SK19292001A3

SK19292001A3 - Tricyklické spirozlúčeniny a farmaceutické prípravky, ktoré ich obsahujú

Info

Publication number: SK19292001A3
Application number: SK1929-2001A
Authority: SK
Inventors: Hidemitsu Nishida; Fumihiko Saitoh; Kousuke Harada; Ikuya Shiromizu
Original assignee: Mochida Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 1999-06-30
Filing date: 2000-06-30
Publication date: 2002-06-04
Also published as: EP1191028A4; AU774397B2; EP1191028B1; HUP0202188A3; TR200103853T2; BR0012093A; JP4890707B2; HK1049157A1; IL147348A0; WO2001002397A9; HUP0202188A2; CN1371375A; PL352862A1; NO20016402L; MXPA02000003A; ZA200110558B; CA2380852A1; NO20016402D0; CA2380852C; NZ516363A

Description

Oblasť techniky

Predložený vynález sa týka tricyklických zlúčenín majúcich spiro jednotku alebo ich soli, ktoré sú užitočné ako farmaceutické látky, najmä ako inhibítor aktivovaného faktora X koagulácie krvi (ďalej uvádzaný ako FXa), ktoré vykazujú silnú antikoagulačnú aktivitu a ktoré sú vhodné na orálne podanie.

Vynález sa týka tiež metód navrhovania liečiv prostriedkami molekulárneho navrhovania na vytvorenie zlúčeniny, ktorá vykazuje inhibičnú aktivitu na FXa.

Doterajší stav techniky

So zavádzaním západného štýlu života a so zvyšujúcim sa počtom starších ľudí sa výskyt ischemických ochorení srdca a ďalších patológii srdca a krvných ciev každým rokom zvyšuje. Najmä zvýšenie vaskulárnych okluzívnych ochorení, ako jé infarkt myokardu, cerebrálna trombóza, pľúcna embólia a periférne arteriálne a venózne okluzívne ochorenie sa zvyšuje každým rokom a liečba takých ochorení sa stáva vážnym spoločenským problémom. Pri liečbe a prevencii trombózy hrá antikoagulačná terapia spolu s protidoštičkovou terapiou dôležitú úlohu vo vnútornom lekárstve. Na liečbu a prevenciu trombózy sú bezpečnosť, ktorá umožňuje dlhodobé podávanie liečiva a vývoj pozitívnej a vhodnej antikoagulačnej aktivity dôležité. Skôr sa používali antikoagulanty, ako warfarín a heparín, s cieľom prevencie a liečby trombózy, vzhľadom na schopnosti hyperkoagulácie. Aj keď také použitie antikoagulantov je spájané s radom nevýhod, vrátane rizika krvácania a interakcií s inými liečivami. Warfarín sa vo svete značne používa ako univerzálny perorálny antikoagulant. Avšak, vzhľadom na jeho charakteristiky založené na mechanizme pôsobe nia, koncentračný rozsah na prejavenie účinnosti je úzky a trvá dlhý čas na prejavenie účinnosti a polčas v krvi je takmer 36 hodin; a naviac, z niekoľkých dôvodov, ako je napríklad veľká individuálna diferencia účinnej dávky, je ťažké regulovať antikoagulačnú schopnosť warfarinu (N. Eng. J. Med. 324 (26) 1865-1875, 1991) a vyžaduje sa častá frekvencia sledovania, aby sa zabránilo krvácaniu ako vedľajšiemu účinku. Ďalej, warfarín má rad ďalších vedľajších účinkov, ako je nauzea, zvracanie, hnačka a vypadávanie vlasov; z týchto dôvodov je warfarín liečivo, ktoré spôsobuje vážne ťažkosti pri klinickom použití. Na druhej strane, heparín sa vo svete používa v značnej miere ako intravenózne podávateľné liečivo. Avšak, keďže je heparín priamym inhibítorom trombínu, predstavuje heparín vysoké nebezpečenstvo krvácania a je potrebné časté sledovanie pacienta, ako v prípade warfarinu; čo je dôležitejšie, vzhľadom na jeho charakteristiky založené na mechanizme pôsobenia, neočakáva sa adekvátna koagulačná inhibícia pri zníženej úrovni antitrombínu III; tak je heparín liečivo, ktoré spôsobuje vážne ťažkosti pri klinickom použití. Vzhľadom na túto situáciu, sú žiaduce antikoagulačné činidlá, ktoré nemajú žiadny z vedľajších účinkov ako warfarín a haparín.

Kaskáda koagulácie krvi je reťazová reakcia, zahŕňajúca obmedzenú hydrolýzu proteínu, spustená aktiváciou vonkajšej koagulačnej kaskády alebo vnútornou koagulačnou kaskádou a akonáhle je kaskáda aktivovaná, reakcia sa rozšíri ako lavína. Nakoľko je posledným stupňom kaskády koagulácie krvi trombínom sprostredkovaná konverzia fibrinogénu na fibrín, v poslednej bolo vyvinuté úsilie na vývoj inhibítorov trombínu; aj keď je známe, že liečivá, ktoré priamo inhibujú trombín, zvyšujú nebezpečie krvácania. Ďalej, tieto liečivá majú nízku biologickú dostupnosť pri orálnom podaní; z tohto dôvodu sa nedodáva na trh žiadny inhibítor trombínu, ktorý je určený na orálne podanie.

EXa je kľúčový enzým, ktorý sa nachádza v protiprúde trombínu v koagulačnej kaskáde a tiež v mieste konvergencie medzi vnútornou a vonkajšou koagulačnou kaskádou. Je známe, že jedna molekula FXa produkuje asi sto molekúl trombinu za minútu. Z toho dôvodu inhibitor FXa môže potenciálne inhibovať koagulačnú kaskádu oveľa účinnejšie ako inhibitor trombinu (Thrombosis Research, diel 19, str. 339-349, 1980; Mebio diel 14, č. 8, 1997).

Zlúčeniny, ktoré majú inhibičný účinok na FXa sú opísané v niekoľkých patentoch, z ktorých zverejnená japonská patentová prihláška č. 208946/1993 a WO 96/16940 opisujú aromatické amidínové deriváty a najmä aminonaftylové deriváty a WO 97/38984 a podobne opisujú cyklické močovinové zlúčeniny s aminodifenylovou skupinou. Avšak, tieto zlúčeniny sú doteraz v štádiu vývoja a doteraz neboli komerčne dodávané.

Tieto zlúčeniny tiež vykazujú nízku biologickú dostupnosť pri orálnom podaní a je tu , priestor na zlepšenie v oddelení trombinového inhibičného pôsobenia a trypsínového inhibičného pôsobenia od inhibičného pôsobenia FXa. Ďalej existuje predpoklad, že tieto zlúčeniny sú spojené so znížením krvného tlaku, respiračnou nedostatočnosťou a inými vedľajšími účinkami, indukovanými amidinovou skupinou.

Čo sa týka zlúčenín uvedených vo zverejnenej japonskej patentovej prihláške č. 208946/1993, opisuje sa tu použitie tejto zlúčeniny ako preventívne a terapeutické činidlo na vírus chrípky. Aktivita tohto činidla inhibovať šírenie vírusu chrípky je založená na inhibičnom pôsobení FXa.

Zlúčeniny s aminoheterocyklickou skupinou reprezentovanou

1-(4-pyridyl)piperidin-4-ylovou skupinou sa môžu použiť ako inhibitor FXa; sú napríklad opísané v stave techniky zahŕňajúcom WO 96/10022, WO 97/28129, WO 97/29104, WO 98/21188, WO 98/54164, WO 99/06371 a WO 99/09027.

Tieto zlúčeniny sa vyvinuli s cieľom, poskytnúť inhibitor

FXa, ktorý je účinný pri orálnej absorpcii. Avšak, inhibítory

FXa s nízkou molekulovou hmotnosťou sú doteraz v štádiu vývoja a doteraz neboli na trh dodané žiadne liečivá s nízkou molekulárnou hmotnosťou ako inhibítory FXa.

Pri vývoji farmaceutických produktov nie je farmaceutická aktivita jedinou požiadavkou. Ďalšia požiadavka spočíva v splnení prísnych kritérií, zahŕňajúca absorpciu, distribúciu, metabolizmus a vylučovanie a podobne. Napríklad sa požaduje, aby liečivá obstáli v rôznych skúškach ako je interakcia, desenbilizácia alebo tolerancia, absorpcia zo zažívacieho traktu pri orálnom podaní, rýchlosť prenosu do tenkého čreva, rýchlosť absorpcie a účinok pri prvom prechode, orgánová bariéra, väzba proteínu, indukcia enzýmu metabolizujúceho liečivo, cesta vylučovania a klírens z tela, metóda podania (miesto, metóda a ciel podania) a podobne. Liečivo spĺňajúce všetky tieto požiadavky sa však zriedka objaví.

Antikoagulanty sa tiež podieľajú na takej všeobecnej výzve vývoja liečiv.

V prípade inhibítora FXa, sa vyhneme problému vedľajších účinkov, spojených s orálnym podávaním warfarínu a taktiež nebezpečiu krvácania založenom na inhibicii trombínu ako sa zistilo v prípade heparínu tým, že sa podanie uskutoční len intravenóznou injekciou.

Ak je inhibítor FXa vytvorený metódou molekulového modelovania, má podmienka väzby medzi

FXa a inhibítorom FXa veľký význam.

V trojrozmernej štruktúre

FXa sa aktívne miesto

FXa tvorí v štruktúre, ktorá je charakteristická pre serínovú proteázu podobnú chymotrypsínu.

Aktívne centrum serínovej proteázy je tvorené množstvom oblastí nazývaných podriadené miesta (subsites) a je známe, že v podstate všetky inhibítory, ktoré netvoria kovalentnú väzbu medzi zvyškom Serl95 sa viažu k týmto oblastiam (pockets). Predpokladá sa, že z týchto oblastí je v serínovej proteáze najdôležitejšia oblasť SI vo väzbe so substrátom alebo v rozvoji selektivity substrátu.

Tiež sa predpokladá, že oblasť SI je najdôležitejšia v inhibitori serínovej proteázy pre vývoj inhibičnej aktivity a enzýmovej selektivity. Zvyšok, o ktorom sa všeobecne predpokladá, že je najdôležitejší pre špecifickosť substrátu v oblasti SI je zvyšok, zodpovedajúci chymotrypsínu č. 189 a FXa má Asp (Asp 189) ako tento zvyšok, a o vnútrajšku oblasti sa predpokladá, že je negatívne nabitá.

Avšak toto je tiež prípad v serínových proteázach iných ako je FXa, menovite u tripsinu, trombinu, proteínu C, tkanivovom plazminogénovom aktivátore a podobne, a taká podobnosť je jedna z príčin ťažkosti v špecifickosti enzýmu v inhibítore FXa. Substrátová špecifickosť celého enzýmu sa určí štruktúralnym rozdielom podriadeného miesta, ako je oblasť S3, k štrukturálnemu rozdielu SI,, a navrhnutie inhibítora selektívneho na FXa sa môže uskutočniť použitím týchto štrukturálnych rozdielov.

Čo sa týka stavu väzby medzi FXa a inhibitorom FXa, existuje len jedna štúdia pre špecifické zlúčeniny (DX-9065 a FX-2212) rôntgenovou kryštalografickou analýzou.

V DX-9065 sa amidínová skupina viaže k oblasti SI FXa a najmä, Aspl89 a amidínová skupina sú pevne navzájom viazané elektrostatickou interakciou a vodíkovými väzbami. Toto je spôsob väzby obvykle známy v inhibítoroch trypsínu a inhibítoroch trombínu.

V prípade FX-2212a sa tiež zistilo, že amidínová skupina sa viaže k oblasti Si FXa podobným známym spôsobom väzby (J. Biol. Chem., 22.11.1996; 271 (47): 29988-92 Brandstetter H. a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (9.6.1998); 95 (12): 6630-5 Kamata K. a kol. ) .

Avšak, DX-9065a a FX-2212a sú nedostatočné vo svojej účinností pri orálnom podaní a existuje tiež obava z postranných účinkov indukovaných amidínovou skupinou a guanidínovou skupinou. Zatiaľ sa ešte dokonca nezistilo u inhibitorov FXa s inou štruktúrou, či taká rontgenová kryštalografická analýza je možná a väzbový stav s FXa sa ešte nenašiel.

Odhliadnuc od užitočnosti amidínovej skupiny a guanidínovej skupiny, nie je žiadna indikácia, pokiaľ sa týka toho, že by sa úsilie vo výskume štruktúry malo zamerať na skúmanie alebo vývoj inhibítora odlišného typu, kde by sa také nevýhody zlepšili, nakoľko nevyplýva žiadne riešenie z informácií o interakcii založenej na údajoch štruktúry kryštálu komplexu FXa so známou inhibítorovou zlúčeninou FXa a riešenie štruktúry sa očakáva.

Podstata vynálezu

Vzhľadom na túto situáciu, existuje potreba antikoagulačného liečiva, ktoré bude vykazovať vysokú bezpečnosť a vynikajúcu účinnosť a ktoré sa bude .ľahko používať. Presnejšie, existuje požiadavka na antikoagulačné liečivo, ktoré sa bude možné orálne podávať ľuďom a iným cicavcom a najmä, ktoré sa bude ľahko používať v klinickej praxi a ktoré nebude vzájomne reagovať s ostatnými liečivami, bude mať znížené vedlajšie účinky, vrátane zníženia nebezpečia krvácania, zlepšenú dávkovú odozvu a podobne.

Ďalej, pri výskume a vývoji inhibítora FXa existuje značná požiadavka na návrh farmakoforu (farmakofor: parameter v návrhu molekuly, ktorý sa môže použiť v objave inhibítora pri návrhu liečiva s pomocou počítača), ktorý sa môže použiť v objave lie čiv odlišného typu od DX-9065a a podobne, ktorý vykazuje rovnaký typ väzby ako inhibítor trypsínu a inhibítor trombínu a ktorý je užitočný v spojení medzi FXa a inhibítorom FXa na získanie dôležitej indikácie.

Je potrebné uviesť, že použitie takého parametra umožni napríklad objav inhibičných zlúčenín FXa, ktoré nebudú obsahovať amidínovú skupinu alebo guanidinovú skupinu, konštrukciu pomocou počítača a skúmanie skúmaného parametra pre inhibičnú zlúčeninu; konverziu na zlúčeninu, ktorá bude slúžiť ako liečivo obsahujúce proteínový substrát pre FXa; odklon od známeho skeletu inhibičných zlúčenín FXa vykazujúcich vedľajšie účinky; úplne nový návrh založený na novom farmakofore; a zmenu špecifickosti založenú na novom parametri inhibítora serínovej proteázy, iného ako FXa; a podobne.

Vynálezcovia predloženého vynálezu uskutočnili rad intenzívnych štúdií s cieľom vyriešiť opísané problémy a poskytnúť zlúčeninu, ktorá by mala vynikajúci inhibičný účinok a zistili, že zlúčenina všeobecného vzorca I, so spiro skeletom, vykazuje pozoruhodne vynikajúci inhibičný účinok na FXa. Predložený vynález je založený na takom výsledku skúmania.

Vynálezcovia predloženého vynálezu tiež dosiahli úspech pri získaní kryštálu komplexu inhibítora FXa podľa vynálezu a FXa a našli dôležitý farmakofor užitočný pri objave inhibítora FXa typu, ktorý sa líši od DX-9065a a podobne, pomocou analýzy takého kryštálu. Predložený vynález je založený na takom výsledku skúmania.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obrázok 1 ukazuje ženého vynálezu.	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 2 ukazuje ženého vynálezu.	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 3 ukazuje ženého vynálezu.	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 4 ukazuje	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-

ženého vynálezu.

Obrázok 5 ukazuje ženého vynálezu.	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 6 ukazuje ženého vynálezu.	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 7 ukazuje ženého vynálezu.	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 8 ukazuje ženého vynálezu.	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 9 ukazuje	štruktúrny	vzorec	zlúčeniny	podľa	predlo-

ženého vynálezu.

Obrázok 10 ukazuje štruktúrny vzorec zlúčeniny referenčných zlúčenín B a C.

Obrázok 11 ženého vynálezu.	ukazuje	postup	syntézy	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 12 ženého vynálezu.	ukazuje	postup	syntézy	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 13 ženého vynálezu.	ukazuje	postup	syntézy	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 14 ženého vynálezu.	ukazuje	postup	syntézy	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 15 ženého vynálezu.	ukazuj e	postup	syntézy	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 16 ženého vynálezu.	ukazuje	postup	syntézy	zlúčeniny	podľa	predlo-
Obrázok 17 ženého vynálezu.	ukazuje	postup	syntézy	zlúčeniny	podľa	predlo-

Obrázok 18 ukazuje postup syntézy zlúčeniny podľa predloukazuje postup syntézy zlúčeniny podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 19 ženého vynálezu.

Obrázok 20 postup syntézy zlúčeniny podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 21 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 22 ukazuje dáta fyzikálnych vlastnosti (NMR spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 23 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností (NMR spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 24 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 25 ukazuje dáta fyzikálnych trum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

vlastností (NMR spekObrázok 26 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností spekObrázok 27 ukazuje dáta fyzikálnych trum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

vlastností (NMR spekObrázok 28 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností (NMR spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 29 ukazuje dáta fyzikálnych vlastnosti (NMR spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 30 ukazuje dáta fyzikálnych vlastnosti spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

trum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 31 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností spek10

Obrázok 32 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností (NMR spektrum) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 33 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností (róntgenový záznam) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 34 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností (róntgenový záznam) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 35 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností (róntgenový záznam) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 36 ukazuje dáta fyzikálnych vlastností (róntgenový záznam) zlúčenín podľa predloženého vynálezu.

Obrázok 37 ukazuje páskový diagram ľudského FXa (doména De s - G1 a) .

Obrázok 38 ukazuje páskový diagram komplexu ľudský FXa (doména Des-Gla)-zlúčenina A.

Obrázok 39 ukazuje aktívne miesto ľudského FXa.

Obrázok 40 ukazuje aktívne miesto komplexu ľudský FXa-zlúčenina A.

Obrázok 41 ukazuje stereopohľad aktívneho miesta komplexu ľudský FXa-zlúčenina A.

Obrázok 42 ukazuje pohľad na tabuľku uvádzajúcu poradové čísla zvyškov domény serínovej proteázy FXa zodpovedajúcu číslam chymotrypsínu v aminokyselinovej sekvencií domény serínovej proteázy FXa.

Najlepšie spôsoby uskutočnenia vynálezu

Ďalej bude predložený vynález podrobne opísaný. Predložený vynález sa týka tricyklickej zlúčeniny so spiro jednotkou, všeobecného vzorca I, ktorá je opísaná ďalej, jej medziproduktov a farmakoforcv, ktoré sú užitočné v návrhu molekuly inhibítora

FXa .

Rôzne uskutočnenia predloženého vynálezu sú opísané nasledovne. V zlúčenine podľa predloženého vynálezu, napríklad alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka znamená skupinu s priamym alebo rozvetveným reťazcom, obsahujúcu 1 až 6 atómov uhlíka, ak nie je uvedené inak. V prípade cyklických skupín označuje počet atómov uhlíka v kruhu.

Zlúčenina všeobecného vzorca I a zlúčenina všeobecného vzorca I' podľa predloženého vynálezu nie sú nijako zvlášť obmedzené čo sa týka molekulovej hmotnosti. Avšak, molekulová hmotnosť je výhodne do 1000, výhodnejšie do 700 (a ak nie je uvedené inak, počet atómov uhlíka tvoriacich zlúčeninu je menší ako 40) . Také obmedzenie molekulovej hmotnosti sa bežne použije pri identifikácii štruktúry zlúčeniny, ako hlavného obmedzujúceho faktora, okrem farmakologickej charakteristiky základného skeletu v priebehu návrhu liečiva. Ak sa u liečiva berie do úvahy orálna absorpčná schopnosť, molekulárna hmotnosť je výhodne obmedzená v rozsahu do 1000.

[1] Prvý aspekt vynálezu

Zlúčenina podľa predloženého.vynálezu je predstavovaná všeobecným vzorcom I alebo jej farmaceutický prijateľnou soľou.

Vo všeobecnom vzorci,

A je atóm vodíka alebo skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí (1) nasýtená alebo nenasýtená päť- alebo šesťčlenná cyklická uhľovodíková skupina, alebo nasýtená alebo nenasýtená päťalebo šesťčlenná heterocyklická skupina, (2) aminoskupina a (3) imidoylová skupina (kde sú skupiny (1) a (3) prípadne substituované);

B je jednoduchá väzba, karbonylová skupina, skupina -S(0)_xalebo prípadne substituovaná alkylénová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka;

D je atóm vodíka, skupina -CO-R⁵ (kde R⁵ je atóm vodíka alebo substituent) alebo prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka;

X je atóm dusíka alebo metínová skupina, prípadne substituovaná skupinou A'-B'- (kde A' znamená skupinu definovanú pre A, a B' znamená skupinu definovanú pre B) ;

Y je atóm kyslíka, skupina -S(0)_y- alebo prípadne substituovaná imínová skupina (—NH—);

Z je metylénová skupina, karbonylová skupina alebo tiokarbonylová skupina;

T je skupina -S(0)_z-, karbonylová skupina alebo prípadne substituovaná alkylénová skupina obsahujúca 1 až 2 atómy uhlíka;

Q je uhľovodíková skupina alebo heterocyklická skupina, ktorá je prípadne substituovaná;

1, m, n, x, y a z sú nezávisle celé číslo 0, 1 a 2 s výhradou, že 1 a m nie sú súčasne 0; a r je celé číslo 0 alebo 1; a tri kruhy (kruh obsahujúci X, kruh obsahujúci Y a kruh obsahujúci Z) sú nezávisle prípadne substituované; a väzba indikovaná prerušovanou čiarou a plnou čiarou v kruhu obsahujúcom Z je jednoduchá väzba alebo dvojitá väzba (keď r je 0).

Rôzne skupiny obsiahnuté vo všeobecnom vzorci I sú opísané podrobne.

[1-1] V zlúčenine všeobecného vzorca I, Q je uhľovodíková skupina alebo heterocyklická skupina a tieto skupiny môžu prípadne obsahovať substituenty. Príkladom uhľovodíkových skupín v rámci definície Q sú alifatické uhľovodíkové skupiny, alicyklické uhľovodíkové skupiny a arylové skupiny, výhodne arylové skupiny.

Príkladom alifatických uhľovodíkových skupín sú uhľovodíkové skupiny s priamym alebo rozvetveným reťazcom, napríklad alkylové skupiny, alkenylové skupiny, alkinylové skupiny a podobne .

Príkladom alkylových skupín sú alkylové skupiny s 1 až 10 atómami uhlíka (výhodnejšie s 1 až 6 atómami uhlíka), napríklad metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sek-butyl, terc-butyl, pentyl, izopentyl, neopentyl, terc-pentyl, 1-metylbutyl, 2-metylbutyl, 1,2-dimetylpropyl, hexyl, izohexyl, 1-metylpentyl, 2-metylpentyl, 3-metylpen.tyl, 1,1-dimetylbutyl, 1,2-dimetylbutyl, 2,2-dimetylbutyl, 1,3-dimetylbutyl, 2,3-dimetylbutyl, 3,3-dimetylbutyl, 1-etylbutyl, 2-etylbutyl, 1,1,2-trimetylpropyl, 1,2,2-trimetylpropyl, 1-etyl-l-metylpropyl, l-etyl-2-metylpropyl, n-hexyl, 1-metylhepťyl a n-nonyl.

Príkladom alkenylových skupín sú alkenylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka, napríklad vinyl, alyl, izopropenyl, 2-metylalyl, butenyl, pentenyl a hexenyl.

Príkladom alkinylových skupín sú alkinylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka, napríklad etinyl, 1-propinyl, 2-propinyl, butinyl, pentinyl a hexinyl.

Príkladom alicyklických uhľovodíkových skupín sú nasýtené a nenasýtené uhľovodíkové skupiny, napríklad cykloalkylová skupina, cykloalkenylová skupina a cykloalkándienylová skupina.

Príkladom cykloalkylových skupín sú cykloalkylové skupiny s 3 až 9 atómami uhlíka, napríklad cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl a cyklononyl.

Príkladom cykloalkenylových skupín sú cykloalkenylové skupiny s 3 až 6 atómami uhlíka, napríklad 1-cyklopropen-l-yl,

1-cyklobuten-l-yl, 1-cyklopenten-l-yl, 2-cyklopenten-l-yl, 3-cyklopenten-l-yl a 1-cyklohexen-l-yl.

Príkladom cykloalkándienylových skupín sú cykloalkyldieny14 lové skupiny so 4 až 6 atómami uhlíka, napríklad 2,4-cyklopentadien-l-yl a 2,5-cyklohexadien-l-yl.

Príkladom arylových skupín sú arylové skupiny so 6 až 14 atómami uhlíka, napríklad fenyl, naftyl, bifenylyl, 2-antryl, fenantryl, acenaftyl a 5,6,1,8-tetrahydronaftalenyl-(2-yl), z ktorých je výhodný fenyl, 2-naftyl a 1-naftyl.

Príkladom heterocyklických skupín prípadne substituovaných heterocyklických skupín v Q sú aromatické heterocyklické skupiny a nasýtené a nenasýtené aromatické heterocyklické skupiny. Príkladom takých skupín sú skupiny, obsahujúce päť- až štrnásťčlenr.ý kruh a výhodne päť- až dvanásťčlenný kruh obsahujúci, okrem atómov uhlíka, aspoň jeden heteroatóm (výhodne 1 až 4 heteroatómy), vybrané z N, 0 a S.

Príkladom aromatických heterocyklických skupín sú monocyklické a kondenzované heterocyklické skupiny. Výhodné monocyklické aromatické heterocyklické skupiny sú skupiny obsahujúce 5 až 6 atómov v kruhu, napríklad pyrolyl, furyl, tienyl, oxazolyl, imidazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, izotiazolyl, pyrazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, furazanyl, 1,2,3-tiadiazolyl, 1,2,4-tiadiazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, tetrazolyl, pyridyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2, 4-triazinyl, 1,2,5-triazinyl a tiadiazinyl.

Výhodné kondenzované heterocyklické skupiny sú skupiny, obsahujúce 8 až 12 členov v kruhu, napríklad jednomocnej skupiny vzniknutej kondenzáciou päť- alebo šesťčlenného aromatického kruhu ako je opísaný skôr, s 1 alebo viac (výhodne 1 až 2) aromatickými kruhmi (napríklad benzénovým kruhom) a následným odstránením atómu vodíka v ľubovoľnej polohe z takto vzniknutého kruhu.

Príklady takých skupín sú indolyl, izoindolyl, 1-H-indazolyl, ber.zof uranyl (-2-yl), izobenzofuranyl, benzotienyl (-2-yl), izobenzotienyl, benzindazolyl, benzoxazolyl (-2-yl), 1,2-benzoizoxazolyl, benzotiazolyl (-2-yl), 1,2-benzoizotiazolyl, 2H-benzopyranyl (-3-yl), (1H-)benzimidazolyl(-2-yl) , lH-benzotriazolyl, 4//-1, 4-benzoxazinyl, 4H-1, 4-benzotiazinyl, chinolyl, izochinolyl, cinolinyl, chinazolinyl, chinoxalinyl, ftalazinyl, naftylizinyl, purinyl, pteridinyl, karbazolyl, karbolinyl, akridinyl, fenoxazinyl, fenotiazinyl, fenazinyl, fenoxazinyl, tiantrenyl, fenantridinyl, fenantrolinyl, indolizinyl, (4,5,6,7-)tetrahydrotiazolo[5,4-c]pyridyl (-2-yl), (4,5,6,7-)tetrahydrotieno-[3,2-c]-pyridyl, (1,2,3,4-)tetrahydroizochinolyl(-6-yl) , tiazolo[5,4-c]pyridyl(-2-yl), pyrolo[1,2-b]pyridazinyl, pyrazo[1,5-a]pyridyl, imidazo[1,2-a]pyridýl, imidazo[1,2-b]pyridazinyl, imidazo[1,5-a]pyrimidinyl, 1,2,4-triazolo[4,3-a]pyridyl,

1,2,4-triazolo[4,3-b]pyridazinyl (výhodné uskutočnenia sú uvedené v zátvorke).

Príkladom nearomatických heterocyklických skupín sú trojaž osemčlenné nasýtené alebo nenasýtené nearomatické heterocyklické skupiny, ako azetidinyl, oxilanyl, oxetanyl, tietanyl, pyrolidinyl, tetrahydrofuryl, tiolanyl, pyrazolinyl, pyrazolidinyl, piperidyl, tetrahydropyranyl, piperidinyl, morfolinyl, tiomorfolinyl a chinuklidinyl.

Príkladom substituentov prípadne substituované uhľovodíkové skupiny alebo prípadne substituované heterocyklické skupiny v Q sú (a) alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, cykloalkyl a cykloalkenyl, (b) heterocyklické skupiny, (c) aminoskupina, (d) imidoylová skupina, amidinoskupina, hydroxylová skupina, tiolová skupina a oxoskupina, (e) atómy halogénu, ako je fluór, chlór, bróm a jód, kyanoskupina a nitroskupina, (f) karboxylová skupina a (g) karbamoylová skupina, tiokarbamoylová skupina, sulfonylová skupina, sulfinylová skupina, sulfidová skupina a acylová skupina. Skupiny uvedené pod (a) až (g) opísané skôr, okrem skupiny (e), môžu ďalej obsahovať substituent.

Prípadne substituovaná uhľovodíková skupina a prípadne substituovaná heterocyklická skupina v Q môžu byť ľubovoľne substituované 1 až 5 substituentami. Také substituenty (a) až (f) sú opísané podrobne ďalej.

a) Alkylové, alkenylové, alkinylové, arylové, cykloalkylová a cykloalkenylové skupiny môžu byť ktorékoľvek z alkylových skupín, alkenylových skupín, alkinylových skupín, arylových skupín, cykloalkylových skupín a cykloalkenylových skupín uvedených ako príklady uhľovodíkovej skupiny pre Q a výhodné sú alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka, alkinylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka, arylové skupiny so 6 až 14 atómami uhlíka, cykloalkylové skupiny s 3 až 7 atómami uhlíka a cykloalkenylové skupiny s 3 až 6 atómami uhlíka.

Tieto skupiny môžu ďalej obsahovať prípadne substituent RI (kde RI znamená skupinu vybranú zo súboru, ktorý tvorí alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, karboxylová skupina, karbamoylová skupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, atóm halogénu, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, halogenovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, aminoskupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenoylamínová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka, nitroskupina, hydroxylová skupina, oxoskupina, kyanoskupina a amidínová skupina).

(b) Heterocyklická skupina môže byť akákoľvek z aromatických heterocyklických skupín a nearomatických heterocyklických skupín uvedené ako príklady heterocyklickéj skupiny pre Q a výhodne sú (i) päť- až šesťčlenné, monocyklické aromatické heterocyklické skupiny, (ii) deväť- až dvanásťčlenné, kondenzované, aromatické heterocyklické skupiny, a (iii) troj- až osemčlenné, nasýtené alebo nenasýtené nearomatické heterocyklické skupiny, ktoré obsahujú, okrem atómov uhlíka, 1 až 4 hetero- atómy vybrané z atómu dusíka, atómu kyslíka a atómu síry.

Tieto skupiny môžu ďalej obsahovať substituent RII (kde RII znamená skupinu vybranú z alkylových skupín s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylových skupín s 1 až 6 atómami uhlíka a benzoylovej skupiny).

(c) Prípadne substituovaná aminoskupina môže byť napríklad aminoskupina, ktorá je pripadne mono- alebo disubstituovaná substituentom RIU (kde RIU znamená skupinu vybranú zo súboru, ktorý tvorí alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenoylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina a alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, ktorá je prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu) alebo troj- až osemčlenná monocyklické aminoskupina, ktorá je prípadne substituovaná skupinou, vybranou zo súboru, ktorý tvorí alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, aralkylová skupina so 7 až 10 atómami uhlíka a arylová skupina so 6 až 10 atómami uhlíka.

(d) Príkladom substituentov v prípadne substituovanej imidoylovej skupine, prípadne substituovanej amidínovej skupine, pripadne substituovanej hydroxylovej skupine a prípadne substituovanej tiolovej skupine sú RIU (kde RIU znamená skupinu vybranú zo súboru, ktorý tvorí alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenoylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina a alkoxykarbonylová skupina s 1 až' 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, ktorá je prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu) opísané v (c) . Tak príklady (d) zahŕňajú alkylimidoylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, formimidoylovú skupinu alebo amidinovú skupinu, benzyloxyskupinu, alkanoyloxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka a oxoskupinu.

(e) Atómy halogénu, ako fluór, chlór, bróm, jód, kyanoskupina a nitroskupina.

(f) Pripadne substituované karboxylové skupiny zahŕňajú karboxylovú skupinu, alkoxykarbonylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, aryloxykarbonylové skupiny so 7 až 12 atómami uhlíka v aryloxylovej časti a arylalkoxykarbonylové skupiny so 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a arylovú skupinu, kde také (f) je prípadne substituované s RIV. RIV znamená aminoskupinu, ktorá je mono- alebo disubstituovaná substituentom RII (kde RII znamená skupinu vybranú z alkylových skupín s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylových skupín s 1 až 6 atómami uhlíka a benzoylové skupiny) skupiny (b); atóm halogénu; hydroxylovú skupinu; nitroskupinu; kyanoskupinu, alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovanú 1 až 5 atómami halogénu; alebo alkoxyskupinu, ktorá je prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu.

(g) Prípadne substituovaná karbamoylová skupina, .prípadne substituovaná tiokarbamoylová skupina, prípadne substituovaná sulfonylová skupina, prípadne substituovaná sulfinylová skupina, prípadne substituovaná sulfidová skupina a prípadne substituovaná acylová skupina sú napríklad skupiny predstavované -CONR^gR⁹', -CSNR^qR^q, -SO,.-R alebo -CO-R^q, kde:

R⁹ znamená atóm vodíka alebo substituent RV (kde RV znamená alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkylovú skupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, arylovú skupinu so 6 až 10 atómami uhlíka, arylalkylovú skupinu so 7 až 10 atómami uhlíka alebo heterocyklickú skupinu, kde heterocyklická skupina je skupina obsahujúca, okrem 1 až 4 heteroatómov vybraných z atómu kyslíka, atómu síry a atómu dusíka, atómy uhlíka, ktorá je akákoľvek skupina z (i) päť- alebo šesťčlennej monocyklickej aromatickej heterocyklickej skupiny, (ii) osemaž dvanásťčlennej kondenzovanej heterocyklickej skupiny a (iii) troj- až osemčlennej nasýtenej alebo nenasýtenej nearomatickej heterocyklickej skupiny a alkylová, cykloalkylová, arylová, arylalkylová alebo heterocyklická skupina je prípadne ďalej substituovaná substituentom RIV (f));

R^g' je atóm vodíka alebo skupina vybraná z alkylových skupín s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkýlových skupín s 3 až 6 atómami uhlíka a arylalkýlových skupín so 7 až 10 atómami uhlíka; a y je 0, 1 alebo 2.

V zlúčenine všeobecného vzorca I, Q je výhodne ako je opísané ďalej.

[1-1-a] Príklady prípadne substituovanej uhľovodíkovej skupiny alebo pripadne substituovanej heterocyklickej skupiny zahŕňajú:

(1) alkylové skupiny s 1 až 10 atómami uhlíka; (2) alkenylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka; (3) alkinylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka; (4) cykloalkylová skupiny s 3 až 9 atómami uhlíka; (5) cykloalkenylové skupiny s 3 až 6 atómami uhlíka; (6) cykloalkándienylové skupiny so 4 až 6 atómami uhlíka; (7) arylové skupiny so 6 až 14 atómami uhlíka; a (8) (i) päť- alebo šesťčlenné monocyklické aromatické heterocyklické skupiny, (ii) osem- až dvanásťčlenné kondenzované heterocyklické skupiny, a (iii) troj- až osemčlenné, nasýtené alebo nenasýtené, nearomatické heterocyklické skupiny, ktoré obsahujú, okrem atómov uhlíka, 1 až 4 heteroatómy vybrané z atómu dusíka, atómu kyslíka a atómu síry, pričom každá skupina (1) až (8) môže byť nesubstituovaná alebo môže byť substituovaná 1 až 5 substituentami vybranými z triedy od (a-1) až (g-1) opísaných ďalej.

Triedy sú:

(a-1): alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka, alkinylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka, arylové skupiny so 6 až 14 atómami uhlíka, cykloalkylové skupiny s 3 až 7 atómami uhlíka a cykloalkenylové skupiny s 3 až 6 atómami uhlíka. Tieto substituenty sú ďalej prípadne substituované substituentom RT. (kde RT znamená skupinu vybranú zo súboru, ktorý tvorí alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka;

alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; karboxylová skupina; karbamoylová skupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; atóm halogénu; alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; halogenované alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; aminoskupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; alkenoylamínová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka; nitroskupina; hydroxylové skupina; oxoskupina; kyanoskupina a amidínová skupina).

(b-1): heterocyklická skupina, obsahujúca okrem atómov uhlíka, 1 až 4 heteroatómy vybrané z atómu kyslíka, atómu síry a atómu dusíka, ktorá je ktorákoľvek skupina z (i) päť- alebo šesťčlennej monocyklickej aromatickej heterocyklickej skupiny, (ii) osemaž dvanásťčlennej kondenzovanej heterocyklickej skupiny a (iii) troj- až osemčlennej, nasýtenej alebo nenasýtenej, nearomatickej heterocyklickej skupiny. Tieto heterocyklické skupiny sú prípadne ďalej substituované s RII (kde RII znamená skupinu vybranú z alkylovej skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylovej skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a benzoylovej skupiny).

(c-1): aminoskupina, ktorá je prípadne substituovaná substituentom RIII (kde RIU znamená skupinu vybranú zo súboru, ktorý tvorí alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenoylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina a alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, ktorá je prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu) a troj- až osemčlenná monocyklická aminoskupina, ktorá je prípadne substituovaná skupinou, vybranou zo súboru, ktorý tvorí alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, aralkylová skupina so 1 až 10 atómami uhlíka a arylová skupina so 6 až 10 atómami uhlíka.

(d-1): imidoylová skupina, amidínová skupina, hydroxylové skupina a tiolová skupina. Tieto substituenty sú prípadne substituované skupinami vybranými zo substituentov RIII ako je opísané v (c-1).

(e —1) : atóm halogénu, ako je fluór, chlór, bróm, jód, kyanoskupina a nitroskupina.

(f —1) : karboxylová skupina, alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, aryloxykarbonylová skupina so 7 až 12 atómami uhlíka a arylalkoxykarbonylová skupina so 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; a arylová skupina v (f—1) je prípadne substituovaná substituentom RIV' (kde RIV' predstavuje aminoskupinu, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná skupinami vybranými z RIU ako je opísané v (c-1); alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka, ktorá je. prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu; atóm halogénu; hydroxylová skupina; nitroskupina; a kyanoskupina).

(g-1): skupina predstavovaná -CONR^yR⁹', -CSNR⁹R⁹'', -SO_y-R alebo

-CO-R⁹, kde:

R⁹ znamená atóm vodíka alebo substituent RV (kde RV znamená alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkylovú skupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, arylovú skupinu so 6 až 10 atómami uhlíka, arylalkylovú skupinu so 7 až 10 atómami uhlíka alebo heterocyklickú skupinu, kde heterocyklická skupina je skupina obsahujúca, okrem 1 až 4 heteroatómov vybraných z atómu kyslíka, atómu síry a atómu dusíka, atómy uhlíka, ktorá je akákoľvek skupina z (i) päť- alebo šesťčlennej monocyklickej aromatickej heterocyklickej skupiny, (ii) osemaž dvanásťčlennej kondenzovanej heterocyklickej skupiny a (iii) troj- až osemčlennej nasýtenej alebo nenasýtenej nearomatickej heterocyklickej skupiny a alkylová, cykloalkylová, arylová, arylalkylová alebo heterocyklická skupina je prípadne ďalej substituovaná substituentom RIV ako je opísané v (f — 1) ) ;

R⁹' je atóm vodíka alebo skupina vybraná z alkylových skupín s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkýlových skupín s 3 až 6 atómami uhlíka a arylalkylových skupín so 7 až 10 atómami uhlíka; a y je 0, 1 alebo 2.

V skupinách uvedených v (a-1) až (g —1) ako sú opísané skôr, najvýhodnejšie skupiny sú substituenty zahŕňajúce alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkinylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, atóm halogénu, halogenovanú alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, kyanoskupinu, aminoskupinu, hydroxylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenyloxyskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkinyloxyskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkyltioskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylsulfinylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylsulfonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, mono/di- alkylaminoskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, alkanoylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkanoylaminovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyalkýlovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, karboxyalkýlovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkoxykarbonylalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, karbamoylalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, N-alkylkarbamoylalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylových častiach, N,N-dialkylkarbamoylalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylových častiach, fenylovú skupinu, fenoxyskupinu, fenyltioskupinu, fenylsulfinylovú skupinu, fenylsulfonylovú skupinu, benzylovú skupinu a benzoylovú skupinu a aromatický kruh v týchto substituentoch môže byť substituovaný 1 až 3 substituentami vybranými zo súboru, ktorý zahŕňa atómy halogénu, trifluórmetylovú skupinu, kyanoskupinu, hydroxylovú skupinu, aminoskupinu, nitroskupinu, karboxylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, mono/di23 alkylaminoskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, dialkylkarbamoylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, N-alkylkarbamoylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, N,N-dia1kylkarbamoylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti a alkenylamínovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka.

[1—1—b] Výhodne Q je (1) alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, (2) alkenylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka, (7) arylová skupina so 6 až 14 atómami uhlíka alebo (8) (i) päť- alebo šesťčlenná monocyklická aromatická heterocyklická skupina, (ii) osem- až dvanásťčlenná, kondenzovaná aromatická heterocyklická skupina alebo (iii) troj- až deväťčlenná, nasýtená alebo nenasýtená, nearomatická heterocyklická skupina, ktorá okrem atómov uhlíka, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané z atómu dusíka, atómu kyslíka a atqmu síry, pričom každá skupina v (1), (2), (7) a (8) je prípadne mono- alebo disubstituovaná v ľubovoľnej polohe substituentom triedy vybraným z [1—1] (a-1) až (g-1) (najvýhodnejšie z tých, ktoré sú uvedené ako zvlášť výhodné skupiny).

[1-1-c] Výhodnejšie Q je (ľ) alebo (2'): alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka (najvýhodnejšie alkylová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka) alebo alkenylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka (najvýhodnejšie alkenylová skupina s 2 atómami uhlíka), substituovaná substituentom vybraným z (a-1): arylová skupina so 6 až 14 atómami uhlíka a substituentom (b-1): aromatická skupina vybraná z (i) päť- alebo šesťčlennej monocyklickej aromatickej heterocyklickej skupiny, (ii) osem- až dvanásťčlennej, kondenzovanej aromatickej heterocyklickej skupiny ktorá okrem atómov uhlíka, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané z atómu dusíka, atómu kyslíka a atómu síry;

alebo obsahujúca 6 až 14 atómov uhlíka, ktorá je prípadne substituovaná 1 až 2 atómami halogénu; alebo (8') : heterocyklická skupina, ktorou je (i) päť- alebo šesťčlenná monocyklické aromatická heterocyklická skupina, (ii) osem- až dvanásťčlenná, kondenzovaná aromatická heterocyklická skupina alebo (iii) troj- až deväťčlenná, nasýtená alebo nenasýtená, nearomatická heterocyklická skupina, ktorá okrem atómov uhlíka, obsahuje 1 až 4 heteroatómy vybrané z atómu dusíka, atómu kyslíka a atómu síry, a kde atómy uhlíka sú mono- alebo disubstituované atómom halogénu.

Aromatický kruh v uvedenom substituente (T) alebo (2') je prípadne substituovaný 1 až 3 substituentami vybranými zo súboru, ktorý zahŕňa atómy halogénu, trifluórmetylovú skupinu, kyanoskupinu, hydroxylovú skupinu, aminoskupinu, nitroskupinu, karboxylovú skupinu, karbamoylovú skupinu, alkylové ..skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, mono/di- alkylaminoskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, dialkylkarbamoylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkoxykarbonylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, N-alkylkarbamoylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, N,N-dialkylkarbamoylalkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka v každej alkylovej časti a alkenylamínovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka.

Aromatický kruh v substituentoch (ľ) a (8') je tiež pripadne mono- alebo disubstituovaný v ľubovoľnej polohe substituentom triedy vybraným z [1-1] (a-1) až (g-1) (a najvýhodnejšie zo substituentov uvedených ako zvlášť výhodné skupiny).

[1-1-d] Ešte výhodnejšie, Q je benzylová skupina, fenetylová skupina, styrylová skupina, 1-naftylová skupina, 2-naftylová skupina, benzofuran-2-ylová skupina, benzo[b]tien-2-ylová skupina, indolyl-2-ylová skupina, chinolin-3-ylová skupina, lH-benzimidazol-2-ylová skupina, benzoxazol-2-ylová skupina, benzotiazol-2-ylová skupina, 2H-benzofuran-3-ylová skupina, 4-vinylfenylová skupina, 4-benzénsulfonyltiofen-2-ylová skupina alebo 5—(2— -pyridyl)tiofen-2-ylová skupina a aromatický kruh je v takej skupine pripadne mono- alebo disubstituovaný atómom halogénu (najvýhodnejšie atómom chlóru alebo atómom brómu) alebo alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka (najvýhodnejšie metylovou skupinou).

[1-2] V zlúčenine všeobecného vzorca I je A atóm vodíka; alebo (1) prípadne substituovaná, nasýtená alebo nenasýtená päť- alebo šesťčlenná, cyklická uhľovodíková skupina alebo prípadne substituovaná, nasýtená alebo nenasýtená, päť- alebo šesťčlenná heterocyklická skupina, (2) pripadne substituovaná aminoskupina, alebo (3) prípadne substituovaná imidoylová skupina.

[1—2—a] V (1) prípadne substituovaná, nasýtená alebo nenasýtená, päť- alebo šesťčlenná, cyklická uhľovodíková skupina alebo prípadne substituovaná, nasýtená alebo nenasýtená, päť- alebo šesťčlenná heterocyklické skupina, nasýtená aleoo nenasýtená, päť- alebo šesťčlenná, cyklická uhľovodíková skupina zodpovedá tým, ktoré obsahujú 5 alebo 6 atómov v cyklickej uhľovodíkovej skupine uvádzanej ako alicyklické uhľovodíkové skupiny a arylové skupiny v Q. Príklady sú cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklopentenyl, cyklopentadienyl, cyklohexadienyl a fenyl.

Príklady nasýtených alebo nenasýtených, päť- alebo šesťčlenných heterocyklických skupín sú päť- alebo šesťčlenné monocyklické heterocyklické skupiny uvedené v aromatických heterocyklických skupinách, a nasýtených alebo nenasýtených nearomatických heterocyklických skupinách v Q. Heterocyklické skupiny obsahujú, okrem atómov uhlíka, aspoň jeden (a výhodne 1 až 4) heteroatóm vybraný z N, 0 a S.

