SK36697A3

SK36697A3 - Use of muramyl peptide compounds

Info

Publication number: SK36697A3
Application number: SK366-97A
Authority: SK
Inventors: Roger Aston; Iouri Maitchouk; Tatyana M Andronova
Original assignee: Peptech Uk Ltd
Priority date: 1994-09-21
Filing date: 1995-09-20
Publication date: 1997-11-05
Also published as: IL115391A0; HUT77741A; EP0782454A1; BG101325A; AU3527495A; JPH10506387A; ZA957997B; CA2200570A1; CZ86197A3; WO1996009063A1; GB9419011D0; KR970706015A

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka ošetrenia očných chorôb a obzvlášť ošetrenia alebo prevencie zjazvenia rohovky, ktoré môže byť spojené s bakteriálnymi alebo vírusovými očnými infekciami.

Doterajší stav techniky

Oko je relatívne zložitý orgán a je citlivé voči mnohým typom vírusových a bakteriálnych infekcií a tiež voči neinfekčným stavom. Príkladom môže byť zápal spojiviek, ktorý predstavuje infekciu spojiviek a môže byť spôsobený baktériami, vírusmi, inými mikroorganizmami, ako je Chlamydia alebo alergiou. Poruchy rohovky zahrňujú keratitis, ktorá môže byť spôsobená baktériami, ako sú stafylokoky, streptokoky, pseudomonády alebo enterobaktériami alebo vírusmi ako je Herpes simplex. Systémové vírusové ochorenia, ako sú osýpky, mumps a ovčie kiahne, môžu byť rovnako príčinou keratitis, ale tá môže byť tiež spôsobená jednoducho suchom v očiach. Určité očné stavy, najmä keratitis, iné stavy rohovky a poruchy alebo infekcie očných viečok môžu vyústiť do zjazvenia rohovky, ktoré môže zhoršiť zrak a obmedziť pohyb očných viečok.

Mnoho očných stavov sa môže ošetriť známymi antibakteriálnymi a antivírusovými liekmi, ale hoci sú tieto lieky účinné, k zjazveniu rohovky napriek tomu môže dôjsť. Predpokladá sa, že je to spôsobené migráciou lymfocytov a makrofágov do rohovky. Aktivita lymfocytov a makrofágov môže zahrňovať sekréciu cytokínov, ktoré môžu spôsobiť aktiváciu fibroblastov, čo neprimeraným spôsobom ovplyvňuje kolagén a spôsobí zjazvenie rohovky. Zjazvenie môže byť tiež spôsobené iným mechanizmom.

V súčasnosti sa však zistilo, že rôzne muramylpeptidové deriváty sú užitočné pri ošetrení oftaimických stavov a obzvlášť sa môžu spolupodieľať na liečení alebo prevencii zjazvenia rohovky.

Už dlho je známe, že nešpecifická stimulácia imunitného systému sa môže dosiahnuť vystavením systému prítomnosti baktérií alebo zložiek získaných zo stien bakteriálnych buniek. Konkrétne zlúčeniny zodpovedné za túto aktivitu boli identifikované ako peptidy bunečnej steny, ktoré obsahujú cukry a ďalšia biochemická analýza peptidu ich určila ako peptidogiykánovú zložku bunečnej steny. Zistilo sa, že najmenšia účinná syntetická molekula je N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutamín (Mersera kol., Biochem. Biophys. Res. Comm. 66, 1316 (1975)). Bola popísaná schopnosť tejto zlúčeniny (teraz často označovanej ako prototyp muramyldipeptidu alebo prototyp MDP) chrániť myši pred bakteriálnou infekciou (Klebsielia pneumonia) (Chedid a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 74, 2089 (1977)).

Následne sa syntetizovala široká škála analógov prototypu muramyldipeptidu, pričom niektoré z nich boli navrhnuté na posilnenie imunitných funkcií alebo na nešpecifickú stimuláciu imunitného systému. Tieto analógy i sám prototyp MDP sú muramylpeptidové zlúčeniny.

Rad autorov sa zaoberal použitím muramylpeptidov a ich analógov ako adjuvans, napríklad Azuma a kol. (Adv. Exp. Med. Biol. 319, 253 až 263 (1992)), ktorý uvádza, že zlúčeniny MDP sa hodia na použitie ako imunoadjuvans pre posilnenie antigenity rekombinantných alebo zložkových vakcín.

Allison a kol. (Semin. Immunol. 2 (5), 369 až 374 (1990)) uvádza, že zmesi adjuvans zložené zo syntetických analógov MDP v emulzii s polymérom skvalen - Pluronic vyvolávajú imunitu sprostredkovanú bunkami a protilátkami ochranných izotypov a zvyšujú odozvu na rôzne antigény.

Búrke (Rev. Infect. Dis., 13, Suppl. 11, 906 až 911, november december 1991) uvádza, že MTP-PE je obzvlášť vhodný ako adjuvans s vakcínou podjednotky vírusu Herpes simplex.

Allison a kol. (Mol. Immunol., 28 (3), 279 až 284 (1991)) sa zaoberal použitím analógov MDP s antigénmi na vyvolanie imunity sprostredkovanej bunkami vo vakcínach vírusu chrípky, vírusu hepatitídy B, vírusu Herpes simplex, lentivírusu a tumoru.

Brynestad a kolektív, J. Virol., 64 (2), 680 až 685 (1990) uvádza, že použitím peptidu odvodeného z Herpes simplex v spojení s nosičom na báze mastnej kyseliny vykazuje zvýšenú imunogenitu u myší, najmä keď je začlenený do lipozómov a sprevádzaný analógom MDP ako imunomodulátorom.

Ishihara a kolektív, Vaccine, 7 (4), 309 až 313 (1989) uvádza, že MDPLys obnovuje odolnosť voči infekcii typu 1 vírusu Herpes simplex u myší ošetrených cyklofosfamidom.

Ikeda a kol., Antiviral Res., 5 (4), 207 - 215 (1985) tiež ukazuje, že MDP a MDP-Lys boli schopné zvýšiť nešpecifickú odolnosť k vírusovým infekciám.

Celý rad iných správ popisuje použitie rôznych muramylpeptidových derivátov ako adjuvans.

Naviac existuje v stave techniky podnet, že niektoré deriváty muramylpeptidu, najmä MTP-PE, môžu zvyšovať antivirusovú aktivitu niektorých antivírusových činidiel.

Gangemi a kol., J. Infect. Dis., 155 (3), 510 - 517 uvádza schopnosť MTP-PE vylepšovať terapeutické vlastnosti širokospektrálneho antivírusového lieku ribavirínu. Účinok bol obzvlášť výrazný s MTP-PE enkapsulovaným v lipozómoch.

