RU2818278C2 - Пневмококковые поверхностные белки - Google Patents
Пневмококковые поверхностные белки Download PDFInfo
- Publication number
- RU2818278C2 RU2818278C2 RU2021130034A RU2021130034A RU2818278C2 RU 2818278 C2 RU2818278 C2 RU 2818278C2 RU 2021130034 A RU2021130034 A RU 2021130034A RU 2021130034 A RU2021130034 A RU 2021130034A RU 2818278 C2 RU2818278 C2 RU 2818278C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ala
- lys
- glu
- asp
- leu
- Prior art date
Links
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 title description 2
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 title 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 54
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 54
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 53
- 229940124733 pneumococcal vaccine Drugs 0.000 claims description 31
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 21
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 14
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 11
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 11
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 10
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 108010040473 pneumococcal surface protein A Proteins 0.000 abstract description 62
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 230000009615 deamination Effects 0.000 abstract description 5
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 208000035109 Pneumococcal Infections Diseases 0.000 abstract description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- 241000130810 Streptococcus pneumoniae D39 Species 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 abstract 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 27
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 24
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 description 23
- 101710138270 PspA protein Proteins 0.000 description 22
- CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N Pro-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2 CGBYDGAJHSOGFQ-LPEHRKFASA-N 0.000 description 20
- IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N Ala-Pro-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IPZQNYYAYVRKKK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 19
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)N)CCCCN PMQXMXAASGFUDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 18
- VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Lys Natural products NCCCCC(NC(=O)C(N)C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- FZIJIFCXUCZHOL-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN FZIJIFCXUCZHOL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 18
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 18
- 108010025153 lysyl-alanyl-alanine Proteins 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- VCSABYLVNWQYQE-SRVKXCTJSA-N Ala-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 12
- JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 12
- SKRGVGLIRUGANF-AVGNSLFASA-N Lys-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SKRGVGLIRUGANF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 12
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 10
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 9
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 9
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 9
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 8
- CVGNCMIULZNYES-WHFBIAKZSA-N Ala-Asn-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O CVGNCMIULZNYES-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- XSLGWYYNOSUMRM-ZKWXMUAHSA-N Ala-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XSLGWYYNOSUMRM-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 8
- FTCGGKNCJZOPNB-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Ser Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FTCGGKNCJZOPNB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 8
- HUKLXYYPZWPXCC-KZVJFYERSA-N Met-Ala-Thr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HUKLXYYPZWPXCC-KZVJFYERSA-N 0.000 description 8
- HZDQUVQEVVYDDA-ACRUOGEOSA-N Tyr-Tyr-Leu Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HZDQUVQEVVYDDA-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 8
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 8
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- BOJYMMBYBNOOGG-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BOJYMMBYBNOOGG-DCAQKATOSA-N 0.000 description 7
- CNGOEHJCLVCJHN-SRVKXCTJSA-N Lys-Pro-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CNGOEHJCLVCJHN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 7
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 7
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 7
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 7
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 7
- FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N Ala-Ala-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FJVAQLJNTSUQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- LSLIRHLIUDVNBN-CIUDSAMLSA-N Ala-Asp-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN LSLIRHLIUDVNBN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- WKOBSJOZRJJVRZ-FXQIFTODSA-N Ala-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WKOBSJOZRJJVRZ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- HXNNRBHASOSVPG-GUBZILKMSA-N Ala-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HXNNRBHASOSVPG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- PIXQDIGKDNNOOV-GUBZILKMSA-N Ala-Lys-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PIXQDIGKDNNOOV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Val Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(C)N)CCCCN MDNAVFBZPROEHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DRARURMRLANNLS-GUBZILKMSA-N Ala-Met-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DRARURMRLANNLS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- FEGOCLZUJUFCHP-CIUDSAMLSA-N Ala-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FEGOCLZUJUFCHP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- YNOCMHZSWJMGBB-GCJQMDKQSA-N Ala-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YNOCMHZSWJMGBB-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 6
- ZCUFMRIQCPNOHZ-NRPADANISA-N Ala-Val-Gln Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N ZCUFMRIQCPNOHZ-NRPADANISA-N 0.000 description 6
- DBKNLHKEVPZVQC-LPEHRKFASA-N Arg-Ala-Pro Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(O)=O DBKNLHKEVPZVQC-LPEHRKFASA-N 0.000 description 6
- PNQWAUXQDBIJDY-GUBZILKMSA-N Arg-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PNQWAUXQDBIJDY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- SRUUBQBAVNQZGJ-LAEOZQHASA-N Asn-Gln-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N SRUUBQBAVNQZGJ-LAEOZQHASA-N 0.000 description 6
- XEDQMTWEYFBOIK-ACZMJKKPSA-N Asp-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XEDQMTWEYFBOIK-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- NAPNAGZWHQHZLG-ZLUOBGJFSA-N Asp-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N NAPNAGZWHQHZLG-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 6
- SNAWMGHSCHKSDK-GUBZILKMSA-N Asp-Gln-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N SNAWMGHSCHKSDK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N Asp-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PDECQIHABNQRHN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- DGKCOYGQLNWNCJ-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DGKCOYGQLNWNCJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- HJCGDIGVVWETRO-ZPFDUUQYSA-N Asp-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(O)=O HJCGDIGVVWETRO-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 6
- PLNJUJGNLDSFOP-UWJYBYFXSA-N Asp-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PLNJUJGNLDSFOP-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 6
- KZKBJEUWNMQTLV-XDTLVQLUSA-N Gln-Ala-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KZKBJEUWNMQTLV-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 6
- IHSGESFHTMFHRB-GUBZILKMSA-N Gln-Lys-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O IHSGESFHTMFHRB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- JRHPEMVLTRADLJ-AVGNSLFASA-N Gln-Lys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N JRHPEMVLTRADLJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- WZZSKAJIHTUUSG-ACZMJKKPSA-N Glu-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WZZSKAJIHTUUSG-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- VAIWPXWHWAPYDF-FXQIFTODSA-N Glu-Asp-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O VAIWPXWHWAPYDF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- CYHBMLHCQXXCCT-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O CYHBMLHCQXXCCT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- XHUCVVHRLNPZSZ-CIUDSAMLSA-N Glu-Gln-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XHUCVVHRLNPZSZ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- CGOHAEBMDSEKFB-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CGOHAEBMDSEKFB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- KASDBWKLWJKTLJ-GUBZILKMSA-N Glu-Glu-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O KASDBWKLWJKTLJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- IQACOVZVOMVILH-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O IQACOVZVOMVILH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- QJCKNLPMTPXXEM-AUTRQRHGSA-N Glu-Glu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O QJCKNLPMTPXXEM-AUTRQRHGSA-N 0.000 description 6
- IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N Glu-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 6
- FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- NJCALAAIGREHDR-WDCWCFNPSA-N Glu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NJCALAAIGREHDR-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 6
- OQXDUSZKISQQSS-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OQXDUSZKISQQSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- HRBYTAIBKPNZKQ-AVGNSLFASA-N Glu-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O HRBYTAIBKPNZKQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N Glu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 6
- GMVCSRBOSIUTFC-FXQIFTODSA-N Glu-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMVCSRBOSIUTFC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ULZCYBYDTUMHNF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 6
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SYMSVYVUSPSAAO-IHRRRGAJSA-N His-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SYMSVYVUSPSAAO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 6
- IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N Ile-Asp-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N 0.000 description 6
- RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N L-isoleucyl-L-alanine Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GPICTNQYKHHHTH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 6
- KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- PNPYKQFJGRFYJE-GUBZILKMSA-N Lys-Ala-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PNPYKQFJGRFYJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N Lys-Ala-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N IXHKPDJKKCUKHS-GARJFASQSA-N 0.000 description 6
- HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 6
- NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N Lys-Asp-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NTBFKPBULZGXQL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- QQUJSUFWEDZQQY-AVGNSLFASA-N Lys-Gln-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN QQUJSUFWEDZQQY-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N Lys-Glu-Gly Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CCC([O-])=O)C(=O)NCC([O-])=O GCMWRRQAKQXDED-IUCAKERBSA-N 0.000 description 6
- LPAJOCKCPRZEAG-MNXVOIDGSA-N Lys-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN LPAJOCKCPRZEAG-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 6
- SLQJJFAVWSZLBL-BJDJZHNGSA-N Lys-Ile-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN SLQJJFAVWSZLBL-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 6
- MUXNCRWTWBMNHX-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MUXNCRWTWBMNHX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 6
- WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WBSCNDJQPKSPII-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 6
- QVTDVTONTRSQMF-WDCWCFNPSA-N Lys-Thr-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN QVTDVTONTRSQMF-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 6
- DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N Lys-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N 0.000 description 6
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AUEJLPRZGVVDNU-UHFFFAOYSA-N N-L-tyrosyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 AUEJLPRZGVVDNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 6
- WLYPRKLMRIYGPP-JYJNAYRXSA-N Phe-Lys-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WLYPRKLMRIYGPP-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 6
- VDGTVWFMRXVQCT-GUBZILKMSA-N Pro-Glu-Gln Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 VDGTVWFMRXVQCT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N Pro-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 6
- XDKKMRPRRCOELJ-GUBZILKMSA-N Pro-Val-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 XDKKMRPRRCOELJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 description 6
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 description 6
- FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FMDHKPRACUXATF-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 6
- UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N Ser-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 6
- VGYBYGQXZJDZJU-XQXXSGGOSA-N Thr-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VGYBYGQXZJDZJU-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 6
- QNCFWHZVRNXAKW-OEAJRASXSA-N Thr-Lys-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O QNCFWHZVRNXAKW-OEAJRASXSA-N 0.000 description 6
- XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N Thr-Val-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N XGFYGMKZKFRGAI-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 6
- GDPDVIBHJDFRFD-RNXOBYDBSA-N Trp-Tyr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O GDPDVIBHJDFRFD-RNXOBYDBSA-N 0.000 description 6
