SU1342424A3 - Способ получени производных хлоргидрата гептапептида - Google Patents

Abstract

Изобретение касаетс  производных пептидов, в частности хлоргидратов гептапептидов H Val-Pro-Pro-Leu-Gly- Trp-Met-Y-HCl, гдеТ-ОН, OCHj, которые обладают биологической активностью и могут найти применение в ветерина- .рии. Цель изобретени  - создание более активных соединений указанного класса. Их синтез ведут из активированного этилхлорформиатом пептида Boc-Val-Pro-Pro-OH, и метилового эфира тетрапептида H-Leu-Gly-Trp-Met-OCH х к НС 1 в среде тетрагидрофурана в присутствии N-метилморфолина при (-12) С в течение 1ч, а затем при О - (+15)°С в течение 2 ч. Полученный продукт Boc-Val-Pro-Pro-Leu-Cly-Trp-Met- OCHj, в случае необходимости, оныл ют едким натром в метаноле и защищенный пептид деблокируют обработкой хлористым водородом в присутствии анизола и 2-меркаптоэтанола. Испытани  новых пептидов показьшают, что они малотоксичны и обладают более высокой способностью промотировать рост животных , чем известньй тетрапептид Туг- Pvo-Trp-Met-NH. 2 табл. СО

Description

Изобретение отно.ситс  к способу получени  производных хлоргидрата гексапептида - новых биологически активных соединенш, которые могут . найти применение в ветеринарии.

Целью изобретени   вл ютс  новые производные гексапептидов, малотоксичные , обладающие высокой способностью промотировать рост животных.

Значени  R, определ ют с помощью предварительно обработанных пластин силикагел  60 (Мегск) толщиной сло  0,25 мм, длиной 20 см, использу  следующие про вл ющие системы. Система А. Бензол/бензин (60-80)

этилацетат 70(10)40 по объему.

Система В. Бензол/этилацетат (уксусна  кислота ) вода

100(100/20)10 по объему (верхн   фаза;.

Система С. Бензол/зтилацетат (уксусна  кислота ) вода 100(100/40)15 по объему (верхн   фаза ).

Система С. н-бутанол (уксусна  кислота ) вода 4(1)1 по объему

Е.Магск - торгова  марка.

Анализы тонкослойной жидкостной хроматографии осуществл ют в интервале температур 8-25°С, при этом значени  R, могли измен тьс  на ±5%. Температуры плавлени  определ ют в открытых капилл рах в-аппарате Тото- ли и поправку не внос т. Большинство производных разм гчаетс  и разлагаетс  перед плавлением. Растворители дл  кристаллизации, осаждени  или измельчени  указаны в скобках.

Высоковольтный бумажный электрофорез провод т на приборе Pherograph Original-Frankfurt тип 64 на бумаге Schleicher and Schull № 2317 при рН 1,2 (муравьина  кислота:уксусна  кислота:вода 123:100:777 по объему ), при 1600v/40v (см) при рН 5,8 (пиридин:уксусна  кислота:вода 450:50:45000 по объему ) при 1400v/ /32,5v (см). Полученные продукты характеризуют по их подвижност м по отношению к G1U при рН 1,2 (Е j и рН 5,8 (Es,8 ).

В примерах использованы следующие символы и сокращени : АсОЕ этилацетат; вое трет-бутоксикарбонил; Bzl бензил, - разложение; ДМФ диме- тилформамид; ЕЦО дизтиловый эфир; НС1 (ТГФ хлористый водород в тетрагидрофуране ), i диизопропило- вый эфир; i РгОН изопропанол; Me метил; МеОН метанол; NMM N-метил-мор- , фолин; РЕ петролейньш эфир; ТГФ тет- рагидрофуран; TLC тонкослойна  хроматографи  .

Пример 1. Получение H-Val- Pro-Pro-Leu-Gly-Trp-Met-OH, HCl

0 (XIII ТК-7). Стади  1. BOC-Trp-Met- ОМе (I).

