SE415143B - Sett att framstella en stabil emulsion av en organisk fluorforening, avsedd att anvendas bl a som artificiellt blod - Google Patents

Description

7206500-6 Emellertid kan erytrocyter passera genom perifera vävnader genom transformering i viss grad efter förefallande behov, under det att fluorokolvätet i det fall då det användes som artificiellt blod, behöver emulgeras i den utsträckningen att det kan passera genom de perifera vävnaderna, men ett lämpligt sätt att omvandla fluorokolvätet till partikelemulsion, som är stabil under lång tid, har man hitintills icke känt till.

Den kända emulgeringsprocessen utföres genom användning av vattenhaltig glukoslösning, Ringerslösning, Ringers albuminlösning eller elektrolyt-totalaminosyra-pentoslösning som vätskefas och nonjoniskt ytaktivt medel av polyoxietylen-polyoxipropylentyp som emulgeringsmedel. Den genom dessa ovanstående processer erhållna emulsionen har emellertid flera sådana nackdelar att emulsionen icke kan steriliseras genom värmning, och även i fall av steril emulgering blir emulsionen fysikaliskt ostabil, emedan fluorokol- vätepartiklarna däri växa-sig stora allteftersom tiden fortskrider och därefter skiljer sig från vätskefasen inom några dagar.

Till följd av forskning med avseende på stabil emulsion har man enligt uppfinningen lyckats framställa en stabil emulsion av O/W-typ av fluorokolvätepartiklar, vilken emulsion erhålles genom att fluorokolväte med ett visst omrâde av specifik vikt och non- joniskt ytaktivt medel som emulgeringeringsmedel emulgeras i vat- tenhaltig lösning, innehållande polyalkohol, som vätskefas vid förhöjt tryck. l Genom förfarandet enligt uppfinningen avser man att åstadkomma en stabil emulsion av fluorokolvätepartiklar, vilken kan användas som artificiellt blod och vilken kan steriliseras genom värmning, och en stabil emulsion av fluorokolvätepartiklar, vilka icke irre- versibelt skiljersig under långtidslagring i avsikt att vara fysi- kaliskt stabila.

Andra syftemål och fördelar med föreliggande uppfinning kommer att framgå för fackmannen efter läsning av föreliggande beskrivning. 7 Föreliggande uppfinning hänför sig således till ett sätt att framställa en stabil olja-i-vatten-emulsion, avsedd att användas som artificiellt blod eller i perfusionslösning för konservering av inre organ vid utförande av transplantation, genom emulgering av en blandning av vatten och en organisk fluorförening och sättet känne- tecknas därav, att en blandning av vatten och 5-60 vikt/vol%, räknat på emulsionen av en i huvudsak vattenolöslig, inert, flytande, orga- nisk fluorförening med en specifik vikt av 1,5-2,0 emulgeras vid 7206500-6 förhöjt tryck med hjälp av 0,2-5 vikt/vol%, räknat på emulsionen, av minst ett ytaktivt medel av nonjonisk typ, som väljes bland polyoxietylenderivat av hydrogenerad ricinolja och polyoxietylen- -polyoxipropylensampolymerer, och 2-20 vikt/vol%, räknat på emul- sionen, av minst en polyalkohol, som väljes bland glycerol, propy- lenglykol, sorbitol och xylitol, för att ge en olja-i-vatten-emulsion av sagda fluorförening med en partikeldiameter av under 0,2 Pm.

Det i föreliggande uppfinning använda fluorokolvätet är en inert vätskeformig förening, som har en specifik vikt av ca 1,5-2,0, är huvudsakligen olöslig i vatten och icke kan reagera med läkemedel.

Vidare är det fluorokolväte som användes i föreliggande uppfinning sta- bilt under hög temperatur och kan icke lösas av och reagera med alla komponenterna i den levande kroppen. Exempel på fluorokolväten av så- dan'art är anskaffbara under varumärkena "Innate Liquid FC-43" (perfluorotributylamin, kp l74°C), "Innate Liquid FC-75" (perfluoro- (2-butylfuran), kp lO2,2°C), tillverkare Minnesota Mining and Manufacturing Cq,"Freon E4" (1,2,2,2-tetrafluoretyleter av perfluoro- (2,5,8-trimetyl-3,6,9-trioxa-1-dodekanol), kp l93°C, från DuPont Chemi- cal Co.), perfluoro(1-metyldekalin) (kp l60°C), perfluorodekalin (kp l42°C) och liknande. Den mängd av dessa fluorokolväten, vilken kan användas vid tillämpning av föreliggande uppfinning, beror på deras förmåga att bära gas, och den tillräckliga mängden därav är allmänt 5-60 % vikt/vol per den totala emulsionen.