- YGKVNUAKYPGORG-AVGNSLFASA-N Tyr-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YGKVNUAKYPGORG-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N Tyr-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O QUILOGWWLXMSAT-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 6
- ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N Val-Ala-Pro Natural products CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O ZLFHAAGHGQBQQN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- UDNYEPLJTRDMEJ-RCOVLWMOSA-N Val-Asn-Gly Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)NCC(=O)O)N UDNYEPLJTRDMEJ-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 6
- ISERLACIZUGCDX-ZKWXMUAHSA-N Val-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ISERLACIZUGCDX-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- RYQUMYBMOJYYDK-NHCYSSNCSA-N Val-Pro-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N RYQUMYBMOJYYDK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 6
- 108010052670 arginyl-glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 6
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 6
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 6
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 6
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 6
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 108010048397 seryl-lysyl-leucine Proteins 0.000 description 6
- 108010026333 seryl-proline Proteins 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 5
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N Ala-Pro-Glu Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IORKCNUBHNIMKY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- BTRULDJUUVGRNE-DCAQKATOSA-N Ala-Pro-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O BTRULDJUUVGRNE-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N Ala-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O WNHNMKOFKCHKKD-BFHQHQDPSA-N 0.000 description 4
- ACRYGQFHAQHDSF-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asn-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ACRYGQFHAQHDSF-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- CTQIOCMSIJATNX-WHFBIAKZSA-N Asn-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CTQIOCMSIJATNX-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PHONXOACARQMPM-BQBZGAKWSA-N Gly-Ala-Met Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O PHONXOACARQMPM-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- WUFYAPWIHCUMLL-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WUFYAPWIHCUMLL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VOZIBWWZSBIXQN-SRVKXCTJSA-N Pro-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O VOZIBWWZSBIXQN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- RTXKJFWHEBTABY-IHPCNDPISA-N Ser-Trp-Tyr Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CC=C(C=C3)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N RTXKJFWHEBTABY-IHPCNDPISA-N 0.000 description 4
- YSXYEJWDHBCTDJ-DVJZZOLTSA-N Thr-Gly-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N)O YSXYEJWDHBCTDJ-DVJZZOLTSA-N 0.000 description 4
- WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N Thr-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N 0.000 description 4
- HYVLNORXQGKONN-NUTKFTJISA-N Trp-Ala-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 HYVLNORXQGKONN-NUTKFTJISA-N 0.000 description 4
- YVXIAOOYAKBAAI-SZMVWBNQSA-N Trp-Leu-Gln Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 YVXIAOOYAKBAAI-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 4
- MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N Tyr-Leu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O MVFQLSPDMMFCMW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- -1 diisocyanate compound Chemical class 0.000 description 4
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000001426 native polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 3
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- BGNLUHXLSAQYRQ-FXQIFTODSA-N Ala-Glu-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O BGNLUHXLSAQYRQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- HMRWQTHUDVXMGH-GUBZILKMSA-N Ala-Glu-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HMRWQTHUDVXMGH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- MDNAVFBZPROEHO-DCAQKATOSA-N Ala-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MDNAVFBZPROEHO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- XUCHENWTTBFODJ-FXQIFTODSA-N Ala-Met-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XUCHENWTTBFODJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- GKAZXNDATBWNBI-DCAQKATOSA-N Ala-Met-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N GKAZXNDATBWNBI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O YYAVDNKUWLAFCV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N Ala-Ser-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RTZCUEHYUQZIDE-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Ser Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N Arg-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- SWLOHUMCUDRTCL-ZLUOBGJFSA-N Asn-Ala-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N SWLOHUMCUDRTCL-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- PIWWUBYJNONVTJ-ZLUOBGJFSA-N Asn-Asp-Asn Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)C(=O)N PIWWUBYJNONVTJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- REQUGIWGOGSOEZ-ZLUOBGJFSA-N Asn-Ser-Asn Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N)C(=O)N REQUGIWGOGSOEZ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N Asp-Gly-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PGUYEUCYVNZGGV-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- KCOPOPKJRHVGPE-AQZXSJQPSA-N Asp-Thr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O KCOPOPKJRHVGPE-AQZXSJQPSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- LPYPANUXJGFMGV-FXQIFTODSA-N Gln-Gln-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N LPYPANUXJGFMGV-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- PKVWNYGXMNWJSI-CIUDSAMLSA-N Gln-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PKVWNYGXMNWJSI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- LWDGZZGWDMHBOF-FXQIFTODSA-N Gln-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O LWDGZZGWDMHBOF-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- WPJDPEOQUIXXOY-AVGNSLFASA-N Gln-Tyr-Asn Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O WPJDPEOQUIXXOY-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- WLIPTFCZLHCNFD-LPEHRKFASA-N Glu-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O WLIPTFCZLHCNFD-LPEHRKFASA-N 0.000 description 2
- NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N Glu-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N Glu-Trp-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N MIWJDJAMMKHUAR-ZVZYQTTQSA-N 0.000 description 2
- TTYVAUJGNMVTRN-GJZGRUSLSA-N Gly-Met-Trp Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)CN TTYVAUJGNMVTRN-GJZGRUSLSA-N 0.000 description 2
- IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N Gly-Ser-Trp Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)C(=O)O IMRNSEPSPFQNHF-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- SFOXOSKVTLDEDM-HOTGVXAUSA-N Gly-Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CN)=CNC2=C1 SFOXOSKVTLDEDM-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 2
- LKJCZEPXHOIAIW-HOTGVXAUSA-N Gly-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)CN LKJCZEPXHOIAIW-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 2
- MREVELMMFOLESM-HOCLYGCPSA-N Gly-Trp-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MREVELMMFOLESM-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 2
- HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N HA peptide Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 HVLSXIKZNLPZJJ-TXZCQADKSA-N 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- DLCXCECTCPKKCD-GUBZILKMSA-N Leu-Gln-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DLCXCECTCPKKCD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- OXRLYTYUXAQTHP-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OXRLYTYUXAQTHP-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N Lys-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O AAORVPFVUIHEAB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- GIKFNMZSGYAPEJ-HJGDQZAQSA-N Lys-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GIKFNMZSGYAPEJ-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- MDDUIRLQCYVRDO-NHCYSSNCSA-N Lys-Val-Asn Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN MDDUIRLQCYVRDO-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- SKICPQLTOXGWGO-GARJFASQSA-N Pro-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O SKICPQLTOXGWGO-GARJFASQSA-N 0.000 description 2
- LHALYDBUDCWMDY-CIUDSAMLSA-N Pro-Glu-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1)C(O)=O LHALYDBUDCWMDY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- UEHYFUCOGHWASA-HJGDQZAQSA-N Pro-Glu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 UEHYFUCOGHWASA-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 2
- WFIVLLFYUZZWOD-RHYQMDGZSA-N Pro-Lys-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WFIVLLFYUZZWOD-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- PCWLNNZTBJTZRN-AVGNSLFASA-N Pro-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 PCWLNNZTBJTZRN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- UGGWCAFQPKANMW-FXQIFTODSA-N Ser-Met-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O UGGWCAFQPKANMW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- JEDIEMIJYSRUBB-FOHZUACHSA-N Thr-Asp-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O JEDIEMIJYSRUBB-FOHZUACHSA-N 0.000 description 2
- GFRIEEKFXOVPIR-RHYQMDGZSA-N Thr-Pro-Lys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O GFRIEEKFXOVPIR-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 2
- LECUEEHKUFYOOV-ZJDVBMNYSA-N Thr-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O LECUEEHKUFYOOV-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 2
- JZSLIZLZGWOJBJ-PMVMPFDFSA-N Trp-Phe-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N JZSLIZLZGWOJBJ-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- PHKQVWWHRYUCJL-HJOGWXRNSA-N Tyr-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O PHKQVWWHRYUCJL-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 2
- LTTQCQRTSHJPPL-ZKWXMUAHSA-N Val-Ser-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N LTTQCQRTSHJPPL-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 2
- 108010040443 aspartyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001841 cholesterols Chemical class 0.000 description 2
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 108010000434 glycyl-alanyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- IQPQWNKOIGAROB-UHFFFAOYSA-N isocyanate group Chemical group [N-]=C=O IQPQWNKOIGAROB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YFVGRULMIQXYNE-UHFFFAOYSA-M lithium;dodecyl sulfate Chemical compound [Li+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O YFVGRULMIQXYNE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 2
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 2
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 2
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- 229940031767 13-valent pneumococcal conjugate vaccine Drugs 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 241000228431 Acremonium chrysogenum Species 0.000 description 1
- YLTKNGYYPIWKHZ-ACZMJKKPSA-N Ala-Ala-Glu Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O YLTKNGYYPIWKHZ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- MYRLSKYSMXNLLA-LAEOZQHASA-N Asn-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MYRLSKYSMXNLLA-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012619 Butyl Sepharose® Substances 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 241000186145 Corynebacterium ammoniagenes Species 0.000 description 1
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108700007698 Genetic Terminator Regions Proteins 0.000 description 1
- YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N Glu-Asn-Asp Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YKLNMGJYMNPBCP-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- FMBWLLMUPXTXFC-SDDRHHMPSA-N Glu-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O FMBWLLMUPXTXFC-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010029719 Nonspecific reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N Pro-Ala-Glu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IWNOFCGBMSFTBC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 241000607717 Serratia liquefaciens Species 0.000 description 1
- 241000187398 Streptomyces lividans Species 0.000 description 1
- 102400000368 Surface protein Human genes 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 229920002000 Xyloglucan Polymers 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011126 aluminium potassium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003366 endpoint assay Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 125000003916 ethylene diamine group Chemical class 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 239000005453 ketone based solvent Substances 0.000 description 1
- AIHDCSAXVMAMJH-GFBKWZILSA-N levan Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@](CO)(CO[C@@H]2[C@H]([C@H](O)[C@@](O)(CO)O2)O)O1 AIHDCSAXVMAMJH-GFBKWZILSA-N 0.000 description 1
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000016379 mucosal immune response Effects 0.000 description 1
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940031999 pneumococcal conjugate vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 229940050271 potassium alum Drugs 0.000 description 1
- GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J potassium aluminium sulfate Chemical compound [Al+3].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O GRLPQNLYRHEGIJ-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к антигенным пневмококковым белкам, и может быть использовано в медицине для вакцинирования против пневмококковой инфекции. Предложены происходящий из штамма Streptococcus pneumoniae D39 мутант пневмококкового поверхностного белка A (PspA) с заменой N254D, кодирующая его ДНК и вакцина, его содержащая. Изобретение обеспечивает получение мутанта PspA, который не подвергается дезаминированию и сохраняет стабильность в качестве молекулы даже около нейтрального интервала рН, при этом его антигенность и способность индуцировать нейтрализующее антитело не изменяется. 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 4 пр.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к пневмококковому поверхностному белку A (PspA) и к вакцине, содержащей PspA.
