SU331537A1 - Способ получения адриамицина - Google Patents

Description

Изобретение отиоситс  к области получени  антибиотика адриамицина, обладающего цен1 ыми свойствами.

Известен микробиологический способ нолучени  адриамицина с помощью микроорганизма Streptomyces peucetius var caesius.

Предлагаемый химический способ иолучени  адриамицииа формулы

О ОН

СНеОН

Ш% о он о

где R имеет формулу

NX ОН I I

-СИ-СИг-СН-СН-СИ-СНз, О

где R имеет формулу

NHa ОН I I -СН-СИа-СИ-СН-СИ-СНз,

ОН

/

Xили

св-С

XOCF,

подвергают взаимодействию с йодом или бромом в среде инертного органического растворител  и на иолученное соответствующее 14-галогенпроизводное действуют ацетатом

щелочного металла в среде пол рного органического растворител  с последующим щелочным гидролизом полученного 14-ацетокснпроизводного , отщеплением защитной группы и выделением целевого продукта известными приемами.

В случае галогенировани  дуаномицина йодом желательно, чтобы реакци  протекала в основной среде, например в присутствии окиси кальци . Указанна  реакци  идет преимущественно при комнатной температуре, по ее можно проводить и при нагревапии, лучше в среде инертного газа.

Найдено, что аминогруппу аминосахара дауномицина целесообразнее защищать соответствующей защитной группой, особенно когда в качестве галогепирующего агента выступает йод. С этой целью можно использовать одпу из известных групп, способных защищать аминогруппу, например ацилпроизводное либо основание Шиффа. Можно также защитить эту грунпу образовапием соединени  трифторацетилпроизводного либо соответствующего основани  Шиффа с салициловым альдегидом.

Трифторацетил производное даупомицииа получают известным снособом взаимодействием дауномицина в виде свободного основани  с трифторуксусным ангидридом в присутствии органического растворител , а основание Шиф|фа - взаимодействием хлоргидрата дауномицина с салициловым альдегидом.

При реакции галогенировани  с бромом или йодом получают соответственно 14-бром- или йодпроизводное, которое взаимодействует с ацетатом щелочного металла, например ацетатом кали , в присутствии пол рного растворител  такого, как ацетон. Реакци  нротекает при нагревании в течение короткого промежутка времени либо на холоду, что удлин ет ее продолжительность. В результате образуетс  14-ацетоксипроизводное дауномицина, которое после гидролиза в щелочной среде превращаетс  в соответствующее 14-оксиироизводное .

В случае использовани  14-бромпроизводного соответствующее 14-оксипроизводпое можно получить при неносредственном воздействии щелочи на это 14-бромпроизводное.

Когда берут дауномицин с аминогруппой аминосахара, защищенной соответствующей защитной группой, перед тем как отделить конечный продукт, эту защитную группу удал ют уже известпым способом.

Удалепие салицилиденовой группы происходит в результате гидролиза N-салицилиденадриамицина в кислой среде, а трифторацетильной группы - после обработки N-трифторацетиладриамицина этиловым о-муравьиным эфиром и п-толуолсульфокислотой дл  получени  Ы-трифторацетиладриамицин-9,14этил-о-муравьиного эфира, из которого затем трифторацетильную группу удал ют гидролизом в щелочной среде.

муравьиного эфира в кислой среде получают свободный адриамицин.

Пример 1. 1,3 г хлоргидрата дауномицина в 30 мл метилового снирта и 100 мл безводного диэтилового эфира обрабатывают 3,3 мл раствора 10 г брома в 100 мл хлороформа . Получепную реакционную смесь выдерживают 4 час нри комнатной температуре, упаривают досуха при пониженном давлении,

