SE526982C2

SE526982C2 - One-layer polymer matrix film comprising lactic acid producing bacteria, preparation and use thereof

Info

Publication number: SE526982C2
Application number: SE0301552A
Authority: SE
Inventors: Ulrika Husmark; Ingrid Gustafson
Original assignee: Sca Hygiene Prod Ab
Priority date: 2003-05-27
Filing date: 2003-05-27
Publication date: 2005-11-29
Also published as: CN100382851C; MXPA05011548A; WO2004105822A1; RU2352627C2; SE0301552D0; AU2004243133A1; RU2005136871A; EP1651284A1; CA2523977A1; AU2004243133B2; SE0301552L; JP2007502900A; CN1795018A; BRPI0410738A

Abstract

The present invention relates to film-shaped polymer matrixes comprising lactic acid producing bacteria that are dissolved when exposed to wet conditions. The film-shaped polymer matrixes according to the present invention protect bacterial cells from moisture thereby increasing bacterial survival during transport and stor-age. The film-shaped polymer matrix also results in a high transfer of bacterial cells to the skin of a subject.

Description

25 30 526 982 2 la floran och lämnar individen känslig för mikrobiala infektioner som orsakar vaginit, urininvägsinfektioner och vanliga hudinfektioner. Mikroorganismer vanligen associerade med dessa slag av infektioner tillhör släktena Escherichia, Enterococcus, Pseudomonas, Proteus, Klebsiella, Streptococcus, Staphylococcus, Gardnerella och Candída. Kvinnor har en särskild risk beroende på deras kortare avstånd mellan anus och det urogenitala området; speciellt yngre kvinnor har en högre risk, som ännu inte har en väl utvecklad mikroﬂora i det urogenitala området och äldre kvinnor, som inte längre har en skyddande ﬂora. 25 30 526 982 2 la flora and leaves the individual susceptible to microbial infections that cause vaginitis, urinary tract infections and common skin infections. Microorganisms commonly associated with these types of infections belong to the genera Escherichia, Enterococcus, Pseudomonas, Proteus, Klebsiella, Streptococcus, Staphylococcus, Gardnerella and Candida. Women are at particular risk due to their shorter distance between the anus and the urogenital area; especially younger women have a higher risk, who do not yet have a well-developed micro ﬂ ora in the urogenital area and older women, who no longer have a protective ﬂ ora.

Ett sätt att reducera problemen med infektionsslagen beskrivna ovan är att ha en god per- sonlig hygien. Överdriven användning av rengöringsmedel minskar emellertid inte bara mängden av skadliga mikrober, utan kan skada den fördelaktiga mikrobiala floran, och återigen gör den känslig för patogena arter som kan kolonisera och orsaka infektioner.One way to reduce the problems with the types of infections described above is to have good personal hygiene. However, excessive use of detergents not only reduces the amount of harmful microbes, but can damage the beneficial microbial flora, and again make it susceptible to pathogenic species that can colonize and cause infections.

Altemativt har administrering av mjölksyraproducerande bakterier till det urogenitala området och huden för att konkurrera ut patogena arter och underlätta återupprättande och bibehållande av en fördelaktig mikrobial ﬂora i dessa områden, visat sig vara ett framgångsrikt sätt för att behandla och förhindra mikrobiala infektioner.Alternatively, the administration of lactic acid-producing bacteria to the urogenital area and the skin to compete with pathogenic species and facilitate the restoration and maintenance of a beneficial microbial organ in these areas has been shown to be a successful means of treating and preventing microbial infections.

Det har föreslagits att mj ölksyraproducerande bakterier kan överföras via absorberande produkter, såsom blöjor, sanitetsbindor, trosskydd och tamponger, som beskrivs i t ex WO92/ 13577, W097/O2846, WO99/ 17813, WO99/45099 och WO00/3 5502.It has been suggested that lactic acid producing bacteria may be transmitted via absorbent products, such as diapers, sanitary napkins, pantiliners and tampons, as described in, for example, WO92 / 13577, WO97 / O2846, WO99 / 17813, WO99 / 45099 and WO00 / 3,5502.

Ett huvudproblem med att tillhandahålla produkter avsedda för att användas för överfö- ring av mjölksyraproducerande bakterier, är att bakterierna måste bibehålla livsduglighet under transport och lagring av produkterna. Mjölksyraproducerande bakterier förlorar snabbt livsduglighet under fuktiga förhållanden, och det är därför viktigt att bakterierna inte utsätts för fukt. Ett sätt att delvis övervinna dessa problem i absorberande produkter tillhandahållna med mjölksyraproducerande bakterier har varit att produktema tillförs bakterierna, produktema torkas för att ta bort det mesta av fukten i dem och produkten tillhandahålles i fuktogenomträngliga förpackningar (W099/178 13). 10 15 20 25 30 526 982 3 Ett alternativt sätt att skydda bakterierna mot fukt har varit att sprida bakteriema i en hyd- rofob substans (se t ex US 4 518 696; WO92/ 13577; WO02/28446) som beroende på dess hydrofoba karaktär kommer att förhindra fukt att nå de inbäddade bakteriecellerna.A major problem with providing products intended for use in the transfer of lactic acid-producing bacteria is that the bacteria must maintain viability during transport and storage of the products. Lactic acid-producing bacteria quickly lose viability under humid conditions, and it is therefore important that the bacteria are not exposed to moisture. One way to partially overcome these problems in absorbent products provided with lactic acid producing bacteria has been to add the products to the bacteria, the products are dried to remove most of the moisture in them and the product is provided in moisture impermeable packages (WO99 / 178 13). An alternative way of protecting the bacteria from moisture has been to disperse the bacteria in a hydrophobic substance (see for example US 4,518,696; WO92 / 13577; WO02 / 28446) which due to its hydrophobic nature will prevent moisture from reaching the embedded bacterial cells.

Emellertid finns det fortfarande ett behov av att utveckla alternativa sätt av att skydda mjölksyraproducerande bakterier från fukt som är lämplig för den avsedda administratio- nen av bakterierna till en patient och kan lagras under långa tidsperioder utan förlust av bakteriecellemas livsduglighet, och dessutom tillåta effektiv överföring av de mjölksyra- producerande bakterierna till användaren. Dessutom finns det fortfarande ett behov av att utveckla framställningsförfaranden som är effektiva och mindre dyra.However, there is still a need to develop alternative ways of protecting lactic acid producing bacteria from moisture that are suitable for the intended administration of the bacteria to a patient and can be stored for long periods of time without losing the viability of the bacterial cells, and also allow efficient transfer of the lactic acid-producing bacteria to the user. In addition, there is still a need to develop manufacturing methods that are efficient and less expensive.

Sammanfattning av uppfinningen Uppﬁnnarna har överraskande funnit ett alternativt sätt att skydda mjölksyraproduceran- de bakterieceller från fukt, därigenom ökande bakteriell överlevnad under transport och lagring. Den presenterade lösningen resulterar också i en hög överföring av bakterieceller till patientens hud. Enligt föreliggande uppfinning bäddas bakteriecellerna in i en ﬁlm- formad polymerrnatris som skyddar bakterierna från fukt och därigenom öka deras över- levnad. Uppfinningen avser också ett forfarande för att framställa en sådan ﬁlmformad polymermatris innefattande mjölksyraproducerande bakterier och produkter innefattande en sådan ﬁlmformad polymennatris innefattande mj ölksyraproducerande bakterier.Summary of the Invention The inventors have surprisingly found an alternative way of protecting lactic acid-producing bacterial cells from moisture, thereby increasing bacterial survival during transport and storage. The solution presented also results in a high transfer of bacterial cells to the patient's skin. According to the present invention, the bacterial cells are embedded in an mlm-shaped polymer matrix which protects the bacteria from moisture and thereby increase their survival. The invention also relates to a process for producing such a non-molded polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria and products comprising such a non-shaped polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria.

Kort beskrivning av ﬁger Fig. 1 skildrar ett illustrativt exempel av en absorberande produkt, såsom en sanitetsbin- da, blöja, trosskydd, inkontinensskydd och liknande innefattande en ﬁlmforrnad poly- merrnatris enligt föreliggande uppfmning.Brief Description of Figure 1 Fig. 1 depicts an illustrative example of an absorbent product, such as a sanitary napkin, diaper, panty liner, incontinence guard and the like comprising a molded polymer matrix of the present invention.

