RU1812497C - Способ дифференциальной диагностики гипертонической болезни и артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом - Google Patents

Abstract

Использование: медицина, дифференциальна  диагностика гипертонической болезни (ГБ) в периоде обострени  и артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом. Сущность изобретени : регистрируют величину активности катзлазы или супероксид днемутазУ эритроцитов. Способ позвол ет упростить, ускорить и обезопасить процесс дифференциальной диагностики ГБ.

Description

Изобретение относитс  к области клинической медицины, в частности к внутренним болезн м, преимущественной областью его использовани   вл етс  дифференциальна  диагностика гипертонической болезни (ГБ) и артериальной гипертензии , обусловленной хроническим пиелонефритом (ХЛ).

Цель насто щего изобретени  - упрощение способа дифференциальной диагностики ГБ и ХП с артериальной гипертензией за счет сокращени  трудоёмких операций путем определени  у больных ГБ и ХП активности каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) эритроцитов.

Способ осуществл етс  следующим образом . Из локтевой вены больного в пробирку с раствором цитрата натри  отбирают 5 мл крови, центрифугируют 10 мин (4000 об/мин) и затем отдел ют зритромассу от плазмы. Эритромассу дважды промывают физиологическим раствором (перемешиванием и центрифугированием по 5 мин при 2000 об/мин). После второго центрифугировани  надосадок сливаетс . Дл  определени  активности каталазы 0,1 мл промытой эритромассы гемолизируют дистиллированной водой и получают гемолизат разведени  1 : 2000 0,1 мл полученного гемолизата переноситс  в пробирку, доводитс  0.05М Трис-HCI буфером рН 7,4 до 1 мл, прибавл етс  2 мл 0,03% Н202 и инкубируетс  в термостате при 25°С в течение 10 мин. После инкубации вноситс  2 мл 4% раствора мо- либдата аммони . Полученную пробу спект- рофотометрируют при длине волны 410 нм. Экстинцию опытной пробы сравнивают с экстинцией контрольной пробы, которую получают таким же образом, только 0,1 мл гемолизата добавл етс  в пробирку после инкубации в термостате, непосредственно перед добавлением молибдата аммони . По разнице между экстинци ми контрольной и опытной проб суд т о величине каталазной

(Л

с

00

ю

4 О V4

активности. Расчеты производ т, исход  из коэффициента миллимол рной экстинции перекиси водорода, и результаты выражают в мМ инактивированной Н20а 1 л эритро- массы за 1 сек.

Дл  определени  активности СОД брали 0,1 мл отмытой эритромассы при подготовке эритроцитов дл  исследовани  СОД в системе феназинметасульфат-Н АД Н-нит- росиний тетразолий. Эти 0,1 мл отмытой эритромассы гемолизируют и разбавл ют 0,9 мл 5 мМ буфера (рН 7,4), перенос т в центрифужную пробирку, добавл ют 0,25 мл этанола, 0,15 мл хлороформа и 0,6 г кристаллического КНаРОд. Все это перемешиваетс  стекл нной палочкой в течение 15 мин, выдерживаетс  в холодильнике при 4°С 30 мин и центрифугируетс  при 5000 об/мин 15 мин. Затем, отбираетс  над- осадочна  жидкость. В пробирку последовательно внос т 1,7 мл фосфатного буфера (0,15 М, рН 7,8), 2 мл раствора нитросинего тетразоли  (0,01 г на 100 мл 0,15 М фосфатного буфера, рН 7,8); 0,5 мл раствора фена- зинметасульфата (0,003 г на 150 мл 0,15 М фосфатного буфера, рН 7,8). 6,1 мл надоса- дбчной жидкости и 0,9 мл раствора НАД Н (0,01 г на 24 м  0,15 М фосфатного буфера, рН 7,8). Содержимое перемешивали стекл нной палочкой, и пробирку помещали в темноту и термостэтировали при 25°С в течение 10 мин, После чего, сразу на фотоэлек- троколориметре при длине волны 540 нм определ ли величину экстинции и сравнивали с экстинцией контрольной пробы, .которую получали таким же образом, только в пробирку не вносили надосадочную жидкость . О величине активности СОД суд т по разнице экстинции контрольной и опытной проб и выражают в процентах (от экстинции контрольной пробы).

При рассмотрении изучаемых показателей в исследуемых группах больных было вы влено, что у 90% больных ГБ активность каталазы составила от 165 мМ НаОа/П С до 235 ММ Нг02/л с, тогда как у 90% больных ХП этот показатель находилс  в пределах 239-303 мМ Н202/Л-С. Активность СОД от 32% flo 44% отмечена у 90,5% больных ГБ, а от 48% до 63% - у 92.5% больных ХП.

При м е р 1. Больной М., 47 лет, был впервые госпитализирован в терапевтическое отделение по поводу повышени  артериального давлени  (АД) дл  стационарного лечени  и обследовани . Диагноз при поступлении: гипертоническа  болезнь, симптоматическа  (почечна ) гипертензи .

При исследовании антиоксидантных -ферментов обнаружено: активность каталазы составила 183 мМ НаОа/л-с, активность СОД-32%. На основании этих данных было высказано мнение о наличии у больного гипертонической болезни.

При проведении в дальнейшем комплексного клинического и лабораторно-инст- рументального исследовани  больного диагноз гипертонической болезни II стадии (криз) был подтвержден.

П р и м е р 2. Больна  Г., 50 лет, была госпитализирована в терапевтическое отделение с предварительным диагнозом: гипертоническа  болезнь

При исследовании антиоксидантных

ферментов обнаружено: активность каталазы составила 165 мМ HaOzArc, активность СОД-34%. Был сделан вывод о наличии у больной гипертонической болезни.

