SE456163B - Forfarande for att odla och skorda ytberoende animala celler - Google Patents
Forfarande for att odla och skorda ytberoende animala cellerInfo
- Publication number
- SE456163B SE456163B SE8604739A SE8604739A SE456163B SE 456163 B SE456163 B SE 456163B SE 8604739 A SE8604739 A SE 8604739A SE 8604739 A SE8604739 A SE 8604739A SE 456163 B SE456163 B SE 456163B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- cells
- alginate
- agarose
- insulin
- immobilised
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 title claims 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 38
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 claims abstract description 18
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 claims abstract description 17
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 claims abstract description 3
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 claims abstract description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 claims 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 abstract description 4
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 108010007093 dispase Proteins 0.000 abstract description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 abstract 2
- SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N ferrosoferric oxide Chemical compound O=[Fe]O[Fe]O[Fe]=O SZVJSHCCFOBDDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 abstract 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 abstract 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 abstract 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 abstract 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N CHCl3 Substances ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 abstract 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 abstract 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 abstract 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 abstract 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 abstract 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 abstract 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 abstract 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000000696 magnetic material Substances 0.000 abstract 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 abstract 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 abstract 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 17
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 239000000648 calcium alginate Substances 0.000 description 4
- 235000010410 calcium alginate Nutrition 0.000 description 4
- 229960002681 calcium alginate Drugs 0.000 description 4
- OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L calcium;(2s,3s,4s,5s,6r)-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxy-6-[(2r,3s,4r,5s,6r)-2-carboxylato-4,5,6-trihydroxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylate Chemical compound [Ca+2].O[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H](C([O-])=O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O2)C([O-])=O)O)[C@H](C(O)=O)O1 OKHHGHGGPDJQHR-YMOPUZKJSA-L 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 2
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 2
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 2
- SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N (2r,3r,4r,5s)-hexane-1,2,3,4,5,6-hexol;(z)-octadec-9-enoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O CUNWUEBNSZSNRX-RKGWDQTMSA-N 0.000 description 1
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 240000001987 Pyrus communis Species 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- UBAZGMLMVVQSCD-UHFFFAOYSA-N carbon dioxide;molecular oxygen Chemical compound O=O.O=C=O UBAZGMLMVVQSCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 1
- SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 description 1
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 description 1
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0068—General culture methods using substrates
- C12N5/0075—General culture methods using substrates using microcarriers
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B60—VEHICLES IN GENERAL
- B60P—VEHICLES ADAPTED FOR LOAD TRANSPORTATION OR TO TRANSPORT, TO CARRY, OR TO COMPRISE SPECIAL LOADS OR OBJECTS
- B60P1/00—Vehicles predominantly for transporting loads and modified to facilitate loading, consolidating the load, or unloading
- B60P1/44—Vehicles predominantly for transporting loads and modified to facilitate loading, consolidating the load, or unloading having a loading platform thereon raising the load to the level of the load-transporting element
- B60P1/4414—Vehicles predominantly for transporting loads and modified to facilitate loading, consolidating the load, or unloading having a loading platform thereon raising the load to the level of the load-transporting element and keeping the loading platform parallel to the ground when raising the load
- B60P1/4421—Vehicles predominantly for transporting loads and modified to facilitate loading, consolidating the load, or unloading having a loading platform thereon raising the load to the level of the load-transporting element and keeping the loading platform parallel to the ground when raising the load the loading platform being carried in at least one vertical guide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M25/00—Means for supporting, enclosing or fixing the microorganisms, e.g. immunocoatings
- C12M25/16—Particles; Beads; Granular material; Encapsulation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/04—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0012—Cell encapsulation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0676—Pancreatic cells
- C12N5/0677—Three-dimensional culture, tissue culture or organ culture; Encapsulated cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/10—Mineral substrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/50—Proteins
- C12N2533/54—Collagen; Gelatin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/70—Polysaccharides
- C12N2533/72—Chitin, chitosan
Landscapes
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Transportation (AREA)
- Mechanical Engineering (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Loading Or Unloading Of Vehicles (AREA)
Description
15 20 25 30 35 456 163 2 Med isolerade hepatocyter från råttor har man kunnat visa, att cellerna förblev åtminstone partiellt intakta vid immobilisering, eftersom brott i cellmembranen skulle leda till läckage av enzymet laktatdehydrogenas. Även langerhansska öar från musbukspottkörtel immobiliserades med samma förfar- ande, varvid man erhöll beredningar, som alltjämt hade för- mågan att producera eller utsöndra insulin (Lundquist, I., och Mosbach, K. (1980) under förberedning). Vi har även visat, att adipocyter, inneslutna i antingen kalcium- Birnbaum, 5. alginat eller agaros, alltjämt har förmåga att metabolisera tillsatt radioaktiv glukos till fettsyror och kan stimuleras ytterligare vid tillsats av insulin (Nilsson, S., Belfrage, P., och Mosbach, K. 1980) under förberedning).
