SK68797A3 - Method and device for separating fibrin monomer from blood plasma - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka spôsobu oddeľovania zložiek, ako je monomér fibrínu z plazmy s tým, že spôsob zahrňuje zavedenie plazmy do druhej nádobky definovanej stenou, kde sa dosiahne oddelenie frakcie s nezosieťovaným fibrínovým polymérom za pridania vhodného enzýmu.

Doterajší stav techniky

Patentový spis EP-PS 592 242 popisuje postupy a kompozície pre celkom nové fibrínové zložky zahrňujúce dotyk kompozície s obsahom fibrínového monoméru na určitom mieste a prevedenie tohto monoméru na fibrínový polymér súbežne so stupňom dotyku. Výraz fibrín, ako sa tu používa, zahrňuje fibrín I, fibrín II a/alebo des-BB-fibrín.

Z EP 0 654 669 sú známe ďalšie postupy a zariadenie na oddeľovanie niektorých zložiek, ako je monomérny fibrín, z krvi. Takéto postupy oddeľovania zložiek z kvapaliny, obsahujúcej niekoľko zložiek s rôznymi špecifickými hmotnosťami zahrňuje stupne, kedy sa krv zhromaždí v prvom priestore celého zariadenia s tým, že uvedený priestor je charakterizovaný v podstate axiálne symetrickou vonkajšou a vnútornou stenou. Krv sa odstreďuje rotáciou celého zariadenia okolo osi symetrie priestoru, takže sa ustanoví medzi zložkami krvi koncentrický medzipovrch. Najmenej jedna zo zložiek krvi, ako je plazma, sa potom prevedie do druhého priestoru celého zariadenia, s výhodou za zníženia objemu v porovnaní s prvým priestorom počas pokračujúceho odstreďovania v celom zariadení. V prvom priestore je v podstate axiálne symetrická vnútorná stena, čím sa zaisťuje, že všetka krv je vystavená odstredivej rotácii, čo je nutné pre oddelenie. Polomer tejto vnútornej steny sa upraví podľa požadovanej rotačnej rýchlosti tak, aby vo všetkých miestach priestoru bola zaistená dostatočná odstredivá sila na dosiahnutie koncentrického delenia.

V druhom priestore sa oddelí z plazmy nezosieťovaný fibrínový polymér pomocou vhodného enzýmu, následne sa rozpustí vo fibrínovom monoméri a prevedie sa filtrom do ďalšej rúrky za zníženia objemu druhého priestoru.

Ukázalo sa však, že oddeľovanie zložky, ako je monomérny fibrín z krvi iba filtráciou v zariadení, ako to bolo vyššie popísané, je spojené s neuspokojivými výsledkami. Je to dané skutočnosťou, že je neľahké zaistiť dostatočne oddeľovanie frakcie s obsahom monomérneho fibrínu v druhom priestore a v zhode s tým sa stratí pomerne vysoký podiel obsahu fibrínu v krvi počas prevodu kvapalnej frakcie z druhého priestoru do prvého počas následných stupňov postupu.

Tiež pri skorších postupoch, týkajúcich sa monomérneho fibrínu, bola výsledkom vyššie popísaného spôsobu úpravy fibrinogénu v plazme za použitia vhodného enzýmu hustá gelová hmota nezosieťovaného fibrínového polyméru, ktorá sa hromadila na dne druhého priestoru. Na získanie žiaduceho roztoku monomérneho fibrínu boli potrebné podstatné množstvá znova rozpusteného pufra v spojení s mohutným miešaním. S tým bolo spojených niekoľko nedostatkov. Takže za prvé výhodné spôsoby pre prípravu monomérneho fibrínu, napríklad na použitie ako fibrínové tesnidlo, pozri EP 592 242, vyžadujú koncentrované roztoky monomérneho fibrínu a veľké množstvo rozpúšťacieho pufra alebo rozpúšťadla, nutné na rozpustenie gelovej hmoty, vedú k zriedeným roztokom, s ktorými sa nepracuje už tak dobre. Ďalej potom mohutné miešanie, nevyhnutné na rozpustenie gelovej hmoty v roztoku monomérneho fibrínu, môže spôsobiť škody na celom zariadení a môže poškodiť fibrín ako taký.

Podstata vynálezu

Úlohou tohto vynálezu je vytvoriť spôsob, dovoľujúci zlepšené oddeľovanie zložiek, ako je práve monomérny fibrín, z krvi.

Vynález sa týka spôsobu, zaisťujúceho oddelenie nezosieťovaného fibrínového polyméru z frakcií plazmy vo valcovitej nádobe, pričom k takémuto oddeľovaniu dochádza počas odstreďovania, kedy sa nezosieťovaný fibrínový polymér ukladá na vonkajšiu stenu nádoby, načo sa zvyšná kvapalná frakcia, ako sa nachádza vo valci, sa z valca vypustí, a táto frakcia s nezosieťovaným fibrínovým polymérom, ktorá zostala vo valci v podstate nanesená na stenách, sa rozpustí pridaním rozpúšťadla alebo odstredivým miešaním.

Pretože sa reakcia plazmy s enzýmom vykonáva za stáleho odstreďovania, potom odstredivá sila pôsobí na vznikajúci nezosieťovaný fibrínový polymér tak, že sa vyzráža vo forme tenkého gelového filmu, ktorý v podstate priľnie na obvodových stenách nádoby. Zvyšná kvapalná plazma sa v kvapalnej forme ukladá na dno nádoby, ak sa preruší odstreďovanie a môže sa potom odstrániť akýmkoľvek spôsobom. Roztok žiadaného fibrínového monoméru sa potom získa vpustením vhodného rozpúšťajúceho roztoku pufra do nádobky a pufor sa vystaví v nádobke, pokrytej gélom, účinkom odstredivého miešania. V porovnaní s predchádzajúcimi spôsobmi má tento postup rad výhod. Tak za prvé opätovné rozpustenie nezosieťovaného gélu roztokom pufra je mimoriadne účinné, čo je čiastočne dané veľkou povrchovou plochou toho istého objemu fibrínového gélu v porovnaní s hmotou fibrínového gélu, ako vznikala pri predchádzajúcich postupoch. V zhode s tým možno gel rozpustiť v malých množstvách rozpúšťacieho pufra a výsledkom je požadovaný koncentrovaný roztok monomérneho fibrínu. Ďalej potom pôsobenie odstredivého miešania roztoku pufra vo vnútri nádoby, pokrytej gélom, je pomerne jemným spôsobom, kedy nedochádza k poškodeniu ani zariadenia, ani k znehodnoteniu monomérneho fibrínu ako produktu. Takto získaná vysoká koncentrácia roztoku monomérneho fibrínu sa pohybuje v rozmedzí 10 až 30 mg monomérneho fibrínu na ml roztoku, s výhodou potom je asi 25 mg/ml.

Vynález tiež zahrňuje spôsob, spočívajúci v prívode krvi, s výhodou za prítomnosti antikoagulačnej látky, do prvej guľatej nádobky zariadenia, kde guľatou nádobkou sa myslí zariadenie s valcovitou vonkajšou stenou a valcovitou vnútornou stenou, pričom obidve tieto steny vyčnievajú koaxiálne okolo spoločnej osi, ako i stropným a dnovým uzatvorením, pričom stropná stena alebo dnová stena je predstavovaná telom piestu, pohyblivým v prvej nádobke s tým, že postup ďalej zahrňuje odstreďovanie v zariadení okolo udanej spoločnej osi, čím sa krv v podstate rozdelí na frakciu buniek a frakciu plazmy s tým, že sa vzniknutá plazma, resp. zodpovedajúca plazmová reakcia prepraví vplyvom uvedeného tela piestu do druhej nádoby, ktorá je definovaná vonkajšou valcovitou stenou, rozloženou koaxiálne okolo spoločnej osi, čím sa frakcia s nezosieťovaným fibrinovým polymérom oddelí v druhej nádobke za pridania vhodného enzýmu. Podľa tohto vynálezu sa spôsob vyznačuje tým, že frakcia plazmy s obsahom fibrinogénu sa vystaví účinkom enzýmu počas odstreďovania, takže vznikajúci nezosieťovaný fibrínový polymér sa ukladá na valcovitej vonkajšej stene druhej nádobky, zatiaľ čo kvapalná frakcia sa hromadí na dne druhej nádobky a prevedie sa potom účinkom piestu do prvej nádobky s tým, že frakcia s nezosieťovaným fibrinovým polymérom, zostávajúca v druhej nádobke a v podstate usadená na valcovitej stene sa prinúti k rozpusteniu pridaním rozpúšťadla a odstredivým miešaním. Potom možno enzým odstrániť, ak je to žiaduce - a takto pripravený roztok monomérneho fibrínu prepraviť do akéhokoľvek vhodného zásobníka.

V zhode s tým sa pri zhromažďovaní roztoku ľahko udržiavajú aseptické podmienky. Potom, čo bol fibrínový monomér opäť rozpustený, možno ho prepraviť do vhodného zásobníka, ako je injekčná striekačka pre prípadné ďalšie použitie podľa spôsobov, ako boli prv popísané. Pred prepravou sa môže enzým odstrániť akýmkoľvek vhodným spôsobom.

Zariadenie pre delenie zložiek kvapaliny použitím odstreďovania okolo centrálnej osi rotácie obsahuje prvú guľatú nádobku, danú vonkajšou valcovitou a vnútornou valcovitou stenou s tým, že obidve steny sú sústredene prispôsobené okolo osi rotácie a zariadenie obsahuje stropnú stenu a dnovú stenu s tým, že dnová stena je tvorená telom piestu, pohyblivým v prvej nádobke. Zariadenie obsahuje ďalej druhú nádobku spojenú s prvou nádobkou prvým vedením, kým druhá nádobka je definovaná vonkajšou valcovitou stenou, koncentricky usporiadanou okolo osi rotácie, ďalej piestovým telieskom a dnovou stenou, kým druhá nádobka je prispôsobená tak, že môže byť počas odstreďovania umiestnená pod prvú nádobku s tým, že zariadenie obsahuje rovnako prostriedky pre prívod krvi do prvej nádobky, ako i prívodné prostriedky pre kompozície podporujúce oddeľovanie, ako i prostriedky pre spojenie s najmenej jedným zásobničkom pre kvapaliny, kde spojovacími prostriedkami sa myslia tie, ktoré spájajú druhým vedením druhú nádobku. Podľa výhodného vyhotovenia sa piest pohybuje vo vnútornej stene prvej nádobky.