Fig. 2 visar ett tvärsnitt av den absorberande produkten skildrad i Fig. l uteﬂer linjen Il-II i Fig. l. 10 15 20 25 30 526 982 4 Fig. 3 skildrar en schematisk illustration av en tampong innefattande en ﬁlmforrnad po- lymermatris enligt föreliggande uppﬁnning.Fig. 2 shows a cross section of the absorbent product depicted in Fig. 1 along the line II-II in Fig. 1. Fig. 3 depicts a schematic illustration of a tampon comprising an elongated polymer matrix according to present invention.

Fig. 4 visar ett tvärsnitt av den absorberande produkten skildrad i Fig. 3 utmed linjen IV- IV i Fig. 3.Fig. 4 shows a cross section of the absorbent product depicted in Fig. 3 along the line IV-IV in Fig. 3.

Fig. 5 visar överlevnaden av mj ölksyraproducerande bakterier i ﬁlmformade polymerrna- triser enligt föreliggande uppfinning under långtidslagring.Fig. 5 shows the survival of lactic acid-producing bacteria in elm-shaped polymer matrixes of the present invention during long-term storage.

Detaljerad beskrivning av uppﬁnningen Föreliggande uppfinning berör problemet med att bibehålla bakteriell livsduglighet i pro- dukter innefattande mj ölksyraproducerande bakterier från tiden för framställning till an- vändning av produkten och att erhålla en tillfredsställande överföring av bakteriema från produkten till användaren. En mycket viktig faktor för att öka bakteriell överlevnad under lagring är att bakterierna måste skyddas från ﬁikt. Uppﬁnnama har överraskande funnit att inbäddning av de mjölksyraproducerande bakterierna i en filmformad polymermatris resulterar i en mycket ökad överlevnad av bakteriecellema under lagring.Detailed Description of the Invention The present invention addresses the problem of maintaining bacterial viability in products comprising lactic acid producing bacteria from the time of manufacture to use of the product and of obtaining a satisfactory transfer of the bacteria from the product to the user. A very important factor in increasing bacterial survival during storage is that the bacteria must be protected from ﬁ ikt. The inventors have surprisingly found that embedding the lactic acid-producing bacteria in a film-shaped polymer matrix results in a much increased survival of the bacterial cells during storage.

Polymerer lämpliga för den ﬁlmformande polymermatrisen skyddar bakteriecellerna från fukt under lagring, men löses i kroppsvätskor och frigör därför bakteriecellerna när de utsätts för våta eller ﬁiktiga förhållanden. Den filmformande polymerrnatrisen innefat- tande mjölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppfinning är sammansatt av åtminstone en polymer som är giﬁfri och icke irriterande för användarens hud och slem- hinnor och åtminstone en mj ölksyraproducerande bakteriell stam. Polymerer lämpliga för föreliggande uppfinning inkluderar naturliga hydroﬁla polymerer, såsom polysackarider och derivat därav, såsom stärkelse och cellulosa (inkluderande deras derivat), proteiner, hydroﬁla polymerer, såsom syntetiska hydrofila polymerer, såsom akrylatbaserade poly- merer, polyetrar, såsom polyetenoxid, polyuretaner, polyamider, polyakrylnitril, vinylba- serade polymerer, såsom polyvinylpyrrolidon och polyvinylalkohol etc. Föredragna po- lymerer för föreliggande uppfinning inkluderar, men är inte begränsade till, polyvinylal- 10 15 20 25 526 982 s kohol, polyetylenoxid, polyvinylpyrrolidon och stärkelse. Polymererna bildar en ﬁlrn- fonnad matris som bäddar in bakterierna och därigenom skyddar dem från fukt. Polyme- rema kan användas ensamma eller i olika kombinationer.Polymers suitable for the film-forming polymer matrix protect the bacterial cells from moisture during storage, but dissolve in body fluids and therefore release the bacterial cells when exposed to wet or icy conditions. The film-forming polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria of the present invention is composed of at least one polymer which is free and non-irritating to the skin and mucous membranes of the user and at least one lactic acid producing bacterial strain. Polymers suitable for the present invention include natural hydro-polymeric polymers, such as polysaccharides and derivatives thereof, such as starch and cellulose (including their derivatives), proteins, hydro-polymeric polymers, such as synthetic hydrophilic polymers, such as acrylate-based polymers, polyethers, such as polyethylene oxide, polyurethanes, polyamides , polyacrylonitrile, vinyl-based polymers such as polyvinylpyrrolidone and polyvinyl alcohol, etc. Preferred polymers for the present invention include, but are not limited to, polyvinylalcohol, polyethylene oxide, polyvinylpyrrolidone, and starch. The polymers form a well-formed matrix that embeds the bacteria and thereby protects them from moisture. The polymers can be used alone or in various combinations.

Den ﬁlmforrnade polymermatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppfinning kan också inkludera ytterligare komponenter. Exempel på såda- na komponenter inkluderar, men är inte begränsade till, medel som skyddar bakterierna under framställningen av polymerﬁlmen, såsom kolhydrater, såsom maltos, sackaros, trehalos, laktos, glukos och fruktos, proteiner, såsom skummjölk och albumin, aminosy- ror, såsom Na-glutamat, polyoler, såsom xylitol, mannitol och sorbitol, och antioxidanter, såsom Na-askorbat. Majoriteten av dessa medel kan också agera som näringsämnen för bakteriell förökning då polymerﬁlmen löses upp. Ytterligare komponenter exempliﬁeras också genom mjukgöringsmedel som kan tillsättas till en polymerﬁlrn innefattande stär- kelse, såsom ﬂervärda alkoholer, såsom glycerol, polyoler, sorbitol och polyvinylalkoho- ler, sackarosester, såsom sackarosstearat, fettsyror, såsom palmitinsyra, lipider baserade på förestrade fettsyror, såsom monoglycerider, diglycerider och triglycerider, vaxer och aminoalkoholer, såsom trietanolamin och N-metyl-dietanolamin, och enzymer, såsom amylas.The molded polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria of the present invention may also include additional components. Examples of such components include, but are not limited to, agents that protect the bacteria during the production of the polymer, such as carbohydrates, such as maltose, sucrose, trehalose, lactose, glucose and fructose, proteins, such as skim milk and albumin, amino acids, such as Na-glutamate, polyols such as xylitol, mannitol and sorbitol, and antioxidants such as Na-ascorbate. The majority of these agents can also act as nutrients for bacterial propagation when the polymer is dissolved. Additional components are also exemplified by plasticizers which may be added to a polymer containing starch, such as essential alcohols, such as glycerol, polyols, sorbitol and polyvinyl alcohols, sucrose esters, such as sucrose stearate, fatty acids, such as palmitic acid, lipids and mono-based lipids; , diglycerides and triglycerides, waxes and amino alcohols such as triethanolamine and N-methyl-diethanolamine, and enzymes such as amylase.

Koncentrationen av polymerlösningen är företrädesvis mellan 0, 1- 10 vikt-%, mer före- draget 0,5-7 vikt-%, mest föredraget 1-2 vikt-%. Tjockleken av den ﬁlmfonnade poly- mermatrisen innefattande mj ölksyraproducerande bakterier är företrädesvis 50 pm-S mm, mer föredraget 100 um-l mm och mest föredraget 500 pm-l mm.The concentration of the polymer solution is preferably between 0, 1-10% by weight, more preferably 0.5-7% by weight, most preferably 1-2% by weight. The thickness of the molded polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria is preferably 50 μm-1 mm, more preferably 100 μm-1 mm and most preferably 500 μm-1 mm.

För att öka den bakteriella överlevnaden är vattenaktiviteten av den filmfonnade poly- mermatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier 0,30 eller lägre, företrädesvis 0,25 eller lägre och mest föredraget 0,20 eller lägre under åtminstone 3 månaders lagring vid 23°C och 50% relativ fuktighet. 10 15 20 25 30 526 982 6 Antalet mj ölksyraproducerande bakterier i den ﬁlrnfonnade polymerrnatrisen enligt före- liggande uppfinning är företrädesvis 107-10” CFU/g ﬁlm, mer föredraget 109-10” CFU/ g ﬁlm.To increase bacterial survival, the water activity of the film-formed polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria is 0.30 or lower, preferably 0.25 or lower and most preferably 0.20 or lower during at least 3 months of storage at 23 ° C and 50% relative humidity. The number of lactic acid-producing bacteria in the formed polymer matrix according to the present invention is preferably 107-10 "CFU / g lm, more preferably 109-10" CFU / g ﬁ lm.

