SK7882002A3 - Use of a buffer to prevent candida albicans infections on the skin - Google Patents

Description

Použitie tlmivého roztoku na prevenciu infekcií Candida albicans na koži

Oblasť techniky

Predložená prihláška sa týka použitia látky schopnej tlmiť pH v rozmedzí 2,0 - 5,5 na prípravu výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu na prevenciu podráždení a lézií kože spôsobených mikroorganizmom Candida albicans. Príkladmi takých výrobkov sú absorpčné výrobky, napríklad plienky a hygienické vložky, obväzy rán ako ovínadlá, chirurgické pásy a sadry, rukavice, protézy a zavedené katétre.

Doterajší stav techniky

Infekcie spôsobené mikroorganizmom Candida albicans môžu predstavovať závažný problém v spojení s používaním pokožku pokrývajúcich, sliznicu pokrývajúcich a absorpčných výrobkov ako plienky, intímky, vložky a obväzy. Zistilo sa, že Candida albicans koreluje so závažnosťou plienkovej dermatitídy (Benjamín L, Pediatrician 1987, suppl. 1, s. 21 - 26). Sú autori, ktorí mikroorganizmu C. Albicans pripisujú primárnu kauzatívnu úlohu pri niektorých prejavoch plienkovej dermatitídy (Leyden J. a Kligman A. M., Árch. Dermatol. 1978, zv. 114, s. 56 - 59).

Zdá sa, že pH je významným zdrojom zmätku a protirečení v kontexte ekológie mikroorganizmu Candida. Nositeľstvo mikroorganizmu Candida in vivo sa môže vyskytovať veľmi ľahko v širokom rozmedzí pH. pH môže byť významným faktorom v patologickom stave C. albicans in vivo, ale nevykazuje svoj vplyv postihovaním rastu huby, t.j. rýchlosti narastania jej biomasy (Odds FC, Candida and Candidosis. A review and bibliography. 2^nd vyd. 1988, Bailliere Tindall). Udáva sa, že dimorfizmus, schopnosť C. albicans existovať v blastospórovej a filamentárnej forme, je ovplyvňovaný pH (Buffo et al., Mycopathologia, zv. 85 (1984), s. 21-30; Odds (1988), supra). Pre blastospórovú formu je priaznivé mierne kyslé pH a pre filamentóznu formu neutrálne pH alebo vyššie.

Navyše sa ukázalo, že mikrofilamenty hrajú dôležitú úlohu počas morfologického prechodu regulovaného pomocou pH (Yokoyama et al., Microbiology, zv. 140 (1994), s. 281-287). Boli publikované klinické pozorovania diabetických pacientov, kde je vyššie pH povrchu pokožky možno korelované s kvasinkovým zápalom (Yosipovitch et al., Diabetes Čare, zv. 16 (1993), s. 560-563). Ako už bolo uvedené, často existuje riziko infekcií, podráždení a lézií kože pri zakrývaní pokožky alebo slizníc absorpčnými výrobkami, obväzmi, sadrami, rukavicami, protézami a podobnými výrobkami. WO 98/57677 a EP 0 202 126 uvádzajú, že neutrálne alebo mierne alkalické pH v spojení s používaním absorpčných výrobkov môže viesť k podráždeniu kože a problémom so zapáchajúcimi látkami. Podľa dokumentov sú tieto problémy spôsobené lipázami a proteinázami prítomnými na pokožke a tieto problémy možno potlačiť znížením pH absorpčného výrobku. Dokumenty neposkytujú žiadnu konkrétnu informáciu o problémoch spôsobovaných mikroorganizmami Candida, alebo ako znížiť virulenciu mikroorganizmu Candida albicans.

Podstata vynálezu

Teraz sa ukázalo, že virulenčnú schopnosť mikroorganizmu Candida albicans možno podstatne narušiť znížením pH výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu na hodnotu v rozmedzí od 2,0 do 5,5. Takto sa výrobok pokrývajúci pokožku alebo sliznicu, napríklad absorpčný výrobok (plienka, vložka, intímka alebo obväz, napríklad ovínadlo), sadra, chirurgický pás, pričom tento výrobok obsahuje farmaceutický prijateľnú netoxickú a nedráždivú látku schopnú tlmiť pH v rozmedzí 2;0 - 5,5, používa na prevenciu podráždení a lézií kože spôsobených mikroorganizmom Candida albicans.