Avšak v žiadnom z týchto dokumentov nie je uvedené, že muramylpeptidové zlúčeniny môžu byť obzvlášť použité pri liečení oftalmických stavov a v skutočnosti sa v stave techniky predpokladá, že použitie analógov muramyldipeptidu môže byť očiam škodlivé. Napríklad Lawrence a kol. v Exp. Eye Res., 54 (4), 105 - 107 (1992) diskutuje o zrušení anatomických bariér medzi ventrálnym segmentom oka a krvným riečiskom počas zápalu vyvolaného MDP. Kufoy a kol. (Exp. Eye Res. 50 (2), 189 - 195 (1990) tiež študoval moduláciu krvnej vodnej bariéry vyvolanú MDP a Waters a kol. (Infect. Immun., 51 (3), 816 - 825 (1986) uvádza, že pomocou MDP bol vyvolaný intraokulárny zápal u králikov. O tomto muramylpeptide je známe, že má škodlivý účinok na oko, a rovnaký účinok sa môže očakávať u jeho derivátov. Avšak teraz sa zistilo, že metóda ošetrenia oftalmických stavov, ktorá zahrňuje podávanie účinného množstva muramylpeptidového derivátu pacientovi trpiacemu na oftalmický stav, má neočakávane pozitívny účinok.

Jedno vyhotovenie vynálezu predstavuje použitie muramylpeptidovej zlúčeniny na výrobu lieku pre ošetrenie oftalmických chorôb a stavov.

Výraz muramylpeptidová zlúčenina má pre odborníka v odbore jasný význam. Obzvlášť predstavuje zlúčeninu obsahujúcu jeden alebo viacero zvyškov cukru, aspoň jeden zvyšok cukru, ktorý často bude zvyškom muramovej kyseliny, ktorý je substituovaný aspoň jednou alebo viacerými (a zvyčajne dvoma alebo viacerými) zvyškami aminokyselín. Muramylpeptidovými zlúčeninami môžu byť peptidoglykány, ktoré sú schopné zvyšovať bunečnú antigénnu odozvu u cicavcov a ktoré sú prototypmi muramyldipeptidu (MDP) alebo jeho analógmi alebo derivátmi.

Oftalmické stavy, pri ktorých môžu byť použité muramylpeptidové zlúčeniny, zahrňujú zápal spojiviek, poruchy rohovky ako je keratitis, poruchy očných viečok, vysýchanie očí a zranenie očí.

Zistilo sa, že muramylpeptidové zlúčeniny sú obzvlášť užitočné pri liečení stavov, ako je keratitis a keratouveitis, najmä keď sú spôsobené vírusovou, bakteriálnou alebo chlamydiálnou infekciou. Jedna relatívne bežná forma keratitis je spôsobená vírusom Herpes simplex a je známa ako herpetická stromálna keratitis. Herpetická keratouveitis môže byť tiež spôsobená vírusom Herpes simplex a muramylpeptidové zlúčeniny sa teraz ukazujú byť obzvlášť účinné pri liečení oboch týchto stavov.

Je obzvlášť prekvapujúce, že muramylpeptidové zlúčeniny sú vhodné na ošetrenie keratouveitis, pretože, ako bolo uvedené vyššie, je známe, že prototyp muramylpeptidu spôsobí uveitis.

Jedným dôvodom užitočnosti muramylpeptidových zlúčenín pri ošetrení stavov, ako je herpetická stromálna keratitis, je, že sú účinné ako antivírusové činidlá. Avšak ďalšou výhodou je, že sú schopné zabrániť alebo redukovať rozsah zjazvenia rohovky, ktoré často sprevádza tento stav. Zistilo sa, že pri podávaní pacientom trpiacim na herpetickú stromálnu keratitis, muramylpeptidové zlúčeniny urýchľujú vymiznutie stromálneho poškodenia a zvyšujú rýchlosť zlepšovania videnia.

Mechanizmus, ktorým muramylpeptidové zlúčeniny spôsobujú tieto prekvapujúce a prospešné účinky, nie je celkom jasný. Podľa jednej teórie nastáva tento efekt vďaka antivírusovým účinkom týchto zlúčenín, lebo rýchlejšie vylúčenie vírusovo nakazených buniek môže redukovať periódu infekcie, a tak možnosť zjazvenia. Podľa inej teórie muramylpeptidové zlúčeniny môžu regulovať aktivitu zápalových cytokínov, a tak inhibovať stimuláciu fibroblastov a ukladanie jazvových tkanív. Účinnosť tohto vynálezu však nie je ovplyvnená presnosťou alebo iným aspektom týchto teórií.

Muramylpeptidové deriváty sú preto tiež vhodné pre spôsob ošetrenia alebo prevencie zjazvenia rohovky spojeného s oftalmickými chorobami, pričom tento spôsob zahrňuje podávanie účinného množstva muramylpeptidovej zlúčeniny pacientovi trpiacemu na oftalmickú chorobu.

Ako druhý aspekt vynálezu sa predpokladá použitie muramylpeptidovej zlúčeniny na prípravu lieku pre ošetrenie alebo prevenciu zjazvenia rohovky spojené s oftalmickými chorobami.

Použitie muramylpeptidovej zlúčeniny spolupôsobí pri ošetrení akéhokoľvek oftalmického stavu, ktorého pravdepodobným následkom je zjazvenie, ale vyššie uvedené oftalmické choroby sú tie, v ktorých muramylpeptidové zlúčeniny sú obzvlášť vhodné pri prevencii zjazvenia.

Vďaka svojej schopnosti zabrániť zjazveniu pri rôznych oftalmických stavoch sú muramylpeptidové zlúčeniny obzvlášť účinné pri použití v kombinácii s druhým liekom, ktorý je použitý pri ošetrení tohto stavu, ale ktorý nemôže redukovať alebo predchádzať zjazveniu spôsobom, akým to môže vykonať muramylpeptidová zlúčenina.

Treťou úlohou vynálezu je poskytnúť produkt obsahujúci muramyldipeptid a druhú liečivú látku ako kombinovaný prípravok pre súčasné, oddelené alebo následné použitie pri ošetrení oftalmickej choroby alebo stavu.

Druhou liečivou látkou môže byť akákoľvek látka, ktorá je vhodná pre ošetrenie oftalmického stavu, tieto látky sú dobre známe odborníkovi v odbore očného lekárstva a zahrňujú antivírusové činidlá, antibakteriálne činidlá, steroidy a nesteroidné protizápalové látky.

Stavy, pre ktoré je tento aspekt vynálezu obzvlášť užitočný, sú tie, ktoré sú uvedené vyššie v súvislosti s prvým a druhým aspektom vynálezu.

Je tak zrejmé, že tento vynález bude tiež užitočný pri spôsobe ošetrenia oftalmických stavov, pričom tento spôsob zahrňuje podávanie účinného množstva muramylpeptidovej zlúčeniny v kombinácii s účinným množstvom druhej liečivej látky pacientovi trpiacemu na oftalmický stav.