En nackdel med kalciumalginatberedningen är behovet Nilsson, K. av kalciumjoner eller liknande joner för att hålla nätverket intakt och som konsekvens därav behovet att arbeta i fosfat- fria media. lnneslutning i agarospartiklar, vilket även be- skrivs i föreliggande uppfinning och tillämpas i studierna på adipocytes avgivning av fri fettsyra, kan utgöra ett alterna- tivt angreppssätt.
Uppfinningen förklaras närmare med hjälp av följande exempel.
De vid försöken använda materialen agaros (typ VII), alginsyra (natriumsalt, typ IV), har erhållits från Sigma.
Glutaraldehyd (25 %) har erhållits från Merck AG. Cytodex och Sepharose CL-6B är produkter från Pharmacia, Sverige.
Arlacel 83 har anskaffats från Atlas Chemical Co, dispas (kvalitet II, 0,5 U/mg) från Boehringcr.
Följande celler har erhållits av Professor Ü. Sjögren: de etablerade cellinjerna HeLa och K562 (erytroleukemisk) och de primära cellkulturerna S 157N (humana skinnfibroblaster) S 15BA (human njurcarcinom), DMH W49 (koloncarcinom från råtta) och DMH W1073 (koloncarcinom från råtta). Alla celler utom K 652 odlades i Waymouth-media,kompletterade med 20 % kalv- fosterserum. K 562 odlades i RPMI-medium med 10 % kalvfosterse- rum. Alla media var kompletterade med gentamicin (50 mg/1).
I. k 10 15 20 25 30 35 Å456 163 3 ÉXGWDB1 1 Alginatimmobilisering Alginat (1 del 4 % (vikt/volym) löst i 25 mM Hepes, 125 mM NaCl, (pH 7,4) blandades med 1 del cellsuspension i Cell- alginatsuspensionen extruderades genomett 0,8 mm munstycke medium, kompletterat med dubbla serumkoncsntrationen. in i en lösning av 25 mM Hepes, 50 mM CaCl2, 75 mM Caßlz, (pH 7,4), varvid pärlor med en medeldiameter av 2 mm bilda- des. lmmobilisation utfördes vid rumstemperatur. Efter 5 mi- nuter tvättades pärlorna med medium och överfördes till en roterande kolv, som placerades i en C02-inkubat0r vid 3705, I intervall uttogs pärlor, som lösts i 0,1 M EDTA (pH 7,4) och.cellerna räknades. ' Agarosimmobilisering Agaros (1 del 4 % (vikt/volym), löst i 25 mM Hepes, 125 mH Naßl, (pH 7,4),placerad i ett vattenbad vid 3700, blandades med 1 del cellsuspension i medium, kompletterat Exempel 2 med 2 gånger koncentrationen av serum; Denna lösning över- fördes till pärlor genom hällning i en form av Teflon. Lös- ning hälldes över en Teflon-platta, som var försedd med 3 mm hål på kort avstånd från varandra. En annan platta användes som stöd, och de två plattorna hölls samman av klämmor. Före gjutning värmdes formen till 3700. När agarosen stelnat, togs formen isär, och de "cylindriska pärlorna" togs ut. Pärlorna placerades i medium i en roterande kolv och placerades i en C02-inkubator vid 3700. Päšlorna uttogs i intervall och lös- tes genom värmning till 70 C, och cellerna räknades.
