SU144578A1 - Способ окраски мазков с бруцеллезными микробами - Google Patents

Description

Способы окраски мазков с целью идентификации типа возбудител  заболеваний известны, однако дл  идентификации типа возбудител  бруцеллеза примен ютс  трудоемкие методы по изучению биологических , биохимических и серологических свойств бактерий. Чаще используют бактериостатический (изучение роста чистых культур возбудител  на средах с фуксином и тионином) и серологический метод, заключающийс  в постановке реакции агглютинации с монорецепторными сыворотками. Эти методы требуют стандартных красок, типоспецифических сывороток и много времени, чтобы получить приближенной точности определение.

Способ дифференциальной окраски бруцелл, описанный в авт. св. ,N9 693317 от 10.5.1961 г., выданном автору данного изобретени , позвол ет Д1:фференцировать бруцелл типа бовис от супе и мелитензис, но не обеспечивает дифференциации супе от мелитензис.

Описываемый способ не имеет указанных выше недостатков благодар  применению специального реактива дл  окраски бруцелл типа мелитензис .

Отличительной особенностью способа  вл етс  применение реактива , состо щего из равных частей 1%-ного водного раствора основного фуксина и 4%-ного водного раствора бриллиантовой зелени. Этим реактивом окрашивают мазки в течение 10-II мин, после чего цромыьают водой и высушивают. Подсушенный мазок исследуют нод микроскопом с иммерсионной системой. Такой способ окраски мазков с бруцелл ми обеспечивает дефференциацию бруцеллы мелитензис от типов супе и бовис с наименьшей затратой средств и времени. Использование такого простого способа идентификации типов бруцелл имеет большое значение не только в микробиологии, но и в практике борьбы с бруцеллезом.

Дл  осуществлени  способа окраски мазков реактив, включающий фуксин и бриллиантовую зелень,- готов т следующим образом.

ж 144578.- 2 -..-

Ввиду того, что растворимость фуксина- в воде равн етс  только 0,39%,, оба раствора препаратов перед смешиванием подогревают до 70-80°Дл  ускоренн  растворени  фуксина раствор при подогревании помешивают . После подогрева растворы смешивают в гор чем виде и полученную смесь в течение суток выдерживают в термостате при 37°.

Мазки дл  окраски готов т из 2-4-суточной культуры бруцелл, выращенной на плотном агаре. При нанесении культуры па стекло ее смешивают с физиологическим раствором. Мазки подсушивают на воздухе или слабо фиксируют над пламенем. Подготовленный мазок окрашивают реактивом в течение 10-11 мин, затем подсушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют.

При микроскопии мазков наблюдают следуюшую микроскопическую картину: недиссоциированные брунеллы типа суис .и бовиссине-зеленого цвета, а мертвые - красного цвета: недиссоциированные бруцеллы типа мелитензис - мертвые и живые -  рко-красного цвета, в некоторых случа х среди этих клеток встречаютс  зеленоокрашенные клетки.

Пред мет изобретени 

Способ окраски мазков с бруцеллезными микробами с прим-енением химических реактивов, отличающийс  тем, что, с целью обнаружени  бруцелл типа мелитензис путем придани  им  рко-красного цвета , примен ют реактив, состо щий из равных частей 1%-ного водногораствора основного фуксина и 4%-пого водного раствора бриллиантовой зелени, которым окрашивают мазок в течение 10-11 мин, после чего промывают водой, высушивают и исследуют под микроскопо.м с иммергианной системой.