För att den ﬁlmformade polymermatrisen skall tillåta tillräcklig överföring av bakterier löses den filmformade polymermatrisen företrädesvis så snabbt som möjligt när den ut- sätts för fukt eller våta förhållanden och i varje fall inom 6 timmar, företrädesvis inom 4 timmar.In order for the film-shaped polymer matrix to allow sufficient transfer of bacteria, the film-shaped polymer matrix is preferably dissolved as quickly as possible when exposed to moisture or wet conditions and in any case within 6 hours, preferably within 4 hours.

Mj ölksyraproducerande bakterier väljs för föreliggande uppfinning beroende på deras positiva effekt för att förhindra och behandla mikrobiell infektion i det urogenitala områ- det och pâ huden. Bakteriema isoleras företrädesvis från den naturliga ﬂoran hos en ﬁisk person, företrädesvis isoleras bakterierna från huden eller det urogenitala området. Före- dragna "mjölksyraproducerande bakterier" för syftet enligt föreliggande uppﬁnning in- kluderar bakterier ﬁån släktet Lactobacillus, Lactococcus och Pedíococcus. Företrädesvis är de valda bakteriema från artema Lactococcus lactis, Lactobacillus acídophílus, Lacto- bacillus curvatus eller Lactobacillus plantarum. Mer föredraget väljs den bakteriella stammen från Lactobacillus plantarum. Ännu mer föredraget är den mj ölksyraproduce- rande bakterien Lactobacillus plantarum 931 (depositionsnr. (DSMZ): 11918). De mjölk- syraproducerande bakteriema kan tillhandahållas ensamma eller i blandningar inne- hållande åtminstone två bakteriella stammar.Lactic acid producing bacteria are selected for the present invention due to their positive effect in preventing and treating microbial infection in the urogenital area and on the skin. The bacteria are preferably isolated from the natural organ of a human, preferably the bacteria are isolated from the skin or the urogenital area. Preferred "lactic acid producing bacteria" for the purpose of the present invention include bacteria of the genus Lactobacillus, Lactococcus and Pedíococcus. Preferably, the selected bacteria are from the species Lactococcus lactis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus curvatus or Lactobacillus plantarum. More preferably, the bacterial strain from Lactobacillus plantarum is selected. Even more preferred is the lactic acid-producing bacterium Lactobacillus plantarum 931 (Deposit No. (DSMZ): 11918). The lactic acid producing bacteria can be provided alone or in mixtures containing at least two bacterial strains.

För att förhindra vattenånga att tränga in i den hydroﬁla fïlmformade polymennatrisen, och därigenom störa den bakteriella överlevnaden under lagring, lamineras den ﬁlmfor- made polymermatrisen innefattande mj ölksyraproducerande bakterier företrädesvis med ett vattenånga-barriärmaterial. Därigenom ökas överlevnaden av de bakteriella cellerna ytterligare under lagring. Laminering av en ﬁlmformad polymerrnatris innefattande mjölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppﬁnning ger också en mekaniskt starkare ﬁlm, som kan tåla hårdare behandling under transport och lagring. Den ﬁlmfor- made polymerrnatrisen innefattande mj ölksyraproducerande bakterier kan lamineras på en eller båda sidor. I fallet då den ﬁlmforrnade polymerrnatrisen lamineras på båda sidor, 10 15 20 25 30 526 982 7 behöver inte samma laminatkomposition användas på båda sidor. Exempel på material lämpliga för att användas för ett laminat inkluderar, men är inte begränsade till, vaxer, vaxpapper, aluminiumfolie, polyetenfilmer, etylensampolymer och samextruderade ﬁl- mer, såsom Suranex (Dow Chemical Company, Reinmünster, Tyskland). Larnineringen kan utföras med användning av samextruderingsteknik eller genom att köra de ﬁlmfor- made polymermatriserna genom att rulla lätt uppvärmda cylindrar. Eventuellt kan svaga vidhäftningsmedel användas för att binda den ﬁlmformade polyrneren och laminatet samman. Ultraljudstekniker kan också användas för att binda den ﬁlmformade polymer- matrisen innefattande mj ölksyraproducerande bakterier och laminatet samman. Lämpliga laminatmaterial har en vattenângaöverföringshastighet av, mätt enligt ASTME 398-83 vid 37,8°C (l00°F) och 90% relativ ﬁlktighet (RH), 10 g/m2/24 h eller lägre, mer före-- draget 5 g/m2/24 h eller lägre, mest föredraget 2 g/m2/24 h eller lägre. Vattenångabarri- ärmaterialet skall tas bort före användning av produkten innefattande den ﬁlmformade polymerrnatrisen.To prevent water vapor from penetrating the hydrophilic film-shaped polymer matrix, thereby interfering with bacterial survival during storage, the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria is laminated preferably with a water vapor barrier material. This further increases the survival of the bacterial cells during storage. Lamination of an elm-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria according to the present invention also gives a mechanically stronger elm, which can withstand harder treatment during transport and storage. The deformed polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria can be laminated on one or both sides. In the case where the molded polymer matrix is laminated on both sides, the same laminate composition need not be used on both sides. Examples of materials suitable for use with a laminate include, but are not limited to, waxes, wax papers, aluminum foil, polyethylene films, ethylene copolymer, and coextruded films, such as Suranex (Dow Chemical Company, Reinmünster, Germany). The lamination can be carried out using co-extrusion technology or by running the deformed polymer matrices by rolling slightly heated cylinders. Optionally, weak adhesives can be used to bond the film-shaped polymer and the laminate together. Ultrasound techniques can also be used to bond the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria and the laminate together. Suitable laminate materials have a water vapor transfer rate of, measured according to ASTME 398-83 at 37.8 ° C (100 ° F) and 90% relative similarity (RH), 10 g / m2 / 24 h or less, more preferably 5 g / m2 / 24 h or lower, most preferably 2 g / m2 / 24 h or lower. The water vapor barrier material must be removed before use of the product comprising the film-shaped polymer matrix.

Frarnställningsförfaranden för att framställa filmformade polymermatriser innefattande mj ölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppﬁnning inkluderar att framställa en vattenhaltig lösning av (a) polymer(-er) genom att lösa polymererna i vatten, disperge- ra bakteriema i den vattenhaltiga lösningen av (a) polymer(-er) och därefter torka disper- sionen av löst polymer och mjölksyraproducerande bakterier på en inert yta vid en tempe- ratur under 50°C. Eventuellt kan ytterligare komponenter tillsättas till polymerlösningen, antingen före eller efter dispersion av bakterierna i den vattenhaltiga lösningen av poly- mer(-er). Den vattenhaltiga lösningen av polymer kan innefatta en eller flera polymerer.Preparation methods for preparing film-shaped polymer matrices comprising lactic acid producing bacteria of the present invention include preparing an aqueous solution of (a) polymer (s) by dissolving the polymers in water, dispersing the bacteria in the aqueous solution of (a) polymer (-). er) and then dry the dispersion of dissolved polymer and lactic acid producing bacteria on an inert surface at a temperature below 50 ° C. Optionally, additional components may be added to the polymer solution, either before or after dispersion of the bacteria in the aqueous solution of polymer (s). The aqueous solution of polymer may comprise one or more polymers.