Špecifickejšie, príklady nearomatických heterocyklických skupín zahŕňajú azetidinyl, oxilanyl, oxetanyl, tietanyl, pyro26 lidinyl, tetrahydrofuryl, tiolanyl, pyrazolinyl, pyrazolodinyl, piperidyl, tetrahydropyranyl, piper'idinyl, morfolinyl, tiomorfolinyl a chinuklidinyl, a príklady aromatických heterocyklických skupín zahŕňajú pyrolyl, furyl, tienyl, oxazolyl, imidazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, izotiazolyl, pyrazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, furazanyl, 1,2,3-tiadiazolyl, 1,2,4-tiadiazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, tetrazolyl, pyridyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-triazinyl, 1,2,5-triazinyl, 1, 3,5-triazinyl,

1,3,5-triazinyl a tiadiazinyl.

Kruh A je pripadne ďalej substituovaný 1 až 3 substituentami R^q (kde R^q je ktorýkoľvek zo substituentov (1) až (8) Q, ktorý je prípadne substituovaný ktorýmkoľvek zo substituentov (a) až (f). Alternatívne, kruh A je prípadne mono- alebo disubstituovaný skupinou vybranou zo súboru, ktorý tvorí:

R¹ (kde R¹ je ktorákoľvek skupina vybraná zo skupiny A (atóm vodíka, atómy halogénu, trifluórmetylová skupina, trifluórmetoxyskupina, karboxylová skupina, karbamoylová skupina, sulfamoylová skupina, aminoskupina, kyanoskupina, nitroskupina, nižšie alkanoylové skupiny, nižšie alkoxyskupiny, nižšie alkoxykarbonylové skupiny, nižšie alkylsulfonylové skupiny, nižšie alkylsulfinylové skupiny, mono- alebo disubstituované nižšie alkylaminoskupiny, cyklické aminoskupiny, nižšie alkanoylaminoskupiny, fenylová skupina, fenoxyskupina, benzyloxyskupina, benzoylová skupina, merkaptoskupina, nižšie alkyltioskupiny, nižšie alkyltiokarbonylové skupiny, hydroxyskupina a mono- alebo disubstituované nižšie alkylaminokarbonylové skupiny); atóm kyslíka, ktorý tvorí N-oxidovú skupinu s cyklickým atómom dusíka; a nižšie alkylové skupiny, nižšie alkoxyskupiny, nižšie alkenylové skupiny, fenylová skupina, päť- alebo šesťčlenné heterocyklické skupiny, ktoré sú prípadne substituované v ľubovoľnom počte polôh substituentom skupiny A).

[1—2—b] Príklady pripadne substituovanej aminoskupiny (2) sú aminoskupiny prípadne mono- alebo disubstituované substituentom RVII (kde RVII je alkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka, formidínová skupina, acetimidoylová skupina, alkenylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka, cykloalkenylová skupina s 3 až 6 atómami uhlíka, cykloalkylová skupina s 3 až 9 atómami uhlíka, cykloalkándienylová skupina so 4 až 6 atómami uhlíka alebo arylová skupina so 6 až 14 atómami uhlíka. Je potrebné uviesť, že cyklická amínoskupina je zahrnutá v nasýtených alebo nenasýtených, päť- alebo šesťčlenných heterocyklických skupinách [1—2—a] (1).

[1-2-c] Príklady prípadne substituovanej imidoylovej skupiny (3) zahŕňaj ú skupinu -C (RVII') =N-RVII” (kde RVII' a RVII” sú rovnaké alebo rôzne a ľubovoľne sa zvolia z atómu vodíka a substituenta RVII, ako je opísané v (2)).

Je potrebné uviesť, že cyklická imidoylová skupina je zahrnutá v [1-2-a] (1) nenasýtené, päť- alebo šesťčlenné heterocyklické skupiny.

Výhodnejšie, A je atóm vodíka; alebo [1-2-al] päťčlenná, aromatická, monocyklická heterocyklické skupina, ktorá môže obsahovať, okrem atómov uhlíka, 1 až 4 atómy dusíka alebo 1 až 3 atómy kyslíka alebo síry alebo nasledujúcu skupinu

kde G¹, G², G³ a G⁴ sú nezávisle CH alebo N a všetky kruhy sú prípadne mono- alebo disubstituované ktorýmkoľvek substituentom (a) až (g) ako sú opísané skôr;

[1—2—bl] amínoskupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 10 atómami uhlíka alebo arylovou skupinou so 6 až 14 atómami uhlíka, formimidoylaminoskupina alebo acetimidoylaminoskupina; alebo skupina [1-2-cl] : -N (R^a)-C (R^a') =N-R^a alebo skupina: -C(R^a')=N-R^a (kde v každej skupine R^a'' je atóm vodíka alebo alkylová skupina s 1 až atómami uhlíka;

R^a' je atóm vodíka; alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina, aminoskupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná skupinou vybranou zo súboru, ktorý tvorí alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo benzoylová skupina; alebo alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka a

R^a je atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina, alebo alternatívne, -C(R^a')=N-R^ri v každej skupine môže tvoriť:

alebo

[1-3] V zlúčenine všeobecného vzorca I, B je [1-3-a] jednoduchá väzba, karbonylová skupina, skupina -S(O)_X(kde x je typicky 0 až 2, výhodne 2) alebo prípadne substituovaná alkylénová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka (ktorá je typicky substituovaná pripadne halogénovanou alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka alebo prípadne halogénovanou alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka), pina -S(O)z^-, a [1-3-c] výhodnejšie jednoduchá väzba.

[1-3-b] výhodne jednoduchá väzba, karbonylová skupina alebo sku29 [1-4] V zlúčenine všeobecného vzorca I, D je [1 — 4—a.] atóm vodíka, skupina -CO-R⁵ (kde R⁵ je atóm vodíka alebo substituent) alebo prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka (výhodne alkylová skupina substituovaná 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovaná R¹⁵, ako je opísané ďalej ) .

R⁵ je výhodne atóm vodika; hydroxylová skupina; alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkoxykarbonylalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; fenoxyskupina alebo benzyloxyskupina, pričom každá táto skupina je prípadne substituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka alebo atómom halogénu; alebo prípadne substituovaná aminoskupina a najmä skupina -NR⁶R⁷ (kde R^s a R⁷ sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkylová skupina so 4 až 7 atómami uhlíka alebo alkenylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka; alebo R' a R⁷ môžu spolu s atómom dusíka ku ktorému sú viazané tvoriť päť- až sedemčlenný heterocyklický kruh, pričom heterocyklický kruh prípadne obsahuje 1 alebo 2 heteroatómy vybrané z N, Sa 0); a substituent R⁵ je prípadne ďalej substituovaný skupinou vybranou zo súboru, ktorý tvorí hydroxylová skupina, aminoskupina, karboxylová skupina, alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6·atómami uhlíka v alkoxylovej časti, oxoskupiny, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, karboxyalkýlová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkylalkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti a 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a karbamoylalkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti).

[1-4-b] Výhodnejšie D je atóm vodíka; alebo

1) skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí karboxylová skúpi- na; alkylkarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti; alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alkoxykarbonylalkylkarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; fenoxykarbonylová skupina, prípadne substituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka alebo atómom halogénu; benzyloxykarbonylová skupina prípadne substituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka alebo atómom halogénu;

2) karbamoylová skupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; alkoxykarbamoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alkoxykarbonylalkylkarbamoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; cyklická aminokarbonylová skupina pripadne substituovaná oxoskupinou, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou alebo karboxylovou skupinou (a najmä, pyrolidin-l-ylkarbonylová skupina, piperidin-l-ylkarbonylová skupina, piperazin-l-ylkarbonylová skupina, 4-morfolinokarbonylová skupina, tiomorfolinokarbonylová skupina alebo 1, l-dioxo-4-tiomorfolinokarbonylová skupina); alebo skupiny predstavované -CONH(CH₂) _PS (O) _qR¹⁰ a -CONH (CHJ-NRⁿR¹² (kde R¹⁰, R¹¹ sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, fenylová skupina alebo alkylfenylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti; p je celé číslo 0 až 4; q je celé číslo 0 až 2; a t je celé číslo 0 až 4; alebo

3) alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka (výhodne metylová alebo etylová skupina), prípadne substituovaná s R¹⁵ (kde R¹⁵j e karboxylová skupina; alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; hydroxylová skupina; alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alkanoyloxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; aminoskupina; mono- alebo disubstituovaná alkylamincskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkanoylaminoskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; päť- alebo šesťčlenná cyklická aminoskupina, prípadne substituovaná s oxoskupinou, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou alebo karboxylovou skupinou (najmä pyrolidin-l-ylová skupina, piperidin-l-ylová skupina, piperazin-l-ylová skupina, 4-morfolínová skupina, tiomorfolinová skupina alebo 1,l-dioxo-4-tiomorfolínová skupina); alebo N-hydroxyiminová skupina (aldoximová skupina).

[1-4-c] Ešte výhodnejšie, D je atóm vodíka; alebo

1) skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí karboxylová skupina; alkylkarbonylová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka v alkylovej časti; alkoxykarbonylová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a alkoxykarbonylalkylkarbonylová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alebo fenoxykarbonylová skupina, prípadne substituovaná alkylovou skupinou s 1 až 2 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 2 atómami uhlíka alebo atómom halogénu alebo benzyloxykarbonylová skupina prípadne substituovaná alkylovou skupinou s 1 až 2 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 2 atómami uhlíka alebo atómom halogénu;

2) karbamoylová skupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 2 atómami uhlíka; alkoxykarbamoylová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alkoxykarbonylalkylkarbamoylová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; cyklická aminokarbonylová skupina prípadne substituovaná oxoskupinou, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou alebo karboxylovou skupinou (a najmä, pyrolidin-l-ylkarbonylová skupina, piperidin-l-ylkarbonylová skupina, piperazin-l-ylkarbonylová skupina, 4-morfolinokarbonylová skupina, tiomorfolinokarbonylová skupina alebo 1,l-dioxo-4-tiomorfolinokarbonylová skupina); alebo

3) metylová alebo etylová skupina, prípadne substituovaná s R¹⁵' (kde R¹⁵' je karboxylová skupina; alkoxykarbonylová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; hydroxylová skupina; alkoxyskupina s 1 až 2 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alkanoyloxyskupina s 1 až 3 atómami uhlíka; aminoskupina; mono- alebo disubstituovaná alkylaminoskupina s 1 až 2 atómami uhlíka; alkanoylaminoskupina s 1 až 2 atómami uhlíka; pyrolidin-l-ylová skupina, piperidin-l-ylová skupina, piperazin-l-ylová skupina,

4-morfolínová skupina, tiomorfolínová skupina alebo l,l-dioxo-4-tiomorfolinová skupina), pričom každá z nich je prípadne substituovaná oxoskupinou, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou alebo karboxylovou skupinou).

[1-5] Vo všeobecnom vzorci I, X je [l-5a] metinová skupina, prípadne substituovaná skupinou A'-B'(kde A' je skupina vybraná zo súboru definovanom pre A a B' je skupina vybraná zo súboru definovanom pre B) alebo atóm dusíka, a [l-5b] výhodne metinová skupina alebo atóm dusíka a [l-5c] výhodnejšie atóm dusíka.

[1-6] Vo všeobecnom vzorci I, Y je [l-6a] atóm kyslíka, skupina -S(0) _y- (kde y je celé číslo 0 až 2) alebo prípadne substituovaná iminoskupina (-NH-) kde substituent pre iminoskupinu je 1) skupina -CO-R⁵ (kde R⁵ je skupina vybraná zo skupín definovaných skôr); 2) alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovaná R¹⁵ (kde R¹⁵ je skupina vybraná zo skupín definovaných skôr); 3) alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo fenylová skupina, ktorá je prípadne substituovaná atómom halogénu; alebo 4) N-oxidová skupina, ako je opísaná pre D v [4].

[1—6—b] Výhodne, Y je atóm kyslíka alebo [1-6-c] alternatívne skupina -S(O)_y- (kde y je celé číslo 0 až 2, výhodne 0) alebo [1—6—d] nesubstituovaná iminoskupina (-NH).

[1-7] Vo všeobecnom vzorci I, Z je [1—7—a] metylénová skupina, karbonylová skupina alebo tiokarbonylová skupina a [1-7-b] výhodne karbonylová skupina.

[1-8] Vo všeobecnom vzorci I, T je [1-8-a] skupina -S(O)t- (kde z je celé číslo 0 až 2, výhodne 2), karbonylová skupina alebo prípadne substituovaná alkylénová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka (najmä alkylénová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka prípadne substituovaná halogenovanou alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka alebo prípadne halogenovanou alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka), a [1-8-b] výhodne, skupina -SO2- alebo skupina -CH₂-.

[1-9] Vo všeobecnom vzorci I, 1, m a n sú í

[1-9-a] nezávisle celé číslo 0, 1 a 2, s výhradou, že 1 a m nie sú súčasne 0 a [1—9—b] výhodnejšie 1 je 1; m je 0 alebo 1; a n je 1.

[1-10] Vo všeobecnom vzorci I, r je 0 alebo 1. Väzba indikovaná prerušovanou čiarou alebo plnou čiarou je jednoduchá väzba alebo dvojitá väzba (keď r je 0).

[1-11] Ako príklady substituentov kruhu obsahujúceho X, kruhu obsahujúceho Y a kruhu obsahujúceho Z sa uvádzajú oxoskupina (=0); hydroxyiminoskupina (=N-OH); alkoxyiminoskupina XN-OR¹, kde R¹ je alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, ' pripadne substituovaná substituentom, ktorým je výhodne skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí halogén, hydroxylová skupina a karboxylová skupina); a skupiny uvedené pre D v [1—4] a výhodné substituenty sú oxoskupina, hydroxylová skupina, karboxylová skupina, atómy halogénu, alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka a alkinylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka. Z nich sú alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka a alkinylové skupiny s 2 až 6 atómami uhlíka prípadne substituované substituentom RI (kde RI znamená skupinu vybranú zo súboru, ktorý tvorí alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; karboxylová skupina; karbamoylová skupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; atóm halogénu; alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; halogenovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; aminoskupina, ktorá je prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; alkenoylamínová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka; nitroskupina, hydroxylová skupina, oxoskupina, kyanoskupina a amidínová skupina). Zvlášť výhodné substituenty sú oxoskupina, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a karboxylová skupina.

Výhodne, [1-11-a] substituent kruhu obsahujúceho X je výhodne oxoskupina, hydroxylová skupina, nižšia alkylová skupina alebo nižšia alkoxy a 1 kýlová skupina;

[1-11-b] substituent kruhu obsahujúceho Y je výhodne oxoskupina, hydroxyiminoskupina alebo substituovaná alkoxyiminoskupina (=N-OR¹, kde R¹ je alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovaná substituentom, ktorým je výhodne skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí halogén, hydroxylová skupina a karboxylová skupina); a [1-11-c] substituent kruhu Z je výhodne oxoskupina, hydroxyiminoskupina alebo substituovaná alkoxyiminoskupina (=N-OR¹, kde R¹je alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovaná substituentom, ktorým je výhodne skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí halogén, hydroxylová skupina a karboxylová skupina); a poloha substitúcie zahŕňa nahradenie karbonylovej skupiny definovanej ako Z hydroxyimínovou skupinou alebo substituovanou alkoxyiminoskupinou.

Čo sa týka zlúčenín všeobecného vzorca I, výhodné zlúčeniny môžu byť definované akýmikoľvek kombináciami [1-1] až [1-11] opísanými skôr. Príklady zlúčenín takej kombinácie sú uvedené ďalej v [1-12].

[1-12] Vo všeobecnom vzorci I,

Q je (1) alkylová skupina s 1 až 10 atómami uhlíka; (2) alkenylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka; (3) alkinylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka; (4) cykloalkylová skupina s 3 až 9 atómami uhlíka; (5) cykloalkenylová skupina s 3 až 6 atómami uhlíka; (6) cykloalkándienylová skupina so 4 až 6 atómami uhlíka; (7) arylová skupina so 6 až 14 atómami uhlíka; (8) heterocyklická skupina obsahujúca, okrem atómov uhlíka, 1 až 4 heteroatómy, vybrané z atómu kyslíka, atómu síry a atómu dusíka, ktorou je (i) päť- alebo šesťčlenná, monocyklická aromatická heterocyklická skupina, (ii) osem- až dvanásťčlenná, kondenzovaná aromatická heterocyklická skupina, alebo (iii) troj- až osemčlenná, nasýtená alebo nenasýtená, nearomatická heterocyklická skupina; pričom každá z uvedených skupín (1) až (8) je buď nesubstituované alebo je substituovaná v 1 až 5 ľubovoľných polohách substituentom z triedy (a) až (g) opísanej ďalej:

(a) alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka a arylová skupina so 6 až 14 atómami uhlíka, ktoré sú prípadne ďalej substituované substituentom Rl (kde Rl predstavuje alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, aminoskupinu, hydroxylovú skupinu, kyanoskupinu alebo amidínovú skupinu);

(b) heterocyklická skupina obsahujúca, okrem atómov uhlíka, 1 až 4 heteroatómy, vybrané z atómu kyslíka, atómu síry a atómu dusíka, ktorou je (i) päť- alebo šesťčlenná, monocyklická aróma- tická heterocyklické skupina, (ii) osem- až dvanásťčlenná, kondenzovaná aromatická hererocyklická skupina, alebo (iii) trojaž osemčlenné, nasýtené alebo nenasýtené, nearomatické heterocyklické skupiny; kde heterocyklické skupiny sú pripadne substituované substituentom RII (kde RII predstavuje alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo benzoylovú skupinu);

(c) aminoskupina, pripadne substituovaná substituentom vybraným zo substituentov RIU (kde RIU znamená skupinu vybranú zo súboru, ktorý tvorí alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina, alebo prípadne halogencvaná alkoxykarbonylové skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, alkylimidoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, fcrmimidoylová skupina alebo amidínová skupina) ;

(d) imidoylová skupina, amidinoskupina, hydroxylová skupina a tiolová skupina, ktoré sú prípadne ďalej substituované skupinou vybranou zo súboru, ktorý tvoria alkylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina a crípadne halogenované alkoxykarbonylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka;

(e) atóm halogénu, kyanoskupina a nitroskupina;

(f) karboxylová skupina, alkoxykarbonylové skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, aryloxykarbonylové skupiny so 7 až 12 atómami uhlíka v aryloxylovej časti, a arylalkoxykarbonylová skupina so 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, kde arylová skupina v takých substituentoch je prípadne ďalej substituovaná substituentom RIV (kde RIV je hydroxylová skupina, aminoskupina, prípadne mono- alebo disubstituovaná skupinou vybranou zo substituentov RIU (c) ako je opísaná skôr, atóm halogénu, nitroskupina, kyanoskupina, alkylová skupina, ktorá je prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu alebo alkoxyskupina, ktorá je pri- padne substituovaná 1 až 5 atómami'halogénu); a (g) skupina -CO-RV, kde RV je alkylová skupina s 1 až 6 ató- mami lová uhlíka, cykloalkylová skupina s 3 až 6 atómami uhlíka, aryarylalkylová skupina so skupina so 6 až 10 atómami uhlíka, až atómami uhlíka, heterocyklická skupina brané z skupina, heterocyklická 1 až 4 heteroatómy, vyatómu kyslíka, atómu síry a atómu dusíka, ktorou je (i) päť- alebo šesťčlenná, obsahujúca, okrem atómov uhlíka, monocyklická aromatická heterocyklická dvanásťčlenná, kondenzovaná aromatická heterocyklická skupina, alebo (iii) troj- až osemčlenná, nasýtená alebo nenasýtená, nearomatická heterocyklická skupina;

T je skupina —S (O)_z— (kde z je celé číslo 0 až 2, výhodne

2), karbonylová skupina alebo prípadne substituovaná alkylénová skupina s až 2 atómami atómami uhlíka, ktorá genovanou alkylovou skupinou s 1 až substituovaná prípadne halo6 atómami uhlíka alebo prípadne halogenovanou alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka) ;

a výhodne skupina -SO2- alebo skupina

-CH₂-;

A je atóm vodíka alebo

P.ä ť alebo šesťčlenná, aromatická alebo nearomatická, monocyklická heterocyklická skupina, ktorá môže obsahovať, okrem atómov uhlíka, 1 až 4 atómy dusíka alebo 1 alebo atómy síry; kde kruh je prípadne ďalej až 3 atómy kyslíka substituovaný substituentom vybraným zo súboru (a) až (d) ďalej:

(a) atóm halogénu; (b) aminoskupina; (c) alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, prípadne substituovaná substituentom vybraným z atómu halogénu, aminoskupiny, karboxylovej skupiny a hydroxys kúpiny; a í d j karboxylová skupina, alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, aryloxykarbonylová skupina so 7 až 12 atómami uhlíka v aryloxylovej časti a arylalkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v arylovej časti s 1 až 4 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, kde arylová skupina je prípadne substituovaná substituentom RIV (kde

RIV je hydroxylová skupina; aminoskupina, pripadne mono- alebo disubstituovaná s kupiny s 1 až atómami uhlíka, alkanoylovej skupiny s až 6 atómami uhlíka a benzoylovej atóm halogénu;

nitroskupina;

kyanoskupina; alkylová skupina s 1 až atómami uhlíka, prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu ; alebo alkoxyskupina, ktorá je prípadne substituovaná 1 až 5 atómami halogénu) ;

(2) aminoskupina, prípadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 10 atómami uhlíka alebo arylovou skupinou so 6 až 14 atómami uhlíka; alebo

(3)	s kupina	: -N(R^a	)-C(R^a')=NR^a alebo skupina : -C (R^a') =N-R^a,
kde
R”	je	atóm	vodíka	alebo alkylová skupina s 1 až 6 atómami
uhlíka;
R^a'	je	atóm	vodíka,	alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlí-

ka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, benzoylová skupina, aminoskupina mono- alebo disubstituovaná skupinou vybranou z alkylovej skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylovej skupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a benzoylovej skupiny alebo alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; a

R^a je atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkanoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo benzoylová skupina; alebo alternatívne časť -C(R^a')=N-R^a v každej skupine môže tvoriť

alebo

B je jednoduchá väzba; skupina -S0₂- alebo prípadne substituovaná alkylénová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka;

D je atóm vodíka; skupina -CO-R⁵ (kde R⁵ je atóm vodíka alebo substituent); alebo prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka (a výhodne alkylová skupina pripadne substituovaná s R¹⁵ ako je opísané ďalej); kde

R⁵ je výhodne atóm vodíka; hydroxylová skupina; alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkoxykarbonylalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, alebo prípadne substituovaná amínoskupina a najmä skupina -NR⁶R⁷ (kde R⁶ a R⁷ sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkýlová skupina so 4 až 7 atómami uhlíka alebo alkenylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka; alebo R⁵ a R⁷ môžu spolu s atómom dusíka ku ktorému sú viazané tvoriť päť- až sedemčlenný heterocyklický kruh, pričom heterocyklický kruh prípadne obsahuje ďalšie 1 až 2 heteroatómy vybrané z N, Sa 0); a substituent R je prípadne ďalej substituovaný skupinou vybranou zo súboru, ktorý tvorí hydroxylová skupina, amínoskupina, karboxylová skupina, alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, karboxyalkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti, alkylalkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti a 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a karbamoylalkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti) .

Výhodnejšie D je atóm vodíka; alebo

1) skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí karboxylová skupina; alkylkarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti; alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti a alkoxykarbonylalkylkarbonylová skupina s 1 až atómami uhlíka v alkoxylovej časti;

2) karbamoylová skupina, ktorá je pripadne mono- alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka; alkoxykarbamoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alkoxykarbor.ylalkylkarbamoylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; cyklická aminokarbonylová skupina prípadne substituovaná oxoskupinou, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou alebo karboxylovou skupinou (a najmä, pyrolidin-l-ylkarbonylová skupina, piperidin-l-ylkarbonylová skupina, piperazin-l-ylkarbonylová skupina, 4-morfolinokarbonylová skupina, tiomor f ol inokarbor.ylová skupina alebo 1, l-dioxo-4-tiomorfolinokarbonylová skupina); alebo skupina vybraná zo skupín, ktoré predstavuje skupina -CONH (CH₂) _PS (O) _qR¹⁰ a -CONH (CH₂) _tNR¹¹R¹² (kde R¹⁰, R¹¹ a R¹² sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, fenylová skupina alebo alkylfenylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkylovej časti; p je celé číslo 0 až 4; q je celé číslo 0 až 2; a t je celé číslo 0 až 4); alebo

3) alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka (výhodne metylová alebo etylová skupina), prípadne substituovaná s R¹⁵ (kde R¹⁵je karboxylová skupina; alkoxykarbonylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; hydroxylová skupina; alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka v alkoxylovej časti; alkanoyloxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; aminoskupina; mono- alebo disubstituovaná alkylaminoskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkanoylaminoskupina s 1 až 6 atómami uhlíka; alkylsulfonylamínová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka; päť- alebo šesťčlenná cyklická aminoskupina, ktorá je prípadne substituovaná oxoskupinou, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou alebo karboxylovou skupinou (a najmä pyrolidin-l-ylová skupina, piperidin-l-ylová skupina, piperazin-l-ylová skupina, 4-morfolínová skupina, tiomorfolínová skupina alebo 1, l-dioxo-4-tiomorfolinová skupina); a N-hydroxyimínová skupina (aldoximová skupina);

X je CH alebo N;

Y je atóm kyslíka, skupina -S(0)_y- (kde y je celé číslo 0 až

2, výhodne 0) alebo NH;

Z je metylénová skupina, karbonylová skupina alebo tiokarbonylová skupina (a výhodne karbonylová skupina); a 1, m a n sú nezávisle celé číslo vybrané z 0, 1 a 2 s výhradou, že 1 a m nie sú súčasne 0; a r je celé číslo 0 alebo 1 a väzba znázornená prerušovanou čiarou a plnou čiarou je buď jednoduchá alebo dvojitá väzba (keď r je 0).

[1-13] Výhodnejšie je zlúčenina, ktorá spadá do rozsahu ako je opísané skôr zlúčenina všeobecného vzorca Im:

/

A—X

(Im)

Vo všeobecnom vzorci Im, X, Y, Z, D, Q, 1, m, n, a majú význam ako je definované pre [1-12]; T je skupina -SO₂- alebo -CH₂-; A je päťčlenná aromatická monocyklická heterocyklická skupina, ktorá môže, okrem atómov uhlíka, obsahovať 1 až 4 atómy dusíka alebo 1 až 3 atómy kyslíka alebo síry a najmä

alebo

kde G¹, G², G³ a G⁴ sú nezávisle CH alebo N, a výhodne, aspoň jedno z G¹, G, G³ a G' je N. Výhodnejšie sú tie, kde G¹ je N a G², G³ a G¹ sú CH; G² je N a G', G³ a G⁴ sú CH; G³ je N a G¹, G² a G⁴ sú

CH; G a G sú N a G a G sú CH; G a G sú N a G a G⁴ sú CH; G³,

G a G su N a G³ je CH; aG, G aG s u Na G² je CH; a ešte výhodnejšie sú tie, kde G¹ je N a G², G³ a G⁴ sú CH; G¹ a G³ sú N a

G² a G⁴ sú CH; a G¹, G³ a G⁴ sú N a G² je CH.

Ako príklady skupín sa uvádzajú 4-pyridyl, 3-pyridyl, 2-pyridyl, 4-pyrimidinyl, 3-pyrimidinyl a 4-pyridazinyl a výhodne

4-pyridyl a 4-pyrimidinyl.

Je potrebné uviesť, že aj keď N-oxidy môžu byť tvorené dusíkom v ktoromkoľvek G¹ až G⁴, N-oxid na G¹ je výhodný (a najmä, kde aspoň G¹ je dusík, je výhodný). Ďalej všetky z päť- až šesťčlenných kruhov sú prípadne mono- alebo disubstituované ktorýmkoľvek zo substituentov (a) až (d) ako je opísané pre A.

Z nich A je výhodne nesubstituovaná 4-pyridylová skupina alebo 4-pyridylová skupina monosubstituovaná atómom halogénu, aminoskupinou, metylovou skupinou, etylovou skupinou, hydroxylovou skupinou alebo hydroxymetylovou skupinou; a najvýhodnejšie nesubstituovaná 4-pyridylová skupina.

Ako príklady zlúčenín sa uvádzajú:

1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ón ;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ón;

1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylmetoxymetyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

3

6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

1, 4-diaza-4- ( 6-chlórnaf talen-2-ylsulf onyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [b.i.cyklo[4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-ľ- (4- pyrimidinyl) spiro [bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1, 4-diaza-4 - ( (E)-4-chlórstyrylsulfonyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxymetyl) - 7-oxa-ľ - (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón;

1,1-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-etoxykarbonyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4- (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 . 3.0] nonán-8, 4'-piper idin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(izopropoxykarbonyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-6-(propoxykarbonyl) - ľ- (4-pyridyl) spiro [bi cyklo [4 .3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-β-(alyloxykarbonyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 . 3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxye t oxy karbonyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1, 4-diaza-6-(terc-butoxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridýl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-6-karboxylát;

(+)-amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-2-oxo-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-6-karboxylát;

(-)-amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-6-karboxylát;

4-[l,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-2-oxospiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-ľ-yl]pyridin-l-oxid;

ľ-acetimidoyl-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

6- (aminometyl) -1, 4-diaza-4-'( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón;

1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylaminometyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(morfolinometyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 . 3.0 ] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metyl-7-oxa-ľ-(4-pyridýl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

amónium 4-[1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-1'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-6-yl]butylát;

1,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-metyl-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón;

1,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - ľ- (4-pyr idýl )spiro[bicyklo’[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(7-chlór-2H-benzopyran-3-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridýl) spiro[bicyklo[4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(7-chlór-2H-benzopyran-3-ylmetyl)-(6-metoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyr idýl) spiro[bicyklo[4 . 3. Q ] nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

1, 4-diaza-4-(6-chlórbenzotiofen-2-y1sulfony1)-(6-metoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridýl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórbenzotiofen-2-ylmetyl)-(6-metoxymetyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridýl) spiro [bicyklo [4.3.0 ] nonán-8,4'-piperidin] - 2-ón;

1.4- diaza-4-(5-chlórbenzofuran-2-ylsulfony1)-(6-metoxymetyl ) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(5-chlórbenzofuran-2-ylmetyl) -(6-metoxymetyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8,4'-piperidin] -2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórbenzofuran-2-ylsulfonyl)-(6-metoxymetyl) -7-oxa-T- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

a (+) alebo (-) optické izoméry takých zlúčenín a ich farmaceutický prijateľné soli (napríklad metánsulfonát, monosoľ alebo disoľ).

[2] Druhým aspektom predloženého vynálezu je farmaceutická kompozícia vyznačujúca sa tým, že obsahuje, ako aktívnu zložku, zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ.

[2-a] Špecifickejšie, farmaceutická kompozícia je:

1) antikoagulačné činidlo; alebo profylaktické a/alebo terapeutické činidlo pre ochorenia indukované trombózou alebo embóliou;

2) profylaktické a/alebc terapeutické činidlo na liečenie ochorení, kde je antikoagulačné činidlo účinné; alebo profylaktické a/alebo terapeutické činidlo pre ochorenia, kde je účinná inhibícia FXa;

3) profylaktické činidlo proti embólii, spojené s atriálnou fibriláciou/atriálnou chlopňou alebo valvulárnym ochorením srdca (výhodne profylaktické činidlo pre začiatok cerebrálnej ischémie spájanej s týmito ochoreniami); alebo profylaktické a/alebo terapeutické činidlo (najmä profylaktické činidlo pri jeho opakovaní) dočasného ischemického napadnutia; alebo

4) profylaktické a/alebo terapeutické činidlo pre DIC; profylaktické a/alebo terapeutické činidlo pre vírus chrípkovej in- fekcie; profylaktické a/alebo terapeutické činidlo pre trombózu hlbokých vén.

[3] Tretím aspektom predloženého vynálezu je inhibítor FXa, vy- značujúci sa tým, že obsahuje ako aktívnu zložku, zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú sol.

[3-a] Špecifickejšie, inhibítor FXa je inhibítor, ktorý je špecifický vzhľadom na FXa a ktorý sa vyznačuje začlenením, ako aktívnej zložky, zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli; inhibítor FXa, ktorý môže byť podávaný orálne; a inhibítor špecifický vzhľadom na FXa, ktorý môže byť podávaný orálne.

[3-b] Inhibítor FXa je činidlo, ktoré je charakterizované použitím zlúčeniny všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnej soli. Príklady takých činidiel zahŕňajú činidlo pre diagnózu abnormality koagulácie krvi u cicavca, kde sa využíva inhibičné pôsobenie FXa; činidlo na použitie vo fyziologických experimentoch, kde sa využíva kvantitatívne inhibičné pôsobenie FXa.

[4]

Štvrtým aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina všeobecného vzorca V:

(V) (kde A, B, X, Y, lama výhodné uskutočnenia majú rovnaký význam ako je definované pre všeobecný vzorec I; kruh obsahujúci X a kruh obsahujúci Y sú nezávisle prípadne substituované; R je atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovaná hydroxyskupinou alebo atómom halogénu alebo dve R môžu spolu predstavovať alkylénovú skupinu s 2 až 4 atómami uhlíka, ktorá je prípadne substituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxylovou skupinou alebo atómom halogénu) .

Zlúčenina všeobecného vzorca V je nová zlúčenina, ktorá sa používa ako medziprodukt v syntéze zlúčeniny všeobecného vzorca

I. Je potrebné uviesť, že výhodné rozsahy pre A, B, X, Y, 1 a m sú opísané skôr pre výhodné uskutočnenia zlúčeniny všeobecného vzorca I. R je výhodne metylová skupina, etylová skupina,

1,2-etylénová skupina alebo 1,3-propylénová skupina.

[5] Piatym aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina všeobecného vzorca VI:

OR

A-B-X

OR

HN-T-Q (kde A, B, X, Y, Z, T, Q, 1, m a n a výhodné uskutočnenia majú rovnaký význam ako je definované pre všeobecný vzorec I; kruh obsahujúci X a kruh obsahujúci Y sú nezávisle prípadne substituované; alkylénovú skupina, ktorá sa viaže na Z, keď n je 1 alebo viac je prípadne substituovaná; R je atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovaná hydroxyskupinou alebo atómom halogénu alebo dve R môžu spolu predstavovať alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylénovú skupinu s 2 až 4 atómami uhlíka, ktorá je prípadne substituovaná hydroxylovou skupinou alebo atómom halogénu).

1,2-etylénová skupina alebo 1,3-propylénová skupina.

[6] Šiestym aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina všeobec- ného vzorca Ik:

(Ik) (kde P¹ a P² sú nezávisle atóm vodika alebo ochranná skupina pre iminoskupinu; Y, Z, D, 1, m, n a r a výhodné uskutočnenia majú význam definovaný pre zlúčeninu všeobecného vzorca I; a tri kruhy sú nezávisle pripadne substituované). Ako príklady iminových ochranných skupín sa uvádzajú arylalkylové skupiny, ako je benzylová skupina; acylové skupiny, ako je acetylová skupina; alkoxykarbonylové skupiny, ako je benzyloxykarb'onylová skupina a terc-butoxykarbonylová skupina; a tiež imínové ochranné skupiny opísané vo vyčerpávajúcom objeme v Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydanie, 1991, John Wiley & Sons, Inc.

[7] Siedmym aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina všeobec- ného vzorca I-a':

(kde A, B, D, X, Y, Z, Q, T, 1, m, n a r a výhodné uskutočnenia majú význam definovaný pre všeobecný vzorec I; W je odštiepujúca sa skupina alebo skupina premenitelná na odštiepujúcu sa skupinu; kruh obsahujúci X a kruh obsahujúci Y sú nezávisle prípadne substituované; a alkylénová skupina, ktorá sa viaže na Z, keď n je 1 alebo viac je prípadne substituovaná). Ako príklady odštiepujúcich sa skupín sa uvádzajú atómy halogénu; acyloxyskupiny, ako acetyloxyskupina; a substituované sulfonyloxyskupiny, ako je metánsulfonyloxyskupina a p-toluénsulfonyloxyskupina, a pripadne sa odkazuje na všeobecné publikácie organickej chémie.

[8] Ôsmym aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina vykazujúca inhibičné účinky vzhľadom na FXa, ktorá má parciálnu štruktúru predstavovanú všeobecným vzorcom ľ' a jej soľ.

ď') (Vo všeobecnom vzorci,

-X= je -CH= alebo

-N=; tri kruhy, menovite kruh obsahujúci X, kruh obsahujúci Y a kruh obsahujúci Z sú nezávisle pripadne substituované; a Y, Z

D, T,

Q, 1, m, a výhodné uskutočnenia sú ako je definované pre všeobecný vzorec

Parciálna štruktúra predstavovaná všeobecným vzorcom ľ' je nová parciálna štruktúra, ktorá hrá dôležitú úlohu ak zlúčenina rozvíja svoju inhibičnú aktivitu.

[9] Deviatym aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina vykazujúca inhibičné účinky vzhľadom na FXa, ktorá má parciálnu štruktúru predstavovanú všeobecným vzorcom ľ a jej soľ.

(ľ) (Vo všeobecnom vzorci, X je metínová skupina alebo atóm dusíka; tri kruhy, menovite kruh obsahujúci X, kruh obsahujúci Y a kruh obsahujúci Z sú nezávisle prípadne substituované; a A, B, Y, Z, D, 1, m, n a r a výhodné uskutočnenia sú ako je definované pre všeobecný vzorec (I)).

Parciálna štruktúra predstavovaná všeobecným vzorcom I j® nová parciálna štruktúra, ktorá hrá dôležitú úlohu ak zlúčenina rozvíja svoju irihibičnú aktivitu.

[10] Desiatym aspektom predloženého vynálezu je [10-a] zlúčenina majúca inhibičný účinok vzhľadom na FXa predstavovaná všeobecným vzorcom ľ alebo jej farmaceutický prijateľná soľ :

(ľ) kde

D je atóm vodíka, skupina -CO-R⁵ (kde R⁵ je atóm vodíka alebo substituent) alebo prípadne substituovaná alkylová skupina obsahujúca 1 až 6 atómov uhlíka,

X je metínová skupina alebo atóm dusíka;

Y je atóm kyslíka, skupina -S(O)_y- alebo prípadne substituovaná imínová skupina (-NH-);

kruh obsahujúci Y môže pripadne mať ako substituent oxoskupinu;

Z je metylénová skupina, karbonylová skupina alebo tiokarbonylová skupina;

1, m, n a y sú nezávisle číslo vybrané z 0, 1 a 2, s výhradou, že 1 a m nie sú súčasne 0 a r je čislo 0 alebo 1;

väzba označená prerušovanou čiarou a plnou čiarou predstavuje jednoduchú väzbu alebo dvojitú väzbu (keď r je 0); a

La a 1b sú skupiny zúčastňujúce sa väzby zlúčeniny všeobecného vzorca I' na FXa, kde

La znamená skupinu majúcu zásaditú časť, ktorá sa viaže s oblasťou S3 FXa [priestor tvorený aspoň aminokyselinovými zvyškami Trp215, Phel74, Tyr99, Thr98, Glu97 a Lys96], a

Lb znamená skupinu majúcu hydrofóbnu časť, ktorá sa viaže na oblasť SI FXa [priestor tvorený aspoň aminokyselinovými zvyškami Val213, Ser214, Trp215, Gly216, Glu217, Gly218, Cys220, Aspl89, Alal90, Cysl91, Glnl92, Glyl93, Aspl94, Serl95, Gly226, Ile227 a Tyr228] a ktorá interaguje s postranným reťazcom Tyr228 v oblasti SI, ale ktorá netvorí kovalentnú väzbu so Serl95 v aktívnom centre (aminokyselina č. FXa je indikovaná chymotrypsínom č. použitom v proteínovej databanke (PDB), registrácia ID: 1FAX (J. Biol. Chem. 22.11.1996; 271 (47): 29988-92).

Aminokyselina č. FXa zodpovedajúca chymotrypsínu je ukázaná na obrázku 42 vo forme tabuľky.

[10-b] Výhodne je zlúčenina všeobecného vzorca I' zlúčenina, kde, keď sa zlúčenina všeobecného vzorca I' viaže na FXa, interakcia Lb s Tyr228 je interakcia sprostredkovaná atómom halogénu, metylovou skupinou, etylovou skupinou alebo metoxyskupinou (výhodne atóm chlóru alebo atóm brómu) tvoriaca časť hydrofóbnej časti Lb. Výhodne je Lb skupina predstavovaná kombináciou Q v [1-1-d] a T v [ 1-8-a].

[10-c] Výhodnejšie je zlúčenina všeobecného vzorca ľ zlúčenina, kde, keď hydrofóbna časť Lb interaguje s Tyr228 vo väzbe zlúčeniny všeobecného vzorca I' na FXa, je vzdialenosť medzi ťažiskom (koordináta získaná výpočtom pre každú koordinátu X, Y a Z všetkých ťažkých atómov obsiahnutých v parciálnej štruktúre; ďalej pre zjednodušenie uvádzaná ako ťažisko) hydrofóbnej časti Lb a ťažiskom postranného reťazca Tyr228 je v rozsahu 6,9 až 7, 9 Á.

[10—d] Zlúčenina je tiež inhibičná zlúčenina FXa, ktorá ďalej spĺňa aspoň jednu z nasledujúcich podmienok 1) až 3) okrem [10-a] až [10-c] ako je opísané skôr.

1) ak sa zlúčenina viaže na FXa, hydrofóbna časť Lb nepod- lieha ani čiastočne ani úplne elektrostatickej interakcii s Asp oblasti SI.

2) ak sa zlúčenina viaže na FXa, poloha ťažiska hydrofóbnej časti Lb spĺňa v oblasti SI aspoň dve z nasledujúcich podmienok, takže táto poloha je:

i)	vo	vzdialenosti	3, 6	až	4,6	Ä	od	C«	atómu	v	Cysl91;
ii)	vo	vzdialenosti	6,2	až	7,2	Á	od	C«	atómu	v	S e r 19 5 ;
iii)	vo	vzdialenosti	5,5	až	6, 5	Ä	od	c_w	atómu	v	Ser214;
iv)	vo	vzdialenosti	3,6	až	4,6	Á	od	C_u	atómu	v	Trp215;
V)	vo	vzdialenosti	6,7	až	7,7	Ä	od	C«	atómu	v	G1U217;
Vi)	vo	vzdialenosti	5, 8	až	6, 8	Ä	od	C,_z	atómu	v	Cys220;

3) Ak sa zlúčenina viaže na FXa, poloha ťažiska parciálnej štruktúry zahŕňajúca zásaditú časť La .spĺňa v oblasti S3 aspoň dve z nasledujúcich podmienok, takže táto poloha je:

i)	vo vzdialenosti Tyr99;	4,1	až	5,5 A od	ťažiska	postranného	reťazca
ii)	vo vzdialenosti	3, 1	až	4,	5	Ä	od	ťažiska	postranného	reťazca
	Phel74;
iii)	vo vzdialenosti	4,1	až	5,	5	Ä	od	ťažiska	postranného	reťazca
	Trp215;
iv)	vo vzdialenosti	4,1	až	6,	3	Ä	od	karbonylového atómu	kyslíka
	hlavného reťazca	Lys96;	a
v)	vo vzdialenosti	3, 5	a ž	/	1	Ä	od	karbonylového atómu	kyslíka
	hlavného reťazca	Glu	í97 .

4) La má pripadne substituovanú, päť- až šesťčlennú aromatickú monocyklickú heterocyklickú skupinu.

[11] Jedenástym aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina vykazujúca inhibičnú aktivitu na FXa, ktorá spĺňa väzbové podmienky ktoréhokoľvek uskutočnenia [10-a] až [10-d], keď táto zlúče- nina tvorí komplex s FXa a komplex je v kryštalickom stave;

a výhodne, zlúčenina spĺňa väzbové podmienky [10-d].

[12] Dvanástym aspektom predloženého vynálezu je zlúčenina, ktorá spĺňa všetky nasledujúce podmienky:

1) zlúčenina má skupinu obsahujúcu zásaditú časť, ktorá sa spája s oblasťou S3 FXa [priestor tvorený aspoň aminokyselinovými zvyškami Trp215, Phel74, Tyr99, Thr98, Glu98 a Lys96] keď je komplex zlúčeniny s FXa v kryštalickom stave;

2) zlúčenina má hydrofóbnu časť, ktorá sa viaže na oblasť SI FXa [priestor tvorený aspoň jedným aminokyselinovým zvyškom Val213, Ser214, Trp215, Gly216, Glu217, Gly218, Cys220, Aspl89, Alal90, Cysl91, Glnl92, Glyl93, Aspl94, Serl95, Gly226, Ile227 a Tyr228] keď je komplex zlúčeniny s FXa v kryštalickom stave;

3) uvedená hydrofóbna časť interaguje s postranným reťazcom Tyr228 v oblasti SI, ale neviaže sa kovalentne na Serl95 v aktívnom centre, keď je komplex zlúčeniny s FXa v kryštalickom stave; a

4) zlúčenina má inhibičný účinok na FXa.

[13] Trinástym aspektom predloženého vynálezu je kompozícia charakterizovaná obsahom aspoň jednej zlúčeniny podlá aspektov osem až dvanásť podľa vynálezu alebo jej soli ako aktívnej zložky. Taká kompozícia má inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa a preto je taká kompozícia užitočná ako profylaktické alebo terapeutické činidlo pre ochorenia opísané v druhom aspekte a na druhej strane ako inhibítor FXa opísaný v treťom aspekte.

[14] Štrnástym aspektom predloženého vynálezu je farmaceutická kompozícia charakterizovaná obsahom aspoň jednej zlúčeniny podľa aspektov osem až dvanásť podľa vynálezu ako aktívnej zložky.

[15] Pätnástym aspektom predloženého vynálezu je spôsob inhibície FXa vyznačujúci sa tým, že tento spôsob zahŕňa podanie cicavcovi, ktorý vyžaduje inhibíciu FXa, farmaceutickej kompozície podľa aspektu 14 podľa vynálezu. Spôsob je výhodne charakterizovaný tým, že podanie sa uskutoční orálne.

[16] Šestnástym aspektom predloženého vynálezu je kryštál komplexu aspoň jednej zlúčeniny podľa deviateho až dvanásteho aspektu podľa vynálezu alebo jej soli s FXa.

Je potrebné uviesť, že ak sa týka inhibičnej účinnosti FXa uvedenej v [10] až [16], v biologických skúškach pre FXa sa uvádza ako výhodná alternatíva pre IC₅₀ do 1 μΜ, výhodne do 0,5 μΜ, výhodnejšie do 0,1 μΜ a najvýhodnejšie do 0,01 mM.

[17] Sedemnástym aspektom predloženého vynálezu je:

[17-a] farmakofor, ktorý je užitočný v identifikácii návrhu inhibitora, ktorý sa kompetitivne viaže k aktívnemu, miestu FXa alebo jeho fragmentu a ktorý spĺňa všetky skutočnosti uvedené pod bodmi a) až c) :

a) ide o trojrozmerný štruktúrny parameter, ktorý definuje spôsob väzby, keď sa inhibítor viaže na oblasť Sl FXa jeho hydrofóbnej časti a ktorý indukuje interakciu s bočným reťazcom Tyr228 v oblasti Sl;

b) ide o trojrozmerný štruktúrny parameter definujúci spôsob väzby, keď sa inhibítor viaže na oblasť S3 FXa jeho zásaditou časťou; a

c) inhibítor sa kovalentne neviaže na Ser.195 v aktívnom centre.

Je potrebné poznamenať, že aminokyselina č. FXa je indikova-

ná chymotrypsínom č.	použitom v	proteínovej databanke	(PDB)	, re-
gistrácia ID: 1FAX	(J. Biol.	Chem., 22.11.1996;	271	(47) :
29988-92).