Zariadenie podľa tohto vynálezu pre vykonávanie postupu podľa tohto vynálezu sa vyznačuje tým, že prvé vedenie obsahuje najmenej jeden kanálik medzi otvorom v najvyššej časti steny prvej nádobky a otvorom na dne steny druhej nádobky.

Výsledkom toho je zariadenie, ktoré je vcelku veľmi jednoduché a nezávislé od polohy piestov a zaisťuje tak ľahký a rýchly prevod predmetných frakcií z jednej nádobky do druhej, najmä potom kvapalnej frakcie z druhej nádobky do prvej nádobky po oddelení frakcie, obsahujúcej fibrín I. Potom uvedený jav je daný skutočnosťou, že kvapalina sa automaticky koncentruje na dne druhej nádobky, ak sa zastaví odstreďovanie, odkiaľ sa môže ľahko dostať do prvej nádobky pohybom piestu, napríklad účinkom stlačeného vzduchu v druhej nádobke, čím sa donúti kvapalina k vtoku do prepravného kanálika.

Podľa tohto vynálezu je obzvlášť výhodné, aby kanálik viedol vnútornou alebo vonkajšou stenou obidvoch valcovitých stien v prvej i v druhej nádobke, a výsledkom toho je skutočnosť, že zariadenie je obzvlášť jednoduché a ľahko ovládateľné.

Podľa tohto vynálezu je otvor jedného, či otvory viacerých kanálikov pri dne druhej nádobky s výhodou usporiadané tak, že sú umiestnené centrálne v nádobke, so zreteľom na jej zahĺbenie, tvorené stenou dna. Dôsledkom toho sa kvapalná frakcia ľahko a rýchlo vedie do prívodného otvoru kanálika.

Ďalej potom ešte inak podľa tohto vynálezu môže byť každý kanálik tvorený trubičkou, vedúcou priamo hmotou piestu, ktorá je istená na koncoch hornej steny prvej nádobky a dnom druhej nádobky, kde sa spája s kanálikovými časťami končiacimi v tej-ktorej nádobke.

Podľa tohto vynálezu môže prvá a druhá nádobka v obzvlášť jednoduchom vyhotovení obsahovať vonkajšiu valcovitú stenu tvorenú vonkajším a vnútorným valcom, navzájom pevne spojenými, čím sa vytvorí medzi nimi axiálne orientovaný kanálik a valce môžu byť zakončené na jednom z koncov stenou, obsahujúcou otvor, dovoľujúci pohyb piestu, lepšie tyčinky s vlastným telom piestu s tým, že telo piestu tvorí dno prvej nádobky a oddeľuje prvú nádobku od druhej, kým kanálik siaha od koncovej steny valca k bezprostredne susediacemu otvoru, alebo blízko k nemu z hľadiska tyčinky s vlastným telom piestu.

Spôsob podľa tohto vynálezu, ako je vyššie popisovaný, znamená zlepšený postup pre oddeľovanie a izolovanie jednotlivých zložiek krvi alebo roztoku s obsahom takejto zložky. Ale súčasný postup sa hodí pre akýkoľvek iný, vykonateľný za použitia odstreďovania vo valci, kedy sa na prvý roztok pôsobí katalyzátorom alebo nejakým činidlom počas odstreďovania s tým, že sa medziprodukt žiadanej látky ukladá na stenách odstredivky s tým, že sa tento medziprodukt opäť rozpustí vhodným zodpovedajúcim rozpúšťadlom za prítomnosti miešania odstredivkou s tým, že sa takto dosiahne požadovaná koncentrácia očakávaného produktu v získanom roztoku. Tu popisovaný postup môže tiež zahrňovať odstredivé oddelenie prvého roztoku od iného roztoku, napríklad plazmy z krvi ako celku. Ako ďalšie postupy v súvislosti s krvou, ktoré môžu ťažiť z popisovaného postupu, sú, ale bez akéhokoľvek obmedzovania so zreteľom na izolovanie niektorej zložky krvi, tieto:

plazma bohatá na krvné doštičky, koncentráty krvných doštičiek, kryoprecipitovaný f ibrinogén, ďalšie proteíny v súvislosti s plazmou, ako sú trombín, fibronektín a pod. Krv je s výhodou od jediného darcu a najvýhodnejšia je krv od tej istej osoby, ktorej bol podaný krvný komponent.

Hoci tieto postupy sú popisované tu ďalej v zmysle produkcie roztoku monoméru fibrínu, rozsah vynálezu, ako je to konečne odborníkom jasné, nie je tým akokoľvek obmedzovaný.

Výrazom odstredivé miešanie ako sa tu používa, sa myslí pohyb, ktorým sa ovplyvňuje zavedený roztok rozpúšťajúceho pufra v zariadení s úmyslom rozpustiť medziprodukt ako je nezosieťovaný gel polymérneho fibrínu zo stien vonkajšej nádobky. Takýto pohyb alebo odstredivé miešanie môže znamenať odstreďovanie, ktoré zaistí, aby všetky exponované povrchové plochy s gélom boli vystavené účinkom rozpúšťacieho roztoku a ide predovšetkým o odstreďovanie s nasadením a zastavením rotáciou v tom istom smere a nasadením i zastavením rotáciou v opačnom smere. Typické odstredivé miešanie sa týka - ale bez akéhokoľvek obmedzovania - pretáčania po 5 až 30 sekúnd, s výhodou po 5 až 10 sekúnd pri 2 000 až 5 000 otáčkach za minútu v opakovaných cykloch tam i späť po akúkoľvek vhodnú časovú dobu. Pri tomto postupe je výhodné využívať pretáčanie 5 až 10 sekúnd pri 3 000 otáčkach za minútu v cykloch tam i späť po 1 až 2 minúty. Ako je uvedené už vyššie, tento spôsob môže predchádzať trochu dlhšie pretáčanie, napríklad 20 sekúnd i viac k počiatočnej distribúcii rozpúšťadla.

Výrazom fibrín, tu používaným, sa myslí fibrín I, fibrín II alebo des-ββfibrín.

Ako už bolo vyššie uvedené, zariadenie podľa tohto vynálezu obsahuje najmenej jeden kanálik schopný prepraviť kvapalinu od dna druhej nádobky, to v zariadení, ako tu bolo definované, do prvej nádobky. Tento jav je spojený s významnou výhodou tým, že uľahčuje výhodné vyhotovenie postupu podľa tohto vynálezu.

Skoršie zariadenie a postup vyžadovali, aby po vzniku gelovej hmoty nezosieťovaného fibrínového polyméru sa piest znížil, aby tak donútil zvyšnú kvapalnú plazmu pretiecť prietokom, uvedeným piestom, a to do prvej nádobky. Takže podľa predchádzajúceho postupu musí prísť piest do styku s kvapalinou. Ale so zreteľom na gel, nanesený na stenách druhej nádobky podľa tohto postupu nemožno piest znížiť dostatočne tak, aby prišiel do styku so zvyšnou kvapalinou plazmy. Kanálikom, zasahujúcim z dna druhej nádobky do prvej nádobky za predpokladu atmosférického prívodu do druhej nádobky možno piest znížiť práve len jemne za vzniku dostatočného tlaku v druhej nádobke, čo donúti kvapalnú plazmu pretiecť kanálikom do prvej nádobky. Ako to už bolo prv uvedené, kanálik môže byť jediný alebo ich môže byť viacero s tým, že prechádzajú nádobkami alebo ich vonkajšou stenou. Výhodným spôsobom nastavenie kanáliku vo vonkajšej stene je zariadenie z dvoch valcovitých nádob, z ktorých jedna zapadá tesnením do druhej. Pomocou jedného či viacerých otvorov ako vo vnútornej, tak vo vonkajšej valcovitej nádobke alebo mimo vnútornej nádobky možno tak zaistiť jeden či viac kanálikov.

Takto popisované zariadenie je jednoduché, uzatvorené, automaticky ovládateľné a schopné previesť všetku krv na žiadané krvné zložky, s výhodou autológne zložky, ako sú napríklad fibrinové tesnidlá.

Zariadenie je najvhodnejšie umiestnené v pohonnej jednotke, ktorá môže zabezpečiť a riadiť celé zariadenie, jeho rotáciu okolo osi, ako je to potrebné, ovládať piesty a ich stlačenie, teda uľahčiť pohyb piestov atď.

Zariadenie podľa obr. 1 podľa tohto vynálezu je zložené z častí, vyznačujúcich sa v podstate rotačnou symetriou, čo dovoľuje uloženie celého zariadenia v ďalšom odstredivom zariadení, ktoré je ako také známe, aby bolo možné vykonať odstredenie podľa stredovej osi 1_. Na obr. 1 výhodné vyhotovenie celého zariadenia obsahuje vonkajšiu nádobku 2 a vnútornú nádobku 3 takéhoto typu, že presne zapadajú do seba tesným dotykom s výnimkou tej časti, kde vedie axiálne vedený kanálik v medzivrstve 4. Kanálik 4 je vytvorený dutinou, vyhĺbenou v stene vnútornej nádoby 3. Obidve nádoby 2 a 3 zahrňujú ich zodpovedajúce horné časti 5 a 6 v tom-ktorom prípade, končiace stredovým otvorom 7, umožňujúcim priechod piestovej tyčinky 8. Okolo otvoru 7 majú obidve nádobky axiálne orientované časti 9 a 10, ústiace blízko dutej piestovej tyčinky 8 v smere od vnútornej časti obidvoch nádobiek. Vonkajšia nádobka 2 tesne nalieha na dutú piestovú tyčinku pozdĺž krátko radiálne siahajúceho lemu 11, obsahujúceho vyhĺbenie 12 s tesniacim krúžkom

13.

