RU2812863C2

RU2812863C2 - Способы лечения гемофилии a

Info

Publication number: RU2812863C2
Application number: RU2020141586A
Authority: RU
Inventors: Элисон ИННЕС; Суреш КАТРАГАДДА; Кара РАЙС; Дэн РУДИН; Экта СЕТХ ЧХАБРА; Нэнси ВОНГ
Original assignee: Байоверетив Терапьютикс Инк.
Priority date: 2018-05-18
Filing date: 2019-05-17
Publication date: 2024-02-05

Abstract

Группа изобретений относится к биотехнологии. Представлены способ лечения и способ профилактического лечения гемофилии A у субъекта, предусматривающий введение субъекту химерного полипептида, содержащего белок фактора VIII (FVIII) и белок фактора фон Виллебранда (VWF). При этом химерный полипептид вводится внутривенно в одной или более дозах, составляющих от 45 МЕ/кг до 55 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере 7 дней, где полипептид FVIII связан с фрагментом VWF с помощью ковалентной связи. Изобретение используется для лечения тяжелой формы гемофилии A у субъекта. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 6 ил., 19 табл., 3 пр.

Description

ССЫЛКА НА ПРИОРИТЕТНЫЕ ЗАЯВКИ

[01] Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на патент США № 62/673670, поданной 18 мая 2018 года, предварительной заявке на патент США № 62/712880, поданной 31 июля 2018 года, предварительной заявке на патент США № 62/773785, поданной 30 ноября 2018 года, и предварительной заявке на патент США № 62/801576, поданной 5 февраля 2019 года, каждая из которых включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

ССЫЛКА НА ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ, ПОДАННЫЙ В ЭЛЕКТРОННОМ ВИДЕ

[02] Содержание перечня последовательностей, поданного в электронном виде в виде текстового файла в формате ASCII (название: SA9-461PC_SeqListing.txt; размер: 922 килобайт; дата создания: 14 мая 2019 г.), включено в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[03] Гемофилия A представляет собой нарушение свертываемости крови, вызванное дефектами гена, кодирующего фактор коагуляции VIII (FVIII), и поражает 1-2 из 10000 новорожденных мальчиков. Graw et al., Nat. Rev. Genet. 6(6): 488-501 (2005). Пациентов, страдающих гемофилией А, можно подвергать лечению посредством инфузий очищенного или полученного рекомбинантным путем FVIII. Известно, что многие коммерчески доступные продукты FVIII характеризуются периодом полужизни приблизительно 8-12 часов, что требует частого внутривенного введения пациентам. См. Weiner M.A. and Cairo, M.S., Pediatric Hematology Secrets, Lee, M.T., 12. Disorders of Coagulation, Elsevier Health Sciences, 2001; Lillicrap, D. Thromb. Res. 122 Suppl 4:S2-8 (2008). Кроме того, был опробован ряд подходов для продления периода полужизни FVIII. Например, разрабатываемые подходы для продления периода полужизни факторов свертывания крови включают пегилирование, гликопегилирование и конъюгирование с альбумином. См. Dumont et al., Blood. 119(13): 3024-3030 (2012). Достоверные результаты были продемонстрированы у людей, например, сообщалось, что rFVIIIFc улучшает период полужизни в до ~1,7 раза по сравнению с ADVATE^® у пациентов с гемофилией А. См. Powell et al., Blood. 119(13): 3031-3037 (2012). Следовательно, увеличение периода полужизни, несмотря на незначительные улучшения, указывает на присутствие других факторов, ограничивающих период полужизни. См. Liu, T. et al., 2007 ISTH meeting, abstract #P-M-035; Henrik, A. et al., 2011 ISTH meeting, abstract #P=MO-181; Liu, T. et al., 2011 ISTH meeting abstract #P-WE-131.

[04] Текущий рекомендуемый стандарт лечения включает регулярное введение FVIII (обычную профилактику) для минимизации количества эпизодов кровотечения. Было установлено, что обычная профилактика связана с улучшением долгосрочных исходов, но она представляет собой сложный режим, ограниченный необходимостью частого внутривенного (IV) введения. См. Manco-Johnson et al., N Engl J Med. 357(6):535-44 (2007). Продукты с продленным периодом полужизни FVIII обеспечивали снижение частоты введения FVIII для профилактики; однако все они взаимодействуют с фактором фон Виллебранда (VWF) и имеют сравнимые периоды полужизни в кровотоке, что соответствует верхнему пределу периода полужизни вариантов rFVIII, обусловленному периодом полужизни эндогенного VWF. См., например, Pipe et al., Blood. 128(16):2007-16 (2016). Профилактическое введение доз этих продуктов FVIII осуществляется каждые 3-5 дней.

[05] Продукты с продленным периодом полужизни FVIII следующего поколения, которые обеспечивают предупреждение и контроль эпизодов кровотечения в течение более длительных периодов времени, что приводит к менее частому введению, потенциально могут решить проблемы соблюдения сложных профилактических режимов, что, в свою очередь, может улучшить качество жизни пациентов с гемофилией.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[06] Определенные аспекты настоящего изобретения относятся к способу лечения гемофилии А у субъекта-человека, нуждающегося в этом, предусматривающему введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белковый фактор VIII (FVIII) и (ii) фрагмент фактора фон Виллебранда (VWF), содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней.

[07] В некоторых вариантах осуществления несколько доз предусматривают по меньшей мере две дозы, по меньшей мере три дозы, по меньшей мере четыре дозы, по меньшей мере пять доз, по меньшей мере шесть доз, по меньшей мере семь доз, по меньшей мере восемь доз, по меньшей мере девять доз, по меньшей мере десять доз, по меньшей мере одиннадцать доз, по меньшей мере двенадцать доз, по меньшей мере тринадцать доз, по меньшей мере четырнадцать доз, по меньшей мере пятнадцать доз, по меньшей мере шестнадцать доз, по меньшей мере семнадцать доз, по меньшей мере восемнадцать доз, по меньшей мере девятнадцать доз, по меньшей мере двадцать доз или больше.

[08] В некоторых вариантах осуществления лечение гемофилии А предусматривает контроль или уменьшение встречаемости или частоты эпизодов кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах осуществления лечение гемофилии А предусматривает предупреждение или лечение эпизода кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом.

[09] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 95 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 90 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 85 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 60 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 55 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 50 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 45 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 40 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 35 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 30 МЕ/кг или от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 30 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 35 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 40 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 45 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 55 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 70 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 75 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 80 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 85 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг или от приблизительно 90 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг.

[010] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг, от приблизительно 30 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг, от приблизительно 35 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, от приблизительно 40 МЕ/кг до приблизительно 60 МЕ/кг или от приблизительно 45 МЕ/кг до приблизительно 55 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг.

[011] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 20 МЕ/кг, приблизительно 25 МЕ/кг, приблизительно 30 МЕ/кг, приблизительно 35 МЕ/кг, приблизительно 40 МЕ/кг, приблизительно 45 МЕ/кг, приблизительно 50 МЕ/кг, приблизительно 55 МЕ/кг, приблизительно 60 МЕ/кг, приблизительно 65 МЕ/кг, приблизительно 70 МЕ/кг, приблизительно 75 МЕ/кг, приблизительно 80 МЕ/кг, приблизительно 85 МЕ/кг, приблизительно 90 МЕ/кг, приблизительно 95 МЕ/кг или приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг.

[012] В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней, по меньшей мере приблизительно 6 дней, по меньшей мере приблизительно 7 дней, по меньшей мере приблизительно 8 дней, по меньшей мере приблизительно 9 дней, по меньшей мере приблизительно 10 дней, по меньшей мере приблизительно 11 дней, по меньшей мере приблизительно 12 дней, по меньшей мере приблизительно 13 дней, по меньшей мере приблизительно 14 дней, по меньшей мере приблизительно 15 дней, по меньшей мере приблизительно 16 дней, по меньшей мере приблизительно 17 дней, по меньшей мере приблизительно 18 дней, по меньшей мере приблизительно 19 дней, по меньшей мере приблизительно 20 дней, по меньшей мере приблизительно 21 день, по меньшей мере приблизительно 22 дня, по меньшей мере приблизительно 23 дня, по меньшей мере приблизительно 24 дня, по меньшей мере приблизительно 25 дней, по меньшей мере приблизительно 26 дней, по меньшей мере приблизительно 27 дней, по меньшей мере приблизительно 28 дней, по меньшей мере приблизительно 29 дней, по меньшей мере приблизительно 30 дней или по меньшей мере приблизительно 31 день.

[013] В некоторых вариантах осуществления частота введения доз составляет по меньшей мере один раз в неделю, по меньшей мере один раз в 2 недели, по меньшей мере один раз в 3 недели или по меньшей мере один раз в 4 недели. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере одну неделю. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере две недели.

[014] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводят для профилактического лечения.

[015] В некоторых вариантах осуществления белок FVIII связан с фрагментом VWF с помощью ковалентной связи. В некоторых вариантах осуществления ковалентная связь представляет собой пептидную связь или дисульфидную связь.

[016] В некоторых вариантах осуществления белок FVIII содержит полипептид FVIII и первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом или N-концом полипептида FVIII. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в полипептид FVIII. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в домен B полипептида FVIII. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в полипептид FVIII непосредственно ниже аминокислоты, соответствующей аминокислотному остатку 745 в SEQ ID NO: 65. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с полипептидом FVIII с помощью линкера.

[017] В некоторых вариантах осуществления фрагмент VWF содержит второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни. В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом или N-концом фрагмента VWF. В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен во фрагмент VWF. В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом фрагмента VWF. В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с фрагментом VWF с помощью линкера.

[018] В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, или они оба выбраны из группы, состоящей из альбумина, Fc-области иммуноглобулина, последовательности XTEN, C-концевого пептида (CTP) β-субъединицы хорионического гонадотропина человека, последовательности PAS, последовательности HAP, трансферрина, альбуминсвязывающих компонентов или любых их фрагментов, производных, вариантов и любой их комбинации.

[019] В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, содержит первый XTEN.

[020] В некоторых вариантах осуществления первый XTEN вставлен в полипептид FVIII непосредственно ниже аминокислоты, соответствующей аминокислотному остатку 745 в SEQ ID NO: 65.

[021] В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, содержит второй XTEN. В некоторых вариантах осуществления второй XTEN слит с С-концом фрагмента VWF.

[022] В некоторых вариантах осуществления белок FVIII содержит константную область первого иммуноглобулина (Ig) или ее часть. В некоторых вариантах осуществления первая константная область Ig или ее часть слита с С-концом или N-концом полипептида FVIII. В некоторых вариантах осуществления первая константная область Ig или ее часть вставлена в полипептид FVIII. В некоторых вариантах осуществления первая константная область Ig или ее часть слита с С-концом полипептида FVIII. В некоторых вариантах осуществления первая константная область Ig или ее часть слита с полипептидом FVIII с помощью линкера. В некоторых вариантах осуществления первая константная область Ig или ее часть содержит первый Fc-домен или его часть.

[023] В некоторых вариантах осуществления фрагмент VWF содержит вторую константную область Ig или ее часть. В некоторых вариантах осуществления вторая константная область Ig или ее часть слита с С-концом или N-концом фрагмента VWF. В некоторых вариантах осуществления вторая константная область Ig или ее часть вставлена во фрагмент VWF. В некоторых вариантах осуществления вторая константная область Ig или ее часть слита с С-концом фрагмента VWF. В некоторых вариантах осуществления вторая константная область Ig или ее часть слита с фрагментом VWF с помощью линкера. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой расщепляемый линкер. В некоторых вариантах осуществления вторая константная область Ig или ее часть содержит первый Fc-домен или его часть.

[024] В некоторых вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF связаны друг с другом посредством ковалентной связи между первым Fc-доменом и вторым Fc-доменом. В некоторых вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF дополнительно связаны друг с другом посредством нековалентного взаимодействия между белком FVIII и фрагментом VWF.

[025] В одном аспекте в данном документе раскрыт способ лечения гемофилии А у субъекта-человека, предусматривающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, нескольких доз химерного полипептида с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид содержит: (i) белок FVIII, содержащий первый фрагмент полипептида FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 215; первую последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8 (AE288); второй фрагмент полипептида FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 216; и первую Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217; и (ii) белок VWF, содержащий: домен D' VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 210; домен D3 VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 214; вторую последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 58 (AE144_5A); линкер а2, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 88; и вторую Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217, и где первая Fc-область ковалентно соединена со второй Fc-областью с помощью дисульфидной связи.

[026] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, содержащий полипептид FVIII, первую последовательность XTEN, первую Fc-область, и белок VWF, содержащий домен D' VWF, домен D3 VWF, вторую последовательность XTEN, линкер a2 FVIII и вторую Fc-область, где полипептид FVIII содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 215, первая последовательность XTEN содержит аминокислотную последовательность AE288 (SEQ ID NO: 8) и слита с С-концом SEQ ID NO: 215, указанный полипептид FVIII дополнительно содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 216; первая Fc-область содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217 и слита с С-концом SEQ ID NO: 216; домен D' VWF содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 210; домен D3 VWF содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 214, вторая последовательность XTEN содержит аминокислотную последовательность AE144_5A (SEQ ID NO: 58) и слита с С-концом домена D3 VWF; линкер a2 содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 88 и слит с С-концом второй последовательности XTEN; вторая Fc-область содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217 и слита с С-концом линкера a2; и где первая Fc-область ковалентно соединена со второй Fc-областью с помощью дисульфидной связи.

[027] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, содержащий сигнальный пептид FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 64. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит белок VWF, содержащий сигнальный пептид VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 208. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит белок VWF, содержащий домен D1D2 VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 209.

[028] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 203 или SEQ ID NO: 207; и белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную SEQ ID NO: 202 или SEQ ID NO: 205.

[029] В одном варианте осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 203, и белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 205. В другом варианте осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 201, и белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 202. В другом варианте осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 207, и белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 202.

[030] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную последовательности, выбранной из FVIII-161 (SEQ ID NO: 69), FVIII-169 (SEQ ID NO: 70), FVIII-170 (SEQ ID NO: 71), FVIII-173 (SEQ ID NO: 72); FVIII-195 (SEQ ID NO: 73); FVIII-196 (SEQ ID NO: 74), FVIII199 (SEQ ID NO: 75), FVIII-201 (SEQ ID NO: 76); FVIII-203 (SEQ ID NO: 77), FVIII-204 (SEQ ID NO: 78), FVIII-205 (SEQ ID NO: 79), FVIII-266 (SEQ ID NO: 80), FVIII-267 (SEQ ID NO: 81), FVIII-268 (SEQ ID NO: 82), FVIII-269 (SEQ ID NO: 83), FVIII-271 (SEQ ID NO: 84), FVIII-272 (SEQ ID NO: 85), FVIII-312 (SEQ ID NO: 173) или FVIII-312A (SEQ ID NO: 203); и белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную последовательности, выбранной из VWF031 (SEQ ID NO: 86), VWF034 (SEQ ID NO: 87), VWF059 (SEQ ID NO: 197), VWF059A (SEQ ID NO: 202) или VWF036.

[031] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводят посредством пути, выбранного из группы, состоящей из внутривенной инъекции, внутривенной инфузии, подкожного введения, внутримышечного введения, перорального введения, назального введения и легочного введения.

[032] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид после введения приводит к уровню активности FVIII в плазме крови, составляющему по меньшей мере приблизительно 1%, по меньшей мере приблизительно 2%, по меньшей мере приблизительно 3%, по меньшей мере приблизительно 4%, по меньшей мере приблизительно 5%, по меньшей мере приблизительно 6%, по меньшей мере приблизительно 7%, по меньшей мере приблизительно 8%, по меньшей мере приблизительно 9% или по меньшей мере приблизительно 10%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5%.

[033] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид после введения приводит к уровню активности FVIII в плазме крови, составляющему по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 2 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 3 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 4 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 6 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 7 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 8 МЕ/дл, по меньшей мере приблизительно 9 МЕ/дл или по меньшей мере приблизительно 10 МЕ/дл. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3 МЕ/дл. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл.

[034] В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 10 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 5 дней после введения химерного полипептида. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 7 дней после введения химерного полипептида. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 8 дней после введения химерного полипептида. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл через по меньшей мере приблизительно 10 дней после введения химерного полипептида.

[035] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней.

[036] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления несколько доз составляют приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет приблизительно 5 дней. В некоторых вариантах осуществления несколько доз составляют приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет приблизительно 7 дней. В некоторых вариантах осуществления несколько доз составляют приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет приблизительно 14 дней.

[037] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней.

[038] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней.

[039] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней.

[040] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 1 неделю. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 1 неделю. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 1 неделю.

[041] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 2 недели. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 2 недели. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 2 недели.

[042] В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет от приблизительно 5 дней до приблизительно 14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет от приблизительно 7 дней до приблизительно 14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет от приблизительно 10 дней до приблизительно 21 дня. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет от приблизительно 14 дней до приблизительно 21 дня. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет приблизительно 14 дней.

[043] В некоторых вариантах осуществления субъект-человек является женщиной. В некоторых вариантах осуществления субъект-человек является ребенком. В некоторых вариантах осуществления субъект-человек является ребенком в возрасте, равном приблизительно 12 лет или меньше, в возрасте менее чем приблизительно 11 лет, в возрасте менее чем приблизительно 10 лет, в возрасте менее чем приблизительно 9 лет, в возрасте менее чем приблизительно 8 лет, в возрасте менее чем приблизительно 7 лет, в возрасте менее чем приблизительно 6 лет, в возрасте менее чем приблизительно 5 лет, в возрасте менее чем приблизительно 4 года, в возрасте менее чем приблизительно 3 года, в возрасте менее чем приблизительно 2 года или в возрасте менее чем приблизительно 1 год.

[044] В некоторых вариантах осуществления введение приводит к индукции иммунной толерантности к FVIII у субъекта-человека. В некоторых вариантах осуществления введение приводит к ослаблению ингибирующего иммунного ответа на FVIII у человека. В некоторых вариантах осуществления ингибирующий иммунный ответ на FVIII предусматривает высокий титр антител к FVIII у субъекта-человека.

[045] В некоторых вариантах осуществления введение химерного полипептида не приводит к индукции образования ингибитора FVIII после приблизительно 7 дней, приблизительно 10 дней, приблизительно 11 дней, приблизительно 12 дней, приблизительно 13 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 15 дней, приблизительно 20 дней, приблизительно 24 дней, приблизительно 25 дней, приблизительно 28 дней, приблизительно 30 дней или приблизительно 35 дней введения. В некоторых вариантах осуществления введение химерного полипептида не приводит к индукции образования ингибитора FVIII после приблизительно 28 дней введения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ/ФИГУР

[046] Фиг. 1 представляет собой схематическое изображение rFVIIIFc-VWF-XTEN. FVIII: фактор VIII; VWF: фактор фон Виллебранда; A1, A2, A3, C1, C2: домены FVIII; D'D3: домены VWF; Fc: Fc-область константной области иммуноглобулина.

[047] На фиг. 2A и 2B показан протокол тестирования безопасности и эффективности rFVIIIFc-VWF-XTEN у пациентов-людей в когорте с низкой дозой, которым вводили 25 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN (фиг. 2A), и в когорте с высокой дозой, которым вводили 65 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN (фиг. 2B).

[048] Фиг. 3A-3B представляют собой графические изображения уровней активности FVIII с поправкой на исходный уровень на основании теста активированного частичного тромбопластинового времени (aPTT) у субъектов-людей с тяжелой формой гемофилии А, которым вводили 25 МЕ/кг rFVIII с последующим периодом отмывки, а затем 25 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN (фиг. 3A; когорта с низкой дозой) или 65 МЕ/кг rFVIII с последующим периодом отмывки и затем 65 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN (фиг. 3B; когорта с высокой дозой). Горизонтальные пунктирные линии указывают на 3%, 5%, 10% и 20% активность FVIII.

[049] Фиг. 4 представляет собой схематическое изображение плана клинического исследования для оценки безопасности и переносимости в общей сложности четырех еженедельных доз rFVIIIFc-VWF-XTEN в дозе 50 МЕ/кг или 65 МЕ/кг у взрослых пациентов-мужчин, ранее получавших лечение (PTP), в возрасте от 18 до 65 лет (включительно) с тяжелой формой гемофилии A. EOS=окончание исследования; ET=досрочное прекращение; PK=фармакокинетические показатели.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[050] Настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания или состояния, связанного с кровотечением, например, гемофилии A, у субъекта-человека, нуждающегося в этом, предусматривающему введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) полипептидный фактор VIII (FVIII) и (ii) фрагмент фактора фон Виллебранда (VWF), содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней.

I. Определения

[051] Следует отметить, что форма единственного числа объекта относится к одному или нескольким таким объектам; например, под "нуклеотидной последовательностью" понимают одну или несколько нуклеотидных последовательностей. В связи с этим формы единственного числа, термины "один или несколько" и "по меньшей мере один" могут использоваться в данном документе взаимозаменяемо.

[052] Кроме того, "и/или" при использовании в данном документе следует понимать как конкретное раскрытие каждого из двух указанных признаков или компонентов с другим или без него. Таким образом, подразумевается, что термин "и/или", используемый в данном документе в такой фразе, как "А и/или В", включает "А и В", "А или В", "А" (отдельно) и "В" (отдельно). Аналогично, подразумевается, что термин "и/или", используемый в такой фразе, как "А, В и/или С", охватывает каждый из следующих аспектов: A, B и C; A, B или C; A или C; A или B; B или C; A и C; A и B; B и C; A (отдельно); B (отдельно) и C (отдельно).

[053] Следует понимать, что во всех случаях, когда аспекты описываются в данном документе с формулировкой "содержащий", также предусмотрены другие аналогичные аспекты, описываемые терминами "состоящий из" и/или "состоящий по сути из".

[054] Если не определено иное, то все используемые в данном документе технические и научные термины имеют то же значение, которое обычно понимает средний специалист в области техники, к которой относится настоящее изобретение. Например, Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press и Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press обеспечивают специалиста общим словарем многих терминов, используемых в настоящем раскрытии.

[055] Единицы измерения, приставки и символы обозначены в их форме, принятой согласно Международной системе единиц (SI). Числовые диапазоны включают числа, определяющие диапазон. Если не указано иное, аминокислотные последовательности записаны слева направо в направлении от амино- к карбокси-концу. Приведенные в данном документе заголовки не являются ограничением различных аспектов настоящего изобретения. Соответственно, термины, определенные непосредственно ниже, более полно определяются посредством ссылки на настоящее описание во всей его полноте.

[056] Термин "приблизительно" используется в данном документе в значении примерно, порядка, около или ориентировочно. Если термин "приблизительно" используется в сочетании с числовым диапазоном, то он модифицирует данный диапазон, расширяя границы выше и ниже изложенных числовых значений. В целом, термин "приблизительно" может модифицировать числовое значение, делая его большим или меньшим заявленного значения, с отклонением, например, на 10 процентов, вверх или вниз (выше или ниже).

[057] Подразумевается, что термин "полинуклеотид" или "нуклеотид" охватывает нуклеиновую кислоту в единственном числе, а также нуклеиновые кислоты во множественном числе и относится к выделенной молекуле или конструкции нуклеиновой кислоты, например, матричной РНК (мРНК) или плазмидной ДНК (пДНК). В определенных вариантах осуществления полинуклеотид содержит традиционную фосфодиэфирную связь или нетрадиционную связь (например, амидную связь, такую как встречающаяся в пептидных нуклеиновых кислотах (PNA)). Термин "нуклеиновая кислота" относится к любому одному или нескольким сегментам нуклеиновой кислоты, например, фрагментам ДНК или РНК, присутствующим в полинуклеотиде. Под "выделенными" нуклеиновой кислотой или полинуклеотидом подразумевается молекула нуклеиновой кислоты, ДНК или РНК, которая была извлечена из ее нативного окружения. Например, рекомбинантный полинуклеотид, кодирующий полипептидный фактор VIII, который содержится в векторе, в рамках настоящего изобретения считают выделенным. Дополнительные примеры выделенного полинуклеотида включают рекомбинантные полинуклеотиды, содержащиеся в гетерологичных клетках-хозяевах или очищенные (частично или по существу) от других полинуклеотидов в растворе. Выделенные молекулы РНК включают РНК-транскрипты полинуклеотидов по настоящему изобретению, полученные in vivo или in vitro. Выделенные полинуклеотиды или нуклеиновые кислоты в соответствии с настоящим изобретением дополнительно включают такие молекулы, полученные путем синтеза. Кроме того, полинуклеотид или нуклеиновая кислота могут содержать регуляторные элементы, такие как промоторы, энхансеры, сайты связывания рибосом или сигналы терминации транскрипции.

[058] Определенные белки, секретируемые клетками млекопитающих, связаны с секреторным сигнальным пептидом, отщепляющимся от зрелого белка после начала экспорта растущей белковой цепи через гранулярный эндоплазматический ретикулум. Средним специалистам в данной области известно, что сигнальные полипептиды обычно слиты с N-концом полипептида и отщепляются от полного или "полноразмерного" полипептида с образованием секретируемой или "зрелой" формы полипептида. В определенных вариантах осуществления применяют нативный сигнальный пептид или функциональное производное такой последовательности, которое сохраняет способность к управлению секрецией полипептида, функционально связанного с ним. В качестве альтернативы можно применять гетерологичный сигнальный пептид млекопитающего, например, тканевой активатор плазминогена (ТРА) человека или сигнальный пептид ß-глюкуронидазы мыши или его функциональное производное.

[059] Подразумевается, что используемый в данном документе термин "полипептид" охватывает "полипептид" в единственном числе, а также "полипептиды" во множественном числе и относится к молекуле, состоящей из мономеров (аминокислот), линейно соединенных амидными связями (также известными как пептидные связи). Термин "полипептид" относится к любой цепи или цепям из двух или более аминокислот и не относится к конкретной длине продукта. Таким образом, пептиды, дипептиды, трипептиды, олигопептиды, "белок", "аминокислотная цепь" или любой другой термин, используемый для обозначения цепи или цепей из двух или более аминокислот, включены в определение "полипептида", и термин "полипептид" можно использовать вместо любого из этих терминов или взаимозаменяемо с любым из них. Также подразумевается, что термин "полипептид" относится к продуктам постэкспрессионных модификаций полипептида, включая без ограничения гликозилирование, ацетилирование, фосфорилирование, амидирование, дериватизацию с помощью известных защитных/блокирующих групп, протеолитическое расщепление или модификацию с помощью аминокислот, не встречающихся в природе. Полипептид может происходить из природного биологического источника или быть получен с помощью рекомбинантной технологии, но не обязательно быть получен в результате трансляции определенной последовательности нуклеиновой кислоты. Он может быть получен любым способом, в том числе путем химического синтеза.

[060] "Выделенный" полипептид или его фрагмент, вариант или производное относятся к полипептиду, который не находится в своем естественном окружении. Никакой конкретный уровень очистки не требуется. Например, выделенный полипептид может быть просто извлечен из его нативной или природной среды. Полученные рекомбинантным путем полипептиды и белки, экспрессирующиеся в клетках-хозяевах, считаются выделенными для целей настоящего изобретения, как и нативные или рекомбинантные полипептиды, которые были отделены, фракционированы или частично или в значительной степени очищены с помощью любой подходящей методики.

[061] Также в настоящее изобретение включены фрагменты или варианты полипептидов и любая их комбинация. Термины "фрагмент" или "вариант" в отношении связывающих доменов полипептидов или связывающих молекул по настоящему изобретению включают любые полипептиды, которые сохраняют по меньшей мере некоторые из свойств эталонного полипептида (например, аффинность связывания с FcRn для FcRn-связывающего домена или варианта Fc, активность коагуляции для варианта FVIII или активность связывания FVIII для фрагмента VWF). Фрагменты полипептидов включают фрагменты, полученные посредством протеолиза, а также фрагменты, полученные посредством делеции, в дополнение к конкретным фрагментам антитела, обсуждаемым в данном документе в другом месте, но не включают встречающийся в природе полноразмерный полипептид (или зрелый полипептид). Варианты связывающих доменов полипептидов или связывающих молекул по настоящему изобретению включают фрагменты, описанные выше, а также полипептиды с аминокислотными последовательностями, измененными в результате аминокислотных замен, делеций или вставок. Варианты могут быть встречающимися в природе или не встречающимися в природе. Не встречающиеся в природе варианты можно получить с помощью известных из уровня техники методик мутагенеза. Варианты полипептидов могут содержать консервативные или неконсервативные аминокислотные замены, делеции или добавления.

[062] Термин "белок VWF" или "белки VWF", используемый в данном документе, означает любые фрагменты VWF, которые взаимодействуют с FVIII и сохраняют по меньшей мере одно или несколько свойств, которые обычно обеспечиваются у FVIII благодаря полноразмерному VWF, например, предотвращение преждевременной активации до FVIIIa, предотвращение преждевременного протеолиза, предотвращение ассоциации с фосфолипидными мембранами, которая может привести к преждевременному выведению, предотвращение связывания с рецепторами, опосредующими выведение FVIII, которые могут связываться с "голым" FVIII, но не с FVIII, связанным с VWF, и/или стабилизацию взаимодействий тяжелой цепи и легкой цепи FVIII. Фрагмент VWF, упоминаемый в данном документе, представляет собой полипептид VWF, имеющий меньший размер, чем полноразмерный белок VWF, при этом фрагмент VWF сохраняет способность взаимодействовать и/или связываться с FVIII.

[063] "Консервативная аминокислотная замена" представляет собой замену, при которой аминокислотный остаток замещается аминокислотным остатком, имеющим сходную боковую цепь. Семейства аминокислотных остатков, имеющих сходные боковые цепи, были определены в уровне техники, включая основные боковые цепи (например, лизин, аргинин, гистидин), кислые боковые цепи (например, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота), незаряженные полярные боковые цепи (например, глицин, аспарагин, глутамин, серин, треонин, тирозин, цистеин), неполярные боковые цепи (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленные боковые цепи (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматические боковые цепи (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин). Таким образом, если аминокислота в полипептиде замещается другой аминокислотой из того же семейства боковых цепей, то замена считается консервативной. В других вариантах осуществления нить из аминокислот можно подвергнуть консервативному замещению сходной в структурном отношении нитью, которая отличается порядком расположения и/или составом представителей семейства боковых цепей.

[064] Как известно из уровня техники, "идентичность последовательностей" между двумя полипептидами определяется путем сравнения аминокислотной последовательности одного полипептида с последовательностью второго полипептида. При обсуждении в данном документе можно определить, является ли какой-либо конкретный полипептид на по меньшей мере 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 99% или 100% идентичным другому полипептиду, с применением способов и компьютерных программ/программного обеспечения, известных в данной области техники, таких как, без ограничения, программа BESTFIT (Wisconsin Sequence Analysis Package, версия 8 для Unix, Genetics Computer Group, University Research Park, 575 Science Drive, Мэдисон, Висконсин 53711). В BESTFIT используется алгоритм поиска локальной гомологии Смита-Уотермана, Advances in Applied Mathematics 2: 482-489 (1981), для нахождения наилучшего сегмента гомологии между двумя последовательностями. При использовании BESTFIT или любой другой программы выравнивания последовательностей для определения того, является ли конкретная последовательность, например, на 95% идентичной эталонной последовательности согласно настоящему изобретению, параметры, разумеется, устанавливаются так, что процент идентичности рассчитывается по полной длине эталонной полипептидной последовательности, и допускаются гэпы в гомологии в количестве до 5% от общего числа аминокислот в эталонной последовательности.

[065] Используемая в данном документе "соответствующая аминокислота" или "эквивалентная аминокислота" в последовательности VWF или последовательности белка FVIII идентифицируются путем выравнивания для максимального увеличения идентичности или сходства между первой последовательностью VWF или FVIII и второй последовательностью VWF или FVIII. Номер, используемый для идентификации эквивалентной аминокислоты во второй последовательности VWF или FVIII, соответствует номеру, используемому для идентификации соответствующей аминокислоты в первой последовательности VWF или FVIII.

[066] Используемый в данном документе термин "сайт вставки" относится к положению в полипептиде FVIII или его фрагменте, варианте или производном, которое находится непосредственно ниже положения, в которое может быть вставлен компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, или гетерологичный компонент. "Сайт вставки" указан в виде числа, при этом число является номером аминокислоты в зрелом нативном FVIII (SEQ ID NO: 65), которому соответствует сайт вставки, который располагается непосредственно за положением вставки в направлении С-конца. Например, фраза "a3 содержит XTEN в сайте вставки, который соответствует аминокислоте 1656 в SEQ ID NO: 65" указывает на то, что гетерологичный компонент расположен между двумя аминокислотами, соответствующими аминокислоте 1656 и аминокислоте 1657 в SEQ ID NO: 65.

[067] Используемая в данном документе фраза "непосредственно ниже аминокислоты" относится к положению сразу возле концевой карбоксильной группы аминокислоты. Например, сайт вставки непосредственно ниже аминокислоты 745, соответствующей зрелому белку FVIII дикого типа, означает, что сайт вставки находится между аминокислотой 745 и аминокислотой 746, соответствующей зрелому белку FVIII дикого типа. Аналогично, фраза "непосредственно выше аминокислоты" относится к положению сразу возле концевой аминогруппы аминокислоты.

[068] Используемая в данном документе фраза "между двумя аминокислотами в сайте вставки" относится к положению, в котором XTEN или любой другой полипептид вставлен между двумя соседними аминокислотами. Таким образом, фразы "вставлен непосредственно ниже аминокислоты" и "вставлен между двумя аминокислотами в сайте вставки" используются как синонимы фразы "вставлен в сайт вставки".

[069] Термины "вставленный", "вставлен", "вставленный в" или грамматически родственные термины, используемые в данном документе, относятся к положению XTEN в химерном полипептиде относительно аналогичного положения в нативном зрелом FVIII человека. Используемые в данном документе термины относятся к характеристикам рекомбинантного полипептида FVIII относительно нативного зрелого FVIII человека и не указывают, не подразумевают или не предполагают никаких способов или процесса, посредством которых был получен химерный полипептид. Например, по отношению к химерному полипептиду, предусмотренному в данном документе, фраза "XTEN вставлен непосредственно ниже остатка 745 полипептида FVIII" означает, что химерный полипептид содержит XTEN непосредственно ниже аминокислоты, соответствующей аминокислоте 745 в природном зрелом FVIII человека, например, ограничен аминокислотами, соответствующими аминокислотам 745 и 746 природного зрелого FVIII человека.

[070] "Слитый" или "химерный" белок содержит первую аминокислотную последовательность, соединенную со второй аминокислотной последовательностью, с которой она в естественных условиях не соединена в природе. Аминокислотные последовательности, которые в обычных условиях существуют в отдельных белках, могут быть объединены в слитом полипептиде, или аминокислотные последовательности, которые в обычных условиях существуют в одном и том же белке, могут быть размещены в новом порядке в слитом полипептиде, например, при слиянии домена фактора VIII по настоящему изобретению с Fc-доменом Ig. Слитый белок создают, например, путем химического синтеза или путем создания и трансляции полинуклеотида, в котором области пептида кодируются в необходимом взаиморасположении. Химерный полипептид может дополнительно содержать вторую аминокислотную последовательность, связанную с первой аминокислотной последовательностью с помощью ковалентной непептидной связи или нековалентной связи.

[071] Термин "соединенный", используемый в данном документе, относится к первой аминокислотной последовательности или нуклеотидной последовательности, ковалентно или нековалентно присоединенной соответственно ко второй аминокислотной последовательности или нуклеотидной последовательности. Первая аминокислотная или нуклеотидная последовательность может быть непосредственно присоединена ко второй аминокислотной или нуклеотидной последовательности или объединена с ней, или, в качестве альтернативы, промежуточная последовательность может ковалентно присоединять первую последовательность ко второй последовательности. Термин "соединенный" означает не только слияние первой аминокислотной последовательности со второй аминокислотной последовательностью на С-конце или N-конце, но также включает вставку всей первой аминокислотной последовательности (или второй аминокислотной последовательности) между любыми двумя аминокислотами во второй аминокислотной последовательности (или соответственно в первой аминокислотной последовательности). В некоторых вариантах осуществления первая аминокислотная последовательность может быть соединена со второй аминокислотной последовательностью с помощью пептидной связи или линкера. Первая нуклеотидная последовательность может быть соединена со второй нуклеотидной последовательностью с помощью фосфодиэфирной связи или линкера. Линкер может представлять собой пептид или полипептид (в случае полипептидных цепей), или нуклеотид или цепь нуклеотидов (в случае цепей нуклеотидов), или любой химический компонент (как в случае полипептидных, так и полинуклеотидных цепей). Термин "соединенный" также обозначается дефисом (-).

[072] Используемый в данном документе термин "связанный с" относится к ковалентной или нековалентной связи, образованной между первой цепью аминокислот и второй цепью аминокислот. В некоторых вариантах осуществления термин "связанный с" означает ковалентную непептидную связь или нековалентную связь. Эта связь может быть обозначена двоеточием, т. e. (:). В других вариантах осуществления это означает любую ковалентную связь, за исключением пептидной связи. Например, аминокислота цистеин содержит тиольную группу, которая может образовывать дисульфидную связь или мостик с тиольной группой во втором цистеиновом остатке. В большинстве встречающихся в природе молекул IgG области CH1 и CL связаны дисульфидной связью, а две тяжелые цепи связаны двумя дисульфидными связями в положениях, соответствующих 239 и 242 согласно системе нумерации по Kabat (положения 226 или 229, система нумерации EU). Примеры ковалентных связей включают без ограничения пептидную связь, металлическую связь, водородную связь, дисульфидную связь, сигма-связь, пи-связь, дельта-связь, гликозидную связь, агостическую связь, банановую связь, диполярную связь, обратную донорно-акцепторную Pi-связь, двойную связь, тройную связь, четверную связь, пятерную связь, шестерную связь, конъюгирование, гиперконъюгирование, ароматичность, гаптичность или антисвязывание. Неограничивающие примеры нековалентной связи включают ионную связь (например, катионную пи-связь или солевую связь), металлическую связь, водородную связь (например, диводородную связь, диводородный комплекс, низкобарьерную водородную связь или симметричную водородную связь), силу Ван-дер-Ваальса, лондоновскую дисперсионную силу, механическую связь, галогенную связь, аурофильность, интеркаляцию, стэкинг, энтропийную силу или химическую полярность.

[073] Используемый в данном документе термин "сайт расщепления" или "сайт ферментативного расщепления" относится к сайту, распознаваемому ферментом. Определенные сайты ферментативного расщепления включают сайт внутриклеточного процессинга. В других вариантах осуществления полипептид содержит сайт ферментативного расщепления, расщепляемый ферментом, который активируется во время каскада свертывания крови, так что расщепление таких сайтов происходит в месте образования сгустка. Примеры таких сайтов включают, например, сайты, распознаваемые тромбином, фактором XIa или фактором Xa. Иллюстративные сайты расщепления для FXIa включают, например, TQSFNDFTR (SEQ ID NO: 1) и SVSQTSKLTR (SEQ ID NO: 3). Иллюстративные сайты расщепления для тромбина включают, например, DFLAEGGGVR (SEQ ID NO: 4), TTKIKPR (SEQ ID NO: 5), LVPRG (SEQ ID NO: 6) ,ALRPR (SEQ ID NO: 7), ISDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 106), DKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 88) и IEPRSFS (SEQ ID NO: 194). Другие сайты ферментативного расщепления известны из уровня техники и описаны в данном документе в другом месте.

[074] Используемый в данном документе термин "сайт процессинга" или "сайт внутриклеточного процессинга" относится к типу сайта ферментативного расщепления в полипептиде, который является мишенью для ферментов, функционирующих после трансляции полипептида. В других вариантах осуществления такие ферменты функционируют во время транспорта из полости аппарата Гольджи в транс-отдел аппарата Гольджи. Ферменты внутриклеточного процессинга расщепляют полипептиды перед секрецией белка из клетки. Примеры таких сайтов процессинга включают, например, сайты, на которые нацеливается семейство PACE/фуриновых (где PACE является аббревиатурой для фермента, расщепляющего белок в месте спаренных основных аминокислот) эндопептидаз. Эти ферменты локализованы на мембране аппарата Гольджи и расщепляют белки с карбоксиконцевой стороны от мотива последовательности Arg-[любой остаток]-(Lys или Arg)-Arg. Используемое в данном документе семейство "фуриновых" ферментов включает, например, PCSK1 (также известный как PC1/PC3), PCSK2 (также известный как PC2), PCSK3 (также известный как фурин или PACE), PCSK4 (также известный как PC4), PCSK5 (также известный как PC5 или PC6), PCSK6 (также известный как PACE4) или PCSK7 (также известный как PC7/LPC, PC8 или SPC7). Другие сайты процессинга известны из уровня техники.

[075] Следует понимать, что в конструкциях, которые содержат более одного сайта процессинга или расщепления, такие сайты могут быть одинаковыми или разными.

[076] "Процессируемый линкер", как используется в данном документе, относится к линкеру, содержащему по меньшей мере один сайт внутриклеточного процессинга, который описан в данном документе в другом месте.

[077] Используемый в данном документе термин "период полужизни" относится к биологическому периоду полужизни конкретного полипептида in vivo. Период полужизни можно выразить в виде времени, требуемого для выведения из кровотока и/или других тканей животного половины количества, введенного субъекту. Если кривую выведения данного полипептида строят в виде функции времени, кривая обычно является двухфазной с быстрой α-фазой и более длинной β-фазой. Обычно α-фаза отображает уравновешивание содержания введенного полипептида Fc между внутри- и внесосудистым пространством и частично определяется размером полипептида. Обычно β-фаза отображает катаболизм полипептида во внутрисосудистом пространстве. В некоторых вариантах осуществления FVIII и химерные полипептиды, содержащие FVIII, являются монофазными и, таким образом, характеризуются отсутствием альфа-фазы и наличием одной только бета-фазы. Следовательно, в определенных вариантах осуществления термин "период полужизни", используемый в данном документе, относится к периоду полужизни полипептида в β-фазе. У человека типичный период полужизни в бета-фазе для антитела человека составляет 21 день. В определенных вариантах осуществления период полужизни выражается как период полужизни в конечной фазе.

[078] Гемостатическое нарушение, как используется в данном документе, означает генетически унаследованное или приобретенное состояние, характеризующееся склонностью к кровоизлиянию, спонтанно либо в результате травмы, из-за нарушенной способности или неспособности образовывать фибриновый сгусток. Примеры таких нарушений включают формы гемофилии. Тремя основными формами являются гемофилия A (дефицит фактора VIII), гемофилия B (дефицит фактора IX или "болезнь Кристмаса") и гемофилия C (дефицит фактора XI, легкая склонность к кровотечению). Другие гемостатические нарушения включают, например, болезнь фон Виллебранда, дефицит фактора XI (дефицит PTA), дефицит фактора XII, дефициты или аномалии структуры фибриногена, протромбина, фактора V, фактора VII, фактора X или фактора XIII, синдром Бернара-Сулье, который представляет собой дефект или дефицит GPIb. GPIb, рецептор VWF, может быть дефектным и приводить к невозможности образования первичного сгустка (первичного гемостаза) и увеличенной склонности к кровотечению, а также к тромбастении Гланцманна-Негели (тромбастении Гланцманна). При печеночной недостаточности (острой и хронической формах) имеет место недостаточная выработка печенью факторов коагуляции; это может увеличивать риск кровотечения.

[079] "Вводить" или "введение", как используется в данном документе, относится к доставке субъекту композиции, описанной в данном документе, например, химерного полипептида. Композицию, например, химерный полипептид, можно вводить субъекту с применением способов, известных из уровня техники. В частности, композицию можно вводить внутривенно, подкожно, внутримышечно, внутрикожно или через любую поверхность слизистой оболочки, например, перорально, сублингвально, трансбуккально, назально, ректально, вагинально или легочным путем - химерный полипептид. В некоторых вариантах осуществления введение представляет собой самостоятельное введение. В некоторых вариантах осуществления родитель вводит химерный полипептид ребенку. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводит субъекту медицинский работник, такой как врач, санитар или медсестра.

[080] Используемый в данном документе термин "доза" относится к однократному введению композиции субъекту. Однократная доза может быть введена сразу, например, в виде болюса, или в течение определенного периода времени, например, путем внутривенной инфузии. Термин "несколько доз" означает более одной дозы, например, более чем одно введение.

[081] Если речь идет о совместном введении более чем одной композиции, доза композиции A может вводиться одновременно с дозой композиции B. В качестве альтернативы дозу композиции A можно вводить до или после введения дозы композиции B. В некоторых вариантах осуществления композиция A и композиция B объединены в один состав.

[082] Используемый в данном документе термин "интервал" или "интервал между введениями доз" относится к количеству времени, которое проходит между первой дозой композиции A и последующей дозой той же композиции, вводимой субъекту. Интервал между введениями доз может относиться к времени, которое проходит между первой дозой и второй дозой, или интервал между введениями доз может относиться к количеству времени, которое проходит между несколькими дозами.

[083] Термин "частота введения доз", используемый в данном документе, относится к количеству доз, вводимых в расчете на конкретный интервал между введениями доз. Например, частота введения доз может быть записана как один раз в неделю, один раз в две недели и т. д. Следовательно, интервал между введениями доз, составляющий 7 дней, также может быть записан как интервал между введениями доз один раз в 7 дней, или каждую неделю, или один раз в неделю.

[084] Используемый в данном документе термин "профилактическое лечение" относится к применению терапии для лечения гемофилии, где такое лечение предназначено для предупреждения или снижения тяжести одного или нескольких симптомов гемофилии, например, эпизодов кровотечения, например, одного или нескольких эпизодов спонтанного кровотечения, и/или повреждения суставов. См. Jimenez-Yuste et al., Blood Transfus. 12(3):314-19 (2014). Для предупреждения или снижения тяжести таких симптомов, например, эпизодов кровотечения и прогрессирования заболевания суставов, пациенты с гемофилией А могут получать регулярные инфузии фактора свертывания крови в рамках режима профилактического лечения. Основой такого профилактического лечения является наблюдение, что пациенты с гемофилией с уровнем фактора свертывания крови, например, FVIII, составляющим 1% или больше, редко испытывают эпизоды спонтанного кровотечения и имеют меньше сопутствующих заболеваний, связанных с гемофилией, по сравнению с пациентами с тяжелой формой гемофилии. См., например, Coppola A. et al, Semin. Thromb. Hemost. 38(1): 79-94 (2012) . Практикующие врачи, лечащие таких пациентов с гемофилией, предположили, что поддержание уровней фактора при около 1% с помощью регулярных инфузий потенциально может снизить риск симптомов гемофилии, в том числе эпизодов кровотечения и повреждения суставов. См. там же. Последующие исследования подтвердили эти преимущества у педиатрических пациентов с гемофилией, получающих профилактическое лечение с помощью фактора свертывания крови, что делает профилактическое лечение целью для людей с тяжелой формой гемофилии. См. там же.

[085] "Профилактическое" лечение также может относиться к упреждающему введению композиции, описанной в данном документе, например, химерного полипептида, субъекту с целью контроля частоты возникновения или тяжести одного или нескольких симптомов гемофилии А, например, эпизодов кровотечения, управления ими, их предупреждения или снижения. Профилактическое лечение с помощью фактора свертывания крови, например, FVIII, является стандартом лечения субъектов с тяжелой формой гемофилии A. См., например, Oldenburg, Blood 125:2038-44 (2015). В некоторых вариантах осуществления профилактическое лечение относится к введению композиции, раскрытой в данном документе, субъекту, нуждающемуся в этом, для снижения частоты возникновения одного или нескольких симптомов гемофилии А. Профилактическое лечение может включать введение нескольких доз. Несколько доз, используемых при профилактическом лечении, обычно вводятся с определенными интервалами между введениями доз. В определенных вариантах осуществления частота кровотечений в годовом исчислении может быть снижена до менее 10, менее 9, менее 8, менее 7, менее 6, менее 5, менее 4, менее 3, менее 2 или менее 1.

[086] Термин "лечение по необходимости" или "эпизодическое лечение" относится к введению "по мере необходимости" химерной молекулы в ответ на симптомы гемофилии А, например, эпизод кровотечения, или перед началом деятельности, которая может вызвать кровотечение. В одном аспекте лечение по необходимости может быть назначено субъекту, когда начинается кровотечение, например, после травмы, или когда ожидается кровотечение, например, перед хирургическим вмешательством. В другом аспекте лечение по необходимости может быть назначено перед началом действий, которые увеличивают риск кровотечения, таких как контактные виды спорта. В некоторых вариантах осуществления лечение по необходимости назначается в виде однократной дозы. В других вариантах осуществления лечение по необходимости назначают в виде первой дозы, за которой следуют одна или несколько дополнительных доз. Если химерный полипептид вводят по необходимости, то одну или несколько дополнительных доз можно вводить через по меньшей мере приблизительно 12 часов, по меньшей мере приблизительно 24 часа, по меньшей мере приблизительно 36 часов, по меньшей мере приблизительно 48 часов, по меньшей мере приблизительно 60 часов, по меньшей мере приблизительно 72 часа, по меньшей мере приблизительно 84 часа, по меньшей мере приблизительно 96 часов, по меньшей мере приблизительно 108 часов или по меньшей мере приблизительно 120 часов после первой дозы. Однако следует отметить, что интервал между введениями доз, связанный с лечением по необходимости, не совпадает с интервалом между введениями доз, используемым для профилактического лечения.

[087] В некоторых вариантах осуществления субъект, нуждающийся в общем гемостатическом средстве, переносит или вскоре перенесет хирургическое вмешательство. Химерный полипептид по настоящему изобретению можно вводить до или после хирургического вмешательства. Химерный полипептид по настоящему изобретению можно также вводить во время или после хирургического вмешательства для контроля эпизода острого кровотечения. Если химерный полипептид вводят до хирургического вмешательства, то введение можно выполнять за по меньшей мере приблизительно 1 час, по меньшей мере приблизительно 2 часа, по меньшей мере приблизительно 4 часа, по меньшей мере приблизительно 8 часов, по меньшей мере приблизительно 12 часов, по меньшей мере приблизительно 24 часа, по меньшей мере приблизительно 36 часов, по меньшей мере приблизительно 48 часов или по меньшей мере приблизительно 72 часа до хирургического вмешательства. Если химерный полипептид вводят после хирургического вмешательства, то введение можно выполнять через по меньшей мере приблизительно 1 час, по меньшей мере приблизительно 2 часа, по меньшей мере приблизительно 4 часа, по меньшей мере приблизительно 8 часов, по меньшей мере приблизительно 12 часов, по меньшей мере приблизительно 24 часа, по меньшей мере приблизительно 36 часов, по меньшей мере приблизительно 48 часов или по меньшей мере приблизительно 72 часа после хирургического вмешательства. Хирургическое вмешательство может включать без ограничения трансплантацию печени, резекцию печени, стоматологические процедуры или трансплантацию стволовых клеток.

[088] Используемый в данном документе термин "острое кровотечение" относится к эпизоду кровотечения независимо от первопричины. Например, у субъекта может быть травма, уремия, наследственное нарушение свертываемости крови (например, дефицит фактора VII), тромбоцитарное нарушение или устойчивость вследствие развития антител к факторам свертывания крови.

[089] "Лечить", "лечение", "осуществление лечения", как используется в данном документе, относится, например, к снижению тяжести заболевания или состояния; снижению продолжительности течения заболевания; уменьшению интенсивности одного или нескольких симптомов, ассоциированных с заболеванием или состоянием; обеспечению благоприятных эффектов у субъекта с заболеванием или состоянием, при этом не обязательно с излечением заболевания или состояния, или профилактике одного или нескольких симптомов, ассоциированных с заболеванием или состоянием. В некоторых вариантах осуществления термин "осуществление лечения" или "лечение" означает поддержание у субъекта остаточного уровня FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл, 2 МЕ/дл, 3 МЕ/дл, 4 МЕ/дл, 5 МЕ/дл, 6 МЕ/дл, 7 МЕ/дл, 8 МЕ/дл, 9 МЕ/дл, 10 МЕ/дл, 11 МЕ/дл, 12 МЕ/дл, 13 МЕ/дл, 14 МЕ/дл, 15 МЕ/дл, 16 МЕ/дл, 17 МЕ/дл, 18 МЕ/дл, 19 МЕ/дл или 20 МЕ/дл, путем введения химерного полипептида или фрагмента VWF по настоящему изобретению. Используемый в данном документе "остаточный уровень" у пациента с гемофилией представляет собой измеренное значение наиболее низкой концентрации, достигаемой с помощью терапии фактором свертывания крови, например, терапии посредством FVIII, перед введением следующей дозы. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание остаточного уровня FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 1 МЕ/дл, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание остаточного уровня FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 3 МЕ/дл, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание остаточного уровня FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 5 МЕ/дл, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание остаточного уровня FVIII, составляющего от приблизительно 1 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 2 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 3 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 4 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 5 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 6 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 7 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 8 до приблизительно 20 МЕ/дл, от приблизительно 9 до приблизительно 20 МЕ/дл или от приблизительно 10 до приблизительно 20 МЕ/дл, в течение интервала между введениями доз.

[090] "Лечение" или "осуществление лечения" заболевания или состояния может также включать поддержание активности FVIII у субъекта на уровне, сравнимом с по меньшей мере приблизительно 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19% или 20% активности FVIII у субъекта, не страдающего гемофилией, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 1%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 2%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 3%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 4%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 5%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 6%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 7%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 8%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 9%, в интервале между введениями доз. В других вариантах осуществления осуществление лечения или лечение означает поддержание уровня активности FVIII, составляющего по меньшей мере приблизительно 10%, в интервале между введениями доз. Минимальный остаточный уровень, требуемый для лечения, может быть измерен с помощью одного или нескольких известных способов (например, с помощью анализов aPTT или хромогенных анализов, описанных в данном документе) и может быть скорректирован (увеличен или уменьшен) для каждого человека.

II. Способы по настоящему изобретению

[091] Определенные аспекты настоящего изобретения относятся к способам лечения гемофилии A у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающим введение субъекту химерного полипептида, содержащего белок FVIII и фрагмент VWF, с интервалом между введениями доз. В некоторых вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз. В других аспектах настоящее изобретение относится к способам лечения заболевания или состояния, связанного с кровотечением, например, гемофилии A, у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающим введение субъекту нескольких доз белка FVIII и нескольких доз фрагмента VWF с интервалом между введениями доз.

[092] В некоторых вариантах осуществления несколько доз предусматривают по меньшей мере две дозы, по меньшей мере три дозы, по меньшей мере четыре дозы, по меньшей мере пять доз, по меньшей мере шесть доз, по меньшей мере семь доз, по меньшей мере восемь доз, по меньшей мере девять доз, по меньшей мере десять доз, по меньшей мере одиннадцать доз, по меньшей мере двенадцать доз, по меньшей мере тринадцать доз, по меньшей мере четырнадцать доз, по меньшей мере пятнадцать доз, по меньшей мере шестнадцать доз, по меньшей мере семнадцать доз, по меньшей мере восемнадцать доз, по меньшей мере девятнадцать доз, по меньшей мере двадцать доз или больше. В некоторых вариантах осуществления несколько доз вводят в течение по меньшей мере приблизительно 1 месяца, по меньшей мере приблизительно 2 месяцев, по меньшей мере приблизительно 3 месяцев, по меньшей мере приблизительно 4 месяцев, по меньшей мере приблизительно 5 месяцев, по меньшей мере приблизительно 6 месяцев, по меньшей мере приблизительно 12 месяцев, по меньшей мере приблизительно 18 месяцев, по меньшей мере приблизительно 2 лет, по меньшей мере приблизительно 3 лет, по меньшей мере приблизительно 4 лет, по меньшей мере приблизительно 5 лет, по меньшей мере приблизительно 10 лет, по меньшей мере приблизительно 15 лет, по меньшей мере приблизительно 20 лет или в течение по меньшей мере приблизительно 25 лет.

[093] В определенных вариантах осуществления способы по настоящему изобретению относятся к лечению гемофилии А. В некоторых вариантах осуществления лечение гемофилии А включает предупреждение эпизода кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах осуществления лечение гемофилии А предусматривает лечение эпизода кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах осуществления лечение гемофилии А предусматривает контроль встречаемости или частоты эпизодов кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах осуществления лечение гемофилии А предусматривает уменьшение встречаемости или частоты эпизодов кровотечения у субъекта-человека, нуждающегося в этом.

A. Дозы

[094] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят в виде однократной дозы или в виде нескольких доз. В некоторых вариантах осуществления количества каждой из нескольких доз являются одинаковыми. В других вариантах осуществления одна или несколько из нескольких доз отличаются от одной или нескольких из других нескольких доз. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 5 МЕ/кг до приблизительно 200 МЕ/кг или от приблизительно 10 МЕ/кг до приблизительно 150 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 95 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 90 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 85 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 60 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 55 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 50 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 45 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 40 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 35 МЕ/кг, от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 30 МЕ/кг или от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 25 МЕ/кг.

[095] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 20 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 30 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 35 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 40 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 45 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 55 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 70 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 75 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 80 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, от приблизительно 85 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг или от приблизительно 90 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг.

[096] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 150 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 140 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 130 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 120 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 110 МЕ/кг или от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 95 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 90 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 85 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 60 МЕ/кг, от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 55 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг.

[097] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 150 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 140 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 130 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 120 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 110 МЕ/кг или от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 95 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 90 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 85 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг, от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг или от приблизительно 60 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг.

[098] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 150 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 140 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 130 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 120 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 110 МЕ/кг или от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 95 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 90 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 85 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг, от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 75 МЕ/кг или от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 70 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз химерного полипептида составляет от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг.

[099] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 5 МЕ/кг, приблизительно 10 МЕ/кг, приблизительно 15 МЕ/кг, приблизительно 20 МЕ/кг, приблизительно 25 МЕ/кг, приблизительно 30 МЕ/кг, приблизительно 35 МЕ/кг, приблизительно 40 МЕ/кг, приблизительно 45 МЕ/кг, приблизительно 50 МЕ/кг, приблизительно 55 МЕ/кг, приблизительно 60 МЕ/кг, приблизительно 65 МЕ/кг, приблизительно 70 МЕ/кг, приблизительно 75 МЕ/кг, приблизительно 80 МЕ/кг, приблизительно 85 МЕ/кг, приблизительно 90 МЕ/кг, приблизительно 95 МЕ/кг, приблизительно 100 МЕ/кг, приблизительно 125 МЕ/кг, приблизительно 150 МЕ/кг, приблизительно 175 МЕ/кг или приблизительно 200 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 30 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 35 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 40 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 45 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 55 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 60 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 70 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 75 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 85 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 90 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 95 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 100 МЕ/кг.

[0100] В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 30 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 35 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 40 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 45 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 55 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 60 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 70 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 75 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 85 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 90 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 95 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления каждая доза из нескольких доз составляет приблизительно 100 МЕ/кг.

[0101] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят в целях профилактики. При профилактическом введении по меньшей мере одна из нескольких доз может составлять от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз, вводимых в целях профилактики, составляет приблизительно 25 МЕ/кг, приблизительно 30 МЕ/кг, приблизительно 35 МЕ/кг, приблизительно 40 МЕ/кг, приблизительно 45 МЕ/кг, приблизительно 50 МЕ/кг, приблизительно 55 МЕ/кг, приблизительно 60 МЕ/кг, приблизительно 65 МЕ/кг, приблизительно 70 МЕ/кг, приблизительно 75 МЕ/кг, приблизительно 80 МЕ/кг, приблизительно 85 МЕ/кг, приблизительно 90 МЕ/кг, приблизительно 95 МЕ/кг или приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз, вводимых в целях профилактики, составляет приблизительно 25 МЕ/кг. В других вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз, вводимых в целях профилактики, составляет приблизительно 50 МЕ/кг. В других вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз, вводимых в целях профилактики, составляет приблизительно 65 МЕ/кг. В других вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз, вводимых в целях профилактики, составляет приблизительно 80 МЕ/кг.

[0102] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят по необходимости. При введении по необходимости химерный полипептид можно вводить в виде однократной дозы или в виде нескольких доз. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводят в виде одной или нескольких доз, составляющих от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг. В определенных вариантах осуществления химерный полипептид вводят по необходимости в виде одной или нескольких доз, составляющих приблизительно 25 МЕ/кг, приблизительно 30 МЕ/кг, приблизительно 35 МЕ/кг, приблизительно 40 МЕ/кг, приблизительно 45 МЕ/кг, приблизительно 50 МЕ/кг, приблизительно 55 МЕ/кг, приблизительно 60 МЕ/кг, приблизительно 65 МЕ/кг, приблизительно 70 МЕ/кг, приблизительно 75 МЕ/кг, приблизительно 80 МЕ/кг, приблизительно 85 МЕ/кг, приблизительно 90 МЕ/кг, приблизительно 95 МЕ/кг или приблизительно 100 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводят по необходимости в виде одной или нескольких доз, составляющих приблизительно 25 МЕ/кг. В других вариантах осуществления химерный полипептид вводят по необходимости в виде одной или нескольких доз, составляющих приблизительно 50 МЕ/кг. В других вариантах осуществления химерный полипептид вводят по необходимости в виде одной или нескольких доз, составляющих приблизительно 65 МЕ/кг. В других вариантах осуществления химерный полипептид вводят по необходимости в виде одной или нескольких доз, составляющих приблизительно 80 МЕ/кг.

[0103] В некоторых вариантах осуществления введение химерного полипептида в соответствии со способами по настоящему изобретению не приводит к индукции образования ингибитора FVIII после приблизительно 7 дней, приблизительно 10 дней, приблизительно 11 дней, приблизительно 12 дней, приблизительно 13 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 15 дней, приблизительно 20 дней, приблизительно 24 дней, приблизительно 25 дней, приблизительно 28 дней, приблизительно 30 дней или приблизительно 35 дней введения. В некоторых вариантах осуществления введение химерного полипептида не приводит к индукции образования ингибитора FVIII после приблизительно 28 дней введения.

