SE468251B - Reningsprocess foer interferon - Google Patents
Reningsprocess foer interferonInfo
- Publication number
- SE468251B SE468251B SE8902230A SE8902230A SE468251B SE 468251 B SE468251 B SE 468251B SE 8902230 A SE8902230 A SE 8902230A SE 8902230 A SE8902230 A SE 8902230A SE 468251 B SE468251 B SE 468251B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- interferon
- column
- solution
- precipitation
- eluate
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/56—IFN-alpha
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
10
5
20
25
30
35
11/2 F'
små 291 _
och reproducerbarhet av läkemedel.
Föreliggande uppfinning har som huvudsyfte att tillhanda-
hålla ett förfarande för tillverkning av högrenat leukocytinter-
feron för kliniskt bruk.
Ett annat ändamål med uppfinningen är att tillhandahålla
ett reningsförfarande som är mycket reproducerbart, relativt
billigt och relativt lätt att utföra. För dessa och andra ända-
så,
mål som framgår av följande beskrivning, avser föreliggande upp-
finning förfarande för rening av rå-interferon från humana leu-
kocyter, varvid nämnda förfarande innefattar följande steg:
a) applicering av en lösning av nämnda rå-interferon på en
immunoaffinitets-adsorbtionskolonn;
b) eluering av det adsorberade interferonet från nämnda ko-
lonn med användande av en buffertlösning;
c) koncentrering av eluatet från steg b) med en tiocyanatlös-
ning genom fällning eller jonbytarkromatografi; och
d) återvinning av det fällda interferonet erhållet i steg c).
I ett sådant förfarande är det föredraget att använda för
framställning av en immunoaffinitetsadsorbtionskolonn ett rekom-
binant interferon för framställning av det antiserum, från vil-
ket polyklonala antikroppar isoleras och kovalent bindes till
kolonnmatrisen.
Förfarandet enligt uppfinningen utföres företrädesvis un-
der användning av ett ytterligare steg för koncentrering av elu-
atet från immunoaffinitetsadsorbtionskolonnen under användning
av en jonbytarkolonn. Interferonet elueras lämpligen från en
sådan jonbytarkolonn genom höjning av pH. Sådan pH-höjning kan
erhållas genom applicering av en buffertlösning på kolonnen.
_ Förutom fällningssteget under användning av exempelvis en
tiocyanatlösning kan förfarandet innefatta ytterligare ett fäll-
ningssteg, vari interferonet som erhålles från sådan fällning
åter utfälles i etanol innan det återvinnas. e
Efter den enkla eller dubbla utfällningen unöerkaetas det
erhållna interferonet företrädesvis gelfiltrering, och de önska- t
de utkommande fraktionerna med absorbans vid 280 nm uppsamlas
och tillvaratas.
Vid fällningssteget är det föredraget att använda en lös-
ning av kaliumtiocyanat. Andra fällningsmedel är triklorättik-
10
15
20
25
30
35
468 251
syra och ammoniumsulfat. Eluering av interferonet fràn jonbytar-
kolonnen för koncentrering av eluatet fràn föregàende steg utfö-
res lämpligen genom applicering av en buffertlösning i syfte att
höja pH. Sàdan pH-höjning utföres företrädesvis till ett pH över
neutralt, såsom till ca 8 eller högre.
Uppfinningen innefattar även ett renat humant leukocytin-
terferon närhelst det framställts genom häri beskrivet förfaran-
de.
Föreliggande uppfinning kommer nu att ytterligare illust-
reras genom konkreta exempel, vilka emellertid ej far tolkas
såsom inskränkande uppfinningens omfattning i annan grad än som
framgår av bilagda patentkrav.
