SA07280637B1 - مضادات أجسام مضادة للانقسام جديدة - Google Patents

مضادات أجسام مضادة للانقسام جديدة Download PDF

Info

Publication number
SA07280637B1
SA07280637B1 SA07280637A SA07280637A SA07280637B1 SA 07280637 B1 SA07280637 B1 SA 07280637B1 SA 07280637 A SA07280637 A SA 07280637A SA 07280637 A SA07280637 A SA 07280637A SA 07280637 B1 SA07280637 B1 SA 07280637B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
antibody
arrangement
cdr
defining
order
Prior art date
Application number
SA07280637A
Other languages
English (en)
Inventor
كورفيا ناتلي
هاآو جون فرنسوا
بي سيدريك
جوتس ليليان
Original Assignee
بيير فابر ميديكامو
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by بيير فابر ميديكامو filed Critical بيير فابر ميديكامو
Publication of SA07280637B1 publication Critical patent/SA07280637B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
    • C12N5/16—Animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/54—F(ab')2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

الملخص: يتعلق الاختراع الحالي بمضادات أجسام (antibodies) جديدة منفصلة، أو مركبات مشتقة أو أجزاء وظيفية منها، قادرة على تثبيط انقسام خلايا ورم (proliferation of tumor cells) في المعمل و/أو في الجسم، ويتم الحصول على مضادات الأجسام (antibodies) المذكورة بواسطة فحص وظيفي. بتحديد أكثر، يتعلق الاختراع الحالي بمضاد الجسم (antibody) 6F4، الخاص مع protein JAM-A، بالإضافة إلى استخدامه لمعالجة سرطان. يتضمن الاختراع أيضا تركيبات دوائية متكونة من مضادات الأجسام (antibodies) تلك.

