SE434887B - Apparat implanterbar i en levande kropp for bestemning av koncentrationen av glukos i biologiska fluider samt sett for bestemning av sadana koncentrationer - Google Patents

Description

15 20 30 40 8200511-'7 Gebhart el al., "Development of an Implantable Electro- catalytic Glucose Sensor", 5 Bioelectrochemistry and Bio- energetics 607 (1978), anger (Figf 9) ett samband mellan glu- koskoncentrationen i närvaro av aminosyror och den laddning som produceras vid elektroden vid en specifik spänning; mellan integrationsperioder skiftas spänningen till en rejuvenations- potential.

SAMMANFATTNING AV UPPFINNINGEN Medelst förfarandet enligt uppfinningen erhålles ett noggrant mätt på glukoskoncentrationen i biologiska fluida genom att man applicerar en spänning på elektroden och varierar spänningen i en förändring eller svepning från en första gräns till en andra gräns och tillbaka mot den första gränsen, varvid det utmärkande för förfarandet är att man integrerar strömmen vid elektroden över åtminstone en del av den spänníngssvepning som väljes för att producera en total laddning som är känslig för glukoskoncentra- tionen och relativt okänslig gentemot andra komponenter i den biologiska fluiden.

På motsvarande sätt innefattar apparaten enligt uppfinningen en elektrod för katalytiskt befrämjande av elektrokemisk oxida- tion av glukos, en spänningskälla, och organ för applicering av en varierande spänning från nämnda källa till elektroden för att förorsaka ett strömflöde därigenom, varvid den utmärkes av organ för integrering av ström vid elektroden med avseende på tiden, och reglerorgan vilka kan opereras automatiskt utan manuellt ingripande för att få nämnda spänning att svepa över ett område i en första riktning från en första gräns till en andra gräns och i motsatt riktning tillbaka mot den första gränsen och för att selektivt aktivera nämnda integrerings- organ under en period innefattande åtminstone en del av nämnda spänningssvepning i båda riktningarna vald för att producerad en total laddning, som är känslig gentemot glukoskoncentration och relativt okänslig gentemot andra komponenter i fluiden.

' Enligt föredragna utföringsformer väljes integreringsdelen så att den mot glukoskoncentrationen svarande laddningen till (Fl 10 15 29 25 30 b! LH 40 8200511-'7 övervägande delen har samma algebraiska tecken över nämnda del, och så att den laddning, som svarar mot störande komponenter i fluíden (eller mot vilken som helst specifik störande komponent), har positivt tecken i ett segment av delen och negativt tecken i ett annat segment, så att den mot glukosen svarande laddningen, och sålunda känsligheten för glukos, förstärkes över integre- ringsdelen, och den mot störande substanser svarande laddningen åtminstone delvis elimineras, vilket sålunda reducerar störningen från sådana komponenter eller förändringar i koncentrationen av sådana komponenter. Den totala laddningen normaliseras i form av förhållandet total algebraisk laddning till totalt absolut ladd- ningsvärde; den undre gränsen för spänningssvepningen är mellan ~1,0 och -0,6 volt och den övre gränsen är mellan 0,7 och 1,1 volt; spänningssvepningen inkluderar uppehàllsperioder vid grän- serna, och hastigheterna för spänningsförändringen under de ano- diska och katodiska svepningarna är konstanta; integrering äger rum kontinuerligt under en fullständig spänningssvepning (eller alternativt i huvudsak inkluderande den anodiska svepningen mel- lan -0,45 volt och den övre gränsen, uppehållet vid den övre gränsen, och hela den katodiska svepningenl; hastigheten för spänningsförändringen under den katodiska spänningssvepningen kan vara högre än under den anodiska spänningssvepningen; och spänningssvepningen kan innefatta uppehållsperioder mellan gränserna vid potentialer, vid vilka glukos undergår en elektro- kemisk reaktion.

BESKRIVNING AV FUREDRAGNA UTFURINGSFORMER Vi övergår nu till en beskrivning av de föredragna utfö- ringsformerna av uppfinningen, varvid först ritningarna kommer att beskrivas kortfattat.

RITNINGAR Fig. l är ett blockschema för kretsen för en implanterbar glukossensor enligt en utföringsform av uppfinningen.

Fig. 2 är ett blockschema för kretsen för en implanterbar glukossensor enligt en annan utföringsform av uppfinningen.

