SU1507797A1

SU1507797A1 - Реагент дл определени уреазной активности энтеробактерий

Info

Publication number: SU1507797A1
Application number: SU874347230A
Authority: SU
Inventors: Федор Иванович Георгица; Валентин Михайлович Никитин; Александр Пантелеевич Каланча; Степан Иванович Георгица
Original assignee: Кишиневский государственный медицинский институт
Priority date: 1987-12-21
Filing date: 1987-12-21
Publication date: 1989-09-15

Abstract

Изобретение относитс к медицинской микробиологии и может быть использовано дл биохимической дифференциации энтеробактерий. Цель изобретени - повышение точности определени . Реагент содержит мас.% мочевину 0,9-1,1

глюкозу 1,5-2,5

поливиниловый спирт 0,4-0,6

бромтимоловый синий водорастворимый 0,04-0,06

физиологический раствор забуференный рН 5,4-5,6. Реагент нанос т на лист бумаги с пленочным гидрофобным покрытием и высушивают. Дл проведени определени уреазной активности на сухой реагент нанос т каплю исследуемой культуры и по характеру окрашивани определ ют степень активности (изменение цвета из желтого в зеленый и далее густо-синий).

Description

Изобретение относитс к медицинской микробиологии и может быть ис- пользовано дл биологической дифференциации энтеробактерий.

Цель изобретени - повышение точности определени ,

Пример 1. Из листа бумаги с пленочным-гидрофобным покрытием вырезают диск диаметром чашки Петри (9-10 см). На пленочной поверхности расчерчивают 20 квадратных зон пло- щадью 1,5 CMJ 1,5 см, В первую пробирку берут навески порошков мочевины (0,1 г) и глюкозы (0,2 r)i заливают забуференным физраствором с рН 5,5 (7,7 мп), затем помещают на вод ную баню при 90°С дл растворени мочевины и глюкозы. Во вторую йробирку : - внос т поливиниловый спирт (0,5 г) и заливают дистилированной водой (10,0 мл), затем раствор ют над пламенем горелки или в вод ной бане, В

(Третью пробирку внос т бромтимоловый синий водорастворимый (0,05 г), заливают дистилированной водой (10,0мп) и встр хивают до полного растворени . Затем в первую пробирку внос т по 0,1 МП растворов поливинилового спирта и бромтимолового синего, тщательно встр хивают, получа смесь дл приготовлени реагента. Дп этого в центр каждой квадратной зоны носител нанос т по 1 капле объемом 0,02 мл смеси ингредиентов, оставл ют при комнатной температуре до полного высыхани капель и получени реагентов в виде фиксированных микропленок диаметром 0,4- см.

Готовые реагенты хран т при комнатной температуре в течение трех лет (срок наблюдени ),

Дл определени уреазной активности микробов носитель с реагентами помещают в чашку Петри, а на ресл

1

1507797

агент нанос т кагшю излучаемой микробной культуры, содержащей 3-5 мпрд и более микробных клеток }з 1 мл физрас- tBOpa забуференного с рН 5,5 - 0,1, jaiiiKy закрывают и инкубируют при |7 С. При наличии уреазоположительной г икробной культуры цвет капли- переводит из желтого до густо-синего, а 1|1ри наличии уреазоотрицательной мик- сбной культуры цвет капли остаетс 0ез изменений,

П р и м е р 2, Готов т реагент в Соответствии с примером 1, но компо- iieHTbi берут в следующих количествах; йас,%: мочевина 0,9; глюкоза 1,5; юливиниловый спирт 0,4; бромтимо- Ловый синий 0,04; забуференный физиологический раствор (рН 5,4) остальное ; Из 39-и исследованык культур одна Культура - слабоположительна реакци (ёеленый цвет), семь культур - положительна реакци , (синб-зеленый цвет), Si культура - резкоположительна реакци (густо-синий цвет),

П Р и м е р 3, Готов т реагент в соответствии с примером 1, но компоненты берут в следующих количествах; мас,%: мочевина 1,1; глюкоза 2,5; поливиниловый спирт 0,6; бромтимоловый синий 0,06, забуференный физраствор (рН 5,6) остальное.

Из 39-и исследуемых культур у всех 39 вы влена резкоположительна реакци (густо-синий цвет),

При исследовании 39-и уреазоположи- тельных культур энтеробактерий (16 ви- доы) с помощью известного реагента (СИБ с мочевиной) вы влено 25 культ- тур, с помощью реагента по изобретению - 39 культур.

Таким образом, использование нового реагента позвол ет повысить точность определени уреазной активности микроорганизмов;

20 25

Claims

|5 Формула изобретени

Реагент дл определени уреазной активности энтеробактерий, содержащий мочевину, индикатор рН, поливиниловый спирт и растворитель, отлич аю- щ и и с тем, что, с целью повышени точности определени , он дополнительно содержит глюкозу, в качестве индй-г катора рН он содержит бромтимоловый синий водорастворимый, а в качестве растворител - физиологический рас твор забуференный с рН 5,4-5,6 при следукидем количественном соотношении

компонентов, мас,%: Мочевина Глюкоз а

Поливиниловый спирт Бромтимоловый синий Указанный физиоло- гический раствор