SU1508168A1 - Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови - Google Patents
Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови Download PDFInfo
- Publication number
- SU1508168A1 SU1508168A1 SU874253420A SU4253420A SU1508168A1 SU 1508168 A1 SU1508168 A1 SU 1508168A1 SU 874253420 A SU874253420 A SU 874253420A SU 4253420 A SU4253420 A SU 4253420A SU 1508168 A1 SU1508168 A1 SU 1508168A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- blood
- mixture
- unstable
- minutes
- butanol
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к экспериментальной медицине, гематологии, а именно к способам вы влени нестабильного гемоглобина в крови. Целью изобретени вл етс упрощение способа. Берут кровь из пальца в количестве 0,1-0,2 мл капилл ром, предварительно смоченным гепарином, отстаивают, плазму удал ют. Гемолизат не готов т, а дл анализа используют эритроциты, которые в количестве 0,01-0,02 мл добавл ют к 2,5-3 мл приготовленной за 30 мин до анализа и тщательно перемешанной смеси 6,5-5,5% н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10-3М NA2 этилен диамино-тетрацксусной кислоты с PH 7,4 при 18-25°С. Суспензию эритроцитов в смеси осторожно перемешивают. Через 3±1 мин эритроциты донора и пациента раствор ютс в этой смеси, и суспензи становитс прозрачной. Оба раствора - контрольный и исследуемый-инкубируют при температуре 18-25°С. Через 5-60 мин раствор эритроцитов носител нестабильного Нв мутнеет, а контроль остаетс прозрачным. Помутнение раствора регистрируют визуально или путем измерени оптической плотности при 700±5 нм. Установлена обратна зависимость между температурой и объемной концентрацией н-бутанола в фосфатном буфере.
Description
1
(21)4253420/28-14
(22)29.05.87
(46) 15.09.89. Бюл. № 34
(71)Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливани крови
(72)Т.П. Молчанова
(53)612.015X088.8)
(56)Carrell R.W. and Kay R. Simple Method for the detection of unstable haemoglobin. - But. Y. Haematology,
1972, V. 25, p. 615-629.
(54)СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ НЕСТАБИЛЬНОГО ГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ
(57)Изобретение относитс к экспериментальной медицине, гематологии, а именно к способам вы влени нестабильного гемоглобина в крови. Целью изоб- ретенил вл етс упрощение способа. Берут кровь из пальца в количестве
0,1-0,2 мл капилл ром, предварительно смоченным гепарином, отстаивают, плазму удал ют. Гемолизат не готов т, а дл анализа используют эритроциты, которые в количестве 0,01-0,02 мл добавл ют к 2,5-3 мл приготовлен ой за 30 мин до анализа и тщательно перемешанной смеси 6,5-5,5% н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 МНа2 ЭДТАс рН 7,4 при 18-25 0. Суспензию эритроцитов в смеси осторожно перемешивают. Через 3±1 мин эритроциты донора и пациента раствор ютс в этой смеси, и суспензи становитс прозрачной. Оба раствора - контрольный и исследуемый - инкубируют при 18-25°С. Через 5-60 мин раствор эритроцитов носител нестабильного Нв мутнеет, а контроль остаетс прозрачным . Помутнение раствора регистрируют визуально или путем измерени оптической плотности при 700±5 нм. Установлена обратна зависимость между температурой и объемной концентрацией н-бутанола в фосфатном буфере.
§ .
(П
Изобретение относитс к экспериментальной медицине, к гематологии, а именно к диагностике, гемоглобинопатии , обусловленных носительством мутантных нестабильных гемоглобинов (Нв).
Цель изобретени - упрощение способа .
Цель достигаетс тем, что непосредственно эритроциты крови донора и пациента , вз той из пальца, суспензируют в специально приготовленной смеси нормального бутилового спирта - н-бу- танола с фосфатным буфером при 1825 С с получением прозрачного раствора . Наличие в крови нестабильного Нв регистрируют по помутнению раствора через 5-60 мин по сравнению с прозрачным контролем.
Способ осуществл етс следующим образом.
