SU882526A1

SU882526A1 - Способ диагностики бактериальной дизентерии

Info

Publication number: SU882526A1
Application number: SU802923158A
Authority: SU
Inventors: Анатолий Федорович Блюгер; Хацкель Мозусович Векслер; Римма Георгиевна Чарная; Игорь Николаевич Новицкий
Original assignee: Рижский Медицинский Институт
Priority date: 1980-02-04
Filing date: 1980-02-04
Publication date: 1981-11-23

Description

Изобретение относится к области медицины и касается диагностики дизентерии .

Известен способ диагностики бакте- риальной дизентерии путем определения в сыворотке крови специфических антител к дизентерийному возбудителю Ill.

Однако известный способ недостаточ-цд но чувствителен и в 20-30% случаев дает ложноположительные результаты.

Цель изобретения - повышение чувствительности способа.

Поставленная цель достигается тем, что способ осуществляют путем исследования крови, из которой готовят монослой 10%-ной взвеси эритроцитов больного и добавляют аутологичные __ лимфоциты, предварительно сенсибилизированные 0-антигеном шигелл. Флекснера, и комплемент, затем после инкубирования их 2-2,5 ч при 37*С и 1718 ч при 4®С подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и ²⁵при повышении их числа на 10% по сравнению с контролем диагностируют дизентерию.

Способ осуществляют следующим образом. 30

Берут 10 мл крови в пробирку, содержащую 20 ед. кристаллического гепарина, и разделяют на фракции лимфоцитов и эритроцитов путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 15 мин в градиенте плотности фи колл-ве ро гр афи н а.

В пробирках готовят два образца, содержащих монослой 10%-ной взвеси эритроцитов больного, трижды отмытых фосфатным буфером, в один из которых (контроль) добавляют равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов в концентрации 2*10 .мл, и комплемент в виде свежей сыворотки крови белой мыши в разведении 1:5. В другой образец (опыт) добавляют также равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов, сенсибилизированных предварительно с равным объемом липополисахаридного 0-антигена шигелл при 37^С в течение 30 мин в концентрации 2 ΊΟ® мл, и комплемента мыши в разведении 1:5, и запускают в камеру Горяева, помещенную в увлажненную чашку Петри. Затем контрольную и опытную смеси запускают в камеру Горяева, которую предварительно помещают в ’чашку’ Петри, содержащую увлажненную фильтровальную бумагу.

Оба образца смеси выдерживают в течение 2 ч в термостате при 37^СС, а затем 18 ч в холодильнике при 4 °C. Подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов, площадь которых не менее 5 клеток, и при повыше- « нии их количества в опыте на 10% и ^Э больше по сравнению с контролем диагностируют дизентерию.

П р и м е р 1. Больной И.Г., 23 лет, поступил в стационар (без жалоб на на-, рушения желудочно-кишечного тракта и других систем организма) в связи со случайным обнаружением в кале шигелл Зонне, с подозрением на дизентерию. Реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитарным антигеном шигелл 15 Зонне была отрицательна.

С помощью предлагаемого способа был выставлен диагноз дизентерии: показатель контроля 4%, а при стимуляции этой реакции О-антигеном ши- 20 гелл равен 15%.

Следовательно, реакция пассивной гемагглютинации была ложноотрицательна.

П р и м е р 2. Больная К.С.М., J5 14 лет, поступила в стационар с проявлениями гемоколита (боли в животе преимущественно слева, спазм сигмы, стул 5-8 раз в день со слизью и кровью). Предварительный диагноз дизертерия. ¹³⁰

При использовании контрольного диагностического препарата - дизентерии показатель реакции был равен 69%, т.е. почти в 9 раз превышая показатель контроля, что также свиде- ’5 тельствовало о диагнозе - дизентерия.

При использовании предлагаемого способа был получен отрицательный результат - при добавлении О-антигена шигелл Флекснера количество лизиро- 40 ванных эритроцитов в виде овальных участков просветления монослоя величиной в 5 клеток и более было равно

7%, а в контроле - 8%. В дальнейшем правильность этого ответа была подтверждена высевом из кала салмонелл энтеридес. Исходя из этого, окончательный диагноз был исправлен на салмонеллез.

Пример 3. Больная К.С.Л., 23 лет, госпитализирована с неясными признаками, присущими дизентерии и пищевым инфекциям (водянистый понос, нормальная копрограмма)·. С помощью предлагаемого способа был выставлен правильный диагноз дизентерии, так как результаты способа были следующие; показатель контроля 9%, показатель стимуляии реакции препаратом О-антигена шигелл - 19%.

Использование предлагаемого способа позволяет повысить достовер.ность диагностики бактериальной дизентерии до 92-94%.