К раствору 30,43 г (100 ммоль) ВОС-Тгр-ОН в 200 мл безводного ТГФ последовательно добавл ют 11,2 мл

5 (100 ммоль) NMM и 9,9 мл этилхлор- формата при -12 С. После перемешивани  при этой температуре в течение 2 мин добавл ют холодный раствор 19,96 г (100 ммоль) HCl-H-Met-OMe и

0 11,2 мл NMM (100 ммоль) в 150 мл ДМФ. Реакционную смесь перемешивают в течение 45 мин при и 90 мин при 0-15 С, а затем фильтруют от солей и выпаривают в вакууме. Остаток

5 раствор ют в зтилацетате и промьюают несколько раз последовательно хлористым натрием насыщенными растворами 1М лимонной кислоты, 1М бикарбоната натри  и водой. Органический слой

0 сушат над безводным сульфатом натри  и растворитель удал ют в вакууме. Получают 39,12 г (выход 87%) соединени  I из изо-РгОН (изо-Рг О)РЕ:т.

пл. 95-97 С.

(

-25,1°(с

1, МеОН). R 0,73; К.0,76. Стади  2. НС1H-Trp-Met-OMe (Ц).

39,00 г С86,75 ммоль) ВОС-Тгр- Met- ОМе (I) раствор ют в 390 мл муравьиной кислоты при комнатной температуре . После завершени  удалени  ВОС (контролируемого TLC) растворитель выпаривают в вакууме при 30 С. Остаток раствор ют в метаноле, охлажденном до , и добавл ют 34,7 мл (104,1 ммоль) ЗМ раствора НС1/ТГФ. Растворители удал ют в вакууме и получают 33,48 г в количественном выходе соединени  II в виде масла, Rfj, 0,71; EI.-I 0,82. Стади  3. BOC-Gly-Trp-Met-OMe (III).

Исход  из 15,20 г (86,75 ммоль) ВОС-С1у-ОН и 33,48 г (86,75 ммоль) gg HCl-H-Trp-Met-OMe (II) по способу стадии I использу  хлороформ вместо этилацетата при выделении продукта, получают 26,37 г (выход 60%) соединени  III из ACOEt ( ) изо-Рг 0:

.( X

:т.пл. 140-145°С.

X (с , МеОН). R.g 0,56; R 0,77;

R- 0,27.

Стади  4. HCl-H-Gly-Trp-Met-OMe (Ж)

Исход  из 26,20 г (51,71 ммоль) BOC-Gly-Trp-Met-OMe (1П) и по способу описанному на стадии 2, получают 21,76 г (выход 95%) соединени  из изо-РгОН/изо-Рг2.0:т.пл.

195°С

(с разложением), ( oi -12,9° (с

1, МеОН), F 0,49; Е,. 0,84. Стади  5. BOC-Leu-Gly-Trp-Met-OMe (V).

К раствору 12,16 г (48,76 ммоль) BOC-Leu-OH в 120 мл безводного ТГФ последовательно добавл ют 5,5 мл (48,76 моль) NMM и 4,8 мл (48,76 ммоль) этилхлорформата при -12°С. После перемешивани  в течение 2 мин при этой температуре добавл ют охлажденный раствор 21,6 г (48,76 ммоль) HCl-H-Gly-Trp-Met-OMe (W ) и 5,5 МП (48,76 ммоль ) NMM в 100 мл ДМФ. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при -12 С и в течение 2 ч при 0-15°С, а затем отфильтровывают от солей и выпаривают в вакууме. Сырой продукт очищают на хроматографической колонке на сили- кагеле (Мегск.) 0,040-0,063 мм, элюи- ру  АсОЕ. Соединение V получают из AcOKt ()PE 18,13 г (выход 60%):

-31,6 (с

:т.пл. НОС. ( об) 1, МеОН). R 0,14; RiB 0,54. Стади  6. HCl-H-Leu-Gly-Trp-Met-OMe (VI).

18 г (29,04 ммоль) BOC-Leu-Gly- Trp-Met-OMe (V) раствор ют в 290 мл насыщенного раствора хлористого водорода в лед ной уксусной кислоте, к которой добавлено 18 мл анизола и 9 МП. 2-меркаптоэтанола. Спуст  30 мин при комнатной температуре удаление вое завершаетс  и растворитель удал ют в вакууме при 30°С. Сырой продукт очищают на хроматографической колонке на силикагеле (Merck) 0,040-0,063 мм, элюиру  смесью хлороформ: метанол 8:2. Из изо-РгОН/изо- получают 12,44 г (выход 77%) соединени  VI : т. пл. 170°С. ( -9,9°(с E,,i 0,71. Стади  7. BOC-Pro-Pro-OBzl (VII).