Предшествующий уровень техники
Пневмококк, как и вирус гриппа, представляет собой важный с клинической точки зрения заразный патоген верхних дыхательных путей, и он ассоциирован со средним отитом, пневмонией, бектеримией, менингитом и тому подобными. Пневмококк вызывает тяжелые заболевания, включая смерть как детей, так и взрослых.
В последние годы в качестве средства для защиты против инфекции, вызванной таким пневмококком, были разработаны 7-валентная, 10-валентная и 13-валентная полисахаридные пневмококковые конъюгатные вакцины (PCV7, PCV10 и PCV13) для взрослых, и они вводились пациентам посредством внутримышечной инъекции. Однако поскольку независимый от Т-клеток полисахарид в данных вакцинах на основе полисахаридов имеет низкую иммуногенность, вакцины на основе полисахаридов с трудом индуцируют иммунный ответ у детей и демонстрируют защитные эффекты только против пневмококков с капсульным серотипом. Кроме того, проблематичным является то, что, поскольку вакцины, введенные посредством внутримышечной инъекции, главным образом, индуцируют системные антитела против IgG, данные вакцины не могут индуцировать иммунный ответ слизистой на пневмококки.
Пневмококковый поверхностный белок A (PspA, от англ. pneumococcal surface protein А), существующий на поверхностном слое пневмококка, был известен как белок, имеющий высокую иммуногенность, и рассматривался как многообещающий кандидат вакцин (непатентная литература 1 и непатентная литература 2). PspA присутствует почти на всех типах пневмококков, и вакцины на основе PspA индуцируют антитела, провоцирующие перекрестные реакции у мышей и людей (непатентная литература 3 - непатентная литература 5). Кроме того, специфичные в отношении PspA антитела слизистой и системные антитела индуцируются у детенышей мышей (через организм матери) и взрослых мышей, и данная индукция антитела опосредуется ответом цитокинов Th1 и Th2 Т-кпеток CD4+. Вышеупомянутые данные свидетельствуют о том, что PspA может представлять собой кандидатную пневмококковую вакцину, эффективную не только для взрослых, но также и для детей.
PspA классифицируется на три семейства (т.е. семейства 1-3) и дополнительно классифицируется на шесть подгрупп, именуемых «клады» (т.е. клады 1-6). Среди них пневмококковый штамм, имеющий PspA, классифицируемый в семейство 1, составляет приблизительно 95% от ранее подтвержденных штаммов, и PspA, классифицируемый в семейство 1, является особенно важным в качестве кандидатной вакцины.
PspA, происходящий из штамма D39, известный в качестве универсального антигена пневмококка, представляет собой репрезентативный антиген вакцины, классифицированный в семейство 1, кладу 2. PspA, происходящий из штамма D39, имеет высокую антигенность и высокую способность индуцировать антитело, нейтрализующее пневмококк. Однако PspA, происходящий из штамма D39, легко дезаминировался около нейтрального интервала рН и был проблематичным в показателях безопасности.
Список цитирований Непатентная литература
Непатентная литература 1: Berry et al., Infect Immun 57: 2037-2042, 1989
Непатентная литература 2: McDaniel et al., J Exp Med 165: 381-394, 1987
Непатентная литература 3: Briles et al., Infect Immun 68: 796-800, 2000
Непатентная литература 4: Nguyen et al., Vaccine 29: 5731-5739, 2011
Непатентная литература 5: McCool et al., J Exp Med 195: 359-365, 2002
Краткое изложение сущности изобретения
Техническая проблема
Рассматривая вышеупомянутые обстоятельства, целью настоящего изобретения является предложение мутанта PspA, происходящего из D39, который не подвергается дезаминированию и сохраняет стабильность в качестве молекулы даже около нейтрального интервала рН.
Решение проблемы
Авторы настоящего изобретения проанализировали аминокислотные последовательности дезаминированного PspA, происходящего из D39, согласно способу МС/МС (тандемная масс-спектрометрия). В результате, авторы изобретения открыли, что мутация генерируется в одной аминокислоте PspA, происходящего из D39 дикого типа.
В отношении данного положения аминокислоты было выяснено, что только аспарагин (Asn) в положении 254 конкретно заменяется аспарагиновой кислотой (Asp) во всей аминокислотной последовательности зрелого PspA, происходящего из D39 дикого типа, как изложено в SEQ ID NO: 1. PspA (N254D), в котором в положении 254 зрелого PspA, происходящего из D39, наблюдается замена на аспарагиновую кислоту, является крайне стабильным, и его антигенность и способность индуцировать нейтрализующее антитело не изменяется. Кроме того, такое изменение аминокислоты не было обнаружено, например, в PspA пневмококкового штамма EF3296, принадлежащего к семейству 2, кладе 3, или в PspA пневмококкового штамма EF5668, принадлежащего к семейству 2, кладе 4.
На основе вышеупомянутых данных было осуществлено настоящее изобретение.
В частности, настоящее изобретение включает следующие (1)-(5).
(1) Белок из следующих (а) или (b):
(a) белок, содержащий аминокислотную последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 2, и имеющий антигенную активность пневмококковой вакцины, и белок, по существу идентичный данному белку; или
(b) белок, являющийся частью аминокислотной последовательности, как изложено в SEQ ID NO: 2, где аспарагиновая кислота в положении 254 содержится в данной части, и имеющий антигенную активность пневмококковой вакцины, и белок, являющийся по существу идентичным данному белку.
(2) Белок согласно (1) выше, где часть аминокислотной последовательности, как изложено в SEQ ID NO: 2, характеризуется тем, что она является областью α-спирали.
(3) Белок согласно (2) выше, где данный белок отличается тем, что он является полной аминокислотной последовательностью или частью аминокислотной последовательности, как изложено в SEQ ID NO: 3.
(4) ДНК, кодирующая белок по любому из (1)-(3) выше.
(5) Пневмококковая вакцина, содержащая белок по любому из (1)-(3) выше в качестве антигена или части антигена.
Преимущественные эффекты изобретения
Согласно настоящему изобретению антиген пневмококковой вакцины является стабильным в том виде, в котором предложена молекула. В частности, в процессе очистки в ионообменной хроматографии и т.д., проводящейся при продукции традиционного PspA фармацевтического уровня качества, происходящего из пневмококка D39, пик элюции в некоторых случаях делился на две части, и последний пик представлял собой дезаминированную форму. Антиген, предложенный настоящим изобретением, может демонстрировать, что может быть получен препарат, который является крайне стабильным в процессе очистки и в последующем состоянии консервации.
Краткое описание графических материалов
Фиг. 1 представляет собой изображение, схематически показывающее структуру белка PspA.
Фиг. 2 показывает результаты, полученные подтверждением молекулярного изменения PspA 1-3 с течением времени при заданных значениях рН (рН 6,5; рН 7,0; рН 7,5; рН 8,0 и рН 8,5) согласно PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле) в нативных условиях. А: маркер (500 мг); В: рН 7,0 (контроль в сутки 0); С: рН 6,5; D: рН 7,0; Е: рН 7,5; F: рН 8,0 и G: рН 8,5.
Фиг. 3 показывает результаты анализа с использованием пептидных карт PspA 1-3 и PspA 1-3 LB. Стрелка показывает пик, специфично генерированный в PspA 1-3 LB.
Фиг. 4 демонстрирует результаты, полученные сравнением эффектов назальной вакцины на основе наногеля с использованием PspA 1-3 LB, с эффектами назальных вакцин на основе наногеля с использованием других антигенов PspA.
Описание воплощений
Согласно настоящему изобретению предложен белок, который сохраняет антигенность и способность индуцировать нейтрализующее антитело, которые являются эквивалентным антигенности и способности белка PspA, происходящего из D39 дикого типа, и он является превосходящим белок PspA, происходящий из D39 дикого типа, в показателях стабильности в виде молекулы (например, невероятность мутации аминокислоты и т.д.) (именуемый далее «белок PspA по настоящему изобретению»).
