SU1688820A1 - Штамм гриба BeaUVeRIa ваSSIаNа (BaLS) VUILL дл производства инсектицидного препарата боверина - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности и может быть использовано при получении инсектицидного препарата боверина, используемого дл  борьбы с вредител ми сельскохоз йственных культур и леса. Целью изобретени   вл етс  получение нового штамма, обладающего большей продуктивностью и вирулентностью , чем известные штаммы. Штамм получен методом селекции на основе многоспорового рассева культуры. Beaveria bassiana после пассажа через колорадского жука. Исходна  культура гриба выделена из природной попул ции. Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером ВКПМ - Г - 399. Выход спор 83,15 г/кг субстрата против 69,38 у известного штамма 124 - Р, ЛКбо% 0,0004 против 0,001 у штамма 10 Е. 3 табл. сл

Description

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности и может быть использовано при получении инсектицида боверина, используемого дл  борьбы с вредител ми сельскохоз йственных культур и леса.

Целью изобретени   вл етс  получение нового штамма, обладающего большей продуктивностью и вирулентностью, чем известные штаммы.

Штамм получен методом селекции на основе многоспорового рассева культуры В.bassiana после пассажа через колорадского жука. Исходна  культура гриба вы делена-из природной попул ции.

Штамм депонирован во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганизмов под номером ВКПМ - Г -399.

Штамм имеет следующую характеристику .

Морфологические признаки. При выращивании штамма на плотной агаризованной среде Сзбуро в течение 15 дней при 26 - 28°С гриб образует круглые плоские колонии, прижатые к субстрату с валиком по периферии колонии. Не имеет вторичного роста, коремий. Конидиальный слой меловой консистенции , пигментаци  конидиального сло  кремового цвета, нижней части - желтовато-рыжа  по А.С.Бондарцеву. Размер колоний от 86 ± 0,37 до 90 ± 0,2 мм, интенсивность спорул ции 1155 - 1038 млн. спор/мл среды. Воздушный мицелий разветвленный , септированный, белый. Гифы мицели  в диаметре 3.5 - 5,0 мкм. Конидие- носцы бутылевидные формируютс  одиночО 00 00 00

ю о

но, попарно или мутовками, конидии образуютс  базипетально на стеригмах. Размер конидий 2,8 - 3,5 мкм, одноклеточные, одно дерные . В гемолимфе пораженных насекомых гриб образует специфические гифаль- ные тела, блзстоспоры, которые размножаютс  делением. Прорастают конидии через 12 ч (на агаризованной среде при 26-28°С) 1 - 2-ростковыми трубками. Начало кониди- образовани  через 24 ч.

На сусло-агаре образует идентичный тип колоний.

Физиолого-биохимические признаки. Отношение к источнику углерода: усваивает сахарозу, глюкозу, лактозу, мальтозу, фруктозу , рамнозу. Не усваивает целлюлозу. Крахмал гидролизует.

Усваивает уксусную, щавелевую кислоты . Не усваивает  нтарную кислоту.

Усваивает дулыдит, сорбит, глицерин. Не усваивает н-бутанол, изобутанол.

В качестве источника азота использует казеин, пептон, аммонийный азот, нитраты, Аминокислоты стимулируют массовое конидиеобразование.

Протеолитическа  активность 3,42 ед/г, липазна  активность 1960,6 ед./г.

По отношению к кислороду - гриб аэроб.

Гриб образует антибиотики - бовери- цин, бассианолид.

Температурный диапазон роста культуры гриба от 10 до 30°С. Оптимальна  дл  данного штамма температура 26 - 28°С; рН 4,8 - 6, оптимальна  рН 5,4 - 5,5. Фаги не вы влены. Штамм 188 стабилен до 8 генераций. Штамм хранитс  в пробирках на скошенном сусло-агаре при 4°С в течение 2 лет. Препарат боверин на основе гриба B.basslana не токсичен дл  теплокровных и человека. ПДК в воздухе рабочей зоны 0,3 мг/м3, класс опасности 2.

П р и м е р 1. Сравнительна  продуктивность различных штаммов B.basslana. Культуру гриба B.basslana выращивают в колбах на качалке (1-  стади ) в жидкой питательной среде, %: меласса 4; кукурузный экстракт 2; KCI0.2; КН2Р040.2. Врем  культивировани  48 ч при 27 - 28°С. Образуетс  хорошо развитый мицелий и бластоспоры (инокул т дл 

твердого субстрата - II стади ). Полученный инокул т смешивают со стерильным твердым субстратом в отношении 1:1. Твердым субстратом  вл ютс  отходы  чмен  при

производстве трихограммы. Врем  выращивани  120 ч, температура 27 - 28°С.

Полученные данные приведены в табл.1.

П р и м е р 2. Сравнительное определение активности различных штаммов B.bassiana на различных насекомых.

Опыт став т в п ти поверхност х. В чашки Петри помещают по 15 особей насекомых , обработанных 1 %-ной суспензией

спор (2,5 см3 с титром (1 - 2) х 10 сп./мл). Корм помещают в чашку и мен ют в течение всего периода наблюдени . Учет провод т на 7-е сутки, температура 28 ± 1°С.

В табл.2 приведена активность штаммов гриба B.basslana на различных насекомых-вредител х .

П р и м е р 3. Определение вирулентности различных штаммов B.basslana.

Дл  определени  вирулентности штаммов гриба B.bassiana используют метод дозированного инфицирование тест-насекомых (имаго Musca donestica а).Дл  биологической оценки используют односуточные имаго домашней мухи (лабораторна  попул ци ). Обработку мух производ т суспензией спор 0,1; 0,01; 0,001 и 1%. кажда  концентраци  в трех повторност х. Обработку насекомых провод т 4 мл суспензии каждой концентрации. В стерильные банки помещают по 15 особей мух, корм ставитс 

в виде сахарного сиропа. Насекомых помещают в сухо-воздушный термостат при 28°С, учет гибели мух производ т на 7-е сутки.

Дальнейший расчет проводитс  по системе пробитое (способ Пригге).

В табл.3 приведена вирулентность штаммов B.basslana.

Таким образом, штамм 188 имеет продуктивность и вирулентность выше, чем известные штаммы 124 - Р, 21 - б, 10 Е, 80№4.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Штамм гриба Beauveria basslana (Bals) Vulll ВКПМ - Г - 399 дл  производства ин- 0 сектицидного препарата боверина.

   Таблица 1

   Таблица 2

   Таблица 3