Ako je to jasné z obr. 1, pokračuje kanálik 4 medzi vnútornou a vonkajšou nádobkou po celú dobu na vonkajšej stene vnútornej nádobky v styku s vonkajšou nádobkou až k horným častiam 5 a 6 a axiálnym častiam 9 a 10 k otvoru bezprostredne pod tesniacim krúžkom 13 otvoru 7. Axiálna časť 10 vnútornej nádobky 3, končiaca otvorom 7, je dimenzovaná tak, že dochádza k úzkemu, ale voľnému priechodu do vnútornej časti nádobiek 2_a 3 okolo dutej piestovej tyčinky 8.

Vonkajšia nádobka 2 je predstavovaná valcovitým dielom rovnakého priemeru, pozri obr. 1. Pri pohľade smerom dole na výkres pokračuje táto časť do ďalšej valcovitej časti 14 mierne väčšieho priemeru krátkou prechodnou časťou 15, tvoriacou vnútorný povrch komolého kužeľa 16. Vnútorná nádobka 3 končí v mieste, kde prechodná časť 15 vonkajšej nádobky 2 prechádza do valcovitej časti 14 väčšieho priemeru. Dolné zakončenie vnútornej nádobky 2 zahrňuje vonkajší povrch 17 tesnenia formy kónického kužeľa, tvoriacej povrch kónicko - kužeľovitý 16 na vnútornej strane vonkajšej nádobky 2. Vonkajší a vnútorný kruhový tanierik 19 a 20 sú umiestnené bezprostredne pod dolným koncom vnútornej nádobky 3 so zakončením na radiálnom povrchu 18. Tieto tanieriky tesne naliehajúce jeden na druhý definujú medzi sebou kanálik 21, siahajúci v axiálnej rovine zo stredového otvoru 22 a dopredu k vnútornej strane vonkajšej nádobky 2, kde kanálik 21 spája sa s kanálikom 4 medzi vonkajšou nádobkou 22 a vnútornou nádobkou 3 axiálne vybočujúcou časťou 23. Kanálik 21 a axiálna kanáliková časť 23 sú vhodne opatrené drážkou na strane vnútorného tanierika 20 v smere vonkajšieho tanierika 19. Obidva tanieriky 19 a 20 sú tvarované zošikmením, takže zahrňujú v podstate vnútorné a vonkajšie komolo - kužeľovité povrchy, pozri obr. 1, a tým smerujú smerom dole k stredovému otvoru 22. Z obr. 1 je rovnako zrejmé, že vnútorný tanierik 20 obsahuje radiálny povrch 24 tesne naliehajúci na susediaci radiálny povrch 18 vnútornej nádobky 3. Radiálny povrch 24 vnútorného tanierika 20 je vybavený hĺbením 25 pre tesniaci krúžok 26.

Obidva tanieriky 19 a 20 sú držané v opornom postavení voči radiálnemu povrchu 18 vnútornej nádobky 3 pomocou poklopu 27 za uzatvorenia vonkajšej nádobky v smere dole. Tento poklop 27 tvorí obvodovú časť 28 tvaru objímky, spôsobilú uzatvoriť tesne vnútornú časť vonkajšej nádobky 2, na ktorú je upevnený vhodným spôsobom, ako je úchytka medzi obvodovým pásom 29 na vonkajšej strane 28 a zodpovedajúcim obvodovým hĺbením 30 na vnútornej strane vonkajšej nádobky 2. Tesné spojenie je zaistené tesniacim krúžkom 31 v obvodovom hĺbení 31a na vonkajšej časti vonkajšieho tanierika 2. Poklop 27 zahrňuje ďalej pomerne tenkú stenu 22 spôsobilú tvoriť dolný koniec celého zariadenia v postavení, ako je to uvedené na obr. 1. Táto stena 22 sa rozťahuje v podstate rovnobežným smerom voči vonkajším a vnútorným tanierikom 19 a 20 takým spôsobom, že stena 32 siaha od vnútornej strany objímky 28 v časti medzi tanierikmi 19 a 20 a smerom dole k časti v podstate na úrovni nižšieho rafika 33 vonkajšej nádobky 2.

So zreteľom na zosilnenie pomerne tenkej steny 32 je tu v regulárnych odstupoch rebro 34, z ktorých však iba jedno je zakreslené na obr. 1. Toto rebro 34 je tvarované čiastočne časťou, umiestnenou mimo steny 32 a čiastočne časťou, umiestnenou vo vnútri steny 32, pozri obr. 1. Potom uvedená časť s označením číslicou 35 je tvarovaná tak, že tesne nalieha na dnové časti vonkajšieho tanierika 19 s tým dôsledkom, že napomáha zdržiavaniu tanierikov 19 a 20 vo vhodnej polohe.

Priečkové prostriedky 36 sú vsunuté medzi vonkajší tanierik 19 a poklop 27; zahrňujú stredovú dĺžku trubice 37. Táto trubica po celej dĺžke je upevnená na čape 38, ktorý preniká axiálne do vnútra a je tvarovaný integrálne na stenu 32 poklopu 27. Uvedená dĺžka trubice 37 je tvarovaná integrálne s obvodovým stenovým kotúčikom 39, zasahujúcim smerom von od dĺžky trubice 37 takým spôsobom, že spočiatku tiahne smerom dole k stene 32 poklopu 27. načo naberie krátky axiálny smer tak, že pokračuje kurzom v podstate rovnobežným so stenou 32 poklopu. Stenový kotúčik 39 končí na krátkom, radiálne prispôsobenom obvode 40, spočívajúcom na osadení 41 na časti rebra 35 poklopu 27. Anulárna filtrová časť 42 je natlačená medzi vonkajším obvodom 40 na stene kotúčika 39 a dolnou stranou vonkajšieho tanierika 19.

Táto anulárna filtrová časť nalieha tesne na v podstate radiálne tvarovaný povrch 43 susediacej vonkajšej strany vonkajšieho tanierika 19. Zariadenie a postupy, využívajúce takýto anulárny filter, sú predmetom ďalšej súvisiacej prihlášky, podávanej súčasne.

So zreteľom na zaistenie stability priečkových prostriedkov 36 sú tu ďalej zosilňujúce radiálne rebrá s označením číslicou 44 medzi dĺžkou trubice 37 a stenovým kotúčikom 39, to v zariadení, označenom ako výhodné.

Puzdro s označením 45 je na opačnom konci poklopu 27 priečkových prostriedkov 36. Takéto puzdro sa hodí pre oneskorujúce činidlá, vypúšťané do druhej nádobky 75 a sú predmetom súvisiacej prihlášky podávanej súčasne.

Uvedené puzdro zahrňuje predĺženú trubicu 46 tvarovanú integrálne s radiálnym krúžkom 47 a nesúcu ďalšie dva radiálne krúžky 48 a 49. Tieto dva radiálne krúžky 48 a 49 sú zaistené pomocou medzivložkového tesnenia na ich zodpovedajúcej strane pevného krúžku 47. Tieto dva voľné krúžky 48 a 49 sú upravené so zreteľom na ich zodpovedajúcu vzdialenosť od pevného krúžku 47 pomocou obvodových pätiek 50 a 51 v tom-ktorom prípade na dĺžke trubice 46. Všetky tri tanieriky 47, 48 a 49 majú rovnaký vonkajší priemer a sú vybavené na svojich zodpovedajúcich obvodoch obvodovou objímkou 52, ktorú možno rôzne nastaviť.

Ako je zachytené na vyobrazení, nižší tanierik 49 nalieha tesne na horný koniec dĺžky trubice 37 oddeľovacím prostriedkom 36, čím je dané postavenie puzdra 45 v axiálnom smere. Toto postavenie je ďalej určené tým spôsobom, že pri oddialení v axiálnom smere nastaviteľná objímka 52 puzdra sa dostane do tesnenia svojím spodným koncom, pozri vyobr. s vnútorným okrajom 53 vonkajšieho tanierika 19 v stredovom otvore 22. V tejto polohe objímky 52 spojenie stále existuje medzi priestorom vo vnútri vnútorného tanierika 20 obklopujúceho objímku 52, ako aj prívodným otvorom do kanálika 21 medzi vonkajším tanierikom 19 a vnútorným tanierikom 20. Axiálna dĺžka nastaviteľnej objímky 52 sa upraví tak, že dôjde k spojeniu s vonkajším tanierikom 20 ešte pred horným koncom, pozri vyobr. objímky 52, za vysunutia pevného krúžku 47 v priebehu axiálneho pohybu dole uvedenej objímky 52. Vnútorný priemer objímky 52 sa teda upraví na vonkajší priemer axiálne vyčnievajúcej časti steny kotúčika 39 priečkových prostriedkov 36 takým spôsobom, že pokračujúci pohyb objímky 52 smerom dole k poklopu 27 spôsobí, že objímka 52 pevne priľnie k priečkovým prostriedkom 36, keď sa odpojila od vonkajšieho tanierika 19. Dĺžka axiálnej časti priečkových prostriedkov 36 zodpovedá tiež axiálnej dĺžke objímky 52 takým spôsobom, že objímka 52 v najnižšej polohe celkom zapadne do priečkových prostriedkov 36.

Ako je zachytené na vyobr., dutá piestová tyčinka 8 nadväzuje na guľatý piest 55 vo vnútri vonkajšej nádobky 2 a vnútornej nádobky 3 s tým, že piest 55 tesne zapadá do vnútra vnútornej nádoby 3 pomocou tesniaceho krúžku 56.