B. Интервал между введениями доз

[0104] В определенных вариантах осуществления, в частности для профилактического лечения, химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят в виде нескольких доз с интервалом между введениями доз. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 3 дня, по меньшей мере приблизительно 4 дня, по меньшей мере приблизительно 5 дней, по меньшей мере приблизительно 6 дней, по меньшей мере приблизительно 7 дней, по меньшей мере приблизительно 8 дней, по меньшей мере приблизительно 9 дней, по меньшей мере приблизительно 10 дней, по меньшей мере приблизительно 11 дней, по меньшей мере приблизительно 12 дней, по меньшей мере приблизительно 13 дней, по меньшей мере приблизительно 14 дней, по меньшей мере приблизительно 15 дней, по меньшей мере приблизительно 16 дней, по меньшей мере приблизительно 17 дней, по меньшей мере приблизительно 18 дней, по меньшей мере приблизительно 19 дней, по меньшей мере приблизительно 20 дней, по меньшей мере приблизительно 21 день, по меньшей мере приблизительно 22 дня, по меньшей мере приблизительно 23 дня, по меньшей мере приблизительно 24 дня, по меньшей мере приблизительно 25 дней, по меньшей мере приблизительно 26 дней, по меньшей мере приблизительно 27 дней, по меньшей мере приблизительно 28 дней, по меньшей мере приблизительно 29 дней, по меньшей мере приблизительно 30 дней или по меньшей мере приблизительно 31 день.

[0105] В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 6 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 8 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 9 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 11 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 12 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 13 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 21 день. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 27 дней. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 30 дней.

[0106] В некоторых вариантах осуществления частота введения доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере два раза в неделю, по меньшей мере один раз в неделю, по меньшей мере один раз в 2 недели, по меньшей мере один раз в 3 недели, по меньшей мере один раз в 4 недели, по меньшей мере один раз в 5 недель или по меньшей мере один раз в 6 недель. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере одну неделю. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере 2 недели. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере 3 недели. В определенных вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере 4 недели.

[0107] В некоторых вариантах осуществления частота введения доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет приблизительно 2 раза в три месяца, приблизительно 1 раз в месяц, приблизительно 2 раза в месяц, приблизительно 3 раза в месяц, приблизительно 4 раза в месяц, приблизительно 5 раз в месяц, приблизительно 6 раз в месяц, приблизительно 7 раз в месяц или приблизительно 8 раз в месяц. В определенных вариантах осуществления частота введения доз составляет приблизительно 1 раз в месяц. В определенных вариантах осуществления частота введения доз составляет приблизительно 2 раза в месяц. В определенных вариантах осуществления частота введения доз составляет приблизительно 3 раза в месяц. В определенных вариантах осуществления частота введения доз составляет приблизительно 4 раза в месяц. В определенных вариантах осуществления частота введения доз составляет приблизительно 5 раз в месяц. В определенных вариантах осуществления частота введения доз составляет приблизительно 6 раз в месяц.

[0108] В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 3-5 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 4-6 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 4-7 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 4-8 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 4-9 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 4-10 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 5-7 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 5-8 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 5-9 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 5-10 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления интервал между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии A, составляет по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0109] В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в соответствии с дозой и частотой введения доз, описанными в таблице 1.

Таблица 1A. Количества дозы и соответствующая частота введения доз, например, для профилактического лечения гемофилии

	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
5 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней
6 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней
7 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней
8 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней
9 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней
10 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней
11 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней
12 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней
13 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней
14 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней
15 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней
16 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней
17 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней
18 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней
19 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней
20 дней	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней
21 день	5 МЕ/кг	10 МЕ/кг	15 МЕ/кг	20 МЕ/кг	25 МЕ/кг	30 МЕ/кг	35 МЕ/кг	40 МЕ/кг	45 МЕ/кг	50 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день
	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
5 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней
6 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней
7 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней
8 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней
9 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней
10 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней
11 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней
12 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней
13 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней
14 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней
15 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней
16 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней
17 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней
18 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней
19 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней
20 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней
21 день	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день

Таблица 1B. Количества дозы и соответствующие интервалы между введениями доз, например, для профилактического лечения гемофилии

	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
5 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней
6 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней
7 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней
8 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней
9 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней
10 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней
11 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней
12 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней
13 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней
14 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней
15 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней
16 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней
17 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней
18 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней
19 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней
20 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней
21 день	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день
	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
5 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней	5 дней
6 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней	6 дней
7 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней	7 дней
8 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней	8 дней
9 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней	9 дней
10 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней	10 дней
11 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней	11 дней
12 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней	12 дней
13 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней	13 дней
14 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней	14 дней
15 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней	15 дней
16 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней	16 дней
17 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней	17 дней
18 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней	18 дней
19 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней	19 дней
20 дней	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней	20 дней
21 день	55 МЕ/кг	60 МЕ/кг	65 МЕ/кг	70 МЕ/кг	75 МЕ/кг	80 МЕ/кг	85 МЕ/кг	90 МЕ/кг	95 МЕ/кг	100 МЕ/кг
	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые	Каждые
	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день	21 день

[0110] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0111] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 25 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0112] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 50 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0113] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 65 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0114] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе, составляющей приблизительно 80 МЕ/кг, с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0115] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0116] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 50 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0117] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0118] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2-8 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 4-9 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 4-10 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 4-11 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 4-12 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 4-13 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 4-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8-14 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10-21 день. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13-15 дней. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14-21 день.

[0119] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 7 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 6 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 5 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 4 дня. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 3 дня. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 2 дня. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 8 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 9 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 10 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 11 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 13 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 14 дней. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 21 день.

[0120] В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 1 неделю. В некоторых вариантах осуществления, как, например, для профилактического лечения гемофилии A у педиатрического субъекта, по меньшей мере одну из нескольких доз вводят в дозе от приблизительно 65 МЕ/кг до приблизительно 80 МЕ/кг с частотой введения доз, составляющей по меньшей мере приблизительно два раза в 1 неделю.

[0121] В определенных вариантах осуществления, как, например, при профилактическом лечении гемофилии A, способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В определенных вариантах осуществления, как, например, при профилактическом лечении гемофилии A, способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 15 МЕ/кг до приблизительно 100 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 8 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 9 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 11 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 12 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 13 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 15 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 16 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 17 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 18 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 19 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 20 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг до приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 21 день.

[0122] В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 6 дней. В некоторых вариантах осуществления способ предназначен для профилактического лечения гемофилии А. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 8 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 9 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 11 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 12 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 13 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 15 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 16 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 17 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 18 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 19 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 20 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 25 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 21 день.

[0123] В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 6 дней. В некоторых вариантах осуществления способ предназначен для профилактического лечения гемофилии А. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 8 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 9 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 11 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 12 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 13 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 15 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 16 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 17 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 18 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 19 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 20 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 21 день.

[0124] В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 6 дней. В некоторых вариантах осуществления способ предназначен для профилактического лечения гемофилии А. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 8 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 9 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 11 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 12 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 13 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 15 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 16 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 17 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 18 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 19 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 20 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 65 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 21 день.

[0125] В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 5 дней. В определенных вариантах осуществления способ предусматривает введение субъекту нескольких доз химерного полипептида, содержащего (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, с интервалом между введениями доз, где по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 6 дней. В некоторых вариантах осуществления способ предназначен для профилактического лечения гемофилии А. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 7 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 8 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 9 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 10 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 11 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 12 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 13 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 14 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 15 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 16 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 17 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 18 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 19 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 20 дней. В определенных вариантах осуществления по меньшей мере одна из нескольких доз составляет от приблизительно 80 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере приблизительно 21 день.

[0126] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводят для профилактического лечения гемофилии A. Профилактическое лечение гемофилии A включает облегчение или снижение тяжести симптомов гемофилии A на непрерывной или почти непрерывной основе. В некоторых вариантах осуществления профилактическое лечение проводят до возникновения симптома гемофилии А, например, до случая кровотечения. В других вариантах осуществления профилактическое лечение проводят на регулярной основе, например, с интервалом между введениями доз, описанным в данном документе, для предупреждения появления или уменьшения тяжести симптома до появления симптома. Любой интервал между введениями доз, раскрытый в данном документе, можно использовать для профилактического лечения гемофилии А.

[0127] В других вариантах осуществления химерный полипептид вводят перед началом деятельности, которая может вызвать один или несколько симптомов гемофилии A, например, в качестве лечения по необходимости. Например, химерный полипептид по настоящему изобретению можно вводить субъекту, страдающему гемофилией A, до того, как субъект перенесет хирургическое вмешательство или начнет деятельность, которая в ином случае увеличивает риск физической травмы и/или случая кровотечения. При введении по необходимости химерный полипептид можно вводить в виде однократной дозы или в виде нескольких доз. В некоторых вариантах осуществления лечение по необходимости включает введение нескольких доз химерного полипептида с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере приблизительно 12 часов, по меньшей мере приблизительно 24 часа, по меньшей мере приблизительно 36 часов, по меньшей мере приблизительно 48 часов, по меньшей мере приблизительно 60 часов, по меньшей мере приблизительно 72 часа, по меньшей мере приблизительно 84 часа, по меньшей мере приблизительно 96 часов, по меньшей мере приблизительно 108 часов или по меньшей мере приблизительно 120 часов. В определенных вариантах осуществления лечение по необходимости включает введение по меньшей мере 2 доз, по меньшей мере 3 доз, по меньшей мере 4 доз или по меньшей мере 5 доз химерного полипептида.

[0128] В некоторых вариантах осуществления субъект ранее получал лечение с помощью одного или нескольких средств заместительной терапии на основе FVIII. В определенных вариантах осуществления субъект не отвечал на предшествующую заместительную терапию с помощью FVIII. В некоторых вариантах осуществления средство заместительной терапии на основе FVIII представляет собой ELOCTATE^® или ADVATE^®. В некоторых вариантах осуществления субъект является взрослым. В некоторых вариантах осуществления субъект является взрослым мужчиной. В других вариантах осуществления субъект является взрослой женщиной. В других вариантах осуществления субъект является ребенком, например, в возрасте, равном приблизительно 12 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 11 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 10 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 9 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 8 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 7 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 6 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 5 лет или меньше, в возрасте, равном приблизительно 4 года или меньше, в возрасте, равном приблизительно 3 года или меньше, в возрасте, равном приблизительно 2 года или меньше, или в возрасте, равном приблизительно 1 год или меньше. В некоторых вариантах осуществления субъект является женщиной. В некоторых вариантах осуществления субъект является мужчиной. В некоторых вариантах осуществления субъект является женщиной в возрасте, равном приблизительно 12 лет или меньше. В некоторых вариантах осуществления субъект является женщиной в возрасте, равном приблизительно 11 лет или меньше. В некоторых вариантах осуществления субъект является женщиной в возрасте, равном приблизительно 10 лет или меньше.

[0129] Химерный полипептид, описанный в данном документе, можно вводить любыми способами, известными из уровня техники. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводят посредством пути, выбранного из группы, состоящей из внутривенной инъекции, внутривенной инфузии, подкожного введения, внутримышечного введения, перорального введения, назального введения и легочного введения. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид вводят внутривенно. В других вариантах осуществления химерный полипептид вводят подкожно.

[0130] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, после введения приводит к уровню активности FVIII в плазме крови, составляющему по меньшей мере приблизительно 1%, по меньшей мере приблизительно 2%, по меньшей мере приблизительно 3%, по меньшей мере приблизительно 4%, по меньшей мере приблизительно 5%, по меньшей мере приблизительно 6%, по меньшей мере приблизительно 7%, по меньшей мере приблизительно 8%, по меньшей мере приблизительно 9% или по меньшей мере приблизительно 10%. В определенных вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 4%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 4%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5,6%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 7%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 10%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 12%. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 12,95%. Используемый в данном документе уровень активности в плазме крови выражается в процентах (%). В качестве альтернативы активность в плазме крови может быть выражена в единицах МЕ/дл, где 1% равен 1 МЕ/дл.

[0131] В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 10% через по меньшей мере приблизительно 5 дней после введения химерного полипептида, например, в дозе 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 12% через по меньшей мере приблизительно 5 дней после введения химерного полипептида, например, в дозе 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 12,95% через по меньшей мере приблизительно 5 дней после введения химерного полипептида, например, в дозе 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5% через по меньшей мере приблизительно 7 дней после введения химерного полипептида, например, в дозе 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 5,6% через по меньшей мере приблизительно 7 дней после введения химерного полипептида, например, в дозе 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 3% через по меньшей мере приблизительно 8 дней после введения химерного полипептида, например, в дозе 25 МЕ/кг. В некоторых вариантах осуществления уровень активности FVIII в плазме крови составляет по меньшей мере приблизительно 1% через по меньшей мере приблизительно 10 дней после введения химерного полипептида, например, в дозе 25 МЕ/кг.

[0132] Настоящее изобретение также включает способ лечения гемофилии A, предусматривающий введение субъекту композиции, содержащей (i) белок FVIII и (ii) фрагмент VWF. В некоторых вариантах осуществления белок FVIII присутствует в первом составе, а фрагмент VWF присутствует во втором составе. В других вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF присутствуют в одном и том же составе. В конкретных вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF являются отдельными компонентами одного состава. В определенных вариантах осуществления белок FVIII, например, одноцепочечный FVIII, FVIII-Fc, пегилированный FVIII, полноразмерный зрелый FVIII или FVIII с делецией домена B, вводят в дозе, раскрытой в данном документе, например, составляющей 25 МЕ/кг, 30 МЕ/кг, 35 МЕ/кг, 40 МЕ/кг, 45 МЕ/кг, 50 МЕ/кг, 55 МЕ/кг, 60 МЕ/кг или 65 МЕ/кг, и с интервалом между введениями доз, составляющим по меньшей мере 6 дней, по меньшей мере 7 дней, по меньшей мере 8 дней, по меньшей мере 9 дней, по меньшей мере 10 дней, по меньшей мере 11 дней, по меньшей мере 12 дней, по меньшей мере 13 дней или по меньшей мере 14 дней, а фрагмент VWF вводят в дозе, соответствующей соотношению вводимых фрагмента VWF и молекулы FVIII, составляющему по меньшей мере приблизительно 0,25:1, 0,5:1, 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 10:1, 15:1, 20:1, 25:1, 30:1, 35:1, 40:1, 45:1, 50:1, 100:1, 200:1, 300:1, 400:1, 500:1, 1000:1, 2000:1, 3000:1, 4000:1, 5000:1, 10000:1, 50000:1, 100000:1 или 500000:1. В других вариантах осуществления фрагмент VWF вводят субъекту одновременно с белком FVIII, сразу после него или непосредственно перед ним. В определенных вариантах осуществления фрагмент VWF вводят за приблизительно 0,5 часа, приблизительно 1 час, приблизительно 1,5 часа, приблизительно 2 часа, приблизительно 2,5 часа, приблизительно 3 часа, приблизительно 3,5 часа, приблизительно 4 часа, приблизительно 4,5 часа, приблизительно 5 часов, приблизительно 5,5 часа или приблизительно 6 часов до белка FVIII. В других вариантах осуществления белок FVIII вводят за приблизительно 0,5 часа, приблизительно 1 час, приблизительно 1,5 часа, приблизительно 2 часа, приблизительно 2,5 часа, приблизительно 3 часа, приблизительно 3,5 часа, приблизительно 4 часа, приблизительно 4,5 часа, приблизительно 5 часов, приблизительно 5,5 часа или приблизительно 6 часов до фрагмента VWF.

C. Индукция иммунной толерантности

[0133] Определенные аспекты настоящего изобретения относятся к способам лечения гемофилии A у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающим введение субъекту химерного полипептида, содержащего белок FVIII и фрагмент VWF, с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид индуцирует иммунную толерантность к FVIII у субъекта. Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к способам лечения гемофилии A у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающим введение субъекту химерного полипептида, содержащего белок FVIII и фрагмент VWF, с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид снижает ингибирующий ответ на FVIII у субъекта. Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к способам лечения гемофилии A у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающим введение субъекту химерного полипептида, содержащего белок FVIII и фрагмент VWF, с интервалом между введениями доз, где химерный полипептид не индуцирует иммунный ответ на химерный полипептид после введения. Другой аспект настоящего изобретения относится к способу индукции иммунной толерантности у человека с гемофилией, предусматривающему (1) введение человеку эффективного количества химерного полипептида, описанного в данном документе, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, где эффективное количество химерного полипептида индуцирует иммунную толерантность у человека. Различные способы индукции иммунной толерантности с применением химерных полипептидов, содержащих FVIII и Fc, раскрыты в международной публикации № WO 2018/102760 A1, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0134] В определенных вариантах осуществления способ дополнительно предусматривает (2) после индукции иммунной толерантности применение в отношении человека режима с постепенным снижением дозы композиции или химерного полипептида. В определенных вариантах осуществления индукция иммунной толерантности происходит, если титр ингибирующих антител у человека составляет менее чем приблизительно 0,6 БЕ. В определенных вариантах осуществления индукция иммунной толерантности происходит, если титр ингибирующих антител у человека составляет менее чем приблизительно 0,6 БЕ и имеет место 60% восстановление активности фактора свертывания крови, отслеживаемое в плазме крови. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения способ дополнительно включает (3) после применения режима с постепенным снижением дозы введение человеку профилактической дозы фактора свертывания крови, например, химерного полипептида, описанного в данного документе, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN.

[0135] В определенных аспектах человек не получал лечение с помощью предшествующей терапии для формирования иммунной толерантности к фактору свертывания крови, например, к FVIII. Химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, можно вводить человеку в любое время после того, как было определено, что у человека развился ингибирующий иммунный ответ, например, после измерения уровня ингибирующего иммунного ответа у человека. В других вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, можно вводить человеку, у которого еще не развились один или несколько ингибирующих иммунных ответов, для предупреждения развития ингибирующего иммунного ответа. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят человеку, у которого имеется высокая вероятность развития ингибирующего иммунного ответа (например, семейный анамнез, генетическая предрасположенность или наличие биомаркера). В некоторых вариантах осуществления способ дополнительно предусматривает измерение уровня ингибирующего иммунного ответа или вероятности развития ингибирующего иммунного ответа перед введением.

[0136] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят человеку через менее чем приблизительно 1 день, менее чем приблизительно 2 дня, менее чем приблизительно 3 дня, менее чем приблизительно 4 дня, менее чем приблизительно 5 дней, менее чем приблизительно 6 дней, менее чем приблизительно 7 дней, менее чем приблизительно 2 недели, менее чем приблизительно 3 недели, менее чем приблизительно 4 недели, менее чем приблизительно 2 месяца, менее чем приблизительно 3 месяца, менее чем приблизительно 4 месяца, менее чем приблизительно 5 месяцев, менее чем приблизительно 6 месяцев, менее чем приблизительно 1 год, менее чем приблизительно 2 года, менее чем приблизительно 3 года, менее чем приблизительно 4 года или менее чем приблизительно 5 лет после определения того, что у человека развился ингибирующий иммунный ответ или что у человека имеется вероятность развития ингибирующего иммунного ответа, например, после измерения уровня ингибирующего иммунного ответа или вероятности развития ингибирующего иммунного ответа у человека. В определенных вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят человеку непосредственно после определения того, что у человека развился ингибирующий иммунный ответ или что у человека имеется вероятность развития ингибирующего иммунного ответа, например, после измерения уровня ингибирующего иммунного ответа или вероятности развития ингибирующего иммунного ответа у человека. В конкретных вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят человеку через менее чем приблизительно 5 минут, менее чем приблизительно 10 минут, менее чем приблизительно 15 минут, менее чем приблизительно 20 минут, менее чем приблизительно 30 минут, менее чем приблизительно 45 минут, менее чем приблизительно 1 час, менее чем приблизительно 2 часа, менее чем приблизительно 3 часа, менее чем приблизительно 4 часа, менее чем приблизительно 5 часов, менее чем приблизительно 6 часов, менее чем приблизительно 7 часов, менее чем приблизительно 8 часов, менее чем приблизительно 9 часов, менее чем приблизительно 10 часов, менее чем приблизительно 11 часов, менее чем приблизительно 12 часов, приблизительно 18 часов или менее чем приблизительно 24 часа после определения того, что у человека развился ингибирующий иммунный ответ или что у человека имеется вероятность развития ингибирующего иммунного ответа, например, после измерения уровня ингибирующего иммунного ответа или вероятности развития ингибирующего иммунного ответа у человека. В конкретных вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят человеку через приблизительно 5 минут, приблизительно 10 минут, приблизительно 15 минут, приблизительно 20 минут, приблизительно 30 минут, приблизительно 45 минут, приблизительно 1 час, приблизительно 2 часа, приблизительно 3 часа, приблизительно 4 часа, приблизительно 5 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 7 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 9 часов, приблизительно 10 часов, приблизительно 11 часов, приблизительно 12 часов, приблизительно 18 часов или приблизительно 24 часа после определения того, что у человека развился ингибирующий иммунный ответ или что у человека имеется вероятность развития ингибирующего иммунного ответа, например, после измерения уровня ингибирующего иммунного ответа или вероятности развития ингибирующего иммунного ответа у человека. В определенных вариантах осуществления химерный полипептид, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, вводят человеку через менее чем приблизительно 1 день после определения того, что у человека развился ингибирующий иммунный ответ или что у человека имеется вероятность развития ингибирующего иммунного ответа, например, после измерения уровня ингибирующего иммунного ответа или вероятности развития ингибирующего иммунного ответа у человека.

[0137] Индукцию иммунного ответа можно продолжать до тех пор, пока уровень ингибитора не станет ниже определенного уровня или пока ингибиторы не будут выявляться. В определенных вариантах осуществления период индукции может продолжаться в течение по меньшей мере приблизительно 24 недель, по меньшей мере приблизительно 26 недель, по меньшей мере приблизительно 28 недель, по меньшей мере приблизительно 30 недель, по меньшей мере приблизительно 32 недель, по меньшей мере приблизительно 34 недель, по меньшей мере приблизительно 36 недель, по меньшей мере приблизительно 38 недель, по меньшей мере приблизительно 40 недель, по меньшей мере приблизительно 42 недель, по меньшей мере приблизительно 44 недель, по меньшей мере приблизительно 46 недель, по меньшей мере приблизительно 48 недель, по меньшей мере приблизительно 50 недель, по меньшей мере приблизительно 52 недель, по меньшей мере приблизительно 54 недель, по меньшей мере приблизительно 56 недель, по меньшей мере приблизительно 58 недель, по меньшей мере приблизительно 60 недель, по меньшей мере приблизительно 62 недель, по меньшей мере приблизительно 64 недель, по меньшей мере приблизительно 66 недель, по меньшей мере приблизительно 68 недель, по меньшей мере приблизительно 70 недель. В конкретном варианте осуществления период индукции составляет менее 60 недель.

[0138] Ингибирующий иммунный ответ, лечение которого осуществляют с помощью способов по настоящему изобретению, может включать любой ответ в организме человека, который отрицательно влияет на один или несколько эффектов лечения с помощью фактора свертывания крови. В некоторых вариантах осуществления ингибирующий иммунный ответ включает выработку ингибирующих антител к фактору свертывания крови, например, ингибирующих антител к FVIII. В определенных вариантах осуществления способ по настоящему изобретению дополнительно включает измерение титра одного или нескольких ингибирующих антител у человека до (например, на исходном уровне) и после введения эффективного количества химерного полипептида, описанного в данном документе, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, или полинуклеотида, кодирующего его. В некоторых вариантах осуществления титр ингибирующих антител перед введением (например, на исходном уровне) составляет по меньшей мере приблизительно 0,6 единицы Бетезда (БЕ). В определенных вариантах осуществления титр ингибирующих антител перед введением (например, на исходном уровне) составляет по меньшей мере приблизительно 1 БЕ, по меньшей мере приблизительно 2 БЕ, по меньшей мере приблизительно 3 БЕ, по меньшей мере приблизительно 4 БЕ, по меньшей мере приблизительно 5 БЕ, по меньшей мере приблизительно 6 БЕ, по меньшей мере приблизительно 7 БЕ, по меньшей мере приблизительно 10 БЕ, по меньшей мере приблизительно 20 БЕ, по меньшей мере приблизительно 30 БЕ, по меньшей мере приблизительно 40 БЕ, по меньшей мере приблизительно 50 БЕ, по меньшей мере приблизительно 100 БЕ, по меньшей мере приблизительно 150 БЕ или по меньшей мере приблизительно 200 БЕ. В одном конкретном варианте осуществления титр ингибирующих антител перед введением (например, на исходном уровне) составляет по меньшей мере приблизительно 5 БЕ.

[0139] В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению обеспечивают снижение титра ингибирующих антител у субъекта-человека по сравнению с титром ингибирующих антител перед введением. В определенных вариантах осуществления титр ингибирующих антител после введения составляет менее чем приблизительно 0,6 БЕ. В некоторых вариантах осуществления титр ингибирующих антител после введения составляет менее чем приблизительно 0,5 БЕ, менее чем приблизительно 0,4 БЕ, менее чем приблизительно 0,3 БЕ, менее чем приблизительно 0,2 БЕ или менее чем приблизительно 0,1 БЕ. В одном конкретном варианте осуществления титр ингибирующих антител после введения составляет 0 БЕ. В других вариантах осуществления титр ингибирующих антител после введения составляет менее 5 БЕ, менее 4 БЕ, менее 3 БЕ, менее 2 БЕ, менее 1 БЕ, менее 0,9 БЕ, менее 0,8 БЕ, менее 0,7 БЕ или менее 0,6 БЕ.

[0140] В некоторых вариантах осуществления введение химерного полипептида, описанного в данном документе, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, обеспечивает увеличение интенсивности дифференцировки макрофагов у человека в направлении М2-подобного фенотипа по сравнению с дифференцировкой макрофагов у не получавших лечение контрольных лиц и у людей, получавших лечение с помощью фактора свертывания крови в отдельности. В некоторых вариантах осуществления M2-подобный фенотип предусматривает повышение экспрессии генов сигнального пути NRF2, сигнального пути PPAR-гамма или как сигнального пути NRF2, так и сигнального пути PPAR-гамма. В некоторых вариантах осуществления M2-подобный фенотип предусматривает повышение экспрессии CD206 (MRC1). В некоторых вариантах осуществления M2-подобный фенотип предусматривает повышение экспрессии ARG1. В некоторых вариантах осуществления M2-подобный фенотип предусматривает повышение экспрессии CD206 (MRC1) и ARG1.

[0141] В некоторых вариантах осуществления введение химерного полипептида, описанного в данном документе, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN, приводит к большей экспрессии одного или нескольких генов у человека по сравнению с экспрессией одного или нескольких генов у не получавшего лечение субъекта или у субъекта, получавшего лечение с помощью фактора свертывания крови в отдельности. В некоторых вариантах осуществления введение приводит к большей экспрессии одного или нескольких генов, выбранных из группы, состоящей из генов Hmox1, PPAR-гамма, LPL, EGR2, SLCO4A1, гемоксигеназы 1 (HO-1), индуцируемого окислительным стрессом ингибитора роста 1 (OSGIN1), супероксиддисмутазы 1 (SOD1), глутатиондисульфидредуктазы (GSR), каталитической субъединицы глутаматцистеинлигазы (GCLC), модифицирующей субъединицы глутаматцистеинлигазы (GCLM), NAD(P)H-хинондегидрогеназы 1 (NQO1), белка 5, связывающего жирные кислоты (FABP5), B7-H3 (CD276), представителя 3 семейства SLAM (SLAMF3; лимфоцитарный антиген 9; LY9), представителя 7 семейства SLAM (SLAMF7), маннозного рецептора C-типа 1 (MRC1), представителя 4 семейства 12 переносчиков растворенных веществ (SLC12A), нейропилина 1 (NRP1) и любой их комбинации. В некоторых вариантах осуществления введение приводит к большей экспрессии одного или нескольких генов сигнального пути NRF2. В определенных вариантах осуществления один или несколько генов сигнального пути NRF2 выбраны из группы, состоящей из генов HO-1, OSGIN1, SOD1, GSR, GCLC, GCLM, NQO1 и любой их комбинации. В некоторых вариантах осуществления введение приводит к большей экспрессии одного или нескольких генов сигнального пути PPAR-гамма. В некоторых вариантах осуществления один или несколько генов сигнального пути PPAR-гамма выбраны из группы, состоящей из генов PPAR-гамма, LPL, FABP5, EGR2 и любой их комбинации. В некоторых вариантах осуществления введение приводит к большей экспрессии одного или нескольких генов, выбранных из группы, состоящей из генов B7-H3 (CD276), SLAMF3, SLAMF7, MRC1, SLC12A, NRP1 и любой их комбинации. В конкретных вариантах осуществления введение приводит к большей экспрессии одного или нескольких генов по сравнению с экспрессией одного или нескольких генов у не получавшего лечение человека или у человека, которому вводили фактор свертывания крови в отдельности, где экспрессия является в по меньшей мере приблизительно 1,5 раза большей, в по меньшей мере приблизительно 2 раза большей, в по меньшей мере приблизительно 2,5 раза большей, в по меньшей мере приблизительно 3 раза большей, в по меньшей мере приблизительно 3,5 раза большей, в по меньшей мере приблизительно 4 раза большей, в по меньшей мере приблизительно 4,5 раза большей или в по меньшей мере приблизительно 5 раз большей.

[0142] В некоторых вариантах осуществления дифференциальная экспрессия одного или нескольких генов наблюдается через менее чем 6 часов после введения химерного полипептида, описанного в данном документе, например, rFVIIIFc-VWF-XTEN. В некоторых вариантах осуществления дифференциальная экспрессия наблюдается через менее чем 12 часов после введения. В некоторых вариантах осуществления дифференциальная экспрессия наблюдается через менее чем 18 часов после введения. В некоторых вариантах осуществления дифференциальная экспрессия наблюдается через менее чем 24 часа после введения.

[0143] В некоторых вариантах осуществления ингибирующий иммунный ответ включает клеточноопосредованный иммунный ответ. В определенных вариантах осуществления клеточноопосредованный иммунный ответ включает высвобождение цитокина. В некоторых вариантах осуществления цитокин представляет собой любой цитокин, ассоциированный с усиленным иммунным ответом. В некоторых вариантах осуществления цитокин выбран из группы, состоящей из IL-1, IL-6, IL-16, IL-12, IL-4, IL-17, фактора некроза опухоли α (TNF-α), интерферона α, интерферона γ и любой их комбинации. В одном варианте осуществления клеточноопосредованный иммунный ответ предусматривает увеличенные уровни IL-12 в сыворотке крови. В другом варианте осуществления клеточноопосредованный иммунный ответ предусматривает увеличенные уровни IL-4 в сыворотке крови. В другом варианте осуществления клеточноопосредованный иммунный ответ предусматривает увеличенные уровни IL-17 в сыворотке крови. В другом варианте осуществления клеточноопосредованный иммунный ответ предусматривает увеличенные уровни TNF-α в сыворотке крови.

[0144] Было установлено, что различные генные мутации связаны с увеличенным риском развития ингибирующего иммунного ответа. Например, полиморфизм TNF-α -308G>A в Hap2, который ассоциирован с увеличенными уровнями конститутивной и индуцируемой транскрипции TNF, был связан с увеличенным риском развития ингибирующего иммунного ответа. См. Astermark et al., Blood 108: 3739-3745 (2006), которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления у человека имеется генетический полиморфизм, ассоциированный с увеличенным уровнем TNF-α. В некоторых вариантах осуществления полиморфизм представляет собой полиморфизм TNF-α -308G>A. В некоторых вариантах осуществления у человека имеется полиморфизм в гене IL10, например, полиморфизм, ассоциированный с увеличенной секрецией IL10. В некоторых вариантах осуществления FVIII-Fc вводят субъекту с аллелем 134 микросателлита IL10G в промоторной области гена IL10. См. Astermark et al. Hemostatis, Thrombosis, and Vascular Biology 108: 3739-3745 (2006), которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0145] В некоторых вариантах осуществления у человека имеется генетический полиморфизм, ассоциированный с уменьшенной экспрессией CTLA-4 (антигена 4 цитотоксических Т-лимфоцитов). В некоторых вариантах осуществления у человека имеется мутация в молекулах DR15 (HLA-DR15) или DQB0602 MHC (главного комплекса гистосовместимости) класса II. Другими молекулами MHC класса II, ассоциированными с развитием ингибирующего иммунного ответа у субъектов с гемофилией, являются A3, B7, C7, DQA0102, C2, DQA0103, DQB0603 и DR13 (см. Inhibitors in Patients with Hemophilia, E.C. Rodriguez-Merchan & C.A. Lee, Eds., Blackwell Science, Ltd., 2002).

[0146] В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению обеспечивают снижение уровня одного или нескольких цитокинов у субъекта по сравнению с уровнем одного или нескольких цитокинов у субъекта после предшествующего лечения с помощью полипептида, состоящего из белка FVIII. В другом варианте осуществления способы по настоящему изобретению обеспечивают снижение уровня одного или нескольких цитокинов у субъекта по сравнению с уровнем одного или нескольких цитокинов у субъекта до введения. В других вариантах осуществления экспрессия одной или нескольких толерогенных молекул увеличивается после применения способов по настоящему изобретению по сравнению с уровнем экспрессии одной или нескольких толерогенных молекул до введения. В определенных вариантах осуществления одна или несколько толерогенных молекул выбраны из IL-10, TGF-β, IL-35, IDO-1 и любой их комбинации.

[0147] В других вариантах осуществления иммунный ответ включает клинический симптом, выбранный из группы, состоящей из увеличенной склонности к кровотечению, высокого потребления фактора свертывания крови, отсутствия ответа на терапию фактором свертывания крови, уменьшенной эффективности терапии фактором свертывания крови, сокращенного периода полужизни фактора свертывания крови и любой их комбинации. В определенных вариантах осуществления иммунный ответ включает клинический симптом, выбранный из группы, состоящей из увеличенной склонности к кровотечению, высокого потребления фактора свертывания крови, отсутствия ответа на терапию фактором свертывания крови, уменьшенной эффективности терапии фактором свертывания крови, уменьшенного восстановления активности фактора свертывания крови, отслеживаемого в плазме крови, сокращенного периода полужизни фактора свертывания крови и любой их комбинации.

[0148] В определенных вариантах осуществления у человека ранее было диагностировано наличие ингибирующего иммунного ответа. Такой диагноз можно поставить с помощью любых способов, известных из уровня техники. Например, человек может характеризоваться наличием иммунного ответа на фактор свертывания крови, например, FVIII, если у человека имеется одно или несколько из следующего: (a) титра ингибирующих антител к фактору свертывания крови, превышающего или равного 0,6 БЕ; (b) увеличенных уровней одного или нескольких цитокинов, выбранных из группы, состоящей из IL-12, IL-4, IL-17 и TNF-α, в сыворотке крови; (c) увеличенной склонности к кровотечению; (d) высокого потребления фактора свертывания крови; (e) отсутствия ответа на терапию фактором свертывания крови; (f) уменьшенной эффективности терапии фактором свертывания крови; (g) сокращенного периода полужизни фактора свертывания крови и любой их комбинации. В одном конкретном варианте осуществления человек характеризуется наличием иммунного ответа на фактор свертывания крови, если у человека титр ингибирующих антител к фактору свертывания крови превышает или равен 0,6 БЕ.

[0149] В некоторых вариантах осуществления у человека ранее было диагностировано наличие развившегося ингибирующего иммунного ответа на фактор свертывания крови за по меньшей мере приблизительно 1 месяц, по меньшей мере приблизительно 2 месяца, по меньшей мере приблизительно 3 месяца, по меньшей мере приблизительно 4 месяца, по меньшей мере приблизительно 5 месяцев, по меньшей мере приблизительно 6 месяцев, по меньшей мере приблизительно 7 месяцев, по меньшей мере приблизительно 8 месяцев, по меньшей мере приблизительно 9 месяцев, по меньшей мере приблизительно 10 месяцев, по меньшей мере приблизительно 11 месяцев, по меньшей мере приблизительно 12 месяцев, по меньшей мере приблизительно 13 месяцев, по меньшей мере приблизительно 14 месяцев, по меньшей мере приблизительно 15 месяцев, по меньшей мере приблизительно 16 месяцев, по меньшей мере приблизительно 17 месяцев, по меньшей мере приблизительно 18 месяцев, по меньшей мере приблизительно 19 месяцев, по меньшей мере приблизительно 20 месяцев, по меньшей мере приблизительно 21 месяц, по меньшей мере приблизительно 22 месяца, по меньшей мере приблизительно 23 месяца, по меньшей мере приблизительно 24 месяца, по меньшей мере приблизительно 27 месяцев, по меньшей мере приблизительно 30 месяцев, по меньшей мере приблизительно 33 месяца, по меньшей мере приблизительно 36 месяцев, по меньшей мере приблизительно 39 месяцев, по меньшей мере приблизительно 42 месяца, по меньшей мере приблизительно 45 месяцев, по меньшей мере приблизительно 48 лет, по меньшей мере приблизительно 51 месяц, по меньшей мере приблизительно 54 месяца, по меньшей мере приблизительно 57 месяцев, по меньшей мере приблизительно 60 месяцев, по меньшей мере приблизительно 6 лет, по меньшей мере приблизительно 7 лет, по меньшей мере приблизительно 8 лет, по меньшей мере приблизительно 10 лет, по меньшей мере приблизительно 15 лет или по меньшей мере приблизительно 20 лет до введения. В одном варианте осуществления у человека ранее было диагностировано наличие развившегося ингибирующего иммунного ответа на фактор свертывания крови за по меньшей мере приблизительно 5 лет до введения.

[0150] В некоторых вариантах осуществления способы по настоящему изобретению обеспечивают улучшенное время достижения толерантности по сравнению со стандартными способами индукции иммунной толерантности. Используемый в данном документе термин "время достижения толерантности" относится к количеству времени между введением первой дозы композиции или химерного белка, содержащих фактор свертывания крови и Fc-область, и развитием иммунной толерантности у человека. Уменьшение времени достижения толерантности может иметь значительные преимущества для человека, в том числе без ограничения уменьшать общее финансовое бремя, требуемое для достижения толерантности. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет от приблизительно 1 до приблизительно 24 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 23 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 22 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 21 недели, от приблизительно 2 до приблизительно 20 недель, от приблизительно 2 до приблизительно 19 недель, от приблизительно 2 до приблизительно 18 недель, от приблизительно 2 до приблизительно 17 недель, от приблизительно 3 до приблизительно 16 недель, от приблизительно 3 до приблизительно 15 недель, от приблизительно 3 до приблизительно 14 недель, от приблизительно 3 до приблизительно 13 недель, от приблизительно 4 до приблизительно 12 недель, от приблизительно 4 до приблизительно 11 недель, от приблизительно 4 до приблизительно 10 недель, от приблизительно 4 до приблизительно 9 недель, от приблизительно 5 до приблизительно 8 недель, от приблизительно 5 до приблизительно 7 недель, от приблизительно 5 до приблизительно 6 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 12 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 11 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 10 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 9 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 8 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 7 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 6 недель, от приблизительно 1 до приблизительно 5 недель или от приблизительно 1 до приблизительно 4 недель. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 70 недель, менее чем приблизительно 65 недель, менее чем приблизительно 60 недель, менее чем приблизительно 58 недель, менее чем приблизительно 56 недель, менее чем приблизительно 54 недели, менее чем приблизительно 52 недели, менее чем приблизительно 50 недель, менее чем приблизительно 48 недель, менее чем приблизительно 46 недель, менее чем приблизительно 44 недели, менее чем приблизительно 42 недели, менее чем приблизительно 40 недель, менее чем приблизительно 38 недель, менее чем приблизительно 36 недель, менее чем приблизительно 34 недели, менее чем приблизительно 32 недели, менее чем приблизительно 30 недель, менее чем приблизительно 28 недель, менее чем приблизительно 26 недель, менее чем приблизительно 24 недели, менее чем приблизительно 23 недели, менее чем приблизительно 22 недели, менее чем приблизительно 21 неделю, менее чем приблизительно 20 недель, менее чем приблизительно 19 недель, менее чем приблизительно 18 недель, менее чем приблизительно 17 недель, менее чем приблизительно 16 недель, менее чем приблизительно 15 недель, менее чем приблизительно 14 недель, менее чем приблизительно 13 недель, менее чем приблизительно 12 недель, менее чем приблизительно 11 недель, менее чем приблизительно 10 недель, менее чем приблизительно 9 недель, менее чем приблизительно 8 недель, менее чем приблизительно 7 недель, менее чем приблизительно 6 недель, менее чем приблизительно 5 недель, менее чем приблизительно 4 недели, менее чем приблизительно 3 недели, менее чем приблизительно 2 недели или менее чем приблизительно 1 неделю. В определенных вариантах осуществления время достижения толерантности составляет от приблизительно 4 до приблизительно 12 недель. В одном варианте осуществления время достижения толерантности составляет приблизительно 4 недели. В другом варианте осуществления время достижения толерантности составляет приблизительно 12 недель. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 10 месяцев. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 9 месяцев. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 8 месяцев. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 7 месяцев. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 6 месяцев. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 5 месяцев. В некоторых вариантах осуществления время достижения толерантности составляет менее чем приблизительно 4 месяца. В некоторых вариантах осуществления способы согласно настоящему изобретению приводят к более короткому времени достижения толерантности у человека после лечения с помощью композиции или химерного белка, содержащих фактор свертывания крови и Fc-область, по сравнению со временем достижения толерантности после лечения с помощью фактора свертывания крови в отдельности.

[0151] В некоторых вариантах осуществления развитие иммунной толерантности характеризуется титром ингибирующего антитела к фактору свертывания крови, составляющим менее чем приблизительно 0,6 БЕ. В некоторых вариантах осуществления формирование иммунной толерантности характеризуется титром ингибирующего антитела к фактору свертывания крови, составляющим приблизительно 0,5 БЕ. В некоторых вариантах осуществления развитие иммунной толерантности характеризуется титром ингибирующего антитела к фактору свертывания крови, составляющим менее чем приблизительно 0,4 БЕ. В некоторых вариантах осуществления развитие иммунной толерантности характеризуется титром ингибирующего антитела к фактору свертывания крови, составляющим менее чем приблизительно 0,3 БЕ. В некоторых вариантах осуществления развитие иммунной толерантности характеризуется титром ингибирующего антитела к фактору свертывания крови, составляющим менее чем приблизительно 0,2 БЕ. В некоторых вариантах осуществления развитие иммунной толерантности характеризуется титром ингибирующего антитела к фактору свертывания крови, составляющим менее чем приблизительно 0,1 БЕ. В некоторых вариантах осуществления развитие иммунной толерантности характеризуется титром ингибирующего антитела к фактору свертывания крови, составляющим 0,0 БЕ. В определенных вариантах осуществления титр ингибирующих иммунных антител наблюдают при двух последовательных измерениях, например, в две последовательные недели в течение четырехнедельного периода.

[0152] В некоторых вариантах осуществления развитие иммунной толерантности характеризуется постепенным восстановлением до > 66% (например, постепенным восстановлением до приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%). Используемый в данном документе термин "постепенное восстановление" относится к пиковым уровням FVIII через 15-30 минут после инфузии.

[0153] После завершения периода индукции и периода постепенного снижения дозы субъект затем может получать профилактическое лечение с помощью химерного белка. Профилактический режим введения доз может представлять собой любой режим введения доз, раскрытый в данном документе.

[0154] В некоторых вариантах осуществления человек, получающий лечение с помощью способов по настоящему изобретению, получает или недавно получил иммуностимулирующую терапию. Например, о наличии ингибиторов также сообщалось у HCV-положительных пациентов с гемофилией А, проходящих лечение интерфероном, а также у HIV-положительных пациентов с гемофилией А, у которых имеется воспалительный синдром восстановления иммунитета, ассоциированный с антиретровирусной терапией. См. Report of Expert Meeting on Factor VIII Products and Inhibitor Development, European Medicines Agency (February 28, 2006 - March 2, 2006). Таким образом, в некоторых вариантах осуществления человек получает терапию интерфероном. В некоторых вариантах осуществления человек получает противовирусную терапию. В некоторых вариантах осуществления человек получает антиретровирусную терапию, и у него имеется воспалительный синдром восстановления иммунитета.

[0155] В определенных вариантах осуществления человек принимал фактор свертывания крови, например, FVIII, в течение менее 150 дней воздействия (ED). В одном варианте осуществления человек принимал его в течение менее 50 ED. В другом варианте осуществления человек принимал его в течение менее 20 ED.

[0156] Некоторые аспекты настоящего изобретения относятся к способам снижения тяжести или частоты возникновения аллергической или анафилактической реакции на фактор свертывания крови у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающим введение субъекту композиции или химерного белка, содержащих фактор свертывания крови и Fc-область. В некоторых вариантах осуществления введение композиции или химерного белка обеспечивает снижение тяжести анафилактоидной реакции на фактор свертывания крови. В некоторых вариантах осуществления введение композиции или химерного белка обеспечивает снижение тяжести аллергической реакции на фактор свертывания крови.

III. Химерные полипептиды

[0157] Химерные полипептиды, применимые для настоящего изобретения, содержат белок FVIII, содержащий полипептид FVIII, и фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3 VWF. Фрагмент VWF используется для предотвращения или блокирования взаимодействия белка FVIII с эндогенным VWF, за счет чего обеспечивается предотвращение выведения белка FVIII через путь выведения VWF. Для предотвращения диссоциации белка FVIII и фрагмента VWF в некоторых вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF связаны непосредственно или опосредованно друг с другом с помощью связи, более сильной, чем естественное взаимодействие между FVIII и VWF.

[0158] В определенных вариантах осуществления белок FVIII связан с фрагментом VWF с помощью ковалентной связи. Ковалентная связь может представлять собой любую ковалентную связь, известную из уровня техники. В некоторых вариантах осуществления ковалентная связь представляет собой дисульфидную связь. В некоторых вариантах осуществления ковалентная связь представляет собой пептидную связь. В других вариантах осуществления белок FVIII модифицирован для увеличения силы взаимодействия между белком FVIII и фрагментом VWF. В других вариантах осуществления фрагмент VWF модифицирован для увеличения силы взаимодействия между белком FVIII и фрагментом VWF. В других вариантах осуществления как белок FVIII, так и фрагмент VWF модифицированы для увеличения силы взаимодействия между белком FVIII и фрагментом VWF.

[0159] В конкретных вариантах осуществления белок FVIII, содержащий полипептид FVIII, и фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3 VWF, связаны непосредственно с помощью по меньшей мере одной ковалентной связи между по меньшей мере одной аминокислотой в последовательности полипептида FVIII и по меньшей мере одной аминокислотой в доменах D' и D3 VWF. В других вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF связаны опосредованно с помощью по меньшей мере одной ковалентной связи между по меньшей мере одной аминокислотой в последовательности полипептида FVIII и по меньшей мере одной аминокислотой в гетерологичной последовательности, непосредственно или опосредованно слитой с доменами D' и D3 VWF. В других вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF связаны опосредованно с помощью по меньшей мере одной ковалентной связи между по меньшей мере одной аминокислотой в последовательности фрагмента VWF и по меньшей мере одной аминокислотой в гетерологичной последовательности, непосредственно или опосредованно слитой с полипептидом FVIII. В еще нескольких других вариантах осуществления белок FVIII и фрагмент VWF связаны опосредованно с помощью по меньшей мере одной ковалентной связи между по меньшей мере одной аминокислотой в гетерологичной последовательности, непосредственно или опосредованно слитой с доменами D' и D3 VWF, и по меньшей мере одной аминокислотой в гетерологичной последовательности, непосредственно или опосредованно слитой с полипептидом FVIII.

[0160] Белок FVIII по настоящему изобретению может содержать полипептид FVIII и один или несколько гетерологичных компонентов, например, компонентов, обеспечивающих продление периода полужизни, непосредственно или опосредованно слитых с полипептидом FVIII. Фрагмент VWF по настоящему изобретению также может содержать домен D' и домен D3 VWF и один или несколько гетерологичных компонентов, например, компонентов, обеспечивающих продление периода полужизни, непосредственно или опосредованно слитых с доменами D' и D3 VWF. В некоторых вариантах осуществления белок FVIII, применимый для настоящего изобретения, состоит по сути из полипептида FVIII или состоит из него, а фрагмент VWF, применимый для настоящего изобретения, содержит домен D' и домен D3 VWF и один или несколько гетерологичных компонентов, например, компонентов, обеспечивающих продление периода полужизни, непосредственно или опосредованно слитых с доменами D' и D3 VWF. В некоторых вариантах осуществления белок FVIII содержит полипептид FVIII и один или несколько гетерологичных компонентов, например, компонентов, обеспечивающих продление периода полужизни, непосредственно или опосредованно слитых с полипептидом FVIII, а фрагмент VWF, применимый для настоящего изобретения, состоит по сути из домена D' и домена D3 VWF или состоит из них. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит белок FVIII, состоящий по сути из полипептида FVIII или состоящий из него, и фрагмент VWF, состоящий по сути из домена D' и домена D3 VWF или состоящий из них.

[0161] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид или белок, раскрытый в данном документе, представляет собой гетеродимер FVIII-XTEN-Fc/D'D3-XTEN-Fc. В одном варианте осуществления гетеродимерный химерный полипептид FVIII-XTEN-Fc/D'D3-XTEN-Fc содержит: (i) белок FVIII, содержащий полипептид FVIII, XTEN, вставленный в домен B полипептида FVIII, и первую Fc-область; и (ii) белок VWF, содержащий фрагмент VWF, вторую последовательность XTEN, линкер a2 и вторую Fc-область. Схематическое изображение иллюстративного гетеродимера FVIII-XTEN-Fc/D'D3-XTEN-Fc, который представляет собой rFVIIIFc-VWF-XTEN, представлено на фиг. 1.

[0162] В конкретном варианте осуществления химерный полипептид представляет собой rFVIIIFc-VWF-XTEN. В другом конкретном варианте осуществления rFVIIIFc-VWF-XTEN содержит (i) белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 203, и (ii) белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 205. В еще одном конкретном варианте осуществления rFVIIIFc-VWF-XTEN содержит (i) белок FVIII и (ii) белок VWF, которые ковалентно соединены друг с другом посредством дисульфидной связи.

III.A. Полипептидные факторы VIII

[0163] "Фактор VIII", сокращенно называемый во всей настоящей заявке как "FVIII", как используется в данном документе, означает функциональный полипептид FVIII с его нормальной ролью в коагуляции, если не указано иное. Таким образом, термин "FVIII" включает варианты полипептидов, которые являются функциональными. "Белок FVIII" используется для обозначения полипептида (или белка) FVIII в отдельности, полипептида FVIII, слитого с дополнительными полипептидами, и полипептида FVIII, связанного с одним или несколькими дополнительными полипептидами, при условии, что белок FVIII демонстрирует функцию/активность FVIII. Термины "полипептид FVIII", "часть FVIII" и "FVIII" относятся к последовательности полипептида FVIII в отдельности. Примеры функций/видов активности FVIII включают без ограничения способность активировать коагуляцию, способность действовать в качестве кофактора для фактора IX или способность образовывать теназный комплекс с фактором IX в присутствии Ca²⁺ и фосфолипидов, который затем обеспечивает превращение фактора X в активированную форму Xa. Полипептид FVIII может представлять собой полипептид FVIII человека, свиньи, собаки, крысы или мыши. Кроме того, путем сравнения FVIII от людей и FVIII от других видов были идентифицированы консервативные остатки, которые, вероятно, требуются для функционирования (Cameron et al., Thromb. Haemost. 79:317-22 (1998); US 6251632). Известны полноразмерные полипептидные и полинуклеотидные последовательности, а также многие функциональные фрагменты, мутантные и модифицированные варианты. Различные аминокислотные и нуклеотидные последовательности FVIII раскрыты, например, в публикациях заявок на патент США №№ 2015/0158929 A1, 2014/0308280 A1 и 2014/0370035 A1 и в международной публикации № WO 2015/106052 A1. Полипептиды FVIII включают в себя, например, полноразмерный FVIII, полноразмерный FVIII без Met на N-конце, зрелый полипептид FVIII (без сигнальной последовательности), зрелый полипептид FVIII с дополнительным Met на N-конце и/или полипептид FVIII с полной или частичной делецией домена B. Варианты FVIII содержат делеции домена B, будь то частичные или полные делеции.

[0164] Полипептид FVIII химерного полипептида, используемого в данном документе, обладает активностью FVIII в плазме крови. Активность FVIII можно измерять с помощью любых способов, известных из уровня техники. Доступен ряд тестов для оценки функции системы коагуляции: тест активированного частичного тромбопластинового времени (aPTT), хромогенный анализ, анализ ROTEM, тест протромбинового времени (PT) (также применяется для определения INR), тестирование содержания фибриногена (зачастую с помощью способа Клаусса), подсчет тромбоцитов, тестирование функции тромбоцитов (зачастую с помощью PFA-100), TCT, определение времени свертывания крови, тест смешивания (устраняется ли аномалия при смешивании плазмы крови пациента с нормальной плазмой крови), анализы факторов коагуляции, антител к фосфолипидам, D-димера, генетические тесты (например, лейденовской мутации фактора V, мутации протромбина G20210A), определение времени свертывания крови с разбавленным ядом гадюки Рассела (dRVVT), различные тесты функции тромбоцитов, тромбоэластография (TEG или Sonoclot), тромбоэластометрия (TEM^®, например, ROTEM^®) или определение времени лизиса эуглобулинов (ELT).

[0165] Тест aPTT является показателем функционирования, измеряющим эффективность как "внутреннего" (также называемого контактным путем активации), так и общего путей коагуляции. Этот тест обычно применяют для измерения свертывающей активности коммерчески доступных рекомбинантных факторов свертывания крови, например, FVIII. Его, как правило, применяют в сочетании с протромбиновым временем (PT), с помощью которого измеряют внешний путь. (См., например, Kamal et al., Mayo Clin Proc., 82(7):864-873 (2007)). В одном варианте осуществления aPTT тестируют с помощью анализа, в котором активность FVIII измеряют с использованием реагента для определения активированного PTT Dade^® Actin^® FSL (Siemens Health Care Diagnostics) на анализаторе BCS^® XP (Siemens Healthcare Diagnostics). В определенных вариантах осуществления химерный полипептид характеризуется активностью FVIII в плазме крови, составляющей по меньшей мере приблизительно 1%, по меньшей мере приблизительно 2%, по меньшей мере приблизительно 3%, по меньшей мере приблизительно 4%, по меньшей мере приблизительно 5%, по меньшей мере приблизительно 6%, по меньшей мере приблизительно 7%, по меньшей мере приблизительно 8%, по меньшей мере приблизительно 9%, по меньшей мере приблизительно 10%, по меньшей мере приблизительно 11%, по меньшей мере приблизительно 12%, по меньшей мере приблизительно 13%, по меньшей мере приблизительно 14%, по меньшей мере приблизительно 15%, по меньшей мере приблизительно 15%, по меньшей мере приблизительно 16%, по меньшей мере приблизительно 17%, по меньшей мере приблизительно 18%, по меньшей мере приблизительно 19% или по меньшей мере приблизительно 20% согласно измерению с помощью теста aPTT.

[0166] Анализ aPTT также можно применять для оценки активности химерного полипептида перед введением пациенту или субъекту. (Hubbard AR, et al. J Thromb Haemost 11: 988-9 (2013)). Анализ aPTT можно дополнительно применять в сочетании с любым из анализов, описанных в данном документе, перед введением либо после введения пациенту или субъекту.

[0167] Анализ ROTEM предоставляет информацию обо всех кинетических показателях гемостаза: времени свертывания крови, образовании сгустка, стабильности и лизисе сгустка. Различные параметры тромбоэластометрии зависят от активности системы коагуляции плазмы крови, функции тромбоцитов, фибринолиза или многих факторов, которые влияют на эти взаимодействия. Этот анализ может дать полное представление о вторичном гемостазе.

[0168] Механизм хромогенного анализа основан на принципах каскада коагуляции крови, где активированный FVIII ускоряет превращение фактора X в фактор Xa в присутствии активированного фактора IX, фосфолипидов и ионов кальция. Активность фактора Ха оценивают путем гидролиза п-нитроанилидного (pNA) субстрата, специфичного для фактора Ха. Начальная скорость высвобождения п-нитроанилина, измеренная при 405 нМ, прямо пропорциональна активности фактора Xa и, следовательно, активности FVIII в образце. В одном варианте осуществления хромогенный анализ представляет собой анализ BIOPHEN FVIII: C (Hyphen Biomed, Невиль-сюр-Уаз, Франция).

[0169] Хромогенный анализ рекомендован подкомитетом по FVIII и фактору IX научного и стандартизационного комитета (SSC) Международного общества по тромбозу и гемостазу (ISTH). С 1994 года хромогенный анализ также являлся эталонным способом определения активности концентрата FVIII согласно Европейской фармакопее. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, содержащий полипептид FVIII, обладает активностью FVIII, сравнимой с таковой у химерного полипептида, содержащего зрелый полипептид FVIII или полипептид FVIII BDD (например, RECOMBINATE^®, KOGENATE FS^®, HELIXATE FS^®, XYNTHA/REFACTO AB^®, HEMOFIL-M^®, MONARC-M^®, MONOCLATE-P^®, HUMATE-P^®, ALPHANATE^®, KOATE-DVI^®, AFSTYLA^® и HYATE:C^®).

[0170] Хромогенный анализ также можно применять для оценки активности химерного полипептида перед введением пациенту или субъекту (Hubbard AR, et al. J Thromb Haemost 11: 988-9 (2013)). Хромогенный анализ можно дополнительно применять в сочетании с любым из анализов, описанных в данном документе, перед введением либо после введения пациенту или субъекту.

[0171] В других вариантах осуществления химерный полипептид, содержащий полипептид FVIII по настоящему изобретению, характеризуется скоростью образования фактора Ха, сравнимой с таковой у химерного полипептида, содержащего зрелый полипептид FVIII или полипептид FVIII BDD (например, ADVATE^®, REFACTO^® или ELOCTATE^®).

[0172] Для активации фактора X до фактора Xa активированный фактор IX (фактор IXa) гидролизует одну связь между аргинином и изолейцином в факторе X с образованием фактора Xa в присутствии Ca²⁺, мембранных фосфолипидов и кофактора FVIII. Следовательно, взаимодействие FVIII с фактором IX является критически важным в пути коагуляции. В определенных вариантах осуществления химерный полипептид, содержащий полипептид FVIII, может взаимодействовать с фактором IXa со скоростью, сравнимой с таковой у химерного полипептида, содержащего последовательность зрелого полипептида FVIII или полипептид FVIII BDD (например, ADVATE^®, REFACTO^® или ELOCTATE^®).

[0173] Кроме того, FVIII связывается с фактором фон Виллебранда, находясь в неактивной форме в кровотоке. FVIII быстро разрушается, если он не связан с VWF, и высвобождается от VWF под действием тромбина. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, содержащий полипептид FVIII, связывается с фактором фон Виллебранда, например, фрагментом VWF, раскрытым в данном документе, на уровне, сравнимом с таковым у химерного полипептида, содержащего последовательность зрелого полипептида FVIII или полипептид FVIII BDD (например, ADVATE^®, REFACTO^® или ELOCTATE^®).

[0174] FVIII можно инактивировать с помощью активированного белка С в присутствии кальция и фосфолипидов. Активированный белок C производит расщепление тяжелой цепи FVIII после аргинина 336 в домене A1, что разрушает сайт взаимодействия с субстратом, представляющим собой фактор X, и производит расщепление после аргинина 562 в домене A2, что усиливает диссоциацию домена A2, а также разрушает сайт взаимодействия с фактором IXa. Это расщепление также приводит к разделению пополам домена A2 (43 кДа) и образованию доменов A2-N (18 кДа) и A2-C (25 кДа). Таким образом, активированный белок C может катализировать расщепление в нескольких сайтах тяжелой цепи. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид, содержащий полипептид FVIII, инактивируется под действием активированного белка С на уровне, сравнимом с таковым у химерного полипептида, содержащего последовательность зрелого полипептида FVIII или FVIII BDD (например, ADVATE^®, REFACTO^® или ELOCTATE^®).

[0175] В других вариантах осуществления химерный полипептид, содержащий полипептид FVIII, обладает активностью FVIII in vivo, сравнимой с таковой у химерного полипептида, содержащего последовательность зрелого полипептида FVIII или полипептид FVIII BDD (например, ADVATE^®, REFACTO^® или ELOCTATE^®). В конкретном варианте осуществления химерный полипептид, содержащий полипептид FVIII, способен обеспечивать защиту у мыши HemA на уровне, сравнимом с таковым у химерного полипептида, содержащего последовательность зрелого полипептида FVIII или полипептид FVIII BDD (например, ADVATE^®, REFACTO^® или ELOCTATE^®), в модели рассечения хвостовой вены на мышах HemA.

[0176] Примеры последовательностей FVIII человека (полноразмерных) показаны ниже.