Polymerlösningen innefattande den mjölksyraproducerande bakteriema gjuts typiskt på en inert yta, som kan vara ett laminatmaterial eller en annan inert yta, såsom ytan av en hygienprodukt, med användning av ett strykknivsset till en förbestämd bredd. De gjutna ﬁlmformade polymermatrisema stelnar då lösningsmedlet snabbt indunstar. Indunstning- en kan äga rum i omgivande luft, en ugn, på en uppvärmd vals, genom konduktiva tork- ningsmedel eller på en yta utsatt för IR-strålning. Föredragna temperaturintervall under indunstning när förfaranden med uppvärmd vals eller konvektiva torkningsmetoden an- vänds är 5-50°C, mer föredraget 20-40°C och mest föredraget 30-37°C. När IR-strålning 10 15 20 25 30 526 982 s används för torkning kan något högre temperaturer nås utan skadliga effekter på den bak- teriella överlevnaden, beroende på de korta torkningstider som behövs. Typiskt kan tork- ningstider i storleksordningen av sekunder till minuter och torkningstemperaturer upp till 65 °C användas för IR-torknign. Därför kan eventuellt den ﬁlmformade polymerrnatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier lamineras såsom beskrivs ovan.The polymer solution comprising the lactic acid producing bacteria is typically cast on an inert surface, which may be a laminate material or other inert surface, such as the surface of a sanitary product, using an iron knife set to a predetermined width. The molded film-shaped polymer matrices solidify as the solvent evaporates rapidly. The evaporation can take place in ambient air, in an oven, on a heated roller, by conductive desiccants or on a surface exposed to IR radiation. Preferred temperature ranges during evaporation when using heated roll or convective drying methods are 5-50 ° C, more preferably 20-40 ° C and most preferably 30-37 ° C. When IR radiation 10 15 20 25 30 526 982 s is used for drying, slightly higher temperatures can be reached without detrimental effects on bacterial survival, depending on the short drying times required. Typically, drying times on the order of seconds to minutes and drying temperatures up to 65 ° C can be used for IR drying. Therefore, optionally, the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria may be laminated as described above.

De speciﬁka tillväxtförhållandena, skördeförhållanden och lämpliga ytterligare kompo- nenter för de mjölksyraproducerande bakterierna måste optimeras för varje specifik stam för att försäkra en hög överlevnad av bakteriema under framställning och lagring av den ﬁlmformade polymerrnatrisen. Fackmannen är bekant med sådana optimeringar. De mjölksyraproducerande bakterierna tillsatta till polymerlösningen kan antingen vara nyli- gen framställda eller en frusen eller torkad preparering. Företrädesvis används nyfram- ställda bakteriepreparationer för föreliggande uppfinning.The specific growth conditions, harvesting conditions and suitable additional components for the lactic acid producing bacteria must be optimized for each specific strain to ensure a high survival of the bacteria during production and storage of the uniform polymer matrix. Those skilled in the art are familiar with such optimizations. The lactic acid producing bacteria added to the polymer solution can be either freshly prepared or a frozen or dried preparation. Preferably, freshly prepared bacterial preparations are used for the present invention.

Dispersionen av polymer och mjölksyraproducerande bakterier som kan användas för att framställa en ﬁlmformad polymerrnatris enligt föreliggande uppfinning kan också direkt gjutas eller sprejas på ett material, eller ett material kan doppas i dispersionen av polymer och mjölksyraproducerande bakterier, som efter torkning är en del av en produkt, såsom en hygienprodukt.The dispersion of polymer and lactic acid-producing bacteria which can be used to prepare a molded polymer matrix according to the present invention can also be directly cast or sprayed on a material, or a material can be dipped in the dispersion of polymer and lactic acid-producing bacteria, which after drying is part of a product , such as a hygiene product.

Det ﬁnns andra förfaranden tillgängliga för bildningen av ﬁlmfonnade polymermatriser innefattande mjölksyraproducerande bakterier, d v s kalandrering och extruderingar som kan användas så länge de drivs vid temperaturer som inte är skadliga för bakteriema.There are other methods available for the formation of formed polymer matrices comprising lactic acid producing bacteria, i.e. calendering and extrusion which can be used as long as they are operated at temperatures which are not harmful to the bacteria.

När stärkelse används för framställning av den ﬁlrnforrnade polymermatrisen mäste stär- kelsen gelatiniseras före användning. Ett sätt på vilket detta kan utföras är genom att värma en suspension av stärkelsen (kom eller granuler) i vatten vid en temperatur av un- gefär 90-l00°C i 30-60 minuter. Före tillsats av bakteriema till den gelatinerade stärkel- sen, kyls suspensionen till 37°C eller lägre. 10 15 20 25 30 526 982 9 Den ﬁlmformade polymermatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppfinning tillsätts företrädesvis till hygienprodukter, såsom hygientissue, inkontinensskydd, blöja, trosskydd, tamponger, sanitetsbindor etc, i vilka den filmforma- de polymermatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier, när de utsätts för fukt och våta förhållanden, resulterar i upplösning av den filmforrnade polymermatrisen och överför de mjölksyraproducerande bakterierna till huden och/eller det urogenitala oinrå- det.When starch is used to prepare the formed polymer matrix, the starch must be gelatinized before use. One way in which this can be done is by heating a suspension of the starch (granules or granules) in water at a temperature of about 90-100 ° C for 30-60 minutes. Before adding the bacteria to the gelatinized starch, cool the suspension to 37 ° C or lower. The film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria of the present invention is preferably added to hygiene products, such as hygiene tissue, incontinence guard, diaper, panty liners, tampons, sanitary napkins, etc., in which the film-shaped polymer matrix comprising the lactic acid-producing bacterial milk for moisture and wet conditions, results in dissolution of the film-shaped polymer matrix and transfers the lactic acid-producing bacteria to the skin and / or the urogenital tract.

Med "hygientissue" menas någon användning för att torka hud, t ex, som tvättlapp, lapp, handduk, servett, våtservett och liknande. Hygientissuen tillhandahållen kan vara sam- mansatt av en matris innefattande några naturliga eller syntetiska fibrer, såsom rayon, cellulosa, regenererad cellulosa, polyester, polyoleﬁnﬁbrer, textil och liknande, eller skum, nonwoven, filt eller vadd, eller kombinationer därav. Den filmformade polymer- matrisen innefattande de mjölksyraproducerande bakteriema appliceras till hygientissuen genom att doppa tissuen i en dispersion av polymer och mjölksyraproducerande bakterier som kan användas för att framställa en filmformad polymerrnatris före torkning av hygi- entissuen.By "hygienic tissue" is meant any use for drying skin, for example, as a washcloth, patch, towel, napkin, wet wipe and the like. The hygienic tissue provided may be composed of a matrix comprising any natural or synthetic fibers, such as rayon, cellulose, regenerated cellulose, polyester, polyolefins, textiles and the like, or foam, nonwoven, felt or wadding, or combinations thereof. The film-shaped polymer matrix comprising the lactic acid-producing bacteria is applied to the hygienic tissue by dipping the tissue in a dispersion of polymer and lactic acid-producing bacteria which can be used to produce a film-shaped polymer matrix before drying the hygienic tissue.

Den ﬁlmformade polymermatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppfinning är, som beskrivs ovan, speciellt lämplig för applicering till ab- sorberande produkter, såsom sanitetsbindor, trosskydd, blöjor, tamponger, inkontinens- skydd etc, eftersom dessa produkter tillhandahåller bekväma medel för att tillföra mj ölk- syraproducerande bakterier till det urogenitala området. De absorberande produkterna, enligt uppfinningen är företrädesvis sammansatta av ett vätskegenomträngligt hölj esskikt, ett vätskeogenomträngligt bottenskikt, ett absorberande lager, innefattande ett eller ﬂera lager, placerat mellan det övre lagret och bottenskiktet och eventuellt en anordning för vidhäftning. Den filmfoimade polymennatrisen enligt föreliggande uppfinning är företrä- desvis placerad på det genomsläppliga höljesskiktet, men kan också placeras inuti detta.The film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria according to the present invention is, as described above, particularly suitable for application to absorbent products, such as sanitary napkins, pantiliners, diapers, tampons, incontinence guards, etc., as these products provide convenient means of supplying milk. - acid-producing bacteria to the urogenital area. The absorbent products, according to the invention, are preferably composed of a liquid-permeable casing layer, a liquid-impermeable bottom layer, an absorbent layer, comprising one or more layers, placed between the upper layer and the bottom layer and optionally an adhesive device. The film-formed polymer matrix of the present invention is preferably placed on the permeable cover layer, but may also be placed inside it.

Altemativt kan den filmformade polymermatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppfinning tillhandahållas separat och placeras på den ab- sorberande produkten av användaren före användning. Antalet probiotiska bakterier i en 10 15 20 25 30 526 982 10 absorberande produkt enligt föreliggande uppﬁnning är 107-10” CFU/, företrädesvis 108- 10” CFU/, mest föredraget 109-10” CFU.Alternatively, the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria of the present invention may be provided separately and placed on the absorbent product by the user prior to use. The number of probiotic bacteria in an absorbent product of the present invention is 107-10 "CFU /, preferably 108-10" CFU /, most preferably 109-10 "CFU.