К раствору 21,52 г (100 ммоль) ВОС-Рго-ОН в 200 мл безводного ТГФ

25 уксусной кислоте при ко ратуре. Спуст  30 мин у завершаетс  и растворит в вакууме. Из изо-РгОН ют 21,60 г (выход 75%) vm: , 0,32; Е ,., 1, Стади  9. BOC-Val-Pro-P Исход  из 13,79 г (6 BOC-Val-OH и 21,5 г (6 HCl H-Pro-Pro-OBzl (vni) стадии 7 получают 22,28 соединени  IX в виде ма очистки на хроматографи с силикагелем (Merck) 0 элюиру  смесью этилацет 98:2.

Стади  10. BOC-Val-Pro22 ,28 г (44,42 ммол Pro-Pro-OBzl (IX) раств метанола и гидрируют п

45 температуре и атмосфер присутствии 4,46 .г (10 паллади  на угле. Ката фильтрованием, а раств ют в вакууме. Остаток

50 этилацетате и концентр После разбавлени  диэт получают 10,98 г (выхо 184-199°

35

40

нени  X т.пл.

-149,9° (с 1, МеО

1, МеОН) ,62; 55 « Е . 0,51,

Стади  11. BOC-Yal-Pro Trp-Met-OMe (XI),

Исход  из 9,10 г (2 BOC-Val-Pro-Pro-OH и 1

последовательно добавл ют 11,2 мл NMM и 13,3 мл изобутилхлорформата при -10 С. После перемешивани  в течение 3 мин при этой температуре добавл ют холодный раствор 24,17 г (100 ммоль). HCl-H-Pro-OBzl и 11,2 мл (100 ммоль) NMM в 150 мл ДМФ, Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч при -10 С и в течение 2 ч при 0-15°С, а затем

0

фильтруют от солей и выпаривают в вакууме . Остаток раствор ют в этилаце- тате и несколько раз промывают насы- щенньми растворами хлористого натри 

5 1М лимонной кислоты, 1М бикарбоната натри  и воды. Органический слой сушат над безводным сульфатом натри  и растворитель удал ют в вакууме, после чего получают 34,21 г (выход 85%)

Q соединени  VII в виде масла R. 0,62. .Стади  8. HCl.H-Pro-Pro-OBzl (VIII)/

34,21 г (85 ммоль) ВОС-Рго-Рго- OBzl (Vli) раствор ют в 342 мл насыщенного раствора хлористого водорода в

5 уксусной кислоте при комнатной температуре . Спуст  30 мин удаление БОС завершаетс  и растворитель удал ют . в вакууме. Из изо-РгОН/АсОЕ1 получают 21,60 г (выход 75%) соединени  vm: , 0,32; Е ,., 1,12. Стади  9. BOC-Val-Pro-Pro-OBzl (|Х). Исход  из 13,79 г (63,45 ммоль) BOC-Val-OH и 21,5 г (63,45 ммоль) HCl H-Pro-Pro-OBzl (vni) и по способу стадии 7 получают 22,28 г (выход 70%) соединени  IX в виде масла после очистки на хроматографической колонке с силикагелем (Merck) 0,040-0,063 мм, элюиру  смесью этилацетат:метанол 98:2.

Стади  10. BOC-Val-ProPro-OH (X). 22,28 г (44,42 ммоль ) BOC-Val- Pro-Pro-OBzl (IX) раствор ют в 150 мл метанола и гидрируют при комнатной

5 температуре и атмосферном давлении в присутствии 4,46 .г (10%) по весу паллади  на угле. Катализатор удал ют фильтрованием, а раствор концентрируют в вакууме. Остаток раствор ют и

0 этилацетате и концентрируют в вакууме. После разбавлени  диэтиловым эфиром получают 10,98 г (выход 60%) соеди- 184-199°С. (огГ

5

0

, го

нени  X т.пл.