Štruktúra zlúčeniny, ktorá sa viaže na oblasť Sl definovanú farmakoforom podlá vynálezu sa jasne odlišuje od štruktúry uvádzanej v stave techniky pre časť uvádzanú v stave techniky pre

DX-9065a a podobne v tom, že interakcia s Tyr228 je nevyhnutná a že elektrostatická interakcia s Aspl89 nie je nevyhnutný predpoklad.

[17—b] farmakofor [17-a] kde [17-bl] interakcia s Tyr228 je interakcia sprostredkovaná atómom halogénu, metylovou skupinou, etylovou skupinou alebo metoxyskupinou (výhodne atóm chlóru alebo atóm brómu) tvoriaca časť hydrofóbnej časti;

[17-b2] pri interakcii s Tyr228 je vzdialenosť medzi ťažiskom hydrofóbnej časti a ťažiskom bočného reťazca Tyr228 v rozsahu

6,9 až 7,9 Á;

[17-b3] farmakofor spĺňa aspoň jednu z nasledujúcich podmienok

1) až 3):

1) ak sa zlúčenina viaže na FXa, hydrofóbna časť nepodlieha ani čiastočne ani úplne elektrostatickej interakcii s Aspl89 oblasti Sl;

2) ak sa zlúčenina viaže na FXa, poloha ťažiska hydrofóbnej časti spĺňa v oblasti Sl aspoň dve z nasledujúcich podmienok, takže táto poloha je:

i)	vo	vzdialenosti	3, 6	až	4, 6	3 A	od	c«	atómu	v	Cysl91;
ii)	vo	vzdialenosti	6,2	až	7,2	Á	od	Ca	atómu	v	Serl95;
iii)	vo	vzdialenosti	5,5	až	6, 5	Ä	od	Ca	atómu	v	Ser214;
iv)	vo	vzdialenosti	3, 6	až	4,6	Á	od	Ca	atómu	v	Trp215;
V)	vo	vzdialenosti	6,7	až	7,7	Ä	od	Ca	atómu	v	Glu217;
vi)	vo	vzdialenosti	5,8	a ž	6, 8	Ä	od	Ca	atómu	v	Cys220;

3) Ak sa zlúčenina viaže na FXa, poloha ťažiska parciálnej štruktúry zahŕňajúca zásaditú časť La spĺňa v oblasti S3 aspoň dve z nasledujúcich podmienok, takže táto poloha je:

vo vzdialenosti

4,1 až

5,5 od ťažiska postranného reťazca

Tyr99;

ii) vo vzdialenosti

3, 1 až

4,5 od ťažiska postranného reťazca

Phel74 ;

vo vzdialenosti

4,1 až

5,5 od ťažiska postranného reťazca

Trp215;

vo vzdialenosti

4,1 až od karbonylového atómu kyslíka

v) hlavného reťazca vo vzdialenosti hlavného reťazca

Lys96; a

3,5 až 5,1

Glu97.

od karbonylového atómu kyslíka [18] Osemnástym aspektom predloženého vynálezu je:

[18-a] spôsob identifikácie návrhu inhibítora, ktorý sa kompetitívne viaže na aktívne miesto FXa alebo jeho fragment, kde inhibítor je skúmaný poskytnutím trojrozmernej štruktúrnej informácie aktívneho miesta do počítačového systému; identifikáciou zlúčeniny, ktorá sa viaže na FXa spôsobom, ktorý spĺňa všetky nasledujúce podmienky:

a) zlúčenina sa spojí s oblasťou Sl svojou hydrofóbnou časťou a časť interaguj e s Tyr22 8,

b) zlúčenina sa spojí s vnútornou časťou oblasti S3 svojou zásaditou časťou, a

c) zlúčenina sa neviaže kovalentne so Ser195;

a podrobením zlúčeniny biologickej skúške, ktorá je schopná merať inhibičnú účinnosť FXa a tým určiť, či zlúčenina vykazuje v skúške inhibičnú účinnosť vzhladom na FXa; a [18—b] výhodne metóda identifikácie inhibítora v rozsahu aspektu [18-a], ktorá je charakterizovaná tým, že zahŕňa: poskytnutie počítačového systému s informáciou o trojrozmernej štruktúre molekuly FXa obsahujúcej aktívne miesto definované koordinátmi tabuľky A (obr. 33 až 36), ako je opísané ďalej; znázornenie trojrozmernej štruktúry aktívneho miesta v počítačovom systéme; porovnanie trojrozmernej štruktúry testovanej zlúčeniny s trojrozmernou štruktúrou aktívneho miesta, takže trojrozmerná štruktúra testovanej zlúčeniny je usporiadaná tak, aby spĺňala všetky nasledujúce podmienky, takže:

a) hydrofóbna časť je usporiadaná v oblasti Sl tak, že hydrofóbna časť môže vzájomne reagovať s Tyr228;

b) zásaditá časť je usporiadaná v oblasti S3; a

c) zlúčenina sa neviaže koválentne so Ser195; hodnotenie, či trojrozmerná štruktúra testovanej zlúčeniny je priestorovo vyhovujúca s aktívnym miestom; prípravu testovanej zlúčeniny, ktorá je priestorovo vyhovujúca s aktívnym miestom; a podrobenie zlúčeniny biologickej skúške, ktorá je schopná merať inhibičnú účinnosť FXa a tým určiť, či zlúčenina vykazuje v skúške inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa; alebo [18-c] alternatívne, metóda pre návrh liečiva, vyznačujúca sa tým, že hodnotenie sa uskutoční na počítači s použitím trojrozmernej informácie o FXa alebo jeho fragmente pre zlúčeninu, ktorá spĺňa nasledujúce asociačné podmienky:

a) zlúčenina sa spojí s oblasťou Sl svojou hydrofóbnou časťou a časť interaguje s Tyr228,

c) zlúčenina sa neviaže kovalentne so Serl95;

alebo [18-d] spôsob v rozsahu aspektov [18-a] až [18-c] ktorým je:

[18—dl] spôsob na uskutočnenie identifikácie alebo molekulového návrhu na základe podmienky, kde interakcia s Tyr228 je spro59 stredkovaná atómom halogénu, metylovou skupinou, etylovou skupinou alebo metoxyskupinou (výhodne atóm chlóru alebo atóm brómu), pričom vzniká podiel hydrofóbnej časti; alebo [18-d2] spôsob uskutočnenia identifikácie alebo molekulového návrhu na základe podmienky, že pri interakcii s Tyr228 je vzdialenosť medzi ťažiskom hydrofóbnej časti a ťažiskom bočného reťazca Tyr228 v rozsahu 6,9 až 7,9 Ä; alebo [18-d3] spôsob uskutočnenia identifikácie alebo molekulového návrhu inhibičnej zlúčeniny FXa, ktorá spĺňa 'aspoň jednu z nasledujúcich podmienok 1) až 3):

1) ak sa zlúčenina viaže na FXa, hydrofóbna časť nepodlieha ani čiastočnej ani úplnej elektrostatickej interakcii s Aspl89 oblasti SI,

2) ak sa zlúčenina viaže na časti spĺňa v oblasti SI aspoň takže táto poloha je:

FXa, poloha ťažiska hydrofóbnej dve z nasledujúcich podmienok,

i)	vo	vzdialenosti	3,6	až 4,6	Ä
ii)	vo	vzdialenosti	6,2	až 7,2	Ä
iii)	vo	vzdialenosti	, c J / >J	až 6,5	Ä
iv)	vo	vzdialenosti	3, 6	až 4,6	Ä
V)	vo	vzdialenosti	6,7	až 7,7	Ä
vi)	vo	vzdialenosti	5,8	až 6,8	Ä
	3)	ak sa zlúčenina	viaže	na
štruktúry zahŕňajúca	zásaditú	ča:
dve	z nasledujúcich podm:	ienok,	tal
i)	vo	vzdialenosti	4,1	až 5, Ξ	0 i A
	Tyr99;
ii)	vo	vzdialenosti	3,1	až 4,5 Ä
	Phel74;

od	c«	atómu	v	Cysl91;
od	C_a	atómu	v	Serl95;
od	c.,	atómu	v	Ser214;
od	C«	atómu	v	Trp215;
od	C_ft	atómu	v	Glu217;
od	c«	atómu	v	Cys220;

FXa, poloha ťažiska parciálnej ť La spĺňa v oblasti S3 aspoň že táto poloha je:

od ťažiska postranného reťazca od ťažiska postranného reťazca

iii)	vo vzdialenosti	4,1 až	5,5	Ä	od	ťažiska postranného	reťazca
	Trp215;
iv)	vo vzdialenosti	4,1 až	6, 3	Ä	od	karbonylového	atómu	kyslíka
	hlavného reťazca	Lys96;	a
V)	vo vzdialenosti	3,5 až	5,1	Ä	od	karbonylového	atómu	kyslíka

hlavného reťazca Glu97.

[18-d₄] spôsob uskutočnenia identifikácie alebo molekulového návrhu v rozsahu aspektu [18-d₃] , ktorý spĺňa aspoň jednu z nasledujúcich podmienok 1) až 3); alebo [18-e] spôsob uskutočnenia identifikácie alebo molekulového návrhu inhibitora podía aspektov [18-a] až [18—d], kde pri poskytnutí zosieťovanej skupiny spájajúcej skupinu viažucu sa na oblasť SI a skupinu viažucu sa na oblasť S3 (napríklad La a Lb vo všeobecnom vzorci I'), kruh majúci spiro jednotku je poskytnutý v sieťujúcej skupine ako prostriedok na potlačenie zmeny konformácie v samotnej sieťujúcej skupine; alebo [18—fJ zlúčenina identifikovaná alebo navrhnutá alebo zlúčenina upravená pre (zlúčenina identifikovateľná alebo navrhnutelná) spôsob na uskutočnenie identifikácie alebo molekulového návrhu podľa aspektov [18-a] až [18-e], ktorá má inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa (IC₅₀) stanovených biologickou skúškou do 1 μΜ a ktorá je neznáma v čase podania prihlášky vynálezu; alebo [18—g] farmaceutická kompozícia obsahujúca ako aktívnu zložku aspoň jednu zlúčeninu identifikovanú alebo navrhnutú alebo zlúčeninu adaptovanú pre spôsob na uskutočnenie identifikácie alebo molekulového návrhu podľa aspektov [18-a] až [18-e], ktorá má inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa (IC50) stanovenú biologickou skúškou do 1 μΜ a (1), ktorá bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu; alebo (2), ktorá bola známa, ale jej biologická aktivita bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu, alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ; alebo [18—h] inhibítor FXa obsahujúci ako aktívnu zložku aspoň jednu zlúčeninu identifikovanú alebo navrhnutú alebo zlúčeninu adaptovanú pre spôsob na uskutočnenie identifikácie alebo molekulového návrhu podľa aspektov [18-a] až [18-e], ktorá má inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa ak sa týka hodnôt IC₅₀ stanovených biologickou skúškou do 1 μΜ a (1) ktorá bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu; alebo (2) ktorá bola známa, ale jej biologická aktivita bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ.

Je potrebné vziať do úvahy, že zlúčenina použitá podľa aspektov [18-f] až [18-h] je výhodne zlúčenina majúca inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa (IC₅₀) do 0,5 μΜ, výhodnejšie do 0,1 μΜ a najvýhodnejšie do 0,01 μΜ.

Vo všetkých aspektoch predloženého vynálezu je treba výraz zlúčenina chápať tak, že zahŕňa tiež jej farmaceutický prijateľnú soľ.

Zlúčenina podľa predloženého vynálezu môže obsahovať asymetrický atóm uhlíka a zlúčenina podľa predloženého vynálezu môže byť zmes alebo izolačný produkt geometrického izoméru, tautoméru, optického izoméru alebo iného stereoizoméru. Izolácia alebo čistenie takého stereoizoméru môže sa uskutočniť odborníkom s použitím techník, ktoré sa obvykle používajú v odbore, napríklad optickým štiepením, s použitím preferenčnej, kryštalizačnej alebo stĺpcovej chromatografie alebo asymetrickou syntézou.

Zlúčenina všeobecného vzorca I podľa predloženého vynálezu môže byť vo forme adičnej soli s kyselinou a v závislosti od typu substituenta môže byť zlúčenina všeobecného vzorca I tiež vo forme soli so zásadou. Táto soľ nie je nijako zvlášť obmedzená, ak je soľ farmaceutický prijateľná a príklady solí zahŕňajú kyslé adičné soli s kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou bromovodíkovou, kyselinou jodovodíkovou, kyselinou sírovou, kyselinou dusičnou, kyselinou fosforečnou alebo inými minerálnymi kyselina62 mi; kyselinou octovou, kyselinou propiónovou, kyselinou šťaveľovou, kyselinou malónovou, kyselinou jantárovou, kyselinou fumarovou, kyselinou maleínovou, kyselinou mliečnou, kyselinou mravčou, kyselinou jablčnou, kyselinou vinnou, kyselinou citrónovou, kyselinou mandľovou alebo ostatnými organickými karboxylovými kyselinami; kyselinou metánsulfónovou, kyselinou etánsulfónovou, kyselinou p-toluénsulfónovou , kyselinou

2-hydroxyetánsulfónovou alebo ostatnými organickými sulfónovými kyselinami; alebo kyselinou aspartovou glutámovou alebo ostatnými kyslými aminokyselinami;

zásadou sodíka, horčíka, vápnika, hliníka alebo ostatnými alkalickými kovmi alebo kovmi . alkalických zemín; metylaminom, etylamínom, etanolamínom, pyridínom, lyzínom, arginínom, ornitínom alebo ostatnými organickými zásadami; a amónna soľ.

Ďalej, soli zlúčeniny podľa vynálezu zahŕňajú tiež monosoli, disoli a trisoli. Ešte ďalej, zlúčenina podľa predloženého vynálezu môže súčasne tvoriť kyslú adičnú soľ a soľ so zásadou, v závislosti od typu substituenta na bočnom reťazci.

Ešte ďalej, predložený vynález zahŕňa tiež hydráty zlúčeniny všeobecného vzorca I a tiež farmaceutický prijateľné solváty a kryštalické polymorfné formy zlúčeniny I. Je potrebné tiež uviesť, že predložený vynález nie je obmedzený zlúčeninami uvedenými v príkladoch ako sú opísané ďalej a že všetky tricyklické zlúčeniny majúce spiro jednotku a predstavované všeobecným vzorcom I a ich farmaceutický prijateľné soli patria do rozsahu predloženého vynálezu.

Je potrebné vziať tiež do úvahy, že taká situácia sa uplatňuje tiež v prípade zlúčenín všeobecného vzorca ľ, Im, V, VI, Ik, I-a', ľ', I”' a podobne.

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu predstavované všeobecným vzorcom I a príbuzné zlúčeniny sa môžu pripraviť postupmi opísanými ďalej.

Ak nie je uvedené inak, A, B, D, G, T, X, Y, Z, 1, m, n a r majú v zlúčeninách všeobecného vzorca I, vzorca I-a, vzorca I-a', vzorca I-a-1, vzorca I-a-2, vzorca I-b, vzorca Ik, vzorca I k',

a vzorca VI v nasledujúcom cvýrobnom postupe 1>, cvýrobnom postupe2>, cvýrobnom postupe 3> a cvýrobnom postupe 4> a ich opise a ich soliach význam, ako je definované pre všeobecný vzorec I. V príslušných zlúčeninách opísaných skôr, . postranné reťazce a alkylénová skupina v kruhoch, sú prípadne substituované 'substituentami definovanými pre všeobecný vzorec I.

Ak nie je uvedené inak, W znamená vo výrobnom postupe odštiepujúcu sa skupinu alebo skupinu, ktorá je premenitelná na odštiepujúcu sa skupinu, ako je opísané skôr. J znamená ochrannú skupinu tiolovej skupiny, ako je p-metoxybenzolová skupina. P¹a P² v medziproduktových zlúčeninách všeobecného vzorca Ik až IIIk-9 označené k nezávisle znamená atóm vodíka alebo ochrannú skupinu imínovej skupiny (-KH-) . Ako príklady ochrannej skupiny pre imínovú skupinu (-ÚH-) sa uvádzajú aralkylové skupiny, ako benzylová skupina; acylové skupiny, ako acetylová skupina; a alkoxykarbonylové skupiny, ako benzyloxykarbonylová skupina a terc-butoxykarbonylová skupina. Ak P¹ a P² sú ochranné skupiny imínovej skupiny (-NH-), odstránenie sa môže uskutočniť adekvátne výberom typu ochranných skupín alebo podmienok k samostatnému alebo súčasnému odstráneniu ochranných skupín, a ak je to nevyhnutné, ochranné skupiny a podobne môžu byť tiež znova zavedené.

Ak nie je uvedené inak, reakčné podmienky použité vo výrob64 ných postupoch sú opísané ďalej. Reakčná teplota je v rozsahu od -78°C do refluxnej teploty rozpúšťadla a reakčný čas je čas, ktorý je dostatočný na požadovaný postup reakcie. Ako rozpúšťadlá sa pri reakcii môžu použiť akékoľvek rozpúšťadlá, ktoré sa nezúčastnia reakcie, napríklad aromatické rozpúšťadlá, ako toluén a benzén; polárne rozpúšťadlá, ako voda, metanol, DMF a DMSO; zásadité rozpúšťadlá, ako trietylamín a pyridín; halogénové rozpúšťadlá, ako chloroform, metylénchlorid a 1,2-dichlórmetán; éterové rozpúšťadlá, ako dietyléter, tetrahydrofurán a dioxán; a ich zmesi; a použité rozpúšťadlo sa môže adekvátne vybrať v závislosti od reakčných podmienok. Zásada môže byť akákoľvek organická zásada, ako je uhličitan draselný, uhličitan cézny, hydroxid sodný, hydroxid draselný a hydrid sodný; alebo organická zásada, ako trietylamín, pyridín, N,N-dialkylanilin a lítiumdiizopropylamid; a kyselina môže byť akákoľvek minerálna kyselina, ako kyselina chlorovodíková a kyselina sírová; organická kyselina, ako kyselina metánsulfdnová a p-toluénsulfónová. Zásady, ani kyseliny nie sú nevyhnutne obmedzené kyselinami uvedenými skôr.

Zlúčeniny predstavované všeobecným vzorcom I a Ik, čo sú zlúčeniny podľa predloženého vynálezu alebo ich soli sa môžu syntetizovať zo zlúčenín predstavovaných všeobecným vzorcom II, všeobecným vzorcom Ilk, všeobecným vzorcom III, všeobecným vzorcom Illk, všeobecným vzorcom III-3, všeobecným vzorcom IIIk-4, všeobecným vzorcom IIIk-6, všeobecným vzorcom IV, všeobecným vzorcom V, všeobecným vzorcom VI alebo ich solí, ktoré sa môžu ľahko pripraviť zo známych, komerčne dostupných zlúčenín cvýrobným postupom 1>, cvýrobným postupom 2> alebo cvýrobným postupom 3> alebo cvýrobným postupom 4>.

Ďalej bude opísaný postup prípravy. Predložený vynález nie je obmedzený na postup opísaný ďalej.

cVýrobný postup 1>

Zlúčenina predstavovaná vzorcom:

a substitúcie každého

I-a alkylénového reťazca majú význam uvedený soľ sa môže pripraviť postupom opísaným skôr; a r je 1) alebo jej

Zlúčeniny predstavované všeobecnými vzorcami II a III:

X, Y, 1, m, n a W a substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr;

a r j e 1; a Z znamená karbonylovú skupinu alebo tiokarbonylovú skupinu) alebo ich soli, ktoré sú komerčne dostupné alebo ľahko odvodené od komerčne dostupných zlúčenín, môžu reagovať podľa známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad, Journal of Medicinal Chemistry, diel 19, str. 436, 1976; Journal of Američan Chemical Society, diel 107, str. 7776, 1985; alebo Journal of Organic Chemistry, diel 63, str. 1732, 1998), výhodne s použitím toluénu lyzátora ako rozpúšťadla v prítomnosti alebo neprítomnosti kyslého kataa výhodne v prítomnosti p-toluénsulfónovej kyseliny.

môže byť podporovaná pri teplote v rozsahu 0°C do

Reakcia teploty spätného toku rozpúšťadla a výhodne sa uskutočňuje pri spätného toku teplote požadovanej reakcie a rozpúšťadla po čas dostatočný pre výhodne počas 2 až 6 hodín, pričom postup vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I-a alebo jej soli.

Ak sa týka substituentu Z, vzájomná premena medzi karbonylovou skupinou a tiokarbonylovou skupinou alebo konverzia na metylénovú skupinu sa môžu uskutočniť, ak je to nevyhnutné, známymi postupmi, napríklad postupom opísaným v Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and Reaction of Organic Compounds [III], str. 1817, 1978, Maruzen.

Ďalej je opísaný typický postup prípravy zlúčenín všeobecného vzorca II a III, ktoré sú východiskovými zlúčeninami.

<1> Postup prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca II:

(Vo všeobecnom vzorci, A,

B, X, Y, 1, m a substitúcie každého alkylénového reťazca definované skôr)

Keď Y je 0 (atóm kyslíka) , zlúčenina sa môže pripraviť napríklad podľa postupu prípravy opísaného ďalej.

A-B-X

jej

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-l alebo soľ, ktoré sú komerčne dostupné alebo ľahko odvoditeľné od merčne dostupnej zlúčeniny, môže reagovať podľa známeho postupu koopísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and

Reaction of Organic Compounds pričom vzniká zlúčenina pred stavovaná všeobecným vzorcom II-2 alebo jej soľ.

<Stupeň ΙΙ-1-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-2 alebo jej sol získaná v <stupni II-1-1> môže byť potom redukovaná podlá známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and Reaction of Organic Compounds [III], str. 1332, 1978, Maruzen) , pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Il-a alebo jej soľ.

Ďalej

je opísaný postup prípravy zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom Il-a alebo jej soli.

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-l alebo jej sol môže reagovať podľa známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and Reaction of Organic Compounds [I], str. 594, 1977, Maruzen), pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-3 alebo jej soľ.

<Stupeň II-2-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-3 alebo jej sol získaná v <stupni II-2-l> môže potom reagovať podlá známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v Synthesis, str. 629, 1984), pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Il-a alebo jej sol.

Ak Y je S (atóm síry), zlúčenina sa môže pripraviť napríklad postupom opísaným ďalej.

<Stupeň II-3-l>

A-B-X y- co₂r \' (II—4)

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-4 (kde R je uhľovodíková skupina, typicky alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, ako metylová skupina, etylová skupina, propylová skupina a terc-butylová skupina a arylalkylová skupina, ako benzylová skupina) alebo jej soľ, ktorá je komerčne dostupná alebo ľahko odvodená od komerčne dostupnej zlúčeniny, môže reagovať známym postupom opísaným v dokumentoch (napríklad JP 09510700), pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-5:

(II-5) (kde R má rovnaký význam ako R v II-4; J je ochranná skupina ako p-metoxybenzylová skupina) alebo jej soľ.

<Stupeň II-3-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-5 alebo jej sol získaná v <stupni II-3-l> a amoniak alebo prípadne chránený amín reagujú normálnou amidáciou, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-6 alebo jej soľ.

(n-6) <Stupeň II-3-3>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-6 alebo jej sol, získaná v <stupni II-3-2> môže byť potom redukovaná podlá známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and Reaction of Organic Compounds [III]'', str. 1332, 1978, Maruzen) , pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-7 alebo jej soľ.

(II-7) <Stupeň II-3-4>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-7 alebo jej soľ získaná v <stupni II-3-3> môže potom reagovať za odstránenia ochrannej skupiny u tiolovej skupiny, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom ΙΙ-b alebo jej soľ.

(Il-b)

1-2) Ked 1 = 0,1 alebo 2 a m = 1 alebo 2

Keď Y je O (atóm kyslíka), zlúčenina sa môže pripraviť na príklad postupom opísaným ďalej.

<Stupeň II-4-l>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-8:

(II—8) alebo jej soľ, ktoré sú komerčne dostupné alebo ľahko odvoditeľné od komerčne dostupnej zlúčeniny, môže reagovať podľa známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v

Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and Reaction of Organic

Compounds [I], str. 331, 1977, Maruzen), pričom vzniká reaktívny derivát predstavovaný všeobecným vzorcom II—9 alebo jeho soľ.

(II-9) <Stupeň II-4-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-9 alebo jej soľ získaná v <stupr.i II-4-l> môže potom reagovať s aktívnou metylénovou zlúčeninou ako etylkyanoacetát, etylnitroacetát, monoamid etylmalonátu alebo etylkyanopropionát v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, v prítomnosti zásady, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom 11-10 (kde E znamená nitroskupinu, kyanoskupinu, amidoskupinu; a R je rovnaké ako R definované vo všeobecnom vzorci II-4 alebo jej soli.

(11-10) <Stupeň II-4-3>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom 11-10 alebo jej sol získaná v <stupni II-4-2> môže byť potom redukovaná podľa známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and Reaction of Organic Compounds [III], str. 1332, 1978, Maruzen), pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-c alebo jej sol.

A—

(II-c)

Keď Y je iminoskupina (-NH-), zlúčenina sa môže získať pos tupom opísaným ďalej.

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-c alebo jej sol získaná v <stupni II-4-3> môže potom reagovať so zlúčeninou fosforu, ako je trifenylfosfin alebo tributylfosfin a azodikarboxylátom, typicky dietylazodikarboxylátom (DEAD) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, k aktivácii hydroxylovej skupiny a vzniknutý produkt môže potom reagovať s ftalimidom, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom 11-11 alebo jej sol.

(H-11) <Stupeň II-5-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom 11-11 alebo jej sol získaná v <stupni II-5-l> môže potom reagovať za odstránenia íiká zlúčenina predstavovaná všesoľ .

y- NH₂ (1 i ~d) (-NH-), zlúčenina sa môže získať napríklad alternatívnym postupom ako je opísané ďalej.

ochrannej skupiny, pričom obecným vzorcom ΙΙ-d alebo

A—B —X vz jej

Keď Y je imínová skupina <Stupeň II-6—1>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-2 alebo jej soľ môže potom reagovať podľa známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad postupom opísaným v Synthesis, str. 832, schéma 2, 1994), pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom 11-12 alebo jej soľ.

CN <Stupeň II-6-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom 11-12 alebo jej soľ získaná v <stupni II-6-l> môže byť potom redukovaná podľa <stupňa II-l-2>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom ΙΙ-e alebo jej soľ.

NH

A-B

Ďalej je opísaný ďalší spôsob prípravy zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom II alebo jej soli.

<Stupeň II-6-3>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II-l alebo jej soľ môže potom reagovať podľa známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad DE 4405140, schéma 1 (reakcia i)), pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom 11-12 alebo jej soľ.

V predchádzajúcich stupňoch môže byť do alkylénového reťazca zavedený substituent, napríklad s použitím komerčne dostupnej zlúčeniny, majúcej zodpovedajúci substituent ako východiskový materiál II-l alebo II-8; zavedením zodpovedajúceho substituenta do východiskového materiálu postupom obvykle používaným v syntéze; konverziou aktívnej metylénovej zlúčeniny <stupeň II-4-l> na adekvátne substituovaný derivát pred reakciou s metylénovou zlúčeninou; redukciou kyánovej skupiny v II-2 alebo I1-4 na amidovú skupinu a konverziou a/alebo modifikáciou karbonylovej skupiny, ako je požadované; alebo ak je to nevyhnutné, priamym zavedením substituenta do zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom II.

Ak sa týka výhodného substituenta D, D môže byť zavedený podľa postupu použitého pre syntézu D ako je opísané ďalej.

<2> Postup prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca III:

(III)

ΝΙή>

,^z_/)n W (kde n je 1 alebo 2) alebo jej alebo ľahko odvodená od komerčne predstavovaná všeobecným vzorcom

W - T - Q <Stupeň III-1-1>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III-l:

(III-l) soľ, ktorá je komerčne dostupná dostupnej zlúčeniny a zlúčenina

III-2:

(IH-2) (kde W, Q a T majú význam opísaný skôr) alebo jej soľ, ktorá je komerčne dostupná alebo ľahko odvodená od komerčne dostupnej zlúčeniny, môžu byť kondenzované, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III-3 alebo jej soľ. Keď je napríklad T sulfonylová skupina a W je atóm chlóru, reakcia sa môže uskutočniť v metylénchloride v prítomnosti trietylaminu pri tep74 lote v rozsahu od 0°C do teploty miestnosti, výhodne pri teplote miestnosti počas 2 až 12 hodín.

HN-T-Q

Ζ-/)η

W (III—3) <Stupeň III-l-2>

III alebo jej sol.

avovanej

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III-3 alebo jej sol získaná v <stupni III-1-1> môže reagovať s alkylačným činidlom predstavovaným všeobecným vzorcom III-4 v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, v prítomnosti zásady, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom (o) r

/)---\

O w (III-4),

Ďalej je opísaný postup prípravy všeobecným vzorcom III alebo jej soli.

<Stupeň III-2-l>

Komerčne dostupná zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom

III-l:

(III-l) (kde n je 1 alebo 2) alebo jej soľ reaguje podlá postupu <stupňa

III-l-2>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III-5 alebo jej soľ.

(HI-5) <Stupeň III-2-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III-5 alebo jej soľ získaná v <stupni III—2—1> sa kondenzuje so zlúčeninou predstavovanou všeobecným vzorcom III-2 alebo jej soľou podľa postupu opísaného v <stupni III-1-1>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III alebo jej soľ.

(D)r (in)

O N —T —Q ,^z~V)n

W

Je potrebné uviesť, že karbonylová skupina vo všeobecnom vzorci III môže byť, ak je to nevyhnutné, chránená a ochranná skupina môže byť v adekvátnom stupni odstránená.

V stupňoch produkujúcich zlúčeninu všeobecného vzorca III môže byť zavedený do alkylénového reťazca substituent, napríklad s použitím komerčne dostupnej zlúčeniny majúcej zodpovedajúci substituent ako východiskový materiál III-l alebo III-4; alebo zavedením zodpovedajúceho substituenta do východiskového materiálu známym postupom opísaným v dokumentoch.

<Výrobný postup 2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom:

(kde A, B, Q, T, X, Y, Z, 1, m a n majú význam definovaný skôr) alebo jej soľ sa môže pripraviť postupom opísaným ďalej.

<Stupeň 1>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom II pripravená postupom opísaným vo <výrobnom postupe 1> alebo jej sol a zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IV alebo jej sol, ktorá je komerčne dostupná alebo ľahko odvodená od komerčne dostupnej zlúčeniny

(kde A, B, X, Y, 1 a m a substitúcie každého alkylénového reťazca sú definované skôr; a R je atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovaná hydroxylovou skupinou, atómom halogénu (a najmä metylovou skupinou alebo etylovou skupinou); alebo dve R môžu zároveň predstavovať alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylénovú skupinu s 2 až 4 atómami uhlíka prípadne substituovanú hydroxylovou skupinou alebo atómom halogénu (najmä 1,2-etylénová skupina alebo 1, 3-propylénová skupina) ) môžu reagovať podlá postupu opísaného vo cvýrobnom postupe 1>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom V alebo jej soľ.

(Vo všeobecnom vzorci, A, B, X, Y, lama substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr; a R má rovnaký význam ako R definované vo všeobecnom vzorci IV).

<Stupeň 2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom V alebo jej sol získaná v cstupni 1> a zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III-3:

W ^z_Wn

HN-T-Q (kde Q, T, W, Z a n a substitúcia každého alkylénového reťazca má význam uvedený skôr) alebo jej sol, pripravená podľa postupu opísaného vo cvýrobnom postupe 1> môžu reagovať, pričom vzniká zlúčenina všeobecného vzorca VI alebo jej sol.

Ak Z je karbonylová skupina alebo tiokarbonylová skupina a W je atóm halogénu, hydroxylová skupina alebo alkoxyskupina v zlúčenine predstavovanej všeobecným vzorcom III-3 alebo jej solou, uskutočni sa amidácia v normálnom peptide. Napríklad, ak W je hydroxylová skupina, fenol, ako 2,4,5-trichlórfenol, pentachlórfenol, 2-hitrofenol alebo 4-nitrofenol alebo N-hydroxyzlúčenina, ako N-hydroxysukcínimid, N-hydroxy-5-norbornen-endo-2,3-dikarboxyimid alebo N-hydroxypiperidin sa kondenzuje v prítomnosti kondenzačného činidla, ako je N,N-dicyklohexylkarbodiimid ku konverzii do formy aktívneho esteru a nechá sa reagovať.

Alternatívne sa reakcia môže uskutočniť po získaní zmesového anhydridu kyseliny, reakciou s halogenovanou acylovou zlúčení78 nou, ako je izobutylchlórformiát. Reakcia sa môže tiež podporiť s použitím peptidového kondenzačného činidla, ako je N,N-dicyklohexylkarbodiimid, azid kyseliny difenylfosforečnej alebo samotný dietylkyanofosforečnan.

Ak Z je metylénová skupina v zlúčenine predstavovanej všeobecným vzorcom III-3 alebo jej soľ, normálna alkylácia môže byť podporovaná v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom VI alebo jej soľ.

Ďalej, ak W je hydroxylová skupina, zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III-3 môže byť aktivovaná s použitím zlúčeniny fosforu, ako je trifenylfosfín alebo tributylfosfin a azodikarboxylát, typicky predstavovaný dietylazodikarboxylátom a potom sa uskutoční reakcia v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie .

HN-T-Q (Vo všeobecnom vzorci, A, B, Q, T, X, Y, Z, 1, m a n a substitúcie každého alkylénového reťazca sú ako je definované skôr). R má rovnaký význam ako R definované pre všeobecný vzorec IV.

<Stupeň 3>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IV (kde A, B, Q, T, X, Y, Z, 1, m a n a substitúcie každého alkylénového reťazca sú ako je definované skôr; a R má význam ako R definované pre všeobecný vzorec IV alebo jej soľ získaná v cstupni 2> môže potom reagovať podľa známeho postupu opísaného v dokumentoch (napríklad JP 09316059) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, výhodne s použitím toluénu ako rozpúšťadla, v prítomnosti kyslé79 ho katalyzátora, a výhodne v prítomnosti kyseliny p-toluénsulfcínovej , pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom

I-b alebo jej sol. Reakčná teplota je výhodne v rozsahu 70°C až 80°C a reakčný čas je výhodne v rozsahu 1 až 2 hodín. Ak sa týka substituenta Z, vzájomná premena medzi karbonylovou skupinou a tiokarbonylovou skupinou alebo konverzia na metylénovú skupinu sa môžu uskutočniť, ak je to nevyhnutné, známymi postupmi, napríklad postupom opísaným v Shinjikkenkagakukouza 14, Synthesis and Reaction of Organic Compounds [III], str. 1817, 1978, Maruzen.

(I-b) (Vo všeobecnom vzorci,

A, B, Q, T, X, Y, Z, 1, m a n majú význam ako je uvedené skôr).

<Výrobný postup 3>

Ďalší postup prípravy zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom I-a alebo jej soli je opísaný ďalej.

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I-b

(I-b) (kde A, B, Q, T, X, Y, Z, 1, m a n majú význam definovaný skôr) alebo jej soľ pripravená vo <výrobnom postupe 2> môže reagovať za redukcie dvojitej väzby vo všeobecnom vzorci, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I-a alebo jej sol. Ako príklad redukčných postupov sa uvádza redukcia kovom alebo kovovou soľou, ako je sodík, vápnik a hliník; redukcia kovovým hyd80 ridom, ako je diizopropylalumíniumhydrid; a redukcia komplexom kovového hydridu, ako je borohydrid sodný; elektrofilná redukcia dibóranom alebo substituovaným dibóranom; a katalytická hydrogenácia s použitím kovového katalyzátora. Ako rozpúšťadlo sa použije rozpúšťadlo, ktoré sa nezúčastní reakcie, napríklad tetrahydrofurán, toluén, metylénchlorid alebo metanol alebo ich zmes a reakcia sa uskutoční pri teplote od -78°C do teploty refluxu po čas dostatočný na priebeh reakcie.

(I-a) (Vo všeobecnom vzorci, A, B, D, Q, T, X, Y, Z, 1, m, n a r majú význam ako je uvedené skôr).

<Výrobný postup 4>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom /

P¹ —N \

(Ik) (kde D, P¹, P², Y, Z, 1, m, n a r a substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr) alebo jej soľ sa môže pripraviť postupom opísaným ďalej.

<1> Postup prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca Ik (Reakcia za tvorby skeletu) <Stupeň 1>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Ilk a všeobecným vzorcom Illk:

P¹-N

W (Ilk), (Illk) (kde D, P¹, P², W, Y, Z, 1, m a n a substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr; a r je 1) alebo ich soli, ktoré sú komerčne dostupné alebo ľahko odvodené od komerčne dostupnej zlúčeniny môžu reagovať podľa cvýrobného postupu 1>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Ik alebo jej soľ.

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Ik alebo jej soľ sa môžu získať iným spôsobom, ako je opísané ďalej.

<Stupeň 2>

Reakcia sa môže podporiť v súlade so <stupňom 1> s použitím rozpúšťadla, ktoré je opísané vo <výrobnom stupni 1> alebo alternatívne halogénovým rozpúšťadlom, ako je metylénchlorid, chloroform alebo 1,2-dichlóretán, výhodne chloroform a tak sa získa zlúčenina všeobecného vzorca Ik' (kde D, P¹, P², W, Y, Z, 1, m a n a substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr; a r je 1) .

(Ik') <Stupeň 3>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Ik' alebo jej sol pripravená v <stupni 2> môže byť potom kondenzovaná podľa cvýrobného postupu 2> <stupeň 2>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Ik alebo jej soľ.

Ďalej sú opísané typické postupy prípravy zlúčenín všeobecného vzorca Ilk a všeobecného vzorca Illk, čo sú východiskové zlúčeniny.

<2> Postup prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca Ilk

(Ilk) (Vo všeobecnom vzorci, P¹, Y, 1 a m, a substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr).

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Ilk alebo jej soľ sa môžu získať postupom podľa <výrobného postupu 1> cvzorec II>.

<3> Postup prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca Illk

(Illk) (Vo všeobecnom vzorci, D, P² , W, Z a n, a substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr; a r je 1).

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Illk alebo jej sol sa môžu získať postupom podľa <výrobného postupu 1> cvzorec III>.

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Illk sa môže pripraviť tiež inými postupmi, opísanými ďalej.

Zlúčeniny predstavované všeobecným vzorcom III-l a všeobec83 <Stupeň ným vzorcom IIIk-1:

(III-l), (IIIk-1) (kde n je 1 alebo 2) a ich soli, ktoré sú komerčne dostupné alebo sa ľahko odvodia od komerčne dostupnej zlúčeniny, môžu reagovať pri nukleofilnej adícii spojenej s otvorením epoxidu, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-2 alebo jej soľ.

(IIIk-2) <Stupeň IIIk-l-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-2 alebo jej soľ získaná v <stupni IIIk-l-l> môžu potom reagovať za normálneho zavedenia ochrannej skupiny do imínovej skupiny (-NH-), pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-3 alebo jej sol.

HO N-P²,^ZY)n

W (IIIk-3) <Stupeň ΙΙΙ-1-3>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-3 alebo jej sol získaná v <stupni IIIk-l-2> sa môžu potom viesť v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, k oxidácii oxidom manganičitým; k oxidácii oxidom chrómovým alebo dvojchrománom; k oxidácii octanom olovičitým; k oxidácii aktivovaným DMSO; k oxidácii vysokovalenčným jódom, typicky Dess-Martinovým činidlom; k oxidácii halogénovou zlúčeninou, ako je kyslíkatá kyselina odvodená od jednomocného halogénu alebo jej sol, pričom vzniká zlúčenina všeobecného vzorca Illk alebo jej sol.

(^D)r

Za

O N-P²,^Z“/)n

W (Illk) <Stupeň IIIk-2-l> a <stupeň IIIk-2-2>

Alternatívne môže zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III—1 alebo jej sol reagovať v <stupni IIIk-l-2> a <stupni IIIk-l-l> cez zlúčeninu predstavovanú všeobecným vzorcom IIIk-4 alebo jej sol, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-3 alebo jej sol.

H N- P²

Z-fjn

W (IIIk-4) <Stupeň IIIk-3-l> a <stupeň IIIk-3-2>

Alternatívne môže zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom

IIIk-2 alebo jej sol reagovať v <stupni IIIk-l-3> a <stupni

IIIk-l-2> cez zlúčeninu predstavovanú všeobecným vzorcom IIIk-5 alebo jej soľ, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Illk alebo jej soľ.

(D) r

O NH ,^z“/)n \N (IIIk-5) <Stupeň IIIk-4-l>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-6 alebo jej soľ, ktorá je komerčne dostupná alebo ľahko odvodená od komerčne dostupnej zlúčeniny, môže reagovať podľa cvýrobného postupu 1> <stupeň III-l-2>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-7 alebo jej sol.

H₂N - P² (D)r

O HN-P² (IIIk-6), <Stupeň IIIk-4-2>

(IIIk-7)

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-7 alebo jej soľ získané v <stupni IIIk-4-l> a zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-8:

(IIIk-8) (kde W, Z a n majú význam uvedený skôr; a W¹ je skupina vybraná zo súboru definovaného pre W pre selektívnu substitúciu W¹ v tejto reakcii) alebo jej sol, ktorá je komerčne dostupná alebo ľahko odvodená od komerčne dostupnej zlúčeniny, sa potom môžu kondenzovať podľa postupu opísaného v <stupni IIIk-4-l>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom Illk alebo jej soľ.

<Stupeň IIIk-5-l> a <stupeň IIIk-5-2> alebo <stupeň IIIk-5-3>

Alternatívne môže zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom III k-6 alebo jej sol reagovať v <stupni IIIk-l-l> a <stupni IIIk-l-2> cez zlúčeninu predstavovanú všeobecným vzorcom IIIk-9 alebo jej sol, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-3 alebo jej soľ. Alternatívne sa môže zlúčenina všeobecného vzorca IIIk-9 oxidovať podľa <stupňa IIIk-l-3>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom IIIk-7 alebo jej soľ.

(IIIk-9)

H Ο HN-P²

Alternatívne sa zlúčenina majúca skupinu -T-Q namiesto skupiny — P\ napríklad zlúčenina všeobecného vzorca IIIk-6, kde -P je -T-Q, alebo zlúčenina všeobecného vzorca IIIk-4, kde -P² je -T-Q môže použiť podľa alternatívneho postupu opísaného skôr na prípravu zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom III alebo jej soli.

Vo cvýrobnom postupe 4> môžu byť P¹ alebo P² zbavené ochrannej skupiny v najadekvátnejšom stupni pre následnú konverziu do A-B alebo T-Q. Konverzia do A-B a T-Q je opísaná ďalej.

Ďalej, ak sa použije cvýrobný postup 4>, zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I-a alebo jej sol, kde P¹ je Α-B-, a -P² je -T-Q sa môže pripraviť prípravou zlúčeniny predstavovanej všeobecným vzorcom I-a':

N-T-Q

/n Z-W (kde A, B, D, Q, T,

X, Y, 1, m, n a W a substitúcie každého alkylénového reťazca majú význam uvedený skôr; r je 1; a Z predstavuje karbonylovú skupinu alebo tiokarbonylovú skupinu) alebo jej soli a následnou kondenzáciou.

zlúčeniny podlá

V predchádzajúcej časti opisu je postup prípravy skeletu predloženého vynálezu opísaný podrobne.

Ďalej bude opísaná konverzia

Konverzia substituentov D,

I

A-B a T-Q sa môže uskutočniť v ktoromkoľvek stupni <výrobného postupu 1>, cvýrobného postupu

2>, <výrobného postupu 3> a <výrobného postupu 4> alebo v stupni východiskovej takej východiskovej zlúčeniny.

zlúčeniny alebo v ktoromkoľvek štádiu prípravy

Pri príprave zlúčeniny podlá vynálezu všeobecného vzorca

I môže odborník zvoliť najvhodnejší čas pre substitučnú konverTypicky sú konverzie substituentov D,

A-B a

T-Q opísané v nasledujúcej sekcii, ktorá však v žiadnom prípade neobmedzuj e rozsah vynálezu.

Napríklad konverzia substituenta D sa uskutočni ako je opisa použije zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I-a alebo jej sol.

<Stupeň D-l>

Zlúčeniny predstavované všeobecným vzorcom Il-a a všeobecným vzorcom III-a-1:

substitúcie na každom alkylénovom reťazci majú význam uvedený skôr; a Ac predstavuje acetylovú sku pinu) alebo ich soli pripravené postupom opísaným vo cvýrobnom postupe 1> reagujú podlá postupu opísaného vo cvýrobnom postupe

1>, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom

I-a-1:

(I-a-1) (kde A, B, Q, T, X, n a Ac a substitúcie na každom alkylénovom reťazci majú význam uvedený skôr) alebo jej soli.

cStupeň D-2>

Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I-a-1 alebo jej sol získaná v cstupni 3-2> sa nechá reagovať s vodným roztokom hydroxidu sodného, napríklad v metanole, pri teplote miestnosti, pričom vzniká zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I-a-2:

A-B-X

(I-a-2) (kde A, B, Q, T, X a n a substitúcie na každom alkylénovom reťazci majú význam uvedený skôr) alebo jej soli.

Ďalej je opísaný postup konverzie postranného reťazca u adekvátneho prekurzora D', napríklad D', ktoré je -CH₂OH (ako v prípade zlúčeniny všeobecného vzorca I-a-2) na substituent D.

1) Substituent D konvertovateľný z D', ktoré je -CH₂OH

1-1) Príprava zlúčeniny, kde D je -CH₂OR' (kde R' je prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka) alebo jej soli

1-1-1) Postup prípravy s použitím R'-W

Zlúčenina, kde D' je -CH₂OH alebo jej soľ môže reagovať so zlúčeninou predstavovanou všeobecným vzorcom R'-W v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, výhodne v zmesovom rozpúšťadle metylénchloridu a vody v prítomnosti zásady a výhodne s použitím hydroxidu sodného v prítomnosti alebo neprítomnosti katalyzátora pre prenos fáz, ako je kvartérna amóniová soľ alebo crown éter, výhodne v prítomnosti benzyltrietylamóniumchloridu, pri teplote v rozsahu od -78°C do teploty spätného toku, výhodne pri teplote 0°C po čas, ktorý je dostatočný pre priebeh reakcie a výhodne, počas 2 hodín na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂OR' alebo jej sol.

1-1-2) Postup prípravy s použitím R'-OH

Zlúčenina, kde D' je skupina -CH₂OH alebo jej soľ môže reagovať so zlúčeninou predstavovanou všeobecným vzorcom R'-OH aktivovanou s použitím zlúčeniny fosforu, ako je trifenylfosfin alebo tributylfosfin a azodikarboxylát, typicky predstavovaný dietylazodikarboxylátom (DEAD) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, pričom dôjde ku konverzii na zlúčeninu, kde D je -CH₂OR' alebo jej soľ.

1-2) Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CH₂-O-COR (kde R'' je prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka) alebo jej soli.

Zlúčenina, kde D' je skupina -CH₂OH alebo jej soľ môže reagovať so zlúčeninou R''-CO-W v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastni reakcie, v prítomnosti alebo neprítomnosti zásady alebo v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny ku konverzii na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂O-CO-R alebo jej soľ.

1-3) Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CH₂NR'R (kde -NR' a R'' sú aminoskupina predstavovaná napríklad -NR⁶R⁷ (kde R⁶ a R⁷ sú nezávisle atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkylová skupina so 4 až 7 atómami uhlíka alebo alkenylová skupina s 2 až 6 atómami uhlíka; alebo R° a R⁷ a dusík, ku ktorému sú viazané tvoria spolu päť- až sedemčlenný heterocyklický kruh, kde heterocyklický kruh obsahuje 1 až 2 heteroatómy vybrané z N, Sa O; a uvedené R⁶ a R⁷ sú prípadne ďalej substituované adekvátnym substituentom)) alebo jej soli.