Description

مضادات أجسام مضادة للانقسام جديدة ‎Novel antiproliferation antibodies‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بمضادات أجسام ‎(antibodies)‏ جديدة؛ بالتحديد مضادات أجسام فأرية أحادية النسخ؛ هجينة ومكتسبة السمة الآدمية؛ قادرة على تثبيط نمو ورم؛ بالإضافة إلى ترتيبات ‎amino acid‏ والنووي المشفرة لمضادات الأجسام تلك. في أحد الجوانب؛ يتعلق ‎٠‏ الاختراع بمضادات أجسام جديدة؛ بمركبات مشتقة أو بأجزاء وظيفية؛ قادرة على تثبيط انقسام خلايا ورم. ‎dads‏ الاختراع أيضا استخدام مضادات الأجسام تلك كعقار لمعالجة مانعة و/أو ‎Ladle‏ لسرطانات؛ بالإضافة إلى الاستخدام في الإجراءات أو المجموعات المرتبطة بتشخيص سرطان. في النهاية؛ يشمل الاختراع تركيبات تشمل مضادات الأجسام تلك في اتحاد مع مركبات أخرى مضادة للسرطان؛ ‎Jie‏ مضادات أجسام؛ أو متحدة مع ‎ctoxing‏ واستخدامها لمنع ‎٠‏ و/أو معالجة سرطانات خاصة. بصفة عامة؛ فإن المعيار المختار لإنتاج مضادات أجسام أحادية النسخ هو إدراك مولد المناعة المحدد كهدف ممكن للمعالجة. في الممارسة العملية؛ تحصن الفئران مع ‎protein‏ ‏مُخلق يطابق مولد المناعة وبعد استرجاع مضادات الأجسام أحادية النسخ المتولدة بواسطة ‎la)‏ يتم فحصها أولا من أجل قدرتها على ‎alge dh)‏ المناعة بطريقة خاصة. في مرحلة ‎٠‏ ثانية؛ تختبر مضادات الأجسام المنتقاة بتلك الطريقة في الجسم وفي المعمل لتحديد نشاطها بالإضافة إلى خواصها و/أو آليات تأثيرها. إن هذا الأسلوب "التقليدي"؛ حتى ولو كان من الممكن معرفة الهدف العامل من البداية؛ غالبا ما يولد عدد كبير من مضادات الأجسام القادرة بالتأكيد على الإدراك بصفة خاصة لهدف معين لكنها لا تظهر في الجسم نشاطا حيويا ملحوظا. في مجال السرطان؛ من المعروف في ‎٠‏ الواقع أنه حتى ولو كان مضاد الجسم يؤدي إلى نتائج جيدة في المعمل؛ فلا يعني ذلك حتميا أن مضاد الجسم ذلك سوف يظهر لاحقا نشاط حقيقي مضاد لورم في الجسم. يختلف الاختراع الحالي عن هذه الطريقة السابقة؛ وقد يكون مضادا لما هو مذكور سلفاء لأنه يعتمد على أسلوب "وظيفي ‎(functional)‏ وبتحديد أكثر على فحص أولي معتمد على الوظيفة المستهدفة لمضاد الجسم وليس على مولد المضاد المدرك. ‎Ya.‏
’ بتحديد أكثر؛ انتقى المخترعون وظيفة معينة؛ تحديد تثبيط انقسام قاعدي غير محث للخلية؛ كمعيار لانتقاء مضاد جسم. سيتم وصف طريقة الإنتاج المستخدمة بتفصيل أكثر في الأمثلة أدناه. الوصف العام ثلاختراع ° بطريقة مثيرة للدهشة؛ بواسطة هذا الأسلوب الوظيفي؛ أنتج المخترعون وانتقوا مضادا للجسم قادرا على تثبيط؛ انقسام خلايا ورم في المعمل و/أو في الجسم؛ بطريقة مفيدة. طبقا لجانب أول؛ يتعلق الاختراع بمضاد جسم منفصل؛ أو مركب مشتق أو ‎era‏ وظيفي منه؛ قادر على تثبيط انقسام خلايا ورم في المعمل و/أو في الجسم؛ يشمل مضاد الجسم المذكور؛ أو مركب مشتق أو ‎ha‏ وظيفي منه؛ يشمل منطقة ‎CDR‏ واحدة على الأقل يتم ‎٠‏ اختيارها من ضمن المناطق المحددة للتكملة ‎(CDRs)‏ من تعريف الترتيبات أرقام ‎FY ob‏ ‎of‏ 0 أو 1 أو ‎CDR‏ واحدة على الأقل يكون لترتيبها تماثل 280 على ‎(JN‏ يفضل ‎Ae‏ ‎(JA‏ 15 و78 بعد إصطفصاف أمثل مع تعريف الترتيبات أرقام ‎FY 0٠‏ 4 © أو 1. إن 'جزء وظيفي ‎"(functional fragment)‏ لمضاد جسم يعني بصفة خاصة جزء مضاد جسم؛ مثل أجزاء ‎5c) scFv (Fv‏ = سلسلة بسيطة) ‎Fab’ F(ab), «Fab‏ 8617-17 أو ‎١‏ أجسام ثنائية؛ أو أي جزء يزداد عمر النتصف له. سيتم وصف تلك الأجزاء الوظيفية بالتفصيل لاحقا في الوصف الحالي. إن “مركب مشتق ‎(derived compound)‏ من مضاد جسم يعني بصفة خاصة ‎protein‏ ‏رابط يتكون من دعامة ‎peptide‏ وواحدة على الأقل من ‎CDRs‏ من مضاد الجسم الأصلي من أجل الحفاظ على إمكانية إدراكه. إن تلك المركبات المشتقة؛ المعروفة جيدا لشخص ماهر في ‎oll ٠‏ سيتم وصفها بتفصيل أكثر لاحقا في الوصف الحالي. بصورة مفضلة أكثر؛ يشمل الاختراع مضادات الأجسام؛ مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ المطابقة للاختراع الحالي؛ تحديدا المختلطة أو المكتسبة للسمة الآدمية؛ الناتجة بتخليق جيني أو تكوين كيميائي. طبقا لتطبيق مفضل؛ يتميز مضاد الجسم المطابق للاختراع؛ أو مركباته المشتقة أو أجزاؤه ‎vo‏ الوظيفية؛ بأنه يتكون من مضاد جسم أحادي النسخ. من المفهوم أن 'مضاد جسم أحادي النسخ ‎"(monoclonal antibody)‏ يعني مضاد جسم ناشئ من حشد مضاد جسم متماثل تقريبا. بتحديد أكثر؛ تكون مضادات الأجسام المنفردة من بول
¢ الحشد متماثلة باستثناء طفرات قليلة ممكنة طبيعية الوجود يمكن وجودها بنسب دنيا. بطريقة أخرى؛ يتكون مضاد جسم أحادي النسخ من مضاد جسم متماثل ناشئ من نمو نسخة خلية واحدة ‎Jo)‏ سبيل المثال ورم هجين؛ خلية ‎Able‏ سوية النواة مستقبلة حامل الجين من العائل مع جزيء ‎DNA‏ مشفر لمضاد الجسم المتمائل؛ خلية عائلة بدائية النواة مستقبلة حامل الجين © من العائل مع جزيء ‎DNA‏ مشفر لمضاد الجسم ‎(lad)‏ إلخ) ويتميز عامة بسلاسل ثقيلة من واحد فقط من وصنف فرعي؛ وسلاسل خفيفة من نوع واحد فقط. إن مضادات الأجسام أحادية النسخ خاصة للغاية وموجهة ضد مولد مضاد واحد. إضافية لذلك؛ بعكس من مستحضرات مضادات الأجسام عديدة النسخ التي تتضمن نموذجيا مضادات أجسام عديدة موجهة ضد مواد تحديد مختلفة؛ أو و©م10:مع؛ فإن كل مضاد جسم أحادي النسخ موجه ضد
‎epitope ٠‏ واحد لمولد المضاد.
‎aN‏ هنا من إدراك أن الاختراع لا يتعلق بمضادات أجسام في شكل طبيعي؛ أي؛ أنه لا يتم أخذها من بيئتها الطبيعية لكن يتم فصلها أو الحصول عليها بالتنقية من مصادر طبيعية أو يتم الحصول عليها بتخليق جيني أو تكوين كيميائي وبالتالي يمكن أن تحمل ‎wing acids‏ غير طبيعية كما سيتم الوصف أدناه.
‏10 بتحديد أكثر؛ طبقا لتطبيق مفضل للاختراع؛ يتميز مضاد الجسم؛ أو مركباته المشتقة أو أجزاؤه الوظيفية؛ بأنه يشمل سلسلة خفيفة تشمل ‎CDR‏ واحدة على الأقل يتم اختيارها من ضمن ‎CDRs‏ لترتيبات ‎amino acid‏ بتعريفات الترتيب أرقام )6 ؟ أو 0« أو ‎CDR‏ واحدة على الأقل متمائل ترتيبها بنسبة ‎JA‏ على الأقل؛ يفضل 7/85 190 780 و7918 بعد اصطفاف أمثل مع تعريفات الترتيب أرقام ‎٠‏ 9 أو ©؛ أو يشمل سلسلة ثقيلة تشمل ‎CDR‏ واحدة على الأقل
‎٠‏ منتقاة من ‎CDRs‏ لترتيبات ‎amino acid‏ بتعريفات الترتيب أرقام ‎oY‏ 4 أو 1 أو ‎CDR‏ واحدة على الأقل متماثل ترتيبها بنسبة 780 على الأقل؛ يفضل 785 ‎JA‏ 715 و48 بعد اصطفاف أمثل مع تعريفات الترتيب أرقام ؛ 4 أو .
‏بتحديد أكثر؛ تتميز مضادات الأجسام من الاختراع؛ أو واحد من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة ثقيلة تشمل واحدة على الأقل من ثلاثة ‎CDRs‏ من
‎Yo‏ تعريفات الترتيب أرقام ‎oY‏ ؛ أو ‎oT‏ أو ترتّيب واحد على الأقل متمائل بنسبة ‎ZA‏ على الأقل؛ يفضل 785 74950 795 و7918 بعد اصطفاف أمثل مع تعريفات الترتيب أرقام ‎١7‏ ؛ أو 7.
‎Ya. .
بصورة مفضلة أكثر أيضاء؛ تتميز مضادات الأجسام من الاختراع؛ أو واحد من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة ثقيلة تشمل الثلاشة ‎Al CDRs‏ على الترتّيب ‎«CDR-H3 5 CDR-H2 «CDR-H1‏ التي فيها: - تشمل 001-111 تعريف الترتيب رقم 7 7 أو ‎ed‏ أو ترتيب له تماثل 780 على الأقل بعد © اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم 7 7 أو 4؛ - تشمل 001-112 تعريف الترتيب رقم ؛ أو ١١؛‏ أو ترتيب له تماثل 780 على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ؛ أو ١١؛‏ و - تشمل ‎CDR-H3‏ تعريف الترتيب رقم 1 أو ‎OY‏ أو ترتيب له تماثل ‎JA‏ على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم 6“ أو ‎AY‏ ‎٠‏ طبقا لتطبيق خاص؛ تتميز مضادات الأجسام؛ أو واحد من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة ثقيلة تشمل 001-111 من تعريف الترتيب رقم 7 ‎CDR-H2‏ من تعريف الترتيب رقم ؛ 5 ‎CDR-H3‏ من تعريف الترتيب رقم ‎AY‏ ‏طبقا لتطبيق آخر خاص؛ تتميز مضادات الأجسام؛ أو ‎daly‏ من مركباته المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة ثقيلة تشمل 007-111 من تعريف الترتيب رقم 3« ‎CDR-‏ ‎٠‏ 112 من تعريف الترتيب رقم ‎CDR-H3 5 ١١‏ من تعريف الترتيب رقم 1. طبقا لتطبيق ‎AT‏ تتميز مضادات الأجسام من الاختراع؛ أو واحد من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة خفيفة تشمل واحدة على الأقل من ثلاثة ‎CDRs‏ من تعريفات الترتيب أرقام )0 ‎oF‏ و©؛ أو ترتيب واحد على الأقل له تماثل 780 على الأقل؛ يفضل 7/5 7950 7295 و7298 بعد اصطفاف أمثل مع تعريفات الترتيب أرقام ‎٠‏ ؟ أو © ‎Y.‏ بطريقة مفضلة؛ تتميز مضادات الأجسام من الاختراع؛ أو واحد من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة خفيفة تشمل الثلاثة ‎CDRs‏ التالية؛ على الترتيب ‎«CDR-LI‏ 08-12 و ‎«CDR-L3‏ التي فيها: - تشمل 007-11 تعريف الترتيب رقم ‎١‏ أو ‎eA‏ أو ترتيب له تماثل 7860 على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ‎١‏ أو ‎A‏ ‎Yo‏ - تشمل 0018-12 تعريف الترتيب رقم ؟ أو ‎٠١‏ أو تريب له ‎dia‏ 7860 على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ؟ أو ١٠؛‏ و ف
+ - تشمل ‎CDR-L3‏ تعريف الترتّيب رقم 0 أو ترتيب له ‎Bla‏ 7850 على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ‎C0‏ طبقا لتطبيق ‎(ala‏ تتميز مضادات الأجسام؛ أو واحد من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة خفيفة تشمل 0018-11 من تعريف الترتيب رقم ‎٠‏ 0018-12 من 0 تعريف الترتيب رقم ¥ و008-13 من تعريف الترتيب رقم *. طبقا لتطبيق ‎pala HAT‏ تتميز مضادات الأجسام؛ أو ‎daly‏ من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ بأنها تشمل سلسلة خفيفة تشمل 0018-11 من تعريف الترتيب رقم ‎CDR- «A‏ 2 من تعريف الترتيب رقم ‎٠١‏ و0018-13 من تعريف ‎Call‏ رقم 10 في الوصف الحاليء فإن المصطلحات ‎"polypeptides"‏ "ترتيبات ‎"polypeptide‏ ‎peptides’ V+‏ و'بروتينات مرتبطة مع مركبات مضاد جسم أو ترتيباتها" مستخدمة بصورة تبادلية. لابد هنا من إدراك أن الاختراع لا يتعلق بمضادات أجسام في شكل طبيعي؛ أي؛ أنه لا يتم أخذها من بيئتها الطبيعية لكن يتم فصلها أو الحصول عليها بالتنقية من مصادر طبيعية أو يتم الحصول عليها بتخليق جيني أو تكوين كيميائي وبالتالي يمكن أن تحمل ‎acids‏ مصنضة غير طبيعية كما سيتم الوصف أدناه. ‎yo‏ في تطبيق أول؛ فإن منطقة محددة للتكملة؛ أو ‎(CDR‏ تعني مناطق مفرطة التغير من السلاسل الثقيلة والخفيفة من ‎globulins‏ مناعية حسب التحديد بواسطة: ‎Kabat et al. (Kabat et al., Sequences of proteins of immunological interest, st Ed. ,‏ ‎U.S.
Department of Health and Human Services, NIH, 1991, and later editions).‏ توجد ثلاث ‎CDRs‏ سلسلة 448 وثلاث ‎CDRs‏ سلسلة خفيفة. هنا؛ تستخدم المصطلحات ‎"CDRs" 5 "CDR" Y‏ للإشارة إلى؛ اعتمادا على الحالة؛ واحدة أو ‎JST‏ من؛ أو حتى كل؛ المناطق التي تحتوي على غالبية متخلفات ‎amino acid‏ المسئولة عن انجذاب ارتباط مضاد جسم لمولد المضاد أو ‎epitope‏ الذي يدركه. في تطبيق ثان؛ فإن مناطق ‎CDR‏ أو ‎«CCDR(s)‏ يقصد بها الإشارة إلى المناطق مفرطة التغير في السلاسل الثقيلة والخفيفة من ‎globulins‏ المناعية حسب تحديد ‎IMGT‏ ‎Yo‏ إن الترقيم الفريد ‎IMGT‏ قد تم تحديده لمقارنة مجالات السيطرة المتغيرة أيا كان مستقبل مولد المضاد؛ نوع السلسلة؛ أو الأنواع:
لا ‎[Lefranc M.-P., Immunology Today 18, 509 (1997) / Lefranc M.-P., The‏ ذا ‎Immunologist, 7, 132-136 (1999) / Lefranc, M.-P., Pommié, C., Ruiz,‏ ‎Giudicelli, V., Foulquier, E., Truong, L., Thouvenin-Contet, V. and Lefranc, Dev.‏ ‎Comp.
Immunol., 27, 55-77 (2003)].‏ في الترقيم الفريد ‎(IMGT‏ تكون ‎amino acids‏ المحمية دائما لها نفس المكان؛ على سبيل المثال» 23 ‎TRP) tryptophan 41 «(Ist-CYS) cystein‏ محمي) 89 ‎amino acid‏ صاد للماى 104 ‎phenylalanine «(2nd-CYS) cystein‏ أو 8 ‎J-PHE) tryptophan‏ أو ‎.(TRP‏ ‏يوفر الترقيم الفريد ‎IMGT‏ تحديد قياسي لمناطق الإطار ‎FRIIMGT)‏ الأماكن ‎Y=)‏ ‎١ :FR2-IMGT‏ إلى 8 ‎:FR3-IMGT‏ 11 إلى ‎٠١‏ و7184-461: ‎١١١‏ إلى ‎)١78‏ ‎٠‏ وللمناطق المحددة للتكملة: ‎YV :CDRI-IMGT‏ إلى 8 ‎0١ :CDR2-IMGT‏ إلى 65 ‎٠١١ :CDR3-IMGT‏ إلى ‎.١١١7‏ لأن الثغرات تمثل أماكن غير مشغولة؛ فإن أطوال ‎CDR-‏ ‎Anal) IMGT‏ بين الأقواس والمنفصلة بنقاط؛ مثلا ‎)]١-8-4[‏ تصبح معلومة حاسمة. يستخدم ‎Cail‏ الفريد ‎IMGT‏ في تمثيلات رسم بياني ‎2D‏ يرمز إليها ‎tie‏ ‎IMGT Colliers de Perles [Ruiz, M. and Lefranc, M.-P., Immunogenetics, 53, 857-‏ ‎Kaas, Q. and Lefranc, M.-P., Current Bioinformatics, 2, 21-30 (2007),‏ / )88312002 وفي بناءات ‎3D‏ في: ‎IMGT/3Dstructure-DB [Kaas, Q., Ruiz, M. and Lefranc, M.-P., 1 cell receptor and‏ ‎MHC structural data.
Nucl.
Acids.
Res., 32, D208-D210 (2004)].‏ توجد ثلاث ‎CDRs‏ سلسلة ثقيلة وثلاث ‎CDRs‏ سلسلة خفيفة. يستخدم المصطلح ‎CDR‏ أو ‎CDRs ©‏ هنا للإشارة إلى؛ طبقا للحالة؛ واحدة من هذه المناطق أو عديد من؛ أو حتى كل؛ هذه المناطق التي تحتوي على غالبية متخلفات ‎amino acid‏ المسئولة عن الربط بانجذاب مضاد الجسم ‎Algal‏ المضاد أو ‎epitope‏ الذي يدركه. من أجل وضوح ‎oi‏ لابد من إدراك أنه في الوصف التالي؛ وبتحديد أكثر في جدول ‎Y‏ ‎(YF‏ سيتم تحديد ‎CDRs‏ بترقيم 17. ترقيم ‎kabat‏ وبترقيم شائع. ‎Yo‏ إن الترقيم الشائع يعيد تكوين مجموعات ‎ha‏ المتخلفات من كل ‎CDR‏ الشائعة لمناطق ‎CDRs‏ حسب تحديد أنظمة ترقيم ‎-kabat g IMGT‏
A
‏حسب التحديد أعلاه بينما يحدد‎ IMGT ‏طبقا لنظام‎ CDRs ‏يحدد‎ IMGT ‏إن نظام ترقيم‎ ‏حسب التحديد أعلاه.‎ kabat ‏المطابقة لنظام‎ CDRs kabat ‏نظام ترقيم‎ ‏في أنظمة الترقيم‎ (QDINNY) ١ ‏بتحديد أكثرء تتكون 0017-11 من تعريف الترتيب رقم‎ .162086 ‏في نظام الترقيم‎ (KASQDINNYIA) A ‏الشائع و1407 ومن تعريف الترتيب رقم‎ ‏في أنظمة‎ (YTS) 7 ‏فإنها تتكون من تعريف الترتيب رقم‎ «CDR-L2 ‏بالنسبة للمنطقة‎ ° kabat ‏في نظام الترقيم‎ (YTSTLQA) ٠١ ‏ومن تعريف الترتيب رقم‎ IMGT 5 ‏الترقيم الشائع‎ ‏لكل من أنظمة الترقيم‎ (LQYDNLWT) © ‏من تعريف الترتيب رقم‎ CDR-L3 ‏تتكون‎ ‏الثلاثة.‎ ‏في نظام‎ (TDYS) ¥ ‏بالنسبة للسلسلة الثقيلة؛ تتكون 001-111 من تعريف الترتيب رقم‎ ‏ومن‎ IMGT ‏في نظام ترقيم‎ (GYSFTDYS) ١ ‏الترقيم الشائع»؛ ومن تعريف الترتيب رقم‎ ٠ -kabat ‏في نظام ترقيم‎ (TDYSMY) 4 ‏تعريف الترتيب رقم‎ ‏في أنظمة الترقيم الشائع‎ (IDPYNGGT) ‏من تعريف الترتيب رقم ؛‎ CDR-H2 ‏تتكون‎ ‏في نظام الترقيم‎ (YIDPYNGGTRYNQKFKG) ١١ ‏ومن تعريف الترتيب رقم‎ IMGT 121 ‏في أنظمة الترقيم‎ (QTDYFDY) 1 ‏من تعريف الترتيب رقم‎ CDR-H3 ‏أخيراء تتكون‎ Vo ‏في نظام الترقيم‎ (ARQTDYFDY) ١١ ‏بينما تتكون من تعريف الترتيب رقم‎ kabat 5 ‏الشائع‎ ‎IMGT ‏بين أثنين‎ (percentage identity) ‏في معنى الاختراع الحالي » فإن "النسبة المئوية للتماثل‎ ‏أو‎ nucleotides ‏يعني النسبة المئوية من‎ amino acids ‏أو‎ nucleic acids ‏من ترتيبات‎ ‏المتماثلة بين الترتيبين المراد مقارنتهما؛ الناتجة بعد اصطفاف أمثل؛ إن‎ amino acid ‏متخلفات‎ Y- ‏وتكون الاختلافات بين الترتيبين متوزعة عشوائيا عبر‎ Lola ‏هذه النسبة المئوية إحصائية‎ ‏بمقارنة الترتيبات‎ amino acid ‏أو‎ nucleic acid ‏طولهما. تجرى تقليديا مقارنة اثتين من ترتيبات‎ ‏بعد اصطفافها بصورة مثلى؛ ويمكن إجراء المقارنة المذكورة بالقطعة أو باستخدام "منفذ‎ ‏أمثل للترتيبات‎ Glia al ‏يمكن إجراء‎ "(alignment window) ‏اصطفاف‎ ‎Smith ‏بواسطة نظام حساب التماتل الموضعي‎ cally ‏أجل المقارنة؛ بالإضافة إلى المقارنة‎ oe Yo ‏بواسطة نظام حساب التمائل الموضعي‎ cand Waterman (1981 ) ‏ذ]‎ App. Math. 2:482] ‏بواسطة طريقة بحث التشابه من‎ Neddleman and Wunsch (1970) [J. Mol. Biol. 48:443]
Ya..
q ‏أو بواسطة برنامج‎ «Pearson and Lipman (1988) [Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:2444] ‏حاسوب باستخدام هذه الحسابات:‎ (GAP, BESTFIT, FASTA and TFASTA in the Wisconsin Genetics Software
Package, Genetics Computer Group, 575 Science Dr., Madison, WI, or by the comparison software BLAST NR or BLAST P). ‏بمقارنة‎ amino acid sl nucleic acid ‏تتحدد النسبة المئوية للتماتل بين اثنتين من ترتيبات‎ ‏أو‎ 02061816 acid ‏يمكن أن يكون في ترتيب‎ Led ‏الترتيبين المصطفين بصورة مثالية والتي‎ ‏المراد مقارنته إضافات أو إزالات مقارنة بالترتيب المرجعي للامتصاص الأمثل‎ amino acid nucleotide led ‏بين الترتيبين. تحسب النسبة المئوية للتماثل بتحديد عدد الأماكن التي يكون‎ ‏متماثلا بين الترتيبين؛ بقسمة عدد الأماكن المتماثلة على العدد الكلي‎ amino acid ‏أو متخلف‎ ٠ ‏للحصول على النسبة المئوية للتماثل‎ ٠٠١ ‏الاصطفاف وضرب النثيجة في‎ dite ‏للأماكن في‎ ‏بين الترتيبين.‎
BLAST ‏على سبيل المثال؛ يمكن استخدام برنامج‎ “BLAST 2 sequences” (Tatusova et ‏ملق‎ “Blast 2 sequences - a new tool for comparing protein and nucleotide sequences”, FEMS Microbiol., 1999, Lett. 174:247-250) available on the site http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gorf/bl2. html, ‏و"جزاء ثغرة‎ «© "(open gap penalty) ‏مع معايير التخلف (تحديدا للمعايير "جزاء ثغرة مفتوحة‎ َ ‏؟؛ إن المصفوفة المنتقاة هي على سبيل المثال مصفوفة‎ "(extension gap penalty) ‏امتداد‎ ‏التي يفترضها البرنامج) ؛ تحسب النسبة المئوية للتماثل بين الترتيبين للمقارنة‎ "BLOSUM 62" ‏مباشرة بواسطة البرنامج.‎ ٠ 790 JAS ‏الذي يظهر تماثل 780 على الأقل؛ يفضل‎ amino acid ‏بالنسبة لترتيب‎ ‏مرجعي؛ تتضمن أمثلة مفضلة تلك التي تحتوي على‎ amino acid ‏و98 مع ترثيب‎ 05 ‏واحد على‎ amino acid ‏الترتيب المرجعي؛ تعديلات خاصة؛ تحديدا إزالة؛ إضافة أو استبدال‎ ‏متعاقبة أو غير‎ amino acids ‏بتر أو إطالة. في حالة استبدال واحد أو أكثر من‎ (JE) ‏'مكافئة‎ amino acids ‏المستبدلة مكان‎ amino acids ‏متعاقبة؛ تفضل استبدالات تحل فيها‎ Yo ‏من‎ amino acids ‏مكافئة" الإشارة إلى أي‎ amino acids’ ‏تعني العبارة‎ «Lia (equivalent)
١ ٠ ‏البنائية بدون تعديل على أية حال للأنشطة الحيوية‎ amino acids ‏المحتمل استبدالها لواحد من‎ ‏لمضادات الأجسام المقابلة وتلك من الأمثلة الخاصة المحددة أدناه.‎ ‏التي‎ amino acids ‏مكافئة إما من ناحية تشابهها البنائي مع‎ amino acids ‏يمكن تحديد‎ ‏تستبدل من أجلها أو من ناحية النتائج للاختبارات المقارنة للنشاط الحيوي بين مضادات‎ ‏الأجسام المختلفة التي من الممكن توليدها.‎ © ‏أدناه الاستبدالات الممكنة التي من المحتمل إجرائها‎ ١ ‏كمثال غير مقيد؛ يلخص جدول‎ ‏بدون أن تؤدي إلى تعديل ملحوظ للنشاط الحيوي لمضاد الجسم المعدل المطابق؛ إن‎ ‏العكسية ممكنة طبيعيا تحت نفس الشروط.‎ oy ‏ا لاستيدا‎ ١ ‏جدول‎ ‏المتخلف الأصلي الاستبدال (الاستبدالات)‎
Gh TT As®
Cys (C)
Gln (Q)
Glu (G)
Gly (G)
Ag
Lew Met)
Ty TTT Phe®
Ala TT ‏لقو‎ ‎Se Thr (T)
I ‏لال‎ Trp (W) ‏يعلم المهرة في الفن أنه في جملة الفن الحالي يوجد أكبر تباين (الطول والتركيبة) بين ستة‎ ٠١ ‏لهذه السلسلة الثقيلة.‎ CDR-H3 ‏وبتحديد أكثر عند‎ «ald ‏السلسلة‎ CDRs ‏عند الثلاثة‎ CDRs ‏المميزة المفضلة لمضادات الأجسام من الاختراع؛ أو‎ CDRs ‏نتيجة لذلك؛ سوف يتضح أن‎ 7 9 LJ
١ ‏السلسلة‎ CDRs ‏لواحد من مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ سوف تكون من الثلاث‎ ‏و1 على الترتيب؛ وأيضا‎ 4 oF ‏التي تشفرها تعريفات الترتيب أرقام‎ CDRs ‏التقيلة؛ أي»‎ .6 ‏رقم‎ adil ‏المقابلة 001-133 التي يشفرها تعريف‎ CDR « iS) ‏بصورة مفضلة‎ ‏في تطبيق خاصء يتعلق الاختراع الحالي بمضاد جسم فأري؛ أو مركبات مشتقة أو أجزاء‎ ‏وظيفية منه.‎ © ‏للاختراع عن مضاد جسم؛ أو مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية؛‎ HAT ‏يكشف تطبيق‎ ‏التالية:‎ CDRs ‏مشتملاً على سلسلة خفيفة تشمل ثلاث‎ 50 0785 ‏له تمائل 780 على الأقل» يفضل‎ ais ‏أو‎ ١ ‏بتعريف الترتيب رقم‎ CDR-LL - ْ ؛١ ‏و7298 بعد اصطفاف أمثتل مع تعريف الترتيب رقم‎ 58 50 785 ‏على الأقل» يفضل‎ 7480 Blo ‏بتعريف الترتيب رقم ؟ أو ترتيب له‎ 008-12 - ٠ ‏مع تعريف الترتيب رقم ؟؛ و‎ Jud ‏و7298 بعد اصطفاف‎ 58
JAS ‏يفضل‎ (JY ‏على‎ 780 Fla ‏بتعريف الترتيب رقم © أو ترتيب له‎ 0018-13 - 560 ‏و2748 بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم‎ 5 ‏التالية:‎ CDRs ‏سلسلة ثقيلة تشمل ثلاث‎
JAS ‏بتعريف الترتيب رقم 7 أو ترتيب له تماشل 780 على الأقل؛ يفضل‎ 008-111 - V0 ‏و28 بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم 7؛‎ 750 (90
AS ‏على الأقل؛ يفضل‎ JA ‏بتعريف الترتيب رقم ؛ أو ترتيب له تماثل‎ CDR-H2 - ‏و78 بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ؛؛ و‎ 215 0
Ae ‏على الأقل؛ يفضل‎ TAY ‏أو ترتيب له تماثل‎ ١١ ‏بتعريف الترتيب رقم‎ 001-133 -
AY ‏مع تعريف الترتيب رقم‎ Jil ‏بعد اصطفاف‎ 7945 790 44.0 ‏وظيفي منه؛‎ edn ‏يكشف تطبيق آخر أيضا للاختراع عن مضاد جسم؛ أو مركب مشتق أو‎ ‏يشمل سلسلة خفيفة تشمل ثلاث م018 التالية:‎ ‏أو ترتيب له تماثل 780 على الأقل بعد اصطفاف أمثل‎ A ‏بتعريف الترتيب رقم‎ 001-11 - tA ‏مع تعريف الترتيب رقم‎ ‏أو ترتيب له تمائل 780 على الأقل بعد اصطفاف أمثل‎ ٠١ ‏بتعريف الترتيب رقم‎ 08-12 - YO ‏مع تعريف الترتيب رقم ١٠؛ و‎
Ya..
VY
‏على الأقل بعد اصطفاف‎ JA ‏بتعريف الترتيب رقم © أو ترتيب له تماثل‎ CDR-L3 - ‏الترتيب مع تعريف الترتيب رقم 5؛ و‎ ‏التالية:‎ CDRs ‏سلسلة ثقيلة تشمل ثلاث‎ ‏رقم 4 أو ترتيب له تماثل 2860 على الأقل بعد اصطفاف أمثل‎ quill ‏بتعريف‎ 001-311 - £9 ‏مع تعريف الترتيب رقم‎ © ‏على الأقل بعد اصطفاف أمثل‎ 7850 Bla ‏أو ترتيب له‎ ١١ ‏بتعريف الترتيب رقم‎ 008-112 - ‏مع تعريف الترتيب رقم ١١؛ و‎ ‏أو ترتيب له تماثل 7850 على الأقل بعد اصطفاف أمثل‎ ١ ‏بتعريف الترتيب رقم‎ 001-113 - .76 ‏مع تعريف الترتيب رقم‎ ‎١‏ طبقا لتطبيق آخر أيضاء يتميز مضاد الجسم من الاختراع؛ أو مركباته المشتقة أو أجزاؤه الوظيفية؛ بأنه يشمل ترتيب سلسلة خفيفة يشمل ترتيب ‎amino acid‏ بتعريف الترتيب رقم ‎٠١‏ ‏أو ترتيب له تماثل 7850 على الأقل؛ يفضل 7885 7450 795 و7918 بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ‎OF‏ وبأنه يشمل ترتيب سلسلة تقيلة يشمل ترتيب ‎amino acid‏ بتعريف الترتيب رقم ؛١‏ أو ترتيب له ‎Bila‏ 7850 على الأقل؛ يفضل 7/88 740 795 و7918 بعد ‎NE ‏اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم‎ ١٠ ‏يعلن الاختراع أيضا عن مضاد جسم مكتسب السمة الآدمية؛ أو مركب مشتق أو جزء وظيفي منه؛ يتميز بأنه يشمل ترتيب سلسلة خفيفة يشمل ترتيب ‎amino acid‏ بتعريف الترتيب رقم ‎١١‏ أو ترتيب له ‎Bla‏ 780 على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ‎OY‏ ‏وبأنه يشمل ترتيب سلسلة ‎ALE‏ يشمل ترتيب ‎amino acid‏ بتعريف الترتيب رقم ‎١8‏ أو 9 أو ‎NVA ‏ترتيب له تمائل 780 على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم‎ ٠ ‏كما يتضح ‎dled‏ يتعلق الاختراع أيضا بأي مركب مشتق من مضاد جسم حسب الوصف في الاختراع. بتحديد أكثر؛ يتميز مضاد الجسم من الاختراع؛ أو مركباته المشتقة أو أجزاؤه الوظيفية؛ ‎ob‏ المركب المشتق المذكور يتكون من ‎protein‏ رابط يشمل دعامة ‎peptide‏ مطعم عليها ‎CDR Yo‏ واحدة على الأقل بطريقة بحيث يتم استبقاء كل أو جزء من خواص إدراك ‎paratope‏ ‏لمضاد الجسم الأولي. .ول
يمكن أيضا وجود واحد أو أكثر من الترئيبات ضمن ستة ترتيبات ‎CDR‏ الموصوفة في الاختراع الحالي على دعامة ‎globulin protein‏ مناعي كثيرة. في هذه الحالة؛ فإن ترتثيب ‎protein‏ يجعل من الممكن توليد هيكل أساسي ‎peptide‏ محبذ لمضاعفة ‎CDRs‏ المطعمة؛ لتمكينها من استبقاء خواص إدراك ‎paratope alias Age‏ الخاصة بها. 8 بصفة عامة؛ يعلم شخص ماهر في الفن كيفية تحديد نوع دعامة ‎protein‏ التي يتم عليها تطعيم واحدة على الأقل من ‎CDRs‏ الناشئة من مضاد الجسم الأصلي. بتحديد أكثرء من المعلوم أن تلك الدعامات لكي يتم انتقائها لابد أن تحقق أكبر عدد من المعايير كما يلي )13:167-187 ,2000 ‎‘(Skerra A., J.
Mol.
Recogn.,‏ - حماية جيدة للنشوء النوعي؛ ‎Ve‏ - بناء ثلاثي الأبعاد معلوم (مثلا؛ بتصوير بللوري» بفحص مجهري طيفي ‎NMR‏ أو أي تقنية أخرى معروفة للشخص الماهر في الفن)؛ ‎(lie -‏ صغير؛ - قلة وجود أو عدم وجود تعديلات بعد النسخ؛ و/أو - سهولة في الإنتاج؛ الإظهار والتنقية. ‎Yo‏ يمكن أن يكون مصدر دعامات ‎protein‏ تلك هوء بدون تحديد؛ البناءات المنتقاة من ضمن : ‎fibronectin‏ ويفضل مجال سيطرة ‎٠١‏ من ‎fibronectin‏ من نوع ‎lipocalin ١‏ ‎protein «(Skerra A., J.
Biotechnol., 2001, 74)4(:257-75( anticalin‏ 7 ناشئ من مجال سيطرة ‎B‏ من ‎A protein‏ من ‎thioredoxin A «Staphylococcus aureus‏ أو ‎proteins‏ =& حافز متكرر ‎Jia‏ 'تكرار ‎(Kohl et al., PNAS, 2003, vol. 100, No. 4, 1700- "ankyrin‏ ‎٠‏ )1705 'تكرار حيوان الأرماديللو"؛ 'تكرار غني مع ‎"tetratricopeptide L)S3' "leucine‏ لايد أيضا من ذكر دعامات مشتقة من ‎ctoxins‏ مثل ‎toxins‏ من العقارب؛ الحشرات؛ النباتات؛ الحيوانات الرخوية البحرية؛ إلخ؛ ومتبطات ‎protein‏ لإنزيم ‎NO synthase‏ خلوي عصبي ‎(PIN)‏ ‏يمكن أيضا ذكر ‎(Ye‏ غير مقيد ‎oly‏ طريقة؛ لتلك البنيات الهجينة؛ هو إدخال ‎CDR-HI‏ ‎Yo‏ (سلسلة ثقيلة) لمضاد جسم مضاد ‎«CD4‏ تحديدا 13138.2؛ في واحد من اللوالب في ‎PIN‏ ‏ويحتفظ ‎protein‏ الربط الجديد الناتج بتلك الطريقة بنفس خواص الارتباط مثل مضاد الجسم لأصلي )334-344 ,)343(1 ,2006 ‎(Bes et al, Biochem.
Biophys.
Res.
Commun.,‏ على ‎Yq...‏
