SK12502001A3 - Prostriedok na liečbu artritídy - Google Patents

Prostriedok na liečbu artritídy Download PDF

Info

Publication number
SK12502001A3
SK12502001A3 SK1250-2001A SK12502001A SK12502001A3 SK 12502001 A3 SK12502001 A3 SK 12502001A3 SK 12502001 A SK12502001 A SK 12502001A SK 12502001 A3 SK12502001 A3 SK 12502001A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
hyaluronic acid
zinc
complex
mmp
matrix metalloproteinase
Prior art date
Application number
SK1250-2001A
Other languages
English (en)
Other versions
SK287223B6 (sk
Inventor
Isao Serizawa
Keisei Maekawa
Janos Illes
Erzsebet Neszmeli
Original Assignee
Takata Seiyaku Co., Ltd.
Richter Gedeon Vegy�Szeti Gy�R Rt.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Takata Seiyaku Co., Ltd., Richter Gedeon Vegy�Szeti Gy�R Rt. filed Critical Takata Seiyaku Co., Ltd.
Publication of SK12502001A3 publication Critical patent/SK12502001A3/sk
Publication of SK287223B6 publication Critical patent/SK287223B6/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/30—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Prostriedok na liečbu artritídy
Oblasť techniky
Vynález sa týka prostriedku na liečbu artritických ochorení, ako je reumatoidná artritída.
DoteraiSí stav techniky
Artritické ochorenia, vrátane ochorení ako je reumatoidná artritída, osteoartritída a traumatická artritída, sú zápalové ochorenia, ktoré spôsobujú deštrukciu chrupavky a kosti, sprostredkovanú zápalom synoviálnej blany kĺbu. V zapálenej synoviálnej blane je pozorovaná vaskulárna neogenéza, invázia a proliferácia lymfocytov a aktivácia synoviálnych buniek. Aktivované synoviálne bunky produkujú chemické mediátory, ako sú cytokíny, prostaglandíny a matricové metaloproteinázy, a považujú sa za pôvodcov deštrukcie chrupavky a kosti (Harris, E.D., New England Journal of Medicíne, sv. 322, str. 1277-1289 (1990) a Cash, J.M. a spol., New England Journal of Medicíne, sv. 330, str. 1368-1375 (1994)).
Je známe, že kyselina hyalurónová vo forme sodnej soli je účinná pri liečbe artritických ochorení (viď Yamamoto, M. a spol., „Clinical Evaluation of High Molecular Sodium Hyaluronate (NRD) on Osteoarthritis of the Knee“, Jpn.Pharmacol.Ther zv. 21, č. 3 (1993)). Ďalej je známe, že je pri liečbe artritídy účinný zinok (A. Frigo a spol.,“Copper and Zinc in Inflammation“, Inflammation and drug therapy šerieš, sv. IV, Kluwer Academic Publishers, str. 133-142 (1989)).
Avšak aj keď je kyselina hyalurónová (typicky vo forme sodnej soli) do určitej miery známa na liečbu artritických ochorení, pretože je výhodná z hľadiska biokompatibility a tokových vlastností, nemá v podstate žiadny účinok proti proliferácii a aktivácii synoviálnych buniek. Uspokojivý terapeutický efekt nemožno dosiahnuť ani použitím zinku.
·· · • · · • ···· ·· ·· • · · · • · · · • · ··· • · · ·· ·· ·· ·
Podstata vynálezu
Predmetom vynálezu je farmaceutický prípravok, výroba a použitie takého prípravku, ktorý je schopný účinne liečiť artritické ochorenie prostredníctvom inhibície proliferácie a aktivácie synoviálnych buniek, ktoré tvoria etiológiu artritických ochorení, ako je reumatoidná artritída, a najmä supresia matricovej metaloproteinázy.
Ako výsledok rozsiahlych štúdií za účelom vyriešenia vyššie uvedených problémov pôvodcami tohto vynálezu zistili, že zatiaľ čo kyselina hyalurónová (sodná soľ) nemá v podstate žiadny inhibičný účinok na proliferáciu a aktiváciu synoviálnych buniek a inhibičný účinok zinku na proliferáciu a aktiváciu synoviálnych buniek a najmä na matricovej metaloproteinázy, je extrémne nízky, zlúčenina kyseliny hyalurónovej a zinku prekvapivo má veľmi silné inhibičné účinky na proliferáciu synoviálnych buniek a supresiu matricových metaloproteináz v dôsledku synergického efektu, totiž potencujúce synergické interakcie obidvoch zložiek, čo viedlo k vytvoreniu tohto vynálezu.
Predmetom vynálezu teda je prostriedok na liečbu artritických ochorení, obsahujúci komplex kyseliny hyalurónovej a zinku.
Vynález tiež poskytuje supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9, obsahujúci komplex kyseliny hyalurónovej a zinku.