-149,9° (с 1, МеОН), Н 0,24;

5 « Е . 0,51,

« Е . 0,51,

Стади  11. BOC-Yal-Pro-Pro-Leu-Gly- Trp-Met-OMe (XI),

Исход  из 9,10 г (22,12 ммоль) BOC-Val-Pro-Pro-OH и 12,30 г

513

(22,12 ммоль) HCl-H-Leu-Gly-Trp -Met

ОМе (YI ) и по способу стадии 5, однако использу  в качестве элюента этилацетат, содержащий возрастающие количества метанола от 5 до 30% в процессе хроматографической очистки, получают 16,16 г (выход 80%) соединени  ХГ из изо-РгОН/изо-Рг О: : т.пл. 184-190°С. ( -98,9 (с 1, МеОН) ,13; Е 0,58. Стади  12. BOC-Val-Pro-Pro-Leu-Gly-. Trp-Met-OH (XII ).

5,00 г (5,48 ммоль) BOC-Val-Pro- Pro-Leu-Gly-Trp-Met-OMe (Xl) раствор - ют в 20 мл метанола и омыл ют 10 мл 1М гидроокиси натри  в течение 2 ч при комнатной температуре. Раствор разбавл ют водой, частично концентрируют в вакууме, охлаждают до 0°С, подкисл ют до рН 25 М водной сол ной кислотой, а затем несколько раз экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают до нейтрального насыщенным водным раствором хлористого натри  и сушат над безводным сульфатом натри . После удалени  растворител  получают 3,99 г (выход 81%) соединени  XII : т.пл. 194-200°С.

(Г° -102,9°С (с 1, МеОН) R, 0,34; Ej,8 0,18 Glu.

Е

1,2

0,58 Glu.

Отади  13. H-Yal-Pro-Pro-Leu-Gly- Trp-Met-OH-HCl (Xill).

Исход  из 3,85 г (4,28 ммоль) BOG-Val-Pro-Pro-Leu-Gly-Trp-Met-OH (хи) и по способу стадии 6 получают 3,05 г сырого соединени  XIII из изо- РгОН/изо-Рг О. Затем этот продукт очищают на ДЕАЕ -Scphadex А-25 (торгова  марка), использу  в качестве элюента 0,02 М раствор ацетата аммони  при рН 6,7. После лиофилизации из уксусной кислоты продукт вновь раствор ют в уксусной кислоте и обрабатывают 6 мл насыщенного раствора сол ной кислоты в уксусной кислоте. Раствор вьшивают в диэтиловый эфир. Получают 2,57 г (выход 72%) соединени  ХШ : т.пл. 150 С. (о)л° -90,5° (с 1 , МеОН); R 0,30;

НПример 2. Получение НС Val-Pro-Pro-4 eu-Gly-Trp-Met-OMe (XIV)TK7. Исход  из 5,00 г (4,28 ммоль) BOC-Yal-Pro-Pro-Leu-Gly- Trp-Met-OMe (Xl), полученного в примере 1, стади  11, и по способу примера 1 стадии 6 однако, использу 

0

5

0

.,

в качестве элюента систему :МеОН:Н,,0 86; 14:1 во врем  хроматографической очистки, получают 2,73 г (выход 75%) соединени  XIV из AcOEt: т.пл. 154°С; (ct) - -92, (с 1, МеОН) 0,34; Е ,,г 0.58 Glu.

Пример 3. Получение НС1 Н- Val-Pro-Pro-Leu-Gly-Trp-Mel-NH i XV).

5,00 г (4,28 ммоль) BOC-Val-Pro- Pro-Leu-Gly-Trp-Met-OMe (XI ), полученного в примере 1 на стадии 11, раствор ют в растворе 100 мл метанола и 2 мл этиленгликол , и насыщают аммиаком при О С. Реакционную смесь вьщерживают в холодильнике в течение 3 дней, а затем избыток аммиака и растворитель удал ют в вакууме. Неочищенный продукт частично очищают на хроматографической колонке с сили- кагелем (Мегск) 0,040-0,063 мм, элюиру  смесью АсОЕ:МеОН 87:13 и использу  на следующей стадии без 5 очистки (получают 2,58 г соединени  IX и изо-РгОН/изо-Рг,,0):Е,. 0,.31. Стади  2. H-Val-Pro-Pro-Leu-Gly-Trp- Met-NH, HCl (XVI).