То есть, первое воплощение настоящего изобретения относится к белку PspA по настоящему изобретению, который представляет собой белок из следующих (а) или (b):
(a) белок, содержащий аминокислотную последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 2, и имеющий антигенную активность пневмококковой вакцины, и белок, по существу идентичный данному белку; или
(b) белок, являющийся частью аминокислотной последовательности, как изложено в SEQ ID NO: 2, в котором аспарагиновая кислота в положении 254 содержится в данной части, и имеющий антигенную активность пневмококковой вакцины, и белок, по существу идентичный данному белку.
Настоящий белок PspA содержит сигнальную последовательность (например, положения аминокислот 1-31 №доступа GenBank: ABJ54172 (происходящий из штамма D39)) и область α-спирали (например, положения аминокислот 32-319 № доступа GenBank: ABJ54172), пролинбогатую область (например, положения аминокислот 320-402 № доступа GenBank: ABJ54172), холинсвязывающую область и С-концевую хвостовую область, с его N-концевой стороны (см. Фиг. 1). Сигнальная последовательность отщепляется с образованием зрелого PspA (который состоит из области α-спирали, пролинбогатой области, холинсвязывающей области и С-концевой хвостовой области).
В одном воплощении настоящего изобретения «антигенная активность пневмококковой вакцины» означает активность, индуцирующую иммунитет (гуморальный иммунитет и/или кпеточноопосредованный иммунитет) для защиты живого организма от атаки пневмококком. Имеет ли или нет определенный белок «антигенную активность пневмококковой вакцины» может быть легко подтверждено специалистом в данной области (например, это может быть подтверждено способом, описанным в «4. Трансназальная иммунизация мышей» в Примерах).
Термин «белок», использованный в (а) выше, означает «белок, содержащий аминокислотную последовательность, как изложено в SEQ ID NO: 2, и имеющий антигенную активность пневмококковой вакцины», тогда как термин «белок», использованный в (b) выше, означает «белок, являющийся частью аминокислотной последовательности, как изложено в SEQ ID NO: 2, в котором аспарагиновая кислота в положении 254 содержится в данной части, и имеет антигенную активность пневмококковой вакцины».
В одном воплощении настоящего изобретения фраза «белок, по существу идентичный данному белку» означает белок, состоящий из аминокислотной последовательности, содержащей делецию (исключая аспарагиновую кислоту в положении 254), замену (исключая аспарагиновую кислоту в положении 254), вставку или присоединение одной или нескольких аминокислот (предпочтительно примерно от 1 до 30, более предпочтительно примерно от 1 до 10 и, кроме того, предпочтительно от 1 до 5 аминокислот) в аминокислотной последовательности «белка», как описано выше, где «белок» имеет активность в качестве антигена пневмококковой вакцины.
Иначе в одном воплощении настоящего изобретения фраза «белок, по существу идентичный данному белку» означает белок, содержащий аминокислотную последовательность, имеющую идентичность аминокислот приблизительно 60% или больше, предпочтительно 70% или больше, более предпочтительно приблизительно 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97% или 98% и наиболее предпочтительно приблизительно 99% относительно аминокислотной последовательности «белка», как описано выше, где аминокислота в положении 254 представляет собой аспарагиновую кислоту, и «белок» имеет активность в качестве антигена пневмококковой вакцины.
Фраза «часть аминокислотной последовательности, как изложено в SEQ ID NO: 2», использованная в (b) выше, предпочтительно означает область, например, содержащую часть или всю область α-спирали (содержащую аспарагиновую кислоту в положении 254) и часть или всю пролинбогатую область, и, например, может представлять собой белок, состоящий из аминокислот, как изложено в SEQ ID NO: 3.
Второе воплощение настоящего изобретения относится к нуклеиновой кислоте (ДНК и т.д.), кодирующей «белок PspA по настоящему изобретению». Белок PspA по настоящему изобретению может быть приготовлен получением нуклеиновой кислоты, кодирующей саму себя из библиотеки кДНК или тому подобных, включением данной нуклеиновой кислоты в подходящий экспрессионный вектор, трансформацией или трансфекцией подходящих клеток-хозяев экспрессионным вектором и затем культивированием данных клеток-хозяев в подходящей среде таким образом, что обеспечивается экспрессия данными клетками белка PspA по настоящему изобретению, который затем очищается.
Примеры клеток-хозяев, которые могут использоваться в данном документе для экспрессии белка PspA, могут включать бактериальные клетки (например, штамм В Escherichia coli, штамм KI2 Е. coli, Corynebacterium ammoniagenes, С. glutamicum, Serratia liquefaciens, Streptomyces lividans, Pseudomonas putida и т.д.), плесени (например, Peniciliium camembertii, Acremonium chrysogenum и т.д.), животные клетки, растительные клетки, клетки насекомых/бакуловирус и клетки дрожжей (например, Saccharomyces cerevisiae и Pichia pastoris и т.д.). Белок PspA может экспрессироваться в данных клетках.
В качестве экспрессионного вектора для осуществления экспрессии белка PspA можно использовать подходящий вектор для разных типов клеток-хозяев. Примеры такого экспрессионного вектора, который можно использовать в данном документе, могут включать: pBR322, pBR325, pUC118 или рЕТ (хозяева Escherichia coli); pEGF-C и pEGF-N (хозяева животные клетки); pVL1392 и pVL1393 (хозяева клетки насекомых, бакуловирусные векторы); и pG-1, Yep13 или pPICZ (хозяева дрожжевые клетки). Данные экспрессионные векторы имеют репликатор, селективный маркер и промотор, которые являются подходящими для индивидуальных векторов, и также могут иметь, по мере необходимости, энхансер, последовательность терминатора транскрипции (терминатор), сайт связывания рибосомы, сигнал полиаденилирования и тому подобное. Кроме того, для того, чтобы облегчать очистку экспрессируемого полипептида, в экспрессионный вектор может быть вставлена нуклеотидная последовательность для слияния метки FLAG, His метки и метки НА, метки GST и тому подобных и осуществления их экспрессии.
Такой экспрессионный вектор может быть получен способом, известным специалисту в данной области, и можно использовать имеющийся в продаже набор, сообразно обстоятельствам.
При экстракции экспрессируемого белка PspA из культивируемой клеточной массы или культивируемых клеток такую клеточную массу или культивируемые клетки отбирают известным способом после завершения культивирования, и данную клеточную массу или культивируемые клетки затем суспендируют в подходящем буферном растворе. Затем клеточную массу или культивируемые клетки разрушают, например, ультразвуком, лизоцимом и/или замораживанием-оттаиванием, и затем получают растворимый экстракт центрифугированием или фильтрованием. В частности, при использовании культивируемых клеток в качестве хозяев желательно применяют способ получения белка PspA, экспрессируемого в супернатанте культуры, посредством выделения супернатанта. Интересующий белок можно получать из полученного экстракта или супернатанта культуры посредством объединения подходящим образом известных способов разделения/очистки друг с другом. Примеры известных способов разделения/очистки могут включать: способы с применением растворимости, такие как высаливание и способ осаждения растворителем; способы, главным образом, с использованием различия в молекулярной массе, такие как способ диализа, способ ультрафильтрации, способ гель-фильтрации и SDS-PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия); способы с применением различия в электрическом заряде, такие как ионообменная хроматография; способы с применением специфической аффинности, такие как аффинная хроматография (например, смола, в которой глутатиону дают связываться с носителем, используется в случае, где полипептиду дают экспрессироваться совместно с меткой GST; смола Ni-NTA или смола на основе Со используется в случае, где полипептиду дают экспрессироваться совместно с His меткой; смола на основе антитела против НА используется в случае, где полипептиду дают экспрессироваться совместно с меткой НА; и смола, связывающаяся с антителом против FLAG, или тому подобная используется в случае, где полипептиду дают экспрессироваться совместно с меткой FLAG); способы применения разницы в гидрофобности, такие как высокоэффективная жидкостная хроматография с обращенной фазой; и способы с применением разницы в изоэлектрической точке, такие как способ изоэлектрофокусировки.
Третье воплощение настоящего изобретения относится к вакцине для подавления инфекции, вызванной пневмококками, содержащей белок PspA по настоящему изобретению в качестве антигена (также именуемой далее «пневмококковая вакцина по настоящему изобретению»).
Белок PspA по настоящему изобретению, содержащийся в пневмококковой вакцине по настоящему изобретению, может содержаться один. Однако настоящий белок PspA также может содержаться в настоящей пневмококковой вакцине в виде слияния с целым или с частью белка PspA, отличного от белка PspA по настоящему изобретению (включая белок PspA, принадлежащий к отличному семейству и/или другой кладе) (см., например, WO 2018102774 и т.д.).
Пневмококковая вакцина по настоящему изобретению может содержать один или несколько типов адъювантов, таких как, например, полный адъювант Фрейнда или неполный адъювант Фрейнда, холерный токсин, термолабильный токсин Е. coli, гидроксид алюминия, калиевые квасцы, сапонин или его производное, мурамилдипептид, минеральное масло или растительное масло, новасом или неионный блоксополимер и DEAE декстран. Кроме того, пневмококковая вакцина по настоящему изобретению также может содержать фармацевтически приемлемый носитель. Такой фармацевтически приемлемый носитель должен быть соединением, которое не влияет на здоровье животного, подлежащего вакцинации. Фармацевтически приемлемый носитель представляет собой, например, стерилизованную воду или буфер.