تن" أساس توضيحي تماماء فإن تطعيم 007-113 (سلسلة ثقيلة) من مضاد الجسم 171111 مضاد ‎lysozyme‏ على واحد من لوالب ‎(Nicaise et al., Protein Science, 2004, neocarzinostatin‏ )13(7):1882-1891. أخيراء حسب الوصف أعلاه؛ يمكن أن تشمل دعامات ‎peptide‏ تلك من ‎١‏ إلى + ‎CDRs‏ ‏© ناشئة من مضاد الجسم أ لأصلي. يفضل؛ لكن بدون حاجة لذلك»؛ أن ينتقي شخص ماهر في الفن ‎CDR‏ واحدة على الأقل من السلسلة الثقيلة؛ والأخيرة معروفة ‎Leal‏ مسئولة أساسيا عن خصوصية مضاد الجسم. إن انتقاء واحدة أو أكثر من ‎CDRs‏ هامة واضح للشخص الماهر في الفن؛ الذي سيختار عندئذ تقنيات معروفة مناسبة ,2001 ,508 ‎FEBS letters‏ .لد ‎(Bes et‏ (67-74. ‎٠١‏ يتعلق جانب خاص للاختراع الحالي بطريقة لانتقاء مركب مشتق من مضاد جسم مطابق للاختراع؛ يكون المركب المشتق المذكور قادرا على تثبيط نمو خلايا الورم في المعمل و/أو في الجسم ويتميز المركب المشتق المذكور المشتمل على دعامة ‎peptide‏ مطعم عليها ‎CDR‏ ‏مضاد جسم واحدة على الأقل؛ بأنه يشمل الخطوات التالية: (أ) التلامس في المعمل لمركب يتكون من دعامة ‎peptide‏ مطعم عليها ‎CDR‏ مضاد جسم ‎١‏ واحدة على الأقل مع عينة حيوية تحتوي على ‎WIA‏ ورم قادرة على النمو وتحت شروط تسمح لهذه الخلايا بالنمو؛ و (ب) انتقاء المركب المذكور إذا كان المركب المذكور قادرا على تثبيط نمو خلايا الورم هذه؛ ويتميز بأن ‎CDR‏ المطعمة المذكورة الواحدة على الأقل تنتفقى من ‎CDRs‏ التالية: ‎CDR -‏ بتعريف الترتيب رقم ‎A ١٠‏ أو ترتيب له ‎Fila‏ 780 على ‎(JB)‏ يفضل ‎dhe‏ 240 ‎Ye‏ 290 و7298 بعد اصطفاف ‎Jil‏ مع تعريف الترتيب رقم ‎A)‏ ‎CDR -‏ بتعريف ‎ail‏ رقم ‎٠١ oF‏ أو ترتيب له ‎JEG‏ 780 على الأقل؛ يفضل 785 ‎0٠‏ 715 و7248 بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم ‎oF‏ ٠؛‏ ‎CDR -‏ بتعريف الترتيب رقم © أو ترتيب له تماثل 780 على الأقل» يفضل ‎LA Ae‏ : 05 و7298 بعد اصطفاف ‎Jil‏ مع تعريف الترتيب رقم £0 ‎CDR - Yo :‏ بتعريف الترتيب رقم ‎OV oY‏ 8 أو ترتيب له تماثل 780 على الأقل؛ يفضل 785 0 790 و7986 بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم 7 ا 9؛ ‎Yq..‏
Yo 7/85 ‏يفضل‎ (JE) ‏أو ترتيب له تماثل 780 على‎ ١١ ‏بتعريف الترتيب رقم 4؛‎ CDR - ‏مع تعريف الترتيب رقم 4؛ ١1؛ و‎ Jel ‏و98 بعد اصطفاف‎ 245 (40
JAS ‏أو ترتيب له تماثل 7850 على الأقل؛ يفضل‎ VY 1 ‏بتعريف الترتيب رقم‎ CDR -
AY 7 ‏بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم‎ 794A 5 2190© 6 ‏طبقا لنمط مفضل؛ يمكن أن تتضمن الطريقة في خطوة (أ) التلامس في المعمل لمركب‎ 8 ‏مضاد جسم على الأقل.‎ CDRs ¥ ‏مطعم عليها ؟ أو‎ peptide ‏يشمل دعامة‎ ‏من بين الدعامات أو‎ peptide ‏طبقا لنمط مفضل أكثر أيضا لهذه الطريقة؛ تنتقى دعامة‎ ‏الرابطة المذكورة بناءاتها أعلاه.‎ proteins ‏بصورة واضحة؛ فإن هذه الأمثلة غير مقيدة بأي طريقة؛ ويجب اعتبار أي بناء آخر‎ ‏معروف أو واضح لشخص ماهر في الفن بأنه مشمول بالحماية التي يوفرها طلب براءة‎ ٠ ْ ‏الاختراع الحالية.‎ ‏يتعلق الاختراع الحالي لذلك بمضاد جسم أو مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية؛ يتميز‎ ‏لها 0( حماية جيدة للنشوء النوعي؛ (ب) بنية‎ proteins ‏تنتقى من ضمن‎ peptide ‏دعامة‎ ob ‏(د) مقاس صغير و/أو (ه) مناطق يمكن تعديلها‎ lam ‏قوية؛ (ج) تنسيق جزيئي 3-0 معلوم‎ ‏بإزالة و/أو إدخال بدون تعديل خواص الثبات.‎ ٠ ‏طبقا لتطبيق مفضل. يتميز مضاد الجسم من الاختراع؛ أو مركباته المشتقة أو أجزاؤه‎ «fibronectin ‏دعامات ناشئة من‎ )١( ‏المذكورة تنتقى من بين‎ peptide ‏الوظيفية؛ بأن دعامة‎ ‏ناشئ‎ 2 protein «anticalin «lipocalin ‏من نوع‎ fibronectin ‏من‎ ٠١ ‏يفضل مجال سيطرةٍ‎ proteins sl thioredoxin A «Staphylococcus aureus ‏من‎ A protein ‏ل‎ B ‏من مجال سيطرة‎ (Kohl ‏ا‎ al., PNAS, 2003, vol. 100, No. 4, 1700- "ankyrin ‏حافز متكرر مثل "تكرار‎ = ٠ ‏أو‎ "tetratricopeptide ‏و'تكرار‎ "leucine ‏حيوان الأرماديللو"؛ 'تكرار غني مع‎ LSE (1705) (PIN) ‏خلوي عصبي‎ NO synthase protein ‏مثبطات‎ (9) ‏يتعلق جانب آخر للاختراع بالأجزاء الوظيفية من مضاد الجسم الموصوف أعلاه.‎ ‏بتحديد أكثر؛ يستهدف الاختراع مضاد جسم؛ أو مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية؛ يتميز‎ scFv- «scFv Fab’ «(Fab’), «Fab Fv ‏بأن الجزءء الوظيفي المذكور ينتقى من بين الأجزاء‎ Ye .10718:60 ‏أجزاء‎ Jie ‏وأجسام ثنائية؛ أو أي جزء يزداد له عمر النصف‎ Fe
١ ‏إن تلك الأجزاء الوظيفية لمضاد الجسم طبقا للاختراع تتكون من: على سبيل المثال؛‎ ‏أو أجسام ثنائية؛‎ 5177-78 Fab’ F(ab’), «Fab ‏سلسلة بسيطة)؛‎ = 5c) scFv Fv ‏الأجزاء‎ ‎Jie polyalkylene glycol ‏إضافة‎ Jie ‏يزداد له عمر النصف بتعديل كيميائي؛‎ eda ‏أو أي‎
Fv-PEG ‏(يشار إلى الأجزاء البيجيلية بأنها‎ (PEGylation ‏(بيجيلية‎ polyethylene glycol ٠ ‏أو بالدمج في جسم دهني؛ كرات‎ ((Fab’-PEG 5 F(ab’),-PEG «Fab-PEG «scFv-PEG ٠ ‏المميزة للاختراع‎ CDRs ‏تكون للأجزاء المذكورة واحدة على الأقل من‎ (PLGA ‏صغيرة أو‎ ‏أيضا جزيئا؛ لمضاد الجسم الناشئة منه.‎ dale ‏القادرة تحديدا على إحداث نشاط بطريقة‎ ‏يفضل؛ أن تشمل أو تتضمن الأجزاء الوظيفية المذكورة ترتيب جزئي للسلسلة الثقيلة أو‎ ‏الخفيفة المتغيرة لمضاد الجسم المشتقة منه؛ ويكون الترتيب الجزئي المذكور كافيا لاستبقاء‎ ‏يفضل أن يساوي على‎ (IS ‏وانجذاب‎ die ‏نفس خصوصية الارتباط مثل مضاد الجسم الناشئ‎ ٠ ‏على الأقل من ذلك لمضاد الجسم الناشئ منه.‎ ٠١/١ ‏الأقل ١/١٠٠؛ يفضل أكثر‎
Vo ‏يفضل ت اف فى‎ camino acids ‏سوف يحتوي الجزء الوظيفي على الأقل على خمس‎ ‏متعاقب من ترتيب مضاد الجسم الناشئ منه.‎ amino acid ٠٠١ ‏6ه أو‎ (YO ‏د‎ ‎F(ab’), Fab scFv Fv ‏بصورة مفضلة؛ سوف تكون هذه الأجزاء الوظيفية من الأنواع‎ ‏أو أجسام ثنائية؛ لها عامة نفس خصوصية الارتباط مثل مضاد الجسم‎ 81-16 Fab) 10 ‏الناتجة منه. طبقا للاختراع الحالي؛ يمكن الحصول على أجزاء مضاد الجسم من الاختراع من‎ ‏و/أو‎ <papain | pepsin ‏هضم إنزيم؛ متضمنا‎ Jie ‏مضادات الأجسام الموصوفة أعلاه بطرق‎ ‏باختزال كيميائي . يمكن أيضا الحصول على أجزاء مضاد الجسم‎ disulfide ‏بفصل قناطر‎ ‏بواسطة؛ على‎ peptide ‏بتقنيات وراثية تخليقية معروفة أيضا لشخص ماهر في الفن أو بتخليق‎
Applied ةطساوب ‏أتوماتيكية مثل تلك المباعة‎ peptide ‏سبيل المثال؛ أدوات تخليق‎ ٠ ‏إلخ.‎ «BioSystems ‏يستهدف الاختراع أيضا مضاد الجسم الفأري الأصلي؛ تحديدا مضاد جسم مطابق‎ ‏للاختراع؛ أو مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية؛ يتميز بأن مضاد الجسم المذكور هو مضاد‎ ‏أو‎ ٠5 ‏بتعريف الترتيب رقم‎ amino acid ‏جسم فأري وبأنه يشمل سلسلة خفيفة من ترتيب‎ ‏على الأقل؛ يفضل 7/85 2450 745 و7598 بعد اصطفاف أمثل مع‎ AA ‏ترتيب له تماثل‎ Ye ‏أو ترتيب‎ ١٠١ ‏بتعريف الترتيب رقم‎ amino acid ‏تعريف الترتيب رقم 10 وسلسلة ثقيلة بترتيب‎
Ya..
VY
‏بعد اصطفاف أمثل مع تعريف‎ 3A 5 795 7450 7/85 ‏له تماتل 7860 على الأقل؛ يفضل‎ . ٠76 ‏الترتيب رقم‎ ‏العديدة المطابقة‎ amino acid ‏من أجل وضوح أكثرء يلخص الجدول ؟ أدناه ترتيبات‎ ‏لمضاد الجسم من الاختراع.‎ ‏مكتسب السمة الآدمية‎ = Huy ‏فأرى‎ = Mu Cua) :7 ‏جدول‎ © ‏اف سا ا ا‎ ‏سلسلة ثقيلة سلسلة خفيفة‎ CDR ‏ترقيم‎ ‏الجسم الترتيب رقم‎ ww ‏ا‎ ‎Cee ‎ow
Co ew aw ww ‏اا‎ ‎eee ew
IMGT
Te ew ew ew ee
Kabat ew oom ww ‏م‎ ‎CEE
Mu
Cc Dame
Yq»
YA
د١‎ | ‏سي‎ ‏سس‎ ‏الس ا‎
Hu [eee
Hu e
Hu ‏يتعلق جانب آخر خاص للاختراع الحالي بمضاد جسم مختلط؛ أو مركباته المشتقة أو‎ ‏أجزائه الوظيفية؛ يتميز بأن مضاد الجسم المذكور يشمل أيضا مناطق ثابتة سلسلة خفيفة‎ ‏مشتقة من مضاد جسم من نوع مغاير للفأرء تحديدا إنسان.‎ ALE ‏وسلسلة‎ ‏يتعلق جانب آخر خاص أيضا للاختراع الحالي بمضاد جسم مكتسب السمة الآدمية؛ أو‎ ‏الوظيفية؛ يتميز بأن المناطق الثابتة للسلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة‎ hal ‏مركباته المشتقة أو‎ © «gamma-1 ‏والمنطقة‎ kappa ‏أو‎ lambda ‏مشتقة من مضاد جسم أدمي ؛ على الترتيب؛ منطقة‎ .gamma-4 ‏أو‎ gamma-2 ‏طبقا لجانب آخرء يتعلق الاختراع بورم هجين فأري قادر على إفراز مضاد جسم أحادي‎ ‏النسخ مطابق للاختراع؛ تحديدا الورم الهجين من مصدر فأري المسجل مع المركز الفرنسي‎ ‏لمزارع الكائن الحي الدقيق:‎ Ye (CNCM, Pasteur Institute, Paris, France) on July 6, 2006, under number 1-3646. ‏وخلايا خطوط الورم‎ Balb/C ‏طحال فأري محصنة‎ WA ‏ينتج الورم الهجين المذكور باندماج‎ ‏م5.‎ 2/0-Ag 14 ‏التخاعي‎ ‏إن مضاد الجسم أحادي النسخ؛ المشار إليه هنا 634؛ أو مركباته المشتقة؛ أو أجزائه‎ ‏الوظيفية؛ المتميز بأن مضاد الجسم المذكور يتم إفرازه بواسطة الورم الهجين المسجل مع‎ ١ ‏تحت رقم 1-3646 يشكل بصورة واضحة جزءا من الاختراع‎ 7٠0٠07 ‏في ؛ يوليو‎ CNCM ‏الحالي.‎ ‏يشمل مضاد الجسم من الاختراع أيضا مضادات أجسام مختلطة أو مكتسبة السمة الآدمية.‎
إن مضاد جسم المختلط هو واحد يحتوي على منطقة متغيرة طبيعية (سلسلة خفيفة وسلسلة ثقيلة) مشتقة من مضاد جسم ‎(antibody)‏ من نوع محدد في اتحاد مع مناطق تابتة للسلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة لمضاد جسم من نوع مغاير للنوع المحدد المذكور. يمكن تحضير مضادات الأجسام؛ أو أجزاء مختلطة منها باستخدام تقنيات الهندسة الوراثية © التخليقية. على سبيل المثال؛ يمكن إنتاج مضاد الجسم المختلط بنسخ ‎DNA‏ مُخلق يحتوي على محث وترتيب يشفر المنطقة المتغيرة لمضاد جسم ‎(antibod‏ أحادي النسخ غير آدمي من الاختراع؛ تحديدا فأري؛ وترتيب يشفر منطقة ثابتة مضاد جسم آدمي. يمكن أن يكون مضاد جسم مختلط مطابق للاختراع مشفر بواسطة هذا الجين المّخلق؛ على سبيل المثال؛ هو مواد فأرية فأرية- آدمية؛ وتتحدد خصوصية مضاد الجسم هذا بواسطة المنطقة المتغيرة المشتقة من ‎DNA)‏ الفأري ونوعه المماثل المحدد بواسطة المنطقة الثابتة المشتقة من ‎DNA‏ آدمي. انظر: ‎Verhoeyn ef al. (BioEssays, 8:74, 1988)‏ لطرق تحضير مضادات أجسام مختلطة. إن "مضادات أجسام مكتسبة السمة الآدمية" تعني مضاد جسم يحتوي على مناطق ‎CDR‏ ‏مشتقة من مضاد جسم من مصدر غير آدمي؛ وتشتق الأجزاء الأخرى لجزيء مضاد الجسم من واحد من (أو عدة) مضادات أجسام آدمية. إضافة ‎ella‏ يمكن تعديل بعض متخلفات ‎٠‏ قطعة الهيكل الأساسي (تسمى ‎(FR‏ للحفاظ على انجذاب الارتباط: ‎(Jones et al., Nature, 321:522-525, 1986; Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536,‏ ‎Riechmann et al., Nature, 332:323-327, 1 988).‏ ;1988 يمكن تحضير مضادات الأجسام المكتسبة للسمة الآدمية من الاختراع أو أجزاء منها بتقنيات معروفة لشخص ماهر في ‎(Jia dll‏ تلك الموصوفة في الوثائق: ‎Singer et al., J.
Immun., 150:2844-2857, 1992; Mountain et al., Biotechnol.
Genet.‏ ‎Eng.
Rev., 10:1-142, 1992; and Bebbington et al., Bio/Technology, 10:169-175,‏ .1992 تفضل مضادات الأجسام تلك المكتسبة للسمة الآدمية لاستخدامها في الطرق المشتملة على تشخيصات معملية أو معالجة مائعة و/أو علاجية في الجسم. يمكن أيضا ذكر تقنيات أخرى ‎Yo‏ لاكساب السمة الآدمية؛ معروفة أيضا لشخص ماهر في الفن؛ مثل؛ تقنية "تطعيم ‎"CDR‏ ‏الموصوفة بواسطة ‎PDL‏ في براءات الاختراع 261 0451 ‎EP 0939 (EP 0682 040 <EP‏ ‎EP 0566 647 »7‏ أو 5530101 ‎«US‏ 6180370 5لا 5585089 ‎US 56937615 US‏ ل
٠
SAATYOY ‏يمكن أيضا ذكر براءات الاختراع الأمريكية 74567 أرى تفتاذيت‎
LOAVYYAY
‏إضافة لذلك؛ يتعلق الاختراع أيضا بمضادات أجسام مكتسبة السمة الآدمية ناشئة من‎ ‏مضادات الأجسام الفأرية الموصوفة أعلاه.‎ ‏بالتفصيل في‎ 6F4 ‏بتحديد أكثر؛ توصف طريقة إكساب السمة الآدمية لمضاد الجسم‎ ° canal ‏على‎ Ally ‏و“ للسلاسل الخفيفة‎ ١ ‏المثالين‎ ‏بطريقة مفضلة؛ تكون المناطق الثابتة للسلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة المشتقة من مضاد‎ ‏أو‎ gamma-2 ‏1لقتصسدي‎ 5 kappa ‏أو‎ lambda ‏على الترتيب؛ مناطق‎ (ot ‏جسم أدمي‎ .gamma-4 ‏في التطبيق المطابق لنوع مماثل 1801؛ فإن سمة إضافية لمضاد الجسم هي أنه يظهر‎ ٠١ ‏و/أو سمية خلية‎ (ADCC) ‏وظائف مستجيبة؛ مثل سمية خلية خلوية معتمدة على مضاد جسم‎ (CDC) ‏معتمدة على مكمل‎ ‏للاختراع؛ فقد حدد مقدم الطلب أيضا مولد المضاد الذي يدركه مضاد‎ Hal ‏في جانب‎ ‏الجسم المطابق للاختراع.‎ ‏توصف الطريقة المستخدمة لتحقيق ذلك بالتفصيل في مثال ؛ أدناه.‎ Yo «(IgSF) ‏المناعي‎ globulin ‏غشاء ينتمي إلى عائلة الفائق من‎ protein ‏هو‎ JAM-A ‏إن‎ ‏التي ينتمي فيها إلى عائلة جزيء الالتصاق عند موضع الاتصال (1414). في الإنسان؛ تشمل‎ ‏و34م. من‎ A33 JAM-C JAM-B JAM-A proteins ‏أعضاء كثيرة؛ تتضمن‎ JAM ‏عائلة‎ ‏وتقريبا تماثل‎ JJAM-C 5 1414-3 ‏تماثل مع‎ Jef ‏له‎ JAM-A ‏فإن‎ JAM ‏بين أعضاء عائلة‎
JAM-A protein ‏وتشابه 45 / مع هذين البروتينين. يسمى‎ amino acids ‏ترتيب ك7 في‎ ٠ .00321 ‏أو‎ PAM-1 ‏كلذل‎ 1 JJAM-1 ‏مستقبل 1ل‎ "117 JAM A ‏أيضا‎ ‏يختلفان في طول المنطقة خارج‎ JAM-A ‏لمصدر أولي‎ files ‏لقد تم تحديد شكلين‎ ‏الخلايا:‎ ‎)6١ ‏(تعريف الترتيب رقم‎ amino acids 794 ‏شكل مماتل (أ):‎ - (VY ‏(تعريف الترتيب رقم‎ amino acids 7*4 ‏(ب):‎ bles ‏شكل‎ - Yo ‏للشكلين المماثلين مع تعريف الترتيب رقم 17 للشكل المماثل‎ nucleotide ‏تتمثل ترتيبات‎ ‏(أ) وتعريف الترتيب رقم 64 للشكل المماثل (ب).‎ ‏مولا‎ vy : إن ‎protein‏ الظاهر على سطح الخلايا الآدمية به سلسلة ‎polypeptide‏ واحدة مع مجال سيطرة طرفي-0 داخل ‎(LOAN‏ مجال سيطرة عبر الغشاء واحد ‎(amino acids YV)‏ ومنطقة طرفية-10 خارج الخلايا تحتوي على اثنين من مجالات سيطرة ‎gant‏ إن ‎JAM-A‏ به مكان ‎(N-glycosylation‏ متخلف ‎Asn‏ في المكان ‎١85‏ للشكل المماثل () و145١‏ للشكل الممائل (ب)؛ واثنين من قناطر ‎disulfide‏ واحدة بين متخلفات ‎Cys‏ +5 و85١٠‏ في مجال السيطرة ‎Ig N= gill)‏ وواحدة بين متخلفات ‎١٠7 Cys‏ و١7‏ في مجال سيطرة ‎Ig‏ الثاني. لقد تأكد وجود اثنين من مجالات سيطرة خارج الخلية تشبه-و1 بتصوير بللوري: ‎(Kostrewa et al., 2001, EMBO J. 16:4391-4398: Prota et al., 2003, Proc. Natl. Acad.‏
Sci. USA, 100:5366-5371). 0 ٠ ‏شكل مماثل (أ).‎ ([VYA=VYV] VLV ‏(ترتيب‎ tripeptide ‏يتصل مجالا السيطرة هذان بوصلة‎ ‏في تفاعلات محبة للتماثل على سطح‎ JAM-A ‏لقد أكدت هذه الدراسات البنائية أيضا تكبير‎ ‏الخلية المشتملة على المنطقة خارج الخلايا؛ إن هذه المنطقة؛ الناتجة في شكل مُخلق والقادرة‎ (Bazzoni et al, 2000, J. Biol. Chem. ‏متشابهة في محلول‎ dimeres ‏على تكوين‎ ‎٠‏ )275:30970-30976 تجعل أيضا من الممكن تحديد ‎amino acids‏ الداخلة في هذه التفاعلات: ‎«Glu 61 «Arg 59‏ 63 دمل 72 تمل 75 ‎Tyr 119 «Glu 114 Met 110 «Tyr‏ و 121 610. إن ‎tripeptide RVE‏ ]11-04[ محمي نسبيا في عائلة ‎RLE) JAM‏ لأجل ‎RIE JAM-B‏ لأجل ‎(JAM-C‏ ويشكل الحافز الأدنى لتكوين ‎dimer‏ متماثل ,2001 ‎(Kostrewa et al,‏ ‎EMBO J. 16:4391-4398)‏ ‎(Liu etal, 2000, ‏أساسيا في اتصالات محكمة‎ JAM-A ‏في خلايا الظهارة والبطانة؛ يوجد‎ Y.
IT ‏نوع‎ PDZ ‏تحتوي المنطقة السيتوبلازمية على مجال سيطرة‎ .1. Cell Sci, 113:2363-2374) ‏شكل مماثل (أ)؛ المسئول عن تفاعل‎ ؛]٠٠0-”794[‎ FLV ‏في المكان الطرفي-6 (ترتيب‎ ‏عصارية خلوية عديدة ملازمة للاتصال المحكم؛ يحتوي أيضا على‎ proteins ‏مع‎ JAM-A :PAR-3 s MUPP-1 ‏متف‎ 20-1 Js ©0727 ‏مجال سيطرة‎ ‎et al., 2000, J. Biol. Chem., 275:27979-27988; Itoh et al., 2001, J. Cell Biol.,‏ 118ط6) ‎Hamazaki et al., 2002, J. Biol. Chem., 277:455-461).‏ ;154:491-498
YY
‏والتي‎ edimer ‏الداخلة في تكوين‎ [1 YF) V1] ‏إن مضادات الأجسام الفأرية المضادة للمنطقة‎ ‏المتماشظلة من‎ dimerization ‏لذلك تسمى مضادات أجسام 1 و010.4؛ قادرة على تثبيط‎ ‏وإعادة تشييد الحاجز الظهاري في المعمل:‎ JAM-A ‏أجل‎ ‎(Mandell et al., 2004, J. Biol. Chem., 279:16254-16262). evitronectin ‏وهو داخل في هجرة خلايا البطانة على‎ integrin avfs ‏مع‎ JAM-A ‏يتفاعل‎ ° (Naik and Naik, 2005, J. Cell Sci. 119:490-499) integrin avfis ‏وهو مركب ترابطي من‎
Lh cayfy ‏مضاد جسم مضاد‎ Jia ‏بنفس الطريقة‎ (JAM-A ‏إن مضاد الجسم 137.1 المضاد‎ (Naik et al., 2003, ‏هجرة خلايا البطانة والتكوين الوعائي الذي يحثه 5101 في المعمل‎
MAP ‏لقد اتضحت مسارات إشارات عديدة في خلايا البطانة:‎ .51000, 102:2108-2114(
PKC PI3-kinase <kinases ٠ (Naik et Naik, 2005, 1. Cell Sci., 119:490-499; Naik et al., 2003, Blood, 102:2108- 2114; Naik et al., 2003, Artherioscler. Thromb. Vasc. Biol., 23:2165-2171). ‏متعادلة الصبغ وصفائح‎ LOA ‏أيضا في خلايا أحادية؛ خلايا ليمفاوية؛‎ JAM-A ‏يظهر‎ ‎JAM- protein ‏لقد تحدد‎ (Williams et al., 1999, Mol. Immunol. 36:1175-1188( ‏دموية‎ ‏على أية حال أوليا كمستقبل لمضاد الجسم 711 وهو مضاد جسم قادر على تنشيط‎ A ٠5 ‏الصفائح الدموية وحث تجمعها:‎ (Naik et al., 1995, Biochem. 1., 310:155-162; Sobocka et al., 2000, Blood, 95:2600- 2609). ‏مضاد الجسم 1111 وهي داخلة في‎ epitope ‏إلى‎ ]٠١5-3171و‎ ]٠١-78[ Peptides ‏تنتمصي‎ ‏متماثلة:‎ dimerization ‏ظاهرةٍ تنشيط وتجمع الصفائح الدموية وفي‎ ٠ (Babinska et al., 2002, Thromb. Haemost., 87:712-721). ‏الفأري؛ يثبط الهجرة‎ JAM-A ‏الموجه ضد شكل‎ (BVI ‏إن مضاد جسم حيوان قارض‎ ‏عبر البطانة للخلايا الأحادية في المعمل وفي الجسم:‎ (Del Maschio et al., 1999, J. Exp. Med., 190:1351-1356). ‏هو‎ JAM-A ‏أن‎ (2002, Nature Immunol., 3:151-158) colleagues 3 Ostermann ‏أظهر‎ Ye ‏ملازم لوظيفة خلية‎ ١ ‏(مولد مضاد‎ LFA-1 ‏دال» أو‎ integrin ‏مركب ترايطي من أجل‎ ‏معينة أثناء حدوث استجابة‎ chemokines ‏ليمفاوية)؛ الذي يظهر بدرجة زائدة الاستجابة إلى‎
Ya..
yy ‏مضادة للالتهاب وهو مطلوب من أجل المرور عبر الجدران السليمة للأوعية أو الهجرة للخلايا‎ ‏بواسطة مجال السيطرة الثاني الذي يشبه ع1‎ JAM-A ‏البيضاء إلى مكان الالتهاب. يساهم‎ ‏وخلايا متعادلة الصبغ‎ T ‏في الالتصاق والهجرة عبر البطانة لخلايا ليمفاوية‎ (Ostermann et al., 2002, Nature Immunol. 3:151-158), ‏وبذلك يلعب دورا هاما في احتشاد الخلايا البيضاء عند مكان الالتهاب.‎ 0 ‏في الواقع هو‎ JAM-A ‏متورط أيضا في ظاهرةٍ العدوى الفيروسية. إن‎ protein JAM-A ‏إن‎ ‏مستقبل لفيروس ارتجاعي؛ وهي الفيروسات المسئولة عن أنواع معينة من الالتهاب الدماغي‎ ‏يثبط‎ (Barton et ‏.له‎ 2001, Cell 104:441-451) ol ‏ارتباط‎ protein ‏بواسطة تفاعل مع‎
JAM-A ‏ارتباط الفيروس الارتجاعي مع‎ JAM-A ‏مضاد الجسم 110.4 المضاد‎ )01 651 et al., 2003, J. Biol. Chem., 278:48434-48444). ‏حتى الآن؛ لا يظهر أي من مضادات الأجسام المذكورة أعلاه المضادة للشكل الآدمي‎ ‏نشاطا في الجسم؛ وتظهر نشاط قليل جدا مضاد لورم. تستخدم‎ JAM-A protein ‏لأجل‎ ‏هناك نقص جوهري‎ (Blu) ‏في المجال‎ celal ‏مضادات الأجسام تلك فقط كأدوات للبحث.‎ ‏لمضاد جسم مضاد لورم نشط في المعمل وفي الجسم.‎ ‏يتميز مضاد الجسم من الاختراع» أو مركباته المشتقة أو أجزاؤه‎ pala ‏طبقا لجانب‎ Vo ‏طبقا للتسمية الإنجليزية‎ JAM-A protein ‏الوظيفية؛ بأنه قادرا على الارتباط بصفة خاصة مع‎ .“Junctional Adhesion Molecules” ‏طبقا لجانب آخر أيضاء يتميز مضاد الجسم من الاختراع؛ أو مركباته المشتقة أو أجزاؤه‎ ‏بيكوجزيئي جرامي‎ ١ ‏نانوجزيئي جرامي و‎ ١ ‏بين‎ JAM-A ‏من أجل‎ Kp ‏الوظيفية؛ بأنه يظهر‎ ‏و50‎ ٠١ ‏تقريبا بين‎ JAM-A protein ‏المذكورة لأجل‎ Kp ‏تقريبا. يفضل أكثرء أن تكون‎ ٠ ‏بيكوجزيئي جرامي.‎ = Kp ‏مضاد معين.‎ alge ‏إلى ثابت التفكك لمركب مضاد الجسم-‎ "Kp ‏يشير المصطلح‎ ‏لتفكك مضاد الجسم من مركب مضاد‎ "Jamal ‏#مكا/ا ويتكون »مآ من ثابت "خارج‎ ‏من المستوى الذي يرتبط عنده مضاد الجسم مع مولد‎ Kon ‏الجسم- مولد المضاد ويتكون‎ (Chen Y. et ‏ملق‎ 1999, J.Mol.Biol., 293:865-881) ‏المضاد:‎ Yo ‏منفصل يتميز بأنه ينتقى من بين‎ nucleic acid ‏يتعلق جانب جديد للاختراع الحالي مع‎ ‏التالية (متضمنة أي شفرة جينية متحللة):‎ nucleic acids
Yd
‎«DNA «nucleic 4 00‏ أو ‎(RNA‏ يشفر مضاد جسم مطابق للاختراع؛ أو واحد من مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية؛ (ب) ‎nucleic acid‏ مكمل لأجل ‎nucleic acid‏ حسب التحديد في 0 ¢ ‎nucleic acid (=)‏ من ‎nucleotides YA‏ على الأقل ‎Hold‏ على التهجين تحت شروط صارمة 0 للغاية مع واحدة على الأقل من ‎CDRs‏ من ترتيبات ‎nucleic acid‏ بتعريفات الترتيب أرقام ‎٠١‏ ‏إلى ١؟‏ أو مع ترتيب مماثئل 780 على الأقل؛ يفضل 7/85 740 795 و2948 بعد اصطفاف أمثل مع تعريفات الترتيب أرقام ‎7١‏ إلى ‎SY‏ ‏(د) ‎nucleic acid‏ من ‎nucleotides ٠8‏ على الأقل قادرا على التهجين تحت شروط صارمة للغاية مع على الأقل السلسلة الخفيفة لترتيب ‎nucleic acid‏ بتعريف الترتيب رقم ‎TY‏ أو 776 ‎Va‏ و/أو السلسلة الثقيلة لترتيب ‎nucleic acid‏ بتعريف الترتيب رقم ‎١‏ أو م أو مع ترتيب له تمائل 7860 على الأقل بعد اصطفاف أمثل مع تعريف الترتيب رقم 37 أو ‎OF SHY‏ ‎١‏ أو ‎YA‏ ‏| يلخص جدول ¥ أدناه ترتيبات ‎nucleotide‏ العديدة الخاصة بمضاد الجسم من الاختراع. ‎٠‏ ‏جدول ؟ سن ‎wn‏ | ااا ترقيم ‎CDR‏ سلسلة ثقيلة سلسلة خفيفة الجسم الترتيب رقم اال ا ا ‎ess‏ ‎ews‏ ‏الشائع ‏الس ا" لس اا ‎Te eee‏ ا ‎ew‏ ‎Cv me |‏ ‎em‏ د ‎Yq..‏
Yo
Tew
Co ew es ‏ا ضع‎
Kabat ew
TT ee eT ow
Cn heme
CL esa ee eT ae
Cr mee ‏ا‎ ‎Hu ‎ee ‎Hu ‎nucleic acid «859 nucleic sequence ‏'ترتيب نووي‎ «nucleic acid” ‏إن المصطلحات‎ ‘nucleotide «+55 5 "polynucleotide ‏"ترتيب‎ <"oligonucleotide” «"polynucleotide” »' ‏دقيق؛ معدلة أو غير‎ nucleotides ‏المستخدمة بصورة تبادلية في الوصف الحالي؛ تعني ترتيب‎ ‏غير‎ nucleotides ‏تحتوي أو لا تحتوي على‎ nucleic acid ‏معدلة؛ تحدد جزءٍ أو منطقة‎ ‏فردي الشريط أو نواتج نسخ‎ DNA ‏مزدوج الشريط»‎ DNA ‏طبيعية؛ وتكون عبارة عن إما‎ ٠ ‏المذكورة.‎ DNAs ‏في بيئتها‎ nucleotide ‏لابد أيضا من الإشارة هنا إلى أن الاختراع الحالي لا يتعلق بترتيبات‎ ‏الكروموسومية الطبيعية؛ أي» في حالة طبيعية. إن ترتيبات الاختراع الحالي تم فصلها و/أو‎ ‏تنقيتهاء أي» تم أخذ عينات منها بصورة مباشرة أو غير مباشرة؛ على سبيل المثال بواسطة‎ ‏منفصلة‎ nucleic acids ‏نسخة؛ وتكون بيئتها معدلة جزئيا على الأقل. لابد هنا أيضا من ذكر‎ ٠ ‏ناتجة بتقنيات وراثية تخليقية؛ بواسطة؛ على سبيل المثال؛ لخلايا عائلة؛ أو ناتجة بتكوين‎ ‏كيميائي.‎ ‏بنكلا‎
Yi
JAA 746 ‏:4ن‎ JA ‏يفضل‎ JA ‏على الأقل‎ JJ ‏إن "ترثيبات نووية تظهر‎ ‏بعد اصطفاف أمثل مع ترتيب مفضل 'تعني ترتيبات نووية تظهر؛ بالنسبة للترتيب النووي‎ ‏بصفة خاصة؛ إزالة؛ بترء إطالة؛ اندماج مختلط و/أو استبدال؛‎ Jie ‏المقارن؛ تعديلات خاصة‎
Jie amino acid ‏واضحة تحديدا. يفضل أن تكون هذه هي ترتيبات تشفر نفس ترتيبات‎ ‏الترتيب المرجعي؛ ويتعلق هذا بتحلل الشفرة الجينية؛ أو ترتيبات تكملة من المحتمل أن تتهجن‎ ٠ ‏بصفة خاصة مع الترتيبات المرجعية؛ يفضل تحت شروط صارمة للغاية؛ تحديدا تلك المحددة‎ ‏أدناه.‎ ‏إن التهجين تحت شروط صارمة للغاية يعني تلك الشروط المتعلقة بدرجة الحرارة والشدة‎ ‏تكميليين. على‎ DNA ‏الأيونية والتي تنتقى بطريقة بحيث تسمح باستبقاء التهجين بين جزئي‎ ‏أساس توضيحي تماماء تكون الشروط الصارمة للغاية لخطوة التهجين بغرض تحديد أجزاء‎ ٠ ‏الموضحة أعلاه كما يلي بصورة مفيدة.‎ polynucleotide ‏تهجين تمهيدي عند‎ )١( ‏على خطوتين:‎ DNA-RNA ‏أو‎ DNA-DNA ‏يجرى تهجين‎ ‏مللي جزيئي جرامي؛‎ ٠١( phosphate ‏لمدة ؟ ساعات في مثبت أس هيدروجيني‎ ety ٠.٠٠ NaCl ‏يطابق محلول من‎ 1X SSC) 5X SSC ‏يحتوي على‎ (V.0 ‏أس هيدروجيني‎ sodium /V «formamide 780 «(sab ‏جزيني‎ ++ V0 sodium citrate + ‏جزيئي جرامي‎ ٠ ‏حيوان منوي‎ DNA 7١ ‏و‎ dextran sulfate /© <10X Denhardt’s «(SDS) dodecyl sulfate ‏ساعة عند درجة حرارة تعتمد على طول المجس (أي؛‎ 7١ ‏سالمون؛ (7) تهجين أولي لمدة‎ ‏دقيقة عند‎ Ve ‏في الطول) ثم الغسيل مرتين‎ nucleotides ٠٠١ > ‏7؛"مئوية للمجس‎ 0.1X ‏دقيقة عند ١٠*مئوية في‎ ٠١ ‏غسيل مرةٍ واحدة‎ 27 SDS + 2X SSC ‏في‎ ةيوئم“٠‎ ‏دقيقة‎ Yr ‏لمدة‎ 200٠ SDS + 0.135 SSC ‏يجرى الغسيل الأخير في‎ 7+.) SDS + 880 ٠ ‏في الطول. إن شروط التهجين الصارمة للغاية‎ nucleotides ٠٠١ > ‏للمجس‎ Agi ‏عند‎ ‏محدد المقاس يمكن تعديلها بواسطة شخص ماهر‎ polynucleotide ‏الموصوفة أعلاه من أجل‎ ‏طبقا للإجراءات الموصوفة في:‎ ٠ ‏أطول أو أقصر‎ oligonucleotides ‏في الفن بالنسبة إلى‎
Sambrook, et al. (Molecular cloning: a laboratory manual, Cold Spring Harbor
Labdfatory; 3rd edition, 2001). ‏حسب الوصف في الاختراع.‎ nucleic acid ‏يتعلق الاختراع أيضا بناقل يشمل‎
Yq..
ود يستهدف الاختراع تحديدا نواقل نسخ و/أو إظهار تحتوي على ذلك الترتيب من 11110160106 تحتوي نواقل الاختراع بصورة مفضلة على عناصر تسمح بإظهار و/أو إفراز ترتيبات ‎nucleotide‏ في خلية ‎Alle‏ محددة. لابد أن يحتوي الناقل لذلك على محث؛ إشارات بداية ‎ily ©‏ ء ترجمة؛ بالإضافة إلى مناطق تنظيم نسخ مناسبة. لابد أن يكون قادرا على البقاء بطريقة ثابتة في الخلية العائلة وقد تكون له اختياريا إشارات خاصة تحدد إفراز ‎protein‏ المترجم. تنتقى هذه العناصر العديدة وتصبح في صورة مثلى بواسطة شخص ماهر في الفن طبقا للخلية العائلة المستخدمة. لهذا الغرض؛ يمكن إدخال ترتيبات ‎nucleotide‏ في نواقل ذاتية الانقسام في العائل المختار أو قد تشكل نواقل تكاملية للعائل المختار.
‎٠١‏ تحضر تلك النواقل بطرق مستخدمة نموذجيا بواسطة شخص ماهر في الفن ويمكن إدخال النسخ الناتجة في عائل مناسب بطرق قياسية ‎Jia‏ استقبال حامل دهني؛ تثقيب كهربي؛ صدمة حرارية أو طرق كيميائية.
‏إن النواقل هي؛ على سبيل المثال؛ نواقل ‎plasmid‏ أو من مصدر فيروسي. إنها تستخدم لتحويل خلايا عائلة من أجل نسخ أو إظهار ترتيبات ‎nucleotide‏ الاختراع. ‎Vo‏ يشمل الاختراع أيضا ‎Alle WIA‏ متحولة بواسطة أو مشتملة على ناقل حسب الوصف في الاختراع الحالي. يمكن انثقاء الخلية العائلة من بين أنظمة بدائية النواة أو سوية النواة ‎Jie‏ خلايا بكتيرية؛ على سبيل المثال؛ وأيضا خلايا خميرة أو خلايا حيوان؛ تحديدا ‎Ad LA‏ يمكن ‎La‏ ‏استخدام خلايا حشرةٍ أو نبات. ‎Ye‏ يتعلق الاختراع ‎Lia‏ بحيوانات؛ بالإضافة إلى الآدميين؛ لديها خلية متحولة طبقا للاختراع. يتعلق جاتب آخر للاختراع بطريقة لإنتاج مضاد جسم مطابق للاختراع؛ أو واحد من أجزائه الوظيفية؛ تتميز بأن الطريقة المذكورة تشمل الخطوات التالية: (أ) الزراعة في وسط وشروط مزرعة مناسبة لخلية عائلة مطابقة للاختراع؛ و (ب) استرجاع مضاد الجسم المذكور؛ أو واحد من أجزائه الوظيفية؛ الناتجة بذلك من وسط © المزرعة أو من ‎WAY‏ المزروعة المذكورة. إن الخلايا المتحولة المطابقة للاختراع لها استخدام في طرق لتحضير ‎polypeptides‏ ‏مُخلقة مطابقة للاختراع. يشمل الاختراع الحالي أيضا طرق لتحضير ‎polypeptide‏ مطابق جل
YA
‏للاختراع في شكل مُخلق؛ تتميز بأن الطرق المذكورة تستخدم ناقل و/أو خلية متحولة بواسطة‎ ‏ناقل طبقا للاختراع. يفضلء أن تزرع خلية متحولة بناقل طبقا للاختراع تحت شروط تسمح‎ ‏المُخلق المذكور.‎ peptide ‏سالف الذكر واسترجاع‎ polypeptide ‏بإظهار‎ ‏كما هو مذكور بالفعل؛ يمكن انتقاء الخلية العائلة من أنظمة بدائية أو سوية النواة. تحديداء‎ ‏الاختراع التي تسهل الإفراز في ذلك النظام بدائي أو سوي‎ nucleotide ‏يمكن تحديد ترتيبات‎ © ‏التواة. يمكن لذلك استخدام ناقل مطابق للاختراع يحمل ذلك الترتيب بصورة مفيدة لإنتاج‎ ‏المُخلقة الهامة سوف تسهلها‎ proteins ‏مُخلقة مراد إفرازها. في الواقع؛ فإن تنقية هذه‎ proteins ‏الحقيقة بأنها موجودة في المادة الطافية للمزرعة الخلوية بدلا من وجودها بداخل الخلايا‎ ‏العائلة.‎ ‏من الاختراع بتكوين كيميائي. تكون تلك الطريقة‎ polypeptides ‏يمكن أيضا تحضير‎ Ve