Nedan anges en mer detaljerad beskrivning av en absorberande produkt, såsom en sani- tetsbinda, trosskydd, blöja eller inkontinensskydd. Den absorberande produkten 1 visad i Fig. 1 och Fig. 2 (tvärsnitt av den absorberande produkten skildrad i Fig. 1 utmed linjen II-II i Fig. 1) inkluderar ett vätskegenomträngligt höljesskikt eller toppskikt 2 placerat på den sidan av den absorberande produkten som är avsedd att ligga närmast användaren vid användning. Det vätskegenomträngliga höljesskiktet 2 kommer läinpligen att bestå av ett något mjukt, hudvänligt material. Olika typer av nonwovenmaterial är exempel på lämp- liga vätskegenomträngliga material. Andra höljesskiktmaterial som kan användas är per- forerade plastﬁlrner, nät, stickade, virkade eller vävda textilier, och kombinationer och laminat av de tidigare nämnda typerna av material.Below is a more detailed description of an absorbent product, such as a sanitary napkin, panty liner, diaper or incontinence guard. The absorbent product 1 shown in Fig. 1 and Fig. 2 (cross-section of the absorbent product depicted in Fig. 1 along the line II-II in Fig. 1) includes a liquid-permeable cover layer or topsheet 2 placed on the side of the absorbent product which is intended to be closest to the user during use. The liquid-permeable cover layer 2 will suitably consist of a somewhat soft, skin-friendly material. Different types of nonwoven materials are examples of suitable liquid-permeable materials. Other cover layer materials that can be used are perforated plastic sheets, nets, knitted, crocheted or woven textiles, and combinations and laminates of the previously mentioned types of materials.

Den absorberande produkten 1 inkluderar också ett vätskeogenomträngligt höljesskikt eller bottenskikt 3, placerat på den sidan av bindan 1 som är längst bort från användaren vid användning. Det vätskeogenomträngliga höljesskiktet 3 utgörs lämpligen av en tunn plastﬁlm. Alternativt kan ett vätskegenomträngligt material användas som har gjorts oge- nomsläppligt mot vätska på något sätt. T ex kan det vätskegenomträngliga materialet be- läggas med ett lim som är ogenomsläppligt mot vätska, och det vätskegenomsläppliga lagret lamineras med ett vätskeogenomträngligt material, eller varmkalandrering av ett material som från början var vätskegenomsläppligt, för att smälta ned ytan av materialet och därmed erhålla ett vätskeogenomträngligt lager. Alternativt kan andra textilier an- vändas innefattande hydrofoba ﬁbrer och så ogenomsläppliga för att göra dem möjliga att använda som vätskebarriärlager. Det vätsikeogenomsläppliga hölj esskiktet 3 kan fördelak- tigt vara ånggenomsläppligt.The absorbent product 1 also includes a liquid impermeable cover layer or bottom layer 3, located on the side of the bandage 1 which is furthest from the user in use. The liquid-impermeable cover layer 3 is suitably made of a thin plastic film. Alternatively, a liquid-permeable material may be used which has been rendered impermeable to liquid in some way. For example, the liquid-permeable material can be coated with an adhesive that is impermeable to liquid, and the liquid-permeable layer is laminated with a liquid-impermeable material, or hot calendering of a material that was initially liquid-permeable, to melt the surface of the material and thereby obtain liquid impervious layer. Alternatively, other textiles may be used including hydrophobic fibers and so impermeable to enable them to be used as liquid barrier layers. The liquid-impermeable casing layer 3 can advantageously be vapor-permeable.

De två höljesskikten 2, 3 bildar en förenande kant 4 som skjuter utåt omkring bindans konturlinje, och de är inbördes förbundna vid denna kant. Skikten kan förenas samman med hjälp av någon lämplig konventionell teknik, såsom limning, svetsning eller sömnad. 10 15 20 25 526 982 11 Absorptionskäman 5 placerad mellan höljesskikten 2, 3 skall utgöra lagret som har för- mågan att ta emot och lagra väsentligen all vätska som kommer från användaren. Absorp- tionskäman 5 kan t ex framställas från cellulosamassa. Denna massa kan existera i rullar, balar eller skikt som är torrdeﬁbrerade och omformade i ett ﬂuffat tillstånd till en mas- samatta, i bland med en blandning av superabsorbenter, vilka är polymerer som har fór- mågan att absorbera ﬂera gånger sin egen vikt av vatten eller kroppsvätska (ﬂuid). Ex- empel på användbara material är olika typer av skummade material kända t ex från SE 9903070-2, naturliga ﬁbrer, såsom bomullsﬁbrer, torv eller liknande. Det är naturligt- vis också möjligt att använda absorberande syntetiska fibrer, eller blandningar av naturli- ga ﬁbrer och syntetiska ﬁbrer. Patentansökan SE 990307 O-2 beskriver ett komprimerat skummaterial av regenererad cellulosa, t ex viskos. Sådant skummaterial kommer före- trädesvis att ha en densitet av 0,1-2,0 g/cm3. Det absorberande materialet kan också inne- hålla andra komponenter, såsom skumstabiliseringsinedel, vätskedispersionsmedel, eller ett bindemedel, såsom termoplastﬁbrer, t ex som har värmebehandlats för att hålla korta fibrer och partiklar samman för att bilda en sammanhängande enhet.The two cover layers 2, 3 form a joining edge 4 projecting outwards around the contour line of the napkin, and they are interconnected at this edge. The layers can be joined together by any suitable conventional technique, such as gluing, welding or sewing. 10 15 20 25 526 982 11 The absorption core 5 placed between the casing layers 2, 3 shall constitute the bearing which is capable of receiving and storing substantially all liquid coming from the user. The absorption core 5 can, for example, be produced from cellulose pulp. This pulp can exist in rolls, bales or layers that are dried ﬁbrated and reshaped in an ﬂcuffed state to a pulp mat, sometimes with a mixture of superabsorbents, which are polymers that have the ability to absorb ﬂ times their own weight of water or body fluid (ﬂ uid). Examples of useful materials are different types of foamed materials known, for example from SE 9903070-2, natural fibers, such as cotton fibers, peat or the like. Of course, it is also possible to use absorbent synthetic fibers, or mixtures of natural och fibers and synthetic ﬁ fibers. Patent application SE 990307 O-2 describes a compressed foam material of regenerated cellulose, eg viscose. Such foam material will preferably have a density of 0.1-2.0 g / cm 3. The absorbent material may also contain other components, such as foam stabilizer, liquid dispersant, or a binder, such as thermoplastics, for example, which have been heat treated to hold short fibers and particles together to form a cohesive unit.

En fastsättningsanordriing 6 i formen av ett avlångt rektangulärt område av självhäftande tillhandahålles på ytan av det vätskeogenomträngliga höljesskiktet 3 som ligger längst bort från användaren vid användning. Fastsättningsanordningen 6 sträcker sig över den huvudsakliga delen av det vätskeogenomträngliga höljesskiktet 3. Uppﬁnningen är inte begränsad till fastsättningsanordningens 6 omfattning, och nämnda anordning kan ha formen av avlånga randningar, tvärgående områden, punkter, cirklar eller andra mönster och former. Inte heller är uppfinningen begränsad till användningen av enbart vidhäftan- de fastsättningsanordningar, eftersom friktionsfastsättare kan användas och andra typer av mekaniska fastsättningsanordningar, såsom fästknappar, klämmor, gördlar, byxor eller liknande kan användas när man ﬁnner det lämpligt att göra så. När en fastsättningsanord- ning används skyddas denna i allmänhet, med ett skyddande lager 9, från att vidhäfta till andra ytor före användning, vilket skulle förstöra fastsättningsanordningen. 10 15 20 25 30 526 982 12 Den ﬁlmfonnade polymerrnatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier enligt föreliggande uppﬁnning, arrangeras på eller direkt under det vätskeogenomträngliga höl- jesskiktet 2, när det används i en absorberande produkt. Företrädesvis placeras den ﬁlm- formade polymerrnatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier på ett sådant sätt att den ﬁlmformade polymerrnatrisen inte täcker hela ytan av den absorberade produkten.A fastening device 6 in the form of an elongate rectangular area of self-adhesive is provided on the surface of the liquid-impermeable cover layer 3 furthest from the user in use. The fastening device 6 extends over the main part of the liquid-impermeable cover layer 3. The invention is not limited to the extent of the fastening device 6, and said device may be in the form of elongated stripes, transverse areas, points, circles or other patterns and shapes. The invention is also not limited to the use of only adhesive fasteners, since friction fasteners can be used and other types of mechanical fasteners, such as fasteners, clamps, belts, trousers or the like can be used when it is convenient to do so. When a fastening device is used, it is generally protected, with a protective layer 9, from adhering to other surfaces before use, which would destroy the fastening device. The molded polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria of the present invention is arranged on or directly below the liquid-impermeable cover layer 2, when used in an absorbent product. Preferably, the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria is placed in such a way that the film-shaped polymer matrix does not cover the entire surface of the absorbed product.