EXEMPEL 1
Framställning av antiserum
Vid framställningen av antiserum används friska och ej
tidigare immuniserade getter. Antigenet som används vid immuni-
seringen är ett rekombinant interferon, K-88, tillverkat vid
Umeå Universitet och beskrivet i detalj i den publicerade euro-
peiska patentansökningen nr. 86903650.9, publiceringsnummer
0263 102. Detta rekombinanta interferon är upplöst i fysiologisk
fosfatbuffert och den specifika aktiviteten av lösningen är un-
gefär 2x105 IU/mg. Denna lösning är administrerad till getterna
tillsammans med "Freund's complete adjuvant" vid det första im-
muniseringstillfället. Därefter sker immunisering med “Freund's
inclompete adjuvant“ en gång per vecka eller var 14:e dag i
volymer från 0,2 ml till 1,0 ml.
Tappningen av getterna sker fràn halsvenen var 14:e dag
efter tredje immuniseringen. Det tappade blodet undersöks med
avseende på anti-interferon-antikroppsinnehåll samt ospecifik
bindning. Antikroppsinnehàllet analyseras med en assay som mäter
neutraliserande titer, d.v.s. den mäter hur stor mängd interfe-
ron som inaktiveras av antikropparna i ett interferonsensitivt
biologiskt system. Ospecifik bindning mäts genom konventionell
Western Blot.
150-200 ml blod tappas normalt vid varje tappningstillfäl-
le. Det nytappade blodet får sta ett dygn i kylskåp varvid det
koagulerar. Därefter centrifugeras det och serumet hälla av.
Detta serum innehållande antikroppar mot interferon renas sedan
10
15
20
25
30
35
fi68 251
vidare som beskrivs nedan.
EXEMPEL 2
Framställning av immuno-affinitetsadsorbtionskolonn.
Antiserat erhållet i Exempel 1 fälls med 25 g ammoniumsul-
fat per 100 g antiserum under långsam omröring i centrifugflas-
kor som sedan får stå över natten. Följande dag centrifugeras
antiserat med 4000 g i 30 min. Överlösningen hälls av och fäll-
ningen tvättas två gånger med ammoniumsulfat 1,75 mol/l för att
minska mängden av hemoglobin och albumin. Fällninen överförs
till dialysslangar och dialysen utförs alternerande mot vatten
och natriumacetatbuffert 0,05 M NaAc, 0,021 M HAC, pH 5,0.
Under dialysen bildas en fällning som består av lipoprote-
iner, och fällningen avlägsnas genom centrifugering vid 4000 g i
30 min. Överlösningen som innehåller gammaglobulin appliceras på'
en kolonn innehållande DEAE Sepharose FF<3(25 ml packad gel per
-100 ml utgångsantiserum) bringad i jämvikt med acetatbuffert pH
5,0. Det dialyserade antiserat tillåts passera genom kolonnen
och elueras med ungefär en kolonnvolym av acetatbuffert.
Volym: 445 ml
Absorbans 280 nm: 35,2
IgG-koncentration: 25,3 mg/ml
Totalt IgG: 11,3 g
Utbyte: 16 mg IgG/ml serum
Det immunoglobulin-innehållande eluatet dialyseras mot
kopplingsbuffert, natriumbikarbonat 0,1 mol/l och natriumklorid
0,5 mol/l.
Br-CN-aktivering av Sepharose 4B.
Sepharose tvättas med destillerat vatten med hjälp av en
glastratt och sugs till torrhet. Ungefär 40-60 g gel per g IgG
vägs upp och suspenderas i kaliumfosfatbuffert 2 mol/l pH 11,0.
Gelslurryn kyls ned på ett isbad. BrCN upplöses i vatten
0,05-0,1 g BrCN/ml. 3,3 g BrCN/100 g torrsugen gel sätts till
och sepharosen aktiveras under 10 min med hjälp av lätt omröring
med en magnetomrörare. Gelslurryn överförs till en glastratt och
tvättas med kallt destillerat vatten tills neutral reaktion av
eluatet erhålls. Den aktiverade gelen blandas med immunoglo-
bulinlösningen och inkuberas vid rumstemperatur över natten
íx
få
10
15
20
25
30
35
468 251
med lätt omröring.
