SU1681258A1 - Способ диагностики активных форм туберкулеза легких - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к области медицины , преимущественно к пульмонологии, и может быть использовано дл  дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза легких Целью изобретени   вл етс  повышение точности способа за счет дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза и неспецифических пневмоний . Цель достигаетс  тем, что эритроциты крови исследуютс  в реакции эхиноци- тарной трансформации эритроцитов, которую провод т до и через 24 ч после постановки пациенту реакции Манту с 2ТЕ турберкудина ППД-Л, при этом реакцию трансформации осуществл ют посредством инкубации крови в присутствии вакцины БЦЖ в течение 1 ч при комнатной температуре с последующей фиксацией клеток и подсчетом показател  эхиноцитарной трансформации эритроцитов и отношени  показателей до и после туберкулиновой нагрузки и при значении отношени  1,1 и выше диагностируют неспецифическую пневмонию, а при значении, меньшем 1,1, диагностируют активный туберкулез легких. Положительный эффект способа заключаетс  в отличие от известного способа в достижении дифференциальной диагностики. W Ё

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно к пульмонологии, и может быть использовано дл  дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза легких и неспецифической пневмонии и дл  оценки состо ни  иммунитета к микробактери м туберкулеза у этой группы больных.

Цель изобретени  - повышение точности за счет дифференциального вы влени  активного туберкулеза легких и неспецифической пневмонии.

Способ осуществл етс  следующим образом .

Кровь из капилл рных сосудов пальца, вз тую общеприн тым методом, в количестве 0,002-0,005 мл перенос т в среду физраствора на 0,1 М фосфатном буфере. рН 7,4,

в объеме 0,2 мл, содержащую вакцину БЦЖ в концентрации 1 мг/мл производства Ставропольского НИИ вакцин и сывороток, хорошо перемешивают и оставл ют на 1 ч при комнатной температуре (21 ± 3°С) По истечении 1 ч реакцию останавливают добавлением в пробу 0,02 мл 25%-ного глютаральдегида, перемешивают дл  равномерного распределени  фиксатора и через 3-5 мин из полученной смеси готов т препарат раздавленной капли, который микроскопируют при увеличении 40 х 10 х 1,5 (при наличии бинокул рной насадки) или 40 х 15 без нее. Учету подлежат нормальные формы эритроцитов - дискоциты (клетки дво ковогнутой формы с гладкой поверхностью ) и эхиноциты (шиповидно-деформироо

00

ю ел

00

ванные клетки) разной степени выраженности (I, II, III и IV степени по классификации M.BessIs). Подсчитывают не менее 200 клеток в каждом препарате, встречающихс  в поле зрени , подсчитывают их среднеарифметическое значение на 100 клеток дл  выражени  результата в процентах и вычисл ют затем показатель эхииоцитар- ной трансформации эритроцитов (ПЭТЭ) по формуле:

ПЭТЭ ( эхиноцитов 1 ст). + ( Ј эхиноцитов II ст. х 10) + (Ј эхиноцитов III

СТ. X 100) + ( ЭХИНОЦИТОВ IV СТ. X

1000). Далее больному не позже чем через 1 ч после первого забора крови став т реакцию Манту с внутрикожным введением 2 ТЕ туберкулина, а через 24 ч повтор ют вз тие крови из пальца дл  повторного проведени  всех вышеописанных манипул ций и вычислени  ПЭТЭ после туберкулиновой нагрузки. Дл  решени  вопроса о специфике воспалительного заболевани  в легких рассчитывают индекс соотношени  между ПЭТЭ до и ПЭТЭ после туберкулиновой пробы путем делени  первого показател  на второй:

Индекс ПЭТЭ - ПЭТЭдоППД индекс lid id пэтЭпослеППД

приготовлен препарат раздавленной капли . Дл  этого на предметное стекло наносили 1 каплю реакционной смеси и накрывали ее тонким покровным стеклом,

окантованным тонким слоем вазелина. Микроскопическое изучение красных клеток крови показало наличие в препарате 46% эхиноцитов I степени, 16,5% эхиноцитов И степени и 4% эхиноцитов III степени. Показатель эхиноцитарной трансформации эритроцитов (ПЭТЭ)

ПЭТЭ 46+ (16,5x10)+ (4x100) 611.

Сразу же после вз ти  крови больному

сделана реакци  Манту с 2 ТЕ туберкулина,

а на следующий день в это же врем  (т.е. через 24 ч) проведено повторное исследование крови по уже описанной методике с вычислением ПЭТЭ после туберкулиновой пробы:

ПЭТЭ 65,5+ (5,5x10) +(2x100) 320,5.

Дл  решени  вопроса о специфичности воспалительного процесса в легких был рас- считан индекс соотношени  ПЭТЭ до и после проведенной пробы Манту:

30

611 320,5

1,9

При значении индекса 1,1 и более ставитс  диагноз неспецифической пневмонии , а при значении менее 1,1 - активной формы туберкулеза легких.

Способ иллюстрируетс  следующими примерами конкретного выполнени .

Дл  удобства одновременного обследовани  группы пациентов были использова- ны 96-луночные планшеты дл  иммунологических реакций с максимальным объемом лунки 0,25 мл и герметичной пластиковой крышкой. Врем  инкубации смеси в каждой лунке учитывали индивидуально .