Jie ‏للتحضير هدفا أيضا للاختراع. يعلم شخص ماهر في الفن طرقا للتكوين الكيميائي؛‎ ‏تقنيات طور صلب؛ انظر:‎
Steward et al., 1984, Solid phase peptides synthesis, Pierce Chem. Company,
Rockford, 111, 2nd ed. ‏أو تقنيات طور صلب جزئية؛ بتكثيف أجزاء أو بتكوين تقليدي في محلول. يشمل الاختراع‎ ١٠ ‏غير طبيعية‎ amino acids ‏ناتجة بتكوين كيميائي وقادرة على احتواء‎ polypeptides ‏أيضا‎ ‏مقابلة.‎ ‏يشمل الاختراع الحالي أيضا مضادات الأجسام,؛ أو مركباتها المشتقة أو أجزاء وظيفية‎ |ّ ‏منهاء من المحتمل إنتاجها بطريقة الاختراع.‎ ‏يتعلق الاختراع الحالي بمضاد جسم حسب الوصف أعلاه؛ يتميز‎ clad ‏طبقا لجانب آخر‎ Y. = tyrosine kinase ‏بأنه؛ إضافة لذلك؛ قادر على الارتباط بصفة خاصة مع مستقبل عائلة‎ ‏لذلك المستقبل.‎ tyrosine kinase ‏و/أو قادر على التثبيط بصفة خاصة لنشاط‎ ‏طبقا لتطبيق جديد؛ يتعلق الاختراع بمضاد جسم؛ أو مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية؛‎ ‏يتكون من مضاد جسم ثنائي الخصوصية من ناحية أنه يشمل حافز ثان قادر على التعامل مع‎ «HER2neu «IGF-IR (EGFR «VEGF «VEGFR «Jia ‏أي مستقبل متورط في نمو الور‎ © 2 ‏أو‎ CXCR4 «integrins ctetraspanins «FGF ‏الع‎ «HGF
Yq...
طبقا لتطبيق ‎(Jol‏ يتكون مضاد الجسم ذلك من مضاد جسم ‎SU‏ الخصوصية ويشمل حافز ثان يثبط بصفة خاصة ارتباط ‎EGF‏ مع مستقبل عامل نمو بشراني آدمي ‎(EGFR)‏ و/أو يثبط بصفة خاصة نشاط ‎tyrosine kinase‏ من أجل ‎EGFR‏ المذكور. طبقا لجانب آخر مفضل أكثر للاختراع؛ ‎Lag‏ حافز مضاد ‎EGFR‏ الثاني المذكور من مضاد الجسم أحادي ‎geil‏ ‎C225) cetuximab ©‏ أو ‎HuMax-EGFR <huR3 ¢matuzumab «(erbitux‏ أو ‎.panitumab‏ ‏طبقا لتطبيق ثان؛ يتكون مضاد الجسم المطابق للاختراع من مضاد جسم ثنائي الخصوصية ويشمل حافز ثان يثبط بصفة خاصة النشاط الذي يضبطه مستقبل ‎HER2/neu‏ ‏و/أو ‎Jady‏ بصفة خاصة نشاط ‎tyrosine kinase‏ لمستقبل ‎HER2/neu‏ المذكور. بتحديد أكثر ‎Lay‏ الحافز المضاد ‎HER2/neu‏ الثاني المذكور من مضاد الجسم أحادي النسخ الفأري 415 ‎٠‏ أو ‎soca‏ من مضاد الجسم المكتسب للسمة الآدمية ‎.pertuzumab | trastuzumab‏ طبقا لتطبيق ثالث؛ يتكون مضاد الجسم المطابق للاختراع من مضاد جسم ثناثي الخصوصية ويشمل حافز ثان يثبط بصفة خاصة ارتباط عامل نمو خلية كبد ‎(HGF)‏ مع مستقبل ‎cMET‏ و/أو يثبط بصفة خاصة نشاط ‎tyrosine kinase‏ لمستقبل ‎c MET‏ المذكور. طبقا لتطبيق رابع؛ يتكون مضاد الجسم المطابق للاختراع من مضاد جسم ‎GL‏ ‎٠‏ الخصوصية ويشمل حافز ثان يثبط بصفة خاصة النشاط الذي يضبطه مستقبل ‎IGF-IR‏ و/أو ‎Jay‏ بصفة خاصة نشاط ‎tyrosine kinase‏ لمستقبل ‎IGF-IR‏ المذكور. بتحديد أكثر؛ ‎Lay‏ ‎ila‏ مضاد 107-18 الثاني المذكور من مضاد جسم أحادي التسخ فأري 7010 من مضاد جسم مكتسب السمة الآدمية مقابل ‎«Goetsch ef al.) h7C10‏ طلب براءة الاختراع الدولية ‎WO‏ ‏03/059951(+ من مضادات أجسام 4 693 ,2003 ‎Cancer Res.,‏ آله ‎(Maloney er‏ ©“ )16):5073-5083(« من مضادات أجسام مضادة ‎IGF-IR‏ ناتجة بواسطة ‎Abgenix‏ (انظر طلب براءة الاختراع الأمريكية 2005/281812)؛ أو من: ‎Mab 39, 1117 (Li et al., Cancer Immunol.
Immunother., 2000, 49(4-5):243-252) or‏ ‎(Jackson-Booth er al., Horm.
Metab.
Res., 2003, 35(11-12):850-856).‏ 4611 وأخيراء طبقا لتطبيق نهائي؛ يتكون مضاد جسم الاختراع من مضاد جسم ثنائي ‎YO‏ الخصوصية ويشمل ‎Sila‏ ثان قادر على التفاعل مع أي نوع مستقبل متدخل في نمو ورم؛ كأمثلة غير حصرية؛ ‎FGF «VEGF «VEGFR‏ (عامل نمو خلية ليفية أولية) أو أي عضو من عائلة ‎CXCR‏ (مستقبل ‎«(chemokine‏ متل ‎CXCR2‏ أر ‎.CXCR4‏ ‏: اس
من المناسب أيضا للذكر مضادات أجسام مضادة ‎ibritumomab «rituximab Jie CD20‏ أو 091007000085؛ مضادات أجسام مضادة 0033 مثل ‎gemtuzumab‏ أى ‎‘lintuzumab‏ ‏مضادات أجسام مضادة ‎CD22‏ مثل ‎tepratuzumab‏ مضادة أجسام مضادة 0052 ‎talemtuzumab Jie‏ مضادات أجسام مضادة ‎EpCAM‏ مثل المقمسماممععل ‎Ch 17-1A‏ أو ‎(IGN-101 ٠‏ مضادات أجسام مضادة 01721 أو 16 ‎¢Xactin Jie‏ مضادات أجسام مضادة ‎DNA-Ag‏ مثل 1111-1 «:ه1ه1-0!”'؛ مضادات أجسام مضادة 111701 ‎pemtumomab Jie‏ أو 81150؛ مضادات أجسام مضادة 1411018 مثل ‎tABX-MAT‏ مضادات أجسام مضادة 3 مثل ‎¢mitumomab‏ مضادات أجسام مضادة ‎ECA‏ مثل ‎CeaVac‏ أو ‎tlabetuzumab‏ ‎٠‏ مضادات أجسام مضادة 8125© مثل ‎tOvaRex‏ مضادات أجسام مضادة ‎(Fie HLA-DR‏ ‎sapolizumab ٠‏ مضادات أجسام مضادة 1144© مثل ‎tMDX-010‏ مضادات أجسام مضادة ‎PSMA‏ مثل ‎Lu 1591 "In & "7-1591 ¢MDX-070‏ 1591-0141؛ مضادات أجسام مضادة 77 ‎Lewis‏ مثل ‎SIGN311‏ مضادات أجسام مضادة للتكوين الوعائي مثل ‎(AS1405‏ ‎$90YmuBCl‏ مضادات أجسام مضادة ‎TRAIL RImAb Je Trail-R1‏ أر ‎TRAIL‏ ‎.R2ZmAb‏ ‏ب إن مضادات الأجسام ثنائية الخصوصية أو ثنائية الوظيفية تشكل جيل ثان من مضادات أجسام أحادية النسخ تتحد فيها ‎١‏ من مناطق متغيرة مختلفة في نفس الجزئ ‎(Hollinger and Bohlen, 1999, Cancer and metastasis, rev. 18:411-419)‏ . يظهر استعمالها في كل من مجالات سيطرة تشخيصية وعلاجية نظرا لقدرتها على حشد وظائف مستجيبة جديدة أوعلى استهداف جزيئات كثيرة على سطح خلايا الورم؛ يمكن الحصول على ‎٠‏ مضادات الأجسام تلك بطرق كيميائية -2367 ,139 ‎(Glennie MJ ef al., 1987, J.
Immunol.‏ ‎Repp R. er al, 1995, J.
Hemat, 377-382)‏ :2375 أو بواسطة طرق جسدية ‎(Staerz U.D. and Bevan M.J., 1986, PNAS 83, 1453-1457; Suresh M.R. et al., 1986,‏ ‎Method Enzymol, 121:210-228)‏ لكن أيضاء بصورة مفضلة. بتقنيات هندسة وراثية تجعل من الممكن تدعيم ‎dimerization‏ المغايرة وبالتالي تسهيل تنقية مضاد الجسم المفترض ‎al., 1998, Nature Biotech., 16:677-681) Ye‏ ان ‎-(Merchand‏ ‏يمكن تشييد مضادات الأجسام هذه 400 الخصوصية مثل 180 كامل؛ 780:2 ثنائي الخصوصية؛ ‎(Fab’PEG‏ أجسام ثنائية أو 80177 ثنائي الخصوصية؛ لكن ‎Waa‏ مثل مضاد
جسم رباعي التكافؤ ثنائي الخصوصية موجود به مكانين للربط لكل مولد مضاد مستهدف ‎(Park er al, 2000, Mol.
Immunol, 37(18):1123-30)‏ أو أجزاء ‎aie‏ حسب الوصف أعلاه. بالإضافة إلى الميزة الاقتصادية بأن إنتاج وإعطاء مضاد جسم ثنائي الخصوصية أرخص من إنتاج ¥ من مضادات أجسام خاصة؛ فإن استخدام مضادات الأجسام تلك ثنائية ‎٠‏ الخصوصية له ميزة تقليل سمية المعالجة. في الواقع؛ فإن استخدام مضاد جسم ثنائي الخصوصية يجعل من الممكن تقليل الكمية الكلية من مضادات الأجسام في الدورة الدموية؛ ونتيجة لذلك؛ تقليل السمية المحتملة. في تطبيق مفضل من الاختراع» يكون مضاد الجسم ثنائي الخصوصية هو مضاد جسم ثنائي أو رباعي التكافؤ. ‎Boal ١‏ يتعلق الاختراع الحالي بمضاد الجسم الموصوف أعلاه؛ أو مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية؛ للاستخدام كعقار. يتعلق الاختراع أيضا بتركيبة دوائية تشتمل كمقوم نشط مركب يتكون من مضاد جسم من الاختراع؛ أو واحد من مركباته المشتقة أو أجزائه الوظيفية. يفضل؛ أن يكون مضاد الجسم المذكور مدعما بمادة مسوغة و/أو مادة حاملة مقبولة دوائيًا. ب طبقا لجانب آخر ‎(Ua‏ يتعلق الاختراع الحالي أيضا بتركيبة دوائية حسب الوصف أعلاه تشمل على الأقل مركب ثاني مضاد لورم ينتقي من المركبات القادرة على التثبيط بصفة خاصة لنشاط ‎tyrosine kinase‏ للمستقبلات مثل ‎VEGFR «MET <HER2/neu «EGFR «IGF-IR‏ ‎VEGF Sf‏ أو أي مركب آخر مضاد لورم معروف لشخص ماهر في الفن. في جانب ثاني مفضل من الاختراع؛ يمكن أن ينتقي المركب الثاني المذكور من بين مضادات الأجسام ‎٠٠‏ المضادة 12078 المضادة ‎(IGF-IR‏ المضادة 1182/00 المضادة ‎«cMET‏ 710611 ‎«VEGF‏ إلخ؛ منفصلة؛ أو أجزائها الوظيفية ومركباتها المشتقة؛ القادرة على تثبيط النشاط الانقسامي و/أو المضاد للموت المبرمج و/أو التكويني الوعائي و/أو المحث لانتشار خلايا ورم تحثه المستقبلات المذكورة. طبقا لجانب آخر ‎Lad‏ من الاختراع؛ تشتمل التركيبة؛ إضافيًا؛ كمنتج اتحاد للاستخدام ‎Yo‏ بطريقة متزامنة؛ منفصلة أو ممتدة؛ على مثبط واحد على الأقل لنشاط ‎tyrosine kinase‏ لمستقبلات متل ‎-VEGFR 5 cMET «HER2/neu «EGFR «IGF-IR‏ ‎Ya...‏
نض في تطبيق آخر مفضل؛ ينتقى المثبط المذكور لنشاط ‎tyrosine kinase‏ لهذه المستقبلات من المجموعة المشتملة على عوامل طبيعية مشتقة؛ ‎pyrazolo «dianilinophthalimides‏ أو ‎pyrrolo-pyridopyrimidines‏ أى ‎.quinazolines‏ توصف تلك العوامل المتبطة؛ المعروفة جيدا للماهر في الفنء في الأدبيات )25-32 ,1 ‎-(Ciardiello F., Drugs 2000, Suppl.‏ ° يتكون تطبيق آخر مكمل للاختراع من تركيبة حسب الوصوف أعلاه تتكون من؛ إضافيًا؛ كمنتج اتحاد للاستخدام المتزامن؛ المنفصل أو الممتد؛ عامل سام للخلايا/ موقف لنمو الخلايا. يعني "استخدام متزامن ‎"Simultaneous use‏ إعطاء مركبي التركيبة الداخلين في شكل جرعة واحد. يعني "استخدام ‎"Separated use (adic‏ إعطاء؛ عند نفس الوقت؛ لمركبي التركيبة؛ ‎٠‏ الداخلين في أشكال جرعة منفصلة. يعني "استخدام ممتد ‎"Extended use‏ الإعطاء المتعاقب لمركبي التركيبة؛ الداخل كل منها بصفة عامة؛ فإن التركيبة المطابقة للاختراع تزيد بدرجة معقولة من كفاءة معالجّة السرطان. بطريقة أخرىء يزداد التأثير العلاجي لمضاد جسم من الاختراع بطريقة غير متوقعة ‎٠‏ بإعطاء عامل سام للخلايا. تعلق ميزة أخرى تالية كبرى ناتجة بواسطة تركيبة الاختراع بإمكانية استخدام جرعات مؤثرة ‎Jil‏ من المقوم النشط؛ وبالتالي تجعل من الممكن تفادي أو تقليل احتمال ظهور تأثيرات جانبية؛ تحديدا تأثير العامل السام للخلايا. علاوة على ذلك؛ فإن هذه التركيبة تجعل من الممكن تحقيق التأثير العلاجي المتوقع بسرعة أكبر. يعني "عامل علاجي مضاد للسرطان ‎"Therapeutic anticancer agent‏ أو "عامل سام ‎٠‏ للخلايا ‎"cytotoxic agent‏ مادة؛ عند الإعطاء لمريض؛ تعالج أو تمنع نشوء السرطان في المريض. إن أمثلة غير حصرية لتلك العوامل تتضمن عوامل "الكيلية ‎alkylating‏ مضادات مواد الأيض؛ مضادات حيوية مضادة لورم؛ مثبطات انقسام فتيلي؛ مثبطات توظيف ‎chromatin‏ “مضادات تكوين ‎(ley‏ مضادات «507088©؛ مضادات ‎androgen‏ ومواد ضابطة للمناعة. ‎Yo‏ إن تلك العوامل؛ على سبيل ‎«JU‏ مذكورة في ‎VIDAL‏ في الصفحة المخصصة للمركبات المتعلقة بعلم الأورام وعلم أمراض الدم تحت العنوان ‎"Cytotoxic‏ إن المركبات السامة للخلايا المذكورة بالإشارة إلى هذه الوثيقة مذكورة هنا كعوامل سامة للخلايا مفضلة. ‎Yq..‏ vy ‏إلى أي مادة يمكن أن ترتبط تساهميا مع أو يمكن‎ "alkylating agent ‏يشير "عامل الكيلية‎ ‏في خلية. إن الأمثلة‎ (DNA ‏(مثلاء‎ nucleic acid ‏أن تسبب الكيلية من أجل أي جزء؛ يفضل‎ ‏#متستقطاع: ملطبعغعص‎ J—ie ‏تتضمن مواد خردل نيتروجين‎ alkylation ‏لتنك العوامل‎ disodium sprednimustine «pipobroman schlorhydrate «melphalan «chlorambucil «cyclophosphamide (J— is oxazaphosphorines testramustine ‏أو‎ phosphate ® ethylene— ‏أو‎ aziridines ‘ifosfamide ‏أو‎ sulfofosfamide ctrofosfamide :altretamine <carmustine Jie nitrosoureas taltetramine ‏أو‎ triethyleneamine «thiotepa ‏معمتستمتل‎ ‎treosulfan sbusulfan Jie alkyl sulfonates ¢lomustine ‏أو‎ fotemustine sstreptozocine (3a platinum ‏أو معقدات‎ tdacarbazine ‏مقل‎ triazenes ¢improsulfan ‏أو‎ ‎.carboplatine ‏أُو‎ oxaliplatine «cisplatine ٠ ‏إلى مادة تثبط النمو و/أو الأيض الخلوي بإعاقة‎ "antimetabolite ‏أيض‎ sala ‏يشير 'مضاد‎ 5- methotrexate ‏خاصة؛ عامة تكوين 0118. تتضمن أمثلة لمضادات مواد الأيض‎ dai «Cytarabine «capecitabine «5-fluorodeoxyuridine «floxuridine «fluorouracile 6-thioguanine (6- «6-mercaptopurine (6-MP) «cytosine arabinoside sfludarabine scladribine igemcifabine <S-azacytidine «chlorodesoxyadenosine JG Ye -pentostatin ‏و‎ deoxycoformycin ‏إلى مركب يمكنه منع أوتثبيط‎ "antitumor antibiotic ‏حيوي مضاد لورم‎ dad ‏يشير‎ ‎past ‏المضادات الحيوية المضادة‎ lll ‏تتضمن أمثلة‎ .proteins ‏و/أو‎ RNA DNA ‏تكوين‎ ‎«dactinomycin <mitoxantrone «darubicin ~~ valrubicin «daunorubicin sdoxorubicin .procarbazine ‏و‎ «bleomycin «mitomycin C ¢plicamycin «mithramycin ٠ ‏تمنع التطور الطبيعي لدورة الخلية‎ "Mitotic inhibitors ‏إن 'مثبطات الانقسام الفتيلي‎ paclitaxel (ie "taxoids’ ‏والاتقسام الفتيلي . بصفة عامة؛ فإن مثبطات أينبيب صغير أو‎ svinblastine Js ‏قادرة علي تثبيط الاتقسام الفتيلي. إن أشباه قلويات معدضاب»‎ docetaxel . ‏على تثبيط الاتقسام الفتيلي‎ Ua ‏قادرة‎ «vinorelbine 3 vindesine <vincristine ‏هي مواد تثبط التوظيف الطبيعي‎ “topoisomerase ‏أو "مثبطات‎ ‘Chromatin ‏إن "مثبطات‎ Ye ‏و؟. إن الأمثلة لتلك المتبطات‎ ١ topoisomerases Jie «chromatin ‏التي تشكل‎ proteins ‏لذ‎ ‎Ya.
Yi ‏أمثلة‎ {topotecan ‏أو‎ irinotecan Jus ‏ومشتقاته؛‎ camptothecine «topoisomerase I ‏تتضمن؛‎ ‎.teniposide ‏و‎ etiposide phosphate «etoposide ‏تتضمن‎ stopoisomerase 1 ‏هو أي عقارء مركب مادة أو عامل يثبط‎ "antiangiogenic ‏إن " مضاد التكوين الوعاني‎ ‏لمضادات التكوين الوعأني؛ تتضمن بدون تحديد؛‎ A BYE ‏نمو الأوعية الدموية. إن‎
CGS- ‏تمامعصمالة‎ «tanomastat <prinomastat «batimastat ¢marimastat ‏مهد‎ 5 {CDC 50] ¢thalidomide «BMS-275291 ¢neovastat «COL-3 <halofuginone «27023A interferon- 5106668 SU5416 endostatine «squalamine «L-651582 (DMXAA .vitaxin ‏و‎ angiostatin 11862 .interleukin-12 «(EMD121974 «alpha ‏إلى أي مادة تقلل؛ تعارض أو تثبط تأثير‎ “estrogen antagonist” ‏أو‎ "Antiestrogen’ ‏يشير‎ ‎sraloxifene «toremifene amoxifene ‏لهسذه العامل هي‎ a hay ‏إن‎ .estropen ٠ 761185176 letrozole «anastrozole dodoxyfene «droloxifene ‏إلى أي مادة تقلل؛ تعارض أو تثبط‎ “androgen antagonist” sf “Antiandrogen” ‏يشير‎ ‎«nilutamide «flutamide ‏لمضادات 02 تتضمن‎ 4 BY ‏إن‎ androgen ‏تأثير‎ ‎.cimitidine 5 finasteride «cyproterone acetate «sprironolactone bicalutamide ‏إن المواد الضابطة للمناعة هي مواد تثير جهاز المناعة. إن الأمثلة لمواد ضابطة للمناعة‎ ‏أُو‎ denileukin diftitox 001-43 :aldesleukin ‏مقل‎ interleukins ¢interferon ‏تتضمن‎ ‏أو أنواع أخرى من المواد الضابطة‎ tasonermine (Jie as Had ‏عوامل‎ cinterleukine-2 spegademase spidotimod croquinimex «sizofiran slentinan ‏للمنامة مق ل‎ -5-fluorouracil ‏في اتحاد مع‎ levamisole ‏أو‎ poly 1:0 «thymopentine ‏أجل تفاصيل إضافية؛ يمكن للماهر في الفن الرجوع إلى الكتيب المنشور بواسطة‎ pe Ye the French Association of Therapeutic Chemistry Teachers titled “Therapeutic chemistry, vol. 6, Antitumor drugs and perspectives in the treatment of cancer, TEC and DOC edition, 2003 [in French]”. ‏في تطبيق مفضل تحديدا؛ تتميز تركيبة الاختراع المذكورة كمنتج اتحاد بأن العامل السام‎ ‏مع مضاد الجسم المذكور للاستخدام بصورة متزامنة.‎ Wiles ‏للخلايا المذكور يرتبط‎ Yo +
Yo ‏في تطبيق مفضل تحديداء تتميز التركيبة المذكورة بأن العامل السام للخلايا/ الموقف لنمو‎ ‏الخلايا المذكور ينتقي من ضمن مثبطات المغزل أو المواد المثبتة للمغزل؛ يفضل‎ vincristine ‏ر/أى‎ vinflunine l/s vinorelbine ‏لتسهيل الارتباط بين العامل السام للخلايا المذكور ومضاد الجسم المطابق للاختراع؛ يمكن‎ the poly(alkylene)glycol ‏إدخال جزيئات مباعدة بين المركبين للربط» مثل‎ © ‏يمكن استخدام مشتقات نشطة‎ » sal ‏أو ؛ في تطبيق‎ amino acids sf polyethyleneglycol ‏للعوامل السامة للخلايا المذكورة؛ يتم فيها إدخال وظائف قادرةٍ على التفاعل مع مضاد الجسم‎ ‏المذكور. إن هذه التقنيات للارتباط معروفة جيدا للماهر في الفن ولن يتم شرحها بالتفصيل في‎ ‏الوصف الحالي.‎
C225 ‏أخرى؛ بدون تحديد؛ مضادات أجسام أحادية النسخ‎ EGFR ‏تتضمن مثبطات‎ Ve
ABX-EGF (Abgenix/Cell «(ImClone Systems Incorporated) <EGFR ‏مضاد‎ 22Mab 21-1838 «ZD-1834 ‏أو مركبات‎ EMD-7200 (Merck KgaA) Genesys) «PKI-166/CGP-75166 (Novartis) «PKI-166 (Novartis) 20-1839 (AstraZeneca) ‏و‎ ‎CI-1033 «flunomide (Pharmacia/Sugen) «CP 701 (Cephalon) «PTK 787 (Novartis) 805 (Warner Lambert Parke «CI-1033/PD 183 «(Wamer Lambert Parke Davis) ٠5
BBR-1611 (Boehringer Mannheim 785 (Wyeth-Ayerst) «CL-387 Davis)
RC-3940-11 (Naamidine A (Bristol-board Myers Squibb) «GMBH/Roche) «OLX-103 (Merck & Co) «BIBX-1382 (Boehringer Ingelheim) «(Pharmacia)
DAB-389 «EGF fusion toxin (Seragen Inc.) <VRCTC-310 (Ventech Research)
RG-50864 «ZM-252808 (Imperial Cancer Research Fund) «(Seragen/Lilgand) ٠٠
WHI-P97 (Parker Hughes « LFM-A12 (Parker Hughes Center Cancer)«(INSERM) ‘EGFR ‏أو "لقاح‎ KT-8391 (Kyowa Hakko) «GW-282974 (Glaxo) «Center Cancer) -(York Medical/Centro of Immunologia Molecular) ‏من الاختراع بتركيبة تتميز بأن واحد على الأقل من مضادات الأجسام‎ AT ‏يتعلق جانب‎ ‏خلوي و/أو نظير مشع.‎ toxin ‏المذكورة؛ أو مركباتها المشتقة أو أجزائها الوظيفية؛ يتحد مع‎ Yo ‏المذكور أو النظير المشع المذكور قادرا على منع نمو أو انقسام‎ toxin ‏يفضل» أن يكون‎ ‏تحديدا إخماد نشاط كامل لخلية الورم المذكورة.‎ capil Ada
Ya..
يفضل أيضنًا أن يكون ‎toxin‏ المذكور هو ‎LAS toxin‏ معوية؛ تحديدا ‎toxin‏ داخلي 0 من ‎.Pseudomonas‏ ‏إن النظائر المشعة المفضل اتحادها مع مضادات أجسام علاجية هي نظائر مشعة تبعث ‎Ax ai‏ مصتصمع؛ يتل ‎«copper®’ «palladium! «gold'® cyttrium®® ciodine'!‏ ‎<bismuth?’ °‏ وال رد«مسنتده. يمكن أيضا في العلاج استخدام نظائر مشعة تبعث ‎Taal‏ ‎.beta s alpha‏ يشير ‎toxin’‏ أو نظير مشع متحد مع مضاد جسم واحد على الأقل من الاختراع؛ أو جزء وظيفي منه" إلى أي وسيلة تجعل من الممكن ربط ‎toxin‏ المذكور أو النظير المشع المذكور مع مضاد الجسم ذلك الواحد على الأقل » تحديدا بارتباط تساهمي بين المركبين» مع أو بدون ‎٠‏ إدخال الجزيء الرابط. تتضمن أمثلة لعوامل تسمح بالارتباط الكيميائي (التساهمي)؛ الساكن كهربياء أو غير التساهمي لكل أو ‎ein‏ من عناصر الاتحاد؛ بالتحديد ‎EDC (1-cthyl-3-[3-dimethyl-‏ ‎dithiobis-nitrobenzoic ~~ «dimaleimide «aminopropyl]-carbodiimide-hydrochloride)‏ ‎N-succinimidyl S-acetyl thio-acetate (SATA) «(DTNB) acid‏ « عوامل تجسير مع واحد ‎٠‏ أو أكثر من مجموعات؛ مع واحدة أو أكثر من مجموعات ‎cphenylasid‏ متفاعلة مع أشعة فوق بنفسجية ‎(UV)‏ أكثر تفضيلا ‎N-[-4 (azidosalicylamino)butyl]-3’-(2’-pyridyldithio)-‏ ‎N-succinimid-yl 3(2-pyridyldithio) propionate (SPDP) ¢propionamide (APDP)‏ و-6 ‎-hydrazino-nicotinamide (HYNIC)‏ يمكن أن أن يتكون شكل آخر للارتباط؛ تحديدا للنظائر المشعة؛ من استخدام عوامل ‎٠‏ كلابية لأيون ثنائي الوظيفية. إن الأمثلة لتلك العوامل الكلابية تتضمن العوامل الكلابية المشستقة من ‎EDTA‏ ‎«DTPA (diethylenetriaminepentaacetic acid) 0 (ethylenediaminetetraacetic acid)‏ الناشئة لربط الفلزات؛ تحديدا فلزات نشطة إشعاعياء مع ‎globulins‏ مناعية. ‎lla]‏ يمكن استبدال ‎DTPA‏ ومشتقاته على سلسلة ‎carbon‏ بمجموعات عديدة بطريقة بحيث يزداد ‎Qld‏ ‎Yo‏ ومتانة معقد المركب الترابطي- الفلز ( :1991 ‎Krejcarek er al., 1977; Brechbiel er al,‏ ‎¢Gansow, 1991‏ براءة الاختراع الأمريكية ‎1١1178‏ 487).
vv ‏ومشتقاته‎ DTPA (diethylenetriaminepentaacetic acid) ‏على سبيل المثال؛ فإن‎ ‏المستخدم منذ فترة طويلة على نطاق واسع في العقار وعلم الأحياء سواء في شكله الحر أو في‎ ‏يظهر السمات الملحوظة لتكوين مواد متكلبة ثابتة مع أيونات فلز يمكن‎ Jl ‏مركب مع أيون‎ ‏مضادات أجسام؛ لتطوير‎ Jie ‏لها أهمية علاجية أو تشخيصية؛‎ proteins ‏أن تكون مقترنة مع‎ .(Meases et al., 1984: Gansow ef al., 1990) ‏اتحادات إشعاعية؛ مناعية لعلاج السرطان‎ ٠ ‏أن ينتقي مضاد جسم واحد على الأقل مذكور من الاختراع المكون للاتحاد‎ (ad ‏يفضل‎ ‎.50177 ‏أجزاء‎ Jie (ld FC ‏المذكور من بين أجزائه الوظيفية؛ تحديدا أجزاء فقدت مكون‎ ‏استخدام التركيبة لتحضير عقار يقصد به منع أو معالجة‎ Wal ‏يشمل الاختراع الحالي‎ ‏سرطان.‎ ‏يتعلق الاختراع الحالي أيضنًا باستخدام مضاد جسم؛ أو مركب مشتق أو جزء وظيفي منه؛‎ Ve ‏يفضل مكتسب السمة الآدمية و/أو تركيبة مطابقة للاختراع لتحضير عقار لتثبيبط نمو خلايا‎ ‏ورم. بصفة عامة. يتعلق الاختراع الحالي باستخدام مضاد جسم؛ أو مركب مشتق أو جزء‎ ‏وظيفي منه؛ يفضل مكتسب السمة الآدمية و/أو تركيبة لتحضير عقار لمنع أو معالجة‎ ‏السرطان.‎ ‏تتضمن سرطانات مفضلة يمكن منعها و/أو علاجها سرطان البروستاتا؛ السرقوم العظمي؛‎ Ve ‏سرطان الرئة؛ سرطان الثدي؛ سرطان بطانة الرحم؛ سرطان القولون؛ ورم نخاعي متعدد؛‎ ‏سرطان المبيض» سرطان البنكرياس أو أي سرطان آخر.‎ ‏في طريقة مفضلة؛ يكون السرطان المذكور هو سرطان يتم اختياره من بين سرطان ثدي‎ ‏سرطان رثة في خلية غير صغيرة؛ سرطان القولون و/أو سرطان‎ cestrogen ‏مرتبط مع‎ ‏البنكرياس.‎ Ye ‏يتعلق جانب آخر من الاختراع الحالي باستخدام مضاد الجسم حسب الوصف في طريقة‎ ‏يفضل؛ أن تكون‎ JAM-A ‏تشخيصية؛ يفضل في المعمل؛ لأمراض متعلقة بمستوى إظهار‎ ‏المذكور في الطريقة التشخيصية المذكورة هي‎ protein JAM-A ‏الأمراض المتعلقة مع‎ ‏سرطانات.‎ ‏الوظيفية؛‎ Lethal ‏لذلك؛ يمكن استعمال مضادات أجسام الاختراع؛ أو مركباتها المشتقة أو‎ Yo ‏في عينة حيوية في المعمل؛ تحديدًا‎ protein JAM-A ‏في طريقة لتحديد و/أو تقدير كمي لأجل‎
Ya...
YA
‏سرطانات؛ حيث تشمل الطريقة‎ Jie cprotein ‏لتشخيص أمراض ملازمة لإظهار شاذ مع هذا‎ ‏المذكورة الخطوات التالية:‎ ‏(أ) تلامس العيئة الحيوية مع مضاد جسم مطابق للاختراع؛ أو مركب مشتق أو جزء وظيفي‎ ٍ ‏منه؛‎ ‏المضاد - مضاد الجسم المتكون بدرجة ممكنة.‎ alge ‏(ب) إظهار مركب‎ © ‏المجموعات أو المواد المساعدة لتنفيذ طريقة حسب‎ ad ‏الاختراع الحالي‎ Jody ‏لذلك؛‎ ‏أو من كائن حي ملازم أو‎ Legionella pneumophila Paris ‏الوصف (لتحديد إظهار جين من‎ ‏أو كائنات حية دقيقة‎ Legionella pneumophila Paris ‏لتحديد و/أو التعرف على بكتريا‎ ‏ملازمة)؛ تشمل العناصر التالية:‎ ‏مضاد جسم عديد النسخ أو أحادي النسخ من الاختراع؛‎ )( ٠ ‏(ب) اختيارياء عوامل كاشفة لتكوين الوسط المحبذ لتفاعلات مناعية؛‎ ‏اختيارياء عوامل كاشفة تكشف عن مركبات مولد المضاد - مضاد الجسم الناتجة بتفاعل‎ (=) ١ ‏مناعي.‎ ‎Ces ‏بدرجة مفيدة؛ يمكن تسكين مضادات الأجسام أو الأجزاء الوظيفية منها على‎ ‏كتلك تكون غرضا للإختراع.‎ protein ‏تحديدا رقاقة 0ع01:م. إن رقاقة‎ ١١ ‏في المجموعات أو المواد المساعدة المطلوبة‎ protein ‏بدرجة مفيدة؛ يمكن استخدام رقاقات‎ ‏في عينة حيوية.‎ protein JAM-A ‏لتحديد و/أو لتقدير كمي لأجل‎ ‏متعلق هنا بعينات مأخوذة‎ ‘biological sample ‏لابد أن نذكر أن المصطلح "عينة حيوية‎ ‏مأخوذة من كائن ثديي؛ تحديدًا‎ gal ‏من كائن حي دقيق (تحديدًا؛ دم؛ نسيج؛ عضو أو عينات‎ ‏واحد (مثل عينة خلاياء‎ protein JAM-A ‏إنسان) أو أي عينة من المحتمل أن تحتوي على‎ ٠ ‏متحولة عند الرغبة).‎ ‏يمكن أن يكون مضاد الجسم المذكور أو جزء وظيفي منه؛ في شكل اتحاد مناعي أو‎ ‏مضاد جسم معلم من أجل الحصول على إشارةٍ يمكن تحديدها و/أو يمكن تقديرها كميا.‎ ‏تتضمن مضادات أجسام الاختراع المعلمة؛ أو الأجزاء الوظيفية منها؛ على سبيل‎ ‏المثال؛ اتحادات مضاد جسم (اتحادات مناعية)؛ التي يمكن أن تتحدد على سبيل المثال؛‎ Yo )0-[(-281261051088© <alkaline phosphatase «peroxidase Jia ‏مع إنزيمات‎ «acetyl-cholinesterase «carbonic anhydrase «glucose amylase «glucose oxidase
Ya...
Ya ‏أو‎ glucose-6 phosphate dehydrogenase ‏أو‎ «malate dehydrogenase «lysozyme ‏يمكن أيضًا أن‎ .5-bromo-desoxyuridine si digoxigenin «biotin ‏بواسطة جزيء مثل‎ ‏تتحد علامات استشعاعية مع مضادات أجسام الاختراع أو أجزاء وظيفية منهاء متضمنة‎ ‏استشعاع‎ protein ‏ومشتقاته»؛‎ rhodamine «fluorochrome ‏ومشتقاتك‎ fluorescein ‏بالتحديد‎ ‏يمكن تحضير مضادات‎ calla ‏إلخ. في تلك‎ cumbelliferone «dansyl «(GFP) ‏أخضر‎ ‏أجسام الاختراع أو أجزائها الوظيفية بطريقة معروفة للماهر في الفن. يمكن أن ترتبط مع‎ ‏إنزيمات أو علامات استشعاعية مباشرة؛ بواسطة مجموعة مباعدة أو مجموعة وصلة‎ «ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) «glutaraldehyde ¢polyaldehyde (Jia ‏أو في وجود عوامل ارتباط مثل تلك‎ ¢diethylenetriaminepentaacetic acid (DPTA)
Je lily fluorescein ‏المذكورة أعلاه لاتحادات علاجية. يمكن تحضير اتحادات تحمل علامات‎ ٠ -isothiocyanate ‏مع‎ ‎luminol ‏علامات‎ Jie ‏يمكن أيضا أن تتضمن اتحجادات أخرى علامات كيميائية مضيئة‎ ‏أو علامات إشعاعية نشطة‎ duciferin 5 luciferase Jie ‏علامات حيوية مضيئة‎ «dioxetane 5 ¢indium'!! <technetium®™ bromine” «iodine! «iodine? ¢iodine'®® <iodine'® ‏مثل‎ ‎«ruthenium'® cruthenium®” <ruthenium® cgallium® cgallium® ¢indium!'P™ ‏مد‎ ‎«thenium'® crhenium'® <rhenium®™ mercury”? ¢mercury'” «ruthenium'® ¢thulium'®’ cthulium'®® ctellurium!'>™ «tellurium'>™ ctelturium'?™ «scandium®’ ‏يمكن استخدام طرق موجودة معروفة‎ iodine’ 5 yttrium!” fluorine’® <thulium!®® ‏للماهر في الفن لربط نظائر مشعة مع مضادات أجسام؛ سواء مباشرة أو من خلال عامل‎ ‏المذكورين أعلاه؛ كنظائر مشعة تشخيصية. لابد لذلك من ذكر‎ DTPA ‏أو‎ EDTA ‏كلابي مثل‎ © [Hunter W.M. and Greenwood F.C. (1962) chloramine-T ‏تعليمه مع محا بتقنية‎
Crockford et. Al ‏؛ تعليم مع 1080777 حسب الوصف بواسطة‎ Nature 194:495] ‏حسب الوصف بواسطة‎ DTPA ‏أو ارتباط من خلال‎ )447570٠0 ‏(براءة الاختراع الأمريكية‎ .)4 41957٠6 ‏(براءة الاختراع الأمريكية‎ Hnatowich ‏باستخدام مضاد جسم مطابق للاختراع لتحضير عقار لاستهداف‎ Wad ‏يتعلق الاختراع‎ Ye protein JAM-A ‏خاص لمركب نشط حيويا تجاه خلايا تظهر أو تظهر بدرجة زائدة‎
Yq...