Luerova spojka 57 alebo akýkoľvek iný vhodný spojovací článok je tvarovaný vo vnútri dutej piestovej tyčinky, aby obsahoval vhodnú injekčnú ihlu 58 s piestovo pôsobiacou zátkou 59 pre spracovanie obsahu injekčnej ihly 58. Spojka 57 je tvarovaná v podstate ako celková dĺžka trubice spojenej so stredovým otvorom 61 v pieste 55 pomocou komolo - kónickej časti 60. Dĺžka trubice 57 je vybavená radiálne smerom do vnútra orientovaným rebrom 62 pre usmernenie kvapaliny, opúšťajúcej injekčnú ihlu 58 von z axiálnej cesty, a tým okolo dĺžky trubice 46 pod vnútro puzdra 45. Celková dĺžka trubice 46 zodpovedá takej dĺžke a takým rozmerom, aby mohla celkom tesne zahrnúť dĺžku trubice 57 v dutej piestovej tyčinke 8, ak je piest 55 vo svojej najnižšej polohe v blízkosti poklopu 27. S ohľadom na posilnenie vyššie uvedeného tesniaceho spoja je vnútorná strana dĺžky trubice 57 tvorená graduálne sa zmenšujúcim priemerom na konci, priľahlom k piestu 55.

Axiálne orientovaný plášť 63 sa vytvorí integrálne s piestom 55 nad stredovým otvorom 61 uvedeného piestu. Plášť 63 je tvarovaný s takým priemerom a takou dĺžkou, že pri vhodnom pohybe piestu 55 môže aktivovať posun posúvateľnej objímky 52 puzdra 45 do takej polohy, v ktorej sa dotkne vnútorného okraja 53 stredového otvoru 22 tanierikmi 19 a 20, čo má za následok zásah oddeľovacich prostriedkov 36.

Pružný, anulárny britový uzáver 53 je - ako je naznačené - nad dutým piestom celkom nahor vo vnútri nádobiek 2 a 3, pozri obr. 1. Tento britový uzáver 64 je prispôsobený tak, aby zabránil nežiaducemu priechodu kvapaliny z vnútra nádobiek 2 a 3 do kanálika 4, ale dovoľuje taký priechod kvapaliny, ak sa vyvinie tlak piestom 55.

Ako je to zrejmé z hornej časti obr. 1, je tu napojenie na hadicu 65 otvorom 66 vo vonkajšej i vnútornej nádobke 2 a 3. Takýto spoj je známy a netreba ho popisovať detailnejšie, ale dovoľuje prerušenie napojenia na hadicu, ak je to potrebné. Ďalej potom je tu otvor pre únik vzduchu s vhodným filtrom, rovnako bežný bez potreby bližšieho popisu.

Je tu priechod 69 z priestoru medzi priečkovými prostriedkami 36 a poklop 27, a to po celú cestu smerom nahor vnútrom dĺžky trubice 37 priečkových prostriedkov 36 a smerom nahor vnútrom dĺžky trubice 46 puzdra 45. Tento priechod 69 umožňuje prienik kvapaliny do injekčnej ihly 58 z uvedeného priestoru, ak sa spojí dĺžka trubice 46 s dĺžkou trubice 57 vo vnútri piestovej tyčinky 8. V najnižšej časti čapu 38 v poklope 27 je priechod 66 s tým, že tento čap 38 je tvarovaný s rovným, axiálnym povrchom a má v podstate kruhový prierez. Dôsledkom toho je vznik priestoru medzi čapom, a susediacou časťou vnútra dĺžky trubice 37. Bezprostredne nad čapom 38 je priestor 67, kde priečkové prostriedky 36 majú trochu nižší vnútorný priemer. Týmto spôsobom je možné umiestniť malý filter 68 bezprostredne nad uvedený priestor, pozri obr. 1 s tým, že kvapalina musí prejsť filtrom prv ako sa dostane do dĺžky trubice 46 puzdra 45.

Zariadenie, ako je tu vyššie popisované, zahrňuje prvý anulárny priestor 70, ktorý môže byť označený tiež ako priestor oddeľovania a je definovaný vnútrom dutiny piestu 8, tvoriacej valcovitú vnútornú stenu 71 a zvonka valcovitou vonkajšou stenou 72, tvorenou vonkajšou nádobkou 2 a vnútornou nádobkou 3. V polohe bežného použitia, pozri obr. 1, je anulárny priestor 70 smerom nahor daný hornou stenou 73, tvorenou dolnou časťou 5 a 6 vonkajšej nádobky 2 a vnútornej nádobky 3. Smerom dole je anulárny priestor definovaný dolnou stenou 74, danou piestom 55. Druhý priestor 75, ktorý môže byť tiež označovaný ako reakčný priestor, je daný spodkom piestu 55 a smerom nahor je definovaný tou istou valcovitou vonkajšou stenou 72 ako prvý priestor 70. Smerom dole je druhý priestor 75 definovaný druhou spodnou stenou 76, tvorenou vonkajším tanierikom 19 a vnútorným tanierikom 20. Puzdro 45 je umiestnené centrálne vo vnútri druhého priestoru 75. Tretí priestor 77 je pod uvedenou druhou dolnou stenou 76 a je definovaný priečkovými prostriedkami 36 a anulárnou filtračnou jednotkou 42. Ďalej potom tento tretí priestor 77, ktorý môže byť tiež označený ako filtračný, spája druhý priestor 75 priechodom, ktorý tvorí stredový otvor 22 vo vonkajšom tanieriku 19 a vnútornom tanieriku 20. Potom je tu štvrtý priestor 78 pod priečkovými prostriedkami 36: ten možno označiť ako zhromažd’ovací priestor, definovaný smerom dole stenou 32 poklopu 27 a ďalej časťami objímky 28 poklopu 27 a dolnou časťou vonkajšieho tanierika 19.

Vyššie popisované zariadenie sa používa hlavne na oddeľovanie zložky, ako je monomérny fibrín, z krvi a na tento účel je druhý priestor 75 alebo s výhodou horný priestor 80 puzdra 45 vopred naplnený vhodným enzýmom, ako je batroxobín. Ako je to zrejmé z EP-PS 592 242, možno použiť akýkoľvek trombínu podobný enzým a patria sem okrem trombínu ako takého ďalšie materiály s podobnou účinnosťou, ako sú ankrod, akutín, venyyme, asperáza, botropáza, krotabáza, flavorxobín, gabonáza a s výhodou batroxobín. Ten môže byť chemicky viazaný na biotín, čo je syntetická látka, dovoľujúca väzbu batroxobínu bežným spôsobom pomocou avidínu a kompozíciou s obsahom avidínu na agaróze. Podľa toho sa nachádza avidín-agaróza v najnižšom priestore 81 puzdra. Ako kompozícia biotín - batroxobín, tak avidín - agaróza sa pomerne ľahko plní do zodpovedajúcich priestorov 80 a 81 v puzdre 45 prv, ako sa toto puzdro umiestni vo vnútri zariadenia.

Potom sa upraví injekčná ihla 58, obsahujúca rozpúšťajúci roztok, napríklad pufor s hodnotou pH 4, pripravený z octanu riedením kyselinou octovou. Potom sa injekčná ihla 58 použije na zachytenie roztoku monoméru fibrínu.

Môže sa použiť akýkoľvek iný známy pufor. Rozpúšťacím pufrovaným činidlom môže byť akýkoľvek kyslý pufor s hodnotou pH medzi 1 až 5. Vhodné príklady sú kyselina octová, jantárová, glukuronová, cysteová, krotónová, itakonová, glukónová, mravčia, asparágová, adipová a soli ktorejkoľvek z nich. Za výhodné možno označiť kyselinu jantárovú, asparágovú, adipovú a soli kyseliny octovej, napríklad sodnú. Solubilizovanie sa dá vykonať tiež za neutrálnej hodnoty pH chaotropným činidlom. Tu možno uviesť ako vhodné močovinu, bromid sodný, hydrochlorid guanidínu, rhodanid draselný, jodid alebo bromid draselný. Koncentrácia a objemy takýchto kyslých činidiel alebo chaotropných látok, pozri EP-PS 592 242.

V priebehu prísunu krvi alebo bezprostredne po ňom sa piestová tyčinka 8 natlačí tak do vnútra celého zariadenia, že pohyblivá objímka 52 puzdra 45 sa pohne smerom dole do zovretia v prechode medzi spodnou stenou 76 a druhým priestorom 77. V dôsledku toho sa ihneď otvorí prístup ku kompozícii biotín - batroxobín vo vnútri horného priestoru 80 daného puzdra. Inak možno otvoriť horný priestor 80 potom, čo došlo k presunu plazmy do druhého priestoru.

Ak je celé zariadenie pripravené na použitie, potom sa vzorka krvi vpraví do prvej nádobky nezakresleným prívodom a hadičkou 65 bežným postupom s tým, že sa použitá vzorka krvi s výhodou zmieša opäť bežným postupom s antikoagulačným činidlom. Počas prísunu krvi hadičkou 65 a otvorom 66 do vnútra prvého priestoru 70 sa odtiaľ bežným spôsobom vyčerpá vzduch. Po skončení prísunu krvi hadičkou 65 sa táto odstráni a otvor 66 sa tesne uzatvorí. Potom sa celé zariadenie s krvou umiestni v priestore odstredivky, ktorá naviac spolupracuje pri tesnom stlačení rôznych častí zariadenia. Odstredivka spôsobí rotáciu celého zariadenia podľa rotačnej osi L V dôsledku toho sa krv rozdelí v prvom priestore 70 na frakciu plazmy, ktorá sa radiálne usadzuje vo vnútri zvyšnej dávky krvi s tým, že zvyšná časť krvi obsahuje červené i biele krvinky. Ako je to popísané v EP-PS 592 242, môžu byť doštičky obsiahnuté v ktorejkoľvek z frakcii, ak je to potrebné, a to menením rýchlosti a doby trvania odstreďovania. Odstreďovacia rýchlosť tohto zariadenia sa zvyčajne pohybuje v rozsahu 2 000 až 10 000 otáčok za minútu a môže sa meniť, ako je to potrebné - v rôznych fázach postupu, pozri EP 654 669.

