SU1755098A1

SU1755098A1 - Способ определени бронхоспазма аллергического генеза при воспалительных заболевани х легких

Info

Publication number: SU1755098A1
Application number: SU864110530A
Authority: SU
Inventors: Лев Васильевич Ященко; Зиновий Николаевич Остапяк; Лариса Матвеевна Гах; Лидия Юрьевна Подставкина
Priority date: 1986-08-05
Filing date: 1986-08-05
Publication date: 1992-08-15

Abstract

Изобретение относитс к медицине, а именно к пульмонологии. Целью вл етс повышение точности способа. Цель достигаетс тем, что в крови исследуют полинукле- арные лейкоциты, в которых определ ют содержание катионных белков, при этом исследовани провод т одновременно двух мазков, один из. которых до вы влени катионных белков облучают ультрафиолетовым светом в течение 2-3 мин. При увеличении содержани катионных белков в клетках облученного мазка по отношению к необлученному на 16% и больше определ ют бронхоспазм аллергического генеза. Способ значительно повышает точность диагностики .

Description

ч

w

Ё

Изобретение относитс к медицине, а именно к пульмонологии.

Цель изобретени - повышение точности способа.

Способ осуществл ют следующим образом .

Из периферической крови готов т два мазка. Оба мазка (до и после УФ-воздейст- ви ) изготовл ютс из одной пробы крови, вз той из пальца или вены в количестве не менее 0,2 мл с одним из используемых антикоагул нтов (гепарин, цитрат или оксалат натри ) в соотношении 10:1. Дл УФ-воз- действи 0,1 мл крови помещают на предметное стекло с лункой и облучают в течение 2-4 мин. Через 1-2 мин после облучени кровь перемешивают (не выключа лампы) 2-кратным набором ее в пипетку. Дл облучени используют ртутно-к-варцевую лампу мощностью 250 Вт Облучение производ т

при рассто нии 40 см от лампы до поверхности крови. Затем из оставшейс необлученной порции крови и облученной готов т два мазка с последующей окраской на кати- онные белки по Шубичу с последующей ци- тоспектрофотометрией по Шерудило и определ ют содержание катионных белков в ПНЛ мазков обеих порций крови. Возможно определение содержани катионных белков визуально с помощью микроскопа по балльной системе. При увеличении показател содержани катионных белков в ПНЛ после воздействи УФ в сравнении с показателем содержани катионных белков без воздействи на 16% и больше диагностируют бронхоспазм аллергического характера при воспалительных заболевани х легких.

Окраска мазков по Шубичу.

Высушенные свежеприготовленные мазки фиксируют 60-90 с 5%-ным раствоVJ

СЛ СЛ О

ю

О)

ром сульфосалициловой кислоты или 3-4 мин в парах формалина, тщательно промывают дистиллированной водой, высушивают и окрашивают 1-2 мин в 0,1%-ном растворе бромфенолового синего в 0,05 М боратном буфере (рН 8,2), после чего мазки промывают в трех сменах этого же буфера по 1-2 мин в каждой смене, высушивают и производ т докраску (необ зательно) дер 1 %-ным раствором сафранина 30-60 с.

Цитоспектрофотометри по Шерудило заключаетс в том, что оптическую плотность клетки измер ют на одном и том же зонде при двух длинах волн экстинкции. Экстинкци использованного в реакции крабител при 2-й длине волны должна составл ть 0,4-0,6 экстинкции при 1-й длине волны. Масса красител в клетке, отражающа количество окрашенного вещества (ка- тионный белок), определ етс по формуле, учитывающей оптические плотности клетки при 1-й и 2-й длинах волн экстинкции использованного красител , при тех же длинах волн и площадь зонда.

Диагностический показатель установлен эмпирически.

Пример 1. У больного А., находившегос на лечении по поводу хронического об- структивного бронхита с клинико-функ- циональными про влени ми бронхоспаз- ма, вз ли из пальца 0,2 мл крови в пробирку с 0,02 мл 1,34%-ного раствора оксалата натри . 0,1 мл крови поместили на предметное стекло с лункой и воздействовали на нее в течение 2-3 мин с помощью лампы Q-139. Рассто ние от лампы до поверхности крови 40 см. Спуст 1,5 мин перемешали кровь 2-кратным набором ее в пипетку, не выключа лампы. Затем из необлученной и облученной порций крови сделали мазки и окрасили одним и тем же реактивом на ка- тионные белки по Шубичу. С помощью ци- тоспектрофотометра установили, что показатель содержани катионных белков в ПНЛ в порции крови без облучени равен 1,07 усл.ед., после УФ-воздействи - 1,47 усл.ед. Увеличение составл ет 37,38%. Таким образом, по предлагаемому способу у

больного диагностирован бронхоспазм аллергического характера

Исследование по прототипу по тесту ППН вы вило сенсибилизацию к эуфеллину , новокаину.

Пример 2. У больного Б., находившегос на лечении по поводу хронического об- структивного бронхита с клинико-функ- циональными про влени ми бронхоспазма,

исследование по предлагаемому способу показало, что показатель содержани катионных белков в ПНЛ порции крови без воздействи УФ равен 1,24 усл.ед., после УФ-воздействи - 1,31 усл.ед. В этом случае

диагностический показатель равен 5,64%, и по предлагаемому способу у больного не диагностирован бронхоспазм аллергического характера.

Исследование по прототипу по тесту

ППН у этого больного не вы вило сенсибилизации к бактериальным аллергенам и лекарственным препаратам.

Таким образом, предложение основано на экспериментально установленной способности УФ оказывать разное вли ние на ПНЛ в зависимости от характера бронхоспазма с последующей регистрацией этой разницы цитохимическим определением в ПНЛ катионных белков.

Способ позвол ет определить бронхоспазм аллергического генеза с большой веро тностью .

Claims

Формула изобретени Способ определени бронхоспазма аллергического генеза при воспалительных заболевани х легких, путем исследовани мазков крови, отличающийс тем, что, с целью повышени точности способа, исследуют полинуклеарные лейкоциты, в которых определ ют содержание катионных белков, при этом исследовани провод т одновременно двух мазков, один из которых до вы влени катионных белков облучают ультрафиолетовым светом в течение 2-3

мин, и при увеличении содержани катионных белков в клетках облученного мазка по отношению к необлученному на 16% и больше определ ют бронхоспазм аллергического генеза.