Exempel 5 Framställning av inneslutna B-celler av langerhansska öar. 90 isolerade langerhansska ökar (medeldiameter cirka 0,1 mm) erhölls från bukspottkörteln av råtta (Lundquist, l. (1971) Enzyme 12, 647-657) och tvättades med Krebs-Ringer- (1971) Enzyme 12, 647-657). Cellerna suspenderades i 0,125 ml buffert och blan- dades med 0,5 ml 2,5 % (vikt/volym) natriumalginat i samma buffertlösning utan fosfat (Lundquist, I. buffert. Cell-algínatsuspensionen extruderades in i en lösning av bufferten innehållande 50 mM CaC]2_ Efter 15 minuter tvättades pärlorna 3 x 10 ml med bufferten. Visuell observa- 10 15 20 25 30 35 456 163 4 tion visade, att pärlorna innehöll i medeltal en ö per pärla.
Scintillationsflaskor fyllas med 10 pärlor och 2 ml 5 % C02), inleddes undeg C i ett vattenbad med skakning. Efter tillsats av 1 mg glukos buffert, gas, carbogen (95 % 02, 1 minut och flaskorna förinkuberades i 30 minuter vid 37 fb' till flaskorna inleddes gas i dessa, och 0,1 ml prov togs efter 0, 30, 60 och12Û minuter. Proven frystes ned och lag- rades tills analys på insulin utfördes med användning av radioimmunoanalys. Visuell inspektion visade ingen frigivning av öarna till mediet.
Exempel 4 Framställning av inneslutna adipocyter Adipocyter från råtta erhölls enligt (Gliemann, J. (1967) Diabetologia 3, 382-388). För inneslutning av alginat 130 mn Nacl, 2 % (vikt/- volym) albumin, (pH 7,4), blandad med en lika stor volym (vikt/volym) alginat (autoklaverat i 15 minuter vid 1200E) och extruderades i en lösning av 25 mM Hepes, 50 mM CaCl2, 75 mM NaCl, Krebs-Ringerbuffert innehållande 24 mM Hepes, 0,55 mM glukos överfördes cellerna till 20 mM Hepes, n: 4D (pH 7,4). Efter 5 minuter tvättades pärlorna med och 1 % (vikt/volym) albumin (lagringsmedium). cellerna till (vikt/volym) 6 % (vikt/volym) agaros. Pärlorna framställdes såsom i exempel 2. Efter gel- För inneslutning i agaros överfördes g: 10 det angivna lagringsmediet innehållande Z albuminoch blandades med en lika stor volym ning överfördes pärlorna till lagringsmedium.
Exempel 5 Cellinneslutning av isolerade celler.
I en preliminär studie för undersökning om animala cel- ler överlever inneslutníng i en gelmatrix, ieolerades hepato- cyter från råttor (Florén, C.H. och Nilsson, A. (1977) Bio- J. 168, 483-494) och inneslöts i kalciumalgínat. De erhållna pärlorna inkuberades sedan i pcrfusiónsbuffert' chem. respektive vaLten. Avgivning av laktatdehydrogenas mättes.
Cirka 10 gånger lägre läckage av enzymet observerades i pro- vet, som befann sig i perfusionsbufferten, jämfört med provet 3 i vatten. Senare inkubation i vatten av pärlorna, som hade be- .w_.__ , funnit sig i perfusionsbufferten, ledde emellertid tillbetwmnde läckage av aktiv laktatdehydrogenas. Sedan isolerades langer- hansska öar innehållande B-celler och inneslöts enligt samma 10 15 20 25 30 35 456 163 5 förfarande för att undersöka om de senare kunde producera/ut- söndra insulin i det immobíliserade tillståndet. Från mediet uttogs prov efter 0, 30, 60 och 120 minuter, vilka analyser- adeš påinsulinhalt med användning av radioimmunoanalys. 23, munoreaktiva insulinenheter (uU/ml).