Таблица 2. Аминокислотная последовательность полноразмерного фактора VIII человека

(Полноразмерный FVIII: сигнальный пептид FVIII выделен подчеркиванием; тяжелая цепь FVIII выделена двойным подчеркиванием;
домен B выделен курсивом; и легкая цепь FVIII представлена в виде обычного текста)

Сигнальный пептид: (SEQ ID NO: 64)

mqielstcfflcllrfcfs

Зрелый фактор VIII (SEQ ID NO: 65)*

Atrryylgavelswdymqsdlgelpvdarfpprvpksfpfntsvvykktlfveftdhlfniakprppwmgllgptiqaevydtvvitlknmashpvslhavgvsywkasegaeyddqtsqrekeddkvfpggshtyvwqvlkengpmasdplcltysylshvdlvkdlnsgligallvcregslakektqtlhkfillfavfdegkswhsetknslmqdrdaasarawpkmhtvngyvnrslpgligchrksvywhvigmgttpevhsifleghtflvrnhrqasleispitfltaqtllmdlgqfllfchisshqhdgmeayvkvdscpeepqlrmknneeaedydddltdsemdvvrfdddnspsfiqirsvakkhpktwvhyiaaeeedwdyaplvlapddrsyksqylnngpqrigrkykkvrfmaytdetfktreaiqhesgilgpllygevgdtlliifknqasrpyniyphgitdvrplysrrlpkgvkhlkdfpilpgeifkykwtvtvedgptksdprcltryyssfvnmerdlasgligpllicykesvdqrgnqimsdkrnvilfsvfdenrswylteniqrflpnpagvqledpefqasnimhsingyvfdslqlsvclhevaywyilsigaqtdflsvffsgytfkhkmvyedtltlfpfsgetvfmsmenpglwilgchnsdfrnrgmtallkvsscdkntgdyyedsyedisayllsknnaiepr sfsqnsrhpstrqkqfnattipendiektdpwfahrtpmpkiqnvsssdllmllrqsptphglslsdlqeakyetfsddpspgaidsnnslsemthfrpqlhhsgdmvftpesglqlrlneklgttaatelkkldfkvsstsnnlistipsdnlaagtdntsslgppsmpvhydsqldttlfgkksspltesggplslseenndskllesglmnsqesswgknvsstesgrlfkgkrahgpalltkdnalfkvsisllktnktsnnsatnrkthidgpsllienspsvwqnilesdtefkkvtplihdrmlmdknatalrlnhmsnkttssknmemvqqkkegpippdaqnpdmsffkmlflpesarwiqrthgknslnsgqgpspkqlvslgpeksvegqnflseknkvvvgkgeftkdvglkemvfpssrnlfltnldnlhennthnqekkiqeeiekketliqenvvlpqihtvtgtknfmknlfllstrqnvegsydgayapvlqdfrslndstnrtkkhtahfskkgeeenleglgnqtkqivekyacttrispntsqqnfvtqrskralkqfrlpleetelekriivddtstqwsknmkhltpstltqidynekekgaitqsplsdcltrshsipqanrsplpiakvssfpsirpiyltrvlfqdnsshlpaasyrkkdsgvqesshflqgakknnlslailtlemtgdqrevgslgtsatnsvtykkventvlpkpdlpktsgkvellpkvhiyqkdlfptetsngspghldlvegsllqgtegaikwneanrpgkvpflrvatessaktpsklldplawdnhygtqipkeewksqekspektafkkkdtilslnacesnhaiaainegqnkpeievtwakqgrterlcsqnppvlkrhqreitrttlqsdqeeidyddtisvemkkedfdiydedenqsprsfqkktrhyfiaaverlwdygmsssphvlrnraqsgsvpqfkkvvfqeftdgsftqplyrgelnehlgllgpyiraevednimvtfrnqasrpysfysslisyeedqrqgaeprknfvkpnetktyfwkvqhhmaptkdefdckawayfsdvdlekdvhsgligpllvchtntlnpahgrqvtvqefalfftifdetkswyftenmerncrapcniqmedptfkenyrfhaingyimdtlpglvmaqdqrirwyllsmgsnenihsihfsghvftvrkkeeykmalynlypgvfetvemlpskagiwrvecligehlhagmstlflvysnkcqtplgmasghirdfqitasgqygqwapklarlhysgsinawstkepfswikvdllapmiihgiktqgarqkfsslyisqfiimysldgkkwqtyrgnstgtlmvffgnvdssgikhnifnppiiaryirlhpthysirstlrmelmgcdlnscsmplgmeskaisdaqitassyftnmfatwspskarlhlqgrsnawrpqvnnpkewlqvdfqktmkvtgvttqgvkslltsmyvkeflisssqdghqwtlffqngkvkvfqgnqdsftpvvnsldpplltrylrihpqswvhqialrmevlgceaqdly

ТАБЛИЦА 3. Нуклеотидная последовательность, кодирующая полноразмерный FVIII (SEQ ID NO: 66)*
*Подчеркнутые нуклеиновые кислоты кодируют сигнальный пептид.

661 ATG CAAATAGAGC TCTCCACCTG
721 CTTCTTTCTG TGCCTTTTGC GATTCTGCTT TAGTGCCACC AGAAGATACT ACCTGGGTGC
781 AGTGGAACTG TCATGGGACT ATATGCAAAG TGATCTCGGT GAGCTGCCTG TGGACGCAAG
841 ATTTCCTCCT AGAGTGCCAA AATCTTTTCC ATTCAACACC TCAGTCGTGT ACAAAAAGAC
901 TCTGTTTGTA GAATTCACGG ATCACCTTTT CAACATCGCT AAGCCAAGGC CACCCTGGAT
961 GGGTCTGCTA GGTCCTACCA TCCAGGCTGA GGTTTATGAT ACAGTGGTCA TTACACTTAA
1021 GAACATGGCT TCCCATCCTG TCAGTCTTCA TGCTGTTGGT GTATCCTACT GGAAAGCTTC
1081 TGAGGGAGCT GAATATGATG ATCAGACCAG TCAAAGGGAG AAAGAAGATG ATAAAGTCTT
1141 CCCTGGTGGA AGCCATACAT ATGTCTGGCA GGTCCTGAAA GAGAATGGTC CAATGGCCTC
1201 TGACCCACTG TGCCTTACCT ACTCATATCT TTCTCATGTG GACCTGGTAA AAGACTTGAA
1261 TTCAGGCCTC ATTGGAGCCC TACTAGTATG TAGAGAAGGG AGTCTGGCCA AGGAAAAGAC
1321 ACAGACCTTG CACAAATTTA TACTACTTTT TGCTGTATTT GATGAAGGGA AAAGTTGGCA
1381 CTCAGAAACA AAGAACTCCT TGATGCAGGA TAGGGATGCT GCATCTGCTC GGGCCTGGCC
1441 TAAAATGCAC ACAGTCAATG GTTATGTAAA CAGGTCTCTG CCAGGTCTGA TTGGATGCCA
1501 CAGGAAATCA GTCTATTGGC ATGTGATTGG AATGGGCACC ACTCCTGAAG TGCACTCAAT
1561 ATTCCTCGAA GGTCACACAT TTCTTGTGAG GAACCATCGC CAGGCGTCCT TGGAAATCTC
1621 GCCAATAACT TTCCTTACTG CTCAAACACT CTTGATGGAC CTTGGACAGT TTCTACTGTT
1681 TTGTCATATC TCTTCCCACC AACATGATGG CATGGAAGCT TATGTCAAAG TAGACAGCTG
1741 TCCAGAGGAA CCCCAACTAC GAATGAAAAA TAATGAAGAA GCGGAAGACT ATGATGATGA
1801 TCTTACTGAT TCTGAAATGG ATGTGGTCAG GTTTGATGAT GACAACTCTC CTTCCTTTAT
1861 CCAAATTCGC TCAGTTGCCA AGAAGCATCC TAAAACTTGG GTACATTACA TTGCTGCTGA
1921 AGAGGAGGAC TGGGACTATG CTCCCTTAGT CCTCGCCCCC GATGACAGAA GTTATAAAAG
1981 TCAATATTTG AACAATGGCC CTCAGCGGAT TGGTAGGAAG TACAAAAAAG TCCGATTTAT
2041 GGCATACACA GATGAAACCT TTAAGACTCG TGAAGCTATT CAGCATGAAT CAGGAATCTT
2101 GGGACCTTTA CTTTATGGGG AAGTTGGAGA CACACTGTTG ATTATATTTA AGAATCAAGC
2161 AAGCAGACCA TATAACATCT ACCCTCACGG AATCACTGAT GTCCGTCCTT TGTATTCAAG
2221 GAGATTACCA AAAGGTGTAA AACATTTGAA GGATTTTCCA ATTCTGCCAG GAGAAATATT
2281 CAAATATAAA TGGACAGTGA CTGTAGAAGA TGGGCCAACT AAATCAGATC CTCGGTGCCT
2341 GACCCGCTAT TACTCTAGTT TCGTTAATAT GGAGAGAGAT CTAGCTTCAG GACTCATTGG
2401 CCCTCTCCTC ATCTGCTACA AAGAATCTGT AGATCAAAGA GGAAACCAGA TAATGTCAGA
2461 CAAGAGGAAT GTCATCCTGT TTTCTGTATT TGATGAGAAC CGAAGCTGGT ACCTCACAGA
2521 GAATATACAA CGCTTTCTCC CCAATCCAGC TGGAGTGCAG CTTGAGGATC CAGAGTTCCA
2581 AGCCTCCAAC ATCATGCACA GCATCAATGG CTATGTTTTT GATAGTTTGC AGTTGTCAGT
2641 TTGTTTGCAT GAGGTGGCAT ACTGGTACAT TCTAAGCATT GGAGCACAGA CTGACTTCCT
2701 TTCTGTCTTC TTCTCTGGAT ATACCTTCAA ACACAAAATG GTCTATGAAG ACACACTCAC
2761 CCTATTCCCA TTCTCAGGAG AAACTGTCTT CATGTCGATG GAAAACCCAG GTCTATGGAT
2821 TCTGGGGTGC CACAACTCAG ACTTTCGGAA CAGAGGCATG ACCGCCTTAC TGAAGGTTTC
2881 TAGTTGTGAC AAGAACACTG GTGATTATTA CGAGGACAGT TATGAAGATA TTTCAGCATA
2941 CTTGCTGAGT AAAAACAATG CCATTGAACC AAGAAGCTTC TCCCAGAATT CAAGACACCC
3001 TAGCACTAGG CAAAAGCAAT TTAATGCCAC CACAATTCCA GAAAATGACA TAGAGAAGAC
3061 TGACCCTTGG TTTGCACACA GAACACCTAT GCCTAAAATA CAAAATGTCT CCTCTAGTGA
3121 TTTGTTGATG CTCTTGCGAC AGAGTCCTAC TCCACATGGG CTATCCTTAT CTGATCTCCA
3181 AGAAGCCAAA TATGAGACTT TTTCTGATGA TCCATCACCT GGAGCAATAG ACAGTAATAA
3241 CAGCCTGTCT GAAATGACAC ACTTCAGGCC ACAGCTCCAT CACAGTGGGG ACATGGTATT
3301 TACCCCTGAG TCAGGCCTCC AATTAAGATT AAATGAGAAA CTGGGGACAA CTGCAGCAAC
3361 AGAGTTGAAG AAACTTGATT TCAAAGTTTC TAGTACATCA AATAATCTGA TTTCAACAAT
3421 TCCATCAGAC AATTTGGCAG CAGGTACTGA TAATACAAGT TCCTTAGGAC CCCCAAGTAT
3481 GCCAGTTCAT TATGATAGTC AATTAGATAC CACTCTATTT GGCAAAAAGT CATCTCCCCT
3541 TACTGAGTCT GGTGGACCTC TGAGCTTGAG TGAAGAAAAT AATGATTCAA AGTTGTTAGA
3601 ATCAGGTTTA ATGAATAGCC AAGAAAGTTC ATGGGGAAAA AATGTATCGT CAACAGAGAG
3661 TGGTAGGTTA TTTAAAGGGA AAAGAGCTCA TGGACCTGCT TTGTTGACTA AAGATAATGC
3721 CTTATTCAAA GTTAGCATCT CTTTGTTAAA GACAAACAAA ACTTCCAATA ATTCAGCAAC
3781 TAATAGAAAG ACTCACATTG ATGGCCCATC ATTATTAATT GAGAATAGTC CATCAGTCTG
3841 GCAAAATATA TTAGAAAGTG ACACTGAGTT TAAAAAAGTG ACACCTTTGA TTCATGACAG
3901 AATGCTTATG GACAAAAATG CTACAGCTTT GAGGCTAAAT CATATGTCAA ATAAAACTAC
3961 TTCATCAAAA AACATGGAAA TGGTCCAACA GAAAAAAGAG GGCCCCATTC CACCAGATGC
4021 ACAAAATCCA GATATGTCGT TCTTTAAGAT GCTATTCTTG CCAGAATCAG CAAGGTGGAT
4081 ACAAAGGACT CATGGAAAGA ACTCTCTGAA CTCTGGGCAA GGCCCCAGTC CAAAGCAATT
4141 AGTATCCTTA GGACCAGAAA AATCTGTGGA AGGTCAGAAT TTCTTGTCTG AGAAAAACAA
4201 AGTGGTAGTA GGAAAGGGTG AATTTACAAA GGACGTAGGA CTCAAAGAGA TGGTTTTTCC
4261 AAGCAGCAGA AACCTATTTC TTACTAACTT GGATAATTTA CATGAAAATA ATACACACAA
4321 TCAAGAAAAA AAAATTCAGG AAGAAATAGA AAAGAAGGAA ACATTAATCC AAGAGAATGT
4381 AGTTTTGCCT CAGATACATA CAGTGACTGG CACTAAGAAT TTCATGAAGA ACCTTTTCTT
4441 ACTGAGCACT AGGCAAAATG TAGAAGGTTC ATATGACGGG GCATATGCTC CAGTACTTCA
4501 AGATTTTAGG TCATTAAATG ATTCAACAAA TAGAACAAAG AAACACACAG CTCATTTCTC
4561 AAAAAAAGGG GAGGAAGAAA ACTTGGAAGG CTTGGGAAAT CAAACCAAGC AAATTGTAGA
4621 GAAATATGCA TGCACCACAA GGATATCTCC TAATACAAGC CAGCAGAATT TTGTCACGCA
4681 ACGTAGTAAG AGAGCTTTGA AACAATTCAG ACTCCCACTA GAAGAAACAG AACTTGAAAA
4741 AAGGATAATT GTGGATGACA CCTCAACCCA GTGGTCCAAA AACATGAAAC ATTTGACCCC
4801 GAGCACCCTC ACACAGATAG ACTACAATGA GAAGGAGAAA GGGGCCATTA CTCAGTCTCC
4861 CTTATCAGAT TGCCTTACGA GGAGTCATAG CATCCCTCAA GCAAATAGAT CTCCATTACC
4921 CATTGCAAAG GTATCATCAT TTCCATCTAT TAGACCTATA TATCTGACCA GGGTCCTATT
4981 CCAAGACAAC TCTTCTCATC TTCCAGCAGC ATCTTATAGA AAGAAAGATT CTGGGGTCCA
5041 AGAAAGCAGT CATTTCTTAC AAGGAGCCAA AAAAAATAAC CTTTCTTTAG CCATTCTAAC
5101 CTTGGAGATG ACTGGTGATC AAAGAGAGGT TGGCTCCCTG GGGACAAGTG CCACAAATTC
5161 AGTCACATAC AAGAAAGTTG AGAACACTGT TCTCCCGAAA CCAGACTTGC CCAAAACATC
5221 TGGCAAAGTT GAATTGCTTC CAAAAGTTCA CATTTATCAG AAGGACCTAT TCCCTACGGA
5281 AACTAGCAAT GGGTCTCCTG GCCATCTGGA TCTCGTGGAA GGGAGCCTTC TTCAGGGAAC
5341 AGAGGGAGCG ATTAAGTGGA ATGAAGCAAA CAGACCTGGA AAAGTTCCCT TTCTGAGAGT
5401 AGCAACAGAA AGCTCTGCAA AGACTCCCTC CAAGCTATTG GATCCTCTTG CTTGGGATAA
5461 CCACTATGGT ACTCAGATAC CAAAAGAAGA GTGGAAATCC CAAGAGAAGT CACCAGAAAA
5521 AACAGCTTTT AAGAAAAAGG ATACCATTTT GTCCCTGAAC GCTTGTGAAA GCAATCATGC
5581 AATAGCAGCA ATAAATGAGG GACAAAATAA GCCCGAAATA GAAGTCACCT GGGCAAAGCA
5641 AGGTAGGACT GAAAGGCTGT GCTCTCAAAA CCCACCAGTC TTGAAACGCC ATCAACGGGA
5701 AATAACTCGT ACTACTCTTC AGTCAGATCA AGAGGAAATT GACTATGATG ATACCATATC
5761 AGTTGAAATG AAGAAGGAAG ATTTTGACAT TTATGATGAG GATGAAAATC AGAGCCCCCG
5821 CAGCTTTCAA AAGAAAACAC GACACTATTT TATTGCTGCA GTGGAGAGGC TCTGGGATTA
5881 TGGGATGAGT AGCTCCCCAC ATGTTCTAAG AAACAGGGCT CAGAGTGGCA GTGTCCCTCA
5941 GTTCAAGAAA GTTGTTTTCC AGGAATTTAC TGATGGCTCC TTTACTCAGC CCTTATACCG
6001 TGGAGAACTA AATGAACATT TGGGACTCCT GGGGCCATAT ATAAGAGCAG AAGTTGAAGA
6061 TAATATCATG GTAACTTTCA GAAATCAGGC CTCTCGTCCC TATTCCTTCT ATTCTAGCCT
6121 TATTTCTTAT GAGGAAGATC AGAGGCAAGG AGCAGAACCT AGAAAAAACT TTGTCAAGCC
6181 TAATGAAACC AAAACTTACT TTTGGAAAGT GCAACATCAT ATGGCACCCA CTAAAGATGA
6241 GTTTGACTGC AAAGCCTGGG CTTATTTCTC TGATGTTGAC CTGGAAAAAG ATGTGCACTC
6301 AGGCCTGATT GGACCCCTTC TGGTCTGCCA CACTAACACA CTGAACCCTG CTCATGGGAG
6361 ACAAGTGACA GTACAGGAAT TTGCTCTGTT TTTCACCATC TTTGATGAGA CCAAAAGCTG
6421 GTACTTCACT GAAAATATGG AAAGAAACTG CAGGGCTCCC TGCAATATCC AGATGGAAGA
6481 TCCCACTTTT AAAGAGAATT ATCGCTTCCA TGCAATCAAT GGCTACATAA TGGATACACT
6541 ACCTGGCTTA GTAATGGCTC AGGATCAAAG GATTCGATGG TATCTGCTCA GCATGGGCAG
6601 CAATGAAAAC ATCCATTCTA TTCATTTCAG TGGACATGTG TTCACTGTAC GAAAAAAAGA
6661 GGAGTATAAA ATGGCACTGT ACAATCTCTA TCCAGGTGTT TTTGAGACAG TGGAAATGTT
6721 ACCATCCAAA GCTGGAATTT GGCGGGTGGA ATGCCTTATT GGCGAGCATC TACATGCTGG
6781 GATGAGCACA CTTTTTCTGG TGTACAGCAA TAAGTGTCAG ACTCCCCTGG GAATGGCTTC
6841 TGGACACATT AGAGATTTTC AGATTACAGC TTCAGGACAA TATGGACAGT GGGCCCCAAA
6901 GCTGGCCAGA CTTCATTATT CCGGATCAAT CAATGCCTGG AGCACCAAGG AGCCCTTTTC
6961 TTGGATCAAG GTGGATCTGT TGGCACCAAT GATTATTCAC GGCATCAAGA CCCAGGGTGC
7021 CCGTCAGAAG TTCTCCAGCC TCTACATCTC TCAGTTTATC ATCATGTATA GTCTTGATGG
7081 GAAGAAGTGG CAGACTTATC GAGGAAATTC CACTGGAACC TTAATGGTCT TCTTTGGCAA
7141 TGTGGATTCA TCTGGGATAA AACACAATAT TTTTAACCCT CCAATTATTG CTCGATACAT
7201 CCGTTTGCAC CCAACTCATT ATAGCATTCG CAGCACTCTT CGCATGGAGT TGATGGGCTG
7261 TGATTTAAAT AGTTGCAGCA TGCCATTGGG AATGGAGAGT AAAGCAATAT CAGATGCACA
7321 GATTACTGCT TCATCCTACT TTACCAATAT GTTTGCCACC TGGTCTCCTT CAAAAGCTCG
7381 ACTTCACCTC CAAGGGAGGA GTAATGCCTG GAGACCTCAG GTGAATAATC CAAAAGAGTG
7441 GCTGCAAGTG GACTTCCAGA AGACAATGAA AGTCACAGGA GTAACTACTC AGGGAGTAAA
7501 ATCTCTGCTT ACCAGCATGT ATGTGAAGGA GTTCCTCATC TCCAGCAGTC AAGATGGCCA
7561 TCAGTGGACT CTCTTTTTTC AGAATGGCAA AGTAAAGGTT TTTCAGGGAA ATCAAGACTC
7621 CTTCACACCT GTGGTGAACT CTCTAGACCC ACCGTTACTG ACTCGCTACC TTCGAATTCA
7681 CCCCCAGAGT TGGGTGCACC AGATTGCCCT GAGGATGGAG GTTCTGGGCT GCGAGGCACA
7741 GGACCTCTAC

[0177] Полипептиды FVIII включают в себя полноразмерный FVIII, полноразмерный FVIII без Met на N-конце, зрелый FVIII (без сигнальной последовательности), зрелый FVIII с дополнительным Met на N-конце и/или FVIII с полной или частичной делецией домена B. В определенных вариантах осуществления варианты FVIII содержат делеции домена B, будь то частичные или полные делеции.

[0178] Последовательность нативного зрелого полипептида FVIII человека представлена под SEQ ID NO: 65. Нативный полипептид FVIII имеет следующую формулу: A1-a1-A2-a2-B-a3-A3-C1-C2, где A1, A2 и A3 представляют собой структурно родственные "домены A", B представляет собой "домен B", C1 и C2 представляют собой структурно родственные "домены C", а а1, а2 и а3 представляют собой кислые спейсерные области. Что касается положения первичной аминокислотной последовательности в SEQ ID NO: 65, домен A1 FVIII человека простирается от Ala1 до приблизительно Arg336, спейсерная область a1 простирается от приблизительно Met337 до приблизительно Val374, домен A2 простирается от приблизительно Ala375 до приблизительно Tyr719, спейсерная область a2 простирается от приблизительно Glu720 до приблизительно Arg740, домен B простирается от приблизительно Ser741 до приблизительно Arg 1648, спейсерная область a3 простирается от приблизительно Glu1649 до приблизительно Arg1689, домен A3 простирается от приблизительно Ser1690 до приблизительно Leu2025, C1 домен простирается от приблизительно Gly2026 до приблизительно Asn2072, а домен C2 простирается от приблизительно Ser2073 до Tyr2332. За исключением конкретных сайтов протеолитического расщепления, обозначение местоположений границ между доменами и областями FVIII может варьироваться в различных литературных источниках. Поэтому указанные в данном документе границы обозначены как примерные с использованием термина "приблизительно".

[0179] Ген FVIII человека был выделен и экспрессирован в клетках млекопитающих (Toole, J. J., et al., Nature 312:342-347 (1984); Gitschier, J., et al., Nature 312:326-330 (1984); Wood, W. I., et al., Nature 312:330-337 (1984); Vehar, G. A., et al., Nature 312:337-342 (1984); WO 87/04187; WO 88/08035; WO 88/03558; а также патент США № 4757006). Аминокислотная последовательность FVIII была выведена из кДНК, как показано в патенте США № 4965199. Кроме того, FVIII с частичной или полной делецией домена B показан в патентах США №№ 4994371 и 4868112. В некоторых вариантах осуществления домен B фактора FVIII человека замещен доменом B фактора V человека, как показано в патенте США № 5004803. Последовательность кДНК, кодирующая фактор VIII человека, и аминокислотная последовательность показаны под SEQ ID NO: 1 и 2 соответственно в публикации заявки на патент США № 2005/0100990.

[0180] Последовательность FVIII свиньи опубликована в Toole, J. J., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:5939-5942 (1986). Кроме того, полная последовательность кДНК свиньи, полученная в результате ПЦР-амплификации последовательностей FVIII из библиотеки кДНК селезенки свиньи, описана в Healey, J. F., et al., Blood 88:4209-4214 (1996). Гибридный FVIII человека/свиньи, имеющий замены всех доменов, всех субъединиц и конкретных аминокислотных последовательностей, раскрыт в патенте США № 5364771 авторства Lollar и Runge, а также в WO 93/20093. Совсем недавно нуклеотидные и соответствующие аминокислотные последовательности доменов A1 и A2 FVIII свиньи и химерного FVIII с доменами A1 и/или A2 свиньи, замещенными соответствующими доменами человека, были описаны в WO 94/11503. В патенте США № 5859204, Lollar, J. S., также раскрыты кДНК свиньи и выведенные аминокислотные последовательности. В патенте США № 6458563 описан FVIII свиньи с делецией домена B.

[0181] В патенте США № 5859204, выданном Lollar, J. S., сообщается о функциональных мутантных формах FVIII, характеризующихся пониженной антигенностью и пониженной иммунореактивностью. В патенте США № 6376463, выданном Lollar, J. S., также сообщается о мутантных формах FVIII, характеризующихся пониженной иммунореактивностью. В публикации заявки на патент США № 2005/0100990 авторства Saenko et al. сообщается о функциональных мутациях в домене A2 FVIII.

[0182] В некоторых вариантах осуществления полипептид FVIII (или часть FVIII химерного полипептида) может быть на по меньшей мере 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичным аминокислотной последовательности FVIII из аминокислот 1-1438 SEQ ID NO: 67 или аминокислот 1-2332 SEQ ID NO: 65 (без сигнальной последовательности) или аминокислотной последовательности FVIII из аминокислот 1-19 SEQ ID NO: 64 и 1-1438 SEQ ID NO: 67 или аминокислот 1-19 SEQ ID NO: 64 и аминокислот 1-2332 SEQ ID NO: 65 (с сигнальной последовательностью), где FVIII обладает свертывающей активностью, например, активирует фактор IX в качестве кофактора для превращения фактора X в активированный фактор X. Полипептид FVIII (или часть химерного полипептида, представляющая собой FVIII) может быть идентичен аминокислотной последовательность FVIII из аминокислот 1-1438 SEQ ID NO: 67 или аминокислот 1-2332 SEQ ID NO: 65 (без сигнальной последовательности). Полипептид FVIII может дополнительно содержать сигнальную последовательность.

[0183] "Домен B" в FVIII, как используется в данном документе, является тем же доменом В, известным из уровня техники, который определяется по идентичности внутренней аминокислотной последовательности и сайтам протеолитического расщепления, например, остаткам Ser741-Arg1648 полноразмерного FVIII человека. Другие домены FVIII человека определяются по следующим аминокислотным остаткам: A1 - остатки Ala1-Arg372; A2 - остатки Ser373-Arg740; A3 - остатки Ser1690-Asn2019; C1 - остатки Lys2020-Asn2172; C2 - остатки Ser2173-Tyr2332. Последовательность A3-C1-C2 содержит остатки Ser1690-Tyr2332. Оставшаяся последовательность, остатки Glu1649-Arg1689, обычно называется кислой областью а3. Из уровня техники также известны местоположения границ всех доменов, в том числе доменов B, для FVIII свиньи, мыши и собаки. В некоторых вариантах осуществления домен B FVIII подвергнут делеции (как в "факторе VIII с делецией домена В" или "FVIII BDD"). Примером FVIII BDD является REFACTO^® (рекомбинантный FVIII BDD), который имеет ту же последовательность, что и часть последовательности фактора VIII в таблице 4. (Тяжелая цепь FVIII BDD выделена двойным подчеркиванием; домен B выделен курсивом; легкая цепь FVIII BDD представлена в виде обычного текста). В некоторых вариантах осуществления FVIII с доменом B имеет делецию всего домена B, за исключением 5 аминокислот, как показано в таблице 5 (SEQ ID NO: 68) (домен B выделен курсивом).

ТАБЛИЦА 4. Аминокислотная последовательность фактора VIII с делецией домена B ( делеция всего домена B, за исключением 14 аминокислотных остатков ) (SEQ ID NO: 67)

atrryylgavelswdymqsdlgelpvdarfpprvpksfpfntsvvykktlfveftdhlfniakprppwmgllgptiqaevydtvvitlknmashpvslhavgvsywkasegaeyddqtsqrekeddkvfpggshtyvwqvlkengpmasdplcltysylshvdlvkdlnsgligallvcregslakektqtlhkfillfavfdegkswhsetknslmqdrdaasarawpkmhtvngyvnrslpgligchrksvywhvigmgttpevhsifleghtflvrnhrqasleispitfltaqtllmdlgqfllfchisshqhdgmeayvkvdscpeepqlrmknneeaedydddltdsemdvvrfdddnspsfiqirsvakkhpktwvhyiaaeeedwdyaplvlapddrsyksqylnngpqrigrkykkvrfmaytdetfktreaiqhesgilgpllygevgdtlliifknqasrpyniyphgitdvrplysrrlpkgvkhlkdfpilpgeifkykwtvtvedgptksdprcltryyssfvnmerdlasgligpllicykesvdqrgnqimsdkrnvilfsvfdenrswylteniqrflpnpagvqledpefqasnimhsingyvfdslqlsvclhevaywyilsigaqtdflsvffsgytfkhkmvyedtltlfpfsgetvfmsmenpglwilgchnsdfrnrgmtallkvsscdkntgdyyedsyedisayllsknnaiepr sfsqnppvlkrhqreitrttlqsdqeeidyddtisvemkkedfdiydedenqsprsfqkktrhyfiaaverlwdygmsssphvlrnraqsgsvpqfkkvvfqeftdgsftqplyrgelnehlgllgpyiraevednimvtfrnqasrpysfysslisyeedqrqgaeprknfvkpnetktyfwkvqhhmaptkdefdckawayfsdvdlekdvhsgligpllvchtntlnpahgrqvtvqefalfftifdetkswyftenmerncrapcniqmedptfkenyrfhaingyimdtlpglvmaqdqrirwyllsmgsnenihsihfsghvftvrkkeeykmalynlypgvfetvemlpskagiwrvecligehlhagmstlflvysnkcqtplgmasghirdfqitasgqygqwapklarlhysgsinawstkepfswikvdllapmiihgiktqgarqkfsslyisqfiimysldgkkwqtyrgnstgtlmvffgnvdssgikhnifnppiiaryirlhpthysirstlrmelmgcdlnscsmplgmeskaisdaqitassyftnmfatwspskarlhlqgrsnawrpqvnnpkewlqvdfqktmkvtgvttqgvkslltsmyvkeflisssqdghqwtlffqngkvkvfqgnqdsftpvvnsldpplltrylrihpqswvhqialrmevlgceaqdly

ТАБЛИЦА 5. Аминокислотная последовательность фактора VIII с делецией домена B ( делеция всего домена B, за исключением 5 аминокислотных остатков) (SEQ ID NO: 68)

ATRRYYLGAVELSWDYMQSDLGELPVDARFPPRVPKSFPFNTSVVYKKTLFVEFTDHLFNIAKPRPPWMGLLGPTIQAEVYDTVVITLKNMASHPVSLHAVGVSYWKASEGAEYDDQTSQREKEDDKVFPGGSHTYVWQVLKENGPMASDPLCLTYSYLSHVDLVKDLNSGLIGALLVCREGSLAKEKTQTLHKFILLFAVFDEGKSWHSETKNSLMQDRDAASARAWPKMHTVNGYVNRSLPGLIGCHRKSVYWHVIGMGTTPEVHSIFLEGHTFLVRNHRQASLEISPITFLTAQTLLMDLGQFLLFCHISSHQHDGMEAYVKVDSCPEEPQLRMKNNEEAEDYDDDLTDSEMDVVRFDDDNSPSFIQIRSVAKKHPKTWVHYIAAEEEDWDYAPLVLAPDDRSYKSQYLNNGPQRIGRKYKKVRFMAYTDETFKTREAIQHESGILGPLLYGEVGDTLLIIFKNQASRPYNIYPHGITDVRPLYSRRLPKGVKHLKDFPILPGEIFKYKWTVTVEDGPTKSDPRCLTRYYSSFVNMERDLASGLIGPLLICYKESVDQRGNQIMSDKRNVILFSVFDENRSWYLTENIQRFLPNPAGVQLEDPEFQASNIMHSINGYVFDSLQLSVCLHEVAYWYILSIGAQTDFLSVFFSGYTFKHKMVYEDTLTLFPFSGETVFMSMENPGLWILGCHNSDFRNRGMTALLKVSSCDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFSQNEITRTTLQSDQEEIDYDDTISVEMKKEDFDIYDEDENQSPRSFQKKTRHYFIAAVERLWDYGMSSSPHVLRNRAQSGSVPQFKKVVFQEFTDGSFTQPLYRGELNEHLGLLGPYIRAEVEDNIMVTFRNQASRPYSFYSSLISYEEDQRQGAEPRKNFVKPNETKTYFWKVQHHMAPTKDEFDCKAWAYFSDVDLEKDVHSGLIGPLLVCHTNTLNPAHGRQVTVQEFALFFTIFDETKSWYFTENMERNCRAPCNIQMEDPTFKENYRFHAINGYIMDTLPGLVMAQDQRIRWYLLSMGSNENIHSIHFSGHVFTVRKKEEYKMALYNLYPGVFETVEMLPSKAGIWRVECLIGEHLHAGMSTLFLVYSNKCQTPLGMASGHIRDFQITASGQYGQWAPKLARLHYSGSINAWSTKEPFSWIKVDLLAPMIIHGIKTQGARQKFSSLYISQFIIMYSLDGKKWQTYRGNSTGTLMVFFGNVDSSGIKHNIFNPPIIARYIRLHPTHYSIRSTLRMELMGCDLNSCSMPLGMESKAISDAQITASSYFTNMFATWSPSKARLHLQGRSNAWRPQVNNPKEWLQVDFQKTMKVTGVTTQGVKSLLTSMYVKEFLISSSQDGHQWTLFFQNGKVKVFQGNQDSFTPVVNSLDPPLLTRYLRIHPQSWVHQIALRMEVLGCEAQDLY

[0184] "FVIII с делецией домена B" может иметь полную или частичную делеции, раскрытые в патентах США №№ 6316226, 6346513, 7041635, 5789203, 6060447, 5595886, 6228620, 5972885, 6048720, 5543502, 5610278, 5171844, 5112950, 4868112 и 6458563, публикациях заявок на патент США №№ 2017/0073393 A1 и 2012/308641 A1, а также международных публикациях №№ WO 2011/041770 A1, WO 2015/106052 A1 (PCT/US2015/010738) и WO 2016/025764. В некоторых вариантах осуществления последовательность FVIII с делецией домена B, применяемая в способах по настоящему изобретению, содержит любую из делеций, раскрытых от столбца 4, строки 4 до столбца 5, строки 28 и в примерах 1-5 патента США № 6316226 (также в US 6346513). В других вариантах осуществления фактор VIII с делецией домена В представляет собой фактор VIII с делецией S743/Q1638 домена В (FVIII BDD SQ) (например, фактор VIII, имеющий делецию от аминокислоты 744 до аминокислоты 1637, например, фактор VIII, содержащий аминокислоты 1-743 и аминокислоты 1638-2332 зрелого FVIII). В некоторых вариантах осуществления FVIII с делецией домена B, применяемый в способах по настоящему изобретению, имеет делецию, раскрытую в столбце 2, строках 26-51 и в примерах 5-8 патента США № 5789203 (также в US 6060447, US 5595886 и US 6228620). В некоторых вариантах осуществления фактор VIII с делецией домена В имеет делецию, раскрытую от столбца 1, строки 25 до столбца 2, строки 40 патента США № 5972885; в столбце 6, строках 1-22 и в примере 1 патента США № 6048720; в столбце 2, строках 17-46 патента США № 5543502; от столбца 4, строки 22 до столбца 5, строки 36 патента США № 5171844; в столбце 2, строках 55-68, на фигуре 2 и в примере 1 патента США № 5112950; от столбца 2, строки 2 до столбца 19, строки 21 и в таблице 2 патента США № 4868112; от столбца 2, строки 1 до столбца 3, строки 19, от столбца 3, строки 40 до столбца 4, строки 67, от столбца 7, строки 43 до столбца 8, строки 26 и от столбца 11, строки 5 до столбца 13, строки 39 патента США № 7041635 или в столбце 4, строках 25-53 патента США № 6458563. В некоторых вариантах осуществления полипептид FVIII с делецией домена B имеет делецию большей части домена В, но по-прежнему содержит аминоконцевые последовательности домена В, существенно важные для протеолитического процессинга первичного продукта трансляции in vivo до двух полипептидных цепей, как раскрыто в WO 91/09122. В некоторых вариантах осуществления полипептид FVIII с делецией домена B сконструирован с делецией аминокислот 747-1638, т. е. с практически полной делецией домена В. Hoeben R.C., et al. J. Biol. Chem. 265 (13): 7318-7323 (1990). Полипептидный фактор VIII с делецией домена В также может содержать делецию аминокислот 771-1666 или аминокислот 868-1562 FVIII. Meulien P., et al. Protein Eng. 2(4): 301-6 (1988). Дополнительные варианты делеции В-домена, которые являются частью настоящего изобретения, включают делецию аминокислот 982-1562 или 760-1639 (Toole et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. (1986) 83, 5939-5942)), 797-1562 (Eaton, et al. Biochemistry (1986) 25:8343-8347)), 741-1646 (Kaufman (опубликованная заявка согласно PCT № WO 87/04187)), 747-1560 (Sarver, et al., DNA (1987) 6:553-564)), 741-1648 (Pasek (заявка согласно PCT № 88/00831)), или 816-1598, или 741-1648 (Lagner (Behring Inst. Mitt. (1988) No 82:16-25, EP 295597)). В конкретных вариантах осуществления полипептид FVIII с делецией домена B содержит делецию аминокислотных остатков 746-1648 зрелого FVIII (что соответствует делеции 765-1665 полноразмерного FVIII). В других вариантах осуществления полипептид FVIII с делецией домена B содержит делецию аминокислотных остатков 745-1648 зрелого FVIII (что соответствует делеции 764-1665 полноразмерного FVIII).

[0185] В других вариантах осуществления FVIII BDD включает в себя полипептид FVIII, содержащий фрагменты домена В, в которых сохранены один или несколько сайтов N-связанного гликозилирования, например, остатки 757, 784, 828, 900, 963 или необязательно 943, которые соответствуют аминокислотной последовательности полноразмерной последовательности FVIII. Примеры фрагментов домена В включают 226 аминокислот или 163 аминокислоты из домена В, как раскрыто в Miao, H.Z., et al., Blood 103(a): 3412-3419 (2004), Kasuda, A, et al., J. Thromb. Haemost. 6. 1352-1359 (2008) и Pipe, S.W., et al., J. Thromb. Haemost. 9. 2235-2242 (2011) (т. е. сохранены первые 226 аминокислот или 163 аминокислоты из домена В). В еще нескольких других вариантах осуществления FVIII BDD дополнительно содержит точечную мутацию в остатке 309 (по типу замены Phe на Ser) для улучшения экспрессии полипептида FVIII BDD. См. Miao, H.Z., et al., Blood 103(a): 3412-3419 (2004). В еще нескольких других вариантах осуществления FVIII BDD включает в себя полипептид FVIII, содержащий часть домена В, но не содержащий один или несколько сайтов расщепления фурином (например, Arg1313 и Arg 1648). См. Pipe, S.W., et al., J. Thromb. Haemost. 9. 2235-2242 (2011). В некоторых вариантах осуществления FVIII BDD включает в себя одноцепочечный FVIII, который содержит делецию аминокислот 765-1652, соответствующих зрелому полноразмерному FVIII (также известный как одноцепочечный rFVIII и AFSTYLA^®). См. патент США № 7041635. Каждый из вышеизложенных вариантов делеции может быть осуществлен в любой последовательности FVIII.

[0186] В некоторых вариантах осуществления FVIII имеет частичный домен B. В некоторых вариантах осуществления полипептид FVIII с частичным доменом B представляет собой FVIII198. FVIII198 представляет собой одноцепочечную молекулу FVIIIFc-226N6, содержащую частичный домен B. Число 226 представляет N-концевые 226 аминокислот домена B FVIII, а N6 представляет шесть сайтов N-гликозилирования в домене B.

[0187] В определенных вариантах осуществления полипептид FVIII выбран из полипептида FVIII, раскрытого в публикациях №№ WO 2017/117630 A1, WO 2018/087271 A1, US 9878017 B2, US 8575104 B2, US 8754194 B2, US 7939632 B2, US 2018/0161402 A1, US 9956269 B2, US 9107902 B2, US 2017/209546 A1.

[0188] В некоторых вариантах осуществления FVIII расщепляется сразу после аргинина по аминокислоте 1648 (в полноразмерном факторе VIII или SEQ ID NO: 65), аминокислоте 754 (в факторе VIII с делецией S743/Q1638 домена B или в SEQ ID NO: 67) или соответствующему аргининовому остатку (в других вариантах), в результате чего образуются тяжелая цепь и легкая цепь. В других вариантах осуществления полипептид FVIII содержит тяжелую цепь и легкую цепь, которые соединены или связаны нековалентной связью, опосредованной ионами металлов.

[0189] В других вариантах осуществления FVIII представляет собой одноцепочечный FVIII, который не был расщеплен сразу после аргинина по аминокислоте 1648 (в полноразмерном FVIII или SEQ ID NO: 65), аминокислоте 754 (в FVIII с делецией S743/Q1638 домена B или в SEQ ID NO: 67) или соответствующему аргининовому остатку (в других вариантах). Одноцепочечный FVIII может содержать одну или несколько аминокислотных замен. В некоторых вариантах осуществления аминокислотная замена происходит по остатку, соответствующему остатку 1648, остатку 1645 или им обоим в полноразмерном зрелом полипептидном факторе VIII (SEQ ID NO: 65) или остатку 754, остатку 751 или им обоим в факторе VIII BDD SQ (SEQ ID NO: 67). Заменяющая аминокислота может представлять собой любую аминокислоту, отличную от аргинина, например, изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, треонин, триптофан, валин, аланин, аспарагин, аспарагиновую кислоту, цистеин, глутаминовую кислоту, глутамин, глицин, пролин, селеноцистеин, серин, тирозин, гистидин, орнитин, пирролизин или таурин.

[0190] FVIII может дополнительно расщепляться тромбином и затем активироваться в виде FVIIIa, выступая в качестве кофактора для активированного фактора IX (FIXa). А активированный FIX вместе с активированным FVIII образуют X-азный комплекс и превращают фактор X в активированный фактор X (FXa). Для активации FVIII расщепляется тромбином после трех аргининовых остатков по аминокислотам 372, 740 и 1689 (которые соответствуют аминокислотам 372, 740 и 795 в последовательности FVIII с делецией домена B), при этом при расщеплении образуется FVIIIa, имеющий цепи A1 размером 50 кДа, A2 размером 43 кДа и A3-C1-C2 размером 73 кДа. В некоторых вариантах осуществления полипептид FVIII, применимый для настоящего изобретения, представляет собой неактивный FVIII. В других вариантах осуществления полипептид FVIII представляет собой активированный FVIII.

[0191] Белок, имеющий полипептид FVIII, соединенный или связанный с белком VWF, может содержать последовательность, на по меньшей мере 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную SEQ ID NO: 65 или 67, где последовательность обладает свертывающей активностью FVIII, например, активируя фактор IX в качестве кофактора для превращения фактора X в активированный фактор X (FXa).

[0192] "Гибридные" или "химерные" полипептиды и белки, как используется в данном документе, содержат комбинацию первого полипептида и второго полипептида. В некоторых вариантах осуществления гибридный или химерный полипептид содержит одну полипептидную цепь, например, в случае с химерным полипептидом, содержащим полипептид FVIII и XTEN. См., например, US 2015/0158929 A1, включенный в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления гибридный или химерный полипептид содержит комбинацию первой полипептидной цепи, например, фрагмента VWF, слитого с последовательностью XTEN и первой константной областью Ig или ее частью, и второй полипептидной цепи, например, полипептида FVIII, слитого со второй константной областью Ig или ее частью, с образованием тем самым гетеродимера. См., например, US 2015/0266943 A1, US 2016/0251408 A1, US 2017/0073393 A1, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления первый полипептид и второй полипептид в гибридной молекуле могут быть связаны друг с другом посредством белок-белковых взаимодействий, таких как взаимодействия между зарядами или гидрофобные взаимодействия. В других вариантах осуществления первый полипептид содержит слитый белок белок VWF-XTEN-Fc, а второй полипептид содержит слитый белок FVIII-Fc, что делает гибрид гетеродимером, в котором XTEN содержит менее 288 аминокислот. В других вариантах осуществления первый полипептид содержит слитый белок белок VWF-XTEN-Fc, а второй полипептид содержит слитый белок FVIII(X)-Fc, что делает гибрид гетеродимером, в котором XTEN содержит менее 288 аминокислот. Первый полипептид и второй полипептид могут быть связаны посредством ковалентной связи, например, дисульфидной связи, между первой Fc-областью и второй Fc-областью. Первый полипептид и второй полипептид могут быть дополнительно связаны друг с другом посредством образования связи между фрагментом VWF и полипептидом FVIII.

[0193] В определенных вариантах осуществления химерный полипептид, раскрытый в данном документе, содержит белок FVIII, содержащий первый фрагмент полипептида FVIII, последовательность XTEN, второй фрагмент полипептида FVIII и Fc-область. В некоторых вариантах осуществления белок FVIII содержит в порядке от N-конца к C-концу первый фрагмент полипептида FVIII, слитый с последовательностью XTEN, слитой со вторым фрагментом полипептида FVIII, слитым с Fc-областью. В конкретном варианте осуществления белок FVIII содержит первый фрагмент полипептида FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 215; последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8; второй полипептид FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 216; и/или первую Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217.

[0194] В одном конкретном варианте осуществления химерный полипептид представляет собой rFVIIIFc-VWF-XTEN и содержит белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 201. В другом конкретном варианте осуществления rFVIIIFc-VWF-XTEN содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 207.

[0195] В некоторых вариантах осуществления белок FVIII дополнительно содержит последовательность сигнального пептида FVIII. В одном конкретном варианте осуществления белок FVIII содержит сигнальный пептид FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 64, первый фрагмент полипептида FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 215; последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 8; второй полипептид FVIII, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 216; и/или первую Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217.

[0196] В одном конкретном варианте осуществления химерный полипептид представляет собой rFVIIIFc-VWF-XTEN и содержит белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 203. В другом конкретном варианте осуществления rFVIIIFc-VWF-XTEN содержит белок FVIII, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 204, или его фрагмент. Дополнительные иллюстративные полипептидные последовательности, относящиеся к белкам FVIII химерных полипептидов, раскрытых в данном документе, представлены в таблицах 18-19.

[0197] Известно множество функциональных вариантов FVIII, обсуждаемых выше и ниже. Кроме того, у пациентов с гемофилией были идентифицированы сотни нефункциональных мутаций в FVIII, и было определено, что эффект данных мутаций в отношении функции FVIII обусловлен в большей степени их местоположением в 3-мерной структуре FVIII, а не природой замены (Cutler et al., Hum. Mutat. 19:274-8 (2002), включенная в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте). Кроме того, путем сравнения FVIII от людей и FVIII от других видов были идентифицированы консервативные остатки, которые, вероятно, требуются для функционирования (Cameron et al., Thromb. Haemost. 79:317-22 (1998); US 6251632, включенные в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте).

III.B. Фрагменты фактора фон Виллебранда (VWF)

[0198] VWF (также известный как F8VWF) представляет собой крупный мультимерный гликопротеин, присутствующий в плазме крови и вырабатываемый конститутивно в эндотелии (в тельцах Вайбеля-Паладе), мегакариоцитах (α-гранулах тромбоцитов) и субэндотелиальной соединительной ткани. Основным мономером VWF является белок из 2813 аминокислот. Каждый мономер содержит ряд специфических доменов с конкретной функцией - домен D'/D3 (который связывается с фактором VIII), домен A1 (который связывается с тромбоцитарным рецептором GPIb, гепарином и/или, возможно, коллагеном), домен A3 (который связывается с коллагеном), домен C1 (в котором домен RGD связывается с тромбоцитарным интегрином αIIbβ3, когда он активирован) и домен "цистеиновый узел" на C-конце белка (который является общим для VWF и тромбоцитарного фактора роста (PDGF), трансформирующего фактора роста β (TGFβ) и β-субъединицы хорионического гонадотропина человека (βHCG)).

[0199] Термин "фрагмент VWF", используемый в данном документе, включает без ограничения функциональные фрагменты VWF, содержащие домен D' и домен D3, которые способны ингибировать связывание эндогенного VWF с FVIII. В некоторых вариантах осуществления фрагмент VWF связывается с белком FVIII. В других вариантах осуществления фрагмент VWF блокирует сайт связывания VWF в белке FVIII, тем самым ингибируя взаимодействие белка FVIII с эндогенным VWF. В других вариантах осуществления фрагмент VWF блокирует связывание FVIII с эндогенным VWF, тем самым предотвращая выведение белка FVIII через путь выведения VWF. Фрагменты VWF включают производные, варианты, мутантные формы или аналоги, у которых сохраняются эти виды активности VWF.

[0200] Последовательность мономерного VWF человека из 2813 аминокислот приведена в Genbank под номером доступа NP000543.2. Нуклеотидная последовательность, кодирующая VWF человека, приведена в Genbank под номером доступа NM000552.3. Нуклеотидная последовательность VWF человека обозначена как SEQ ID NO: 20. SEQ ID NO: 21 представляет собой аминокислотную последовательность полноразмерного VWF. Каждый домен VWF приведен в таблице 6.

ТАБЛИЦА 6. Последовательности VWF (человека)

Домены VWF	Аминокислотная последовательность
Сигнальный пептид VWF SEQ ID NO: 208 (Аминокислоты 1-22 из SEQ ID NO: 21)	1 MIPARFAGVL LALALILPGT LC 22
Домен D1D2 VWF SEQ ID NO: 209 (Аминокислоты 23-763 из SEQ ID NO: 21)	23 AEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM 51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG 101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL 151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC 201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC 251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME 301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC 351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD 401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG 451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM 501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG 551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS 601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL 651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD 701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD 751 AVLSSPLSHR SKR 763
Домен D' VWF SEQ ID NO: 210 (Аминокислоты 764-866 из SEQ ID NO: 21)	764 SLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM 801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV 851 CRDRKWNCTD HVCDAT 866
Домен D3 VWF SEQ ID NO: 211 (Аминокислоты 867-1240 из SEQ ID NO: 21)	867 CSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS 901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE 951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD 1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI 1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCACF 1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY ECEWRYNSCA 1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE 1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP 1240
Домен A1 VWF SEQ ID NO: 212 (Аминокислоты 1241-1479 из SEQ ID NO: 21)	1241 GGLVVPPTDA 1251 PVSPTTLYVE DISEPPLHDF YCSRLLDLVF LLDGSSRLSE AEFEVLKAFV 1301 VDMMERLRIS QKWVRVAVVE YHDGSHAYIG LKDRKRPSEL RRIASQVKYA 1351 GSQVASTSEV LKYTLFQIFS KIDRPEASRI ALLLMASQEP QRMSRNFVRY 1401 VQGLKKKKVI VIPVGIGPHA NLKQIRLIEK QAPENKAFVL SSVDELEQQR 1451 DEIVSYLCDL APEAPPPTLP PDMAQVTVG 1479
Домен A2 VWF, до C-конца SEQ ID NO: 213 (Аминокислоты 1480-2813 из SEQ ID NO: 21)	1480 PGLLGVSTLGP KRNSMVLDVA 1501 FVLEGSDKIG EADFNRSKEF MEEVIQRMDV GQDSIHVTVL QYSYMVTVEY 1551 PFSEAQSKGD ILQRVREIRY QGGNRTNTGL ALRYLSDHSF LVSQGDREQA 1601 PNLVYMVTGN PASDEIKRLP GDIQVVPIGV GPNANVQELE RIGWPNAPIL 1651 IQDFETLPRE APDLVLQRCC SGEGLQIPTL SPAPDCSQPL DVILLLDGSS 1701 SFPASYFDEM KSFAKAFISK ANIGPRLTQV SVLQYGSITT IDVPWNVVPE 1751 KAHLLSLVDV MQREGGPSQI GDALGFAVRY LTSEMHGARP GASKAVVILV 1801 TDVSVDSVDA AADAARSNRV TVFPIGIGDR YDAAQLRILA GPAGDSNVVK 1851 LQRIEDLPTM VTLGNSFLHK LCSGFVRICM DEDGNEKRPG DVWTLPDQCH 1901 TVTCQPDGQT LLKSHRVNCD RGLRPSCPNS QSPVKVEETC GCRWTCPCVC 1951 TGSSTRHIVT FDGQNFKLTG SCSYVLFQNK EQDLEVILHN GACSPGARQG 2001 CMKSIEVKHS ALSVEXHSDM EVTVNGRLVS VPYVGGNMEV NVYGAIMHEV 2051 RFNHLGHIFT FTPQNNEFQL QLSPKTFASK TYGLCGICDE NGANDFMLRD 2101 GTVTTDWKTL VQEWTVQRPG QTCQPILEEQ CLVPDSSHCQ VLLLPLFAEC 2151 HKVLAPATFY AICQQDSCHQ EQVCEVIASY AHLCRTNGVC VDWRTPDFCA 2201 MSCPPSLVYN HCEHGCPRHC DGNVSSCGDH PSEGCFCPPD KVMLEGSCVP 2251 EEACTQCIGE DGVQHQFLEA WVPDHQPCQI CTCLSGRKVN CTTQPCPTAK 2301 APTCGLCEVA RLRQNADQCC PEYECVCDPV SCDLPPVPHC ERGLQPTLTN 2351 PGECRPNFTC ACRKEECKRV SPPSCPPHRL PTLRKTQCCD EYECACNCVN 2401 STVSCPLGYL ASTATNDCGC TTTTCLPDKV CVHRSTIYPV GQFWEEGCDV 2451 CTCTDMEDAV MGLRVAQCSQ KPCEDSCRSG FTYVLHEGEC CGRCLPSACE 2501 VVTGSPRGDS QSSWKSVGSQ WASPENPCLI NECVRVKEEV FIQQRNVSCP 2551 QLEVPVCPSG FQLSCKTSAC CPSCRCERME ACMLNGTVIG PGKTVMIDVC 2601 TTCRCMVQVG VISGFKLECR KTTCNPCPLG YKEENNTGEC CGRCLPTACT 2651 IQLRGGQIMT LKRDETLQDG CDTHFCKVNE RGEYFWEKRV TGCPPFDEHK 2701 CLAEGGKIMK IPGTCCDTCE EPECNDITAR LQYVKVGSCK SEVEVDIHYC 2751 QGKCASKAMY SIDINDVQDQ CSCCSPTRTE PMQVALHCTN GSVVYHEVLN 2801 AMECKCSPRK CSK 2813

[0201] Белок VWF, используемый в данном документе, может представлять собой фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3 VWF, где фрагмент VWF связывается с фактором VIII (FVIII) и ингибирует связывание эндогенного VWF (полноразмерного VWF) с FVIII. Фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3, может дополнительно содержать домен VWF, выбранный из группы, состоящей из домена A1, домена A2, домена A3, домена D1, домена D2, домена D4, домена B1, домена B2, домена B3, домена C1, домена C2, домена CK, одного или нескольких их фрагментов и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления фрагмент VWF содержит: (1) домены D' и D3 VWF или их фрагменты; (2) домены D1, D' и D3 VWF или их фрагменты; (3) домены D2, D' и D3 VWF или их фрагменты; (4) домены D1, D2, D' и D3 VWF или их фрагменты или (5) домены D1, D2, D', D3 и A1 VWF или их фрагменты, состоит по сути из них или состоит из них. Фрагмент VWF, описанный в данном документе, не содержит сайт связывания с рецептором, опосредующим выведение VWF. В других вариантах осуществления фрагмент VWF, описанный в данном документе, не представляет собой аминокислоты 764-1274 из SEQ ID NO: 21. Фрагмент VWF по настоящему изобретению может содержать любые другие последовательности, соединенные или слитые с фрагментом VWF. Например, фрагмент VWF, описанный в данном документе, может дополнительно содержать сигнальный пептид.

[0202] В некоторых вариантах осуществления фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3, связывается с белком FVIII или соединен с ним. См., например, US 2015/0023959 A1, US 2015/0266943 A1, US 2016/0251408 A1, US 2017/0073393 A1, US 2018/185455 A1, US 2018/0051067 A1, US 2017/0152300 A1, US 9878017 B2, US 9458223 B2, US 8575104 B2, WO 2017/117630 A1, US 2018/0161402 A1, WO 2017/117631 A1, WO 2018/087271 A1, US 9107902 B2, WO 2017/222337 A1, WO 2015/185758 A1, каждая из которых включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Связываясь или соединяясь с белком FVIII, фрагмент VWF по настоящему изобретению защищает FVIII от расщепления протеазой и активации FVIII, стабилизирует тяжелую цепь и легкую цепь FVIII и предотвращает выведение FVIII, опосредованное фагоцитарными рецепторами. В других вариантах осуществления фрагмент VWF связывается или соединяется с белком FVIII и блокирует или предотвращает связывание белка FVIII с фосфолипидом и активированным белком C. Посредством предотвращения или ингибирования связывания белка FVIII с эндогенным полноразмерным VWF фрагмент VWF по настоящему изобретению снижает выведение FVIII с помощью рецепторов, опосредующих выведение VWF и таким образом продлевает период полужизни химерного полипептида. Продление периода полужизни химерного полипептида, таким образом, происходит вследствие связывания или соединения с фрагментом VWF, в котором отсутствует сайт связывания рецептора, опосредующего выведение VWF, с белком FVIII, и экранирования или защиты белка FVIII от эндогенного VWF, который содержит сайт связывания рецептора, опосредующего выведение VWF, с помощью фрагмента VWF. Белок FVIII, связанный с фрагментом VWF или защищенный им, также может обеспечивать рециркуляцию белка FVIII. Посредством устранения сайтов связывания рецепторов пути выведения VWF, содержащихся в полноразмерной молекуле VWF, гетеродимеры FVIII/VWF по настоящему изобретению экранируются от пути выведения VWF с дополнительным продлением периода полужизни FVIII.

[0203] В некоторых вариантах осуществления белок VWF, применимый для настоящего изобретения, содержит домен D' и домен D3 VWF, где домен D' на по меньшей мере 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичен аминокислотам 764-866 из SEQ ID NO: 21, где белок VWF предотвращает или ингибирует связывание эндогенного VWF с FVIII. В других вариантах осуществления белок VWF содержит домен D' и домен D3 VWF, где домен D3 на по меньшей мере 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичен аминокислотам 867-1240 из SEQ ID NO: 21, где белок VWF предотвращает или ингибирует связывание эндогенного VWF с FVIII. В некоторых вариантах осуществления белок VWF, описанный в данном документе, содержит домен D' и домен D3 VWF, которые на по меньшей мере 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичны аминокислотам 764-1240 из SEQ ID NO: 21, состоит по сути из них или состоит из них, где белок VWF предотвращает или ингибирует связывание эндогенного VWF с FVIII. В других вариантах осуществления белок VWF содержит домены D1, D2, D' и D3, на по меньшей мере 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичные аминокислотам 23-1240 из SEQ ID NO: 21, состоит по сути из них или состоит из них, где белок VWF предотвращает или ингибирует связывание эндогенного VWF с FVIII. В еще нескольких других вариантах осуществления белок VWF дополнительно содержит сигнальный пептид, функционально связанный с ним.

[0204] В некоторых вариантах осуществления белок VWF, применимый для настоящего изобретения, состоит по сути из (1) домена D'D3, домена D1D'D3, домена D2D'D3 или домена D1D2D'D3 и (2) дополнительной последовательности VWF размером до приблизительно 10 аминокислот (например, любых последовательностей от аминокислот 764-1240 из SEQ ID NO: 21 до аминокислот 764-1250 из SEQ ID NO: 21), до приблизительно 15 аминокислот (например, любых последовательностей от аминокислот 764-1240 из SEQ ID NO: 21 до аминокислот 764-1255 из SEQ ID NO: 21), до приблизительно 20 аминокислот (например, любых последовательностей от аминокислот 764-1240 из SEQ ID NO: 21 до аминокислот 764-1260 из SEQ ID NO: 21), до приблизительно 25 аминокислот (например, любых последовательностей от аминокислот 764-1240 из SEQ ID NO: 21 до аминокислот 764-1265 из SEQ ID NO: 21) или до приблизительно 30 аминокислот (например, любых последовательностей от аминокислот 764-1240 из SEQ ID NO: 21 до аминокислот 764-1260 из SEQ ID NO: 21) или состоит по сути из них. В некоторых вариантах осуществления белок VWF, содержащий домен D' и домен D3 или состоящий по сути из них, не представляет собой ни аминокислоты 764-1274 из SEQ ID NO: 21, ни полноразмерный зрелый VWF. В некоторых вариантах осуществления домен D1D2 экспрессируется в транс-положении относительно домена D'D3. В некоторых вариантах осуществления домен D1D2 экспрессируется в цис-положении относительно домена D'D3.

[0205] В других вариантах осуществления белок VWF, содержащий домены D'D3, соединенные с доменами D1D2, дополнительно содержит сайт внутриклеточного расщепления (например, сайт расщепления PACE (фурином) или PC5), позволяющий отщеплять домены D1D2 от доменов D'D3 при экспрессии. Неограничивающие примеры сайта внутриклеточного расщепления раскрыты в данном документе в другом месте.

[0206] В еще некоторых других вариантах осуществления белок VWF содержит домен D' и домен D3, но не содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей (1) аминокислот 1241-2813, соответствующих SEQ ID NO: 21, (2) от аминокислоты 1270 до аминокислоты 2813, соответствующих SEQ ID NO: 21, (3) от аминокислоты 1271 до аминокислоты 2813, соответствующих SEQ ID NO: 21, (4) от аминокислоты 1272 до аминокислоты 2813, соответствующих SEQ ID NO: 21, (5) от аминокислоты 1273 до аминокислоты 2813, соответствующих SEQ ID NO: 21, (6) от аминокислоты 1274 до аминокислоты 2813, соответствующих SEQ ID NO: 21, и любых их комбинаций.

[0207] В еще нескольких других вариантах осуществления белок VWF по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность, соответствующую домену D', домену D3 и домену A1, состоит по сути из нее или состоит из нее, где аминокислотная последовательность на по меньшей мере 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотам 764-1479 из SEQ ID NO: 21, где белок VWF предотвращает связывание эндогенного VWF с FVIII. В конкретных вариантах осуществления белок VWF не представляет собой аминокислоты 764-1274 из SEQ ID NO: 21.

[0208] В некоторых вариантах осуществления белок VWF по настоящему изобретению содержит домен D' и домен D3, но не содержит по меньшей мере один домен VWF, выбранный из группы, состоящей из (1) домена A1, (2) домена A2, (3) домена A3, (4) домена D4, (5) домена B1, (6) домена B2, (7) домена B3, (8) домена C1, (9) домена C2, (10) домена CK, (11) домена CK и домена C2, (12) домена CK, домена C2 и домена C1, (13) домена CK, домена C2, домена C1, домена B3, (14) домена CK, домена C2, домена C1, домена B3, домена B2, (15) домена CK, домена C2, домена C1, домена B3, домена B2 и домена B1, (16) домена CK, домена C2, домена C1, домена B3, домена B2, домена B1 и домена D4, (17) домена CK, домена C2, домена C1, домена B3, домена B2, домена B1, домена D4 и домена A3, (18) домена CK, домена C2, домена C1, домена B3, домена B2, домена B1, домена D4, домена A3 и домена A2, (19) домена CK, домена C2, домена C1, домена B3, домена B2, домена B1, домена D4, домена A3, домена A2 и домена A1, а также (20) любых их комбинаций.

