SU1758558A1 - Способ дифференциальной диагностики саркоидоза легких и фиброзирующих альвеолитов - Google Patents

Abstract

Способ дифференциальной диагностики саркоидоза легких и фиброзирующих альвеолитов. Изобретение относитс  к медицине , а именно к пульмонологии, и может быть использовано при дифференциальной диагностике саркоидоза легких и фиброзирующих альвеолитов. Цель изобретени  - повышение точности диагностики. Сущность способа заключаетс  в определении одновременно в жидкости бронхоавельо- л рного лаважа (ЖДАЛ) и в сыворотке крови эстеразной активности эластазы и катепси- на G, причем при увеличении активности этих ферментов в двух исследуемых материалах диагностируют фиброзирующий альве- олит, а при снижении активности ферментов в сыворотке и увеличении в ЖБАЛ диагностируют саркоидоз легких. 2 табл.

Description

у

6

Изобретение относитс  к анализу биоматериала и может быть использовано дл  дифференциальной диагностики саркоидоза легких и фиброзирующих альвеолитов по результатам биохимического анализа жидкости бронхоальвеол рного лаважа (ЖБАЛ) и сыворотки крови.

Известны способы дифференциальной диагностики фиброзирующих альвеолитов и саркоидоза легких на основании результатов клинического, иммунологического и цитологического исследовани .

Широко распространенным и основным в клинической практике  вл етс  метод диагностики саркоидоза легких и фиброзирующих альвеолитов по суммарным клиническим данным - это комплексный надежный метод, однако его возможности ограничены в результате длительности

предварительного обследовани  больного и субъективности оценок врача, став щего диагноз.

Наиболее точным и информативным методом  вл етс  открыта  биопси  легких. Патоморфологическое исследование био- птатов легочной ткани достаточно информативно , но ввиду большой травматичности метода получени  материала он применим лишь в редких, особых случа х.

Рентгенологические методы диагностики просты, доступны в любой клинике, однако недостаточно точны и информативны, так как требуют дополнительных исследований дл  уточнени  диагноза.

Наиболее близким к предлагаемому  вл етс  способ диагностики некоторых дис- семинированных процессов в легких по

XJ

сл

00

СЛ

сл

00

соотношению субпопул ций Т-клеток жидкости бронхоальвеол рного лаважа.

Однако способу-прототипу присущи следующие недостатки: необходимость большого количества материала дл  анализа и в св зи с этим больша  травматичносг ; трудоемкость анализа; недостаточна  точность - в некоторых случа х не получено достоверных различий.

Целью изобретени   вл етс  повышение точности способа.

Способ осуществл ют следующим образом

Дл  обследовани  у пациента берут капилл рную кровь (на одно определение не- обходимо 5 мкл сыворотки) и при проведении субсегментарного бронхоальвеол рного лаважа (ЖБАЛ) из супернатанта поспе центрифугировани  дл  одного определени  отбирают 500 мкл на анализ.

В качестве контрольных групп при исследовании эстеразной активности в сыворотке крови использовали кровь здоровых доноров, прошедших предварительное обследование в Институте переливани  крови АМН СССР. Контрольную группу при анализе ЖБАЛ получали лаваж с лечебно-диагностическими цел ми.

Полученный материал сразу подвергали биохимическому анализу, однако материал мог хранитьс  при температуре около 0°С с предварительной добавкой азида натри  в течение 1-2 суток. Определение активности ферментов проводили с помощью спектрофлуориметра Perkin Solmer 3000 при температуре 20±1°С, длинах волн: возбуждени  - 360 нм, испускани  - 455 нм, концентрации субстратов в реакционной смеси 1-3- .

Использованы два синтетических флуо- рогенных субстрата: 4-метилумбеллифери- ловые эфиры М-бензилоксикарбонил-Ь фенилаланина (субстрат дл  катепсина G) и трет.-бутилоксикарбонил-1-аланина (субстрат дл  эластазы).

В качестве флуорогенной метки примен ли 4-метилумбеллиферон А. В ходе определени  показани  прибора снимали через 3 с, 1 мин, 2 мин. Таким образом, одно определение занимало 3-4 мин.

Калибровочную кривую строили по 4- метилумбеллиферону. Удельную активность ферментов выражали в мкмоль индикатора, отщепившегос  от субстрата за 1 мин,и пересчитывали на 1 мл сыворотки или ЖБАЛ и на 1 мг белка.