Дл ,исследовани кровь берут из пальца в количестве О,1-0,2 мл капилл ром , предварительно смоченным гепарином . Затем кровь отстаивают в течение 30-60 мин, плазму удал ют. Дл анализа используют эритроциты. Эритроциты в количестве 0,01-0,02 мл
3150
добавл ют к 2,5-3 мл приготовленной за 30 мин до анализа и тщательно перемешанной смеси 6,5-5,5% н-бутанола в О,I М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 М натриевой соли этилен- диаминотетрауксусной кислоты (Naj, ЭДТА) с рН 7,4 при 18-25°С. Суспензию эритроцитов в смеси осторожно переме- щивают палочкой или покачива пробирку рукой. Через 3-1 мин эритроциты донора и пациента раствор ютс в этой смеси и суспензи становитс прозрачной . Оба раствора - контрольный и исследуемый инкубируют при 18-25 С 30 мин. Через 5-60 мин раствор эритроцитов носител нестабильного Нв мутнеет, а контроль остаетс прозрачным . Помутнение раствора регистрируют визуально или путем измерени рассе ни растворов без предварительного центрифугировани при 700-f5 нм на спектрофотометре.
Установлена обратна зависимость между температурой и объемной концентрацией н-бутанола в фосфатном буфере. Дл различных интервалов температур составлена таблица, которой следует руководствоватьс при выборе условий вы влени нестабильного Нв в крови предложенным способом.
Пример 1 . Больна Б (Московска городска детска клиническа
больница № 1, истори болезни № 9143) ,, Из пальца берут 0,15 мл крови гемато- страдает врожденной гемолитической критным капилл ром. Кровь отстаивают 60 мин, плазму удал ют капилл ром. 0,02 мл эритроцитов больной добавл анемией и цианозом. Из пальца берут 0,1 мл крови гематокритным капилл ром . Отстаивают, через 30 мин плазму
удал ют капилл ром. 0,01 мл эритроци- Q товленной и тщательно перемешанной тов больной добавл ют при 20°С к 2,5 мл за 30 мин приготовленной и тщательно перемешанной смеси 6,5% н-бутанола в 0,01 М натрий-фосфатном буфере , содержащем Ю М рН ремешивают путем покачивани пробир- 7,4. Аналогичным образом готов т кон- ки рукой. Через 3 мин суспензии эрит- троль. Смеси осторожно перемешивают путем покачивани пробирки рукой. Через 4 мин суспензии эритроцитов стают при 25 С к 3 мл за 30 мин пригосмеси 5,5% по н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 М Nag SflTA с рН 7,4. Аналогичным образом готов т контроль. Смеси осторожно пероцитов станов тс прозрачными. Оба раствора инкубируют 60 мин при 25 С. Раствор эритроцитов больной через 60 мин мутнеет, а контроль остаетс прозрачным. После регистрации оптических плотностей при 700 нм на спектрофотометре Спекорд получают следующие показани : контроль 0,035 опт.ед,, больна - 0,93 опт.ед, У больной диагносцировано носительство нестабильного Нв.
ли прозрачными. Оба раствора инкубируют при . Через 5 мин раствор эритроцитов больной мутнеет, а контроль остаетс прозрачным. После регистрации оптических плотностей растворов на спектрофотометре Спекорд пр и 700 нм получают следующие показани : контроль 0,03 опт.ед., больна 0,7 опт.ед. У больной диагносцировано носи тельство нестабильного Нв
Пример 2. Больна Р (ЦНИИ гематологии и переливани крови МЗ СССР, истори болезни № 299) страдает наследственной гемолитической анемией . Из пальца берут 0,1 мл крови капилл ром , предварительно смоченным гепарином. Кровь отстаивают 45 мин, плазму удал ют капилл ром. 0,015 мл эритроцитов больной добавл ют при 23 С к 3 мл за 30 мин приготовленной и тщательно перемещанной смеси 6,0% н-бутанола в 0,1 Ы натрий-фосфатном буфере, содержащем с
рН 7,4. Аналогичным образом готов т контроль. Смеси осторожно перемешивают стекл нной палочкой. Через 3 мин обе суспензии эритроцитов станов тс прозрачными. Инкубируют при 23 С. Через 15 мин раствор эритроцитов значительно мутнеет, а контроль остаетс прозрачным. После регистрации оптических Плотностей растворов при 702 нм на спектрофотометре Спекорд
получают следующие показани : контроль 0,02 опт.ед., больна 1,4 опт. ед. У больной диагносцировано носи- тельство нестабильного Нв.
Пример 3. Больна Ш (Московска городска детска клиническа больница № 1, истори болезни № 17462) имеет жалобы на повьпиенную утомл емость , периодические.головные боли.