Fig. 3a och Sb visar schematiskt elementen i en elektrod- cell använda vid utföringsformen enligt Fig. 1 eller 2.

Fig. 4a, b, c, d, e och f är kurvor avseende utföringsfor- V. -..w-wa ___... 10 15 20 25 35 40 8200511-7 men enligt Pig. 1.

Fíg. Sa, b och c är kurvor avseende utföringsformen en- ligt Fig. 2.

INTBGRERING AV STROM Fíg. 1 visar i blockform en utföríngsform av en ímplanter- bar krets inkluderande en glukosavkänningscell 40. Fig. Sa och Bb visar en potentiostut 30 inkopplad för att reglera potcntinlfnl- lot mellan glukosoxidutionsclektrod 50 och rcferenselcktrod 52.

Mera konkret gäller att potentiostaten 30 jämför denna spänning (V mät.) med och utjämnar densamma till den spänning (V appl.) som alstras av funktíonsgenerator 20 genom att ström tillåtes flyta i en mätningskrets bildad av ledningar 51, glukoselektrod 50, det biologiska mediet, motelektrod 54, ledning 53 och poten- tíostat 30. Referenselektroden S2 är ansluten till funktions- generatorn medelst ledning 55.

I Pig. 1 är signalprocessor 60 kopplad till mätningskret- sen och integrerar ström i kretsen som svar på tidstyrningssigna- ler från funktionsgeneratorn 20. Modulator/sändare 70 är kopplad till signalprocessor 60 och sänder en FM-signal svarande mot ut- signalen från processor 60 i enlighet med en sändningssígnal från funktionsgeneratorn 20. Sensorcellen 40 (Fig. 3) har en glu- kosoxidationselektrod 50, vilken medelst barriär eller separator 56 (som är ett jonbytarmembran behandlat för att tillåta passage av enbart katjoner) är åtskilt från motelektroden S4. Ett glukos- permeabelt membran S8 avskiljer elektroden 50 från högmolekylära föreningar i det biologiska mediet, och ett biokombinerbart hyd- rofobt membran S9 vid motelektroden tillåter reaktionsprodukter (gaser) att diffundera till omgivande vävnad, under det att elektroden isoleras elektriskt från denna vävnad. Referenselek- troden 52 är en silver/sílverkloridelektrod. Motelektroden 54 är en kolelektrod.

Glukoselektroden 50 är en teflonbunden platiniserad pla- tinaelektrod framställd på följande sätt: En elektrodskiva bildas av en suspension av "Teflon-30" (Dupont) respektive platinasvart (Enge1hard). Denna suspension filtreras därefter genom ett mem- bran till bildning av ett homogent skikt av ifrågavarande "Teflon" och platina på membranet. Denna skiktade struktur pla- ceras därefter ovanpå ett platinatrådgaller med "Teflon"-p1atína- 10 20 ZS 35 40 8200511-7 skiktblandningen i kontakt med platinagallret. Den resulterande skiktade strukturen utsättes för tryck och sintras därefter för åstadkommande av den slutliga elektrodstrukturen. Elektroden skäres ut ur skivan.

Vid drift alstrar funktionsgeneratorn 20 en vågform, som varierar fram och åter mellan två gränser. Linje 2 i Fig. 4a visar en typisk trapetsoid vågform, där spänningen hålles vid -0,8V i 60 sekunder och därefter ökas till +0,8V med en hastig- het av 2 volt/min. Detta område för ökande spänning kallas den anodiska spänningssvepningen. Efter 30 sekunders uppehåll vid 0,8V sänkes spänningen åter med en hastighet av 2 volt/min. till den undre gränsen -0,8V. Området för minskande spänning är den katodiska spänningssvepningen. Genom wfl.av en spänningssvep- ning som effektivt tillåter glukosoxidation och föryngrar elek- trodens katalytiska yta är kontinuerliga svepningar och glukos- koncentrationsmätning möjliga. i När spänningen appliceras på elektroden, katalyseras elektrokemisk reaktion av glukos vid elektrod S0. Glukos från den omgivande vävnaden tränger igenom membranet, och reaktions- produkter transporteras bort från elektroden. Separatorn 56 iso- lerar de båda elektroderna men tillåter överföring av katjoner till motelektroden för att fullborda strömmätningskretsen.