Mängden utsöndrat insulin var 1, 40 respektive 78 im- Slutligen isolerades adipocyter och inneslöts i kalciumalginat liksom i agaros. 3H-H glukos i lipider (Moody, A.J., Stan, M.A., Stan, M. och J.(1974) Metab. Res. 6, 12-16) efter stimule- ring med insulin liksom på sin förmåga att avge fria fett- De undersöktes sedan på sin förmåga att införliva 3- Gliemann, Horm. syror vid noradrenalinstimulering (Nilsson, N.Ü. och Belfrage, P. (1979) J. 20, 557-560). mobiliserade adiposytberedningen i början visade en högre Lipid. Res. Man fann att den im- vilket var mera uttalat Vid sti- basinkorparation än fria celler, hos celler, som var immobiliserade i kalciumalginat. mulering med insulin visade båda beredningar en ökning av glukosinkorporation (när högre halter av alginat användes, svarade cellerna inte på insulin i glukostestet). Avgivningen av fria fettsyror studerades endast för agarosimmobiliserade adiposyter, eftersom alginatpärlorna var alltför mjuka. De immobiliserade cellerna visade också fettsyror efter omkring den dubbla tiden, cirka en tredjedel av hastigheten för fria celler. som erfordras för fria celler, och vid Exempel 6 Ett antal celltyper, MDH W49 och K 562, inneslöts i geler för undersökning av eventuell tillväxt i Cellinneslutning av cellkulturer. d.v.s. fibroblaster, HeLa, av vilka den senare växte i suspension, en gel-matrix eller om de förblev livskraftiga. De framställda gelerna var pärlor av (a) 2 % alginat, (b) 2 % agaros, (c) en blandning av 2 % agaros och 0,5 % alginat,och (d) 2 % agaros innehållande samtidigt inneslutna Cytodex-partiklar, I alla fallen eftersom indiffun- på vilka celler redan har blivit fastsatta. inneslöts serum samtidigt med cellerna, dering av några komponenter av serum troligen skulle vara hämmad. Ingen förökning av de undersökta cellerna observera- des under de använda betingelserna; emellertid förblev i 10 15 20 456 163 { 6 genomsnitt 10 - 3 % av cellerna livskraftiga, såsom framgår av trypan-blå-testet efter inkubation i en vecka. Vid kont- rollförsök med HeLa-celler ej inneslutna men hållna fria i lösning i silikonbehandlade provrör, har dessa försvunnit efter 1 dygn (med undantag av suspensíonskulturen K 562).
Resultaten visar att ínneslutning synes vara det bästa alternativet för immobilisering av suspensionskulturer medan goda mikrobärare för isolerade ytberoende celler omfattas av SE 8005838-1. Vidare kan inneslutning i ett tredimensionellt nätverk av ytberoende celler, som är absorberade på sina van- liga bärare, vara fördelaktigt, eftersom detta kan ge skydd att yt- roende celler, för vilka hittills ingen lämplig mikrobärare mot exempelvis skjuvkrafter. Det är även så, finns kan acceptera polymernätverket som mottagningsyta eller åtminstone förbli livskraftiga, såsom man har visat med trypan- blå-testèt.Även om man hittills inte har observerat någon tydlig cellökning för de olika inneslutna typerna av celler, förblir de livskraftiga under betydande tid och tillåter att metaboliska studier, enzymatiska omvandlingar eller synteser utföres.
G/Y' up.
Claims (2)
1. Ett förfarande för att odla och skörda ytberoende ani- mala celler, k ä n n e t e c k n a L av att man innesqufep cellerna i en mikrobärare bestående av alginat eller agaros, odlar cellerna i ett lämpligt odlingsmedium och därefter upp- löser mikrobäraren helt genom värme eller enzymatisk nedbryt- ning av alginatet eller agaroset utan att väsentligt påverka cellernas livskraft.
2. Förfarande enligt patentkravet 1, k ä n n e t e c k- n a t av att cellerna är B-celler av langerhansska öar och användes för framställning av insulin.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE8005838A SE456164B (sv) | 1980-08-20 | 1980-08-20 | Forfarande for immobilisering, odling och efterfoljande frigoring av animala celler samt mikroberare av gelatin med absorberade animala celler |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8604739D0 SE8604739D0 (sv) | 1986-11-05 |