Ako bolo uvedené vyššie, druhá liečivá látka môže byť vybraná zo skupiny zahrňujúcej antivírusové činidlá, antibakteriálne činidlá, steroidy a nesteroidné protizápalové látky.

Medzi činidlá, ktoré sú obzvlášť vhodné pre toto vyhotovenie vynálezu, patrí acyklovírus, idoxuridín, chloramfenikol, chlórtetracyklín, kyselina fuzidová, gentamycin, neomycín, oflaxacín, polymixín, tetracyklín, tobramycín, betametazón, clobetazón, dexametazón, fluórmetiolón, hydrokortizón, prednizolón a flurbiprofén. Z uvedených látok sú výhodné acyklovírus alebo idoxuridín.

Mnoho muramylpeptidových zlúčenín vhodných pre tento vynález spadá do všeobecného vzorca I:

i kde:

R¹ predstavuje atóm vodíka alebo acylovú skupinu obsahujúcu 1 až 22 uhlíkových atómov, r2 predstavuje atóm vodíka alebo acylovú skupinu obsahujúcu 1 až 22 uhlíkových atómov, r3 predstavuje atóm vodíka alebo alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 6 atómov uhlíka, r4 predstavuje alkylovú skupinu obsahujúcu 1 až 21 atómov uhlíka alebo arylovú skupinu obsahujúcu 6 alebo 10 atómov uhlíka, r5 predstavuje atóm vodíka, a

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného z 2 až 6 aminokyselinových zvyškov, pričom aspoň jeden zo zvyškov je pripadne substituovaný lipofilnou skupinou.

Výhodné acylové skupiny pre R** a R^ sú acylové skupiny obsahujúce 1 až 5 uhlíkových atómov, ako je acetyl; pričom je žiaduce, aby počet uhlíkov v acylovej skupine nezahrňoval karbonylovú časť. Výhodné alkylové skupiny pre r3 sú alkylové skupiny obsahujúce 1 až 4 atómy uhlíka, ako je metyl a etyl. Výhodné alkylové skupiny sú pre R^ alkylové skupiny obsahujúce 1 až 6 atómov uhlíka, výhodne alkylové skupiny obsahujúce 1 až 4 atómy uhlíka, ako je metyl alebo etyl; s výhodou arylovú skupinu predstavuje fenyl.

L-alanyl L-valyl L-leucyl L-izoleucyl L-a-aminobutyryl L-seryl L-treonyl L-metionyl L-cysteinyl L-fenylalanyl L-tyrozyl

Substituent R predstavuje výhodne mono-, di- alebo tripeptid. Proximálny peptidový zvyšok (alebo jediný peptidový zvyšok, pokiaľ je samotný) je výhodne tvorený l-aminokyselinou. Ako príklad možno uviesť:

L-tryptofanyl L-lyzyl L-ornityl L-arginyl L-histidyl L-glutamyl L-glutaminyl L-aspartyl L-asparaginyl L-prolyl

L-hydroxyprolyl

Výhodný je L-alanyl a L-treonyl.

Ďalšia aminokyselina z proximálneho konca peptidu má výhodne Dkonfiguráciu. Je výhodne kyslá a môže to byť kyselina D-glutamová alebo Dasparágová alebo ich mono-, di- alebo zmesné alkylestery obsahujúce 1 až 22 uhlíkových atómov (výhodne 1 až 6 uhlíkových atómov), amidy alebo alkylamidy obsahujúce 1 až 4 uhlíkové atómy. (Výraz zmesný je použitý pokiaľ jedna karboxylová skupina je amidovaná a druhá esterifikovaná.) S výhodou sa používajú D-izoglutamín a D-glutamát.

Tretí aminokyselinový zvyšok z proximálneho konca reťazca, ak je prítomný, je výhodne v konfigurácii L, ako je uvedené vyššie v súvislosti s proximálnym aminokyselinovým zvyškom. Výhodné sú L-alanyl a L-lyzyl.

Aminokyselinový zvyšok alebo lineárny peptid je prípadne substituovaný aspoň jednou lipofilnou skupinou. Lipofilnou skupinou môže byť acylová skupina obsahujúca 10 až 22 atómov uhlíka ako je stearoyl alebo di-acyl-snglycero-3'- hydroxyfosforyloxyskupina obsahujúca v acyle 10 až 22 atómov uhlíka, kde napríklad každá z acylových skupín obsahujúcich 10 až 22 atómov uhlíka môže byť palmitoylová skupina. Lipofilná skupina môže byť alternatívne (alebo naviac, lebo môže byť prítomná viac ako jedna substitúcia) esterová skupina obsahujúca 1 až 10 atómov uhlíka, ako je esterová skupina obsahujúca 2 až 6 atómov uhlíka; ako príklad možno uviesť butylesterovú skupinu.

Ako príklady muramyldipeptidov v rámci všeobecného vzorca I možno uviesť:

muroctazín, inak známy ako MDP-Lys (L18), (N2-(N-acetylmuramyl- L-alanyl-Dizoglutaminyl)-N6-stearoyl-L-lyzin);

MTP-PE (N-acetyl-muramyl-Ľ-alanyl-D-izoglutaminyl-L-alanyl-2- (ľ.Z-dipalmitoyl-sn-glycero-S'-hydroxyfosforyloxyJetylamid, monosodný);

murabutid (N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamín-a-N-butylester) a t-MDP (N-acetylmuramyl-L-treonyl-D-izoglutamín).

Príprava muroctazínu je popísaná v patentovom spise EP-A-0 021 367 a US-A-4 317 771. Príprava MTP-PE je popísaná v EP-A-0 025 495. Príprava murabutidu je popísaná v Lefrancier a kol., J. Med. Chem., 25, 87 (1982).

Príprava t-MDP môže byť vykonaná metódami známymi zo stavu techniky. Ako príklady patentových prihlášok, ktoré uvádzajú detaily prípravy muramylpeptidových zlúčenín, možno v zásade uviesť BE-A-0 834 753,

834 754,

922 533,

358 159, 54 063 016,

BE-A-0 847 103, DE-A-2 747 379, FR-A-2 375 249, JP-A-54 073 729,

BE-A-0 849 214, DE-A-2 912 865, EP-A-0 004 512, JP-A-55 019 236,

DE-A-2 710 455, FR-A-2 355 505, EP-A-0 002 677, US-A-4 082 735 a

BE-ADE-AFR-AJP-AUS-A10

082 736. (Príprava prototypu muramyldipeptidu je popísaná v DE-A2 450 355 a US-A-4 235 771). Všetky dokumenty uvedené v tejto špecifikácii sú tu použité ako odkaz.

Nie všetky muramyldipeptidy vhodné pre tento vynález spadajú do všeobecného vzorca I. Mnoho spadá do všeobecného vzorca II, ktorý predstavuje veľmi výhodnú skupinu zlúčenín pre použitie podľa tohto vynálezu:

HOCHí

NHAc

OH

II kde:

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného 2 až 6 aminokyselinovými zvyškami, pričom aspoň jeden zo zvyškov je prípadne substituovaný lipofilnou skupinou, a

n je 1 alebo 2.