Zlúčenina, kde D' je skupina -CH₂OH alebo jej soľ, môžu reagovať s tionylchloridom, metánsulfonylchloridom, p-toluénsulfonylchloridom alebo podobne, v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, v prítomnosti alebo neprítomnosti zásady, v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny ku konverzii na zlúčeninu, kde D' je skupina -CH₂-W alebo jej soľ. Zlúčenina, kde D' je skupina -CH₂W alebo jej soľ môžu ďalej reagovať s aminom predstavovaným HNR'R” (napríklad HNR⁶R⁷ a NR⁶R⁷ ako je definované skôr) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, v prítomnosti alebo neprítomnosti medeného prášku, oxidu meďnatého alebo železného prášku, v prítomnosti alebo neprítomnosti zásady alebo v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny ku konverzii na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂-NR'R” alebo na jej soľ. Ak je to žiaduce, môžu sa použiť kovy, ako je meď, paládium, chróm alebo bizmut pre tvorbu komplexu so zlúčeninou, kde D' je predstavované skupinou -CH₂-W, aby sa použila zlúčenina s väčšou aktivitou pri reakcii.

Alternatívne môže reagovať zlúčenina kde D' je skupina -CH₂OH alebo jej sol so zlúčeninou fosforu, ako je trifenylfosfin alebo tributylfosfin a azodikarboxylát, ako je typicky predstavovaný dietylazodikarboxylátom (DEAD) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastni reakcie, s cieľom aktivovať hydroxylovú skupinu a vzniknutý produkt môže reagovať so zlúčeninou predstavovanou NHR'R za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂-NR'R'' alebo jej soľ.

Ak je vo vzniknutej zlúčenine, kde D je skupina -CH₂NR'R alebo jej soli R'' vodík, zlúčenina môže reagovať s R'-CO-W (kde W má význam uvedený skôr; a R' je prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastni reakcie, v prítomnosti alebo neprítomnosti zásady alebo v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂NR'-CO-R' alebo jej soľ. Ak sa reakcia uskutoční s použitím R'-S(O)_s-W (kde W, R'” a z majú význam uvedený skôr) namiesto R'-CO-W, zlúčenina sa môže konvertovať na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂-NR'-S (0) _Z-R' alebo jej sol.

Ak je vo vzniknutej zlúčenine, kde D je skupina -CH₂-NR'R alebo jej soli R” vodík, zlúčenina môže byť tiež alkylovaná s R'-W (kde R' je prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, v prítomnosti alebo neprítomnosti zásady alebo v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny, za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂-NR'R' alebo jej soľ.

Ak je vo vzniknutej zlúčenine, kde D je skupina -CH₂-NR'R alebo jej soli R vodík, zlúčenina môže tiež reagovať s ketónom alebo aldehydom všeobecného vzorca R^dl-CO-R^a2 (kde R^dl a R^d2 sú nezávisle atóm vodíka, prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, cykloalkylová skupina s 3 až 6 atómami uh92 lika alebo 5- alebo šesťčlenný heterocyklický kruh obsahujúci aspoň jeden heteroatóm vybraný z N, 0 a S alebo dl, d2 a atóm uhlíka ketónovej skupiny tvoria spolu päť- alebo šesťčlennú cyklickú skupinu, ktorá môže obsahovať aspoň jeden heteroatóm vybraný z N, 0 a S) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie v prítomnosti redukčného činidla, ako je borohydrid sodný, lítiumalumíniumhydrid alebo diizobutylalumíniumhydrid k reduktívnej aminácii zlúčeniny, pričom sa zlúčenina konvertuje na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂-NR'-CHR^dlR^d2 alebo jej sol.

1—4) Príprava zlúčeniny, kde D' je skupina -CHO alebo jej sol

Zlúčenina, kde D' je skupina -CH₂OH alebo jej soľ sa môžu viesť k reakcii v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, k oxidácii oxidom manganičitým; k oxidácii oxidom chrómovým alebo dvojchrománom; k oxidácii octanom olovičitým; k oxidácii kyslíkom; k oxidácii aktivovaným DMSO; k oxidácii halogénovou zlúčeninou, ako je kyslíkatá kyselina odvodená od jednomocného halogénu alebo jej sol za konverzie zlúčeniny na zlúčeninu, kde D je skupina -CHO alebo jej sol.

1-5) Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CO₂H alebo jej soli

Zlúčenina, kde D' je skupina -CH₂OH alebo jej soľ sa môžu viesť k reakcii v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie k oxidácii oxidom manganičitým; k oxidácii oxidom chrómovým alebo dvojchrománom; k oxidácii octanom olovičitým; k oxidácii kyslíkom, k oxidácii aktivovaným DMSO; k oxidácii halogénovou zlúčeninou, ako je kyslíkatá kyselina odvodená od jednomocného halogénu alebo jej sol za konverzie zlúčeniny na zlúčeninu, kde D je skupina -CO₂H alebo jej sol.

Zlúčenina, kde D je skupina -CH₂OH alebo jej sol sa môžu tiež pripraviť reakciou zlúčeniny, kde D je skupina -CHO alebo jej soli syntetizované v 1-4), pri ktorej dochádza k oxidácii oxidom manganičitým; k oxidácii oxidom chrómovým alebo dvojchro93

mánom;

k oxidácii octanom olovičitým; k oxidácii kyslíkom;

k oxidácii aktivovaným DMSO; k oxidácii halogénovou zlúčeninou, ako je kyslíkatá kyselina odvodená od jednomocného halogénu alebo jej soľ, za konverzie zlúčeniny na zlúčeninu, kde D je skupina -CO₂H alebo jej sol.

2) Substituent D premenitelný z D, ktoré je skupina -CHO

2-1) Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CH(OH)-R^d3 (kde R^d3 je adekvátna skupina vybraná z R¹⁶) definovaná pre D alebo jej sol.

Zlúčenina, kde D je skupina -CHO alebo jej sol pripravená v

1- 4) môže reagovať s nukleofilným činidlom ako je metyllítium alebo fenyllítium v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, za konverzie na zlúčeninu, kde D je -CH(OH)R^d’’ alebo jej sol.

Vzniknutá zlúčenina, kde D je skupina -CH(OH)R^Č3 alebo jej sol, môžu byť konvertované na zlúčeninu, kde D je skupina -CH(OR')R^d3 alebo jej sol postupom, ktorý je podobný 1-1); na zlúčeninu, kde D je -CH(O-CO-R') R^a3 alebo jej soľ, postupom podobným 1-2); a na zlúčeninu, kde D je -CH (NR'R) R^d3 (kde NR'R majú význam uvedený skôr) alebo jej soľ postupom podobným 1-3).

Zlúčenina, kde D je skupina -CH(OH)R^d3 alebo jej soľ môže byť tiež konvertovaná na zlúčeninu, kde D je skupina -CO-R^d4 (kde R^d4 je alkylová skupina adekvátne vybraná napríklad z R¹⁵) postupom podobným 1-4). Vzniknutá zlúčenina, kde D je skupina -CO-R^d4alebo jej sol môže reagovať s alkylidénfosforanom predstavovaným vzorcom Ph3P=CR^cl5R^dc v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastni .reakcie, za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CR^d4=CR^d5R^dS alebo jej soľ. Zlúčenina, kde D je skupina CR^d4=CR^d5R^d6 alebo jej soľ môže byť hydrogenovaná s použitím katalyzátora, ako je aktívne uhlie-paládium za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CHR^d4-CHR^d5R^de (kde R^d5 a R^de sú napríklad alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka) alebo jej sol.

2- 2) Príprava zlúčeniny, kde D je -CH=CR^d5R^do alebo jej soľ

Zlúčenina, kde D je skupina -CHO alebo jej sol, pripravená v

1- 4) môže reagovať s alkylidénfosforanom predstavovaným vzorcom Ph3P=CR^d5R^dS v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CH=CR^d5R^de alebo jej sol.

Vzniknutá zlúčenina, kde D je skupina -CH=CR^d5R^db alebo jej soľ sa môže hydrogenovať s použitím katalyzátora, ako je aktívne uhlie-paládium v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, za konverzie zlúčeniny na zlúčeninu, kde D je skupina -CH₂-CHR^d5R^d6alebo jej sol.

2- 3) Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CH-NR'R alebo jej soľ

Zlúčenina, kde D je skupina -CHO alebo jej soľ, pripravená v 1-4) môže reagovať s aminom predstavovaným vzorcom HNR'R ako je opísané skôr, v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastni reakcie v prítomnosti redukčného činidla, ako je borohydrid sodný, litiumaluminiumhydrid alebo diizobutylalumíniumhydrid reduktívnou amináciou, pričom sa zlúčenina prevedie na zlúčeninu, kde D je skupina -CH-NR'R alebo jej soľ.

3) Substituent D premeniteľný z D, ktoré je -CO₂H

3- 1) Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CO₂R' alebo jej soľ

Zlúčenina, kde D je skupina -CO₂H alebo jej soľ pripravená v 1-5) môže reagovať s R'-OH (kde R' je prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, v prítomnosti alebo neprítomnosti kondenzačného činidla, ako je karbodiimidazol za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CO₂R' alebo jej soľ. Zlúčenina, kde D je skupina -CO₂H alebo jej soľ, môže tiež reagovať s tionylchloridom alebo podobne, za konverzie na zlúčeninu, kde D je -COC1 a zlúčenina potom môže reagovať s R'-OH za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CO₂R' alebo jej sol.

3-2) Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CO-NR'R (kde NR'R má význam definovaný skôr) alebo jej soli

Zlúčenina, kde D je skupina -CO2H alebo jej soľ, môže reagovať s NHR'R (ako je definované skôr) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastni reakcie v prítomnosti alebo neprítomnosti kondenzačného činidla, ako je karbodiimidazol za konverzie na zlúčeninu, kde D je skupina -CO-NR'R” alebo jej soľ. Vzniknutá zlúčenina, kde D je skupina -CO-NR'R” alebo jej soľ, môže reagovať s redukčným činidlom, ako je lítiumalumíniumhydrid alebo diizobutylalumíniumhydrid za konverzie zlúčeniny na zlúčeninu, kde D je skupina -CHO alebo jej soľ. Vzniknutá zlúčenina, kde D je skupina -CO-NR'R” alebo jej soľ, môže tiež reagovať s redukčným činidlom, ako je lítiumalumíniumhydrid alebo diizobutylaluminiumhydrid za konverzie zlúčeniny na zlúčeninu, kde D je skupina -ClhNR'R” alebo jej sol.

Príprava zlúčeniny, kde D je skupina -CO-R· alebo jej sol

Zlúčenina, kde

D je skupina -CO₂H alebo jej soľ, môže reagovať s nukleofilným činidlom, ako je metyllítium alebo fenyllítium v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie, za konverzie 'na zlúčeninu, kde D je skupina

-CO-R alebo jej soľ.

Reakcia s nukleofilným činidlom sa môže uskutočniť s použitím zlúčeniny, kde

D je skupina -CO₂R' alebo jej soli získanej v 3-1) alebo zlúčeniny, kde D je skupina -CO-NR'R” alebo jej soli získanej v 3-2) .

Ďalej sú opísané typické spôsoby konverzie substituentov A-B a T-Q.

Je potrebné uviesť, že väčšina výrobných postupov je zahrnu tá vo výrobných postupoch opísaných skôr pre konverziu substi tuenta D.

postupu opísaného v

Napríklad, keď substituent B alebo T je karbonylová skupina, akcie, v prítomnosti alebo neprítomnosti zásady alebo v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny. Alternatívne sa môže substituent získať kondenzáciou s použitím A-CO₂H alebo Q-CO₂H, ako je opísané v 3-2) .

Keď je substituent B alebo T skupina -S (0)_Z-W, substituent sa môže získať reakciou s A-S(0)_z-W alebo Q-S(0)_Z-W postupom opísaným v 1-2) v rozpúšťadle, ktoré sa nezúčastní reakcie v prítomnosti alebo neprítomnosti zásady a v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny.

Ak je substituent B alebo T prípadne substituovaná alkylénová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka, potom sa substituent môže získať konverziou hydroxylovej časti zodpovedajúcej alkoholovej formy na odštiepujúcu sa skupinu a následnou nukleofilnou substitúciou postupom opísaným v 1-3); použitím reduktívnej aminácie zodpovedajúcej aldehydovej formy uvedenej v 2-3); alebo redukciou väzby tvorenej cez karbonyl opísanej skôr.

Aj je substituent B jednoduchá väzba, substituent sa môže pripraviť s použitím A-W cez kopulačnú reakciu s použitím kovu, ako je opísané v 1-3); alebo reakciou zlúčeniny s organickou zásadou, ako je trietylamín alebo diizopropyletylamín alebo anorganickou zásadou, ako je uhličitan draselný alebo hydroxid sodný v polárnom rozpúšťadle, ako je DMF, 2-etoxyetanol, etanol alebo voda pri teplote spätného toku rozpúšťadla alebo za zahrievania v utesnenej skúmavke.

Je potrebné uviesť, že keď zlúčenina syntetizovaná cvýrobným postupom 1>, cvýrobným postupom 2>, cvýrobným postupom 3> alebo cvýrobným postupom 4> má reaktívnu skupinu, ako je hydroxylová skupina, aminoskupina, karboxylová skupina alebo tiolová skupina ako jej substituent, taká skupina môže byť chránená ochrannou skupinou, ako je požadované v každom reakčnom stupni a ochranná skupina môže byť odstránená v adekvátnom štádiu. Postup takého zavedenia alebo odstránenia ochrannej skupiny môže byť adekvátne určený v závislosti od skupiny, ktorá má byť chránená a od typu ochrannej skupiny, napríklad postupom opísaným v sekcii Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydanie, 1991, John Willey & Sons, Inc..

Ďalej, ak X je metínový uhlík alebo keď je prítomný D substituent, zlúčenina podľa vynálezu môže byť prítomná vo forme geometrického izoméru, tautoméru, optického izoméru alebo ostatných stereoizomérov. Tieto izoméry a zmesi sú v rozsahu predloženého vynálezu. Izolácia a čistenie takého stereoizoméru sa môže uskutočniť akýmikoľvek technikami obvykle používanými v stave techniky, napríklad rekryštalizáciou a rôznymi chromatografickými postupmi. Je tiež možné separátne získať taký izomér asymetrickou syntézou.

Farmakofor podľa predloženého vynálezu a jeho praktické použitie

Farmakofor podľa predloženého vynálezu je farmakofor, ktorý je opísaný v sedemnástom aspekte predloženého vynálezu, špecifickejšie farmakofor, ktorý je opísaný podrobne v [17-a] až [17-e]. Použitie takého farmakofora umožňuje navrhnutie a/alebo skúmanie inhibítora, ktorý selektívne inhibuje FXa reverzibilnou väzbou k aktívnemu miestu FXa, aby došlo k vývoju kompetitívnej inhibičnej aktivity pre FXa. Najmä, keď sa informácia farmakofora podľa predloženého vynálezu poskytne počítačovému systému, umožní to rýchle hodnotenie veľkého množstva zlúčenín a také hodnotenie podstatným spôsobom zvýši účinnosť biologických testov, ktoré vyžadujú enormné náklady a čas. Také hodnotenie tiež umožní obmedzenie zlúčenín, ktoré sa majú syntetizovať a podstatným spôsobom zvýši efektívnosť syntetického postupu.

Pri navrhovaní a/alebo skúmaní zlúčenín, ktoré sa viažu k aktívnemu miestu FXa a tak inhibujú FXa, by sa mali vziať do úvahy dva faktory. Podľa prvého faktora by mala byť zlúčenina schopná fyzikálne alebo štruktúrne sa viazať k aktívnemu miestu FXa. Nekovalentná väzba medzi proteínom a inhibítorom obvykle naberá formu elektrostatickej interakcie, vodíkovej väzby, van der Waalsovej interakcie alebo hydrofóbnej interakcie. Podlá druhého faktora by zlúčenina mala byť schopná prijať konformáciu, ktorá umožňuje zlúčeninu viazať k aktívnemu miestu FXa. Účinný návrh a/alebo skúmanie je umožnené výberom zlúčeniny, ktorá spĺňa také podmienky a farmakora podľa predloženého vynálezu .

Objavenie zlúčeniny inhibujúcej FXa, ktorá spĺňa faktory ako sú opísané skôr, môže byť uskutočnené využitím informácií o trojrozmernej štruktúre FXa v kombinácii s rôznymi počítačovými programami a databázami. Zlúčenina, ktorá vykazuje inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa môže byť určená selekciou zlúčenín, ktoré spĺňajú farmakofor podľa predloženého vynálezu metódou opísanou ďalej; nákupom alebo syntézou zlúčeniny; a hodnotením zlúčenín s ohľadom na ich inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa štandardnou metódou.

Metóda 1)

Zlúčeniny s nízkou molekulárnou hmotnosťou sú pripojené v aktívnom mieste FXa. Trojrozmerná štruktúra FXa sa zisťuje pomocou PDB a štruktúra aktívneho miesta je dostupná z PDB. Pripojenie sa môže uskutočniť rôznymi počítačovými programami. Použitie počítačovej databázy trojrozmerných zlúčenín umožňuje skúmanie od niekoľkých miliónov zlúčenín do niekoľkých desiatok miliónov zlúčenín a tiež skúmanie neexistujúcich zlúčenín. Po výbere zlúčenín vykazujúcich tvar, ktorý je komplementárny k aktívnemu miestu FXa sa vyberú zlúčeniny vykazujúce väzbový mód, ktorý spĺňa farmakofor podľa vynálezu. Väzbový mód sa môže potvrdiť použitím rôznych molekulárnych grafických počítačových programov.

Metóda 2)

Zlúčeniny s ako hydrofóbnou časťou, tak zásaditou časťou sa najskôr vyberú z databázy, pričom je možné tiež zaradiť do data99 bázy neexistujúce zlúčeniny. Trojrozmerné štruktúry vybraných zlúčenín s nízkou molekulárnou hmotnosťou sú potom pripojené v aktívnom mieste FXa a vyberú sa zlúčeniny, ktoré vykazujú väzbový mód, ktorý spĺňa farmakofor podľa predloženého vynálezu. Spojenie sa môže uskutočniť s použitím rôznych počítačových programov a väzbový mód sa môže potvrdiť s použitím molekulárnych grafických počítačových programov.

Metóda 3)

Zlúčeniny s nízkou molekulárnou hmotnosťou sa pripoja ku každej oblasti Sl a oblasti S3 FXa, takže farmakofor predloženého vynálezu je vyhovujúci. Použité zlúčeniny môžu byť z počítačovej databázy, trojrozmerné zlúčeniny alebo akékoľvek zlúčeniny alebo ich fragmenty. Zlúčenina, ktorá sa umiestni do oblasti Sl a zlúčenina, ktorá sa umiestni do oblasti S3 sa spoja s použitím primeraného skeletu, ktorý nemení relatívnu priestorovú polohu. Tento postup sa môže tiež uskutočniť s použitím rôznych počítačových programov.

Metóda 4)

Pripravia sa komplexné štruktúry medzi serinovou proteázou podobnou chymotrypsínu a jej substrátom. Trojrozmerná štruktúra proteázy a trojrozmerná štruktúra FXa sa prekryjú navzájom v oblasti konzervovanej štruktúry serínovej proteázovej rodiny podobnej chymotrypsínu, čím vznikne virtuálny spojovací model medzi substrátom alebo inhibítorom a FXa. Štruktúra substrátu alebo inhibítora sa potom upraví, aby spĺňala farmakofor podľa predloženého vynálezu. Tento postup sa môže tiež uskutočniť s použitím rôznych počítačových programov.

Návrh a/alebo skúmanie zlúčenín ako je opísané skôr sa môže uskutočniť s použitím tak zvaného asistenčného integrovaného počítačového systému pre návrh molekuly (molecular designassisting integrated computer systém), ako Insight II, Cerius 2, Sybyl a ich modulov. Insight II a Cerius 2 sú dostupné od Molecular

Stimulations Inc., San Diego, CA, USA a Sybyl je dostupný od

100

Tripos Inc., St. Louis, MO, USA.

Okrem týchto programov sú tiež užitočné počítačové programy so špeciálnymi funkciami v postupoch detekcie zlúčenín s nízkou molekulovou hmotnosťou, ktoré aktívneho miesta; detegujú adekvátne zlúceniny, ktoré spĺňajú farmakofor; pripájajú zlúčeniny s nízkou molekulovou hmotnosťou k štruktúre aktívneho miesta.

Príklady takých programov zahŕňajú tie, ktoré sú opísané ďalej.

DOCK [I.D. Kuntz a kol.,

A Geometrie Approach to

Macromolecule-Ligand

Interactions,

J. Mol. Biol., 1961:

(1982)]. DOCK je komerčne dostupný od University of California,

San Francisco,

CA, USA.

Catalyst [Green, J. a kol., Chemical Function Queries for 3D Database Search, J. Chem. Inf. Comput. Sci. 34, 1297-1308 (1994)]. Catalyst je komerčne dostupný od Molecular Simulations Inc., San Diego, CA, USA.

Ludi [Bohm, H. J. LUDI: rule-based automatic design of new substituents for enzýme inhibítor or leads, J. Comput. Aided Mol. Des., 6: 593-606 (1992)]. Ludi je komerčne dostupný od

Molecular Simulations Inc. San Diego, CA, USA.

C2-LigandFit. C2-LigandFit je komerčne dostupný od Molecular Simulations Inc., San Diego, CA, USA.

FlexX [Rarey, M. a kol., A fast flexible docking method using an ineremental construction algorithm, J. Mol. Biol., 261: 470-489 (1996)]. FlexX je komerčne dostupný od Tripos Inc., St. Louis, MO, USA.

Zlúčenina majúca inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa sa môže tiež navrhnúť alebo skúmať postupom, ktorý je iný ako postup pre návrh alebo skúmanie zlúčenín opísaných v predloženom vynáleze alebo počítačové systémy.

Ako je ukázané v desiatom až osemnástom aspekte predloženého

101 vynálezu ako typické použitie farmakofora podlá predloženého vynálezu, inhibítor, ktorý sa kompetitívne viaže k aktívnemu miestu FXa alebo jeho fragmentu, môže byť identifikovaný:

poskytnutím trojrozmernej štruktúrnej informácie aktívneho miesta FXa (dostupný metódou opísanou ďalej) počítačovému systému ;

identifikáciou zlúčeniny o ktorej sa predpokladá, že sa viaže k FXa spôsobom, ktorý spĺňa farmakofor podľa predloženého vynálezu, menovite všetky podmienky, že:

a) zlúčenina sa spojí s oblasťou Sl [definícia oblasti Sl je rovnaká ako definícia uvedená v desiatom alebo sedemnástom aspekte] svojou hydrofóbnou časťou a z-lúčenina interaguje s Tyr228,

b) zlúčeniny spojené, s oblasťou S3 [definícia oblasti S3 je rovnaká ako definícia uvedená v desiatom alebo sedemnástom aspekte] aktívneho miesta svojou zásaditou časťou, a

c) zlúčenina netvorí koválentnú väzbu so Serl95; a podrobením zlúčeniny biologickej skúške, ktorá je schopná merať inhibičnú účinnosť FXa a tým stanoviť, či zlúčenina vykazuje inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa v skúške a identifikovať žiadaný inhibítor FXa.

Konkrétnejšie, inhibítor sa môže identifikovať zabezpečením počítačového systému s trojrozmernou štruktúrnou informáciou o molekule FXa obsahujúcej aktívne miesto definované-v koordinátach tabuľky A ako je opísané ďalej; zobrazením trojrozmernej štruktúry aktívneho miesta v počítačovom systéme; prekrytím trojrozmernej štruktúry testovanej zlúčeniny a trojrozmernej štruktúry aktívneho miesta tak, že trojrozmerná štruktúra testovanej zlúčeniny je usporiadaná tak, aby spĺňala všetky nasledujúce podmienky, že:

a) hydrofóbna časť je usporiadaná v oblasti Sl, takže hydrofób-

102 na časť môže reagovať vzájomne s Tyr228;

b) zásaditá časť je usporiadaná v oblasti S3; a

c) žiadna kovalentná väzba nevzniká so Serl95;

hodnotením, či sa trojrozmerná štruktúra testovanej zlúčeniny priestorovo prispôsobí aktívnemu miestu; prípravou testovanej zlúčeniny, ktorá sa priestorovo prispôsobí s aktívnym miestom; podrobením testovanej zlúčeniny biologickej skúške, ktorá je schopná merať inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa a tým stanoviť, či testovaná zlúčenina vykazuje inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa v skúške a identifikovať žiadaný inhibítor FXa.

Alternatívne sa návrh liečiva môže uskutočniť hodnotením pomocou počítača, s použitím trojrozmernej štruktúrnej informácie o FXa alebo jeho fragmentu u zlúčeniny, ktorá spĺňa nasledujúce asociačné podmienky:

a) zlúčenina sa spojí s oblasťou SI svojou hydrofóbnou časťou a zlúčenina interaguje s Tyr228;

b) zlúčenina sa spojí s oblasťou S3 svojou zásaditou časťou; a

c) zlúčenina netvorí kovalentnú väzbu so Serl95.

Ďalej, špecifickejšia identifikácia alebo návrh molekuly inhibítora FXa je umožnený pridaním podmienky pre farmakofor podlá predloženého vynálezu, takže interakcia s Tyr 228 je sprostredkovaná atómom halogénu, metylovou skupinou alebo etylovou skupinou (výhodne atómom chlóru alebo atómom brómu) , tvoriaca podiel hydrofóbnej časti.

Alternatívne sa identifikácia alebo návrh molekuly inhibítora FXa môže uskutočniť pridaním podmienky, že pri interakcii s Tyr228 je ťažisko hydrofóbnej časti a ťažisko bočného reťazca Tyr228 v rozsahu 6,9 až 7,9 Ä.

Alternatívne sa identifikácia alebo návrh molekuly inhibičnej zlúčeniny FXa môže uskutočniť pridaním podmienky, takže far103 makofor tiež spĺňa aspoň jednu z nasledujúcich podmienok 1) až

3) :

1) ak sa zlúčenina viaže k FXa, hydrofóbna časť nepodlieha ani čiastočne ani úplne elektrostatickej interakcii s Aspl89 oblasti SI,

2) ak sa zlúčenina viaže k FXa, poloha ťažiska hydrofóbnej časti spĺňa v oblasti SI aspoň dve z nasledujúcich podmienok, takže táto poloha je;

i)	vo	vzdialenosti	3, 6	až	4,6	Á	od	Co.	atómu	v	Cys191;
vii)	vo	vzdialenosti	6,2	až	7,2	Ä	od	c_u	atómu	v	Serl95;
viii;	I vo	vzdialenosti	5, 5	a ž	6, 5	Ä	od	c_a	atómu	v	Ser214;
ix)	vo	vzdialeností	3, 6	až	4 , 6	Ä	od	c«	atómu	v	Trp215;
x)	vo	vzdialenosti	6,7	až	7,7	Ä	od	C„	atómu	v	Glu217;
xi)	vo	vzdialenosti	5,8	až	6,8	Ä	od	Ca	atómu	v	Cys220;
	3)	ak sa zlúčenina	viaže	k	FXa,	poloha	ťažiska parciálnej
štruktúry zahŕňajúca	zásaditú	časť	La	spĺňa	v	oblasti S3 aspoň

dve z nasledujúcich podmienok, takže táto poloha je;

vi)	vo vzdialenosti Tyr99;	4,1	až	5, 5	A	od	ťažiska	postranného	reťazca
vii)	vo vzdialenosti	3,1	a ž	4,5	Á	od	ťažiska	postranného	reťazca
	Phel74;
viii)	)vo vzdialenosti	4,1	až	5,5	0 A	od	ťažiska	postranného	reťazca
	Trp215;
ix)	vo vzdialenosti	4,1	až	6, 3	Ä	od	karbonylového atómu	kyslíka
	hlavného reťazca	Lys96;	a;
X)	vo vzdialenosti	3,5	až	5, 1	Ä	od	karbonylového atómu	kyslíka
	hlavného reťazca	Glu97.	f

Alternatívne sa môže identifikácia alebo návrh molekuly inhibítora FXa uskutočniť pridaním podmienky, takže sú splnené

104 všetky podmienky 1) až 3).

Ďalej, návrh molekuly inhibítora FXa sa môže uskutočniť pridaním prostriedkov na potlačenie zmien konformácie sieťujúcej skupiny opísanej v aspekte [18-e].

Takto identifikovaná alebo navrhnutá zlúčenina sa môže získať nákupom alebo syntézou a zlúčenina sa môže podrobiť biologickej skúške, napríklad biologickej skúške opísanej v príkladoch predloženého vynálezu s cieľom stanoviť farmakologické účinky, napríklad in vitro IC50.

Čo sa týka zlúčeniny podľa predloženého vynálezu, potom ide o zlúčeninu, ktorá má inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa ak ide o hodnoty IC50 stanovené biologickou skúškou do 1 μΜ a ktorá je neznáma v čase podania prihlášky vynálezu.

Predložený vynález sa týka tiež farmaceutickej kompozície obsahujúcej ako aktívnu zložku aspoň jednu zlúčeninu, ktorá sa identifikovala alebo navrhla identifikáciou alebo metódou návrhu liečiva opísanou skôr, ktorá má inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa, ak ide o hodnoty IC₅₀ stanovené biologickou skúškou do 1 μΜ a ktorá (1) bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu; alebo (2) bola známa, ale jej biologická aktivita bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu. Užitočnosť takej farmaceutickej kompozície bude ocenená odkazom na druhý aspekt predloženého vynálezu alebo podrobný opis kompozície obsahujúcej zlúčeninu podľa predloženého vynálezu uvedený ďalej.

Predložený vynález sa týka tiež inhibítora FXa vyznačujúceho sa začlenením, ako aktívnej zložky, aspoň jednej zlúčeniny, ktorá má inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa ak ide o hodnoty IC50 stanovené biologickou skúškou do 1 μΜ a ktorá (1) bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu; alebo ktorá (2) bola známa, ale jej biologická aktivita bola neznáma v čase podania prihlášky vynálezu. Užitočnosť takého inhibítora FXa bude ocenená odkazom na tretí aspekt predloženého vynálezu alebo podrobný opis

105 kompozície obsahujúcej zlúčeninu podľa predloženého vynálezu uvedený ďalej.

Je potrebné vziať do úvahy, že z takto identifikovaných alebo navrhnutých zlúčenín podľa vynálezu je výhodná zlúčenina majúca inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa v hodnotách IC₅₀ do 0,5 μΜ, výhodnejšie do 0,1 μΜ a najvýhodnejšie do 0,01 μΜ.

Je potrebné poznamenať, že identifikácia alebo návrh takej zlúčeniny sa môžu uskutočniť za predpokladu, že zlúčenina podľa vynálezu má čiastočnú štruktúru obsahujúcu spiro skelet, čo je štruktúra, kde jedna alebo obidve skupiny La a Lb sa odstránili zo všeobecného vzorca ľ a potom definíciou zvyškového Lb, zvyškového La alebo zvyškových Lb a La.

V takom postupe môže byť skupina Lb definovaná napríklad za predpokladu, že skupina predstavovaná A-B- všeobecného vzorca I, ako zvláštna skupina La a napríklad po splnení podmienky podľa aspektu 10-d, 4), menovite podmienky, že La má prípadne substituovanú, päť- alebo šesťčlennú aromatickú monocyklickú heterocyklickú skupinu vo význame La a najmä za predpokladu, že La zahŕňa 4-pyridylovú skupinu. Alternatívne môže byť skupina La definovaná za predpokladu, že skupina reprezentovaná skupinou -T-Q všeobecného vzorca I, ako zvláštna skupina Lb, a výhodne za predpokladu, že skupina Lb zahŕňa skupinu, kde Q je skupina opísaná v aspekte [1—1—d] a T je skupina opísaná v aspekte [1—8—b] a najvýhodnejšie p-halogénstyrylsulfonylová skupina, 6-halogénnaftalen-2-ylsulfonylová skupina alebo 7-halogén-2H-benzopyran-3-ylsulfonylová skupina, ako vyplýva z ďalej uvedeného opisu.

Ďalej je opísané terapeutické alebo profylaktické činidlo a farmaceutická kompozícia podľa predloženého vynálezu. Farmaceutická kompozícia podlá predloženého vynálezu by mala obsahovať aspoň jednu zlúčeninu predstavovanú všeobecným vzorcom I, vzorcom ľ, vzorcom V, vzorcom VI, vzorcom Ik, vzorcom I-a', vzorcom ľ alebo vzorcom ľ' (definícia môže byť ako je definované

106 skôr) ako aktívnu zložku a kompozícia môže tiež obsahovať farmakologicky prijateľný nosič. Výhodné zlúčeniny pre zlúčeninu predstavovanú všeobecným vzorcom I sú zlúčeniny, ktoré sú rovnaké ako sú opísané skôr.

Inhibičná účinnosť zlúčeniny podľa predloženého vynálezu

Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu vykazujú silnú inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa. Inými slovami, kompozície podľa predloženého vynálezu sú silným inhibítorom FXa, najmä špecifickým inhibítorom FXa, ktorý neinhibuje iné enzýmy.

Kompozície podľa predloženého vynálezu sú tiež orálne podávatelným inhibítorom FXa, špecifickejšie orálne podávatelným špecifickým inhibítorom FXa. Zlúčeniny podľa predloženého vynálezu špecificky inhibujú aktivitu FXa medzi mnohými serínovými proteázami. Špecifickejšie, neinhibujú vôbec trypsín alebo chymotrypsín, ani neinhibujú trombín, ktorý je ďalšou serínovou proteázou v kaskáde koagulácie krvi. Preto zlúčeniny podľa predloženého vynálezu riešia skôr uvedené problémy spojené s použitím obvyklých trombínových inhibítorov, napríklad s tendenciou ku krvácaniu. Ďalšia výhoda spočíva v tom, že zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu ľahko absorbovať v zažívacom trakte po orálnom podaní bez toho, aby došlo k zníženiu ich aktivity po absorpcii a tiež vykazujú priaznivé absorpčné, distribučné, metabolistické a vylučovacie charakteristiky. Ich hodnota, ako orálne podávateľného činidla je pomerne vysoká.

Kompozície obsahujúce zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu použiť ako preventívne a/alebo terapeutické činidlá ochorení, kde je výhodné použitie inhibítora FXa.

Kompozície obsahujúce zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa môžu tiež používať ako antikoagulanty a ako preventívne a/alebo terapeutické činidlá ochorení, pre ktoré je použitie antikoagulantu užitočné.

107

Špecifickejšie, tieto činidlá sú užitočné pri prevencii a/alebo liečbe ochorení spôsobených trombom. alebo embóliou. Špecifické príklady takých ochorení zahŕňajú: ochorenia spôsobené ischemickými chorobami, ako cerebrálna trombóza, infarkt mozgu, cerebrálna embólia, prechodné cerebrálne ischemické napadnutie (TIA) a cerebrálny vaskulárny spazmus po subarachonoidnej hemoragii; Alzheimerova choroba, cerebrovaskulárna demencia, asymptomatické cerebrovaskulárne ochorenie, ochorenie spojené s ischemickým ochorením srdca, ako akútny a chronický infarkt myokardu, oneskorený účinok po myokardiálnom infarkte, nestabilná angína pektoris, angína pektoris a koronárna trombolýza; trombogenéza po náhrade umelej krvnej cievy alebo umelej srdcovej chlopne, reoklúzia a restenóza po transplantácii premostenia koronárnej artérie, reoklúzia a restenóza po PTCA alebo PTCA alebo umiestnenie stentu, pulmonárny infarkt, pľúcny trombus/pľúcna embólia, ochorenia spojené s pulmonárnym vaskulárnym ochorením (napríklad pneumónia indukovaná liečivom), syndróm akútnej respiračnej úzkosti (ARDS), akútna nefritída, akútna progresívna nefritída (napríklad diabetická nefropatia, chronická glumerulonefritída a IgA nefropatia) , akútne arteriálne okluzívne ochorenie, tromboangiitida obliterujúca (Buegerova choroba), artérioskleróza obliterujúca, periférne arteriálne okluzívne ochorenie, periférne venózne okluzívne ochorenie, hlboká žilová trombóza, tromboflebitída, roztrúsená intravaskulárna koagulácia (DIC), zlyhanie orgánu indukované postupom šoku alebo DIC, trombotické mikroangiopatia (TMA), syndróm systemickej zápalovej reakcie (SIRS), trombotická trombocytopenická purpura, hemolytický uremický syndróm (HUS), ochorenia spojené s rôznymi vaskulárnymi ochoreniami, ako trombogenéza pri mimotelovej cirkulácii, trombocytopénia pri závažnej operácii, arteriálna skleróza, rakovinové metastázy, odmietnutie transplantátu a ochrana orgánu alebo jeho zlepšenie pri transplantácii. Taktiež sú zahrnuté profylaxie vaskulárnych endoteliálnych buniek, zranenia spojené s diabetom, hyperkoagulácia spojená s transplantáciou alebo rezistenciou aktivovaného proteínu C (APC), koagulácia krvi spojená

108 s vaskulárnym ochorením, poranenie po operácii, obezita, tehotenstvo, používanie orálnej antikoncepcie, trvalá depresia, trombocytopénia indukovaná heparínom, kolagénne ochorenie (napríklad antifosfolipidný syndróm, polyarteritída a systemický lupus erythematosus), Bechetova choroba, ischemické reperfúzne poranenie, rakovina alebo podobne a toxémia v tehotenstve.

Činidlá podlá predloženého vynálezu sú adaptované najmä na použitie v prevencii embólie spojenej s fibriláciou predsiení, s umelou chlopňou alebo valvulárnym srdcovým ochorením a výhodne na prevenciu začiatku cerebrálnej embólie, prevenciu dočasného cerebrálneho ischemického postihnutia a najmä na prevenciu recidívy dočasného cerebrálneho ischemického postihnutia a pri prevencii alebo liečbe hlbokej trombózy žily alebo DIC.

Ak sa činidlá podľa predloženého vynálezu použijú ako liečivo pre tieto ochorenia, odporúča sa preventívne podanie a také použitie je najmä dôležité, nakoľko činidlá podľa predloženého vynálezu nie sú ani priame trombolytické činidlá, ani priame protidoštičkové činidlá. Inými slovami, činidlá podľa predloženého vynálezu sú adaptované na preventívne použitie u pacientov, ktorí trpia trombofiliou alebo pacientov majúcich rizikový faktor trombu alebo embólie, na prevenciu trombu alebo embólie. V prípade pacientov s fibriláciou predsiení, s umelou chlopňou alebo valvulárnym srdcovým ochorením sa trombóza ľahko generuje v mieste lézie alebo transplantácie a taká trombóza často spúšťa cerebrálny infarkt, čo je viac ako časté fatálny atak. Činidlá podľa predloženého vynálezu majú dobrý potenciál, aby boli silným liečivom na prevenciu začiatku trombu alebo embólie a najmä cerebrálnej embólie indukovanej u takých pacientov.

Taká terapia sa uskutočňuje dlhý čas. Činidlá podľa predloženého vynálezu sa môžu podávať orálne s menšími vedľajšími účinkami ako je krvácanie a preto sa môžu činidlá podľa predloženého vynálezu použiť dlhý čas, bez toho, aby bolo potrebné časté sledovanie.

109

Inými slovami, činidlá podľa predloženého vynálezu sú preventívne činidlá a/alebo terapeutické činidlá pre embóliu spojenú s fibriláciou predsiení alebo s umelou chlopňou alebo valvulárnym ochorením srdca. Činidlá podľa vynálezu sú tiež vhodné ako preventívne činidlá pri začiatku cerebrálnej embólie spojenej s takým ochorením. Činidlá podľa predloženého vynálezu sú tiež vhodné ako preventívne činidlá a/alebo terapeutické činidlá a najmä ako preventívne činidlá začiatku alebo dočasného cerebrálneho ischemického napadnutia; a ako preventívne činidlá a/alebo terapeutické činidlá pre hĺbkovú trombózu žily alebo DIC.

Ďalej, niektoré zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sa ľahko metabolizujú v priebehu absorpcie a sekrécie farmaceutickej látky substituentom v D a niektoré z takto vzniknutých metabolitov spadajú do rozsahu zlúčenín predloženého vynálezu reprezentovaných všeobecným vzorcom I a vykazujú silnú inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa. Toto je výsledok celkom zaujímavý z farmakologického a farmakokinetického hľadiska.

Kompozície obsahujúce zlúčeninu podľa predloženého vynálezu ako aktívnu zložku sú tiež účinné ako veterinárske liečivá a majú vysokú hodnotu pre použitie. Kompozície sú tiež užitočné ako reakčné zložky adaptované pre použitie na meranie rôznych funkcií koagulácie krvi a ako laboratórne činidlá.

Vzhľadom na inhibičné pôsobenie zlúčenín podľa predloženého vynálezu na FXa, sú také kompozície tiež užitočné ako preventívne a/alebo terapeutické činidlá pre infekciu spôsobenú vírusom chrípky, založené na inhibičnej aktivite k propagácii vírusu chrípky a tiež ako preventívne a/alebo terapeutické činidlá pre periodontálne ochorenie.

Predložený vynález je ďalej opísaný pomocou experimentálnych príkladov a príkladov, ktoré sú uvedené len na ilustráciu a v žiadnom prípade neobmedzujú rozsah predloženého vynálezu.

110

Vynikajúca inhibičná aktivita zlúčenín podľa vynálezu vzhľadom na FXa je potvrdená testom opísaným ďalej.

1) Meranie enzýmového inhibičného pôsobenia

a) Meranie inhibičného pôsobenia na ľudský FXa

In vitro inhibičná aktivita FXa sa meria podľa metódy, ktorú opísal Kettner a kol., (Journal of Biological Chemistri, diel 265, str. 18289 až 18297, 1990). Špecifickejšie, ľudský FXa (produkt Enzýme Research Laboratories, Inc., 0,019 U/ml) sa zmieša (DMSO) testovanou zlúčeninou zriedenou dimetylsulfoxidom pri rôznych koncentráciách a syntetickým substrátom

S-2222 (Chromogenic AB, 0,4 mM)A Zmesi sa inkubujú pri teplote

37°C v pufri Tris-chlorovodíková kyselina pričom sa meria kontinuálne absorbancia pri 405 nm.

K výpočtu inhibičnej aktivity testovanej zlúčeniny vzhľadom na FXa sa počiatočná reakčná rýchlosť porovná s hodnotou pre kontrolu, ktorá neobsahuje žiadnu testovanú zlúčeninu. Je potrebné uviesť, že inhibičná aktivita testovanej zlúčeniny vzhľadom na FXa sa obvykle stanoví ako IC50·

Ak sa zlúčeniny podľa predloženého vynálezu hodnotia na inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa postupom opísaným skôr, sila je v rozsahu 0,1 n.M až 1 μΜ v hodnotách IC50· Tabuľka 1 ukazuje typické výsledky merania.

111

Tabuľka 1

Testovaná zlúčenina (zlúčeniny príkladov)	IC₅o (μΜ)
Príklad 1	0,0032
Príklad 5	0,0029
Príklad 10	0,0054
Príklad 25	0,0015
Príklad 50	0,0019
Príklad 59	0,0034
Príklad 61	0,0028

2) Meranie antikoagulačnej aktivity (in vitro)

Meranie vnútorného koagulačného času

Aktivovaný parciálny tromboplastický čas (APTT) sa meria v prítomnosti testovaných zlúčenín zriedených na rôzne koncentrácie. Testovaná zlúčenina zriedená s DMSO na rôzne koncentrácie sa zmieša s ľudskou plazmou a činidlom APTT. Zmes sa inkubuje pri 37°C počas 2 minút; k zmesi sa pridá chlorid vápenatý (25 mM) a potom sa meria koagulačný čas. Je potrebné uviesť, že antikoagulačné aktivita testovanej zlúčeniny je opísaná z hľadiska koncentrácie požadovanej k dvojnásobku koagulačného času pre prípad, keď sa nepridá žiadna testovaná zlúčenina. V tomto teste sa zlúčeniny podľa vynálezu našli ako účinné v predĺžení APTT. Účinok zlúčenín podľa predloženého vynálezu je uvedený v tabuľke 2.

112

Tabuľka 2

Testovaná zlúčenina (zlúčeniny príkladov)	Koncentrácia požadovaná k dvojnásobku koagulačného času (μΜ)
Príklad 5	0, 43
Príklad 6	0, 99
Príklad 9	0,29
Príklad 23	0,62
Príklad 29	0, 90
Príklad 42	0,20
Príklad 58	0,18
Príklad 69	0,36

3) Charakteristiky antikoagulačnej aktivity (ex vivo)

a) Ex vivo meranie koagulačného času u krýs (i.v.)

Samcom krýs Wistar (200 g - 300 g; Japan SLC ľne.), ktorí boli hladní počas viac ako 12 hodín sa podá femorálnou vénou v jednej dávke liečivo (3 - 30 mg/kg) rozpustené vo fyziologickom roztoku (alebo 10% roztoku DMSO) a krv sa odoberá v určitom časovom intervale (3,8% citrát sodný, 1/10 objemu) a potom sa oddelí plazma odstredením pri 3000 otáčkach/minúta počas 10 minút. Protrombínový čas (PT) sa meria postupom opísaným ďalej s použitím oddelenej plazmy.

μΐ plazmy sa inkubuje pri 37 °C počas 3 minút a potom sa pridá 1C0 μΐ tromboblastínového roztoku, aby sa naštartovala koagulácia. Meria sa koagulačný čas. Pri aktuálnom teste sa zistilo, že intravenózne podané zlúčeniny podľa predloženého vynálezu sú účinné pri rozšírení PT vzhľadom na inhibíciu enzýmu.

b) Ex vivo meranie koagulačného času u krýs (p.o)

113

Testovaná zlúčenina sa nútene podá orálnym podaním s použitím orálneho zavádzacieho zariadenia namiesto podania z femorálnej vény v jednej dávke v teste a) a určitý objem krvi sa odoberie v určitom časovom intervale do 3,8% citrátu sodného, 1/10 objemu. Krv sa hodnotí postupom opísaným v a) na vnútorný koagulačný čas a vonkajší koagulačný čas.

Zistilo sa, že v tomto teste b) sú zlúčeniny podía predloženého vynálezu účinné v predĺžení koagulačného času po orálnom podaní 10 až 100 mg.

Je potrebné poznamenať, že sa nepozorovala žiadna abnormalita z hľadiska bezpečnosti, pokiaľ sa týka ex vivo testu u krýs.

Farmaceutické kompozície podľa predloženého vynálezu môžu obsahovať aspoň jednu zlúčeninu predstavovanú všeobecným vzorcom I (ako je definované skôr) alebo 'jej sol ako aktívnu zložku. Môžu tiež obsahovať akékoľvek farmaceutický prijateľné nosiče. Výhodné príklady zlúčenín všeobecného vzorca I už boli uvedené.

Ako je opísané skôr, zlúčeniny podľa predloženého vynálezu vykazujú silnú inhibičnú aktivitu vzhľadom na FXa, bez vykazovania inhibičnej aktivity vzhľadom na trypsín, chymotrypsín alebo trombín a špecifickosť zlúčenín je vysoká. Ďalej, zlúčeniny podľa predloženého vynálezu vykazujú antitrombotický účinok u krýs po orálnom podaní v dávke od 0,1 do 10 mg/kg alebo po intravenóznom podaní v dávke 0,01 až 1 mg/kg.