Det biologiska mediet producerar strömmar vid specifika delar av spänningssvepníngen. Speciellt sker glukosoxidation vid specifika delar av svepningen; i dessa delar kan den alstrade strömmen (vilken innefattar ström alstrad somext resultat av re- aktion av bakgrundskomponenter liksom även ström svarande mot glukos) användas för att indikera glukoskoncentrationen. Elek- trokemiska reaktioner på grund av andra komponenter i fluiden -- specifikt karbamid och aminosyror -- kan dock påverka ström- mätningen och förhindra en bestämning av glukoskoncentrationen.

I vissa delar av svepningen är strömmen relaterad till en speciell störande substans positiv i ett segment av delen och negativ i ett annat segment, medan effekten av glukosrelaterade strömmar är i huvudsak positiv över hela delen. Genom integre- ring av cellströmmen över tiden för erhållande av total laddning vid elektroden i denna svepningsdel gör dessa glukosförstärkande, störningsförhindrande fenomen att känsligheten för glukoskoncen- trationen förbättras avsevärt, under det att störningen samtidigt 10 15 20 25 30 40 8200511-7 reduceras. Specifikt gäller att signalprocessorn 60 integrerar ström och ger en mätning på total algebraísk laddning Qt över integreringsområdet; alternativt kan signalprocessorn åstadkomma en signal som representerar förhållandet total algebraisk ladd- ning :in de: absoluta värdet för total laddning Qt/[Qty Kurvorna i Fíg. 4 representerar exempel på operationer ut- förda under simulerade fysiologiska betingelser. De är utförda vid 37°C under en atmosfär av 95% kväve och 5% C02. Bakgrunds- fluíden är en modifierad Kreb-Ringer-buffertlösníng (O,109 hINuC1, 0,024 M NaHCO3, 0,006 M MgS04, 0,001 M NaH2PO4, pH = 7,4).

Aminosyror tillhandahålles i en förrâdslösning av 23 olika amino- syror vid koncentrationer som är proportionella mot fysiologiska koncentrationer. Karbamid är närvarande i de angivna fysiolo- giska koncentrationerna. Den använda potentiostaten (Princeton Applied Research Corp., Model PAR-173) har automatisk IR-kom- pensation. Den programmerbara funktionsgeneratorn är Model 73211 från Data Trak, Research, Inc. Glukoselektroden har en geometrisk area av 0,19 cmz, en Pt-beläggning av 25 mg per cmz och en faktisk area (genom coulometrisk vätestrippníngsmätning) av 485 cmz. Referenselektroden är en mättad standardkalomel- (Hg, Hg2C12, KCl) elektrod, och det glukospermeabla membranet är "Nucleopore" 500 Ångström. f När den ovan beskrivna spänningsvågformen (linje 2 i Fig. 4a) appliceras på enbart Krebs-Ringer-buffert, är strömmen vid elektroden först negativ, därefter positiv och slutligen ne- gativ, såsom visas med linje 1 i Fig. 4(a). Den skuggade ytan under linje 1 representerar laddning, och de positiva och nega- tiva ytorna tar i huvudsak ut varandra.

Fig. 4b visar strömmen uppmätt i systemet före (linje 1) och efter (linje 2) tillsats av glukos. Den skillnad som kan tillskrivas glukos (linje 3) resulterar i en laddning (skuggad) som är i huvudsak positiv över hela vågformen.

Med tillsats av karbamid (Fig. 4c) eller aminosyror (Pig. 4d) till systemet är de resulterande strömförändringarna (linje 2 i Fig. 4c och d) positiva i vissa områden av svepningen och negativa i andra områden, under det att strömmen svarande mot glukos (linje ll förblir i huvudsak positiv över svepningen.

Följande tabell visar att integrering av strömmen över he- la svepningen ger ett algebraiskt laddningsvärde (Qt) (eller ett 10 15 20 30 35 40 8200511-7 normaliserat laddníngsvärde i form av förhållandet mellan alge- braísk och total absolut laddning (Qt/QtD, som är känsligt för glukoskoncentrationen till och med i närvaro av föränderliga Fig. 4e och f illu- strerar specifikt ovanstående samband '1 närvaro av sig föränd- koncontratíoner av zunínosyror och karbanlíd. rande koncentratíoner av aminosyror.

Glukoselektrodrespons gentemot förändrgxgar i glukos- och amlnosyrakoncentratlon.