Len čo sa medzivrstva plazmy a zvyšnej časti krvi stabilizuje, teda oddeľovanie je skončené, vyvolá sa znižovanie objemu v prvom priestore 70, zahájené piestovou tyčinkou 8 a v dôsledku toho sa piest stláča za neprerušovanej rotácie. V dôsledku toho sa dostane prvá možná vrstva vzduchu kanálikmi 4 a 21 do druhého priestoru 75 a ďalší pohyb piestu 55 spôsobí, že tiež plazma sa dostane do druhého priestoru 75. Pohyb piestu 55 sa zastaví, len čo všetka vrstva plazmy bola takto prepravená do druhého priestoru 75, teda keď medzivrstva medzi frakciou plazmy a zvyšnou časťou krvi dosiahne vnútorné steny 71 v prvom priestore 70. Pokiaľ nebol doteraz otvorený najvyšší priestor 80, možno to vykonať v túto chvíľu, takže sa batroxobín vpustí.

V druhom priestore 75 sa frakcia plazmy dostane do styku s enzýmom batroxobínom s tým výsledkom, že monomérny fibrín, ktorý polymeruje bezprostredne za vzniku nezosieťovaného fibrínového polyméru, sa uvoľní z frakcie plazmy. Tento postup prebieha za nepretržitého odstreďovania s výsledkom, že fibrínový polymér sa účinne oddelí zo zvyšnej časti frakcie plazmy s tým, že vzniká reakciou kompozície biotín - batroxobín a usadením ako vrstva viskózneho gélu pozdĺž valcovitej vonkajšej steny 72. Keď je toto oddeľovanie skončené, zastaví sa odstreďovanie a potom možno celkom ľahko pretlačiť zvyšnú pomerne kvapalnú časť plazmy späť do prvého priestoru 70 piestom 55, ktorý sa najprv kvôli presunu vzduchu zdvihne z prvého priestoru do druhého priestoru 75 s následným stlačením piestu 55 smerom dole. Fibrínový polymér môže zostať na vonkajšej stene alebo môže sa začať odlupovať, ale v takom prípade sa odlupuje podstatne pomalšie ako zvyšok kvapaliny. Takže prepravu kvapaliny možno vykonať pomerne ľahko a rýchlo prv ako viskózna vrstva s fibrínovým polymérom sa dostane k otvoru do kanálika 21. Možno použiť pripadne ďalšie opatrenie so zreteľom na znemožnenie dosiahnutia viskóznej vrstvy prívodu do kanálika 21 príliš rýchlo, hoci nastavením krúžku na nahor vyčnievajúcom ozubení 82, ako je to naznačené bodkovanými čiarkami na dne 76. Tento postup odstreďovania/vypúšťania možno vykonať dvakrát či viackrát, ako je to potrebné, teda so zreteľom dostať tak mnoho plazmatickej kvapaliny z fibrínového polyméru, ako je to len možné.

Len čo zvyšná časť frakcie plazmy bola vypudená z druhého priestoru 75, posunie sa pohyblivá objímka puzdra 45 smerom dole takým spôsobom, že je umožnený prístup do najspodnejšieho priestoru 81. V rovnakej dobe alebo v súvislosti s neskorším posunom objímky sa uzáver injekčnej ihly 58 zatlačí dokonale do vnútra pôsobením vretena zvonka takým spôsobom, že pufor s hodnotou pH 4 sa presunie do druhého priestoru 75, čo možno vykonať na začiatku odstredivého miešania. Prísadou pufra s hodnotou pH 4 sa dosiahne rozpustenie fibrínového polyméru v tomto pufre a prítomnosť kompozície avidín - agaróza v dolnom priestore 81 v puzdre 45 spôsobí, že kompozícia biotín batroxobín sa viaže zvyčajným spôsobom avidínom. Pokračujúci posun piestu 55 spôsobí, že pohyblivá objímka 52 puzdra 45 zapôsobí na priečkové prostriedky 36 a odpojí dolnú stenu 76 s výsledkom, že totiž dôjde k voľnému priechodu do tretieho priestoru 77. V dôsledku toho môže obsah druhého priestoru 75 tiecť voľne dole do tretieho priestoru 77. S výhodou sa rozpustenie vykoná za odstredivého miešania, čo zahrňuje odstreďovanie a sériu zastavenia a nasadenie miešacích pohybov tam a späť, ako to bolo uvedené vyššie.

Pokračujúcim odstreďovaním sa dosiahne, že sa roztok monoméru fibrínu môže oddeliť v treťom priestore jednotky anulárneho filtra 42, ktorý zadržiava pomerne veľké čiastočky agarózy a batroxobínu takto viazaného pôsobením sústavy zachytenia biotínom - avidínom. Len čo roztok monomérneho fibrínu sa dostane do najnižšieho štvrtého priestoru 78 v dôsledku vyššie uvedeného odstreďovania, odstreďovanie sa preruší a roztok monoméru fibrínu sa ľahko dostane do injekčnej ihly 58 odstránením zátky 59, pričom najhornejší koniec celej dĺžky trubice 46 puzdra 45 zodpovedá dĺžke trubice 77 za vzájomného spojenia s injekčnou ihlou 58.

Pretože sa fibrinový polymér oddelí z frakcie plazmy v druhom priestore 75 počas pokračujúceho odstreďovania a pretože sa roztok monomérneho fibrínu oddelí odstreďovaním v treťom priestore 77, je možné takto dosiahnuť pomerne vysoký výťažok monomérneho fibrínu z tej či onej vzorky krvi.

Vynález bol popísaný s odvolaním na výhodné vyhotovenie. Možno však uskutočniť mnohé modifikácie a obmeny, bez toho, aby sa vybočilo z rozsahu tohto vynálezu.

Na obr. 2 sú príklady takýchto modifikácií, kde je druhá možnosť vykonania postupu podľa tohto vynálezu, ktorá viac či menej zodpovedá vyhotoveniu, ako bolo zachytené na obr. 1. Zariadenie na obr. 2 zahrňuje prvý priestor 90 a druhý priestor 91, oddelené piestom 92, ktorý má dutú piestovú tyčinku 93, a zapadá do prvého priestoru. Obidva priestory sú von definované časťou v podstate valcovitej časti 94, tvoriacej vonkajšiu valcovitú stenu 95 pre obidva priestory 90 a 91 Hore je prvý priestor 90 zakončený hornou stenou 85, ktorá je zasa tvorená horným krytom isteným tubulárnou časticou 94 prostredníctvom prstenca 96 so závitom do uvedenej tubulárnej časti 94. Vrchol steny 85 má otvor pre priechod dutej piestovej tyčinky 93. Smerom dole druhý priestor 91 je definovaný dolnou stenou 96, tvorenou kruhovou vnútornou obrubou v tubulárnej časti 94. Na strane susediacej s druhým priestorom 91 obsahuje valcovitá časť komolo - kužeľovitý povrch 97 so sklonom od piestu 92 smerom k stredu druhého priestoru 91. Dolná stena 96 umožňuje stredový priechod 98 do tretieho priestoru 99. Tento tretí priestor 99 je vybavený prehradzujúcimi priečkami 100 a guľatou filtračnou jednotkou 101. vloženou medzi dolnú stenu 96 a priečkami 100 a vedúce k štvrtému anulárnemu priestoru 102. Ten je vsadený medzi kalíškové veko 103, istené závitmi na tubulárnu časť 94. Uvedené veko 103 má v zárezoch s odstupmi deliace priečky 100 v postavení centrálne vo vnútri tubulárnej časti 94, zvierajúcej jednotku anulárneho filmu 101.

Puzdro 105 je istené centrálne a nahor vyčnievajúcim čapom 104 na deliacich priečkach 100. Puzdro 105 obsahuje tubulárnu časť 106 a diskovými krúžkami 107 a 108 voľne pripojenými a ohraničujúcimi priestory pre uvedené enzýmy (pozri označenie písmenami BB a AA) pomocou nastaviteľných objímok. Diskové krúžky sú istené v potrebných vzájomných vzdialenostiach po dĺžke trubice 106 pomocou pätiek tvarovaných na vonkajšom obvode tubulárnej časti 106 s klesajúcim priemerom zdola smerom nahor.

Od najvyššieho bodu prvého priestoru 90 k dnu druhého priestoru 91 vedú prietokové kanáliky 115 a 116 dané trubicami pevnej dĺžky 117 a 118, vedúcimi rovnobežne s osou zariadenia rotáciou tohto zariadenia s istením na koncoch v spojitosti s otvormi 95 nahor a 96 dole. Kanálikové spojenie medzi celou dĺžkou trubice a zodpovedajúcimi priestormi je vybavené mnohými otvormi a zátkami, ktoré ich istia. Celé dĺžky trubíc 117 a 118 ústia zodpovedajúcimi otvormi v pieste 92. Sú tam tesniace krúžky kvôli zabráneniu úniku kdekoľvek.

Spojka 120 je umiestnená centrálne v pieste 92 pre spojenie s injekčnou ihlou 121 vo vnútri dutiny piestovej tyčinky 93 a s horným koncom celej dĺžky trubice 106 v puzdre 105. Spojka 120 má plášť 122, siahajúci do druhej komory 91 a ovplyvňujúci posúvateľnú objímku 110 na puzdre 105.

Ako je to nakreslené, je vonkajší priemer objímky 110 prispôsobený so zreteľom k priemeru priechodu 98 smerom dole do tretieho priestoru 99 takým spôsobom, že objímka 110 je vedená a udržiavaná spodnou stenou 96 v ktorejkoľvek polohe a v dôsledku toho tiež v najnižšej možnej polohe, v ktorej objímka 105 sa nedotýka najnižšieho diskového krúžku 109 v puzdre 105 a dovoľuje priechod kvapaliny z druhého priestoru 91 smerom dole do tretieho priestoru 99. Zo štvrtého priestoru 102 vedie kanálik 123 centrálne smerom nahor čapom 104 na deliacej prepážke 100 a ďalej potom smerom nahor tubulárnou časťou 106 puzdra 105, kde sa môže kvapalina dostať odtiaľ do injekčnej ihly 121.