Podrobný opis vynálezu

V súlade s uvedeným sa predložený vynález týka použitia látky schopnej tlmiť pH v rozmedzí pH 2,0 - 5,5 na prípravu výrobku pokrývajúceho pokožku na prevenciu podráždení a lézií kože spôsobených mikroorganizmom Candida albicans. Možno použiť akúkoľvek farmaceutický prijateľnú, netoxickú a ne3 dráždivú látku schopnú tlmiť pH v uvedenom rozmedzí. Príkladmi vhodných tlmiacich látok sú superabsorpčné častice vykazujúce úroveň neutralizácie v rozmedzí 20 - 50 % a farmaceutický prijateľné, netoxické a nedráždivé tlmivé roztoky, napríklad tlmivé roztoky organických solí, napríklad acetátový tlmivý roztok alebo citrátový tlmivý roztok. Tlmivý roztok môže byť priamo pridaný do výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu. Alternatívne možno pridať farmaceutický prijateľný gél obsahujúci tlmivý roztok. Medzi príklady vhodných gélov patria gély bežne používané na farmaceutické účely, napríklad agaróza.

Kyslá tlmivá látka podľa predloženého vynálezu sa pridáva do výrobku pokrývajúceho pokožku. V tu používanom význame „výrobok pokrývajúci pokožku“ alebo „výrobok pokrývajúci sliznicu“ sa vzťahuje na výrobok, ktorý je určený na zakrytie pokožky alebo sliznice človeka. Výrobok pokrývajúci pokožku alebo výrobok pokrývajúci sliznicu podľa predloženého vynálezu môže byť absorpčný výrobok, napríklad plienka, hygienická vložka, intímka alebo obväz na ranu, chirurgický pás, sadra, rukavice, protézy alebo zavedené katétre. Pre vynález nie je dôležité, ako sa pridá kyselinová tlmivá látka, a v súlade s uvedeným ju možno do výrobku pokrývajúceho pokožku pridať mnohými rôznymi spôsobmi. Príkladmi vhodných spôsobov na pridanie kyselinovej tlmivej látky do výrobku pokrývajúceho pokožku sú podanie roztoku obsahujúceho kyselinovú tlmiacu látku alebo podanie tejto látky vo forme prášku alebo gélu. Toto podanie možno uskutočniť ,v spojení s výrobou uvedeného výrobku alebo po vyrobení tohto výrobku.

V tu používanom význame sa pojem „farmaceutický prijateľný fungicídny prostriedok“ vzťahuje na zlúčeniny bežne používané na liečbu infekcií mikroorganizmom Candida, napríklad deriváty imidazolu, nystatín a ciclopirox olamine. Tieto zlúčeniny sa pridávajú do výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu v množstvách zodpovedajúcich bežným terapeutickým dávkam.

i

Prehľad obrázkov na výkresoch

Predložený vynález bude teraz opísaný s odkazom na pripojené výkresy a tabuľky, kde:

Obrázok 1 predstavuje príklad plienky, do ktorej možno pridať kyselinovú tlmiacu látku podľa vynálezu;

Obrázok 2 uvádza prirodzenú distribúciu pH povrchu pokožky na predlaktí zo strany dlane u 15 žien. Pozorovania sú stredné hodnoty ľavej a pravej ruky;

Obrázok 3 predstavuje diagram vývoja pH miesta náplasti pred, počas a po použití náplasti tlmenej kyselinovou tlmiacou látkou a bežnej referenčnej náplasti;

Tabuľka I prezentuje výsledky vizuálneho hodnotenia reakcie kože na infekciu mikroorganizmom Candida albicans', a

Tabuľka II ukazuje rast Candida albicans 24 hodín po naočkovaní.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Plienka 100 zobrazená na obrázku 1 pozostáva z vonkajšej vrstvy _L priepustnej pre tekutiny, napríklad vyrobenej z vláknitej textílie alebo perforovaného plastového filmu, vonkajšej vrstvy 2 nepriepustnej pre tekutiny, napríklad vyrobenej z plastového filmu alebo hydrofóbnej vláknitej textílie, a nakoniec z absorpčného telesa 3. uzavretého medzi vonkajšími vrstvami 1, 2.