Na druhej strane, zlúčeniny podľa predloženého vynálezu nevykazujú predĺženie času krvácania, keď sa podajú orálne v dávke 10 mg/kg alebo keď sa podajú intravenózne v dávke 1 mg/kg u krýs. Podľa toho zlúčeniny podľa predloženého vynálezu vykazujú antikoagulačné pôsobenie bez nebezpečia tendencie ku krvácaniu, a toto je podstatný rozdiel od heparínu a warfarínu, čo sú známe antikoagulanty. Ďalej, zlúčeniny podlá predloženého vynálezu vykazujú vynikajúcu orálnu absorpciu, adekvátne dlhotrvajúce pôsobenie a tiež vysokú bezpečnosť.

114

Zlúčeniny podlá predloženého vynálezu sa môžu podávať pri ochoreniach opísaných skôr, buď s cieľom prevencie alebo liečby ochorenia, samostatne alebo v kombinácii s inom farmakologicky aktívnou zložkou. Príklady takých farmakologicky aktívnych zložiek zahŕňajú známe fybrinolytiká (napríklad tkanivové plazminogénové aktivátory (tPA) a ich deriváty (vrátane modifikovaných činidiel alebo tak zvaných činidiel druhej generácie), urokinázu a streptokinázu; známe antikoagulanty (napríklad warfarín, heparín a trombomodulín); známe inhibítory agregácie doštičiek (napríklad aspirín, tromboxámový antagonista, inhibítor tromboxámovej syntézy, a antagonista GPIIb/IIIa); známe terapeutické činidlá pre hyperlipidémiu (napríklad clofibrát a príbuzné liečivá, inhibítor reduktázy HMG-CoA a EPA-E); a známe hypotenzivne činidlá (napríklad nifedipín a diltiazem).

Výraz kombinované použitie ako sa tu používa, zahŕňa nielen podanie kombinačného liečiva obsahujúceho obidve zlúčeniny podľa predloženého vynálezu a ďalšiu farmaceutický aktívnu zložku, ale tiež prípad, keď obidve zložky tvoria oddelené dávkové formy, ktoré sa podajú buď v rovnakom alebo rôznom čase. Mód podania nie je v žiadnom prípade obmedzený ak zlúčenina podlá predloženého vynálezu a aktívna zložka sa súčasne nachádzajú v tele pacienta.

Farmaceutická kompozícia obsahujúca jednu alebo viac zlúčenín podľa predloženého vynálezu alebo jej farmaceutický prijatelnú sol, ako jej aktívnu zložku, sa môžu pripraviť vo forme kapsúl, piluliek, tabliet, granúl, jemných granúl alebo práškov; alebo alternatívne, ako orálny roztok, ako suspenzia, emulzia, malinovky, elixír alebo sirup; vo forme injikovatelného roztoku; vo forme transnazálnej formulácie; vo forme čapíkov; vo forme masti; vo forme epitemu; a podobne. Tieto formy sa podajú človeku a iným živočíchom s použitím obvyklých farmaceutických vehikúl, pomocných látok, alebo ďalších aditív.

Klinická dávka zlúčenín podľa predloženého vynálezu sa sta115 noví adekvátne po zvážení symptómu, telesnej hmotnosti, veku, pohlavia a podobne, pacienta, ktorému sa má zlúčenina podať. U dospelých pacientov je pri orálnom podaní obvyklá denná dávka v rozsahu 0,1 mg až 1000 mg, výhodne 1 mg až 300 mg a dávka pri perorálnom podaní je 0,01 až 300 mg a výhodne 0,1 až 100 mg. Taká dávka sa môže podať ako jedna dávka alebo môže byť rozdelená do niekoľkých dávok. Dávka sa môže líšiť v závislosti od rôznych podmienok a v niektorých prípadoch môže byť dostatočná dávka pod rozsah uvedený skôr.

Pri orálnom podaní podľa predloženého vynálezu sa môžu použiť kapsuly, pilulky, tablety, prášok, granuly a podobne, použité pre pevnú kompozíciu. Táto pevná kombinácia sa pripraví zmiešaním aspoň jednej aktívnej látky s aspoň jedným inaktívnym nosičom. Konkrétnejšie, kompozícia môže obsahovať excipient (napríklad laktózu, sacharózu, manitol, glukózu, hydroxypropylcelulózu, mikrokryštalickú celulózu alebo metakremičitú kyselinu, spojivo (napríklad kryštalickú celulózu, sacharid, dextrín, hydroxypropy1celulóžu, hydroxypropylmetylcelulózu, polyvinylpyrolidón alebo Macrogol), mazadlo (napríklad stearát horečnatý, stearát vápenatý alebo mastenec) , dezintegračné činidlo (napríklad kukuričný škrob, karboxymetylcelulózu, celulózoglykolát vápena tý), stabilizátor (napríklad laktózu a iné cukrové alkoholy alebo cukor), solubilizér alebo solubilizačnú pomôcku (napríklad cholesterol, trietanolamín, kyselinu glutámovú alebo kyselinu aspartovú), farbivo, aromát, antiseptické činidlo, izotonické činidlo, dispergačné činidlo, antioxidačné činidlo (napríklad kyselinu askorbovú alebo butylhydroxyanizol), pufor alebo konzervačné činidlo (napríklad paraben alebo benzylalkohol).

Je potrebné uviesť, že tableta, pilulka a granuly môžu byť povlečené cukrom, želatínou, ftalátom hydroxypropylmetylcelulózy alebo iným gastrickým alebo enterickým filmom alebo povlakom.

Príklady inj ikovateľných roztokov používané na parenterálne podanie zahŕňajú aseptický vodný alebo nevodný roztok, suspenziu

116 a emulziu. Príklady nosičov pre vodný roztok a suspenziu, zahŕňajú vodu pre injekcie a fyziologický roztok a príklady nosičov pre nevodný roztok a suspenziu zahŕňajú propylénglykol, polyetylénglykol, rastlinné oleje, ako olivový olej a alkoholy, ako etylalkohol a polysorbát 80™.

Také kompozície môžu ďalej obsahovať izotonické činidlá, antiseptické činidlá, zmäkčovače, stabilizátory, solubilizéry, slubilizačné pomocné činidlá alebo ďalšie aditiva ako je opísané skôr, a tieto aditiva môžu byť sterilizované, napríklad filtráciou cez membránový filter, začlenením antimikrobiálneho činidla alebo UV žiarením.

Kompozície môžu byť tiež získané vo forme sterilizovanej pevnej kompozície, ktorá môže byť pred použitím rozpustená, emulgovaná alebo suspendovaná a tak použitá ako injikovatelný roztok. Ak zlúčenina podlá vynálezu má nízku rozpustnosť, potom môže byť solubilizovaná.

Taká solubilizácia sa môže uskutočniť akýmkoľvek známym spôsobom v stave techniky, ktorý je aplikovateľný pre liečivá, napríklad pridaním povrchovo aktívnej látky (napríklad polyoxyetylénovaný hydrogenovaný ricínový olej, polyoxyetylénovaný sorbitanový ester vyššej mastnej kyseliny, cukrový ester mastnej kyseliny) ; a tvorbou pevnej disperzie liečiva a solubilizéra, napríklad polyméru (vo vode rozpustný polymér ako je polyetylénglykol (PEG), hydroxypropylmetylcelulóza (HPMC) alebo polyvinylpyrolidón (PVP); alebo enterického polyméru, ako je ftalát hydroxypropylmetylcelulózy (HPMC) alebo kopolymér metylmetakrylátu a kyseliny akrylovej (Eudragid L, S™, vyrábaný Rohm Hass Company) ) . Ak je to žiaduce, vpravenie zlúčeniny sa môže uskutočniť s použitím α-, β- alebo γ- cyklodextrínu, hydroxypropylcyklodextrinu alebo podobne. Postup použitý pre solubilizáciu sa môže tiež modifikovať v závislosti od požadovaného liečiva, ako je uvedené v Nagai, T. a kol., Monograph in Pharmacology č. 1, Biochemical Availability, Soft-Science ľne., 78-82 (1988) alebo

117

Utsumi, I., a kol., Current Pharmaceutical Technology and Its Application, Iyaku Journal, 157-159 (1983). Medzi týmito odkazmi je výhodná príprava pevnej disperzie, obsahujúca liečivo a solubilizér, ktorá vykazuje zlepšenú rozpustnosť (JP-A-56-49314, FR 2 460 667) .

Formulačné príklady

Ďalej sú uvedené formulačné príklady farmaceutickej kompozície podlá predloženého vynálezu. ''Zlúčenina M je zlúčenina podlá predloženého vynálezu predstavovaná všeobecným vzorcom I alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, špecifickejšie, zlúčenina vybraná zo zlúčenín opísaných v príkladoch.

a) Tableta (1 mg)

Zlúčenina M 1,0g

Laktóza 90,0g

Sodná karboxymetylcelulóza 7,0g

Pasta kukuričného škrobu (5% hmotn./obj. pasty) 7,0g

Stearát horečnatý 1,0g

Zložky ako je opísané skôr sa odmerajú a obvyklým spôsobom sa spracujú do 100 mg tabliet.

118

b) Tableta (10 mg)

Zlúčenina M 10g

Laktóza 150g

Sodná karboxymerylcelulóza 6,0g

Kukuričný škrob 28,5g

Polyvinylpyrolidon 2,5g

Stearát horečnatý 3,0g

Zložky ako je opísané skôr sa odmerajú a obvyklým spôsobom sa spracujú do 200 mg tabliet a tablety sa povlečú acetátftalátom celulózy a získajú sa enterické tablety.

c) Tableta (100 mg'i

Zlúčenina M 100g

Laktóza 180g

Sodná karboxymetylcelulóza13 g

Kukuričný škrob (5% hmotn./obj. pasty)4 g

Stearát horečnatý3 g

Zložky ako je opísané skôr sa odmerajú a obvyklým spôsobom sa spracujú do 300 mg tabliet.

d) Kapsuly (50 mg)

Zlúčenina M100 g

Laktóza 395,5 g

Stearát horečnatý

4,5 g

Zložky ako je opísané skôr sa odmerajú a rovnomerne sa zmiešajú. Tento prášok sa potom hermeticky uzatvorí v tvrdých želatínových kapsuliach (Pharmacopeia č. 1) v množstve 250 mg/kapsula.

119

e) Injikovateľný roztok (0,1 mg/ml)

Zlúčenina M

Pufor fosfátu sodného

Kyselina citrónová

Macrogol 400

Voda pre injekcie

0,1% hmotn./obj.

2,3% hmotn./obj,

0,4%

3, 5% do 100%

Uvedené zložky sa zmiešajú a vzniknutý roztok sa hermeticky uzatvorí v injekčných ampuliach, 1 ml/ampula a získa sa injiko vatelný roztok.

f) Injikovateľný roztok (1,0 mg/ml)

Zlúčenina M	1,0%	hmotn./obj
Pufor fosfátu sodného	3, 6%	hmotn./obj
IM vodný roztok NaOH	15%	hmotn./obj
Voda pre injekcie		do 100%

Uvedené zložky sa zmiešajú a vzniknutý roztok sa hermeticky uzatvorí v injekčných ampuliach, 1 ml/ampula a získa sa injiko vateľný roztok.

120

Príklady uskutočnenia vynálezu

Ďalej je predložený vynález podrobne opísaný odkazmi na syntézne príklady, ktoré však v žiadnom prípade neobmedzujú rozsah predloženého vynálezu.

Spektrum nukleárnej magnetickej rezonancie (NMR) sa meralo s použitím JEOL JNM-EX270 FT-NMR (vyrobené JEOL Ltd.) alebo JEOL JNM-LA300 FT-NMR (indikované v dátach *; vyrobené JEOL Ltd.). Infračervené absorpčné spektrum (IČ) sa meralo s použitím HORIBA FT-200 FT-IR (indikované v dátach *; vyrobené HORIBA Ltd.) alebo HORIBA FT-270 FT-IR (vyrobené HORIBA Ltd) . Hmotnostné spektrometria s vysokou rozlišovacou schopnosťou sa merala JEOL JMS-GCMATE '(vyrobené JEOL Ltd.). Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) sa uskutočňovala s použitím Shimadzu LC-10A (vyrobené Shimadzu Corporation).

Príklad 1

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metoxymetyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň A-l>

Príprava etyl 2-[(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)amino] acetátu

Hydrochlorid glycínetylesteru (9,88 g) sa suspenduje v metylénchloride (500 ml) a k suspenzii sa pridajú za chladenia ladom trietylamín (20,2 ml) a potom 6-chlórnaftalén-2-sulfonylchlorid (17,6 g). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu a potom sa upraví pH zmesi pomocou IN kyseliny chlorovodíkovej na 2 a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Metylénchloridová vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Po premytí vzniknutých kryštálov n-hexánom sa kryštály

121 odoberú filtráciou a sušením na vzduchu sa získa zlúčenina uvedená v názve (22,4 g).

NMR spektrum (*CDC13) δ ppm: 8,43-8,40 (1H, m), 7,95-7,87 (4H,

m), 7,57 (1H, dd, J=2,9 Hz), 5,22-5,15 (1H, m), 4,01 (2H, q,

J=7 Hz), 3,82 (2H, d, J=6 Hz), 1,11 (3H, t, J=7 Hz).

<Stupeň A-2>

Príprava etyl 2-[(3-acetoxy-2-oxopropan-l-yl)(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)amino]acetátu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni A-2 (2,50 g) v N,N-dimetylformamidu (25 ml) sa pridá uhličitan draselný (1,58 g) a jodid sodný (1,14 g) a po kvapkách a pri teplote miestnosti sa pridá roztok l-acetoxy-3-chlóracetónu (1,72 g) v N,N-dimetylformamide (7 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti

1,5 hodiny a po pridaní vody sa extrahuje dietyléterom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa kryštalizuje v dietyléteri a kryštály sa odoberú filtráciou a sušením na vzduchu sa získa zlúčenina uvedená v názve (2,72 g).

NMR	spekt.	rum	(XDC1₃) δ	ppm: 8,	42-8,37 (1H, m),	7,98-7,85	(3H,
m) ,	7,80	(1H,	dd, J=2,9	Hz), 7,	57 (1H, dd, J=2,9	Hz), 4,84	(2H,
s) ,	4,31	(2H,	s), 4,15	(2H, s),	4,06 (2H, q, J=7	Hz), 2,16	(3H,
s) ,	1,17 (	3H,	t, J=7 Hz)	•
<Stupeň A-	3>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-l'-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni A-2 (1,6 g) a 4-(aminometyl)-l-benzyl-4-hydroxypiperidínu (800 mg) v toluéne (200 ml)

122 sa pridá monohydrát kyseliny p-toluénsulfdnovej (34,0 mg) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 1 hodinu s použitím aparatúry Dean Stark. Reakčná zmes sa ochladí a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; etylacetát) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,08 g).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,36 (1H, s), 8,02-7, 88 (3H, m), 7,78 (1H, d, J=9 Hz), 7,60 (1H, d, J=9 Hz), 7,36-7,19 (5H, m), 4,48-4,14 (5H, m), 3,46 (2H, s), 3,34 (1H, d, J=17 Hz), 3,08 (1H, d, J=12 Hz), 2,62-2,21 (4H, m), 2,33 (1H, d, J=12 Hz), 2,11 (3H, s), 1,93-1,72 (2H, m), 1,53-1,34 (2H, m).

<Stupeň A-4>

Príprava 1, 4 -diaza-ľ-benzyl-4- ( 6-chlórnaf talen-2-ylsulf onyl) -6-(hydroxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidín]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni A-3 (425 mg) v metanole (11 ml) sa pridá za chladenia ľadom IN vodný roztok hydroxidu sodného (2,8 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Zvyšok sa premyje pridaním vody, odoberie sa filtráciou a suší sa za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (365 mg).

NMR spektrum ('CDCI3) δ ppm: 8,40-8,33 (1H, m), 8,01-7,90 (3H, m), 7,82-7,76 (1H, m), 7,65-7,58 (1H, m), 7,35-7,21 (5H, m),

4,50-4,31 (3H, m), 4,24 (1H, d, J=12 Hz), 3,89 (1H, d, J=12 Hz), 3,62 (1H, d, J=12 Hz), 3,47 (2H, s), 3,35 (1H, d, J=17 Hz), 3,07 (1H, d, J=12 Hz), 2,66-2,07 (4H, m), 2,26 (1H, d, J=12 Hz),

1,97-1,75 (2H, m), 1,57-1,36 (2H, m).

<Stupeň A-5>

Príprava 1, 4-diaza-l'-benzyl-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6123

-(metoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidín]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni A-4 (100 mg), benzyltrietylamóniumchloridu (4,0 mg) a dimetylsulfátu (0,018 ml) v metylénchloride (2 ml) sa postupne pridá za intenzívneho miešania a chladenia ľadom 50% vodný hydroxid sodný (0,6 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 2 hodiny, za chladenia ľadom sa pridá voda a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého' tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čisti chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : etylacetátu = 1:4 - 1:6) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (48,0 mg) .

NMR	spekt	rum (	*CDC13) Ô ppm:	8,36-8,33 (1.	H, m)	, 7,	97-7,92	(3H,
m) ,	7, 80-	7,75	(1H, m), 7,6	3-7,57 (1H, m:	1 , 7,	33-7,	20 (5H,	m) ,
4,40·	-4,30	(2H,	m), 4,18 (1H,	d, J=12 Hz),	3, 64	(1H,	d, J=10	Hz) ,
3, 54	(1H,	d, J=	=10 Hz), 3,46	(2H, s), 3,41	(3H,	s) ,	3,32 (1H	r d,
J=17	Hz) ,	3, 10	(1H, d, J=12	Hz), 2,67-2,18	(4H,	m) ,	2,24 (1H	< d,
J=12	Hz) ,	1,99-	1,75 (2H, m),	1,53-1,33 (2H,	m) .

<Stupeň A-6>

Príprava hydrochloridu 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni A-5 (45,0 mg) v

1,2-dichlóretáne (2 ml) sa pridá 1-chlóretylchlórformiát (0,021 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 30 minút. Reakčná zmes sa ochladí a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá metanol (2 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 30 minút. Reakčná zmes sa ochladí a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa kryštalizuje pridaním dietyléteru a supernatant sa odstráni dekantáciou. Rozpúš-

124 ťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (39,5 mg).

NMR spektrum ('DMSO-d_s) δ ppm: 8, 89-8,75 (1H, široký s), 8,73-8,58 (1H, široký s), 8,61 (1H, s), 8,33-8,13 (3H, m), 7,93-7,84 (1H, m), 7,77-7,69 (1H, m), 4,17-4,02 (3H, m), 3,57-2,80 (7H, m), 3,28 (3H, s), 3,18 (1H, d,J=12 Hz), 2,62 (1H, d, J=ll Hz), 2,00-1,83 (2H, m), 1,70-1,54 (2H, m).

<Stupeň A-7>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0 ] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

K suspenzii zlúčeniny získanej v stupni A-6 (35,0 mg) a hydrochloridu 4-chlórpyridínu (10,2 mg) v 2-etoxyetanole (2 ml) sa pridá diizopropyletylamin (0,041 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 2 hodiny. Po ochladení zmesi sa pridá k reakčnej zmesi uhličitan draselný (56 mg) a zmes sa mieša 30 minút. Nerozpustný obsah sa odstráni filtráciou a filtrát sa koncentruje. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 10:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (9,6 mg) .

HRMS: C27H29CIN4O5S (M⁺) : Vypočítané: 556,1547, nájdené: 556, 1540.

Vzniknutá zlúčenina sa opticky rozštiepi HPLC (Waters DeltaPrep 4000, vyrobené Waters Inc.); použitá kolóna Daicel Chiralcel OD, vyrobená Daicel Chemical Industries, Ltd., 2 cm x 25 cm; eluent; n-hexán : etanolu : dietylamínu = 60:40:1; prietoková rýchlosť 10 ml/min., detekčná vlnová dĺžka 254 nm; a získa sa (+)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piper idin] -2-ón [retenčný čas: 43,5 min., [a]²⁵ _D + 48,8 (cl,247, chloroform), [a]³S + 91,3 (cl,000, metanol), >99% ee] , a (-)-1,4-diaza-4-(6125

-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6- (metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón [retenčný čas :

63,0 min., [cx]²⁵d -48,4 (cl,175, chloroform), [a]³³ _D -90,7 (cl,C00, metanol), >99% ee] .

Ďalej, racemická hmota zlúčeniny uvedenej v názve (50,9 mg) sa zmieša s ( + ) - (O, O'-dibenzoyl-D-vínnou kyselinou 32,7 mg) a k zmesi sa pridá metanol (6,6 ml). Zmes sa mieša, nerozpustný obsah sa odoberie filtráciou a suší sa vo vákuu. Takto získané kryštály (20 mg) sa odsolia s použitím nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a získa sa (+) forma zlúčeniny uvedenej v názve optickej čistoty 94,6%ee. Podobným spôsobom sa získa (-) forma s použitím (-)-0, O'-dibenzoyl-L-vínnej kyseliny.

<Stupeň B-l>

Príprava 1,4-diaza-ľ- (benzyloxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin] -2-ónu

Zlúčenina získaná v <stupni A-3> (70,0 g) a 1,8-bis(N,N-dime.tylamino) naftalén (5,00 g) sa rozpustí v 1,2-dichlóretáne (700 ml) a za udržiavania roztoku pri 0°C sa k roztoku po kvapkách pridá benzylchlórformiát (33,4 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 2 hodiny a za chladenia ľadom sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Zmes sa extrahuje metylénchloridom a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa rozpustí v zmesovom roztoku metanolu (1,33 1) a metylénchloridu (1,33 1) a k tomuto roztoku sa za chladenia ľadom pridá IN vodný roztok hydroxidu sodného. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 30 minút a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá nasýtený vodný roztok chloridu amónneho a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného, súši sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku.

Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 40:1 - 30:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (64,6 g).

126

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,37-8,33 (1H, m), 7,97-7,91 (3H,

m), 7,80-7,74 (1H, m), 7,63-7,58 (1H, m), 7,39-7,25 (5H, m),

5,10 (2H, s), 4,46-4,32 (2H, m), 4,22 (1H, d, J=12 Hz), 3,96-

-3,85 (1H, m), 3,76-3, 53 (3H, m), 3, 52-3,40 (1H, m), 3,36 (1H, d, J=17 Hz), 3,37-3,24 (1H, m), 3,15 (1H, d, J=12 Hz), 2,41 (1H, široký s), 2,28 (1H, d, J=12 Hz), 1, 89-1,68 (2H, m), 1,48-1,34 (2H, m).

<Stupeň B-2>

Príprava 1, 4-diaza-l'- (benzyloxykarbonyl) -4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup <stupňa A-5> s použitím zlúčeniny získanej v stupni B-l (30,0 g) a veľkého prebytku dimetylsulfátu (62,4 ml) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (26,4 g).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,34 (1H, s), 7,99-7,91 (3H, m),

7,80-7,74	(1H, m), 7,64-7,58 (1H, m), 7,38-7,25	(5H,	m) , 5,09
(2H,	s) ,	4,42-4,29	i (2H, m), 4,16	(1H, d,	J=ll Hz),	3,41	(3H, s),
3, 65	(1H,	d, J=10	Hz), 3,59 (1H,	d, J=10	Hz) , 3,74-	-3, 13	(6H, m) ,
2,25	(1H,	d, J=12	Hz), 1,94-1,66	(2H, m),	1,46-1,31	(2H,	m) .

<Stupeň B~3>

Príprava 1,4-diaza-4- (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni B-2 (76,5 g) v acetonitrile (1,53 1) sa pridá za chladenia ľadom trimetylsilyljodid

127 (32 ml) . Zmes sa mieša za chladenia ľadom 45 minút, potom sa reakčná zmes naleje do IN kyseliny chlorovodíkovej za chladenia ľadom a k tejto zmesi sa pridá n-hexán. Zmes sa mieša k separácii a vodná vrstva sa premyje n-hexánom a potom sa pridá metylénchlorid. Za miešania a chladenia ľadom sa pridá 2N vodný roztok hydroxidu sodného a pH zmesi sa upraví na 11. Zmes sa extrahuje metylénchloridom a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (55,9 g).

NMR spektrum (’	CDClj) δ ppm: 8,38-8,32 (1H, m	), 7,99-7,91	(3H,m),
7,82-7,74 (1H,	m), 7,61 (1H,	dd, J-2,9 Hz) ,	4,41-4,29 (	2H,	m) ,
4,21 (1H, d,	J=12 Hz) , 3, 65	(1H, d, J=10	Hz), 3,58	(1H,	d,
J=10 Hz), 3,41	(3H, s), 3,32	(1H, d, J=17	Hz), 3,20-3,	04 (	:2h,
m), 3,01-2,74	(3H, m), 2,25 (1	H, d, J=12 Hz)	, 1,98-1,82	(2H,	m) ,
1,58-1,38 (2H,	m) .

<Stupeň B-4>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-T- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-pi perídin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni B-3 (7,50 g) a hydrochloridu 4-chlórpyridínu (2,34 g) v etanole (150 ml) sa pridá diizopropyletylamín (13,6 ml) a zmes sa mieša v zatavenej skúmavke pri 150°C počas 15 hodín. Reakčná zmes sa ochladí a koncentruje. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanol = 100:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,85 g).

<Stupeň C-l>

Príprava etyl 2-[[[2-(acetoxymetyl)-3,8-diaza-l-oxa-8-benzylspiro[4.5]dekan-2-yl]metyl](6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)amino]acetátu

128

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni A-2 (200 mg) a 4-(aminometyl)-l-benzyl-4-hydroxypiperidinu (140 mg) v metylénchloride (7,5 ml) sa pridajú molekulové sitá 3Á (400 mg) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti. K tejto zmesi sa pridá 0,09N roztok kyseliny octovéj-metylénchlorid (0,50 ml). Zmes sa zahrieva pri spätnom toku 3,5 hodiny, ochladí sa a koncentruje a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 19:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (142 mg).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,37-8,32 (1H, m), 7, 94-7,76 (4H, m), 7,55 (1H, dd, J=2,9 Hz), 7,33-7,22 (5H, m), 4,44 (2H, s),

4,14 (1H, d, J=12 Hz), 4,02 (1H, d, J=12 Hz), 3,95-3,77 (2H,m), 3,60 (1H, d, J=15 Hz), 3,50 (1H, d, J=15 Hz), 3,49 (2H, s), 3,38-3,23 (1H, m), 3,11-2,85 (2H, m), 2,62-2,20 (4H, m), 2,04 (3H, s), 1,82-1,54 (4H, m), 1,06 (3H, t, J=7 Hz).

<Stupeň C-2>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1, 4-diaza-ľ-benzyl-4-(β-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-spiro [bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Roztok zlúčeniny získanej v stupni C-l (125 mg) v toluéne sa zahrieva pri spätnom toku 2,5 hodiny. Roztok sa ochladí a koncentruje sa a vzniknutý zvyšok sa čisti stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : etylacetátu = 1:8) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (97,3 mg).

<Stupeň D-l>

Príprava etyl 2-(2-hydroxy-3-metoxypropylaminoacetátu)

Roztok glycidylmetyléteru (1,00 g) a glycínetylesteru (5,91 g) v etanole sa mieša cez noc a koncentráciou za zníženého tlaku sa získa zlúčenina uvedená v názve (2,17 g).

129

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 4,19 (2H, q, J=7 Hz), 3,87-3,78 (1H,

m), 3,39 (3H, s), 3, 50-3,55 (4H, m), 2,81-2,62 (2H, m), 1,29 (3H, t, J=7 Hz) .

<Stupeň D-2>

Príprava etyl 2-[(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)(2-hydroxy-3-metoxypropyl)amino]acetátu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni D-l (1,60 g) a 6-chlórnaftalén-2-sulfonylchloridu (2,20 g) v metylénchloride (30 ml) sa pridá po kvapkách a pri 0°C trietylamín (1,17 ml). Zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti a reakčná zmes sa okyslí kyselinou chlorovodíkovou. Zmes sa potom extrahuje etylacetátom a suší sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : etylacetátu = 1:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (800 mg) .

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,38 (1H, s), 7,88 (1H, d,J=9 Hz), 7,87-7,81 (3H, m), 7,50 (1H, dd, J=2,9 Hz), 4,22 (2H, s), 4,05 (2H, q, J=7 Hz), 4,06-3,97 (1H, m), 3,33 (3H, s), 3,56-3,31 (4H, m), 1,14 (3H, t, J=7 Hz).

<Stupeň D-3>

Príprava etyl 2-[(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)(3-metoxy-2-oxopropyl)amino]acetátu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni D-2 (220 mg) v metylénchloride (5 ml) sa pridá pri teplote miestnosti Dess-Martinovo činidlo a zmes sa mieša cez noc. K reakčnej zmesi sa pridá zmesový roztok 1:1 nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a nasýteného vodného roztoku hydrogensíranu sodného a po miešaní sa zmes extrahuje metylénchloridom a organická vrstva sa suší nad síranom sodným. Po oddestilovaní rozpúšťadla za zníženého tlaku sa vzniknutý zvyšok čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : etylacetátu =1:1) a získa sa

130 zlúčenina uvedená v názve (190 mg) .

NMR spektrum ('CDC1₃) δ ppm:

7,54-7,48 (1H, m), 4,44 (2H,

4,02 (2H, q, J=7 Hz), 3,39 (3H

8,38 (1H,	s) ,	7,93-7,77	(4H,	m) ,
s), 4,20	(2H,	s), 4,13	(2H,	s) ,
, s), 1,13	(3H,	t, J=7 Hz)

<Stupeň D-4>

Etyl 2-[[[3,8-díaza-2-(metoxymetyl)-1-oxa-8-benzylspiro [4.5]dekan-2-yljmetyl](6-chlór-2-naftalen-2-ylsulfonyl)amino]acetát

Opakuje sa postup stupňa C-l s použitím zlúčeniny získanej v stupni D-3 (100 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (145 mg).

NMR spektrum ('CDClj) δ ppm: 8,37-8, 32 (1H, m), 7,96-7, 77 (4H, m), 7, 56-7,50 (1H, m), 7,35-7,22 (5H, m), 4,53-4,37 (2H, m), 3,93-3,81 (2H, m), 3,59-3,54 (2H, m), 3,50-3, 44 (4H, m), 3,34 (3H, s), 2,94 (1H, d, J=12 Hz), 2,86 (1H, d, J=12 Hz), 2,68-2,34 (4H, m), 1,88-1,53 (3H, t, J=7 Hz).

<Stupeň D-5>

Príprava 1, 4-diaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup stupňa C-2 s použitím zlúčeniny získanej v stupni D-4 (72,5 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (67,0 mg).

<Stupeň E>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

131

Opakuje sa postup <stupňa A-5> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 3 <stupeň A-2> (70 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (38,7 mg).

<Stupeň F-l>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-4> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 7 <stupeň B-l> (938 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (626 mg).

NMR spektrum (’CDsOD) δ ppm: 8,52-8,4.7 (1H, m), 8,16-8,04 (3H,

m), 7,87 (1H, dd, J=2,9 Hz), 7,65 (1H, dd, J=2,9 Hz), 4,32-4,19 (2H, m), 4,16 (1H, d, J=12 Hz), 3,78-3,68 (2H, m), 3,48 (1H, d,

J=17 Hz), 3,35-3,25 (1H, m), 3,23-3,11 (1H, m), 3,08-2,83 (3H,

m), 2,58 (1H, d, J=12 Hz), 2,06-1,79 (2H, m), 1,66-1,35 (2H,m).

<Stupeň F-2>

Príprava 1, 4-diaza-ľ-(benzyloxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Zlúčenina získaná v stupni F-l (3,29 g) sa suspenduje vo vode (132 ml) a po pridaní uhličitanu sodného (1,80 g) k suspenzii sa pridá k suspenzii po kvapkách za miešania a chladenie ľadom benzylchlórformiát (1,21 ml). Zmes sa mieša 1 hodinu za chladenia ľadom a pridá sa voda. Zmes sa potom extrahuje metylénchloridom a organická vrstva sa premyje s nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 40:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (3,82 g) .

132

Príklad 2

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-T- ( 4-pyrimidinyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-T- [2 - (metyltio) pyrimidin-4-y 1 ] spiro [bicyklo [ 4.3.0 ] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K suspenzii zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň A-6> (200 mg) a 4-chlór-2-(metyltio)pyrimidinu (0,049 ml) v izoamylalkohole (2 ml) sa pridá hydrogenuhličitan sodný (87,5 mg) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 1,5 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí a koncentruje a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu - 50:1) a získa sa olejovitý produkt. Tento produkt sa nechá stuhnúť v n-hexáne a pevná látka sa odoberie filtráciou a získa sa zlúčenina uvedená v názve (63,2 mg).

NMR spektrum ( CD3CI3) δ ppm: 8,36	(1H, s), 8,07-7,90	(4H,	m) ,
7,84-7,74 (1H, m), 7,67-7,58 (1H,	m), 6,16 (1H, d,	J=6	Hz) ,
4,44-4,29 (2H, m), 4,24-4,14 (1H,	m), 3, 95-3,28 (6H,	m) ,	3,43
(3H, s), 3,35 (1H, d, J=17 Hz), 3,28-3,17 (1H, m), 2,46	(3H,	s) ,

2,29 (1H, d, J=12 Hz), 2,01-1,73 (2H, m), 1,53-1,40 (2H, m).

<Stupeň 2>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-T- (4-pyrimidinyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Raney nikel (pripravený Aldrich Company, 50% vodný roztok,

0,2m 2001), ktorý sa premyl etanolom sa pridá k roztoku zlúčeniny získanej v stupni 1 (58,0 mg) v etanole (1 ml) a zmes sa za133 hrieva pri spätnom toku 1 hodinu. Po ochladení reakčnej zmesi sa katalyzátor odstráni filtráciou a filtrát sa koncentruje. Zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 50:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (23,0 mg). HRMS: CggHggClthOsS (M⁺) : Vypočítané: 557,1499, nájdené: 557,1520.

Príklad 3

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl) -7-oxa-l'- ( 4 - pyridyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3.0 ] nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň A-l>

Príprava hydrochloridu 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup z príkladu 1 <stupeň A-6> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň A-3> (584 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (430 mg).

NMR spektrum (DMSO-d₆) Ô ppm: 8,77 (1H, široký s), 8,68-8,52

(2H, m),	8,34-8,14 (	3H, m), 7,93-7,86	(1H,	m) ,	7,74 (1H,	dd,
J=2,9 Hz)	, 5,32-5,22	(1H, m), 4,17-3,97	(3H,	m) ,	3,63-2,80	(7H,
m) , 3,21	(1H, d, J=12	Hz), 2,63 (1H, d,	J=12	Hz) ,	2,04-1,84	(2H,

m) , 1,69-1,53 (2H, m) .

<Stupeň A-2>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Na prípravu sa použije zlúčenina získaná v stupni A-l (370 mg) a postupuje sa podľa postupu v príklade 1 <stupeň A-7>

134 a získa sa zlúčenina uvedená v názve (30,0 mg).

HRMS: C26H27CIN4O5S (M⁺) : Vypočítané: 542,1390, nájdené: 542, 1421.

<Stupeň B>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 7 <stupeň A-4> (30,0 mg) v etanole (1 ml) sa pridá hydrazínmonohydrát (0,04 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 30 minút. Reakčná zmes sa ochladí a koncentruje sa za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 8:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (20,7 mg).

Príklad 4

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylmetoxymetyl)-7-oxa-ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] - 2-ónu <Stupeň A-l>

Príprava 1, 4-diaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6-(etoxykarbonylmetoxymetyl)-7-oxa-spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku v metylénchloride (20 ml) zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň A-4> (1,0 g), benzyltrietylamóniumchloridu (41 mg) a etylbrómacetátu (259 ml) sa postupne pridá za intenzívneho miešania a chladenia ľadom, 50% roztok hydroxidu sodného (6 ml) . Reakčná zmes sa mieša 1,5 hodiny za chladenia ľadom, pridá sa etylbrómacetát (120 ml) a zmes sa mieša 30 minút. K reakčnej zmesi sa pridá voda a zmes sa extrahuje metylénchloridom,

135 organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 50:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (413 mg).

NMR spektrum (CDC1₃) δ ppm: 8,37-8,32 (1H, m), 7,97-7, 90 (3H, m),

7,80-7,73 (1H, m), 7,60 (1H, dd, J=2,9 Hz), 7,34-7,18 (5H, m),

4,42-4,08 (7H, m), 3,90-3,73 (2H, m), 3,47 (2H, s), 3,31 (1H, d,

J=17 Hz), 3,18 (1H, d, J=12 Hz), 2,68-2,19 (4H, m), 2,27 (1H, d,

J=12 Hz), 2,07-1,79 (2H, m), 1,66-1,33 (2H, m), 1,33-1,22 (3H,

m) .

<Stupeň A-2>

Príprava hydrochloridu 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6-(etoxykarbonylmetoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3. 0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Na prípravu sa použije zlúčenina získaná v stupni A-l (300 mg) . Postupuje sa podlá postupu v príklade 1 <stupeň A-6> a získa sa zlúčenina uvedená v názve (276 mg).

ppm: 9,65-9,45 (2H,

široký s) , 8,33 (1H,
7,65-7,58	(1H,	m) ,
77 (1H, d,	J=10	Hz) ,
6 (1H, d,	J=12	Hz) ,

Hz) .

t, J=7 δ

NMR spektrum (

CDCI3)

s), 8,00-7,90	(3H, m),
4,40-4,05	(7H,	m) , 3,90 1
3,42-3,01	(6H,	m) , 2,37-
2,05-1,91	(1H,	m) , 1,58-1
<Stupeň A-	-3>
Príprava	1, 4-d	iaza-4-(6-

(1H, d, J=10 Hz), 3, ,45 (1H, m), 1,29 (3H,

-2,09 (2H, m), 2, chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykar bonylmetoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán

-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Na prípravu sa použije zlúčenina získaná v stupni A-2 (200 mg). Postupuje sa podlá postupu v príklade 1 <stupeň A-7>

136 a získa sa zlúčenina uvedená v názve (11,4 mg).

HRMS: C30H33CIN4O7S (M⁺) : Vypočítané: 628,1758, nájdené: 628,1802.

<Stupeň B>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylmetoxymetyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Na prípravu sa použije zlúčenina získaná v príklade 3 <stupeň A-2> (300 mg). Postupuje sa podlá postupu príkladu 7 cstupeň A-l> a získa sa zlúčenina uvedená v názve (168 mg).

Príklad 5

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(karboxymetoxymetyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridýl) spiro [bicyklo [ 4.3.0 ] nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň A>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(karboxymetoxymetyl) - 7- oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 4 cstupeň A-3> (10,0 mg) v etanole (320 ml) sa pridá 2N vodný roztok hydroxidu sodného (32,0 ml) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 20 minút. Potom sa upraví pH reakčnej zmesi na 5, pridaním nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí na stĺpci silikagélu (eluent; metylénchlorid : metanolu =4:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (3,3 mg).

IČ (’KBr) cm’¹: 3412, 3149, 1998, 1744, 1647, 1402.

137 <Stupeň B-l>

Príprava l,4-diaza-4-(terc-karbonylmetoxymetyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-T-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku metylénchloridu (1,4 ml) zlúčeniny získanej v príklade 3 <stupeň A-2> (85,0 mg), benzyltrietylamóniumchloridu (3,57 mg) a terc-butylbrómacetátu (0,03 ml) sa postupne pridá za intenzívneho miešania a chladenia ladom 50% vodný roztok hydroxidu sodného (0,43 ml). Zmes sa mieša 40 minút za chladenia ľadom, pridá sa voda a reakčná zmes sa extrahuje chloroformom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čisti stĺpcovou chromatografiou (eluent; metylénchlorid : metanolu = 20:1-15:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (53,5 mg).

NMR spektrum (	;*CDC1₃) δ ppm: 8,38-8	,32	(1H,	m), 8,28-8,17	(2H,
m), 8,00-7,89	(3H, m), 7,83-7,74	(1H,	m) ,	7,66-7,58 (1H,	m) ,
6, 66-6, 56 (2H,	m), 4,42-4,28 (2H,	m) ,	4 , 19	(1H, d, J=ll	Hz) ,
4,12 (1H, d, J=	= 17 Hz) , 4,02 (1H, d,	J=17	Hz) ,	3,96-3,88 (1H,	m) ,
3,81-3,72 (1H,	m), 3,53-3,17 (4H,	m) ,	3,35	(1H, d, J=17	Hz) ,
3,30 (1H, d, J=	= 11 Hz) , 2,32 (1H, d,	J=12	Hz) ,	2,16-2,04 (1H,	m) ,
1,96-1,82 (1H,	m), 1,78-1,41 (2H, m)	, 1,50 (9H, s).

<Stupeň B-2>

Príprava 1,4-diaza-4-'( 6-chlór na f talen-2-ylsulf onyl )-6-( karboxymetoxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spi r o [bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Zlúčenina získaná v stupni B-l (48 mg) sa rozpusti v kyseline mravčej (1,0 ml) a roztok sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Zmes sa stuží pridaním dietyléteru a supernatant sa odstráni dekantáciou, a sušením vo vákuu sa získa zlúčenina uvede138 ná v názve (35,3 mg).

Príklad 6

Príprava 1,4-diaza-6-(metoxymetyl)-4-(2-naftalénsulfonyl)-7-oxa-1'- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň A-7> (12,0 mg) v metanole (1 ml) sa pridá 10% paládium na aktívnom uhlí (6,0 mg). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 3 dni pod tlakom vodíka. Reakčná zmes sa filtruje a filtrát sa koncentruje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent;n-hexán : etylacetátu = 1:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (8,6 mg).

HRMS: C27H30N4O5S (M⁺) : Vypočítané: 522,1937, nájdené: 522,1949.

Príklad 7

Príprava 6-(acetoxymetyl)-l,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 .3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň A-l>

Príprava 4-[4-(terc-butoxykarbonylamino)metyl-4-hydroxypiperidin-l-yl]pyridín-l-oxidu

K suspenzii izoamylalkoholu (35 ml) všeobecne známeho ako

4-[(terc-butoxykarbonylamino)metyl]-4-hydroxypiperidín (2,00 g) a 4-chlórpyridín-l-oxidu (1,12 g) sa pridá hydrogenuhličitan sodný (1,75 g) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 4 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí a pridá sa k nej voda. Reakčná zmes sa extrahuje metylénchloridom a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou (eluent; metylénchlorid : metanolu = 9:1 - 4:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve

139 (1,03 g) .

NMR	spektrum (	*DMSO-dg)	δ ppm	: 7,90-7,83	(2H,	m) , 6,92-6, 84 (2H,
m) ,	6,78-6, 70	(1H, m),	4,58	(1H, široký	s) ,	3, 64-3, 50 (2H, m) ,
3,17	-3,04 (2H,	m), 2,92	(2H,	d, J=6 Hz),	1, 60·	-1,30 (4H, m), 1,35
(9H,	s) .

<Stupeň A-2>

Príprava 4- [ (terc-butoxykarbonylamino)metyl]-4-hydroxy-l- (4-pyridyl)piperidínu

Raney nikel (katalytické množstvo), pripravený podlá postupu opísaného v literatúre: Aromatic Amine Oxide (Eiji Ochiai, Elsevier, str. 189, 1967) sa pridá k roztoku zlúčeniny získanej v stupni A-l (300 mg) v metanole (3 ml) . Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 3,5 hodiny pod atmosférou vodíka. Katalyzátor sa odfiltruje a filtrát sa koncentruje. Zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu =4:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (214 mg).

NMR spektrum (*DMSO-dg) δ ppm: 8,10 (2H, d, J=7 Hz),. 6,87 (2H, d,

J=7 Hz), 6,76-6,68 (1H, m), 4,55 (1H, široký s), 3,78-3,65 (2H, m), 3,24-3,11 (2H, m), 2,92 (2H, d, J=6 Hz), 1,58-1,30 (4H, m),

1,35 (9H, s) .

<Stupeň A-3>

Príprava hydrochloridu 4-(aminometyl)-4-hydroxy-l-(4-pyridyl)piperidínu

Zlúčenina získaná v stupni A-2 (175 mg) sa rozpustí v 10% roztoku chlorovodíka v metanole (2 ml) a roztok sa mieša pri teplote miestnosti počas 2 hodín. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa nechá stuhnúť pridaním dietyléteru a potom sa dôkladne trituruje. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (160 mg).

0

NMR spektrum (*DMSO-dg) δ ppm: 13,68 (1H, široký s), 8,20 (2H, d,

J=8 Hz) , 8,13	(2H,	široký s), 7,22 (2H,	d, J=8	Hz) ,	5,43 (1H,
s), 4,08-3,96	(2H,	m) , 3,52-3,32 (2H, m)	, 2,80	(2H,	široký s),
1,77-1,46 (4H,	m) .

<Stupeň A-4>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -7-oxa-l'- (4 -pyridyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Postup príkladu 1 <stupeň A-3> sa opakuje s použitím zlúčeniny získanej v stupni A-3 namiesto 4-(aminometyl)-l-benzyl-4-hydroxypiperidínu a zmesi chloroformu a toluénu namiesto toluénu a získa sa zlúčenina uvedená v názve.

HRMS: C₂₈H29C1N₄O₆S (M⁺) : Vypočítané: 584,1496, nájdené: 584,1459.

<Stupeň B-l>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň A-3> (4,00 g) v 1,2-dichlóretáne (42 ml) sa pridá 1, 8-bis(N,N-dimetylamino)na ftalén (287 mg) a 1-chlóretylchlórformiát (1,82 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 1 hodinu. Reakčná zmes sa ochladí a čistí sa stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu =8:1) a získa sa pevná látka. Pevná látka (4,29 g) sa rozpustí v metanole (43 ml) a roztok sa zahrieva pri spätnom toku 30 minút. Reakčná zmes sa koncentruje a ku vzniknutému zvyšku sa pridá IN vodný roztok hydroxidu sodného. Zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (3,47 g).

141

NMR spektrum	(’CDC13) δ ppm:	8,38-8,34	(1H, m), 7,99-7,92	(3H,
m), 7,82-7,76	(1H,	m) ,	7,65-7	,58 (1H, m)	, 4,43	(1H, d,	J=12	Hz) ,
4,45-4,30 (2H,	m) ,	4,27	(1H,	d, J=12 Hz)	, 4,19	(1H, d,	J=12	Hz) ,
3,34 (1H, d,	J=17	Hz) ,	3,08	(1H, d, J=	12 Hz),	3,04- -	-2, 82	(2H,
m), 2,77-2,61	(2H	, m) ,	2,33	(1H, d,	J=12 Hz)	, 2, 12	(3H,	s) ,
1,86-1,67 (2H,	m) ,	1,47-	-1,29	(2H, m) .

<Stupeň B-2>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulf onyl) -7-oxa-l'- (4 -pyr idýl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonän-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup z príkladu 1 cstupeň A-7> s použitím zlúčeniny získanej v stupni B-l (2,60 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (240 mg).

Príklad 8

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo [4 . 4 . 0]dekán-9, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1, 4-diaza-l'-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.4.0]dekán-9, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 cstupeň A-2> (3,77 g) v toluéne (1 1) a všeobecne známej zlúčeniny 4-(aminometyl)-l-benzyl-4-(hydroxymetyl)piperidínu (2,00 g) sa pridá monohydrát kyseliny p-toluénsulfónovej (162 mg) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 1 hodinu, s použitím Dean Starkovej aparatúry. Reakčná zmes sa nechá ochladiť, pridá sa nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje s etylacetátom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 40:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,53 g) .

