SU1380732A1 - Способ определени реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине , точнее к аллергологии, предназначено дл  определени  реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители. Цель изобретени  - повьппение точности определени  путем измерени  интенсивности люминесценции лимфоцитов под вли нием мембранного зонда 3-метоксибензантрона после инкубации лимфоцитов с растворами ацетилхоли- на (АХ), гистаьшна (ГА) и физраствора (ФР). Сопоставл ют число лимфоцитов , имеющих интенсивность люминесценции 0,50-1,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов в ФР, в пробах, «нкубированных с АХ, ГА и ФР, и при увеличении числа лим- фо1Ц1тов в пробах с АХ и ГА по сравнению с ФР на 10% и более диагностируют повышенную чувствительность больного к АХ или ГА. 1 табл. с « (Л

Description

со

00

о со ю

Изобретение относитс  к медицине, а именно к аллергологии.

Цель изобретени  - повышение точности определени .

Способ осуществл ют следующим образом.

Утром натощак у больного из вены отбирают 3 мл крови в гепаринизи- ропанную пробирку. Из крови выдел ют лимфоциты на градиенте плотности фиколл-верографин 1,07/. Лимфоциты промывают 2 раза физраствором и 2 раза раствором Хенкса путем центрифугировани  при 1500 об/мин в течение 15 мин. После последнего центрифугировани  Jшмфoциты разбавл ют средо1 1 199 до концентрации 1 10 клеток в 1 мл. По 0,2 мл взвеси лимфоцитов разнос т в три центрифужные пробирки, В первую пробирку добавл ют 0,05 мл физраствора (ФР), во вторую пробирку - 0,05 мл 0,001%-но- го раствора ацетилхолина (АХ) на физрастворе, в третью пробирку - 0,03 мл 0,0001%-ного раствора гнет- амина (ГЛ) на физрастворе. Инкубируют все три пробирки в термостате при 37 С в течение 30 мин. После окончани  срока инкубапли добавл ют во все пробирки по 2 мкл 1 М раствора 1-метоксибензантрона и измер ют интенсивность свечени  лимфоцитов во всех пробах с помощью проточного

цитофлуориметра. Возбуждение лю Qlнec- ценции провод т лучами с 400- 460 ни, регистрируют люминесценцию не менее 10000 клеток в области спектра 490-650 нм. Подсчитывают

среднеарифметическую интенсивность люминесценции лимфоцитов в пробе, инкубированной с ФР, В пробах, инкубированных с ФР, АХ и ГА, считают количество лимфоцитов, имеющих интенсивность люминесценции 0,501 ,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов, инкубированных с ФР, При увеличении числа лимфоцитов с такой интенсивностью свечени 

в пробах с АХ и/или ГА по сравнению с пробой с ФР на 10% и более диагностируют повышенную чувствительность больного к неспецифическим раздражител м .

Сравнительна  точность определени  реакции больных аллергнческиьш заболевани ми на неспецифические раздражители с помощью известных и предлагаемого способов представлена в таблице.

32 (66,7%) 23 (47,9%)

46 (95,8%)

О

6 (23%)

О

О О

Из таблицы пидно, что точность определени  реакции больных аллергическими заболевани ми на неспецифические раздражители предлаг аемым способом повышаетс  в 1,5-2 раза по сравнению с известными способами о

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители путем вьщелени  из крови форменного элемента , инкубации его в отдельных про- бак физиологическим раствором и веществами , вли ющими на функции форменного злемента, с последующим введением в пробы люминесцентного

   красител  и определени  интенсивности люминесценции, отличающийс  тем, что; с целью повышени  точности определени , в качестве форменного элемента используют лимфоциты, инкубируют их в пробах с ацетилхолином (АХ) и гистамином (ГЛ), в качестве люминесцентного красител  используют 3-метоксибензантрон, определ ют число лимфоцитов с интенсивностью люминесценции 0,5-1,9 от средней интенсивности люминесценции в пробе с физраствором и при увеличении числа лимфодатов в пробах с АХ или ГА по сравнению с контролем на 10% и более диагностируют реакцию больного на неспецифические раздражители