Пневмококковая вакцина по настоящему изобретению может вводиться согласно обычному способу активной иммунизации. Настоящая пневмококковая вакцина может вводиться либо посредством инъекции, либо способом через слизистую, таким как пероральное или трансназальное введение. Кроме того, пневмококковая вакцина может вводиться один раз или много раз, в эффективном количестве для предупреждения или лечения пневмококковой инфекции (т.е. в достаточном количестве для индуцирования иммунитета для атаки пневмококков в живом организме) согласно подходящему способу для лекарственной формы. Данная пневмококковая вакцина может вводиться посредством внутрикожного, подкожного, внутримышечного, внутрибрюшинного, внутривенного, перорального введения или введения через слизистую (введение в нос или подъязычное введение). Кроме того, пневмококковая вакцина по настоящему изобретению также может использоваться смешанной с другими антигенными компонентами.
Доза и число доз настоящей пневмококковой вакцины может изменяться, в зависимости от субъекта введения. Пневмококковая вакцина, содержащая несколько десятков мкг антигена, вводится субъекту несколько раз с частотой от одного раза в неделю до одного раза в несколько недель, таким образом, что она может индуцировать защитный иммунитет субъекта.
Кроме того, пневмококковая вакцина по настоящему изобретению может содержать наногель таким образом, что она становится подходящей для введения через нос. В одном воплощении настоящего изобретения термин «наногель» используется для обозначения полимерных гелевых наночастиц, в которые добавляют гидрофобный холестерин в качестве боковой цепи гидрофильного полисахарида (например, пуллулана). Такой наногель можно получать согласно известному способу, такому как способ, описанный, например, в международной публикации WO 2000/012564.
В частности, во-первых, углеводороду, содержащему гидроксильную группу, имеющему от 12 до 50 атомов углерода, или стерину дают взаимодействовать с диизоцианатным соединением, представленным OCN-R1 NCO (где представляет углеводородную группу, имеющую от 1 до 50 атомов углерода), с получением гидрофобного соединения, содержащего изоцианатную группу, с которой взаимодействует одна молекула углеводорода, содержащего гидроксильную группу, имеющего от 12 до 50 атомов углерода, или стерин. Полученному гидрофобному соединению, содержащему изоцианатную группу, дают взаимодействовать с полисахаридом с получением полисахарида, содержащего гидрофобную группу, содержащую углеводородную группу, имеющую от 12 до 50 атомов углерода или стерильную группу. Затем полученный продукт очищают в растворителе на основе кетона с получением полисахарида, содержащего гидрофобную группу, с высокой чистотой.
В качестве полисахарида в данном документе может использоваться пуллулан, амилопектин, амилоза, декстран, гидроксиэтилдекстран, маннан, леван, инулин, хитин, хитозан, ксилоглюкан, водорастворимая целлюлоза и т.д., и пуллулан является особенно предпочтительным.
Примеры наногеля, используемого в третьем воплощении настоящего изобретения, могут включать пуллулан, несущий катионную холестерильную группу (именуемый как «сСНР») и его производное. сСНР имеет структуру, в которой 1-10 холестеринов, предпочтительно один-несколько холестеринов участвуют в замещении на 100 моносахаридов в пуллулане, имеющем молекулярную массу от 30000 до 200000, например, имеющем молекулярную массу 100000. Кроме того, сСНР, используемый в настоящем изобретении, может быть заряжен, сообразно обстоятельствам, в показателях количества замещенных холестеринов, в зависимости от размера антигена или степени гидрофобности. Кроме того, для того чтобы изменить степень гидрофобности СНР, к СНР может быть добавлена алкильная группа (имеющая приблизительно от 10 до 30, предпочтительно от 12 до 20 атомов углерода). Наногель, используемый в настоящем изобретении, имеет диаметр частиц от 10 до 40 нм и предпочтительно от 20 до 30 нм. Наногели уже широко распространились на рынке, и также можно использовать такие имеющиеся в продаже наногелевые продукты.
Наногель, используемый в воплощении настоящего изобретения, представляет собой наногель, в который вводится функциональная группа, имеющая положительный заряд, такая как, например, аминогруппа, таким образом, что вакцина может вторгаться в поверхность отрицательно заряженной слизистой носа. В качестве способа введения аминогруппы в наногель можно применять способ с использованием холестеринпуллулана с добавленной аминогруппой (CHPNH2). В частности, СНР, высушенный при пониженном давлении, растворяют в диметилсульфоксиде (DMSO), и затем добавляют к полученному раствору под током воздуха с азотом 1,1'-карбонилдиимидазол, с последующим проведением реакции при комнатной температуре в течение нескольких часов. Затем в реакционный раствор постепенно добавляется этилендиамин, и полученную смесь затем перемешивают в течение нескольких часов - нескольких десятков часов. Полученный реакционный раствор диализируют против дистиллированной воды в течение нескольких суток. После завершения диализа данный реакционный раствор лиофилизируют с получением опалесцентного твердого вещества. Степень замещения этилендиамина может оцениваться с использованием анализа элементов, Н-ЯМР (Н-ядерный магнитный резонанс) и т.д.
Пневмококковая вакцина по настоящему изобретению может содержать фармацевтически приемлемые известные стабилизаторы, антисептики, антиоксиданты и т.д. Данные стабилизаторы могут включать желатин, декстран и сорбит. Данные антисептики могут включать тиомерсал и β-пропиолактон. Данный антиоксидант может представлять собой α-токоферол.
Четвертое воплощение настоящего изобретения относится к способу предупреждения инфекционных заболеваний, вызванных пневмококками, включающему введение пациенту пневмококковой вакцины по настоящему изобретению.
В данном документе термин «предупреждать» означает, что у пациента, который может быть инфицирован пневмококком, инфекция предупреждается ранее и, посредством этого, предупреждение представляет собой обработку с целью предупреждения ранее начала пневмококковой инфекции.
Раскрытия всех публикаций, процитированных в настоящем описании, включаются в данный документ посредством ссылки во всей их полноте. Кроме того, когда перевод настоящего описания включает термины в единственном числе, данные термины включают не только предметы в единственном числе, но также предметы во множественном числе, если из контекста явно не определяется иное.
Ниже настоящее изобретение будет дополнительно описываться в следующих примерах. Однако данные примеры являются лишь иллюстративными примерами воплощений настоящего изобретения и, таким образом, не подразумевают ограничение объема настоящего изобретения.
Примеры
1. Нативный PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле)
Экспрессионной системе Escherichia coli и т.д. давали экспрессировать разные типы белков PspA, а именно PspA 1-1 (SEQ ID NO: 5), PspA 1-2 (SEQ ID NO: 6), PspA 1-3 (SEQ ID NO: 4) и PspA 1-3 LB (SEQ ID NO: 3) (см. WO2018102774 относительно подробностей). Экспрессируемые белки PspA экстрагировали согласно обычному неденатурирующему способу и очищали согласно LDS (додецилсульфат лития)-РАСЕ с использованием ионообменной хроматографии, бутилсефарозы и тому подобного, пока они не становились гомогенными.
Во-первых, молекулы PspA 1-3 суспендировали в 2 мг/мл PBS немедленно после очистки и затем доводили до заданных значений рН (рН 6,5; рН 7,0; рН 8,0 и рН 8,5) с использованием 0,5 М NaH2PO4 или 0,5 М Na2HP4, с последующей консервацией при 25°С в течение заданного периода времени (в течение 1 суток, 2 суток и 5 суток). С использованием 10 мкл (1,0 мкг/полосу) каждого образца проводили электрофорез с использованием нативного PAGE при 200 В в течение 60 минут, и затем осуществляли окрашивание кумасси синим (BioRad). Кроме того, используемый в данном документе гель представлял собой 7,5% Mini-Protein TGX Gel 12 well (BioRad), используемый в данном документе раствор для обработки представлял собой буфер для нативных образцов для белковых гелей (BioRad), и используемый в данном документе электрофорезный буфер представлял собой 10х предварительно смешанный электрофорезный буфер (BioRad).
Посредством осуществления обработки при данных условиях в LDS-PAGE все образцы демонстрировали одну полосу, и кажущаяся молекулярная масса не изменялась (данные не показаны), тогда как при нативном PAGE формировалась полоса с высокой подвижностью через 5 суток после завершения обработки, независимо от рН (стрелка на Фиг. 2). Белок, соответствующий данной полосе, был определен как PspA 1-3 LB. Хотя данные и не показаны, это явление наблюдали в PspA 1-1 и PspA 1-2 сразу после очистки. С другой стороны, данное явление не наблюдали в PspA 2 (полученном из штамма EF3296) и PspA 3 (полученном из штамма EF5668). Таким образом, считается, что данное явление конкретно происходит у PspA, происходящего из пневмококкового штамма D39.
2. Пептидная карта
Для того чтобы определять молекулярное изменение от PspA 1-3 до PspA 1-3 LB добавляли 10 мкг трипсина (Sigma, уровень качества для секвенирования) к PspA 1-3 и PspA 1-3 LB (по 0,5 мг/мл каждого) сразу после очистки таким образом, что обработку расщеплением проводили при 37°С в течение 24 часов при рН 8,5, и затем 50 мкл обработанного образца вводили в систему ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) с обращенной фазой (Waters С18, 1,7 мкм, 2,1×100 мм). Таким образом, анализ проводили при температуре разделения 50°С посредством 110 мин элюции линейным градиентом 0,1% TFA (100%) и 0,1% TFA - 40% ацетонитрил (55%) при скорости 0,2 мл/мин и 220 нм (выявление).
В результате выявляли пик с другим временем элюции (Фиг. 3). Следовательно, настоящий пик фракционировали и затем подвергали анализу N-конца с использованием секвенатора белка PPSQ-21A (Shimadzu). В результате в PspA 1-3 LB наблюдали последовательность AAEENDNVE (SEQ ID NO: 7). Данные результаты свидетельствовали о том, что в аминокислотной последовательности PspA 1-3 LB вероятно случалось бы специфичное дезаминирование.