$e ‏هو أي‎ "biologically active compound ‏بالنسبة للوصف الحالي فإن "مركب نشط حيريا‎ ‏مركب قادر على ضبط؛ تحديدا؛ تثبيط نشاط خلوي؛ تحديدا نمو؛ انقسام؛ نسخ وترجمة جين.‎ ‏بعامل كاشف تشخيصي في الجسم يتكون من مضاد جسم مطابق‎ Unf ‏يتعلق الاختراع‎ ‏للاختراع؛ أو جزءٍ وظيفي منه؛ يفضل معلم؛ تحديدا معلم إشعاعيا؛ واستخدامه في تصوير‎ protein JAM-A ‏طبي؛ تحديدًا لتحديد سرطان متعلق بإظهار أو إظهار زائد خلوي لأجل‎ © ‏أو نظير‎ toxin [JAM-A ‏يتعلق الاختراع أيضًا بتركيبه كمنتج اتحاد أو باتحاد مضاد‎ ‏مشع؛ طبقا للاختراع؛ مستخدمة كعقار.‎ ‏يفضل» أن تكون التركيبة المذكورة كمنتج اتحاد أو اتحاد مذكور مدعمة بمادة مسوغة و/أو‎ ‏وسط حامل دوائي.‎ ‏مركب؛ أو اتحاد‎ "pharmaceutical vehicle ‏دوائي‎ dala ‏في الوصف الحالي؛ يعني "وسط‎ Ve ‏مركبات» داخل في تركيبة دوائية لا يسبب تفاعلات ثانوية وعلى سبيل المثال؛ يسهل إعطاء‎ ‏المركبات النشطة؛ يزيد مدة صلاحيتها و/أو فعاليتها في الكائن الحي؛ يزيد قابلية ذوبانها في‎ ‏محلول أو يحسن تخزينها. إن تلك المواد الحاملة الدوائية معروفة جيدا وسوف يعدلها الماهر‎ ‏لطبيعة وطريقة إعطاء المركبات النشطة المنتقاة.‎ lida ‏في الفن‎ ‏يفضل؛ أن تعطى تلك المركبات بطريقة عامة؛ تحديدا بإعطاء في الوريد؛ في العضل؛ في‎ vo ‏الجلدء في البريتون؛ تحت الجلد أو معويا. يفضل أكثر؛ أن تعطى التركيبة المتكونة من مضاد‎ ‏الجسم المطايق للاختراع في جرعات عديدة متباعدة بدرجة متساوية مع الوقت.‎ ‏يمكن تحديد طرق إعطائها؛ برامج تجريعها وأشكالها الجالينوسية المثتلى طبقا للمعايير‎ ‏الموضوعة في الاعتبار عند ترسيخ معالجة مناسبة لمريض؛ على سبيل المثال؛‎ dale ‏الهامة‎ ‏العامة؛ تحمله للمعالجة والتأثيرات الجانبية التي‎ alla ‏سن أو وزن جسم المريض»؛ خطورة‎ Yo ‏يشعر بها.‎ ‏لذلك؛ يتعلق الاختراع باستخدام مضاد جسم أو واحد من أجزائه الوظيفية؛ لتحضير عقار‎
JAM-A ‏لاستهداف خاص لمركب نشط حيويا تجاه خلايا تظهر أو تظهر بدرجة زائدة‎ ‏شرح مختصر للرسومات‎ ‏سوف تتضح إضافيا سمات ومميزات أخرى للاختراع في الوصف مع الأمثلة والأشكال‎ Yo ‏المقدمة تفسيراتها أدناه.‎ ‏.ل‎
١ ‏الفأري. إن‎ 6F4 ‏الترتيبات الخاصة للسلاسل الثقيلة والخفيفة لمضاد الجسم‎ ١ ‏يبين الشكل‎ (Kabat ‏تحتها خط ومكتوبة بحروف سوداء بارزة (طبقا لترقيم‎ CDRs ‏و1 (شكل‎ (NY ‏الشكلان ؟(أ) و”(ب) الإصطفافات الخاصة بالمناطق 7 (شكل‎ Jha
IGKV19-93*01 ‏فأري وخطوط الخلية الفأرية المنتقاة؛ تحديدا‎ 6F4 ‏"(لب)) لمضاد جسم‎
J ‏و101611*01 (تعريف الترتيب رقم £0( للمنطقة‎ V ‏للمنطقة‎ (V4 ‏(تعريف الترتيب رقم‎ © ‏(شكل ؟()) و1 (شكل‎ v ‏و؟(ب) الاصطفافات الخاصة للمناطق‎ (HF ‏يمثل الشكلان‎
IGKV1-33#01 ‏*(ب)) لمضاد جسم 674 فأري وخطوط الخلية الآدمية المنتقاة؛ تحديدًا‎
J ‏و101611*01 (تعريف الترتيب رقم 47) للمنطقة‎ V ‏للمنطقة‎ )4١ ‏(تعريف الترتيب رقم‎ ‏للسلسلة الخفيفة من مضاد الجسم 674 بالإشارة إلى أنظمة‎ protein ‏الشكل ؛ ترتيب‎ Jie
IMGT 5 KABAT ‏الترقيم الخاصة‎ ٠
D «((f)o ‏*(ب)؛ *(ج) لإصطفافات الخاصة للمناطق 7 (شكل‎ «fo ‏الأشكال‎ Jas ‏(شكل #(ب) و1 (شكل *(ج)) لمضاد الجسم 684 الفأري وخطوط الخلية الفأرية المنتقاة؛‎ ‏تعريف‎ IgHD-ST4#01 5 7 ‏تحديداء 1011718135*01 (تعريف الترتيب رقم £7( للمنطقة‎
J ‏(تعريف الترتيب رقم £0( للمنطقة‎ TgHI2*01 5 D ‏رقم ££ للمنطقة‎ ail تمثل الأشكال ‎oo)‏ 1 )2( الإصطفافات الخاصة للمناطق ‎V‏ (شكل ‎Ds ))(١‏ (شكل ١(ب))؛‏ و1 (شكل )2( لمضاد الجسم ‎6F4‏ الفأري وخطوط الخلية الآدمية المنتقاة؛ تحديدًا 101171-01 (تعريف الترتيب رقم £7( للمنطقة 7؛ و161101-1*01 (تعريف الترتيب رقم ‎(£V‏ للمنطقة ‎D‏ و161114*01 (تعريف الترتيب رقم ‎($A‏ للمنطقة ‎J‏ يمثل الشكل ‎V‏ ترتيب ‎protein‏ للسلسلة الثقيلة لمضاد الجسم ‎6F4‏ بالإشارة إلى أنظمة ‎٠‏ الترقيم الخاصة ‎KABAT‏ و ‎IMGT‏ ‏يشمل الشكلان ‎(i) 5 (DA‏ التنقية المناعية مع ‎6F4-sepharose‏ لمولد مضاد 614 من أغشية خلية 117-29. إن التحليلات للأجزاء المجمعة بواسطة انتقال كهربي ‎SDS-PAGE‏ ‏(شكل ‎western blots (A‏ (شكل +4(ب)) موجودة ‎Lad‏ ‏يمثل الشكلان 4(أ) و4(ب) تحليل بانتقال كهربي ‎SDS-PAGE‏ (شكل ؟()) 5 ‎western‏ ‎blot Yo‏ (شكل 4(ب)) لأجل ‎protein‏ نقي ‎Lelia‏ تجري تنقيته مرثين (رقم ‎١‏ ورقم؟) ويحلل تحت شروط اختزال وعدم اختزال. ‎Ya.‏
يمتل الشكل ‎٠١‏ تحليل بقياس طيف كتلة ‎MALDI-TOF‏ لخليط ‎peptides‏ المستخلص بعد تحلل مائي انتقالي. يتكون الشكلان ‎(My‏ و١١(ب)‏ من تأكيد ‎protein‏ محدد بواسطة ‎western blot‏ (شروط عدم اختزال): يتضح باستخدام مضاد جسم ‎6F4‏ (شكل ‎))(١١‏ ومضاد جسم عديد النسخ © مضاد ‎JAMAA‏ آدمي (شكل ١١(ب)).‏ يبين الشكل ‎VY‏ خصوصية مضاد الجسم ‎6F4‏ لروتين ‎JAM-A‏ آدمي. إن الكميات المستخدمة لكل ‎protein‏ هي ‎You‏ نانوجرام» ‎Yo‏ نانوجرام و١٠‏ نانوجرام. يمثل الشكل ‎١١‏ رسومات استشعارية ناتجة بعد دقيقتين من حقن (سهم مزدوج) مضاد الجسم ‎6F4‏ عند ‎٠٠١‏ نانوجزيئي جرامي في مثبت ‎(ul‏ هيدروجيني ‎HBS-EP‏ مع ‎protein‏ ‎٠‏ 181417 فأري (خلية تدفق رقم ٠١؛‏ رسم سفلي) وعلى 1817 ‎protein‏ فأري (خلية تدفق رقم ؛ رسم علوي) مع زمن تفكك عند * ؟"مئوية مدته © دقائق ومعدل تدفق ‎Te‏ ميكرولتر/ الدقيقة ‎RU (Fc2) s m-JAMI-Fc 501.6 RU (Fel) :CM4)‏ 511.5(« يمتل الشكل ‎VE‏ رسومات استشعارية ناتجة مع مثال مرجعي مزدوج؛ ‎(Fe2-Fe1)6F4(Fe2-‏ ‎.Fol)HBS-EP‏ تتم مطابقة المنحنى باستخدام نموذج ارتباط ‎Langmuir A+B‏ إن المعايير ‎١‏ الحركية المحسوبة (منحنى أسود) هي كما يلي: ‎kd = (0.25 + 1.58)*10°° 5”; Rmax (global fitting) =‏ با و14 0.001)*10° + 1.38) = ‎ka‏ ‎RU; 0%=0.853.‏ 371 ‎(global fitting)‏ = (مطابقة شاملة) يوضح الشكل ‎Vo‏ النشاط المضاد لورم لمضاد الجسم ‎6F4‏ في نموذج رقعة دخيلة لخلايا ‎٠‏ 1100-7 في ‎ll‏ ناقص المناعة ‎Swiss‏ يختبر مضاد الجسم 674 بطريقة 18 في شكل غير نقي (مادة مائعة من التجويف البريتوني) »؛ عند الجرعة النظرية ‎You‏ ميكروجرام/ فأر مرتين في الأسبوع. إن مضاد الجسم 904 هو مضاد جسم من نفس النوع المماتل بغض النظر (1801)؛ بغض النظر عن النشاط المقاس. يوضح الشكل ‎١١‏ إظهار ‎JAM-A‏ يدركه 674 ‎Mab‏ على سطح خطوط ورم مختلفة. ‎Yo‏ يمثل الشكل ‎٠١7‏ ترتيب مجال السيطرة ‎protein 6F4 VL‏ المكتسب للسمة الآدمية حيث: "تطابق ‎nucleic acids‏ المتغيرة في الواقع مع أجزاء مقابلة آدمية؛ ‎١‏ يطابق ‎amino acids‏ دول
محللة من أجل قدراتها على اكتساب السمة الآدمية؛ يشار إلى المتخلف الآدمي أسفل العلامة؛ و ؟ يطابق ‎amino acids‏ التي تظل فأرية في مجال اليسطرة ‎6F4 VL‏ المكتسب السمة الآدمية. ‎Jia‏ الشكل ‎VA‏ ترتيب مجال السيطرة ‎VH‏ 684 المكتسب للسمة الآدمية حيث: "تطابق ‎amino acids‏ المتغيرة في الواقع مع أجزاء مقابلة آدمية ‎١‏ يطابق ‎amino acids‏ محللة من أجل © قدراتها على اكتساب السمة الآدمية؛ يشار إلى المتخلف الآدمي أسفل ‎Aa)‏ و7 يطابق ‎amino acids‏ التي تظل فأرية في مجال اليسطرة ‎6F4 VH‏ المكتسب السمة الآدمية. يوضح الشكل ‎V4‏ انخفاض مستوى تنظيم ‎JAM-A‏ في المعمل الذي يحثه ‎MAD‏ 614. يوضح الشكل ‎٠١‏ التثبيط في الجسم لانقسام خلية ورم بحثه ‎MAD‏ 614. يمثل الشكل ‎YY‏ خفض مستوى التنظيم في الجسم لأجل ‎protein JAM-A‏ بواسطة ‎6F4‏ ‎MAb ٠‏ يمثل الشكل ‎YY‏ منحنيات مقارنة 674 وجزئه ‎F(ab®),‏ على نموذج ‎MCF-7‏ في الجسم. يوضح الشكل ‎YY‏ مقارنة الإظهار العادي مقابل الورمي لأجل ‎protein JAM-A‏ على أنسجة درقية. يوضح الشكل 4 ؟ مقارنة الإظهار الطبيعي مقابل الورمي لأجل ‎protein JAM-A‏ على ‎٠‏ أنسجة رئة. يوضح الشكل ‎Yo‏ مقارنة الإظهار الطبيعي مقابل الورمي لأجل ‎protein JAM-A‏ على أنسجة ثدي. يمثل الشكل ‎YT‏ منحنيات توضح النشاط في الجسم من أجل 634 على رقعة دخيلة لسرطان شبيه بشراني ‎A431‏ في فثران ناقصة المناعة. أ يوضح الشكل ‎YY‏ تأثير مضاد الجسم 684 على (أ) الانقسام غير الخاص الذي يحثه ‎PHA‏ و(ب) عملية تمثيل مولد مضاد. تجربة أولى 7 من المانحين المستقلين. يوضح الشكل ‎YA‏ تأثير مضاد الجسم 684 على (أ) الانقسام غير الخاص الذي يحثه ‎PHA‏ و(ب) عملية تمثيل مولد مضاد. تجربة ثانية ؟ من المانحين المستقلين. يوضح الشكل ‎YA‏ تجمع الصفائح الدموية على ‎٠١‏ مانحين عاديين آدميين. ‎Jia Yo‏ الشكل ‎Yo‏ إطلاق ‎serotonine‏ على ‎٠١‏ مانحين عاديين آدميين. إن النتائج متوقعة كمتوسط حسابي + حيود قياسي. مال it
IGHV1-03*01 ‏وجين خط جرثومة‎ 674 VH ‏اصطفاف مجال سيطرة‎ 7١ ‏يمثل الشكل‎ .) 49 ‏(تعريف الترتيب رقم‎ ‏الأمثلة:‎ ‎6F4 ‏توليد مضاد الجسم‎ ١ ‏مثال:‎ © ‏باستخدام خلايا‎ BALB/C ‏تحصن فئران‎ (Mab) ‏لتوليد مضاد الجسم أحادي النسخ الفأري‎ ‏تتحد‎ MCF-7 ‏خلية‎ ” ٠١ ‏بعد حقن تعزيزي نهائي بمقدار‎ AATCC ‏من‎ ١ ٠١# 107 ‏باستخدام التقنيات‎ Sp2/0-Agld ‏مع خلايا ورم نخاعي‎ hill ‏خلايا من عقد ليمفاوية‎ ‏يتم عندئذ فحص المواد الطافية للأورام الهجينة‎ Milstein y Kohler ‏الموصوفة تقليديً من‎ ‏في الجسم.‎ MCF-7 ‏الناشئة من الاندماج من أجل النشاط الوظيفي؛ تحديدا تثبيط انقسام خلايا‎ Ye "٠١*58 ‏لهذا الفحص؛ تزرع خلايا 8407-7 في أطباق مزرعة بها 97 عين عند‎
Baad ‏ميكرولتر وسط ورم هجين بدون مصل جنين بقري. تحضن الأطباق‎ ٠٠١ ‏خلية/عين في‎ ‏ميكرولتر من‎ ٠٠ ‏ساعة؛ يضاف‎ YE ‏؛؟ ساعة عند 7١؟"*مئوية تحت جو ر0© 75. بعد‎ ‏المادة الطافية للأورام الهجينة المراد فحصها إلى كل عين. يتم الاحتفاظ بالخط الأخير للطبق‎ ‏من أجل المقارنات:‎ ٠ ‏ميكرولتر من مادة طافية لورم هجين غير هامة بالنسبة للنشاط‎ ٠٠ ‏عيون مع‎ Tope i - ‏المفترض وتتم زراعتها في نفس وسط المزرعة مثل ذلك المستخدم للخلايا المندمجة. سوف‎ tritiated ‏تستخدم هذه العيون لمعايرة تأثير المادة الطائفية خامدة النتشاط على دمج‎ ‘thymidine ‏ميكرولتر من وسط مزرعة ورم هجين.‎ ٠٠ ‏يضاف إلى ؟ عيون‎ - 9. 83 ‏وتحضن‎ "H]thymidine ‏زراعة تقريبا تدعم كل عينة مع 0786 ميكروكيورس‎ OY ‏بعد‎ ‏والذي يدل‎ «DNA ‏في‎ [H]thymidine ‏ساعة عند 7١؟"مئوية. يقدر كميا اندماج‎ 7١ sad ‏ثانية‎ ‏على انقسام الخلية؛ بقياس وميض السائل. يتحدد التشوش الأساسي والقيم الحرجة لكل طبق‎ ‏كوظيفة للعيون المقارنة التي تحتوي على الوسط فقط والمادة الطافية للورم الهجين غير الهامة.‎ ‏بعد‎ MCF-7 ‏بهذه الطريقة؛ ينتقي ؛؟ ورم هجين يفرز مضادات أجسام تثبط نمو خلايا‎ Yo © ‏من £7 ورم هجين نمو ضعيف أو غير موجود ويتم التغلص‎ ١١ ‏الفحص الأول. يكون لعدد‎ ‏منها. أثناء اختبارات الانقسام التي تتم عقب زيادة حجم ونسخ الأورام الهجينة؛ تنتقي فقط‎ ‏مل‎
$0 الأورام الهجينة التي يكون فيها للمادة الطافية نشاط تثبيطي ‎7Y ex‏ على انقسام خلايا ‎MCF-‏ ‏7. عند نهاية عملية النسخ/ ‎co iY‏ ثبت فقط وجود نسخة واحدة لها الخواص المطلوبة؛ النسخ 6]4. مثال ؟: عملية إكساب السمة الآدمية بتطعيم ‎CDR‏ للمنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة من ‎٠‏ مضاد الجسم ‎(6F4 VL) 6F4‏ (أ) مقارنة ترتيب ‎6F4 VL nucleotide‏ مع كل ترتيبات خط الخلية الفأرية المعروفة كخطوة تمهيدية في إكساب السمة الآدمية بتطعيم ‎«CDR‏ يقارن أوليا ترتيب ‎nucleotide‏ ‎6F4 VL‏ مع كل ترتيبات خط الخلية الفأرية الموجودة في بنك بيانات ‎IMGT‏ ‎-http://imgt.cines.fr) (internet address:‏ ‎Ve‏ تتحدد مناطق 7 و1[ لخطوط خلية فأرية لها تماثل ترتيب 798.57 للمنطقة ‎V‏ و٠٠٠7‏ للمنطقة ‎of‏ على الترتيب ‎IGKV19-93*01‏ (تعريف الترتيب رقم ؟؛ تسمية ‎EMBL‏ ‎£(AT235935‏ و1616-1*01 (تعريف الترتيب رقم + ‎cf‏ تسمية ‎:EMBL‏ 1100777). اعتبارًا بهذه النسبة المثئوية للتماتل؛ فقد تقرر استخدام ترتيب ‎6F4 VL‏ مباشرة. ا إن هذه الاصطفافات موجودة في الشكل ‎(HY‏ للمنطقة ‎١7‏ وفي ‎(Q)Y Jal‏ للمنطقة ‎J‏ ‎٠‏ (ب) مقارنة ‎6F4 VL nucleotide cai‏ مع كل ترتيبات خط الخلية الآدمية المعروفة لتحديد أفضل مرشح آدمي لتطعيم ‎(CDR‏ يستخدم خط الجرثومة من المصدر الآدمي الذي له أكبر تماثل ممكن مع ‎.6F4 VL‏ لهذا الغرض» يقارن ترتيب ‎VL nucleotide‏ 674 فأر مع كل ترتيبات خط الخلية الآدمية الموجودة في قاعدة بيانات ‎IMGT‏ ‏تتحدد المناطق ‎V‏ و1 لخطوط خلية من مصدر آدمي مع ‎(Bla‏ ترتيب 781.77 للمنطقة ‎٠‏ 7 تحديدا ‎IGKV1-33*01)‏ تعريف الترتيب رقم ١4؛‏ تسمية ‎(M64856 :EMBL‏ و781.84 للمنطقة ‎J‏ تحديدًا 1016[1*01 (تعريف الترتيب رقم 147؛ تسمية ‎EMBL‏ ‎-(J00242‏ ‏تنتقي لذلك خطوط خلية ‎IGKV1-33%01‏ للمنطقة ‎IGKT1*01 5 ١7‏ للمنطقة 1 كترتيبات مستقبل آدمي من أجل ‎VL CDRs‏ 684 فأرية. ‎Yo‏ إن هذه الاصطفافات موجودة في الشكل ‎(IY‏ للمنطقة ‎V‏ وفي الشكل ‎(GQ)‏ للمنطقة ‎J‏ ‏)2( طرازات ‎6F4 VL‏ مكتبسة السمة الآدمية ماو
ا تتكون الخطوات التالية في عملية إكساب السمة الآدمية من توصيل ترتيبات خط خلية 10161771-1 و101611*01 ومعا ثم توصيل ‎VL CDRs‏ 624 الفأرية مع مناطق الدعامة لنفس خطوط الجرثومة هذه. في هذه المرحلة للعملية سوف يكون النموذج الجزيئي لمناطق ‎VL‏ 604 الفأرية مفيدا بصفة ‎٠‏ خاصة في اختيارات المتخلفات الفأرية التي تتم حمايتها لأنها قد تلعب دورا سواء في استبقاء البناء ثلاثي الأبعاد للجزيء (بناء ‎CDRs‏ مقبول؛ أسطح بينية .711/71؛ إلخ) أو في ربط مولد المضاد. في مناطق الدعامة؛ سيتم بحرص بالغ اختبار كل فرق بين ‎nucleotides‏ فأرية ‎(6F4‏ ‎VL)‏ وآدمية ‎{(IGKV1-33*01/IGKJ1*01)‏ ‏من أجل وضوح أكثر فيما يلي؛ يمثل الشكل في ترتيب ‎6F4 VL‏ بالإشارة إلى تصنيفات -\ ال لقد تحددت 7 متخلفات فأرية لابد من حمايتها. يشارك المتخلف ‎(Tle) YY‏ في تثبيت 00181 بصورةٍ تطابق ‎IMGT‏ وهو جزءٍ من 0011 طبقا لقاعدة ‎Kabat‏ ْ يشارك المتخلف $4 ‎(His)‏ تثبيت ‎CDR2‏ طبقا لقاعدة ‎IMGT‏ ؛ يشارك في السطح ‎Ve‏ البيني ‎VH/VL‏ وينتمي إلى نطاق ‎Vernier‏ ‏يشارك المختلف ‎(Thr) oF‏ في تثبيت ‎laa CDR2‏ لقاعدة ‎IMGT‏ وهو جزء من ‎CDR2‏ ‏طبقا لقاعدة ‎Kabat‏ ‏أولياء ستتم دراسة ثلاثة تغيرات في مناطق دعامة ‎IGKV1-33*01‏ و1616[1*01. تتعلق هذه التغيرات بالمتخلفات ؛7؛ 14 و71 (تسمية ‎(IMGT‏ لابد من إدراك؛ بالطبع؛ أن هذه ‎٠‏ التغيرات الثلاثة ستتم دراستها على حدة وأيضنًا في اتحادات مختلفة. إن الهدف هو توفير كل الطفرات الممكنة لاختبارها ولانتقاء المادة الطفرية التي تستبقي أفضل خواصل ارتباط. سوف تجري لذلك اختبارات ‎ELISA/Biacore‏ لكل مادة طفرية. إن المتخلف ؛ ؟ ‎(Lys/Gln)‏ قريب من 0011 وقد يكون لذلك حرجا لاستبقاء الشكل الذي يمكن من تمثيل 001 أمثل. بتحديد أكثر؛ من المحتمل أن يتفاعل هذا المتخلف مع ‎ve‏ المتخلفات ‎١0-14‏ في نطاق ‎Vernier‏ إن ‎Lys‏ موجود بدرجة بسيطة فقط في ‎VLs‏ آدمية 438 موجود جزبيا في ‎CDR1‏ طبقا لقاعدة ‎‘Kabat‏ ‎Ya.‏
Ly ‏ولذلك يشارك مباشرة في‎ Vernier ‏موجود في نطاق‎ (Arg/Thr) 15 ‏برغم أن المتخلف‎ ‏الأدمية.‎ VL ‏في‎ Thr ‏فإن هذا المختلف يكون دائما‎ «CDR ‏البناء المقبول لمنطقة‎ ‏يشارك مباشرة في بناء 00181 المقبول؛ فإنه يكون‎ (Tyr/Phe) 7١ ‏برغم أن المتخلف‎ ‏الأدمية.‎ VL ‏في‎ Phe ‏بصفة عامة‎ ‏له أهمية. إن هذا المتخلف؛‎ Thr ‏إلى‎ (Ala) © ‏ثانياء يمكن أن يكون تعديل المتخلف‎ °
Kabat ‏طبقا لقاعدة‎ CDR2 ‏ينتمي إلى‎ 436 (IMGT ‏طبقا لقاعدة‎ CDRs ‏برغم أنه خارج‎ (IMGT ‏ثالثا وأخيراء يمكن إجراء تعديلين إضافيين عند المتخلفات ؛؟ 4 00 (تسمية‎ ‏المحددة‎ CDRs ‏متضمنتين في‎ (IMGT ‏المحددة بواسطة‎ CDRs ‏هناك ¥ من المتخلفات؛ خارج‎
Kabat ‏بواسطة‎ ‏ويشارك في السطح‎ Kabat ‏لقاعدة‎ Ligh 0081 ‏إلى‎ (Ala/Asn) ‏ينتمي المتخلف 4 ؟‎ ٠ ‏في‎ Ala ‏تظل تلك الطفرة هامة على الرغم من التمثيل القوي من أجل‎ VH/VL ‏البيني‎ ‏الإنسان.‎ ‏ويشارك أيضًا في‎ Kabat ‏طبقا لقاعدة‎ CDR2 ‏هو جزءء من‎ (Gl/Glu) 00 ‏إن المتخلف‎ ‏على الرغم من التمثيل القوي من أجل‎ Ua ‏السطح البيني 71. تظل تلك الطفرة هامة‎ ‏في الإنسان.‎ 6[« ٠
BES ‏حسب الوصف أعلاه؛ يمكن اختبار هذه الطفرات الثلاثة على حدة أو في اتحادات‎ ‏مثال©: عملية إكساب السمة الآدمية بتطعيم 001 للمنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة لمضاد‎ (6F4 VH) 6F4 ‏الجسم‎ ‏ترتيبات خط الخلية الفأرية المعروفة‎ JS ‏مع‎ 6F4 VH nucleotide ‏(أ) مقارنة ترتيب‎ ‏يقارن أوليا ترتيب‎ «CDR ‏كخطوة تحضيرية في إكساب السمة الآدمية بتطعيم‎ 7 ‏الموجودة في بنك‎ All ‏مع كل ترتيبات خط الخلية‎ 684 714 nucleotide -http://imgt.cines.fr) (internet address: IMGT ‏بيانات‎ ‎١7 ‏للمنطقة‎ 799.7 gp ‏خطوط خلية فأرية لها تماثل‎ jy D ov ‏إن المناطق‎ ‏للمنطقة‎ 7200 ((AF304556 :21131,. ‏تعريف الترتيب رقم '؛؛ تسمية‎ (IGHVIS135%01) ‏للمنطقة‎ 7٠٠٠و‎ (M23243 EMBL ‏18110-4*1؛ تعريف الترتيب رقم ؛؟؛ تسمية‎ yD ve -(V00770 :EMBL ‏تعريف الترتيب رقم £20 تسمية‎ ¢1gHI2*01) J
Yq.
ب إن هذه الاصطفافات موجودة في الشكل #ل() للمنطقة ‎ov‏ والشكل *(ب) للمنطقة ‎D‏ ‏والشكل *(ج) للمنطقة [. ‎beg‏ لهذه النسب المئوية للتماثل؛ فقد تقرر استخدام ترتيب ‎VH‏ 614 مباشرة» كما هوالحال مع ‎-6F4 VL‏ ‎٠‏ (ب) مقارنة ترتيب ‎6F4 VH nucleotide‏ مع كل ترتيبات خط الخلية الآدمية المعروفة من أجل تحديد أفضل مرشح آدمي لتطعيم ‎«CDR‏ يوضع في الاعتبار خط جرثومة المصدر الآدمي الذي له أكبر تماثل ممكن مع كل من المناطق الثلاثة ‎DV‏ و1 من 654 3. لهذا الغرض» يقارن تريب ‎nucleotide‏ 1711 684 الفأري مع كل ترتيبات خط الخلية الآدمية الموجودة في قاعدة بيانات ‎IMGT‏ ‎Ve‏ لقد تحددت خطوط جرثومة مصدر أدمي لها تماشل ترتثيب 775.94 ‎Vashi‏ ‏) 01*-101171؛ تعريف الترتيب رقم 47؛ تسمية ‎¢(Z12305 (EMBL‏ 7971.57 للمنطقة ‎D‏ ‏(1061101-1*01؛ تعريف الترتيب رقم ‎$£Y‏ تسمية ‎AV.0Y 5 (X97051 :EMBL‏ للمنطقة ‎J‏ ‏(161114*01؛ تعريف الترتيب رقم 18؛ تسمية ‎:EMBL‏ 100256). بالنسبة لكل من المناطق 77؛ 7 5 ‎J‏ تنتقي الخطوط الجرثومية أعلاه ويعاد ترتيبها فيما ‎Ve‏ بينها. إن هذه الاصطفافات ممثلة في الشكل ١(أ)‏ للمنطقة ‎ov‏ الشكل 7(ب) للمنطقة ‎D‏ والشكل 1(ج) للمنطقة ‎J‏ ‏)2( طرازات ‎6F4 VH‏ مكتسبة السمة الأدمية تتكون الخطوة التالية في عملية إكساب السمة الآدمية من توصيل ترتيبات خط خلية ‎IGHI4*01 5 10101-1*01 JIGHVI-f*01 ٠‏ مع بعضها وعندئذ توصيل ‎VH CDRs‏ 614 فأرية مع مناطق الدعامة لنفس خطوط الجرثومة هذه. في هذه المرحلة للعملية سوف يكون النموذج الجزيئي لمناطق ‎FV‏ 64 الفأرية مفيدا بصفة خاصة في اختيار المتخلفات الفأرية التي تتم حمايتها نظرًا لأنها قد تلعب دورا سواء في استبقاء البناء ثلاثي الأبعاد للجزئ (بنا ء متعارف عليه ‎(CDRs‏ أسطح بينية ‎VHVL‏ إلخ) أو في ربط ‎Yo‏ مولد المضاد. في مناطق الدعامة؛ سيتم بحرص بالغ اختبار كل فرق بين ‎nucleotides‏ فأرية ‎(6F4 VH)‏ وآدمية 1061171-01 ‎IGHD1-1*01‏ و101114*01.
£9 من أجل وضوح أكثر فيما يلي؛ يمتل الشكل ‎V‏ ترتيب ‎6F4 VH‏ مع إشارة إلى تصنيفات ‎IMGT 5 KABAT‏ كما هو الحال مع السلسلة الخفيفة؛ تم تحديد ؛ متخلفات يجب أن تظل غير متغيرة. المتخلف ‎(Ile)Y‏ هو ‎ea‏ من نطاق ‎Vernier‏ ويشارك في بناء ‎-CDR3‏ ‏° المتخلف ‎(Tyr) Vo‏ يشارك في تثبيت 6011 طبقا لقاعدة ‎IMGT‏ وهو جزءِ من ‎CDR1‏ ‏طبقا لقاعدة ‎(Kabat‏ ويشارك أيضنًا في السطح البيني ,711/71 ويتفاعل مع ‎.CDR3‏ ‏المتخلف ‎(Tyr) © ٠‏ يشارك في تثبيت ‎CDR2‏ طبقا لقاعدة ‎IMGT‏ وهو جزء من ‎CDR2‏ ‏طبقا لقاعدة ‎Kabat‏ وهو ‎Und‏ جزء من نطاق ‎Vernier‏ ويشارك أيضًا في السطح البيني 1/7 ‎Ve‏ يشارك المتخلف © ‎(Arg)‏ في تثبيت 0082 طبقا لقاعدة ‎(IMGT‏ وهو جزء من ‎CDR2‏ ٍ طبقا لقاعدة ‎Kabat‏ ويشارك في السطح البيني ‎LVH/VL‏ ‏سيكون طراز أول مكتسب للسمة الآدمية قادرا على أن يتضمن ؟ طفرات عند المتخلفات 1 17 و15؛ على الترتيب (تصنيف ‎(IMGT‏ ‏تقع هذه الطفرات الثلاشة في ‎Lida CDR2‏ لقاعدة ‎Kabat‏ وتشارك في السطح البيني ‎VH/VL ٠‏ المتخلف ‎1١‏ (واخ/دوه) غير داخل مباشرة في إدراك مولد مضاد. لذلك يمكن الاهتمام بطفرته. المتخلف 17 ‎(Gln/Glu)‏ والمتخلف 10 ‎.(Lys/Gln)‏ ‎ald‏ سيتم تقييم ‎Y‏ من التغييرات الإضافية. يرتبط التغيران بالمتخلفات ‎EA‏ و74 (تسمية ‎(IMGT ٠‏ المتخلف ‎o(lle/Met) A‏ ينتمي إلى منطقة الدعامة؛ يشارك في السطح البيني ‎VHVL‏ ‏المتخلف ‎(Lys/Thr) VE‏ هو جزء من نطاق ‎Vernier‏ وقد يكون داخلا في بناء ‎CDR2‏ ‎cal, (El‏ هناك ‎ALLL‏ ثالثة من الطفرات يمكن الاهتمام ‎ley‏ تحديدًا تغير في المتخلفات ‎(Pro/Ala) 4‏ و١؛‏ (9/0:0نل. إن الهدف هوء بطريقة مشابهة للطفرات المخططة من أجل ‎VL Yo‏ 684؛ التقارب من خط الجرثومة الآدمي بدرجة قريبة بقدر الإمكان بدون تعديل تثبيت ‎.CDR‏ ‎Ya.‏
بغرض التلخيص فقط؛ يقدم الجدولان ؛ 5 0 أدناه قائمة بخطوط الخلية المستخدمة بالإضافة إلى؛ على ‎canal‏ أرقام ‎amino acid‏ وترتيب ‎nucleotide‏ لها. ‎dye‏ ‎TT ea‏ ‎TT wean‏
6F4 ‏مضاد لمضاد جسم‎ alge ‏مثال4: تنقية وتحديد هدف‎ ‏التنقية بالانجذاب المناعي:‎ .111-29 ‏المضاد لمضاد الجسم 674 هو التنقية من قسم غشاء غني بخلايا‎ alge ‏إن هدف‎ ‏هيدروجيني 1101/15 أس هيدروجيني‎ of ‏مللي جزيئي جرامي مثبت‎ ٠٠ ‏بعد الإذابة في‎ ‏تحضن‎ AGEPAL 5 Triton X-100 NaCl aba ia ‏مللي‎ ١٠5١ ‏يحتوي على‎ 7.4 © ‏طوال الليل عند‎ sepharose ‏الغشاء في وجود مضاد الجسم 4 ساكن على حبات‎ proteins ‏المتكون على الحبات مع محاليل‎ 6F4-Ag ‏؛“مئوية تحت خلط هادئ. يغسل عندئذ معقد‎ ‏الممتزة بصفة غير خاصة. يتفصل هدف‎ proteins ‏عديدة تحتوي على منظفات من أجل إزالة‎ ٠.١١ 61/1101 ‏باستخدام مثبت أس هيدروجيني‎ 6F4-sepharose ‏من دعامة‎ 6F4 ‏مضاد‎ Alga
SDS-PAGE ‏جزيئي جرامي؛ أس هيدروجيني 7.7. تحلل الأقسام المجمعة بانتقال كهربي‎ ٠ nitrocellulose ‏بعد الانتقال إلى غشاء‎ western blots ‏شروط عدم اختزال)‎ ٠ ‏(هلام‎ ‏ميكروجرام/ ملليلترء مع تحديد بواسطة إضاءة‎ ١.5 ‏أولي مستخدم عند‎ 6F4 ‏(مضاد جسم‎ ‏يؤكد التحليل‎ (QA (NA ‏كيميائية) لانتقاء الأقسام الغنية بمولد المضاد الهام (الشكلان‎ ‏الهام في الأقسام ومواد الغسيل غير المنتقاة» وفصل‎ protein ‏عدم وجود‎ western blot ‏بواسطة‎ ‏خاص للأخيرة عند أس هيدروجيني حمض.‎ ١٠ ‏(هلام‎ SDS-PAGE ‏تحلل عندئذ الأقسام الغنية الناتجة من مرتين للتنقية بانتقال كهربي‎ ‏تحت الشروط الموصوفة مسبقا. إن مولد المضاد الذي يدركه مضاد‎ western blots (71 + ‏كيلودالتون بعد التحليل في شروط‎ Yo ‏له وزن جزيثي ظاهر‎ western blot ‏الجسم 614 في‎ shal ‏اختزال (الشكلان 4 (ب)). يمكن ملاحظة فرق في الوزن الجزيئي الظاهر عند‎ ‏الانتقال الكهربي في شروط عدم اختزال: تحت هذه الشروط؛ يكون الوزن الجزيئي الظاهر في‎ YS ‏الحقيقة أقل بدرجة بسيطة من ذلك الملحوظ في شروط الاختزال.‎ ‏تحديد هدف مولد المضاد:‎ ‏بلون أزرق غروي‎ proteins ‏(هلام © )1( تصبغ‎ SDS-PAGE ‏بعد انتقال كهربي‎ ‏تزال بالقطع الحزمة الهامة‎ .)٠١ ‏باستخدام طريقة موائمة لتحليل قياس طيف الكتلة (شكل‎ ‏باستخدام مشرط وعندئذ تزال الصبغة منها‎ western blot ‏بواسطة‎ protein ‏المطابقة إلى‎ ve ov ‏مللي جزيئي جرامي. بعد اختزال‎ Yo ammonium bicarbonate ‏'بالحضانة في محلول‎ ‏(طوال الليل عند‎ "(in gel) ‏وتحلل مائي "في هلام‎ (fodoacetamide) ‏الكيلية‎ /]0177( ‏يحلل‎ protein ‏وهو إنزيم محلل لأجل‎ «(Promega) trypsin ‏بواسطة‎ protein ‏"مثوية) لأجل‎ ١ ‏بها متخلف‎ peptides ‏وبالتالي يطلق‎ Arginine 5 Lysine ‏عند متخلفات‎ Lila proteins by an ‏المتولدة‎ peptides ‏في المكان الطرفي-؛ تستخلص‎ Arginine ‏أو‎ Lysine © ‏توضع هذه عندئذ على‎ formic acid ‏حجم/حجم) في وجود‎ 70/٠ ( ‏اماء‎ acetonitrile
Bruker <alpha-cyano-4-hydroxycinnamic acid) ‏في خليط مع مادة بينية‎ MALDI ‏هدف‎ ‎(Autoflex, MALDI-TOF ‏وتحلل عندئذ بقياس طيف كتلة‎ (ATFA ‏وفي وجود‎ (Daltonics peptides ‏تستخدم قائمة‎ .٠١ ‏إن طيف الكتلة الناتج موجود في الشكل‎ Bruker Daltonics) ‏بالبحث في بنوك البيانات باستخدام محرك بحث‎ protein ‏الناتجة من هذا التحليل لتحديد‎ ٠ (Matrix Sciences) Mascot ‏الخاصة مع 5 من مصدر آدمي؛ إلى‎ (NCBInr ‏تشير نتائج بحث بنك بيانات‎ : :)14> ‏لها تقدير درجي مفيد (درجة‎ proteins ١ ‏وجود‎ ‎٠ ‏بناء بلوري لجزيء التصاق اتصالي آدمي نوع‎ LY ١١١ - ‏الدرجة‎ ٠ ‏المستخدم‎ FIIR/JAM-A protein ‏مجال السيطرة خارج الخلايا لأجل‎ protein ‏يطابق هذا‎ ‏للدراسات البنائية.‎ (Homo sapiens) F11 ‏مستقبل‎ ." ١١6 < ‏درجة‎ ‎(1) ‏شكل مماثل‎ fprotein 11118 ‏المصدر الأولي لأجل‎ protein ‏يطابق هذا‎ Ye (Homo sapiens) F11 ‏؟. شكل مماثل (ب) لمستقبل‎ - ‏درجة‎ ‏إن هذا هو المصدر الأولي للشكل المماثل (ب) لأجل 11118 016:0 مع إزالتين لعدد‎ : 9 ‏مقارنة بالشكل المماتل (أ).‎ amino acid Yo
FIT ‏أو مستقبل‎ FTIR ‏المحدد؛ بهذه الطريقة؛ يسمى لذلك‎ protein ‏إن‎ ‏اس‎ oy ‏المحدد عندما كان يوصف ألا‎ protein ‏إن هذا في الواقع هو الرمز الرسمي لأجل‎ ‏إن‎ (Naik ef al., 1995, Biochem.
J., 310, 155-162( 111 ‏كمستقبل لما يسمى مضاد جسم‎ ‏معروف اليوم بصورة أفضل تحت المسمى 1814-8 أو "جزيء التصاق اتصالي‎ protein ‏هذا‎ ‎٠٠6 ‏مضاد‎ alse ‏أو‎ 00321 PAM-1 JAMI ‏(أ) ويسمى أيضًا‎
° من بين ‎peptides‏ المنطلقة بتحلل ماني ‎tryptic‏ والمحللة بقياس طيف الكتلة؛ هناك 1 0065م لها وزن جزيئي تجريبي مطابق؛ مع ‎١‏ دالتون»؛ لذلك تكون ‎peptides‏ الناشئة من التحلل المائي النظري للشكل الآدمي ‎[JAM-A‏ شكل مماثل (أ). تشمل هذه ‎Axl peptides‏ ‎ITY‏ من الترثيب الأولي لأجل ‎proteins‏ علاوة على ذلك؛ فإن الوزن الجزيثي ‎eB‏ ‏لمصدر أولي ‎JAM-A‏ (حوالي 4 كيلودالتون) ‎Gildas‏ للوزن الجزيئي الظاهر المحدد
.SDS-PAGE ‏تجريبيا بواسطة‎ ٠ western blot ‏تأكيد الهدف المحدد بواسطة‎
يتم عندئذ تأكيد تحديد ‎JAM-A‏ بطريقة تحلل ‎protein‏ بواسطة ‎western blot‏ (هلام ‎1٠١ SDS-PAGE‏ في شروط عدم اختزال؛ مضاد جسم 654 عند © ميكروجرام/ ملليلتر؛ الاكتشاف بواسطة التألق الكيميائي).
‎Yo‏ كما هو مبين في الشكل ‎٠» (NY‏ فإن مضاد الجسم ‎6F4‏ يدرك ‎protein JAM-A‏ طبيعي في خلاصة غشاء 117-29 وفي القسم الغني بالتنقية المناعية (وزن جزيئي ظاهر - 5" كيلو دالتون)؛ بالإضافة على ‎dimeric protein‏ المخلق ‎R&D Systems ref. 1103-) JAM-A/Fc‏ 41 وزن جزيئي ظاهر حوالي ‎١7١‏ كيلودالتون). إن هذا الإدراك مكافئ لذلك لمضاد الجسم
‏عديد النسخ من الماعز المضاد ‎JAM-A‏ آدمي التجاري ‎(R&D Systems, ref.
AF1103)‏ © مخفف إلى ‎٠٠٠١/١‏ (شكل ‎(DN‏ ‏مثال 10 خصوصية مضاد الجسم ‎6F4‏ لأجل ‎protein JAM-A‏ أدمي تتحدد الخصوصية لمضاد الجسم 4 بواسطة ‎western blot‏ تحت الشروط الموصوفة أعلاه. يبين شكل ‎١١‏ أن مضاد الجسم ‎6F4‏ خاص بالشكل الأدمي ‎protein JAM-A A‏ لأنه ‎Yo‏ يدرك ‎protein‏ المخلق ‎(R&D Systems ref. 1103-JM) hJAM-A/Fc‏ لكنه لا يدرك الأشكال ‎dV!‏ من ‎proteins) JAM-C 3 JAM-B‏ مخلتة ‎R&D hJAM-C/Fc y hJAM-B/Fc‏ et protein) JAM-A ‏ولا الشكل الفأري من‎ » (Systems ref. 1074-V] and 11893 -(R&D Systems ref. 1077-JMmJAM-A/Fc ‏مخلق‎ ‏(رنين بلازمون سطح)‎ BlAcore ‏بواسطة‎ 6F4 ‏مثال 1: قياس انجذاب مضاد الجسم‎ 6174 ‏(جزيئي جرامي) لمضاد الجسم‎ Kp ‏يمكن حساب ثابت الانجذاب‎ <BlAcore ‏باستخدام‎ ‏من‎ Fe eda ‏القابل للذويان (مجال سيطرة خارج الخلايا مندمج مع‎ JAM-1-Fe protein ‏لل‎ © .رتم/١(‎ (Ka) ‏من تحديد حركيات التلازم‎ (NSO ‏مضاد الجسم وناتج في شكل مخلق في خلايا‎ (Rich and Myszka, J. Mol. ‏طبقا للصيغةيىا/رواحم1‎ (08/1) (kg) ‏ثانية) وحركيات التفكك‎ .Recog., 2005, 18, 431) ‏المواد والطرق:‎