[0209] В еще некоторых других вариантах осуществления белок VWF содержит домены D'D3 и один или несколько доменов или модулей. Примеры таких доменов или модулей включают без ограничения домены и модули, раскрытые в Zhour et al., Blood, опубликованной в Интернете 6 апреля 2012 г.: DOI 10.1182/blood-2012-01-405134, включенной в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Например, белок VWF может содержать домен D'D3 и один или несколько доменов или модулей, выбранных из группы, состоящей из домена A1, домена A2, домена A3, модуля D4N, модуля VWD4, модуля C8-4, модуля TIL-4, модуля C1, модуля C2, модуля C3, модуля C4, модуля C5, модуля C5, модуля C6 и любых их комбинаций.

[0210] В еще нескольких других вариантах осуществления белок VWF соединен с гетерологичным компонентом, где гетерологичный компонент соединен с N-концом или C-концом белка VWF или вставлен непосредственно ниже одной или нескольких аминокислот (например, в одном или нескольких сайтах вставки XTEN) в белке VWF. Например, сайты вставки гетерологичного компонента в белке VWF могут находиться в домене D', домене D3 или в них обоих. Гетерологичный компонент может представлять собой компонент, обеспечивающий продление периода полужизни.

[0211] В определенных вариантах осуществления белок VWF, применимый для настоящего изобретения, образует мультимер, например, димер, тример, тетрамер, пентамер, гексамер, гептамер или мультимеры более высокого порядка. В других вариантах осуществления белок VWF представляет собой мономер, содержащий только один белок VWF. В некоторых вариантах осуществления белок VWF по настоящему изобретению может иметь одну или несколько аминокислотных замен, делеций, добавлений или модификаций. В некоторых вариантах осуществления белок VWF может содержать аминокислотные замены, делеции, добавления или модификации, при которых белок VWF не способен образовывать дисульфидную связь или образовывать димер или мультимер. В других вариантах осуществления аминокислотная замена находится в домене D' и домене D3. В конкретном варианте осуществления белок VWF, применимый для настоящего изобретения, содержит по меньшей мере одну аминокислотную замену по остатку, соответствующему остатку 1099, остатку 1142 или как остатку 1099, так и остатку 1142, соответствующим SEQ ID NO: 21. По меньшей мере одна заменяющая аминокислота может представлять собой любую аминокислоту, которая не встречается в природе в VWF дикого типа. Например, заменяющая аминокислота может представлять собой любую аминокислоту, отличную от цистеина, например, изолейцин, аланин, лейцин, аспарагин, лизин, аспарагиновую кислоту, метионин, фенилаланин, глутаминовую кислоту, треонин, глутамин, триптофан, глицин, валин, пролин, серин, тирозин, аргинин или гистидин. В другом примере заменяющая аминокислота включает в себя одну или несколько аминокислот, которые предотвращают или ингибируют образование мультимеров белками VWF.

[0212] В определенных вариантах осуществления белок VWF, применимый в данном документе, может быть дополнительно модифицирован для улучшения его взаимодействия с FVIII, например, для улучшения аффинности связывания с FVIII. В качестве неограничивающего примера белок VWF содержит сериновый остаток на месте остатка, соответствующего аминокислоте 764 в SEQ ID NO: 21, и лизиновый остаток на месте остатка, соответствующего аминокислоте 773 в SEQ ID NO: 21. Остатки 764 и/или 773 могут вносить вклад в аффинность связывания белков VWF с FVIII. В других вариантах осуществления белки VWF, применимые для настоящего изобретения, могут иметь другие модификации, например, белок может быть пегилированным, гликозилированным, гезилированным или полисиалилированным.

[0213] В определенных вариантах осуществления химерный полипептид, раскрытый в данном документе, содержит белок VWF, содержащий фрагмент VWF, последовательность XTEN, линкер a2 FVIII и Fc-область. В некоторых вариантах осуществления белок VWF содержит в порядке от N-конца к C-концу фрагмент VWF, слитый с последовательностью XTEN, слитой с линкером a2, слитым с Fc-областью. В определенных вариантах осуществления белок VWF содержит домен D' VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 210, домен D3 VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 214; последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 58 (AE144_5A); линкер а2, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 88; и/или Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217.

[0214] В одном конкретном варианте осуществления химерный полипептид представляет собой rFVIIIFc-VWF-XTEN и содержит белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 202.

[0215] В некоторых вариантах осуществления белок VWF содержит фрагмент VWF, содержащий домен D1, D2, D' и/или D3 VWF. В одном варианте осуществления фрагмент VWF содержит домен D1D2 VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 209. В некоторых вариантах осуществления белок VWF дополнительно содержит последовательность сигнального пептида VWF. В одном варианте осуществления сигнальный пептид VWF содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 208. В одном конкретном варианте осуществления белок VWF содержит сигнальный пептид VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 208, область D1D2 VWF, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 209, домен D' VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 210, домен D3 VWF, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 214; последовательность XTEN, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 58 (AE144_5A); линкер а2, который содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 88; и/или Fc-область, которая содержит аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 217.

[0216] В одном конкретном варианте осуществления химерный полипептид представляет собой rFVIIIFc-VWF-XTEN и содержит белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность под SEQ ID NO: 205. В другом конкретном варианте осуществления rFVIIIFc-VWF-XTEN содержит белок VWF, кодируемый последовательностью нуклеиновой кислоты под SEQ ID NO: 206, или его фрагмент. Дополнительные иллюстративные полипептидные последовательности, относящиеся к белкам VWF химерных полипептидов, раскрытых в данном документе, представлены в таблицах 18-19.

III.C. Компоненты, обеспечивающие продление периода полужизни

[0217] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит один или несколько компонентов, обеспечивающих продление периода полужизни. В некоторых вариантах осуществления полипептид FVIII химерного полипептида слит или связан с одним или несколькими компонентами, обеспечивающими продление периода полужизни (т. е. в белке FVIII). В других вариантах осуществления химерный полипептид содержит по меньшей мере два компонента, обеспечивающих продление периода полужизни, при этом первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с полипептидом FVIII, и второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с доменами D'D3 VWF. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом или N-концом полипептида FVIII. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в полипептид FVIII. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в домен B полипептида FVIII. В некоторых вариантах осуществления первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен в полипептид FVIII непосредственно ниже аминокислоты, соответствующей аминокислотному остатку 745 в SEQ ID NO: 65. В некоторых вариантах осуществления первый гетерологичный компонент слит с полипептидом FVIII с помощью линкера.

[0218] В определенных вариантах осуществления домены D'D3 VWF во фрагменте VWF могут быть слиты или связаны со вторым компонентом, обеспечивающим продление периода полужизни. В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом или N-концом фрагмента VWF. В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, вставлен во фрагмент VWF. В некоторых вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с С-концом фрагмента VWF. В определенных вариантах осуществления второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, слит с фрагментом VWF с помощью линкера.

[0219] В других вариантах осуществления химерный полипептид содержит полипептид FVIII и фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3 VWF, где домен D'D3 VWF слит с одним или несколькими фрагментами, обеспечивающими продление периода полужизни, и где домен D'D3 VWF и полипептид FVIII связаны более сильной связью, чем встречающаяся в природе связь между FVIII и VWF.

[0220] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит полипептид FVIII и фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3 VWF, где домен D'D3 VWF слит с полипептидом FVIII посредством линкера. В некоторых вариантах осуществления линкер представляет собой расщепляемый линкер. В некоторых вариантах осуществления домен D' и домен D3 VWF дополнительно связаны с полипептидом FVIII с помощью по меньшей мере одной нековалентной связи. В определенных вариантах осуществления домен D' и домен D3 VWF дополнительно слиты с Fc. В некоторых вариантах осуществления домен D' и домен D3 VWF слиты с Fc с помощью линкера. В некоторых вариантах осуществления Fc слит со вторым Fc с помощью дополнительного линкера. В определенных вариантах осуществления Fc и второй Fc связаны друг с другом с помощью ковалентной связи, например, дисульфидной связи. В конкретных вариантах осуществления химерный полипептид содержит полипептид FVIII и фрагмент VWF, содержащий домен D' и домен D3 VWF, как раскрыто в международной публикации № WO 2017/222337 A1, которая включена в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0221] Первый компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, второй компонент, обеспечивающий продление периода полужизни, или они оба могут быть выбраны из группы, состоящей из партнера по связыванию с FcRn, например, альбумина или Fc-области иммуноглобулина, последовательности XTEN, C-концевого пептида (CTP) β-субъединицы хорионического гонадотропина человека, последовательности PAS, последовательности HAP, трансферрина, альбуминсвязывающих компонентов или любых их фрагментов, производных, вариантов и любой их комбинации.

III.C.1. Константная область Ig или ее часть

[0222] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению также содержит первую константную область Ig или ее часть, слитую с полипептидом FVIII с помощью необязательного линкера. Первая константная область Ig или ее часть может быть вставлена в полипептид FVIII или слита с С-концом или N-концом полипептида FVIII. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид дополнительно содержит вторую константную область Ig или ее часть, слитую с белком VWF. Первая константная область Ig или ее часть может быть вставлена во фрагмент VWF или слита с С-концом или N-концом фрагмента VWF. В конкретных вариантах осуществления первая константная область Ig соединена или связана со второй константной областью Ig с помощью ковалентной связи, например, дисульфидной связи.

[0223] Константная область Ig или ее часть могут улучшать фармакокинетические или фармакодинамические свойства химерного полипептида в соединении с дополнительным гетерологичным компонентом, например, последовательностью XTEN, и белком VWF. В определенных вариантах осуществления константная область Ig или ее часть обеспечивает продление периода полужизни молекулы, слитой с константной областью Ig или ее частью.

[0224] Константная область Ig состоит из доменов, обозначенных как домены СН (константной области тяжелой цепи) (СН1, СН2 и т. д.). В зависимости от изотипа (т. е. IgG, IgM, IgA, IgD или IgE) константная область может состоять из трех или четырех доменов СН. Константные области некоторых изотипов (например, IgG) также содержат шарнирную область. См. Janeway et al. 2001, Immunobiology, Garland Publishing, N.Y., N.Y.

[0225] Константная область Ig или ее часть для получения химерного полипептида по настоящему изобретению могут быть получены из ряда различных источников. В некоторых вариантах осуществления константная область Ig или ее часть получены из Ig человека. Однако следует понимать, что константная область Ig или ее часть могут быть получены из Ig другого вида млекопитающего, в том числе, например, вида грызуна (например, мыши, крысы, кролика, морской свинки) или примата, отличного от человека (например, шимпанзе, макака). Более того, константная область Ig или ее часть могут быть получены из любого класса Ig, в том числе IgM, IgG, IgD, IgA и IgE, и любого изотипа Ig, в том числе IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. В некоторых вариантах осуществления применяют изотип IgG1 человека.

[0226] Различные последовательности генов константных областей Ig (например, последовательности генов константных областей человека) доступны в форме общедоступных депонирований. Можно выбрать последовательность домена константной области, обладающую конкретной эффекторной функцией (или не обладающую конкретной эффекторной функцией) или имеющую конкретную модификацию для снижения иммуногенности. Было опубликовано большое количество последовательностей антител и генов, кодирующих антитела, и подходящие последовательности константных областей Ig (например, последовательности шарнирных областей, СН2 и/или СН3 или их части) могут быть получены из этих последовательностей с применением методик, принятых в данной области техники. Генетический материал, полученный с применением любого из вышеуказанных способов, можно затем подвергать изменению или синтезу с получением полипептидов по настоящему изобретению. Дополнительно следует понимать, что объем настоящего изобретения охватывает аллели, варианты и мутации последовательностей ДНК константных областей.

[0227] Последовательности константной области Ig или ее части могут быть клонированы, например, с применением полимеразной цепной реакции и праймеров, выбранных для амплификации домена, представляющего интерес. Для клонирования последовательности константной области Ig или ее части из антитела можно выделить мРНК из клеток гибридомы, селезенки или лимфатических клеток, подвергнуть ее обратной транскрипции с образованием ДНК и амплифицировать гены антитела с помощью ПЦР. Способы ПЦР-амплификации подробно описаны в патентах США №№ 4683195; 4683202; 4800159; 4965188 и, например, в "PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications" Innis et al. eds., Academic Press, San Diego, CA (1990); Ho et al. 1989. Gene 77:51; Horton et al. 1993. Methods Enzymol. 217:270. ПЦР можно инициировать с помощью консенсусных праймеров для константной области или с помощью более специфических праймеров на основе опубликованных последовательностей ДНК и аминокислот, соответствующих тяжелым и легким цепям. Как обсуждалось выше, ПЦР также можно применять для выделения клонов ДНК, кодирующих легкую и тяжелую цепи антитела. В этом случае можно осуществлять скрининг библиотек с помощью консенсусных праймеров или более крупных гомологичных зондов, таких как зонды для константных областей мыши. Из уровня техники известны многочисленные наборы праймеров, подходящие для амплификации генов антител (например, 5'-праймеры на основе N-концевой последовательности очищенных антител (Benhar and Pastan. 1994. Protein Engineering 7:1509); праймеры для быстрой амплификации концов кДНК (Ruberti, F. et al. 1994. J. Immunol. Methods 173:33); праймеры для лидерных последовательностей антител (Larrick et al. 1989 Biochem. Biophys. Res. Commun. 160:1250)). Клонирование последовательностей антител дополнительно описано в выданном Newman et al. патенте США № 5658570, заявка на который была подана 25 января 1995 г., который включен в данный документ посредством ссылки.

[0228] Используемая в данном документе константная область Ig может содержать все домены и шарнирную область или их части. В некоторых вариантах осуществления константная область Ig или ее часть содержит домен СН2, домен СН3 и шарнирную область, т. е. Fc-область или партнера по связыванию с FcRn.

[0229] Используемый в данном документе термин "Fc-область" определяется как часть полипептида, которая соответствует Fc-области нативного Ig, т. e. образована путем димерной ассоциации соответствующих Fc-доменов двух его тяжелых цепей. Нативная Fc-область образует гомодимер с другой Fc-областью. В отличие от этого, термины "генетически слитая Fc-область" или "одноцепочечная Fc-область" (scFc-область), используемые в данном документе, относятся к синтетической димерной Fc-области, состоящей из Fc-доменов, генетически соединенных в одну полипептидную цепь (т. е. кодируемых одной непрерывной генетической последовательностью).

[0230] В некоторых вариантах осуществления "Fc-область" относится к части одной тяжелой цепи Ig, начинающейся в шарнирной области непосредственно выше сайта расщепления папаином (т. е. остатка 216 в IgG, если принять первый остаток константной области тяжелой цепи за 114) и заканчивающейся на С-конце антитела. Соответственно, полный Fc-домен содержит по меньшей мере шарнирный домен, домен CH2 и домен CH3.

[0231] Fc-область константной области Ig в зависимости от изотипа Ig может содержать домены CH2, CH3 и CH4, а также шарнирную область. Химерные полипептиды, содержащие Fc-область Ig, наделяют химерный полипептид несколькими необходимыми свойствами, включая увеличенную стабильность, увеличенный период полужизни в сыворотке крови (см. Capon et al., 1989, Nature 337:525), а также связывание с Fc-рецепторами, такими как неонатальный Fc-рецептор (FcRn) (патенты США №№ 6086875, 6485726, 6030613; WO 03/077834; US2003-0235536A1, которые включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте).

[0232] Константная область Ig или ее часть может являться партнером по связыванию с FcRn. FcRn активен в зрелых эпителиальных тканях и экспрессируется в просвете кишечника, легочных дыхательных путях, поверхностях носа, поверхностях влагалища, поверхностях толстой и прямой кишки (патент США № 6485726). Партнер по связыванию с FcRn представляет собой часть Ig, которая связывается с FcRn. Другим примером партнера по связыванию с FcRn является альбумин, который дополнительно описан ниже.

[0233] Рецептор FcRn был выделен у некоторых видов млекопитающих, в том числе у людей. Известны последовательности FcRn человека, FcRn обезьяны, FcRn крысы и FcRn мыши (Story et al. 1994, J. Exp. Med. 180:2377). Рецептор FcRn связывается с IgG (но не с Ig других классов, таких как IgA, IgM, IgD и IgE) при относительно низком значении pH, осуществляет активный транспорт IgG через клетки по направлению от просвета к серозной оболочке, а затем высвобождает IgG при относительно более высоком значении pH, обнаруживаемом в интерстициальных жидкостях. Он экспрессируется в зрелой эпителиальной ткани (патенты США №№ 6485726, 6030613, 6086875; WO 03/077834; US2003-0235536A1), в том числе в эпителии легких и кишечника (Israel et al. 1997, Immunology 92:69), эпителии почечных проксимальных канальцев (Kobayashi et al. 2002, Am. J. Physiol. Renal Physiol. 282: F358), а также эпителии полости носа, на поверхностях влагалища и поверхностях системы желчных протоков.

[0234] Партнеры по связыванию с FcRn, применимые в настоящем изобретении, охватывают молекулы, которые могут специфично связываться с рецептором FcRn, в том числе целый IgG, Fc-фрагмент IgG и другие фрагменты, которые содержат полную связывающую область для рецептора FcRn. Область Fc-части IgG, которая связывается с рецептором FcRn, была описана с использованием рентгеноструктурной кристаллографии (Burmeister et al. 1994, Nature 372:379). Основная область контакта Fc с FcRn находится вблизи стыка доменов CH2 и CH3. Все области контакта Fc-FcRn находятся в пределах одной тяжелой цепи Ig. Партнеры по связыванию с FcRn включают в себя целый IgG, Fc-фрагмент IgG и другие фрагменты IgG, которые содержат полную связывающую область для FcRn. Основные сайты контакта включают аминокислотные остатки 248, 250-257, 272, 285, 288, 290-291, 308-311 и 314 из домена CH2 и аминокислотные остатки 385-387, 428 и 433-436 из домена CH3. Все из ссылок на нумерацию аминокислот Ig или фрагментов или областей Ig делаются на основе Kabat et al. 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, U.S. Department of Public Health, Bethesda, Md.

[0235] Fc-области или партнеры по связыванию с FcRn, связанные с FcRn, могут эффективно переноситься через эпителиальные барьеры с помощью FcRn, за счет чего обеспечивается неинвазивный способ системного введения необходимой терапевтической молекулы. Кроме того, слитые белки, содержащие Fc-область или партнера по связыванию с FcRn, подвергаются эндоцитозу клетками, экспрессирующими FcRn. Но вместо маркировки для разрушения эти слитые белки подвергаются рециркуляции в кровоток, за счет чего увеличивается период полужизни этих белков in vivo. В определенных вариантах осуществления части константных областей Ig представляют собой Fc-область или партнера по связыванию с FcRn, которые обычно связываются посредством дисульфидных связей и других неспецифических взаимодействий с другой Fc-областью или другим партнером по связыванию с FcRn с образованием димеров и мультимеров более высокого порядка.

[0236] Два рецептора FcRn могут связываться с одной молекулой Fc. Кристаллографические данные позволяют предположить, что каждая молекула FcRn связывается с одним полипептидом гомодимера Fc. В некоторых вариантах осуществления связывание партнера по связыванию с FcRn, например Fc-фрагмента IgG, с биологически активной молекулой обеспечивает способ доставки биологически активной молекулы пероральным, трансбуккальным, сублингвальным, ректальным, вагинальным путем, в виде аэрозоля, вводимого назально или посредством легочного пути, или посредством глазного пути. В других вариантах осуществления химерный полипептид можно вводить инвазивным способом, например, подкожно, внутривенно.

[0237] Область партнера по связыванию с FcRn представляет собой молекулу или ее часть, которая может специфично связываться с рецептором FcRn с последующим активным транспортом Fc-области с помощью рецептора FcRn. "Специфично связанный" относится к двум молекулам, образующим комплекс, который является относительно стабильным в физиологических условиях. Специфичное связывание характеризуется высокой аффинностью и емкостью от низкой до умеренной, в отличие от неспецифичного связывания, которое обычно характеризуется низкой аффинностью и емкостью от умеренной до высокой. Как правило, связывание считается специфичным, если константа аффинности KA превышает 10⁶ M^-1 или превышает 10⁸ M^-1. При необходимости неспецифичное связывание можно снизить без существенного влияния на специфичное связывание путем изменения условий связывания. Соответствующие условия связывания, такие как концентрация молекул, ионная сила раствора, температура, допустимое время связывания, концентрация блокирующего средства (например, сывороточного альбумина, казеина молока) и т. д., могут быть оптимизированы специалистом в данной области с применением обычных методик.

[0238] В определенных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит одну или несколько усеченных Fc-областей, которых, тем не менее, достаточно для придания Fc-области свойств связывания с Fc-рецептором (FcR). Например, часть Fc-области, которая связывается с FcRn (т. e. FcRn-связывающая часть), содержит приблизительно аминокислоты 282-438 из IgG1 согласно нумерации EU, при этом основными сайтами контакта являются аминокислоты 248, 250-257, 272, 285, 288, 290-291, 308-311 и 314 в домене CH2 и аминокислотные остатки 385-387, 428 и 433-436 в домене CH3. Таким образом, Fc-область по настоящему изобретению может содержать FcRn-связывающую часть или состоять из нее. FcRn-связывающие части могут быть получены из тяжелых цепей любого изотипа, в том числе IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. В некоторых вариантах осуществления применяют FcRn-связывающую часть из антитела изотипа IgG1 человека. В других вариантах осуществления применяют FcRn-связывающую часть из антитела изотипа IgG4 человека.

[0239] В других вариантах осуществления "Fc-область" содержит аминокислотную последовательность Fc-домена или аминокислотную последовательность, полученную из Fc-домена. В определенных вариантах осуществления Fc-область содержит по меньшей мере одно из шарнирного домена (например, верхней, средней и/или нижней шарнирной области) (приблизительно аминокислоты 216-230 Fc-области антитела в соответствии с нумерацией EU), домена CH2 (приблизительно аминокислоты 231-340 Fc-области антитела в соответствии с нумерацией EU), домена CH3 (приблизительно аминокислоты 341-438 Fc-области антитела в соответствии с нумерацией EU), домена CH4 или их варианта, части или фрагмента. В других вариантах осуществления Fc-область содержит полный Fc-домен (т. е. шарнирный домен, домен CH2 и домен CH3). В некоторых вариантах осуществления Fc-область содержит шарнирный домен (или его часть), слитый с доменом CH3 (или его частью), шарнирный домен (или его часть), слитый с доменом CH2 (или его частью), домен CH2 (или его часть), слитый с доменом CH3 (или его частью), домен CH2 (или его часть), слитый как с шарнирным доменом (или его частью), так и доменом CH3 (или его частью), состоит по сути из них или состоит из них. В еще нескольких других вариантах осуществления Fc-область не содержит по меньшей мере часть домена CH2 (например, весь домен CH2 или его часть). В конкретном варианте осуществления Fc-область содержит аминокислоты 221-447 в соответствии с нумерацией EU или состоит из них.

[0240] Fc-области, обозначенные в данном документе как F, F1 или F2, могут быть получены из ряда различных источников. В некоторых вариантах осуществления Fc-область полипептида получена из Ig человека. Однако следует понимать, что Fc-область может быть получена из Ig другого вида млекопитающего, в том числе, например, вида грызуна (например, мыши, крысы, кролика или морской свинки) или отличного от человека примата (например, шимпанзе, макака). Более того, полипептидные Fc-домены или их части могут быть получены из любого класса Ig, в том числе IgM, IgG, IgD, IgA и IgE, и любого изотипа Ig, в том числе IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. В других вариантах осуществления применяют изотип IgG1 человека.

[0241] В определенных вариантах осуществления вариант Fc обеспечивает изменение по меньшей мере одной эффекторной функции, придаваемой Fc-областью, содержащей указанный Fc-домен дикого типа (например, улучшение или снижение способности Fc-области к связыванию с Fc-рецепторами (например, FcγRI, FcγRII или FcγRIII) или белками системы комплемента (например, C1q) или инициированию антителозависимой цитотоксичности (ADCC), фагоцитоза или комплементзависимой цитотоксичности (CDCC)). В других вариантах осуществления в варианте Fc представлен сконструированный цистеиновый остаток.

[0242] В качестве Fc-областей по настоящему изобретению можно использовать известные из уровня техники варианты Fc, которые, как известно, придают изменение (например, усиление или снижение) эффекторной функции и/или связывания с FcR или FcRn. В частности, связывающая молекула по настоящему изобретению может содержать, например, изменение (например, замену) в одном или нескольких аминокислотных положениях, раскрытых в международных публикациях согласно PCT WO88/07089A1, WO96/14339A1, WO98/05787A1, WO98/23289A1, WO99/51642A1, WO99/58572A1, WO00/09560A2, WO00/32767A1, WO00/42072A2, WO02/44215A2, WO02/060919A2, WO03/074569A2, WO04/016750A2, WO04/029207A2, WO04/035752A2, WO04/063351A2, WO04/074455A2, WO04/099249A2, WO05/040217A2, WO04/044859, WO05/070963A1, WO05/077981A2, WO05/092925A2, WO05/123780A2, WO06/019447A1, WO06/047350A2 и WO06/085967A2; публикациях заявок на патент США №№ US2007/0231329, US2007/0231329, US2007/0237765, US2007/0237766, US2007/0237767, US2007/0243188, US20070248603, US20070286859, US20080057056 или патентах США №№ 5648260; 5739277; 5834250; 5869046; 6096871; 6121022; 6194551; 6242195; 6277375; 6528624; 6538124; 6737056; 6821505; 6998253; 7083784; 7404956 и 7317091, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки. В некоторых вариантах осуществления конкретное изменение (например, конкретная замена одной или нескольких аминокислот, раскрытых в уровне техники) может быть осуществлено в одном или нескольких раскрытых аминокислотных положениях. В других вариантах осуществления может быть осуществлено другое изменение в одном или нескольких раскрытых аминокислотных положениях (например, другая замена в одном или нескольких аминокислотных положениях, раскрытых в уровне техники).

[0243] Fc-область IgG или его партнер по связыванию с FcRn могут быть модифицированы в соответствии с хорошо известными процедурами, такими как сайт-направленный мутагенез и т. п., с получением модифицированных IgG или Fc-фрагментов или их частей, которые будут связываться с FcRn. Такие модификации включают модификации в отдалении от сайтов контакта с FcRn, а также модификации в пределах сайтов контакта, которые обеспечивают сохранение или даже усиление связывания с FcRn. Например, следующие отдельные аминокислотные остатки в Fc IgG1 человека (Fcγ1) могут быть заменены без значительной потери аффинности связывания Fc с FcRn: P238A, S239A, K246A, K248A, D249A, M252A, T256A, E258A, T260A, D265A, S267A, H268A, E269A, D270A, E272A, L274A, N276A, Y278A, D280A, V282A, E283A, H285A, N286A, T289A, K290A, R292A, E293A, E294A, Q295A, Y296F, N297A, S298A, Y300F, R301A, V303A, V305A, T307A, L309A, Q311A, D312A, N315A, K317A, E318A, K320A, K322A, S324A, K326A, A327Q, P329A, A330Q, P331A, E333A, K334A, T335A, S337A, K338A, K340A, Q342A, R344A, E345A, Q347A, R355A, E356A, M358A, T359A, K360A, N361A, Q362A, Y373A, S375A, D376A, A378Q, E380A, E382A, S383A, N384A, Q386A, E388A, N389A, N390A, Y391F, K392A, L398A, S400A, D401A, D413A, K414A, R416A, Q418A, Q419A, N421A, V422A, S424A, E430A, N434A, T437A, Q438A, K439A, S440A, S444A, и K447A, где, например, P238A представляет собой пролин дикого типа, замененный аланином в положении номер 238. В качестве примера некоторые варианты осуществления включают мутацию N297A, обеспечивающую удаление высококонсервативного сайта N-гликозилирования. Аминокислоты дикого типа в положениях, указанных выше, могут быть заменены другими аминокислотами в дополнение к аланину. Мутации могут быть введены в Fc по отдельности, что дает более ста Fc-областей, отличных от нативного Fc. Кроме того, комбинации из двух, трех или более из этих отдельных мутаций могут быть введены совместно, что дает еще несколько сотен Fc-областей. Более того, одна из Fc-областей конструкции по настоящему изобретению может быть подвергнута мутации, а другая Fc-область конструкции вообще не подвергнута мутации, или они обе могут быть подвергнуты мутации, но с использованием разных мутаций.

[0244] Определенные из вышеуказанных мутаций могут придавать новое функциональное свойство Fc-области или партнеру по связыванию с FcRn. Например, некоторые варианты осуществления включают N297A, обеспечивающую удаление высококонсервативного сайта N-гликозилирования. Эффект этой мутации заключается в снижении иммуногенности, за счет чего увеличивается период полужизни Fc-области в кровотоке, и лишении Fc-области способности к связыванию с Fc-гамма-RI, Fc-гамма-RIIA, Fc-гамма-RIIB и Fc-гамма-RIIIA без нарушения аффинности в отношении FcRn (Routledge et al. 1995, Transplantation 60:847; Friend et al. 1999, Transplantation 68:1632; Shields et al. 1995, J. Biol. Chem. 276:6591). В качестве дополнительного примера нового функционального свойства, появляющегося в результате вышеописанных мутаций, аффинность в отношении FcRn в некоторых случаях может увеличиваться, превышая таковую у дикого типа. Эту увеличенную аффинность могут отражать увеличенная скорость ассоциации, уменьшенная скорость диссоциации или как увеличенная скорость ассоциации, так и уменьшенная скорость диссоциации. Примеры мутаций, которые, как полагают, придают увеличенную аффинность в отношении FcRn, включают без ограничения T256A, T307A, E380A и N434A (Shields et al. 2001, J. Biol. Chem. 276:6591).

[0245] Кроме того, по меньшей мере три Fc-гамма-рецептора человека, по-видимому, распознают сайт связывания в IgG в нижней шарнирной области, обычно аминокислоты 234-237. Следовательно, другой пример нового функционального свойства и потенциальной уменьшенной иммуногенности может появляться в результате мутаций в этой области, как, например, путем замещения аминокислот 233-236 "ELLG" из IgG1 человека соответствующей последовательностью "PVA" из IgG2 (с делецией одной аминокислоты). Было показано, что FcγRI, FcγRII и FcγRIII, которые опосредуют различные эффекторные функции, не будут связываться с IgG1 после введения таких мутаций. Ward and Ghetie 1995, Therapeutic Immunology 2:77, и Armour et al. 1999, Eur. J. Immunol. 29:2613.

[0246] В некоторых вариантах осуществления константная область Ig или ее часть, например, Fc-область, представляет собой полипептид, содержащий последовательность PKNSSMISNTP (SEQ ID NO: 89 или SEQ ID NO: 3 из патента США № 5739277) и необязательно дополнительно содержащий последовательность, выбранную из HQSLGTQ (SEQ ID NO: 90), HQNLSDGK (SEQ ID NO: 91), HQNISDGK (SEQ ID NO: 92) или VISSHLGQ (SEQ ID NO: 93) (или SEQ ID NO: 11, 1, 2 и 31 соответственно из патента США № 5739277).

[0247] В других вариантах осуществления константная область иммуноглобулина или ее часть содержит аминокислотную последовательность в шарнирной области или ее части, которая образует одну или несколько дисульфидных связей со другой константной областью иммуноглобулина или ее частью. Дисульфидная связь, образуемая константной областью иммуноглобулина или ее частью, объединяет первый полипептид, содержащий полипептид FVIII, и второй полипептид, содержащий фрагмент VWF, так что эндогенный VWF не замещает фрагмент VWF и не связывается с полипептидом FVIII. Следовательно, дисульфидная связь между первой константной областью иммуноглобулина или ее частью и второй константной областью иммуноглобулина или ее частью предотвращает взаимодействие между эндогенным VWF и полипептидом FVIII. Это ингибирование взаимодействия между VWF и полипептидом FVIII обеспечивает продление периода полужизни химерного полипептида свыше двукратного предела. Шарнирная область или ее часть могут дополнительно быть соединены с одним или несколькими доменами СН1, СН2, СН3, их фрагментом и любыми их комбинациями. В конкретном варианте осуществления константная область иммуноглобулина или ее часть представляет собой шарнирную область и CH2.

[0248] В определенных вариантах осуществления константная область Ig или ее часть является полугликозилированной. Например, химерный полипептид, содержащий две Fc-области или два партнера по связыванию с FcRn, может содержать гликозилированные первые Fc-область (например, гликозилированную область CH2) или партнера по связыванию с FcRn и агликозилированные вторые Fc-область (например, агликозилированную область CH2) или партнера по связыванию с FcRn. В некоторых вариантах осуществления линкер может быть помещен между гликозилированной и агликозилированной Fc-областями. В других вариантах осуществления Fc-область или партнер по связыванию с FcRn являются полностью гликозилированными, т. е. все Fc-области являются гликозилированными. В других вариантах осуществления Fc-область может быть агликозилированной, т. е. ни один из Fc-компонентов не является гликозилированным.

[0249] В определенных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит аминокислотную замену в константной области Ig или ее части (например, варианты Fc), которая изменяет антигеннезависимые эффекторные функции константной области Ig, в частности, период полужизни белка в кровотоке.

[0250] Такие белки демонстрируют увеличенное либо уменьшенное связывание с FcRn по сравнению с белками, не содержащими таких замен, и, следовательно, характеризуются соответственно увеличенным или уменьшенным периодом полужизни в сыворотке крови. Предполагается, что варианты Fc с улучшенной аффинностью в отношении FcRn характеризуются более длительными периодами полужизни в сыворотке крови, и такие молекулы имеют полезную применимость в способах лечения млекопитающих, при которых необходим длительный период полужизни введенного полипептида, например, для лечения хронического заболевания или нарушения (см., например, патенты США 7348004, 7404956 и 7862820). В отличие от этого, ожидается, что варианты Fc с уменьшенной аффинностью связывания с FcRn будут характеризоваться более короткими периодами полужизни, и такие молекулы также применимы, например, для введения млекопитающему, при котором целесообразным может быть сокращенное время циркуляции, например, для диагностической визуализации in vivo или в ситуациях, когда исходный полипептид оказывает токсические побочные эффекты, если он присутствует в кровотоке в течение длительных периодов. Варианты Fc с уменьшенной аффинностью связывания с FcRn также с меньшей долей вероятности пересекают плацентарный барьер и, таким образом, также являются применимыми в лечении заболеваний или нарушений у беременных женщин. Кроме того, другие пути применения, при которых может быть необходимой сниженная аффинность связывания с FcRn, включают такие пути применения, при которых необходима локализация в головном мозге, почке и/или печени. В одном иллюстративном варианте осуществления химерные полипептиды по настоящему изобретению демонстрируют сниженный транспорт через эпителий почечных клубочков из сосудистой сети. В других вариантах осуществления химерные полипептиды по настоящему изобретению демонстрируют сниженный транспорт через гематоэнцефалический барьер (ВВВ) из головного мозга в сосудистое пространство. В некоторых вариантах осуществления белок с измененным связыванием с FcRn содержит по меньшей мере одну Fc-область или партнера по связыванию с FcRn (например, одну или две Fc-области или один или два партнера по связыванию с FcRn), имеющих одну или несколько аминокислотных замен в "FcRn-связывающей петле" в константной области Ig. FcRn-связывающая петля состоит из аминокислотных остатков 280-299 (в соответствии с нумерацией EU) полноразмерной Fc-области дикого типа. В других вариантах осуществления константная область Ig или ее часть в химерном полипептиде по настоящему изобретению, характеризующемся измененной аффинностью связывания c FcRn, содержит по меньшей мере одну Fc-область или партнера по связыванию с FcRn, имеющих одну или несколько аминокислотных замен в пределах "зоны контакта" с FcRn размером 15 Ǻ. Используемый в данном документе термин "зона контакта" с FcRn размером 15 Ǻ включает остатки в следующих положениях полноразмерного Fc-компонента дикого типа: 243-261, 275-280, 282-293, 302-319, 336-348, 367, 369, 372-389, 391, 393, 408, 424, 425-440 (нумерация EU). В других вариантах осуществления константная область Ig или ее часть по настоящему изобретению, характеризующиеся измененной аффинностью связывания с FcRn, содержат по меньшей мере одну Fc-область или партнера по связыванию с FcRn, имеющих одну или несколько аминокислотных замен в аминокислотном положении, соответствующем любому из следующих EU-положений: 256, 277-281, 283-288, 303-309, 313, 338, 342, 376, 381, 384, 385, 387, 434 (например, N434A или N434K) и 438. Иллюстративные аминокислотные замены, обеспечивающие изменение активности связывания с FcRn, раскрыты в международной публикации согласно PCT № WO05/047327, которая включена в данный документ посредством ссылки.

[0251] Fc-область или партнер по связыванию с FcRn, применяемые в настоящем изобретении, также могут содержать известную из уровня техники аминокислотную замену, обеспечивающую изменение гликозилирования химерного полипептида. Например, Fc-область или партнер по связыванию с FcRn химерного полипептида, соединенные с доменом D'D3 VWF или полипептидом FVIII, может включать в себя Fc-область, имеющую мутацию, приводящую к пониженному гликозилированию (например, N- или O-связанному гликозилированию), или может включать в себя измененную гликоформу Fc-компонента дикого типа (например, гликан с низким содержанием фукозы или гликан, не содержащий фукозу).

[0252] В некоторых вариантах осуществления непроцессированный химерный полипептид по настоящему изобретению может содержать генетически слитую Fc-область (т. e. scFc-область), имеющую две или более составляющих ее константных областей Ig или их частей, независимо выбранных из константной области Ig или ее части, описанных в данном документе. В некоторых вариантах осуществления Fc-области димерной Fc-области являются одинаковыми. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере две Fc-области являются разными. Например, Fc-области или партнеры по связыванию с FcRn белков по настоящему изобретению содержат одинаковое количество аминокислотных остатков, или они могут отличаться по длине одним или несколькими аминокислотными остатками (например, приблизительно 5 аминокислотными остатками (например, 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотными остатками), приблизительно 10 остатками, приблизительно 15 остатками, приблизительно 20 остатками, приблизительно 30 остатками, приблизительно 40 остатками или приблизительно 50 остатками). В еще некоторых других вариантах осуществления Fc-области или партнеры по связыванию с FcRn белка по настоящему изобретению могут отличаться по последовательности в одном или нескольких аминокислотных положениях. Например, по меньшей мере две Fc-области или два партнера по связыванию с FcRn могут отличаться по приблизительно 5 аминокислотным положениям (например, 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотным положениям), приблизительно 10 положениям, приблизительно 15 положениям, приблизительно 20 положениям, приблизительно 30 положениям, приблизительно 40 положениям или приблизительно 50 положениям.

III.C.2. Последовательности XTEN

[0253] Используемое в данном документе выражение "последовательность XTEN" относится к полипептидам увеличенной длины с не встречающимися в природе по существу неповторяющимися последовательностями, которые состоят главным образом из небольших гидрофильных аминокислот, при этом последовательность характеризуется низкой степенью образования вторичной или третичной структуры в физиологических условиях или отсутствием таковой. Являясь партнером для химерного полипептида, XTEN могут служить в качестве носителя, придавая определенные необходимые фармакокинетические, физико-химические и фармацевтические свойства, будучи соединенными с белком VWF или последовательностью FVIII по настоящему изобретению с образованием химерного полипептида. Такие необходимые свойства включают без ограничения улучшенные фармакокинетические параметры и характеристики растворимости. Используемый в данном документе термин "XTEN" конкретным образом исключает антитела или фрагменты антител, такие как одноцепочечные антитела или Fc-фрагменты легкой цепи или тяжелой цепи.

[0254] В некоторых вариантах осуществления более короткая последовательность XTEN обеспечивает улучшенное свойство продления периода полужизни по сравнению с более длинной последовательностью XTEN, если последовательность XTEN слита с белком VWF и/или второй константной областью Ig или ее частью. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN, слитая с белком VWF и/или второй константной областью Ig или ее частью, имеет длину менее 288 аминокислот, т. е. короче 288 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN, слитая с белком VWF и/или второй константной областью Ig или ее частью, состоит из аминокислотной последовательности, имеющей длину от 12 аминокислот до 287 аминокислот. В других вариантах осуществления последовательность XTEN, слитая с белком VWF и/или второй константной областью Ig или ее частью, содержит по меньшей мере приблизительно 36 аминокислот, по меньшей мере приблизительно 42 аминокислоты, по меньшей мере приблизительно 72 аминокислоты или по меньшей мере приблизительно 144 аминокислоты, но менее 288 аминокислот. В других вариантах осуществления последовательность XTEN, слитая с белком VWF и/или второй константной областью Ig или ее частью, выбрана из AE36, AG36, AE42, AG42, AE72, AG72, AE144 или AG144. В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN, слитая с белком VWF и/или второй константной областью Ig или ее частью, представляет собой аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентичную SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 14, где химерный полипептид демонстрирует улучшенный период полужизни по сравнению с химерным полипептидом без последовательности XTEN.

[0255] Химерный полипептид по настоящему изобретению может дополнительно содержать дополнительные (вторую, третью или больше) последовательности XTEN. Дополнительная последовательность XTEN дополнительно может быть слита с полипептидом FVIII или первой константной областью Ig или ее частью. Дополнительные последовательности XTEN могут иметь любую длину. Например, дополнительная последовательность XTEN, слитая с полипептидом FVIII или первой константной областью Ig или ее частью, представляет собой пептид или полипептид, содержащий более чем приблизительно 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950, 1000, 1200, 1400, 1600, 1800 или 2000 аминокислотных остатков. В определенных вариантах осуществления дополнительная последовательность XTEN представляет собой пептид или полипептид, содержащий более чем от приблизительно 20 до приблизительно 3000 аминокислотных остатков, более чем от приблизительно 30 до приблизительно 2500 остатков, более чем от приблизительно 40 до приблизительно 2000 остатков, более чем от приблизительно 50 до приблизительно 1500 остатков, более чем от приблизительно 60 до приблизительно 1000 остатков, более чем от приблизительно 70 до приблизительно 900 остатков, более чем от приблизительно 80 до приблизительно 800 остатков, более чем от приблизительно 90 до приблизительно 700 остатков, более чем от приблизительно 100 до приблизительно 600 остатков, более чем от приблизительно 110 до приблизительно 500 остатков или более чем от приблизительно 120 до приблизительно 400 остатков. В определенных вариантах осуществления дополнительная последовательность XTEN, слитая с полипептидом FVIII, содержит по меньшей мере приблизительно 288 аминокислот. В конкретных вариантах осуществления дополнительная последовательность XTEN, слитая с полипептидом FVIII, содержит приблизительно 288 аминокислот. В конкретных вариантах осуществления дополнительная последовательность XTEN, слитая с полипептидом FVIII, содержит аминокислотную последовательность, которая на по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентична аминокислотной последовательности AE288 (SEQ ID NO: 8).

[0256] Последовательности XTEN (т. е. последовательность XTEN, слитая с белком VWF и/или второй константной областью Ig или ее частью, или последовательность XTEN, слитая с полипептидом FVIII и/или первой константной областью Ig или ее частью или вставленная в один или несколько сайтов вставки в полипептиде FVIII) могут содержать один или несколько мотивов последовательности из 9-14 аминокислотных остатков или аминокислотную последовательность, на по меньшей мере 80%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичную мотиву последовательности, где мотив содержит 4-6 типов аминокислот, выбранных из группы, состоящей из глицина (G), аланина (A), серина (S), треонина (T), глутамата (E) и пролина (P), состоит по сути из них или состоит из них. См. US 2010-0239554 A1.

[0257] В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN содержит неперекрывающиеся мотивы последовательностей, в которых по меньшей мере приблизительно 80%, или по меньшей мере приблизительно 85%, или по меньшей мере приблизительно 90%, или по меньшей мере приблизительно 91%, или по меньшей мере приблизительно 92%, или по меньшей мере приблизительно 93%, или по меньшей мере приблизительно 94%, или по меньшей мере приблизительно 95%, или по меньшей мере приблизительно 96%, или по меньшей мере приблизительно 97%, или по меньшей мере приблизительно 98%, или по меньшей мере приблизительно 99%, или приблизительно 100% последовательности состоит из нескольких звеньев неперекрывающихся последовательностей, выбранных из одного семейства мотивов, выбранного из таблицы 7, что в результате дает последовательность, характерную для определенного семейства. Используемый в данном документе термин "семейство" означает, что XTEN содержит мотивы, выбранные только из одной категории мотивов из таблицы 7, т. е. XTEN на основе AD, AE, AF, AG, AM, AQ, BC или BD, и что любые другие аминокислоты в XTEN, не относящиеся к мотиву из определенного семейства, выбраны для достижения необходимого свойства, как, например, для обеспечения встраивания сайта рестрикции рядом с кодирующими нуклеотидами, встраивания последовательности для расщепления или для достижения лучшего соединения с FVIII или VWF. В некоторых вариантах осуществления семейств XTEN последовательность XTEN содержит несколько звеньев неперекрывающихся мотивов последовательностей из семейства мотивов AD, или семейства мотивов AE, или семейства мотивов AF, или семейства мотивов AG, или семейства мотивов AM, или семейства мотивов AQ, или семейства BC, или семейства BD, в результате чего XTEN демонстрирует диапазон гомологии, описанный выше. В других вариантах осуществления XTEN содержит несколько звеньев последовательностей мотивов из двух или более семейств мотивов из таблицы 7. Эти последовательности могут быть выбраны для достижения необходимых физических/химических характеристик, в том числе таких свойств, как суммарный заряд, гидрофильность, отсутствие вторичной структуры или отсутствие повторяемости, которые определяются аминокислотным составом мотивов, более полно описанным ниже. В вариантах осуществления, описанных выше в данном абзаце данного документа, мотивы, встраиваемые в XTEN, могут быть отобраны и собраны с применением способов, описанных в данном документе, для получения XTEN из от приблизительно 36 до приблизительно 3000 аминокислотных остатков.

Таблица 7. Мотивы последовательностей XTEN из 12 аминокислот и семейства мотивов

Семейство мотива*	ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ МОТИВА
AD	GESPGGSSGSES (SEQ ID NO: 24)
AD	GSEGSSGPGESS (SEQ ID NO: 25)
AD	GSSESGSSEGGP (SEQ ID NO: 26)
AD	GSGGEPSESGSS (SEQ ID NO: 27)
AE, AM	GSPAGSPTSTEE (SEQ ID NO: 28)
AE, AM, AQ	GSEPATSGSETP (SEQ ID NO: 29)
AE, AM, AQ	GTSESATPESGP (SEQ ID NO: 30)
AE, AM, AQ	GTSTEPSEGSAP (SEQ ID NO: 31)
AF, AM	GSTSESPSGTAP (SEQ ID NO: 32)
AF, AM	GTSTPESGSASP (SEQ ID NO: 33)
AF, AM	GTSPSGESSTAP (SEQ ID NO: 34)
AF, AM	GSTSSTAESPGP (SEQ ID NO: 35)
AG, AM	GTPGSGTASSSP (SEQ ID NO: 36)
AG, AM	GSSTPSGATGSP (SEQ ID NO: 37)
AG, AM	GSSPSASTGTGP (SEQ ID NO: 38)
AG, AM	GASPGTSSTGSP (SEQ ID NO: 39)
AQ	GEPAGSPTSTSE (SEQ ID NO: 40)
AQ	GTGEPSSTPASE (SEQ ID NO: 41)
AQ	GSGPSTESAPTE (SEQ ID NO: 42)
AQ	GSETPSGPSETA (SEQ ID NO: 43)
AQ	GPSETSTSEPGA (SEQ ID NO: 44)
AQ	GSPSEPTEGTSA (SEQ ID NO: 45)
BC	GSGASEPTSTEP (SEQ ID NO: 46)
BC	GSEPATSGTEPS (SEQ ID NO: 47)
BC	GTSEPSTSEPGA (SEQ ID NO: 48)
BC	GTSTEPSEPGSA (SEQ ID NO: 49)
BD	GSTAGSETSTEA (SEQ ID NO: 50)
BD	GSETATSGSETA (SEQ ID NO: 51)
BD	GTSESATSESGA (SEQ ID NO: 52)
BD	GTSTEASEGSAS (SEQ ID NO: 53)

* Обозначает отдельные последовательности мотивов, которые при совместном применении в различных перестановках дают в результате "последовательность, характерную для определенного семейства"

[0258] В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN, применяемая в настоящем изобретении, на по меньшей мере 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична последовательности, выбранной из группы, состоящей из AE42, AG42, AE48, AM48, AE72, AG72, AE108, AG108, AE144, AF144, AG144, AE180, AG180, AE216, AG216, AE252, AG252, AE288, AG288, AE324, AG324, AE360, AG360, AE396, AG396, AE432, AG432, AE468, AG468, AE504, AG504, AF504, AE540, AG540, AF540, AD576, AE576, AF576, AG576, AE612, AG612, AE624, AE648, AG648, AG684, AE720, AG720, AE756, AG756, AE792, AG792, AE828, AG828, AD836, AE864, AF864, AG864, AM875, AE912, AM923, AM1318, BC864, BD864, AE948, AE1044, AE1140, AE1236, AE1332, AE1428, AE1524, AE1620, AE1716, AE1812, AE1908, AE2004A, AG948, AG1044, AG1140, AG1236, AG1332, AG1428, AG1524, AG1620, AG1716, AG1812, AG1908 и AG2004. См. US 2010-0239554 A1.

[0259] В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN на по меньшей мере 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из AE42 (SEQ ID NO: 9), AE72 (SEQ ID NO: 10), AE144_2A (SEQ IDNO: 55), AE144_3B (SEQ ID NO: 56), AE144_4A (SEQ ID NO: 57), AE144_5A (SEQ ID NO: 58), AE144_6B (SEQ ID NO: 59), AG144_A (SEQ ID NO: 60), AG144_B (SEQ ID NO: 61), AG144_C (SEQ ID NO: 62), AG144_F (SEQ IDNO: 63), AE864 (SEQ ID NO: 15), AE576 (SEQ ID NO: 16), AE288 (SEQ ID NO: 8), AE288_2 (SEQ ID NO: 54), AE144 (SEQ ID NO: 11), AG864 (SEQ ID NO: 17), AG576 (SEQ ID NO: 18), AG288 (SEQ ID NO: 19), AG144 (SEQ ID NO: 14) и любых их комбинаций. В других вариантах осуществления последовательность XTEN выбрана из группы, состоящей из AE42 (SEQ ID NO: 9), AE72 (SEQ ID NO: 10), AE144_2A (SEQ IDNO: 55), AE144_3B (SEQ ID NO: 56), AE144_4A (SEQ ID NO: 57), AE144_5A (SEQ IDNO: 58), AE144_6B (SEQ ID NO: 59), AG144_A (SEQ ID NO: 60), AG144_B (SEQ ID NO: 61), AG144_C (SEQ ID NO: 62), AG144_F (SEQ IDNO: 63), AE864 (SEQ ID NO: 15), AE576 (SEQ ID NO: 16), AE288 (SEQ ID NO: 8), AE288_2 (SEQ ID NO: 54), AE144 (SEQ ID NO: 11), AG864 (SEQ ID NO: 17), AG576 (SEQ ID NO: 18), AG288 (SEQ ID NO: 19), AG144 (SEQ ID NO: 14) и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN представляет собой AE288. Аминокислотные последовательности для определенных последовательностей XTEN по настоящему изобретению показаны в таблице 8.

ТАБЛИЦА 8. Последовательности XTEN

XTEN	Аминокислотная последовательность
AE42 SEQ ID NO: 9	GAPGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPASS
AE72 (SEQ ID NO: 10)	GAP TSESATPESG PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG TSTEPSEGSA PGASS
AE144 (SEQ ID NO: 11)	GSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEG SAPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGTSTEPSEGSAPGTSESA PESGPGSEPATSGSETPGTSTEPSEGSAP
AE144_2A (SEQ ID NO: 55)	TSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPESGPG
AE144_3B (SEQ ID NO: 56)	SPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPG
AE144_4A (SEQ ID NO: 57)	TSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPG
AE144_5A (SEQ ID NO: 58)	TSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEG
AE144_6B (SEQ ID NO: 59)	TSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPG
AG144 SEQ ID NO: 14	GTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGASPGTSST GSPGASPGTSSTGSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGSSPSA STGTGPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSP
AG144_A (SEQ ID NO: 60)	GASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGTPGSGTASSSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSP
AG144_B (SEQ ID NO: 61)	GTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGSSTPSGATGSPGSSTPSGATGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSP
AG144_C (SEQ ID NO: 62)	GTPGSGTASSSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGTPGSGTASSSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSTPSGATGSPGSSTPSGATGSPGASPGTSSTGSP
AG144_F (SEQ ID NO: 63)	GSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSTPSGATGSPGASPGTSSTGSP
AE288 SEQ ID NO: 8	GTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESG PGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPES GPGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPE SGPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSE GSAPGTSTEPSEGSAPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAP
AE288_2 (SEQ ID NO: 54)	GSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAP
AG288 SEQ ID NO: 19	PGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGTPGSGTASS SPGSSTPSGATGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTG TGPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSPSAST GTGPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSTPSGATGSPGSSPSAS TGTGPGASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGS
AE576 SEQ ID NO: 16	GSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSA PGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSPAGSPTST EEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEG SAPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSG SETPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGSPAGSP TSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSTEP SEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSPAG SPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEP ATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSP AGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAP
AG576 SEQ ID NO: 18	PGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGSSTPSGATG SPGSSTPSGATGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTAS SSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGTPGSGTA SSSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSTPSGATGSPGSSTPSG ATGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSTPSGATGSPGSSTPS GATGSPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGASPG TSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSST PSGATGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSS TPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGS STPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGS
AE864 SEQ ID NO: 15	GSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSA PGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSPAGSPTST EEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEG SAPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSG SETPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGSPAGSP TSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSTEP SEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSPAG SPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEP ATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSP AGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGS EPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPG SPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEE GSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGTSESATPESG PGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGS APGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAP
AG864 SEQ ID NO: 17	GASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGS PGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGTPGSGTASS SPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGASPGTSST GSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGSSTPSGA TGSPGSSTPSGATGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGT ASSSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGTPGSG TASSSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGSSTPSGATGSPGSSTP SGATGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGSSTPSGATGSPGSST PSGATGSPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGAS PGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSPGS STPSGATGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPGTPGSGTASSSPGSSTPSGATGSPG SSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGTPGSGTASSSP GSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGASPGTSSTGS PGSSTPSGATGSPGSSPSASTGTGPGASPGTSSTGSPGSSPSASTGTGPGTPGSGTASS SPGSSTPSGATGSPGSSTPSGATGSPGASPGTSSTGSP

[0260] В тех вариантах осуществления, где компонент(компоненты) XTEN содержит(содержат) менее 100% аминокислот, состоящих из 4, 5 или 6 типов аминокислот, выбранных из глицина (G), аланина (A), серина (S), треонина (T), глутамата (E) и пролина (P), или менее 100% последовательности, состоящей из мотивов последовательностей из таблицы 7 или последовательностей XTEN из таблицы 8, другие аминокислотные остатки XTEN выбраны из любых других 14 природных L-аминокислот, но предпочтительно выбраны из гидрофильных аминокислот, так что последовательность XTEN содержит по меньшей мере приблизительно 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или по меньшей мере приблизительно 99% гидрофильных аминокислот. Аминокислоты XTEN, которые не являются глицином (G), аланином (A), серином (S), треонином (T), глутаматом (E) и пролином (P), распределены по всей последовательности XTEN, расположены в пределах мотивов последовательностей или между ними либо сконцентрированы в одном или нескольких коротких отрезках последовательности XTEN, например, для создания линкера между компонентами XTEN и FVIII или VWF. В таких случаях, когда компонент XTEN содержит аминокислоты, отличные от глицина (G), аланина (A), серина (S), треонина (T), глутамата (E) и пролина (P), предпочтительно, чтобы менее чем приблизительно 2% или менее чем приблизительно 1% аминокислот представляли собой гидрофобные остатки, так что полученные последовательности обычно не имеют вторичной структуры, например, имеют не более 2% альфа-спиралей или 2% бета-складчатых слоев, как определено посредством способов, раскрытых в данном документе. Гидрофобные остатки, которые являются менее предпочтительными при конструировании XTEN, включают триптофан, фенилаланин, тирозин, лейцин, изолейцин, валин и метионин. Кроме того, можно разработать последовательности XTEN так, чтобы они содержали менее 5%, или менее 4%, или менее 3%, или менее 2%, или менее 1%, или ни одной из следующих аминокислот: цистеина (во избежание образования дисульфидных связей и окисления), метионина (во избежание окисления), аспарагина и глутамина (во избежание дезамидирования). Таким образом, в некоторых вариантах осуществления компонент XTEN, содержащий другие аминокислоты в дополнение к глицину (G), аланину (A), серину (S), треонину (T), глутамату (E) и пролину (P), имеет последовательность с менее чем 5% остатков, вносящих вклад в образование альфа-спиралей и бета-складчатых слоев, как измерено с помощью алгоритма Чоу-Фасмана, и характеризуются по меньшей мере 90% или по меньшей мере приблизительно 95% или большей вероятностью образования случайного клубка, как измерено с помощью алгоритма GOR.

[0261] В дополнительных вариантах осуществления последовательность XTEN, применяемая в настоящем изобретении, влияет на физические или химические свойства, например, фармакокинетические показатели, химерного полипептида по настоящему изобретению. Последовательность XTEN, применяемая в настоящем изобретении, может демонстрировать одно или несколько из следующих преимущественных свойств: конформационную гибкость, повышенную растворимость в воде, высокую степень устойчивости к протеазам, низкую иммуногенность, слабое связывание с рецепторами млекопитающих или увеличенные значения гидродинамического радиуса (или радиуса Стокса). В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN, соединенная с белком FVIII согласно настоящему изобретению, улучшает фармакокинетические свойства, как, например, обеспечивает более длительный конечный период полужизни или увеличенную площадь под кривой (AUC), так что описанный в данном документе химерный полипептид сохраняется in vivo в течение увеличенного периода времени по сравнению с FVIII дикого типа. В дополнительных вариантах осуществления последовательность XTEN, применяемая в настоящем изобретении, улучшает фармакокинетические свойства, как, например, обеспечивает более длительный конечный период полужизни или увеличенную площадь под кривой (AUC), так что белок FVIII сохраняется in vivo в течение увеличенного периода времени по сравнению с FVIII дикого типа.

[0262] Для определения физических/химических свойств белков, содержащих последовательность XTEN, можно использовать различные способы и анализы. Такие способы включают без ограничения аналитическое центрифугирование, EPR, ионообменную HPLC, эксклюзионную HPLC, обращенно-фазовую HPLC, рассеяние света, капиллярный электрофорез, круговой дихроизм, дифференциальную сканирующую калориметрию, флуоресценцию, ионообменную HPLC, эксклюзионную HPLC, IR-спектроскопию, NMR, рамановскую спектрометрию, рефрактометрию и спектроскопию в UV- и видимой области спектра. Дополнительные способы раскрыты в Amau et al., Prot Expr and Purif 48, 1-13 (2006).

[0263] Дополнительные примеры последовательностей XTEN, которые можно применять согласно настоящему изобретению, раскрыты в публикациях заявок на патент США №№ 2010/0239554 A1, 2010/0323956 A1, 2011/0046060 A1, 2011/0046061 A1, 2011/0077199 A1 или 2011/0172146 A1 или публикациях международных заявок на патент №№ WO 2010091122 A1, WO 2010144502 A2, WO 2010144508 A1, WO 2011028228 A1, WO 2011028229 A1, WO 2011028344 A2 или WO 20130122617 A1.

III.C.2. Альбумины

[0264] Альбумин или его часть может являться партнером по связыванию с FcRn. В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один полипептид альбумин или его фрагмент, вариант или производное. Сывороточный альбумин человека (HSA или HA), представляющий собой белок из 609 аминокислот в своей полноразмерной форме, ответственен за значительную долю осмотического давления сыворотки крови, а также выполняет функцию носителя эндогенных и экзогенных лигандов. Термин "альбумин", используемый в данном документе, включает полноразмерный альбумин или его функциональный фрагмент, вариант, производное или аналог. Примеры альбумина или его фрагментов или вариантов раскрыты в публикациях заявок на патент США №№ 2008/0194481A1, 2008/0004206 A1, 2008/0161243 A1, 2008/0261877 A1 или 2008/0153751 A1 или в публикациях заявок согласно PCT №№ 2008/033413 A2, 2009/058322 A1 или 2007/021494 A2, которые включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0265] Альбуминсвязывающие полипептиды (ABP) могут включать без ограничения бактериальные альбуминсвязывающие домены, альбуминсвязывающие пептиды или фрагменты альбуминсвязывающих антител, которые могут связываться с альбумином. Домен 3 из стрептококкового белка G, раскрытого в Kraulis et al., FEBS Lett. 378:190-194 (1996) и Linhult et al., Protein Sci. 11:206-213 (2002), является примером бактериального альбуминсвязывающего домена. Примеры альбуминсвязывающих пептидов раскрыты в Dennis et al., J. Biol. Chem. 2002, 277: 35035-35043 (2002). Примеры фрагментов альбуминсвязывающих антител раскрыты в Muller and Kontermann, Curr. Opin. Mol. Ther. 9:319-326 (2007); Roovers et al., Cancer Immunol. Immunother. 56:303-317 (2007), и Holt et al., Prot. Eng. Design Sci., 21:283-288 (2008), которые включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0266] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один сайт присоединения неполипептидной малой молекулы, ее варианта или производного, которые могут связываться с альбумином. Например, химерный полипептид может содержать один или несколько органических альбуминсвязывающих компонентов. Примером таких альбуминсвязывающих компонентов является 2-(3-малеимидопропанамидо)-6-(4-(4-йодфенил)бутанамидо)гексаноат (метка "Albu"), раскрытый в Trussel et al., Bioconjugate Chem. 20:2286-2292 (2009).

[0267] В определенных вариантах осуществления фрагмент VWF, описанный в данном документе, слит с альбумином. В некоторых вариантах осуществления конструкции фрагмент VWF-альбумин образуют гомодимеры. В некоторых вариантах осуществления домен D'D3 VWF, который слит с альбумином, связывается с полипептидом FVIII. В некоторых вариантах осуществления домен D'D3 VWF, слитый с альбумином, связывается с полипептидом FVIII посредством взаимодействия, более сильного, чем природные нековалентные взаимодействия между FVIII дикого типа и VWF. В конкретных вариантах осуществления домен D'D3 VWF и/или полипептид FVIII содержат одну или несколько мутаций, которые увеличивают аффинность между доменом D'D3 VWF и полипептидом FVIII. В определенных вариантах осуществления домен D'D3 VWF и/или полипептид FVIII содержат одну или несколько мутаций, которые обеспечивают образование дисульфидной связи между доменом D'D3 VWF и/или полипептидом FVIII.