Gelen överförs sedan till en glastratt och filtratet ana-
lyseras med avseende pà proteininnehàll genom mätning av A280.
Gelen suspenderas sedan àter i kopplingsbuffert och glycin 0,1
mol/1 sätts till för att blockera återstående kopplingsställen
och gelen inkuberas i minst 1 timme vid rumstemperatur. Efter
blockeringsproceduren tvättas gelen upprepade gånger med fosfat-
buffert 0,02 mol/l, natriumklorid 0,2 mol/1 pH 7,0 och citronsy-
ra 0,1 mol/l, natriumklorid 0,15 mol/1. Gelen lagras i fosfat-
buffrad salin med 0,04% natriumazid som konserveringsmedel.
Kopglingsprocedur.
750 ml Sepharose 4B tvättas med 2,5 l destillerat vatten i
en glastratt och sugs torr. Den torra gelen väger 520 g. Gelen
suspenderas i 500 ml kaliumfosfatbuffert 2,0 mol/1 pH 11,0 och
kyls i isbad. 17,3 g BrCN upplöses i 200 ml vatten och sätts
till gelslurryn och gelen aktiveras i 10 min. Gelen tvättas med
7 l kallt destillerat vatten. Eluatet uppvisar då neutralt pH.
Gelen blandas med immunoglobulinfraktionen som dialyserats
mot kopplingsbuffert, natriumbikarbonat 0,1 mol per l, natrium-
klorid 0,5 mol/1 pH 8,5 och inkuberas över natt vid rumstempera-
tur. Följande dag filtreras gelen och tvättas med en volym av
kopplingsbuffert och proteinkoncentrationen i filtratet och i
tvättvätskan bestäms med hjälp av A230.
A250 filtrat: 184 mg protein
A280 tvättvätska:
Totalt:
165 mg protein
349 mg protein
Kopplingseffektivitetz 96,91
Gelen àtersuspenderas i kopplingsbuffert med glycin 0,1
mol/1 för att blockera återstående aktiverade ställen i en tim-
me. Gelen tvättas med fosfatbuffert pH 7,0 och citronsyra. Gelen
lagras i fosfatbuffrad salin med 0,04% natriumazid som konser-
veringsmedel.
EXEMEEL 3
Produktion av rå-interferon
I denna produktion används "buffy coats" för att tillverka
10
15
20
25
30
35
468 251
rà-interferon. "Buffy coats" är en biprodukt vid sjukhusens
blodcentraler. De "buffy coats" som används är ej äldre än 48
timmar och de flesta av dem är ej äldre än 24 timmar.
För att framställa leukocyter fran buffy coats lyseras de
röda blodcellerna genom tillsats av ammoniumklorid till en slut-
ff'
lig koncentration av 0,83%. Efter ca 10 min vid rumstemperatur
centrifugeras leukocyterna i en korgcentrifug med ett flöde av
300 ml per min. Leukocyterna suspenderas i PBS. Denna process Ü
upprepas en gäng och de erhållna leukocyterna tillsätts sedan
odlingsmediet.
De renade leukocyterna suspenderas i Eagels MEM med föl-
jande tillsatser;
Neomycin 25 ug/ml
Trícin 3 mg/ml
4% human plasma fälld med 6% polyetylenglykol 6000
(Inglot A et al, Acta Virol. 19; 250-254, 1975)
Användning av PEG-fraktionerad plasma i stället för G-
-gamma-serum är den enda större skillnaden från originalmetoden
enligt Cantell. Cellerna används i koncentrationer om 107 celler
per ml i 4-liters rundkolvar innehållande ca 2,0 l i varje. Vat-
tenbadet omrörs med magnetomrörare och termostateras vid 37°C.