BlAevaluation 3.1 X software (Uppsala, SW) s BlAcore X ‏الأداة المستخدمة:‎ ٠ ‏العوامل الكاشفة:‎ ‏مجم/ملليلتر.‎ ٠١7 ‏مضاد جسم 624 أحادي النسخ فأري:‎ - ‏ميكروجرام خالي من المادة‎ ٠٠ :)1103-13/4 R&D Systems ‏آدمي (مرجع‎ JAM-1-FC - ‏الحاملة.‎ ‏ميكروجرام خالي من‎ 5٠ :)1077-[4 R&D Systems ‏ع181/4-1 فأري (مرجع‎ - ‏المادة الحاملة.‎ (BlAcore) HBS-EP ‏مثبت أس هيدروجيني للتشغيل:‎ - (BIAcore) "Amine" ‏مجموعة الربط:‎ - (BlAcore) © ‏بأس هيدروجيني‎ Acetate ‏مثبت أس هيدروجيني الربط:‎ - ‏ماعز مضاد آدمي)‎ «GAH =) ‏آدمي‎ alias ‏من ماعز‎ IgG Fe ‏مضاد الجسم الماسك:‎ - 9 (Bioscience) ‏ثانية‎ 5٠ ‏لمدة‎ ٠.6 ‏أس هيدروجيني‎ 1101. «Glycine ‏مثبت أس هيدروجيني التجديد:‎ - -(BIlAcore) ‏الشرح والاستنتاجات:‎ ‏أن مضاد الجسم 684 الفأري مرتّبط مع الجزء خارج الخلايا‎ ١3 ‏تبين البيانات في الشكل‎ Yo ‏الفأري.‎ protein JAM-1 ‏الأدمي لكن ليس من الجزء خارج الخاايا لل‎ protein JAM-1 ‏من‎ so ‏لمضاد الجسم‎ pM YY ‏بمقدار‎ Kp ‏إن البيانات في الشكل ؛١ تجعل من الممكن حساب‎ ‏الأآدمي تحث هذه الشروط التجريبية.‎ protein JAM-1 ‏لل‎ 4 ‏تشير حركيات التفكك البطيئة إلى وجود ظاهرةٍ قوة انجذاب مضاد الجسم لمولد مضاد‎ ‏(نموذج تحليلي ثنائي التكافو).‎
MCF-7 ‏دخيلة‎ dad) ‏مثال »: النشاط في الجسم 684 في نموذج‎ ©
You ‏غير نقي ومحقون في البريتون عند جرعة‎ 6F4 ‏يظهر اختبار لمضاد الجسم‎ ‏ميكروجرام/ فأر؛ أن مضاد الجسم هذا يثبط بدرجة ملحوظة نمو خلايا 1401-7 في الجسم مع‎ ‏إن مضاد‎ .)١٠9 ‏(شكل‎ PBS ‏نسب مئوية للتبيط تصل إلى 757 مقارنة بالفئران المحقونة مع‎ ‏كما هو متوقع؛ ليس له نشاط‎ IgGl ‏الجسم 9064 غير الهام المستخدم كنوع مماثئل مقارن‎ ‏مضاد لورم.‎ ٠ ‏ورم‎ WA ‏المضاد الذي يدركه 614 على مجموعة‎ alge ‏دراسة توزيع‎ A ‏مثال‎ ‏ثتم دراسته في أنواع ورم بقياس‎ FA ‏لتحديد دواعي الاستعمال الممكنة لمضاد الجسم‎ ‏(سرطان‎ MCF-7 ‏خلوي انسيابي بالنسبة لنمط إظهار غشاء. إن خطوط الخلية المنتقاة هي‎
Colo ‏(سرطان رئة في خلية غير متغيرة)؛ 11129 و205‎ A549 ¢(estrogen ‏ثدي مرتبط مع‎ ‏يختبر نطاق من‎ LOA) ‏(سرطان قولون) و1003 (سرطان بنكرياس). بالنسبة لتعليم‎ ٠ ٠.*# ‏ميكروجرام/ ملليلترء؛‎ ١ ‏ميكروجرام/ ملليلترء © ميكروجرام/ ملليلترء‎ ٠١( ‏الجرعات‎ ‏ميكروجرام/ ملليلتر و75٠١ ميكروجرام/ ملليلتر).‎ ٠١7 lille ‏ميكروجرام/‎ ‏أن مضاد الجسم 674 يدرك مولد مضاد ظاهر بدرجة‎ ١١ ‏تبين النتائج الموجودة في الشكل‎ ‏ملحوظة على سطح كل الخلايا المختبرة. إن التعليم الناتج قابل للتشبع؛ مما يدل على‎
Jabs ‏ميكروجرام/ ملليلتر لمضاد الجسم؛ وذلك‎ ١ ‏خصوصيته. ينتج تشبع الأماكن من تركيز‎ Ye ‏كبير.‎ JAM-A alias ‏على أن انجذاب مضاد الجسم 674 لمود‎ ‏للمنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة من مضاد‎ CDR ‏مثال 9: إكساب السمة الآدمية بتطعيم‎ (6F4 VL) 6F4 ‏الجسم‎ ‏ملخص تحليل جيني مناعي‎ - ‏ملخص النتائج ترتيب 1016 إنتاجي معاد ترتيبه‎ ‏(بدون كودون إيقاف واتصال في إطار)‎ oe
Yq.
اا لس ا اي ‎IGKJ1*01‏ الدرجة = ‎١450‏ (nt YV/YY)
TL ee [A 7 ‏لت‎ ‎AA ‏واتصال‎ ‏الآدمي.‎ V ‏بيانات مفصلة لأقرب تحديد لجين‎ - ‏الأول لمنطقة © إلى كودون 0775- الثاني+‎ nucleotide ‏(مقيمة من‎ V- ‏أقرب مناطق‎ - -(CDR3-IMGT ‏من‎ nucleotide ٠
Jal ‏الدرجة‎ ‎(nt YY3/YYV) ZAY.T3 avy 1104856 1071-1 (nt YVA/YYY) ZAY.¥A 91 1164855 IGRV1D-33%01 (nt 74/17 1( 1747 ATA X63398 IGKV1-27*01 (nt YY4/YVA) ZYAN Ag) Y14865 IGKV1-NL1*01 (nt YY4/XVA) TYAN Af X72817 IGKV1D-43*01 ‏بيانات تفصيلية لأقرب تحديد لجين -1 آدمي‎ - :[- ‏أقرب مناطق‎ ° ‏الدرجة التماتل‎ (nt ‏إل‎ 4 Ve 100242 IGKJ1*01 ‏رم‎ TAY. A ve AF103571 IGKJ4*02 (nt TV/Y4) ZYA.YA yy 100242 IGKJ4*01 (nt YV/YA) ZY. 1A Vet 770260 1GKJ2%02 (nt YV/YV) ‏.اا‎ 40 £46620 IGKJ2*04 ‏تحديد متخلفات حرجة‎ ‏خارجية. تتضمن هذه‎ CDR ‏هناك معايير كثيرة داخلة في تحديد وتصنيف متخلفات حرجة‎ ‏في ارتباط مولد مضاد أو‎ VHVL ‏على الأقل؛ مساهمة معلومة للمتخلف في السطح البيني‎ ‏تغيرات نوع الحمض الأميني بين متخلفات فأرية وآدمية؛ تحديد موقع المتخلف‎ (CDR sly ‏في‎ ‏في بناء 30 لمجال سيطرة متغير؛ إلخ.‎ ٠ ‏ف‎
بات يوجد ‎amino acid 7١‏ مختلف بين مجال سيطرة ‎6F4 VL‏ وأقرب جين ‎V‏ خط جرثومة آدمي ‎(IGKVI-33401‏ وكلها خارج متخلفات ‎«CDR‏ من بين هؤلاء ‎YY‏ متخلف؛ فقد أدى تحليل المعايير المذكورة أعلاه إلى تحديد 4 متخلفات أكثر مساهمة بدرجة قوية. إن هذه المتخلفات الفأرية هي ‎K24‏ 39ل 0ف ‎.Y875 R85 (A69 068 166 HSS‏ من هذه المتخلفات التسعة؛ يفترض أن ¥ منها تكون هامة أكثر ‎Wal‏ ولذلك تستبقى مصدرها الفأري في الشكل المكتسب للسمة الآدمية. إن هذه هي المتخلفات ‎٠9‏ 1155 و166؛ الواقعة عند مثبتات ‎CDR2 3 CDR1‏ على الترتيب. ‎chal‏ سيتم تحليل ‎amino acids ١‏ بصورةٍ منفردة و/أو في اتحاد لتحديد ما إذا كانت مكتسبة للسمة الآدمية أو إذا كانت محتفظة بمصدرها الفأري. بالنظر إلى عدم إدخال المنطقة [ في ربط ‎alge‏ مضاد وبناء المنطقة ‎V‏ فقد تقرر ‎٠‏ استخدام جين خط الجرثومة 101611*01 الآدمي الأولي. في الترتيب المشار إليه لمجال السيطرة ‎6F4 VL‏ الآدمي الموصوف في الشكل ‎DV‏ ‏فإن * تقابل ‎amino acids‏ متغيرة في الواقع إلى أجزائها المقابلة الآدمية ‎١‏ يقابل ‎amino acids‏ المحللة من أجل قدراتها على اكتساب السمة الآدمية؛ ويشار إلى المتخلف الآدمي أسفل العلامة ‎oY Yo‏ يقابل ‎amino acids‏ التي تظل فأرية في مجال سيطرة 1711 674 المكتسب للسمة الأدمية. مثال ‎:٠١‏ طراز أول لاكساب السمة الآدمية بتطعيم ‎CDR‏ للمنطقة المتغيرة من السلسلة التقيلة لمضاد الجسم ‎VH) 6F4‏ 64): ملخص التحليل الجيني المناعي: ملخص النتائج ترتيب 1016 إنتاج معاد ترتيبه ‎Bes‏ (بدون كودون إيقاف واتصال في إطار) ‎V-GENE‏ وأليل التمائل = 7975.75 ك3 | سس امد ان ‎en |S‏ أ الس ‎VAY = ‏الدرجة‎ IGHJ4*01 (nt £Y/£1) ee RE [3 A A]
AA ‏واتصال‎ ‎Yd.
oA ‏في مجال السيطرة 11. تعتمد عملية إكساب‎ CDR3 ‏ينتمي جين © بدقة إلى المنطقة‎ ‏آدمية غير مفيد في هذه‎ D Glin ‏إن تحليل أقرب‎ CDR ‏السمة الآدمية على طريقة "تطعيم‎ ‏السياسة.‎ ‏آدمي.‎ V ‏بيانات تفصيلية لأقرب تحديد لجين‎ - ‏أول للمنطقة إلى كودون 6775 الثاني)‎ nucleotide ‏(مقيمة من‎ V- ‏أقرب مناطق‎ - °
Jil ‏الدرجة‎ ‎(nt YAA/YAY) / ‏م‎ val 212305 IGHV1-f*01 (nt YAA/YYT) ‏دامر‎ YAY X62106 IGHV1-2*02 (nt YAA/YVo) 7 ‏مخ‎ YAY X92208 IGHV1-2*03 (nt YAA[YY0) ‏لال مخ ا‎ 212310161171-4 (nt YAA/YAY) ‏تخا‎ vi. M99642 IGHV1-24*01 ‏بيانات تفصيلية لأقرب تحديد جين -[ أدمي‎ :[ ‏أقرب مناطق‎ ‏الدرجة التماتل‎ (nt £Y/£1) ‏لم‎ VAY 100256 IGHJ4*01 (nt £/¢) 41 we X86355 IGHJ4*02 (nt 17/5 0( 4 we 1125625 3 (nt 21/74( 17651 7 100256 71 (nt ‏اا ورم‎ VEY 100256 71 ‏تحديد متخلفات حرجة:‎ ‏خارجية. تتضمن هذه‎ CDR ‏هناك معايير كثيرة داخلة في تحديد وتصنيف متخلفات حرجة‎ ‏على الأقل؛ مساهمة معلومة للمتخلف في السطح البيني ,1711/771؛ في ارتباط مولد مضاد أو‎ ٠ ‏تغيرات نوع الحمض الأميني بين متخلفات فأرية وآدمية؛ تحديد موقع المتخلف‎ «CDR ‏في بناء‎ ‏لمجال سيطرة متغيرء إلخ.‎ 3D ‏في بناء‎ ‏خط جرثومة‎ V ‏مختلف بين مجال سيطرة 1711 64 وأقرب جين‎ amino acid ١ ‏يوجد‎ ‏متخلف؛ فقد أدى تحليل‎ VY ‏من بين هؤلاء‎ «CDR ‏آدمي 161171-01 وكلها خارج متخلفات‎ ‏المعايير المذكورةٍ أعلاه إلى تحديد 4 متخلفات أكثر مساهمة بدرجة قوية. إن هذه المتخلفات‎ Vo ‏069؛ 1672 و1682. من هذه المتخلفات‎ (N68 866 ‏الفأرية هي 12( 740» 153 ء 755؛‎ of ‏التسعة؛ يفترض أن " منها تكون هامة أكثر أيضنًا ولذلك تستبقى مصدرها الفأري في الشكل‎ (CDR? ‏؛ الواقعة عند مثبتات‎ R665 755 ‏المكتسب للسمة الآدمية. إن هذه هي المتخلفات‎ ‏بصورة منفردة و/أو في اتحاد لتحديد ما إذا كانت مكتسبة‎ amino acids 7 ‏سيتم تحليل‎ ofa] ‏للسمة الآدمية أو إذا كانت محتفظة بمصدرها الفأري.‎ ‏مضاد وبناء المنطقة 7 فقد تقرر استخدام‎ alge ‏بالنظر إلى عدم إدخال المنطقة آ في ربط‎ ° 674 ‏جين خط الجرثومة 101114*01 الآدمي الأولي. في الترتيب المشار إليه لمجال السيطرة‎
DA ‏الآدمي الموصوف في الشكل‎ 7 ‏متغيرة في الواقع إلى أجزائها المقابلة الآدمية‎ amino acids ‏فإن *» تقابل‎ ‏المحللة من أجل قدراتها على اكتساب السمة الآدمية؛ ويشار‎ amino acids ‏يقابل‎ ء١‎ ‏العلامة‎ Jind ‏إلى المتخلف الآدمي‎ Ve ‏المكتسب للسمة‎ 64 VH ‏تظل فأرية في مجال سيطرة‎ amino acids ‏يقابل‎ Y ‏الآدمية.‎ ‏لمنطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة من‎ CDR ‏طراز ثاني لإكساب السمة الأدمية بتطعيم‎ :١١لاثم‎ :)6]4 VH) 6F4 ‏مضاد الجسم‎ ‏هي البحث عن مماثلات‎ CDR ‏إن طريقة أخرى لتحديد مرشحات جين -7 آدمية لتطعيم‎ - Vo -IMGT/DomainGapAlign ‏آدمية عند مستوى الحمض الأميني باستخدام أداة‎ ‏ملخصة هنا لاحقا:‎ IMGT/DomainGapAlign elie ‏إن نتائج تحليل جيني‎ - ‏التداخل‎ ! ةبسنلا‎ | Smith ‏ألليل النوع مجال السيطرةٍ | درجة‎ ‏المئوية‎ Waterman ‏للتماتل‎ ‎aA 1.7 51١ ١ Homo sapiens | 161171-11 ‏(تعريف الترتيب رقم 41 ؛‎ TGHVI-03%01 ‏تحديد متخلفات حرجة في جين خط جرثومة‎ - (X62109 :EMBL ‏تسمية‎ ‏موجود في‎ IGHVI1-3*01 ‏وترتيبات بروتينية‎ 654 VH ‏إن اصطفاف مجال سيطرة‎ Ye
Yds ‏إن انتقاء وتصنيف هذه المتخلفات يعتمد على معايير متباينة معتمدة على الأهمية النسبية‎ ‏علاقة البناء - الوظيفة المعروفة لهاء أهمية تغير نوع‎ (gl ‏لكل مكان وحيد طبقا للأهمية‎ ‏مل‎
Te ‏تستفيد من ميزة النتائج الناتجة أثناء عملية إكساب سمة آدمية‎ Waly ‏حدث‎ 13) amino acids ‏أولى.‎ ‏المختلفة تم تغييرها من أجل أجزائها‎ "CDRs ‏"خارج‎ amino acids JS ‏فإن‎ «Jf ‏في جاتب‎ ‏المفترض بدرجة قوية إشتمالهما في الارتباط‎ R665 755 ‏المقابلة الآدمية؛ ما عدا المتخلفات‎ ‏كمتخلفات منسوبة لمثبتات 00186. إن قابلية هذين المتخلفين لاكتساب السمة الآدمية ستتضح‎ © ‏عند نهاية العملية. عند إجراء كل التحصيلات الأخرى الموصوفة لاحقا. في الواقع؛ فإن‎ ‏معاد‎ VH ‏فلابد من تحسين مجال سيطرة‎ (Lal) ‏استرجاع النشاط الكامل لمضاد الجسم‎ ‏"إزالة - اكتساب السمة الآدمية"‎ Adee ‏اكتساب السمة الآدمية 1122 674 كما يلي؛ سوف تتكون‎ ‏جزئها المقابل الفأري:‎ amino acids ‏من إجراء طفرات خلفية؛ عند الضرورة؛ لهذه‎ ‏و1758 تمثل إتحاد قوي من‎ K43R (E1Q ‏إن متخلفات المجموعة الأولى؛ تحديدا‎ Ve ‏المعايير وتطابق الأماكن الأولى التي يختبر عندها "إزالة اكتساب السمة الآدمية" عند البحث‎ ‏عن فائدة.‎ ‏و1190 هي‎ F88Y ¢S49R (K48Q ‏عندئذ؛ فإن المتخلفات من المجموعة ؟ء تحديدًا‎ ‏متخلفات رئيسية مفترضة بدرجة أقل وسيتم‎ ich ‏طفرات هامة كيميائيا لكن من الناحية البنائية‎ ‏اختبارها في جولة ثانية للتجربة.‎ ve ‏إن المتخلفات الستة من المجموعة الثالثة؛ تدخل بدرجة أكبر بصورة مفترضة في‎ ‏المتخلفات الكلية و/أو المتجهة إلى اللب ولذلك من المفترض أن تكون داخلة بدرجة أقل في‎ ‏الارتباط وبالتالي سيتم استكشافها في جولة ثالثة من التحسين؛ كلما كان ذلك ضروريًا.‎ ‏من المفترض أن تكون أقل أهمية بنائيا و/أو بالنسبة لتغير‎ cf ‏إن المتخلفات من المجموعة‎ : ‏والتي من أجلها سيتم لاحقا استكشاف "إزالة إكساب السمة الأدمية".‎ amino acid ‏نوع‎ ٠٠ ‏و21ق‎ K72Q 01685 ‏5324ل‎ «Y40H 127 ‏فإن المتخلفات الستة التاليةء‎ «fal ‏التي لا يغير إكسابها السمة الآدمية؛ على الأقل في هذا الاتحاد الأولي؛‎ amino acids ‏تطابق‎ ‏إكساب السمة‎ AI ‏نشاط ارتباط مجال سيطرة 711 المكتسب السمة الآدمية أولا. سيتم إجراء‎ ‏للتحسين.‎ yal ‏الآدمية" لهذه المتخلفات في جولة‎ ‏إكساب‎ lee ‏بدقة إلى المنطقة 0013 في مجال السيطرة 711. تعتمد‎ D ‏ينتمي جين‎ Yo ‏آدمية غير مفيد في هذه‎ D ‏إن تحليل أقرب جينات‎ CDR ‏السمة الآدمية على طريقة 'تطعيم‎ ‏السياسة.‎
بالنظر إلى عدم إدخال المنطقة 1 في ربط مولد مضاد وبناء المنطقة ‎V‏ فقد تقرر استخدام جين خط جرثومة 161114*01 الآدمي الأولي. بيانات تجريبية ناتجة من أجل مضاد جسم 674 معاد إكسابه السمة الآدمية. في التجارب التالية؛ تتعلق إعادة إكساب السمة الآدمية فقط بالسلسلة الثقيلة؛ وتطابق » السلسلة الخفيفة دائما مجال سيطرة ‎6F4 VL‏ مكتسب السمة الآدمية ‎QTY/AET‏ حسب التمثيل في مثال 9 ويظهر مجال السيطرة ‎VL‏ المكتسب السمة الآدمية المنتقي في النهاية نشاط ربط مضاد ‎JAM-a‏ شابه لذلك لمضاد الجسم ‎6F4‏ الهجين المخلق. بصورة مشابهة؛ تجري اختبارات تحسين الطراز المعاد إكسابه السمة الآدمية بالمقارنة مع نشاط الربط المضاد ‎JAM-a‏ ‏مضاد جسم ‎6F4‏ هجين مخلق حسب التحديد باختبار ‎ELISA‏ (البيانات غير مبينة). ‎٠‏ مثال ‎VY‏ انخفاض مستوى التنظيم في المعمل لإظهار ‎JAM-A‏ بواسطة ‎6F4 MAD‏ تنتفى خطوط خلية 1107-7 11129 و2549 لتحديد تأثير ‎6F4 MAD‏ على إظهار ا ‎JAMA‏ بإيجاز تزرع الخلايا في دوارق سعة 0 ‎YauV‏ وتحضن عند 7١7"مثوية؛‏ في جو ‎CO‏ ‏8؛ لمدة ‎YE‏ ساعة؛ في وسط مدعم مع مصل جنين بقري ‎(FCS) 7٠١‏ تغسل الخلايا عندئذ ؟ مرات مع ‎PBS‏ وتحضن لمدة يوم إضافي في وسط بدون مصل. بعد هذه الحضانة ‎ve‏ الثانية؛ يزال الوسط الخالي من المصل ويستبدل بوسط حديث التحضير خالي من المصل وحده أو وسط حديث التحضير خالي من المصل يحتوي على سواء ‎6F4‏ أو نوع مماثل 1861 مقارن موصوف مثل 904. بعد حضانة سواء لمدة © أو ‎cela ١١‏ يضاف مثبت أس هيدروجيني تحلل بارد ‎٠١(‏ مللي جزيئي جرامي مثبت ‎of‏ هيدروجيني 1101 ‎(Tris‏ أس هيدروجيني 7.8 14801715 ‎ipa ١‏ جرامي ‎7٠١ «(Sigma Chemical Co.)‏ خليط ‎Ye‏ منظف ‎٠١(‏ مللي جزيئي جرامي ‎17٠١ (Tris HCL‏ أس هيدروجيني محلل ‎(Sigma (Igepal‏ ‎١ «(Sigma Chemical Co.) sodium deoxycholate 7/8 «Chemical Co.)‏ قرص ‎TM‏ كامل لخلطة مثبط ‎(Roche) protease‏ 5 1 / متبط ‎«(Calbiochem) Set IT Cocktail phosphatase‏ أس هيدروجيني ‎(V.0‏ وتكشط الخلايا على تلج. تنقى مواد التحلل بطرد مركزي ‎die‏ "مثوية. يقدر ‎protein‏ كميا باختبار ‎BCA protein‏ ويحمل ‎YO‏ ميكروجرام من ‎protein‏ في كل خانة ‎oe YO‏ هلام ‎Biorad Bis-Tris‏ 4 -717. تسخن العينات لمدة © دقائق عند ١٠٠”مئوية‏ وتحفظ عند -١٠7*مئوية‏ أو تحمل مباشرةٍ على هلامات ؛-717 ‎SDS-PAGE‏ وتنقل إلى ‎elie‏ ‎nitrocellulose‏ يتم إخماد البقع أولا مع ‎BSA‏ 70 لكل مضادات الأجسام. تجري حضانة يح
“+ لمضاد جسم أولي مضاد ‎JAMA‏ محدد لمدة ساعتين عند درجة حرارة الغرفة. تغسل المرشحات في ‎TBST‏ وتحضن مع مضادات أجسام ثانوية ملائمة متصلة ‎HRP‏ لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة. تغسل الأغشية في ‎TBST‏ قبل رؤية ‎proteins‏ مع ‎ECL‏ ‎.(Amersham)‏
° كما هو مبين في الشكل 19 يلاحظ خفض مستوى تنظيم مفيد لأجل ‎JAMA-A protein‏ لخطوط الخلية الثلاثة المعالجة على ‎.6F4 Mab‏ يبدو أن 1407-7 هو الخط الأكثر حساسية مع خفض مستوى تنظيم كامل وثابت ملحوظ في وقت مبكر مثل 0 ساعات بعد حضانة 674. بالنسبة لخلايا 11729 يلاحظ ‎Unf‏ انخفاض مستوى تنظيم ‎ia‏ لكنه طويل البقاء من أجل ‎JAM-A‏ إن حركية خفض مستوى التتظيم مختلفة للخلايا ‎A549‏ حيث لم يلاحظ أي تأثير
674 ‏ساعة من الحضانة مع‎ ١6 ‏مفيد عند وقت الحضانة المبكرةٍ بينما يحدث تثبيط كامل بعد‎ Ve ‏حسب التوقعات لم تلاحظ فروق مفيدة بين الخلايا غير المعالجة والخلايا المحضنة‎ 56 ‏مقارن.‎ 964 Silas ‏مع نوع‎ ‏تأثير حقنة وحيدة من 674 علي انقسام ورم في الجسم‎ VY ‏مثال‎
لتحديد آلية التأثير في الجسم من أجل ‎6F4 MAb‏ تحقّن فئران إناث عمرها ‎١‏ أسابيع
٠٠١ ‏تحقن مع خلايا 8407-7. عند وصول الأورام إلى حجم 880 إلى‎ estrogen ‏تحمل كريات‎ Vo ‏تتولد ؟ مجموعات فئران مع أورام متساوية. قبل أي حقن؛ تزال الأورام من واحدة من هذه‎ ٠ ‏مم‎ ‏من‎ ODA ‏المجموعات لفحص الانقسام القاعدي لخلايا الورم في ورم غير معالج. تحقن‎ ‏المجموعتين الأخريتين سواء مع ١مجم 6354 أو مع نفس الجرعة من نوع مماثل 1801 مقارن‎ .964 ‏موصوف بأنه‎
‎Y.‏ بعد 7 ساعات من الحقن؛ تزال الأورام تثبت في ‎formalin‏ تطمر في ‎eparaffin‏ تقطع إلى قطاعات © ميكرومتر وتصبغ مع مضاد جسم مضاد ‎Ki67‏ لتحديد مستوى الانقسام في الأورام المعالجة مقابل المقارنة.
‏كما هو مبين في الشكل ‎Yo‏ لم يلاحظ فرق بين الأورام المزالة قبل الحقن (موصوف ‎Jie‏ ‎TO‏ للزمن صفر) والأورام المعالجة من النوع المماتل المقارن 904.
‎.64 ‏يلاحظ تثبيط مفيد لانقسام خلية ورم بعد حقنة واحدة من‎ ¢ AT ‏على صعيد‎ ve
‏مثال )0 تأثير ‎didn‏ واحدة من ‎6F4‏ على إظهار ‎JAM-A‏ في الجسم ‎Yq.‏ iy ‏بالنسبة لهذه الدراسة فإن البروتوكول في الجسم هو نفسه مثل ذلك الموصوف في تجارب‎ ‏سائل من أجل‎ nitrogen ‏الانقسام في الجسم ما عدا أن الأورام المزالة يتم تجميدها بسرعة في‎ ‏أعلاه.‎ ١١ ‏حسب الوصف في المثال‎ Western blot ‏يجري‎ - Western blot ‏تحليل‎ ‏يمكن ملاحظته بين الفثران غير‎ JAM-A ‏عدم وجود فرق في إظهار‎ YY ‏يوضح الشكل‎ 964 ‏للزمن صفر) والفئران المحقونة مرة واحدة مع النوع المماثل‎ TO ‏المعالجة (موصوف مثل‎ © ‏مما يدل‎ 6F4 MAD ‏المقارن. يلاحظ انخفاض مفيد في مستوى التنظيم عند معالجة الفئران مع‎ ‏على أن الآلية المحتملة للتأثير الداخلة في النشاط المضاد لورم في الجسم لمضاد الجسم هذا‎ ‏من الممكن أن تكون خفضا لمستوى تنظيم المستقبل. إن هذه النتائج متطابقة مع النتيجة‎
NY ‏الملحوظة في المعمل والموصوفة أعلاه في المثال‎
F(ab’), ‏المضاد لورم وجزئه‎ 6F4 ‏مثال ©١:؛: مقارنة نشاط‎ ٠ ‏هو‎ 6F4 ‏الرغم من الحقيقة بأن‎ eg 1401-7 ‏يظهر للغاية بواسطة خلايا‎ JAM-A ‏لأن‎ ‏تجرى‎ (OLA ‏(نوع مماثل معروف بأنه داخل بدرجة فقيرة في وظائف مستجيبة في‎ 1 ‏وجزثه 1)85(2 في نموذج 1407-7 لتحديد التدخل الممكن‎ 6F4 ‏مقارنة في الجسم بين‎ ‏للوظائف المستجيبة في النشاط في الجسم.‎ ‏أسابيع تحمل كرية‎ ١ ‏في فئران إناث عمرها‎ MCF7 ‏لذلك الغرض؛ تطعم © مليون خلية‎ Ve ‏أو‎ 6F4 ‏ميكروجرام‎ 7٠0٠0 ‏مع إما‎ oil) ‏بعد © أيام من ازدراع الخلاياء تعالج‎ estrogens 100 ‏ميكروجرام 77طة)1 64 ثلاث مرات في الأسبوع. بالنسبة للحقن الأول؛ يحقن‎ ٠ ‏يقاس حجم الورم مرثتين في‎ .674 Fab’), ‏ميكروجرام من مضاد الجسم و4060 ميكروجرام من‎ ‏الأسبوع لمدة أربع أسابيع.‎ ‏مختلف بدرجة‎ 6F4 F(ab’), 5 6F4 ‏أن نمو الورم في الفثران المعالجة مع‎ YY ‏أ يبين شكل‎ < ‏وم‎ 6F4 ‏لأجل‎ 0.07 2p) 027 ‏ملحوظة عن نمو الورم في الفئران المقارنة من 03 إلى‎ ‏للفئران مما‎ 6F4 F(ab’), ‏و‎ 6F4 ‏لا يلاحظ فرق بين مجموعات‎ .)64 F(ab’), ‏لأجل‎ ... ٠٠ .674 ‏يدل على أن الوظائف المستجيبة غير داخلة في نشاط‎ ‏على نسيج آدمي‎ JAM-A ‏تقييم إظهار‎ :١١ ‏مثال‎ ‏على أنسجة مرضى ورمية مقابل طبيعية لانتقاء أنواع‎ JAM-A ‏تم إجراء مقارنة لإظهار‎ Yo ‏الورم التي تظهر 1424-8 بدرجة زائدة. تنتقى أزواج من أنسجة طبيعية مقابل ورمية من نفس‎ ‏المريض لهذه الدراسة. في هؤلاء المرضى تؤخذ الأنسجة الطبيعية بالقرب من الورم. يتحدد‎
إظهار ‎JAM-A‏ لكيمياء نسيجية مناعية ‎(THC)‏ باستخدام مصفوفات نسيج من ‎-Superships‏ ‏باختصار؛ يزال الشمع من الشرائح ويجرى استرجاع مولد المضاد باستخدام محلول ‎Dakocytomation‏ 81699؛ عند 18"مئوية لمدة ‎٠١‏ دقيقة. بعد اخماد ‎peroxidase‏ داخلي (محلول ‎HO,‏ 7007 لمدة © دقائق) وإخماد الأماكن غير الخاصة ‎tUltra-V-Block)‏ ... ‎o(ref.
TA-125-UB cLabvision ©‏ يحضن مضاد الجسم الأولي (مضاد خ-كلذتت 411103 من نظام ‎RED‏ أو نوع ‎Biles‏ مقارن 180 من ماعز من ‎(Zymed‏ لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارة الغرفة. بعد عدد من مرات الغسيل في ‎(TBS-tween‏ يتم الكشف عن إرتباط مضاد- ‎JAM-A‏ باستخدام مجموعة ‎LSAB+‏ من ‎.dakocytomation‏ تتم رؤية مركب ‎Ab‏ الأولي ‎LSAB+ 4‏ بتفاعل مولد الصبغ ‎JHRP-DAB‏ تصبغ الشرائح عندئذ بصبغة مضادة بواسطة ‎-hematoxylin ٠‏ تحلل عينات سرطان غدة درقية؛ رئة ‎(gy‏ بالنسبة لعينات الغدة الدرقية (شكل ؟؟)؛ لا يلاحظ إظهار على نسيج درقي طبيعي بينما يبدو أن ‎JAM-A‏ يظهر بقوة في قطاعات الورم (صباغة غشاء) من نفس المريض. في نسيج الرئة الطبيعي يظهر ‎JAM-A‏ بواسطة الخلايا الرئوية. على أية حال؛ يلاحظ إظهار غشاء قوي في كل عينات الورم (شكل ‎(YE‏ بالنسبة ‎٠‏ لسرطان الثدي؛ يلاحظ إظهار ‎JAM-A‏ ضعيف»؛ واقع على قنوات فصية؛ على نسيج ثدي طبيعي. في قطاعات السرطان؛ إن © أمثلة من الورم السرطاني المبينة في الشكل ‎Yo‏ (قناة متوغلة؛ ‎ola‏ غير تقليدي وحليمي متوغل) تظهر أن 1814-8 يظهر بدرجة زائدة على أنسجة سرطان ثدي. تقترح هذه البيانات أن سرطان الغدة الدرقية؛ الثديء والرئة يمكن أن تشكل أهدافا جيدة ‎Ye‏ لعلاج ‎JAM-A‏ ‏مثال ‎Y‏ )1 نشاط ‎6F4‏ في الجسم على رقعة دخيلة لسرطان شبيه بشراني ‎A431‏ في قئران ناقصة المناعة تزرع خلايا 8-431 روتينيا في ‎(Lonza) DMEM‏ مدعم مع مصل جنين بقري ‎7٠١‏ خامد النشاط بالحرارة ‎(Sigma)‏ تنفصل الخلايا قبل يومين من التطعيم بحيث تكون في مرحلة أسية ‎Yo‏ للنمو. تطعم ‎٠١‏ مليون خلية 8-431 في فثئران ناقصة المناعة مزالة الغدة الصعترية عمرها ‎١‏ ‏أسابيع. بعد © أيام من التطعيم ‎(DS)‏ تقسم الفئران عشوائيا وتعالج في البريتون مع البرامج التالية: تعطى المجموعة المقارنة ‎(pire‏ أسبوعيا حقن ‎PBS‏ وتحقن المجموعة المعالجة ‎6F4‏ ‎Ya.‏
في البريتون مع جرعة تحميل ‎١‏ مجم تليها حقنات مرتين في الأسبوع بجرعة ‎١‏ مجم من مضاد الجسم. يقاس الورم مرتين في الأسبوع وتحسب أحجام الورم بالصيغة: 7[ ‎XT‏ الطول” العرض* الارتفاع. تجرى تحليلات إحصائية لكل نقطة زمنية باستخدام برنامج ‎Mann-‏ ‎Whitney Test and SigmaStat‏ يبين شكل 76 أن ‎6F4 MAD‏ قادرا على أن يثبط بدرجة © مفيدة نمو خط خلية ‎A431‏ في الجسم (م < ‎١.4‏ من اليوم ‎AYA‏ اليوم ‎(OT‏ ‏مثال ‎VA‏ تقييم نشاط ‎6F4‏ على تقديم مولد مضاد بواسطة خلايا تقدم مولد مضاد ‎(APC)‏ ‏تظهر ‎proteins JAM‏ في تشكيلة من الأنسجة خلال الجسد الآدمي وأيضا على سطح الصفائح الدموية؛ الخلايا البيضاء؛ والخلايا الحمراء: ‎[Naik 1995; Malergue 1998; Korneki 1 990; Williams 1999; Gupta 2000].‏ ‎٠‏ يبدو أن ‎JAM-A‏ يظهر في الصفائح الدموية؛ الخلايا متعادلة الصبغ؛ الخلايا الأحادية؛ الخلايا الليمفاوية والخلايا الحمراء؛ للمراجعة انظر ]2005 ‎-[Mandell‏ ‏لتحديد ما إذا كانت المعالجة مع 4 يمكن أن تتلف عملية تقديم مولد مضاد في مرضى يجرى تقييم للتداخل الممكن مع خلايا تقدم مولد مضاد ‎(APC)‏ متضمنة ‎LOA‏ بلعمة كبيرة وخلايا متفرعة. في عملية التقديم؛ تقوم ‎APC‏ بعملية تذوت لمولدات المضاد وتحللها لتوليد ‎peptides Vo‏ ملازمة في ‎cytoplasm‏ مع جزينات ‎CMH‏ من الصنف ‎JI‏ يظهر المركب عندئذ على أغشية ‎APC‏ ويقدم إلى خلايا ليمفاوية 7 خاصة تستجيب لتلك الإثارة بالانقسام. في الدراسة المقدمة أدناه؛ يتم تقييم تأثير 654 الممكن على تقديم ‎Tetanus Toxoid‏ بواسطة ‎PBMC‏ آدمية. لذلك الغرض» تنفصل ‎PBMC‏ بطرد مركزي متدرج ‎Ficoll‏ من الدم. تغسل الخلايا في ‎PBS‏ يتم عد وتعليق في وسط 1640 ‎RPMI‏ مدعم مع مصل جنين بقري ‎٠‏ خامد النشاط بالحرارة ‎glutamine «(FCS) 7٠١‏ ومضادات حيوية عند تركيز ‎TeX Yo‏ خلية/ ملليلتر . يبذر ‎٠٠١‏ ميكرولتر من ‎PBMC‏ في كل عين من طبق به 476 عين ‎Loe‏ ‏مسبقا مع مولد المضاد ومضاد الجسم المراد اختباره عند تركيز نهائي ‎٠١‏ ميكرولتر/ ملليلتر). يستخدم ‎9G4 Mab‏ كنوع مماثل 18501 مقارن ‎PHA phytohemagglutinin‏ (تركيز نهائي 0. ميكروجرام/ ‎(Abs‏ وهو منشط عديد النسخ للخلايا الليمفاوية يتم إدخاله كمثال مقارن ‎YO‏ موجب. ينتقى ‎(TT) Tetanus Toxoid‏ منشط مولد مضاد خاص ويضاف إلى ‎PBMC‏ عند تركيز نهائي ‎٠‏ ميكروجرام/ ملليلتر. تحضن الأطباق عندئذ عند ا"”مئوية في جو يحتوي على in ‏إلى‎ PH]-Thymidine ‏لمدة 47 ساعة. عندئذ؛ يضاف ¥0 .+ ميكروكيورس من‎ 75 CO, ‏غشاء المرشح ويتم عد‎ Ching (LAN ‏ساعة. بعد الحضانة تجمع‎ YE ‏العيون ويحضن لمدة‎ ‏مقدار النشاط الإشعاعي في عداد وميض.‎ ‏التي تظهر القيم لتجربتين مستقلتين؛ فإن المنشط عديد‎ (YA, (YY ‏بالنسبة للأشكال‎ ‏هو محث قوي لانقسام‎ PBMC ‏مقارن موجب لمستحضر‎ JUS ‏المستخدم‎ PHA ‏النسخ؛‎ © ‏اعتمادا على المانحين والتجربة. في هذه‎ 7١و‎ To ‏الخلايا الليمفاوية؛ مع مؤشرات تتراوح بين‎ ‏الحالات؛ لا يتم تعديل مؤشر انقسام الخلايا الليمفاوية مهما كان مضاد الجسم المحضن؛ ولا‎ ‏و78(ب) التي بها القيم‎ (YY ‏أي نشاط معضد أو مضاد ملحوظ. الأشكال‎ 6F4 ‏يظهر‎ ‎TT ‏لتجربتين مستقلتين تظهر إمكانية حدوث تباينات ملحوظة بين المانحين باتجاه تنشيط‎ ‏اعتمادا على‎ ٠و‎ ١ ‏الانقسام الخلايا الليمفاوية. في هذه التجارب. تتراوح المؤشرات بين‎ ٠ .614 ‏المانحين والتجربة. على أية حال؛ لا يلاحظ إعاقة لتقديم مولد المضاد في وجود‎
OH ‏وخلية ليمفاوية؛‎ APC ‏الملحوظ على‎ JAM-A ‏في الختام؛ على الرغم من إظهار‎ ‏استخدام مضاد جسم مضاد لهذا الهدف لا يعوق الانقسام غير الخاص لخلية ليمفاوية ولا على‎ ‏عملية تقديم مولد المضاد.‎ 6F4 ‏تقييم تجمع وتنشيط الصفائح الدموية بعد حضانة‎ :١9 ‏مثال‎ Vo ‏الذي يرتبط مع صفائح دموية آدمية؛ من الممكن أن‎ 6F4 ‏من أجل التحري عما إذا كان‎ -serotonine ‏تكون له أي وظيفة حيوية؛ يتم قياس معيارين: تجمع الصفائح الدموية وإطلاق‎ ‏مانحين طبيعيين مع © ميكروجرام/‎ ٠١ ‏تحضن صفائح دموية آدمية من‎ pall ‏لهذا‎ ‏ملليلتر من مضادات أجسام عديدة مراد اختبارها.‎ 964 ‏(مضاد 11:03) يحث تجمع الصفائح الدموية. يستخدم‎ PM6/248 ‏لقد تقرر أن‎ Ye ‏كنوع مماتل مقارن سالب.‎ ‏يحثان‎ ADP 5 thrombine ‏كما هو متوقع عند الاختيار على صفائح دموية آدمية؛ فإن‎ ‏يحث أيضا تجمع الصفائح الدموية.‎ PM6/248 ‏التجمع. إن‎ ‏لا يقاس تجمع صفائح دموية بعد حضانة مع 654. إن التأثير مساو لذلك الملحوظ مع‎ .)79 ‏المستخدم كمثال مقارن موجب (شكل‎ 9G4 Yo ‏بينما بحث‎ (Vr ‏(شكل‎ serotonine ‏بطريقة مشابهة؛ لا يكون 674 قادرا على حث إطلاق‎ .5-111 ‏كما هو متوقع» إطلاق‎ cthrombine ¥Y4..
في بصورة مجمعة؛ تشير هذه النتائج إلى أنه في الوقت الذي يتم فيه إظهار ‎JAM-A‏ فإنه لا تتم إثارة وظيفة حيوية على الصفائح الدموية بعد تنشيط 64. ‎Y q LIN]‏