III.C.3. CTP

[0268] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один C-концевой пептид (CTP) β-субъединицы хорионического гонадотропина человека или его фрагмент, вариант или производное. Известно, что CTP-пептиды обеспечивают увеличение периода полужизни данного белка. См., например, патент США № 5712122, включенный в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. Неограничивающие иллюстративные CTP-пептиды раскрыты в публикации заявки на патент США № US 2009/0087411 A1, включенной посредством ссылки.

III.C.4. PAS

[0269] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один пептид PAS или его фрагмент, вариант или производное. Пептид PAS или последовательность PAS, как используется в данном документе, означают аминокислотную последовательность, содержащую главным образом аланиновые и сериновые остатки или содержащую главным образом аланиновые, сериновые и пролиновые остатки, при этом аминокислотная последовательность образует конформацию случайного клубка в физиологических условиях. Соответственно, последовательность PAS представляет собой структурный блок, полимер из аминокислот или последовательность-кассету, которые содержат аланин, серин и пролин, состоят по сути из них или состоят из них, которые можно применять в качестве части гетерологичного компонента в химерном полипептиде. Полимер из аминокислот также может образовывать конформацию случайного клубка при добавлении в последовательность PAS остатков, отличных от аланина, серина и пролина, в качестве вспомогательной составляющей. Под "вспомогательной составляющей" подразумевается, что аминокислоты, отличные от аланина, серина и пролина, могут быть добавлены в последовательность PAS в определенной мере, например, в количестве до приблизительно 12%, т. e. приблизительно 12 из 100 аминокислот последовательности PAS, до приблизительно 10%, до приблизительно 9%, до приблизительно 8%, приблизительно 6%, приблизительно 5%, приблизительно 4%, приблизительно 3%, т. e. приблизительно 2%, или приблизительно 1% аминокислот. Аминокислоты, отличные от аланина, серина и пролина, могут быть выбраны из группы, состоящей из Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Thr, Trp, Tyr и Val. В физиологических условиях пептид PAS образует конформацию случайного клубка и за счет этого может опосредовать увеличенную стабильность рекомбинантного белка по настоящему изобретению in vivo и/или in vitro и обладает прокоагулянтной активностью.

[0270] Неограничивающие примеры пептидов PAS раскрыты, например, в публикации заявки на патент США № 2010/0292130 A1; публикации заявки согласно PCT № WO 2008/155134 A1 и выданном европейском патенте № EP2173890.

III.C.5. HAP

[0271] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один пептид, являющийся гомополимером из аминокислот (HAP), или его фрагмент, вариант или производное. Пептид HAP может содержать последовательность из повторяющихся глициновых остатков, которая имеет длину по меньшей мере 50 аминокислот, по меньшей мере 100 аминокислот, 120 аминокислот, 140 аминокислот, 160 аминокислот, 180 аминокислот, 200 аминокислот, 250 аминокислот, 300 аминокислот, 350 аминокислот, 400 аминокислот, 450 аминокислот или 500 аминокислот. Последовательность HAP способна обеспечивать продление периода полужизни компонента, слитого или связанного с последовательностью HAP. Неограничивающие примеры последовательности HAP включают без ограничения (Gly)n, (Gly4Ser)n или S(Gly4Ser)n, где n равняется 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, или 20. В некоторых вариантах осуществления n равняется 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 26, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, или 40. В других вариантах осуществления n равняется 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, или 200. См., например, Schlapschy M et al., Protein Eng. Design Selection, 20: 273-284 (2007).

III.C.6. Трансферрин

[0272] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один пептид трансферрин или его фрагмент, вариант или производное. Любой трансферрин можно сливать с химерным полипептидом, применяемым в способах по настоящему изобретению. В качестве примера, Tf человека дикого типа (Tf) представляет собой белок из 679 аминокислот размером примерно 75 кДа (без учета гликозилирования) с двумя основными доменами N (приблизительно 330 аминокислот) и C (приблизительно 340 аминокислот), которые, по-видимому, образуются в результате дупликации гена. См. номера доступа в GenBank NM001063, XM002793, M12530, XM039845, XM 039847 и S95936 (www.ncbi.nlm.nih.gov), все из которых включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0273] Трансферрин транспортирует железо путем эндоцитоза, опосредованного рецепторами трансферрина (TfR). После высвобождения железа в эндосомальный компартмент и рециркуляции комплекса Tf-TfR на клеточную поверхность Tf высвобождается обратно во внеклеточное пространство для следующего цикла транспорта железа. Tf обладает длительным периодом полужизни, превышающим 14-17 дней (Li et al., Trends Pharmacol. Sci. 23:206-209 (2002)). Слитые белки на основе трансферрина исследовались в отношении продления периода полужизни, целенаправленной доставки для терапии рака, пероральной доставки и устойчивой активации проинсулина (Brandsma et al., Biotechnol. Adv., 29: 230-238 (2011); Bai et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 102:7292-7296 (2005); Kim et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 334:682-692 (2010); Wang et al., J. Controlled Release 155:386-392 (2011)).

III.C.7. PEG

[0274] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один сайт присоединения неполипептидного гетерологичного компонента или его фрагмента, варианта или производного. Например, химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, может содержать один или несколько полиэтиленгликолевых (PEG) компонентов, присоединенных к одному или нескольким аминокислотным остаткам в факторе свертывания крови и/или Fc-области.

[0275] Пегилирование белка может относиться к конъюгату, образуемому между белком и по меньшей мере одной молекулой полиэтиленгликоля (PEG). PEG коммерчески доступен в широком ассортименте с различными значениями молекулярной массы и диапазонами средней молекулярной массы. Типичные примеры диапазонов средней молекулярной массы PEG включают без ограничения приблизительно 200, приблизительно 300, приблизительно 400, приблизительно 600, приблизительно 1000, приблизительно 1300-1600, приблизительно 1450, приблизительно 2000, приблизительно 3000, приблизительно 3000-3750, приблизительно 3350, приблизительно 3000-7000, приблизительно 3500-4500, приблизительно 5000-7000, приблизительно 7000-9000, приблизительно 8000, приблизительно 10000, приблизительно 8500-11500, приблизительно 16000-24000, приблизительно 35000, приблизительно 40000, приблизительно 60000 и приблизительно 80000 дальтонов. Эти значения средней молекулярной массы приведены исключительно в качестве примеров и не подразумеваются как ограничивающие каким-либо образом.

[0276] Химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, может быть пегилирован со включением одного или нескольких (например, 2-4) PEG-компонентов. Пегилирование можно выполнять с помощью любой из реакций пегилирования, известных из уровня техники. Способы получения продукта на основе пегилированного белка обычно будут включать (i) осуществление реакции полипептида с полиэтиленгликолем (таким как реакционноспособное сложноэфирное или альдегидное производное PEG) в условиях, при которых происходит присоединение пептида по настоящему изобретению к одной или нескольким группам PEG; и (ii) получение продукта(продуктов) реакции. В целом, оптимальные реакционные условия для реакций будут определяться в каждом конкретном случае, исходя из известных параметров и необходимого результата.

[0277] Существует ряд способов присоединения PEG, которые доступны специалистам в данной области, например, в Malik F et al., Exp. Hematol. 20:1028-35 (1992); Francis, Focus on Growth Factors 3(2):4-10 (1992); публикациях заявок на европейский патент №№ EP0401384, EP0154316 и EP0401384 и публикациях международных заявок на патент №№ WO92/16221 и WO95/34326. В качестве неограничивающего примера, варианты FVIII могут содержать замены на цистеин, и цистеиновые остатки могут быть дополнительно конъюгированы с полимером PEG. См. Mei et al., Blood 116:270-279 (2010) и патент США № 7632921, которые включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0278] В определенных вариантах осуществления химерный полипептид содержит одноцепочечный полипептид FVIII, ковалентно соединенный с фрагментом VWF, содержащим домен D' и домен D3 VWF, где полипептид FVIII содержит делецию всего домена B или его части, где полипептид FVIII является пегилированным, и где фрагмент VWF непосредственно или опосредованно слит с N-концом полипептида FVIII (например, в PEG-scFVIII-D'D3, "MG1121" или LAFATE). В других вариантах осуществления химерный полипептид содержит одноцепочечный полипептид FVIII, ковалентно соединенный с фрагментом VWF, содержащим домен D' и домен D3 VWF, где полипептид FVIII содержит делецию всего домена B или его части, где фрагмент VWF является пегилированным, и где фрагмент VWF непосредственно или опосредованно слит с N-концом полипептида FVIII (например, в scFVIII-D'D3-PEG). В других вариантах осуществления химерный полипептид содержит одноцепочечный полипептид FVIII, ковалентно соединенный с фрагментом VWF, содержащим домен D' и домен D3 VWF, где полипептид FVIII содержит делецию всего домена B или его части, где полипептид FVIII и фрагмент VWF являются пегилированными, и где фрагмент VWF непосредственно или опосредованно слит с N-концом полипептида FVIII (например, в scFVIII-D'D3-PEG).

III.C.8. HES

[0279] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один полимер гидроксиэтилкрахмал (HES). HES является производным встречающегося в природе амилопектина и разрушается под действием альфа-амилазы в организме. HES демонстрирует преимущественные биологические свойства и применяется в качестве средства для восполнения объема крови и в гемодилюционной терапии в клиниках. См., например, Sommermeyer et al., Krankenhauspharmazie 8:271-278 (1987); и Weidler et al., Arzneim.-Forschung/Drug Res. 41: 494-498 (1991).

[0280] HES главным образом характеризуют по молекулярно-массовому распределению и степени замещения. HES характеризуется средней молекулярной массой (средневзвешенной) от 1 до 300 кДа, от 2 до 200 кДа, от 3 до 100 кДа или от 4 до 70 кДа. Гидроксиэтилкрахмал может дополнительно характеризоваться степенью молярного замещения от 0,1 до 3, от 0,1 до 2, от 0,1 до 0,9 или от 0,1 до 0,8 и соотношением замещения С2:С6 в диапазоне от 2 до 20 применительно к гидроксиэтильным группам. HES со средней молекулярной массой приблизительно 130 кДа представляет собой Voluven^® от Fresenius. Voluven^® представляет собой искусственный коллоид, используемый, например, для восполнения объема, который применяют при терапевтическом показании для терапии и профилактики гиповолемии. Существует ряд способов присоединения HES, доступных специалистам в данной области, например, аналогичные способам присоединения PEG, которые описаны выше.

III.C.9. PSA

[0281] В определенных аспектах химерный полипептид, применяемый в способах по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один полимер полисиаловую кислоту (PSA). PSA представляют собой встречающиеся в природе неразветвленные полимеры сиаловой кислоты, вырабатываемые определенными штаммами бактерий и у млекопитающих в определенных клетках. См., например, Roth J. et al. (1993) в Polysialic Acid: From Microbes to Man, eds. Roth J., Rutishauser U., Troy F. A. (BirkhäuserVerlag, Basel, Switzerland), pp. 335-348. PSA могут быть получены с различной степенью полимеризации от n=приблизительно 80 или больше остатков сиаловой кислоты до n=2 путем неполного кислотного гидролиза, или путем расщепления нейраминидазами, или путем фракционирования природных форм полимера бактериального происхождения. Существует ряд способов присоединения PSA, доступных специалистам в данной области, например, аналогичные способам присоединения PEG, которые описаны выше. В определенных аспектах активированная PSA также может быть присоединена к цистеиновому аминокислотному остатку в факторе свертывания крови, например, в FVIII, или в Fc-области. См., например, патент США № 5846951.

III.C.10. Рецепторы, опосредующие выведение

[0282] В определенных аспектах период полужизни химерного полипептида, применяемого в способах согласно настоящему изобретению, может быть продлен, если фактор свертывания крови в составе химерного полипептида содержит полипептид FVIII и по меньшей мере один фрагмент рецептора, опосредующего выведение FVIII, или его FVIII-связывающий фрагмент, вариант или производное. Посредством вставки растворимых форм рецепторов, опосредующих выведение, таких как белок LRP1, родственный рецепторам липопротеинов низкой плотности, или их фрагментов можно блокировать связывание FVIII с рецепторами, опосредующими выведение, и за счет этого продлевать его период полужизни, например, период полужизни in vivo. LRP1 представляет собой интегральный мембранный белок размером 600 кДа, который участвует в рецепторно-опосредованном выведении различных белков, в том числе FVIII. См., например, Lenting et al., Haemophilia 16:6-16 (2010). Другими подходящими рецепторами, опосредующими выведение FVIII, являются, например, LDLR (рецептор липопротеинов низкой плотности), VLDLR (рецептор липопротеинов очень низкой плотности) и мегалин (LRP-2) или их фрагменты. См., например, Bovenschen et al., Blood 106:906-912 (2005); Bovenschen, Blood 116:5439-5440 (2010); Martinelli et al., Blood 116:5688-5697 (2010).

III.D. Сайты вставки

[0283] В некоторых аспектах сайт вставки в полипептиде FVIII расположен в одном или нескольких доменах полипептида FVIII, которые представляют собой N-конец, домен A1, домен A2, домен A3, домен B, домен C1, домен C2, C-конец или две или более их комбинации, или между двумя доменами полипептида FVIII, которые представляют собой домен A1 и кислую область a1, и кислую область a1 и домен A2, домен A2 и кислую область a2, кислую область a2 и домен B, домен B и домен A3, и домен A3 и домен C1, домен C1 и домен C2 или любые их комбинации. Например, сайты вставки, в которые может быть вставлена последовательность XTEN, выбраны из группы, состоящей из N-конца и домена A1, N-конца и домена A2, N-конца и домена A3, N-конца и домена В, N-конца и домена C1, N-конца и домена C2, N-конца и C-конца, доменов A1 и A2, доменов A1 и A3, доменов A1 и B, доменов A1 и C1, доменов A1 и C2, домена A1 и C-конца, доменов A2 и A3, доменов A2 и B, доменов A2 и C1, доменов A2 и C2, домена A2 и C-конца, доменов A3 и B, доменов A3 и C1, доменов A3 и C2, домена A3 и C-конца, доменов B и C1, доменов B и C2, домена B и C-конца, доменов C1 и C2, домена C1 и C-конца, домена C2 и C-конца, а также двух или более их комбинаций.

[0284] Полипептид FVIII, в котором последовательность XTEN вставлена непосредственно ниже одной или нескольких аминокислот (например, в одном или нескольких сайтах вставки XTEN) в полипептиде FVIII или соединена с С-концом или N-концом, сохраняет активность FVIII после соединения с последовательностью XTEN или ее вставки. Последовательность XTEN может быть вставлена в полипептид FVIII один или более одного раза, два раза, три раза, четыре раза, пять раз или шесть раз, таким образом, что вставки не влияют на активность FVIII (т. е. белок FVIII по-прежнему сохраняет свойство коагуляции).

[0285] Полипептид FVIII, применимый в настоящем изобретении, может быть соединен с одним или несколькими полипептидами XTEN на N-конце или C-конце полипептида FVIII с помощью необязательного линкера, или они могут быть вставлены непосредственно ниже одной или нескольких аминокислот (например, в одном или нескольких сайтах вставки XTEN) в полипептиде FVIII с помощью одного или нескольких необязательных линкеров.

[0286] В еще некоторых других вариантах осуществления один или несколько XTEN вставлены в домен B FVIII. В одном примере XTEN вставлен между аминокислотами 740 и 1640, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 740 и 1640 необязательно отсутствует. В другом примере XTEN вставлен между аминокислотами 741 и 1690, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 740 и 1690 необязательно отсутствует. В других примерах XTEN вставлен между аминокислотами 741 и 1648, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 741 и 1648 необязательно отсутствует. В еще некоторых других примерах XTEN вставлен между аминокислотами 743 и 1638, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 743 и 1638 необязательно отсутствует. В еще нескольких других примерах XTEN вставлен между аминокислотами 745 и 1656, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 745 и 1656 необязательно отсутствует. В некоторых примерах XTEN вставлен между аминокислотами 745 и 1657, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 745 и 1657 необязательно отсутствует. В определенных примерах XTEN вставлен между аминокислотами 745 и 1667, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 745 и 1667 необязательно отсутствует. В еще нескольких других примерах XTEN вставлен между аминокислотами 745 и 1686, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 745 и 1686 необязательно отсутствует. В некоторых других примерах XTEN вставлен между аминокислотами 747 и 1642, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 747 и 1642 необязательно отсутствует. В еще нескольких других примерах XTEN вставлен между аминокислотами 751 и 1667, соответствующими SEQ ID NO: 65, где последовательность FVIII между аминокислотами 751 и 1667 необязательно отсутствует. В некоторых вариантах осуществления последовательность XTEN вставлена между аминокислотами 745 и 746 зрелого полипептида FVIII или в соответствующем сайте вставки полипептида FVIII с делецией домена B. В конкретном варианте осуществления последовательность XTEN, содержащая аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью под SEQ AE288 (SEQ ID NO: 8), вставлена между аминокислотами 745 и 746 зрелого FVIII, где зрелый FVIII имеет делецию аминокислотных остатков 746-1648. В конкретных вариантах осуществления XTEN вставлен непосредственно ниже аминокислоты 745 в FVIII с делецией домена B из таблицы 5 (SEQ ID NO: 68).

III.E. Линкеры

[0287] В определенных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению дополнительно содержит один или несколько линкеров в белке FVIII и/или во фрагменте VWF. Одним из типов линкеров является расщепляемый линкер, который может расщепляться различными протеазами при введении субъекту in vivo, например, в участке коагуляции. В некоторых вариантах осуществления расщепляемый линкер обеспечивает отщепление компонента, например, белка VWF, от последовательности XTEN и, таким образом, от химерного полипептида в участке каскада коагуляции, за счет чего обеспечивается наличие активности FVIIIa у активированного FVIII (FVIIIa). Другим типом линкеров является процессируемый линкер, который содержит сайт внутриклеточного расщепления и, таким образом, может расщепляться ферментом внутриклеточного процессинга в клетке-хозяине, обеспечивая удобную экспрессию полипептида и образование химерного полипептида.

[0288] Один или несколько линкеров могут присутствовать между любыми двумя белками химерного полипептида. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид содержит первый полипептид, который содержит (i) полипептид FVIII и (ii) первую константную область Ig или ее часть, и второй полипептид, который содержит (iii) белок VWF, (iv) линкер (например, расщепляемый линкер), (v) последовательность XTEN и (vi) вторую константную область Ig или ее часть. В других вариантах осуществления химерный полипептид содержит первый полипептид, который содержит (i) полипептид FVIII и (ii) первую константную область Ig или ее часть, и второй полипептид, который содержит (iii) белок VWF, (iv) последовательность XTEN, (v) линкер (например, расщепляемый линкер), а также (vi) вторую константную область Ig или ее часть. В других вариантах осуществления химерный полипептид содержит первый полипептид, который содержит (i) полипептид FVIII и (ii) первую константную область Ig или ее часть, и второй полипептид, который содержит (iii) белок VWF, (iv) первый линкер (например, расщепляемый линкер), (v) последовательность XTEN, (vi) второй линкер (например, расщепляемый линкер), а также (vii) вторую константную область Ig или ее часть. В некоторых вариантах осуществления первый полипептид дополнительно содержит линкер, например, расщепляемый линкер между полипептидом FVIII и первой константной областью Ig.

[0289] В определенных вариантах осуществления химерный полипептид содержит одну цепь, содержащую (i) полипептид FVIII, (ii) первую константную область Ig или ее часть, (iii) линкер (например, процессируемый линкер), (iv) белок VWF, (v) последовательность XTEN и (vi) вторую константную область Ig или ее часть. В других вариантах осуществления химерный полипептид содержит одну цепь, содержащую (i) полипептид FVIII, (ii) первую константную область Ig или ее часть, (iii) первый линкер (например, процессируемый линкер), (iv) белок VWF, (v) второй линкер (например, расщепляемый линкер), (vi) последовательность XTEN и (vii) вторую константную область Ig или ее часть. Процессируемый линкер может подвергаться процессингу после экспрессии химерного полипептида в клетке-хозяине; таким образом, химерный полипептид, вырабатываемый в клетке-хозяине, может быть представлен в конечной форме, содержащей две или три полипептидные цепи.

[0290] Линкер, применимый в настоящем изобретении, может включать в себя любую органическую молекулу. Примеры линкеров, которые можно применять в химерных полипептидах по настоящему изобретению, раскрыты, например, в US 2011/0183907 A1, US 2016/0229903 A1 и US 2016/0251408 A1, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте. В некоторых вариантах осуществления линкер содержит полимер, например, полиэтиленгликоль (PEG) или гидроксиэтилкрахмал (HES). В других вариантах осуществления линкер содержит аминокислотную последовательность. Линкер может содержать по меньшей мере приблизительно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 300, 400,500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900 или 2000 аминокислот. Линкер может содержать 1-5 аминокислот, 1-10 аминокислот, 1-20 аминокислот, 10-50 аминокислот, 50-100 аминокислот, 100-200 аминокислот, 200-300 аминокислот, 300-400 аминокислот, 400-500 аминокислот, 500-600 аминокислот, 600-700 аминокислот, 700-800 аминокислот, 800-900 аминокислот или 900-1000 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления линкер содержит последовательность XTEN. Дополнительные примеры XTEN, которые можно применять согласно настоящему изобретению, раскрыты в публикациях заявок на патент США №№ 2010/0239554 A1, 2010/0323956 A1, 2011/0046060 A1, 2011/0046061 A1, 2011/0077199 A1 или 2011/0172146 A1 или публикациях международных заявок на патент №№ WO 2010091122 A1, WO 2010144502 A2, WO 2010144508 A1, WO 2011028228 A1, WO 2011028229 A1 или WO 2011028344 A2. В других вариантах осуществления линкер представляет собой последовательность PAS.

[0291] В определенных вариантах осуществления линкер представляет собой полимер, например, полиэтиленгликоль (PEG) или гидроксиэтилкрахмал (HES). В других вариантах осуществления линкер представляет собой аминокислотную последовательность. Линкер может содержать по меньшей мере приблизительно 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 1600, 1700, 1800, 1900, или 2000 аминокислот. Линкер может содержать 1-5 аминокислот, 1-10 аминокислот, 1-20 аминокислот, 10-50 аминокислот, 50-100 аминокислот, 100-200 аминокислот, 200-300 аминокислот, 300-400 аминокислот, 400-500 аминокислот, 500-600 аминокислот, 600-700 аминокислот, 700-800 аминокислот, 800-900 аминокислот или 900-1000 аминокислот.

[0292] Примеры линкеров хорошо известны из уровня техники. В определенных вариантах осуществления линкер содержит последовательность G_n. Линкер может содержать последовательность (GA)_n. Линкер может содержать последовательность (GGS)_n. В других вариантах осуществления линкер содержит (GGGS)_n (SEQ ID NO: 101). В еще нескольких других вариантах осуществления линкер содержит последовательность (GGS)_n(GGGGS)_n (SEQ ID NO: 95). В этих случаях n может являться целым числом от 1 до 100. В других случаях n может являться целым числом от 1 до 20, т. е.1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, или 20. Примеры линкеров включают без ограничения GGG, SGGSGGS (SEQ ID NO: 96), GGSGGSGGSGGSGGG (SEQ ID NO: 97), GGSGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 98), GGSGGSGGSGGSGGSGGS (SEQ ID NO: 99), или GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO: 100). Линкер не устраняет и не снижает активность белка VWF или свертывающую активность фактора VIII. Линкер необязательно усиливает активность белка VWF или свертывающую активность белкового фактора VIII, например, за счет дополнительного снижения эффектов стерического несоответствия и обеспечения большей доступности белка VWF или части фактора VIII для их сайта связывания в мишени.

[0293] В определенных вариантах осуществления линкер, применимый для химерного полипептида, имеет длину 15-25 аминокислот. В других вариантах осуществления линкер, применимый для химерного полипептида, имеет длину 15-20 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления линкер для химерного полипептида имеет длину 10-25 аминокислот. В других вариантах осуществления линкер для химерного полипептида имеет длину 15 аминокислот. В еще нескольких других вариантах осуществления линкер для химерного полипептида представляет собой (GGGGS)_n (SEQ ID NO: 94), где G представляет собой глицин, S представляет собой серин, и n представляет собой целое число от 1 до 20.

III.F. Сайты расщепления

[0294] Расщепляемый линкер может содержать в своем составе компонент, способный расщепляться химическим (например, путем гидролиза сложноэфирной связи), ферментативным (т. е. при встраивании последовательности для расщепления протеазой) или фотолитическим путем (например, в случае с хромофором, таким как 3-амино-3-(2-нитрофенил)пропионовая кислота (ANP)) для высвобождения одной молекулы от другой. Примеры расщепляемых линкеров, подходящих для химерных полипептидов по настоящему изобретению, можно найти, например, в US 2016/0229903 A1 и US 2016/0251408 A1, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

[0295] В определенных вариантах осуществления расщепляемый линкер содержит один или несколько сайтов расщепления на N-конце или C-конце или на них обоих. В других вариантах осуществления расщепляемый линкер состоит по сути из одного или нескольких расщепляемых сайтов или состоит из них. В других вариантах осуществления расщепляемый линкер содержит гетерологичные аминокислотные линкерные последовательности, описанные в данном документе, или полимеры и один или несколько расщепляемых сайтов.

[0296] В определенных вариантах осуществления расщепляемый линкер содержит один или несколько сайтов расщепления, которые могут расщепляться в клетке-хозяине (т. е. сайты внутриклеточного процессинга). Неограничивающие примеры сайта расщепления включают RRRR (SEQ ID NO: 102), RKRRKR (SEQ ID NO: 103), а также RRRRS (SEQ ID NO: 104).

[0297] В некоторых вариантах осуществления расщепляемый линкер содержит область a1 из FVIII, область a2 из FVIII, область a3 из FVIII, сайт расщепления тромбином, который содержит X-V-P-R (SEQ ID NO: 105) и мотив PAR1, взаимодействующий с экзосайтами, где X представляет собой алифатическую аминокислоту, или любые их комбинации. Он содержит область a2, которая содержит аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или на 100% идентичную последовательности от Glu720 до Arg740, соответствующей полноразмерному FVIII, при этом область a2 способна расщепляться тромбином. В конкретных вариантах осуществления расщепляемый линкер, применимый для настоящего изобретения, содержит область a2, которая содержит ISDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 106) или DKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 88).. В других вариантах осуществления расщепляемый линкер по настоящему изобретению содержит область a1, которая содержит аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или на 100% идентичную последовательности от Met337 до Arg372, соответствующей полноразмерному FVIII, при этом область a1 способна расщепляться тромбином. В конкретных вариантах осуществления область a1 содержит ISMKNNEEAEDYDDDLTDSEMDVVRFDDDNSPSFIQIRSV (SEQ ID NO: 107). В некоторых вариантах осуществления расщепляемый линкер по настоящему изобретению содержит область a3, которая содержит аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95% или на 100% идентичную последовательности от Glu1649 до Arg1689, соответствующей полноразмерному FVIII, при этом область a3 способна расщепляться тромбином. В определенных вариантах осуществления расщепляемый линкер по настоящему изобретению содержит область a3, содержащую ISEITRTTLQSDQEEIDYDDTISVEMKKEDFDIYDEDENQSPRSFQ (SEQ ID NO: 108).

[0298] В других вариантах осуществления расщепляемый линкер содержит сайт расщепления для тромбина, который содержит X-V-P-R (SEQ ID NO: 105) и мотив PAR1, взаимодействующий с экзосайтами, и где мотив PAR1, взаимодействующий с экзосайтами, содержит S-F-L-L-R-N (SEQ ID NO: 109). Мотив PAR1, взаимодействующий с экзосайтами, может дополнительно содержать аминокислотную последовательность, выбранную из P, P-N, P-N-D, P-N-D-K (SEQ ID NO: 110), P-N-D-K-Y (SEQ ID NO: 111), P-N-D-K-Y-E (SEQ ID NO: 112), P-N-D-K-Y-E-P (SEQ ID NO: 113), P-N-D-K-Y-E-P-F (SEQ ID NO: 114), P-N-D-K-Y-E-P-F-W (SEQ ID NO: 115), P-N-D-K-Y-E-P-F-W-E (SEQ ID NO: 116), P-N-D-K-Y-E-P-F-W-E-D (SEQ ID NO: 117), P-N-D-K-Y-E-P-F-W-E-D-E (SEQ ID NO: 118), P-N-D-K-Y-E-P-F-W-E-D-E-E (SEQ ID NO: 119), P-N-D-K-Y-E-P-F-W-E-D-E-E-S (SEQ ID NO: 120), или любую их комбинацию. В некоторых вариантах осуществления алифатическая аминокислота выбрана из глицина, аланина, валина, лейцина или изолейцина.

[0299] В других вариантах осуществления расщепляемый линкер содержит один или несколько сайтов расщепления, которые расщепляются протеазой после введения субъекту химерного полипептида, содержащего расщепляемый линкер. В некоторых вариантах осуществления сайт расщепления расщепляется протеазой, выбранной из группы, состоящей из фактора XIa, фактора XIIa, калликреина, фактора VIIa, фактора IXa, фактора Xa, фактора IIa (тромбина), эластазы-2, MMP-12, MMP-13, MMP-17 и MMP-20. В других вариантах осуществления сайт расщепления выбран из группы, состоящей из сайта расщепления для FXIa (например, KLTR↓AET (SEQ ID NO: 121)), сайта расщепления для FXIa (например, DFTR↓VVG (SEQ ID NO: 122)), сайта расщепления для FXIIa (например, TMTR↓IVGG (SEQ ID NO: 123)), сайта расщепления для калликреина (например, SPFR↓STGG (SEQ ID NO: 124)), сайта расщепления для FVIIa (например, LQVR↓IVGG (SEQ ID NO: 125)), сайта расщепления для FIXa (например, PLGR↓IVGG (SEQ ID NO: 126)), сайта расщепления для FXa (например, IEGR↓TVGG (SEQ ID NO: 127)), сайта расщепления для FIIa (тромбина) (например, LTPR↓SLLV (SEQ ID NO: 128)), сайта расщепления для эластазы-2 (например, LGPV↓SGVP (SEQ ID NO: 129)), сайта расщепления для гранзима В (например, VAGD↓SLEE (SEQ ID NO: 130)), сайта расщепления для MMP-12 (например, GPAG↓LGGA (SEQ ID NO: 131)), сайта расщепления для MMP-13 (например, GPAG↓LRGA (SEQ ID NO: 132)), сайта расщепления для MMP-17 (например, APLG↓LRLR (SEQ ID NO: 133)), сайта расщепления для MMP-20 (например, PALP↓LVAQ (SEQ ID NO: 134)), сайта расщепления для TEV (например, ENLYFQ↓G (SEQ ID NO: 135)), сайта расщепления для энтерокиназы (например, DDDK↓IVGG (SEQ ID NO: 136)), сайта расщепления для протеазы 3C (PreScission™) (например, LEVLFQ↓GP (SEQ ID NO: 137)), а также сайта расщепления для сортазы A (например, LPKT↓GSES) (SEQ ID NO: 138). В определенных вариантах осуществления сайты расщепления для FXIa включают без ограничения, например, TQSFNDFTR (SEQ ID NO: 1) и SVSQTSKLTR (SEQ ID NO: 3). Неограничивающие иллюстративные примеры сайтов расщепления для тромбина включают, например, DFLAEGGGVR (SEQ ID NO: 4), TTKIKPR (SEQ ID NO: 5), LVPRG (SEQ ID NO: 6), DKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 88) или IEPRSFS (SEQ ID NO: 194), а также последовательность, содержащую ALRPR (SEQ ID NO: 7) (например, ALRPRVVGGA (SEQ ID NO: 145)), состоящую по сути из нее или состоящую из нее.

[0300] В некоторых вариантах осуществления сайт расщепления представляет собой TLDPRSFLLRNPNDKYEPFWEDEEK (SEQ ID NO: 146). В других вариантах осуществления сайт расщепления содержит DKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 88) или его фрагмент. В конкретных вариантах осуществления сайт расщепления содержит IEPRSFS (SEQ ID NO: 194). В других вариантах осуществления сайт расщепления содержит EPRSFS (SEQ ID NO: 195), где сайт расщепления не представляет собой полноразмерную область а2 FVIII. В еще нескольких других вариантах осуществления сайт расщепления содержит IEPR (SEQ ID NO: 200). В еще некоторых других вариантах осуществления сайт расщепления содержит IEPR (SEQ ID NO: 200), где сайт расщепления не представляет собой полноразмерную область а2 FVIII или не содержит полноразмерную область а2 FVIII. В других вариантах осуществления сайт расщепления содержит DKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 88), KNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 139), NTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 140), TGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 141), GDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 142), DYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 143)¸ YYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 144)¸ YEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 176), EDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 177), DSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 178), SYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 179), YEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 180), EDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 181), DISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 182)¸ ISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 183), SAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 184), AYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 185), YLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 186), LLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 187), LSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 188), SKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 189), KNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 190), NNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 191), NAIEPRSFS (SEQ ID NO: 192), AIEPRSFS (SEQ ID NO: 193), или IEPRSFS (SEQ ID NO: 194). В других вариантах осуществления сайт расщепления содержит DKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 88), KNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 139), NTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 140), TGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 141), GDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 142), DYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 143)¸ YYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 144)¸ YEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 176), EDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 177), DSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 178), SYEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 179), YEDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 180), EDISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 181), DISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 182)¸ ISAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 183), SAYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 184), AYLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 185), YLLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 186), LLSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 187), LSKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 188), SKNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 189), KNNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 190), NNAIEPRSFS (SEQ ID NO: 191), NAIEPRSFS (SEQ ID NO: 192), AIEPRSFS (SEQ ID NO: 193), или IEPRSFS (SEQ ID NO:194), где сайт расщепления не представляет собой полноразмерную область a2 FVIII. В определенных вариантах осуществления расщепляемый линкер расщепляется в анализе расщепления тромбином, как предусмотрено в данном документе или как известно из уровня техники.

[0301] В конкретных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит: (i) белок FVIII, содержащий полипептид FVIII, первую последовательность XTEN и первую Fc-область; и (ii) фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, вторую последовательность XTEN, линкер a2 FVIII и вторую Fc-область; где:

(a) белок FVIII имеет делецию аминокислот 746-1648, соответствующих зрелому FVIII;

(b) первая последовательность XTEN вставлена в полипептид FVIII непосредственно ниже аминокислоты 745, соответствующей зрелому FVIII;

(с) первая последовательность XTEN содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью под SEQ AE288 (SEQ ID NO: 8);

(d) первая Fc-область слита с С-концом полипептида FVIII;

(e) вторая последовательность XTEN слита с С-концом фрагмента VWF;

(f) вторая последовательность XTEN содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью под SEQ AE144_5A (SEQ ID NO: 58);

(g) линкер a2 слит с C-концом XTEN;

(h) линкер а2 содержит аминокислотную последовательность, которая характеризуется по меньшей мере приблизительно 70%, по меньшей мере приблизительно 75%, по меньшей мере приблизительно 80%, по меньшей мере приблизительно 85%, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 96%, по меньшей мере приблизительно 97%, по меньшей мере приблизительно 98%, по меньшей мере приблизительно 99% или приблизительно 100% идентичностью последовательности с аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO: 88;

(i) вторая Fc-область слита с С-концом линкера a2; и

(j) первая Fc-область ковалентно соединена со второй Fc-областью с помощью дисульфидной связи.

[0302] В конкретных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит две полипептидные последовательности - первую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную последовательности, выбранной из FVIII-161 (SEQ ID NO: 69), FVIII-169 (SEQ ID NO: 70), FVIII-170 (SEQ ID NO: 71), FVIII-173 (SEQ ID NO: 72); FVIII-195 (SEQ ID NO: 73); FVIII-196 (SEQ ID NO: 74), FVIII199 (SEQ ID NO: 75), FVIII-201 (SEQ ID NO: 76); FVIII-203 (SEQ ID NO: 77), FVIII-204 (SEQ ID NO: 78), FVIII-205 (SEQ ID NO: 79), FVIII-266 (SEQ ID NO: 80), FVIII-267 (SEQ ID NO: 81), FVIII-268 (SEQ ID NO: 82), FVIII-269 (SEQ ID NO: 83), FVIII-271 (SEQ ID NO: 84) или FVIII-272 (SEQ ID NO: 85), и вторую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную последовательности, выбранной из VWF031 (SEQ ID NO: 86), VWF034 (SEQ ID NO: 87) или VWF-036.

[0303] В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит две полипептидные последовательности - первую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 201; и вторую полипептидную последовательность, содержащую фрагмент VWF, содержащий домен D' VWF и домен D3 VWF, и Fc-область. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит две полипептидные последовательности - первую полипептидную последовательность, содержащую полипептид FVIII и Fc-область; и вторую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 202. В определенных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит две полипептидные последовательности - первую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 201, и вторую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, на по меньшей мере приблизительно 80%, 90%, 95% или 100% идентичную аминокислотной последовательности, приведенной под SEQ ID NO: 202. В конкретных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит две полипептидные последовательности - первую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO: 201, и вторую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO: 202. В других конкретных вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению содержит две полипептидные последовательности - первую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO: 201, и вторую полипептидную последовательность, содержащую аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO: 202, где первая полипептидная последовательность и вторая полипептидная последовательность соединены друг с другом с помощью дисульфидной связи.

IV. Фармацевтические композиции

[0304] Композиции, содержащие химерный полипептид по настоящему изобретению, могут содержать подходящий фармацевтически приемлемый носитель. Например, они могут содержать вспомогательные вещества и/или вспомогательные средства, которые способствуют переработке активных соединений в препараты, предназначенные для доставки в место действия.

[0305] Фармацевтическая композиция может быть составлена для парентерального введения (т. е. внутривенного, подкожного или внутримышечного) путем болюсной инъекции. Составы для инъекций могут быть представлены в единичной лекарственной форме, например, в ампулах или в многодозовых контейнерах с добавленным консервантом. Композиции могут иметь такие формы, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных средах-носителях, и содержать средства для составления, такие как суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие средства. В качестве альтернативы активный ингредиент может быть представлен в форме порошка для разбавления подходящей средой-носителем, например, апирогенной водой.

[0306] Подходящие составы для парентерального введения также включают водные растворы активных соединений в водорастворимой форме, например, водорастворимые соли. Кроме того, можно вводить суспензии активных соединений в виде подходящих масляных инъекционных суспензий. Подходящие липофильные растворители или среды-носители включают жирные масла, например, кунжутное масло, или синтетические сложные эфиры жирных кислот, например, этилолеат или триглицериды. Водные инъекционные суспензии могут содержать вещества, которые увеличивают вязкость суспензии, в том числе, например, натрий-карбоксиметилцеллюлозу, сорбит и декстран. Суспензия также необязательно может содержать стабилизаторы. Также можно применять липосомы для инкапсулирования молекул по настоящему изобретению для доставки в клетки или интерстициальные пространства. Иллюстративными фармацевтически приемлемыми носителями являются физиологически совместимые растворители, дисперсионные среды, покрытия, антибактериальные и противогрибковые средства, изотонические средства и средства, замедляющие всасывание, вода, солевой раствор, фосфатно-солевой буферный раствор, декстроза, глицерин, этанол и т. п. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит изотонические средства, например, сахара, многоатомные спирты, такие как маннит, сорбит, или хлорид натрия. В других вариантах осуществления композиции содержат фармацевтически приемлемые вещества, такие как смачивающие средства или незначительные количества вспомогательных веществ, таких как смачивающие или эмульгирующие средства, консерванты или буферы, которые увеличивают срок годности или эффективность активных ингредиентов.

[0307] Композиции по настоящему изобретению могут быть представлены в различных формах, в том числе, например, в форме жидкости (например, инъекционных и инфузионных растворов), дисперсий, суспензий, полутвердых и твердых лекарственных форм. Предпочтительная форма зависит от способа введения и терапевтического применения.

[0308] Композиция может быть составлена в виде раствора, микроэмульсии, дисперсии, липосомы или другой упорядоченной структуры, подходящей для высокой концентрации лекарственного средства. Стерильные инъекционные растворы можно получить путем помещения активного ингредиента в требуемом количестве в соответствующий растворитель с одним ингредиентом или комбинацией ингредиентов, перечисленных выше, если это требуется, с последующей стерилизующей фильтрацией. Обычно дисперсии получают путем помещения активного ингредиента в стерильную среду-носитель, которая содержит основную дисперсионную среду и требуемые другие ингредиенты из перечисленных выше. В случае со стерильными порошками для получения стерильных инъекционных растворов предпочтительные способы получения представляют собой вакуумную сушку и сублимационную сушку, которые приводят к получению порошка активного ингредиента и любого дополнительного необходимого ингредиента из их раствора, предварительно подвергнутого стерилизующей фильтрации. Надлежащую текучесть раствора можно поддерживать, например, путем применения покрытия, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае с дисперсией и путем применения поверхностно-активных веществ. Длительное всасывание инъекционных композиций может обеспечиваться включением в композицию средств, которые замедляют всасывание, например, моностеаратных солей и желатина.

[0309] Активный ингредиент может быть составлен в составе или устройстве с контролируемым высвобождением. Примеры таких составов и устройств включают имплантаты, трансдермальные пластыри и микроинкапсулированные системы доставки. Можно применять биоразлагаемые, биосовместимые полимеры, например, этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевую кислоту, коллаген, сложные полиортоэфиры и полимолочную кислоту. Способы получения таких составов и устройств известны из уровня техники. См., например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.

[0310] Инъекционные депо-составы можно получать путем образования микроинкапсулированных матриц с лекарственным средством в биоразлагаемых полимерах, таких как сополимер лактида и гликолида. В зависимости от соотношения лекарственного средства и полимера и природы используемого полимера можно контролировать скорость высвобождения лекарственного средства. Другими иллюстративными биоразлагаемыми полимерами являются сложные полиортоэфиры и полиангидриды. Инъекционные депо-составы также можно получать путем захвата лекарственного средства в липосомы или микроэмульсии.

[0311] В композиции могут быть включены дополнительные активные соединения. В некоторых вариантах осуществления химерный полипептид по настоящему изобретению составлен с другим фактором свертывания крови или его вариантом, фрагментом, аналогом или производным. Например, фактор свертывания крови включает без ограничения фактор V, фактор VII, фактор VIII, фактор IX, фактор X, фактор XI, фактор XII, фактор XIII, протромбин, фибриноген, фактор фон Виллебранда или рекомбинантный растворимый тканевой фактор (rsTF) или активированные формы любого из предшествующих. Фактор свертывания крови в гемостатическом средстве также может включать антифибринолитические лекарственные средства, например, эпсилон-аминокапроновую кислоту, транексамовую кислоту.

[0312] Режимы введения доз могут быть скорректированы для обеспечения оптимального необходимого ответа. Например, можно вводить однократную болюсную дозу, можно вводить несколько разделенных доз на протяжении некоторого периода времени, или дозу можно пропорционально снизить или увеличить, как указывают потребности терапевтической ситуации. Преимущественным является составление композиций для парентерального применения в виде единичной лекарственной формы для удобства введения и однородности дозирования. См., например, Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co., Easton, Pa. 1980).

[0313] В дополнение к активному соединению жидкая лекарственная форма может содержать инертные ингредиенты, такие как вода, этиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла, глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбитана.

[0314] Неограничивающие примеры подходящих фармацевтических носителей также описаны в Remington's Pharmaceutical Sciences, E.W. Martin. Некоторые примеры вспомогательных веществ включают крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, моностеарат глицерина, тальк, хлорид натрия, сухое обезжиренное молоко, глицерин, пропиленгликоль, воду, этанол и т. п. Композиция также может содержать рН-буферные реагенты, а также смачивающие или эмульгирующие средства.

[0315] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит химерный полипептид и фармацевтически приемлемый носитель. Белок FVIII в химерном полипептиде имеет продленный период полужизни по сравнению с белком FVIII дикого типа или соответствующим белком FVIII без фрагмента VWF. В некоторых вариантах осуществления продленный период полужизни химерного полипептида является в по меньшей мере приблизительно 1,5 раза, по меньшей мере приблизительно 2 раза, по меньшей мере приблизительно 2,5 раза, по меньшей мере приблизительно 3 раза, по меньшей мере приблизительно 4 раза, по меньшей мере приблизительно 5 раз, по меньшей мере приблизительно 6 раз, по меньшей мере приблизительно 7 раз, по меньшей мере приблизительно 8 раз, по меньшей мере приблизительно 9 раз, по меньшей мере приблизительно 10 раз, по меньшей мере приблизительно 11 раз или по меньшей мере приблизительно 12 раз более длительным по сравнению с FVIII дикого типа. В других вариантах осуществления период полужизни фактора VIII составляет по меньшей мере приблизительно 17 часов, по меньшей мере приблизительно 18 часов, по меньшей мере приблизительно 19 часов, по меньшей мере приблизительно 20 часов, по меньшей мере приблизительно 21 час, по меньшей мере приблизительно 22 часа, по меньшей мере приблизительно 23 часа, по меньшей мере приблизительно 24 часа, по меньшей мере приблизительно 25 часов, по меньшей мере приблизительно 26 часов, по меньшей мере приблизительно 27 часов, по меньшей мере приблизительно 28 часов, по меньшей мере приблизительно 29 часов, по меньшей мере приблизительно 30 часов, по меньшей мере приблизительно 31 час, по меньшей мере приблизительно 32 часа, по меньшей мере приблизительно 33 часа, по меньшей мере приблизительно 34 часа, по меньшей мере приблизительно 35 часов, по меньшей мере приблизительно 36 часов, по меньшей мере приблизительно 48 часов, по меньшей мере приблизительно 60 часов, по меньшей мере приблизительно 72 часа, по меньшей мере приблизительно 84 часа, по меньшей мере приблизительно 96 часов или по меньшей мере приблизительно 108 часов. В некоторых вариантах осуществления период полужизни химерного полипептида продлен приблизительно в 3 раза по сравнению с FVIII дикого типа.

[0316] В некоторых вариантах осуществления композицию вводят путем парентерального введения, которое может представлять собой внутривенное или подкожное введение.

[0317] В других вариантах осуществления композицию применяют для лечения заболевания или состояния, связанного с кровотечением, у субъекта, нуждающегося в этом. Заболевание или состояние, связанное с кровотечением, выбрано из группы, состоящей из коагуляционного нарушения свертываемости крови, гемартроза, мышечного кровотечения, кровотечения из полости рта, кровоизлияния, кровоизлияния в мышцы, кровоизлияния в полости рта, травмы, черепно-мозговой травмы, желудочно-кишечного кровотечения, внутричерепного кровоизлияния, внутрибрюшного кровоизлияния, внутригрудного кровоизлияния, перелома кости, кровотечения в центральной нервной системе, кровотечения в заглоточном пространстве, кровотечения в забрюшинном пространстве, кровотечения во влагалище подвздошно-поясничной мышцы и любых их комбинаций. В еще нескольких других вариантах осуществления у субъекта запланировано проведение хирургического вмешательства. В еще нескольких других вариантах осуществления лечение проводят в режиме профилактики или по необходимости.

[0318] Теперь при наличии подробного описания настоящего изобретения таковое будет более четко понятным благодаря ссылке на следующие примеры, которые включены в данный документ только в целях иллюстрации и не предназначены для ограничения настоящего изобретения. Все патенты, публикации и статьи, упомянутые в данном документе, в явной форме и конкретным образом включены в него посредством ссылки.

ПРИМЕРЫ

Пример 1. Исследование гетеродимеров FVIII-XTEN-Fc/D'D3-XTEN-Fc, впервые проводящееся с участием людей

[0319] Заместительная терапия с использованием факторов свертывания крови является фундаментальным компонентом медицинской помощи при гемофилии. Традиционные рекомбинантные продукты FVIII (rFVIII) имеют короткий период полужизни, что требует частого введения. Значительные успехи в уходе за пациентами были достигнуты с помощью rFVIIIFc (Eloctate^®), в том числе наиболее длительный интервал между введениями доз при гемофилии А; надлежащий контроль кровотечения, в том числе профилактический, в острых, периоперационных и экстренных ситуациях; защита, выходящая за рамки контроля кровотечения, включая защиту суставов и улучшение качества жизни; и долгосрочный последовательный и хорошо изученный профиль безопасности. Однако профилактическое введение доз фактора VIII с частотой один раз в неделю или реже все еще представляет собой неудовлетворенную потребность для большинства людей с гемофилией А.

[0320] В настоящем исследовании изучаются безопасность и фармакокинетические показатели (PK) rFVIIIFc-VWF-XTEN - химерного полипептида, содержащего (i) полипептид FVIII, XTEN, вставленный в домен B полипептида FVIII, и первую Fc-область; и (ii) фрагмент VWF, вторую последовательность XTEN, линкер a2 и вторую Fc-область (фиг. 1).

[0321] План исследования

[0322] Целью настоящего исследования была оценка безопасности, переносимости и активности фактора VIII (PK) однократной дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN по сравнению с rFVIII. Популяция пациентов включала взрослых мужчин с тяжелой формой гемофилии A (уровень эндогенной активности FVIII < 1 МЕ/дл [< 1%]), ранее получавших лечение продуктами FVIII в течение по меньшей мере 150 дней воздействия и при отсутствии положительного результата теста на ингибиторы или клинических признаков ослабленного ответа на введение FVIII в анамнезе. Первичными конечными точками являлись нежелательные явления и клинические аномалии в лабораторных тестах, в том числе выработка ингибиторов. Ключевые вторичные конечные точки включали фармакокинетические параметры, в том числе без ограничения период полужизни (t1/2), клиренс (CL), площадь под кривой от 0 до бесконечности (AUC_0-∞), среднее время удержания (MRT) и постепенное восстановление (IR).

[0323] Пациентов включали в когорту с низкой дозой (7 пациентов; фиг. 2A) или в когорту с высокой дозой (9 пациентов; фиг. 2B). Каждому пациенту вводили дозу rFVIII (ADVATE^®) с последующим периодом отбора образцов для PK-анализа. После короткого периода отмывки (≥ 3 дня для когорты с низкой дозой (фиг. 2A) и ≥ 4 дня для когорты с высокой дозой (фиг. 2B)) каждому субъекту затем вводили rFVIIIFc-VWF-XTEN с последующим периодом отбора образцов для PK-анализа. Субъекты подвергались наблюдению в отношении безопасности в течение 28 дней после инъекции rFVIIIFc-VWF-XTEN, включающему сбор образцов для оценки ингибиторов через 14 и 28 дней после инъекции rFVIIIFc-VWF-XTEN. Пациенты в когорте с низкой дозой получали 25 МЕ/кг rFVIII и 25 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN. Пациенты в когорте с высокой дозой получали 65 МЕ/кг rFVIII и 65 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN.

[0324] Способы

[0325] Фармакокинетические параметры измеряли с помощью модифицированного анализа свертывания крови по активированному частичному тромбопластиновому времени (aPTT) ("одностадийного" анализа). Вкратце, активность FVIII измеряют в модифицированном анализе aPTT с использованием реагента для определения активированного PTT Dade^® Actin^® FSL (Siemens Health Care Diagnostics) на анализаторе BCS^® XP (Siemens Healthcare Diagnostics). Калибровочные кривые по 7 точкам (высокий уровень: 1,500-0,050 МЕ/мл; низкий уровень: 0,150-0,0025 МЕ/мл) получали с использованием специфического калибровочного стандарта для rFVIIIFc-VWF-XTEN. Для построения калибровочной кривой высокого уровня калибровочный стандарт rFVIIIFc-VWF-XTEN [1,000 МЕ/мл] разбавляют в буфере Tris/BSA (50 мМ, 150 мМ хлорида натрия, pH 7,4 +/- 0,2, содержащем 1% BSA). Это разбавление выполняется с помощью анализатора BCS^® XP для получения предварительно отобранных калибровочных уровней активности FVIII. Затем их тестируют в рабочем разведении 1:2, приготовленном в буфере Tris/BSA. Для построения калибровочной кривой низкого уровня калибровочный стандарт для rFVIIIFc-VWF-XTEN [1,000 МЕ/мл] разбавляют в иммуноистощенной плазме крови с дефицитом FVIII (Siemens Healthcare Diagnostics) с помощью анализатора BCS^® XP и тестируют в неразбавленном виде (при отсутствии рабочего разведения). Калибровку выполняют в двух повторностях. Кривые строят по активности FVIII в МЕ/мл (ось x) и времени свертывания крови в секундах (ось y). Для калибровочных кривых как высокого уровня, так и низкого уровня используется аппроксимация кривой методом логарифмически-линейной регрессии с линейной зависимостью.

[0326] Образцы тестируют в двух повторностях с использованием метатеста с калибровочной кривой высокого уровня (в рабочих разведениях 1:2, 1:4 и 1:8 в Tris/BSA) или метатеста с калибровочной кривой низкого уровня (в неразбавленном виде и в рабочих разведениях 1:2 и 1:4 в иммуноистощенной плазме крови с дефицитом FVIII). После получения соответствующего рабочего разведения все калибровочные стандарты, образцы от пациентов и образцы для контроля качества смешивают в соотношении 1:1 с иммуноистощенной плазмой крови с дефицитом FVIII, содержащей молекулу с активностью фактора VIII в количестве, равном 0,010 МЕ/мл или меньше, и по меньшей мере 0,400 МЕ/мл других факторов свертывания крови. После смешивания образцов с указанной плазмой крови добавляют реагент для APTT, и смесь инкубируют. После инкубирования добавляют хлорид кальция и оптическим путем измеряют время образования сгустка. Посредством алгоритма затем проверяют, находятся ли результаты для отдельных рабочих разведений в пределах +/- 15,0% от среднего значения, для определения регистрируемой активности FVIII. Для определения регистрируемой активности FVIII необходимы результаты как минимум двух метатестов в рабочих разведениях, за исключением значений, близких к нижнему пределу количественного определения (LLOQ).

[0327] Результаты: когорта с низкой дозой

[0328] Семь субъектов были включены в когорту с низкой дозой; один субъект отказался от участия по причинам, не связанным с исследованием, до получения rFVIIIFc-VWF-XTEN. Шесть субъектов получили однократную низкую дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN (25 МЕ/кг). Характеристики первых четырех субъектов, получавших лечение в когорте с низкой дозой, включали следующие: ранее получавшие лечение взрослые субъекты-мужчины с тяжелой формой гемофилии A (уровень эндогенной активности FVIII < 1 МЕ/дл [< 1%]); все субъекты относились к европеоидной расе; возраст субъектов находился в диапазоне от 19 до 60 лет, при этом средний возраст составлял 33 года; а средняя масса тела составляла 85 кг (в диапазоне от 67,2 до 100,6 кг).

[0329] У всех пациентов rFVIIIFc-VWF-XTEN обычно хорошо переносился, и в день 14 или день 28 после введения дозы ингибиторы не наблюдались.

[0330] Средняя активность FVIII после инфузии у первых шести субъектов, получавших однократную низкую дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN (25 МЕ/кг), через 5 дней составляла приблизительно 12,0%, а через 7 дней составляла приблизительно 5,3% (фиг. 3A). Средняя активность FVIII оставалась на уровне выше 1% в течение 10 дней (фиг. 3A). Фармакокинетические параметры, измеренные путем измерения активированного частичного тромбопластинового времени (aPTT), для rFVIIIFc-VWF-XTEN (25 МЕ/кг) и rFVIII (25 МЕ/кг) показаны в таблице 9. Наблюдалось, что rFVIIIFc-VWF-XTEN у субъектов-людей имеет средний период полужизни, составляющий приблизительно 37,6 часа, что более чем в 4 раза превышает средний период полужизни rFVIII (приблизительно 9,12 часа), вводимого в той же дозе.

Таблица 9. Фармакокинетические (PK) параметры для когорты с низкой дозой

PK-параметр	rFVIIIFc-VWF-XTEN, среднее геометрическое значение [диапазон] (N=6)	rFVIII, среднее геометрическое значение [диапазон] (N=7)	Соотношение средних значений [95% CI]
Период полужизни, ч.	37,61	9,12	4,13 [2,94, 5,79]
Период полужизни, ч.	[33,28-42,50]	[6,24-13,33]	P < 0,001
C _max (МЕ/дл)	70,1 [49,7-98,9]	51,80 [43,3-61,9]	1,35 [1,04, 1,77] P=0,032
AUC∞, ч. x МЕ/дл	4470	638	7,00 [5,78, 8,48]
AUC∞, ч. x МЕ/дл	[3280-6080]	[495-822]	P < 0,001
MRT, ч.	56,93	12,54	4,54 [3,64, 5,66]
MRT, ч.	[49,19-65,89]	[9,82-16,10]	P < 0,001
CL, мл/ч./кг	0,56	3,91	0,14 [0,12, 0,17]
CL, мл/ч./кг	[0,41-0,76]	[3,05-5,02]	P < 0,001
IR, МЕ/дл на МЕ/кг	2,72	2,00	1,36 [0,98, 1,89]
IR, МЕ/дл на МЕ/кг	[1,95-3,80]	[1,60-2,50]	P=0,063

[0331] Результаты: когорта с высокой дозой

[0332] Девять субъектов были включены в когорту с высокой дозой. Субъектам вводили однократную высокую дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN (65 МЕ/кг). Один субъект не мог быть подвергнут тестированию в отношении PK-параметров по причинам, не связанным с исследованием. Характеристики субъектов, получавших лечение в когорте с высокой дозой, включали следующие: ранее получавшие лечение взрослые субъекты-мужчины с тяжелой формой гемофилии A (уровень эндогенной активности FVIII < 1 МЕ/дл [< 1%]); 7 из 9 субъектов относились к европеоидной расе; возраст субъектов находился в диапазоне от 32 до 63 лет, при этом средний возраст составлял 44 года; а средняя масса тела составляла 81,1 кг (в диапазоне от 61,5 до 100,7 кг).

[0333] Средняя активность FVIII после инфузии у восьми оцениваемых субъектов, получавших однократную высокую дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN (65 МЕ/кг), через 5 дней составляла приблизительно 38,0%, а через 7 дней составляла приблизительно 17% (фиг. 3B). Средняя активность FVIII оставалась на уровне выше 1% в течение 14 дней (фиг. 3B). Фармакокинетические параметры, измеренные путем измерения активированного частичного тромбопластинового времени (aPTT), для rFVIIIFc-VWF-XTEN (65 МЕ/кг) и rFVIII (65 МЕ/кг) показаны в таблице 10. Наблюдалось, что rFVIIIFc-VWF-XTEN у субъектов-людей имеет средний период полужизни, составляющий приблизительно 42,5 часа, что более чем в 3 раза превышает средний период полужизни rFVIII (приблизительно 13 часов), вводимого в той же дозе.

Таблица 10. Фармакокинетические (PK) параметры для когорты с высокой дозой

PK-параметр	rFVIIIFc-VWF-XTEN, среднее геометрическое значение [диапазон] (N=8)	rFVIII, среднее геометрическое значение [диапазон] (N=9)	Соотношение средних значений [95% CI]
Период полужизни (ч.)	42,54 [39,72-45,56]	13,15 [10,89-15,87]	3,24 [2,76, 3,79] P < 0,001
C _max (МЕ/дл)	161 [142-183]	138 [117-162]	1,17 [1,09-1,25] P < 0,001
AUC _0-inf (ч. x МЕ/дл)	12,800 [11,100-14,900]	1960 [1670-2310]	6,54 [5,89-7,27] P < 0,001
MRT (ч.)	67,66 [62,59-73,14]	15,66 [14,06-17,45]	4,32 [3,96-4,72] P < 0,001
CL (мл/ч./кг)	0,51 [0,44-0,59]	3,31 [2,81-3,88]	0,15 [0,14-0,17 P < 0,001
IR (МЕ/дл на МЕ/кг)	2,48 [2,18-2,82]	2,11 [1,79-2,49]	1,18 [1,10-1,26] P < 0,001

[0334] Выводы

[0335] rFVIIIFc-VWF-XTEN хорошо переносился всеми пациентами с тяжелой формой гемофилии А, которые получали лечение с помощью однократной низкой дозы (25 МЕ/кг) либо однократной высокой дозы (65 МЕ/кг). Ни у одного пациента не вырабатывался ингибитор FVIII. rFVIIIFc-VWF-XTEN продемонстрировал период полужизни, который был в от 3 раз до 4 раз выше, чем у rFVIII, что свидетельствует о прорыве в направлении достижения верхнего предела периода полужизни, налагаемого VWF. Устойчивая высокая активность фактора VIII может обеспечить улучшенную защиту от всех типов кровотечений.

Пример 2. Исследование с повторными дозами гетеродимеров FVIII-XTEN-Fc/D'D3-XTEN-Fc

[0336] rFVIIIFc-VWF-XTEN хорошо переносился и обеспечивал устойчивые уровни FVIII в когорте субъектов, получивших однократную дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN. (Пример 1). В настоящем исследовании будут оцениваться безопасность и переносимость, а также определяться фармакокинетические характеристики rFVIIIFc-VWF-XTEN при повторном введении доз (фиг. 1).

[0337] План исследования

[0338] В общей сложности 4 еженедельные дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN будут введены взрослым пациентам-мужчинам с тяжелой формой гемофилии A, которые ранее получали лечение посредством лечения с помощью FVIII и получали такое лечение с помощью FVIII в течение по меньшей мере 150 дней воздействия. Будут включены две когорты, каждая из которых состоит из примерно десяти взрослых мужчин в возрасте от 18 до 65 лет. Каждый субъект в когорте 1 получит в общей сложности четыре еженедельные дозы по 50 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN в дни 1, 8, 15 и 22. Каждый субъект в когорте 2 получит в общей сложности четыре еженедельные дозы по 65 МЕ/кг rFVIIIFc-VWF-XTEN в дни 1, 8, 15 и 22.

[0339] Схематическое изображение плана клинического исследования изображено на фиг. 4. Образец для фармакокинетического анализа до введения дозы будет взят в день 1. Кроме того, после введения дозы в дни 1 и 22 будут взяты несколько образцов для PK-анализа, и в дни 8, 15 и 22 перед введением дозы будут взяты образцы с остаточным уровнем (168 ч.). Субъекты будут проходить период наблюдения в отношении безопасности в течение 28 дней после последней дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN, в том числе подвергаться оценке ингибиторов через 14 и 28 дней после последней дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN. Для субъектов, завершивших прием всех четырех еженедельных доз rFVIIIFc-VWF-XTEN, период наблюдения в отношении безопасности заканчивается визитом окончания исследования (EOS) в день 50 (+3 дня). Для субъектов, которые досрочно прекращают лечение, период наблюдения в отношении безопасности заканчивается визитом досрочного прекращения исследования (ЕТ) через 28 дней после последней дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN.

