SU525311A1 - 4(5) Карбэтоксиимидазолил-5(4)-амид @ -[п-ди-(2-хлорэтил)аминофенил]масл ной кислоты, обладающий противоопухолевой активностью - Google Patents

Abstract

4

Description

35253

Предлагаемое соединение обладает менее выраженным токсическим вли нием на общее число лейкоцитов крови и имеет несколько иной спектр про тивоопухолевой активности, а также оказьшает более эффективное действие на отдельные штаммы экспериментальныз опухолей,например саркому 45 и ССК, по сравнению с хлорбутином.

Целью изобретени   вл етс  син-, тез нового химического соединени  4 (5)-карбэтоксиимидазолил-5(4)-амида - 1П-ди-(2-хлорэтил)-аминофенил масл ной кислоты, которое может найти применение в медицинской практике дл  лечени  злокачественных новообразований .

4 (5 )-Карбэтоксиимидазолил-5 (4 )-амид - п-ди-(2-хлорзтш1)- аминофeнилJ-масл ной кислоты получают ацилированием этилового эфира 4(5)-амино имидазол-5(4)-карбоновой кислоты хлоргидратом хлорангидрида -Сп-ди-(2-xлopэтил )-aминoфeнилJ-мacл нoй кислоты в среде бензола в присутствии триэ тиламин а.

П р и м е р. К суспензии 3,1 г (0,02 моль) этилового эфира 4(5)-аминоимидазол-5 (4)-карбоновой кислоты и 7,2 г (0,0206 моль) гуюрангидрИ да (JT - п-дй-(2-хлорэтил)-аминофенил}-масл ной кислоты в 300 мл безводного бензола при температуре не выше 5 С прибавл ют по капл м 10,8 мл (0,08 моль) триэтиламина, нагревают до кипени -и кип т т 1 ч. Гор чую реакционную массу фильтруют от осадка хлоргидрата триэтиламина и бензольный фильтрат упаривают досуха на роторном испарителе,., Остаток .последовательно обрабатывают разбавленной сол ной кислотой (1:1), разбавленным раствором соды, промьшают водой и сушат на воздухе. Выход неочищенного продукта с т.пл. 129-131 С 5,8 г (65,8%). Чистый продукт получают двукратной кристаллизацией из спирта. Бесцветные пластинки с т.пл. 133-134 С, выход 3,0 г (34,0%).Растворим в спирте, ацетоне, бензоле, нерастворим в воде, эфире. При хранении на воздухе медленно гидролизуетс 

Найдено, %: С 54,44, Н 5,92, С1 15,99, N 12,74.

С4оНмС1гЫ4 Озвычислено ,%: С 54,42, Н 5,89, С1 16,10, N 12,70.

4(5)-Карбзтокс имидазолил-5(4)-амид -/п-ди(2-хлорэтил)-аминофенил -масл ной кислоты в дозе 8 мг/кг при: введении внутрь обладает значительным противоопухолевым действием. Индекс торможени  при максимальном эффекте составл ет, %: Саркома 4590,4

Карцинома Герена 94 Саркома М-1 67 , Саркома ССК 100 Лимфосаркома Плисса 58 Саркома Иенсена 96 Саркома 53680

Альвеол рный рак печени55

Асцитна  опухоль Эрлиха 63 Саркома 18069

Саркома НК68

Саркома АК40

Суд  по химиотерапевтическому индексу , предлагаемое сЬединение обладает наибольшой избирательностью противоопухолевого действи  в отношении саркомы 45 по сравнению с хлорбутином и сарколизином. Предлагаемое соединение может найти применение в медицинской практике дл  лечени  определенных форм злокачественных новообразований и расширить ассортимент противоопухолевых препаратов.

4 (5) -Карбэтоксиимидазолил-15 (4) ;г-амид Г - п-ди(2 хлорэтил)-аминофенилJ-мacл нoй кислоты дл  краткости назван имбутином.

Вли ние имбутина на рост экспериментальных опухолей.