Výhodné hodnoty R sú uvedené vyššie vo vzťahu k všeobecnému vzorcu I. Obzvlášť výhodné je, pokiaľ peptid R zodpovedá peptidu v prototype MDP (L-Ala-D-isoGIn). Alternatívne, v inom výhodnom vyhotovení, môže R predstavovať L-Ala-D-Glu.

Výhodná hodnota n je 1.

Zlúčeniny všeobecného vzorca II sú popísané v patentovom spise US-A4 395 399 a výhodné vyhotovenia uvedené v tomto dokumente predstavujú výhodné vyhotovenia tiež v tomto vynáleze. Naviac v tomto vynáleze môže byť skupina R lipofilné substituovaná, ako je popísané vyššie.

Jedna z najvýhodnejších zlúčenín pre použitie podľa vynálezu spadá do všeobecného vzorca II a predstavuje N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-Nacetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutamín (GMDP), ktorý má štruktúru:

HOCH;

NHAc

GMDP

Táto zlúčenina (zlúčenina II v US-A-4 395 399), tiež známa ako glykopín, už prešla predklinickými testami toxicity a farmakokinetickými pozorovaniami požadovanými pre povolenie pre klinické použitie v ZSSR (bývalom). Akútna toxicita u myší, meraná testom LD50 je 7 g/kg. Toto číslo ukazuje, že zlúčenina je takmer rádovo menej toxická ako muroctazín, ktorý má hodnotu LD50 u myší 625 mg/kg.

Zatiaľ čo pyrogenicita GMDP je dostatočne nízka preto, aby bol vhodný pre použitie podľa tohto vynálezu a nebráni jeho klinickému využitiu pre iné účely, môže byť za určitých okolností výhodné použitie dokonca ešte menej pyrogénneho analógu. Takýto analóg je dostupný a je ním N-acetyl-Dglukózaminyl-(B1-4)-N- acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamová kyselina (GMDPA), ktorý zodpovedá zlúčenine III z patentového spisu US-A-4 395 399 a ktorý má nasledujúcu štruktúru:

GMDP-A

Iné výhodné zlúčeniny v rámci všeobecného vzorca II zahrňujú:

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-L-izoglutamin (GMDP-LL), ktorý má štruktúru:

GMDP-LL n-butylester N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D glutamínu (GMDP-OBu), ktorý má štruktúru:

HOCHj

NHAc

CHCO-L-Ala-D-GIn-OBu

I

CHj

GMDP-OBu

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutaminyl-Llyzín (GMDP-Lys), ktorý má štruktúru:

HOCH

NHAc

GMDP-Lys

N^a-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl D-izoglutami nyl]-N^E-stearoyl-L-lyzín (GMDP-Lys(St)), ktorý má štruktúru:

Lys-COC,jHj_S'Na*

GMDP-Lys(St)

Iné vhodné zlúčeniny sú:

N^a-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(S1--4)-N-acetylmuramyl-Lalanyl-Y-D-glutamyl]-N^E-stearoyl-L-lyzín (GMDPA-Lys(St)), ktorý má štruktúru:

GMDPA-Lys(St) dibenzylester N-acetyl-D-glukózamínyl-(B1~4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-Dglutamovej kyseliny (GMDPA (OBzl)2), ktorý má štruktúru:

GMDPA(OBzl)2

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-N-metyl-L-alanyl-L-izoglutamin (Me-GMDP). ktorý má štruktúru:

Me-GMDP

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-(B1“4)-N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D-izoglutamín) ((GMDP)2). ktorý má štruktúru:

HOCH,

CHCO-L-Ala-D-isoGIn

I

CH,

Λ

(GMDP)2

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-(B1--4)-N-acetyl-D-glukóz aminyl-(B1“4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D-glutarnová kyselina) ((GMDPA)2), ktorý má štruktúru:

HOCH,

HOCHj

NHAc

CHCO-L-Ala-D-Glu

I

CH,

NHAc

HOCH,

/

NHAc

CHCO-L-Ala-D-Glu

I

CH, (GMDPA)₂

N-acetyl-D-glukózaminyl-(ft1--4)-N-acetylmuramyl-(B1--4)-N-acetyl-Dglukózaminyl-(R1--4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D-izoglutaminyl-L-lyzín) ((GMDP Lys)2), ktorý má štruktúru:

HOCH, / Ý^H'íy-r \ NHAc

HOCHj ° CHCO-L-Ala-D-isoGIn-L-Lys J— 0

CH,

NHAc

CHCO-L-Ala-D-issGIn-L-Lys

I

CH, (GMDP Lys)₂

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1~4)-N-acetylmuramyl-(B1--4)-N-acetyl-Dglukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-bis-[L-alanyl-D-izoglutaminyl-N^E-stearoyl L-lyzín] ([GMDP-Lys(St)]2), ktorý má štruktúru:

HOCH,

W / e ψ / ' \ NHAc ° CHCO-L-Ala-D-isoGln-L-Lys-COC₁₇H_M'Na*

CH,

NHAc

HOCH,

HO

/

NHAc

CHCO-L-Ala-0-isoGln-L-Lys-C0C„H,_s'Na'

CH,

NHAc [GMDP-Lys (St) ]₂

-adamantylester N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1 ~4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D izoglutamínu (GMDP-Ad), ktorý má štruktúru:

HOCHj

NHAe

GMDP-Ad

L-treonyl-N^E[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-y-Dizoglutaminyl]-L-lyzyl-L-prolyl-L-arginín (GMDP-tuftsin E), ktorý má štruktúru:

Lys(Thr)-Pro-Arg

GMDP-tuftsín E

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-y-D-izoglutaminyl]-L· treonyl-L-lyzyl-L-prolyl-L-arginín (GMDP-tuftsín A), ktorý má štruktúru:

GMDP-tuftsín A

N-acetyl-D-glukózaminyl-(R1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-a-D-glutamyl-L-lyzylL-treonyl-N^E-stearoyl-L-lyzyl-L-prolyl-L-arginín (lipofilný GMDPA-tuftsín), ktorý má štruktúru:

HOCH,

HOCHj

NHAc

ČHCO-L-Ala-D-Glu-Thr-Lys(COC,7Hji)-Pro-Arg

I

CHj

HO

NHAc lipofilný GMDPA-tuftsín

N^E-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-L-alanyi-ý-Dizoglutaminyl]-L-lyzyl-L-histidyl-L·glycínamid(GMDPA-burzín)_t ktorý má štruktúru:

HOCH;

NHAc

GMDPA-burzín

N-acetyl-D-glukózaminyl-(S1~4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutaminyl]-Lglutamyl-L-tryptofán (GMDP-tymogén I), ktorý má štruktúru:

GMDP-tymogén I

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutaminyl-saminohexanoyl-L-glutamyl-L-tryptofán (GMDP-tymogén II), ktorý má štruktúru:

HOCK;

NHAc

GMDP-tymogén II

N^a-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-L-alanyl-Dizoglutaminyl]-N^E-stearoyl-L-lyzyl-L-glutamyl-l_-tryptofán (GMDP-tymogén III), ktorý má štruktúru:

hoch₂

GMDP-tymogén III

N-acetylmuramyl-L-treonyl-D-izoglutamín (THR-MDP), ktorý má štruktúru:

HOCH,

Thr-MDP n-butylester N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamínu (Murabutid) ktorý má štruktúru:

CKCO-L-Ala-D-GIn-OC.H.

