SU1508168A1 - Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови - Google Patents

Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови Download PDF

Info

Publication number
SU1508168A1
SU1508168A1 SU874253420A SU4253420A SU1508168A1 SU 1508168 A1 SU1508168 A1 SU 1508168A1 SU 874253420 A SU874253420 A SU 874253420A SU 4253420 A SU4253420 A SU 4253420A SU 1508168 A1 SU1508168 A1 SU 1508168A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
blood
mixture
unstable
minutes
butanol
Prior art date
Application number
SU874253420A
Other languages
English (en)
Inventor
Татьяна Павловна Молчанова
Original Assignee
Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови filed Critical Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови
Priority to SU874253420A priority Critical patent/SU1508168A1/ru
Application granted granted Critical
Publication of SU1508168A1 publication Critical patent/SU1508168A1/ru

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относитс  к экспериментальной медицине, гематологии, а именно к способам вы влени  нестабильного гемоглобина в крови. Целью изобретени   вл етс  упрощение способа. Берут кровь из пальца в количестве 0,1-0,2 мл капилл ром, предварительно смоченным гепарином, отстаивают, плазму удал ют. Гемолизат не готов т, а дл  анализа используют эритроциты, которые в количестве 0,01-0,02 мл добавл ют к 2,5-3 мл приготовленной за 30 мин до анализа и тщательно перемешанной смеси 6,5-5,5% н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10-3М NA2 этилен диамино-тетрацксусной кислоты с PH 7,4 при 18-25°С. Суспензию эритроцитов в смеси осторожно перемешивают. Через 3±1 мин эритроциты донора и пациента раствор ютс  в этой смеси, и суспензи  становитс  прозрачной. Оба раствора - контрольный и исследуемый-инкубируют при температуре 18-25°С. Через 5-60 мин раствор эритроцитов носител  нестабильного Нв мутнеет, а контроль остаетс  прозрачным. Помутнение раствора регистрируют визуально или путем измерени  оптической плотности при 700±5 нм. Установлена обратна  зависимость между температурой и объемной концентрацией н-бутанола в фосфатном буфере.