Zariadenie ako je na obr. 2, sa používa celkom rovnakým spôsobom ako je to na obr. 1, pričom pochopiteľne takéto zariadenie je rovnako vybavené hadičkou pre prívod krvi.

Ďalšie iné zariadenie je na obr. 3, ktoré v podstate má rovnaké základné prvky ako na obr. 1 a 2. Kanálik pre prietok kvapaliny 4 je s výhodou tvorený štrbinou medzi ktoroukoľvek stenou zásobníkov 2 a 3, zapadajúcich jeden do druhého. Ako je to zrejmé z obr. 3, kanálik 4 vedie nahor až do horných častí 5 a 6 a ústi do ramenového priestoru 300, takže neprechádza ďalej medzi axiálne orientovanými časťami 9 a 10 (ako na obr. 1). Pružný uzáver 64 je priamo napojený na ramenový priestor 300 a zaisťuje, že predmetná kvapalina (teda napr. plazma) sa po priechode uzáverom 64 dostane priamo do otvoru kanálika 4 medzi hornými časťami 5 a 6 bez toho, aby musela prechádzať medzi časťou skrutky 8 a vnútornou, axiálne orientovanou časťou 10.

Podľa iného vyhotovenia v zmysle obr. 3 bolo ozubenie 82 (obr. 1) nahradené fibrínovým filtrom 310, čo je zostava zúbkov, usporiadaných cirkulárne (napríklad v ráme alebo krúžku) okolo puzdra 45 v blízkosti dna druhého priestoru 70. Filter 310 je napojený v jednom mieste či na viacerých miestach na spodnú stenu 76, ale v podstate je umiestnený pri dne steny 76, aby totiž nadbytok kvapaliny bol odtiahnutý čo možno najúčinnejšie. Usporiadanie pomáha uľahčiť riešenie situácií za použitia zariadenia podľa obr. 1, kde sa fibrínový polymér zadržiava, ak sa to požaduje, na ozubení 82, ale nadbytok kvapaliny môže byť rovnako zachytený spolu s fibrínovým polymérom.

Ďalšie prispôsobenie je zachytené na obr. 3, najmä s ohľadom na injekčnú ihlu 50, kde možno vidieť chrániaci držiak 320, obklopujúci v podstate ihlu 58. Držiak 320 je s výhodou valcovitý a zodpovedá všeobecne tvaru ihly 58. Veko držiaku 322 je uvoľniteľným spôsobom napojené na ihlu 58 v hornej časti držiaku 320 a predstavuje tak rukoväť, pomocou ktorej je možné kedykoľvek ľahko vybrať ihlu 58 a zodpovedajúce puzdro 320 z vlastného zariadenia po vykonaní postupu na získanie očakávaného produktu, napríklad roztoku monomérneho fibrínu, len čo je postup v ihle skončený. Puzdro 320 môže byť z plastického alebo pevného polymérneho materiálu, aby tento chránil ihlu 58 pri vlastnom zaobchádzaní. Ďalej potom, pretože pracovník sa priamo nedotýka ihly, môže byť táto prenesená na ďalšie miesto použitia bez kontaminácie. Odstrániteľné spodné držadlo (nie je zakreslené) puzdra 320 sa môže použiť tiež, najmä vtedy, kedy je vopred sterilizovaná ihla 58 s puzdrom

320 a obsahujúca nutný roztok kyslého pufra predpokladaná ako jedna zložka sústavy podľa tohto vynálezu. Na obr. 3 je zakreslená tiež ihlová spojka 324. ktorá je axiálne odoberateľná spolu s rukoväťou 322 pri vykonávaní postupu, teda napríklad pri pohybe sem a tam nezakreslenej tyčinky, ktorá môže byť časťou pre ovládanie celého zariadenia. Zátka 59 je prispôsobená na prijatie ihlovej spojky 324 ako pri spôsobe zapojenia a vypojenia. To možno uskutočniť napríklad vyhĺbením 326 za časťou 328 vnútra zátky 58 a zodpovedajúcou protuberanciou 330 na skrutke spojky 324. Veľkosť a tvary týchto častí sa volia tak, že spojku 324 možno zasunúť do vnútra s minimálnou silou k pohybu zátky 59 do vnútra, bez toho, aby sa vynútil pohyb protuberancie 330 cez vyvýšenú časť 320. Týmto spôsobom sa môže spojka 324 pohybovať späť bez toho, aby sa menilo postavenie zátky 59. Ak sa vyvinie mierne vyššia sila na spojku 324 pri ovplyvňovaní zátky 59. protuberancia 330 uvoľní vyhĺbenie 328 s dôsledkom, že zátka 59 sa teraz pohne v postavení spolu so spojkou 324.

Tiež na obr. 3 axiálne usporiadaný plášť 63 je celkom jasnou zložkou pätkového usporiadania na dne piestu 55.

Všetky diely, tvoriace časti tohto usporiadania, sa ľahko vyrobia z vhodných plastických materiálov postupom injekčného tvarovania. Potrebné zariadenia nie sú preto nákladné a sú ľahko dosiahnuteľné.

V tomto zmysle sa teda môže použiť akýkoľvek vhodný materiál. S výhodou sú známe v priemysle pre výrobu lekárskych predmetov stabilné polyméry, γ-ožarovateľné. S výhodou sú vonkajšia nádobka i piest z polykarbonátu, držiak ihly, veka a plunžer sú z polypropylénu, filter je z polyetylénu, ihla je sklenená, krúžky sú silikónové a ďalšie časti sú z kopolyméru styrénu a nitrilu kyseliny akrylovej.

Vynález bol popísaný s odvolaním na výhodné vyhotovenie celého zariadenia. Ale postup podľa tohto vynálezu sa môže ľahko vykonávať v laboratóriu za aseptických podmienok použitím kadičky krytej vekom. Kadička sa naplní plazmou a enzýmom a po zmiešaní s následným odstredením sa nezosieťovaný fibrínový polymér oddelí od dna alebo zo stien kadičky, ako to bolo popísané vyššie. Po odstránení zvyšnej frakcie plazmy sa polymér nezosieťovaného fibrínu znova rozpustí pridaním rozpúšťadla a pomocou odstredivého miešania, ako to bolo vyššie popísané.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Výhodné vyhotovenie za použitia súčasného zariadenia, ako i zodpovedajúci spôsob sú popísané s odkazom na vyobrazenie, kde obr. 1 je axiálny sekčný prierez výhodného vyhotovenia zariadenia podľa tohto vynálezu a na obr. 2 je druhé vyhotovenie zariadenia podľa tohto vynálezu.

obr. 3 je vyhotovenie tretie.

Príklady vyhotovenia vynálezu

Do prvého priestoru 70 zariadenia, ako bolo popísané skôr, sa zavedie 140 ml krvi a 20 ml dusičnanu sodného (USP) ako antikoagulačného činidla. Nasleduje odstreďovanie 2 minúty pri asi 6 000 otáčkach za minútu, tým sa dosiahne oddelenie plazmy od krvných buniek. Za pokračovania odstreďovania kvôli udržaniu oddelenia sa piest zdvihne tak, aby dovolil presun strednej fázy, teda plazmy, do druhého priestoru 75 s tým, že sa dosiahne výťažok asi 60 ml plazmy. Na tú sa pôsobí 30 jednotkami batroxobínu, upraveného biotínom, ktorý sa zavádza do druhého priestoru 75 pomocou horného priestoru 80 puzdra 45, ako to bolo popísané už skôr. Plazma a batroxobín sa miešajú za nižšej rýchlosti, asi 2 000 až 3 000 otáčok za minútu a potom odstreďujú s použitím 9 000 otáčok za minútu.

Nezosieťovaný fibrínový polymérny gel sa vyzráža ako tenká gelová vrstva na stenách valca, rotácia sa preruší. Zvyšná plazmová kvapalina (sérum) sa prevedie späť do prvého priestoru 70. Nasleduje ďalšie dvojnásobné miešanie a odstreďovanie minútu za 9 000 otáčok za minútu kvôli odstráneniu takého množstva séra v geli, ako je to len možné. Po každom z týchto dvoch minútových odstreďovaní sa nadbytok séra prepraví do prvého priestoru 70.

Ďalej sa do druhého priestoru 75 pomocou injekčnej ihly 58 prepraví roztok pufra, obsahujúci 3,5 ml 0,2 M roztoku octanu sodného (pH 4,0) s obsahom 24 mM chloridu vápenatého. V tú dobu sa nasadí odstredivé miešanie, spočívajúce v 5 -10 sekundovom striedavom pretáčaní za asi 3 000 otáčok za minútu, čo sa opakuje smerom ta a späť po 2 minúty. Rozpustí sa tým fibrínový polymérny gel a získa sa roztok s obsahom monomérneho fibrínu. K takto pripravenému roztoku sa pridá avidín/agaróza z nižšieho priestoru 71 puzdra 45. Nasleduje ďalšie odstredivé miešanie vždy 5-10 sekúnd sem a tam pri asi 3 000 otáčkach za minútu v opakovaných cykloch sem a tam po 5 minút. Získaný roztok obsahuje monomér fibrínu a ďalej komplex avidín/agaróza : biotín/batroxobín.

Roztok sa preleje do tretieho priestoru 77 a minútu sa odstredivo filtruje anulárnym filtrom 20 pm Porex pri 9 000 otáčkach za minútu. Získaný roztok monomérneho fibrínu sa naberie do ihly 58 ako to bolo popísané vyššie a obsahuje na 1 ml 25 mg monoméru fibrínu.

Takto pripravený roztok monoméru fibrínu (v tomto prípade fibrínu I) sa repolymerizuje na fibrínové tesnivo tak, že sa pridáva na postihnuté miesto spolu s 0,75 M pufrom uhličitanu a hydrogénuhličitanu sodného v pomere fibrín I: pufor 5:1.

