SU1520094A1 - Питательна среда дл выращивани спорообразующих аэробных бактерий BacILLUS SUвтILIS и BacILLUS LIснеNIFоRмIS - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности и может быть использовано при производстве ферментов, антибиотических и бактерийных препаратов. Цель изобретени  - повышение выхода биомассы. Дл  приготовлени  среды используют, г/л: пивное сусло 500-600, гидролизат м са (с содержанием аминного азота 600 мг %) 100-120, меднокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,304-0,064, марганцевокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,028-0,017, агар-агар 25-30, дистиллированную воду до 1 л. Среду стерилизуют и используют дл  выращивани . На 12-ые сутки выращивани  выход биомассы BACILLUS SUBTILIS увеличиваетс  в 3-4 раза, BACILLUS LICHENIFORMIS в 2-3 раза по сравнению с известной средой.

Description

Изобретение относитс  к микробиологической промышленности и может быть использова но при производстве ферментных, антибиотических и бактерийных препаратов.

Цель изобретени  - повышение выхода биомассы.

Среду готов т следующим образом.

Питательную среду, предназначенную дл  выращивани  В. subtilis и В. licheniformis, обогащают новым набором аминокислот, полученным при триптическом падролизе м са (600 мг % аминного азота) и микроэлементами Ып - и Си при следующем соотношении компонентов, г/л:

Пивное сусло 500,0-600,0

Гидролизат м са 100,0-120,0

Мп

140 ,05-0,01

0,005-0,003

25,0-30,0

Си

Агар-агар

Дистиллированна 

водаОстальное

После тщательного перемешивани  среду стерилизуют текучим паром с избыточным давлением 0,5 атмосферы в течение 30 мин.

В качестве источников микроэлементов Мп используют марганцевокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты , а в качестве источника микроэлемента меди - меднокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты.

После приготовлени  питательную среду разливают в 50 бaктepиoлoгиr ческих.матрацев по 0,25 л и стерилиСЛ ts9

QD 4

зуют текучим паром с избыточным давлением 0,5 атмосферы в течение 40 мин.

Засев питательных сред в матрацах роизвод т одной и той же маточной культурой В. subtilis и отдельно . licheniforniis, содержащей в 1 мл 1 млрд. микробных тел по оптическоу стандарту. В каждый матрац внос т 10 мл одной из указанных микробных Q звесей, которую равномерно распреел ют по всей поверхности питательной среды. Матрацы помещают в термотат с температурой 28 С. Выросшую икробную пленку на 2-5 - 12-й день 15 роста собирают с каждого матраца отельно с помощью 0,85%-ного раствора хлорида натри . Полученную взвесь икроорганизмов с хлопь ми пленки гомогенизируют. В гомогенной микроб- 20 ной взвеси определ ют количество микробных тел с помощью оптического стандарта и делают пересчет количества Ш1кроорганизмов, выросших на 1 мл питательной среды. В дальнейшем 25 вычисл ют средние данные по каждой группе исследований.

Пример 1. Используют среду следующего состава, г/л: пивное сусло 500; гидролизат м са 100; меднока- ,,. лиева  соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,28.; марганцевокалиева  соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,304; дистиллированна  вода остальное.

Количество микроорганизмов, выросших на 1 мл среды составл ет: на 2-й день Б. subtilis - 0,28 млрд.кл., В. licheniformis - 0,24 млрд. кл.; на 5-й дейь - 0,52 и 0,42 млрд.кл. соответственно; на 12-й день - 0,83 и 0,7 млрд. кл. соответственно.

Пример 2. Дл  выращивани  микроорганизмов используют питательную среду следующего состава, г/л: пивное сусло 550; гидролизат м са . 110; меднокалиева  соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,023; марганцевокалиева  соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,18; агар-агар 27,5; дистиллированна  вода остальное. Получено биомассы с 1 мл среды: на 2-й день В.subtilis - 0,28 - 0,3 млрд.кл., В. licheniformis - 0,24-0,26 млрд. кл.j На 5-й день 0,52-0,58 и 0,42 - 0,5 млрд. кл. соответственно; на 12-й день - 0,83-0,88 и 0,7 - 0,72 млрд. кл. соответственно.

Пример 3. Используют дл  выращивани  микроорганизмов питатель40

50

55

ную среду следующего состава, г/л: пивное сусло 600 гидролизат м са 120j меднокалиева  соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,017, марганцевокалиева  соль оксиэтиленфосфоновой кислоты 0,64; агар-агар 30; дистиллированна  вода остальное.

Количество микроорганизмов, выросших на 1 мл среды, составл ет: на 2-й день В.subtilis - 0,3 млрд. кл., В. licheniformis - 0,26 млрд. кл.} на 5-й день - 0,58 и 0,5 млрд. кл. соответственно; на 12-й день - 0,88 и 0,72 млрд. кл. соответственно.

На известной среде выход биомассы на 2-й, 5-й и 12-й дни составл ет: дл  В. subtilis - 0,13 - 0,14, 0,25- 0,3 и 0,44-0,46 млрд. кл. соответственно; дл  В. licheniformis - 0,11- 0,2, 0,23-0,26 и 0,38-0,4 млрд. кл. соответственно.

Вместо указанных солей можно ис

пользовать и иные источники ионов Си и Мп из расчета, что в питаг+

тельной среде концентраци  ионов Ып составл ет 0,05-0,01 г, а концентраци  ионов 0,005-0,003 г/л среды

Использование предлагаемой питательной среды позволит повысить выход биомассы спорообразующих аэробных микроорганизмов. Кроме того, состав питательной среды способствует повьппению выхода живых микроорганизмов после лиофилизации,

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Питательна  среда дл  вьфащивани  спорообразующих аэробных бактерий Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis , содержаща  пивное сусло, агар-агар и воду, отличающа с  тем, что, с целью повышени  выхода биомассы,, она дополнительно содержит гидролизат м са с содержанием аминного азота 600 мг %, меднокалиевую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты и марганцевокалневую соль оксиэтилендифосфоновой кислоты, а в качестве воды она содержит дистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, г/л:

   Пивное сусло 500-600

   Гидролизат м са .100-120

   Неднокалиева 

   соль оксиэтилендифосфоновой кислоты 0,304-0,064

   5 1520094 .и

   Марганцевокалие-Агар-агар25-30

   ва  соль окси-Дистиллированна 

   этилендифосфо-водаОстальное

   новой кислоты 0,028-0,017