[0340] Первичной целью исследования является оценка безопасности и переносимости в общей сложности четырех еженедельных внутривенно вводимых (IV) доз rFVIIIFc-VWF-XTEN. Первичными конечными точками являются возникновение нежелательных явлений (AE) и возникновение клинически значимых аномалий в лабораторных тестах, в том числе выработка ингибиторов (нейтрализующих антител, направленных против FVIII), что определяется с помощью анализа Бетезда в модификации Неймегена (Verbruggen et al, Thrombosis and Haemostasis, 73: 247-251 (1995)).

[0341] Вторичной целью исследования является определение фармакокинетических характеристик rFVIIIFc-VWF-XTEN после в общей сложности четырех еженедельных IV доз, при этом активность FVIII определяется с помощью одностадийного анализа свертывания крови по активированному частичному тромбопластиновому времени (aPTT), как описано в примере 1. Вторичными конечными точками являются фармакокинетические показатели, оцениваемые посредством оценки параметров, включающих без ограничения максимальную активность (Cmax), период полужизни (t½), общий клиренс в равновесном состоянии (CLss), индекс накопления (AI), площадь под кривой зависимости активности от времени от часа 0 в течение интервала между введениями доз (AUC0-tau), объем распределения в равновесном состоянии (Vss), среднее время удержания (MRT), IR, наиболее низкую (остаточную) концентрацию, которой лекарственное средство достигает до введения следующей дозы (Ctrough), и время до достижения активности FVIII, на 1% превышающей исходный уровень.

[0342] Поисковой целью исследования является определение фармакокинетических характеристик rFVIIIFc-VWF-XTEN после в общей сложности четырех еженедельных IV доз, при этом активность FVIII определяется с помощью двухстадийного хромогенного анализа коагуляции. Поисковыми конечными точками являются PK-показатели, оцениваемые посредством оценки параметров, включающих без ограничения Cmax, t½, CLss, AI, AUC0-tau, Vss, MRT, IR, Ctrough и время до достижения активности FVIII, на 1% превышающей исходный уровень.

[0343] Способы

[0344] Активность FVIII определяли с помощью модифицированного анализа свертывания крови по активированному частичному тромбопластиновому времени (aPTT) ("одностадийного" анализа), как подробно описано выше в примере 1.

[0345] Посредством двухстадийного хромогенного анализа коагуляции измеряют активность FVIII с применением анализа BIOPHEN FVIII:C (Hyphen Biomed 221402-RUO) на анализаторе BCS^® XP (Siemens Healthcare Diagnostics). Вкратце, фосфолипиды, кальций и FVIII:C, активированный тромбином, образуют ферментный комплекс в присутствии постоянного количества фактора IXa. Этот ферментный комплекс, в свою очередь, активирует фактор X (FX), который предоставляется в постоянной концентрации и в избытке, до фактора Xa (FXa). Активация FX до FXa напрямую связана с количеством FVIII:C, которое является лимитирующим фактором в анализе в присутствии постоянного и избыточного количества фактора IXa. Затем активность образованного FXa измеряют с использованием специфического хромогенного субстрата FXa, представляющего собой SXa-11 (Hyphen Biomed). Фактор Ха расщепляет SXa-11 и высвобождает паранитроанилин (pNA). Количество высвободившегося pNA прямо пропорционально количеству образованного FXa. Существует прямая зависимость между количеством FVIII:C в образце, количеством образованного FXa и количеством высвободившегося pNA. Высвобождение pNA определяется по проявлению окрашивания при длине волны 405 нм.

[0346] Калибровочные кривые по 8 точкам (высокий уровень: 1,500-0,150 МЕ/мл; низкий уровень: 0,200-0,008 МЕ/мл) получали с использованием специфического калибровочного стандарта для rFVIIIFc-VWF-XTEN. Для построения калибровочной кривой высокого уровня rFVIIIFc-VWF-XTEN при 1 МЕ/мл разбавляют в буфере Tris/BSA для получения предварительно отобранных калибровочных уровней активности FVIII. Это разбавление выполняется с помощью анализатора BCS^® XP. Предварительно отобранные калибровочные уровни активности FVIII тестируют в рабочем разведении 1:4 в буфере Tris/BSA. Для построения калибровочной кривой низкого уровня rFVIIIFc-VWF-XTEN в концентрации 1 МЕ/мл предварительно разбавляют 1:4 в плазме крови с врожденным дефицитом FVIII (Helena Laboratories), а затем дополнительно разбавляют с помощью анализатора BCS ^® XP в буфере Tris/BSA для получения предварительно отобранных калибровочных уровней активности FVIII, которые тестируют при отсутствии дополнительного разбавления в реакционной установке.

[0347] Калибровку выполняют в двух повторностях. Кривые строят по активности FVIII в МЕ/мл (ось x) и изменению оптической плотности/мин (ось y). Для калибровочной кривой высокого уровня используется аппроксимация кривой методом двойной логарифмической регрессии с линейной зависимостью. Для калибровочной кривой низкого уровня используется аппроксимация кривой методом двойной линейной регрессии с линейной зависимостью. Образцы тестируют в двух повторностях по калибровочной кривой высокого уровня в рабочем разведении 1:4 либо по калибровочной кривой низкого уровня в разведении 1:4 в плазме крови с врожденным дефицитом FVIII или в неразбавленном виде (при отсутствии рабочего разведения).

[0348] Результаты

[0349] Демографические данные и характеристики исходного уровня

[0350] 10 взрослых субъектов-мужчин в возрасте от 18 до 65 лет (включительно) были включены в когорту 1 (50 МЕ/кг), и 5 взрослых субъектов-мужчин в возрасте от 18 до 65 лет (включительно) были включены в когорту 2 (65 МЕ/кг). Все 10 субъектов в дозовой когорте 50 МЕ/кг получили 4 дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN. Трое из 5 субъектов, включенных в дозовую когорту 65 МЕ/кг, получили по меньшей мере одну дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN. Все 15 субъектов, включенных в исследование, были из одного исследовательского центра в Софии, Болгария. Из 15 субъектов, включенных в исследование, 13 получили по меньшей мере одну дозу BIVV001 и были включены в сводный обзор демографических данных и характеристик исходного уровня. Все субъекты были мужчинами. Медианный возраст составлял 35 лет (диапазон: от 25 до 55 лет), и все субъекты были белыми. Медианная масса тела составляла 86,7 кг (диапазон: от 51,0 до 130,9 кг), а медианный индекс массы тела составлял 25,9 кг/м² (диапазон: от 16,4 до 40,9 кг/м²).

[0351] Анализ безопасности

[0352] Для промежуточного анализа в выборку для анализа безопасности были включены в общей сложности 13 субъектов (n=10 из когорты 50 МЕ/кг и n=3 из когорты 65 МЕ/кг). Все анализы безопасности проводились на основе выборки для анализа безопасности и включали всех субъектов, получивших по меньшей мере одну дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN.

[0353] AE, возникшее после начала лечения (TEAE), определяется как любое нежелательное явление, которое началось во время или после первого введения rFVIIIFc-VWF-XTEN и в течение 28 дней после последнего введения rFVIIIFc-VWF-XTEN. Предполагается, что AE с отсутствующими датами начала возникли после начала лечения, если только дата прекращения не была раньше даты введения дозы. В целом, AE были обобщены по встречаемости у субъектов по когортам и в целом, а также представлены в перечне данных по когортам и субъектам. Серьезные нежелательные явления, возникшие после начала лечения (TESAE), также оценивались для каждого субъекта, но ни одно из них не наблюдалось у субъектов, получавших лечение (таблица 11).

[0354] Из 15 субъектов, включенных в исследование, 13 получили по меньшей мере одну дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN и были включены в анализ безопасности. У 8 из 13 субъектов (61,5%) сообщалось о 19 TEAE (таблица 11). Не сообщалось о серьезных или связанных TEAE, и ни один субъект не прекратил исследование из-за TEAE. Наиболее частыми TEAE были артралгия, инфекция верхних дыхательных путей, головная боль и ринит (в каждом случае у 2/13 пациентов; 15,4%). Не была выявлена выработка ингибиторов FVIII, и не было сообщений о серьезной гиперчувствительности или анафилаксии. На каждом уровне обобщения у субъектов субъекта подсчитывают один раз, если он сообщил об одном или нескольких явлениях. Процентные значения, указанные в таблице 11, приводятся на основании количества субъектов, получивших по меньшей мере одну дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN в каждой когорте и в целом.

Таблица 11. Сводный обзор нежелательных явлений, возникших после начала лечения (TEAE), в выборке для анализа безопасности

	rFVIIIFc-VWF-XTEN, 50 МЕ/кг	rFVIIIFc-VWF-XTEN, 65 МЕ/кг	Большой хирургический период (N=0)	rFVIIIFc-VWF-XTEN, общее количество получивших лечение
Количество субъектов, получавших лечение с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN	10	3	0	13

Общее количество TEAE	17	2	0	19
Субъекты с по меньшей мере одним TEAE	7 (70,0%)	1 (33,3%)	0	8 (61,5%)
Субъекты с по меньшей мере одним связанным TEAE	0	0	0	0
Субъекты, которые прекратили исследование из-за TEAE	0	0	0	0

Общее количество TESAE	0	0	0	0
Субъекты с по меньшей мере одним TESAE	0	0	0	0
Субъекты с по меньшей мере одним связанным TESAE	0	0	0	0

[0355] Анализ иммуногенности

[0356] Всех субъектов оценивали в отношении выработки ингибиторов и антител к rFVIIIFc-VWF-XTEN при скрининге, в день 1, день 8, день 15, день 22, день 36 и день 50 (во время визита EOS или ET). Тестирование на ингибиторы проводилось центральной лабораторией с использованием анализа Бетезда в модификации Неймегена. Если выдаваемый результат анализа Бетезда в модификации Неймегена был ≥ 0,6 БЕ/мл, то собирали отдельный образец, и его тестировали для подтверждения выработки ингибиторов в течение 2-4 недель. Тестирование на потенциальное образование антител проводили в центральной лаборатории с использованием валидированного анализа rFVIIIFc-VWF-XTEN-специфичных антител к лекарственному средству (ADA). Для подтвержденных положительных образцов определяли дополнительные характеристики относительно антител, специфичных к FVIII, D'D3 или XTEN. Количество и процентную долю субъектов с положительным результатом тестирования в отношении выработки ингибиторов, а также количество и процентную долю субъектов с положительным результатом тестирования в отношении антител к rFVIIIFc-VWF-XTEN обобщали по когортам с использованием выборки для анализа безопасности.

[0357] После введения rFVIIIFc-VWF-XTEN ни у одного субъекта не проявлялся положительный результат анализа на антитела к лекарственному средству.

[0358] Фармакокинетический анализ и результаты

[0359] В целом, данные о безопасности и PK-параметрах обобщали с использованием стандартных показателей сводной статистики для непрерывных и категориальных данных. Данные обобщали по когортам. Непрерывные переменные обобщали с использованием показателей описательной статистики, включающих количество непропущенных значений (n), среднее значение, стандартное отклонение (SD), медиану, минимум и максимум. Фармакокинетические параметры также обобщали с использованием среднего геометрического значения и процентного коэффициента вариации (% CV). Категориальные переменные обобщали по количеству и процентным значениям.

[0360] Все PK-анализы проводили на основе выборки для PK-анализов (PKAS) и включали 9 субъектов из дозовой когорты 50 МЕ/кг, у которых были надлежащим образом собраны образцы крови после введения rFVIIIFc-VWF-XTEN.

[0361] Активность FVIII

[0362] Для определения фармакокинетических характеристик rFVIIIFc-VWF-XTEN после в общей сложности четырех еженедельных IV доз активность FVIII определяли у каждого субъекта в заранее определенные моменты времени. Активность FVIII обобщали по когортам, запланированным визитам для PK-анализа и моментам времени как для одностадийного анализа свертывания крови (по активированному частичному тромбопластиновому времени [aPTT]), так и для хромогенного анализа коагуляции. Профили активности FVIII в зависимости от времени строили как в исходном, так и в логарифмическом масштабе для обоих анализов активности FVIII. Индивидуальная активность FVIII была указана для каждого субъекта по когортам, запланированным визитам для PK-анализа и моментам времени для обоих анализов активности FVIII. Результаты относительно активности FVIII согласно одностадийному анализу [aPTT] представлены в таблице 12. Результаты относительно активности FVIII согласно хромогенному анализу представлены в таблице 13.

[0363] Вкратце, после введения дозы в день 1 средние значения активности FVIII согласно одностадийному и хромогенному анализам через 72 ч. составляли 45,53% и 29,37%, через 120 ч. составляли 21,56% и 13,49%, а через 168 ч. составляли 7,91% и 5,97% соответственно. После введения дозы в день 22 средние значения активности FVIII согласно одностадийному и хромогенному анализам через 72 ч. составляли 46,28% и 30,46%, через 120 ч. составляли 22,30% и 14,48%, а через 168 ч. составляли 9,83% и 6,74% соответственно. Обычно для всех пациентов, моментов времени и для обоих анализов Ctrough для rFVIIIFc-VWF-XTEN при 50 МЕ/кг QW в этом промежуточном анализе находилась в диапазоне 7-10%.

[0364] PK-параметры

[0365] Индивидуальные оценки PK-параметров были перечислены для каждого субъекта и обобщены описательно по когортам, запланированным визитам для PK-анализа и моментам времени для обоих анализов активности FVIII.

[0366] Среднее геометрическое значение периода полувыведения (t1/2) для всех субъектов, получавших rFVIIIFc-VWF-XTEN в дозе 50 МЕ/кг QW в этом промежуточном анализе, составляло 41,24 часа согласно одностадийному анализу (таблица 16B) и 43,87 часа согласно хромогенному анализу (таблица 17B).

[0367] После введения дозы в день 1 среднее геометрическое значение максимальной активности FVIII (C_max) составляло 113 МЕ/дл в одностадийном анализе (таблица 14) и 108 МЕ/дл в хромогенном анализе (таблица 15). После введения дозы в день 22 среднее геометрическое значение активности FVIII в равновесном состоянии (C_maxss) составляло 127 МЕ/дл согласно одностадийному анализу (таблица 16A) и 115 МЕ/дл согласно хромогенному анализу (таблица 17A).

[0368] После введения дозы в день 1 среднее геометрическое значение совокупной активности FVIII (AUC_0-tau) составляло 7650 ч.*МЕ/дл согласно одностадийному анализу (таблица 14) и 5630 ч.*МЕ/дл согласно хромогенному анализу (таблица 15). После введения дозы в день 22 среднее геометрическое значение AUC_0-tau составляло 8270 ч.*МЕ/дл согласно одностадийному анализу (таблица 16А) и 5880 ч.*МЕ/дл согласно хромогенному анализу (таблица 17А).

[0369] Данные о C_max и AUC_0-tau в день 1 и 22 введения доз указывали на минимальное накопление, что подтверждается индексом накопления (AI), составляющим 1,07 (одностадийный анализ, таблица 16B) и 1,08 (хромогенный анализ, таблица 17B). Для всех данных о PK-параметрах, представленных в таблицах 12-17, значения ниже предела количественного определения (BLQ) обрабатывались как 0 для целей анализа. При необходимости для расчета PK-параметров, поскольку время окончания инфузии не было зафиксировано, продолжительность инфузии была условно рассчитана как 8 минут для каждого субъекта в соответствии с руководством по введению в документе "Указания по обращению и введению" исследования.

Таблица 12. Сводный обзор уровней активности FVIII с поправкой на исходный уровень (МЕ/дл) согласно одностадийному анализу свертывания крови по aPTT: выборка для PK-анализа (уровень дозы: 50 МЕ/кг)

День введения дозы	Момент времени	n	Среднее значение (SD)	Медиана	Ср. геом.	% CV	Мин., макс.
День 1	До инъекции	9	0,00 (0,000)	0,00	0,00	--------	0,0, 0,0
	30 минут после SOI	9	113,17 (20,214)	118,10	111,51	17,862	82,0, 140,2
	3 часа после SOI	9	109,07 (19,243)	109,90	107,49	17,643	77,4, 135,5
	24 часа после SOI	9	91,04 (15,231)	92,80	89,88	16,730	68,9, 115,8
	48 часов после SOI	9	66,38 (12,231)	65,90	65,30	18,426	46,7, 80,3
	72 часа после SOI	9	45,53 (6,742)	45,60	45,08	14,807	36,7, 53,9
	120 часов после SOI	9	21,56 (4,473)	22,20	21,11	20,750	14,2, 27,1

День 8	До инъекции	9	7,91 (2,869)	7,40	7,48	36,265	4,0, 13,1

День 15	До инъекции	9	8,94 (3,322)	7,80	8,34	37,140	3,9, 13,5

День 22	До инъекции	9	9,91 (2,838)	11,61	9,49	28,633	5,0, 12,9
	30 минут после SOI	9	132,77 (31,741)	131,80	129,56	23,907	96,0, 190,7
	3 часа после SOI	9	120,94 (22,168)	126,60	119,03	18,329	85,2, 152,0
	24 часа после SOI	9	103,79 (18,513)	110,20	102,21	17,838	74,0, 126,3
	48 часов после SOI	9	69,89 (12,812)	68,10	68,84	18,332	49,8, 91,7
	72 часа после SOI	9	46,28 (7,720)	47,90	45,68	16,682	33,4, 58,3
	120 часов после SOI	9	22,30 (4,979)	21,70	21,77	22,329	13,7, 29,8
	168 часов после SOI	9	9,83 (3,847)	9,60	9,16	39,120	4,9, 15,5
	240 часов после SOI	9	2,84 (0,999)	2,80	2,68	35,117	1,4, 4,4
	336 часов после SOI	9	1,28 (2,651)	0,00	0,00	207,494	0,0, 8,2

Сокращения: SD=стандартное отклонение, ср. геом. = среднее геометрическое значение, % CV=процентный коэффициент вариации, мин. = минимальное значение, макс. = максимальное значение, SOI=начало инъекции

Таблица 13. Сводный обзор уровней активности FVIII с поправкой на исходный уровень (МЕ/дл) согласно хромогенному анализу: выборка для PK-анализа (уровень дозы: 50 МЕ/кг)

День введения дозы	Момент времени	n	Среднее значение (SD)	Медиана	Ср. геом.	% CV	Мин., макс.
День 1	До инъекции	9	0,00 (0,000)	0,00	0,00	---------	0,0, 0,0
	30 минут после SOI	9	108,94 (15,126)	113,00	107,99	13,884	87,4, 129,9
	3 часа после SOI	9	101,86 (13,782)	102,50	100,99	13,531	79,1, 118,3
	24 часа после SOI	9	71,68 (14,654)	73,50	70,24	20,445	47,8, 93,5
	48 часов после SOI	9	43,84 (7,086)	43,40	43,32	16,163	32,5, 54,0
	72 часа после SOI	9	29,37 (5,319)	30,10	28,93	18,112	22,3, 37,2
	120 часов после SOI	9	13,49 (2,680)	13,80	13,24	19,870	9,4, 17,2

День 8	До инъекции	9	5,97 (1,764)	6,20	5,74	29,568	3,6, 9,4

День 15	До инъекции	9	6,93 (1,736)	6,70	6,74	25,044	4,8, 10,0

День 22	До инъекции	9	7,13 (1,817)	7,50	6,93	25,466	5,0, 10,4
	30 минут после SOI	9	113,58 (14,920)	113,25	112,72	13,137	91,3, 137,6
	3 часа после SOI	9	109,08 (16,394)	112,50	107,96	15,029	85,4, 132,6
	24 часа после SOI	9	72,13 (14,985)	71,40	70,78	20,774	56,6, 95,8
	48 часов после SOI	9	45,23 (4,907)	46,10	44,99	10,847	37,4, 52,3
	72 часа после SOI	9	30,46 (5,247)	31,20	30,04	17,230	21,4, 39,6
	120 часов после SOI	9	14,48 (2,862)	13,70	14,23	19,769	10,5, 18,7
	168 часов после SOI	9	6,74 (1,911)	6,20	6,51	28,328	4,4, 9,7
	240 часов после SOI	9	2,20 (1,025)	2,20	0,00	46,577	0,0, 3,7
	336 часов после SOI	9	0,46 (1,021)	0,00	0,00	224,158	0,0, 3,0

Таблица 14. Сводный обзор фармакокинетических параметров активности FVIII с поправкой на исходный уровень согласно одностадийному анализу свертывания крови по aPTT после введения дозы в день 1: выборка для PK-анализа

№ субъекта	Фактическая доза (МЕ/кг)	CMAX (МЕ/дл)	TMAX (ч.)	AUC0-tau *(ч.МЕ/дл)**	Нормализованная по дозе AUC0-tau *(ч.кгМЕ/дл/МЕ)*	IVR (%)	IR (МЕ/дл на МЕ/кг)
Когорта 1 (50 МЕ/кг): введение дозы BIVV001 в день 1
170-001	50,0	91,7	3,13	7940	159	52,5	1,83
170-002	49,9	140	0,50	8310	166	97,4	2,81
170-003	50,2	82,0	0,50	6000	119	53,1	1,63
170-004	50,1	131	3,00	9300	186	95,9	2,61
170-006	50,0	139	0,50	7960	159	89,4	2,78
170-007	49,8	109	0,50	7480	150	71,1	2,19
170-009	50,0	121	2,85	8170	163	85	2,42
170-010	50,2	99,1	0,50	5750	115	61,3	1,97
170-011	49,8	118	0,50	8740	176	64,2	2,37

n	9	9	9	9	9	9	9
Среднее значение	50,00	115	1,33	7740	155	74,4	2,29
Медиана	50,00	118	0,5	7960	159	71,1	2,37
Станд. отклон.	0,150	20,7	1,25	1180	23,8	17,9	0,42
% CV	0	18	94	15	15	24	18
Ср. геом.	50,00	113	0,91	7650	153	72,5	2,26
(95% CI)	(49,88, 50,12)	(97,6, 130)	(0,46, 1,81)	(6750, 8670)	(135, 174)	(60,1, 87,5)	(1,95, 2,61)
Минимум	49,8	82,0	0,50	5750	115	52,5	1,63
Максимум	50,2	140	3,13	9300	186	97,4	2,81

Сокращения: станд. отклон. = стандартное отклонение, ср. геом. = среднее геометрическое значение, % CV=процентный коэффициент вариации, CMAX=максимальная концентрация в равновесном состоянии, TMAX=время достижения максимальной концентрации, CMAXSS=максимальная концентрация в равновесном состоянии, IVR=восстановление in vivo, AUC0-inf=площадь под кривой зависимости активности от времени от момента времени 0 до бесконечности, AUC0-tau=площадь под кривой зависимости активности от времени от часа 0 в течение интервала между введениями доз, MRTINF=среднее время удержания, экстраполированное на бесконечность, AI=индекс накопления, IR=постепенное восстановление, Ctrough=наиболее низкая концентрация, которой лекарственное средство достигает до введения следующей дозы, Cavg=средняя концентрация после достижения равновесного состояния, t1/2=период полувыведения, CLss=клиренс в равновесном состоянии, Vss=объем распределения в равновесном состоянии.

Таблица 15. Сводный обзор фармакокинетических параметров активности FVIII с поправкой на исходный уровень согласно хромогенному анализу в день 1: выборка для PK-анализа

№ субъекта	Фактическая доза (МЕ/кг)	CMAX (МЕ/дл)	TMAX (ч.)	AUC0-tau *(ч.МЕ/дл)**	Нормализованная по дозе AUC0-tau *(ч.кгМЕ/дл/МЕ)*	IVR (%)	IR (МЕ/дл на МЕ/кг)
Когорта 1 (50 МЕ/кг): введение дозы BIVV001 в день 1
170-001	50	90,8	0,63	5850	117	52	1,82
170-002	49,9	130	0,5	6160	123	90,2	2,6
170-003	50,2	87,4	0,5	4290	85,4	56,6	1,74
170-004	50,1	124	0,5	7030	140	90,5	2,47
170-006	50	117	0,5	5530	111	74,9	2,33
170-007	49,8	105	0,5	5580	112	68,3	2,1
170-009	50	119	0,5	6500	130	84	2,39
170-010	50,2	95,4	0,5	4360	86,9	59	1,9
170-011	49,8	113	0,5	5970	120	61,4	2,27

n	9	9	9	9	9	9	9
Среднее значение	50	109	0,51	5700	114	70,8	2,18
Медиана	50	113	0,5	5850	117	68,3	2,27
Станд. отклон.	0,15	15,1	0,04	905	18,2	14,8	0,3
% CV	0	14	9	16	16	21	14
Ср. геом.	50	108	0,51	5630	113	69,4	2,16
(95% CI)	(49,88, 50,12)	(96,8, 120)	(0,48, 0,55)	(4950, 6400)	(98,9, 128)	(59,1, 81,5)	(1,93, 2,41)
Минимум	49,8	87,4	0,5	4290	85,4	52	1,74
Максимум	50,2	130	0,63	7030	140	90,5	2,6

Таблица 16A. Сводный обзор фармакокинетических параметров активности FVIII с поправкой на исходный уровень согласно одностадийному анализу свертывания крови по aPTT в день 22: выборка для PK-анализа (часть 1)

№ субъекта	Фактическая доза (МЕ/кг)	CMAX SS (МЕ/дл)	AUC0-inf *(ч.МЕ/дл)**	Нормализованная по дозе AUC0-inf *(ч.кгМЕ/дл/МЕ)*	AUC0-tau *(ч.МЕ/дл)**	Нормализованная по дозе AUC0-tau *(ч.кгМЕ/дл/МЕ)*
Когорта 1 (50 МЕ/кг): введение дозы BIVV001 в день 22
170-001	50,1	106	9230	184	8240	165
170-002	49,9	135	8690	174	8310	167
170-003	50	104	7520	150	6950	139
170-004	50	143	11000	219	10100	201
170-006	50	165	9480	190	9210	184
170-007	49,9	132	9300	186	8550	171
170-009	49,8	154	8980	180	8580	172
170-010	49,8	96	6130	123	5810	117
170-011	49,9	129	10200	205	9560	192

n	9 9	9	9	9	9	9
Среднее значение	49,93	129	8940	179	8370	168
Медиана	49,9	132	9230	184	8550	171
Станд. отклон.	0,1	23,2	1420	28,4	1310	26,1
% CV	0	18	16	16	16	16
Ср. геом.	49,93	127	8830	177	8270	166
(95% CI)	(49,86, 50,01)	(110, 147)	(7740, 10100)	(155, 202)	(7260, 9410)	(145, 188)
Минимум	49,8	96	6130	123	5810	117
Максимум	50,1	165	11000	219	10100	201

Таблица 16B. Сводный обзор фармакокинетических параметров активности FVIII с поправкой на исходный уровень согласно одностадийному анализу свертывания крови по aPTT в день 22: выборка для PK-анализа (часть 2)

№ субъекта	t1/2 (ч.)	MRTINF (ч.)	CLss (мл/ч./кг)	Vss (мл/кг)	AI	Ctrough (МЕ/дл)	Cavg (МЕ/дл)
Когорта 1 (50 МЕ/кг): введение дозы BIVV001 в день 22
170-001	50,05	78,56	0,61	47,8	1,11	15,2	49,1
170-002	36,86	57,13	0,6	34,3	1,04	7	49,5
170-003	43,86	66,35	0,72	47,8	1,08	9,6	41,4
170-004	45,45	69,54	0,5	34,5	1,08	15,5	60
170-006	34,21	49,79	0,54	27	1,03	4,9	54,8
170-007	48,87	67,08	0,58	39,1	1,1	11,5	50,9
170-009	34,63	56,19	0,58	32,6	1,04	7,8	51,1
170-010	38,29	58,71	0,86	50,3	1,05	5,8	34,6
170-011	42,34	63,41	0,52	33,1	1,07	11,2	56,9

n	9	9	9	9	9	9	9
Среднее значение	41,62	62,97	0,61	38,5	1,07	9,83	49,8
Медиана	42,34	63,41	0,58	34,5	1,07	9,6	50,9
Станд. отклон.	5,93	8,57	0,11	8,21	0,03	3,85	7,79
% CV	14	14	18	21	3	39	16
Ср. геом.	41,24	62,46	0,6	37,7	1,07	9,16	49,2
(95% CI)	(36,95, 46,04)	(56,27, 69,33)	(0,531, 0,688)	(32,0, 44,4)	(1,05, 1,09)	(6,70, 12,5)	(43,2, 56,0)
Минимум	34,21	49,79	0,5	27	1,03	4,9	34,6
Максимум	50,05	78,56	0,86	50,3	1,11	15,5	60

Таблица 17A. Сводный обзор фармакокинетических параметров активности FVIII с поправкой на исходный уровень согласно хромогенному анализу в день 22: выборка для PK-анализа (часть 1)

№ субъекта	Фактическая доза (МЕ/кг)	CMAX SS (МЕ/дл)	AUC0-inf *(ч.МЕ/дл)**	Нормализованная по дозе AUC0-inf *(ч.кгМЕ/дл/МЕ)*	AUC0-tau *(ч.МЕ/дл)**	Нормализованная по дозе AUC0-tau *(ч.кгМЕ/дл/МЕ)*
Когорта 1 (50 МЕ/кг): введение дозы BIVV001 в день 22
170-001	50,1	103	6560	131	5810	116
170-002	49,9	124	6830	137	6430	129
170-003	50,0	91,3	5210	104	4780	95,5
170-004	50,0	126	7050	141	6410	128
170-006	50,0	138	6520	130	6300	126
170-007	49,9	117	6460	129	5990	120
170-009	49,8	123	6620	133	6290	126
170-010	49,8	103	5080	102	4800	96,5
170-011	49,9	113	6910	138	6450	129

n	9	9	9	9	9	9
Среднее значение	49,93	115	6360	127	5920	119
Медиана	49,9	117	6560	131	6290	126
Станд. отклон.	0,100	14,5	718	14,3	674	13,5
% CV	0	13	11	11	11	11
Ср. геом.	49,93	115	6320	127	5880	118
(95% CI)	(49,86, 50,01)	(104, 126)	(5760, 6940)	(115, 139)	(5360, 6460)	(107, 129)
Минимум	49,8	91,3	5080	102	4780	95,5

Таблица 17B. Сводный обзор фармакокинетических параметров активности FVIII с поправкой на исходный уровень согласно хромогенному анализу в день 22: выборка для PK-анализа (часть 2)

№ субъекта	t1/2 (ч.)	MRTINF (ч.)	CLss (мл/ч./кг)	Vss (мл/кг)	AI	Ctrough (МЕ/дл)	Cavg (МЕ/дл)
Когорта 1 (50 МЕ/кг): введение дозы BIVV001 в день 22
170-001	53,31	76,94	0,86	66,3	1,13	9,6	34,6
170-002	44,73	55,57	0,78	43,1	1,08	6	38,3
170-003	48,29	64,39	1,05	67,4	1,1	6,2	28,4
170-004	46,03	71,12	0,78	55,5	1,09	9,7	38,2
170-006	35,59	47,89	0,79	38	1,04	4,4	37,5
170-007	45,35	62,51	0,83	52	1,08	7	35,7
170-009	40,09	54,93	0,79	43,5	1,06	5,5	37,4
170-010	40,2	56,26	1,04	58,3	1,06	4,8	28,6
170-011	43,61	60,71	0,77	47	1,07	7,5	38,4

n	9	9	9	9	9	9	9
Среднее значение	44,13	61,15	0,85	52,4	1,08	6,74	35,2
Медиана	44,73	60,71	0,79	52	1,08	6,2	37,4
Станд. отклон.	5,15	8,88	0,11	10,4	0,03	1,91	4,01
% CV	12	15	13	20	2	28	11
Ср. геом.	43,87	60,59	0,85	51,4	1,08	6,51	35
(95% CI)	(40,08, 48,01)	(54,25, 67,67)	(0,773, 0,932)	(44,1, 60,0)	(1,06, 1,10)	(5,26, 8,07)	(31,9, 38,4)
Минимум	35,59	47,89	0,77	38	1,04	4,4	28,4
Максимум	53,31	76,94	1,05	67,4	1,13	9,7	38,4

[0370] Выводы

[0371] В соответствии с результатами, наблюдаемыми в исследовании с однократной дозой (пример 1), еженедельное введение доз rFVIIIFc-VWF-XTEN в целом хорошо переносилось, и ингибиторы не выявлялись в течение 28 дней после последнего введения rFVIIIFc-VWF-XTEN. rFVIIIFc-VWF-XTEN в дозе 50 МЕ/кг продемонстрировал средний период полувыведения (t1/2), составляющий 41,24 и 43,87 часа в одностадийном и хромогенном анализах соответственно. Эти промежуточные результаты демонстрируют, что увеличенный период полужизни, наблюдаемый при однократном введении дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN, сохраняется при повторном введении доз QW, что убедительно свидетельствует о том, что преимущества rFVIIIFc-VWF-XTEN могут быть реализованы у пациентов с гемофилией A, получающих лечение в соответствии с профилактической схемой введения доз FVIII.

Пример 3. Исследование rFVIIIFc-VWF-XTEN фазы 3 у пациентов с тяжелой формой гемофилии A, ранее получавших лечение

[0372] В настоящем исследовании будут оцениваться безопасность и переносимость, а также определяться фармакокинетические характеристики rFVIIIFc-VWF-XTEN при еженедельном введении 50 МЕ/кг (фиг. 1). Первичной целью исследования является оценивание эффективности профилактического лечения с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN по сравнению с лечением по необходимости с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN. Вторичной целью исследования является оценивание rFVIIIFc-VWF-XTEN в качестве средства профилактического лечения, его эффекта в отношении эпизодов кровотечения и потребления rFVIIIFc-VWF-XTEN, функционального состояния суставов и качества жизни, что измеряют по исходам, сообщаемым пациентами (PRO), и оценивание rFVIIIFc-VWF-XTEN для лечения по необходимости.

[0373] Кроме того, целью фармакокинетического анализа (PK) является определение PK-показателей rFVIIIFc-VWF-XTEN при профилактическом применении на исходном уровне для всех субъектов и повторно через три месяца для заранее определенной подгруппы субъектов согласно анализу активности FVIII по aPTT. Дополнительными целями являются оценивание эффективности rFVIIIFc-VWF-XTEN у субъектов, переносящих хирургическое вмешательство, а также оценивание безопасности и переносимости rFVIIIFc-VWF-XTEN. Кроме того, структурные исходы в отношении функционального состояния суставов будут оцениваться с помощью ультразвукового исследования, и будет оцениваться влияние лечения на другие измеряемые показатели качества жизни и на использование ресурсов здравоохранения.

[0374] План исследования

[0375] Это опорное открытое многоцентровое исследование фазы 3 в отношении безопасности, эффективности и PK-показателей rFVIIIFc-VWF-XTEN при внутривенном введении у пациентов в возрасте ≥ 12 лет с тяжелой формой гемофилии А (определяемой как уровень эндогенного фактора VIII < 1 МЕ/дл [< 1%]). Примерно двадцать пять субъектов, в настоящее время проходящих режим лечения по необходимости, будут получать rFVIIIFc-VWF-XTEN в дозе 50 МЕ/кг IV по необходимости в течение двадцати шести недель, затем будут получать rFVIIIFc-VWF-XTEN в дозе 50 МЕ/кг IV один раз в неделю в режиме профилактического лечения в течение двадцати шести недель. Субъекты, которые в настоящее время проходят режим профилактического лечения, будут получать rFVIIIFc-VWF-XTEN в дозе 50 МЕ/кг IV один раз в неделю в режиме профилактического лечения в течение пятидесяти двух недель.

[0376] В исследование будут включены примерно 140 субъектов в возрасте ≥ 12 лет; повторные оценки PK-показателей будут проведены в подгруппе из примерно шестнадцати субъектов через 12 недель.

[0377] Субъекты будут подвергнуты скринингу и после определения соответствия критериям включения перейдут к одному из двух режимов лечения (т. е. по необходимости или для профилактики) с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN в дозе 50 МЕ/кг IV. Все субъекты будут подвергнуты оценкам PK-показателей на исходном уровне после периода отмывки (по меньшей мере 4-5 дней в зависимости от текущей терапии). На протяжении всего исследования субъекты будут подвергаться оценкам эффективности и безопасности. Эти оценки безопасности будут включать тестирование в отношении образования потенциальных ингибиторов. Визит для оценки безопасности или телефонный звонок в период последующего наблюдения будет происходить через двадцать восемь дней после последней дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN, если только субъект не будет включен в открытое расширенное исследование.

[0378] Окончание исследования (EOS) может произойти, если соблюдены оба критерия: (i) по меньшей мере 104 субъекта достигли 50 дней воздействия (ED) и выполнили достоверный тест на ингибиторы после 50-^го ED; и (ii) по меньшей мере двадцать пять субъектов завершили исследование в группе лечения по необходимости, в том числе 26-недельный период профилактического лечения, или досрочно прекратили участие в исследовании. Кроме того, в подгруппу переносящих хирургическое вмешательство будут включены субъекты из любой группы, которые переносят хирургическое вмешательство во время исследования. Для оценки контроля и предупреждения кровотечения в хирургической ситуации будет намечено не менее десяти обширных хирургических вмешательств у по меньшей мере пяти субъектов.

[0379] Субъекты будут посещать клинику в течение примерно 28-дневного периода скрининга для определения соответствия критериям участия в исследовании. В дополнение к скрининговому(скрининговым) визиту(визитам) субъекты будут повторно посещать клинику для визитов на исходном уровне, в неделю 4, неделю 12, неделю 26, неделю 36, неделю 52 и при EOS/ET. Период введения доз составляет более 52 недель. Субъекты, входящие в группу профилактического лечения, будут получать 52 еженедельные дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN и дополнительные дозы, необходимые для лечения эпизодов кровотечения. Субъекты, которые входят в группу лечения по необходимости, будут получать rFVIIIFc-VWF-XTEN по необходимости в течение 26-недельного периода лечения по необходимости, а также 26 еженедельных доз rFVIIIFc-VWF-XTEN и дополнительные дозы, необходимые для лечения эпизодов кровотечения, в течение последующего 26-недельного периода профилактического лечения. Безопасность будет оцениваться на протяжении всего исследования. Визит для оценки безопасности или телефонный звонок в период последующего наблюдения будет происходить через 28 дней после последней дозы rFVIIIFc-VWF-XTEN, если только субъект не будет включен в открытое расширенное исследование.

[0380] Первичной конечной точкой исследования будет интрасубъектное сравнение частоты кровотечения в годовом исчислении (ABR) в случае, когда субъекты проходят лечение с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN по необходимости (26 недель), и в случае, когда субъекты проходят профилактическое лечение один раз в неделю (26 недель).

[0381] Вторичные конечные точки исследования будут включать (i) интрасубъектное сравнение ABR при профилактическом лечении с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN и исторической ABR (для субъектов, проходящих профилактическое лечение, которые участвовали в предшествующем наблюдательном исследовании); (ii) частоту возникновения эпизодов кровотечения и потребление (общую ABR, ABR по типу и местоположению, а также общее потребление rFVIIIFc-VWF-XTEN на одного субъекта в годовом исчислении); (iii) ответ на лечение; (iv) индекс эффективности (процентную долю субъектов, у которых сохраняется остаточный уровень L3% в день 7; (v) функциональное состояние суставов и (vi) изменения в измеряемых показателях качества жизни (физической функции согласно опросникам Haem-A-QoL и PROMIS-SF для субъектов в возрасте по меньшей мере 18 лет, а также физической активности согласно опросникам Haemo-QoL и педиатрическому PROMIS-SF для субъектов в возрасте менее 18 лет).

[0382] Ответ на лечение будет включать (i) количество инфузий и дозу rFVIIIFc-VWF-XTEN, требуемые для устранения эпизода кровотечения; (ii) процентную долю эпизодов кровотечения, для устранения которых требуется однократная инфузия; (iii) оценку субъектом ответа на лечение отдельных эпизодов кровотечения с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN по 4-балльной шкале ответа и (iv) общую оценку исследователем ответа субъекта на лечение с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN по 4-балльной шкале ответа.

[0383] Оценка функционального состояния суставов будет включать (i) ABR для эпизодов кровотечения в суставах; (ii) восстановление суставов-мишеней через 52 недели на основании критериев Международного общества по изучению тромбозов и гемостаза (ISTH); (iii) функциональные исходы на основании абсолютного изменения от исходного уровня до 52 недель, оцениваемого по модифицированной шкале оценки функционального состояния суставов при гемофилии (mHJHS или HJHS); (iv) процентную долю субъектов без ухудшения состояния суставов через 52 недели, оцениваемого по mHJHS или HJHS.

[0384] Дополнительные конечные точки включают (i) максимальную (пиковую) концентрацию лекарственного средства в плазме крови (Cmax), период полувыведения (t½), индекс накопления (AI), площадь под кривой зависимости концентрации в плазме крови от времени (AUC), кажущийся объем распределения в равновесном состоянии (Vss), среднее время удержания (MRT), постепенное восстановление (IR), остаточную концентрацию в плазме крови (Ctrough) и время превышения предварительно определенных уровней активности FVIII; (ii) оценки исследователями или хирургами гемостатического ответа субъектов на лечение с помощью rFVIIIFc-VWF-XTEN по 4-балльной шкале ответа, количество и дозу инфузий, требуемых для поддержания гемостаза во время хирургического вмешательства, общее потребление rFVIIIFc-VWF-XTEN во время хирургического периода, ожидаемую кровопотерю во время хирургического вмешательства, количество и тип переливаний компонентов крови, требуемых во время хирургического вмешательства, и эпизоды кровотечений после хирургического вмешательства во время хирургического периода; (iii) возникновение нежелательных явлений (AE) и серьезных нежелательных явлений (SAE), клинически значимые аномалии при физикальном обследовании, в показателях жизненно важных функций и в лабораторных тестах, а также выработку ингибиторов (нейтрализующих антител, направленных против фактора VIII, как определено с помощью анализа Бетезда в модификации Неймегена); и (iv) анатомические структурные исходы в отношении функционального состояния суставов, полученные с помощью ультразвуковой визуализации в субпопуляции, изменения в других измеряемых показателях качества жизни (баллов EQ-5D-5L, PGIC (только неделя 52), интенсивности боли согласно опроснику PROMIS, влияния боли согласно опроснику PROMIS-SF (субъекты ≥ 18 лет), влияния боли согласно педиатрическому опроснику PROMIS-SF (субъекты < 18 лет)) и HRU.

[0385] Критерии включения/исключения

[0386] Пригодные кандидаты должны соответствовать следующим критериям участия в исследовании: (1) возраст ≥ 12 лет на момент подписания информированного согласия; (2) тяжелая форма гемофилии A, определяемая как уровень эндогенного фактора VIII < 1 МЕ/дл (< 1%), что документально подтверждено сертифицированной клинической лабораторией; (3) предшествующее лечение гемофилии А (профилактическое или по необходимости) с помощью любого рекомбинантного и/или полученного из плазмы крови FVIII или криопреципитата в течение по меньшей мере 150 ED; (4) в настоящее время проходят режим профилактического лечения с помощью представленного на рынке продукта FVIII и имели по меньшей мере четыре эпизода кровотечения за двенадцать месяцев до включения в исследование или в настоящее время проходят режим лечения по необходимости с помощью представленного на рынке продукта FVIII и имели по меньшей мере двенадцать эпизодов кровотечения за двенадцать месяцев до включения в исследование; и (5) количество тромбоцитов ≥ 100000 клеток/мкл при скрининге (в тесте, проведенном центральной лабораторией и проанализированном до введения дозы в день 1). Субъекты будут исключены по любой из следующих причин: (1) другое(другие) известное(известные) нарушение(нарушения) коагуляции в дополнение к гемофилии А; (2) гиперчувствительность или анафилаксия в анамнезе, связанная с любым продуктом FVIII; (3) положительный результат теста на ингибиторы или клинические признаки ослабленного ответа на введение FVIII в анамнезе (при наличии ингибиторов в семейном анамнезе субъект не исключается); (4) положительный результат теста на ингибиторы, полученный при скрининге, определенный как ≥ 0,6 БЕ/мл; (5) аномалия почечной функции, определяемая как уровень креатинина в сыворотке крови > 2,0 мг/дл, полученный при скрининге; (6) уровень аланинаминотрансферазы (ALT) или аспартатаминотрансферазы (AST) в сыворотке крови > 5 × верхний предел нормы (ULN), полученный при скрининге; (7) уровень общего билирубина в сыворотке крови > 3 × ULN, полученный при скрининге; (8) применение фитусирана или эмицизумаба в течение 12 недель до скрининга; (9) лечение в течение 12 недель до скрининга с помощью терапевтического моноклонального антитела, слитого белка на основе Fc, отличного от rFVIIIFc, или иммуноглобулина IV; (10) лечение с помощью ацетилсалициловой кислоты (ASA) в течение 2 недель до скрининга или лечение с помощью нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (NSAID) в максимальной дозе, указанной в региональной инструкции по применению для каждого продукта, или в дозе, превышающей ее; (11) системное лечение в течение 12 недель до скрининга с помощью химиотерапии и/или других иммунодепрессивных лекарственных средств (за исключением лечения инфекции, вызываемой вирусом гепатита С [HCV] или HIV; применение кортикостероидов допускается, за исключением лечения системными кортикостероидами, проводимого ежедневно или через день в дозе 20 мг/день преднизона или его эквивалента в течение > 14 дней; местное, наружное и/или ингаляционное применение стероидов разрешено) и (12) обширное хирургическое вмешательство в течение 8 недель до скрининга (обширное хирургическое вмешательство определяется как любая хирургическая процедура (плановая или экстренная), которая, как правило, но не всегда, включает общую анестезию и/или искусственную вентиляцию легких, при которой проникают в большую полость тела и обнажают ее или производят существенное нарушение физических или физиологических функций (например, лапаротомия, торакотомия, краниотомия, замена сустава или ампутация конечности)).

ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ

Нуклеотидная последовательность VWF031 (SEQ ID NO: 147)

1 ATGAT TCCTG CCAGA TTTGC CGGGG TGCTG CTTGC TCTGG CCCTC ATTTT

51 GCCAG GGACC CTTTG TGCAG AAGGA ACTCG CGGCA GGTCA TCCAC GGCCC

101 GATGC AGCCT TTTCG GAAGT GACTT CGTCA ACACC TTTGA TGGGA GCATG

151 TACAG CTTTG CGGGA TACTG CAGTT ACCTC CTGGC AGGGG GCTGC CAGAA

201 ACGCT CCTTC TCGAT TATTG GGGAC TTCCA GAATG GCAAG AGAGT GAGCC

251 TCTCC GTGTA TCTTG GGGAA TTTTT TGACA TCCAT TTGTT TGTCA ATGGT

301 ACCGT GACAC AGGGG GACCA AAGAG TCTCC ATGCC CTATG CCTCC AAAGG

351 GCTGT ATCTA GAAAC TGAGG CTGGG TACTA CAAGC TGTCC GGTGA GGCCT

401 ATGGC TTTGT GGCCA GGATC GATGG CAGCG GCAAC TTTCA AGTCC TGCTG

451 TCAGA CAGAT ACTTC AACAA GACCT GCGGG CTGTG TGGCA ACTTT AACAT

501 CTTTG CTGAA GATGA CTTTA TGACC CAAGA AGGGA CCTTG ACCTC GGACC

551 CTTAT GACTT TGCCA ACTCA TGGGC TCTGA GCAGT GGAGA ACAGT GGTGT

601 GAACG GGCAT CTCCT CCCAG CAGCT CATGC AACAT CTCCT CTGGG GAAAT

651 GCAGA AGGGC CTGTG GGAGC AGTGC CAGCT TCTGA AGAGC ACCTC GGTGT

701 TTGCC CGCTG CCACC CTCTG GTGGA CCCCG AGCCT TTTGT GGCCC TGTGT

751 GAGAA GACTT TGTGT GAGTG TGCTG GGGGG CTGGA GTGCG CCTGC CCTGC

801 CCTCC TGGAG TACGC CCGGA CCTGT GCCCA GGAGG GAATG GTGCT GTACG

851 GCTGG ACCGA CCACA GCGCG TGCAG CCCAG TGTGC CCTGC TGGTA TGGAG

901 TATAG GCAGT GTGTG TCCCC TTGCG CCAGG ACCTG CCAGA GCCTG CACAT

951 CAATG AAATG TGTCA GGAGC GATGC GTGGA TGGCT GCAGC TGCCC TGAGG

1001 GACAG CTCCT GGATG AAGGC CTCTG CGTGG AGAGC ACCGA GTGTC CCTGC

1051 GTGCA TTCCG GAAAG CGCTA CCCTC CCGGC ACCTC CCTCT CTCGA GACTG

1101 CAACA CCTGC ATTTG CCGAA ACAGC CAGTG GATCT GCAGC AATGA AGAAT

1151 GTCCA GGGGA GTGCC TTGTC ACTGG TCAAT CCCAC TTCAA GAGCT TTGAC

1201 AACAG ATACT TCACC TTCAG TGGGA TCTGC CAGTA CCTGC TGGCC CGGGA

1251 TTGCC AGGAC CACTC CTTCT CCATT GTCAT TGAGA CTGTC CAGTG TGCTG

1301 ATGAC CGCGA CGCTG TGTGC ACCCG CTCCG TCACC GTCCG GCTGC CTGGC

1351 CTGCA CAACA GCCTT GTGAA ACTGA AGCAT GGGGC AGGAG TTGCC ATGGA

1401 TGGCC AGGAC ATCCA GCTCC CCCTC CTGAA AGGTG ACCTC CGCAT CCAGC

1451 ATACA GTGAC GGCCT CCGTG CGCCT CAGCT ACGGG GAGGA CCTGC AGATG

1501 GACTG GGATG GCCGC GGGAG GCTGC TGGTG AAGCT GTCCC CCGTC TATGC

1551 CGGGA AGACC TGCGG CCTGT GTGGG AATTA CAATG GCAAC CAGGG CGACG

1601 ACTTC CTTAC CCCCT CTGGG CTGGC GGAGC CCCGG GTGGA GGACT TCGGG

1651 AACGC CTGGA AGCTG CACGG GGACT GCCAG GACCT GCAGA AGCAG CACAG

1701 CGATC CCTGC GCCCT CAACC CGCGC ATGAC CAGGT TCTCC GAGGA GGCGT

1751 GCGCG GTCCT GACGT CCCCC ACATT CGAGG CCTGC CATCG TGCCG TCAGC

1801 CCGCT GCCCT ACCTG CGGAA CTGCC GCTAC GACGT GTGCT CCTGC TCGGA

1851 CGGCC GCGAG TGCCT GTGCG GCGCC CTGGC CAGCT ATGCC GCGGC CTGCG

1901 CGGGG AGAGG CGTGC GCGTC GCGTG GCGCG AGCCA GGCCG CTGTG AGCTG

1951 AACTG CCCGA AAGGC CAGGT GTACC TGCAG TGCGG GACCC CCTGC AACCT

2001 GACCT GCCGC TCTCT CTCTT ACCCG GATGA GGAAT GCAAT GAGGC CTGCC

2051 TGGAG GGCTG CTTCT GCCCC CCAGG GCTCT ACATG GATGA GAGGG GGGAC

2101 TGCGT GCCCA AGGCC CAGTG CCCCT GTTAC TATGA CGGTG AGATC TTCCA

2151 GCCAG AAGAC ATCTT CTCAG ACCAT CACAC CATGT GCTAC TGTGA GGATG

2201 GCTTC ATGCA CTGTA CCATG AGTGG AGTCC CCGGA AGCTT GCTGC CTGAC

2251 GCTGT CCTCA GCAGT CCCCT GTCTC ATCGC AGCAA AAGGA GCCTA TCCTG

2301 TCGGC CCCCC ATGGT CAAGC TGGTG TGTCC CGCTG ACAAC CTGCG GGCTG

2351 AAGGG CTCGA GTGTA CCAAA ACGTG CCAGA ACTAT GACCT GGAGT GCATG

2401 AGCAT GGGCT GTGTC TCTGG CTGCC TCTGC CCCCC GGGCA TGGTC CGGCA

2451 TGAGA ACAGA TGTGT GGCCC TGGAA AGGTG TCCCT GCTTC CATCA GGGCA

2501 AGGAG TATGC CCCTG GAGAA ACAGT GAAGA TTGGC TGCAA CACTT GTGTC

2551 TGTCG GGACC GGAAG TGGAA CTGCA CAGAC CATGT GTGTG ATGCC ACGTG

2601 CTCCA CGATC GGCAT GGCCC ACTAC CTCAC CTTCG ACGGG CTCAA ATACC

2651 TGTTC CCCGG GGAGT GCCAG TACGT TCTGG TGCAG GATTA CTGCG GCAGT

2701 AACCC TGGGA CCTTT CGGAT CCTAG TGGGG AATAA GGGAT GCAGC CACCC

2751 CTCAG TGAAA TGCAA GAAAC GGGTC ACCAT CCTGG TGGAG GGAGG AGAGA

2801 TTGAG CTGTT TGACG GGGAG GTGAA TGTGA AGAGG CCCAT GAAGG ATGAG

2851 ACTCA CTTTG AGGTG GTGGA GTCTG GCCGG TACAT CATTC TGCTG CTGGG

2901 CAAAG CCCTC TCCGT GGTCT GGGAC CGCCA CCTGA GCATC TCCGT GGTCC

2951 TGAAG CAGAC ATACC AGGAG AAAGT GTGTG GCCTG TGTGG GAATT TTGAT

3001 GGCAT CCAGA ACAAT GACCT CACCA GCAGC AACCT CCAAG TGGAG GAAGA

3051 CCCTG TGGAC TTTGG GAACT CCTGG AAAGT GAGCT CGCAG TGTGC TGACA

3101 CCAGA AAAGT GCCTC TGGAC TCATC CCCTG CCACC TGCCA TAACA ACATC

3151 ATGAA GCAGA CGATG GTGGA TTCCT CCTGT AGAAT CCTTA CCAGT GACGT

3201 CTTCC AGGAC TGCAA CAAGC TGGTG GACCC CGAGC CATAT CTGGA TGTCT

3251 GCATT TACGA CACCT GCTCC TGTGA GTCCA TTGGG GACTG CGCCG CATTC

3301 TGCGA CACCA TTGCT GCCTA TGCCC ACGTG TGTGC CCAGC ATGGC AAGGT

3351 GGTGA CCTGG AGGAC GGCCA CATTG TGCCC CCAGA GCTGC GAGGA GAGGA

3401 ATCTC CGGGA GAACG GGTAT GAGGC TGAGT GGCGC TATAA CAGCT GTGCA

3451 CCTGC CTGTC AAGTC ACGTG TCAGC ACCCT GAGCC ACTGG CCTGC CCTGT

3501 GCAGT GTGTG GAGGG CTGCC ATGCC CACTG CCCTC CAGGG AAAAT CCTGG

3551 ATGAG CTTTT GCAGA CCTGC GTTGA CCCTG AAGAC TGTCC AGTGT GTGAG

3601 GTGGC TGGCC GGCGT TTTGC CTCAG GAAAG AAAGT CACCT TGAAT CCCAG

3651 TGACC CTGAG CACTG CCAGA TTTGC CACTG TGATG TTGTC AACCT CACCT

3701 GTGAA GCCTG CCAGG AGCCG ATATC TGGCG GTGGA GGTTC CGGTG GCGGG

3751 GGATC CGGCG GTGGA GGTTC CGGCG GTGGA GGTTC CGGTG GCGGG GGATC

3801 CGGTG GCGGG GGATC CCTGG TCCCC CGGGG CAGCG GCGGT GGAGG TTCCG

3851 GTGGC GGGGG ATCCG ACAAA ACTCA CACAT GCCCA CCGTG CCCAG CTCCA

3901 GAACT CCTGG GCGGA CCGTC AGTCT TCCTC TTCCC CCCAA AACCC AAGGA

3951 CACCC TCATG ATCTC CCGGA CCCCT GAGGT CACAT GCGTG GTGGT GGACG

4001 TGAGC CACGA AGACC CTGAG GTCAA GTTCA ACTGG TACGT GGACG GCGTG

4051 GAGGT GCATA ATGCC AAGAC AAAGC CGCGG GAGGA GCAGT ACAAC AGCAC

4101 GTACC GTGTG GTCAG CGTCC TCACC GTCCT GCACC AGGAC TGGCT GAATG

4151 GCAAG GAGTA CAAGT GCAAG GTCTC CAACA AAGCC CTCCC AGCCC CCATC

4201 GAGAA AACCA TCTCC AAAGC CAAAG GGCAG CCCCG AGAAC CACAG GTGTA

4251 CACCC TGCCC CCATC CCGCG ATGAG CTGAC CAAGA ACCAG GTCAG CCTGA

4301 CCTGC CTGGT CAAAG GCTTC TATCC CAGCG ACATC GCCGT GGAGT GGGAG

4351 AGCAA TGGGC AGCCG GAGAA CAACT ACAAG ACCAC GCCTC CCGTG TTGGA

4401 CTCCG ACGGC TCCTT CTTCC TCTAC AGCAA GCTCA CCGTG GACAA GAGCA

4451 GGTGG CAGCA GGGGA ACGTC TTCTC ATGCT CCGTG ATGCA TGAGG CTCTG

4501 CACAA CCACT ACACG CAGAA GAGCC TCTCC CTGTC TCCGG GTAAA TGA

Последовательность белка VWF031 (SEQ ID NO: 86)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP ISGGGGSGGG

1251 GSGGGGSGGG GSGGGGSGGG GSLVPRGSGG GGSGGGGSDK THTCPPCPAP

1301 ELLGGPSVFL FPPKPKDTLM ISRTPEVTCV VVDVSHEDPE VKFNWYVDGV

1351 EVHNAKTKPR EEQYNSTYRV VSVLTVLHQD WLNGKEYKCK VSNKALPAPI

1401 EKTISKAKGQ PREPQVYTLP PSRDELTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE

1451 SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSKLTV DKSRWQQGNV FSCSVMHEAL

1501 HNHYTQKSLS LSPGK*

Нуклеотидная последовательность VWF034 (SEQ ID NO: 148)