I

CHj

Murabutid

Vo vyššie uvedených štruktúrach sú použité nasledujúce skratky:

Bzl - benzyl

Me - metyl

Ahx - ε-aminohexanoyl.

Najvýhodnejšia zlúčenina je GMDP nasledovaná GMDP-A a murabutidom.

Glukózaminyl-muramyldipeptidy v rozsahu všeobecného vzorca II môžu byť pripravené relatívne lacno a v dostatočne veľkom množstve spôsobom popísaným v patentovom spise US-A-4 395 399. Uvedený spôsob prípravy je založený na extrakcii a purifikácii disacharidovej zložky z baktérie Micrococcus lysodecticus a jej následnom chemickom naviazaní na dipeptid syntetizovaný napríklad spôsobom bežným v odbore syntézy peptidov. Disccharid môže byť tiež rovnako dobre syntetizovaný za použitia štandardnej metódy chémie cukrov.

Účinnosť muramylpeptidových zlúčenín podľa vynálezu bola demonštrovaná použitím orálnej aplikácie. Zloženie tabletiek prípravku v tomto prípade zahrňuje farmaceutický prijateľný excipient, konkrétne laktózu, škrob, polyvidón, stearát horečnatý a mastenec. Muramylpeptidové zlúčeniny môžu byť prispôsobené podľa požiadaviek pre trvalé alebo oneskorené uvoľňovanie. Inú možnosť predstavuje gastrický povlak.

Presné orálne dávkovanie pre podávanie bude vždy závisieť od klinického alebo ošetrujúceho lekára. V závislosti od toho môže byť pokladaná za prijateľnú denná orálna dávka v rozsahu od 0,1 do 50 mg na deň (alebo na dávkovú jednotku), pričom výhodná dávka môže byť 0,5 až 50 mg. Za optimálnu dennú dávku sa pokladá množstvo 1 až 20 mg.

Naviac sa môže odlišovať doba podávania. Doba podávania bude samozrejme závisieť v určitom rozsahu od úrovne dávkovania, to znamená, že nižšia dávka vedie k dlhšej požadovanej dobe podávania. Všeobecne platí, že doba podávania v rozmedzí 1 až 60 dní, výhodne 1 až 30 dní a obzvlášť výhodne 1 až 14 dní. Naviac podávanie nemusí byť nevyhnutne každodenné: tu uvádzaný príklad 2 používa systém podávania GMDP a tri dni jedenkrát denne, tri dni bez podávania GMDP, potom po dobu ďalšie tri dni podávanie GMDP jedenkrát denne. Iné obmeny, napríklad podávanie každý druhý deň, sa môžu tiež použiť.

Pretože sú muramylpeptidové zlúčeniny určené na ošetrenie oftaimických stavov, je tiež možná ich formulácia pre topické podávanie do oka. Takáto formulácia bude všeobecne obsahovať farmaceutický prijateľný excipient a ďalšie látky zvyčajné u týchto kompozícií.

Takéto formulácie sú nové, a preto sú v štyroch aspektoch tohto vynálezu popísané farmaceutické kompozície obsahujúce muramylpeptidové zlúčeniny spolu s farmaceutický prijateľným excipientom alebo nosičom; vyznačujú sa tým, že kompozícia je formulovaná pre topické podávanie do oka.

Pri formulácii pre topické podávanie do oka môže kompozícia obsahovať jeden alebo viacero muramylpeptidov vo farmaceutický prijateľnej oftalmickej masti alebo kréme. Alternatívne môže byť kompozícia vo forme kvapiek, ktoré budú obsahovať vhodné pufry a konzervačné prostriedky bežné v odbore a známe odborníkovi v odbore.

Presné dávkovanie pre topické podávanie bude vždy závisieť od klinického alebo ošetrujúceho lekára. V závislosti od toho múze byť prijateľná denná dávka pre topické kompozície v rozsahu od 0,1 do 100 mg na deň (alebo na dávkovú jednotku), pričom výhodná dávka môže byť 0,5 až 50 mg na deň (alebo na dávkovú jednotku). Za optimálnu dennú dávku sa pokladá množstvo 1 až 20 mg.

Vynález bude ďalej doložený v nasledujúcich neobmedzujúcich príkladoch a obrázkoch, v ktorých:

Obrázok 1: je graf ukazujúci porovnanie účinkov muramylpeptidovej zlúčeniny GMDP a placeba na vymiznutie symptómov očnej herpetickej infekcie.

Obrázok 2: graf ukazujúci porovnanie účinkov muramylpeptidovej zlúčeniny GMDP a placeba na zahojenie epitelu pacientov trpiacich na dendritickú keratitis.

Obrázok 3: je graf ukazujúci porovnanie účinkov muramylpeptidovej zlúčeniny

GMDP a placeba v prípade kompletného zmiznutia klinických symptómov u pacientov s herpetickou stromálnou keratitis.

Príklady vyhotovenia vynálezu

Príklad 1

Použitie GMDP pri liečení oftalmickej herpetickej infekcie

Štúdia bola vykonávaná na pacientoch s herpetickými oftalmickými chorobami. Štúdie sa zúčastnilo 25 pacientov vo veku 16 až 60 rokov. V skupine bolo 16 mužov a 9 žien (tabuľka 1).

Pacienti boli rozdelení do dvoch skupín. Prvá skupina vykazovala dendritickú herpetickú keratitis (DK) so stromálnou léziou (13 pacientov) a druhá skupina vykazovala herpetickú keratouveitis (KU) (12 pacientov).

Infekcia u pacientov s dendritickou keratitis so stromálnymi léziami bola sprevádzaná zasiahnutím očných viečok a spojiviek, prítomnosťou vriedkov na epitele rohovky a povrchovými stromálnymi vrstvami vo forme rozvetvenia, perifokálnou stromálnou infiltráciou. U niektorých pacientov boli pozorované príznaky descemetitis a iritis.

Pred začiatkom testov boli prevládajúce symptómy u pacientov s keratouveitis stromálny zápal sprevádzaný edémom, infiltrácia a zápal očného vaskulárneho obalu. Stupeň závažnosti choroby sa pohyboval od 14 do 21 bodov.