П р и м е р 1. Больной Антонов С.И. При первичном обследовании была вз та капилл рна  кровь из пальца в количестве 0,002- 0,005 мл (на кончике пластикового наконечника микропипетки), котора  пере- несена в лунку планшета дл  иммунологических реакций с 0,2 мл физраствора на 0,1 М фосфатном буфере, содержащем вакцину БЦЖ в концентрации 1 мг/мл, хорошо перемешана со средой путем пипетировани , накрыта пластиковой крышкой и оставлена на инкубацию при комнатной температуре. Спуст  1 ч в лунку добавлено 0,02 мл 25%- ного глютаральдегида, вновь проведено пи- петирование смеси и через 3-5 мин был

т.е. более 1,1, поэтому расценен как типичный дл  неспецифической пневмонии. В дальнейшем в ходе обследовани  и пробного лечени  пациента диагноз пневмонии, поставленный с помощью предлагаемого способа, был подтвержден клиническим диагнозом ,

П р и м е р 2. Больной Бурцев Ю.Н. При первичном обследовании с целью дифференциальной диагностики активного туберкулеза легких и пневмонии проведено исследование способности эритроцитов измен ть свою форму при инкубации в физрастворе с вакциной БЦЖ до и через 24 ч после постановки реакции Манту с 2 ТЕ туберкулина . В результате величина ПЭТЭ до туберкулиновой пробы составила

50,5+ (9x10) 140,5, а через 24 ч

58,5 + (2,2 х 10) + (1 х 100) 378,5.

Последующее вычисление индекса соотношени  ПЭТЭ показало: что величина индекса значительно меньше 1,1:

378 5 0,4, в св зи с чем и заболевание

пациента было расценено как активна  форма туберкулеза легких. В дальнейшем в ходе дополнительного обследовани  и пробного

специфического лечени  диагноз, поставленный на основе предлагаемого лабора- торного исследовани  крови, был подтвержден клиническим диагнозом,

Всего под наблюдением с целью диффе- ренциальной диагностики воспалительного процесса в легких было 63 пациента в возрасте от 30 до 65 лет; из них 43 с активной формой туберкулеза легких и 20 с неспецифической пневмонией.

При обследовании пациентов по предлагаемому способу было обнаружено, что в то врем  как количество эхиноцитов (и величина ПЭТЭ) после туберкулиновой нагрузки у больных с активной формой туберкулеза легких имеет тенденцию к увеличению при среднем значении индекса ПЭТЭ, равном 0,37 ±0.04, у больных пневмонией величина ПЭТЭ - увеличивалась при среднем значении индекса ПЭТЭ, равном 3,75 ± 0,79. При индивидуальной оценке величины индекса у каждого больного было установлено, что у больных с диагнозом активна  форма туберкулеза легких этот индекс всегда ниже 1,1, а у больных неспецифической пневмонией равен или выше 1,1, т.е. была определена диагностическа  граница, выше которой располагались значени  индексов ПЭТЭ у больных с пневмонией, а ниже - у больных с активной формой туберкулеза.

Необходимо отметить, что чрезвычайно высока  чувствительность предлагаемого способа диагностики обусловлена прежде всего инкубацией крови с вакцинным штаммом микробактерий туберкулеза и тем, что способ предусматривает изучение взаимодействи  клеток крови с полными оболочными антигенами возбудителей туберкулеза, а не с продуктами их жизнеде тельности (туберкулином ) и учет результатов реакции по малейшему изменению формы эритроцитов , а не по их конечному разрушению (гемолизу ), как в прототипе.

Таким образом, предлагаемый способ дифференциальной диагностики активных форм туберкулеза легких и пневмонии позвол ет в течение 24 ч точно и однозначно определить у больного характер воспалительного (патологического) процесса в легких и своевременно начать его специфическое лечение. Последнее обсто тельство имеет особое значение, так как в насто щее врем  отмечаетс  заметное изменение клинического течени  и патамор- фоза не только всех форм туберкулеза легких, но и неспецифических пневмоний, что обусловливает повышенную частоту диагностических ошибок среди этих заболеваний от 30 до 50%.

Кроме того, предлагаемый способ отличаетс  простотой исполнени , доступностью дл  любой диагностической лаборатории и неограниченной широтой количественной характеристики результатов реакции в виде показател  эхиноцитарной трансформации эритроцитов, что позвол ет изучать у каждого пациента состо ние устойчивости к возбудителю в процессе специфической терапии.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Способ диагностики активных форм туберкулеза легких путем клинического обсле- довани  и исследовани  эритроцитов крови, отличающийс  тем, что, с целью повышени  точности путем дифференциального вы влени  активных форм туберкулеза и неспецифических пневмоний, эритроциты крови исследуют в реакции эхиноцитарной трансформации эритроцитов, при этом провод т реакцию до и через 24ч. после постановки пациенту реакции Манту с 2ТЕ туберкулина ППД-Л путем инкубации крови в присутствии вакцины БЦЖ в течение 1 ч при комнатной температуре с после: дующей фиксацией клеток, подсчетом показател  эхиноцитарной трансформации эритроцитов и отношени  показателей до и после туберкулиновой нагрузки и при значении отношени  1,1 и выше диагностируют неспецифическую пневмонию, а при значении , меньшем 1,1, диагностируют активный туберкулез легких.