Claims

Изобретение относитс к области медицины и касаетс диагностики дизе терии . Известен способ диагностики бакте риальной дизентерии путем определени IB сыворотке крови специфических антител к дизентерийному возбудителю 111 . Однако известный способ иедостато но чувствителен и в 20-30% случаев дает ложноположительные результаты. Цель изобретени - повьшение чувствительности способа. Поставленна цель достигаетс тем что способ осуществл ют путем исследовани крови, из которой готов т мо нослой 10%-ной взвеси эритроц1 тов больного и добавл ют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибилизированные О-антигеном шигелл Флекс ра, и комплемент, затем после инкубировани их 2-2,5 ч при и 1718 ч при подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 10% по сравнению с контролем диагностируют дизентерию. Способ осуществл ют следующим образом . Берут 10 мл крови в пробирку, содержащую 20 ед. кристаллического гепарина , и раздел ют на фракции лимфоцитов и эритроцитов путем центрифугировани при 1000 об/мин в течение 15 мин в грещиенте плотности фиколл-верографина. В пробирках готов т два образца, содержащих монослой 10%-ной взвеси эритроцитов больного, трижды отмытых фосфатным буфером, в один из которых (контроль) добавл ют равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов в концентрации мл, и комплемент в виде свежей сыворотки крови белой икаак в разведении 1:5. В другой образец (опыт) добавл ют также равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов, сенсибилизированных предварительно с равным объемом липополисахаридного 0-антигена шигелл при 37 С в течение 30 мин в концентрации 210 мл, и комплемента млши в разведении 1:5, и запускают в камеру Гор ева, помещенную в увлажненную чашку Петри. Затем контрольнуй и опытную смеси запускают в камеру Гор ева , которую предварительно помещают в чаику Петри, содержащую увлажнеНиую фильтровгшьную бумагу, Оба образца смеси выдерживают в течение 2 ч в термостате при 37 С, а затем 18 ч в холодильнике при 4с. Подсчитывают количество участков лиэированных эритроцитов, площадь кото рых не менее 5 клеток, и при повышении их количества в опыте на 10% и больше по сравнению с контролем диаг юстируют дизентерию. Пример. Больной И.Г., 23ле поступил в стационар (без жалоб на н рушени желудочно-кишечного тракта и других систем организма} в со случайным обнаружением в кале шигелл Зонне, с подозрением на дизентерию. Реакци пассивной гемагглютинации с эритроцитарным антигеном шигелл Зонне была отрицательна. С помощью предлагаемого способа был выставлен диагноз дизентерии: показатель контрол 4%/ а при стимул ции этой реакции О-антигеном шигелл равен 15%. Следовательно, реакци пассивной гемагглютинации была ложноотрицатель на. П р и м е р
2. Больна К.С.М., 14 лет, поступила в стационар с про влени ми гемоколита (боли в животе преимущественнр слева, спазм сигмы , стул 5-8 раз в день со слизью и кровью|| . Предварительный диагноз дизертери . При использовании контрольного ди дизентеагностического препарата рии показатель реакции был равен 69%, т.е. почти в 9 раз превыша показатель контрол , что также свидетельствовало о диагнозе - дизе2|тери При использовании предлагаемого способа был получен отрицательный ре зультат - при добавлении О-антигена шигелл Флекснера количество лизированных эритроцитов в виде овальных участков просветлени моносло вели чиной в 5 клеток и более было равно 7%, а в контроле - 8%. В дальнейшем правильность этого ответа была подтверждена высевом из кала сапмонелл энтеридес. Исход из этого, окончательный диагноз был исправлен на сапмонеллез . Пример
3. Больна К.С.Л., 23 лет, госпитализирована с не сными признаками, присущими дизентерии и пищевым инфекци м (вод нистый понос , нормальна копрограмма) % С помощью предлагаемого способа был выставлен правильный диагноз дизентерии , так как результаты способа были следующие г показатель контрол 9% , показатель стимул ии реакции препаратом О-антигена шигелл - 19%. Использование предлагаемого способа позвол ет повысить достоверность диагностики бактериальной дизентерии до 92-94%. Формула изобретени Способ диагностики бактериальной дизентерии путем исследовани крови, отличающийс тем, что, с целью повышени чувствительности способа готов тМОНОСЛОЙ 10%-ной взвеси эритроцитов больного и добавл ют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибилизированные О-антигеном шигелл Флекснера,и компле- мент, затем после инкубировани их 2-2,5 ч при и 17-18 ч при 4с, подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 10% по сравнению с контролем диагностируют дизентерию. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Покровский В.И. и др. Дизентери . М., Медгиз, 1979, с. 209.