Экспериментальные данные сведены в табл.1.

Представленные в табл.1 величины активности катепсина G и эластазы в сыворот-  е крови и в ЖБАЛ дают возможность отличить по этим параметрам здоровых людей , страдающих саркоидозом легких и фиб- розирующими альвеолитами.

В табл.2 приведены данные по исследованию ЖБАЛ у больных диссеминированны- ми процессами в легких другими методами.

0 Дл  сравнени  точности предлагаемого способа дифференциальной диагностики и способа прототипа была обследована группа больных с гистологически верифицированными диагнозами при оперативном

5 вмешательстве: саркоидоз легких и фибро- зирующие альвеолиты Дифференциальна  диагностика согласно предлагаемому способу подтвердила 65% установленных диагнозов , а при использовании способа0 прототипа - 55%.

П р и м е р 1. Больна  Г., 49 лет, поступила в отделение дифференциальной диагностики ВНИИ пульмонологии МЗ СССР. 24 05.89 с жалобами на одышку, сухой ка5 шель, слабость. Заболела в  нваре 1989, лечилась с диагнозом: острый бронхит, остра  пневмони , зат жна  пневмони  антибиотиками и симптоматическими средствами по месту жительства без эффек0 та, направлена по ВНИИП дл  обследовани  и уточнени  диагноза. Проводилась дифференциальна  диагностика между саркоидозом легких и идиопатическим фибро- змоующим альвеолитом. Результат

5 биохимического исследовани  крови и жидкости бронхоальвеол рного лаважа: в сыворотке крови определ лась повышенна  активность эластазы 132 мкмоль/мин/мл (при норме 98±3) и катепсина G; 167

0 мкмоль/мин/мл (при норме 13б±б), в ходкости бронхоальвеол рного лаважа активность ферментов оказалась также повышенной, при этом эластаза: 0,15 мкмоль/мин/мл (при норме 0,00), а катеп5 син G : 0,30 мкмоль/мин/мл (при норме 0,016 ±0,07), Увеличение активности ферментов в сыворотке крови и жидкости брон- хоальвеол рного лаважа (ЖБАЛ) свидетельствовало в пользу идиопатическо0 го фиброзирующего альвеолита. Диагноз в дальнейшем был подтвержден результатами морфологического исследовани  био- псийного материала (чрезбронхиальна  биопси  легочной ткани).

5П р и м е р 2. Больна  В., 59 лет, поступила в отделение дифференциальной диагностики ВНИИП МЗ СССР 7.04.89 с целью уточнени  диагноза по поводу диссемини- ровзнного процесса в легких. Больна с августа 1987. Заболевание началось с кашл , затем присоединилась слабость, одышка. Терапи  кортикостероидами оказала поло- жительный клинический и рентгенологический эффект, однако диагноз оставалс  не сным, в св зи с чем больша  была направлена во 8НИИП. При обследовании кроме изменений на рентгенограммах были вы влены отклонени  от нормы уровн  ферментов в сыворотке крови и ЖБАЛ, свиде- гельстаующие в пользу саркоидоза легких. Активность эластазы крови была ниже нормы: 58 мкмоль/мин/мл (при норме 98±3), уровень катепсина в крови оказалс  сниженным: 120 мкмоль/мин/мл (при норме 136±6). В ЖБАЛ содержание этих ферментов было значительно больше нормы: зла- стаза составила 0,36 мкмоль/мин/мл (при норме 0,0), а катепсин G 0,10 мкмоль/мин/мл (при норме 0,016±0,07). В дальнейшем диагноз саркоидоза был подСодержание Т-лимфоцитов и их субпопул ций в ЖБАЛ у дольных лиссеминированными процессами в легких.

твержден морфологически при исследовании биопсийного материала, полученного при медиастинотомии.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Способ дифференциальной диагностики саркоидоза легких и фиброзирующих альзэолитов, включающий биохимический анализ жидкости бронхоэльвеол рного га- важа, отличающийс  тем, что, с целью повышени  точности диагностики, определ ют эстераэную активность эластазы и ка- тепсина G одновременно в жидкости бронхоальвеол рного лаважа и в сыворотке крови и при увеличении относительно нормы активности ферментов в исследуемых биоматериалах диагностируют фиброзиру- ющий идиопатический альвео ит, а при снижении активности а сыворотке крови и одновременном увеличени  в альвеол рной жидкости диагностируют саркоидоз легких.

   Таблица 1

   Таблица 2