Klinické hodnoty na začiatku štúdie u pacientov kontrolnej skupiny a skupiny ošetrenej GMDP sú zhrnuté v tabuľke 1.

Pre kontrolu bolo pri štúdii použité placebo, pričom testy boli dvojnásobne slepé a pacienti dostávali po dobu 10 dní buď 1 mg GMDP za deň alebo identické tabletky placeba. Všetci pacienti, ktorí sa zúčastnili štúdie, sa tiež podrobovali lokálnej a systematickej terapii prispôsobenej závažnosti a klinickej forme ochorenia.

Pred začiatkom štúdie boli vykonané nasledujúce procedúry: zhromaždenie dát o prípade, klinické testy, zistenie teploty, odohranie vzorky krvi pre klinické analýzy (hemoglobín, celkový počet buniek, ESR), odohranie vzoriek zo spojiviek infikovaného oka pre bakteriologické analýzy.

Vyšetrenie očí zahrňovalo testovanie zrakovej ostrosti, očnú biomikroskopiu po vyfarbení fluoresceínom, vyšetrenie vnútorného oka, zisťovanie intraokulárneho tlaku pomocou Maklokovho tonometra a, ak to nebolo vzhľadom k stavu oka možné, pomocou palpácie.

Imunologické vyšetrenia zahrňovali: odohranie sterov zo spojiviek infikovaného oka, odohranie vzoriek sĺz z infikovaného a neinfikovaného oka a vzoriek krvi.

Po vykonaní kompletnej sady klinických a imunologických vyšetrení (prvý a druhý deň po príjme na kliniku) boli s pacientom začaté skúšky a začalo podávanie liekov.

Počas liečenia a pozorovania bol denne skúmaný zdravotný stav pacientov, ich teplota a očná biomikroskopia po sfarbení fluoresceínom. Každé tri dni bola testovaná zraková ostrosť a bola vykonávaná tonometria. Hematologické a imunologické vyšetrenia boli opakované 3 až 4 dni po skončení podávania testovaných látok. Bakteriologická analýza obsahu spojivkového vačku a iné dodatočné vyšetrenia boli vykonávané podľa indikácií.

Odhad závažnosti očnej choroby

Pre odhad závažnosti očnej choroby boli klinické symptómy ocenené trojbodovým systémom: závažné - 3, stredné - 2, ľahké - 1. Každý zo symptómov choroby bol vyjadrený bodovou hodnotou a zistila sa celková intenzita zápalu.

U každého pacienta bolo denne okrem hodnotenia zrakovej ostrosti vykonávané klinické hodnotenie.

Bezpečnosť a tolerancia látok

Bezpečnosť a tolerancia látok bola zisťovaná na základe klinických skúšok, ktoré zahrňovali subjektívne pozorovanie pacienta, kontrolu alergických vedľajších reakcií, objektívne údaje o stave vnútorných orgánov, teplotu, hematologické výsledky.

Zisťovanie klinickej účinnosti sa vykonávalo podľa nasledujúcich kritérií:

- stupeň epitelopatie a doba potrebná na celkovú epitelizáciu rohovky

- vymiznutie symptómov iritis

- vymiznutie stromálnych infiltrácií

- komplikácie počas zápalového procesu a ich charakter

- zmeny v zrakovej ostrosti

Výsledky (i) Bezpečnosť a tolerancia

Nepozorovali sa žiadne subjektívne problémy a vedľajšie účinky prisúditeľné týmto látkam. Udržal sa všeobecne dobrý zdravotný stav a neboli pozorované žiadne horúčkové stavy alebo podstatné zmeny v klinických krvných testoch.

(ii) Účinnosť a aktivita

Klinické výsledky pacientov v skupine ošetrenej látkou a piacebom sú porovnané v tabuľke 2. Vo väčšine parametrov bol pozorovaný trend k rýchlejšiemu hojeniu u skupiny pacientov ošetrených GMDP, obzvlášť pri spojení výsledkov u DK a KU. Tieto výsledky však neboli štatisticky významné. U mnohých parametrov sa získali horšie výsledky u skupiny pacientov trpiacich na KU ošetrených GMDP. Tieto výsledky sa javia ako do značnej miery ovplyvnené jedným prípadom, ktorý vykazoval obzvlášť pomalé zlepšenie zdravotného stavu. U liečenej skupiny bolo, v porovnaní so skupinou, ktorej bolo podávané placebo, pozorované oveľa väčšie zlepšenie zrakovej ostrosti. Platilo to ako o pacientoch trpiacich na DK, tak o pacientoch trpiacich na KU.

Na obrázkoch 1 a 2 je ukázaný vývoj klinických parametrov v čase. Znova je zrejmý zhodný trend k rýchlejšiemu zahojeniu u skupiny ošetrenej GMDP.

Záver

i) Klinické testy ukázali zreteľné výhody GMDP pri ošetrení pacientov s dendritickou herpetickou keratitis.

ii) Výsledky imunologickej kontroly neukázali akýkoľvek stá!y trend, ktorý by mohol mať vzťah k účinnosti skúmanej látky. Vymiznutie lymfocytovej reaktivity na HSV je však jasnejšie zrejmé u skupiny pacientov, ktorým bol podávaný GMDP. Podľa testu na zistenie HSV antigénu v spojivkách infikovaného oka boli tiež zaznamenané určité výhody u pacientov, ktorý bol podávaný GMDP.

iii) Boli zaznamenané tieto skutočnosti: výborná tolerancia GMDP a placeba; neprítomnosť vedľajších alergických reakcií rovnako ako neprítomnosť zmien celkového zdravotného stavu; teploty a klinických krvných hodnôt.

Tabuľka 1 Hlavné znaky kontrolnej skupiny a skupiny ošetrenej GMDP

Skupina
	Kontrola	GMDP
Celkový počet	13	12
muži	9	7
ženy	4	5
Vek, priemer (smerodajná
odchýlka)	42,8 (2.9)	44,3 (3,7)
Klinická podskupina
Dendritická keratitis	7	6
Keratouveitis	6	6
Doba od prvej infekcie H SV
> 20 rokov	5	3
< 20 rokov	4	5
prvý prípad	4	4
Doba predchádzajúcej remisie
Priemer (smer. odchýlka) (mesiace)	27,7 (16,7)	68,4 (29,5)
Rozmedzie	1 mesiac až	2 mesiace až
Doba trvania infekčného stavu Pred začiatkom testu:	13 rokov	20 rokov
Priemer (smer. odchýlka) (dni) Celkové bodové hodnotenie na začiatku testu	29,5 (5,2)	23,6 (5,4)
Priemer (smerodajná odchýlka)	16.1 (0.9)	15,1 (0,8)
Zraková ostrosť na začiatku testu
Priemer (smerodajná odchýlka)	0,27 (0,07)	0,27 (0,06)