3. Дезаминирование аминокислотной последовательности PspA 1-3 LB
Затем для анализа всей аминокислотной последовательности PspA 1-3 LB осуществляли такое же расщепление трипсином, что и описанное в п. 2 выше, и затем проводили анализ последовательности с использованием ЖХ-МС/МС (СВЭЖХ (сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография) HPLC acquity (Waters: С4, 1,7 мкм, 2,1×100 мм) - MS: Orbitrap Fusion Tribrid (Thermo) MS1: Orbitrap, MS2: ионная ловушка.
В результате идентифицировали последовательность из 208 аминокислотных остатков (69%) в 302 аминокислотных остатка, и также был проведен полный анализ МС (интактная форма: 33569,03 и одна дезаминированная форма: 33569,93). Поскольку полученные значения согласовались с индивидуальными теоретическими значениями, было сделано заключение о том, что возможность появления отличного от N254D дезаминирования была крайне низкой.
4. Трансназальная иммунизация мышей
4-1. Способ
4-1-1. Образование наногеля, содержащего антиген (получение вакцины) Наногель сСНР и каждый белок PspA (PspA 1-1, PspA 1-2, PspA 1-3 и PspA 1-3 LB) смешивали друг с другом в молярном соотношении 1:1, и полученную смесь затем инкубировали с использованием термоблока при 40°С в течение 1 часа.
4-1-2. Трансназальная иммунизация мышей
Каждый раствор cCHP-PspA трансназально вводили 7-недельным самкам мышей Balb/c. В отношении одной дозы антигена, введенного на мышь, каждой мыши вводили 10 мкг антигена в показателях количества каждого белка PspA. Такую трансназальную иммунизацию проводили всего три раза с интервалами 1 неделя.
4-1-3. Получение образцов сыворотки от иммунизированных мышей
Для того чтобы измерять PspA-специфичный IgG в сыворотке, который увеличивался через 1 неделю после последней иммунизации, из глазничных вен иммунизированных мышей отбирали кровь. Отобранный образец крови центрифугировали при 4°С при 7000 об./мин, и затем выделяли супернатант и использовали в качестве образца сыворотки.
4-1-4. Измерение антигенспецифичного IgG
Планшет ELISA покрывали каждым антигеном до конечной концентрации 1 мкг/мл, и после завершения реакции, осуществляемой в течение ночи, промывали лунки. Для того чтобы избегать неспецифичной реакции, лунки блокировали PBS (фосфатно-солевой буферный раствор), содержащим 1% BSA (бычий сыворотчный альбумин), при 25°С в течение 1 часа и дополнительно промывали. Затем образцы сыворотки получали серийным разведением от 28, и каждый из полученного таким образом образца сыворотки добавляли в лунки с последующим проведением реакции при 25°С в течение 2 часов. После этого лунки промывали, затем добавляли в лунки антитело против мышиного IgG, меченое HRP (пероксидаза хрена), с последующим проведением реакции при 25°С в течение 1,5 часа. После дополнительной промывки добавляли раствор ТМВ (3,3',5,5'-тетраметилбензидин) в качестве субстрата HRP для развития окрашивания. Сразу после завершения реакции с 2 н. серной кислотой измеряли поглощение (450 нм) с использованием микропланшет-ридера, и титр антител затем рассчитывали согласно анализу конечной точки.
4-1. Результаты
Обнаружили, что посредством трансназального введения cCHP-PspA 1-1, cCHP-PspA 1-2, cCHP-PspA 1-3 или cCHP-PspA 1-3 LB мышам в сыворотке мышей индуцировался IgG, специфичный к каждому антигену. Кроме того, не было большого различия среди индивидуальных антигенов PspA (Фиг. 4).
Промышленная применимость
Пневмококковый поверхностный белок по настоящему изобретению и его часть можно использовать в качестве антигена пневмококковой вакцины.
Соответственно, ожидается, что настоящее изобретение будет использоваться в области предупредительной медицины в отношении инфекционных заболеваний.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> The University of Tokyo
HanaVax Inc.
<120> ПНЕВМОКОККОВЫЙ ПОВЕРХНОСТНЫЙ БЕЛОК А
<130> TPRU0403UVT
<150> JP2019- 65362
<151> 2019-03-29
<160> 7
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 588
<212> Белок
<213> Streptococcus pneumoniae
<400> 1
Glu Glu Ser Pro Val Ala Ser Gln Ser Lys Ala Glu Lys Asp Tyr Asp
1 5 10 15
Ala Ala Lys Lys Asp Ala Lys Asn Ala Lys Lys Ala Val Glu Asp Ala
20 25 30
Gln Lys Ala Leu Asp Asp Ala Lys Ala Ala Gln Lys Lys Tyr Asp Glu
35 40 45
Asp Gln Lys Lys Thr Glu Glu Lys Ala Ala Leu Glu Lys Ala Ala Ser
50 55 60
Glu Glu Met Asp Lys Ala Val Ala Ala Val Gln Gln Ala Tyr Leu Ala
65 70 75 80
Tyr Gln Gln Ala Thr Asp Lys Ala Ala Lys Asp Ala Ala Asp Lys Met
85 90 95
Ile Asp Glu Ala Lys Lys Arg Glu Glu Glu Ala Lys Thr Lys Phe Asn
100 105 110
Thr Val Arg Ala Met Val Val Pro Glu Pro Glu Gln Leu Ala Glu Thr
115 120 125
Lys Lys Lys Ser Glu Glu Ala Lys Gln Lys Ala Pro Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Lys Leu Glu Glu Ala Lys Ala Lys Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Ala
145 150 155 160
Thr Glu Ala Lys Gln Lys Val Asp Ala Glu Glu Val Ala Pro Gln Ala
165 170 175
Lys Ile Ala Glu Leu Glu Asn Gln Val His Arg Leu Glu Gln Glu Leu
180 185 190
Lys Glu Ile Asp Glu Ser Glu Ser Glu Asp Tyr Ala Lys Glu Gly Phe
195 200 205
Arg Ala Pro Leu Gln Ser Lys Leu Asp Ala Lys Lys Ala Lys Leu Ser
210 215 220
Lys Leu Glu Glu Leu Ser Asp Lys Ile Asp Glu Leu Asp Ala Glu Ile
225 230 235 240
Ala Lys Leu Glu Asp Gln Leu Lys Ala Ala Glu Glu Asn Asn Asn Val
245 250 255
Glu Asp Tyr Phe Lys Glu Gly Leu Glu Lys Thr Ile Ala Ala Lys Lys
260 265 270
Ala Glu Leu Glu Lys Thr Glu Ala Asp Leu Lys Lys Ala Val Asn Glu
275 280 285
Pro Glu Lys Pro Ala Pro Ala Pro Glu Thr Pro Ala Pro Glu Ala Pro
290 295 300
Ala Glu Gln Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro Gln Pro Ala Pro Ala Pro
305 310 315 320
Lys Pro Glu Lys Pro Ala Glu Gln Pro Lys Pro Glu Lys Thr Asp Asp
325 330 335
Gln Gln Ala Glu Glu Asp Tyr Ala Arg Arg Ser Glu Glu Glu Tyr Asn
340 345 350
Arg Leu Thr Gln Gln Gln Pro Pro Lys Ala Glu Lys Pro Ala Pro Ala
355 360 365
Pro Lys Thr Gly Trp Lys Gln Glu Asn Gly Met Trp Tyr Phe Tyr Asn
370 375 380
Thr Asp Gly Ser Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Asn Asn Gly Ser Trp
385 390 395 400
Tyr Tyr Leu Asn Ser Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Tyr
405 410 415
Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly
420 425 430
Trp Ala Lys Val Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala
435 440 445
Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Tyr Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn
450 455 460
Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly Trp Ala Lys Val Asn Gly Ser Trp
465 470 475 480
Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Tyr
485 490 495
Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly
500 505 510
Trp Ala Lys Val Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala
515 520 525
Met Ala Thr Gly Trp Val Lys Asp Gly Asp Thr Trp Tyr Tyr Leu Glu
530 535 540
Ala Ser Gly Ala Met Lys Ala Ser Gln Trp Phe Lys Val Ser Asp Lys
545 550 555 560
Trp Tyr Tyr Val Asn Gly Leu Gly Ala Leu Ala Val Asn Thr Thr Val
565 570 575
Asp Gly Tyr Lys Val Asn Ala Asn Gly Glu Trp Val
580 585
<210> 2
<211> 588
<212> Белок
<213> Streptococcus pneumoniae
<400> 2