Vynález sa tiež týka použitia komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku na výrobu prostriedku na liečbu artritických ochorení.
Vynález sa ďalej týka použitia komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku na výrobu supresora matricovej metaloproteinázy MMP-9.
Ďalej vynález zahrnuje spôsob liečby artritických ochorení, zahrnujúci podávanie komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku pacientovi s artritickým ochorením.
Konečne vynález zahrnuje spôsob potlačovania zrýchlenej produkcie matricovej metaloproteinázy MMP-9, zahrnujúci podávanie komplexu kyseliny ·· ·· ·· • ···· · e · ··· · · φ ··. : ·..· ..· ·..· .
hyalurónovej a zinku pacientovi majúcemu zrýchlenú produkciu matricovej metaloproteinázy MMP-9.
Účinnou zložkou podľa vynálezu je komplex kyseliny hyalurónovej a zinku. Kyselina hyalurónová normálne existuje vo forme sodnej soli a ide o makromolekulu opísanú v Meyer a spol. (J.Biol.Chem., zv. 107, str. 629 (1934)). Kyselina hyalurónová je vysoko viskózny glukozaminoglykán so striedajúcimi sa zložkami β 1,3-glukurónovej kyseliny a pi,4-glukozamínu a jej molekulová hmotnosť sa pohybuje od 50 kD do niekoľko miliónov D. Kyselina hyalurónová sa nachádza v spojivovom tkanive všetkých cicavcov a vo veľkom množstve je prítomná v koži, sklovci, synoviálnej tekutine, pupočnej šnúre a chrupavkevom tkanive. Pretože je kyselina hyalurónová základnou zložkou spojivového tkaniva, je biokompatibilná, bioadsorbovateľná a neimunogénna.
V dôsledku toho vykazuje kyselina hyalurónová mnohé biologické funkcie pri lubrikácii a ochrane kĺbových chrupaviek.
V komplexe kyseliny hyalurónovej a zinku podľa vynálezu je pomer kyseliny hyalurónovej a zinku v rozmedzí, v ktorom tieto zložky vykazujú synergické účinky s ohľadom na inhibíciu proliferácie synoviálnych buniek a supresiu matricovej metaloproteinázy MMP-9. Pokiaľ ide o hmotnostný pomer, sú kyselina hyalurónová a zinok v pomere 5:1 až 20:1 a výhodne 10:1. Molekulová hmotnosť komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku používaného podľa vynálezu je výhodne 100 kD až 2 000 kD a výhodná je molekulová hmotnosť asi 1 000 kD. Komplex kyseliny hyalurónovej a zinku podľa vynálezu je možné vyrobiť napríklad zmiešaním vodného roztoku hyaluronátu sodného a vodného roztoku soli zinku, ako je chlorid zinočnatý (európska patentová prihláška EP 0 413 016).
Má sa za to, že mnohé zápalové artritické ochorenia sú dôsledkom proliferácie a aktivácie synoviálnych buniek, vyvolávané niektorým faktorom. Aktivované synoviálne bunky produkujú chemické mediátory, ako sú cytokíny, prostaglandíny a matricové metaloproteinázy, a spôsobujú deštrukciu kosti a chrupavky vedúcu k zápalu kĺbu. Matricové metaloproteinázy (MMP) zahrnujú MMP-1, ktorá rozkladá kolagén typu I a typu II, MMP-3, ktorá okrem uvedených kolagénov rozkladá chrupavkový kolagén, a MMP-9, ktorá rozkladá želá• · ···· ··· ·· tinované formy kolagénu typu I a typu II na kolagény s nižšou molekulovou hmotnosťou a rozkladá kolagén typu IV, kolagén typu V, kolagén typu IX a chrupavkový proteoglykán (Sapata, I. a spol., Biochem. Biophys. Acta, zv. 370, str. 510-523, 1974, Murphy, G. a spol., Biochem.J., zv. 203, str. 209-221, 1982, Morel, F. a spol., Biochem. Biophys. Res. Commun., zv. 191, str. 269274, 1993, Hibbs, M.S., Matrix Supple., zv. 1, str. 51-57, 1992, Murphy, G. a spol., Biochem.J., zv. 277, str. 277-279, 1991, Hibbs, M.S. a spol., J. Biol.Chem., zv. 260, str. 2493-2500, 1995). Tie, ako sa predpokladá, sa zúčastňujú deštrukcie kĺbov.
Aj keď je možné synoviálne bunky od pacientov s reumatoidnou artritídou, osteoartritídou a traumatických pacientov pestovať in vitro, je rast týchto buniek inhibovaný v koncentračnej závislosti komplexom kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu v koncentrácii 100 až 300 pg/ml. Komplex kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu je teda použiteľný na liečbu artritických ochorení, ako je reumatoidná artritída, osteoartritída, traumatické artritické ochorenia, hydrartróza a rýchlo deštruujúce ochorenia panvového kĺbu. Má sa za to, že schopnosť inhibovať proliferáciu synoviálnych buniek umožňuje nosotropické ošetrovanie reumatoidnej artritídy (japonská patentová prihláška zverejnená bez prieskumu č. 7-145062).