De odlade cellerna “primas" genom tillsats av rå-interferon 100
units/ml. Två timmar efter “primingen“ tillsätts Sendai-virus
ungefär 150 hemagglutinerande enheter per ml (ungfär 40 ml Sen-
dai-virus per 1). Efter 20 timmar vid 37° avlägsnas leukocyterna
genom centrifugering eller filtrering. Rå-interferonet kan lag-
ras i maximalt 7 dagar före rening.
EXEMPEL 4
Koncentrering av ra-interferon
Rà-interferonlösningen som erhållits i enlighet med Exem-
pel 3 koncentreras genom ultrafiltrering med ett filtronsystem
MW 10.000 filter, Innan ultrafiltreringen äger rum filtreras f
rä-interferonet genom ett 0,45 um membran (Hillipore, Prostak)
för att avlägsna cellrester. Interferonlösningen koncentreras
ungefär 5 gånger.
Q!
10
15
20
25
30
35
Ja.
O\
CD
BD
U"|
...a
EXEMPEL 5
Affinitetskromatografi av rà-interferon
Affinitetskolonnen (BP 113/15, Pharmacia, gelvolym ungefär
1 l) som erhàllits sàsom beskrivits i Exempel 2 är ekvilibrerad
med 0,02 M Tris-HCl 0,2 M NaCl 0,001 M EDTA pH 8,0 (Tris-
-buffert). Interferonlösningen som erhållits i Exempel 4 får
sedan passera genom kolonnen med ett flöde av ungefär 4 l per
timme. Efter det att Interferon-lösningen har passerat genom
kolonnen, tvättas kolonnen med en Tris-buffert tills absorbansen
av eluatet är 0 eller nästan 0.
Affinitetskolonnen desorberas med 0,1 M citronsyra,-0,15 M
NaCl pH 2,0. Citronsyrebufferten passerar genom kolonnen med ett
flöde av ungefär 3 l per timme. Denna surgöring av kolonnen re-
sulterar i desorbtion av interferonet som varit adsorberat till
kolonnen. Desorbtionen fortsättes till dess att absorbansen vid
280 nm upphört, och den uppsamlade interferonlösningen tillvara-
tas. Volymen är ungefär 5 1.
EXEMPEL 5
Koncentrering av desorberat interferon
Den utvunna interferonlösningen fràn Exempel 5 appliceras
pà en jonbytarkolonn (S-Sepharose®) ekvilibrerad med citronsyra-
buffert pH 2,0. Jonbytaren tvättas sedan med citronsyrebuffert
och interferonet elueras genom höjning av pH genom tillsats av
Tris-buffert som medför en pH-ökning till ungefär pH 8.
EXEMPEL 7
Fällning av interferon med kaliumtiocïanat
_ Till den fràn Exempel 6 erhållna interferonlösningen sätts
försiktigt 5 M kaliumtiocyanat under omröring till en slutkon-
centration av 0,5 M kaliumtiocyanat. (Viktförhàllande Ifn:HSA ca
1:5-10.) Saltsyra (IM) tillsätts tills pH har sjunkit fràn 8
till ungefär 2,0. Den opalescenta fällningen centrifugeras vid
5000 rpm i 30 min (Beckman J-21). Överlösningen tillvaratas för-
siktigt.
EXEMPEL 8
Fällning med etanol
Interferonfällningen från kaliumtiocyanatfällningen i
10
15
20
25
30
-f
Exerfipgls72ušplslammas i 95%-ig sur etanol tillsammans med HSA
(viktförhàllande interferon till HSA ungefär 1:5-10) (ungefär
300 ml.) vid en temperatur av -20°C. Uppslamningen centrifugeras
i 30 min vid 5000 rpm. Den interferoninnehàllande överlösningen
àtervinns och dess pH ökas sakta till pH 8 genom tillsättning av
0,1 M NaOH. Fällningen centrifugeras sedan i 30 min vid 5000
rpm. (Beckman J-21). Överlösningen tillvaratas och fällningen
upplöses i 10 ml 0,15 M natriumfosfatbuffert + 0,5 M KSCN, pH
8,0.