Claims (50)

1. Spôsob oddeľovania fibrínu z plazmy, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje stupne prívodu plazmy do reakčného priestoru, ohraničeného vonkajšou stenou a dnom, na fibrinogén, obsiahnutý v plazme, sa pôsobí činidlom, schopným previesť fibrinogén na nezosieťovaný fibrínový polymér, počas tohto dotykového stupňa sa vystaví reakčný priestor, plazma a činidlo vplyvu dostačujúceho odstredenia, takže sa z uvedenej plazmy oddelí nános, t.j. uvedený nezosieťovaný fibrínový polymér na uvedenej vonkajšej stene ako tenký film gélu.

2. Spôsob podľa nároku 1, na oddeľovanie monomérneho fibrínu z plazmy, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje ďalej stupne:

rozpustenia uvedeného nezosieťovaného fibrínového polyméru pridaním rozpúšťadla do reakčného priestoru s nezosieťovaným gélom polyméru na vonkajšej stene, takže sa dosiahne vznik roztoku monoméru fibrínu.

3. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že akýkoľvek podiel plazmy v uvedenom reakčnom priestore po stupňoch pôsobenia látok a odstreďovania sa odstráni z uvedeného reakčného priestoru prv ako sa rozpustí nezosieťovaný fibrínový polymér.

4. Spôsob podľa nároku 3, vyznačujúci sa tým, že sa plazma odstráni bez toho, aby došlo k porušeniu vrstvy nezosieťovaného fibrínového polyméru na uvedenej vonkajšej stene.

5. Spôsob podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že sa plazma odstraňuje prepravným kanálikom s otvorom v dne uvedeného reakčného priestoru.

6. Spôsob podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že sa uvedený reakčný priestor vystaví dostatočnému tlaku, aby sa vypudila plazma z uvedeného priestoru prepravným kanálikom počas tohto stupňa.

7. Spôsob podľa nároku 6, vyznačujúci sa tým, že ešte zahrňuje stupne:

nastavenie pohyblivej hornej steny v uvedenom reakčnom priestore a pohyb tejto steny smerom dole so zreteľom na zníženie objemu v uvedenom reakčnom priestore, takže sa do tohto priestoru natlačí vzduch v dostatočnej miere kvôli vypudeniu uvedenej plazmy z tohto priestoru prepravným kanálikom.

8. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že sa ako fibrín použije fibrín I, fibrín II alebo des-BB-fibrín.

9. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že ako uvedené činidlo sa použije enzým, podobný trombínu, zvolený zo skupiny trombín, ankrod, akutín, venyyme, asperáza, botropáza, krotabáza, flavorxobín a gabonáza.

10. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že sa ako uvedené rozpúšťadlo použije kyslý roztok pufra.

11. Spôsob podľa nároku 10, vyznačujúci sa tým, že sa použije kyslý roztok pufra s hodnotou pH 1 až 5.

12. Spôsob podľa nároku 11, vyznačujúci sa tým, že sa uvedený kyslý roztok pufra použije s kyselinou zo skupiny kyselina octová, jantárová, glutonová, cysteová, krotónová, itakonová, glutonová, mravčia, asparágová, adipová alebo soľ ktorejkoľvek z nich.

13. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že sa ako rozpúšťadlo použije chaotropné činidlo s neutrálnou hodnotou pH zo skupiny, ktorú tvorí močovina, bromid sodný, hydrochlorid guanidínu, rodanid draselný, ďalej jodid alebo bromid draselný.

14. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že sa uvedený reakčný priestor, nezosieťovaný fibrínový polymér a rozpúšťadlo vystavia účinkom odstredivého miešania.

15. Spôsob podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že roztok fibrínového monoméru má koncentráciu medzi 10 až 30 mg na ml.

16. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že obsahuje ďalej stupne:

prísun krvi do deliaceho priestoru, tento deliaci priestor sa vystaví účinku odstredivých síl dostatočných na koncentrické oddelenie hustejšej fázy krvných buniek a menej hustej fázy plazmy, a udržiava sa použitá odstredivá sila počas prívodu plazmy do uvedeného reakčného priestoru.

17. Spôsob podľa nároku 16, vyznačujúci sa tým, že v deliacom priestore je obsiahnuté antikoagulačné činidlo.

18. Spôsob podľa nároku 16, vyznačujúci sa tým, že uvedený oddeľovací priestor a uvedený reakčný priestor sú usporiadané okolo spoločnej osi jednotného zariadenia.

19. Spôsob podľa nároku 18, vyznačujúci sa tým, že uvedené priestory oddeľuje pohyblivý piest, predstavujúci stropnú stenu uvedeného reakčného priestoru a spodnú dnovú stenu uvedeného oddeľovacieho priestoru.

20. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že je uvedené činidlo vnesené do uvedeného reakčného priestoru pred prísunom plazmy.

21. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že sa uvedené činidlo zavádza do uvedeného reakčného priestoru po prísune plazmy.

22. Spôsob podľa nároku 16, vyznačujúci sa tým, že sa uvedená kvapalná plazma, ktorá zostala v reakčnom priestore po vzniku nezosieťovaného fibrínového polyméru, prevedie do uvedeného oddeľovacieho priestoru prv ako sa rozpustí nezosieťovaný fibrínový polymér v uvedenom rozpúšťadle.

23. Spôsob podľa nároku 22, vyznačujúci sa tým, že sa uvedená kvapalná plazma, zvyšujúca v reakčnom priestore po tvorbe nezosieťovaného fibrínového polyméru prepravuje do uvedeného oddeľovacieho priestoru jedným či viacerými kanálikmi, zasahujúcimi z dna reakčného priestoru do oddeľovacieho priestoru.

24. Spôsob podľa nároku 23, vyznačujúci sa tým, že jeden či viacero kanálikov pre prepravu plazmy je vedených z dna reakčného priestoru do hornej časti uvedeného oddeľovacieho priestoru.

25. Spôsob oddeľovania roztoku fibrínového monoméru z krvi, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje stupne:

prívod krvi do valcovitého deliaceho priestoru, ohraničeného vonkajšou stenou, hornou stenou a pohyblivým piestom je funkciou spodnej dnovej steny, pretáča sa uvedený deliaci priestor okolo pozdĺžnej osi kvôli zaisteniu dostatočnej odstredivej sily k dosiahnutiu koncentrického oddelenia frakcie plazmy a frakcie buniek, takto oddelená plazma sa vedie prepravným kanálikom za pokračovania uvedeného pretáčania do valcovitého reakčného priestoru, nastaveného pozdĺž rovnakej osi ako je uvedený deliaci priestor s tým, že reakčný priestor je ďalej obmedzený dolnou dnovou stenou, vonkajšou stenou, spoločnou s uvedeným deliacim priestorom a uvedeným piestom ako horná stena s tým, že prepravné kanáliky vedú od dna uvedeného reakčného priestoru do deliaceho priestoru s tým, že prívod je ovplyvnený pohybom uvedeného piestu smerom nahor, čím sa zníži objem deliaceho priestoru a prinúti sa plazma k priechodu uvedenými kanálikmi, uvedená plazma sa dostáva do styku s činidlom, schopným previesť fibrinogén v plazme na nezosieťovaný fibrínový polymér s tým, že sa táto reakcia vykonáva za pokračujúceho pretáčania, aby sa totiž uvedený nezosieťovaný fibrínový polymér usadil na vonkajšej stene uvedeného reakčného priestoru, zastaví sa pretáčanie, takže zvyšná plazma stečie dole k dnu reakčného priestoru, natlačí sa dostatočne vzduch do reakčného priestoru s pohybom uvedeného piestu smerom dole, takže zvyšná plazma sa tým prinúti vtiecť do prepravnej trubice a do uvedeného deliaceho priestoru s tým, že nezosieťovaný fibrínový polymér zostáva v podstate neporušený uvedeným miernym pohybom piestu, do reakčného priestoru sa vpustí rozpúšťadlo, a za miešania v reakčnom priestore sa rozpustí nezosieťovaný fibrínový polymér v použitom rozpúšťadle za vzniku roztoku, obsahujúceho monomérny fibrín v uvedenom rozpúšťadle.

26. Zariadenie na oddeľovanie fibrínu z plazmy, vyznačujúce sa tým, že obsahuje:

reakčný priestor s vonkajšou a spodnou, teda dnovou stenou, schopný prijať na odstreďovanie plazmu, zariadenie pre prívod do tohto reakčného priestoru činidla, schopného previesť fibrinogén v plazme na nezosieťovaný fibrínový polymér, prostriedky pre vykonanie odstreďovania v uvedenom reakčnom priestore, obsahujúcom plazmu a uvedené činidlo dostatočnou mierou na oddelenie nezosieťovaného fibrínového polyméru z plazmy a nanesenie nezosieťovaného fibrínového polyméru na vonkajšiu stenu reakčného priestoru.

27. Zariadenie podľa nároku 26, vyznačujúce sa tým, že ďalej obsahuje prostriedky pre prívod rozpúšťadla do uvedeného reakčného priestoru v dostatočnej miere na rozpustenie nezosieťovaného fibrínového polyméru, naneseného na vonkajšej stene, takže sa tým získa roztok fibrínového monoméru.

28. Zariadenie podľa nároku 27, vyznačujúce sa tým, že obsahuje ďalej prostriedky pre prevedenie akéhokoľvek zvyšku plazmy z reakčného priestoru po tvorbe nezosieťovaného fibrínového polyméru.

29. Zariadenie podľa nároku 28, vyznačujúce sa tým, že uvedenými prostriedkami pre prevedenie akéhokoľvek zvyšku plazmy je jeden či viacero kanálikov s otvormi v dne reakčného priestoru.