Description

1
(21)4253420/28-14
(22)29.05.87
(46) 15.09.89. Бюл. № 34
(71)Центральный научно-исследовательский институт гематологии и переливани  крови
(72)Т.П. Молчанова
(53)612.015X088.8)
(56)Carrell R.W. and Kay R. Simple Method for the detection of unstable haemoglobin. - But. Y. Haematology,
1972, V. 25, p. 615-629.
(54)СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ НЕСТАБИЛЬНОГО ГЕМОГЛОБИНА В КРОВИ
(57)Изобретение относитс  к экспериментальной медицине, гематологии, а именно к способам вы влени  нестабильного гемоглобина в крови. Целью изоб- ретенил  вл етс  упрощение способа. Берут кровь из пальца в количестве
0,1-0,2 мл капилл ром, предварительно смоченным гепарином, отстаивают, плазму удал ют. Гемолизат не готов т, а дл  анализа используют эритроциты, которые в количестве 0,01-0,02 мл добавл ют к 2,5-3 мл приготовлен ой за 30 мин до анализа и тщательно перемешанной смеси 6,5-5,5% н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 МНа2 ЭДТАс рН 7,4 при 18-25 0. Суспензию эритроцитов в смеси осторожно перемешивают. Через 3±1 мин эритроциты донора и пациента раствор ютс  в этой смеси, и суспензи  становитс  прозрачной. Оба раствора - контрольный и исследуемый - инкубируют при 18-25°С. Через 5-60 мин раствор эритроцитов носител  нестабильного Нв мутнеет, а контроль остаетс  прозрачным . Помутнение раствора регистрируют визуально или путем измерени  оптической плотности при 700±5 нм. Установлена обратна  зависимость между температурой и объемной концентрацией н-бутанола в фосфатном буфере.
§ .
Изобретение относитс  к экспериментальной медицине, к гематологии, а именно к диагностике, гемоглобинопатии , обусловленных носительством мутантных нестабильных гемоглобинов (Нв).
Цель изобретени  - упрощение способа .
Цель достигаетс  тем, что непосредственно эритроциты крови донора и пациента , вз той из пальца, суспензируют в специально приготовленной смеси нормального бутилового спирта - н-бу- танола с фосфатным буфером при 1825 С с получением прозрачного раствора . Наличие в крови нестабильного Нв регистрируют по помутнению раствора через 5-60 мин по сравнению с прозрачным контролем.
Способ осуществл етс  следующим образом.
Дл ,исследовани  кровь берут из пальца в количестве О,1-0,2 мл капилл ром , предварительно смоченным гепарином . Затем кровь отстаивают в течение 30-60 мин, плазму удал ют. Дл  анализа используют эритроциты. Эритроциты в количестве 0,01-0,02 мл
3150
добавл ют к 2,5-3 мл приготовленной за 30 мин до анализа и тщательно перемешанной смеси 6,5-5,5% н-бутанола в О,I М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 М натриевой соли этилен- диаминотетрауксусной кислоты (Naj, ЭДТА) с рН 7,4 при 18-25°С. Суспензию эритроцитов в смеси осторожно переме- щивают палочкой или покачива  пробирку рукой. Через 3-1 мин эритроциты донора и пациента раствор ютс  в этой смеси и суспензи  становитс  прозрачной . Оба раствора - контрольный и исследуемый инкубируют при 18-25 С 30 мин. Через 5-60 мин раствор эритроцитов носител  нестабильного Нв мутнеет, а контроль остаетс  прозрачным . Помутнение раствора регистрируют визуально или путем измерени  рассе ни  растворов без предварительного центрифугировани  при 700-f5 нм на спектрофотометре.
Установлена обратна  зависимость между температурой и объемной концентрацией н-бутанола в фосфатном буфере. Дл  различных интервалов температур составлена таблица, которой следует руководствоватьс  при выборе условий вы влени  нестабильного Нв в крови предложенным способом.
Пример 1 . Больна  Б (Московска  городска  детска  клиническа 
больница № 1, истори  болезни № 9143) ,, Из пальца берут 0,15 мл крови гемато- страдает врожденной гемолитической критным капилл ром. Кровь отстаивают 60 мин, плазму удал ют капилл ром. 0,02 мл эритроцитов больной добавл анемией и цианозом. Из пальца берут 0,1 мл крови гематокритным капилл ром . Отстаивают, через 30 мин плазму
удал ют капилл ром. 0,01 мл эритроци- Q товленной и тщательно перемешанной тов больной добавл ют при 20°С к 2,5 мл за 30 мин приготовленной и тщательно перемешанной смеси 6,5% н-бутанола в 0,01 М натрий-фосфатном буфере , содержащем Ю М рН ремешивают путем покачивани  пробир- 7,4. Аналогичным образом готов т кон- ки рукой. Через 3 мин суспензии эрит- троль. Смеси осторожно перемешивают путем покачивани  пробирки рукой. Через 4 мин суспензии эритроцитов стают при 25 С к 3 мл за 30 мин пригосмеси 5,5% по н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 М Nag SflTA с рН 7,4. Аналогичным образом готов т контроль. Смеси осторожно пероцитов станов тс  прозрачными. Оба раствора инкубируют 60 мин при 25 С. Раствор эритроцитов больной через 60 мин мутнеет, а контроль остаетс  прозрачным. После регистрации оптических плотностей при 700 нм на спектрофотометре Спекорд получают следующие показани : контроль 0,035 опт.ед,, больна  - 0,93 опт.ед, У больной диагносцировано носительство нестабильного Нв.
ли прозрачными. Оба раствора инкубируют при . Через 5 мин раствор эритроцитов больной мутнеет, а контроль остаетс  прозрачным. После регистрации оптических плотностей растворов на спектрофотометре Спекорд пр и 700 нм получают следующие показани : контроль 0,03 опт.ед., больна  0,7 опт.ед. У больной диагносцировано носи тельство нестабильного Нв
Пример 2. Больна  Р (ЦНИИ гематологии и переливани  крови МЗ СССР, истори  болезни № 299) страдает наследственной гемолитической анемией . Из пальца берут 0,1 мл крови капилл ром , предварительно смоченным гепарином. Кровь отстаивают 45 мин, плазму удал ют капилл ром. 0,015 мл эритроцитов больной добавл ют при 23 С к 3 мл за 30 мин приготовленной и тщательно перемещанной смеси 6,0% н-бутанола в 0,1 Ы натрий-фосфатном буфере, содержащем с
рН 7,4. Аналогичным образом готов т контроль. Смеси осторожно перемешивают стекл нной палочкой. Через 3 мин обе суспензии эритроцитов станов тс  прозрачными. Инкубируют при 23 С. Через 15 мин раствор эритроцитов значительно мутнеет, а контроль остаетс  прозрачным. После регистрации оптических Плотностей растворов при 702 нм на спектрофотометре Спекорд
получают следующие показани : контроль 0,02 опт.ед., больна  1,4 опт. ед. У больной диагносцировано носи- тельство нестабильного Нв.
Пример 3. Больна  Ш (Московска  городска  детска  клиническа  больница № 1, истори  болезни № 17462) имеет жалобы на повьпиенную утомл емость , периодические.головные боли.
ют при 25 С к 3 мл за 30 мин приготовленной и тщательно перемешанной ремешивают путем покачивани  пробир- ки рукой. Через 3 мин суспензии эрит-
смеси 5,5% по н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, содержащем 10 М Nag SflTA с рН 7,4. Аналогичным образом готов т контроль. Смеси осторожно петовленной и тщательно перемешанной ремешивают путем покачивани  пробир- ки рукой. Через 3 мин суспензии эрит-
роцитов станов тс  прозрачными. Оба раствора инкубируют 60 мин при 25 С. Раствор эритроцитов больной через 60 мин мутнеет, а контроль остаетс  прозрачным. После регистрации оптических плотностей при 700 нм на спектрофотометре Спекорд получают следующие показани : контроль 0,035 опт.ед,, больна  - 0,93 опт.ед, У больной диагносцировано носительство нестабильного Нв.
Упрощение способа вы влени  нестабильного Нв позвол ет: проводить ана51508
ЛИЗ на микроуровне - на крови объемом- 0,1-0,2 мл, вз той из пальца; сократить стадии приготовлени  гемолиза- та, термостатироваии  и прецизионных спектральных измерений, которые дли- тельны и требуют использовани  специального оборудовани . Введенные упрощени  позвол ют не только детектировать нестабильные Нв у гематолог гических больных, но и проводить массовые профилактические и попул - ционные обследовани  населе - ни .
686