В дальнейшем комплексное и лабораторно-инструментальное исследование подтвердили диагноз: гипертоническа  болезнь I стадии, криз.

П р и м е р 3. Больна  М., 45 лет, была направлена на стационарное лечение и об

следование с предварительным диагнозом:

хронический пиелонефрит в гипертензив- ной стадии..

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы составила 220 мМ НаОа/л -с, активность СОД-40%. На основании этих данных был сделан вывод о наличии у больной гипертонической болезни.

В дальнейшем при динамическом наблюдении и проведении комплексного лабораторно-инструментальногб исследовани  диагноз хронического пиелонефрита был сн т. Окончательный диагноз: гипертоническа  болезнь II стадии, кризовое течение .

П р и м е р 4. Больна  Л., 43 года, поступила в терапевтическое отделение по поводу повышенного АД. Диагноз при поступлении: гипертоническа  болезнь I

стадии, криз.

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность каталазы составила 235 мМ Н202/Л-С, активность СОД-40%. Полученные данные позволили

сделать вывод о наличии у больной гипертонической болезни.

При проведении комплексного клинического и лабораторно-инструментального исследовани  диагноз гипертонической

болезни II стадии (криз) был подтвержден .

П р и м е р 5. Больной С,, 50 лет, впервые был госпитализирован в терапевтическое отделение по поводу повышени  АД. Диагноз при поступлении: гипертоническа  болезнь II стадии, криз.

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность катала- зы составила 230 мМ Н202/лт„ активность СОД-44%. Был сделан вывод о наличии у больного гипертонической болезни.

В дальнейшем комплексное клиническое и лабораторно-инструментальное исследование подтвердили диагноз: ги- пертоническа  болезнь И стадии, криз.

П р и м е р 6. Больна  К., 49 лет, была направлена на стационарное лечение и обследование по поводу повышенного АД. Диагноз при поступлении: гипертоническа  болезнь, хронический пиелонефрит, симптоматическа  гипертензи 

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность катала- зы составила 239 мМ Н202/Л -с, активность СОД-48%. На основании этих данных был сделан вывод о наличии у больной хронического пиелонефрита.

При комплексном клиническом и лабо- раторно-инструментальном исследовании диагноз хронического пиелонефрита (ги- пертензивна  стади ) был подтвержден.

Пример. Больной Р., 41 год, поступил в терапевтическое отделение с предварительным диагнозом: гипертоническа  болезнь II стадии, криз.

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: аткивность катала- зы составила 260 мМ Н202/Л -с, активность СОД-53%. На основании полученных дан- ных был сделан вывод о наличии у больного артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом.

При комплексном клиническом и лабо- рэторно-инструментальном исследовании диагноз хронического пиелонефрита (ги- пертензивна  стади ) был подтвержден.

Пример 8. Больной И., 38 лет, поступил в терапевтическое отделение дл  лечени  и обследовани  по поводу по- вишенного АД. Диагноз при поступлении: гипертоническа  болезнь

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность катэла- зы составила 303 мМ , активность СОД-58%. На основании этих данных было высказано мнение о наличии у больного хронического пиелонефрмта.

В дальнейшем при динамическом наблюдении и проведении комплексного лабораторно-инструментального исследовани  диагноз гипертонической болезни был сн т. Окончательный диагноз; хронический пиелонефрит, гипертензивна  стади .

П р и м е р 9. Больна  С., 46 лет. поступила в терапевтическое отделение с диагнозом: хронический пиелонефрит , гипертензивна  стади .

При исследовании антиоксидантных ферментов обнаружено: активность катэла- зы составила 285 мМ Н202/Л -с, активность СОД-63%. Был сделан вывод о наличии у больной хронического пиелонефрита.

В дальнейшем на основании комплексной оценки клиники и данных лабораторно- инструментального исследовани  диагноз хронического пиелонефрита (гипертензивна  стади ) был подтвержден.

Приме р 10. У служащего Н., 39 лет, при проведении профосмотра определена активность антиоксидантных ферментов. Обследуемый здоров, самосто тельно занимаетс  спортом. Активность каталазы составила 310 мМ Н202/л-с, активность СОД-66%. Таким образом, отсутствие гипертонической болезни было подтверждено .

Таким образом, разработанный способ дифференциальной диагностики ГБ и ХП в гипертензивной стадии позвол ет сократить врем  (по сравнению с прототипом) проведени  методики в 11,3 раза при определении активности каталазы и - в 3,8 раза при определении активности СОД. Значительно сокращаетс  количество трудоемких операций, таких как получение мембран, экстрагирование липидов. Кроме того, устран етс  вли ние токсичных веществ (гептан, серна  кислота по Сава- лю) и необходимость дополнительных расчетов (вычисление диагностического коэффициента). Предлагаемый способ  вл етс  простым, надежным и доступным дл  обычной клинико-биохимической лаборатории , при этом точность диагностики в сравнении с известным способом не снижаетс .

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ дифференциальной диагностики гипертонической болезни и артериальной гипертензии, обусловленной хроническим пиелонефритом, включающий отбор венозной крови, получение эритроцитов и их биохимический анализ, отличающийс  тем, что, с целью упрощени  способа за счет сокращени  трудоемких операций , провод т гемолиз эритроцитов, в гемолизате определ ют активность каталазы или супероксиддисмутэзы и при активности каталазы 165-235 мМ Н202/л-с или суперксиддисмутазы 32-44% стенки инги- бировани  восстановлени  нитросинего тетразолиевого диагностируют гипертоническую болезнь, а при активности каталазы

   239-303 мМ НаОа/л-с или супероксиддис- зию, обусловленную хроническим пиело- мутазы 48-63% артериальную гипертони- нефритом.