ют при 25 С к 3 мл за 30 мин приготовленной и тщательно перемешанной ремешивают путем покачивани пробир- ки рукой. Через 3 мин суспензии эрит-
смеси 5,5% по н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 М Nag SflTA с рН 7,4. Аналогичным образом готов т контроль. Смеси осторожно петовленной и тщательно перемешанной ремешивают путем покачивани пробир- ки рукой. Через 3 мин суспензии эрит-
роцитов станов тс прозрачными. Оба раствора инкубируют 60 мин при 25 С. Раствор эритроцитов больной через 60 мин мутнеет, а контроль остаетс прозрачным. После регистрации оптических плотностей при 700 нм на спектрофотометре Спекорд получают следующие показани : контроль 0,035 опт.ед,, больна - 0,93 опт.ед, У больной диагносцировано носительство нестабильного Нв.
Упрощение способа вы влени нестабильного Нв позвол ет: проводить ана51508
ЛИЗ на микроуровне - на крови объемом- 0,1-0,2 мл, вз той из пальца; сократить стадии приготовлени гемолиза- та, термостатироваии и прецизионных спектральных измерений, которые дли- тельны и требуют использовани специального оборудовани . Введенные упрощени позвол ют не только детектировать нестабильные Нв у гематолог гических больных, но и проводить массовые профилактические и попул - ционные обследовани населе - ни .
686
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ вы влени нестабильного гемоглобина в крови, включающий вз тие крови, получение эритроцитов и последующую обработку пробы органическим растворителем с последующей регистрацией оптической плотности пробы , отличающийс тем, что, с целью упрощени способа, пробу эритроцитов инкубируют 30 мин при 18-25 С в смеси, состо щей из 6,5- 5,5% н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, при рН 7,4, содержащем 10 М этилендиаминтетраацетат натри .
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874253420A SU1508168A1 (ru) | 1987-05-29 | 1987-05-29 | Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874253420A SU1508168A1 (ru) | 1987-05-29 | 1987-05-29 | Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1508168A1 true SU1508168A1 (ru) | 1989-09-15 |
Family
ID=21307505
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU874253420A SU1508168A1 (ru) | 1987-05-29 | 1987-05-29 | Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1508168A1 (ru) |
-
1987
- 1987-05-29 SU SU874253420A patent/SU1508168A1/ru active
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Hartmann et al. | Studies on thrombocytosis. I. Hyperkalemia due to release of potassium from platelets during coagulation | |
| Valberg et al. | Spectrochemical analysis of sodium, potassium, calcium, magnesium, copper, and zinc in normal human erythrocytes | |
| US3733179A (en) | Method and apparatus for the quantitative determination of blood chemicals in blood derivatives | |
| Stuart | Erythrocyte rheology. | |
| Prasad | Laboratory diagnosis of zinc deficiency. | |
| Heller et al. | A simplified assay for porphyrins in whole blood | |
| Raess et al. | A semi-automated method for the determination of multiple membrane ATPase activities | |
| Elson | Quantitative determination of serum haptoglobin: a simple and rapid method | |
| Mommaerts et al. | Dephosphorylation of adenosine triphosphate by concentrates of the virus of avian erythromyeloblastic leucosis. | |
| Simon et al. | Incubation hemolysis and red cell metabolism in acanthocytosis | |
| Bernini | Rapid estimation of hemoglobin A 2 by DEAE chromatography | |
| Green et al. | Polymerization of sickle cell hemoglobin at arterial oxygen saturation impairs erythrocyte deformability. | |
| Rodkey et al. | Effects of carboxyhemoglobin on the determination of methemoglobin in blood | |
| Warty et al. | A kit for citrate in foodstuffs adapted for assay of serum and urine. | |
| NISHIDA et al. | Studies on the factors influencing the hydrogen peroxide hemolysis test | |
| SU1508168A1 (ru) | Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови | |
| Zipursky et al. | The distribution of fetal hemoglobin in the blood of normal children and adults | |
| Hassanein et al. | Relationships between platelet function tests in normal and uraemic subjects | |
| Brittenham | Spectrophotometric plasma iron determination from fingerpuncture specimens | |
| Edwards et al. | The effect of in vivo aging of normal human erythrocytes and erythrocyte macromolecules upon oxyhemoglobin dissociation | |
| Thomas et al. | Luminol-dependent chemiluminescence microassay for phagocytic function | |
| Bartlett et al. | Comparative effects of the different formed elements on normal human blood glycolysis | |
| Beutler et al. | Aconitase in human blood | |
| Bender et al. | Precipitation of oxyhemoglobins A and S by isopropanol | |
| Varghese | Determination of plasma calcium fractions |