Konc. , mg/dl Qtí Glukos Aminosyror Karbamíd mCoul 50 35 40 20,0 63 35 40 22,6 75 35 40 24,5 88 35 40 26,0 100 35 40 27,6 113 35 40 28,0 125 35 40 30,0 150 35 40 31,9 175 35 40 33,7 200 35 40 36,3 250 35 40 41,0 50 50 40 23,8 63 50 40 24,3 75 so 40 24,9 88 50 40 27,3 100 50 40 28,8 113 50 40 28,5 125 50 40 28,9 150 50 40 31,2 175 50 40 34,4 200 50 40 35,2 250 50 40 38,5 50 65 40 23,6 63 65 40 23,7 75 65 40 24,4 88 65 40 25,2 100 65 40 26,5 113 65 40 26,7 125 65 40 27,3 150 65 40 29,1 175 65 40 31,3 200 65 40 31,9 250 65 40 34,1 , _-, _, .- ..-_.-v-.-._._.-.~_..._.....

Ali-_ lQtl 10 15 20 30 35 40 3200511-7 När man sålunda integrerar över hela spänningssvepningen, upphäves i huvudsak bakgnnußladdningen (från bakgrundslösningen och från aminosyrorna och karbamiden), under det att den mot glukosen swumnde laddningen är i huvudsak positiv, och sensibili- teten gentemot glukos ökas genom integrering. Dessutom upphäves i huvudsak förändringar ifråga om laddningar förenade med för- ändringar i karbamid- resp. aminosyrakoncentrationer, vilket så- lunda ökar känsligheten för glukos.

Under specifik hänvisning till Fig. 4c och d framgår det att integrering inte behöver ske över hela spänningssvepningen.

Undersökning av en specifik del av svepningen -- i huvudsak in- kluderande delen av den anodiska svepningen från -0,45 volt till 0,8 volt, uppehållet vid den övre gränsen och hela den kato- diska svepningen ~- visar också erforderliga karakteristika för selektivitet och sensíbilitet.

STROMMÄINING Fig. 2 visar ett schema för en apparat liknande den från Fig. 1, med undantag av att funktionsgeneratorn 20 utför ström- mätning med strömmätningsorgan 80 och utsändning av en signal som representerar denna mätning medelst sändare 70. Fig. Sa, b och c representerar resultaten av strömmätningar under beting- - elser som har beskrivits för ovanstående strömíntegrerings- exempel. Området mellan 0,2 och 0,6 volt av den anodiska delen av svepningen visar en klar respons gentemot förändringar i glu- koskoncentrationen samt brist på respons gentemot förändringar i koncentrationerna av aminosyror och karbamid. Mätning vid en punkt inom detta område (t.ex. 0,3 volt) ger sålunda en mätning på glukoskoncentrationerna oberoende av närvaron av karbamid och aminosyror. Just denna del avser en uppfinning beskriven i svenska patentansökningen 8304129-3. Exempelvis visar värden på strömmen vid O,3V i den anodiska svepningen för en Krebs-Ringer- -buffert innehållande 40 mg karbamid per dl och 35 mg aminosyror per dl, tagna från en kurva såsom Fig; Sc, ett linjärt samband mellan ström och glukoskoncentration.

Utföringsformerna enligt såväl Fig. 1 som Fig. 2 skulle inkludera en mottagare (ej visad) utanför den organism, vari sensorn är implanterad, vilken mottagare mottar den signal som utsändes av sensorn och omvandlar denna signal till data repre- 8200511-7 senterande glukoskoncentratíonen. Alternativt skulle mottagaren kunna trygga en alarmanordning när glukoskoncentrationen hamnar utanför förutbestämda gränser. 5 ANDRA UTFURINGSPoRMER Andra utföringsformer ligger inom ramen för de bilagda patentkraven. I exemplifierande syfte kan nämnas att spännings- vågformen kan varieras på otaliga sätt: uppehållstiderna kan förändras men bör företrädesvis vara minst 2 sekunder; den 10 undre gränsen kan ökas till exempelvis -1,0 volt, men alltför stor alstring av väte blir resultatet av en gräns som ligger signifikant under denna nivå. Den övre gränsen kan variera, t.ex. från 0,7 till 1,1 volt; en spänning som markant översti- ger 1,1V förorsakar korrosion på elektroden. Uppehållsperioder 15 kan införas under den anodiska och/eller den katodiska delen av svepningen, företrädesvis vid potentialer vid.vi1ka ghdmsreaktioner sker, så att man ökar den tidsperiod, vid vilken man ligger på sådana potentíaler, och förbättrar känsligheten och selektiví- teten för glukos; hastigheten för spänningsförändringen vid de 20 anodiska och katodiska svepningarna kan vara olika -- exempelvis kan den anodiska svepningen vara relativt sett långsammare, så att man ökar den tid, vid vilken man ligger på spänningar, vil- ka ger strömmar som är känsliga och selektiva för glukos. Vad beträffar strömmätningsutföringsformen enligt Fig. 2 skulle 35 spänningsvariationen kunna innefatta diskontinuiteter såsom språng från en gräns till mätningsspänningen.