EXEMPEL 9
Gelfiltrering av den ugplösta fällningen
Den från Exempel 8 erhallna interferonlösningen centrifu-
geras och gelfiltreras pá en kolonn (2,5x90 cm, AcA-54, IBF,
Frankrike). Den med UV-ljus (280 nm) detekterade interferontop-
pen tillvaratas sedan. Renheten av det erhållna interferonet är
ungefär 80% och vid analys i ett Western blot system befinnes
den innehålla alla interferonkomponenter som áterfinnes i ett
ra-interferon av Cantell-typ.
Förfarandet enligt denna uppfinning erbjuder manga förde-
lar, bland vilka kan nämnas:
effektiv eliminering av risken för virusinfektion,
höga utbyten,
enkelt och pålitligt att utföra.
Exemplen som beskrivits här ovan skall inte ses som av-
gränsande av uppfinningen. De har presenterats endast i avsikt
att illustrera och beskriva uppfinningen. Många modifikationer
och variationer är möjliga för fackmannen i ljuset av den be-
skrivna uppfinningen. Avsikten är att omfattningen av uppfin-
ningen skall definieras av de bilagda kraven.
MQ
'H
Claims (7)
- PATENTKRAV ' 12 Förfarande för rening av ett humant rå-leukocytinterfe- ron innefattande stegen: a) applicering av en lösning av nämnda rå-interferon på en immunoaffinitetsadsorbtionskolonn; b) eluering av det adsorberade interferonet från nämnda ko- lonn under användning av en buffertlösning med surt pH; c) koncentrering av eluatet erhållet från steg b) genom en- dera utfällning med en tiocyanatlösning eller jonbytarkromato- grafig- d) utfällning av det interferon som är närvarande i eluatet härrörande från steg C) med en tiocyanatfällning; e) återutfällning av interferonet härrörande från steg d) i vatten~etanol vid ett basiskt pH; f) tillvaratagande av det i steg e) erhållna interferonet.
- 2. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att eluatet från steg b) koncentreras under användning av en jonbytarkolonn, varvid interferonet elueras från nämnda kolonn genom höjning av pH över neutralt värde medelst tillförsel av en buffertlösning till kolonnen.
- 3. Förfarande enligt patentkravet 1, kännetecknat därav, att eluatet från steg b) koncentreras genom utfällning under användning av tiocyanat, triklorättiksyra eller ammoniumsulfat.
- 4. Förfarande enligt något av de föregående patentkraven, kännetecknat därav, att det från utfällningen erhållna interfa- ronet underkastas gelfiltrering, varvid den effluent som visar absorbans vid 280 nm tillvaratas.
- 5. Förfarande enligt något av de föregående patentkraven, vari den i steg a) använda kolonnen innehåller polyklonala anti- kroppar erhållna genom immunisering under användning av ett re- kombinant interferon.
- 6. Förfarande enligt något av de föregående patentkraven, kännetecknat därav, att utfällningen i steg c) utföres med en lösning av kaliumtiocyanat.
- 7. Förfarande enligt något av de föregående patentkraven, kännetecknat därav, att all utfällning utföres i närvaro av al- bumin.