30 Исход  из 2,45 г (2,73 ммоль) вое-V al-Pro-Pro-Leu-Gly-Trp-Met-NH (XV) и по способу .примера 1 стадии 6, однако, использу  в качестве элюен- тов системы :Ме-ОН:Н2.0 85:

gg :15:1 по объему и , :МеОН:Н О - 80:20:1 по объему при хроматографической очистке, получают 1,55 г (выход 68%) соединени  XVI из МеОН (изо-РгОН)изо-Рг20 после удалени 

40 солей на Sephadex G10 (торгова  марка ): т.пл. 150-158 G. (о)

1 it о

т.пл. -74,8° (с 1, МеОН) R. 0,36;

Е.г

кие

50

- 0 ,55 Glu. Проведены биологичес- испытани  описываемых гептапепти- 4g дов. Описываемые гептапептиды демонстрируют интересную активность промо- тировани  роста животныхj определенную в тестовых системах in vivo - in vitro по синтезу протеина тканью печени и по завис щим от дозы привесу и эффективности корма после подкожного и орального введени .

Тест по синтезу протеина in vivo - in vitro.

Тест по росту проводили в течение 4 недель, использу  группы по 6 самцов крыс (Wistar, Hagemann, Exter- tal), разделенные на подгруппы по 3 животных, которых содержали в клет55

71

ках Макролона с древесными опилками в качестве подстилки. Вода и корм (стандартный рацион Altromin 1321, содержащий 19% неочищенного протеина ) ;a(i Libitim.

Пептиды общей формулы вводили в растворе подкожно ежедневно в дозах 10,50 и 100 нг/кг, использу  в качестве разбавител  нормальный физиоло- гический раствор (исход  из начального раствора 100 нг/мл).

Получение образцов тканей. Гомогенизируют 3 г печени в 9 мл буферного сахарозного раствора ТКМ, охлажденно го на льду в гомогенизаторе Поттера со скоростью 600 об/мин в течение 2 мин, центрифугируют при 4- С в ультрацентрифуге при 1OOOOg в течение 20 мин, дека11тируют надосадочную жидкость сок микросомных клеток.

Рабоча  процедура. После подсчета содержани  протеина в соке микросомных клеток с помощью биуретического метода, концентрацию протеина довод  с помош;ью ТКМ буфера до 1 мг/мл. После этого провод т разбавление би- дистиллированной водой до 0,25 мг протеина на мл сока микросомных клеток .

Добавл ют последовательные порции 0,15 мл реакционной среды и 0,05 мл (50 мкг) раствора пируваткиназы, а также 0,1 мл С смеси аминокислот ( I мк Кюри).. Получают объемы по 1 мл инкубируемой смеси.

После инкубировани  в течение 35 мин при 37°С в вод ной бане получают осаждение протеина за счет добавлени  2 мл трихлоруксусной кисло- ты (10%). Осадок промывают, добавл   несколько раз трихлоруксусную кислоту , затем центрифугируют (3600 г/мин до тех -пор, пока в надосадочной жидкости не остаетс  следов радиоактив- ности.

Остаток раствор ют в 1,0 мл Ьг па- solve и оставл ют в течение ночи при 37 С до тех пор, пока он не становитс  прозрачным. Изменени  провод т на PRIAS жидкостном сцинтилл ционном счетчике PL (1,0 + 5 мл сцинтилл ци- онной жидкости).

Результаты измерений скорости синтеза белка в ткан х печени мужски особей крыс после обработки в течение 4 недель и данные по токсичности (ежедневные подкожные инъекции) приведены в табл.1.

4

Контрольна  группа. У тех крыс,которым подкожно вводили физиологический солевой раствор по сравнению с необработанной контрольной группой, наблюдалось снижение активности синтеза протеина пор дка 13,6%. Предлагаемые гептапептиды значительно ускор ют скорость синтеза белка в печени рыс. При введении их крысам в дозе 10 нг/кг скорость синтеза белка 29,4 и 36,1%, в то врем  как известое соединение ускор ет синтез белка на 17,3%.

Тест по росту свиней. Тест по привесу проводили в течение 4 недель, спользу  группы из 7 кастрированных самцов свиней (Грибриды), разделенных на подгруппы и содержащиес  в загонах с плоскими настилами. Свинь м в течение всего эксперимента давали корм в количестве 1 кг в день (Hoveler, нормального типа, без добавок), воду в неограниченном количестве. Привес учитывали ежедневно. Результаты эксперимента приведены в табл.2.