30. Zariadenie na oddeľovanie fibrínu z krvi, vyznačujúce sa tým, že obsahuje:

prostriedky pre prívod krvi do deliaceho priestoru, valcovitý deliaci priestor, ohraničený hornou stenou, vonkajšou stenou a pohyblivým piestom ako spodnou, dnovou stenou, valcovitý reakčný priestor pod uvedeným deliacim priestorom so spoločnou osou a spoločnou vonkajšou stenou, kde uvedený piest je hornou stenou reakčného priestoru, prostriedky pre zavedenie do reakčného priestoru činidla, schopného previesť fibrinogén na nezosieťovaný fibrínový polymér, prevodné kanáliky z dna reakčného priestoru do deliaceho priestoru na prevod kvapalín medzi obidvoma priestormi pôsobením uvedeného piestu, a prostriedky pre pretáčanie uvedeného zariadenia okolo spoločnej osi, dostačujúce ku koncentrickému oddeleniu plazmy a krvi v deliacom priestore s tým, že sa tak dosiahne dostačujúce nanesenie nezosieťovaného fibrínového polyméru v reakčnom priestore na vonkajšiu stenu.

31. Zariadenie podľa nároku 30, vyznačujúce sa tým, že ďalej obsahuje prostriedky pre zavedenie rozpúšťadla do reakčného priestoru.

32. Zariadenie podľa nároku 30, vyznačujúce sa tým, že uvedené prepravné kanáliky sa nachádzajú v hornej stene uvedeného deliaceho priestoru.

33. Zariadenie podľa nároku 30, vyznačujúce sa tým, že prepravnými kanálikmi je jeden či viacero kanálikov, prechádzajúcich vonkajšími stenami obidvoch priestorov.

34. Zariadenie podľa nároku 30, vyznačujúce sa tým, že obsahuje vo funkcii prepravných kanálikov jeden či viacero tubulárnych kanálikov, prechádzajúcich priamo uvedenými priestormi.

35. Zariadenie podľa nároku 33, vyznačujúce sa tým, že obsahuje vnútorný valcovitý priestor uložený vo vonkajšom valcovitom priestore a kde štrbina v jednom z obidvoch priestorov alebo v oboch z nich tvorí prepravný kanálik vo vonkajšej stene.

36. Zariadenie podľa nároku 35, vyznačujúce sa tým, že vo vnútri vonkajšieho priestoru proti spodnej dnovej stene tohto vnútorného priestoru je umiestnený tanierik, obsahujúci štrbinu na pretiahnutie uvedeného prepravného kanálika z vonkajšej steny reakčného priestoru do stredu, alebo blízko stredu dnovej steny reakčného priestoru.

37. Zariadenie podľa nároku 30, vyznačujúce sa tým, že uvedený piest obsahuje naviac piestový hriadeľ, integrálny s uvedeným piestom a zasahujúcim nahor stredom deliaceho priestoru a otvorom v hornej stene deliaceho priestoru, takže deliaci priestor je tvarovo anulárny.

38. Zariadenie podľa nároku 37, vyznačujúce sa tým, že uvedený piestový hriadeľ je dutý a obsahuje prostriedky pre vedenie rozpúšťadla piestom, kde uvedený piest a výpustné prostriedky sú prispôsobené na zavedenie rozpúšťadla do reakčného priestoru.

39. Zariadenie podľa nároku 38, vyznačujúce sa tým, že uvedenými prostriedkami pre vedenie rozpúšťadla je chránená trubica so spojením kvapalín s druhými kvapalinovými prepravnými prostriedkami v uvedenom pieste.

40. Zariadenie podľa nároku 39, vyznačujúce sa tým, že uvedené prostriedky pre vedenie rozpúšťadla sú ďalej prispôsobené na prijatie a zhromaždenie roztoku monomérneho fibrínu po rozpustení uvedeného nezosieťovaného fibrínového polyméru v uvedenom rozpúšťadle.

41. Spôsob oddeľovania jednej zložky, ako je fibrínový monomér z plazmy, pričom spôsob spočíva v prívode plazmy do priestoru, ohraničeného stenou, kde sa vylúči frakcia s nezosieťovaným fibrinovým polymérom po pridaní vhodného enzýmu, vyznačujúci sa tým, že sa delenie nezosieťovaného fibrínového polyméru od frakcie plazmy vykonáva v uvedenom priestore odstreďovaním, kedy sa nezosieťovaný fibrínový polymér ukladá na vonkajšej stene uvedeného priestoru, zatiaľ čo zvyšná kvapalná frakcia sa zhromažďuje v priestore, oddelenom od vyššie uvedeného priestoru, načo sa frakcia s nezosieťovaným fibrinovým polymérom, zostávajúcim v priestore za nanesenia na stene rozpustí pridaním rozpúšťadla a odstredivým miešaním.

42. Spôsob podľa nároku 41, zahrňujúci prívod krvi s výhodou za prítomnosti antikoagulačného činidla do prvého anulárneho priestoru zariadenia, kde anulárny priestor tvorí valcovitá vonkajšia stena a valcovitá vnútorná stena, obidve usporiadané koaxiálne podľa spoločnej osi, ako i horná stena a dolná stena, kde hornú stenu alebo dolnú stenu tvorí piest, pohyblivý v prvom priestore s tým, že spôsob ďalej zahrňuje odstreďovanie celého zariadenia okolo zmienenej spoločnej osi tak, aby sa v podstate rozdelila krv na frakciu buniek a frakciu plazmy s tým, že vzniknutá frakcia plazmy sa prepraví vplyvom piestu do druhého priestoru, definovaného vonkajšou valcovitou stenou, ktorá vyčnieva koaxiálne s uvedenou spoločnou osou, pričom frakcia s nezosieťovaným fibrínovým polymérom sa oddelí v druhom priestore za pridania vhodného enzýmu, vyznačujúci sa tým, že na plazmu s obsahom fibrinogénu sa pôsobí enzýmom počas odstreďovania tak, že vznikajúci nezosieťovaný fibrínový polymér sa nanáša na valcovitú vonkajšiu stenu druhého priestoru, zatiaľ čo sa kvapalná frakcia, zhromaždená na dne druhého priestoru prepraví vplyvom piestu do prvého priestoru a frakcia s nezosieťovaným fibrínovým polymérom, ktorá zostala v druhom priestore v podstate ako nános na valcovitej stene, sa rozpustí pridaním rozpúšťadla a odstredivým miešaním.

43. Zariadenie pre oddeľovanie zložiek z kvapaliny odstreďovaním okolo centrálnej osi rotácie a obsahujúce prvý anulárny priestor daný vonkajšou a vnútornou vždy valcovitou stenou s tým, že obidve sú usporiadané koncentricky okolo ich rotačnej osi, ako i obsahujúce hornú a dolnú stenu, kde dolnú stenu predstavuje piest, pohyblivý v prvom priestore, vyznačujúce sa tým, že zariadenie ďalej obsahuje druhý priestor spojený s prvým priestorom prvým vedením, kým druhý priestor je definovaný vonkajšou valcovitou stenou koncentricky usporiadanou okolo osi rotácie, a ďalej piestom a dolnou stenou s tým, že druhý priestor je prispôsobený na umiestnenie pod prvým priestorom počas odstreďovania, ďalej s tým, že zariadenie obsahuje tiež prívodné prostriedky pre vedenie krvi do prvého priestoru, ako i zariadenie pre prívod kompozície, ktorá podporuje oddeľovanie, ako i pre spojenie s najmenej jedným zásobníkom pre prívod kvapaliny, keď zariadenie pre prívod je spojené s druhým priestorom druhým vedením a prvé vedenie obsahuje najmenej jeden kanálik medzi otvorom v hornej stene prvého priestoru a otvorom v dne druhého priestoru.

44. Zariadenie podľa nároku 43, vyznačujúce sa tým, že uvedený najmenej jediný kanálik je vedený vnútrom vonkajšej valcovitej steny v prvom a v druhom priestore.

45. Zariadenie podľa nároku 44, vyznačujúce sa tým, že otvor najmenej jedného kanálika v dolnej stene druhého priestoru je prispôsobený stredovo v spojitosti so zahĺbením, tvoreným spodnou stenou.

46. Zariadenie podľa nároku 43, vyznačujúce sa tým, že každý kanálik je tvorený trubičkou, vedúcou priamo telom piestu so zaistením na koncoch ako u stropnej steny prvého priestoru, tak u dolnej steny v tom-ktorom prípade druhého priestoru, kde sa spája s časťami kanálika končiacimi v tom či onom priestore.

47. Zariadenie podľa nároku 44 alebo 45, vyznačujúce sa tým, že prvý i druhý priestor obsahujú spoločnú vonkajšiu valcovitú stenu tvorenú vonkajším a vnútorným valcom, tesne spolu súvisiacimi a tvoriacu medzi nimi axiálne prebiehajúci kanálik s tým, že valce sú ukončené na jednom konci stenou, obsahujúcou otvor dovoľujúci priechod piestovej tyčinky spojenej s vlastným telom piestu s tým, že telo piestu tvorí spodnú stenu prvého priestoru a oddeľuje uvedený prvý priestor od druhého, kde sú kanáliky medzi konečnými stenami valcov a zasahujú bezprostredne do otvorov piestovej tyčinky.

48. Zariadenie podľa nároku 46, vyznačujúce sa tým, že spodnú stenu druhého priestoru tvoria dve tesne naľahlé časti steny, definujúce medzi sebou kanálik, ktorý na jednom konci sa spája s kanálikom vonkajšej valcovitej steny a na druhom konci ústi do druhého priestoru bezprostredne u centrálnej časti spodnej steny.

49. Spôsob podľa nárokov 1 a 16 pre delenie akejkoľvek polymerovateľnej alebo vyzrážateľnej zložky z krvi alebo plazmy, kde vhodné činidlo je schopné previesť látku v krvi alebo v plazme na uvedenú zložku.

50. Spôsob podľa nárokov 1 a 16, kde uvedené rozpúšťadlo je schopné rozpustiť uvedenú zložku za vzniku jej roztoku.