SU1704011A1 - Способ дифференциальной диагностики острого инфаркта миокарда и стенокардии - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к области медицины , а именно к иммунологии и кардиологии. Целью  вл етс  повышение точности дифференциальной диагностики. Цель достигаетс  тем, что исследуют нейтрофилы крови, в которых определ ют интенсивность свечени  ке- пов мембран клеток и при интенсивности этого свечени  от 0,009 ус.ед. и ниже определ ют острый инфаркт, а при интенсивности свечени  от0.010-0,014усл.ед. -стенокардию. Способ позвол ет равно провести диагностику ИБС и скорректировать последующее лечение.

Description

Изобретение относитс  к области медицины , а именно к иммунологии, и предназначено дл  диагностики острого инфаркта миокарда и стенокардии.

Цель изобретени  - повышение точности способа диагностики острога инфаркта миокарда и стенокардии.

Способ осуществл етс  следующим образом .

Из венозной крови в количестве 10 мл выдел ют нейтрофилы на градиенте плотности верографинафиколла. Дл  этого кровь, отобранную с Na-солью этилендиаминтет- рауксусной кислотой, развод т в 4 раза 0,9%-ным раствором Nad и наслаивают на раствор верографинфиколла (d - 1,077 - 1,078 г/см3) по 7 мл в каждую, пробирку и центрифугируют 40 мин при 400 д. После центрифугировани  образуетс  осадок эритроцитов и гранулоцитов. Нейтрофилы располагаютс  пленкой на поверхности осадка.

Дл  получени  взвеси гранулоцитое удал ют верофиколл. а осадок, содержащий эритроциты и гранулоциты, развод т в 1 мл физиологического раствора. Содержимое пробирок объедин ют и перенос т в силико- нированные пробирки, где осаждают эритроциты 10%-ным раствором желатина (конечна  концентраци  желатина - 1 %). В течение 45-60 мин при 37°С эритроциты лизируют 0.83%-ным раствором . После перемешивани  осадка фракции, содержащей гранулоциты с дес тикратном объем раствора NH-iCI, центрифугируют ее 5-10 мин при 400 д. Процедуру повтор ют несколько раз до полного освобождени  гранулоцитов от эритроцитов. Провер ют жизнеспособность клеток по трипановому синему и подсчитывают в камере Гор ева

Выделенные клетки довод т до рабочей концентрации 2,0-2.5 10 кл/мл и инкубируют с люминесцентными коньюгатами кроличьих иммуноглобулинов против иммуноглобули« Ј

S

о

нов человека в течение 15 мин при 37°С. Отмывают двукратно в среде 199 и делают препараты, которые просматривают с помощью люминесцентного микроскопа ЛМ- И2 с использованием объектива хбО (водна  иммерси ) и окул ра х8.

Подсчитывают на мазке 50 нейтрофи- лов и среди них выдел ют следующие морфологические варианты или типы свечени : ринг (ring) - кольцо флюоресценции, видимое в ультрафиолетовом свете, демонстрирует равномерность распределени  меченых комплексов на клеточной поверхности , пэтч (patch) - нарушаетс  равномерность свечени  клеточной поверхности, образуютс  разрывы кольца с по влением зон с усиленным или ослабленным свечением; кэп (cap) или шапочка - процесс перераспределени  в плоскости мембраны заканчиваетс  объединением мелких комплексов в массивный агрегат, который прин то называть колпачком.

Из перечисленных трех морфологических форм выбирают дл  анализа только клетки с. кэпами как наиболее демонстративные по типу свечени  мембраны.

Интенсивность свечени  выбранных клеток измер ют в условных единицах, показани  снимаютс  с фотоэлектронного умножител , установленного на микроскопе.

Подсчитывают интенсивность свечени  каждой клети следующим образом: регистрируют показани  ФУ единичной клетки и вычитают из него значение интенсивности свечени  фона - участка чистого пол , расположенного р дом с этой клеткой.

Рассчитывают среднее арифметическое значение интенсивности свечени  анализируемых клеток. В том случае, если величина рассчитываемого показател  находитс  в диапазоне 0,009 усл.ед . и ни- же, то ставитс  диагноз острый инфаркт миокарда: диапазон 0,010-0.014 усл.ед. - стенокарди , значение интенсивности свечени  нейтрофилов 0,014 усл. ед. и выше характерны дл  здоровых лиц.

Пример 1. Больной Ш,, 55 лет, поступил в клиническое отделение кардиологии с диагнозом - подозрение на инфаркт миокарда. Клинические данные соответствовали классической картине острого инфаркта миокарда; наличие выраженного болевого синдрома, симптомов недостаточности кровообращени  (сердечна  астма) существенное снижение уровн  артериального давлени  (95/55 мм рт.ст.).

Забор крови был произведен в первые сутки с момента поступлени  больного в клинику. По представленному способу определена интенсивность свечени  кзпов - 0,007 усл. ед. что позволило поставить диагноз - острый инфаркт миокарда.

Пример 2. Больной Б., 50 лет. поступил в клинику кардиологии с интенсивными болевыми приступами за грудиной с иррадиацией в левое плечо и лопатку. Боли держались в течение б ч до момента купировани  их фармакологическими средствами.

Исследование пробы, вз той в первые сутки с момента поступлени  больного-.в клинику, на определение функционального состо ни  рецепторного аппарата нейтрофилов показали значени  интенсивности

свечени  кэпов 0,012 усл.ед., что позволило предположить у больного наличие стенокардии .

Дальнейшее наблюдение за состо нием

больного показало, что произошло длительное и существенное снижение длительности и интенсивности приступов боли в области сердца, уровень АД за врем  наблюдени  был стабильным (130/180 мм рт.ст.). Лабораторно-биохимические методы исследовани  позволили исключить наличие у больного острой ишемии миокарда. ЭКГ не отражала признаков нарушени  коронарного кровообращени , гиперферментеми  отсутстввовала.

Результаты ЭКГ с дозированной физической нагрузкой, толерантность 75 Вт х 3 мин, причина прекращени  пробы-типичный приступ стенокардии, смещение сегмента Т в двух отведени х на 1 мм. Совокупность вышеизложенных данных позволила клиницистам определить диагноз как ИБС. стенокарди  напр жени  II функциональный класс.

Способ позвол ет корректно судить о состо нии рецепторного аппарата нейтрофилов за счет оценки функционально активных его компонентов на поверхности клеток. При этом отработаны количественные критерии, позвол ющие проводить дифференциальную диагностику острого инфаркта миокарда и стенокардии. Использование данного метода позволит адекватно судить об эффективности фармакорегул ции синтеза рецепторов, кэппинге, сбросе их или интернализации.Контролирование и коррекци  этих процессов принципиально необходимы при реализации современных методов терапии, предлагаемых молекул рной иммунологией .

Claims (1)

1. Формулаизобретени 

   Способ дифференциальной диагностики острого инфаркта миокарда стенокардии путем иммунофлуоресцентного исследовани  полиморфно- дерных лейкоцитов крови , отличающийс  тем, что, с целью

   повышени  точности способа, исследуюти при свечении 0.009 усл.ед. и ниже диагнейтрофилы , в которых определ ют интвн-носцируют острый инфаркт, а при свечении

   сивностъ свечени  кэпов мембран клеток0,010-0,014 усл. ед. - стенокардию.