Föredragna nonjoniska ytaktiva medel, vilka användes som emulgeringsmedel i föreliggande uppfinning, innehåller icke pyrogen och är icke alls giftiga och hemolytiska och är exempelvis polycxi- etylenhydrogenerairicinolja, nonjoniskt ytaktivt medel av poly- oxietylen-polyoxipropylentyp och/eller liknande. vid användning av dessa nonjoniska ytaktiva medel är det lämpligt, att de är i förväg renade, t ex renas dessa ytaktiva medel genom beredning av en 10 % vattenhaltig lösning och efterföljande dialysering mot vatten under användning av recellulosarör eller genom passage genom stark syra-katjonbytesharts och därefter stark bas-anjon- bytesharts. Dessa nonjoniska ytaktiva medel är även användbara i en eller flera kombinationer därav i föreliggande uppfinning, och den tillräckliga mängd, som användes därav, är allmänt 0,2-5 % vikt/vol av den totala emulsionen.

Polyalkoholer, som användes tillsammans med de nonjoniska ytaktiva medlen, väljes allmänt från den grupp som allmänt an- vändes för injektion eller liknande. Dessa polyalkoholer, såsom i 7206500-6 glycerol, propylenglykol, sorbitol, xylitol och/eller liknande, är fördelaktiga och kan användas i en eller flera kombinationer därav i föreliggande uppfinning. Den tillräckliga mängd, som an- vändes därav, är allmänt 2-20 % vikt/vol per den totala emulsionen.

En emulsion, som framställes enligt uppfinningen, beredes exempelvis genom att fluorokolvätet, de nonjoniska ytaktiva medlen och polyalkoholerna blandas med vatten, blandningen emulgeras vid förhöjt tryck och därefter filtreras genom mikroporöst filter med ca 0,45-0,8 um poröppningar (t ex varumärke MilliporeC)Filter, tillverkare Millipore Filter Co., "Micro Filter", tillverkare Fuji Film Co. och liknande). Före filtreringen är det lämpligt, att emulsionens pH-värde likställes med pH-värdet hos en kropps- vätska med ett reagens, såsom fosfat, karbonat, citrat eller liknande.

Den sålunda erhållna emulsionen steriliseras företrädesvis genom värmning i ett lufttätt kärl, såsom en ampull, flaska eller liknande. p Den enligt uppfinningen erhållna emulsionen av fluorokolväte- partiklar kan exempelvis injiceras genom kontinuerlig intravenös administration som hjälpblod vid utförande av operation och är effektiv i perfusionslösning för konservering av inre organ vid utförande av transplantation.

Experiment l I Var och en av emnlsionerna av fluorokolvätepartiklar med följande recept framställdes genom emulgering på samma sätt som i följande exempel 1, och 50 ml av de respektive emulsionerna inne- slöts i teströr med slipad propp och med en innerdiameter av 20 mm, motsvarande prover A, B, C och D. Sedimentationshastigheterna för des- sa prover bestämdes regelbundet, och resultatet därav visas i tabell l.

Recept A Fluorokolväte under varumärket 30 g Innate Liquid FC-75 (sp.v. 1,76 via 25%) Polyoxietylen-hydrerad ricinolja ' 2,0 g under varumärket Nikkol HCO-60, tillv. Nikko Chemicals Co, med genomsnittlig halt av etylenoxid: 60 mol per mol hgdrogenerad ricinolja, HLB 14,0. fryspunkt 26-30 c Dinatriumfosfat Na2HPO4.l2H2O 0,01 g Destillerat vatten . 80 g Recept B 5,0 g xylítol sattes till recept A. 7206500-6 ReCeEt C Fluorokolväte under varumärket 30 g Innate Liquid FC-4å (sp.v. 1,87 vid 25 C) Nonjoniskt ytaktivt medel av polyoxietylen- -polyoxipropylentyp 2,0 g under varumärket PLURONICC)-F68 tillv. Asahi Denka Industries Co. genomsnittlig molekylvikt 8750 etylenoxidhalt 80 vikt/vikt%, propylengxidhalt 20 vikt/vikt%, HLB 14,8, smältpunkt 50 C Dinatriumfosfat Na2HPO4.l2H20 0,01 g Destillerat vatten 80 g Recept D 2,5 g glycerol sattes till recept C.