Kraven innefattar glukosavkännare som ej är implantera- de -- t.ex. kliniska laboratorieavkännare. De biologiska flui- derna kan innefatta vilka som helst fluider som tas från le- 30 vande organismer eller fluider som simulerar betingelser i en levande organísm, vari innefattas, utan att uppfinningen för den skull är begränsad därtill, blod, urin, buffertlösningar och saltlösningar. f 35 40

Claims (22)

8200511-'7 10 PATENTKRAV

1. Apparat implanterbar i en levande kropp för bestäm- ning av koncentrationen av glukos i biologiska fluider, inne- fattande en elektrod för katalytiskt befrämjande av elektrokemisk oxidation av glukos, 'en spänningskälla, och organ för applicering av en varierande spänning från nämnda källa till elektroden för att förorsaka ett strömflöde därigenom, k ä'n n e t e c k n a d av g g organ för integrering av ström vid elektroden med avseende på tiden, och reglerorgan vilka kan opereras automatiskt utan manuellt ingripande för att få nämnda spänning att svepa över ett område i en första riktning från en första gräns till en andra gräns och i motsatt riktning tillbaka mot den första gränsen och förd att selektivt aktivera nämnda integreringsorgan under en period innefattande åtminstone en del av nämnda spänningssvepning i båda riktníngarna vald för att producera en total laddning, som är känslig gentemot glukoskoncentration och relativt okänslig gent- emot andra komponenter i fluiden. i i _

2. Apparat enligt krav l, k ä n n e t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att aktivera integreringsorganen under en del av spänningssvepningen som är vald så att den mot glukoskoncentrationen svarande laddningen har till övervägande delen samma algebraíska tecken under perioden, och så att den _1addning, som svarar mot störande komponenter i fluiden, har po- sitivt tecken i ett segment av perioden och negativt tecken i ett annat segment av perioden, varigenom den mot glukos svarande laddningen, och sålunda känsligheten gentemot glukos, förstärkes och laddningen svarande mot störande substanser åtminstone del- vis elimineras, vilket sålunda reducerar sådan störning.

3. Apparat enligt krav 1 eller 2, k ä n n e t e c k - n a d av att reglerorganen är anordnade att ge en spänningssvep- ning mellan en undre gräns av mellan -1,0 och -0,6 volt och en övre gräns av mellan 0,7 och 1,1 volt, varvid svepningen innefattar en anodisk svepning från den undre till den övre gränsen samt en ka- 8200511-7 11 todisk svepning från den övre till den undre gränsen.

4. Apparat enligt något av de föregående kraven, k ä n - n e t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att ge en spänningssvepning innefattande uppehållsperioder vid nämnda övre och undre gränser, och där hastigheten för spänningsförändringen under nämnda anodiska och katodiska svepningar är konstant.

5. Apparat enligt något av kraven 1-3, k ä n n e - t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att aktivera integreringsorganen för kontinuerlig integrering under en full- ständig spänningssvepning.

6. Apparat enligt något av kraven l-3, k ä n n e - t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att aktivera íntegreringsorganen under en period innefattande den anodiska svepningen mellan -0,45 volt och den övre gränsen, uppehållet vid den övre gränsen samt hela den katodíska spänningssvepningen.

7. Apparat enligt något av kraven l-3, k ä n n e - t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att ge en has- tighet för spänningsförändringen under den katodiska spännings- svepningen som är högre än under den anodiska spänningssvep- ningen.

8. Apparat enligt något av kraven 1-3, k ä n n e - t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att göra så att varierandet av den applicerade spänningen upphör under uppehålls- perioder mellan nämnda gränser, varvid dessa uppehållsperioder är anordnade vid potentialer, vid vilka glukos undergâr en elek- trokemisk reaktion. a

9. Apparat enligt något av kraven l-3, k ä n n e - t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att aktivera integreringsorganen under en period som är vald så att den ladd- ning, som kan tillskrivas vilken som helst specifik störande komponent i fluiden, elimineras, varigenom förändringar í kon- centrationen av denna specifika komponent inte stör den uppmätta laddningen.