Pri kultivácii synoviálnych buniek od pacientov s reumatoidnou artritídou, osteoartritídou a traumatických pacientov in vitro je matricová metaloproteináza MMP-9 zo synoviálnych buniek pochádzajúcich z reumatoidnej artritídy potlačovaná komplexom kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu v koncentrácii 100 μg/ml alebo nižšej. Komplex kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu je teda použiteľný ako supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 zo synoviálnych buniek pri reumatoidnej artritíde. Tu je vyššie uvedeným supresorom matricovej metaloproteinázy MMP-9 napríklad prostriedok na liečbu proliferatívnej diabetickej retinopatie so závislosťou na inzulíne alebo inhibítor invázie alebo metastázy malígnych nádorov.
Ako je ukázané v jednotlivých uskutočneniach, hyaluronát sodný neinhibuje podstatne proliferáciu synoviálnych buniek ani podstatne nepotlačuje matricovú metaloproteinázu MMP-9. Navyše, pretože chlorid zinočnatý inhibuje • · ···· ·· ·· · • · · · · · • · · · · • · · ··· · · · ; · · · · · • ·· ·· ·· proliferáciu synoviálnych buniek a potlačuje matricovú metaloproteinázu MMP-9, komplex kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu vykazuje účinnejšiu inhibíciu proliferácie synoviálnych buniek a supresiu matricovej metaloproteinázy MMP-9 než chlorid zinočnatý.
Účinky komplexu kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu pri inhibícii proliferácie synoviálnych buniek a supresii matricovej metaloproteinázy MMP-9 sú teda synergické vzhľadom na kyselinu hyalurónovú a zinok ako zložiek vyššie uvedeného komplexu.
To znamená, že obidve zložky vyššie uvedeného komplexu vykazujú v prípade vyššie uvedeného účinku potencujúci synergizmus.
Pre komplex kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu je možné používať metódy aplikácie, bežne používané pre liečiva. Tento komplex môže byť najmä podávaný orálne alebo parenterálne a zvlášť výhodné je injekčné podávanie. Účinná dávka komplexu kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu je 0,01 až 1 mg, výhodne 0,03 až 0,5 mg na kĺb na aplikáciu na osobu. Nebolo pozorované, že by komplex kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu vyvolával symptómy systémovej toxicity, ani keď bol podávaný subkutánne krysám a myšiam v fyzicky možnej maximálnej dávke 200 mg/kg.
Prostriedok na liečbu artritických ochorení a supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 podľa vynálezu môže obsahovať 0,001 až 1 %, výhodne 0,01 až 0,5 % komplexu kyselina hyalurónová/zinok podľa vynálezu s rutinne používaným farmaceutickým nosičom. Medzi rutinne používané farmaceutické nosiče patria bázy, typicky používané v terapeutických aplikáciách, ako je chitozán, škrob, pektín, HPMC a alginát sodný, spojiva ako tragant, arabská guma, kukuričný škrob a želatína, vehikula ako kryštalická celulóza a manitol, dezintegračné prostriedky ako kukuričný škrob, β-škrob a kyselina algínová, lubrikanty ako stearát horečnatý, sladidlá ako sacharóza, laktóza a sacharín, ochucovadlá ako pepermint, mäta a čerešňový extrakt a antiseptiká.
• · ···· ·· ·· • · · • · · • ··· ·· ··
Prehľad obrázkov na výkresoch
Obr. 1 predstavuje graf znázorňujúci inhibičné účinky HA/Zn, Na-HA a Zn na rast synoviálnych buniek od pacientov s reumatoidnou artritídou (RASC).
Obr. 2 predstavuje graf znázorňujúci inhibičné účinky HA/Zn, Na-HA a Zn na rast synoviálnych buniek od pacientov s osteoartritídou (OASC).
Obr. 3 predstavuje graf znázorňujúci inhibičné účinky HA/Zn, Na-HA a Zn na rast synoviálnych buniek od pacientov s traumatickou artritídou (TASC).
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1. Inhibičný účinok na proliferáciu synoviálnych buniek
Účinky komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku (HA/Zn) podľa vynálezu a účinky hyaluronátu sodného (Na-HA) a zinku (Zn) ako porovnávacích kontrol boli testované na synoviálnych bunkách (RASC) od pacientov s reumatoidnou artritídou (RA), synoviálnych bunkách (OASC) od pacientov s osteoartritídou (OA) a synoviálnych bunkách (TASC) od pacientov s traumatickou artritídou (TA).