Enheterna i dessa recept betecknar antalet gram i 100 ml av emulsionen.

Tabell l Tid efter P r o v experimentets ~ start A B C D Cm Cm Cm cm 2 dygn ingen ingen ingen ingen sedimentation sedinentation sedinentation sedinentation 7 " _ 15,0 A ingen 15,2 ingen sedinentation sedimentatign 14 " 13,8 l5,0 13,6 15,2 1 mån 12,0 14,5 ' 12,1 14,3 3 " 10,5 i 14,1 9,7 14,3 Siffervärdena i tabellen visar höjden för sedimentations- skikt, bestämt vid 30°C.

Såsom framgår av tabell l började proverna A och C att skilja sig efter endast ca 7 dygn från experimentet, medan provet B, innehållande xylitol, och provet D, innehållande glycerol, började att skilja sig efter ca 14 dygn. ' Efter 3 män från experimentets start skakades proverna A och C kraftigt, varefter diametrarna för fluorokolvätepartiklar i proverna A och C observerades med ett mikroskop. Det obser- verades, att fluorokolvätepartiklarna med en medeldiameter av under O,2fmnnär'proverna beretts, hade förändrats till fluorokolväte- partiklar med en större diameter än 1 um vid denna tidpunkt. 7206500-6 Fastän provet B, innehållande xylitol, och provet D, innehållande glycerol, något skilde sig med tiden, hade fluorokolvätepartiklarna i proverna B och D efter 3 mån från experimentets start full- ständigt identisk diameter med utgångsdiametern, dvs en medel- diameter av under 0,2 pm, när de utsatts för samma behandling som ovan beskrivits.

Föreliggande uppfinning belyses men begränsas icke på något sätt av följande exempel.

Exempel 1 l00 g xylitol och 5 g polyoxietylen-hydrogenerad ricinolja sattes till 500 ml destillerat vatten för injektion och löstes genom värmning vid 60-70°C. I den erhållna lösningen under kraf- tig omröring hälldes 500 g fluorokolväte under varumärket Innate Liquid FC-75 (sp.v. 1,76 vid 25°C), förvärmt till 60°C,sakta, varvid en råemulsion erhölls. Mängden av råemulsionen bringades upp :in looo m1 med tilieättning ev destillera: vatten för injektion, och râemulsionens pH-värde inställdes till 7,4 genom tillsättning av 80 mg Na2HP04.l2H20. Råemulsionen placerades i en högtrycksemulgerapparat (Manton-Gaulin-typ) och emulgerades genom att den bringades i cirkulation i 5 min under ett tryck av 450 kp/cmz. Den sålunda erhållna emulsionen filtrerades genom ett 0,8 um filter under varumärket MilliporeGDFilter, och filtra- tet hälldes därefter i två flaskor för dubbelprov och flaskorna tillslöts. Proverna steriliserades 2 ggr vid 90°C under 30 min _varje 24:e timme, varigenom emulsionen av fluorokolvätepartiklar erhölls.

Exempel 2 200 g sorbitol och 20 g nonjoniskt ytaktivt medel av poly- oxietylen-polyoxipropylentyp sattes till 400 ml destillerat vatten för injektion och löstes genom värmning vid 60-70°C.

I den erhållna lösningen under kraftig omröring hälldes 300 g fluorokolväte under varumärket Freon E4 [l,2,2,2-tetrafluoretyleter av perfluor (2,5,8-trimetyl-3,6,9-trioxa-l-dodekanol)], förvärmt till 60°C, sakta, varigenom en råemulsion erhölls. Råemulsionens mängd bringades upp till 1000 ml med tillsättning av destillerat vatten för injektion, och râemulsionens pH-värde inställdes till 7,4 genom tillsättning av 25 mg Na2HP04.l2H20. De följande behand- lingarna av råemulsionen utfördes på samma sätt som det i exempel 1 beskrivna, varigenom en emulsion av fluorkolvätepartiklar erhölls. 7206500-6 Exempel 3 25 g glycerol och 20 g nonjoniskt ytaktivt medel av poly- oxietylen-polyoxipropylentyp sattes till 500 ml destillerat vatten för injektion och löstes genom värmning till 60-70°C.