På detta sätt stör inte den ﬁlmformade polymennatrisen innefattande mj ölksyraproduce- rande bakterier absorptionen av kroppvätskor (såsom blod, urin, sekret etc) av den absor- berande produkten. Även om den filmformade polymerrnatrisen innefattande mjölksyra- producerande bakterier löser sig med kroppsvätskor, kan den initiala absorptionen av den absorberande produkten försämras innan den filmformade polymerrnatrisen löses om hela den absorberande produkten täcks med den ﬁlmformade polymerrnatrisen. Ett sätt att lösa detta är att tillföra den absorberande artikeln en ﬁlmformad polymemiatris innefat- tande mjölksyraproducerande bakterier enligt uppfinningen som har stansats, bildande åtminstone en öppning genom vilken kroppsvätskor kan transporteras. Mer föredraget kan också en bärare i fonnen av ett nät eller löst nonwovenskikt, doppas i en dispersion av polymer och mj ölksyraproducerande bakterier som kan användas för att 'framställa en ﬁlmforrnad polymerrnatris enligt föreliggande uppﬁnning, arrangeras på eller direkt un- der det vätskegenomträngliga höljesskiktet. I Fig. l och 2 exempliferas ett sätt att placera den filmformade polymerrnatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier, vari den filmforrnade polymerrnatrisen placeras i strängar 8.In this way, the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria does not interfere with the absorption of body fluids (such as blood, urine, secretions, etc.) of the absorbent product. Although the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria dissolves with body fluids, the initial absorption of the absorbent product may deteriorate before the film-shaped polymer matrix is dissolved if the entire absorbent product is covered with the film-shaped polymer matrix. One way of solving this is to supply the absorbent article with an form-shaped polymemiatry comprising lactic acid-producing bacteria according to the invention which has been punched, forming at least one opening through which body fluids can be transported. More preferably, a carrier in the form of a mesh or loose nonwoven layer, dipped in a dispersion of polymeric and lactic acid producing bacteria which can be used to prepare a modified polymer matrix of the present invention, can be arranged on or directly below the liquid-permeable cover layer. Figs. 1 and 2 exemplify a method of placing the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria, wherein the film-shaped polymer matrix is placed in strands 8.

På ett liknande sätt som det som beskrivs ovan, kan en tampong innefattande den ﬁlm- formade polymerrnatrisen framställas. Fig. 3 och 4 (tvärsnitt av tampongen i Fig. 3 utmed linjen IV-IV) skildrar en schematisk ritning av ett exemplar av en tampong 10 innefattan- de en ﬁlmforinad polymermatris 13 enligt föreliggande uppfinning, vari den filmformade polymerrnatrisen 13 är arrangerad på hölj esskiktet 1 1. Skildrat också är den absorberande kärnan 12.In a manner similar to that described above, a tampon comprising the mlm-shaped polymer matrix can be prepared. Figs. 3 and 4 (cross-section of the tampon of Fig. 3 along the line IV-IV) depict a schematic drawing of a copy of a tampon 10 comprising a laminated polymer matrix 13 according to the present invention, wherein the film-shaped polymer matrix 13 is arranged on a casing. ess layer 1 1. Also depicted is the absorbent core 12.

Fackmarmen kan lätt använda beskrivningarna ovan av exempel på hygienprodukter in- nefattande en ﬁlmformad polymennatris enligt föreliggande uppfinning för att framställa en hygienprodukt innefattande en ﬁlmformad polymermatris enligt uppfinningen. Därför 10 15 20 25 30 *S26 982 13 är också alternativa utformningar av en sanitetsbinda, inkontinensskydd, trosskydd, blöja, tampong, hygientissue etc inkluderade i föreliggande uppﬁnning.The skilled artisan can readily use the above descriptions of examples of hygiene products including an elongated polymer matrix of the present invention to produce a hygiene product comprising an elongated polymer matrix of the invention. Therefore, alternative designs of a sanitary napkin, incontinence guard, panty liner, diaper, tampon, hygiene tissue, etc. are also included in the present invention.

Inbäddningen av mj ölksyraproducerande bakterier i en ﬁlmformad polymermatris enligt föreliggande uppﬁnning är också lämplig för ökning av överlevnad av bakterierna i far- maceutiska prepareringar och i livsmedelsindustrin.The embedding of lactic acid-producing bacteria in a film-shaped polymer matrix according to the present invention is also suitable for increasing the survival of the bacteria in pharmaceutical preparations and in the food industry.

En ﬁlmformad polymerrnatris innefattande mjölksyraproducerande bakterier enligt före- liggande uppﬁnning har ﬂera fördelar. När frystorkade bakterier eller suspensioner av bakterier tillsätts direkt till en hygienprodukt, måste produkten torkas för att ingående fuktinnehåll i produkten inte skall påverka den bakteriella överlevnaden negativt. Detta är både ett komplicerat förfarande, eﬁersom hela produkten måste torkas, men torkning av produkten kan också resultera i en sänkt initial absorption av kroppsvätskor då någon återstående fukt underlättar initial absorption. Dessutom, är ytterligare skydd från fukt under transport och lagring med vattenogenomsläpplig förpackning nödvändig för att bibehålla bakteriell överlevnad i detta fall. Denna nödvändighet att tillhandahålla hela hygienprodukten i en fuktogenomsläpplig förpackningsenhet resulterar i högre produk- tionskostnader. Som jämförelse, genom inbäddning av bakterierna i en ﬁlmformad poly- mermatris enligt föreliggande uppﬁnning undviks behovet av torkning av hygienproduk- ten och användningen av fuktogenomsläppliga förpackningsenheter, fortfarande med en resulterande hög överlevnad av bakteriecellema, även efter långvarig lagring. Använd- ningen av en ﬁlmformad polymermatris enligt föreliggande uppﬁnning lättar vidare an- vändningen av ﬁystorkade bakteriella preparationer, vilket är den mest vanliga prepara- tionsformen för bakterier för användning i hygienprodukter, men som är kostsamma och komplicerade att framställa. I stället kan suspensioner av mjölksyraproducerande bakteri- er användas direkt vid framställning av en ﬁlmformad polymerrnatris innefattande mjölk- syraproducerande bakterier som är billigare och mer praktisk.A film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria according to the present invention has its advantages. When lyophilized bacteria or suspensions of bacteria are added directly to a hygiene product, the product must be dried so that the moisture content of the product does not adversely affect bacterial survival. This is both a complicated process, as the whole product must be dried, but drying of the product can also result in a reduced initial absorption of body fluids as some residual moisture facilitates initial absorption. In addition, additional protection from moisture during transport and storage with water-impermeable packaging is necessary to maintain bacterial survival in this case. This necessity to provide the entire hygiene product in a moisture-permeable packaging unit results in higher production costs. For comparison, by embedding the bacteria in an form-shaped polymer matrix according to the present invention, the need for drying of the hygiene product and the use of moisture-permeable packaging units is avoided, still with a resulting high survival of the bacterial cells, even after long-term storage. The use of an polymer-shaped polymer matrix according to the present invention further facilitates the use of ﬁ-dried bacterial preparations, which is the most common form of preparation for bacteria for use in hygiene products, but which are expensive and complicated to manufacture. Instead, suspensions of lactic acid-producing bacteria can be used directly in the preparation of a film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria which is cheaper and more practical.

En ﬁlmforrnad polymerrnatris innefattande mj ölksyraproducerande bakterier kan också förtillverkas och senare placeras på många olika produkter, såsom hygienprodukter etc utan nâgra speciella anpassningar för olika produkter. Även framställningen av produkter 10 15 20 25 526 982 14 innefattande bakterier kräver speciella hygienkrav vid framställningsanläggningen. Kost- nader kan därför reduceras genom att framställa den ﬁlmformade polymennatrisen inne- fattande mjölksyraproducerande bakterier på en annan plats.A modified polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria can also be prefabricated and later placed on many different products, such as hygiene products, etc. without any special adaptations for different products. The production of products including bacteria also requires special hygiene requirements at the production plant. Costs can therefore be reduced by producing the formlm-shaped polymenatrix comprising lactic acid-producing bacteria in another location.