Ako skúšobné látky boli použité HA/Zn (šarža č. A65242, 1% roztok, Gedeon Richter, Ltd.), hyaluronát sodný (Na-HA, šarža č. KK4001, Q.P. Corp.) a chlorid zinočnatý (Zn, šarža č. ESH1413, Wako Pure Chemical Ind., Ltd.). Vopred boli stanovené kvantitatívne hodnoty obsahu kyseliny hyalurónovej a
A A zinku vo vyššie uvedenom roztoku HA/Zn (špecifická hmotnosť; d 20 = 1,0134). Pretože množstvo kyseliny hyalurónovej bolo 99 % (105,0 %, počítané ako hyaluronát sodný) a množstvo zinku bolo 1,07 mg/ml, ak sa vyššie uvedenému 1 % priradí hodnota 100, bol hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej k zinku v uvedenom HA/Zn považovaný za rovný 10:1 (Na-HA : Zn). Skúšobné látky boli testované v koncentráciách 10 pg/ml, 30 pg/ml, 100 gg/ml, 150
Ί ··· ···· ·· ·· ·· • · · · • · · · • ··· · · • · · ·· pg/ml, 200 gg/ml, 250 pg/ml a 300 gg/ml pre HA/Zn, v rovnakých koncentráciách ako HA/Zn pre Na-HA a v desatinových koncentráciách HA/Zn pre Zn.
Tkanivá synoviálnej blany boli odobraté z kolenného kĺbu pacientov s reumatoidnou artritídou (RA; 5 prípadov, vek 65,6 ± 10,6 rokov) a pacientov s osteoartritídou (OA; 6 prípadov, vek 73,4 ± 8,9 rokov) počas chirurgickej náhrady umelým kĺbom a z kolenného kĺbu pacientov s traumatickou artritídou (TA; 6 prípadov, vek 25,6 ± 6,7 rokov) počas artroskopického chirurgického zákroku. Po odobratí boli vzorky ihneď umiestnené do skúmaviek (centrifugačnej skúmavky s objemom 50 ml, Iwaki) obsahujúcich DMEM (Dulbeccovo modifikované Eaglovo médium) a uchovávané pri 4 °C. Neskôr bolo tkanivo synoviálnej blany premyté v čistom zariadení, ostatné tkanivo bolo odstránené, synoviálna blana bola rozrezaná na tenké plátky a na testovanie rozdelená na jednotlivé synoviálne bunky (SC) pôsobením enzýmov (kolagenáza a trypsín, Wako Pure Chemical Ind., Ltd.).
Celková kultivácia SC sa vykonávala s použitím DMEM obsahujúceho 10 % teplom dezaktivovaného (56 °C, 30 min) fetálneho teľacieho séra (FCS, Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd.) a zmiešaného roztoku protilátok (penicilín 100 jednotiek/ml, streptomycín 100 pg/ml, fungizón 25 ng/ml).
Synoviálne bunky (SC) boli inokulované na mikroplatňu (96 jamiek, Iwaki) v koncentrácii 3,55.103 buniek/0,1 ml/jamku (1.104 buniek/cm2) a prekultivované po dobu 2 dní pri 37 °C v parnej fázy tvorenej 5 % CO2 a 95 % vzduchu. Neskôr bolo médium nahradené médiom obsahujúcim vyššie uvedené lieky pripravené v rôznych koncentráciách s následnou kultiváciou pri 37 °C v parnej fázy tvorenej 5 % CO2 a 95 % vzduchu do 12. dňa po pridaní lieku. Počas kultivácie bolo médium nahradzované médiom obsahujúcim liek každé 4 dni. Meranie proliferácie buniek sa vykonávalo v deň 4, 8 a 12 metódou MTT (New Biochemistry Experiments and Lectures 12, Molecular Immunology I Immune cells and cytokines, 358, 1989). Výsledky boli vyjadrené optickou absorbanciou, ktorá vykazovala pozitívnu koreláciu s počtom buniek.
Štatistická analýza bola vykonávaná zisťovaním rovnomernej odchýlky Barlettovou metódou na úrovni významnosti 5 %. Keď bola odchýlka rovno-
·· · merná, boli údaje podrobené jednosmernej izovariančnej úprave (1-way ANOVA) a v prípade, kedy bol pozorovaný významný rozdiel, boli priemerné hodnoty podrobené viacnásobnému porovnávaniu metódou podľa Dunnetta alebo Turkeye. V prípade nerovnomernej odchýlky boli údaje podrobené KruskalWalisovmu testu a rad bol zisťovaný viacnásobným porovnávaním neparametrickou metódou podľa Dunnetta alebo Turkeye.
Výsledky získané pre RASC, OASC a TASC, sú znázornené na obr. 1, 2, resp. 3. Hviezdičky na týchto grafoch označujú významný rozdiel vzhľadom na skupinu, ktorej nebolo podané liečivo, na úrovni p < 0,05, zatiaľ čo dvojité hviezdičky označujú významný rozdiel na úrovni p < 0,01.