I den erhållna lösningen under kraftig omröring hälldes 300 g fluorokolväte under varumärket Innate Liquid FC-43 (sp.v. 1,87 vid 25°C), förvärmt till 80°C,sakta, varigenom en råemulsion erhölls. Råemulsionens mängd bringades upp till 1000 ml med tillsättning av destillerat vatten för injektion, och råemulsionens pH-värde justerades till 7,4 genom tillsättning av 80 mg Na2HP04.l2H2Ö. De följande behandlingarna av råemulsionen ut- fördes på samma sätt som i exempel l, varigenom en emulsion av fluorokolvätepartiklar erhölls.

Exempel 4 25 g glycerol och 15 g polyoxietylen-hydrogenerad ricinolja sattes till 600 ml destillerat vatten för injektion och löstes genom värmning vid 60-70°C. l den erhållna lösningen under kraf- tig omröring hälldes 200 g fluorokolväte under varumärket Innate Liquid FC-78 (perfluor(N-metylmorfolin), sp.v. 1,70 vid 25°C), förvärmt till 60°C, sakta, varigenom en råemulsion erhölls. Rå- emulsionens mängd bringades upp till 1000 ml med tillsättning av destillerat vatten för injektion, och råemulsionens pH-värde in- ställdes till 7,4 genom tillsättning av 120 mg Na2HPO4.l2H20.

De följande behandingarna av råemulsionen utfördes på samma sätt som det i exempel l beskrivna, varigenom en emulsion av fluorokol- vätepartiklar erhölls.

Rapport över jämförande försök Det är känt att fluorkolväteemulsioner är användbara som arti- ficiellt blod eller blodersättningsmedel på grund av den stora förmågan att bära biologisk gas (t ex syrgas till perifera väv- nader och koldioxidgas från perifera vävnader). Det inses här- vid av fackmannen på omrâdet att partikelstorleken hos fluor- kolväteemulsionen, som administreras intravenöst, måste vara så liten som möjligt för att undvika störningar av mikrocirku- lationen, såsom vaskulär embolism.

Såsom framgår av "Federation Proceedings " 29 (1970), sid 1758 - 1763 och "Journal of Surgical Research" 10 (1970), sid 559 - 570, kan fluorkolväteemulsioner framställas genom att 72065 00-6 8 emulgera en blandning av vatten och fluorkolväte med hjälp av ett nonjoniskt ytaktivt medel av typen polyoxietylen-hydrerad ricinolja eller polyoxietylen-polyoxipropylen. De fluorkolväte- emulsioner, som framställts enligt dessa kända förfaranden, upp- visar emellertid fortfarande nackdelar vid användning inom det kliniska området på grund av att de inte är tillräckligt stabila för att hindra de dispergerade fluorkolvätepartiklarna från att öka i storlek eller att separera från vätskefasen efter viss tid.

Till skillnad från de ovannämnda, på känt sätt framställda emul- sionerna har emellertid fluorkolväteemulsionen enligt föreligg- ande uppfinning tillräcklig stabilitet och uppvisar ingen ökning i partiklarnas medeldiameter efter långvarig lagring.

Dessa fakta framgår klart av de jämförande försök, som ges i det följande. k Metoder (i) Framställning av prover Ytaktivt medel och polyalkohol sattes till 500 ml vatten och löstes däri genom upphettning vid 60-70°C. Ett fluorkolväte, som förvämts vid 60°C, hälldes i lösningen under kraftig omröring.

En råemulsion erhölls på detta sätt. Destillerat vatten sattes till råemulsionen till en volym av 1000 ml. Därefter tillsattes NaHP04.l2H20 för att justera pH-värdet till 7,4. Råemulsionen placerades i en homogeniseringsapparat av typ Manton-Gaulin och emulgerades genom cirkulation i apparaten under 5 min vid ett tryck av 450 kp/cmz. Den sålunda erhållna emulsionen filtrerades genom ett 0,8 um filter av varumärket Milliporg Filter. Filtra- tet hälldes i ampuller, som förseglades. Proverna steriliserades vid 90°C under 30 min. Steriliseringen utfördes 2 gånger med 24 h intervalll På detta sätt erhölls en fluorkolväteemulsion.