142

NMR	spektrum	(*CDC1₃) t	) ppm:	8,35	(1H, s),	7,97-	7, 90	(3H, m),
7,82-	-7,	76 (1H, m), 7,63-7,	56	(1H,	m), 7,33-	7, 18	(5H,	m) , 5,03
(1H,	d,	J=13	Hz), 4,68	(1H,	d,	J=14	Hz), 4,32	-4,20	(2H,	m) , 4,06
(1H,	d,	J=13	Hz) , 3,67	(1H,	d,	J=12	Hz) , 3,54	-3,43	(1H,	m) , 3,4 6
(2H,	s)	, 3,32	(1H, d, J=16	Hz)	, 2,54 (1H, d,	J=14	Hz) ,	2,46 (1H,
d, J =	= 12	Hz) ,	2,45-2,35	(2H,	m)	, 2,32-2,19 (2H	, m) ,	2,13	(3H, s),

1,54-1,24 (4H, m).

<Stupeň 2>

Príprava 1,4-diaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6- (hydroxymetyl) - 7-oxaspiro [bicyklo[4 . 4 . 0]dekán-9, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 1 (76,6 mg) v metanole (2 ml) sa pridá pri teplote miestnosti IN vodný roztok hydroxidu sodného (2,84 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 20 minút a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá voda a zmes sa extrahuje s metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (63,1 mg) .

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,36-8,32 (1H, m), 7,96-7,90 (3H,m),

7,81-7,75	(1H,	m) ,	7, 63-	7, 57	(1H, m),	7, 32-7	,18 (5H, m) , 4,7 3-
-4,62 (1H,	m) ,	4, 34	-4,15	(3H,	m) , 3,90	-3,80	(1H, m), 3,68-3,44
(2H, m),	3,46	(2H,	s) ,	3,34	(1H, d,	J=17	Hz), 2,51 (1H, d,
J=14 Hz) ,	2,47-	2,36	(3H,	m) ,	2, 32-2,20	(2H,	m), 2,14-2,07 (1H,

m), 1,58-1,28 (4H, m).

<Stupeň 3>

3

Príprava 1,4-diaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6- (metoxymetyl) -7-oxaspiro [bicyklo [4.4.0] dekán-9, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 2 (1,20 g) v metylénchloride (30 ml), benzyltrietylamóniumchloride (39,0 mg) a dimetylsulfáte (260 ml) sa postupne pridá za intenzívneho miešania a chladenia ľadom 50% vodný roztok hydroxidu sodného (7,5 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 45 minút, pH sa upraví na 9 pomocou nasýteného vodného roztoku chloridu amónneho za chladenia ľadom a extrahuje sa metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 30:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (541 mg).

NMR spektrum ( CDC1	3) δ ppm:	8,34	(1H,	s) ,	7,96	-7,89	(3H,	m) ,
7,81-7,75 (1H, m),	7,62-7,56	(1H,	m) ,	7, 35-	7, 17	(5H,	m) ,	4,67
(1H, d, J=14 Hz),	4,35-4,23	(2H,	m) ,	4, 04	(1H,	d,	J=ll	Hz) ,
3,69-3,42 (5H, m),	3,47 (3H,	s) ,	3,29	(1H,	d,	J=17	Hz) ,	2,55

(1H, d, J=14 Hz), 2,49-2,19 (5H, m), 1,58-1,23 (4H, m).

<Stupeň 4>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxaspiro[bicyklo[4.4.0]dekán-9,4'-piperidin]-2-ónu

K suspenzii zlúčeniny získanej v stupni 3 (200 mg) v 1,2-dichlóretáne (10 ml) a 1,8-bis(dimetylamino)naftalénu (15,0 mg) sa pridá 1-chlóretylchlórformiát (92,0 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 30 minút. Zmes sa ochladí a potom sa čistí stĺpcovou chrómatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 20:1). Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá metanol (10 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 30 minút. Po ochladení reakčnej zmesi sa rozpúšťadlo oddes144 tiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa kryštalizuje pridaním dietyléteru. Supernatant sa odstráni dekantáciou. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (167 mg).

NMR spektrum (*DMSO-d_e) δ ppm: 8,71 (2H, široký s), 8,60 (1H, s), 8,35-8,14 (3H, m), 7,94-7,83 (1H, m), 7,80-7,68 (1H, m), 4,36 (1H, d, J=14 Hz), 4,21-4,09 (2H, m), 3, 98-3, 88 (2H, m), 3,77-2,72 (7H, m), 3,32 (3H, s), 2,79 (1H, d, J=14 Hz), 2,67 (1H, d, J=12 Hz), 1,62-1,42 (4H, m).

<Stupeň 5>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 4.0] dekán-9, 4'-piperidin]-2-ónu

K suspenzii zlúčeniny získanej v stupni 4 (50,0 mg) v

2-etoxyetanole (3 ml) a hydrochloride 4-chlórpyridínu (14 mg) sa pridá diizopropyletylamín (57 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 4 hodiny. Po ochladení reakčnej zmesi sa pridá uhličitan draselný (78,0 mg) a zmes sa mieša 1 hodinu. Nerozpustný materiál sa odstráni filtráciou a filtrát sa koncentruje. Vzniknutý zvyšok sa čisti stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 10:1 - 5:1). Potom sa zvyšok čisti stĺpcovou chromatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent; etylacetát) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (7,4 mg).

HRMS: C₂áH3iClN₄O5S (M⁺) : vypočítané: 570,1703, nájdené: 570, 1658.

Príklad 9

Príprava l,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava etyl 2-[(2,2-dietoxyetyl)amino]acetátu

145

K suspenzii hydrochloridu glycinetylesteru (1,00 g) a dietylacetalu brómacetaldehydu (1,08 ml) v N,N-dimetylformamide (30 ml) sa pridá uhličitan cézny (4,67 g) a jodid sodný (107 mg) a zmes sa mieša pri 100°C počas 4 hodin. Potom sa upraví pH reakčnej zmesi na 2 pomocou IN kyseliny chlorovodíkovej a premyje sa etylacetátom. Potom sa upraví pH vodnej vrstvy na 11 použitím IN vodného roztoku hydroxidu sodného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa suší nad bezvodým síranom sodným a potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (860 mg).

NMR spektrum CCDCI3) δ ppm: 4,63-4,57 (1H, m), 4,24-4,14 (2H, m), 3,78-3,64 (2H, m), 3,61-3,48 (2H, m), 3,44 (2H, s), 2,76 (2H, d, J=6 Hz), 1,32-1,15 (9H, m).

<Stupeň 2>

Príprava etyl 2-[(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)(2,2-dietoxyetyl)amino]acetátu

Zlúčenina získaná v stupni 1 (504 mg) sa suspenduje v metylénchloride (20 ml) a k suspenzii sa pridá za chladenia ľadom trietylamín (336 ml) a potom 6-chlórnaftalén-2-sulfonylchlorid (600 mg) . Zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti, pridá sa nasýtený roztok chloridu sodného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa súši nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : etylacetátu = 20:1 - 4:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (750 mg).

NMR spektrum ( CDCI3) 8 ppm: 8,40 (1H, s),

7,93-7,82 (4H, m),

7,55	(1H, dd, J=2,9 Hz), 4,68-4,63	(1H,	m) ,	4,33	(2H, s), 3,96
(2H,	q, J=7 Hz), 3,77-3,64 (2H, m),	3, 60	-3,47	(2H,	m), 3,37 (2H,
d, J=	6 Hz), 1,23-1,13 (6H, m), 1,12-	1,04	(3H,	m) .

<Stupeň 3>

146

Príprava etyl 2-[(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)(formylmetyl)amino] acetátu

K zmesovému roztoku kyseliny trifluóroctovej (5 ml), chloroformu (1,5 ml) a vody (2,5 ml) sa pridá za chladenia ľadovou vodou roztok zlúčeniny získanej v stupni 2 (560 mg) v chloroforme (1 ml) . Zmes sa mieša 1,5 hodiny za chladenia ľadovou vodou, pH reakčnej zmesi sa upraví na 8 pomocou vodného nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje dietyléterom. Organická vrstva sa suší nad bezvodým síranom sodným a potom sa rozpúšťadlo oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán :

: etylacetátu (240 mg).	= 5:1 -	2:1) a	získa sa	zlúčenina	uvedená	v názvé
NMR spektrum	(*CDC1₃)	δ ppm:	9,74-9,70	(IH, m) ,	8,39 (	IH, s),
7,98-7,85 (3H,	m) , 7,	85-7,78	(IH, m),	7,62-7,53	(IH, m)	, 4,24-
-4,03 (6H, m),	1,21-1,	13 (3H,	m) .

<Stupeň 4>

Príprava 1, 4-diaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 3 (200 mg) v toluéne (25 ml) a 4-aminometyl-l-benzyl-4-hydroxypiperidínu (119 mg) sa pridá monohydrát kyseliny p-toluénsulfónovej (5,0 mg) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku počas 1 hodiny, s použitím Dean Starkovej aparatúry. Reakčná zmes sa ochladí, rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 50:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (200 mg).

NMR spektrum (CDCI3) δ ppm: 8,36-8,32 (IH, m), 7,97-7,88 (3H, m),

7,81-7,74 (IH, m), 7,60 (IH, dd, J=2,9 Hz), 7,37-7,21 (5H, m),

5,17-5,10 (IH, m), 4,41-4,24 (2H, m), 3,65 (IH, d, J=12 Hz),

2,60-2,32 (5H, m), 1,92-1,58 (4H, m).

147 <Stupeň 5>

Prípravy hydrochloridu 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-6> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 4 (180 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (162 mg).

NMR spektrum (DMSO-d_s) δ ppm: 9, 00-8,57 (3H, m), 8,33-8,13 (3H, m), 7,98-7, 87 (1H, m), 7,75 (1H, dd, J=9,2 Hz), 5,16 (1H, dd, J=4,8 Hz), 4,22-4,08 (1H, m), 4,05 (1H, d, J=16 Hz), 3,81-3,69 (1H, m), 3,62-2,78 (6H, m), 2,78-2,64 (1H, m), 2,05-1,58 (4H,

m) .

<Stupeň 6>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidín]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-7> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 5 (100 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (3,8 mg) .

HRMS: C25H25CIN4O4S (M”) : vypočítané: 512,1285, nájdené: 512,1310.

Príklad 10

Príprava 1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyridinyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidín]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- [2- (metyltio) pyrimidin-4 -yl ] spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 2 <stupeň 1> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 9 <stupeň 5> a získa sa zlúčenina uvedená

148

v názve (293 mg).
NMR	spektrum	(CDCI3) δ ppm: 8, 42-8,35 (1H, m), 8,07-7,92	(3H, m) ,
8,02	(1H,	d,	J=6 Hz), 7,84-7,76 (1H, m), 7,68-7,58 (1H,	m), 6,21
(1H,	d, J	= 6	Hz), 5,21 (1H, dd, J=4,9 Hz), 4,45-4,34	(1H, m),
4,33	(1H,	d,	J=17 Hz), 4,12-3,93 (2H, m), 3,80-3,71	(1H, m),
3,52	-3,27	(2H, m), 3,32 (1H, d, J=17 Hz), 3,23-3,15	(1H, m),
2,48	(3H,	s)	, 2,57-2,39 (1H, m), 2,23-1,80 (1H, m),	1,80-1,57

(3H, m) .

<Stupeň 2>

Príprava 1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyrimidinyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 2 <stupeň 2> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 1 (290 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (15,0 mg).

HRMS: C24H24CIN5O4S (M⁺) : vypočítané: 513,1237, nájdené: 513,1276.

Príklad 11

Príprava 1,4-diaza-4-((E)-4-chlórstyrylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava etyl 2-[((E)-4-chlórstypylsulfonyl) (2,2-dietoxyetyl)amino]acetátu

Zlúčenina získaná v príklade 9 <stupeň 1> (2,46 g) sa suspenduje v metylenchloride (90 ml) a k suspenzii sa pridá trietylamín (1,56 ml) a potom za chladenia ľadom (E)-4-chlórstyrylsulfonylchlorid (2,26 g). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 4 hodiny a potom sa k nej pridá voda. Zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa suší nad bezvodým síranom sodným

149 a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent;

n-hexán : etylacetátu =5:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (2,03 g) .

NMR spektrum (*CDC13) δ ppm: 7,48-7,35 (5H, m), 6,96-6,88 (1H,

m), 4,64 (1H, t, J=5 Hz), 4,29 (2H, s), 4,17 (2H, q, J=7 Hz),

3,78-3,47 (4H, m), 3,24 (2H, d, J=5 Hz), 1,32-1,14 (9H, m).

<Stupeň 2>

Príprava etyl 2-[((E)-chlórstyrylsulfonyl)(formylmetyl)amino]acetátu

K zmesovému roztoku zlúčeniny získanej v stupni 1 (2,00 g), chloroformu (9,5 ml) a vody (9,5 ml) sa pridá za chladenia ľadom kyselina trifluóroctová (13,5 ml). Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 4 hodiny, pH sa upraví nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje sa s metylénchloridom. Organická vrstva sa suší nad bezvodým síranom sodným a potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : etylacetátu =2:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,27 g) .

NMR spektrum (CDCI3) δ ppm: 9,68 (1H, s), 7,50-7,35 (5H, m), 6,82 (1H, d, J=15 Hz), 4,25-4,10 (6H, m), 1,32-1,21 (3H, m).

<Stupeň 3>

Príprava 1, 4-diaza-l'-benzyl-4- ( (E) -4-chlórstyrylsulfonyl) -7- oxaspiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-p iperidin]-2-ónu

K roztoku toluénu (175 mi) zlúčeniny získanej v stupni 2 (1,27 g) a 4-(aminometyl)-l-benzyl-4-hydroxypiperidinu (810 mg) sa pridá monohydrát p-toluénsulfónovej kyseliny (35,0 g) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 1 hodinu s použitím Dean Starkovej aparatúry. Reakčná zmes sa ochladí a rozpúšťadlo sa odstráni za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatogragiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 50:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,08 g) .

150

NMR spektrum (CDCI3) δ ppm: 7,48 (1H, d, J=15 Hz), 7,49-7,37 (4H,

m) ,	7,37-7,22	(5H,	m) ,	6, 63	(1H,	d,	J=15	Hz), 5,13 (1H,	dd,
J=4,	9 Hz) , 4,32	-4, 18	(2H,	m) ,	3,74	(1H,	d, J	=12 Hz) 3,56 (1H	, d,
J=17	Hz) , 3,51	(2H,	s) ,	3,20	(1H,	d,	J=12	Hz), 2,75-2,64	(1H,

m), 2,61-2,36 (4H, m), 1, 94-1, 66 (4H, m).

<Stupeň 4>

Príprava hydrochloridu 1,4-diaza-4-((E)-4-chlórstyrylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0 jnonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-6> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 3 (1,00 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (914 mg).

NMR spektrum ( CDCI3) δ ppm: 9,68 (2H, široký s), 7,49 (1H, d,

J=15 Hz),	7,58-7,31	(4 H, m), 6,66 (1H,	d,	J=15 Hz),	5,21-5,12
(1H,	m) ,	4,33-4,14	(2H, m), 3,93 (1H, d,	J=	12 Hz)	, 3,	59 (1H, d,
J=17	Hz) ,	3,54-3, 10	(4H, m), 3,23 (1H,	d,	J=12	Hz) ,	2,80-2,68
(1H,	m) ,	2,35-2,00	(2H, m), 1,92-1,65 (2H,	m)

<Stupeň 5>

Príprava 1, 4-diaza-4-((E)-4-chlórstyrylsulfonyl)-7-oxa-ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-7> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 4 (350 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (46,0 mg).

HRMS: C₂3H₂5C1N₄O₄S (M⁺) : vypočítané: 488,1285, nájdené: 488,1306.

Príklad 12

151

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnafťalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 (111 mg) v metanole (0,4 ml) sa pridá kyselina metánsulfónová (0,01313,6 ml) a zmes sa mieša 30 minút. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa kryštalizuje pridaním dietyléteru. Supernatant sa odstráni dekantáciou a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (119 mg).

Príklad 13

Príprava (-)(-)1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím (-) (-)1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu pripravenom metódou optického štiepenia opísanou v príklade 1 <stupeň A-7> a získa sa zlúčenina uvedená v názve (119 mg).

Príklad 14

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 3 <stupeň A-2> (33,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (38,0 mg).

Príklad 15

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylmetoxymetyl ) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán152

-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 4 <stupeň A-3> (40,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (43,0 mg).

Príklad 16

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)- 7-oxa-l'- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 7 <stupeň A-4’> (33,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (34,2 mg).

Príklad 17

Príprava 1, 4-diaza-4 - (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7- oxa-l'- (4 -pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 9 <stupeň 6> (27,8 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (30,0 mg) .

Príklad 18

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyrimidinyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 10 <stupeň 2> (31,2 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (34,0 mg).

Príklad 19

153

Príprava 1, 4-diaza-4-((E)-4-chlórstyrylsulfonyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidín]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 11 <stupeň 5> (30,6 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (31,5 mg).

Príklad 20

Príprava 1,4-diaza-4-( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4 -pyridyl) spi ro [bi cyklo[4. 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1,4-diaza-ľ-(benzyloxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylmetoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo-[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 4 <stupeň A-l> s použitím zlúče-

niny získanej v príklade 1 <stupeň B-l>	(4,00 g) a ziska sa zlú-
čenina uvedená	v názve (3,90 g) .
NMR	spektrum	('CDClj) δ ppm: 8,36-	8,31	(1H,	m) , 7,98-	7,90	(3H,
m) ,	7,81-7,74	(1H, m), 7,65-7,57	(1H,	m) ,	7,40-7,24	(5H,	m) ,
5,10	(2H, s),	4,40-4,06 (7H, m),	3,89	(1H,	d, J=10	Hz) ,	3,78
(1H,	d, J=10	Hz), 3,82-3,20 (6H,	m) ,	2,29	(1H, d,	J=12	Hz) ,
2,03-	-1,91 (1H,	m) , 1, 84-1, 70 (1H, m) , 1,	46-1,24 (5H, m)

<Stupeň 2>

Príprava 1, 4-diaza-l'- (benzyloxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-hydroxyetoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin] -2-ónu

Zlúčenina získaná v stupni 1 (100 mg) sa rozpustí v zmesovom

154 roztoku tetrahydrofuránu (1 ml) a etanolu (1 ml) a k roztoku sa pridá chlorid litny (18,6 mg) a borohydrid sodný (16,5 mg). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 3 hodiny, k reakčnej zmesi sa pridá za chladenia ladom nasýtený vodný roztok chloridu amónneho a potom sa uskutoční extrakcia metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 40:1 - 20:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (86,4 mg).

NM	!R	spekt	rum	(*CDi	Cl₃) ?	> ppm: 8,37-8,33	(IH,	m), 7,98-	7, 92	(3H,
m)	t	7,78	(IH,	, dd,	J=2,	9 Hz), 7,64-7,58	(IH,	m) , 7,39-	7,24	(5H,
m)	r	5, 10	(2H,	s) ,	4,50	(IH, d, J=12 Hz),	4, 3E	! (IH, d,	J=17	Hz) ,
4,	21	(IH,	d,	J=12	Hz) ,	3,86 (IH, d, J=10	Hz) ,	3,83-3,26	(9H,	m) ,
3,	60	(IH,	d,	J=10	Hz) ,	3,13 (IH, d, J=12	Hz) ,	2,40-2,33	(IH,	m) ,
2,	24	(IH,	d,	J=12	Hz) ,	1,90-1,70 (2H, m),	1,46	-1,33 (2H,	m) .

<Stupeň 3>

Príprava 1, 4-diaza-l'- (benzyloxykarbonyl) -4- (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň B-2> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 2 (50 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (35 mg).

NMR	spektrum (*CDC13) δ ppm:	8,36-8,32 (IH,	m) ,	7,98-7,90	(3H,
m) ,	7,80-7,74 (IH, m), 7,61	(IH, dd, J=2,9	Hz) ,	7,40-7,26	(5H,
m) ,	5,10 (2H, s), 4,40-4,26	(2H, m), 4,13 (IH, d,	J=ll Hz),	3, 36
(3H,	s), 3,82-3,20 (12H, m)	, 2,27 (IH, d,	J=12	Hz), 1,98	-1,66

(2H, m) , 1, 46-1, 30 (2H, m) .

<Stupeň 4>

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

155

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň B-3> s použitím zlúče-

niny získanej v stupni 3 (2,00 g) a získa v názve (1,54 g).	sa zlúčenina uvedená
NMR	spektrum	(*CDC13) δ ppm: 8,38-	-8,32 (1H	, m), 7,99-7,91 (3H,
m) ,	7,81-7,75	(1H, m), 7,64-7,58	(1H, m),	4,39-4,16 (3H, m) ,
3,80·	-3,66 (4H,	m) , 3,60-3,51 (2H,	m) , 3,37	(3H, s), 3,31 (1H, d,
J=17	Hz) , 3, 17 (1H, d, J=ll Hz) ,	3,10-2,99 (1H, m), 2,96-2,84
(1H,	m) , 2,76	-2,60 (2H, m), 2,21	' (1H, d,	J=12 Hz), 1,96-1,62
(2H,	m) , 1,48-	1,27 (2H, m).

<Stupeň 5>

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxymet yl) -7-oxa-ľ- ( 4 -pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 4 (700 mg) a 4-chlórpyridinhydrochloridu (201 mg) v etanole (14 ml) sa pridá diizopropyletylamín (1,17 ml) a zmes sa mieša v zatavenej skúmavke pri 150°C počas 15 hodín. Reakčná zmes sa ochladí a koncentruje. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 20:1 - 10:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (140 mg).

HRMS: C'cH₃3C1N₄O₆S (M’‘) : vypočítané: 600, 1809, nájdené: 600,1785.

Príklad 21

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxymetyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bi cyklo [4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 20 <stupeň 5> (50,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (59,3 mg).

156

Príklad 22

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-hydroxyetoxymetyl)-7-oxa-T- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 20 <stupeň 2> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 4 <stupeň A-3> (50,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (39,2 mg).

HRMS: C28H31CIN4O6S (M⁺) : vypočítané: 586,1652, nájdené: 586, 1685.

Príklad 23

Príprava 4-[1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfony1)-6-(metoxymetyl) - 7-oxa-2-oxospiro [bicyklo [ 4.3.0 ] nonán-8,4'-piperidin-T-yl]]metylpyridínium p-toluénsulfonátu

Zlúčenina získaná v príklade 1 <stupeň A-7> sa rozpustí v zmesovom roztoku metanolu (2 ml) a chloroformu (1 ml) a k roztoku sa pridá silikagél (50 mg) a metyl p-toluénsulfonát (36,8 mg). Potom sa reakčná zmes zahrieva pri spätnom toku celý deň. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 10:1 - 5:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (65,3 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 3435, 3066, 1657, 1554, 1205, 1122.

Príklad 24

Príprava 1,4-diaza~4- (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-T- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidínu]

K suspenzii zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň A-7>

(100 mg) v tetrahydrofuräne (2 ml) sa pridá za chladenia ľadom komplex borán-tetrahydrofurán (l,0N tetrahydrofuránový roztok,

157

0,54 ml) . Zmes sa mieša za chladenia ladom 1 hodinu, pridá sa 10% roztok kyseliny chlorovodíkovej v metanole a zmes sa mieša 15 minút za chladenia ľadom. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Potom sa upraví pH vzniknutého zvyšku na 9 pomocou nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí chromatografiou na tenkej vrstve (vyvíjajúce činidlo: metylénchlorid : metanolu = 10:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (14,6 mg).

Príklad 25

Príprava l,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl ) -7-oxa-l'- (4 -pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1,4-diaza-l'-(benzyloxykarbonyl)-6-karboxy-4-(6-chlórnaf talen-2-y1sulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň B-l> (6834,0 g) v metylénchloride (68340 ml) sa pridá 4-hydroxy^-2,2,-6,6-tetrametylpiperidín 1-oxylbenzoát a voľný radikál (314 mg). Potom sa pridá po kvapkách a za chladenia ľadom 5% vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (1,36 ml) a bieliaci prášok (54,0 g). Zmes sa intenzívne mieša 1,5 hodiny za chladenia ľadom, pH sa upraví pomocou IN kyseliny chlorovodíkovej na 1 a extrahuje sa metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (62,7 g).

NMR spektrum (‘CD₃OD) Ô ppm: 8,52-8,44 (1H, m), 8,15-7,97 (3H,

158

m) ,	7,83 (1H,	dd,	J=2,9 Hz) , 7,63 (1H,	dd, J=2,9 Hz),	7,41-7,25
(5H,	m), 5,08	(2H	, s), 4,69-4,61 (1H, m)	, 4,18 (1H, d,	J=17 Hz) ,
4,03	(1H, d,	J=12 Hz), 3,82-3,64 (2H,	m), 3,57-3,17	(3H, m),
3,44	(1H, d, J;	= 17	Hz), 2,79-2,66 (1H, m),	, 1,87-1,39 (4H,	m) .

<Stupeň 2>

Príprava 1, 4-diaza-ľ- (benzyloxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 1 (62,7 g) v pyridíne (640 ml) sa pridá etanol (58,4 ml) . Potom sa postupne pridá za miešania a chladenia ľadom p-toluénsulfonylchlorid (97,3 g) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 4 hodiny. Pridá sa ľadová voda a reakčná zmes sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa premyje vodou, zriedenou kyselinou chlorovodíkovou a nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : etylacetátu = 3:1 - 2:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (40,1 g).

NMR spektrum (’CDClj) δ ppm: 8,35 (1H, s), 7, 99-7,87 (3H, m),

7,80-7,72 (1H, m), 7,65-7,56 (1H, m), 7,40-7,28 (5H, m), 5,10 (2H, s), 4,75 (1H, d, J=12 Hz), 4,38-4,18 (3H, m), 4,07 (1H, d,

J=12 Hz), 3,81-3,58 (2H, m), 3,48-3,22 (4H, m), 2,45 (1H, d, J=12 Hz), 1,75-1, 60 (2H, m), 1,56-1,42 (2H, m), 1,39-1,30 (3H,

m) .

<Stupeň 3>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl) -7-oxaspiro [bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň B-3> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 2 (40,0 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (29,7 g).

NMR spektrum (CDC1₃) δ ppm: 8,38-8,31 (1H, m), 8,01-7,85 (3H, m),

159

7,77	(1H,	dd, J=2 ,9 Hz) ,	7, 61	(1H,	dd,	J=2,9 Hz) , 4,74 (1H,	d,
J=ll	Hz) ,	4,38-4,17	(3H,	m) ,	4,11	(1H,	d,	J=12	Hz) ,	3,41-3,	26
(2H,	m) ,	3,16-2,77	(4H,	m) ,	2,45	(1H,	d,	J=ll	Hz) ,	1,90-1,	45
(4H,	m) ,	1,34 (3H, t,	J=7	Hz) .

<Stupeň 4>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbony 1 ) -7-oxa-l'- (4 -pyridyl) spiro[bicyklo[4. 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 20 cstupeň 5> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 3 (30,0 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (14,2 g).

HRMS: C_2SH_2&C1N₄O₆S (M⁺) : vypočítané: 584,1496, nájdené: 584,1532

Príklad 26

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbony 1) -7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 25 cstupeň 4> (56,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (58,9 mg).

Príklad 27

Príprava 1,4-diaza-6-karboxy-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -7-oxa-1'- ( 4 -pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 25 cstupeň 4>

(400 mg) v metanole (9,6 ml) sa pridá za chladenia ľadom IN vodný roztok hydroxidu sodného (2,74 ml) a zmes sa mieša pri teplo160 te miestnosti 1 hodinu. Po upravení pH zmesi na 4 pomocou IN kyseliny chlorovodíkovej sa vyzrážaná pevná látka odoberie filtráciou, premyje sa vodou a suší sa vo vákuu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (335 mg).

IČ (KBr) cm'¹: 1666, 1647, 1537, 1460, 1350, 1169, 698.

Príklad 28

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 27 (20,0 mg) v pyridíne (0,20 ml) sa pridá metanol (0,015 ml). Postupne sa pridá p-toluénsulfonylchlorid (34,2 mg) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 0,5 hodiny. Po pridaní nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného sa reakčná zmes extrahuje metylénchloridom a organická vrstva sa suší nad bezvodým síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 15:1 - 10:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (17,1 mg).

IČ (KBr) cm^-1: 1751, 1678, 1597, 1350, 1165, 1080.

Príklad 29

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(izopropoxykarbonyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyr idýl) spiro [bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 27 (20,0 mg) a izopropylalkoholu (0,028 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (18,1 mg).

HRMS: C/sHaiClN^OgS (M⁺) : vypočítané: 598,1652, nájdené: 598,1668.

161

Príklad 30

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-6- (propoxykarbonyl) - ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 27 (20,0 mg) a propylalkoholu (0,026 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (15,3 mg).

HRMS: C29H3ÍC1N4O6S (M⁺) : vypočítané: 538, 1652, nájdené: 598,1625.

Príklad 31

Príprava 6-(alyloxykarbonyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsul f onyl)' -7-oxa-ľ - (4-pyridyl) spi ro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 27 (20,0 mg) a alylalkoholu (0,025 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve.

IČ (KBr) cm’¹: 1747, 1678, 1597, 1350, 1167, 972.

Príklad 32

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxye t oxy karbonyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo[4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 27 (20,0 mg) a 2-metoxyetanolu (0,028 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (13,1 mg).

HRMS: C29H31CIN4O7S (M⁺) : vypočítané: 614,1602, nájdené: 614,1597.

162

Príklad 33

Príprava 1,4-diaza-6-(terc-butoxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K dioxánu (1,0 ml) stuhnutého v kúpeli ochladenom na -20°C sa pridá koncentrovaná kyselina sírová (0,1 ml). Zmes sa zahreje na teplotu miestnosti a získa sa homogénny roztok. Roztok sa znova nechá stuhnúť v kúpeli ochladenom na -20°C a pridá sa zlúčenina získaná v príklade 27 (18,0 g). Zmes sa zahreje na teplotu miestnosti a získa sa homogénny roztok, ktorý sa nechá stuhnúť v kúpeli ochladenom na -20°C. Po pridaní kvapalného izobutylénu (0,7 ml) sa zmes mieša v utesnenej skúmavke pri teplote miestnosti 5 hodín. K reakčnej zmesi sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a potom nasleduje extrakcia s metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 15:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (17,1 mg).

HRMS: C30H33CIN4O6S (M⁺) : vypočítané: 612,1809, nájdené: 612,1786

Príklad 34

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-[1-(etoxykarbonyloxy)etoxykarbonyl]-7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo-[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

•íklade 27	(42,0	mg)
trietylamín	(0,063	ml)
a zmes sa	mieša	pri
k reakčnej	zmesi a	ex-

K roztoku zlúčeniny získanej v pr v N,N-dimetylformamide (2,1 ml) sa pridá i a 1-jódchlóretyletylkarbonát (0,0164 ml) teplote miestnosti 2 dni. Po pridaní vody

163 trakcii s metylénchloridom sa organická vrstva premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čisti stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 15:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (11,6 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 1765, 1670, 1645, 1599, 1543, 1167.

Príklad 35

Príprava ( + ) -1, 4-diaza-4- ( 6-chlórr.af talen-2-ylsulfonyl) -6-(etoxykarbonyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu a (-)-l,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxy karbony 1-7-oxa-1'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo-[4.3.0]nonán-8,4'-piperidín]-2-ónu

Zlúčenina získaná v príklade 25 <stupeň 4> sa opticky rozštiepi na HPLC [použitá kolóna, Daicel Chiralcel OD, vyrobená Daicel Chemical Industries, Ltd., 0,46 cm x 25 cm; eluent; N-hexán : etanolu = 1:1, prietoková rýchlosť, 1,0 ml/min., detekčná vlnová dĺžka, 254 nm] a získa sa (+) forma zlúčeniny uvedenej v názve [retenčný čas: 12,7 min., [a]³³ _D +99,7 Cl,000, etanol] a (-) forma zlúčeniny uvedenej v názve [retenčný čas: 14,9 min., [cc]³³d -99,3 (cl, 000, etanol].

Ďalej, k roztoku zlúčeniny získanej v príklade 25 <stupeň 4> (845 mg) v metanole (20 ml) sa pridá (-)-O, O'-dibenzoyl-LD-vínna kyselina (543 mg) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu. Zrazenina sa odoberie filtráciou a suší sa na vzduchu. Takto získané kryštály (598 mg) sa suspendujú v metanole (15 ml) a zahrievajú sa pri spätnom toku 10 minút. Suspenzia sa ochladí, zrazenina sa odoberie filtráciou a suší sa na vzduchu. Takto získané kryštály (386 mg) sa rozpustia v nasýtenom vodnom roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahujú sa metylénchloridom.

164

Organická vrstva sa suší nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a získa sa (-) forma zlúčeniny uvedenej v názve (230 mg, 97,2% ee) . Rovnaký postup sa opakuje s použitím (+)-O, O'-dibenzoyl-D-vínne j kyseliny a získa sa (+) forma zlúčeniny uvedenej v názve.

( + ) forma: HRMS: C₂8H29C1N₄O₆S (M⁺) : vypočítané: 584,1496, nájdené: 584,1462.

(-) forma: HRMS: C₂oH₂9ClN₄0eS (M⁺) : vypočítané: 584, 1496, nájdené: 584,1540 .

Príklad 36

Príprava (-) -1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0)nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím (-) formy zlúčeniny získanej v príklade 35 (100 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (104 mg).

Príklad 37

Príprava (-)-1,4-diaza-6-karboxy-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-ľ- ( 4-pyr idýl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 27 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 35 (1,80 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,63 g) .

IČ (KBr) cm’¹: 1664, 1647, 1543, 1460, 1350, 1169.

165

Príklad 38

Príprava (-)-1,4-diaza-4-( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxykarbonyl)-7-oxa-ľ- ( 4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 37 (160 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (153 mg).

IČ (KBR) cm¹: 1749, 1678, 1599, 1349.

Príklad 39

Príprava (-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(izopropoxykarbonyl) - 7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 37 (150 mg) a s použitím izopropylalkoholu (0,206 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (157,7 mg).

HRMS: CsglľjClNziOgS (M⁺) : Vypočítané: 598,1652, nájdené: 598,1667.

Príklad 40

Príprava (-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-6-(propoxykarbonyl) - ľ- (4 -pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 37 (170 mg) a s použitím n-propylalkoholu (0,023 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (158 mg).

HRMS: C₂9H3iClN₄O₆S (M⁺) : vypočítané: 598,1652, nájdené: 598,1666.

166

Príklad 41

Príprava (-)-6-(alyloxykarbonyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2yl sulf onyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 37 (160 mg) a s použitím n-alylalkoholu (0,196 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (158 mg).

IČ (KBr) cm^-1: 1747, 1678, 1597, 1419, 1352

Príklad 42

Príprava (-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxykarbonyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 28 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 37 (180 mg) a s použitím 2-metoxyetanolu (0,255 ml) namiesto metanolu a získa sa zlúčenina uvedená v názve (178,6 mg) .

HRMS: C2c,H₃₁C1N₄O7S (M⁺) : Vypočítané: 614,1602, nájdené: 614,1572.

Príklad 43

Príprava (-)-1,4-diaza-6-(terc-butoxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 33 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 37 (160 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (146 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 1738, 1678, 1597, 1352, 1157, 1132.

167

Príklad 44

Príprava (-)-l,4-diaza-4-(6-chló'rnaf talen-2-ylsul f onyl)-6-(metoxy karbonyl ) - 7-oxa-l'- ( 4 -pyr idýl )spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 38 (110 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (12 mg).

Príklad 45

Príprava (-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(izopropox y karbonyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 . 3.0] nonán-8, 4'-piper idin ]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 39 (110 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (125 mg).

Príklad 46

Príprava (-) -1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(izopropoxykarbonyl)-7-oxa-6-(propoxykarbonyl) -ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4’-piperidín]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 40 (110 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (12 6 mg) .

Príklad 47

Príprava (-) -(6-alyloxykarbonyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2— ylsul f onyl) - 7-oxa-l'- ( 4 -pyr idýl) spiro [bicyklo [ 4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej

168 v príklade 41 (110 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (129 mg).

Príklad 48

Príprava (-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxykarbonyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 42 (110 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (127 mg).

Príklad 49

Príprava (-)-1,4-diaza-6-(terc-butoxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 43 (119 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (137 mg).

Príklad 50

Príprava amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-1'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-6-karboxylátu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 25 <stupeň 4> (100 mg) v metanole (2,4 ml· sa pridá pri teplote miestnosti IN vodný roztok hydroxidu sodného (0,684 ml) . Zmes sa mieša 1 hodinu a pH sa upraví na 2-3 pomocou IN kyseliny chlorovodíkovej. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa rozpustí v metancle (5 ml) a pridá sa ionomeničová živica MSC-1 (100 až 200 mesh, H-forma, vyrobená Muromachi Chemi169 cal Inc. 2,0 g) a zmes sa mieša 30 minút. Živica sa odoberie filtráciou, premyje sa metanolom a pridá sa do 2N roztoku amoniak-metanol (5 ml). Zmes sa mieša 30 minút. Roztok získaný po odfiltrovaní živice sa koncentruje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (54,8 mg).

IČ (KBr) cm^-1: 1657, 1628, 1601, 1396, 1348, 1169.

Príklad 51

Príprava (+)-amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-β-karboxylátu a (-)-amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-6-karboxylátu

Opakuje sa postup príkladu 50 s použitím (+) formy zlúčeniny získanej v príklade 35 (40,0 mg) a získa sa (+) forma zlúčeniny uvedenej v názve (20,5 mg).

IČ (KBr) cm^-1: 1626, 1603, 1398, 1169.

Ďalej sa opakuje postup príkladu 50 s použitím .(-) formy zlúčeniny získanej v príklade 35 (55,0 mg) a získa sa (-) forma zlúčeniny uvedenej v názve (28,3 mg).

IČ (KBr) cm'¹: 1657, 1626, 1603, 1396, 1348, 1169.

Príklad 52

Príprava 4-[1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl) -7-oxa-oxospiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin] - ľ-yl]-1-etylpyridínium p-toluénsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 23 s použitím (-) formy zlúčeniny získanej v príklade 35 a s použitím etyl p-toluénsulfonátu na170 miesto metyl p-toluénsulfonátu a získa sa zlúčenina uvedená v názve.

IČ (KBr) cm^-1: 3064, 1676, 1649, 1349, 1221, 1192, 1169, 1124 ,

1012 .

Môžu sa opakovať postupy 36 a 52 s použitím (+) formy získanej v príklade 35, pričom sa získajú príslušné (+) štruktúry. Ďalej sa môžu opakovať postupy príkladov 37 a 38 až 49 a získajú sa príslušné (+) štruktúry.

Príklad 53

Príprava ľ- (4-amidinofenyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -ľ- (4-kyánfenyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 cstupeň B-3> (50,0 mg) v 1,3-dimetyl-2-imidazolidóne (1 ml) sa pridajú 4-fluórbenzonitril (18,9 mg) a diizopropyletylamín (20,2 mg). Zmes sa zahrieva pri spätnom toku na 150°C až 160°C počas 4 hodín. Potom sa reakčná zmes ochladí, pridá sa k nej voda a reakčná zmes sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 25:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (25 mg) .

NMR spektrum (CDCI3) δ ppm: 8,36 (1H, s), 7,99-7,90 (3H, m),

7,82-7,74 (1Η, m), 7,65-7,56 (1H, m), 7,45 (2H, d, J=9 Hz), 6,81

171

(2H,	d,	J=9 Hz), 4 , 42-4,29	(2H, m), 4,21 (1H, d,	J=12	Hz), 3,67
(1H,	d,	J=10 Hz) , 3, 61 (1H,	d, J=10 Hz), 3,43 (3H,	s) ,	3,50-3,16
(5H,	m) ,	3,21 (1H, d, J=12	Hz), 2,31 (1H, d, J=12	Hz) ,	2,08-1,80
(2H,	m) ,	1,58-1,46 (2H, m).

<Stupeň 2>

Príprava l,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-ľ-(4-etoxyimidoylfenyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Zlúčenina získaná v stupni 1 (240 mg) sa rozpustí v 20% roztoku kyseliny chlorovodíkovej v etanole (2 ml) a roztok sa mieša pri teplote miestnosti 3 hodiny. Potom sa reakčná zmes koncentruje za zníženého tlaku. K vzniknutému zvyšku sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje s metylénchloridom a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 25:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (16,8 mg).

NMR	spektrum ¹	rCDClj) δ	ppm: 8,38-8,33	(1H,	m), 7,99-7,91	(3H,
m) ,	7,82-7,76	(1H, m),.	7,66-7,58 (3H,	m) ,	6,87-6,80 (2H,	m) ,
4,42	-4,18 (5H,	m) , 3,67	(1H, d, J=10 Hz)	, 3,	61 (1H, d, J=10	Hz) ,
3,43	(3H, s),	3, 48-3, 16	(6H, m) , 2,29	(1H,	d, J=12 Hz), 2	, 08-

-1,84 (2H, m),

1,58-1,50 (2H, m),

1,44-1,36 (3H, m).

<Stupeň 3>

Príprava ľ-(4-amidinofenyl)-1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin] -2-ónu

172

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 2 (16,8 mg) v etanole (2 ml) sa pridá prebytok octanu amónneho a zmes sa zahrieva pri spätnom toku pri teplote miestnosti 13 hodín. Zmes sa mieša a potom sa koncentruje za zníženého tlaku. K vzniknutému zvyšku sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje s metylénchloridom. Potom sa organická vrstva premyje s nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa suspenduje v metylénchloride a filtruje sa odsatím. Potom sa filtrát koncentruje za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina uvedená v názve (4,7 mg).

Príklad 54

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4 -pyridylmetyl )spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň B-3> (50,0 mg) v metylénchloride (1,0 ml) sa pridajú molekulárne sitá 3Á (15 mg), 4-pyridinkarboxaldehyd (12,2 mg) a kyselina octová (18,1 mg) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 30 minút. Potom sa pridá za chladenia ľadom triacetoxyborohydrid (55,1 mg). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 8 hodín. K zvyšku sa pridá 10% kyselina chlorovodíková v metanole, zmes sa mieša 10 minút a pH reakčnej zmesi sa upraví na 9 nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Nerozpustné látky sa odstránia filtráciou a nasleduje extrakcia metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent; metylénchlorid : metanolu = 400:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (51,2 mg).

173

HRMS: C₂8H3iClN₄O₅S (M⁺) : vypočítané: 570, 1703, nájdené: 570, 1716.

Príklad 55

Príprava 4-[1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-2-oxospiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-ľ-yl]pyridin-l-oxidu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 1 cstupeň B-3> (50,0 mg) v etanole (1 ml) sa pridá 4-chlórpyridín-N-oxid (16,2 mg) a diizopropyletylamín (26,9 mg) a zmes sa zahrieva za miešania v utesnenej skúmavke na teplotu 150°C až 160°C počas 18 hodín. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 10:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (8,7 mg).

IČ (KBr) cm“¹; 2925, 1658, 1506, 1346, 1165.

Príklad 56

Príprava ľ-acetimidoyl-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej (100 mg) v etanole (4 ml) sa pridá (60,9 mg) a trietylamínu (0,093 ml) teplote miestnosti. Reakčná zmes tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí silikagéli (eluent; metylénchlorid zlúčenina uvedená v názve (97 mg).

v príklade 1 <stupeň B-3> hydrochlorid etylacetimidátu a zmes sa mieša cez noc pri sa koncentruje za zníženého stĺpcovou chromatografiou na : metanolu = 10:1) a získa sa

IČ (KBr) cm’¹: 3422, 2817, 1670, 1454, 1419, 1350, 1169.

Príklad 57

174

Príprava ľ-acetimidoyl-1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 56 (40,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (43,7 mg).

Príklad 58

Príprava 6-(aminometyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridýl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-pi perídin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-6- (f talimi dome tyl) - ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku ftalimidu (4,88 g) a trifenylfosfinu (8,69 g) v metylénchloride (150 ml) sa pridá po kvapkách a za chladenia ľadom dietylazodikarboxylát (40% toluénový roztok, 10,0 ml). Potom sa pridá zlúčenina získaná v príklade 3 <stupeň A-2> (3,0 g) a zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. K reakčnej zmesi sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného, zmes sa extrahuje metylénchloridom, organická vrstva sa premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chrómatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 19:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (2,5 g).

spektrum	CCDCI3) δ ppm: 8,44-8,41 (1H, m)	, 8,25-8,18	(2H,
8,00-7,75	(8H, m), 7,62 (1H, dd, J=2,9 Hz)	, 6,65-6,51	(2H,
4,58-4,51	(1H, m), 4,39-4,24 (2H, m), 4,19	(1H, d, J=15	Hz) ,

175

4,09 (1Η, d, J=15 Hz), 3,44 (1H, d, J=17 Hz), 3,44-3,16 (4H, m),

3,04 (1H, d, J=12 Hz), 2,45-2,38 (1H, m), 1,89-1, 62 (2H, m),

1,47-1,40 (2H, m).

<Stupeň 2>

Príprava 6-(aminometyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-l' - (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K suspenzii zlúčeniny získanej v stupni 1 (2,45 g) v etanole (50 ml) sa pridá hydrazínmonohydrát (0,37 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 16 hodín. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu =4:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,432,5 g).

IČ (KBr) cm'-: 3395, 2920, 2360, 1666, 1597, 1348, 1167.

Príklad 59

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl aminometyl ) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4 . 3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 58 cstupeň 2> (50,0 mg) a trietylaminu (0,02 ml) v metylénchloride (1 ml) sa pridá etylchlórformiát (12 mg) zä chladenia ľadom a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 2 hodiny. K reakčnej zmesi sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 50:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (49,4 mg) .

176

IČ (KBr) cm'¹: 3419, 2941, 1718, 1672, 1599, 1350, 1242, 1169.

Príklad 60

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylmetylaminometyl)-7-oxa-ľ - (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku oxalyldichloridu (0,16 ml) v metylénchloride (7 ml) sa postupne pridá po kvapkách pri -75°C až -70°C roztok dimetylsulfoxidu (0,29 ml) v metylénchloride (7 ml). Potom sa postupne pridá roztok zlúčeniny získanej v príklade 3 <stupeň A-2> (500 mg) v metylénchloride (7 ml) pri tej istej teplote.

Reakčná zmes sa mieša pri -60°C až -50°C počas 4 hodín a potom sa po kvapkách pridá trietylamin (0,77 ml). Reakčná zmes sa zahreje na teplotu miestnosti a pridá sa voda. Zmes sa extrahuje s metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Amorfná látka (450 mg) získaná oddestilovaním rozpúšťadla za zníženého tlaku sa rozpustí v metylénchloride (1,3 ml) a k roztoku sa pridá hydrochlorid glycínetylesteru (50,4 mg) a kyselina octová (0,03 ml). Potom sa za chladenia ľadom pridá triacetoxyborohydrid (127 mg) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 8 hodín. K reakčnej zmesi sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 19:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (17,8 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 3360, 2854, 1736, 1670, 1597, 1348, 1169.

Príklad 61

177

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(morfolinometyl) - 7-oxa-l'- ( 4 -pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl)-6-(p-toluénsulfonyloxymetyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidín]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 3 <stupeň A-2> (200 mg) v metylénchloride (4 ml) sa pridá za chladenia ľadom trietylamín (0,146 ml) a p-toluénsulfonylchlorid (120 mg) a zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. K reakčnej zmesi sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická' vrstva sa premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 19:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (234 mg).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,36-8,31 (1H, m), 8,28-8,20(2H,

m), 8,00-7,92 (3H, m), 7,85-7,72 (3H, m), 7,63 (1H, dd,

J=2,9Hz), 7,44-7,37 (2H, m), 6,68-6,63 (2H, m), 4,31-4,17(5H,

m), 3, 64-3,37 (3H, m), 3,34-3,17 (3H, m), 2,49 (3H, s),2,32 (1H, d, J=12 Hz), 2,10-1,98 (1H, m), 1,94-1,81 (1H, m),1,58-1,43 (2H, m) .