Plienka má obaliť dolnú časť trupu nositeľa ako absorpčné nohavičky. Je preto konštruovaná s dvoma koncovými časťami 4, 5 ako aj s užšou rozkrokovou časťou 6 medzi koncovými časťami, ktorá má byť pri používaní plienky umiestnená v rozkroku nositeľa medzi nohami. Aby sa dosiahol požadovaný tvar nohavičiek, pri zadnom pásovom okraji 8 sú umiestnené lepiace krídelká 7. Pri použití sa lepiace krídelká upevnia na prednú časť 5 plienky, blízko pri prednom pásovom okraji 9, aby plienka držala okolo pása nositeľa.

Plienka podľa obrázka 1 navyše zahŕňa predpätý elastický prostriedok 10, ktorý môže pozostávať z elastických šnúr, elastických vláken, elastickej peny alebo iného vhodného materiálu. Elastický prostriedok 10 je kvôli jednoduchosti zobrazený v natiahnutom stave. Len Čo sa však natiahnutie skončí, stiahnu sa a vytvoria v plienke elastické pásy.

Absorpčné teleso 3 v príklade zobrazenom na obrázku 1 je tvorené dvoma vrstvami 11, 12, hornou, tekutiny prijímajúcou vrstvou 11 a dolnou vrstvou 12, ktorá rozptyľuje a distribuuje tekutinu. Horná vrstva prijímajúca tekutiny musí byť schopná rýchlo prijať veľké množstvo tekutiny v priebehu krátkeho času, t.j. mať vyššiu schopnosť okamžitého príjmu tekutiny, ale dolná vrstva 12 uchovávania a distribúcie musí mať vysokú schopnosť distribúcie kvapalín a musí byť schopná vysať tekutinu z prijímajúcej vrstvy 11 a distribuovať túto tekutinu vo vrstve 12 uchovávania a distribúcie. Rozdiely medzi vrstvami 11, 12 možno dosiahnuť rozdielmi hustoty. Komprimovanejšia vláknitá štruktúra distribuuje tekutinu lepšie ako zodpovedajúca vláknitá štruktúra s nižšou hustotou. Taká nízkohustotná štruktúra má vyššiu schopnosť okamžitej absorpcie kvapalín a nižšiu distribučnú schopnosť v dôsledku väčšej veľkosti pórov. Rôzne absorpčné schopnosti možno dosiahnuť aj použitím rôznych vláknitých štruktúr s rôznymi charakteristikami. Chemicky vyrobená celulózová drvina takto vykazuje lepšie distribučné charakteristiky v porovnaní napríklad s mechanicky alebo chemicko-mechanicky vyrobenou celulózou, napríklad chemicko-termomechanickou celulózou (CTMP). Vláknitá štruktúra, obsahujúca chemicky spevnené celulózové vlákna, vykazuje vyššiu schopnosť okamžitej absorpcie kvapalín, ale nižšiu distribučnú schopnosť v porovnaní s konvenčnou chemickou celulózou. Ďalšími materiálmi vhodnými ako prijímajúce vrstvy 11 môžu byť vata z prírodných vláken alebo našuchorený netkaný materiál.

Čiastočne neutralizovaný superabsorbent sa primieša do hornej vrstvy 11 prijímajúcej tekutiny absorpčného telesa 3.. Tento superabsorbent pôsobí ako kyselinová tlmiaca látka podľa predloženého vynálezu.

Konvenčný superabsorbent sa primieša do dolnej vrstvy 12 uchovávajúcej a distribuujúcej tekutiny absorpčného telesa. Je výhodné dať konvenčný superabsorbent do dolnej vrstvy 12 uchovávajúcej tekutiny, pretože konvenčný superabsorbent má vyššiu celkovú absorpčnú kapacitu v porovnaní s čiastočne neutralizovaným a pH regulujúcim superabsorbentom.

Vynález prirodzene pokrýva aj iné uskutočnenia absorpčného telesa. Absorpčné teleso môže obsahovať čiastočne neutrálizované superabsorbenty aj konvenčné superabsorbenty a oba superabsorbenty môžu byť rovnako distribuované v hornej a dolnej absorpčnej vrstve. Navyše s výnimkou celulózovej drviny možno použiť aj iba jeden druh superabsorpčného materiálu. V tom prípade superabsorpčný materiál pôsobí aj ako látka regulujúca pH podľa predloženého vynálezu.