полученный осадок раствор ют в 5-10 мл хлороформа и добавл ют к этому раствору трех-н тикратный объем этилового эфира. Хлоргидрат бромдауномицина выпадает в виде осадка с выходом 1,1 г. После перекристаллизации из смеси растворителей хлороформ-метанол он имеет т. пл. 177-178°С. Раствор 1 г хлоргидрата 14-бромдауномицина в 150 мл метилового спирта обрабатывают 70 мл дистиллированной воды, добавл ют к этому раствору 0,1 и. раствор гидрата окиси натри  довод т рП до 10,3, и выдерживают его при таком рН 20 мин. Все процессы ведут в среде азота. Затем после разбавлени  нолученного раствора дистиллированиой водой его многократно экстрагируют хлороформом до тех пор, пока все окрашивающие вещества не будут извлечены растворителем. Объединенные хлороформные экстракты высушивают над безводным сульфатом натри , упаривают при пониженном давлении до небольшого объема, смешивают с 1,8 мл 0,6 н. раствора сол ной кислоты в безводном метаноле и обрабатывают дес тикратным объемом этилового эфира.

Получают 0,72 г аморфного осадка, который выкристаллизовываетс  из смеси метанол - пропанол. При этом выход хлоргидрата адриамицина 0,45 гит. пл. 205-210°С

(с разл.).

Пример 2. Полученную по примеру 1 суспепзию 6,6 г хлоргидрата 14-бромдауномицина в 200 мл безводного ацетона смешивают с 1,8 г нлавленого и топкоизмельченного ацетата кали , фильтруют после нагревани  ее с обратным холодильником в течение 45 мин и полученный раствор досуха упаривают при пониженном давлении. Осадок, растворенный в хлороформе, обрабатывают этиловым эфиром и очищают 0,45 г осадка фильтрацией его через колонку, наполненную салициловой кислотой (система растворител  включает хлористый метилен - метанол - воду, вз тых в соотношении 120:20:2). В результате получают 150 мг 14-ацетоксидауномицина с т. пл. 196-198°С.

Раствор 0,1 г 14-ацетоксидауномицина в 30 мл смеси ацетон - метанол (2:1) смещивают с 10 мл 5%-ного раствора бикарбоната