1 ATGAT TCCTG CCAGA TTTGC CGGGG TGCTG CTTGC TCTGG CCCTC ATTTT

51 GCCAG GGACC CTTTG TGCAG AAGGA ACTCG CGGCA GGTCA TCCAC GGCCC

101 GATGC AGCCT TTTCG GAAGT GACTT CGTCA ACACC TTTGA TGGGA GCATG

151 TACAG CTTTG CGGGA TACTG CAGTT ACCTC CTGGC AGGGG GCTGC CAGAA

201 ACGCT CCTTC TCGAT TATTG GGGAC TTCCA GAATG GCAAG AGAGT GAGCC

251 TCTCC GTGTA TCTTG GGGAA TTTTT TGACA TCCAT TTGTT TGTCA ATGGT

301 ACCGT GACAC AGGGG GACCA AAGAG TCTCC ATGCC CTATG CCTCC AAAGG

351 GCTGT ATCTA GAAAC TGAGG CTGGG TACTA CAAGC TGTCC GGTGA GGCCT

401 ATGGC TTTGT GGCCA GGATC GATGG CAGCG GCAAC TTTCA AGTCC TGCTG

451 TCAGA CAGAT ACTTC AACAA GACCT GCGGG CTGTG TGGCA ACTTT AACAT

501 CTTTG CTGAA GATGA CTTTA TGACC CAAGA AGGGA CCTTG ACCTC GGACC

551 CTTAT GACTT TGCCA ACTCA TGGGC TCTGA GCAGT GGAGA ACAGT GGTGT

601 GAACG GGCAT CTCCT CCCAG CAGCT CATGC AACAT CTCCT CTGGG GAAAT

651 GCAGA AGGGC CTGTG GGAGC AGTGC CAGCT TCTGA AGAGC ACCTC GGTGT

701 TTGCC CGCTG CCACC CTCTG GTGGA CCCCG AGCCT TTTGT GGCCC TGTGT

751 GAGAA GACTT TGTGT GAGTG TGCTG GGGGG CTGGA GTGCG CCTGC CCTGC

801 CCTCC TGGAG TACGC CCGGA CCTGT GCCCA GGAGG GAATG GTGCT GTACG

851 GCTGG ACCGA CCACA GCGCG TGCAG CCCAG TGTGC CCTGC TGGTA TGGAG

901 TATAG GCAGT GTGTG TCCCC TTGCG CCAGG ACCTG CCAGA GCCTG CACAT

951 CAATG AAATG TGTCA GGAGC GATGC GTGGA TGGCT GCAGC TGCCC TGAGG

1001 GACAG CTCCT GGATG AAGGC CTCTG CGTGG AGAGC ACCGA GTGTC CCTGC

1051 GTGCA TTCCG GAAAG CGCTA CCCTC CCGGC ACCTC CCTCT CTCGA GACTG

1101 CAACA CCTGC ATTTG CCGAA ACAGC CAGTG GATCT GCAGC AATGA AGAAT

1151 GTCCA GGGGA GTGCC TTGTC ACTGG TCAAT CCCAC TTCAA GAGCT TTGAC

1201 AACAG ATACT TCACC TTCAG TGGGA TCTGC CAGTA CCTGC TGGCC CGGGA

1251 TTGCC AGGAC CACTC CTTCT CCATT GTCAT TGAGA CTGTC CAGTG TGCTG

1301 ATGAC CGCGA CGCTG TGTGC ACCCG CTCCG TCACC GTCCG GCTGC CTGGC

1351 CTGCA CAACA GCCTT GTGAA ACTGA AGCAT GGGGC AGGAG TTGCC ATGGA

1401 TGGCC AGGAC ATCCA GCTCC CCCTC CTGAA AGGTG ACCTC CGCAT CCAGC

1451 ATACA GTGAC GGCCT CCGTG CGCCT CAGCT ACGGG GAGGA CCTGC AGATG

1501 GACTG GGATG GCCGC GGGAG GCTGC TGGTG AAGCT GTCCC CCGTC TATGC

1551 CGGGA AGACC TGCGG CCTGT GTGGG AATTA CAATG GCAAC CAGGG CGACG

1601 ACTTC CTTAC CCCCT CTGGG CTGGC GGAGC CCCGG GTGGA GGACT TCGGG

1651 AACGC CTGGA AGCTG CACGG GGACT GCCAG GACCT GCAGA AGCAG CACAG

1701 CGATC CCTGC GCCCT CAACC CGCGC ATGAC CAGGT TCTCC GAGGA GGCGT

1751 GCGCG GTCCT GACGT CCCCC ACATT CGAGG CCTGC CATCG TGCCG TCAGC

1801 CCGCT GCCCT ACCTG CGGAA CTGCC GCTAC GACGT GTGCT CCTGC TCGGA

1851 CGGCC GCGAG TGCCT GTGCG GCGCC CTGGC CAGCT ATGCC GCGGC CTGCG

1901 CGGGG AGAGG CGTGC GCGTC GCGTG GCGCG AGCCA GGCCG CTGTG AGCTG

1951 AACTG CCCGA AAGGC CAGGT GTACC TGCAG TGCGG GACCC CCTGC AACCT

2001 GACCT GCCGC TCTCT CTCTT ACCCG GATGA GGAAT GCAAT GAGGC CTGCC

2051 TGGAG GGCTG CTTCT GCCCC CCAGG GCTCT ACATG GATGA GAGGG GGGAC

2101 TGCGT GCCCA AGGCC CAGTG CCCCT GTTAC TATGA CGGTG AGATC TTCCA

2151 GCCAG AAGAC ATCTT CTCAG ACCAT CACAC CATGT GCTAC TGTGA GGATG

2201 GCTTC ATGCA CTGTA CCATG AGTGG AGTCC CCGGA AGCTT GCTGC CTGAC

2251 GCTGT CCTCA GCAGT CCCCT GTCTC ATCGC AGCAA AAGGA GCCTA TCCTG

2301 TCGGC CCCCC ATGGT CAAGC TGGTG TGTCC CGCTG ACAAC CTGCG GGCTG

2351 AAGGG CTCGA GTGTA CCAAA ACGTG CCAGA ACTAT GACCT GGAGT GCATG

2401 AGCAT GGGCT GTGTC TCTGG CTGCC TCTGC CCCCC GGGCA TGGTC CGGCA

2451 TGAGA ACAGA TGTGT GGCCC TGGAA AGGTG TCCCT GCTTC CATCA GGGCA

2501 AGGAG TATGC CCCTG GAGAA ACAGT GAAGA TTGGC TGCAA CACTT GTGTC

2551 TGTCG GGACC GGAAG TGGAA CTGCA CAGAC CATGT GTGTG ATGCC ACGTG

2601 CTCCA CGATC GGCAT GGCCC ACTAC CTCAC CTTCG ACGGG CTCAA ATACC

2651 TGTTC CCCGG GGAGT GCCAG TACGT TCTGG TGCAG GATTA CTGCG GCAGT

2701 AACCC TGGGA CCTTT CGGAT CCTAG TGGGG AATAA GGGAT GCAGC CACCC

2751 CTCAG TGAAA TGCAA GAAAC GGGTC ACCAT CCTGG TGGAG GGAGG AGAGA

2801 TTGAG CTGTT TGACG GGGAG GTGAA TGTGA AGAGG CCCAT GAAGG ATGAG

2851 ACTCA CTTTG AGGTG GTGGA GTCTG GCCGG TACAT CATTC TGCTG CTGGG

2901 CAAAG CCCTC TCCGT GGTCT GGGAC CGCCA CCTGA GCATC TCCGT GGTCC

2951 TGAAG CAGAC ATACC AGGAG AAAGT GTGTG GCCTG TGTGG GAATT TTGAT

3001 GGCAT CCAGA ACAAT GACCT CACCA GCAGC AACCT CCAAG TGGAG GAAGA

3051 CCCTG TGGAC TTTGG GAACT CCTGG AAAGT GAGCT CGCAG TGTGC TGACA

3101 CCAGA AAAGT GCCTC TGGAC TCATC CCCTG CCACC TGCCA TAACA ACATC

3151 ATGAA GCAGA CGATG GTGGA TTCCT CCTGT AGAAT CCTTA CCAGT GACGT

3201 CTTCC AGGAC TGCAA CAAGC TGGTG GACCC CGAGC CATAT CTGGA TGTCT

3251 GCATT TACGA CACCT GCTCC TGTGA GTCCA TTGGG GACTG CGCCG CATTC

3301 TGCGA CACCA TTGCT GCCTA TGCCC ACGTG TGTGC CCAGC ATGGC AAGGT

3351 GGTGA CCTGG AGGAC GGCCA CATTG TGCCC CCAGA GCTGC GAGGA GAGGA

3401 ATCTC CGGGA GAACG GGTAT GAGGC TGAGT GGCGC TATAA CAGCT GTGCA

3451 CCTGC CTGTC AAGTC ACGTG TCAGC ACCCT GAGCC ACTGG CCTGC CCTGT

3501 GCAGT GTGTG GAGGG CTGCC ATGCC CACTG CCCTC CAGGG AAAAT CCTGG

3551 ATGAG CTTTT GCAGA CCTGC GTTGA CCCTG AAGAC TGTCC AGTGT GTGAG

3601 GTGGC TGGCC GGCGT TTTGC CTCAG GAAAG AAAGT CACCT TGAAT CCCAG

3651 TGACC CTGAG CACTG CCAGA TTTGC CACTG TGATG TTGTC AACCT CACCT

3701 GTGAA GCCTG CCAGG AGCCG ATATC GGGTA CCTCA GAGTC TGCTA CCCCC

3751 GAGTC AGGGC CAGGA TCAGA GCCAG CCACC TCCGG GTCTG AGACA CCCGG

3801 GACTT CCGAG AGTGC CACCC CTGAG TCCGG ACCCG GGTCC GAGCC CGCCA

3851 CTTCC GGCTC CGAAA CTCCC GGCAC AAGCG AGAGC GCTAC CCCAG AGTCA

3901 GGACC AGGAA CATCT ACAGA GCCCT CTGAA GGCTC CGCTC CAGGG TCCCC

3951 AGCCG GCAGT CCCAC TAGCA CCGAG GAGGG AACCT CTGAA AGCGC CACAC

4001 CCGAA TCAGG GCCAG GGTCT GAGCC TGCTA CCAGC GGCAG CGAGA CACCA

4051 GGCAC CTCTG AGTCC GCCAC ACCAG AGTCC GGACC CGGAT CTCCC GCTGG

4101 GAGCC CCACC TCCAC TGAGG AGGGA TCTCC TGCTG GCTCT CCAAC ATCTA

4151 CTGAG GAAGG TACCT CAACC GAGCC ATCCG AGGGA TCAGC TCCCG GCACC

4201 TCAGA GTCGG CAACC CCGGA GTCTG GACCC GGAAC TTCCG AAAGT GCCAC

4251 ACCAG AGTCC GGTCC CGGGA CTTCA GAATC AGCAA CACCC GAGTC CGGCC

4301 CTGGG TCTGA ACCCG CCACA AGTGG TAGTG AGACA CCAGG ATCAG AACCT

4351 GCTAC CTCAG GGTCA GAGAC ACCCG GATCT CCGGC AGGCT CACCA ACCTC

4401 CACTG AGGAG GGCAC CAGCA CAGAA CCAAG CGAGG GCTCC GCACC CGGAA

4451 CAAGC ACTGA ACCCA GTGAG GGTTC AGCAC CCGGC TCTGA GCCGG CCACA

4501 AGTGG CAGTG AGACA CCCGG CACTT CAGAG AGTGC CACCC CCGAG AGTGG

4551 CCCAG GCACT AGTAC CGAGC CCTCT GAAGG CAGTG CGCCA GATTC TGGCG

4601 GTGGA GGTTC CGGTG GCGGG GGATC CGGTG GCGGG GGATC CGGTG GCGGG

4651 GGATC CGGTG GCGGG GGATC CCTGG TCCCC CGGGG CAGCG GAGGC GACAA

4701 AACTC ACACA TGCCC ACCGT GCCCA GCTCC AGAAC TCCTG GGCGG ACCGT

4751 CAGTC TTCCT CTTCC CCCCA AAACC CAAGG ACACC CTCAT GATCT CCCGG

4801 ACCCC TGAGG TCACA TGCGT GGTGG TGGAC GTGAG CCACG AAGAC CCTGA

4851 GGTCA AGTTC AACTG GTACG TGGAC GGCGT GGAGG TGCAT AATGC CAAGA

4901 CAAAG CCGCG GGAGG AGCAG TACAA CAGCA CGTAC CGTGT GGTCA GCGTC

4951 CTCAC CGTCC TGCAC CAGGA CTGGC TGAAT GGCAA GGAGT ACAAG TGCAA

5001 GGTCT CCAAC AAAGC CCTCC CAGCC CCCAT CGAGA AAACC ATCTC CAAAG

5051 CCAAA GGGCA GCCCC GAGAA CCACA GGTGT ACACC CTGCC CCCAT CCCGG

5101 GATGA GCTGA CCAAG AACCA GGTCA GCCTG ACCTG CCTGG TCAAA GGCTT

5151 CTATC CCAGC GACAT CGCCG TGGAG TGGGA GAGCA ATGGG CAGCC GGAGA

5201 ACAAC TACAA GACCA CGCCT CCCGT GTTGG ACTCC GACGG CTCCT TCTTC

5251 CTCTA CAGCA AGCTC ACCGT GGACA AGAGC AGGTG GCAGC AGGGG AACGT

5301 CTTCT CATGC TCCGT GATGC ATGAG GCTCT GCACA ACCAC TACAC GCAGA

5351 AGAGC CTCTC CCTGT CTCCG GGTAA ATGA

Последовательность белка VWF034 (SEQ ID NO: 87)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP ISGTSESATP

1251 ESGPGSEPAT SGSETPGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP GTSESATPES

1301 GPGTSTEPSE GSAPGSPAGS PTSTEEGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP

1351 GTSESATPES GPGSPAGSPT STEEGSPAGS PTSTEEGTST EPSEGSAPGT

1401 SESATPESGP GTSESATPES GPGTSESATP ESGPGSEPAT SGSETPGSEP

1451 ATSGSETPGS PAGSPTSTEE GTSTEPSEGS APGTSTEPSE GSAPGSEPAT

1501 SGSETPGTSE SATPESGPGT STEPSEGSAP DIGGGGGSGG GGSLVPRGSG

1551 GDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE

1601 DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY

1651 KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV

1701 KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ

1751 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK*

Нуклеотидная последовательность VWF050 (с тройной мутацией IHH) (SEQ ID NO: 149)

1 ATGAT TCCTG CCAGA TTTGC CGGGG TGCTG CTTGC TCTGG CCCTC ATTTT

51 GCCAG GGACC CTTTG TGCAG AAGGA ACTCG CGGCA GGTCA TCCAC GGCCC

101 GATGC AGCCT TTTCG GAAGT GACTT CGTCA ACACC TTTGA TGGGA GCATG

151 TACAG CTTTG CGGGA TACTG CAGTT ACCTC CTGGC AGGGG GCTGC CAGAA

201 ACGCT CCTTC TCGAT TATTG GGGAC TTCCA GAATG GCAAG AGAGT GAGCC

251 TCTCC GTGTA TCTTG GGGAA TTTTT TGACA TCCAT TTGTT TGTCA ATGGT

301 ACCGT GACAC AGGGG GACCA AAGAG TCTCC ATGCC CTATG CCTCC AAAGG

351 GCTGT ATCTA GAAAC TGAGG CTGGG TACTA CAAGC TGTCC GGTGA GGCCT

401 ATGGC TTTGT GGCCA GGATC GATGG CAGCG GCAAC TTTCA AGTCC TGCTG

451 TCAGA CAGAT ACTTC AACAA GACCT GCGGG CTGTG TGGCA ACTTT AACAT

501 CTTTG CTGAA GATGA CTTTA TGACC CAAGA AGGGA CCTTG ACCTC GGACC

551 CTTAT GACTT TGCCA ACTCA TGGGC TCTGA GCAGT GGAGA ACAGT GGTGT

601 GAACG GGCAT CTCCT CCCAG CAGCT CATGC AACAT CTCCT CTGGG GAAAT

651 GCAGA AGGGC CTGTG GGAGC AGTGC CAGCT TCTGA AGAGC ACCTC GGTGT

701 TTGCC CGCTG CCACC CTCTG GTGGA CCCCG AGCCT TTTGT GGCCC TGTGT

751 GAGAA GACTT TGTGT GAGTG TGCTG GGGGG CTGGA GTGCG CCTGC CCTGC

801 CCTCC TGGAG TACGC CCGGA CCTGT GCCCA GGAGG GAATG GTGCT GTACG

851 GCTGG ACCGA CCACA GCGCG TGCAG CCCAG TGTGC CCTGC TGGTA TGGAG

901 TATAG GCAGT GTGTG TCCCC TTGCG CCAGG ACCTG CCAGA GCCTG CACAT

951 CAATG AAATG TGTCA GGAGC GATGC GTGGA TGGCT GCAGC TGCCC TGAGG

1001 GACAG CTCCT GGATG AAGGC CTCTG CGTGG AGAGC ACCGA GTGTC CCTGC

1051 GTGCA TTCCG GAAAG CGCTA CCCTC CCGGC ACCTC CCTCT CTCGA GACTG

1101 CAACA CCTGC ATTTG CCGAA ACAGC CAGTG GATCT GCAGC AATGA AGAAT

1151 GTCCA GGGGA GTGCC TTGTC ACTGG TCAAT CCCAC TTCAA GAGCT TTGAC

1201 AACAG ATACT TCACC TTCAG TGGGA TCTGC CAGTA CCTGC TGGCC CGGGA

1251 TTGCC AGGAC CACTC CTTCT CCATT GTCAT TGAGA CTGTC CAGTG TGCTG

1301 ATGAC CGCGA CGCTG TGTGC ACCCG CTCCG TCACC GTCCG GCTGC CTGGC

1351 CTGCA CAACA GCCTT GTGAA ACTGA AGCAT GGGGC AGGAG TTGCC ATGGA

1401 TGGCC AGGAC ATCCA GCTCC CCCTC CTGAA AGGTG ACCTC CGCAT CCAGC

1451 ATACA GTGAC GGCCT CCGTG CGCCT CAGCT ACGGG GAGGA CCTGC AGATG

1501 GACTG GGATG GCCGC GGGAG GCTGC TGGTG AAGCT GTCCC CCGTC TATGC

1551 CGGGA AGACC TGCGG CCTGT GTGGG AATTA CAATG GCAAC CAGGG CGACG

1601 ACTTC CTTAC CCCCT CTGGG CTGGC GGAGC CCCGG GTGGA GGACT TCGGG

1651 AACGC CTGGA AGCTG CACGG GGACT GCCAG GACCT GCAGA AGCAG CACAG

1701 CGATC CCTGC GCCCT CAACC CGCGC ATGAC CAGGT TCTCC GAGGA GGCGT

1751 GCGCG GTCCT GACGT CCCCC ACATT CGAGG CCTGC CATCG TGCCG TCAGC

1801 CCGCT GCCCT ACCTG CGGAA CTGCC GCTAC GACGT GTGCT CCTGC TCGGA

1851 CGGCC GCGAG TGCCT GTGCG GCGCC CTGGC CAGCT ATGCC GCGGC CTGCG

1901 CGGGG AGAGG CGTGC GCGTC GCGTG GCGCG AGCCA GGCCG CTGTG AGCTG

1951 AACTG CCCGA AAGGC CAGGT GTACC TGCAG TGCGG GACCC CCTGC AACCT

2001 GACCT GCCGC TCTCT CTCTT ACCCG GATGA GGAAT GCAAT GAGGC CTGCC

2051 TGGAG GGCTG CTTCT GCCCC CCAGG GCTCT ACATG GATGA GAGGG GGGAC

2101 TGCGT GCCCA AGGCC CAGTG CCCCT GTTAC TATGA CGGTG AGATC TTCCA

2151 GCCAG AAGAC ATCTT CTCAG ACCAT CACAC CATGT GCTAC TGTGA GGATG

2201 GCTTC ATGCA CTGTA CCATG AGTGG AGTCC CCGGA AGCTT GCTGC CTGAC

2251 GCTGT CCTCA GCAGT CCCCT GTCTC ATCGC AGCAA AAGGA GCCTA TCCTG

2301 TCGGC CCCCC ATGGT CAAGC TGGTG TGTCC CGCTG ACAAC CTGCG GGCTG

2351 AAGGG CTCGA GTGTA CCAAA ACGTG CCAGA ACTAT GACCT GGAGT GCATG

2401 AGCAT GGGCT GTGTC TCTGG CTGCC TCTGC CCCCC GGGCA TGGTC CGGCA

2451 TGAGA ACAGA TGTGT GGCCC TGGAA AGGTG TCCCT GCTTC CATCA GGGCA

2501 AGGAG TATGC CCCTG GAGAA ACAGT GAAGA TTGGC TGCAA CACTT GTGTC

2551 TGTCG GGACC GGAAG TGGAA CTGCA CAGAC CATGT GTGTG ATGCC ACGTG

2601 CTCCA CGATC GGCAT GGCCC ACTAC CTCAC CTTCG ACGGG CTCAA ATACC

2651 TGTTC CCCGG GGAGT GCCAG TACGT TCTGG TGCAG GATTA CTGCG GCAGT

2701 AACCC TGGGA CCTTT CGGAT CCTAG TGGGG AATAA GGGAT GCAGC CACCC

2751 CTCAG TGAAA TGCAA GAAAC GGGTC ACCAT CCTGG TGGAG GGAGG AGAGA

2801 TTGAG CTGTT TGACG GGGAG GTGAA TGTGA AGAGG CCCAT GAAGG ATGAG

2851 ACTCA CTTTG AGGTG GTGGA GTCTG GCCGG TACAT CATTC TGCTG CTGGG

2901 CAAAG CCCTC TCCGT GGTCT GGGAC CGCCA CCTGA GCATC TCCGT GGTCC

2951 TGAAG CAGAC ATACC AGGAG AAAGT GTGTG GCCTG TGTGG GAATT TTGAT

3001 GGCAT CCAGA ACAAT GACCT CACCA GCAGC AACCT CCAAG TGGAG GAAGA

3051 CCCTG TGGAC TTTGG GAACT CCTGG AAAGT GAGCT CGCAG TGTGC TGACA

3101 CCAGA AAAGT GCCTC TGGAC TCATC CCCTG CCACC TGCCA TAACA ACATC

3151 ATGAA GCAGA CGATG GTGGA TTCCT CCTGT AGAAT CCTTA CCAGT GACGT

3201 CTTCC AGGAC TGCAA CAAGC TGGTG GACCC CGAGC CATAT CTGGA TGTCT

3251 GCATT TACGA CACCT GCTCC TGTGA GTCCA TTGGG GACTG CGCCG CATTC

3301 TGCGA CACCA TTGCT GCCTA TGCCC ACGTG TGTGC CCAGC ATGGC AAGGT

3351 GGTGA CCTGG AGGAC GGCCA CATTG TGCCC CCAGA GCTGC GAGGA GAGGA

3401 ATCTC CGGGA GAACG GGTAT GAGGC TGAGT GGCGC TATAA CAGCT GTGCA

3451 CCTGC CTGTC AAGTC ACGTG TCAGC ACCCT GAGCC ACTGG CCTGC CCTGT

3501 GCAGT GTGTG GAGGG CTGCC ATGCC CACTG CCCTC CAGGG AAAAT CCTGG

3551 ATGAG CTTTT GCAGA CCTGC GTTGA CCCTG AAGAC TGTCC AGTGT GTGAG

3601 GTGGC TGGCC GGCGT TTTGC CTCAG GAAAG AAAGT CACCT TGAAT CCCAG

3651 TGACC CTGAG CACTG CCAGA TTTGC CACTG TGATG TTGTC AACCT CACCT

3701 GTGAA GCCTG CCAGG AGCCG ATATC TGGCG GTGGA GGTTC CGGTG GCGGG

3751 GGATC CGGCG GTGGA GGTTC CGGCG GTGGA GGTTC CGGTG GCGGG GGATC

3801 CGGTG GCGGG GGATC CCTGG TCCCC CGGGG CAGCG GCGGT GGAGG TTCCG

3851 GTGGC GGGGG ATCCG ACAAA ACTCA CACAT GCCCA CCGTG CCCAG CTCCA

3901 GAACT CCTGG GCGGA CCGTC AGTCT TCCTC TTCCC CCCAA AACCC AAGGA

3951 CACCC TCATG GCCTC CCGGA CCCCT GAGGT CACAT GCGTG GTGGT GGACG

4001 TGAGC CACGA AGACC CTGAG GTCAA GTTCA ACTGG TACGT GGACG GCGTG

4051 GAGGT GCATA ATGCC AAGAC AAAGC CGCGG GAGGA GCAGT ACAAC AGCAC

4101 GTACC GTGTG GTCAG CGTCC TCACC GTCCT GGCCC AGGAC TGGCT GAATG

4151 GCAAG GAGTA CAAGT GCAAG GTCTC CAACA AAGCC CTCCC AGCCC CCATC

4201 GAGAA AACCA TCTCC AAAGC CAAAG GGCAG CCCCG AGAAC CACAG GTGTA

4251 CACCC TGCCC CCATC CCGCG ATGAG CTGAC CAAGA ACCAG GTCAG CCTGA

4301 CCTGC CTGGT CAAAG GCTTC TATCC CAGCG ACATC GCCGT GGAGT GGGAG

4351 AGCAA TGGGC AGCCG GAGAA CAACT ACAAG ACCAC GCCTC CCGTG TTGGA

4401 CTCCG ACGGC TCCTT CTTCC TCTAC AGCAA GCTCA CCGTG GACAA GAGCA

4451 GGTGG CAGCA GGGGA ACGTC TTCTC ATGCT CCGTG ATGCA TGAGG CTCTG

4501 CACAA CGCCT ACACG CAGAA GAGCC TCTCC CTGTC TCCGG GTAAA TGA

Последовательность белка VWF050 (с тройной мутацией IHH) (SEQ ID NO: 150)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP ISGGGGSGGG

1251 GSGGGGSGGG GSGGGGSGGG GSLVPRGSGG GGSGGGGSDK THTCPPCPAP

1301 ELLGGPSVFL FPPKPKDTLM ASRTPEVTCV VVDVSHEDPE VKFNWYVDGV

1351 EVHNAKTKPR EEQYNSTYRV VSVLTVLAQD WLNGKEYKCK VSNKALPAPI

1401 EKTISKAKGQ PREPQVYTLP PSRDELTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE

1451 SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSKLTV DKSRWQQGNV FSCSVMHEAL

1501 HNAYTQKSLS LSPGK*

Нуклеотидная последовательность VWF057 (SEQ ID NO: 151)

1 ATGAT TCCTG CCAGA TTTGC CGGGG TGCTG CTTGC TCTGG CCCTC ATTTT

51 GCCAG GGACC CTTTG TGCAG AAGGA ACTCG CGGCA GGTCA TCCAC GGCCC

101 GATGC AGCCT TTTCG GAAGT GACTT CGTCA ACACC TTTGA TGGGA GCATG

151 TACAG CTTTG CGGGA TACTG CAGTT ACCTC CTGGC AGGGG GCTGC CAGAA

201 ACGCT CCTTC TCGAT TATTG GGGAC TTCCA GAATG GCAAG AGAGT GAGCC

251 TCTCC GTGTA TCTTG GGGAA TTTTT TGACA TCCAT TTGTT TGTCA ATGGT

301 ACCGT GACAC AGGGG GACCA AAGAG TCTCC ATGCC CTATG CCTCC AAAGG

351 GCTGT ATCTA GAAAC TGAGG CTGGG TACTA CAAGC TGTCC GGTGA GGCCT

401 ATGGC TTTGT GGCCA GGATC GATGG CAGCG GCAAC TTTCA AGTCC TGCTG

451 TCAGA CAGAT ACTTC AACAA GACCT GCGGG CTGTG TGGCA ACTTT AACAT

501 CTTTG CTGAA GATGA CTTTA TGACC CAAGA AGGGA CCTTG ACCTC GGACC

551 CTTAT GACTT TGCCA ACTCA TGGGC TCTGA GCAGT GGAGA ACAGT GGTGT

601 GAACG GGCAT CTCCT CCCAG CAGCT CATGC AACAT CTCCT CTGGG GAAAT

651 GCAGA AGGGC CTGTG GGAGC AGTGC CAGCT TCTGA AGAGC ACCTC GGTGT

701 TTGCC CGCTG CCACC CTCTG GTGGA CCCCG AGCCT TTTGT GGCCC TGTGT

751 GAGAA GACTT TGTGT GAGTG TGCTG GGGGG CTGGA GTGCG CCTGC CCTGC

801 CCTCC TGGAG TACGC CCGGA CCTGT GCCCA GGAGG GAATG GTGCT GTACG

851 GCTGG ACCGA CCACA GCGCG TGCAG CCCAG TGTGC CCTGC TGGTA TGGAG

901 TATAG GCAGT GTGTG TCCCC TTGCG CCAGG ACCTG CCAGA GCCTG CACAT

951 CAATG AAATG TGTCA GGAGC GATGC GTGGA TGGCT GCAGC TGCCC TGAGG

1001 GACAG CTCCT GGATG AAGGC CTCTG CGTGG AGAGC ACCGA GTGTC CCTGC

1051 GTGCA TTCCG GAAAG CGCTA CCCTC CCGGC ACCTC CCTCT CTCGA GACTG

1101 CAACA CCTGC ATTTG CCGAA ACAGC CAGTG GATCT GCAGC AATGA AGAAT

1151 GTCCA GGGGA GTGCC TTGTC ACTGG TCAAT CCCAC TTCAA GAGCT TTGAC

1201 AACAG ATACT TCACC TTCAG TGGGA TCTGC CAGTA CCTGC TGGCC CGGGA

1251 TTGCC AGGAC CACTC CTTCT CCATT GTCAT TGAGA CTGTC CAGTG TGCTG

1301 ATGAC CGCGA CGCTG TGTGC ACCCG CTCCG TCACC GTCCG GCTGC CTGGC

1351 CTGCA CAACA GCCTT GTGAA ACTGA AGCAT GGGGC AGGAG TTGCC ATGGA

1401 TGGCC AGGAC ATCCA GCTCC CCCTC CTGAA AGGTG ACCTC CGCAT CCAGC

1451 ATACA GTGAC GGCCT CCGTG CGCCT CAGCT ACGGG GAGGA CCTGC AGATG

1501 GACTG GGATG GCCGC GGGAG GCTGC TGGTG AAGCT GTCCC CCGTC TATGC

1551 CGGGA AGACC TGCGG CCTGT GTGGG AATTA CAATG GCAAC CAGGG CGACG

1601 ACTTC CTTAC CCCCT CTGGG CTGGC GGAGC CCCGG GTGGA GGACT TCGGG

1651 AACGC CTGGA AGCTG CACGG GGACT GCCAG GACCT GCAGA AGCAG CACAG

1701 CGATC CCTGC GCCCT CAACC CGCGC ATGAC CAGGT TCTCC GAGGA GGCGT

1751 GCGCG GTCCT GACGT CCCCC ACATT CGAGG CCTGC CATCG TGCCG TCAGC

1801 CCGCT GCCCT ACCTG CGGAA CTGCC GCTAC GACGT GTGCT CCTGC TCGGA

1851 CGGCC GCGAG TGCCT GTGCG GCGCC CTGGC CAGCT ATGCC GCGGC CTGCG

1901 CGGGG AGAGG CGTGC GCGTC GCGTG GCGCG AGCCA GGCCG CTGTG AGCTG

1951 AACTG CCCGA AAGGC CAGGT GTACC TGCAG TGCGG GACCC CCTGC AACCT

2001 GACCT GCCGC TCTCT CTCTT ACCCG GATGA GGAAT GCAAT GAGGC CTGCC

2051 TGGAG GGCTG CTTCT GCCCC CCAGG GCTCT ACATG GATGA GAGGG GGGAC

2101 TGCGT GCCCA AGGCC CAGTG CCCCT GTTAC TATGA CGGTG AGATC TTCCA

2151 GCCAG AAGAC ATCTT CTCAG ACCAT CACAC CATGT GCTAC TGTGA GGATG

2201 GCTTC ATGCA CTGTA CCATG AGTGG AGTCC CCGGA AGCTT GCTGC CTGAC

2251 GCTGT CCTCA GCAGT CCCCT GTCTC ATCGC AGCAA AAGGA GCCTA TCCTG

2301 TCGGC CCCCC ATGGT CAAGC TGGTG TGTCC CGCTG ACAAC CTGCG GGCTG

2351 AAGGG CTCGA GTGTA CCAAA ACGTG CCAGA ACTAT GACCT GGAGT GCATG

2401 AGCAT GGGCT GTGTC TCTGG CTGCC TCTGC CCCCC GGGCA TGGTC CGGCA

2451 TGAGA ACAGA TGTGT GGCCC TGGAA AGGTG TCCCT GCTTC CATCA GGGCA

2501 AGGAG TATGC CCCTG GAGAA ACAGT GAAGA TTGGC TGCAA CACTT GTGTC

2551 TGTCG GGACC GGAAG TGGAA CTGCA CAGAC CATGT GTGTG ATGCC ACGTG

2601 CTCCA CGATC GGCAT GGCCC ACTAC CTCAC CTTCG ACGGG CTCAA ATACC

2651 TGTTC CCCGG GGAGT GCCAG TACGT TCTGG TGCAG GATTA CTGCG GCAGT

2701 AACCC TGGGA CCTTT CGGAT CCTAG TGGGG AATAA GGGAT GCAGC CACCC

2751 CTCAG TGAAA TGCAA GAAAC GGGTC ACCAT CCTGG TGGAG GGAGG AGAGA

2801 TTGAG CTGTT TGACG GGGAG GTGAA TGTGA AGAGG CCCAT GAAGG ATGAG

2851 ACTCA CTTTG AGGTG GTGGA GTCTG GCCGG TACAT CATTC TGCTG CTGGG

2901 CAAAG CCCTC TCCGT GGTCT GGGAC CGCCA CCTGA GCATC TCCGT GGTCC

2951 TGAAG CAGAC ATACC AGGAG AAAGT GTGTG GCCTG TGTGG GAATT TTGAT

3001 GGCAT CCAGA ACAAT GACCT CACCA GCAGC AACCT CCAAG TGGAG GAAGA

3051 CCCTG TGGAC TTTGG GAACT CCTGG AAAGT GAGCT CGCAG TGTGC TGACA

3101 CCAGA AAAGT GCCTC TGGAC TCATC CCCTG CCACC TGCCA TAACA ACATC

3151 ATGAA GCAGA CGATG GTGGA TTCCT CCTGT AGAAT CCTTA CCAGT GACGT

3201 CTTCC AGGAC TGCAA CAAGC TGGTG GACCC CGAGC CATAT CTGGA TGTCT

3251 GCATT TACGA CACCT GCTCC TGTGA GTCCA TTGGG GACTG CGCCG CATTC

3301 TGCGA CACCA TTGCT GCCTA TGCCC ACGTG TGTGC CCAGC ATGGC AAGGT

3351 GGTGA CCTGG AGGAC GGCCA CATTG TGCCC CCAGA GCTGC GAGGA GAGGA

3401 ATCTC CGGGA GAACG GGTAT GAGGC TGAGT GGCGC TATAA CAGCT GTGCA

3451 CCTGC CTGTC AAGTC ACGTG TCAGC ACCCT GAGCC ACTGG CCTGC CCTGT

3501 GCAGT GTGTG GAGGG CTGCC ATGCC CACTG CCCTC CAGGG AAAAT CCTGG

3551 ATGAG CTTTT GCAGA CCTGC GTTGA CCCTG AAGAC TGTCC AGTGT GTGAG

3601 GTGGC TGGCC GGCGT TTTGC CTCAG GAAAG AAAGT CACCT TGAAT CCCAG

3651 TGACC CTGAG CACTG CCAGA TTTGC CACTG TGATG TTGTC AACCT CACCT

3701 GTGAA GCCTG CCAGG AGCCG ATATC GGGCG CGCCA ACATC AGAGA GCGCC

3751 ACCCC TGAAA GTGGT CCCGG GAGCG AGCCA GCCAC ATCTG GGTCG GAAAC

3801 GCCAG GCACA AGTGA GTCTG CAACT CCCGA GTCCG GACCT GGCTC CGAGC

3851 CTGCC ACTAG CGGCT CCGAG ACTCC GGGAA CTTCC GAGAG CGCTA CACCA

3901 GAAAG CGGAC CCGGA ACCAG TACCG AACCT AGCGA GGGCT CTGCT CCGGG

3951 CAGCC CAGCC GGCTC TCCTA CATCC ACGGA GGAGG GCACT TCCGA ATCCG

4001 CCACC CCGGA GTCAG GGCCA GGATC TGAAC CCGCT ACCTC AGGCA GTGAG

4051 ACGCC AGGAA CGAGC GAGTC CGCTA CACCG GAGAG TGGGC CAGGG AGCCC

4101 TGCTG GATCT CCTAC GTCCA CTGAG GAAGG GTCAC CAGCG GGCTC GCCCA

4151 CCAGC ACTGA AGAAG GTGCC TCGAG CGGCG GTGGA GGTTC CGGTG GCGGG

4201 GGATC CGGTG GCGGG GGATC CGGTG GCGGG GGATC CGGTG GCGGG GGATC

4251 CCTGG TCCCC CGGGG CAGCG GAGGC GACAA AACTC ACACA TGCCC ACCGT

4301 GCCCA GCTCC AGAAC TCCTG GGCGG ACCGT CAGTC TTCCT CTTCC CCCCA

4351 AAACC CAAGG ACACC CTCAT GATCT CCCGG ACCCC TGAGG TCACA TGCGT

4401 GGTGG TGGAC GTGAG CCACG AAGAC CCTGA GGTCA AGTTC AACTG GTACG

4451 TGGAC GGCGT GGAGG TGCAT AATGC CAAGA CAAAG CCGCG GGAGG AGCAG

4501 TACAA CAGCA CGTAC CGTGT GGTCA GCGTC CTCAC CGTCC TGCAC CAGGA

4551 CTGGC TGAAT GGCAA GGAGT ACAAG TGCAA GGTCT CCAAC AAAGC CCTCC

4601 CAGCC CCCAT CGAGA AAACC ATCTC CAAAG CCAAA GGGCA GCCCC GAGAA

4651 CCACA GGTGT ACACC CTGCC CCCAT CCCGG GATGA GCTGA CCAAG AACCA

4701 GGTCA GCCTG ACCTG CCTGG TCAAA GGCTT CTATC CCAGC GACAT CGCCG

4751 TGGAG TGGGA GAGCA ATGGG CAGCC GGAGA ACAAC TACAA GACCA CGCCT

4801 CCCGT GTTGG ACTCC GACGG CTCCT TCTTC CTCTA CAGCA AGCTC ACCGT

4851 GGACA AGAGC AGGTG GCAGC AGGGG AACGT CTTCT CATGC TCCGT GATGC

4901 ATGAG GCTCT GCACA ACCAC TACAC GCAGA AGAGC CTCTC CCTGT CTCCG

4951 GGTAA ATGA

Последовательность белка VWF057 (SEQ ID NO: 152)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP ISGAPTSESA

1251 TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP GSEPATSGSE TPGTSESATP

1301 ESGPGTSTEP SEGSAPGSPA GSPTSTEEGT SESATPESGP GSEPATSGSE

1351 TPGTSESATP ESGPGSPAGS PTSTEEGSPA GSPTSTEEGA SSGGGGSGGG

1401 GSGGGGSGGG GSGGGGSLVP RGSGGDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP

1451 KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ

1501 YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE

1551 PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP

1601 PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP

1651 GK*

Нуклеотидная последовательность VWF058 (VWF034 с мутацией IHH) (SEQ ID NO: 153)

1 ATGAT TCCTG CCAGA TTTGC CGGGG TGCTG CTTGC TCTGG CCCTC ATTTT

51 GCCAG GGACC CTTTG TGCAG AAGGA ACTCG CGGCA GGTCA TCCAC GGCCC

101 GATGC AGCCT TTTCG GAAGT GACTT CGTCA ACACC TTTGA TGGGA GCATG

151 TACAG CTTTG CGGGA TACTG CAGTT ACCTC CTGGC AGGGG GCTGC CAGAA

201 ACGCT CCTTC TCGAT TATTG GGGAC TTCCA GAATG GCAAG AGAGT GAGCC

251 TCTCC GTGTA TCTTG GGGAA TTTTT TGACA TCCAT TTGTT TGTCA ATGGT

301 ACCGT GACAC AGGGG GACCA AAGAG TCTCC ATGCC CTATG CCTCC AAAGG

351 GCTGT ATCTA GAAAC TGAGG CTGGG TACTA CAAGC TGTCC GGTGA GGCCT

401 ATGGC TTTGT GGCCA GGATC GATGG CAGCG GCAAC TTTCA AGTCC TGCTG

451 TCAGA CAGAT ACTTC AACAA GACCT GCGGG CTGTG TGGCA ACTTT AACAT

501 CTTTG CTGAA GATGA CTTTA TGACC CAAGA AGGGA CCTTG ACCTC GGACC

551 CTTAT GACTT TGCCA ACTCA TGGGC TCTGA GCAGT GGAGA ACAGT GGTGT

601 GAACG GGCAT CTCCT CCCAG CAGCT CATGC AACAT CTCCT CTGGG GAAAT

651 GCAGA AGGGC CTGTG GGAGC AGTGC CAGCT TCTGA AGAGC ACCTC GGTGT

701 TTGCC CGCTG CCACC CTCTG GTGGA CCCCG AGCCT TTTGT GGCCC TGTGT

751 GAGAA GACTT TGTGT GAGTG TGCTG GGGGG CTGGA GTGCG CCTGC CCTGC

801 CCTCC TGGAG TACGC CCGGA CCTGT GCCCA GGAGG GAATG GTGCT GTACG

851 GCTGG ACCGA CCACA GCGCG TGCAG CCCAG TGTGC CCTGC TGGTA TGGAG

901 TATAG GCAGT GTGTG TCCCC TTGCG CCAGG ACCTG CCAGA GCCTG CACAT

951 CAATG AAATG TGTCA GGAGC GATGC GTGGA TGGCT GCAGC TGCCC TGAGG

1001 GACAG CTCCT GGATG AAGGC CTCTG CGTGG AGAGC ACCGA GTGTC CCTGC

1051 GTGCA TTCCG GAAAG CGCTA CCCTC CCGGC ACCTC CCTCT CTCGA GACTG

1101 CAACA CCTGC ATTTG CCGAA ACAGC CAGTG GATCT GCAGC AATGA AGAAT

1151 GTCCA GGGGA GTGCC TTGTC ACTGG TCAAT CCCAC TTCAA GAGCT TTGAC

1201 AACAG ATACT TCACC TTCAG TGGGA TCTGC CAGTA CCTGC TGGCC CGGGA

1251 TTGCC AGGAC CACTC CTTCT CCATT GTCAT TGAGA CTGTC CAGTG TGCTG

1301 ATGAC CGCGA CGCTG TGTGC ACCCG CTCCG TCACC GTCCG GCTGC CTGGC

1351 CTGCA CAACA GCCTT GTGAA ACTGA AGCAT GGGGC AGGAG TTGCC ATGGA

1401 TGGCC AGGAC ATCCA GCTCC CCCTC CTGAA AGGTG ACCTC CGCAT CCAGC

1451 ATACA GTGAC GGCCT CCGTG CGCCT CAGCT ACGGG GAGGA CCTGC AGATG

1501 GACTG GGATG GCCGC GGGAG GCTGC TGGTG AAGCT GTCCC CCGTC TATGC

1551 CGGGA AGACC TGCGG CCTGT GTGGG AATTA CAATG GCAAC CAGGG CGACG

1601 ACTTC CTTAC CCCCT CTGGG CTGGC GGAGC CCCGG GTGGA GGACT TCGGG

1651 AACGC CTGGA AGCTG CACGG GGACT GCCAG GACCT GCAGA AGCAG CACAG

1701 CGATC CCTGC GCCCT CAACC CGCGC ATGAC CAGGT TCTCC GAGGA GGCGT

1751 GCGCG GTCCT GACGT CCCCC ACATT CGAGG CCTGC CATCG TGCCG TCAGC

1801 CCGCT GCCCT ACCTG CGGAA CTGCC GCTAC GACGT GTGCT CCTGC TCGGA

1851 CGGCC GCGAG TGCCT GTGCG GCGCC CTGGC CAGCT ATGCC GCGGC CTGCG

1901 CGGGG AGAGG CGTGC GCGTC GCGTG GCGCG AGCCA GGCCG CTGTG AGCTG

1951 AACTG CCCGA AAGGC CAGGT GTACC TGCAG TGCGG GACCC CCTGC AACCT

2001 GACCT GCCGC TCTCT CTCTT ACCCG GATGA GGAAT GCAAT GAGGC CTGCC

2051 TGGAG GGCTG CTTCT GCCCC CCAGG GCTCT ACATG GATGA GAGGG GGGAC

2101 TGCGT GCCCA AGGCC CAGTG CCCCT GTTAC TATGA CGGTG AGATC TTCCA

2151 GCCAG AAGAC ATCTT CTCAG ACCAT CACAC CATGT GCTAC TGTGA GGATG

2201 GCTTC ATGCA CTGTA CCATG AGTGG AGTCC CCGGA AGCTT GCTGC CTGAC

2251 GCTGT CCTCA GCAGT CCCCT GTCTC ATCGC AGCAA AAGGA GCCTA TCCTG

2301 TCGGC CCCCC ATGGT CAAGC TGGTG TGTCC CGCTG ACAAC CTGCG GGCTG

2351 AAGGG CTCGA GTGTA CCAAA ACGTG CCAGA ACTAT GACCT GGAGT GCATG

2401 AGCAT GGGCT GTGTC TCTGG CTGCC TCTGC CCCCC GGGCA TGGTC CGGCA

2451 TGAGA ACAGA TGTGT GGCCC TGGAA AGGTG TCCCT GCTTC CATCA GGGCA

2501 AGGAG TATGC CCCTG GAGAA ACAGT GAAGA TTGGC TGCAA CACTT GTGTC

2551 TGTCG GGACC GGAAG TGGAA CTGCA CAGAC CATGT GTGTG ATGCC ACGTG

2601 CTCCA CGATC GGCAT GGCCC ACTAC CTCAC CTTCG ACGGG CTCAA ATACC

2651 TGTTC CCCGG GGAGT GCCAG TACGT TCTGG TGCAG GATTA CTGCG GCAGT

2701 AACCC TGGGA CCTTT CGGAT CCTAG TGGGG AATAA GGGAT GCAGC CACCC

2751 CTCAG TGAAA TGCAA GAAAC GGGTC ACCAT CCTGG TGGAG GGAGG AGAGA

2801 TTGAG CTGTT TGACG GGGAG GTGAA TGTGA AGAGG CCCAT GAAGG ATGAG

2851 ACTCA CTTTG AGGTG GTGGA GTCTG GCCGG TACAT CATTC TGCTG CTGGG

2901 CAAAG CCCTC TCCGT GGTCT GGGAC CGCCA CCTGA GCATC TCCGT GGTCC

2951 TGAAG CAGAC ATACC AGGAG AAAGT GTGTG GCCTG TGTGG GAATT TTGAT

3001 GGCAT CCAGA ACAAT GACCT CACCA GCAGC AACCT CCAAG TGGAG GAAGA

3051 CCCTG TGGAC TTTGG GAACT CCTGG AAAGT GAGCT CGCAG TGTGC TGACA

3101 CCAGA AAAGT GCCTC TGGAC TCATC CCCTG CCACC TGCCA TAACA ACATC

3151 ATGAA GCAGA CGATG GTGGA TTCCT CCTGT AGAAT CCTTA CCAGT GACGT

3201 CTTCC AGGAC TGCAA CAAGC TGGTG GACCC CGAGC CATAT CTGGA TGTCT

3251 GCATT TACGA CACCT GCTCC TGTGA GTCCA TTGGG GACTG CGCCG CATTC

3301 TGCGA CACCA TTGCT GCCTA TGCCC ACGTG TGTGC CCAGC ATGGC AAGGT

3351 GGTGA CCTGG AGGAC GGCCA CATTG TGCCC CCAGA GCTGC GAGGA GAGGA

3401 ATCTC CGGGA GAACG GGTAT GAGGC TGAGT GGCGC TATAA CAGCT GTGCA

3451 CCTGC CTGTC AAGTC ACGTG TCAGC ACCCT GAGCC ACTGG CCTGC CCTGT

3501 GCAGT GTGTG GAGGG CTGCC ATGCC CACTG CCCTC CAGGG AAAAT CCTGG

3551 ATGAG CTTTT GCAGA CCTGC GTTGA CCCTG AAGAC TGTCC AGTGT GTGAG

3601 GTGGC TGGCC GGCGT TTTGC CTCAG GAAAG AAAGT CACCT TGAAT CCCAG

3651 TGACC CTGAG CACTG CCAGA TTTGC CACTG TGATG TTGTC AACCT CACCT

3701 GTGAA GCCTG CCAGG AGCCG ATATC GGGTA CCTCA GAGTC TGCTA CCCCC

3751 GAGTC AGGGC CAGGA TCAGA GCCAG CCACC TCCGG GTCTG AGACA CCCGG

3801 GACTT CCGAG AGTGC CACCC CTGAG TCCGG ACCCG GGTCC GAGCC CGCCA

3851 CTTCC GGCTC CGAAA CTCCC GGCAC AAGCG AGAGC GCTAC CCCAG AGTCA

3901 GGACC AGGAA CATCT ACAGA GCCCT CTGAA GGCTC CGCTC CAGGG TCCCC

3951 AGCCG GCAGT CCCAC TAGCA CCGAG GAGGG AACCT CTGAA AGCGC CACAC

4001 CCGAA TCAGG GCCAG GGTCT GAGCC TGCTA CCAGC GGCAG CGAGA CACCA

4051 GGCAC CTCTG AGTCC GCCAC ACCAG AGTCC GGACC CGGAT CTCCC GCTGG

4101 GAGCC CCACC TCCAC TGAGG AGGGA TCTCC TGCTG GCTCT CCAAC ATCTA

4151 CTGAG GAAGG TACCT CAACC GAGCC ATCCG AGGGA TCAGC TCCCG GCACC

4201 TCAGA GTCGG CAACC CCGGA GTCTG GACCC GGAAC TTCCG AAAGT GCCAC

4251 ACCAG AGTCC GGTCC CGGGA CTTCA GAATC AGCAA CACCC GAGTC CGGCC

4301 CTGGG TCTGA ACCCG CCACA AGTGG TAGTG AGACA CCAGG ATCAG AACCT

4351 GCTAC CTCAG GGTCA GAGAC ACCCG GATCT CCGGC AGGCT CACCA ACCTC

4401 CACTG AGGAG GGCAC CAGCA CAGAA CCAAG CGAGG GCTCC GCACC CGGAA

4451 CAAGC ACTGA ACCCA GTGAG GGTTC AGCAC CCGGC TCTGA GCCGG CCACA

4501 AGTGG CAGTG AGACA CCCGG CACTT CAGAG AGTGC CACCC CCGAG AGTGG

4551 CCCAG GCACT AGTAC CGAGC CCTCT GAAGG CAGTG CGCCA GATTC TGGCG

4601 GTGGA GGTTC CGGTG GCGGG GGATC CGGTG GCGGG GGATC CGGTG GCGGG

4651 GGATC CGGTG GCGGG GGATC CCTGG TCCCC CGGGG CAGCG GAGGC GACAA

4701 AACTC ACACA TGCCC ACCGT GCCCA GCTCC AGAAC TCCTG GGCGG ACCGT

4751 CAGTC TTCCT CTTCC CCCCA AAACC CAAGG ACACC CTCAT GGCCT CCCGG

4801 ACCCC TGAGG TCACA TGCGT GGTGG TGGAC GTGAG CCACG AAGAC CCTGA

4851 GGTCA AGTTC AACTG GTACG TGGAC GGCGT GGAGG TGCAT AATGC CAAGA

4901 CAAAG CCGCG GGAGG AGCAG TACAA CAGCA CGTAC CGTGT GGTCA GCGTC

4951 CTCAC CGTCC TGGCC CAGGA CTGGC TGAAT GGCAA GGAGT ACAAG TGCAA

5001 GGTCT CCAAC AAAGC CCTCC CAGCC CCCAT CGAGA AAACC ATCTC CAAAG

5051 CCAAA GGGCA GCCCC GAGAA CCACA GGTGT ACACC CTGCC CCCAT CCCGC

5101 GATGA GCTGA CCAAG AACCA GGTCA GCCTG ACCTG CCTGG TCAAA GGCTT

5151 CTATC CCAGC GACAT CGCCG TGGAG TGGGA GAGCA ATGGG CAGCC GGAGA

5201 ACAAC TACAA GACCA CGCCT CCCGT GTTGG ACTCC GACGG CTCCT TCTTC

5251 CTCTA CAGCA AGCTC ACCGT GGACA AGAGC AGGTG GCAGC AGGGG AACGT

5301 CTTCT CATGC TCCGT GATGC ATGAG GCTCT GCACA ACGCC TACAC GCAGA

5351 AGAGC CTCTC CCTGT CTCCG GGTAA ATGA

Последовательность белка VWF058 (VWF034 с мутацией IHH) (SEQ ID NO: 154)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP ISGTSESATP

1251 ESGPGSEPAT SGSETPGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP GTSESATPES

1301 GPGTSTEPSE GSAPGSPAGS PTSTEEGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP

1351 GTSESATPES GPGSPAGSPT STEEGSPAGS PTSTEEGTST EPSEGSAPGT

1401 SESATPESGP GTSESATPES GPGTSESATP ESGPGSEPAT SGSETPGSEP

1451 ATSGSETPGS PAGSPTSTEE GTSTEPSEGS APGTSTEPSE GSAPGSEPAT

1501 SGSETPGTSE SATPESGPGT STEPSEGSAP DSGGGGSGGG GSGGGGSGGG

1551 GSGGGGSLVP RGSGGDKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP KPKDTLMASR

1601 TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ YNSTYRVVSV

1651 LTVLAQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR

1701 DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF

1751 LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNA YTQKSLSLSP GK*

Нуклеотидная последовательность FVIII 169 (SEQ ID NO: 155)

1 ATGCA AATAG AGCTC TCCAC CTGCT TCTTT CTGTG CCTTT TGCGA TTCTG

51 CTTTA GTGCC ACCAG AAGAT ACTAC CTGGG TGCAG TGGAA CTGTC ATGGG

101 ACTAT ATGCA AAGTG ATCTC GGTGA GCTGC CTGTG GACGC AAGAT TTCCT

151 CCTAG AGTGC CAAAA TCTTT TCCAT TCAAC ACCTC AGTCG TGTAC AAAAA

201 GACTC TGTTT GTAGA ATTCA CGGAT CACCT TTTCA ACATC GCTAA GCCAA

251 GGCCA CCCTG GATGG GTCTG CTAGG TCCTA CCATC CAGGC TGAGG TTTAT

301 GATAC AGTGG TCATT ACACT TAAGA ACATG GCTTC CCATC CTGTC AGTCT

351 TCATG CTGTT GGTGT ATCCT ACTGG AAAGC TTCTG AGGGA GCTGA ATATG

401 ATGAT CAGAC CAGTC AAAGG GAGAA AGAAG ATGAT AAAGT CTTCC CTGGT

451 GGAAG CCATA CATAT GTCTG GCAGG TCCTG AAAGA GAATG GTCCA ATGGC

501 CTCTG ACCCA CTGTG CCTTA CCTAC TCATA TCTTT CTCAT GTGGA CCTGG

551 TAAAA GACTT GAATT CAGGC CTCAT TGGAG CCCTA CTAGT ATGTA GAGAA

601 GGGAG TCTGG CCAAG GAAAA GACAC AGACC TTGCA CAAAT TTATA CTACT

651 TTTTG CTGTA TTTGA TGAAG GGAAA AGTTG GCACT CAGAA ACAAA GAACT

701 CCTTG ATGCA GGATA GGGAT GCTGC ATCTG CTCGG GCCTG GCCTA AAATG

751 CACAC AGTCA ATGGT TATGT AAACA GGTCT CTGCC AGGTC TGATT GGATG

801 CCACA GGAAA TCAGT CTATT GGCAT GTGAT TGGAA TGGGC ACCAC TCCTG

851 AAGTG CACTC AATAT TCCTC GAAGG TCACA CATTT CTTGT GAGGA ACCAT

901 CGCCA GGCTA GCTTG GAAAT CTCGC CAATA ACTTT CCTTA CTGCT CAAAC

951 ACTCT TGATG GACCT TGGAC AGTTT CTACT GTTTT GTCAT ATCTC TTCCC

1001 ACCAA CATGA TGGCA TGGAA GCTTA TGTCA AAGTA GACAG CTGTC CAGAG

1051 GAACC CCAAC TACGA ATGAA AAATA ATGAA GAAGC GGAAG ACTAT GATGA

1101 TGATC TTACT GATTC TGAAA TGGAT GTGGT CAGGT TTGAT GATGA CAACT

1151 CTCCT TCCTT TATCC AAATT CGCTC AGTTG CCAAG AAGCA TCCTA AAACT

1201 TGGGT ACATT ACATT GCTGC TGAAG AGGAG GACTG GGACT ATGCT CCCTT

1251 AGTCC TCGCC CCCGA TGACA GAAGT TATAA AAGTC AATAT TTGAA CAATG

1301 GCCCT CAGCG GATTG GTAGG AAGTA CAAAA AAGTC CGATT TATGG CATAC

1351 ACAGA TGAAA CCTTT AAGAC TCGTG AAGCT ATTCA GCATG AATCA GGAAT

1401 CTTGG GACCT TTACT TTATG GGGAA GTTGG AGACA CACTG TTGAT TATAT

1451 TTAAG AATCA AGCAA GCAGA CCATA TAACA TCTAC CCTCA CGGAA TCACT

1501 GATGT CCGTC CTTTG TATTC AAGGA GATTA CCAAA AGGTG TAAAA CATTT

1551 GAAGG ATTTT CCAAT TCTGC CAGGA GAAAT ATTCA AATAT AAATG GACAG

1601 TGACT GTAGA AGATG GGCCA ACTAA ATCAG ATCCT CGGTG CCTGA CCCGC

1651 TATTA CTCTA GTTTC GTTAA TATGG AGAGA GATCT AGCTT CAGGA CTCAT

1701 TGGCC CTCTC CTCAT CTGCT ACAAA GAATC TGTAG ATCAA AGAGG AAACC

1751 AGATA ATGTC AGACA AGAGG AATGT CATCC TGTTT TCTGT ATTTG ATGAG

1801 AACCG AAGCT GGTAC CTCAC AGAGA ATATA CAACG CTTTC TCCCC AATCC

1851 AGCTG GAGTG CAGCT TGAGG ATCCA GAGTT CCAAG CCTCC AACAT CATGC

1901 ACAGC ATCAA TGGCT ATGTT TTTGA TAGTT TGCAG TTGTC AGTTT GTTTG

1951 CATGA GGTGG CATAC TGGTA CATTC TAAGC ATTGG AGCAC AGACT GACTT

2001 CCTTT CTGTC TTCTT CTCTG GATAT ACCTT CAAAC ACAAA ATGGT CTATG

2051 AAGAC ACACT CACCC TATTC CCATT CTCAG GAGAA ACTGT CTTCA TGTCG

2101 ATGGA AAACC CAGGT CTATG GATTC TGGGG TGCCA CAACT CAGAC TTTCG

2151 GAACA GAGGC ATGAC CGCCT TACTG AAGGT TTCTA GTTGT GACAA GAACA

2201 CTGGT GATTA TTACG AGGAC AGTTA TGAAG ATATT TCAGC ATACT TGCTG

2251 AGTAA AAACA ATGCC ATTGA ACCAA GAAGC TTCTC TCAAA ACGGC GCGCC

2301 AGGTA CCTCA GAGTC TGCTA CCCCC GAGTC AGGGC CAGGA TCAGA GCCAG

2351 CCACC TCCGG GTCTG AGACA CCCGG GACTT CCGAG AGTGC CACCC CTGAG

2401 TCCGG ACCCG GGTCC GAGCC CGCCA CTTCC GGCTC CGAAA CTCCC GGCAC

2451 AAGCG AGAGC GCTAC CCCAG AGTCA GGACC AGGAA CATCT ACAGA GCCCT

2501 CTGAA GGCTC CGCTC CAGGG TCCCC AGCCG GCAGT CCCAC TAGCA CCGAG

2551 GAGGG AACCT CTGAA AGCGC CACAC CCGAA TCAGG GCCAG GGTCT GAGCC

2601 TGCTA CCAGC GGCAG CGAGA CACCA GGCAC CTCTG AGTCC GCCAC ACCAG

2651 AGTCC GGACC CGGAT CTCCC GCTGG GAGCC CCACC TCCAC TGAGG AGGGA

2701 TCTCC TGCTG GCTCT CCAAC ATCTA CTGAG GAAGG TACCT CAACC GAGCC

2751 ATCCG AGGGA TCAGC TCCCG GCACC TCAGA GTCGG CAACC CCGGA GTCTG

2801 GACCC GGAAC TTCCG AAAGT GCCAC ACCAG AGTCC GGTCC CGGGA CTTCA

2851 GAATC AGCAA CACCC GAGTC CGGCC CTGGG TCTGA ACCCG CCACA AGTGG

2901 TAGTG AGACA CCAGG ATCAG AACCT GCTAC CTCAG GGTCA GAGAC ACCCG

2951 GATCT CCGGC AGGCT CACCA ACCTC CACTG AGGAG GGCAC CAGCA CAGAA

3001 CCAAG CGAGG GCTCC GCACC CGGAA CAAGC ACTGA ACCCA GTGAG GGTTC

3051 AGCAC CCGGC TCTGA GCCGG CCACA AGTGG CAGTG AGACA CCCGG CACTT

3101 CAGAG AGTGC CACCC CCGAG AGTGG CCCAG GCACT AGTAC CGAGC CCTCT

3151 GAAGG CAGTG CGCCA GCCTC GAGCC CACCA GTCTT GAAAC GCCAT CAAGC

3201 TGAAA TAACT CGTAC TACTC TTCAG TCAGA TCAAG AGGAA ATCGA TTATG

3251 ATGAT ACCAT ATCAG TTGAA ATGAA GAAGG AAGAT TTTGA CATTT ATGAT

3301 GAGGA TGAAA ATCAG AGCCC CCGCA GCTTT CAAAA GAAAA CACGA CACTA

3351 TTTTA TTGCT GCAGT GGAGA GGCTC TGGGA TTATG GGATG AGTAG CTCCC

3401 CACAT GTTCT AAGAA ACAGG GCTCA GAGTG GCAGT GTCCC TCAGT TCAAG

3451 AAAGT TGTTT TCCAG GAATT TACTG ATGGC TCCTT TACTC AGCCC TTATA

3501 CCGTG GAGAA CTAAA TGAAC ATTTG GGACT CCTGG GGCCA TATAT AAGAG

3551 CAGAA GTTGA AGATA ATATC ATGGT AACTT TCAGA AATCA GGCCT CTCGT

3601 CCCTA TTCCT TCTAT TCTAG CCTTA TTTCT TATGA GGAAG ATCAG AGGCA

3651 AGGAG CAGAA CCTAG AAAAA ACTTT GTCAA GCCTA ATGAA ACCAA AACTT

3701 ACTTT TGGAA AGTGC AACAT CATAT GGCAC CCACT AAAGA TGAGT TTGAC

3751 TGCAA AGCCT GGGCT TATTT CTCTG ATGTT GACCT GGAAA AAGAT GTGCA

3801 CTCAG GCCTG ATTGG ACCCC TTCTG GTCTG CCACA CTAAC ACACT GAACC

3851 CTGCT CATGG GAGAC AAGTG ACAGT ACAGG AATTT GCTCT GTTTT TCACC

3901 ATCTT TGATG AGACC AAAAG CTGGT ACTTC ACTGA AAATA TGGAA AGAAA

3951 CTGCA GGGCT CCCTG CAATA TCCAG ATGGA AGATC CCACT TTTAA AGAGA

4001 ATTAT CGCTT CCATG CAATC AATGG CTACA TAATG GATAC ACTAC CTGGC

4051 TTAGT AATGG CTCAG GATCA AAGGA TTCGA TGGTA TCTGC TCAGC ATGGG

4101 CAGCA ATGAA AACAT CCATT CTATT CATTT CAGTG GACAT GTGTT CACTG

4151 TACGA AAAAA AGAGG AGTAT AAAAT GGCAC TGTAC AATCT CTATC CAGGT

4201 GTTTT TGAGA CAGTG GAAAT GTTAC CATCC AAAGC TGGAA TTTGG CGGGT

4251 GGAAT GCCTT ATTGG CGAGC ATCTA CATGC TGGGA TGAGC ACACT TTTTC

4301 TGGTG TACAG CAATA AGTGT CAGAC TCCCC TGGGA ATGGC TTCTG GACAC

4351 ATTAG AGATT TTCAG ATTAC AGCTT CAGGA CAATA TGGAC AGTGG GCCCC

4401 AAAGC TGGCC AGACT TCATT ATTCC GGATC AATCA ATGCC TGGAG CACCA

4451 AGGAG CCCTT TTCTT GGATC AAGGT GGATC TGTTG GCACC AATGA TTATT

4501 CACGG CATCA AGACC CAGGG TGCCC GTCAG AAGTT CTCCA GCCTC TACAT

4551 CTCTC AGTTT ATCAT CATGT ATAGT CTTGA TGGGA AGAAG TGGCA GACTT

4601 ATCGA GGAAA TTCCA CTGGA ACCTT AATGG TCTTC TTTGG CAATG TGGAT

4651 TCATC TGGGA TAAAA CACAA TATTT TTAAC CCTCC AATTA TTGCT CGATA

4701 CATCC GTTTG CACCC AACTC ATTAT AGCAT TCGCA GCACT CTTCG CATGG

4751 AGTTG ATGGG CTGTG ATTTA AATAG TTGCA GCATG CCATT GGGAA TGGAG

4801 AGTAA AGCAA TATCA GATGC ACAGA TTACT GCTTC ATCCT ACTTT ACCAA

4851 TATGT TTGCC ACCTG GTCTC CTTCA AAAGC TCGAC TTCAC CTCCA AGGGA

4901 GGAGT AATGC CTGGA GACCT CAGGT GAATA ATCCA AAAGA GTGGC TGCAA

4951 GTGGA CTTCC AGAAG ACAAT GAAAG TCACA GGAGT AACTA CTCAG GGAGT

5001 AAAAT CTCTG CTTAC CAGCA TGTAT GTGAA GGAGT TCCTC ATCTC CAGCA

5051 GTCAA GATGG CCATC AGTGG ACTCT CTTTT TTCAG AATGG CAAAG TAAAG

5101 GTTTT TCAGG GAAAT CAAGA CTCCT TCACA CCTGT GGTGA ACTCT CTAGA

5151 CCCAC CGTTA CTGAC TCGCT ACCTT CGAAT TCACC CCCAG AGTTG GGTGC

5201 ACCAG ATTGC CCTGA GGATG GAGGT TCTGG GCTGC GAGGC ACAGG ACCTC

5251 TACGA CAAAA CTCAC ACATG CCCAC CGTGC CCAGC TCCAG AACTC CTGGG

5301 CGGAC CGTCA GTCTT CCTCT TCCCC CCAAA ACCCA AGGAC ACCCT CATGA

5351 TCTCC CGGAC CCCTG AGGTC ACATG CGTGG TGGTG GACGT GAGCC ACGAA

5401 GACCC TGAGG TCAAG TTCAA CTGGT ACGTG GACGG CGTGG AGGTG CATAA

5451 TGCCA AGACA AAGCC GCGGG AGGAG CAGTA CAACA GCACG TACCG TGTGG

5501 TCAGC GTCCT CACCG TCCTG CACCA GGACT GGCTG AATGG CAAGG AGTAC

5551 AAGTG CAAGG TCTCC AACAA AGCCC TCCCA GCCCC CATCG AGAAA ACCAT

5601 CTCCA AAGCC AAAGG GCAGC CCCGA GAACC ACAGG TGTAC ACCCT GCCCC

5651 CATCC CGGGA TGAGC TGACC AAGAA CCAGG TCAGC CTGAC CTGCC TGGTC

5701 AAAGG CTTCT ATCCC AGCGA CATCG CCGTG GAGTG GGAGA GCAAT GGGCA

5751 GCCGG AGAAC AACTA CAAGA CCACG CCTCC CGTGT TGGAC TCCGA CGGCT

5801 CCTTC TTCCT CTACA GCAAG CTCAC CGTGG ACAAG AGCAG GTGGC AGCAG

5851 GGGAA CGTCT TCTCA TGCTC CGTGA TGCAT GAGGC TCTGC ACAAC CACTA

5901 CACGC AGAAG AGCCT CTCCC TGTCT CCGGG TAAAT GA

Последовательность белка FVIII 169 (SEQ ID NO: 70)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNGAPGTS ESATPESGPG SEPATSGSET PGTSESATPE