Ako je z týchto grafov zrejmé, aj keď prídavkom Na-HA nebola významne inhibovaná proliferácia pre žiadne synoviálne bunky, bola v prípade prídavku HA/Zn proliferácie synoviálnych buniek významne inhibovaná v závislosti na pridanom množstve. Okrem toho bola významná inhibícia synoviálnych buniek pozorovaná tiež v prípade prídavku Zn. Inhibícia proliferácie synoviálnych buniek však bola väčšia u HA/Zn než u Zn, a ak sa vezme do úvahy, že v prípade prídavku Na-HA nebola proliferácia inhibovaná, potvrdzuje to, že HA/Zn má synergické účinky v porovnaní s použitím samotného Na-HA alebo Zn.
Príklad 2. Supresný efekt na matricovú metoproteinázu MMP-9 v supernatante kultúry synoviálnych buniek
Synoviálne bunky boli inkulované na kultivačnej miske (priemer 35 mm, Iwaki) v koncentrácii 10.104 buniek/2 ml/misku (1.104 buniek/cm2) a prekultivované 2 dni pri 37 °C v parnej fázy tvorenej 5 % CO2 a 95 % vzduchu. Potom bolo médium nahradené médiom obsahujúcim jednotlivé liečiva a po 8 dňoch kultivácie za rovnakých podmienok boli odobraté vzorky supernatantu a pred meraním skladované pri -80 °C. Pridávané koncentrácie HA/Zn a Na-HA boli 100 pg/ml (konečná koncentrácia), zatiaľ čo koncentrácia Zn bola 10 pg/ml (konečná koncentrácia). Množstvo matricovej metaloproteinázy MMP-9 v supernatante sa meralo pomocou EIA (enzýmové imunoanalýzy). Aby bolo ·· ·· * · · Λ · • · · · · · ···· · · · ··« • · · « • ·· ·· možné hodnotiť výsledky vypočítané ako koncentrácia v supernatante na bunku, boli výsledky prevedené na hodnoty delené hodnotou optickej absorbancie synoviálnych buniek krát MTT v tom čase. Navyše bola táto hodnota ďalej vyjadrená ako relatívna hodnota ku kontrole jednotlivej hodnoty pre každú skupinu pridávaného liečiva, pričom kontrolnej skupine (bez prídavku liečiva) bola priradená hodnota 100 %.
Výsledkom bolo, že v prípade priradenia hodnoty 100 % kontrole (bez pridania liečiva) produkcia MMP-9 pri prídavku HA/Zn bola 0%, pri prídavku Na-HA 100 % a pri prídavku Zn 50 %. To teda potvrdzuje, že supresný efekt HA/Zn voči MMP-9 je voči samotným zložkám, Na-HA alebo Zn, synergický.
Ako bolo vyššie uvedené, má komplex kyseliny hyalurónovej a zinku podľa vynálezu v porovnaní so svojimi zložkami, kyselinou hyalurónovou a zinkom, účinky, ktoré synergicky inhibujú proliferáciu synoviálnych buniek a potlačujú matricovú metaloproteinázu MMP-9, produkovanú synoviálnymi bunkami, takže je vhodný ako prostriedok na liečbu artritických ochorení, ako je reumatoidná artritída.
Príklad 3. Formulácia
kyselina hyalurónová zinok 0,2 g
manitol 5,0 g
voda pre injekciu príslušné množstvo
celkom 100 ml
Postup prípravy:
Potom, čo bolo 5 g manitolu alebo glukózy rozpustených v 80 ml vody pre injekcie, bol v malých podieloch pridaný komplex kyselina hyalurónová zinok, miešaný a rozpustený. Roztok bol prefiltrovaný a naplnený do ampule. Na prípravu injekcií bola ampula 30 min sterilizovaná v sprchovom sterilizátore (asi 105 °C).
• · ···· ·· ·· • · · · • · · · • · ··· • · ·
BB
BB
Podobný postup prípravy bol použitý na formuláciu v príklade 4.
Príklad 4. Formulácie
kyselina hyalurónová zinok 0,2 g
glukóza 5,0 g
voda pre injekcie príslušné množstvo
celkom 100 ml

Claims (37)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Prostriedok na liečbu artritických ochorení, vyznačujúci sa tým, že obsahuje komplex kyseliny hyalurónovej a zinku.
  2. 2. Prostriedok na liečbu artritických ochorení podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 100 kD až asi 2 000 kD.
  3. 3. Prostriedok na liečbu artritických ochorení podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 1 000 kD.
  4. 4. Prostriedok na liečbu artritických ochorení podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, vyznačujúci sa tým, že hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je 5 : 1 až 20 : 1.
  5. 5. Prostriedok na liečbu artritických ochorení podľa nároku 4, vyznačujúci sa tým, že hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je asi 10 : 1.