<Stupeň 2>

Príprava 1,4-diaza-4- (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6- (morfolinometyl) - 7-oxa-l'- ( 4 -pyridyl) spiro [bicyklo[4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

178

Roztok zlúčeniny získanej v stupni 1 (171 mg) v morfoline (1,7 ml) sa zahrieva pri spätnom toku 18 hodín. Reakčná zmes sa ochladí, pridá sa voda a reakčná zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje vodou, nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čisti stĺpcovou chromatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent; n-hexán : etylacetátu = 1:1 - 1:2) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (88,8 mg).

IČ (KBr) cm^-1: 2951, 2852, 1670, 1597, 1350, 1167.

Príklad 62

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(morfolinometyl) -7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón dimetánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 61 <stupeň 2> (50,9 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (50,8 mg).

Príklad 63

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -1'-(2-chlórpyrimidin-4-yl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K suspenzii zlúčeniny získanej v príklade 7 <stupeň B-l> (300 mg) a 2 , 4-dichlórpyrimidínu (88 mg) v izoamylalkohole (4 ml) sa pridá hydrogenuhličitan sodný (174 mg) a zmes sa mieša pri 70°C počas 1,5 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí, pridá sa voda a reakčná zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silika179 géli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 125:1 - 100:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (237 mg).

Príklad 64

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(2-naftalénsulfonyl)-7-oxa-ľ- ( 4-pyrimidinyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin ] -2-ónu

Zlúčenina získaná v príklade 63 (110 mg) sa rozpustí v etanole (6 ml) a k roztoku sa pridá 5% paládium - uhličitan bárnatý (1,65 g) . Reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti 15 hodín pod atmosférou vodíka. Reakčná zmes sa filtruje cez Celiť. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí chromatografiou na tenkej vrstve (vyvíjacie činidlo; n-hexán : acetónu =. 1:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (5,5 mg).

HRMS: C27H29N5O6S (M⁺) : vypočítané: 551,1838, nájdené: 551,1804.

Príklad 65

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-ľ- ( 4-pyrimidinyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0 ] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

K suspenzii zlúčeniny získanej v príklade 4 <stupeň B-l> (100 mg) a hydrogenuhličitanu sodného (49,6 mg) v izoamylalkohole (5 ml) sa pridá 4-chlórpyrimidínhydrochlorid (29,7 mg) pripravený postupom opísaným vo WO 98/21188. Zmes sa mieša pri 80°C 4 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí a koncentruje sa za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou (eluent; metylénchlorid : metanolu = 19:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (37,0 g).

HRMS: C27H28CIN5O6S (M*) : vypočítané: 585,1448, nájdené: 585, 1497.

180

Príklad 66

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl) - 7-oxa-l' - ( 4 -pyrimidinyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)-1'- [2- (metyltio)pyrimidin-4-yl]-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0Jnonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 2 <stupeň 1> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 7 <stupeň B-l> (930 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (480 mg).

NMR spektrum ('CDC1₃) δ ppm: 8,41-8,34 (1H, m),

8,04-7,89 (4H,

m) ,	7,79	(1H,	dd, J=2,9 Hz), 7,62 (1H, dd,	J=2, 9	Hz), 6,17 (1H,
d, J	=6 Hz), 4,	50-4,32 (2H, m), 4,25	(1H, d,	J=12	Hz), 4,01-3,30
(6H,	m) ,	3,38	(1H, d, J=17 Hz), 3,20	(1H, d,	J=12	Hz), 2,76-2,60
(1H,	m) ,	2,45	(3H, s), 2,33 (1H, d,	J=12 Hz)	, 2,0C	ι-1,67 (2H, m),

1,56-1,36 (2H, m).

Súčasne sa získa tiež 6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -1'- [2-(metyltio)pyrimidin-4-yl]-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón (228 mg).

NMR spektrum ( CDC1₃) δ ppm: 8 8,01-7,90 (3H, m), 7,84-7,78 (1H, d, J=6 Hz), 4,51 (1H, d, (1H, d, J=12 Hz), 4,18 (1H,

3,51-3,30 (2H, m), 3,37 (1H, d

2,46 (3H,s), 2,36 (1H, d, J=12 m) .

(1H, s) , 8,01 (1H, d, J=6 Hz), (1H, m), 7,66-7,60 (1H, m),6,16

J=12 Hz), 4,48-4,32 (2H, m),4,26 d, J=12 Hz), 4,00-3,80 (2H,m), , J=17 Hz), 3,18 (1H, d, J=12 Hz),

Hz), 2,14 (3H, s), 1,97-1,40 (4H,

181 <Stupeň 2>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl) - 7-oxa-l'- (4 -pyrimidinyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 2 <stupeň 2> s použitím zlúčeniny získanej v <stupni 1> (300 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (197 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 3400, 1666, 1595, 1348, 1169.

Príklad 67

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl) - 7-oxa-l'- ( 4-pyrimidinyl) spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidín]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonyl) - T- [2 - (metyltio)pyrimidinyl-4-yl]-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 2 <stupeň 1> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 25 <stupeň 3> (390 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (363 mg).

NMR spektrum CCDCI3) δ ppm: 8,36 (IH, s), 8,02 (IH, d, J=6 Hz),

7, 99-	-7,9	2 (3H, m)	, 7,81-7,75	(IH,	m) ,	7,65-7,59	(IH,	m) , 6,	18
(IH,	d,	J=6 Hz) ,	4,77 (IH, d,	J=ll	Hz) ,	4,38-4,22	(3H,	m) , 4,	10
(IH,	d,	J=12 Hz) ,	4,00-3,80	(2H,	m) ,	3,58-3,34	(3H,	m) , 3,	35
(IH,	d,	J=17 Hz) ,	2,53-2,43	(IH,	m) ,	2,47 (3H,	s) ,	1,83-1,	51
(4H,	m) ,	1,36 (3H,	t, J=7 Hz) .

182 <Stupeň 2>

Príprava 1,4-diaza-4- ( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6-(etoxykarbonyl) -7-oxa-1'- ( 4 -pyrimidinyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3.0 ] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 2 <stupeň 2> s použitím zlúčeniny získanej v <stupni 3> (360 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (41 mg) .

HRMS: CivHžíCIN-.OóS (M'^r) : vypočítané: 585, 1448, nájdené: 585, 1456.

Príklad 68

Príprava 1,4-diaza-6-karboxy-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-1'- (4-pyrimidinyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 27 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 67 <stupeň 2> (10 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,9 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 3400, 1657, 1599, 1346, 1169.

Príklad 69

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metyl-7-oxa-1'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0] nonán-8,4'-piperidín] -2-ónu <Stupeň 1>

Príprava etyl 2-[(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) (2-oxopropan-l-yl)amino]acetátu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-2> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 1 <stupeň A-l> (1,0 g) a s použitím chlóracetónu (0,368 ml) namiesto l-acetoxy-3-chlóracetónu a zís183 ka sa zlúčenina uvedená v názve (1,08 g).

NMR	spe ktrum	(*CDC1₃	) δ	ppm: 8,40-8,38	(1H, m), 7,93-7,86 (3H,
m) ,	7,83-7,78	(1H,	m) ,	7,56 (1H, dd,	J=2,9 Hz), 4,29 (2H, s),
4,17	(2H, s),	4,04	(2H,	g, J=7 Hz), 2,	19 (3H, s), 1,16 (3H, t,

J=7 Hz) .

<Stupeň 2>

Príprava 1,4-dia za-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metyl-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidín]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A~3> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 1 (870 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (150 mg) .

NMR spektrum	(CDC1₃	) δ	ppm:	8, 33	(1H,	s) ,	7,97-7,88	(3H,	m) ,
7,80-7,73	(1H,	m) , 7,60	(1H,	dd,	J=2, 9	Hz) ,	7,34-7,18	(5H,	m) ,
4,37-4,26	(1H,	m) ,	4,25	-4,08	(2H,	m) ,	3,46	(2H, s),	3,32-	3,22

(1H, m), 3,04 (1H, d, J=12 Hz), 2,65-2,20 (4H, m), 2,33 (1H, d,

J=ll Hz), 1,90-1,73 (2H, m), 1,59 (3H, s), 1,47-1,37 (2H, m).

<Stupeň 3>

Príprava

1, 4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metyl-7

-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidín]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 7 <stupeň B-l> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 2 (195 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (142 mg).

NMR	spektrum	(‘CDC1₃) δ ppm: 8,36-8,33 (1H,	m) ,	7,97-7,92	(3H,
m) ,	7,80-7,76	(1H, m), 7,61 (1H, dd, J=2,9	Hz) ,	4,38-4,29	(1H,
m) ,	4,24 (1H,	d, J=12 Hz), 4,14 (1H, d, J=ll	Hz) ,	3,32-3,23	(1H,

184

m), 3,08-2,98 (1H, m), 3,04 (1H, d, J=12 Hz), 2,92-2,82 (1H, m),

2,78-2,61 (2H, m), 2,34 (1H, d, J=ll Hz), 1,85-1, 69 (2H, m),

1, 61 (3H, s), 1, 44-1,27 (2H, m) .

<Stupeň 4>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metyl-7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidín]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 20 <stupeň 5> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 3 (130 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (95 mg).

HRMS: C₂₆H₂7C1N₄O₄S (M⁺) : vypočítané: 526,1441, nájdené: 526,1408.

Príklad 70

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metyl-7-oxa-ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidín] -2-ón metánsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 69 <stupeň 4> (35,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (37,9 mg).

Príklad 71

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(3-metoxykarbonylpropyl)-7-oxa-1'- ( 4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón metánsulfonátu <Stupeň 1>

Príprava etyl 2-[(5-metoxykarbonyl-2-oxopentan-l-yl)(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)amino]acetátu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-2> s použitím metyl-6-bróm-5-oxohexanoátu (10,8 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (11,4 g).

185

NMR	spektrum	(’CDC1₃) δ	ppm: 8,39	(1H,	s) ,	7,95-	-7,84 (3H,	m) ,
7,84	-7,77 (1H,	m) , 7,60-	7,52 (1H,	m) ,	4,27	(2H,	s), 4,17	(2H,
s) ,	4,04 (2H,	q, J=7 Hz)	, 2,31 (2H	, t,	J=7	Hz) ,	1,96-1,83	(2H,

m) , 1,15 (3H, t, J=7 Hz) .

<Stupeň 2>

Príprava 1, 4-diaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(3-metoxykarbonylpropyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň C-l> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 1 (5,56’g). Takto získaná zlúčenina sa použije ako východiskový materiál pre postup prípravy podľa príkladu 1 <stupeň C-2>, pričom sa získa zlúčenina uvedená v názve (1,50 g).

NMR	spektrum	(⁺CDC1₃) δ	ppm:	8,39-	-8,31	(1H,’ m),	8,00-7,87	(3H,
m) ,	7,78	(1H,	dd, J=2,9	Hz) ,	7,60	(1H,	dd, J=2, 9	Hz), 7,36-	-7,17
(5H,	m) ,	4, 39-	-4,13 (3H,	m) ,	3, 69	(3H,	s) , 3,47	(2H, s),	3, 30

(1H, d, J=17 Hz), 3,04 (1H, d, J=12 Hz), 2,67-2,12 (6H, m), 2,22 (1H, d, J=12 Hz), 2,12-1,53 (6H, m), 1,53-1,30 (2H, m).

<Stupeň 3>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(3-metoxykarbonylpropyl ) - 7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 7 <stupeň B-l> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 2 (0,53 g) a získa sa zlúčenina uvedená

186 v názve (0,30 g).

NMR spektx	um	(*CDC1.	3) δ ppm:	8,35	(1H	:, s), 8,02-7,92	(3H, m) ,
7,83-	7,74	(1H,	m) ,	7,61 (1H,	dd,	J=2,	9 Hz), 4,40-4,17	(3H, m),
3,70	(3H,	s) ,	3,31	(1H, d,	J=17	Hz) ,	3,11-2,97 (1H,	m) , 3,04
(1H,	d, J=	= 12	Hz), 2,97-2,79	(1H,	m) ,	2,79-2,68 (2H,	m), 2,48-
-2,30	(2H,	m)	, 2,24	(1H, d,	J=12	Hz) ,	2,12-1,67 (6H,	m), 1,45-
-1,30	(2H,	m) .

<Stupeň 4>

Príprava 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(3-metoxykarbonylpropyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 20 <stupeň 5> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 3 (420 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (90 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 3442, 2949, 1732, 1666, 1597, 1348, 1167.

Príklad 72

Príprava amónium 4-[l,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ- ( 4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-6-yl]butylátu

Opakuje sa postup príkladu 50 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 71 <stupeň 4> (90 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (70 mg) .

IČ (KBr) cm’¹: 3445, 2949, 1666, 1599, 1348, 1167.

Príklad 73

Príprava l,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hyd187 roxymetyl) - ľ- (4-pyridýl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu <Stupeň 1>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1,4, 7-triaza-l'-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 cstupeň A-3> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 1 cstupeň A-2> (10,3 g) a 4-amino-4-(aminometyl)-1-benzylpiperidínu (5,26 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (7,76 g).

NMR spektrum	( CDCI3) δ ppm:	8,37-8,32 (1H,	m) ,	7,97-	7,89	(3H,
m) , 7,80-7,74	(1H, m), 7,59	(1H, dd, J=2,9	Hz) ,	7,35-	-7,17	(5H,
m), 4,36-4,12	(5H, m), 3,45 (2H, s), 3,33 (1H, d,	J=17	Hz) ,	2,88
(1H, ’ d, J=12	Hz), 2,63-2,40	(2H, m), 2,31	(1H,	d,	J=12	Hz) ,
2,37-1,93 (2H,	m), 2,11 (3H,	s), 1,80-1,65	(2H,	m) ,	1,40-	-1,25
(2H, m) .

<Stupeň 2>

Príprava 1,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 1 (5,00 g) a 1,8-bis-(N,N-dimetylamino)naftalénu (2,15 g) v 1,2-dichlóretáne (50 ml) sa pridá za chladenia ľadom 1-chlóretylchlórformiát (2,28 ml). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 30 minút a potom sa zahrieva pri spätnom toku 2 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. K zvyšku sa pridá metanol (50 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 1 hodinu. Reakčná zmes sa ochladí a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Výsledný zvyšok kryštalizuje po pridaní dietyléteru. Supernatant sa odstráni dekantáciou a rozpúšťadlo sa oddestiluje

188 za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa rozpustí v metanole (50 ml) a k roztoku sa pridá pri teplote miestnosti IN vodný roztok hydroxidu sodného (33,5 ml). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu. Vyzrážané kryštály sa odoberú filtráciou a premyjú sa s metylénchloridom a získa sa zlúčenina uvedená v názve (3,30 g).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8, 60-8,55 (1H, m), 8,30 (1H, d,

J=9 Hz), 8,27-8,24 (1H, m), 8,17 (1H, d, J=9 Hz), 7,87 (1H, dd,

J=2,9 Hz), 7,73 (1H, dd, J=2,9 Hz), 5,26-5,18 (1H, m), 4,01 (1H, d, J=17 Hz), 4,00-3,89 (2H, m), 3,58-3,30 (3H, m), 2,78 (1H, d,

J=ll Hz), 2,85-2,25 (4H, m), 2,36 (1H, d, J=12 Hz), 1,99 (1H, široký s), 1,60-1,44 (2H, m), 1,20-1,04 (2H, m).

<Stupeň 3>

Príprava l,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6- (hydroxymetyl) -1'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4’-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 20 <stupeň 5> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 2 (3,30 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (2,50 g).

IČ (KBr) cm¹: 3336, 2939, 1657, 1601, 1454, 1421, 1346, 1167.

Príklad 74

Príprava 1,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl) -7-metyl-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 73 <stupeň 3>

(1,00 g) v metylenchloride (10 ml) sa pridá pri teplote miest nosti kyselina octová (0,42 ml) a paraformaldehyd (0,12 g). Zmes sa mieša 30 minút a pridá sa k nej triacetoxyborohydrid sodný

189 (1,56 g) . Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 6 dni a potom sa zahrieva pri spätnom toku 8 hodín. Po pridaní vody sa reakčná zmes extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje s nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čisti stĺpcovou chromatografiou na silikagéli [ChromatexNH™] (eluent; metylénchlorid - 1% metanol/metylénchlorid) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0,45 g) .

IČ (KBr) cm^-1: 3444, 2943, 1657, 1599, 1456, 1348, 1167.

Príklad 75

Príprava 1,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6-(metoxymetyl) -7-metyl -1'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 cstupeň A-5> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 74 (0,34 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0,14 g) .

IČ (KBr) cm'¹: 3446, 2930, 1662, 1597, 1454, 1348, 1167.

Príklad 76

Príprava 1,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6-(metoxymetyl)-7-metyl-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ón dirnetylsulfonátu

Opakuje sa postup príkladu 12 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 75 (0,13 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0, 17 g) .

Príklad 77

Príprava 1,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(me190 toxymetyl) - ľ- ( 4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3.0] nonán-8 , 4'-pi perídin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-5> s použitím zlúčeniny získanej v príklade 73 <stupeň 3> (1,50 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0,75 g).

IČ (KBr) cm’¹: 3435, 2939, 1662, 1597, 1454, 1421, 1350, 1167.

Príklad 78

Príprava 7-acetyl-l,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6- (metoxymetyl) - ľ- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón dimetylsulfonátu <Stupeň 1>

Príprava 1, 4,7-triaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)spiro[bicyklo[4 . 3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-4> s použitím

niny	získanej	v príklade 73 <stupeň 1> (2,00 g) a získa sa zlúče-
nina	uvedená v	názve (1,75 g).
NMR	spe ktrum	( CDCI3) δ ppm: 8,35-8,32 (1H, m), 7,96-7,88	(3H,
m) ,	7,80-7,73	(1H, m), 7,60 (1H, dd, J=2, 9 Hz), 7,34-7,19	(5H,
m) ,	4,37-4,20	(2H, m), 4,17-4,08 (1H, m), 4,00-3,93 (1H,	m) ,
3, 55	-3,47 (1H,	, m), 3,46 (2H, s), 3,32 (1H, d, J=17 Hz),	2,93
(1H,	d, J=12	Hz), 2, 64-2,40 (2H, m), 2,35-2,15 (2H, m),	2,25
(1H,	d, J=12 Hz), 1,80-1,71 (2H, m), 1,44-1,35 (2H, m).

<Stupeň 2>

Príprava 1,4, 7-triaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6- (metoxymetyl) spiro [bicyklo [4.3.0 ] nonán-8 , 4'-piperidin ] - 2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 1 <stupeň A-5> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 1 (1,72 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,43 g) .

191

NMR	spekt	.rum ('CDCI3) δ	ppm:	8,35-8,	31 (1H,	m).,	7,97-7,88 (3H,
m) ,	7,80-	7, 74 (1H, m) ,	7,59	(1H, dd,	, J=2,9	Hz) ,	7,34-7,19 (5H,
m) ,	4, 31	(1H, d, J=17	Hz) ,	4,22-4,	08 (2H,	m) ,	3,70 (1H, d,
J=10	Hz) ,	3,49-3,'38 (1	H, m)	), 3,45	(3H,	s) ,	3,27 (1H, d,
J=17	Hz) ,	2,88 (1H, d,	J=12	Hz), 2,	60-2,40	(2H,	m), 2,31-2,10
(2H,	m) ,	2,21 (1H, d,	J=12	Hz), 1,	80-1,65	(2H,	m), 1,40-1,21
(2H,	m) .

<Stupeň 3>

Príprava 7-acetyl-l, 4,7-triaza-ľ-benzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 2 (0,30 g) a trietylamínu (0,11 ml) v metylénchloride (3 ml) sa pridá za chladenia ľadom acetylchlorid (56 μΐ) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 2 hodiny. Po pridaní nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného sa reakčná zmes extrahuje s metylénchloridom a organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; etylacetát : metanolu = 19:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0,31 g) )

NMR spektrum (CDCI3) δ ppm: 8,35-8,31 (1H, m), 7,98-7,88 (3H, m), 7,77 (1H, dd, J=2,9 Hz), 7,59 (1H, dd, J=2,9 Hz), 7,35-7,20 (5H, m), 5,16 (1H, d, J=13 Hz), 4,54 (1H, d, J=ll Hz), 4,42 (1H, d, J=17 Hz), 4,37-4,29 (1H, m), 3,90-3,83 (1H, m), 3,47 (2H, s), 3,37-3,25 (2H, m), 3,32 (3H, s), 2, 94-2,75 (2H, m), 2,55-2,25 (2H, m), 2,29 (1H, d, J=13 Hz), 2,28 (3H, s), 2,18-2,00 (2H, m),

192

1,95-1,80 (IH, m), 1,28-1,13 (IH, m).

<Stupeň 4>

Príprava 7-acetyl-l,4,7-triaza-4-( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6- (metoxymetyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 3 (0,28 g) a 1,8-bis-(N,N-dimetylamino)naftalénu (20 mg) v 1,2-dichlóretáne (3 ml) sa pridá za chladenia ľadom

1-chlóretylchlórformiát (0,13 ml) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po ochladení reakčnej zmesi sa rozpúšťadlo oddestiluje za zníženého tlaku.

K zvyšku sa pridá metanol (3 ml) a zmes sa zahrieva pri spätnom toku 1 hodinu.

Reakčná zmes sa ochladí a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku.

K vzniknutému zvyšku sa pridá voda a zmes sa premyje dietyléterom. Potom sa upraví pH vodnej vrstvy na 10 pomocou uhličitanu draselného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou [ChromatorexNH™] (eluent; mety lénchlorid

2% metanol/metylénchlorid) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0,15 g).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 8,34 (IH, s), 8,00-7, 88 (3H,m),

7,81-7,74 (IH, m), 7,60 (IH, dd, J=2,9 Hz), 5,16 (IH, d,

J=12 Hz), 4,61 (IH, d, J=ll Hz), 4,42 (IH, d, J=17 Hz),4,34 (IH, d, J=10 Hz), 3,87 (IH, d, J=10 Hz), 3,40-3,27 (2H, m), 3,34 (3H, s), 3,15-2,97 (2H, m), 2,80-2,65 (IH, m), 2,55-2,44(1H,

m), 2,43-2,23 (2H, m), 2,28 (3H, s), 2,03-1,85 (2H, m),1,30-1,17 (IH, m).

<Stupeň 5>

Príprava 7-acetyl-l,4,7-triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)193

-6- (metoxymetyl) -1' - (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0 ] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 20 cstupeň 5> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 4 (110 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (78 mg).

IČ (KBr) cm’¹: 3435, 2920, 1666, 1639, 1597, 1383, 1346, 1167.

Príklad 79 .

Príprava 1,4,7-triaza-4-(2-naftalenylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)— ľ— ( 4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3.0] nonán-8 , 4'-piperidin] - 2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v príklade 77 (200 mg) v metanole (4 ml) sa pridá kyselina chlorovodíková (1,8 ml) a potom 10% paládium na aktívnom uhlí. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 4 dni pod atmosférou vodíka. Reakčná zmes sa filtruje cez Celit a potom sa koncentruje za zníženého tlaku. Potom sa upraví pH vzniknutého zvyšku na 10 pomocou vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent; metylénchlorid - metylénchlorid : metanolu 199:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (140 mg).

Príklad 80

Príprava 1,4,7-triaza-4-(2-naftalénsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-metyl-ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 79 s použitím zlúčeniny získanej v príklade 75 (130 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve

194

69,0 mg) .

Príklad 81

Príprava ( + ) -1, 4-diaza-6- (metoxymetyl) - 4- (2-naftalénsulfonyl) -7-oxa-ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 79 s použitím (+)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3 . 0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu (100 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (90,7 mg) .

Príklad 82

Príprava (-)-l,4-diaza-6-(metoxymetyl)-4-(2-naftalénsulfonyl)-7-oxa-1' - (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0] nonán-8,4'-piperidin] - 2-ónu

Opakuje sa postup príkladu 79 s použitím (-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-T- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3 . 0 ] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu (100 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (84,1 mg).

Príklady na postup prípravy medziproduktových zlúčenín predloženého vynálezu sú opísané ďalej ako referenčné príklady.

Referenčný príklad 1 <Stupeň 1>

Príprava etyl-2-[(2-nitrobenzénsulfonyl)amino]acetátu

K suspenzii hydrochloridu glycínetylesteru (9,45 g) v metylénchloride (100 ml) sa pridajú postupne a za chladenia ľadom trietylamín (18,9 ml) a 2-nitrobenzénsulfonylchlorid (10,0 g) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 2 dni. K reakčnej zmesi sa pridá za chladenia ľadom IN kyselina chlorovodíková a potom

195 nasleduje extrakcia s metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, potom nasýteným roztokom chloridu sodného a súši sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vyzrážané kryštály sa premyjú zmesovým rozpúšťadlom n-hexánu a dietyléteru, odoberú sa filtráciou a získa sa zlúčenina uvedená v názve (10,8 g) .

NMR spektrum (XdC1₃) δ ppm: 8,14-8,06 (1H, m), 7,98-7,91 (1H, m), 7,80-7,71 (2H, m), 6,06 (1H, široký s), 4,06 (2H, q, J=7 Hz), 4,01 (2H, s), 1,20-1,13 (3H, m).

<Stupeň 2>

Príprava etyl-2-[(3-acetoxy-2-oxopropan-l-yl) (2-nitrobenzénsulfonyl)amino]acetátu

K suspenzii zlúčeniny získanej v stupni 1 (10,0 g), uhličitanu draselného (7,20 g) a jodidu sodného (5,2 g) v N,N-dimetylformamide (100 ml) sa pridá za chladenia ľadom roztok (20 ml) l-acetoxy-3-chlóracetónu (7,84 g) v N,N-dimetylformamide a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 2 hodiny. K reakčnej zmesi sa pridá za chladenia ľadom voda a potom sa uskutoční extrakcia s etylacetátom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. K vzniknutému roztoku sa pridá hexán a zmes sa mieša. Supernatant sa odstráni dekantáciou a kryštalizuje po pridaní dietyléteru. Kryštály sa odoberú

filtráciou a	po	vysušení na vzduchu sa získa zlúčenina	uvedená
v názve (9,36	g)	1 .
NMR spektrum	(‘	CDC1₃) δ ppm: 8,10-8,02 (1H, m), 7,76-7,	62 1	:3h,
m), 4,73 (2H	r	s), 4,53 (2H, s), 4,24 (2H, s), 4,15	(2H,	q,

J=7 Hz), 2,16 (3H, s), 1,24 (3H, t, J=7 Hz).

196 <Stupeň 3>

Príprava etyl-2-[ (3-acetoxy-2-oxopropan-l-yl) (benzyloxykarbonyl)amino]acetátu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 21 (5,0 g) v acetonitrile (75 ml) sa pridá za chladenia ladom tiofenol (1,40 ml) a uhličitan cézny (12,1 g). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu. Po pridaní ďalšieho tiofenolu (1,0 ml) a miešania pri teplote miestnosti sa reakčná zmes filtruje cez Celit. Po premytí Celitu s metylénchloridom (500 ml) sa k filtrátu pridá za chladenia ľadom trietylamín (5,20 ml) a potom benzylchlórformiát (4,68 ml). Zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Po pridaní vody sa reakčná zmes extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou (eluent; n-hexán : etylacetátu = 20:1 - 2:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (1,41 g).

NMR spektrum	(DMSO-d.-:, 10C°C )	Ó ppm: 7,38-7,24	(5H,	m) ,	5,08
(2H, s), 4,75	(2H, s), 4,25 (2H,	s), 4,10 (2H, q,	J=7	Hz) ,	4,03
(2H, s), 2,07	(3H, s), 1,17 (3H,	t, J=7 Hz) .

<Stupeň 4>

Príprava etyl-2-[[2-(acetoxymetyl)-3, 8-diaza-8-benzyl-l-oxaspiro[bicyklo[4.5]dekan-2-yl]metyl](benzyloxykarbonyl)amino]acetátu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 3 (1,0 g) a 4-(aminometyl)-l-benzyl-4-hydroxypiperidínu (879 mg) v metylénchloride (50 ml) sa pridá kyselina octová (0,1 ml) a molekulové sitá 3Ä (2,0 g) . Zmes sa zahrieva pri spätnom toku 2 hodiny. Reakčná zmes sa ochladí a čistí sa stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 100:0 - 50:1 - 20:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve v kvantitatívnom výťažku.

197

NMR spektrum ('DMSC-d_e, 100°C (2H, s), 4,21-3,88 (6H, m),

3,30-3,20 (1H, m), 2,90-2,76

-2,22 (2H, m), 1,94 (3H, s),

J=7 Hz) .

) δ	ppm:	7,37-7,16	(10H,	m) ,	5,07
3, 54	-3, 34	(2H, m),	3, 44	(2H,	s) ,
(2H,	m) ,	2, 52-2,38	(2H,	m) ,	2,34-

1,65-1,45 (4H, m), 1,16 (3H, t, <Stupeň 5>

Príprava 6-(acetoxymetyl)-1, 4-diaza-l'-benzyl-4-benzyloxykarbo~ nyl-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Roztok zlúčeniny získanej v stupni 43 (1,60 g) v toluéne (32 ml) sa mieša v utesnenej skúmavke pri 180°C počas 2 hodín. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = '50:1 - 20:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (890 mg).

NMR spektrum (’DMSO-d₅, 100°C ) δ ppm: 7,38-7,16 (10H, m), 5,11 (2H, s), 4,38 (1H, d, J=13 Hz), 4,30-3,99 (4H, m), 3,82 (1H, d,

J=18 Hz), 3,47 (2H, s), 3,09 (1H, d, J=ll Hz), 3,00 (1H, d, J=13 Hz), 2,58-2,22 (4H, m), 1,94 (3H, s), 1,80-1,72 (2H, m), 1,56-1,50 (2H, m).

<Stupeň 6>

Príprava 1,4-diaza-ľ-benzyl-4-benzyloxykarbonyl-6-(hydroxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 5 (400 mg) v etanole (8 ml) sa pridá za chladenia ľadom hydrazínmonohydrát (0,38 ml) . Zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa koncentruje a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; metylénchlorid : metanolu = 50:1 25:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (329 mg).

198

NMR spektrum ('DMSO-d_£,	100°C	) δ ppm: 7,38-7,16 (10H, m	), 5,10
(12H, s),	4,76-4,67	(1H,	m) ,	4,29 (1H, d, J=13 Hz) , 4,17	(1H, d,
J=18 Hz),	4,10 (1H,	d,	J=ll	Hz), 3,81 (1H, d, J=18 Hz]	I, 3,47
(2Η, s),	3,44-3,35	(2H,	m) ,	3,09 (1H, d, J=ll Hz) , 2,	99-2,91
(1Η, m),	2,59-2,42	(2H,	m) ,	2,37-2,24 (2H, m), 1,86-1,'	72 (2H,
m), 1,58-	1,42 (2H, m	) ·

<Stupeň 7>

Príprava 1,4-diaza-4-benzyloxykarbonyl-6-(hydroxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidín]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 6 (100 mg) a 1,8-bis(N,N-dimetylamino)naftalénu (9,2 mg) v 1,2-dichlóretáne (3 ml) sa pridá za chladenia 1-chlóretylchlórformiát (58 μΐ) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu. Potom sa pridá k reakčnej zmesi metanol (3 ml) a zmes sa zahrieva za miešania pri teplote okolia 70°C. Reakčná zmes sa ochladí a koncentruje sa. K zvyšku sa pridá IN kyselina chlorovodíková a benzoylchlorid sa extrahuje dietyléterom. Dietyléterová vrstva sa ďalej extrahuje IN kyselinou chlorovodíkovou a spojí sa so skôr uvedenou vodnou vrstvou. Potom sa upraví pH vodnej vrstvy na 9 pomocou uhličitanu sodného za chladenia ľadom a extrahuje sa metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent; metylénchlorid : metanolu = 50 : 1 - 25:1) a kvantitatívne sa získa zlúčenina uvedená v názve.

NMR	spektrum (	:*DMSO-d₆, 100°C )	δ ppm: 7,38-7,26	(5H,	m) ,	5, 11
(2H,	s), 4,69	(1H, široký	s) ,	4,30	(1H,	d,	J=13	Hz) ,	4,18	(1H,
d, J	=18 Hz), 4	,12 (1H, d,	J=ll	Hz) ,	3,81	(1H	, d,	J=18	Hz) ,	3, 40
(2H,	s), 3,06	(1H, d, J=ll	Hz) ,	2, 94	(1H,	d,	J=13	Hz) ,	3,02-	-2,74

(2H, m), 2,62-2,50 (2Η, m), 1,72-1,66 (2Η, m), 1,44-1,36 (2Η,

199

m) .

<Stupeň 8>

Príprava 1,4-diaza-6-(hydroxymetyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 7 (4,5 mg) v metanole (1 ml) sa pridá 10% paládium na aktívnom uhlí (2 mg) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 2 hodiny pod atmosférou vodíka. Reakčná zmes sa filtruje cez Celit a premyje sa metanolom. Filtrát sa koncentruje a kvantitatívne sa získa zlúčenina uvedená v názve.

NMR	spektrum	(*CDC1₃) δ ppm:	4,42	(1H,	d,	J=12	Hz) ,	3,77-3,58
(4H,	m), 3,50	(1H, d, J=18 Hz)	,. 3,05	(1H, d,	J=12	Hz) ,	3,10-2,94
(2H,	m), 2,82	-2,70 (2H, m) ,	2,67	(1H,	d,	J=12	HZ) ,	1,90-1,46

(4H, m).

Referenčný príklad 2 <Stupeň 1>

Príprava 1, 4-diaza-l'-benzyl-6- (hydroxymetyl) -7-oxaspiro [bicyklo-[4 . 3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v referenčnom príklade 1 <stupeň 6> (25,0 mg) v acetonitrile (1 ml) sa pridá za chladenia ľadom trimetylsilánjodid (20 μΐ) . Zmes sa mieša za chladenia ľadom 30 minút a potom pri teplote miestnosti 3 dni. Ďalej sa pridá trimetylsiiánjodid (0,2 ml) a zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. K reakčnej zmesi sa pridá za chladenia ľadom IN kyselina chlorovodíková a benzyljodid sa extrahuje dietyléterom. Organická vrstva sa extrahuje IN kyselinou chlorovodíkovou a spojí sa s predchádzajúcou vodnou vrstvou. Po úprave pH na 9

200 pomocou uhličitanu sodného sa vodná vrstva koncentruje. K vzniknutému zvyšku sa pridá metylénchlorid a nerozpustný materiál sa odstráni filtráciou a filtrát sa premyje s metylénchloridom a koncentráciou sa získa zlúčenina uvedená v názve (18,3 mg).

NMR spektrum (CDC1₃) δ ppm: 7,36-7,22 (5H, m), 4,37 (1H, d, J=12 Hz), 3,76-3,42 (5H, m), 3,51 (2H, s), 3,05 (1H, d,J=12 Hz), 2,70-2,48 (3H, m), 2,46-2,29 (2H, m), 1,94-1,73 (2H, m), 1,70-1,50 (2H, m).

<Stupeň 2>

Príprava 1,4-diaza-ľ-tenzyl-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(hydroxymetyl)-7-cxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 1 (13,5 mg) a trietylamínu (9 μΐ) v metylénchloride (0,5 ml) sa pridá za chladenia ľadom 6-chlórnaftalén-2-sulfonylchlorid (12 mg) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti 5 dní. Po pridaní vody za chladenia ľadom sa zmes extrahuje s metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom ohloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čisti preparatívnou chromatografiou na tenkej vrstve (vyvijacie činidlo; metylénchlorid : metanolu = 20:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (2,8 mg).

Referenčný príklad 3 <Stupeň 1>

Príprava etyl-2-[(benzyloxykarbonyl) (2,2-dietoxyetyl)amino]acetátu

K dietylacetalu aminoacetaldehydu (43,6 ml) sa pridá po kvapkách a za chladenia ľadom etylbrómacetát (34,5 ml) a potom

201 sa pridá N, N-dimetylformamid (150 ml), uhličitan cézny (97,7 g) a jodid sodný (4,5 g). Zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa naleje do ľadovej vody, pH sa upraví na 1 pomocou kyseliny chlorovodíkovej a extrahuje sa etylacetátom. Potom sa upraví pH vodnej vrstvy na 10 pomocou uhličitanu sodného a extrahuje sa metylénchloridom. Potom sa organická vrstva suší nad bezvodým síranom sodným. Rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa rozpustí v metylénchloride (200 ml) a pridá sa trietylamín (16,1 ml). Potom sa po kvapkách pridá v priebehu 30 minút a za chladenia ľadom roztok benzylchlórformiátu (16,5 ml) v metylénchloride (20 ml). Reakčná zmes sa mieša za chladenia ľadom 30 minút a potom pri teplote miestnosti 1 hodinu a extrahuje sa IN kyselinou chlorovodíkovou. Organická vrstva sa premyje nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným a rozpúšťadlo sa oddestiluje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; n-hexán : dietyléteru = 2:1 - 1:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (28,9 g).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 7,42-7,25 (5H, m), 5,24-5,08 (2H, m), 4,62-4, 44 (1H, m), 4,23-4,07 (4H, m), 3,78-3,36 (6H, m), 1,30-1,11 (9H, m).

<Stupeň 2>

Príprava etyl-2-[(benzyloxykarbonyl)(formylmetyl)amino]acetátu

Po pridaní vody (60 ml) k roztoku zlúčeniny získanej v stupni 1 (14,1 g) v chloroforme (120 ml), sa pridá po kvapkách, v priebehu 2 hodín a za chladenia ľadom kyselina trifluóroctová (153 ml). Zmes sa mieša za chladenia ľadom 1 hodinu a pri teplote miestnosti 1,5 hodiny. Po pridaní vody k reakčnej zmesi a extrakcii s metylénchloridom sa organická vrstva premyje s vodným roztokom 10% uhličitanu draselného, vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným.

202

Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a ziska sa zlúčenina uvedená v názve (10,3 g).

NMR spektrum (*CDC1₃) δ ppm: 9,70-9,56 (1H, m), 7,40-7,26 (5H,

m), 5,23-5,11 (2H, m), 4,25-4,01 (6H, m), 1,32-1,18 (3H, m).

<Stupeň 3>

Príprava 2-[[(3,8-diaza-8-benzyl-l-oxaspiro[4.3.0]dekan-2-yl)metyl] (benzyloxykarbonyl)amino]octovéj kyseliny

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 2 (1,35 g) v metanole (25 ml) sa pridá za chladenia ľadom roztok monohydrátu hydroxidu lítneho (0,24 g) vo vode (10 ml). Zmes sa mieša za chladenia ľadom 10 minút a potom pri teplote miestnosti 40 minút. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a k vzniknutému zvyšku sa pridá voda a potom etylacetát. Potom sa upraví pH vodnej vrstvy na 2 pomocou 6N kyseliny chlorovodíkovej a zmes sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa premyje vodou a nasýteným roztokom chloridu sodného a suší sa nad bezvodým síranom sodným. Potom sa oddestiluje rozpúšťadlo za zníženého tlaku a získa sa zlúčenina. K roztoku tejto zlúčeniny (1,21 g) v metylénchloride (40 ml) sa pridá toluén (40 ml), 4-(aminometyl)-l-benzyl-4-hydroxypiperidín (1,06 g) a síran horečnatý (2,90 g) a zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Reakčná zmes sa filtruje a filtrát sa koncentruje za zníženého tlaku. Vzniknutý zvyšok sa nechá stuhnúť pridaním dietyléteru a potom sa pevná látka odoberie filtráciou a sušením vo vákuu sa získa zlúčenina uvedená v názve (2,05 g).

NMR spektrum ('DMSO-dg, 100°C ) δ ppm: 7,39-7,15 (10H, m), 5,15-4,98 (2H, m), 4,62-4,57 (1H, m), 4,13-3,91 (2H, m), 3,67-3,25 (4H, m), 2,88-2,60 (2H, m), 2,56-2,26 (4H, m), 1, 65-1, 33 (4H,

m) .

203 <Stupeň 4>

Príprava 1, 4-diaza-l'-benzyl-4-(benzyloxykarbonyl)-7-oxaspiro[bicyklo [4 . 3.0] nonán-8 , 4'-piperidin] -2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 3 (1,61 g) v metylénchloride (30 ml) sa pridá za chladenia ľadom dicyklohexylkarbodiimid (0,81 g). Zmes sa mieša 30 minút za chladenia ľadom a cez noc pri teplote miestnosti. Potom sa nerozpustný materiál odstráni filtráciou. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chromatografiou na silikagéli (eluent; etylacetát : metanolu =9:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0,63 g).

NMR	spektrum (	DMSO-dg,	100°C ) δ	ppm: 7,40-7,15	(10H,	m) ,	5, 12
(2H,	s) , 5,00	(1H, dd,	J=4,9 Hz) ,	4,35-4,27 (1H,	m) ,	4,21	(1H,
d, J	=18 Hz), 3,	76 (1H,	d, J=18 Hz)	, 3,70 (1H, d,	J=ll	Hz) ,	3,48
(2H,	s), 3,10	(1H, d,	J=ll Hz),	3,00-2,88 (1H,	m) ,	2,57	-2,32
(4H,	m), 1,84-1	,55 (4H,	m) .

<Stupeň 5>

Príprava l,4-diaza-4-(benzyloxykarbonyl)-7-oxaspiro[bicyklo [4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin-2-ónu

Opakuje sa postup referenčného príkladu 1 cstupeň 7> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 4 (1,00 g) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (0,57 g).

NMR spektrum (*DMSO-dg, 100°C ) δ ppm: 7,38-7,27 (5H, m), 5,12 (2H, s), 5,01 (1H, dd, J=4,9 Hz), 4,36-4,27 (1H, m), 4,26-4,17 (1H, m), 3,81-3,65 (2H, m), 3,12-3,06 (1H, m), 2,98-2,74 (3H,

m), 2, 64-2,54 (2H, m), 1,67-1,60 (2H, m), 1,55-1,47 (2H, m).

<Stupeň 6>

204

Príprava 1,4-diaza-4-(benzyloxykarbonyl)-7-oxa-ľ-(4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin-2-ónu

K roztoku zlúčeniny získanej v stupni 5 (0,1 g) a 4-chlórpyridinu (0,33 g) v etanole (2,9 ml) sa pridá N-etyldiizopropylamín (56 μΐ) . Zmes sa zahrieva za miešania v utesnenej skúmavke na 150 až 160°C. Reakčná zmes sa koncentruje za zníženého tlaku a zvyšok sa čistí stĺpcovou chrómatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent; etylacetát : metanolu = 98:2 - 95:5). Frakcie obsahujúce zlúčeninu sa koncentrujú za zníženého tlaku a kryštalizujú zo zmesi n-hexánu a dietyléteru. Kryštály sa odoberú filtráciou a sušením na vzduchu sa získa zlúčenina uvedená v názve (60 mg).

NMR spektrum (	XMSO-d_e, 100°C ) δ ppm:	8,13	(2H,	dd, J=2, 5	Hz) ,
7,40-7,25	(5H,	m), 6,76 (2H, dd, J=2,5	Hz) ,	5, 13	(2H, s),	5, 07
(1H, dd,	J=4, 9	Hz), 4,38-4,28 (1H, m),	4,23	(1H,	, d, J=18	Hz) ,
3,84-3, 73	(2H,	m) , 3,52-3,23 (4H, m) ,	3, 17	(1H,	. d, J=ll	Hz) ,
3,04-2,92	(1H,	m) , 1, 90-1,60 (4H, m) .

<Stupeň 7>

Príprava 1, 4-diaza-7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup referenčného príkladu 1 <stupeň 8> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 6. K roztoku tejto zlúčeniny (100 mg) v metanole (2,4 ml) sa pridá 10% paládium na uhlí (20 mg) . Zmes sa mieša pri teplote miestnosti 1 hodinu pod atmosférou vodíka a potom sa reakčná zmes filtruje. Filtrát sa koncentruje za zníženého tlaku a vzniknutý zvyšok sa čistí stĺpcovou chrómatografiou na silikagéli [ChromatorexNH™] (eluent; etylacetát : metanolu =9:1) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (60 mg).

205

NMR	spektrum	(*CDC1₃) δ ppm: 8,31-8,22	(2H,	m) ,	6,72-6,63	(2H,
m) ,	5,00 (1H,	dd,	J=4,8 Hz) , 3,96-3,88	(1H,	m) ,	3,65-3,28	(7H,
m) ,	3,19-3,10	(1H,	m) , 2,66 (1H, dd, J=	^:8, 13	Hz) ,	2,00-1,55	(4H,

m) .

Referenčný príklad 4 <Stupeň 1>

Príprava 1, 4-diaza-l'-benzyl-7-oxaspiro [bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin-2-ónu

Opakuje sa postup referenčného príkladu 2 <stupeň 1> s použitím zlúčeniny získanej v referenčnom, príklade 3 <stupeň 4> (50 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (15 mg).

NMR spektrum ( CDC1₃) δ	ppm:	7,40	-7,25	(5H,	m) ,	4, 94	(1H, dd,
J=4,8 Hz) , 3,83 (1H, d,	J=ll	Hz) ,	3, 62	-3, 37	(5H,	m) ,	3,14 (1H,
d, J=ll Hz) , 2, 62 (1H,	dd, J=	8, 13	Hz) ,	2, 65-	2, 35	(4H,	m), 1,95-

-1,53 (4H, m).

<Stupeň 2>

Príprava 1,4-diaza-l'-benzyl-4-( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup referenčného príkladu 2 <stupeň 2> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 1 (10,0 mg) a v kvantitatívnom výťažku sa získa zlúčenina uvedená v názve.

<Stupeň 3>

Opakuje sa postup referenčného príkladu 1 <stupeň A-l> s použitím zlúčeniny získanej v stupni 1 (10,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (22 mg).

206

Referenčný príklad 5

Príprava 1,4-diaza-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ónu

Opakuje sa postup referenčného príkladu 1 <stupeň 8> s použitím zlúčeniny získanej v referenčnom príklade 3 <stupeň 5> (10,0 mg) a získa sa zlúčenina uvedená v názve (6,0 mg).

NMR spektrum ( CDC1₃) δ ppm: 4,97 (IH, dd, J=4,8 Hz), 3,87 (IH, d, J=12 Hz), 3,59 (IH, d, J=18 Hz), 3,51-3,38 (2H, m), 3,15 (IH, d, J=12 Hz), 3,15-2,97 (2H, m), 2,94-2,77 (2H, m), 2,63 (IH, dd, J=8,13 Hz),1,88-1,63 (4H, m).

Štruktúry zlúčenín podlá predloženého vynálezu získané v príkladoch uvedených skôr sú uvedené na obrázkoch 1 až 9.

Syntetické postupy prípravy zlúčenín podlá predloženého vynálezu sú uvedené na obrázkoch 11 až 20.

Dáta spektier NMR zlúčenín týchto príkladov sú uvedené na obrázkoch 21 až 32.

Zlúčeniny uvedené ďalej sa pripravia rovnakým spôsobom ako zlúčeniny v príkladoch.

207

055

Q55

057

Q58

059

N.