10. Apparat enligt något av de föregående kraven, k ä n n e t e c k n a d av att den innefattar normaliserings- organ för formning av förhållandet mellan nämnda totala laddning och det totala absoluta värdet för laddningen under nämnda period.

11. ll. Apparat enligt något av de föregående kraven, k ä n - n e t e c k n a d av att reglerorganen är anordnade att ge en 8200511 '7 12 spänningsvaríation innefattande en anodisk svepning och en ka- todisk svepning, där hastigheten för spänningsvaríationen är mellan 0,5 volt/min. och 4 volt/min.

12. Förfarande för bestämning av koncentrationen av glu~ kos i biologiska fluider, varvid man: applicerar en spänning på en elektrod för att förorsaka ett strömflöde därigenom, och varierar nämnda applicerade spänning i en svepning varie- rande från en första gräns till en andra gräns samt tillbaka mot den första gränsen, k ä n n e t e c k n a t av att man: integrerar ström med avseende på tid över åtminstone en del av spänningsvariationen vald för att ge en total laddning, som är känslig gentemot glukoskoncentration och relativt okänslig gent- emot andra komponenter i fluiden. i

13. - Förfarande enligt krav 12, k ä n n e t e c k n a t av att man väljer nämnda del så, att den mot glukoskoncentra- tionen svarande laddningen har till övervägande delen samma alge- braiska tecken under perioden, och så att den laddning, som sva- rar mot störande komponenter i fluiden, har positivt tecken i ett segment av perioden och negativt tecken i ett annat segment av perioden, varigenom den mot glukos svarande laddningen, och sâ~ lunda känsligheten gentemot glukos, förstärkes och laddningen svarande mot störande substanser åtminstone delvis elimineras, viflæt sålunda reducerar sådan störning.

14. Förfarande enligt krav 12 eller 13, k ä n n e - t e c k n a t av att man väljer den undre gränsen för en sådan spänníngssvepning mellan -1,0 och -0,6 volt och den övre gränsen mellan 0,7 och 1,1 volt, varvid svepningen innefattar en anodísk svepning från den undre till den övre gränsen samt en katodisk svepníng från den övre till den undre gränsen.

15. Förfarande enligt något av kraven 12-14, k ä n n e - t e c k n a t av att spänningssvepningen innefattar uppehålls- perioder vid nämnda övre och undre gränser, och att hastigheten för spänningsförändringen under nämnda anodiska och katodiska svepningar är konstant. A,

16. “ 16. Förfarande enligt något av kraven 12-14, k ä n n e - t e c k n a t av att integreringen utföres kontinuerligt under en fullständig spänningssvepning. s2oos11-7 13

17. Förfarande enligt något av kraven 12-14, k ä n n e - t e c k n a t av att íntegreringen utföres i huvudsak under en period innefattande den anodiska svepningen mellan -0,45 volt och den övre gränsen, uppehållet vid den övre gränsen samt hela den katodiska spänníngssvepningen.

18. Förfarande enligt något av kraven 12-14, t e c k n a t _av att hastigheten för spänningsförändríngen under den katodíska spänningssvepningen är högre än under den anodiska k ä n n e - spänningssvepningen.

19. Förfarande enligt något av kraven 12-14, k ä n n e - t e c k n a t av att varierandet av den applícerade spänningen upphör under uppehàllsperioder mellan nämnda gränser, varvid des- sa uppehållsperioder är anordnade vid potentíaler, vid vilka glu- kos undergår en elektrokemisk reaktion.

20. - Förfarande enligt något av kraven 12-14, t e c k n a t av att perioden väljes så att den laddning, som kan tillskrivas vilken som helst specifik störande komponent i fluiden, elimineras, varigenom förändringar i koncentrationen av denna specifika komponent inte stör den uppmätta laddningen.

21. Förfarande enligt något av kraven 12-20, k ä n n e - t e c k n a t av att man bildar förhållandet mellan nämnda totala laddning och det totala absoluta värdet för laddningen under pe- rioden.

22. Förfarande enligt något av kraven 12-21, av att spänningsvariatíonen innefattar en anodisk k ä n n e - k ä n n e - t e c k n a t svepning och en katodisk svepning, där hastigheten för spännings- variationen är mellan 0,5 volt/min. och 4 volt/min.