Användning av en filmformad polymerrnatris för att skydda mj ölksyraproducerande bak- terier från fukt leder till hög stabilitet vid vanliga temperaturer under transport och lag- ring, eftersom ﬁlmstrukturen i sig sj älv är mycket okänslig för temperaturvariationer. Även bakteriecellemas torrhet i den torra ﬁlmfonnade polymermatrisen gör bakterierna mer värmetoleranta.The use of a film-shaped polymer matrix to protect lactic acid-producing bacteria from moisture leads to high stability at normal temperatures during transport and storage, since the film structure itself is very insensitive to temperature variations. The dryness of the bacterial cells in the dry-formed polymer matrix also makes the bacteria more heat-tolerant.

Vidare är framställningen av en ﬁlmformad polymennatris mer mild mot de mjölksyra- producerande bakteriema, jämfört med t ex extrudering eller sprejning som ofta används när bakterierna blandas med hydrofoba substanser.Furthermore, the production of an polym-shaped polymenatrix is milder against the lactic acid-producing bacteria, compared with, for example, extrusion or spraying which is often used when the bacteria are mixed with hydrophobic substances.

Användningen av en ﬁlmfonnad polymermatris innefattande mjölksyraproducerande bakterier är också fördelaktig när det gäller effektivitet av överföring av bakterierna till huden. När den filmformade polymerrnatrisen innefattande mjölksyraproducerande bak- terier löses, kan fragment av den ﬁlmforrnade polymennatrisen överföras till huden där det löses vidare. Därigenom agerar ﬁlmfragmenten som ett medel för överföring av bak- terierna. Även användningen av en ﬁlmforrnad polymerrnatris försäkrar att bakterierna hålls i de yttre lagren av hygienprodukten, därigenom försäkrande en hög överföringshas- tighet. När den ﬁlmformade polymerrnatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakte- rier appliceras till en hygienprodukt, kan överföringshastighetema också optimeras med valet av allmänt använda ytmaterial.The use of a molded polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria is also advantageous in terms of the efficiency of transferring the bacteria to the skin. When the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria is dissolved, fragments of the deformed polymer matrix can be transferred to the skin where it is further dissolved. Thereby, the ﬁ lm fragments act as a means of transmitting the bacteria. The use of a modified polymer matrix also ensures that the bacteria are kept in the outer layers of the hygiene product, thereby ensuring a high transfer rate. When the film-shaped polymer matrix comprising lactic acid-producing bacteria is applied to a hygiene product, the transfer rates can also be optimized with the choice of commonly used surface materials.

Föreliggande uppfinning löser därför många av problemen förenade med att tillhandahål- la produkter innefattande mj ölksyraproducerande bakterier. Nedan beskrivs föreliggande uppfmning vidare med illustrativa men ej begränsande exempel. 10 15 20 25 526 982 15 Exempel 1 Framställning av en ﬁhnformad polymermatris innefattande mj ölksyraproducerande bak- terier En vattenhaltig polymerlösning med en koncentration av 0,1-10 vikt-% framställs genom att lösa polyetylenoxid, polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkohol eller stärkelse i vatten.The present invention therefore solves many of the problems associated with providing products comprising lactic acid producing bacteria. The present invention is further described by way of illustrative but non-limiting example. Example 15 Preparation of a uniform polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria An aqueous polymer solution having a concentration of 0.1-10% by weight is prepared by dissolving polyethylene oxide, polyvinylpyrrolidone, polyvinyl alcohol or starch in water.

En dei sv beineneli suspension (en 10"” CPU/mi, BinNnﬁv AB, Bex 7979, 907 19 Umeå, Sverige) innefattande Lactobacillus plantarum 931 (depositionsnr. (DSMZ): 11918) blandas med 9 delar av polymerlösningen i 5 minuter. Blandningen hälls i små Petri- skålar i en mängd som försäkrar den rätta tjockleken och en mängd av bakterier av unge- fär 109 CFU/ﬁlrnformad polymermatris. Den resulterande ﬁlmformade polymerrnatrisen innefattande mjölksyraproducerande bakterier har en tjocklek av företrädesvis 50 pm- 5 mm, mer föredraget 100 um-l mm och mest föredraget 500 um-l mm.En dei sv beineneli suspension (en 10 "” CPU / mi, BinNn ﬁ v AB, Bex 7979, 907 19 Umeå, Sverige) comprising Lactobacillus plantarum 931 (deposition no. (DSMZ): 11918) is mixed with 9 parts of the polymer solution for 5 minutes. is poured into small Petri dishes in an amount that ensures the correct thickness and an amount of bacteria of about 109 CFU / micron-shaped polymer matrix. um-1 mm and most preferably 500 um-1 mm.

Petri-skålen placeras i en klimatkamrnare vid en temperatur av 37°C och med så låg rela- tiv fuktighet som möjligt (l0% eller lägre), varigenom vattnet avdunstar och den ﬁlm- formade polymermatrisen stelnar och bakterierna ﬁxeras i den ﬁlmformade polymerrna- trisen.The petri dish is placed in a climate chamber at a temperature of 37 ° C and with as low a relative humidity as possible (10% or lower), whereby the water evaporates and the mlm-shaped polymer matrix solidifies and the bacteria are ixerated in the formlm-shaped polymer matrix .

Vattenaktiviteten hos de ñlmfonnade polymennatrisema innefattande mj ölksyraproduce- rande bakterier mäts med användning av ett aw-instrument; DD40l 102 Aqualab Se- rie 3TE (ADAB Analytical Devices AB, Stockholm, Sverige).The water activity of the inoculated polymeric matrices comprising lactic acid producing bacteria is measured using an aw instrument; DD40l 102 Aqualab Series 3TE (ADAB Analytical Devices AB, Stockholm, Sweden).

Inom l-2 veckor efter produktion av den ﬁlmformade polymerrnatrisen utförs överfö- ringstest från absorberande produkter innefattande den ﬁlmformade polymerrnatrisen enligt föreliggande uppfinning till hud (se nedan). 10 15 20 25 526 982 16 Exempel 2 Överlevnad av L. plantarum 931 i ﬁlmformade polymermatriser enligt föreliggande upp- ﬁnning Den ﬁlrnforrnade polymermatrisen placeras i en klimatkammare vid 23°C och 50% rela- tiv fuktighet. Överlevnaden av bakterierna testas i en ﬁlmformad polymermatris enligt Exempel 1 vidare belagd med Caremelt (en blandning av vaxer, Cognis, Henkel KgaA, Düsseldorf, Tyskland). Överlevnaden av bakterierna i den ﬁlmformade polymermatrisen testas vid förbestämda intervall under ﬂera månader (se nedan).Within 1-2 weeks after production of the molded polymer matrix, transfer tests are performed from absorbent products comprising the molded polymer matrix of the present invention to skin (see below). Example 2 Survival of L. plantarum 931 in Elformed Polymer Matrices of the Present Invention The deformed polymer matrix is placed in a climate chamber at 23 ° C and 50% relative humidity. The survival of the bacteria is tested in an polymer-shaped polymer matrix according to Example 1 further coated with Caremelt (a mixture of waxes, Cognis, Henkel KgaA, Düsseldorf, Germany). The survival of the bacteria in the polymer-shaped polymer matrix is tested at predetermined intervals during your months (see below).

För att testa överlevnaden av mjölksyraproducerande bakterier i den ﬁlmformade poly- mermatrisen, placeras ﬁlmen i en Petri-skål, nedsänkt med 20 ml NaCl (0,85%) och satt på en skakanordning. Efter 40 minuter löses den ﬁlmformade polymermatrisen och över- levnaden av bakterierna bestämdes genom att räkna antalet kolonibildande enheter (CFU) genom standard plattutstrykningstekniker och odling på MRS agar (2 dagar av inkubation vid 37°C). Resultaten presenteras i Fig. 5, vari PVP är polyvinylpyrrolidon.To test the survival of lactic acid-producing bacteria in the film-shaped polymer matrix, the film is placed in a Petri dish, immersed in 20 ml of NaCl (0.85%) and placed on a shaker. After 40 minutes, the film-shaped polymer matrix is dissolved and the survival of the bacteria was determined by counting the number of colony forming units (CFU) by standard plate smearing techniques and culturing on MRS agar (2 days of incubation at 37 ° C). The results are presented in Fig. 5, wherein PVP is polyvinylpyrrolidone.