Ежедневные инъекции физиологического солевого раствора вызывают сниение привеса по сравнению с необработанными животными. Несмотр  на такое снижение привеса, вызванное стрессом при инъекци х, те животные которым ежедневно вводили ТК-7, дали отчетливый привес. Эффективность усвоени  пищи отражает результаты привеса. ормула изобретени 

Способ получени  производных хлор- гидрата гептапептида формулы

H-Val-Pro-Pro.-I.eii-Gly-Trp-Met-Y- НС1,

где Y - ОН, ОСН,, отличающийс  тем, что трипептид формулы

Boc-Val-Pro-Pro ОН, активированный этилхлорформиатом, ввод т во взаимодействие с метиловым эфиром хлоргидрата тетрапептида формулы

Leu-Gly-Trp-Met ОСИ jНС1

в тетрагидрофуране в присутствии N- метилморфолина при в течение

1ч, а затем при в течение

2ч и полученный продукт формулы

. -.

Boc-Val-Pro-Pro-Leu-Gly-Trp- -Met OCHj

91342424 °

в случае необходимости омыл ют обра- кой хлористым водородом в при- боткой едким натром в метаноле и да- сутствин анизола и 2 - меркап- блокируют защищенньш пептид обработ- тоэтанола.

Таблица 1

10

50

100

10

50

100

10 50

100

а 

11958

10336

Начальный вес, кг

-13,6

Таблиц а 2

12,5 14,8

11,7

Составитель В.Волкова Редактор 10.Середа Техред И.Попович

Заказ 4447/58 Тираж 347Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушска  наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предпри тие, г.Ужгород, ул.Проектна ,4

Корректор Н. Король

Claims (2)

1. Формула изобретения

   Способ получения производных хлоргидрата гептапептида формулы

   H-Val-Pro-PrO’-j.eu-Gly-Trp-Met-Y’ НС1, где Y - ОН, ОСН_?,. отличающийся тем, что трипептид формулы

   Boc-Val-Pro-Pro ОН, активированный этилхлорформиатом, вводят во взаимодействие с метиловым эфиром хлоргидрата тетрапептида формулы

   Leu-Gly-Trp-Met ОСН _э·НС1 в тетрагидрофуране в присутствии Nметилморфолина при -12°С в течение

   1 ч, а затем при 0-15°C в течение
2. 2 ч и полученный продукт формулы Boc-Val-Pro-Pro-Leu-Gly-Trp-

   -Met ОСНJ в случае необходимости омыляют обработкой едким натром в метаноле и деблокируют защищенный пептид обработ1342424 кой хлористым водородом в присутствии анизола й 2 - меркаптоэтанола.

   Таблица 1 Обработка соединением по примерам Дозировка нг/кг УВМ (удары в минуту) Δ, % Контрольная необ₇ работанная Группа крыс обработанная Подострая токсичность 1 10 14072 + 17,7 + 36,1 Нет эффекта (ТК7) 50 15093 . +26,2 +46,0 Уровень 100 16180 +35,3 +56,5 100 нг/кг 2 10 13377 + 11,9 +29,4 — ^п — . (ТК7 D) 50 14280 + 19,4 +38,2 __ η _ 100 16866 +41,0 +63,2 — ” — Пир-Про-Трп- Мет-NH^ для 10 12106 + 1,2 + 17,3 __ п _ _ И _ сравнения 50 8425 -29,5 -18,5 100 8540 -29,6 -17,4 _ И —

   Необработанная контрольная

   группа — 11958 — Обработанная контрольная группа - 10336 -13,6 - -

   Таблица 2

   Показатели Группа животных 1 2 ) 3

   Количество животных 2 2 3

   Обработка соединением NaCl физиолог. ТК-7 (по примеру 1) Доза 0,1 мл/кг веса . .50 нг/кг веса Начальный вес, кг 12,5 1'4,8 И,7

   1 I

   I 2

   Продолжение табл.2

   Показатели Группа животных ] * 1 3 Вес, кг, через 1 неделю 14,0 16,3 15,2 2 16,0 18,5 17,8 3 19,3 20,5 20,7 Привес, кг 6,8 5,7 9,0 % 54,4 38,5 76,9 д% к контролю -16,2 +32,4 Расход пищи, кг 21 21 21 Эффективность корма, 3,09 3,68 2,33 А % к контрольной группе + 19,1 -24,6

   Составитель В,Волкова