208

Pr. ^c·	Y	D	T
83	Y1	Dl	TI
84	Y1	Dl	TI
85	Y1	D1	TI
86	Y1	D1	T1
87	Yl	D1	TI
88	Y1	D1	T1
89	Y1	Dl	T1
90	Y1	Dl	T1
91	Y1	D1	TI
92	Y1	DT	TI
93	Yl	D1	T1
94	Yl	D1	T1
95	Y1	D1	TI
96	Y1	D1	TI
97	Y1	Dl	T1
98	Y1	D1	T1
99	Yl	D1	TI
100	Yl	D1	T1
101	Yl	D1	TI
102	Y1	D1	T1
103	Y1	D1	T1
104	Y1	D1	T1
105	Y1	Dl	TI
106	Y1	D1	TI
107	Y1	D1	TI
108	Yl	D1	TI
109	Y1	D1	TI
110	Yl	D1	T1
111	Y1	D1	T1
112	Y1	Dl	T1
113	Y1	D1	TI
114	Yl	D1	TI
115	Yl	D1	TI
116	Y1	D1	TI
117	Yl	D1	T1
118	Yl	D1	TI
119	Y1	D1	T1
120	Y1	D1	T1
121	Yl	D1	T1
122	Y1	Dl	TI
123	Y1	Dl	TI
124	Y1	Dl	TI
125	Yl	D1	T1
126	Y1	D1	TI
127	Y1	D1	T1
128	Y1	D1	T1
129	Y1	Dl	T1
130	Yl	D1	TI
131	Y1	D1	TI
132	Y1	D1	T1

OOOOOOOOOOOOOOOOOO0OOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOOr>or><r><n<r»<r><mď->

» —· —. . —» —* —* —> —

O<£>oo~jcncn4xcoro—‘O<ooo~jcn<_n4xcjro—·θ(θωχΐσ>ίη^ωΜ-‘Otoco-Jmui^CJM-.Qioat'^mcnjxuN209

Pr. c.	Y	D	T	Q
133	Y1	D1	TI	Q51
134	Y1	D1	TI	Q52
135	Y1	D1	TI	Q53
136	Y1	D1	TI	Q 54
137	Y1	D1	TI	Q55
138	Y1	D1	TI	Q56
139	Y1	D1	T1	Q57
140	Y1	D1	T1	Q58
141	Y1	D1	TI	Q59
142	Y1	D2	T1	Q1
143	Y1	D2	T1	Q2
144	Y1	D2	T1	Q3
145	Y1	D2	T1	Q4
146	Y1	D2	T1	Q5
147	Y1	D2	T1	Q6
148	Y1	D2	T1	Q7
149	Y1	D2	TI	Q8
150	Y1	D2	TI	Q9
151	Y1	D2	. TI	Q10
152	Y1	D2	T1	G11
153	Y1	D2	T1	G12
154	Y1	D2	TT	G13
155	Y1	D2	T1	Q14
156	Y1	D2	TI	G15
157	Y1	D2	T1	G16
158	Y1	D2	T1	Q17
159	Y1	D2	T1	Q18
160	Y1	D2	T1	G19
161	Y1	D2	T1	G20
162	Y1	D2	T1	G21
163	Y1	D2	T1	Q 22
164	Y1	D2	TI	G23
165	Y1	D2	T1	G 24
166	Y1	D2	TI	G 25
167	Y1	D2	TI	G26
168	Y1	D2	T1	G27
169	Y1	D2	TI	G28
170	Y1	D2	T1	G29
171	Y1	D2	TI	Q30
172	Y1	D2	T1	G31
173	Y1	D2	T1	Q32
174	Y1	D2	TI	G33
175	Y1	D2	T1	G34
176	Y1	D2	T1	G35
177	Y1	D2	TI	G36
178	Y1	D2	TI	Q37
179	Y1	D2	T1	Q38
180	Y1	D2	TI	Q39
181	Y1	D2	T1	G40
182	Y1	D2	T1	G41

210

Pr. c..	Y	D	T	0
183	Y1	D2	TI	Q42
184	Y1	D2	T1	Q43
185	Y1	D2	TI	Q44
186	Y1	D2	TI	Q45
187	Y1	D2	TI	Q46
188	Y1	D2	T1	Q47
189	Y1	D2	T1	Q48
190	Y1	D2	T1	Q49
191	Y1	D2	T1	Q50
192	Y1	D2	T1	Q51
193	Y1 .	D2	T1	Q52
194	Y1	D2	T1	Q53
195	Y1	D2	TI	Q54
196	Y1	D2	T1	Q55
197	Y1	D2	TI	Q56
198	Y1	D2	T1	Q57
199	Y1	D2	T1	Q58
200	Y1	D2	TI	Q59
201	Y1	D3	T1	Q1
202	Y1	D3	TI	Q2
203	Y1	D3	T1	Q3
204	Y1	D3	T1	Q4
205	Y1	D3	T1	Q5
206	Y1	D3	T1	Q6
207	Y1	D3	T1	Q7
208	Y1	D3	T1	Q8
209	Y1	D3	T1	Q9
210	Y1	D3	TI	Q10
211	Y1	D3	T1	Q11
212	Y1	D3	T1	Q12
213	Y1	D3	T1	Q13
214	Y1	D3	TI	Q14
215	Y1	D3	TI	Q15
216	Y1	D3	TI	Q16
217	Y1	D3	T1	Q17
218	Y1	D3	TI	Q18
219	Y1	D3	T1	Q19
220	Y1	D3	T1	Q20
221	Y1	D3	T1	Q21
222	Y1	D3	T1	Q22
223	Y1	D3	T1	Q23
224	Y1	D3	T1	Q24
225	Y1	D3	TI	Q25
226	Y1	D3	T1	Q26
227	Y1	D3	T1	Q27
228	Y1	D3	T1	Q28
229	Y1	D3	TI	Q29
230	Y1	D3	TI	Q30
231	Y1	D3	T1	Q31
232	Y1	D3	T2	Q1

211

Pŕ. č.	Y	D	T	0
233	Yl	D3	T2	Q2
234	Y1	D3	T2	03
235	Y1	D3	T2	Q4
236	Y1	D3	T2	Q5
237	• Y1	D3	T2	Q6
238	Y1	D3	T2	Q7
239	Y1	D3	T2	Q8
240	Y1	D3	T2	Q9
241	Y1	D3	T2	Q10
242	Yl	D3	T2	Q11
243	Yl	D3	T2	Q12
244	Y1	D3	T2	Q13
245	Y1	D3	T2	Q14
246	Y1	D3	T2	Q15
247	Y1	D3	T2	Q16
248	Yl	D3	T2	Q17
249	Y1	D3	T2	018
250	Y1	D3	T2	Q19
251	Y1	D3	T2	020
252	Y1	D3	T2	021
253	Y1	D3	T2	Q22
254	Y1	D3	T2	Q23
255	Y1	D3	T2	Q24
256	Y1	D3	T2	Q25
257	Y1	03	T2	Q26
258	Yl	D3	T2	Q27
259	Y1	D3	T2	Q28
260	Y1	D3	T2	Q29
261	Y1	D3	T2	Q30
262	Yl	D3	T2	Q3]
263	Y2	D3	T1	Q1
264	Y2	D3	TI	Q2
265	Y2	D3	T1	Q3
266	Y2	D3	T1	04
267	Y2	D3	T1	Q5
268	Y2	D3	T1	Q6
269	Y2	D3	T1	Q7
270	Y2	D3	T1	08
271	Y2	D3	T1	Q9
272	Y2	D3	T1	Q10
273	Y2	D3	T1	Q11
274	Y2	D3	T1	Q12
275	Y2	D3	T1	013
276	Y2	D3	T1	Q14
277	Y2	D3	T1	Q15
278	Y2	D3	T1	Q16
279	Y2	D3	TI	Q17
280	Y2	D3	TI	Q18
281	Y2	D3	TI	Q19
282	Y2	D3	TI	Q20

212

213

Pr. c.	Y	D	T	0
333	Y3	D3	TI	Q9
334	Y3	D3	T1	Q10
335	Y3	D3	• TI	Q11
336	Y3	D3	T1	Q12
337	Y3	D3	T1	Q13
338	Y3	D3	T1	Q14
339	Y3	D3	T1	Q15
340	Y3	D3	T1	Q16
341	Y3	D3	T1	Q17
342	Y3	D3	T1	Q18
343	Y3	D3	T1	Q19
344	Y3	D3	T1	Q20
345	Y3	D3	T1	Q21
346	Y3	D3	T1	Q22
347	Y3	D3	TI	Q23
348	Y3	D3	T1	Q24
349	Y3	D3	TI	Q25
350	Y3	D3	T1	026
351	Y3	D3	TI	Q27
352	Y3	D3	T1	Q28
353	Y3	D3 '	TI	Q29
354	Y3	D3	TI	Q30
355	Y3	D3	T1	Q31
356	Y3	D3	T2	Q1
357	Y3	D3	T2	Q2
358	Y3	D3	T2	Q3
359	Y3	D3	T2	04
360	Y3	D3	T2	05 .
361	Y3	D3	T2	06
362	Y3	D3	. T2	07
363	Y3	D3	T2	08
364	Y3	D3	T2	Q9
365	Y3	D3	T2	Q10
366	Y3	D3	T2	Q11
367	Y3	D3	T2	Q12
368	Y3	D3	T2	Q13
369	Y3	D3	T2	Q14
370	Y3	D3	T2	Q15
371	Y3	D3	T2	016
372	Y3	D3	T2	Q17
373	Y3	D3	T2	Q18
374	Y3	D3	T2	Q19
375	Y3	D3	T2	Q20
376	Y3	D3	T2	Q21
377	Y3	D3	T2	Q22
378	Y3	D3	T2	Q23
379	Y3	D3	T2	Q24
380	Y3	D3	T2	Q25
3S1	Y3	D3	T2	026
382	Y3	D3	T2	Q27

T Q

214

Pr. r. .	Y	D
383	Y3	D3
384	Y3	D3
385	Y3	D3
386	Y3	D3
387	Y1	D4
388	Y1	D4
389	Y1	D4
390	Y1	D4
391	Y1	D4
392	Y1	D4
393	Y1	D4
394	Y1	D4
395	Y1	D4
396	Y1	D4
397	Y1	D4
398	Y1	D4
399	Y1	D4
400	Y1	D4
401	Y1	D4
402	Y1	D4
403	Y1	D4
404	Y1	D4
405	Y1	D4
406	Y1	D4
407	Y1	D4
408	Y1	D4
409	Y1	D4
410	Y1	D4
411	Y1	D4
412	Y1	D4
413	Y1	D4
414	Y1	D4
415	Y1	D4
416	Y1	D4
417	Y1	D4
418	Y1	D4
419	Y1	D4
420	Y1	D4
421	Y1	D4
422	Y1	D4
423	Y1	D4
424	Y1	D4
425	Y1	D4
426	Y1	D4
427	Y1	D4
428	Y1	D4
429	Y1	D4
430	Y1	D4
431	Y1	D4
432	Y1	D4

T2	Q28
T2	Q29
T2	Q30
T2	Q31
T1	Q1
T1	Q2
T1	Q3
T1	Q4
T1	Q5
T1	Q6
T1	Q7
T1	Q8
T1	Q9
T1	Q10
T1	Q11
T1	Q12
T1	Q13
T1	Q14
TI	Q15
T1	Q16
T1	Q17
T1 .	Q18
T1	Q19
T1	Q20
T1	021
T1	Q22
T1	Q23
T1	Q24
T1	025
T1	Q26
T1	027
T1	Q28
T1	Q29
T1	Q30
T1	Q31
T2	Q1
T2	Q2
T2	Q3
T2	Q4
T2	05
T2	06
T2	Q7
T2	Q8
T2	Q9
T2	Q10
T2	Q11
T2	Q12
T2	Q13
T2	Q14
T2	Q15

215

Pr. c.	—Ϋ---	D	T	0
433	Y1	D4	T2	Q16
434	Y1	D4	T2	Q17
435	Y1	D4	T2	Q18
436	Y1	D4	T2	019
437	Y1	D4	T2	020
438	Y1	D4	T2	Q21
439	Y1	D4	T2	022
440	Y1	D4	T2	Q23
441	Y1	D4	T2	Q24
442	Y1	D4	T2	Q25
443	Y1	D4	T2	Q26
444	Y1	D4	T2	Q27
445	Y1	D4	T2	Q28
446	Y1	D4	T2	Q29
447	Y1	D4	T2	Q30
448	Y1	D4	T2	Q31
449	Y2	D4	TI	Q1
450	Y2	D4	TI	Q2
451	Y2	D4	TI	03
452	Y2	D4	TI	Q4
453	Y2	D4	TI	Q5
454	Y2	D4	TI	Q6
455	Y2	D4	T1	Q7
456	Y2	D4	TI	08
457	Y2	D4	T1	Q9
458	Y2	D4	T1	Q10
459	Y2	D4	T1	Q11
460	Y2	D4	T1	Q12
461	Y2	D4	T1	Q13
462	Y2	D4	TI	Q14
463	Y2	D4	T1	Q15
464	Y2	D4	TI	Q16
465	Y2	D4	T1	Q17
466	Y2	D4	TI	Q18
467	Y2	D4	T1	019
468	Y2	D4	T1	020
469	Y2	D4	TI	Q21
470	Y2	D4	TI	Q22
471	Y2	D4	TI	Q23
472	Y2	D4	T1	Q24
473	Y2	D4	T1	Q25
474	Y2	D4	TI	Q26
475	Y2	D4	T1	Q27
476	Y2	D4	T1	Q28
477	Y2	D4	T1	Q29
478	Y2	D4	TI	Q30
479	Y2	D4	T1	Q31
480	Y2	D4	T2	Q1
481	Y2	D4	T2	02
482	Y2	D4	T2	Q3

216

2JL7

Έγ, c.	Y	D	Τ	Q
533	Y3	D4	Τ1	Q23
534	Y3	D4	Τ1	Q24
535	Υ3	D4	τι	Q25
536	Υ3	D4	Τ1	Q26
537	Υ3	D4	Τ1	Q27
538	Υ3	D4	Τ1	Q28
539	Υ3	D4	Τ1	Q29
540	Υ3	D4	τι	Q30
541	Υ3	D4	Τ1	Q31
542	Υ3	D4	Τ2	Q1
543	Υ3	. D4	Τ2	Q2
544	Υ3	D4	Τ2	03
545	Υ3	D4	Τ2	Q4
546	Υ3	D4	Τ2	Q5
547	Υ3	D4	Τ2	Q6
548	Υ3	D4	Τ2	Q7
549	Υ3	D4	Τ2	08
550	Υ3	D4	Τ2	Q9
551	Υ3	D4	Τ2	Q10
552	Υ3	D4	Τ2	Q11
553	Υ3	D4	Τ2	Q.12
554	Υ3	D4	Τ2	Q13
555 ’	Υ3	D4	Τ2	Q14
556	Υ3	D4	Τ2	Q15
557	Υ3	D4	Τ2	Q16
558	Υ3	D4	Τ2	Q17
559	Υ3	D4	Τ2	Q18
560	Υ3	D4	Τ2	Q19
561	Υ3	D4	Τ2	Q20
562	Υ3	D4	Τ2	Q21
563	Υ3	D4	Τ2	Q22
564	Υ3	D4	Τ2	Q23
565	Υ3	D4	Τ2	Q24
566	Υ3	D4	Τ2	Q25
567	Υ3	D4	Τ2	Q26
568	Υ3	D4	Τ2	Q27
569	Υ3	D4	Τ2	Q28
570	Υ3	D4	Τ2	Q29
571	Υ3	D4	Τ2	Q30
572	Υ3	D4	Τ2	Q31
573	Υ1	D3	ΤΙ	Q32
574	Υ1	D3	Τ1	Q33
575	Υ1	D3	Τ1	Q34
576	Υ1	D3	τι	Q35
577	Υ1	D3	τι	036
578	Υ1	D3	Τ1	Q37
579	Υ1	D3	τι	038
580	Υ1	D3	τι	039
581	Υ1	D3	Τ1	Q40
582	Υ1	D3	Τ1	Q41

218

Pr. č..	I Y	D	T	Q
583	Y1	D3	TI	Q42
584	Y1	D3	T1	Q43
585	Y1	D3	T1	Q44
586	Y1	D3	TI	Q45
587	Y1	D3	T1	Q46
588	Y1	D3	T1	Q47
589 '	Y1	D3	T1	Q48
590	Y1	D3	T1	Q49
591	Y1	D3	T1	Q50
592	Y1	D3	T1	Q51
593	Y1	D3	T1	Q52
594	Y1	D3	TI	053
595	Y1	D3	T1	Q54
596	Y1	D3	T1	Q55
597	Y1	D3	TI	Q56
598	Y1	D3	T1	057
599	Y1	D3	T1	058
600	Y1	D3	T1	Q59
601	Y2	D3	T1	Q32
602	Y2	D3	TI	Q33
603	Y2	D3	T1	Q34
. 604	Y2	D3	T1	Q35
605	Y2	D3	T1	Q36
606	Y2	D3	TI	Q37
607	Y2	D3	TI	Q38
608	Y2	D3	TI	Q39
609	Y2	D3	TI	Q40
610	Y2	D3	T1	Q41
611	Y2	D3	T1	042
612	Y2	D3	TI	Q43
613	Y2	D3	T1	Q44
614	Y2	D3	T1	Q45
615	Y2	D3	TI	Q46
616	Y2	D3	T1	Q47
617	Y2	D3	TI	Q48
618	Y2	D3	T1	Q49
619	Y2	D3	TI	050
620	Y2	D3	T1	051
621	Y2	D3	T1	Q52
622	Y2	D3	TI	Q53
623	Y2	D3	T1	054
624	Y2	D3	TI	Q55
625	Y2	D3	T1	056
626	Y2	D3	T1	Q57
627	Y2	D3	T1	058
628	Y2	D3	T1	Q59
629	Y3	D3	T1	032
630	Y3	D3	T1	033
631	Y3	D3	TI	034
632	Y3	D3	T1	035

219

Pr. c.	Y	D	T	Q
633	Y3	D3	TI	036
634	Y3	D3	T1	Q37
635	Y3	D3	T1	Q38
636	Y3	D3	T1	Q39
637	Y3	D3	T1	Q40
638	Y3	D3	T1	Q41
639	Y3	D3	T1	Q42
640	Y3	D3	T1	Q43
641	Y3	D3	T1	Q44
642	Y3	D3	T1	Q45
643	Y3	D3	T1	Q46
644	Y3	D3	TI	Q47
645	Y3	D3	T1	Q48
646	Y3	D3	T1	Q49
647	Y3	D3	T1	Q50
648	Y3	D3	T1	Q51
649	Y3	D3	T1	Q52
650	Y3	D3	T1	053
651	Y3	D3	T1	Q54
652	Y3	D3	T1	Q55
653	Y3	D3	TI	Q56
654	Y3	D3	T1	057
' 655	Y3	D3	T1	058
656	Y3	D3	T1	Q59
657	Yl	D4	T1	Q32
658	Y1	D4	T1	Q33
659	Y1	D4	T1	Q34
660	Y1	D4	T1	Q35
661	Y1	D4	T1	Q36
662	Yl	D4	T1	Q37
663	Yl	D4	T1	Q38
664	Y1	D4	T1	Q39
665	Y1	D4	T1	Q40
666	Y1	D4	T1	041
667	Yl	D4	T1	Q42
668	Y1	D4	T1	043
669	Y1	' D4	T1	Q44
670	Y1	D4	TI	045
671	Y1	D4	T1	Q46
672	Yl	D4	T1	Q47
673	Y1	D4	T1	Q48
674	Y1	D4	T1	049
675	Y1	D4	T1	Q50
676	Y1	D4	TI	Q51
677	Y1	D4	T1	Q52
678	Y1	D4	TI	Q53
679	Yl	D4	TI	Q54
680	Y1	D4	T1	Q55
681	Y1	D4	T1	Q56
682	Y1	D4	T1	Q57

220’

Pr. c.	í Y	D	T	Q
683	Y1	D4	TI	Q58
684	Y1	D4	T1	Q59
685	Y2	D4	T1	Q32
686	Y2	D4	TI	Q33
687	Y2	D4	T1	Q34
688	Y2	D4	T1	Q35
689	Y2	D4	T1	Q36
690	Y2	D4	T1	Q37
691	Y2	D4	T1	038
692	Y2	D4	T1	Q39
693	Y2	D4	T1	Q40
694	Y2	D4	T1	Q41
695	Y2	D4	T1	Q42
696	Y2	D4	TI	Q43
697	Y2	D4	T1	Q44
698	Y2	D4	T1	Q45
699	Y2	D4	T1	046
700	Y2	D4	TI	047
701	Y2	D4	T1	Q48
702	Y2	D4	T1	Q49
703	' Y2	D4	T1	Q 50
704	Y2	D4	TI	Q51
705	Y2	D4	T1	052
706	Y2	D4	T1	Q53
707	Y2	D4	T1	Q 54
708	Y2	D4	T1	Q55
709	Y2	D4	T1	Q56
710	Y2	D4	T1	057
711	Y2	D4	T1	Q58
712	Y2	D4	T1	Q59
713	Y3	D4	TI	Q32
714	Y3	D4	TI	Q33
715	Y3	D4	T1	034
716	Y3	D4	T1	035
717	Y3	D4	T1	Q36
718	Y3	D4	TI	Q37
719	Y3	D4	T1	Q38
720	Y3	D4	T1	Q39
721	Y3	D4	T1	Q40
722	Y3	D4	TI	Q41
723	Y3	D4	T1	Q42
724	Y3	D4	TI	Q43
725	Y3	D4	T1	Q44
726	Y3	D4	TI	045
727	Y3	D4	TI	Q46
728	Y3	D4	T1	047
729	Y3	D4	T1	Q48
730	Y3	D4	T1	Q49
731	Y3	D4	T1	Q50
732	Y3	D4	T1	051

221

Pr. č.	Y	D	T	Q
733	Y3	D4	TI	Q52
734	Y3	D4	TI	Q53
735	Y3	D4	TI	Q54
736	Y3	D4	TI	Q55
737	Y3	D4	TI	Q56
738	Y3	D4	TI	Q57
739	Y3	,D4	TI	Q58
740	Y3	D4	TI	Q59

Príklady rôntgenovej kryštalografie

A. Róntgenová kryštalografia FXa a (-) optického izoméru príkladu 1 podľa predloženého vynálezu (ďalej uvádzané ako zlúčenina A) (A-l) Čistenie a kryštalografia ľudského FXa z ktorého sa odstránila doména Gla (ďalej uvádzané ako Des-Gla-FXa)

Čistená vzorka ľudského FXa sa získa od Enzýme Research Laboratories, Inc. a vzorka sa vylúhuje s proteázou v súlade s postupom, ktorý je opísaný v J. Biol. Chem., 271, 16614-16620 (1996) na odstránenie domény Gla (1-44 (chymotrypsín č.)). Des-Gla-FXa sa čistí s použitím Mono-P (Ámersham Pharmacia Biotech Inc.) a kryštalizácia sa uskutoční visiacou kvapkovou parnou difúznou metódou.

Dobré kryštály sa získajú, ak sa parná difúzia kvapiek získaných zmiešaním ekvivalentného množstva koncentrovanej vzorky a 26% (hmotn./objem) PEG1500 uskutoční proti 26% roztoku PEG1500.

Komplexný kryštál sa podrobí pokusu rôntgenovej difrakcie pri nízkej teplote -180°C s použitím difraktometra R-AXIS (Rigaku K.K.) a dáta sa odoberú pri rozlíšení 2,8 Ä. Komplexný kryštál je ortorombický a priestorová skupina je P2i2i2_x a mriežková konštanta je a = 72,7, b = 78,17 a c = 56,04 Á. Tento kryštál obsahuje 1 molekulu v asymetrickej jednotke a hodnota Vm je

2,2 A³/Dalton.

222

Štruktúra sa analyzuje metódou molekulového vytesňovania s použitím REPLACE (Tong, 1993), zahrnutom v kryštalografickom programe Xsight (MSI Inc.). Pre začiatočný štruktúrny model sa použije lhcg proteínovej databanky.

(A-2) Konštrukcia štruktúry kryštálu a rafinácia

S použitím mapy trojrozmernej elektrónovej hustoty získanej postupom opísaným skôr sa uskutoční detailné prispôsobenie reťazca A (Ilelô na The244) a reťazca B (Lys877 na Leul37) (v chrómtrypsíne č.) FXa.

Tieto operácie sa uskutočnia manuálne s využitím programu Xfit zahrnutým v programe XtalView (McRee, 1993).

Kryštalografická štruktúra týchto atómových koordinát sa rafinuje s použitím X-PLOR (Brunger, 1987). Rafinácia sa uskutoční opakovaním kalkulácie pomocou X-PLOR a nastavením polohy atómu manuálnym nastavením, aby sa minimalizoval R faktor a táto rafinácia pokračuje pokiaľ sa nezíska hodnota vo výške asi 20%.

Koordinačné dáta (PDB formát) kryštálovej štruktúry komplexu FXa - zlúčenina A po rafinácii sú uvedené v tabuľke A.

Stĺpce sú opísané ďalej. Stĺpec 1: záznam ID súboru PDB; stĺpec 2: poradové číslo koordináty v súbore PDB; stĺpec 3: názov atómu; stĺpec 4: názov zvyšku aminokyseliny; stĺpec 5: zvyšok aminokyseliny č. (chymotrypsín č.); stĺpec 6: koordináta X atómu; stĺpec 7: koordináta Y atómu; stĺpec 8: koordináta Z atómu; stĺpec 9: faktor plnenia (pevne stanovený do 1,0) a stĺpec 10: teplotný faktor.

Názov zvyšku aminokyseliny zlúčeniny A je pre zjednodušenie indikovaný ako M32. Atómy vodíka v koordinančných dátach sú tie, ktoré sú generované v priebehu kalkulácie na program X-PLOR a dáta neindikujú presnú polohu atómov vodíka.

Na základe takých dát, obrázok 37 ukazuje štruktúru FXa

223 (páskový diagram) a obrázok 38 ukazuje kryštálovú štruktúru komplexu FXa - zlúčenina A (páskový diagram).

Obr. 37 a 38 sa získajú s použitím programu MOLSCRIPT (Kraulis, P., J. Appl. Crystallogr., 24, 946-950 (1991)).

Obr. 39 ukazuje aktívne miesta ľudského FXa.

Obr. 40 ukazuje aktívne miesta komplexu ľudský FXa - zlúčenina A.

Regióny zodpovedajúce oblasti Sl a oblasti S3 sú uzatvorené prerušovanou čiarou pre jednoduchšie pochopenie farmakofora podľa predloženého vynálezu.

Obr. 41 ukazuje stereo pohľad na aktívne miesta komplexu ľudský FXa - zlúčenina A. Obr. 41 sa pripraví s použitím programu MOLSCRIPT.

Výsledkom rontgenovej kryštalografickej analýzy je zistenie, že časť naftalénového kruhu zlúčeniny A sa viaže k oblasti Sl FXa hydrofóbnou interakciou; atóm chlóru zavedený do naftalénu interaguje s časťou benzénového kruhu bočného reťazca Tyr228 v oblasti Sl; zlúčenina A neprechádza vzájomnou elektrostatickou interakciou s Aspl89 FXa v oblasti Sl; a väzbový mód zlúčeniny A k oblasti Sl je úplne rôzny od väzbového módu DX-9065a a FX-2212a, ktorý je známy inhibítor FXa, ktorého štruktúra komplexu sa našla.

Pokiaľ sa týka pozoruhodne vysokej selektivity zlúčeniny A vzhľadom na trypsín, predpokladá sa, že stérická blokácia je indukovaná medzi zlúčeninou A a Ser 190 trypsínu a taká stérická blokácia je faktor pre vysokú selektivitu pre trypsín.

4-Aminopyridinová časť zlúčeniny A sa viaže k oblasti S3 interakciou medzi zásaditou časťou 4-aminopyridínovej časti a elektricky negatívnym stavom oblasti S3 a predpokladá sa, že taká situácia prispieva k selektivite zlúčeniny A vzhľadom na

224 trypsin, trombin, proteín C a tkanivový plazminogénový aktivátor.

Okrem toho, vodíková väzba vzniká medzi karbonylovým atómom kyslíka zlúčeniny A a NH skupinou hlavného reťazca Gly218. Aj keď predložený vynález nie je obmedzený na akúkoľvek hypotézu, predpokladá sa, že korelácia aktivity štruktúry zlúčeniny podľa vynálezu indikuje, že táto väzba nie je nevyhnutná na inhibíciu FXa, ale má sekundárny účinok, ako je zvýšenie inhibičnej aktivity FXa .

Konštrukcia modelovej štruktúry komplexu zlúčenina - FXa

Ďalej uvádzané názvy počítačových programov Insight II, Discover a Search Compare sú komerčne dostupné od Molecular Stimulations Inc., San Diego, CA, USA.

Dve referenčné zlúčeniny

Zlúčenina B: 4-[3-(6-Chlórnaftalen-2-ylsulfónamido)-2-[l-(4-pyrídyl)piperidin-4-ylmetyl]aminopropionyl]-1, 1-dioxotiomorfolín (zlúčenina japonskej patentovej prihlášky č. 11-180909, príklad 8) ; a

Zlúčenina C: (R)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-etoxykarbonyl-1-[1-(4-pyridyl)piperidin-4-ylmetyl]piperazin-2-ón (zlúčenina WO 99/33805, príklad 60). (Poznámka: Postup prípravy týchto zlúčenín je možné nájsť v opisoch týchto patentových prihlášok. Štruktúrne vzorce sú uvedené na obr. 10). Trojrozmerné štruktúrne modely týchto zlúčenín B a C sa pripravili pomocou Insight II a model štruktúry sa optimalizoval molekulárnou mechanickou kalkuláciou s použitím Discover. Potom sa ručnou obsluhou na Insight II prekryli halogénnaftalénové časti zlúčeniny B a zlúčeniny C s halogénnaftalénovou časťou zlúčeniny A v kryštálovej štruktúre komplexu, získanom v kryštálovej štruktúrnej analýze v príkladoch podľa predloženého vynálezu, čím sa získal konštrukt modelu počiatočnej štruktúry FXa a zlúčeniny B alebo

225

C.

Konformačný prieskum zlúčeniny

Konformácia zlúčenín B a C, iná ako halogénnaftalénová časť sa skúmala s použitím porovnania s halogénnaftalénovou časťou zlúčenín B a C fixovaných v oblasti SI.

Konformácia sa generuje systematicky rotáciou väzieb v zlúčeninách B alebo C, ktoré sa odhadli, že budú rotovateľné. Rotačný uhol je 60 stupňov až 300 stupňov pri prírastku 120 stupňov v klinovom uhle v prípade väzby medzi atómami Sp3; a 0 stupňov až 330 stupňov pri prírastku 30 stupňov v klinovom uhle v prípade väzby medzi atómom Sp3 a atómom Sp2. Rotačné uhly sú uhly, ktoré sú odporúčané MSI Inc. ako podmienky prieskumu pre generovanie stabilnej konformácie zlúčeniny.

Výsledky analýzy

Výsledkom skúmania konformácie bolo v prípade zlúčeniny B zistenie, že 4-aminopyridínová časť, ktorá je základnou časťou zlúčeniny B je schopná sa viazať k oblasti S3 a väzbové podmienky zlúčeniny B k FXa spĺňajú všetky body aspektu 17-b. V prípade zlúčeniny C sa zistilo, že 4-aminopyridínová časť je základnou časťou zlúčeniny C, ktorá je tiež schopná sa viazať k oblasti S3 a väzbové podmienky zlúčeniny C k FXa tiež spĺňajú všetky body aspektu 17-b.

Meranie aktivity

Ak sa aktivita hodnotila biologickou skúškou podľa postupu opísaného v experimentálnom príklade 1, a) podľa predloženého vynálezu, zlúčenina B vykazuje IC50 0,031 mM a zlúčenina C vykazuje IC50 0,028 mM.

Farmakofor podľa predloženého vynálezu sa odvodil na základe nových tricyklických zlúčenín majúcich spiro jednotku. Táto zlú226 cenina hrá dôležitú úlohu v nájdení nového farmakofora, ktorý doteraz nebol uvedený pre FXa, pretože trojrozmerné usporiadanie troch kruhov je fixované v tejto zlúčenine. Neočakávane sa tiež potvrdilo, že takto odvodený farmakofor je význačný a plne aplikovateľný prostriedkami molekulárneho návrhu molekuly na zlúčeninu ktorá nemá taký skelet, a najmä na zlúčeninu majúcu flexibilné trojrozmerné usporiadanie.

Priemyselná využiteľnosť

Zlúčenina podľa predloženého vynálezu špecificky inhibuje FXa a vykazuje silnú antikoagulačnú aktivitu. Zlúčenina podľa predloženého vynálezu sa tiež lahko používa, pretože vykazuje vysokú orálnu absorbovatelnosť a tiež dlhodobé pôsobenie a vysokú bezpečnosť. Podľa toho je zlúčenina podľa predloženého vynálezu veľmi užitočná ako antikoagulant.

Ďalej, farmakofor podľa predloženého vynálezu odvodený od zlúčeniny podľa predloženého vynálezu je schopný poskytovať informáciu užitočnú pri identifikácii alebo návrhu inhibítorov ktoré sa kompetitívne viažu k aktívnemu miestu FXa alebo jeho fragmentu.

Claims

PATENTOVÉ' NÁROKY

1. Zlúčenina predstavovaná všeobecným vzorcom I alebo jej farmaceutický prijateľnou soľou kde

A je atóm vodíka alebo skupina vybraná zo súboru, ktorý tvorí (1) nasýtená alebo nenasýtená päť- alebo šesťčlenná cyklická uhľovodíková s kúpina, alebo nasýtená alebo nenasýtená päťalebo šesťčlenná heterocyklické skupina, (2) aminoskupina a (3) imidoylová skupina (kde sú skupiny (1) až (3) prípadne substituované);

B je jednoduchá väzba, karbonylová skupina, skupina -S(0)_xalebo pripadne substituovaná alkylénová skupina s 1 až 2 atómami uhlíka;

D je atóm vodíka, skupina -CO-R⁵ (kde R⁵ je atóm vodíka alebo substituent) alebo prípadne substituovaná alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka;

X je atóm dusíka alebo metínová skupina, prípadne substituovaná skupinou A'-B'- (kde A' znamená skupinu definovanú pre A, a B' znamená skupinu vybranú zo skupín definovaných pre B);

Y je atóm kyslíka, skupina -S(0)_y- alebo prípadne substituovaná imínová skupina (-NH-);

Z je metylénová skupina, karbonylová skupina alebo tiokarbonylová skupina;

T je skupina -S(O)_Z-, karbonylová skupina alebo prípadne substituovaná alkylénová skupina obsahujúca 1 až 2 atómy uhlíka;

228

Q je uhľovodíková skupina alebo heterocyklická skupina, ktorá je prípadne substituovaná;

1, m, n, x, y a z sú nezávisle celé číslo 0, 1 a 2 s výhradou, že 1 a m nie sú súčasne 0; a r je celé číslo 0 alebo 1; a tri kruhy (kruh obsahujúci X, kruh obsahujúci Y a kruh obsahujúci Z) sú nezávisle prípadne substituované; a väzba indikovaná prerušovanou čiarou a plnou čiarou v kruhu obsahujúcom Z je jednoduchá väzba alebo dvojitá väzba (keď r je 0).

2. Aspoň jedna zlúčenina vybraná zo zlúčenín uvedených ďalej alebo jej (+) alebo (-) optický izomér alebo jej farmaceutický prijateľná sol:

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-pi perídin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 6-(hydroxymetyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ón ;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylmetoxymetyl) - 7-oxa-l'-(4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

6-(acetoxymetyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin ] -2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l' - (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

229

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyrimidinyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-( (E)-4-chlórstyrylsulfonyl)-7-oxa-l'- (4-pyri- dyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxyetoxymetyl) -7-oxa-l' - (4-pyridyl) spiro [bi cyklo [4 . 3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-etoxykarbonyl ) -7-oxa-l'- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbony 1) -7-oxa-l' - (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymet y 1) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4.3.0] nonán-8, 4’-p i per idin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 6-(izopropoxykarbonyl) -7-oxa-l' - (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4 - (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7- oxa-6-(propoxy karbonyl) -1'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo[4 . 3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-6-(alyloxykarbonyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

(-)-1,4-diaza-4- (6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(2-metoxye t oxy karbonyl) - 7- oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3.0] nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

230 (-)-1,4-diaza-6-(terc-butoxykarbonyl)-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-ľ- (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

amónium 1,4-diaza-4-( 6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-6-karboxylát;

(+)-amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ- (4-pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin]-6-karboxylát;

(-)-amónium 1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-ľ- (4-pyridyl) spiro [bi cyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin]-6-karboxylát;

4-[1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - 7- oxa-2-oxosp i ro [bicyklo [4. 3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -ľ-yl] pyridin-l-oxid;

ľ-acetimidoyl-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxaspiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

6-(aminometyl)-1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-ľ- (4 -pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8 , 4'-piperidin] - 2-ón ;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(etoxykarbonylaminometyl)-7-oxa-ľ - (4-pyridyl)spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8,4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(morfolinometyl) -7-oxa-ľ - (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 . 3.0]nonán-8, 4'-piperidin]-2-ón;

1.4- diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-metyl-7-oxa- ľ-

- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 . 3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -2-ón;

231 amónium 4 -[1,4-diaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-7-oxa-2-oxo-1'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4 . 3.0]nonán-8, 4'-piperidin] -6-yl]butylát;

1.4.7- triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl) -6-(metoxymetyl) -7-metyl-ľ- (4 -pyridyl )spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, 4'-piperidin] -2-ón;

1.4.7- triaza-4-(6-chlórnaftalen-2-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) - ľ- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [ 4 . 3 . O ] nonán-8 , 4'-piperidin] -2-ón;

1, 4-diaza-4-(7-chlór-2H-benzopyran-3-ylsulfonyl)-6-(metoxymetyl) -7-oxa-l' - ( 4 -pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8 , 4'-piperidin ] -2-ón;

1.4- diaza-4-(7-chlór-2H-benzopyran-3-ylmetyl)-(6-metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, /'-piperidin] -2-ón;

1, 4-diaza-4-(6-chlórbenzotiofen-2-ylsulfonyl)-(6-metoxymetyl) - 7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0] nonán-8, /'-piperidin] -2-ón;

1,4~diaza-4-(6-chlórbenzot iofen-2-ylmety1)-(6-metoxymetyl)-7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4.3 . O ] nonán-8 , 4'-piperidin] -2-ón ;

1.4- diaza-4-(5-chlórbenzofuran-2-ylsulfonyl)-(6-metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3.0] nonán-8 , 4'-piperidin] -2-ón;

1.4- diaza-4-(5-chlórbenzofuran-2-ylmetyl)-(6-metoxymetyl) - 7-oxa-1'- (4-pyridyl) spiro[bicyklo[4.3.0]nonán-8, /'-piperidin]-2-ón;

1, 4-diaza-4-(6-chlórbenzofuran-2-ylsulfonyl)-(6-metoxymetyl) -7-oxa-l'- (4-pyridyl) spiro [bicyklo [4 . 3 . 0] nonán-8, /'-piperidin]-2-ón.

232

3. Proliečivo zlúčeniny podlá nároku 1 alebo 2 alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.

4. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje, ako aktívnu zložku, zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ.

5. Inhibítor FXa, vyznačujúci sa tým, že obsahuje, ako aktívnu zložku, zlúčeninu všeobecného vzorca I alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ.

6.

Zlúčenina všeobecného vzorca V alebo jej kde A, B, X, Y, 1 a m sú ako je definované pre všeobecný vzorec I; kruh obsahujúci X a kruh obsahujúci Y sú nezávisle pripadne substituované; R je atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 6 atómami uhlíka alebo alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovaná hydroxyskupinou alebo atómom halogénu, s výhradou, že dve R môžu spolu predstavovať alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylénovú skupinu s 2 až 4 atómami uhlíka, prípadne substituovanú hydroxylovou skupinou alebo atómom halogénu.

7. Zlúčenina všeobecného vzorca VI alebo jej soľ

HN-T-Q

233

X, Y, Z, T,

Q, 1, m a n majú rovnaký význam ako je definované pre všeobecný vzorec I;

kruh obsahujúci X a kruh obsahuj úci sú nezávisle prípadne substituované;

alkylénová skupina, ktorá sa viaže na Z, keď n je

1 alebo viac, je prípadne substituovaná;

je atóm vodíka, alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupina s až 6 atómami uhlíka alebo alkylová skupina s 1 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovaná hydroxyskupinou alebo atómom halogénu, s výhradou, že dve R môžu spolu predstavovať alkylovú skupinu s

1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylénovú skupinu s 2 až

4 atómami uhlíka, prípadne substituovanú hydroxylovou skupinou alebo atómom halogénu).

8. Zlúčenina všeobecného vzorca Ik alebo jej soľ iminoskupinu ;

kde P¹ ma j u a tri ochranná skupina pre zlúčeninu všeobecného (Ik) význam definovaný pre kruhy sú nezávisle prípadne substituované.

9. Zlúčenina všeobecného vzorca I-a' alebo jej soľ

234 kde A, B, D, X, Y, Z, Q, T, 1, m, n a r majú význam definovaný pre všeobecný vzorec I; W je odštiepujúca sa skupina alebo skupina premenitelná na odštiepujúcu sa skupinu; kruh obsahujúci X a kruh obsahujúci Y sú nezávisle prípadne substituované; a alkylénová skupina, ktorá sa viaže na Z, keď n je 1 alebo viac je prípadne substituovaná.

10. Zlúčenina vykazujúca inhibičné účinky na FXa, ktorá má parciálnu štruktúru predstavovanú všeobecným vzorcom I” alebo jej farmaceutický prijateľná sol kde -X= je -CH= alebo -N=; tri kruhy (kruh obsahujúci X, kruh obsahujúci Y a kruh obsahujúci Z) sú nezávisle pripadne substituované; Y, Z, D, T, Q, 1, m, n a r sú ako je definované pre všeobecný vzorec (I).

11. Zlúčenina vykazujúca inhibičné účinky na FXa, ktorá má v molekule parciálnu štruktúru predstavovanú všeobecným vzorcom I' alebo jej farmaceutický prijateľná soľ

235 kde X je metinová skupina alebo atóm dusíka; tri kruhy (kruh obsahujúci X, kruh obsahujúci Y a kruh obsahujúci Z) sú nezávisle pripadne substituované; a A, B, Y, Z, D, 1, m, n a r sú ako je definované pre všeobecný vzorec (I).

12. Zlúčenina vykazujúca inhibičný účinok na FXa predstavovaná všeobecným vzorcom ľ alebo jej farmaceutický prijatelná sol (ľ) kde

D je atóm vodíka, skupina -CO-R⁵ (kde R'^J je atóm vodíka alebo substituent) alebo prípadne substituovaná alkylová skupina obsahujúca 1 až 6 atómov uhlíka,

X je metinová skupina alebo atóm dusíka;

Y je atóm kyslíka, skupina —S(0)_y- alebo prípadne substituovaná imino skupina (-NH-);

tri kruhy (kruh obsahujúci X, kruh obsahujúci Y a kruh obsahujúci Z) sú nezávisle prípadne substituované;

Z je metylénová skupina, karbonylová skupina alebo tiokarbonylová skupina;

1, m, n a y sú nezávisle celé číslo vybrané z 0, 1 a 2, s výhradou, že 1 a m nie sú súčasne 0 a r je číslo 0 alebo

1;

236 väzba označená prerušovanou čiarou a plnou čiarou predstavuje jednoduchú väzbu alebo dvojitú väzbu (keď r je 0); a

La a Lb sú skupiny zúčastňujúce sa väzby zlúčeniny všeobecného vzorca I' na FXa, kde

La znamená skupinu, ktorá má zásaditú časť, ktorá sa viaže s oblasťou S3 FXa [priestor tvorený aspoň aminokyselinovými zvyškami Trp215, Phel74, Tyr99, Thr98, Glu97 a Lys96], a

Lb znamená skupinu majúcu hydrofóbnu časť, ktorá sa viaže na oblasť SI FXa [priestor tvorený aspoň aminokyselinovými zvyškami Val213, Ser214, Trp215, Gly216, Glu217, Gly218, Cys220, Aspl89, Alal90, Cysl91, Glnl92, Glyl93, Aspl94, Serl95, Gly226, Ile227 a Tyr228] a ktorá interaguje s postranným reťazcom Tyr228 v oblasti SI, ale ktorá netvorí kovalentnú väzbu so Serl95 v aktívnom centre (kde aminokyselina č. FXa je indikovaná chymotrypsínom č. použitom v proteínovej databanke (PDB), registrácia ID: 1FAX (J. Biol. Chem. 22.11.1996; 271 (47): 29988-92).

13. Zlúčenina, ktorá spĺňa všetky podmienky ako sú uvedené ďalej, alebo jej farmaceutický prijateľná soľ

1) zlúčenina' má skupinu obsahujúcu zásaditú časť, ktorá sa spája s oblasťou S3 FXa [priestor tvorený aspoň aminokyselinovými zvyškami Trp215, Phel74, Tyr99, Thr98, Glu98 a Lys96] keď je komplex zlúčeniny s FXa v kryštalickom stave;
2) zlúčenina má hydrofóbnu časť, ktorá sa viaže na oblasť SI FXa [priestor tvorený aspoň jedným aminokyselinovým zvyškom Val213, Ser214, Trp215, Gly216, Glu217, Gly218, Cys220, Aspl89, Alal90, Cysl91, Glnl92, Glyl93, Aspl94, Serl95, Gly226, Ile227 a Tyr228] keď je komplex zlúčeniny s FXa v kryštalickom stave;
3) uvedená hydrofóbna časť interaguje s postranným reťazcom Tyr228 v oblasti SI, ale neviaže sa kovalentne na Serl95 v aktívnom centre, keď je komplex v kryštalickom stave; a

237
4) zlúčenina má inhibičný účinok na FXa.

14. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že kompozícia obsahuje ako aktívnu zložku aspoň jednu zlúčeninu alebo jej farmaceutický prijateľnú sol podľa nárokov 10 až 13.

15. Spôsob inhibície FXa, vyznačujúci sa tým, že tento spôsob zahŕňa podanie farmaceutickej kompozície podľa nároku 14 cicavcovi, ktorý vyžaduje inhibíciu FXa.

16. Kryštál komplexu medzi FXa a aspoň jednou zlúčeninou alebo jej soľou podľa nárokov 10 až 13.

17. Farmakofor, ktorý je užitočný v identifikácii alebo návrhu inhibítora, ktorý sa kompetitívne viaže k aktívnemu miestu. FXa alebo jeho fragmentu a ktorý spĺňa všetky skutočnosti uvedené pod bodmi a) až c):

a) ide o trojrozmerný štruktúrny parameter, ktorý definuje spôsob väzby, keď sa inhibítor viaže na oblasť SI FXa jeho hydrofóbnou časťou a ktorý indukuje interakciu s bočným reťazcom

Tyr228 v oblasti SI;

b) ide o trojrozmerný štruktúrny parameter definujúci spôsob

väzby, časťou; keď sa inhibítor viaže na a oblasť S3 FXa jeho zásaditou c) inhibítor sa kovalentne neviaže na Serl95 v aktívnom

centre.

18. Spôsob identifikácie alebo navrhovania inhibítora, ktorý sa kompetitívne viaže k aktívnemu miestu FXa alebo jeho fragmentu, vyznačujúci sa tým, že inhibítor sa skúma poskytnutím trojrozmernej štruktúrnej informácie aktívneho miesta do počítačového systému; identifikáciou zlúčeniny, o ktorej sa

238 predpokladá, že sa viaže k FXa spôsobom, ktorý spĺňa všetky nasledujúce podmienky:

a) zlúčenina sa spojí s oblasťou SI svojou hydrofóbnou časťou a časť interaguje s Tyr228,

b) zlúčenina sa spojí s vnútornou časťou aktívneho miesta oblasti S3 svojou zásaditou časťou, a

c) zlúčenina sa neviaže kovalentne so Serl95;

a zlúčenina sa podrobí biologickej skúške, ktorá je schopná merať inhibičnú účinnosť FXa s cieľom určiť, či zlúčenina vykazuje v skúške inhibičnú účinnosť vzhľadom na FXa.