Exempel 3 Överföring av L. plantarum 931 från ett trosskydd tillhandahållet med en ﬁlmformad po- lymerrnatris Filmformade polymermatriser innefattande mj ölksyraproducerande bakterier framställdes som beskrivs i Exempel 1. Omkring 1 cmz av en ﬁlmformad polymermatris skars ut, väg- des och placerades på nonwoven topplagret av ett trosskyddsprov (en cirkel 2,5 cm i di- ameter, utstansad från en absorberande produkt). 10 15 20 25 526 982 17 100 ul av NaC1 tillsattes till den absorberande produkten, innefattande den ﬁlmformade polymermatrisen med bakterier, med en pipett, och provet monterades därefter, med kon- stant tryck (elastisk tejp, och elastiskt bandage), på frivilligas underarrn. Eﬁer 2 timmar togs produkten bort och antalet överförda Lactobacilli på huden mättes. En steril cylinder av rostfritt stål (2,6 cm i diameter, höjd 2 cm) hölls tätt mot huden (som hade täckts med provet), och 1 ml fosfatbuffert (0,1 M, pH 7,2) hälls i cylindern. Med en mjuk glassticka "knådas" huden försiktigt i 1 minut. Efteråt samlas bufferten med en pipett och CFU mäts med plattstrykningsteknik och MRS agar.Example 3 Transfer of L. plantarum 931 from a panty liner provided with an m-shaped polymer matrix Film-shaped polymer matrices comprising lactic acid producing bacteria were prepared as described in Example 1. About 1 cm 2 of an polymer-shaped polymer matrix was cut out, weighed and placed on top of a panty liner (a circle 2.5 cm in diameter, punched from an absorbent product). 100 μl of 526 982 17 100 μl of NaCl was added to the absorbent product, comprising the elongated bacterial polymer matrix, with a pipette, and the sample was then mounted, with constant pressure (elastic tape, and elastic bandage), on the volunteers' underarms. . After 2 hours, the product was removed and the number of Lactobacilli transferred to the skin was measured. A sterile stainless steel cylinder (2.6 cm in diameter, height 2 cm) was held tightly against the skin (which had been covered with the sample), and 1 ml of phosphate buffer (0.1 M, pH 7.2) was poured into the cylinder. With a soft glass stick, the skin is "kneaded" gently for 1 minute. Afterwards, the buffer is collected with a pipette and CFU is measured with flat ironing technique and MRS agar.

Procenthalten av Överförd Lactobacíllí beräknas genom att dela antalet CFU samlat från hudarean täckt med provet med det totala antalet av CFU i den ﬁlmformade polymerma- trisen på testprovet. Antalet Lactobacílli initialt närvarande på huden vid provplatsen är mycket lågt, speciellt med avseende på antalet L. plantarum 931 överförda till huden.The percentage of Transferred Lactobacilli is calculated by dividing the number of CFUs collected from the skin area covered by the sample by the total number of CFUs in the molded polymer matrix on the test sample. The number of Lactobacílli initially present on the skin at the test site is very low, especially with respect to the number of L. plantarum 931 transferred to the skin.

Därför anses antalet Lactobacílli påvisade på huden efter överföringstestet att vara ett resultat av överföring från provet innefattande L. plantarum 931. Som jämförelse använ- des ett trosskydd med en torr bakteriell preparation ej inbäddad i en ﬁhnformad poly- mermatris. Som kan ses i Tabell 1 förbättrades procenthalten av bakterieöverföring till huden från en absorberande produkt med användning av en ﬁlmformad polymermatris enligt föreliggande uppfinning.Therefore, the number of Lactobacílli detected on the skin after the transfer test is considered to be a result of transfer from the sample comprising L. plantarum 931. For comparison, a panty liner with a dry bacterial preparation not embedded in an form-shaped polymer matrix was used. As can be seen in Table 1, the percentage of bacterial transfer to the skin from an absorbent product was improved using an elongated polymer matrix of the present invention.

Tabell 1 Antal CFU överñrda Initialt antal Polymer Konc. (v/v) MW (kDa) till huden CFU på produkten Övertört (%) PVOH 1 96 3.E+04 1.E+06 2,4 PVP 1 40 7.E+07 6.E+08 12,7 Jämförelse 2.E+05 4.E+07 0,4 PVP = Polyvinylpyrïolidon PVOH = PolyvinylalkoholTable 1 Number of CFUs surpassed Initial number of Polymer Conc. (v / v) MW (kDa) to the skin CFU on the product Overgrown (%) PVOH 1 96 3.E + 04 1.E + 06 2.4 PVP 1 40 7.E + 07 6.E + 08 12.7 Comparison 2.E + 05 4.E + 07 0.4 PVP = Polyvinylpyrrolidone PVOH = Polyvinyl alcohol

Claims

10 15 20 25 30 526 982 1.5 ”Patent claim

A single-layer polymer matrix comprising at least one lactic acid-producing bacterial star in polymer (s) which is non-toxic and non-irritating to a user's skin and mucous membranes, which polymer (s) have the ability to protect bacterial cells from storage during storage, but which can be dissolved of body fluids.

The monolayer polymer matrix of claim 1, wherein the lactic acid-producing bacterial strains are isolated from the skin or urogenital region of a healthy persoil.

The monolayer polymer matrix of claim 1 or 2, wherein the lactic acid-producing bacterial strain is selected from the genera Pediococcus, Lactococcus, Lactobacillus or mixtures thereof.

The monolayer polymer sodium according to claim 3, wherein the lactic acid-producing bacterial strain is selected from at least Lactobacillus plantarum.

The monolayer polymer matrix of claim 4, wherein the lactic acid-producing bacterial strain is selected from at least Lactobacillus plantarum 931 (Deposit No. (DSMZ): 11918).

The monolayer polymer matrix of claims 1-5, wherein the polymer (s) is selected from the group consisting of polysaccharides and derivatives thereof and synthetic hydro-polymers and derivatives thereof.

The monolayer polymer matrix of the polymer matrix of claims 1-6, wherein the polymer (s) is selected from the group consisting of polyvinyl alcohol, polyethylene oxide, polyvinylpyrrolidone and starch. 10 15 20 25 30 526 982 F?

The monolayer polymer matrix according to claims 1-7, further comprising additional components.

A single layer polymer matrix matlm according to claims 1-8, which single layer polymer matrix ﬁlm has a thickness of preferably 50 μm-S mm, more preferably 100 μm-1 mm and most preferably 500 hr-1 mm.

A monolayer polymer matrix according to claims 1-9, wherein the water activity of the monolayer polymer matrix is 0.30 or lower, preferably 0.25 or lower and most preferably 0.20 or lower.

A single layer polymer matrix according to claims 1-10, wherein the bacterial concentration is 107-10 "CFU / g film, more preferably 109-10" CFU / g film.

The monolayer polymer matrix of claims 1 to 11, further comprising a laminate layer located on at least one side of the monolayer polymer matrix.

Hygiene product, such as sanitary napkin, panty liner, diaper, incontinence guard, tampon, hygiene tissue, etc., comprising a single layer polymer matrix comprising lactic acid producing bacteria according to claims 1-12.

A process for preparing a monolayer polymeric matrix according to claims 1-12, comprising lactic acid producing bacteria comprising the steps of: a) preparing an aqueous solution (a) polymer (s) which are non-toxic and non-irritating to the user's skin and mucous membranes b) dispersing lactic acid producing bacteria in the solution of (a) polymer (s) c) optionally adding additional components to the dispersion d) drying the resulting dispersion comprising lactic acid producing bacteria on an inert surface, at a temperature below 50 ° C, thereby producing an elm-shaped polymer matrix 526 982 2.0 e) optionally laminating the resulting elm; wherein steps b) and c) can be performed in any order.

A test kit comprising a) a sanitary product, such as a sanitary napkin, panty liner, diaper, incontinence guard, tampon, hygiene tissue, etc .; and b) a single layer polymer matrix according to claims 1-12.