  6. 6. Prostriedok na liečbu artritických ochorení podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5, vyznačujúci sa tým, že artritickým ochorením je reumatoidná artritída, osteoartritída, hydrartróza alebo rýchlo deštruujúce ochorenie bedrového kĺbu.
    • · · · · · ···· · · · ··· • · · · · · · ··· · ·· ·· ·· ·
  7. 7. Prostriedok na liečbu artritických ochorení podľa nároku 6, vyznačujúci sa tým, že artritickým ochorením je reumatoidná artritída.
  8. 8. Supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9, obsahujúci komplex kyseliny hyalurónovej a zinku.
  9. 9. Supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 podľa nároku 8, kde komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 100 kD až asi 2 000 kD.
  10. 10. Supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 podľa nároku 9, kde komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 1 000 kD.
  11. 11. Supresor matricové metaloproteinázy MMP-9 podľa ktoréhokoľvek z nárokov 8 až 10, kde hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je 5 : 1 až 20 : 1.
  12. 12. Supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 podľa nároku 11, kde hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je asi 10 : 1.
  13. 13. Supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 podľa ktoréhokoľvek z nárokov 8 až 12, kde supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 je prostriedkom na liečenie na inzulíne závislej proliferatívnej diabetickej retinopatie alebo inhibítorom malígnej nádorovej invázie alebo metastázy· ·· ·· ·· • ·
  14. 14. Použitie komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku na výrobu prostriedku na liečbu artritického ochorenia.
    Použitie podľa nároku 14, kde komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 100 kD až asi 2 000 kD.
    Použitie podľa nároku 15, kde komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 1 000 kD.
  15. 17. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 14 až 16, kde hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je 5 : 1 až 20 : 1.
  16. 18. Použitie podľa nároku 17, kde hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je asi 10 : 1.
  17. 19. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 14 až 18, kde artritickým ochorením je reumatoidná artritída, osteoartritída, hydrartróza alebo rýchlo deštruujúce ochorenie bedrového kĺbu.
  18. 20. Použitie podľa nároku 19, kde artritickým ochorením je reumatoidná artritída.
  19. 21. Použitie komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku na výrobu supresoru matricovej metaloproteinázy MMP-9.
    • · ···· ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · · • · · ··· · · · • · · · · · · ··· · ·· ·· ·· ·
  20. 22. Použitie podľa nároku 21, kde komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 100 kD až asi 2 000 kD.
  21. 23. Použitie podľa nároku 22, kde komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 1 000 kD.
  22. 24. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 21 až 23, kde hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je 5 : 1 až 20 : 1.
  23. 25. Použitie podľa nároku 24, kde hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je asi 10 : 1.
  24. 26. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 21 až 25, kde supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 je prostriedkom na liečenie na inzulíne závislej proliferatívnej diabetickej retinopatie alebo inhibítorom malígnej nádorovej invázie alebo metastázy.
  25. 27. Spôsob liečenia artritického ochorenia, vyznačujúci sa tým, že sa pacientovi s artritickým ochorením podáva komplex kyseliny hyalurónovej a zinku.
  26. 28. Spôsob liečenia podľa nároku 27, vyznačujúci sa tým, že komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 100 kD až asi 2 000 kD.
    • · ···· ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · · • · · ··· · · · • · · · · · · ··· · ·· ·· ·· ·
  27. 29. Spôsob liečenia podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 1 000 kD.
  28. 30. Spôsob liečenia podľa ktoréhokoľvek z nárokov 27 až 29, vyznačujúci sa tým, že hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je 5 : 1 až 20 :
    1.
  29. 31. Spôsob liečenia podľa nároku 30, vyznačujúci sa tým, že hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je asi 10 : 1.
  30. 32. Spôsob liečenia podľa ktoréhokoľvek z nárokov 27 až 30, vyznačujúci sa tým, že artritickým ochorením je reumatoidná artritída, ostéoartritída, hydrartróza alebo rýchlo deštruujúce ochorenie bedrového kĺbu.
  31. 33. Spôsob liečenie podľa nároku 32, vyznačujúci sa tým, že artritickým ochorením je reumatoidná artritída.
  32. 34. Spôsob potlačovania zrýchlenej produkcie matricovej metaloproteinázy MMP-9, vyznačujúci sa tým, že sa pacientovi so zrýchlenou produkciou matricovej metaloproteinázy MMP-9 podáva komplex kyseliny hyalurónovej a zinku.
  33. 35. Spôsob podľa nároku 34, vyznačujúci sa tým, že komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 100 kD až asi 2 000 kD.
    • · ·· ·· ·· ··· ···· ··· ··· · · · · ·· • ···· · · · ··· · · · • · · · · · ·
  34. 36. Spôsob podľa nároku 35, vyznačujúci sa tým, že komplex kyseliny hyalurónovej a zinku má molekulovú hmotnosť asi 1 000 kD.