| SE8604739L SE8604739L (sv) | 1986-11-05 |
| SE456163B true SE456163B (sv) | 1988-09-12 |
Family
ID=20341574
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8005838A SE456164B (sv) | 1980-08-20 | 1980-08-20 | Forfarande for immobilisering, odling och efterfoljande frigoring av animala celler samt mikroberare av gelatin med absorberade animala celler |
| SE8602560A SE456153B (sv) | 1980-08-20 | 1986-06-06 | Lyftgaffelanordning for en lyftanordning, som er anbringad pa ett lastflak till ett lastfordon |
| SE8604739A SE456163B (sv) | 1980-08-20 | 1986-11-05 | Forfarande for att odla och skorda ytberoende animala celler |
Family Applications Before (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8005838A SE456164B (sv) | 1980-08-20 | 1980-08-20 | Forfarande for immobilisering, odling och efterfoljande frigoring av animala celler samt mikroberare av gelatin med absorberade animala celler |
| SE8602560A SE456153B (sv) | 1980-08-20 | 1986-06-06 | Lyftgaffelanordning for en lyftanordning, som er anbringad pa ett lastflak till ett lastfordon |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0058689B1 (sv) |
| JP (1) | JPS57501411A (sv) |
| GB (1) | GB2093040B (sv) |
| SE (3) | SE456164B (sv) |
| WO (1) | WO1982000660A1 (sv) |
Families Citing this family (36)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ZA827728B (en) * | 1981-11-17 | 1983-08-31 | Nestle Sa | A process for the production of enzymatically active biocatalysts and the products obtained |
| DE3200988A1 (de) * | 1982-01-14 | 1983-07-28 | Thomas A. Dr. 6900 Heidelberg Reed | Verfahren und vorrichtung zur abtrennung von organischen stoffen aus einer suspension oder loesung |
| SE8201972L (sv) * | 1982-03-29 | 1983-09-30 | Gambro Lundia Ab | Magnetiskt paverkbara kristalliserade kolhydrat sferer eller partiklar att anvendas tillsammans med bioadsorberande material |
| EP0097907A3 (en) * | 1982-06-25 | 1985-01-09 | Flow General, Inc. | Cell culture microcarriers |
| US4605623A (en) * | 1982-11-08 | 1986-08-12 | Malette William Graham | Method of altering growth and development and suppressing contamination microorganisms in cell or tissue culture |
| JPS59164723A (ja) * | 1983-03-10 | 1984-09-17 | Koken:Kk | 再生コラーゲンフイブリルを含有する基質及びその製造方法 |
| IL74259A0 (en) * | 1984-02-06 | 1985-05-31 | Surface Concepts Pty Ltd | Improved method for cell culture |
| SE8401125L (sv) * | 1984-03-01 | 1985-09-02 | Ulf Schroder | Sett vid diagnostisering in vitro och diagnostiskt medel |
| US5387522A (en) * | 1984-06-01 | 1995-02-07 | Schering Corporation | Apparatus having a biphasic spray head for entrapping biological material in a hydrophilic gel |
| AU5669486A (en) * | 1985-04-04 | 1986-10-23 | Verax Corp. | Weighted microsponge for immobilizing bioactive material |
| US5100783A (en) * | 1985-05-10 | 1992-03-31 | Verax Corporation | Weighted microsponge for immobilizing bioactive material |
| CA1265443A (en) * | 1985-09-18 | 1990-02-06 | Elieser Gorelik | Assays for chemotherapeutic agents |
| DD274336A3 (de) * | 1985-10-03 | 1989-12-20 | Npo Biolar | Verfahren zur Gewinnung einer Mikroträgersubstanz für die Zellkultivierung |
| SE464816B (sv) * | 1985-10-15 | 1991-06-17 | Nilsson Kjell | Makroporoesa partiklar, foerfarande foer dess framstaellning och dess anvaendning |
| PT83746B (pt) * | 1985-11-15 | 1988-08-17 | Gist Brocades Nv | Processo para a preparacao de novos biocatalisadores imobilizados e para a producao de etanol por fermentacao |
| JPH0634699B2 (ja) * | 1986-12-27 | 1994-05-11 | 千代田化工建設株式会社 | 動物細胞培養方法及び装置 |
| DE3735397A1 (de) * | 1987-10-20 | 1989-05-03 | Hoechst Ag | Magnetische membrankapseln und ihre verwendung |