Claims (1)

  1. TA ‏عناصر الحماية‎ ol (derived compound) ‏أو مركب مشتق‎ «(isolated antibody) ‏مضاد جسم متفصل‎ -١ ١ ‏خلايا‎ (proliferation) ‏منه قادر على تثبيط انقسام‎ (functional fragment) ‏جزء وظيفي‎ Y es 7 ‏في المعمل و/أو في الجسم ؛ يتميز بأنه يشمل‎ (tumor cells) ¢ «CDR-HI ‏الثلاثة التاليين» على التوالي‎ CDRs ‏تشمل‎ (heavy chain) ‏سلسلة ثقيلة‎ (i) ° ‏حيث:‎ «CDR-H3 5 CDR-H2 1 ‏يشمل تعريف الترتيب رقم 7 أو 4؛‎ 008-111 - 7 ‏يشمل تعريف الترتيب رقم ؛ أو ١١؛ و‎ CDR-H2 - A SOY ‏يشمل تعريف الترتيب رقم > أو‎ CDR-H3 - 1 «CDR-L1 ‏الثلاثة التاليين؛ على التوالي‎ CDRs ‏تشمل‎ (light chain) ‏سلسلة خفيفة‎ (if) Ve ‏حيث:‎ «CDR-L3 5 CDR-L2 ١ A ‏أو‎ ١ ‏يشمل تعريف الترتيب رقم‎ CDR-LI - VY ‏يشمل تعريف الترتيب رقم © أو ١٠؛ و‎ 008-12 - A © ‏يشمل تعريف الترتيب رقم‎ 008-13 - VE ‏جزء وظيفي‎ ol (derived compound) ‏أو مركب مشتق‎ «(antibody) ‏7؟- مضاد الجسم‎ ١ ‏يشمل سلسلة ثقيلة‎ asl ‏يتميز‎ ٠ ‏منه؛ طبقا لعنصر الحماية‎ (functional fragment) Y ‏بتعريف ترتيب رقم‎ CDR-HI ‏من‎ IMGT ‏طبقا إلى نظام ترقيم‎ «S55 (heavy chain) v VY ‏بتعريف ترتيب رقم‎ CDR-H3 5 ‏بتعريف ترتيب رقم ؛‎ CDR-H2 © ‏أو جزء وظيفي‎ (derived compound) ‏مضاد الجسم (8012000)؛ أو مركب مشتق‎ =F ١ ‏يتميز بأنه يشمل سلسلة ثقيلة‎ oF ‏منه؛ طبقا لعنصر الحماية‎ (functional fragment) Y ‏بتعريف ترتيب رقم‎ CDR-HI ‏من‎ (KABAT ‏تتكون» طبقا إلى نظام ترقيم‎ (heavy chain) 1 76 ‏بتعريف ترتيب رقم‎ CDR-H3 51) ‏بتعريف ترتيب رقم‎ CDR-H2 <4 1 ‏أو جزء وظيفي‎ (derived compound) ‏أو مركب مشتق‎ «(antibody) ‏؛- مضاد الجسم‎ ١ ‏يتميز بأئه يشمل سلسلة خفيفة‎ ١٠ ‏لعنصر الحماية‎ Wh ‏منه؛‎ (functional fragment) Y ١ ‏من 001-11 بتعريف ترتيب رقم‎ (IMGT ‏تتكون» طبقا إلى نظام ترقيم‎ (light chain) 1 © ‏بتعريف ترتيب رقم‎ CDR-L3 ‏بتعريف ترتيب رقم ¥ و‎ CDR-L2 ¢
    Ya...
    ‎١‏ *- مضاد الجسم ‎«(antibody)‏ أو مركب مشتق ‎(derived compound)‏ أو جزء وظيفي ل ‎(functional fragment)‏ منه؛ طبقا لعنصر الحماية ‎٠‏ يتميز ‎ashy‏ يشمل سلسلة خفيفة ‎chain) 1‏ © تتكون؛ طبقا إلى نظام ترقيم ‎<KABAT‏ من ‎CDR-L1‏ بتعريف ترتيب رقم ‎cA‏ 001-12 بتعريف ترتيب رقم ‎CDR-L3 4 ٠‏ بتعريف ترتيب رقم ©. ‎١‏ +- مضاد الجسم ‎¢(antibody)‏ أو مركب ‎sl (derived compound) (Fide‏ جزء وظيفي ‎(functional fragment) Y‏ منه؛ طبقا لعنصر الحماية ١؛‏ يتميز بأنه يشمل سلسلة خفيفة ‎(light chain) 7‏ تشمل؛ طبقا لنظام ترقيم ‎CDRs (IMGT‏ الثلاثة التالية: ؛ - 008-11 بتعريف الترتيب رقم ‎$Y‏ ‏© - 008-12 بتعريف الترتيب رقم "؛ و ‎CDR-L3 - 4‏ بتعريف الترتيب رقم ©؛ و ‎v‏ سلسلة ثقيلة ‎(heavy chain)‏ تشمل؛ طبقا لنظام ترقيم ‎CDRs (IMGT‏ الثلاثة التالية: + - 008-111 بتعريف الترتيب رقم ٠؛‏ ‎٠‏ - 08-112 بتعريف الترتيب رقم ؛؛ و ‎٠‏ - 08-13 بتعريف الترتيب رقم ‎AY‏ ‎١‏ “7- مضاد الجسم ((800000)؛ أو مركب ‎(derived compound) (ide‏ أو جزء وظيفي ‎(functional fragment) Y‏ منه؛ طبقا لعنصر الحماية ١؛‏ يتميز ‎ail,‏ يشمل سلسلة خفيفة ‎(light chain) 1‏ تشمل؛ طبقا لنظام ترقيم ‎CDRs (KABAT‏ الثلاثة التالية: 4 - 008-11 بتعريف الترتيب رقم ‎(A‏ ‏ف - ‎CDRAL2‏ بتعريف الترتيب رقم ١٠؛‏ و + - 08-13 بتعريف الترتيب رقم ©؛ و ‎vy‏ سلسلة ثقيلة ‎(heavy chain)‏ تشمل؛ طبقا لنظام ترقيم ‎CDRs «(KABAT‏ الثلاثة التالية: ‎CDRH] - +‏ بتعريف الترتيب رقم 4؛ ‎٠4‏ - 08-12 بتعريف الترتيب رقم ١١؛‏ و ‎CDR-H3 - ٠‏ بتعريف الترتيب رقم 76. ‎١‏ 8- مضاد الجسم ‎‘(antibody)‏ أو مركب مشتق ‎of (derived compound)‏ جزء وظيفي ‎(functional fragment) ¥‏ منه؛ ‎Lids‏ لأي من عناصر الحماية السابقة؛ يتميز بأنه يشمل
    ‎Ya...‏
    ل
    AY ‏بتعريف الترتيب رقم‎ amino acid ‏مشتملة على ترتيب‎ (light chain) ‏سلسلة خفيفة‎ Y VE ‏بتعريف الترثيب رقم‎ amino acid ‏بترتيب‎ (heavy chain) ‏ويشمل سلسلة ثقيلة‎ ¢ ‏أو مركب مشتق‎ «(humanized antibody) ‏؟- مضاد جسم مكتسب السمة الآدمية‎ ١ ‏منه؛ طبقا لأي من‎ (functional fragment) ‏أو جزءٍ وظيفي‎ (derived compound) Y ‏مشتملة‎ (light chain) ‏يتميز بأنه يشمل ترتيب سلسلة خفيفة‎ o ‏إلى‎ ١ ‏عناصر الحماية‎ ¥ ‏وبأئه يشمل ترتيب سلسلة ثقيلة‎ ١ ١١ ‏بتعريف الترثيب رقم‎ amino acid ‏على ترتيب‎ ¢ NA ‏أو‎ ١8 ‏بتعريف الترتيب رقم‎ amino acid ‏مشتملة على ترتيب‎ (heavy chain) ° ‏جزء وظيفي‎ 0 (derived compound) ‏أو مركب مشتق‎ «(antibody) ‏مضاد الجسم‎ -٠١ ١ ‏منه؛ طبقا لأي من عناصر الحماية السابقة؛ يتميز بأن مضاد‎ (functional fragment) Y ‏يشمل سلسلة خفيفة‎ asl ‏فأري‎ (antibody) ‏المذكور هو مضاد جسم‎ (antibody) ‏الجسم‎ 1 ‏وسلسلة تقيلة‎ Vo ‏بتعريف الترتيب رقم‎ amino acid ‏بترتيب‎ (light chain) : NT ‏بتعريف الترتيب رقم‎ amino acid ‏بترتيب‎ (heavy chain) ® ‏مع:‎ (murine hybridoma filed) ‏حقل ورم هجين فأري‎ -١١ 1 CNCM, Pasteur Institute, Paris, July 6, 2006, under number 1-3646. ١ AY ‏الورم الهجين طبقا لعنصر الحماية‎ 0) 54 (antibody) ‏مضاد جسم‎ -١؟‎ ١ ‏التالية:‎ nucleic acids ‏منفصل يتميز بأنه ينتقى من ضمن‎ nucleic acid -١“ ١ ‏أو مركب مشتق‎ (antibody) ‏يشفر مضاد جسم‎ (RNA ‏أو‎ DNA nucleic acid )( ¥ ‏منه؛ طبقا لواحدة من‎ (functional fragment) ‏أو جزء وظيفي‎ (derived compound) 7 ؛٠١"و‎ ٠١ ‏إلى‎ ١ ‏عناصر الحماية‎ £ ‏حسب التحديد في (أ).‎ nucleic acid JaY ‏مكمل‎ nucleic acid ‏(ب)‎ © AY ‏طبقا لعنصر الحماية‎ nucleic acid ‏يتكون من‎ (vector) ‏ناقل‎ -١4 ١ VE ‏طبقا لعنصر الحماية‎ (vector) ‏ناقل‎ Jedd (host cell) ‏خلية عائلة‎ —Yo ١ ‏طبقا لعنصر الحماية‎ (vector) ‏حيوان فقري؛ وليس إنسان؛ يشمل خلية متحولة بناقل‎ -١١ ١ No 7 Gide ‏أو مركب‎ (antibody) ‏لإنتاج مضاد جسم‎ (method) ‏طريقة‎ -١١7 ١ ‏منه؛ طبقا لواحد من‎ (functional fragment) ‏أو جزءِ وظيفي‎ (derived compound) Y
    الا
    1 عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎٠١‏ و17. تتميز بأن الطريقة ‎(method)‏ المذكورة تشمل الخطوات ¢ التالية: ‎٠‏ )( الزراعة في وسط وفي شروط زراعة مناسبة لخلية عائلة طبقا لعنصر الحماية 6١؛‏ و (ب) استرجاع مضاد الجسم ‎antibody)‏ المذكور؛ أو واحد من أجزائه الوظيفية؛ الناتج بتلك 7 الطريقة من وسط المزرعة أو من الخلايا المزروعة المذكورة.
    ‎=VA ١‏ مضاد جسم ‎(antibody)‏ أو مركب مشتق ‎(derived compound)‏ أو جزء وظيفي ‎(functional fragment) Y‏ منه؛ طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎AY ٠١‏ يتميز ‎v‏ بأنه يتكون من مضاد جسم ‎(antibody)‏ ثنائي الخصوصية وبأنه يشمل حافز ثاني قادر ¢ على التعامل مع مستقبل متورط في نمو ورم؛ ينتقى من ضمن المستقبلات ‎«VEGFR‏ ‎-CXCR2 5 CXCR4 (FGF «MET «HGF «HER2neu «IGF-IR «EGFR (VEGF °e‏ ‎AL I‏ مضاد جسم ‎(antibody)‏ أو مركب مشتق ‎(derived compound)‏ أو جزء وظيفي ‎(functional fragment) ¥‏ منه؛ طبقا لواحد من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎ASI ٠١‏ 1و للاستخدام كعقار ‎(drug)‏
    ‎‘(antibody) ‏تشمل كمقوم نشط مركب يتكون من مضاد جسم‎ (composition) ‏تركيبة‎ -”٠ ١ ‏منه؛‎ (functional fragment) ‏أو جزء وظيفي‎ (derived compound) ‏أو مركب مشتق‎ Y NASA OY Ae ‏إلى‎ ١ ‏طبقا لواحد من عناصر الحماية‎ ¥
    ‎-١١ ١‏ تركيبة ‎(composition)‏ طبقا لعنصر الحماية + ‎Y‏ تتميز بأنها تشمل؛ إضافياء كمنتج ‎Y‏ اتحاد للاستخدام بطريقة متزامنة؛ منفصلة أو ممتدة؛ مضاد جسم ‎(antibody)‏ مضاد لورم 1 بخلاف مضاد جسم ‎(antibody)‏ مضاد لبروتين ‎JAM-A‏ مباشر.
    ‎—YY ١‏ تركيبة ‎(composition)‏ طبقا لعنصري الحماية ‎7١‏ أو ‎YY‏ تتميز بأنها تشمل؛ إضافياء ‎Y‏ كمنتج اتحاد للاستخدام بطريقة متزامنة؛ منفصلة أو ممتدة؛ عامل سام ‎[LAL‏ موقف لنمو 3 الخلايا.
    ‎—YY ١‏ تركيبة ‎Ligh (composition)‏ لعنصر الحماية ‎YY‏ تتميز بأن العامل السام للخلايا/ الموقف لنمو الخلايا المذكور مرتبط كيميائيا مع واحد على الأقل من عناصر التركيبة ¥ المذكورة لاستخدام متزامن.
    ‎١‏ 74- تركيبة ‎(composition)‏ طبقا لأي واحد من عناصر الحماية ‎٠١‏ إلى ‎YY‏ تتميز بأن ‎Y‏ واحدا على الأقل من مضادات الأجسام ‎(antibodies)‏ المذكورة؛ أو المركبات المشتقة
    لص ‎(derived compounds) v‏ أو الأجزاء الوظيفية ‎«Leia (functional fragments)‏ متحد مع ‎toxin ¢‏ خلوي و/أو نظير مشع. ‎—Yo ١‏ تركيبة ‎(composition)‏ طبقا لواحد من عناصر الحماية ‎Ye‏ إلى ؛ ؟؛ للاستخدام كعقار ل ‎(drug)‏ ‎=Y1 ١‏ استخدام مضاد جسم ‎(antibody)‏ » أو مركب مشتق ‎(derived compound)‏ أو جزء ‎Y‏ وظيفي ‎(functional fragment)‏ منه؛ طبقا لواحد من عناصر الحماية ‎١‏ إلى ‎AY ٠١‏ ‎Vas YA ¥‏ و/أو تركيبة ‎(composition)‏ طبقا لأي من عناصر الحماية ‎٠١‏ إلى ‎Yo‏ ‏؛ -- لتحضير عقار ‎(drug)‏ لمنع أو معالجة مرض مرتبط بانقسام خلية ورم. ‎١‏ 77- الاستخدام طبقا لعنصر الحماية ‎YT‏ لتحضير عقار ‎(drug)‏ لمنع أو معالجة سرطان. ‎١‏ 8؟- الاستخدام طبقا لعنصر الحماية ‎(YY‏ يتميز بأن السرطان المذكور هو سرطان ينتقى من ‎v‏ بين سرطان بروستاتاء سرقوم عظمي؛ سرطان رئة؛ سرطان ثدي؛ سرطان بطانة رحم؛ ورم ¥ نخاعي متعدد؛ سرطان المبيض؛ سرطان البنكرياس وسرطان القولون. ‎١‏ ؟7- الاستخدام طبقا لعنصر الحماية ‎YA‏ يتميز بأن السرطان المذكور هو سرطان ينتقى من " بين سرطان ثدي مرتبط مع ‎cestrogen‏ سرطان رئة في خلية غير صغيرة؛ سرطان قولون " وسرطان بنكرياس.
SA07280637A 2006-11-24 2007-11-24 مضادات أجسام مضادة للانقسام جديدة SA07280637B1 (ar)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0610329A FR2909092B1 (fr) 2006-11-24 2006-11-24 Nouveaux anticorps anti-proliferation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA07280637B1 true SA07280637B1 (ar) 2012-04-11