  35. 37. Spôsob liečenia podľa ktoréhokoľvek z nárokov 34 až 36, vyznačujúci sa tým, že hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je 5 : 1 až 20 : 1.
  36. 38. Spôsob podľa nároku 37, vyznačujúci sa tým, že hmotnostný pomer kyseliny hyalurónovej a zinku je asi 10 : 1.
  37. 39. Spôsob podľa ktoréhokoľvek z nárokov 34 až 38, vyznačujúci sa tým, že supresor matricovej metaloproteinázy MMP-9 je prostriedkom na liečenie na inzulíne závislej proliferatívnej diabetickej retinopatie alebo inhibítorom malígnej nádorovej invázie alebo metastázy.
SK1250-2001A 1999-03-10 2000-03-10 Použitie komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku pri liečení artritického ochorenia SK287223B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP06371899A JP2003089647A (ja) 1999-03-10 1999-03-10 関節性疾患治療剤
PCT/JP2000/001487 WO2000053194A1 (fr) 1999-03-10 2000-03-10 Medicaments contre les affections articulaires

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK12502001A3 true SK12502001A3 (sk) 2002-02-05
SK287223B6 SK287223B6 (sk) 2010-03-08

Family

ID=13237463

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1250-2001A SK287223B6 (sk) 1999-03-10 2000-03-10 Použitie komplexu kyseliny hyalurónovej a zinku pri liečení artritického ochorenia

Country Status (21)

Country Link
US (1) US6608043B1 (sk)
EP (1) EP1166788B8 (sk)
JP (1) JP2003089647A (sk)
KR (1) KR100728096B1 (sk)
CN (1) CN1165315C (sk)
AT (1) ATE466584T1 (sk)
AU (1) AU2942500A (sk)
BG (1) BG65681B1 (sk)
CA (1) CA2364451C (sk)
CY (1) CY1109773T1 (sk)
CZ (1) CZ301736B6 (sk)
DE (1) DE60044341D1 (sk)
DK (1) DK1166788T3 (sk)
EA (1) EA005010B1 (sk)
EE (1) EE04660B1 (sk)
ES (1) ES2344677T3 (sk)
PL (1) PL200848B1 (sk)
PT (1) PT1166788E (sk)
SK (1) SK287223B6 (sk)
UA (1) UA72913C2 (sk)
WO (1) WO2000053194A1 (sk)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUP0303779A2 (en) * 2003-11-20 2006-02-28 Richter Gedeon Vegyeszet Pharmaceutical compositions containing hyaluronan complex for the treatment of sclerosis multiplex
ITRM20030590A1 (it) * 2003-12-22 2005-06-23 Univ Siena Formulazione a base di polimetafosfati per la cura di artropatie microcristalline.
WO2005089800A1 (ja) * 2004-03-17 2005-09-29 Locomogene, Inc. hsHRD3を含む医薬組成物
US20070099867A1 (en) * 2005-05-24 2007-05-03 Glycoscience Laboratories, Inc. Pharmaceutical agent containing hyaluronan as an active ingredient
CA2560844C (en) * 2005-09-26 2011-05-17 Glycoscience Laboratories, Inc. Pharmaceutical agent containing hyaluronan as an active ingredient
JP2009091248A (ja) * 2006-01-17 2009-04-30 Toshitsu Kagaku Kenkyusho:Kk 外傷性神経障害および／または運動機能障害の治療薬
BRPI0621470A2 (pt) 2006-12-05 2011-12-13 Glycoscience Lab Inc agente terapêutico para artrite degenerativa
FR2927255B1 (fr) * 2008-02-07 2011-08-12 Keysan Consulting Produits injectables biocompatibles a liberation de zinc et/ou de sel de saccharide sous forme de zinc et leurs utilisations.