натри . Смесь выдерживают 3 час при комнатной температуре и затем после разбавлени  ее водой экстрагируют хлороформом. чени  небольшого объема при пониженном давлении. Упаренный раствор смешивают с 0,15 мл 0,6 н. раствора сол ной кислоты в безводном метаноле, а затем с трехкратным объемом этилового эфира. Аморфный осадок пропускают через колонку, наполненную 40 г порошка целлюлозы. Его элюируют системой растворителей пропанол - этилацетат - вода, наход шихс  в соотношении 7:1:2 (по объему). Фракции, содержащие адриамицин, объедин ют и упаривают досуха. Получают 43 мг хлоргидрата адриамицина с т. пл. 204-210°С (с разл.). Пример 3. 4,6 г свободного основани  15 дауномицина в 390 мл хлороформа и 155 мл безводного эфира обрабатывают 9,3 мл трифторуксусного ангидрида. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре 30 мин, экстрагируют водой и органическую 20 фазу упаривают досуха под вакуумом. Осадок раствор ют в 100 мл безводного метанола и нагревают с обратным холодильником 10 мин. Раствор метанола упаривают досуха, и осадок , выкристаллизованный из смеси раствори- 25 телей тетрагидрофуран - петролейный эфир, дает выход 4,5 г N-трифторацетилдауномицина с т. пл. 169-171 °С. 0,6 г N-трифторацетилдауномицина в 30 мл тетрагидрофурана и 20 мл безводного метано- 30 ла смешивают с 0,5 г йода и 0,5 г тонкоизмельченной окиси кальци . Смесь выдерживают в среде азота при одновременном встр хивании 5 час, затем ее фильтруют и раствор, разбавленный хлороформом, взбалтывают 35 вместе с водой при подкислении сол ной кислотой до изменени  окраски лакмусового индикатора. Органическую фазу упаривают досуха под вакуумом, осадок раствор ют в небольшом количестве хлороформа и затем 40 подвергают хроматографическому разделению при элюировании хлороформом, содержащим повышенные количества этилацетата. Целевой продукт элюируют хлороформом. в котором концентраци  этилацетата состав- 45 л ет примерно 10%. Получают 0,25 г 14-йодN-трифторацетилдауномицина с т. пл. 172- 175°С. 0,8 г этого соединени  в течение 15 мин нагревают с обратным холодильником вместе 50 с .60 мл безводного ацетона в присутствии 1,5 г плавленого и тонкоизмельченного ацетата кали . После фильтрации этот раствор в хлороформе взбалтывают с водой при медленном подкислении разбавленной сол ной 55 кислотой (до изменени  цвета лакмусового индикатора). Органическую фазу упаривают почти досуха под вакуумом и к осадку добавл ют нетролейный эфир. При осаждении получают 0,62 г 14-ацетокси-М-трифторацетил- 60 дауномицина с т. ПЛ: 150-153°С. 1,4 г этого продукта, растворенного в смеси 50 мл метанола и 100 мл ацетона, смешивают со 100 мл 5%-ного водного раствора бикарбоната натри . Полученную смесь выдержи- 65 5 10 вают 3 час при комнатной температуре и в среде азота, затем смешивают с водой, подкисл ют водным раствором винной кислоты до тех пор, пока рН не станет равным 5-6, и многократно экстрагируют хлороформом при обш,ем количестве используемого растворител  350 мл. Органические фазы объедин ют и упаривают при пониженном давлении. При этом образуетс  0,95 г твердого осадка, который раствор ют в хлороформе и раздел ют в хроматографической колонке. Полученный таким образом N-трифторацетиладриамицин элюируют хлороформом, содержащим 15% этилацетата. При объединении элюатов и последующем их упаривании получаю 0,56 г целевого продукта с т. пл. 174-176°С. 0,45 г N-трифторацетиладриамиципа в 80 мл диэтилового эфира смещивают с 10 мл этилового о-муравьиного эфира и 3 мг п-толуолсульфокислоты . После выдержки в течение 48 час при комнатной температуре реакционную смесь разбавл ют хлороформом и промывают водой прп интенсивном взбалтывании в делительной воронке. Органическа  фаза, упаренна  до небольшого объема, образует 35 г осадка при добавлении петролейного эфира. Полученный продукт раздел ют в хроматографической колонке, заполненной 7 г салициловой кислоты, при элюировании хлороформом , содержащим 10% этилацетата. При упаривании элюата образуетс  80 мг 9,14-N- трифторацетиладриамицинэтилхлормуравьиного эфира с т. пл. 162-164°С. 0,2 г этого соединени  раствор ют в смеси 10 мл ацетона и 40 мл 0,1 н. раствора гидроокиси натри  в среде чистого азота. После выдерживани  раствора в течение 20 мин при комнатной температуре добавлением 1 н. раствора сол ной кислоты довод т рН до 8,6 и этот раствор многократно экстрагируют 50 мл хлороформа до тех пор, пока все крас щие вещества не перейдут в растворитель. Объединенные хлороформные экстракты упаривают, пока не останетс  небольшой объем, и подвергают хроматографическому разделению в колонке, заполненной 4 г салициловой кислоты. Элюирование осуществл ют смесью растворителей хлористый метилен - метанол - вода в соотношении 50 : 10 : 1. При упаривании элюата получают 0,11 г адриамицин-9 ,14-этил-о-муравьиного эфира с т. пл. 203-206°С. Раствор 0,1 г этого соединени  в 9 мл ацетона смешивают с 1 мл п. раствора сол ной кислоты. Этот раствор выдерл ивают при комнатной температуре 20 час. Полученный осаДОк , выкристаллизованный из системы растворителей метанол - пропанол, дает 40 мг хлоргидрата адриамицина с т. пл. 204-210°С (с разл.). Пример 4. Раствор 1 г хлоргидрата даупомицина в 30 мл дистиллированной воды смешивают с ОД н. раствором гидроокиси натри  до рН 8,6, а затем его раствор обрабатывают 10 мл 10%-ного раствора салици