Tabuľka 2 : Prehľad výsledkov

	Skupina
Doba	Placebo	GMDP
Doba dosiahnutia celkového skóre 0 (dni)
Celkom	15,3(1,6)	14,4 (2.6)
DK	13,3 (2,5)	9,8 (1.2)
KU	17,7 (1,4)	19,0(4.4)*
Doba dosiahnutia 50 % zhojenia (dni)
Celkom	7,2 (0,6)	6,4 (0,7)
DK	5.6 (0,6)	4,8 (1.0)
KU	9,0 (0,5)	8,0 (0.6)
Doba dosiahnutia muiovej epitelopatie (dni)
Celkom	14,0 (1,5)	13.5(2,7)
DK	11.6(2,3)	8,3 (1.7)
KU	16,8 (1,3)	18,7(4,4)*
Doba dosiahnutia 50 % epitelopatie (dni)
Celkom	7,3	6,8
DK	5.4	5,5
KU	9,5	8,0
Doba dosiahnutia kompletnej epitelizácie (dni)
DK	9.4 (2.9)	5.5 (1.4)
Zmeny zrakovej ostrosti (skóre)
Celkom	0,22 (0,02)	0,34 (0,07)
DK	0,20 (0,03)	0,28 (0,08)
KU	0,25 (0,03)	0.40(0,11)
Rozpustenie infiltrátu (dni)
Celkom	15,2 (1,6)	14,0(2,5)
DK	13,3 (2,5)	9,8 (1,2)
KU	17.3 (1.4)	18.2 (4,4)*
Vymiznutie iritis (dni)
Celkom	8.7 (0.7)	11,2 (3,5)
DK	7.8 (1.4)	4,3 (0,3)
KU	9,3 (0.8)	14,7 (4.8)*

Príklad 2

Použitie GMDP pri ošetrení herpetickej stromálnej keratitis

Druhý klinický test bol vykonaný v zásade podobným spôsobom, aký je popísaný v príklade 1. Testu sa podrobilo celkovo 60 pacientov trpiacich na herpetickú stromálnu keratitis. Títo pacienti boli pre podávanie tabletiek GMDP a identických tabletiek placeba náhodne rozdelení do dvoch skupín (2 skupiny po 30).

Dávka bola 20 mg GMDP denne, pričom systém podávania bol nasledujúci: GMDP alebo placebo jedenkrát denne po dobu 3 dni, 3 dni zdržanie (bez podávania GMDP/placeba), GMDP alebo placebo jedenkrát denne po dobu 3 dni.

Pacientom sa naviac dostávalo sprievodné ošetrenie (antivírusovým acyklovírusom, antibiotikami atď.) podľa bežnej praxe.

Vyhodnotenie liečenia bolo vykonané bodovým ohodnotením, ktoré sledovalo nasledujúce parametre: stromálne postihnutie (povrchové, hlboké, edém rohovky, descemetitis), vredy rohovky (bodové, plošné), postihnutie vnútra oka (precipitáty, hypopion, iritis), hyperaémia (spojivková a percikorneálna).

Výsledky ukazujú, že ošetrenie GMDP zlepšovalo vymiznutie väčšiny klinických symptómov a urýchľovalo zlepšenie zrakovej ostrosti. Napríklad priemerná doba k 50 % vymiznutia stromálneho postihnutia bola u skupiny ošetrenej placebom 7,3 dní a u skupiny ošetrenej GMDP 5,8 dní. Priemerná doba kompletného vyliečenia bola 14,9 dní prvej skupiny a 10,6 dni u druhej. Časový priebeh kompletného vymiznutia príznakov je uvedený na obrázku 3. Analýza rozsahu vymiznutia príznakov v následných časových okamihoch (chisquared test) ukazuje, že medzi 8 a 14 dňom vrátane, významne (p < 0,05) viac pacientov dostávajúcich GMDP vykazuje vymiznutie príznakov v porovnaní so skupinou pacientov dostávajúcich placebo. Zi oková ostrosť v skupine ošetrenej GMDP dosiahla priemerné hodnoty 0,60 počas 10 dní, zatiaľ čo v skupine ošetrenej placebom iba 0,49.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použitie muramylpeptidovej zlúčeniny všeobecného vzorca II:

kde

HOCHj

NHAc

OH n

II

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného 2 až 6 aminokyselinovými zvyškami, pričom aspoň jeden zo zvyškov je prípadne substituovaný lipofilnou skupinou, n je 1 alebo 2, na prípravu prostriedku pre ošetrenie oftalmických chorôb alebo stavov.
2. Použitie muramylpeptidovej zlúčeniny všeobecného vzorca II:

II kde:

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného 2 až 6 aminokyselinovými zvyškami, pričom aspoň jeden zo zvyškov je prípadne substituovaný lipofilnou skupinou, a

n je 1 alebo 2, na prípravu prostriedku pre ošetrenie alebo prevenciu zjzzvenia rohovky spojeného s oftalmickou chorobou alebo stavom.
3. Produkt, vyznačujúci sa tým, že obsahuje muramyldipeptid všeobecného vzorca II:

kde

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného 2 až 6 aminokyselinovými zvyškami, pričom aspoň jeden zo zvyškov je pripadne substituovaný lipofilnou skupinou, a