US8462765B2 (en) * 2008-08-20 2013-06-11 Qualcomm Incorporated Method and apparatus to perform ranging operations for wireless stations
JP5587637B2 (ja) * 2009-04-10 2014-09-10 生化学工業株式会社 マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤及びその用途
HUP0900717A3 (en) 2009-11-18 2012-02-28 Richter Gedeon Nyrt Pharmaceutical composition for urological use containing zinc hyaluronate
US8398611B2 (en) 2010-12-28 2013-03-19 Depuy Mitek, Inc. Compositions and methods for treating joints
US8524662B2 (en) 2010-12-28 2013-09-03 Depuy Mitek, Llc Compositions and methods for treating joints
US8455436B2 (en) 2010-12-28 2013-06-04 Depuy Mitek, Llc Compositions and methods for treating joints
US8623839B2 (en) 2011-06-30 2014-01-07 Depuy Mitek, Llc Compositions and methods for stabilized polysaccharide formulations
ES2665254T3 (es) * 2011-07-12 2018-04-25 Holy Stone Healthcare Co., Ltd. Composiciones que comprenden ácido hialurónico para tratamiento y prevención de enfermedades relacionadas con las mucosas
US9682099B2 (en) 2015-01-20 2017-06-20 DePuy Synthes Products, Inc. Compositions and methods for treating joints

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4746504A (en) * 1986-03-14 1988-05-24 Bio-Technology General Corp. Heavy metal salts of hyaluronic acid and their use as antimicrobial agents
CA1291123C (en) 1986-03-14 1991-10-22 Abraham Nimrod Heavy metal salts of hyaluronic acid useful as antimicrobial agents
CA1327354C (en) * 1987-03-19 1994-03-01 David Cullis-Hill Anti-inflamatory compounds and compositions
AU616502B2 (en) * 1988-04-22 1991-10-31 Medvet Science Pty. Ltd. Treatment of inflammatory disorders in humans
HU203372B (en) 1989-02-24 1991-07-29 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing hyaluronic associates and pharmaceutical compositions and cosmetics comprising such active ingredient
CZ202591A3 (cs) * 1991-07-02 1993-01-13 Hypro Vyzkum Prostředek pro prevenci dekubitft a topickou terapii kožních lézt
US5744442A (en) * 1992-08-26 1998-04-28 Bristol Meyers Squibb Company Regulation of cellular invasiveness
IT1281877B1 (it) * 1995-05-10 1998-03-03 Fidia Advanced Biopolymers Srl Sali di metalli pesanti di succinil derivati dell'acido ialuronico e loro impiego come potenziali agenti terapeutici
IT1288290B1 (it) 1996-06-21 1998-09-11 Fidia Spa In Amministrazione S Acido ialuronico autoreticolato e relative composizioni farmaceutiche per il trattamento delle artropatie
EP0834319A1 (en) * 1996-10-07 1998-04-08 Kartar Dr. Lalvani Mineral and vitamin combinations in arthritic pain

Also Published As

Publication number Publication date
PL200848B1 (pl) 2009-02-27
CY1109773T1 (el) 2014-09-10
EP1166788B8 (en) 2010-06-16
CA2364451A1 (en) 2000-09-14
UA72913C2 (en) 2005-05-16
DK1166788T3 (da) 2010-08-23
SK287223B6 (sk) 2010-03-08
WO2000053194A1 (fr) 2000-09-14
DE60044341D1 (de) 2010-06-17
PL350289A1 (en) 2002-12-02
EE200100478A (et) 2003-02-17
EP1166788A4 (en) 2007-10-10
ES2344677T3 (es) 2010-09-03
CN1343122A (zh) 2002-04-03
BG105885A (en) 2002-06-28
KR20010108343A (ko) 2001-12-07
EA200100963A1 (ru) 2002-02-28
BG65681B1 (bg) 2009-06-30
EP1166788B1 (en) 2010-05-05
PT1166788E (pt) 2010-06-25
EP1166788A1 (en) 2002-01-02
CA2364451C (en) 2011-08-02
CZ20013110A3 (cs) 2002-01-16
CN1165315C (zh) 2004-09-08
CZ301736B6 (cs) 2010-06-09
KR100728096B1 (ko) 2007-06-14
ATE466584T1 (de) 2010-05-15
EE04660B1 (et) 2006-08-15
AU2942500A (en) 2000-09-28
JP2003089647A (ja) 2003-03-28
EA005010B1 (ru) 2004-10-28
US6608043B1 (en) 2003-08-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK12502001A3 (sk) Prostriedok na liečbu artritídy
JP2806454B2 (ja) 脈管形成阻止剤
JP6113424B2 (ja) 安定化された多糖の処方のための組成物及び方法
AU2006220034B2 (en) Amide derivatives of hyaluronic acid in osteoarthrosis
MXPA00009159A (es) Formulaciones de dextrano y metodo para el tratamiento de desordenes inflamatorios de articulaciones.
NZ514827A (en) A pharmaceutical formulation comprising a low molecular weight thrombin inhibitor and its prodrug
US6653294B2 (en) Use of chitinous materials for inhibiting cellular nitric oxide production
EP1444983B1 (en) Agents for treating inflammatory bowel diseases
US20110288048A1 (en) Promoter for hard tissue formation
JP3751202B2 (ja) 関節性疾患治療剤
EP1127574A1 (en) Use of chitinous materials for inhibiting cellular nitric oxide production
JP4607264B2 (ja) ヒアルロン酸を有効成分とする異所性石灰化抑制剤
EP2318014B1 (en) New composition for treating autoimmune disorders
Hussein et al. HISTOLOGICAL AND HISTOMORPHOMETRIC EVALUATION OF THE SYSTEMIC METFORMIN ADMINISTRATION ON BONE HEALING IN RABBITS.

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Expiry date: 20200310