| EP0318286A3 (en) * | 1987-11-26 | 1990-10-31 | Katakura Chikkarin Co., Ltd. | A substratum for cell culture and its production and use |
| JPH03505163A (ja) * | 1989-03-15 | 1991-11-14 | ゲゼルシャフト フュア バイオテクノロギッシェ フォーシュング エムベーハー（ゲーベーエフ） | 触媒反応並びにその実施のための担体及び装置 |
| DK210989D0 (da) * | 1989-05-01 | 1989-05-01 | Danochemo As | Microcarriers fremstillet ved sprayteknik |
| WO1999021963A1 (en) * | 1997-10-25 | 1999-05-06 | Roche Diagnostics Gmbh | Autodegradable microcarriers and their use |
| KR19990014353A (ko) * | 1998-10-17 | 1999-02-25 | 윤태욱 | 췌도의 대량 배양증식방법 |
| US7604807B2 (en) | 2000-12-01 | 2009-10-20 | Auburn University | Use of pullulan to isolate and preserve biological material |
| WO2002043779A2 (en) | 2000-12-01 | 2002-06-06 | Auburn University | Use of acacia gum (arabic gum) to isolate and preserve biological material |
| WO2003104313A1 (en) | 2002-06-11 | 2003-12-18 | Terminus Biotech Ab | Porous gelatin material, gelatin structures, methods for preparation of the same and uses thereof |
| US20040248291A1 (en) * | 2003-04-10 | 2004-12-09 | Pentax Corporation | Method for culturing cells, cell culture carriers and cell culture apparatus |
| US20090137018A1 (en) | 2003-06-30 | 2009-05-28 | University Of South Florida | Magnetic three-dimensional cell culture apparatus and method |
| WO2005003332A2 (en) * | 2003-06-30 | 2005-01-13 | University Of South Florida | Diamagnetically stabilised three-dimensional cell culture |
| EP1660629A4 (en) * | 2003-07-17 | 2015-04-08 | Global Cell Solutions Llc | SYSTEM AND METHOD FOR AUTOMATIC CELL CULTURE |
| WO2005010139A2 (en) | 2003-07-23 | 2005-02-03 | University Of South Florida | Ferromagnetic cell and tissue culture microcarriers |
| CN1321175C (zh) * | 2004-01-13 | 2007-06-13 | 中国科学院动物研究所 | 一种用于大规模培养细胞的微载体 |
| DE102009043537B4 (de) | 2009-09-30 | 2012-03-22 | Siemens Aktiengesellschaft | Verfahren und Anordnung zur Bestimmung von Zell-Vitalitäten |
| EP2640827B1 (en) * | 2010-11-16 | 2023-07-19 | Ingeneron, Inc. | Methods for preserving target cells |
| KR20220003137A (ko) * | 2017-03-30 | 2022-01-07 | 닛산 가가쿠 가부시키가이샤 | 나노섬유를 이용한 세포 배양 |
| CN109125786A (zh) * | 2018-08-29 | 2019-01-04 | 佛山市森昂生物科技有限公司 | 一种高强度抑菌医用敷料的制备方法 |
| CN109624816A (zh) * | 2018-10-24 | 2019-04-16 | 唐卫 | 货车分层自动装卸技术 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3639558A (en) * | 1968-02-19 | 1972-02-01 | Louis Csizmas | Immunological reagent particles having proteinaceous materials covalently bonded thereto |
| FR2053565A5 (sv) * | 1969-07-09 | 1971-04-16 | Pasteur Institut | |
| US3977941A (en) * | 1971-04-20 | 1976-08-31 | Research Corporation | Protein-enzyme complex membranes |
| BE789195A (fr) * | 1971-09-24 | 1973-03-22 | Gist Brocades Nv | Compositions d'enzymes |
| US3972776A (en) * | 1973-02-26 | 1976-08-03 | Research Corporation | Preparation of protein membranes containing microbial cells |
| US4024020A (en) * | 1975-12-15 | 1977-05-17 | Monsanto Company | Method of cell culture on polyacrylonitrile surface |
| US4036693A (en) * | 1976-02-02 | 1977-07-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Treatment of cell culture microcarries |
| FR2353562A1 (fr) * | 1976-06-04 | 1977-12-30 | Roquette Freres | Procede de fabrication de particules insolubles a activite enzymatique |
| US4167447A (en) * | 1976-07-19 | 1979-09-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Method for insolubilizing enzymes on chitosan |
| US4189534A (en) * | 1976-11-11 | 1980-02-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Cell culture microcarriers |
| FR2396083A1 (fr) * | 1977-06-30 | 1979-01-26 | Merieux Inst | Procede de culture de virus |
| DK146481C (da) * | 1978-08-14 | 1984-03-26 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret enzymprodukt |
| US4257884A (en) * | 1979-04-17 | 1981-03-24 | Damon Corporation | Chromatography |