Противоопухолева  активность имбутина изучена на 8 перевиваемых опухол х крыс и 4 перевиваемых опухл х мышей. Препарат ввод т внутрь в виде взвеси в 1%-ном крахмальном клейстере. Лечение солидных опухоле начинают на 5-8 день после трансплатации (альвеол рного рака печени - н 14 день), за исключением отмеченных ниже опытов. Противоопухолевую активность оценивают по индексу торможени  роста опухолей, вычисленному как отношение разности веса опухлей в контроле и опыте к среднему весу опухолей в контроле (%). Лечение асцитной опухоли Эрлиха начинают на следующий день после перевивки. Про5 . 5 тивоопухолевую активность оценивают по вли нию на накопление асцитической жидкости и асцитных клеток.

О , токсичности имбутина суд т по. изменению веса животных (за вычетом веса онухоли) и веса селезенки в конце опыта. В некоторых опытах подсчитьшают общее количество лейкоцитов в крови.

Число животных в каждой опытной и контрольной группе составл ет 610 , в большинстве случаеВ8-9.

Все экспериментальные данные статстически обработаны путем вычислени  средней арифметической и ее стандартной ошибки. Различие между сравниваемыми средними считают статистически значимыми при уровне веро тности ,05.

А. Первичное испытание противоопухолевой активности имбутина.

В предварительных опытах на здорвых крысах была изучена токсичность имбутина при однократном введении. Установлено, что дл  крыс равна 105 мг/кг.

Первичное испытание противоопухолевого действи  имбутина проведено на трех штаммах опухолей: асцитна  опухоль Эрлиха, саркома 45 и саркома 180.

Результаты показывают (табл.1), что препарат в дозах 5, 10 и 20 мг/кг уменьшает накопление асцнтической жидкости опухоли Эрлиха на 33-56%. В этих же опытах имбутин снижает накопление асцитных клеток на 35-48%.

В дозе 20 мг/кг препарат тормозит рост саркомы 180 на 76%.

Значительное противоопухолевое дествие имбутин про вл ет в опытах на крысах с саркомой 45. При длительном введении((в течение 15 дней) в дозе 8 мг/кг препарат угнетает рост опухоли на 90,4%. Во второй серии опытов лечение крыс начинают через 72 ч после перевивки и продолжают в течение 5 дней. Результат оценивают через 10 дней после окончани  лечени . В дозах 6, 10 и 12, 8 мкг/к имбутин вызывает полное рассасывание опухоли. В дозе 12, 8 мг/кг препарат оказывает токсическое действие на организм, снижа  вес тела животных, уменьша  вес селезенки и вызыва  гибель 10% животных.

Таким образом, при первичном испытании имбутин про вл ет выраженную

.

способность тормозить рост опухолей, в св зи с чем было проведено расширенное изучение его противоопухолевой активности в сравнении с хлорбутином .- препаратом группы хлорэтиламинов , примен емым в клинической практике.

Б. Сравнительное изучение противоопухолевой активности имбутина и хлорбутина.

В терапевтических опытах животных дел т на три группы. В первой группе ввод т имбутин внутрибрюшинно в дозах 8-10 мг/кг, во второй группе - хлорбутин внутриб рюшинно в дозе 3 мг/кг. Выбранна  первоначально доза 5 мг/кг оказалась токсичной и была снижена Треть  группа животных служит контролем дл  двух первых.

Результаты показывают (табл.2), что имбутин так же, как хлорбутин, имеет широкий спектр противоопухолевого действи . Оба препарата вызывают сильное торможение карциномы Герена и саркомы Иенсена. При этом отдельные опухоли подвергаютс  полной регрессии.

Самый высокий эффект достигнут на саркоме ССК. К концу лечени  опухоли отсутствовали у всех животных в обеих экспериментальных группах. Дл  определени  полноты излечени  за ивотными наблюдают в течение двух недель после окончани  введени  препаратов , через две недели у крысы,получивших имбутин, опухоли не по вл ютс . У крыс, леченныххлорбутином, средний вес опухолей составл ет 26,0. Таким образом, на этом штамме имбутин оказываетс  более эффективным, чем хлорбутин.