Family

ID=37903981

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA07280637A SA07280637B1 (ar) 2006-11-24 2007-11-24 مضادات أجسام مضادة للانقسام جديدة

Country Status (28)

Country Link
US (2) US8071730B2 (ar)
EP (1) EP2074148A1 (ar)
JP (1) JP2010509931A (ar)
KR (1) KR20090088878A (ar)
CN (1) CN101535344B (ar)
AU (1) AU2007324509B2 (ar)
BR (1) BRPI0719323A2 (ar)
CA (1) CA2670039A1 (ar)
CL (1) CL2007003357A1 (ar)
CR (1) CR10788A (ar)
CU (1) CU23792A3 (ar)
EC (1) ECSP099341A (ar)
FR (1) FR2909092B1 (ar)
GE (1) GEP20125629B (ar)
GT (1) GT200900126A (ar)
HK (1) HK1132752A1 (ar)
IL (1) IL198744A0 (ar)
MA (1) MA30891B1 (ar)
MX (1) MX2009005293A (ar)
NI (1) NI200900079A (ar)
NO (1) NO20092360L (ar)
NZ (1) NZ576174A (ar)
RU (1) RU2451689C2 (ar)
SA (1) SA07280637B1 (ar)
TN (1) TN2009000194A1 (ar)
TW (1) TW200829602A (ar)
UA (1) UA99602C2 (ar)
WO (1) WO2008062063A1 (ar)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JOP20080381B1 (ar) 2007-08-23 2023-03-28 Amgen Inc بروتينات مرتبطة بمولدات مضادات تتفاعل مع بروبروتين كونفيرتاز سيتيليزين ككسين من النوع 9 (pcsk9)
WO2010002862A2 (en) * 2008-07-01 2010-01-07 Aveo Pharmaceuticals, Inc. Fibroblast growth factor receptor 3 (fgfr3) binding proteins
AU2010313381A1 (en) * 2009-10-30 2012-04-12 Merck Sharp & Dohme Corp. AX1 and AX189 PCSK9 antagonists and variants
SG189929A1 (en) * 2010-10-29 2013-06-28 Immunogen Inc Novel egfr-binding molecules and immunoconjugates thereof
EP2455403A1 (en) 2010-11-23 2012-05-23 Pierre Fabre Medicament Homogeneous humanized antibodies against JAM-A that inhibit proliferation
US20130287790A1 (en) * 2012-03-30 2013-10-31 The Board Of Trustees Of The Leland Standford Junior University Use of jam-a in diagnosing and treating leukemia
CN109369808B (zh) 2012-08-24 2023-11-07 加利福尼亚大学董事会 用于治疗ror1癌症并抑制转移的抗体和疫苗
KR20150097304A (ko) 2014-02-18 2015-08-26 삼성전자주식회사 항 EGFR DARPin을 포함하는 EGFR/HER2 이중 특이 항체
BR112018067522A2 (pt) * 2016-03-01 2019-02-05 Univ Of Rijeka Faculty Of Medicine anticorpos específicos para receptor de poliovírus humano (pvr)
IL299099A (en) 2016-06-27 2023-02-01 Univ California Combinations of cancer treatments
WO2018027039A1 (en) * 2016-08-03 2018-02-08 Nextcure, Inc. Compositions and methods for modulating lair signal transduction
CN109022366A (zh) * 2018-08-16 2018-12-18 江南大学 一株分泌抗左旋咪唑单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
CN114740108B (zh) * 2022-03-28 2023-07-14 天津键凯科技有限公司 一种聚合物修饰抗体类药物的修饰度的测定方法

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE9604470D0 (sv) * 1996-12-04 1996-12-04 Tamas Bartfai Konsulting Ab Transmembrane component of tight junction
US6235883B1 (en) * 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
US20030171568A1 (en) * 1998-09-16 2003-09-11 Avi Ashkenazi Use of A33 antigens and JAM-IT
US6677436B1 (en) * 1998-04-03 2004-01-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Humanized antibody against human tissue factor (TF) and process of production of the humanized antibody
MXPA01009110A (es) * 1999-03-11 2002-08-20 Rmf Dictagene Sa Moleculas de adhesion vascular y modulacion de su funcion.
WO2005060457A2 (en) * 2003-12-04 2005-07-07 Pdl Biopharma, Inc. Treatment of inflammatory bowel diseases with anti-ip-10 antibodies
WO2006008076A2 (en) * 2004-07-16 2006-01-26 Universita Degli Studi Di Milano Methods and agents stimulating the immune response
WO2006121207A1 (en) * 2005-05-12 2006-11-16 Oncotherapy Science, Inc. Methods for damaging cells using effector function of anti-dsc2 antibody
WO2007127476A2 (en) * 2006-04-28 2007-11-08 Oregon Health & Science University Monoclonal antibodies specific for pancreatic endocrine, exocrine or ductal cell

Also Published As

Publication number Publication date
US8071730B2 (en) 2011-12-06
NI200900079A (es) 2010-11-10
EP2074148A1 (en) 2009-07-01
AU2007324509A1 (en) 2008-05-29
JP2010509931A (ja) 2010-04-02
FR2909092A1 (fr) 2008-05-30
WO2008062063A1 (en) 2008-05-29
GEP20125629B (en) 2012-09-10
CN101535344A (zh) 2009-09-16
CL2007003357A1 (es) 2008-04-04
CN101535344B (zh) 2013-10-16
MX2009005293A (es) 2009-08-07
RU2009123409A (ru) 2010-12-27
CA2670039A1 (en) 2008-05-29
US20100092455A1 (en) 2010-04-15
CR10788A (es) 2009-06-23
GT200900126A (es) 2011-09-02
TW200829602A (en) 2008-07-16
HK1132752A1 (en) 2010-03-05
AU2007324509B2 (en) 2013-01-17
US20120156191A1 (en) 2012-06-21
BRPI0719323A2 (pt) 2014-02-04
RU2451689C2 (ru) 2012-05-27
CU23792A3 (es) 2012-03-15
TN2009000194A1 (en) 2010-10-18
NO20092360L (no) 2009-08-11
MA30891B1 (fr) 2009-11-02
FR2909092B1 (fr) 2012-10-19
ECSP099341A (es) 2009-06-30
UA99602C2 (ru) 2012-09-10
IL198744A0 (en) 2010-02-17
NZ576174A (en) 2012-03-30
KR20090088878A (ko) 2009-08-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7069261B2 (ja) Ｃｄ７３特異的結合分子及びその使用
SA07280637B1 (ar) مضادات أجسام مضادة للانقسام جديدة
TWI771361B (zh) 人程序性死亡受體pd-1的單株抗體及其片段
CN113286634A (zh) 对gucy2c特异性的抗体及其用途
CN109154611A (zh) 人源化抗cd73抗体
CN115286695A (zh) 抗hla-g特异性抗体
JP2020536109A (ja) Ｃｄ３９／ｃｄ７３軸によるｔ細胞活性の回復
WO2020228806A1 (zh) 针对密蛋白18a2的抗体及其应用
MX2012011234A (es) Anticuerpos contra csf-1r.
AU2014317009A1 (en) CD70-binding peptides and method, process and use relating thereto
EP3988573A1 (en) Anti-cd3e/bcma bispecific antibody and use thereof
CN111971298A (zh) 抗体
AU2019208793A1 (en) Anti-4-1BB antibody, antigen-binding fragment thereof and medical use thereof
EP4101867A1 (en) Anti-cd3 and anti-cd123 bispecific antibody and use thereof
WO2023151693A1 (zh) 包含抗tigit抗体和抗pd-1-抗vegfa双特异性抗体的药物组合物及用途
TW201920282A (zh) 抗egfr和pd-1的雙特異性抗體
CN112955548A (zh) 叶酸受体α特异性抗体
CA3207791A1 (en) Anti-cd112r antibody and use thereof
TW201736399A (zh) 抗vegfr抗體及其應用
JP2022514786A (ja) Ｍｕｃ１８に特異的な抗体
CA3134680C (en) Fusion protein comprising anti-mesothelin antibody, anti-cd3 antibody or anti-egfr antibody, bispecific or trispecific antibody comprising same, and uses thereof
CN111108120A (zh) 抗人类血管内皮生长因子受体的抗体及其应用
WO2021013061A1 (zh) 一种人源化抗vegfr2抗体及其应用
EP4183800A1 (en) Novel sars-cov-2 neutralizing antibodies
WO2023001303A1 (zh) 药物组合物及用途