Experimentálna práca

Uskutočnila sa štúdia, aby sa určilo, či rôzne environmentálne pH ovplyvňuje infekcie Candida na koži. Zúčastnilo sa pätnásť žien, zdravých dobrovoľníčok medzi 30 a 63 rokmi veku (priemer 44,5). Použili sa nasledujúce rutinné postupy a materiály:

Experimentálne náplasti boli vyrobené z bežných plienkových materiálov a vyrazené ako kruhové disky s priemerom 70 mm. Vonkajšia strana z polyetylénu a vnútorná strana (ktorá bude umiestnená smerom k pokožke) z netkaného polypropylénu boli spolu zlepené 10 mm okrajom pozdĺž vnútorného kruhového jadra s priemerom 50 mm. Vnútorné jadro pozostávalo z približne 0,85 g celulózy a približne 0,15 g superabsorpčného polyméru (IM 7100 a E 127/97, Clairant GmbH, DE). Superabsorpčným polymérom bola kyselina polyakrylová, ktorá bola upravená buď na pH 4,5 alebo 6,0. Pôsobí ako silný tlmiaci systém. 10⁴ buniek na ml C. albicans sa suspendovalo vo fyziologickom roztoku. 7 ml tohto roztoku sa pridalo na každú náplasť 15 minút pred ich prilepením na predlaktia.

pH povrchu pokožky sa meralo prístrojom Courage+Khazaka PH900 s plochou elektródou Mettler-Toledo 304. Každé ráno a popoludnie sa prístroj kalibroval na pH 4,0 a 7,0. Presnosť prístroja je 0,1 jednotky. Na elektródu sa

Ί pred meraním pridalo niekoľko kvapiek deionizovanej vody a zaznamenal sa priemer troch hodnôt.

Použitým kmeňom C. albicans bol typ H29, ktorý láskavo poskytol profesor Lars Edebo, Katedra mikrobiológie, Univerzitná nemocnica Sahlgrenska, Goteborg, SE. Bunky sa kultivovali na Sabouraudovom glukózovom agare pri 37 °C 24 hodín pred použitím.

Na vyhodnotenie rezidentnej kožnej mikroflóry a pridanej C. albicans sa použila modifikácia Williamson-Kligmanovej sterovej techniky. Použil sa krúžok z nehrdzavejúcej ocele s vnútorným priemerom 2,6 cm a pokrývajúci plochu pokožky 5,5 cm². Jeden milimeter sterilného 0,075 M fosfátového tlmivého roztoku (pH 7,9) obsahujúceho 0,1 % Triton X-100 sa nalial do krúžku a pokožka sa jemne šúchala tupou sterilnou sklenenou tyčinkou jednu minútu a tekutina sa odstránila Pasteurovou pipetou (Faergemann J. Mapping the Fungi of the Skin. Handbook of Non-invasive Methods and the Skin, kapitola 10.2, CRC Press, 1995). Sériové zriedenia sa uskutočnili v PBS a vzorky zriedení sa naplatničkovali. Platničky sa inkubovali pri 37 °C a odčítali sa po 48 hodinách.

Párový t test sa použil na testovanie štatistickej významnosti medzi rozdielmi pH a rozdielmi v počte organizmov Candida. Rozdiely v pozorovaných kožných léziách sa testovali znamienkovým testom.

Na začiatku štúdie sa určila kožná mikroflóra pomocou sterového testu. Všetky subjekty mali koagulázovo negatívne Staphylococci (rozmedzie 170 25 000 kolónie tvoriacich jednotiek (KTJ)). Dva zo subjektov mali Diphteroid sp. (rozmedzie 50 - 2 400 KTJ). Štyri subjekty mali Bacillus sp. (rozmedzie 10 - 1 200 KTJ). Jeden subjekt mal S. aureus na jednej ruke (10 KTJ).

Množstvá sú uvedené v kolónie tvoriacich jednotkách na 5,5 cm pokožky. U žiadneho subjektu sa pred štúdiou nezistil žiadny rast C. albicans.

Na začiatku sa zmeralo pH povrchu pokožky 15 dobrovoľníčok a zistilo sa, že sa pohybuje od 4,5 do 6,0. Stredná hodnota bola 5,2. Výsledky sú uvedené na obrázku 2.