Det i varje prov använda fluorkolvätet, ytaktivt medlet och polyalkoholen samt mängderna därav anges i tabell l.

Tabell l 7206500-6 Prov Använt fluorkol- Anvânt ytaktivt me- Använd polyalkohol och nr väte och mängd del och mängd därav mängd därav därav 1 Perfluoro(2-bu- Polyoxietylen-hydrerad Ej tillsatt tylfuran), 200 ml ricinolja (av varumär- ket Nikkol HCO-60), 25 g 2 Perfluorotribu- Nonjoniskt ytaktivt me- Ej tillsatt tylamin, 200 ml del av typen polyoxi- ety1en-polyoxipropy- len av v umärket Pluroni F-68), 25 g 3 l,2,2,2-tetra- Samma som ovan Ej tillsatt fluoretyleter av perfluoro (2 ,5 ,8- -trimetyl-3,6,9- -trioxa-l-dode- kano1),200 ml 4 Perfluoro(l-me- Samma som ovan Ej tillsatt tyldekalin), 200 ml S Perfluorodeka- Samma som ovan Ej tillsatt lin, 200 ml - 6 Perf1uoro(2- Polyoxietylen-hydre- Xylitol, 50 g -butylfuran), rad ricinolja (av 200 ml varumärket Níkkol Hce-eo) , 25 g 7 Perfluorotri- Nonjoniskt ytaktivt Glycerol, 25 g butylamin, 200 ml medel av typen polyoxietylen-poly- oxipropylen (av v rumärket Pluronic F-68), 25 g B l,2,2,2-tetrafluor- Samma som ovan Sorbitol, 50 q etyleter av per- fluoro(2,S,8-tri- mety1-3,6,9-tri- oxa-1-dodekanol), 200 ml 9 Perfluoro(l-metyl- Samma som ovan Xylitol, 50 g dekalin), 200 ml 10 Perfluorodekalin, Samma som ovan Sorbitol, 25 g 200 ml xy11c01, 25 g '7206500-'6 10 (ii) Mätning av fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter Storleken av de dispergerade' fluorkolvätepartildaxna hos varje prov bestämdes medelst ett mikroskop, som var försett med en kalibrerad mikrometerskala, och med användning av en i olja nedsänkt lins.

S ml av provet späddes till 25 ml och en droppe placerades på ett objektglas, täcktes och undersöktes. Åtminstone fem områden på olika delar av objektglaset undersöktes och de dispergerade fluor- kolvätepartiklarnas medeldiameter beräknades med ledning därav.

Resultat Resultaten vid undersökning av fluorkolvätepartiklarnas medel- diameter visas i tabell 2.

Tabell 2 Prov _ nr Observationsresultat (Kontrollgrupp) l Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Denna diameter ökade till 0,8 um efter 3 månaders lagring gvid 30°C. 2 -Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Denna diameter ökade till 0,8 um efter 3 månaders lagring vid 30°C. 3 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Denna diameter ökade till 1,0 um efter 3 månaders lagring vid 30°C. 4 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Denna diameter ökade till 1,2 um efter 3 månaders lagring 1 vid 3o°c. 35 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Denna diameter ökade till 1,2 um efter 3 månaders lagring vid 30°C 6 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Emulsionen uppvisade ingen förändring i partiklarnas medel- diameter efter 3 månaders lagring vid 30°C. 7 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Emulsionen uppvisade ingen förändring i partiklarnas medel- diameter efter 3 månaders lagring vid 30°C. 8 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Emulsionen uppvisade ingen ändring i gartiklarnas medeldia- meter efter 3 månaders lagring vid 30 u 7206500-6 ll Tabell 2 (forts.) Prov nr Observationsresultat 9 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Emulsionen uppvisade ingen ändring i partiklarnas medeldia- meter efter 3 månaders lagring vid 30°C, 10 Fluorkolvätepartiklarnas medeldiameter var mindre än 0,2 um.

Emulsionen uppvisade ingen ändring i gartiklarnas medeldia- meter efter 3 månaders lagring vid 30 C.