Claims (1)

  1. Формула изобретени 
    Способ вы влени  нестабильного гемоглобина в крови, включающий вз тие крови, получение эритроцитов и последующую обработку пробы органическим растворителем с последующей регистрацией оптической плотности пробы , отличающийс  тем, что, с целью упрощени  способа, пробу эритроцитов инкубируют 30 мин при 18-25 С в смеси, состо щей из 6,5- 5,5% н-бутанола в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, при рН 7,4, содержащем 10 М этилендиаминтетраацетат натри .
SU874253420A 1987-05-29 1987-05-29 Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови SU1508168A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU874253420A SU1508168A1 (ru) 1987-05-29 1987-05-29 Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU874253420A SU1508168A1 (ru) 1987-05-29 1987-05-29 Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1508168A1 true SU1508168A1 (ru) 1989-09-15

Family

ID=21307505

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU874253420A SU1508168A1 (ru) 1987-05-29 1987-05-29 Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1508168A1 (ru)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hartmann et al. Studies on thrombocytosis. I. Hyperkalemia due to release of potassium from platelets during coagulation
Valberg et al. Spectrochemical analysis of sodium, potassium, calcium, magnesium, copper, and zinc in normal human erythrocytes
Marks et al. Erythrocyte glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency: evidence of differences between Negroes and Caucasians with respect to this genetically determined trait
Stuart Erythrocyte rheology.
Prasad Laboratory diagnosis of zinc deficiency.
Heller et al. A simplified assay for porphyrins in whole blood
Raess et al. A semi-automated method for the determination of multiple membrane ATPase activities
Elson Quantitative determination of serum haptoglobin: a simple and rapid method
Bernini Rapid estimation of hemoglobin A 2 by DEAE chromatography
EP0746767B1 (en) Analyzer cuvette, method and diagnostic test kit for determination of analytes in whole blood samples
Green et al. Polymerization of sickle cell hemoglobin at arterial oxygen saturation impairs erythrocyte deformability.
Rodkey et al. Effects of carboxyhemoglobin on the determination of methemoglobin in blood
Warty et al. A kit for citrate in foodstuffs adapted for assay of serum and urine.
MIND et al. Studies on the factors influencing the hydrogen peroxide hemolysis test
SU1508168A1 (ru) Способ вы влени нестабильного гемоглобина в крови
Zipursky et al. The distribution of fetal hemoglobin in the blood of normal children and adults
Hassanein et al. Relationships between platelet function tests in normal and uraemic subjects
Brittenham Spectrophotometric plasma iron determination from fingerpuncture specimens
Edwards et al. The effect of in vivo aging of normal human erythrocytes and erythrocyte macromolecules upon oxyhemoglobin dissociation
Thomas et al. Luminol-dependent chemiluminescence microassay for phagocytic function
Bartlett et al. Comparative effects of the different formed elements on normal human blood glycolysis
Beutler et al. Aconitase in human blood
Bender et al. Precipitation of oxyhemoglobins A and S by isopropanol
Goldenfarb et al. The determination of ADP-induced platelet aggregation in normal men
Donnelly et al. Is heparinized plasma suitable for use in routine biochemistry?