Náplasti nasýtené suspenziou Candida (10⁴ buniek/ml) sa nalepili na predlaktia dobrovoľníčok. Náplasti mali dve rôzne hodnoty pH a náhodne sa umiestnili na buď ľavú alebo pravú ruku. Náplasti sa nosili pri prísnom zakrytí 24 hodín. Náplasti sa odstránili a po približne 2 minútach sa zmerali hodnoty pH pokožky. Keď sa náplasti odstránili po 24 hodinách pokrytia, pH bolo 5,1 +/- 0,18 a 5,7 +/- 0,29 (stredná hodnota +/- SD) na dvoch príslušných miestach. Rozdiel je štatisticky signifikantný pri p < 0,0001. Pokožka sa vizuálne vyšetrila a odobrali sa vzorky, aby sa určil počet KTJ mikroorganizmu Candida na ploche 5,5 cm². Sumarizované výsledky sú uvedené v tabuľke II. Medzi „kyslým“ miestom a referenčným miestom sa nezistil žiadny štatisticky signifikantný rozdiel (P = 0,64). Rast sa zistil na oboch rukách u 13 subjektov. U jedného subjektu sa rast zistil len na „kyslom“ mieste a u jedného subjektu len na referenčnom mieste.

Po 48 hodinách sa meranie pH ako aj odber vzoriek mikroorganizmu Candida zopakovali. Výsledky meraní pH sú uvedené na obrázku 3. Výsledky odberu vzoriek mikroorganizmu Candida po 48 hodinách, t.j. 24 hodín po odstránení náplastí a keď boli lézie vizuálne evidentné, ukazujú, že 9 subjektov nemalo vôbec žiadny rast C. albicans. Tri subjekty vykazovali nízke počty (10 130 KTJ) a jeden subjekt mal zvýšený rast od predchádzajúceho dňa (1 400 a 4 300 KTJ na každej ruke). Dva subjekty pri tejto príležitosti chýbali a vzhľadom na to nebolo možné získať žiadne mikrobiálne dáta.

Kožné lézie sa vizuálne vyhodnotili. Žiadna reakcia = 0; slabá reakcia = 1; evidentná reakcia = 2; silná reakcia = 3. Odčítanie výsledkov bolo anonymné a typ náplasti bol hodnotiteľovi neznámy. Kožné reakcie boli zaznamenané aj na fotografiách. Toto vizuálne hodnotenie kožných reakcií dalo veľmi jasný výsledok. Kyslé miesto malo menej závažné reakcie ako referenčné miesto u všetkých 14 subjektov, ktoré reagovali. Znamienkový test vykazuje štatisticky signifikantný rozdiel pri p < 0,001 pre rozdiel v reakcii na dvoch miestach. Podrobný výsledok je prezentovaný v tabuľke I.

Ukázalo sa teda, že rozdiely indukované pomocou pH nie sú spôsobené inhibovaným rastom Candida albicans. Sú pravdepodobne spôsobené vplyvom pH na virulenčnú schopnosť huby a/alebo zlepšenia obranyschopnosti hostiteľa.

Claims (7)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použitie farmaceutický prijateľnej, netoxickej a nedráždivej látky schopnej tlmiť pH v rozmedzí 2,0 - 5,5 na prípravu výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu na prevenciu podráždení a lézií kože spôsobených mikroorganizmom Candida albicans.
2. 2. Použitie farmaceutický prijateľnej, netoxickej a nedráždivej látky schopnej tlmiť pH v rozmedzí 2,0 - 5,5 spolu s farmaceutický prijateľným fungicídnym prostriedkom, ako je napríklad derivát imidazolu, nystatín a ciclopirox olamine, na prípravu výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu na prevenciu podráždení a lézií kože spôsobených mikroorganizmom Candida albicans.
3. 3. Použitie podľa nároku 1 alebo nároku 2, vyznačujúce sa tým, že farmaceutický prijateľnou, netoxickou a nedráždivou tlmivou látkou je čiastočne neutralizovaný superabsorbent.
4. 4. Použitie podľa nároku 1 alebo nároku 2, vyznačujúce sa tým, že farmaceutický prijateľnou, netoxickou a nedráždivou tlmivou látkou je tlmivý roztok soli organickej kyseliny.
5. 5. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4 na prípravu výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu, ktorý je absorpčným výrobkom, ako je napríklad plienka, hygienická vložka alebo intímka.
6. 6. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4 na prípravu výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu, ktorý je obväzom na rany, sadrou, chirurgickým pásom alebo podobným výrobkom.

   I

   I
7. 7. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4 na prípravu výrobku pokrývajúceho pokožku alebo sliznicu, ktorý je rukavicou, protézou alebo zavedeným katétrom.