Priority Applications (13)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE8902230A SE468251B (sv) | 1989-06-20 | 1989-06-20 | Reningsprocess foer interferon |
PCT/SE1990/000393 WO1990015817A1 (en) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | Interferon purification process |
JP50907190A JP3158254B2 (ja) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | インターフェロン精製方法 |
DK90909823.8T DK0478659T3 (da) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | Fremgangsmåde til oprensning af interferon |
ES90909823T ES2068392T3 (es) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | Procedimiento de purificacion de interferon. |
AT90909823T ATE118782T1 (de) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | Reinigungsverfahren für interferon. |
EP90909823A EP0478659B1 (en) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | Interferon purification process |
CA002062729A CA2062729C (en) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | Interferon purification process |
DE69017211T DE69017211T2 (de) | 1989-06-20 | 1990-06-06 | Reinigungsverfahren für interferon. |
FI916021A FI98218C (sv) | 1989-06-20 | 1991-12-19 | Förfarande för rening av interferon |
NO915032A NO300895B1 (no) | 1989-06-20 | 1991-12-19 | Fremgangsmåte for rensing av et humant rå-leukocyttinterferon |
US08/066,655 US5391713A (en) | 1989-06-20 | 1993-05-25 | Interferon purification process |
HK98106901A HK1007747A1 (en) | 1989-06-20 | 1998-06-26 | Interferon purification process |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE8902230A SE468251B (sv) | 1989-06-20 | 1989-06-20 | Reningsprocess foer interferon |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SE8902230D0 SE8902230D0 (sv) | 1989-06-20 |
SE8902230L SE8902230L (sv) | 1990-12-21 |
SE468251B true SE468251B (sv) | 1992-11-30 |
Family
ID=20376336
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SE8902230A SE468251B (sv) | 1989-06-20 | 1989-06-20 | Reningsprocess foer interferon |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0478659B1 (sv) |
JP (1) | JP3158254B2 (sv) |
AT (1) | ATE118782T1 (sv) |
CA (1) | CA2062729C (sv) |
DE (1) | DE69017211T2 (sv) |
DK (1) | DK0478659T3 (sv) |
ES (1) | ES2068392T3 (sv) |
FI (1) | FI98218C (sv) |
HK (1) | HK1007747A1 (sv) |
NO (1) | NO300895B1 (sv) |
SE (1) | SE468251B (sv) |
WO (1) | WO1990015817A1 (sv) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999024138A1 (en) * | 1997-11-12 | 1999-05-20 | Life Technologies, Inc. | Device and methods for purifying biological molecules using low volumes of chromatographic and adsorptive media |
FI105319B (sv) * | 1998-06-10 | 2000-07-31 | Suomen Punainen Risti Veripalv | Förfarande för framställning av multikomponent-alfa-interferon |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FI77877C (sv) * | 1979-04-20 | 1989-05-10 | Technobiotic Ltd | Förfarande för framställning och rening av human Le-formig interferonp rotein. |
DE3211263A1 (de) | 1981-03-31 | 1983-01-27 | Otsuka Pharmaceutical Co. Ltd., Tokyo | Human-interferon verwandte peptide, antigene und antikoerper, sowie verfahren zu deren herstellung |
DE3306060A1 (de) | 1983-02-22 | 1984-08-23 | Boehringer Ingelheim International GmbH, 6507 Ingelheim | Neue immunglobulin-produzierende hybridzellinien, deren verwendung und verfahren zu deren herstellung |
SE8502430L (sv) | 1985-05-15 | 1986-11-16 | Kabivitrum Ab | En cdna-molekyl som kodar for expressionen av en polypeptid av typen interferon alfa, en bakteriell eller celluler verd transformerad med en sadan molekyl och en polypeptid som uppvisar interferonaktivetet framstelld me |
-
1989
- 1989-06-20 SE SE8902230A patent/SE468251B/sv not_active IP Right Cessation
-
1990
- 1990-06-06 WO PCT/SE1990/000393 patent/WO1990015817A1/en active IP Right Grant