n je 1 alebo 2, a druhú liečivú látku ako kombinovaný prostriedok pre súčasné, oddelené alebo následné použitie pre ošetrenie oftalmickej choroby alebo stavu.
4. Produkt podľa nároku 3, vyznačujúci sa tým, že druhá liečivá látka je antivírusové činidlo, antibakteriálne činidlo, steroidný alebo nesteroidný protizápalový liek.
5. Produkt podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že druhá liečivá látka je acyklovírus, idoxuridín, chloramfenikol, chlórtetracyklín, kyselina fuzidová. gentamycín, neomycín, oflaxacín, polymixín, tetracyklín, tobramycín, betametazon, clobetazón, dexametazón, fluórmetiolón, hydrokortizón, prednizilón, alebo flurbiprof'én.
6. Produkt podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že druhá liečivá látka je acyklovir, alebo idoxuridín.
7. Použitie podľa nároku 1, alebo 2, alebo produkt podľa niektorého z nárokov 3 až 6, kde oftalmické choroba, alebo stav je zápal spojiviek, choroba rohovky, ako je keratitis, choroba očných viečok, alebo poškodenie oka.
8. Použitie, alebo produkt podľa nároku 7, kde stav je herpetická stromálna keratitis.
9. Použitie, alebo produkt podľa niektorého z nárokov 1 až 8, kde n je 1.
10. Použitie, alebo produkt podľa nároku 9, kde proximálny aminokyselinový zvyšok je zvyšok L-aminokyseliny.
11. Použitie, alebo produkt podľa nároku 10, kde proximálny aminokyselinový zvyšok, alebo jediný aminokyselinový zvyšok' v prípade, že je prítomný len jeden, je zvyšok L-alanínu.
12. Použitie, alebo produkt podľa niektorého z nárokov 9 až 11, kde druhý aminokyselinový zvyšok od proximálneho konca peptidu, pokiaľ je prítomný je v D-konfigurácii.
13. Použitie, alebo produkt podľa nároku 12, kde uvedený druhý aminokyselinový zvyšok je kyselina D-glutamová, alebo D-asparágová , alebo ich mono-, di-, alebo zmesný alkylester obsahujúci 1 až 22 at=ómov uhlíka, výhodne obsahujúci 1 až 6 atómov uhlíka, amid, alebo alkylamid obsahujúci 1 až 4 atómy uhlíka.
14. Použitie alebo produkt podľa niektorého z nárokov 11 až 13, kde uvedený druhý aminokyselinový zvyšok je D-izoglutaminyl alebo D-glutamyl.
15. Použitie alebo produkt podľa niektorého z nárokov 9 až 14, kde tretí aminokyselinový zvyšok z proximálneho konca peptidu, ak je prítomný, je v Lkonfigurácii.
16. Použitie alebo produkt podľa nároku 15, kde tretí aminokyselinový zvyšok je L-alanyl alebo L-lyzyl.
17. Použitie alebo produkt podľa niektorého z národov 9 až 16, kde aminokyselinový zvyšok alebo lineárny peptid je prípadne substituovaný aspoň jednou lipofilnou skupinou.
18. Použitie alebo produkt podľa nároku 9, kde zlúčenina je N-acetylglukózaminyl-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutamín (GMDP).
19. Použitie alebo produkt podľa nároku 9, kde zlúčenina je: N-acetyl-Dglukózaminyl-N-acetylmuramyl-L-alanyi-D-glutamová kyselina (GMDP-A),

N-acetyl-D-glukózaminyl-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamová kyselina (GMDP-A), n-butylester N-acetyl-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-Dglutamínu (GMDP-OBu),

N^a-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutaminyl]N^e-stearoyl-L-lyzín (GMDP-Lys(St)),

N^a-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-y-D-glutamyl]hľ-stearoyl-L-lyzín (GM DP-Lys(St)), dibenzylester N-acetyI-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmĽr2myl-L-alanyl-Dglutamovej kyseliny (GMDPA (OBzl)2),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1~4)-N-acetylmuramyl-N-metyl-L-alanyl-Dizoglutamín (Me-GMDP),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-(B1--4)-N-acetyl-Dglukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D-izoglutamín) ((GMDP)2),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-(B1-4)-N-acetyl-Dglukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D-glutamová kyselina) ((GMDPA)2),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-(B1--4)-N-acetyl-Dglukózaminyl-(B1~4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D-izoglutaminyl-L-lyzín) ((GMDP Ľys)2),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-(B1--4)-N-acetyl-Dglukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-bis-[L-alanyl-D-izoglutaminyl-N^e-stearoylL-lyzín] ([GMDP-Lys(St)]₂),

1 -adamantylester N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1 -4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-Dizoglutamínu (GMDP-Ad),

L-treonyl-N^IN-acetyl-D-glukózaminyl-ÍBI-^J-N-acetylmuramyl-L-alanyl-Y-Dizoglutaminyl]-L-lyzyl-L-prolyl-L-arginín (GMDP-tuftsín E),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-y-D-izoglutaminyl-L· treonyl-L-lyzyl-L-prolyl-L-arginín (GMDP-tuftsín A),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-a-D-glutamyl-L-lyzylL-treonyl-N^E-stearoyl-L-lyzyl-L-prolyl-L-arginín (lipofilný GMDPA-tuftsín),

N^E-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-y-DizoglutaminylJ-L-lyzyl-L-histidyl-L-glycínamidíGMDPA-burzín),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1--4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutaminyl]-Lglutamyl-L-tryptofán (GMDP-tymogén I),

N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1~4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-izoglutaminyl-saminohexanoyl-L-glutamyl-L-tryptofán(GMDP-tymogén II),

N^a-[N-acetyl-D-glukózaminyl-(B1~4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-L-alanyl-Dizoglutaminylj-N'-stearoyl-L-lyzyl-L-glutamyl-L-tryptofán (GMDP-tymogén III),

N-acetylmuramyl-L-treonyl-D-izoglutamín (Thr-MDP) alebo n-butylester N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamínu (Murabutid).
20. Spôsob ošetrenia oftalmických stavov, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie účinného množstva muramylpeptidového derivátu vzorca II:

kde:

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného 2 až 6 aminokyselinovými zvyškami, pričom aspoň jeden zo zvyškov je prípadne substituovaný lipofilnou skupinou, a

n je 1 alebo 2, pacientovi trpiacemu na oftalmický stav.
21. Spôsob ošetrenia alebo prevencie zjazvenia rohovky spojeného s oftalmickou chorobou, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie účinného množstva muramylpeptidovej zlúčeniny vzorca II:

H

HOCHj

NHAc

OH

II kde

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného 2 až 6 aminokyselinovými zvyškami, pričom aspoň jeden zo zvyškov je prípadne substituovaný lipofilnou skupinou, a

n je 1 alebo 2, pacientovi trpiacemu na oftalmickú chorobu.
22. Spôsob ošetrenia oftalmického stavu, vyznačujúci sa tým, že zahrňuje podávanie účinného množstva muramylpeptidovej zlúčeniny vzorca II:

HOCHj oh n

II kde

R predstavuje zvyšok aminokyseliny alebo lineárneho peptidu tvoreného 2 až 6 aminokyselinovými zvyškami, pričom aspoň jeden zo zvyškov je prípadne substituovaný lipofilnou skupinou, a

n je 1 alebo 2, v kombinácii s účinným množstvom druhej liečivej látky pacientovi trpiacemu na oftalmický stav.
23. Spôsob podľa niektorého z nárokov 20 až 22, vyznačujúci sa tým, že podávaná muramylpeptidová zlúčenina je GMDP.
24. Spôsob podľa nároku 23, vyznačujúci sa tým, že sa podáva 0,1 až 50 mg GMDP denne.
25. Spôsob podľa nároku 24, vyznačujúci sa tým, že sa podáva 0,5 až 50 GMDP denne.
26. Spôsob podľa nároku 25, vyznačujúci sa tým, že sa podáva 1 až 20 mg GMDP denne.
27. Spôsob podľa niektorého z nárokov 20 až 26, vyznačujúci sa tým, že doba podávania je 1 až 60 dní.
28. Spôsob podľa nároku 27, vyznačujúci sa tým, že doba podávania je od 1 do 30 dní.
29. Spôsob podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že doba podávania je 1 až 14 dní.
30. Spôsob podľa niektorého z nárokov 20 až 26, vyznačujúci sa tým, že zlúčenina je podávaná nasledovne:

i) tri dni podávania ii) tri dni bez podávania iii) záverečné tri dni podávania.