RU96122161A

RU96122161A - Способ отбора популяций или субпопуляций образца

Info

Publication number: RU96122161A
Application number: RU96122161/14A
Authority: RU
Inventors: Х.Коултер Воллейс; К.Звернер Роберт; Дж.Шмитлинг Роберт; Р.Расселл Томас
Original assignee: Коултер Корпорейшн
Priority date: 1994-04-15
Filing date: 1995-04-11
Publication date: 1999-01-10

Claims

1. Способ удаления выбранной клеточной субпопуляции из жидкого образца клеток крови или костного мозга, причем упомянутый образец включает в себя множество различных клеточных субпопуляций, упомянутый способ включает в себя: обеспечение множество частиц, имеющих плотность по крайней мере вдвое большую, чем средняя плотность клеток, и размер по крайней мере в 3 микрона, причем упомянутые частицы имеют присоединенный к ним реагент, который связывается со специфичными клетками или с упомянутыми выбранными субпопуляциями; перемешивание упомянутых частиц с частью упомянутого жидкого образца в емкости для того, чтобы вызвать присоединение упомянутых частиц лишь к клеткам упомянутой выбранной субпопуляции, причем этап перемешивания проводят для того, чтобы вызвать неоднократное оседание упомянутых частиц благодаря силе тяжести через значительную часть упомянутого жидкого образца; по завершении этапа перемешивания, обеспечение возможности упомянутым частицам и присоединенным к ним клеткам дифференциально осесть под действием силы тяжести так, чтобы пространственно отделить упомянутые частицы по отношению к несвязавшимся клеткам в упомянутом жидком образце; и отделение по крайней мере части несвязавшихся клеток от пространственно отделенных клеток и присоединенных к ним клеток.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выбранные клеточные субпопуляции являются раковыми клетками, лейкоцитами, тромбоцитами, иммунокомпетентными клетками или специфически дифференцированными клетками.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутое перемешивание осуществляют путем вращения упомянутой емкости для того, чтобы вызвать опрокидывание упомянутого образца и упомянутых частиц вверх дном.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутые частицы образованы из никеля.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутые частицы имеют диаметр от приблизительно 3 до 35 микронов.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что частицы имеют диаметр приблизительно 5 микронов.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что частицы имеют плотность большую, чем 2 г/см³.

8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что упомянутые частицы имеют плотность приблизительно 9 г/см³.

9. Способ по п. 7, отличающийся тем, что упомянутые частицы имеют плотность менее, чем в три раза превышающую плотность клеток крови из упомянутой субпопуляции.

10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый реагент включает в себя лекарство, гормон, фактор роста, лектин, фермент или последовательность нуклеиновой кислоты.

11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что реагент является антителом.

12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что упомянутое антитело специфично к тромбоцитам или белым клеткам крови.

13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутое перемешивание проводят в течение приблизительно от 15 с до 30 мин.

14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что упомянутое перемешивание проводят в течение приблизительно 4 мин.

15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что дифференциальное осаждение проводят в течение приблизительно от 15 с до 180 мин.

16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что упомянутый этап дифференциального осаждения проводят в течение приблизительно 4 мин.

17. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый этап разделения включает в себя удаление по крайней мере части получившегося супернатанта упомянутой порции образца без упомянутых частиц и упомянутой присоединной популяции или субпопуляции.

18. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый этап разделения включает в себя выделение упомянутых частиц и последующее удаление упомянутой присоединенной популяции или субпопуляции от упомянутых частиц.

19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что упомянутыми присоединенными популяциями являются С 8 позитивные клетки.

20. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый реагент специфичен к моноцитарной, лимфоцитарной и тромбоцитарной субпопуляциям клеток крови, посредством чего гранулицитарная субпопуляция становится пространственно отделенной от моноцитарной, лимфоцитарной и тромбоцитарной субпопуляций.

21. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый реагент специфичен к моноцитарной, нейтрофильной, эозинофильной и тромбоцитарной субпопуляциям клеток крови, посредством чего лимфоцитарная субпопуляция становится пространственно отделенной от моноцитарной, нейтрофильной, эозинофильной и тромбоцитарной субпопуляций.

22. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый реагент специфичен к тромбоцитарной субпопуляции клеток крови, посредством чего лейкоцитарная субпопуляция клеток становится пространственно отделенной от субпопуляции тромбоцитов.

23. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый реагент специфичен к нейтрофильной субпопуляции клеток крови.

24. Способ по п. 1, отличающийся тем, что упомянутый реагент специфичен, по существу, ко всем дифференцированным позитивным клеткам.

25. Способ по п. 1, отличающийся нагреванием упомянутых частиц перед присоединением к ним упомянутого реагента.

26. Способ по п. 1, отличающийся лиофилизацией упомянутых частиц.

27. Устройство для удаления предварительно выбранной субпопуляции клеток крови из образца цельной крови, включающее в себя множество частиц, имеющих плотность по крайней мере вдвое большую, чем плотность упомянутых клеток крови, и диаметр между приблизительно 3 и 35 микронами, причем упомянутые частицы имеют присоединенный к ним реагент, специфичный к данной предварительно выбранной клеточной субпопуляции, причем упомянутые частицы приспособлены для перемешивания с порцией упомянутого образца цельной крови для связывания упомянутых частиц с предварительно выбранной клеточной субпопуляцией и для того, чтобы стало возможным дифференциальное оседание связанных частиц и клеток в упомянутой порции образца по отношению к несвязавшимся клеткам.

28. Устройство по п. 27, далее отличающееся тем, что упомянутые частицы содержат никель.

29. Устройство по п. 27, отличающееся тем, что упомянутые частицы имеют плотность большую, чем 2 г/см³.

30. Устройство по п. 27, отличающееся тем, что упомянутые частицы изготовлены из никеля и имеют плотность приблизительно 9 г/см³.

31. Устройство по п. 29, отличающееся тем, что упомянутые частицы имеют плотность менее, чем в три раза превышающую плотность клеток крови из упомянутой субпопуляции.

32. Устройство по п. 27, отличающееся тем, что упомянутым реагентом является по крайней мере одно антитело, лекарство, фактор роста, лектин, фермент или последовательность нуклеиновой кислоты.

33. Устройство по п. 27, отличающееся тем, что упомянутый реагент включает в себя антитело, специфичное к тромбоцитам и белым клеткам крови.

34. Устройство по п. 27, отличающееся тем, что упомянутые частицы лиофилизированы.

35. Устройство по п. 27, отличающееся тем, что упомянутые частицы содержат никель и имеют диаметр приблизительно 5 мкм.