Менее чувствительными к обоим препаратам оказались саркома 45, саркома М-1, саркома 536, лимфосаркома Плйсса и альвеол рный рак печени РС-1.

При сравнении противоопухолевой активности препаратов в отношении перевиваемых опухолей мьш1ей установлено , что имбутин оказывает более сильное вли ние .на рост саркомы 180. ндекс торможени  при максимальном эффекте дл  имбутина 69, дл  хлорбутина 44%.

По вли нию на асцитную опухоль Эрлиха имбутин уступает хлорбутину: индекс торможени  соответственно 68 и 84%.

Саркома НК и саркома АК оказались в одинаковой степегда чувствительны к обоим препаратам.

При сравнении токсического действи  препаратов на организм установлено , что имбутин и хлорбутин в одинаковом числе опытов вызывают уменьшение веса селезенки и падение веса тела животных. Однако имбутин оказывает более м гкое воздействие на лейкопоэз . Так, после применени  имбутина в дозе 10 мг/кг в крови сохран етс  54% от исходного содержани  лейкоцитов . После применени  хлорбутина в адекватной по эффективности дозе 3,3 мг/кг в крови определ етс  лишь 18% лейкоцитов.

В. Исследование избирательности противоопухолевого действи  имбутина .

Изучение избирательности противоопухолевого действи  имбутина провод т в сравнении с двум  препаратами группы хлорэтиламинов - сарколизином и хлорбутином. Противоопухолевую активность и токсичность испытьшают в одном комбинированном токсико-терапевтическом опыте на саркоме 45 по методике М.Х. Караивановой (1971). Соединение ввод т в п ти-шести различных дозах в течение 5 дней, имбутин внутрь, сарколизии и хлор .бутин - внутрибрюшинно. Лечение начинают через 72.ч после перевивки опухоли . Животных забивают через 10 дней после-окончани  введени  препаратов. Вычисл ют процент гибели животных. Противоопухолевую активность выражают в процентах торможени  роста опухоли.

Примен ют пробит - метод дл  нахождени  значени  искомых величин: дозы, вызывающей гибель 10% животных () и дозы, дающей 90% торможени  опухоли (ДТдо). Определ ют терапевтический индекс-ДЛ й : Щ ёУстановлено (табл. 3), терапевтический индекс равен у сарколизина 1,76, -у хлорбутина 2,22, у имбутина 2,70. Таким образом, имбутин обладает наибольшей избирательностьюдействи  в отношении саркомы 45.

Имбутин о.бладает высокой противоопухолевой активностью и широким спектром действи . По силе противоопухолевого эффекта сопоставим с таким алкилирующим препаратом, как хлорбутин, но отличаетс  от него по спектру действи , В опытах на саркоме 45 имбутин про вл ет большую .

избирательность противоопухолевого действи  по сравнению с сарколизином и хлорбутином.

Вли ние нмбутина на рост перевиваеььж опухолей

Таблица 1

Асцитна  опухоль Эрлнха Вли ние имбутина н хлорбутииа на рост перевиваемых

Саркома 45

10 10 10

В 5/3

10

8

8

5/3

9

8 8 3

В

8

8

В 5/3

10

10

В

8 3

10

10

10 10 10

8 3

8 9 10

8 5/3

0,98tO,09 0,54 t 0,05 0,6410,06

1,61 to,22 0,B7 ±0,06 0,86tO,07

0,96 to,n 0,68 ±0,09 0,72 to,16

l,50t 0,19 0,71 t 0,06 0,85 to,07

2,50t 0,27 0,58 + 0,07 1,01 t 0,15

0,67t 0,11 0,88t 0,12 0,67 t 0,06

0,78t 0,12 0,48 t 0,04 0,88 t0,08 Таблица 2 опухолей крыс и мьшей

Продолжение табл. 2

Claims (1)

1. 4(5)-Карбэтоксиимидазолил-5(4)-амид р ~[п-ди-(2-хлорэтил)-аминофенил] -масляной кислоты формулы

   *ί соос₂н₅' ²

   обладающий противооцухолёв«Я активностью.

   а · <·.·<