- 1990-06-06 CA CA002062729A patent/CA2062729C/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-06 EP EP90909823A patent/EP0478659B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-06 AT AT90909823T patent/ATE118782T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-06-06 ES ES90909823T patent/ES2068392T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-06 DE DE69017211T patent/DE69017211T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-06-06 DK DK90909823.8T patent/DK0478659T3/da active
- 1990-06-06 JP JP50907190A patent/JP3158254B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-12-19 FI FI916021A patent/FI98218C/sv active
- 1991-12-19 NO NO915032A patent/NO300895B1/no not_active IP Right Cessation
-
1998
- 1998-06-26 HK HK98106901A patent/HK1007747A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0478659A1 (en) | 1992-04-08 |
SE8902230D0 (sv) | 1989-06-20 |
NO915032D0 (no) | 1991-12-19 |
JPH04506075A (ja) | 1992-10-22 |
CA2062729A1 (en) | 1990-12-21 |
DE69017211D1 (de) | 1995-03-30 |
ES2068392T3 (es) | 1995-04-16 |
HK1007747A1 (en) | 1999-04-23 |
NO915032L (no) | 1992-02-07 |
WO1990015817A1 (en) | 1990-12-27 |
CA2062729C (en) | 2001-12-04 |
EP0478659B1 (en) | 1995-02-22 |
DK0478659T3 (da) | 1995-05-08 |
DE69017211T2 (de) | 1995-06-22 |
JP3158254B2 (ja) | 2001-04-23 |
FI916021A0 (sv) | 1991-12-19 |
SE8902230L (sv) | 1990-12-21 |
FI98218B (sv) | 1997-01-31 |
FI98218C (sv) | 1997-05-12 |
ATE118782T1 (de) | 1995-03-15 |
NO300895B1 (no) | 1997-08-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5599719A (en) | Method for isolating biomolecules from a biological sample with linear polymers | |
CN1150004C (zh) | 用辛酸钠作分离剂的低温白蛋白分级分离法 | |
EP0091543B1 (en) | Anti-interferon antibodies and method of producing same | |
US10792654B2 (en) | Solid phase for mixed-mode chromatographic purification of proteins | |
SU1554755A3 (ru) | Способ получени субъединичной вакцины вируса простого лиша | |
US6680376B2 (en) | Process for selectively isolating avian immunoglobulins | |
US4764279A (en) | Process for preparing the principal proteins of hemolyzed blood in the non-denatured form | |
US8173783B2 (en) | Process for selectively isolating IgY antibodies from egg yolk of an anseriform bird and IgY antibodies obtained thereby | |
US6608172B1 (en) | Isolation of IgY (ΔFc) antibodies | |
US4232004A (en) | Antibody-specific solid phase immunoadsorbent, preparation thereof, and antibody purification therewith | |
US5391713A (en) | Interferon purification process | |
CN106957362B (zh) | 一种毕赤酵母宿主蛋白抗体的制备方法及其应用 | |
EP1371665B1 (en) | Process for selectively isolating IgY antibodies from egg yolk of an anseriform bird | |
SE468251B (sv) | Reningsprocess foer interferon | |
JPS63123395A (ja) | 抗pciモノクローナル抗体、これを用いた抗pciの精製法及び免疫学的測定法 | |
CN100591694C (zh) | 自雁形目鸟类卵中选择性分离IgY抗体的方法及由此获得的IgY抗体 | |
RU2792819C1 (ru) | Способ получения гомологического иммуноглобулина против COVID-19 | |
RU1776415C (ru) | Способ очистки поверхностного антигена вируса гепатита В (НВ @ А @ ) | |
RU2499605C1 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИКЛОНАЛЬНОЙ МОНОСПЕЦИФИЧЕСКОЙ СЫВОРОТКИ ПРОТИВ СЕКРЕТОРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА А ЧЕЛОВЕКА - SIgA | |
RU2367449C1 (ru) | Способ выделения и очистки трофобластического бета-1-гликопротеина | |
JPH0459797A (ja) | 抗体の精製法 | |
Inglot | [75] Preparation of antisera to interferon by interferon· blue dextran complexes | |
JPH07101879A (ja) | 免疫グロブリン製剤及びその製造方法 | |
AU4750702A (en) | Process for selectively isolating IgY antibodies from egg yolk of an anseriform bird and IgY antibodies obtained thereby | |
CA2389897A1 (en) | Process for selectively isolating igy antibodies from egg yolk of an anseriform bird and igy antibodies obtained thereby |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
NAL | Patent in force |
Ref document number: 8902230-5 Format of ref document f/p: F |
|
NUG | Patent has lapsed |