Såsom framgår av de jämförande pmvningsresultaten ökades fluorkol- partiklarnas medeldiameter i kontrollgruppen (proverna l-5) från 0,2 um (vid framställning) till 0,8-1,2 um (3 månader efter fram- ställningen). Fluorkolväteemulsionerna i kontrollgruppen, vilka emulsioner framställdes genom att emulgera en blandning av vatten och fluorkolväte med hjälp av enbart polyoxietylen-hydrerad ricinolja eller nonjoniskt ytaktivt medel av typen polyoxietylen-polyoxipropylen, uppvisade sålunda försämring eller koalescens av fluorkolvätepartik- larna efter lagring under 3 månader. Detta visar ett fluorkolväte- emulsionerna i kontrollgruppen hade otillräcklig stabilitet under långvarig lagring.

I motsats till kontrollgruppen uppvisade emellertid fluorkolväteemul- sionerna enligt föreliggande uppfinning (proverna 6-10) ingen föränd- ring i flurkolvätepartiklarnas medeldiameter. När blandningen av vat- ten och fluorkolväte emulgerades med hjälp av polyalkohol och endera av ett nonjoniskt ytaktivt medel av typen polyoxietylen-polyoxipropy- len eller polyoxietylen-hydrerad ricinolja, hade fluorkolvätepartiklar- na hos de sålunda erhållna emulsionerna en diameter av mindre än 0,2 um och denna diameter förblev konstant t o m efter lagring under 3 månader. Detta visar klart att polyalkohol vid användning i blandning med polyoxietylen-hydrerad ricinolja eller nonjoniskt ytaktivt medel av typen polyoxietylen-polyoxipropylen har en synergistisk effekt med avseende på stabilisering av fluorkolväteemulsioner. Det visar också att fluorkolväteemulsionerna enligt föreliggande uppfinning har ut- märkt stabilitet under långvarig lagring till följd av att polyalkohol använts som stabiliseringsmedel. Det är följaktligen tydligt att, i

Claims (7)

7206500-6 12 jämförelse med de tidigare använda, kända metoderna, sättet enligt föreliggande uppfinning möjliggör framställning av bättre fluorkolväteemulsioner till användning som artificiellt blod eller blodersättningsmedel på grund av emulsionernas högre stabilitet. PATENTKRAV

1. l. Sätt att framställa en stabil olja-i-vatten-emulsion, avsedd att användas som artificiellt blod eller i perfusionslös- ning för konservering av inre organ vid utförande av trans- plantation, genom emulgering av en blandning av vatten och en organisk fluorförening, k ä n n e t e c k n a t därav, att en blandning av vatten och 5-60 vikt/vol%, räknat på emulsionen, av en i huvudsak vattenolöslig, inert, flytande, organisk fluorförening med en specifik vikt av 1,5-2,0 emulgeras vid förhöjt tryck med hjälp av 0,2-5 vikt/vol%, räknat på emulsionen, av minst ett ytaktivt medel av nonjonisk typ, som väljes bland polyoxietylenderivat av hydrogenerad ricinolja och polyoxietylen- -polyoxipropylensampolymerer, och 2-20 vikt/vol%, räknat på emulsionen, av minst en polyalkohol, som väljes bland glycerol, propylenglykol, sorbitol och xylitol, för att ge en olja-i- -vatten-emulsion av sagda fluorförening med en partikeldiameter av under 0,2 pm.

2. Sätt enligt kravet l, k ä n n e t e c k n a t därav, att emulsionen filtreras genom ett mikroporöst filter med poröppningar av 0,45-0,8 pm, och att emulsionen därefter steri- liseras genom upphettning i ett lufttätt kärl.

3. ANFÖRDA PuBL1KAT1oNER=

4. Sverige patentansökan ll 185/71

5. Tyskland 2 144 094 (A61K 27/10)

6. Andra publikationer: _ Federation proceedings. Federation of American socíetíes for _ experimental biology 29 (1970):5, p. 1758-1763; Journal of surgical research 10 (1970):11, p. 559-570; The condensed chemical dictionary.

7. Ed. New York 1966, p. 452 ("glycerol"); _ _ The Merck index. s. Ed. Ruhwuy, N.J. USA, 1968, p. 846 ("P°1°xq1ene").