Glu Glu Ser Pro Val Ala Ser Gln Ser Lys Ala Glu Lys Asp Tyr Asp
1 5 10 15
Ala Ala Lys Lys Asp Ala Lys Asn Ala Lys Lys Ala Val Glu Asp Ala
20 25 30
Gln Lys Ala Leu Asp Asp Ala Lys Ala Ala Gln Lys Lys Tyr Asp Glu
35 40 45
Asp Gln Lys Lys Thr Glu Glu Lys Ala Ala Leu Glu Lys Ala Ala Ser
50 55 60
Glu Glu Met Asp Lys Ala Val Ala Ala Val Gln Gln Ala Tyr Leu Ala
65 70 75 80
Tyr Gln Gln Ala Thr Asp Lys Ala Ala Lys Asp Ala Ala Asp Lys Met
85 90 95
Ile Asp Glu Ala Lys Lys Arg Glu Glu Glu Ala Lys Thr Lys Phe Asn
100 105 110
Thr Val Arg Ala Met Val Val Pro Glu Pro Glu Gln Leu Ala Glu Thr
115 120 125
Lys Lys Lys Ser Glu Glu Ala Lys Gln Lys Ala Pro Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Lys Leu Glu Glu Ala Lys Ala Lys Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Ala
145 150 155 160
Thr Glu Ala Lys Gln Lys Val Asp Ala Glu Glu Val Ala Pro Gln Ala
165 170 175
Lys Ile Ala Glu Leu Glu Asn Gln Val His Arg Leu Glu Gln Glu Leu
180 185 190
Lys Glu Ile Asp Glu Ser Glu Ser Glu Asp Tyr Ala Lys Glu Gly Phe
195 200 205
Arg Ala Pro Leu Gln Ser Lys Leu Asp Ala Lys Lys Ala Lys Leu Ser
210 215 220
Lys Leu Glu Glu Leu Ser Asp Lys Ile Asp Glu Leu Asp Ala Glu Ile
225 230 235 240
Ala Lys Leu Glu Asp Gln Leu Lys Ala Ala Glu Glu Asn Asp Asn Val
245 250 255
Glu Asp Tyr Phe Lys Glu Gly Leu Glu Lys Thr Ile Ala Ala Lys Lys
260 265 270
Ala Glu Leu Glu Lys Thr Glu Ala Asp Leu Lys Lys Ala Val Asn Glu
275 280 285
Pro Glu Lys Pro Ala Pro Ala Pro Glu Thr Pro Ala Pro Glu Ala Pro
290 295 300
Ala Glu Gln Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro Gln Pro Ala Pro Ala Pro
305 310 315 320
Lys Pro Glu Lys Pro Ala Glu Gln Pro Lys Pro Glu Lys Thr Asp Asp
325 330 335
Gln Gln Ala Glu Glu Asp Tyr Ala Arg Arg Ser Glu Glu Glu Tyr Asn
340 345 350
Arg Leu Thr Gln Gln Gln Pro Pro Lys Ala Glu Lys Pro Ala Pro Ala
355 360 365
Pro Lys Thr Gly Trp Lys Gln Glu Asn Gly Met Trp Tyr Phe Tyr Asn
370 375 380
Thr Asp Gly Ser Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Asn Asn Gly Ser Trp
385 390 395 400
Tyr Tyr Leu Asn Ser Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Tyr
405 410 415
Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly
420 425 430
Trp Ala Lys Val Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala
435 440 445
Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Tyr Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn
450 455 460
Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly Trp Ala Lys Val Asn Gly Ser Trp
465 470 475 480
Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly Trp Leu Gln Tyr
485 490 495
Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala Met Ala Thr Gly
500 505 510
Trp Ala Lys Val Asn Gly Ser Trp Tyr Tyr Leu Asn Ala Asn Gly Ala
515 520 525
Met Ala Thr Gly Trp Val Lys Asp Gly Asp Thr Trp Tyr Tyr Leu Glu
530 535 540
Ala Ser Gly Ala Met Lys Ala Ser Gln Trp Phe Lys Val Ser Asp Lys
545 550 555 560
Trp Tyr Tyr Val Asn Gly Leu Gly Ala Leu Ala Val Asn Thr Thr Val
565 570 575
Asp Gly Tyr Lys Val Asn Ala Asn Gly Glu Trp Val
580 585
<210> 3
<211> 302
<212> Белок
<213> Streptococcus pneumoniae
<400> 3
Glu Glu Ser Pro Val Ala Ser Gln Ser Lys Ala Glu Lys Asp Tyr Asp
1 5 10 15
Ala Ala Lys Lys Asp Ala Lys Asn Ala Lys Lys Ala Val Glu Asp Ala
20 25 30
Gln Lys Ala Leu Asp Asp Ala Lys Ala Ala Gln Lys Lys Tyr Asp Glu
35 40 45
Asp Gln Lys Lys Thr Glu Glu Lys Ala Ala Leu Glu Lys Ala Ala Ser
50 55 60
Glu Glu Met Asp Lys Ala Val Ala Ala Val Gln Gln Ala Tyr Leu Ala
65 70 75 80
Tyr Gln Gln Ala Thr Asp Lys Ala Ala Lys Asp Ala Ala Asp Lys Met
85 90 95
Ile Asp Glu Ala Lys Lys Arg Glu Glu Glu Ala Lys Thr Lys Phe Asn
100 105 110
Thr Val Arg Ala Met Val Val Pro Glu Pro Glu Gln Leu Ala Glu Thr
115 120 125
Lys Lys Lys Ser Glu Glu Ala Lys Gln Lys Ala Pro Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Lys Leu Glu Glu Ala Lys Ala Lys Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Ala
145 150 155 160
Thr Glu Ala Lys Gln Lys Val Asp Ala Glu Glu Val Ala Pro Gln Ala
165 170 175
Lys Ile Ala Glu Leu Glu Asn Gln Val His Arg Leu Glu Gln Glu Leu
180 185 190
Lys Glu Ile Asp Glu Ser Glu Ser Glu Asp Tyr Ala Lys Glu Gly Phe
195 200 205
Arg Ala Pro Leu Gln Ser Lys Leu Asp Ala Lys Lys Ala Lys Leu Ser
210 215 220
Lys Leu Glu Glu Leu Ser Asp Lys Ile Asp Glu Leu Asp Ala Glu Ile
225 230 235 240
Ala Lys Leu Glu Asp Gln Leu Lys Ala Ala Glu Glu Asn Asp Asn Val
245 250 255
Glu Asp Tyr Phe Lys Glu Gly Leu Glu Lys Thr Ile Ala Ala Lys Lys
260 265 270
Ala Glu Leu Glu Lys Thr Glu Ala Asp Leu Lys Lys Ala Val Asn Glu
275 280 285
Pro Glu Lys Pro Ala Pro Ala Pro Glu Thr Pro Ala Pro Glu
290 295 300
<210> 4
<211> 302
<212> Белок
<213> Streptococcus pneumoniae
<400> 4
Glu Glu Ser Pro Val Ala Ser Gln Ser Lys Ala Glu Lys Asp Tyr Asp
1 5 10 15
Ala Ala Lys Lys Asp Ala Lys Asn Ala Lys Lys Ala Val Glu Asp Ala
20 25 30
Gln Lys Ala Leu Asp Asp Ala Lys Ala Ala Gln Lys Lys Tyr Asp Glu
35 40 45
Asp Gln Lys Lys Thr Glu Glu Lys Ala Ala Leu Glu Lys Ala Ala Ser
50 55 60
Glu Glu Met Asp Lys Ala Val Ala Ala Val Gln Gln Ala Tyr Leu Ala
65 70 75 80
Tyr Gln Gln Ala Thr Asp Lys Ala Ala Lys Asp Ala Ala Asp Lys Met
85 90 95
Ile Asp Glu Ala Lys Lys Arg Glu Glu Glu Ala Lys Thr Lys Phe Asn
100 105 110
Thr Val Arg Ala Met Val Val Pro Glu Pro Glu Gln Leu Ala Glu Thr
115 120 125
Lys Lys Lys Ser Glu Glu Ala Lys Gln Lys Ala Pro Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Lys Leu Glu Glu Ala Lys Ala Lys Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Ala
145 150 155 160
Thr Glu Ala Lys Gln Lys Val Asp Ala Glu Glu Val Ala Pro Gln Ala
165 170 175
Lys Ile Ala Glu Leu Glu Asn Gln Val His Arg Leu Glu Gln Glu Leu
180 185 190
Lys Glu Ile Asp Glu Ser Glu Ser Glu Asp Tyr Ala Lys Glu Gly Phe
195 200 205
Arg Ala Pro Leu Gln Ser Lys Leu Asp Ala Lys Lys Ala Lys Leu Ser
210 215 220
Lys Leu Glu Glu Leu Ser Asp Lys Ile Asp Glu Leu Asp Ala Glu Ile
225 230 235 240
Ala Lys Leu Glu Asp Gln Leu Lys Ala Ala Glu Glu Asn Asn Asn Val
245 250 255
Glu Asp Tyr Phe Lys Glu Gly Leu Glu Lys Thr Ile Ala Ala Lys Lys
260 265 270
Ala Glu Leu Glu Lys Thr Glu Ala Asp Leu Lys Lys Ala Val Asn Glu
275 280 285
Pro Glu Lys Pro Ala Pro Ala Pro Glu Thr Pro Ala Pro Glu
290 295 300
<210> 5
<211> 384
<212> Белок
<213> Streptococcus pneumoniae
<400> 5
Glu Glu Ser Pro Val Ala Ser Gln Ser Lys Ala Glu Lys Asp Tyr Asp
1 5 10 15
Ala Ala Lys Lys Asp Ala Lys Asn Ala Lys Lys Ala Val Glu Asp Ala
20 25 30
Gln Lys Ala Leu Asp Asp Ala Lys Ala Ala Gln Lys Lys Tyr Asp Glu
35 40 45
Asp Gln Lys Lys Thr Glu Glu Lys Ala Ala Leu Glu Lys Ala Ala Ser
50 55 60
Glu Glu Met Asp Lys Ala Val Ala Ala Val Gln Gln Ala Tyr Leu Ala
65 70 75 80
Tyr Gln Gln Ala Thr Asp Lys Ala Ala Lys Asp Ala Ala Asp Lys Met
85 90 95
Ile Asp Glu Ala Lys Lys Arg Glu Glu Glu Ala Lys Thr Lys Phe Asn
100 105 110
Thr Val Arg Ala Met Val Val Pro Glu Pro Glu Gln Leu Ala Glu Thr
115 120 125
Lys Lys Lys Ser Glu Glu Ala Lys Gln Lys Ala Pro Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Lys Leu Glu Glu Ala Lys Ala Lys Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Ala
145 150 155 160
Thr Glu Ala Lys Gln Lys Val Asp Ala Glu Glu Val Ala Pro Gln Ala
165 170 175