| US4266032A (en) * | 1979-08-10 | 1981-05-05 | Monsanto Company | Method of culturing microcarrier supported cells |
| SE445116B (sv) * | 1979-09-12 | 1986-06-02 | Pharmacia Fine Chemicals Ab | Sett att odla celler pa mikroberare med fibronektinytskikt |
| FR2470794A1 (fr) * | 1979-12-05 | 1981-06-12 | Pasteur Institut | Nouvelles microparticules, leur preparation et leurs applications en biologie, notamment a la culture de cellules diploides humaines |
-
1980
- 1980-08-20 SE SE8005838A patent/SE456164B/sv unknown
-
1981
- 1981-08-14 EP EP81902357A patent/EP0058689B1/en not_active Expired
- 1981-08-14 WO PCT/US1981/001098 patent/WO1982000660A1/en active IP Right Grant
- 1981-08-14 GB GB8210512A patent/GB2093040B/en not_active Expired
- 1981-08-14 JP JP56502848A patent/JPS57501411A/ja active Pending
-
1986
- 1986-06-06 SE SE8602560A patent/SE456153B/sv not_active IP Right Cessation
- 1986-11-05 SE SE8604739A patent/SE456163B/sv not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB2093040A (en) | 1982-08-25 |
| SE8602560L (sv) | 1987-12-07 |
| SE8604739D0 (sv) | 1986-11-05 |
| EP0058689B1 (en) | 1986-04-23 |
| SE8005838L (sv) | 1982-02-21 |
| JPS57501411A (sv) | 1982-08-12 |
| GB2093040B (en) | 1984-09-19 |
| WO1982000660A1 (en) | 1982-03-04 |
| SE8604739L (sv) | 1986-11-05 |
| SE456164B (sv) | 1988-09-12 |
| EP0058689A1 (en) | 1982-09-01 |
| EP0058689A4 (en) | 1983-02-16 |
| SE8602560D0 (sv) | 1986-06-06 |
| SE456153B (sv) | 1988-09-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SE456163B (sv) | Forfarande for att odla och skorda ytberoende animala celler | |
| Nilsson et al. | Preparation of immobilized animal cells | |
| Hall et al. | Microencapsulation of islets within alginate/poly (ethylene glycol) gels cross-linked via Staudinger ligation | |
| JP6882449B2 (ja) | 内部を固定した脂質小胞 | |
| US4409331A (en) | Preparation of substances with encapsulated cells | |
| Lazar et al. | Formation of porcine hepatocyte spheroids for use in a bioartificial liver | |
| KR20220125295A (ko) | 배양 유제품의 생산을 위한 생세포 구축물 및 이것을 사용하는 방법 | |
| SE441009B (sv) | Sett att immobilisera levande biomaterial i perlformiga polymerer | |
| US4778749A (en) | Tissue culture and production in permeable gels | |
| JPS6244919B2 (sv) | ||
| GB2094832A (en) | Process for culturing anchorage dependent cells | |
| Del Guerra et al. | Entrapment of dispersed pancreatic islet cells in CultiSpher‐S macroporous gelatin microcarriers: Preparation, in vitro characterization, and microencapsulation | |
| WO1989010397A1 (en) | Process for culturing animal cells on a large scale and process for preparing supporting substrate for that process | |
| Kampf | The use of polymers for coating of cells | |
| CN101240270B (zh) | 一种固定化有细胞的海藻酸盐胶囊及其制备方法 | |
| Fukuda et al. | Mass preparation of primary porcine hepatocytes and the design of a hybrid artificial liver module using spheroid culture for a clinical trial | |
| KR100564813B1 (ko) | 세포의 보존방법 | |
| Hoesli et al. | A novel alginate hollow fiber bioreactor process for cellular therapy applications | |
| Nilsson et al. | [35] Entrapment of animal cells | |
| Tarusin et al. | Selection of protocols to cryopreserve mesenchymal stromal cells in suspension and alginate microspheres by studying their osmotic responses in 1M DMSO | |
| CN112972712A (zh) | 一种用于处理生物墨水的新型热压灭菌程序及其在人肝类器官3d模型构建中的应用 | |
| Kim et al. | Development of hepatocyte spheroids immobilization technique using alternative encapsulation method | |
| Sarika et al. | Microgravity as a means to incorporate HepG2 aggregates in polysaccharide–protein hybrid scaffold | |
| CN105802251A (zh) | 一种自组装胶原模板组织工程材料及其制备方法与应用 | |
| CN115369072B (zh) | 一种用于实现多细胞球形成和传代的水凝胶纤维及制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8604739-6 Effective date: 19891201 Format of ref document f/p: F |