SU1538128A1 - Способ определени содержани средних молекул в крови - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине, а именно к способам определени  средних молекул в крови. Целью изобретени   вл етс  упрощение способа, снижение его травматичности. Способ заключаетс  в том, что дл  исследовани  используют капилл рную кровь в объеме не менее 60 мкл, которую центрифугируют, супернатант развод т водой в соотношении не менее 1:15 и обрабатывают ТХУ, вновь центрируют супернатант, спектрофотометрируют и по оптической плотности определ ют концентрацию средних молекул.

Description

Изобретение относитс  к медицине, в частности к способу определени  пептидов в биологических средах.

Цель изобретени  - упрощение способа .

Согласно предлагаемому способу осуществл ют забор капилл рной крови в количестве не менее 60 мкл, добавл ют антикоагул нт, а перед обработку ТХУ супернатант предварительно развод т водой в соотношении не менее

1:15.

Способ осуществл ют следующим образом .

В стекл нные, с коническим дном, пробирки объемом 3-5 мл (можно использовать пробирки из любого прозрачного нейтрального пластика, не подверженного действию кислот) с помощью пипетки-дозатора приливают по 30 мкл исходного раствора (0,9%NaCl, 3,5% Ка-оксалата--5,5 ). До забора

крови пробирки с раствором хран т закрытыми пробкой,

Забор капилл рной крови пациента производитс  из пальца или мочки уха в стекл нные пипетки объемом 50- 100 мкл. Предварительно пипетки промывают исходным раствором и высушивают . Отобранную кровь тщательно перемешивают в пробирке с 30 мкл наход щегос  там исходного раствора из расчета на 30 мкл раствора 100 мкл капилл рной крови. Дальнейшие операции производ т как можно быстрее. Допускаетс  хранение отобранных проб на холоду при 4°С, но не более 4 ч.

Пробы центрифугируют на лабораторной медицинской центрифуге ОПн-8 в течение 10 мин при 5000 об/мин (1700). После окончани  центрифугировани  из каждой пробирки пипеткой-дозатором осторожно извлекают по 50 мкл супернатанта (не затрагива  осадок,

(Л

с

ел

со

00

ю

оо

который содержит форменные элементы крови) и перенос т в чистую аналог гичную пробирку. Затем в каждую пробирку добавл ют по 750 мкл дистиллированной НА0 и 400 мкл 10%-ного водного раствора ТХУ (раствор трихлор- уксусной кислоты предварительно пропущен через фарфоровые фильтры). Через 5 мин после добавлени  ТХУ и об- разовани  непрозрачной взвеси пробы центрифугируют на центрифуге ОПн-8 при 5000 об/мин в течение 5 мин.

После центрифугировани 1 по 1 мл супернатанта каждой пробы помещают в кварцевую кюветув Оптическую плотность при 254 и 280 нм измер ют против слепой пробы (3%-лый раствор ТХУ) на любом отечественном или зарубежном спектрофотометре-УФ,напри- мер, СФ-26 (СССР) с использованием кюветы с длиной оптического пути 5 мм.

Claims (1)

1. Формула изоб

   е т е н и  

   Способ определени  содержани  средних молекул в крови путем отбора пробы, отделени  форменных элементов , обработки супернатанта трихлор- уксусной кислотой центрифугированием с последующим измерением оптической плотности при ft 254 нм и 280 нм отличающийс  тем, что, с целью упрощени  способа и снижени  его травматичности, в качестве пробы используют капилл рную кровь в объеме не менее 60 мкл, а перед обработкой ТХУ супернатант предварительно развод т водой в соотношении не менее 1:15,