Lys Ile Ala Glu Leu Glu Asn Gln Val His Arg Leu Glu Gln Glu Leu
180 185 190
Lys Glu Ile Asp Glu Ser Glu Ser Glu Asp Tyr Ala Lys Glu Gly Phe
195 200 205
Arg Ala Pro Leu Gln Ser Lys Leu Asp Ala Lys Lys Ala Lys Leu Ser
210 215 220
Lys Leu Glu Glu Leu Ser Asp Lys Ile Asp Glu Leu Asp Ala Glu Ile
225 230 235 240
Ala Lys Leu Glu Asp Gln Leu Lys Ala Ala Glu Glu Asn Asn Asn Val
245 250 255
Glu Asp Tyr Phe Lys Glu Gly Leu Glu Lys Thr Ile Ala Ala Lys Lys
260 265 270
Ala Glu Leu Glu Lys Thr Glu Ala Asp Leu Lys Lys Ala Val Asn Glu
275 280 285
Pro Glu Thr Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro
290 295 300
Ala Pro Ala Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro
305 310 315 320
Lys Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Ala Pro
325 330 335
Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro
340 345 350
Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Glu Lys
355 360 365
Pro Ala Glu Lys Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Glu Thr Pro Lys Thr
370 375 380
<210> 6
<211> 356
<212> Белок
<213> Streptococcus pneumoniae
<400> 6
Glu Glu Ser Pro Val Ala Ser Gln Ser Lys Ala Glu Lys Asp Tyr Asp
1 5 10 15
Ala Ala Lys Lys Asp Ala Lys Asn Ala Lys Lys Ala Val Glu Asp Ala
20 25 30
Gln Lys Ala Leu Asp Asp Ala Lys Ala Ala Gln Lys Lys Tyr Asp Glu
35 40 45
Asp Gln Lys Lys Thr Glu Glu Lys Ala Ala Leu Glu Lys Ala Ala Ser
50 55 60
Glu Glu Met Asp Lys Ala Val Ala Ala Val Gln Gln Ala Tyr Leu Ala
65 70 75 80
Tyr Gln Gln Ala Thr Asp Lys Ala Ala Lys Asp Ala Ala Asp Lys Met
85 90 95
Ile Asp Glu Ala Lys Lys Arg Glu Glu Glu Ala Lys Thr Lys Phe Asn
100 105 110
Thr Val Arg Ala Met Val Val Pro Glu Pro Glu Gln Leu Ala Glu Thr
115 120 125
Lys Lys Lys Ser Glu Glu Ala Lys Gln Lys Ala Pro Glu Leu Thr Lys
130 135 140
Lys Leu Glu Glu Ala Lys Ala Lys Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Ala
145 150 155 160
Thr Glu Ala Lys Gln Lys Val Asp Ala Glu Glu Val Ala Pro Gln Ala
165 170 175
Lys Ile Ala Glu Leu Glu Asn Gln Val His Arg Leu Glu Gln Glu Leu
180 185 190
Lys Glu Ile Asp Glu Ser Glu Ser Glu Asp Tyr Ala Lys Glu Gly Phe
195 200 205
Arg Ala Pro Leu Gln Ser Lys Leu Asp Ala Lys Lys Ala Lys Leu Ser
210 215 220
Lys Leu Glu Glu Leu Ser Asp Lys Ile Asp Glu Leu Asp Ala Glu Ile
225 230 235 240
Ala Lys Leu Glu Asp Gln Leu Lys Ala Ala Glu Glu Asn Asn Asn Val
245 250 255
Glu Asp Tyr Phe Lys Glu Gly Leu Glu Lys Thr Ile Ala Ala Lys Lys
260 265 270
Ala Glu Leu Glu Lys Thr Glu Ala Asp Leu Lys Lys Ala Val Asn Glu
275 280 285
Pro Glu Thr Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro
290 295 300
Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro
305 310 315 320
Ala Pro Ala Pro Lys Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro
325 330 335
Lys Pro Glu Lys Pro Ala Glu Lys Pro Ala Pro Ala Pro Lys Pro Glu
340 345 350
Thr Pro Lys Thr
355
<210> 7
<211> 9
<212> Белок
<213> Streptococcus pneumoniae
<400> 7
Ala Ala Glu Glu Asn Asp Asn Val Glu
1 5
<---
Claims (5)
1. Белок, имеющий антигенную активность пневмококковой вакцины, по следующим (а) или (b):
(а) белок, имеющий аминокислотную последовательность как изложено в SEQ ID NO: 3; или
(b) белок, имеющий аминокислотную последовательность, идентичную (а) по аминокислотам на 90% или более, где аминокислота, соответствующая положению 254 в SEQ ID NO: 3, является аспарагиновой кислотой.
2. ДНК, кодирующая белок по п.1.
3. Пневмококковая вакцина, содержащая эффективное количество белка по п.1 в качестве антигена и фармацевтически приемлемый носитель.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2019-065362 | 2019-03-29 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2021130034A RU2021130034A (ru) | 2023-05-02 |
| RU2818278C2 true RU2818278C2 (ru) | 2024-04-27 |
Family
ID=
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2087156C1 (ru) * | 1995-06-22 | 1997-08-20 | Леонид Николаевич Падюков | Вакцина против пневмококковой инфекции |
| WO2014045621A1 (ja) * | 2012-09-19 | 2014-03-27 | 国立大学法人大阪大学 | 肺炎球菌表面タンパク質ａを含む肺炎球菌ワクチン |
| WO2018102774A2 (en) * | 2016-12-03 | 2018-06-07 | The Uab Research Foundation | Pneumococcal vaccine combining selected alpha helical domains and proline rich domains of pneumococcal surface protein a |
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2087156C1 (ru) * | 1995-06-22 | 1997-08-20 | Леонид Николаевич Падюков | Вакцина против пневмококковой инфекции |
| WO2014045621A1 (ja) * | 2012-09-19 | 2014-03-27 | 国立大学法人大阪大学 | 肺炎球菌表面タンパク質ａを含む肺炎球菌ワクチン |
| WO2018102774A2 (en) * | 2016-12-03 | 2018-06-07 | The Uab Research Foundation | Pneumococcal vaccine combining selected alpha helical domains and proline rich domains of pneumococcal surface protein a |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ANEZ G. et al., Passage of dengue virus type 4 vaccine candidates in fetal rhesus lung cells selects heparin-sensitive variants that result in loss of infectivity and immunogenicity in rhesus macaques, Journal of virology, 2009, v. 83, n. 20, p.10384-10394. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5327873B2 (ja) | リコンビナントヘリコバクターピロリの経口ワクチン及びその調製方法 | |
| JP3883569B2 (ja) | 呼吸器多核体ウイルスプロテインｇのペプチド断片、免疫原的薬剤、それを含む医薬組成物、および製造法 | |
| Schorr et al. | Surface expression of malarial antigens in Salmonella typhimurium: induction of serum antibody response upon oral vaccination of mice | |
| JP2002541808A (ja) | ポリサッカリド結合体ワクチンのための組換えトキシンａタンパク質キャリア | |
| US20100316665A1 (en) | Papaya mosaic virus-based vaccines against salmonella typhi and other enterobacterial pathogens | |
| CA2022420C (en) | Escherichia coli vaccine | |
| ES2367128T3 (es) | Procedimiento para preparar una variante del antígeno protector de superficie de erysipelothrix rhusiopathiae en e. coli. | |
| CN111961138B (zh) | 疫苗融合蛋白 | |
| HU211031B (en) | Method for preparation of actinobacillus pleuropneumoniae vaccine | |
| CA2931570A1 (en) | Proline-rich peptides protective against s. pneumoniae | |
| WO2010064243A1 (en) | GLUTAMYL tRNA SYNTHETASE (GtS) FRAGMENTS | |
| CA1341334C (en) | Synthetic peptides from streptococcal m protein and vaccines prepared therefrom | |
| Shivachandra et al. | Immunogenicity of recombinant Omp16 protein of Pasteurella multocida B: 2 in mouse model | |
| KR20210146392A (ko) | 침습 플라스미드 항원 b의 최적화된 무세포 합성 및 관련 조성물 및 사용 방법 | |
| RU2818278C2 (ru) | Пневмококковые поверхностные белки | |
| CN108339115B (zh) | 使用重组载体蛋白的肺炎球菌联合疫苗及其制备方法 | |
| US20220160860A1 (en) | Pneumococcal surface proteins | |
| IE60324B1 (en) | Vaccine against e. coli septicaemia in poultry | |
| JP2023503058A (ja) | ヘモフィルス・パラスイスに対する新規ワクチン | |
| JP2023503057A (ja) | ヘモフィルス・パラスイスに対する新規ワクチン | |
| JP2003535147A (ja) | 遊離形態でｆｈａタンパク質又はそのフラグメントを含むアジュバント組成物 | |
| RU2794625C2 (ru) | Пневмококковая вакцина, сочетающая выбранные альфа-спиральные домены и богатые пролином домены пневмококкового поверхностного белка а | |
| RU2775621C2 (ru) | Иммуногенный пептид против стрептококков группы а | |
| CA2961883A1 (en) | Combined enterotoxigenic escherichia coli and campylobacter jejuni recombinant construct | |
| JP2002539169A (ja) | アジュバント効果を有する細菌膜分画 |