801 SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG SPAGSPTSTE

851 EGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGSP AGSPTSTEEG

901 SPAGSPTSTE EGTSTEPSEG SAPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGTS

951 ESATPESGPG SEPATSGSET PGSEPATSGS ETPGSPAGSP TSTEEGTSTE

1001 PSEGSAPGTS TEPSEGSAPG SEPATSGSET PGTSESATPE SGPGTSTEPS

1051 EGSAPASSPP VLKRHQAEIT RTTLQSDQEE IDYDDTISVE MKKEDFDIYD

1101 EDENQSPRSF QKKTRHYFIA AVERLWDYGM SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK

1151 KVVFQEFTDG SFTQPLYRGE LNEHLGLLGP YIRAEVEDNI MVTFRNQASR

1201 PYSFYSSLIS YEEDQRQGAE PRKNFVKPNE TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD

1251 CKAWAYFSDV DLEKDVHSGL IGPLLVCHTN TLNPAHGRQV TVQEFALFFT

1301 IFDETKSWYF TENMERNCRA PCNIQMEDPT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG

1351 LVMAQDQRIR WYLLSMGSNE NIHSIHFSGH VFTVRKKEEY KMALYNLYPG

1401 VFETVEMLPS KAGIWRVECL IGEHLHAGMS TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

1451 IRDFQITASG QYGQWAPKLA RLHYSGSINA WSTKEPFSWI KVDLLAPMII

1501 HGIKTQGARQ KFSSLYISQF IIMYSLDGKK WQTYRGNSTG TLMVFFGNVD

1551 SSGIKHNIFN PPIIARYIRL HPTHYSIRST LRMELMGCDL NSCSMPLGME

1601 SKAISDAQIT ASSYFTNMFA TWSPSKARLH LQGRSNAWRP QVNNPKEWLQ

1651 VDFQKTMKVT GVTTQGVKSL LTSMYVKEFL ISSSQDGHQW TLFFQNGKVK

1701 VFQGNQDSFT PVVNSLDPPL LTRYLRIHPQ SWVHQIALRM EVLGCEAQDL

1751 YDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE

1801 DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY

1851 KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV

1901 KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ

1951 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK*

Нуклеотидная последовательность FVIII 263 (с тройной мутацией IHH) (SEQ ID NO: 156)

1 ATGCA AATAG AGCTC TCCAC CTGCT TCTTT CTGTG CCTTT TGCGA TTCTG

51 CTTTA GTGCC ACCAG AAGAT ACTAC CTGGG TGCAG TGGAA CTGTC ATGGG

101 ACTAT ATGCA AGGCG CGCCA ACATC AGAGA GCGCC ACCCC TGAAA GTGGT

151 CCCGG GAGCG AGCCA GCCAC ATCTG GGTCG GAAAC GCCAG GCACA AGTGA

201 GTCTG CAACT CCCGA GTCCG GACCT GGCTC CGAGC CTGCC ACTAG CGGCT

251 CCGAG ACTCC GGGAA CTTCC GAGAG CGCTA CACCA GAAAG CGGAC CCGGA

301 ACCAG TACCG AACCT AGCGA GGGCT CTGCT CCGGG CAGCC CAGCC GGCTC

351 TCCTA CATCC ACGGA GGAGG GCACT TCCGA ATCCG CCACC CCGGA GTCAG

401 GGCCA GGATC TGAAC CCGCT ACCTC AGGCA GTGAG ACGCC AGGAA CGAGC

451 GAGTC CGCTA CACCG GAGAG TGGGC CAGGG AGCCC TGCTG GATCT CCTAC

501 GTCCA CTGAG GAAGG GTCAC CAGCG GGCTC GCCCA CCAGC ACTGA AGAAG

551 GTGCC TCGAG CAGTG ATCTC GGTGA GCTGC CTGTG GACGC AAGAT TTCCT

601 CCTAG AGTGC CAAAA TCTTT TCCAT TCAAC ACCTC AGTCG TGTAC AAAAA

651 GACTC TGTTT GTAGA ATTCA CGGAT CACCT TTTCA ACATC GCTAA GCCAA

701 GGCCA CCCTG GATGG GTCTG CTAGG TCCTA CCATC CAGGC TGAGG TTTAT

751 GATAC AGTGG TCATT ACACT TAAGA ACATG GCTTC CCATC CTGTC AGTCT

801 TCATG CTGTT GGTGT ATCCT ACTGG AAAGC TTCTG AGGGA GCTGA ATATG

851 ATGAT CAGAC CAGTC AAAGG GAGAA AGAAG ATGAT AAAGT CTTCC CTGGT

901 GGAAG CCATA CATAT GTCTG GCAGG TCCTG AAAGA GAATG GTCCA ATGGC

951 CTCTG ACCCA CTGTG CCTTA CCTAC TCATA TCTTT CTCAT GTGGA CCTGG

1001 TAAAA GACTT GAATT CAGGC CTCAT TGGAG CCCTA CTAGT ATGTA GAGAA

1051 GGGAG TCTGG CCAAG GAAAA GACAC AGACC TTGCA CAAAT TTATA CTACT

1101 TTTTG CTGTA TTTGA TGAAG GGAAA AGTTG GCACT CAGAA ACAAA GAACT

1151 CCTTG ATGCA GGATA GGGAT GCTGC ATCTG CTCGG GCCTG GCCTA AAATG

1201 CACAC AGTCA ATGGT TATGT AAACA GGTCT CTGCC AGGTC TGATT GGATG

1251 CCACA GGAAA TCAGT CTATT GGCAT GTGAT TGGAA TGGGC ACCAC TCCTG

1301 AAGTG CACTC AATAT TCCTC GAAGG TCACA CATTT CTTGT GAGGA ACCAT

1351 CGCCA GGCTA GCTTG GAAAT CTCGC CAATA ACTTT CCTTA CTGCT CAAAC

1401 ACTCT TGATG GACCT TGGAC AGTTT CTACT GTTTT GTCAT ATCTC TTCCC

1451 ACCAA CATGA TGGCA TGGAA GCTTA TGTCA AAGTA GACAG CTGTC CAGAG

1501 GAACC CCAAC TACGA ATGAA AAATA ATGAA GAAGC GGAAG ACTAT GATGA

1551 TGATC TTACT GATTC TGAAA TGGAT GTGGT CAGGT TTGAT GATGA CAACT

1601 CTCCT TCCTT TATCC AAATT CGCTC AGTTG CCAAG AAGCA TCCTA AAACT

1651 TGGGT ACATT ACATT GCTGC TGAAG AGGAG GACTG GGACT ATGCT CCCTT

1701 AGTCC TCGCC CCCGA TGACA GAAGT TATAA AAGTC AATAT TTGAA CAATG

1751 GCCCT CAGCG GATTG GTAGG AAGTA CAAAA AAGTC CGATT TATGG CATAC

1801 ACAGA TGAAA CCTTT AAGAC TCGTG AAGCT ATTCA GCATG AATCA GGAAT

1851 CTTGG GACCT TTACT TTATG GGGAA GTTGG AGACA CACTG TTGAT TATAT

1901 TTAAG AATCA AGCAA GCAGA CCATA TAACA TCTAC CCTCA CGGAA TCACT

1951 GATGT CCGTC CTTTG TATTC AAGGA GATTA CCAAA AGGTG TAAAA CATTT

2001 GAAGG ATTTT CCAAT TCTGC CAGGA GAAAT ATTCA AATAT AAATG GACAG

2051 TGACT GTAGA AGATG GGCCA ACTAA ATCAG ATCCT CGGTG CCTGA CCCGC

2101 TATTA CTCTA GTTTC GTTAA TATGG AGAGA GATCT AGCTT CAGGA CTCAT

2151 TGGCC CTCTC CTCAT CTGCT ACAAA GAATC TGTAG ATCAA AGAGG AAACC

2201 AGATA ATGTC AGACA AGAGG AATGT CATCC TGTTT TCTGT ATTTG ATGAG

2251 AACCG AAGCT GGTAC CTCAC AGAGA ATATA CAACG CTTTC TCCCC AATCC

2301 AGCTG GAGTG CAGCT TGAGG ATCCA GAGTT CCAAG CCTCC AACAT CATGC

2351 ACAGC ATCAA TGGCT ATGTT TTTGA TAGTT TGCAG TTGTC AGTTT GTTTG

2401 CATGA GGTGG CATAC TGGTA CATTC TAAGC ATTGG AGCAC AGACT GACTT

2451 CCTTT CTGTC TTCTT CTCTG GATAT ACCTT CAAAC ACAAA ATGGT CTATG

2501 AAGAC ACACT CACCC TATTC CCATT CTCAG GAGAA ACTGT CTTCA TGTCG

2551 ATGGA AAACC CAGGT CTATG GATTC TGGGG TGCCA CAACT CAGAC TTTCG

2601 GAACA GAGGC ATGAC CGCCT TACTG AAGGT TTCTA GTTGT GACAA GAACA

2651 CTGGT GATTA TTACG AGGAC AGTTA TGAAG ATATT TCAGC ATACT TGCTG

2701 AGTAA AAACA ATGCC ATTGA ACCAA GAAGC TTCTC TCAAA ACGGC GCGCC

2751 AGGTA CCTCA GAGTC TGCTA CCCCC GAGTC AGGGC CAGGA TCAGA GCCAG

2801 CCACC TCCGG GTCTG AGACA CCCGG GACTT CCGAG AGTGC CACCC CTGAG

2851 TCCGG ACCCG GGTCC GAGCC CGCCA CTTCC GGCTC CGAAA CTCCC GGCAC

2901 AAGCG AGAGC GCTAC CCCAG AGTCA GGACC AGGAA CATCT ACAGA GCCCT

2951 CTGAA GGCTC CGCTC CAGGG TCCCC AGCCG GCAGT CCCAC TAGCA CCGAG

3001 GAGGG AACCT CTGAA AGCGC CACAC CCGAA TCAGG GCCAG GGTCT GAGCC

3051 TGCTA CCAGC GGCAG CGAGA CACCA GGCAC CTCTG AGTCC GCCAC ACCAG

3101 AGTCC GGACC CGGAT CTCCC GCTGG GAGCC CCACC TCCAC TGAGG AGGGA

3151 TCTCC TGCTG GCTCT CCAAC ATCTA CTGAG GAAGG TACCT CAACC GAGCC

3201 ATCCG AGGGA TCAGC TCCCG GCACC TCAGA GTCGG CAACC CCGGA GTCTG

3251 GACCC GGAAC TTCCG AAAGT GCCAC ACCAG AGTCC GGTCC CGGGA CTTCA

3301 GAATC AGCAA CACCC GAGTC CGGCC CTGGG TCTGA ACCCG CCACA AGTGG

3351 TAGTG AGACA CCAGG ATCAG AACCT GCTAC CTCAG GGTCA GAGAC ACCCG

3401 GATCT CCGGC AGGCT CACCA ACCTC CACTG AGGAG GGCAC CAGCA CAGAA

3451 CCAAG CGAGG GCTCC GCACC CGGAA CAAGC ACTGA ACCCA GTGAG GGTTC

3501 AGCAC CCGGC TCTGA GCCGG CCACA AGTGG CAGTG AGACA CCCGG CACTT

3551 CAGAG AGTGC CACCC CCGAG AGTGG CCCAG GCACT AGTAC CGAGC CCTCT

3601 GAAGG CAGTG CGCCA GCCTC GAGCC CACCA GTCTT GAAAC GCCAT CAAGC

3651 TGAAA TAACT CGTAC TACTC TTCAG TCAGA TCAAG AGGAA ATCGA TTATG

3701 ATGAT ACCAT ATCAG TTGAA ATGAA GAAGG AAGAT TTTGA CATTT ATGAT

3751 GAGGA TGAAA ATCAG AGCCC CCGCA GCTTT CAAAA GAAAA CACGA CACTA

3801 TTTTA TTGCT GCAGT GGAGA GGCTC TGGGA TTATG GGATG AGTAG CTCCC

3851 CACAT GTTCT AAGAA ACAGG GCTCA GAGTG GCAGT GTCCC TCAGT TCAAG

3901 AAAGT TGTTT TCCAG GAATT TACTG ATGGC TCCTT TACTC AGCCC TTATA

3951 CCGTG GAGAA CTAAA TGAAC ATTTG GGACT CCTGG GGCCA TATAT AAGAG

4001 CAGAA GTTGA AGATA ATATC ATGGT AACTT TCAGA AATCA GGCCT CTCGT

4051 CCCTA TTCCT TCTAT TCTAG CCTTA TTTCT TATGA GGAAG ATCAG AGGCA

4101 AGGAG CAGAA CCTAG AAAAA ACTTT GTCAA GCCTA ATGAA ACCAA AACTT

4151 ACTTT TGGAA AGTGC AACAT CATAT GGCAC CCACT AAAGA TGAGT TTGAC

4201 TGCAA AGCCT GGGCT TATTT CTCTG ATGTT GACCT GGAAA AAGAT GTGCA

4251 CTCAG GCCTG ATTGG ACCCC TTCTG GTCTG CCACA CTAAC ACACT GAACC

4301 CTGCT CATGG GAGAC AAGTG ACAGT ACAGG AATTT GCTCT GTTTT TCACC

4351 ATCTT TGATG AGACC AAAAG CTGGT ACTTC ACTGA AAATA TGGAA AGAAA

4401 CTGCA GGGCT CCCTG CAATA TCCAG ATGGA AGATC CCACT TTTAA AGAGA

4451 ATTAT CGCTT CCATG CAATC AATGG CTACA TAATG GATAC ACTAC CTGGC

4501 TTAGT AATGG CTCAG GATCA AAGGA TTCGA TGGTA TCTGC TCAGC ATGGG

4551 CAGCA ATGAA AACAT CCATT CTATT CATTT CAGTG GACAT GTGTT CACTG

4601 TACGA AAAAA AGAGG AGTAT AAAAT GGCAC TGTAC AATCT CTATC CAGGT

4651 GTTTT TGAGA CAGTG GAAAT GTTAC CATCC AAAGC TGGAA TTTGG CGGGT

4701 GGAAT GCCTT ATTGG CGAGC ATCTA CATGC TGGGA TGAGC ACACT TTTTC

4751 TGGTG TACAG CAATA AGTGT CAGAC TCCCC TGGGA ATGGC TTCTG GACAC

4801 ATTAG AGATT TTCAG ATTAC AGCTT CAGGA CAATA TGGAC AGTGG GCCCC

4851 AAAGC TGGCC AGACT TCATT ATTCC GGATC AATCA ATGCC TGGAG CACCA

4901 AGGAG CCCTT TTCTT GGATC AAGGT GGATC TGTTG GCACC AATGA TTATT

4951 CACGG CATCA AGACC CAGGG TGCCC GTCAG AAGTT CTCCA GCCTC TACAT

5001 CTCTC AGTTT ATCAT CATGT ATAGT CTTGA TGGGA AGAAG TGGCA GACTT

5051 ATCGA GGAAA TTCCA CTGGA ACCTT AATGG TCTTC TTTGG CAATG TGGAT

5101 TCATC TGGGA TAAAA CACAA TATTT TTAAC CCTCC AATTA TTGCT CGATA

5151 CATCC GTTTG CACCC AACTC ATTAT AGCAT TCGCA GCACT CTTCG CATGG

5201 AGTTG ATGGG CTGTG ATTTA AATAG TTGCA GCATG CCATT GGGAA TGGAG

5251 AGTAA AGCAA TATCA GATGC ACAGA TTACT GCTTC ATCCT ACTTT ACCAA

5301 TATGT TTGCC ACCTG GTCTC CTTCA AAAGC TCGAC TTCAC CTCCA AGGGA

5351 GGAGT AATGC CTGGA GACCT CAGGT GAATA ATCCA AAAGA GTGGC TGCAA

5401 GTGGA CTTCC AGAAG ACAAT GAAAG TCACA GGAGT AACTA CTCAG GGAGT

5451 AAAAT CTCTG CTTAC CAGCA TGTAT GTGAA GGAGT TCCTC ATCTC CAGCA

5501 GTCAA GATGG CCATC AGTGG ACTCT CTTTT TTCAG AATGG CAAAG TAAAG

5551 GTTTT TCAGG GAAAT CAAGA CTCCT TCACA CCTGT GGTGA ACTCT CTAGA

5601 CCCAC CGTTA CTGAC TCGCT ACCTT CGAAT TCACC CCCAG AGTTG GGTGC

5651 ACCAG ATTGC CCTGA GGATG GAGGT TCTGG GCTGC GAGGC ACAGG ACCTC

5701 TACGA CAAAA CTCAC ACATG CCCAC CGTGC CCAGC TCCAG AACTC CTGGG

5751 CGGAC CGTCA GTCTT CCTCT TCCCC CCAAA ACCCA AGGAC ACCCT CATGG

5801 CCTCC CGGAC CCCTG AGGTC ACATG CGTGG TGGTG GACGT GAGCC ACGAA

5851 GACCC TGAGG TCAAG TTCAA CTGGT ACGTG GACGG CGTGG AGGTG CATAA

5901 TGCCA AGACA AAGCC GCGGG AGGAG CAGTA CAACA GCACG TACCG TGTGG

5951 TCAGC GTCCT CACCG TCCTG GCCCA GGACT GGCTG AATGG CAAGG AGTAC

6001 AAGTG CAAGG TCTCC AACAA AGCCC TCCCA GCCCC CATCG AGAAA ACCAT

6051 CTCCA AAGCC AAAGG GCAGC CCCGA GAACC ACAGG TGTAC ACCCT GCCCC

6101 CATCC CGCGA TGAGC TGACC AAGAA CCAGG TCAGC CTGAC CTGCC TGGTC

6151 AAAGG CTTCT ATCCC AGCGA CATCG CCGTG GAGTG GGAGA GCAAT GGGCA

6201 GCCGG AGAAC AACTA CAAGA CCACG CCTCC CGTGT TGGAC TCCGA CGGCT

6251 CCTTC TTCCT CTACA GCAAG CTCAC CGTGG ACAAG AGCAG GTGGC AGCAG

6301 GGGAA CGTCT TCTCA TGCTC CGTGA TGCAT GAGGC TCTGC ACAAC GCCTA

6351 CACGC AGAAG AGCCT CTCCC TGTCT CCGGG TAAAT GA

Последовательность белка FVIII 263 (с тройной мутацией IHH) (SEQ ID NO: 157)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP TSESATPESG

51 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG

101 TSTEPSEGSA PGSPAGSPTS TEEGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS

151 ESATPESGPG SPAGSPTSTE EGSPAGSPTS TEEGASSSDL GELPVDARFP

201 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

251 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

301 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

351 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

401 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

451 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

501 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

551 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

601 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

651 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

701 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

751 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

801 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

851 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

901 SKNNAIEPRS FSQNGAPGTS ESATPESGPG SEPATSGSET PGTSESATPE

951 SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG SPAGSPTSTE

1001 EGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGSP AGSPTSTEEG

1051 SPAGSPTSTE EGTSTEPSEG SAPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGTS

1101 ESATPESGPG SEPATSGSET PGSEPATSGS ETPGSPAGSP TSTEEGTSTE

1151 PSEGSAPGTS TEPSEGSAPG SEPATSGSET PGTSESATPE SGPGTSTEPS

1201 EGSAPASSPP VLKRHQAEIT RTTLQSDQEE IDYDDTISVE MKKEDFDIYD

1251 EDENQSPRSF QKKTRHYFIA AVERLWDYGM SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK

1301 KVVFQEFTDG SFTQPLYRGE LNEHLGLLGP YIRAEVEDNI MVTFRNQASR

1351 PYSFYSSLIS YEEDQRQGAE PRKNFVKPNE TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD

1401 CKAWAYFSDV DLEKDVHSGL IGPLLVCHTN TLNPAHGRQV TVQEFALFFT

1451 IFDETKSWYF TENMERNCRA PCNIQMEDPT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG

1501 LVMAQDQRIR WYLLSMGSNE NIHSIHFSGH VFTVRKKEEY KMALYNLYPG

1551 VFETVEMLPS KAGIWRVECL IGEHLHAGMS TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

1601 IRDFQITASG QYGQWAPKLA RLHYSGSINA WSTKEPFSWI KVDLLAPMII

1651 HGIKTQGARQ KFSSLYISQF IIMYSLDGKK WQTYRGNSTG TLMVFFGNVD

1701 SSGIKHNIFN PPIIARYIRL HPTHYSIRST LRMELMGCDL NSCSMPLGME

1751 SKAISDAQIT ASSYFTNMFA TWSPSKARLH LQGRSNAWRP QVNNPKEWLQ

1801 VDFQKTMKVT GVTTQGVKSL LTSMYVKEFL ISSSQDGHQW TLFFQNGKVK

1851 VFQGNQDSFT PVVNSLDPPL LTRYLRIHPQ SWVHQIALRM EVLGCEAQDL

1901 YDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMASRTPEV TCVVVDVSHE

1951 DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL AQDWLNGKEY

2001 KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV

2051 KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ

2101 GNVFSCSVMH EALHNAYTQK SLSLSPGK*

Нуклеотидная последовательность FVIII 282 (SEQ ID NO: 158)

1 ATGCA AATAG AGCTC TCCAC CTGCT TCTTT CTGTG CCTTT TGCGA TTCTG

51 CTTTA GTGCC ACCAG AAGAT ACTAC CTGGG TGCAG TGGAA CTGTC ATGGG

101 ACTAT ATGCA AAGTG ATCTC GGTGA GCTGC CTGTG GACGC AAGAT TTCCT

151 CCTAG AGTGC CAAAA TCTTT TCCAT TCAAC ACCTC AGTCG TGTAC AAAAA

201 GACTC TGTTT GTAGA ATTCA CGGAT CACCT TTTCA ACATC GCTAA GCCAA

251 GGCCA CCCTG GATGG GTCTG CTAGG TCCTA CCATC CAGGC TGAGG TTTAT

301 GATAC AGTGG TCATT ACACT TAAGA ACATG GCTTC CCATC CTGTC AGTCT

351 TCATG CTGTT GGTGT ATCCT ACTGG AAAGC TTCTG AGGGA GCTGA ATATG

401 ATGAT CAGAC CAGTC AAAGG GAGAA AGAAG ATGAT AAAGT CTTCC CTGGT

451 GGAAG CCATA CATAT GTCTG GCAGG TCCTG AAAGA GAATG GTCCA ATGGC

501 CTCTG ACCCA CTGTG CCTTA CCTAC TCATA TCTTT CTCAT GTGGA CCTGG

551 TAAAA GACTT GAATT CAGGC CTCAT TGGAG CCCTA CTAGT ATGTA GAGAA

601 GGGAG TCTGG CCAAG GAAAA GACAC AGACC TTGCA CAAAT TTATA CTACT

651 TTTTG CTGTA TTTGA TGAAG GGAAA AGTTG GCACT CAGAA ACAAA GAACT

701 CCTTG ATGCA GGATA GGGAT GCTGC ATCTG CTCGG GCCTG GCCTA AAATG

751 CACAC AGTCA ATGGT TATGT AAACA GGTCT CTGCC AGGTC TGATT GGATG

801 CCACA GGAAA TCAGT CTATT GGCAT GTGAT TGGAA TGGGC ACCAC TCCTG

851 AAGTG CACTC AATAT TCCTC GAAGG TCACA CATTT CTTGT GAGGA ACCAT

901 CGCCA GGCTA GCTTG GAAAT CTCGC CAATA ACTTT CCTTA CTGCT CAAAC

951 ACTCT TGATG GACCT TGGAC AGTTT CTACT GTTTT GTCAT ATCTC TTCCC

1001 ACCAA CATGA TGGCA TGGAA GCTTA TGTCA AAGTA GACAG CTGTC CAGAG

1051 GAACC CCAAC TACGA ATGAA AAATA ATGAA GAAGC GGAAG ACTAT GATGA

1101 TGATC TTACT GATTC TGAAA TGGAT GTGGT CAGGT TTGAT GATGA CAACT

1151 CTCCT TCCTT TATCC AAATT CGCTC AGTTG CCAAG AAGCA TCCTA AAACT

1201 TGGGT ACATT ACATT GCTGC TGAAG AGGAG GACTG GGACT ATGCT CCCTT

1251 AGTCC TCGCC CCCGA TGACA GAAGT TATAA AAGTC AATAT TTGAA CAATG

1301 GCCCT CAGCG GATTG GTAGG AAGTA CAAAA AAGTC CGATT TATGG CATAC

1351 ACAGA TGAAA CCTTT AAGAC TCGTG AAGCT ATTCA GCATG AATCA GGAAT

1401 CTTGG GACCT TTACT TTATG GGGAA GTTGG AGACA CACTG TTGAT TATAT

1451 TTAAG AATCA AGCAA GCAGA CCATA TAACA TCTAC CCTCA CGGAA TCACT

1501 GATGT CCGTC CTTTG TATTC AAGGA GATTA CCAAA AGGTG TAAAA CATTT

1551 GAAGG ATTTT CCAAT TCTGC CAGGA GAAAT ATTCA AATAT AAATG GACAG

1601 TGACT GTAGA AGATG GGCCA ACTAA ATCAG ATCCT CGGTG CCTGA CCCGC

1651 TATTA CTCTA GTTTC GTTAA TATGG AGAGA GATCT AGCTT CAGGA CTCAT

1701 TGGCC CTCTC CTCAT CTGCT ACAAA GAATC TGTAG ATCAA AGAGG AAACC

1751 AGATA ATGTC AGACA AGAGG AATGT CATCC TGTTT TCTGT ATTTG ATGAG

1801 AACCG AAGCT GGTAC CTCAC AGAGA ATATA CAACG CTTTC TCCCC AATCC

1851 AGCTG GAGTG CAGCT TGAGG ATCCA GAGTT CCAAG CCTCC AACAT CATGC

1901 ACAGC ATCAA TGGCT ATGTT TTTGA TAGTT TGCAG TTGTC AGTTT GTTTG

1951 CATGA GGTGG CATAC TGGTA CATTC TAAGC ATTGG AGCAC AGACT GACTT

2001 CCTTT CTGTC TTCTT CTCTG GATAT ACCTT CAAAC ACAAA ATGGT CTATG

2051 AAGAC ACACT CACCC TATTC CCATT CTCAG GAGAA ACTGT CTTCA TGTCG

2101 ATGGA AAACC CAGGT CTATG GATTC TGGGG TGCCA CAACT CAGAC TTTCG

2151 GAACA GAGGC ATGAC CGCCT TACTG AAGGT TTCTA GTTGT GACAA GAACA

2201 CTGGT GATTA TTACG AGGAC AGTTA TGAAG ATATT TCAGC ATACT TGCTG

2251 AGTAA AAACA ATGCC ATTGA ACCAA GAAGC TTCTC TCAAA ACGGC GCGCC

2301 AACAT CAGAG AGCGC CACCC CTGAA AGTGG TCCCG GGAGC GAGCC AGCCA

2351 CATCT GGGTC GGAAA CGCCA GGCAC AAGTG AGTCT GCAAC TCCCG AGTCC

2401 GGACC TGGCT CCGAG CCTGC CACTA GCGGC TCCGA GACTC CGGGA ACTTC

2451 CGAGA GCGCT ACACC AGAAA GCGGA CCCGG AACCA GTACC GAACC TAGCG

2501 AGGGC TCTGC TCCGG GCAGC CCAGC CGGCT CTCCT ACATC CACGG AGGAG

2551 GGCAC TTCCG AATCC GCCAC CCCGG AGTCA GGGCC AGGAT CTGAA CCCGC

2601 TACCT CAGGC AGTGA GACGC CAGGA ACGAG CGAGT CCGCT ACACC GGAGA

2651 GTGGG CCAGG GAGCC CTGCT GGATC TCCTA CGTCC ACTGA GGAAG GGTCA

2701 CCAGC GGGCT CGCCC ACCAG CACTG AAGAA GGTGC CTCGA GCCCA CCAGT

2751 CTTGA AACGC CATCA AGCTG AAATA ACTCG TACTA CTCTT CAGTC AGATC

2801 AAGAG GAAAT CGATT ATGAT GATAC CATAT CAGTT GAAAT GAAGA AGGAA

2851 GATTT TGACA TTTAT GATGA GGATG AAAAT CAGAG CCCCC GCAGC TTTCA

2901 AAAGA AAACA CGACA CTATT TTATT GCTGC AGTGG AGAGG CTCTG GGATT

2951 ATGGG ATGAG TAGCT CCCCA CATGT TCTAA GAAAC AGGGC TCAGA GTGGC

3001 AGTGT CCCTC AGTTC AAGAA AGTTG TTTTC CAGGA ATTTA CTGAT GGCTC

3051 CTTTA CTCAG CCCTT ATACC GTGGA GAACT AAATG AACAT TTGGG ACTCC

3101 TGGGG CCATA TATAA GAGCA GAAGT TGAAG ATAAT ATCAT GGTAA CTTTC

3151 AGAAA TCAGG CCTCT CGTCC CTATT CCTTC TATTC TAGCC TTATT TCTTA

3201 TGAGG AAGAT CAGAG GCAAG GAGCA GAACC TAGAA AAAAC TTTGT CAAGC

3251 CTAAT GAAAC CAAAA CTTAC TTTTG GAAAG TGCAA CATCA TATGG CACCC

3301 ACTAA AGATG AGTTT GACTG CAAAG CCTGG GCTTA TTTCT CTGAT GTTGA

3351 CCTGG AAAAA GATGT GCACT CAGGC CTGAT TGGAC CCCTT CTGGT CTGCC

3401 ACACT AACAC ACTGA ACCCT GCTCA TGGGA GACAA GTGAC AGTAC AGGAA

3451 TTTGC TCTGT TTTTC ACCAT CTTTG ATGAG ACCAA AAGCT GGTAC TTCAC

3501 TGAAA ATATG GAAAG AAACT GCAGG GCTCC CTGCA ATATC CAGAT GGAAG

3551 ATCCC ACTTT TAAAG AGAAT TATCG CTTCC ATGCA ATCAA TGGCT ACATA

3601 ATGGA TACAC TACCT GGCTT AGTAA TGGCT CAGGA TCAAA GGATT CGATG

3651 GTATC TGCTC AGCAT GGGCA GCAAT GAAAA CATCC ATTCT ATTCA TTTCA

3701 GTGGA CATGT GTTCA CTGTA CGAAA AAAAG AGGAG TATAA AATGG CACTG

3751 TACAA TCTCT ATCCA GGTGT TTTTG AGACA GTGGA AATGT TACCA TCCAA

3801 AGCTG GAATT TGGCG GGTGG AATGC CTTAT TGGCG AGCAT CTACA TGCTG

3851 GGATG AGCAC ACTTT TTCTG GTGTA CAGCA ATAAG TGTCA GACTC CCCTG

3901 GGAAT GGCTT CTGGA CACAT TAGAG ATTTT CAGAT TACAG CTTCA GGACA

3951 ATATG GACAG TGGGC CCCAA AGCTG GCCAG ACTTC ATTAT TCCGG ATCAA

4001 TCAAT GCCTG GAGCA CCAAG GAGCC CTTTT CTTGG ATCAA GGTGG ATCTG

4051 TTGGC ACCAA TGATT ATTCA CGGCA TCAAG ACCCA GGGTG CCCGT CAGAA

4101 GTTCT CCAGC CTCTA CATCT CTCAG TTTAT CATCA TGTAT AGTCT TGATG

4151 GGAAG AAGTG GCAGA CTTAT CGAGG AAATT CCACT GGAAC CTTAA TGGTC

4201 TTCTT TGGCA ATGTG GATTC ATCTG GGATA AAACA CAATA TTTTT AACCC

4251 TCCAA TTATT GCTCG ATACA TCCGT TTGCA CCCAA CTCAT TATAG CATTC

4301 GCAGC ACTCT TCGCA TGGAG TTGAT GGGCT GTGAT TTAAA TAGTT GCAGC

4351 ATGCC ATTGG GAATG GAGAG TAAAG CAATA TCAGA TGCAC AGATT ACTGC

4401 TTCAT CCTAC TTTAC CAATA TGTTT GCCAC CTGGT CTCCT TCAAA AGCTC

4451 GACTT CACCT CCAAG GGAGG AGTAA TGCCT GGAGA CCTCA GGTGA ATAAT

4501 CCAAA AGAGT GGCTG CAAGT GGACT TCCAG AAGAC AATGA AAGTC ACAGG

4551 AGTAA CTACT CAGGG AGTAA AATCT CTGCT TACCA GCATG TATGT GAAGG

4601 AGTTC CTCAT CTCCA GCAGT CAAGA TGGCC ATCAG TGGAC TCTCT TTTTT

4651 CAGAA TGGCA AAGTA AAGGT TTTTC AGGGA AATCA AGACT CCTTC ACACC

4701 TGTGG TGAAC TCTCT AGACC CACCG TTACT GACTC GCTAC CTTCG AATTC

4751 ACCCC CAGAG TTGGG TGCAC CAGAT TGCCC TGAGG ATGGA GGTTC TGGGC

4801 TGCGA GGCAC AGGAC CTCTA CGACA AAACT CACAC ATGCC CACCG TGCCC

4851 AGCTC CAGAA CTCCT GGGCG GACCG TCAGT CTTCC TCTTC CCCCC AAAAC

4901 CCAAG GACAC CCTCA TGATC TCCCG GACCC CTGAG GTCAC ATGCG TGGTG

4951 GTGGA CGTGA GCCAC GAAGA CCCTG AGGTC AAGTT CAACT GGTAC GTGGA

5001 CGGCG TGGAG GTGCA TAATG CCAAG ACAAA GCCGC GGGAG GAGCA GTACA

5051 ACAGC ACGTA CCGTG TGGTC AGCGT CCTCA CCGTC CTGCA CCAGG ACTGG

5101 CTGAA TGGCA AGGAG TACAA GTGCA AGGTC TCCAA CAAAG CCCTC CCAGC

5151 CCCCA TCGAG AAAAC CATCT CCAAA GCCAA AGGGC AGCCC CGAGA ACCAC

5201 AGGTG TACAC CCTGC CCCCA TCCCG GGATG AGCTG ACCAA GAACC AGGTC

5251 AGCCT GACCT GCCTG GTCAA AGGCT TCTAT CCCAG CGACA TCGCC GTGGA

5301 GTGGG AGAGC AATGG GCAGC CGGAG AACAA CTACA AGACC ACGCC TCCCG

5351 TGTTG GACTC CGACG GCTCC TTCTT CCTCT ACAGC AAGCT CACCG TGGAC

5401 AAGAG CAGGT GGCAG CAGGG GAACG TCTTC TCATG CTCCG TGATG CATGA

5451 GGCTC TGCAC AACCA CTACA CGCAG AAGAG CCTCT CCCTG TCTCC GGGTA

5501 AATGA

Последовательность белка FVIII 282 (SEQ ID NO: 159)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNGAPTSE SATPESGPGS EPATSGSETP GTSESATPES

801 GPGSEPATSG SETPGTSESA TPESGPGTST EPSEGSAPGS PAGSPTSTEE

851 GTSESATPES GPGSEPATSG SETPGTSESA TPESGPGSPA GSPTSTEEGS

901 PAGSPTSTEE GASSPPVLKR HQAEITRTTL QSDQEEIDYD DTISVEMKKE

951 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

1001 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

1051 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

1101 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1151 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1201 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1251 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1301 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1351 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1401 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1451 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1501 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1551 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1601 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1651 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

1701 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

1751 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

1801 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Нуклеотидная последовательность FVIII 283 (FVIII 169 с тройной мутацией IHH) (SEQ ID NO: 160)

1 ATGCA AATAG AGCTC TCCAC CTGCT TCTTT CTGTG CCTTT TGCGA TTCTG

51 CTTTA GTGCC ACCAG AAGAT ACTAC CTGGG TGCAG TGGAA CTGTC ATGGG

101 ACTAT ATGCA AAGTG ATCTC GGTGA GCTGC CTGTG GACGC AAGAT TTCCT

151 CCTAG AGTGC CAAAA TCTTT TCCAT TCAAC ACCTC AGTCG TGTAC AAAAA

201 GACTC TGTTT GTAGA ATTCA CGGAT CACCT TTTCA ACATC GCTAA GCCAA

251 GGCCA CCCTG GATGG GTCTG CTAGG TCCTA CCATC CAGGC TGAGG TTTAT

301 GATAC AGTGG TCATT ACACT TAAGA ACATG GCTTC CCATC CTGTC AGTCT

351 TCATG CTGTT GGTGT ATCCT ACTGG AAAGC TTCTG AGGGA GCTGA ATATG

401 ATGAT CAGAC CAGTC AAAGG GAGAA AGAAG ATGAT AAAGT CTTCC CTGGT

451 GGAAG CCATA CATAT GTCTG GCAGG TCCTG AAAGA GAATG GTCCA ATGGC

501 CTCTG ACCCA CTGTG CCTTA CCTAC TCATA TCTTT CTCAT GTGGA CCTGG

551 TAAAA GACTT GAATT CAGGC CTCAT TGGAG CCCTA CTAGT ATGTA GAGAA

601 GGGAG TCTGG CCAAG GAAAA GACAC AGACC TTGCA CAAAT TTATA CTACT

651 TTTTG CTGTA TTTGA TGAAG GGAAA AGTTG GCACT CAGAA ACAAA GAACT

701 CCTTG ATGCA GGATA GGGAT GCTGC ATCTG CTCGG GCCTG GCCTA AAATG

751 CACAC AGTCA ATGGT TATGT AAACA GGTCT CTGCC AGGTC TGATT GGATG

801 CCACA GGAAA TCAGT CTATT GGCAT GTGAT TGGAA TGGGC ACCAC TCCTG

851 AAGTG CACTC AATAT TCCTC GAAGG TCACA CATTT CTTGT GAGGA ACCAT

901 CGCCA GGCTA GCTTG GAAAT CTCGC CAATA ACTTT CCTTA CTGCT CAAAC

951 ACTCT TGATG GACCT TGGAC AGTTT CTACT GTTTT GTCAT ATCTC TTCCC

1001 ACCAA CATGA TGGCA TGGAA GCTTA TGTCA AAGTA GACAG CTGTC CAGAG

1051 GAACC CCAAC TACGA ATGAA AAATA ATGAA GAAGC GGAAG ACTAT GATGA

1101 TGATC TTACT GATTC TGAAA TGGAT GTGGT CAGGT TTGAT GATGA CAACT

1151 CTCCT TCCTT TATCC AAATT CGCTC AGTTG CCAAG AAGCA TCCTA AAACT

1201 TGGGT ACATT ACATT GCTGC TGAAG AGGAG GACTG GGACT ATGCT CCCTT

1251 AGTCC TCGCC CCCGA TGACA GAAGT TATAA AAGTC AATAT TTGAA CAATG

1301 GCCCT CAGCG GATTG GTAGG AAGTA CAAAA AAGTC CGATT TATGG CATAC

1351 ACAGA TGAAA CCTTT AAGAC TCGTG AAGCT ATTCA GCATG AATCA GGAAT

1401 CTTGG GACCT TTACT TTATG GGGAA GTTGG AGACA CACTG TTGAT TATAT

1451 TTAAG AATCA AGCAA GCAGA CCATA TAACA TCTAC CCTCA CGGAA TCACT

1501 GATGT CCGTC CTTTG TATTC AAGGA GATTA CCAAA AGGTG TAAAA CATTT

1551 GAAGG ATTTT CCAAT TCTGC CAGGA GAAAT ATTCA AATAT AAATG GACAG

1601 TGACT GTAGA AGATG GGCCA ACTAA ATCAG ATCCT CGGTG CCTGA CCCGC

1651 TATTA CTCTA GTTTC GTTAA TATGG AGAGA GATCT AGCTT CAGGA CTCAT

1701 TGGCC CTCTC CTCAT CTGCT ACAAA GAATC TGTAG ATCAA AGAGG AAACC

1751 AGATA ATGTC AGACA AGAGG AATGT CATCC TGTTT TCTGT ATTTG ATGAG

1801 AACCG AAGCT GGTAC CTCAC AGAGA ATATA CAACG CTTTC TCCCC AATCC

1851 AGCTG GAGTG CAGCT TGAGG ATCCA GAGTT CCAAG CCTCC AACAT CATGC

1901 ACAGC ATCAA TGGCT ATGTT TTTGA TAGTT TGCAG TTGTC AGTTT GTTTG

1951 CATGA GGTGG CATAC TGGTA CATTC TAAGC ATTGG AGCAC AGACT GACTT

2001 CCTTT CTGTC TTCTT CTCTG GATAT ACCTT CAAAC ACAAA ATGGT CTATG

2051 AAGAC ACACT CACCC TATTC CCATT CTCAG GAGAA ACTGT CTTCA TGTCG

2101 ATGGA AAACC CAGGT CTATG GATTC TGGGG TGCCA CAACT CAGAC TTTCG

2151 GAACA GAGGC ATGAC CGCCT TACTG AAGGT TTCTA GTTGT GACAA GAACA

2201 CTGGT GATTA TTACG AGGAC AGTTA TGAAG ATATT TCAGC ATACT TGCTG

2251 AGTAA AAACA ATGCC ATTGA ACCAA GAAGC TTCTC TCAAA ACGGC GCGCC

2301 AGGTA CCTCA GAGTC TGCTA CCCCC GAGTC AGGGC CAGGA TCAGA GCCAG

2351 CCACC TCCGG GTCTG AGACA CCCGG GACTT CCGAG AGTGC CACCC CTGAG

2401 TCCGG ACCCG GGTCC GAGCC CGCCA CTTCC GGCTC CGAAA CTCCC GGCAC

2451 AAGCG AGAGC GCTAC CCCAG AGTCA GGACC AGGAA CATCT ACAGA GCCCT

2501 CTGAA GGCTC CGCTC CAGGG TCCCC AGCCG GCAGT CCCAC TAGCA CCGAG

2551 GAGGG AACCT CTGAA AGCGC CACAC CCGAA TCAGG GCCAG GGTCT GAGCC

2601 TGCTA CCAGC GGCAG CGAGA CACCA GGCAC CTCTG AGTCC GCCAC ACCAG

2651 AGTCC GGACC CGGAT CTCCC GCTGG GAGCC CCACC TCCAC TGAGG AGGGA

2701 TCTCC TGCTG GCTCT CCAAC ATCTA CTGAG GAAGG TACCT CAACC GAGCC

2751 ATCCG AGGGA TCAGC TCCCG GCACC TCAGA GTCGG CAACC CCGGA GTCTG

2801 GACCC GGAAC TTCCG AAAGT GCCAC ACCAG AGTCC GGTCC CGGGA CTTCA

2851 GAATC AGCAA CACCC GAGTC CGGCC CTGGG TCTGA ACCCG CCACA AGTGG

2901 TAGTG AGACA CCAGG ATCAG AACCT GCTAC CTCAG GGTCA GAGAC ACCCG

2951 GATCT CCGGC AGGCT CACCA ACCTC CACTG AGGAG GGCAC CAGCA CAGAA

3001 CCAAG CGAGG GCTCC GCACC CGGAA CAAGC ACTGA ACCCA GTGAG GGTTC

3051 AGCAC CCGGC TCTGA GCCGG CCACA AGTGG CAGTG AGACA CCCGG CACTT

3101 CAGAG AGTGC CACCC CCGAG AGTGG CCCAG GCACT AGTAC CGAGC CCTCT

3151 GAAGG CAGTG CGCCA GCCTC GAGCC CACCA GTCTT GAAAC GCCAT CAAGC

3201 TGAAA TAACT CGTAC TACTC TTCAG TCAGA TCAAG AGGAA ATCGA TTATG

3251 ATGAT ACCAT ATCAG TTGAA ATGAA GAAGG AAGAT TTTGA CATTT ATGAT

3301 GAGGA TGAAA ATCAG AGCCC CCGCA GCTTT CAAAA GAAAA CACGA CACTA

3351 TTTTA TTGCT GCAGT GGAGA GGCTC TGGGA TTATG GGATG AGTAG CTCCC

3401 CACAT GTTCT AAGAA ACAGG GCTCA GAGTG GCAGT GTCCC TCAGT TCAAG

3451 AAAGT TGTTT TCCAG GAATT TACTG ATGGC TCCTT TACTC AGCCC TTATA

3501 CCGTG GAGAA CTAAA TGAAC ATTTG GGACT CCTGG GGCCA TATAT AAGAG

3551 CAGAA GTTGA AGATA ATATC ATGGT AACTT TCAGA AATCA GGCCT CTCGT

3601 CCCTA TTCCT TCTAT TCTAG CCTTA TTTCT TATGA GGAAG ATCAG AGGCA

3651 AGGAG CAGAA CCTAG AAAAA ACTTT GTCAA GCCTA ATGAA ACCAA AACTT

3701 ACTTT TGGAA AGTGC AACAT CATAT GGCAC CCACT AAAGA TGAGT TTGAC

3751 TGCAA AGCCT GGGCT TATTT CTCTG ATGTT GACCT GGAAA AAGAT GTGCA

3801 CTCAG GCCTG ATTGG ACCCC TTCTG GTCTG CCACA CTAAC ACACT GAACC

3851 CTGCT CATGG GAGAC AAGTG ACAGT ACAGG AATTT GCTCT GTTTT TCACC

3901 ATCTT TGATG AGACC AAAAG CTGGT ACTTC ACTGA AAATA TGGAA AGAAA

3951 CTGCA GGGCT CCCTG CAATA TCCAG ATGGA AGATC CCACT TTTAA AGAGA

4001 ATTAT CGCTT CCATG CAATC AATGG CTACA TAATG GATAC ACTAC CTGGC

4051 TTAGT AATGG CTCAG GATCA AAGGA TTCGA TGGTA TCTGC TCAGC ATGGG

4101 CAGCA ATGAA AACAT CCATT CTATT CATTT CAGTG GACAT GTGTT CACTG

4151 TACGA AAAAA AGAGG AGTAT AAAAT GGCAC TGTAC AATCT CTATC CAGGT

4201 GTTTT TGAGA CAGTG GAAAT GTTAC CATCC AAAGC TGGAA TTTGG CGGGT

4251 GGAAT GCCTT ATTGG CGAGC ATCTA CATGC TGGGA TGAGC ACACT TTTTC

4301 TGGTG TACAG CAATA AGTGT CAGAC TCCCC TGGGA ATGGC TTCTG GACAC

4351 ATTAG AGATT TTCAG ATTAC AGCTT CAGGA CAATA TGGAC AGTGG GCCCC

4401 AAAGC TGGCC AGACT TCATT ATTCC GGATC AATCA ATGCC TGGAG CACCA

4451 AGGAG CCCTT TTCTT GGATC AAGGT GGATC TGTTG GCACC AATGA TTATT

4501 CACGG CATCA AGACC CAGGG TGCCC GTCAG AAGTT CTCCA GCCTC TACAT

4551 CTCTC AGTTT ATCAT CATGT ATAGT CTTGA TGGGA AGAAG TGGCA GACTT

4601 ATCGA GGAAA TTCCA CTGGA ACCTT AATGG TCTTC TTTGG CAATG TGGAT

4651 TCATC TGGGA TAAAA CACAA TATTT TTAAC CCTCC AATTA TTGCT CGATA

4701 CATCC GTTTG CACCC AACTC ATTAT AGCAT TCGCA GCACT CTTCG CATGG

4751 AGTTG ATGGG CTGTG ATTTA AATAG TTGCA GCATG CCATT GGGAA TGGAG

4801 AGTAA AGCAA TATCA GATGC ACAGA TTACT GCTTC ATCCT ACTTT ACCAA

4851 TATGT TTGCC ACCTG GTCTC CTTCA AAAGC TCGAC TTCAC CTCCA AGGGA

4901 GGAGT AATGC CTGGA GACCT CAGGT GAATA ATCCA AAAGA GTGGC TGCAA

4951 GTGGA CTTCC AGAAG ACAAT GAAAG TCACA GGAGT AACTA CTCAG GGAGT

5001 AAAAT CTCTG CTTAC CAGCA TGTAT GTGAA GGAGT TCCTC ATCTC CAGCA

5051 GTCAA GATGG CCATC AGTGG ACTCT CTTTT TTCAG AATGG CAAAG TAAAG

5101 GTTTT TCAGG GAAAT CAAGA CTCCT TCACA CCTGT GGTGA ACTCT CTAGA

5151 CCCAC CGTTA CTGAC TCGCT ACCTT CGAAT TCACC CCCAG AGTTG GGTGC

5201 ACCAG ATTGC CCTGA GGATG GAGGT TCTGG GCTGC GAGGC ACAGG ACCTC

5251 TACGA CAAAA CTCAC ACATG CCCAC CGTGC CCAGC TCCAG AACTC CTGGG

5301 CGGAC CGTCA GTCTT CCTCT TCCCC CCAAA ACCCA AGGAC ACCCT CATGG

5351 CCTCC CGGAC CCCTG AGGTC ACATG CGTGG TGGTG GACGT GAGCC ACGAA

5401 GACCC TGAGG TCAAG TTCAA CTGGT ACGTG GACGG CGTGG AGGTG CATAA

5451 TGCCA AGACA AAGCC GCGGG AGGAG CAGTA CAACA GCACG TACCG TGTGG

5501 TCAGC GTCCT CACCG TCCTG GCCCA GGACT GGCTG AATGG CAAGG AGTAC

5551 AAGTG CAAGG TCTCC AACAA AGCCC TCCCA GCCCC CATCG AGAAA ACCAT

5601 CTCCA AAGCC AAAGG GCAGC CCCGA GAACC ACAGG TGTAC ACCCT GCCCC

5651 CATCC CGGGA TGAGC TGACC AAGAA CCAGG TCAGC CTGAC CTGCC TGGTC

5701 AAAGG CTTCT ATCCC AGCGA CATCG CCGTG GAGTG GGAGA GCAAT GGGCA

5751 GCCGG AGAAC AACTA CAAGA CCACG CCTCC CGTGT TGGAC TCCGA CGGCT

5801 CCTTC TTCCT CTACA GCAAG CTCAC CGTGG ACAAG AGCAG GTGGC AGCAG

5851 GGGAA CGTCT TCTCA TGCTC CGTGA TGCAT GAGGC TCTGC ACAAC GCCTA

5901 CACGC AGAAG AGCCT CTCCC TGTCT CCGGG TAAAT GA

Последовательность белка FVIII 283 (FVIII 169 с тройной мутацией IHH) (SEQ ID NO: 161)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNGAPGTS ESATPESGPG SEPATSGSET PGTSESATPE

801 SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG SPAGSPTSTE

851 EGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGSP AGSPTSTEEG

901 SPAGSPTSTE EGTSTEPSEG SAPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGTS

951 ESATPESGPG SEPATSGSET PGSEPATSGS ETPGSPAGSP TSTEEGTSTE

1001 PSEGSAPGTS TEPSEGSAPG SEPATSGSET PGTSESATPE SGPGTSTEPS

1051 EGSAPASSPP VLKRHQAEIT RTTLQSDQEE IDYDDTISVE MKKEDFDIYD

1101 EDENQSPRSF QKKTRHYFIA AVERLWDYGM SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK

1151 KVVFQEFTDG SFTQPLYRGE LNEHLGLLGP YIRAEVEDNI MVTFRNQASR

1201 PYSFYSSLIS YEEDQRQGAE PRKNFVKPNE TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD

1251 CKAWAYFSDV DLEKDVHSGL IGPLLVCHTN TLNPAHGRQV TVQEFALFFT

1301 IFDETKSWYF TENMERNCRA PCNIQMEDPT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG

1351 LVMAQDQRIR WYLLSMGSNE NIHSIHFSGH VFTVRKKEEY KMALYNLYPG

1401 VFETVEMLPS KAGIWRVECL IGEHLHAGMS TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

1451 IRDFQITASG QYGQWAPKLA RLHYSGSINA WSTKEPFSWI KVDLLAPMII

1501 HGIKTQGARQ KFSSLYISQF IIMYSLDGKK WQTYRGNSTG TLMVFFGNVD

1551 SSGIKHNIFN PPIIARYIRL HPTHYSIRST LRMELMGCDL NSCSMPLGME

1601 SKAISDAQIT ASSYFTNMFA TWSPSKARLH LQGRSNAWRP QVNNPKEWLQ

1651 VDFQKTMKVT GVTTQGVKSL LTSMYVKEFL ISSSQDGHQW TLFFQNGKVK

1701 VFQGNQDSFT PVVNSLDPPL LTRYLRIHPQ SWVHQIALRM EVLGCEAQDL

1751 YDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMASRTPEV TCVVVDVSHE

1801 DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL AQDWLNGKEY

1851 KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV

1901 KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ

1951 GNVFSCSVMH EALHNAYTQK SLSLSPGK*

Нуклеотидная последовательность pSYNFVIII 010 (двухцепочечный FVIIIFc) (SEQ ID NO: 162)

1 ATGCAAATAG AGCTCTCCAC CTGCTTCTTT CTGTGCCTTT TGCGATTCTG

51 CTTTAGTGCC ACCAGAAGAT ACTACCTGGG TGCAGTGGAA CTGTCATGGG

101 ACTATATGCA AAGTGATCTC GGTGAGCTGC CTGTGGACGC AAGATTTCCT

151 CCTAGAGTGC CAAAATCTTT TCCATTCAAC ACCTCAGTCG TGTACAAAAA

201 GACTCTGTTT GTAGAATTCA CGGATCACCT TTTCAACATC GCTAAGCCAA

251 GGCCACCCTG GATGGGTCTG CTAGGTCCTA CCATCCAGGC TGAGGTTTAT

301 GATACAGTGG TCATTACACT TAAGAACATG GCTTCCCATC CTGTCAGTCT

351 TCATGCTGTT GGTGTATCCT ACTGGAAAGC TTCTGAGGGA GCTGAATATG

401 ATGATCAGAC CAGTCAAAGG GAGAAAGAAG ATGATAAAGT CTTCCCTGGT

451 GGAAGCCATA CATATGTCTG GCAGGTCCTG AAAGAGAATG GTCCAATGGC

501 CTCTGACCCA CTGTGCCTTA CCTACTCATA TCTTTCTCAT GTGGACCTGG

551 TAAAAGACTT GAATTCAGGC CTCATTGGAG CCCTACTAGT ATGTAGAGAA

601 GGGAGTCTGG CCAAGGAAAA GACACAGACC TTGCACAAAT TTATACTACT

651 TTTTGCTGTA TTTGATGAAG GGAAAAGTTG GCACTCAGAA ACAAAGAACT

701 CCTTGATGCA GGATAGGGAT GCTGCATCTG CTCGGGCCTG GCCTAAAATG

751 CACACAGTCA ATGGTTATGT AAACAGGTCT CTGCCAGGTC TGATTGGATG

801 CCACAGGAAA TCAGTCTATT GGCATGTGAT TGGAATGGGC ACCACTCCTG

851 AAGTGCACTC AATATTCCTC GAAGGTCACA CATTTCTTGT GAGGAACCAT

901 CGCCAGGCGT CCTTGGAAAT CTCGCCAATA ACTTTCCTTA CTGCTCAAAC

951 ACTCTTGATG GACCTTGGAC AGTTTCTACT GTTTTGTCAT ATCTCTTCCC

1001 ACCAACATGA TGGCATGGAA GCTTATGTCA AAGTAGACAG CTGTCCAGAG

1051 GAACCCCAAC TACGAATGAA AAATAATGAA GAAGCGGAAG ACTATGATGA

1101 TGATCTTACT GATTCTGAAA TGGATGTGGT CAGGTTTGAT GATGACAACT

1151 CTCCTTCCTT TATCCAAATT CGCTCAGTTG CCAAGAAGCA TCCTAAAACT

1201 TGGGTACATT ACATTGCTGC TGAAGAGGAG GACTGGGACT ATGCTCCCTT

1251 AGTCCTCGCC CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTCAATAT TTGAACAATG

1301 GCCCTCAGCG GATTGGTAGG AAGTACAAAA AAGTCCGATT TATGGCATAC

1351 ACAGATGAAA CCTTTAAGAC TCGTGAAGCT ATTCAGCATG AATCAGGAAT

1401 CTTGGGACCT TTACTTTATG GGGAAGTTGG AGACACACTG TTGATTATAT

1451 TTAAGAATCA AGCAAGCAGA CCATATAACA TCTACCCTCA CGGAATCACT

1501 GATGTCCGTC CTTTGTATTC AAGGAGATTA CCAAAAGGTG TAAAACATTT

1551 GAAGGATTTT CCAATTCTGC CAGGAGAAAT ATTCAAATAT AAATGGACAG

1601 TGACTGTAGA AGATGGGCCA ACTAAATCAG ATCCTCGGTG CCTGACCCGC

1651 TATTACTCTA GTTTCGTTAA TATGGAGAGA GATCTAGCTT CAGGACTCAT

1701 TGGCCCTCTC CTCATCTGCT ACAAAGAATC TGTAGATCAA AGAGGAAACC

1751 AGATAATGTC AGACAAGAGG AATGTCATCC TGTTTTCTGT ATTTGATGAG

1801 AACCGAAGCT GGTACCTCAC AGAGAATATA CAACGCTTTC TCCCCAATCC

1851 AGCTGGAGTG CAGCTTGAGG ATCCAGAGTT CCAAGCCTCC AACATCATGC

1901 ACAGCATCAA TGGCTATGTT TTTGATAGTT TGCAGTTGTC AGTTTGTTTG

1951 CATGAGGTGG CATACTGGTA CATTCTAAGC ATTGGAGCAC AGACTGACTT

2001 CCTTTCTGTC TTCTTCTCTG GATATACCTT CAAACACAAA ATGGTCTATG

2051 AAGACACACT CACCCTATTC CCATTCTCAG GAGAAACTGT CTTCATGTCG

2101 ATGGAAAACC CAGGTCTATG GATTCTGGGG TGCCACAACT CAGACTTTCG

2151 GAACAGAGGC ATGACCGCCT TACTGAAGGT TTCTAGTTGT GACAAGAACA

2201 CTGGTGATTA TTACGAGGAC AGTTATGAAG ATATTTCAGC ATACTTGCTG

2251 AGTAAAAACA ATGCCATTGA ACCAAGAAGC TTCTCTCAAA ACCCACCAGT

2301 CTTGAAACGC CATCAACGGG AAATAACTCG TACTACTCTT CAGTCAGATC

2351 AAGAGGAAAT TGACTATGAT GATACCATAT CAGTTGAAAT GAAGAAGGAA

2401 GATTTTGACA TTTATGATGA GGATGAAAAT CAGAGCCCCC GCAGCTTTCA

2451 AAAGAAAACA CGACACTATT TTATTGCTGC AGTGGAGAGG CTCTGGGATT

2501 ATGGGATGAG TAGCTCCCCA CATGTTCTAA GAAACAGGGC TCAGAGTGGC

2551 AGTGTCCCTC AGTTCAAGAA AGTTGTTTTC CAGGAATTTA CTGATGGCTC

2601 CTTTACTCAG CCCTTATACC GTGGAGAACT AAATGAACAT TTGGGACTCC

2651 TGGGGCCATA TATAAGAGCA GAAGTTGAAG ATAATATCAT GGTAACTTTC

2701 AGAAATCAGG CCTCTCGTCC CTATTCCTTC TATTCTAGCC TTATTTCTTA

2751 TGAGGAAGAT CAGAGGCAAG GAGCAGAACC TAGAAAAAAC TTTGTCAAGC

2801 CTAATGAAAC CAAAACTTAC TTTTGGAAAG TGCAACATCA TATGGCACCC

2851 ACTAAAGATG AGTTTGACTG CAAAGCCTGG GCTTATTTCT CTGATGTTGA

2901 CCTGGAAAAA GATGTGCACT CAGGCCTGAT TGGACCCCTT CTGGTCTGCC

2951 ACACTAACAC ACTGAACCCT GCTCATGGGA GACAAGTGAC AGTACAGGAA

3001 TTTGCTCTGT TTTTCACCAT CTTTGATGAG ACCAAAAGCT GGTACTTCAC

3051 TGAAAATATG GAAAGAAACT GCAGGGCTCC CTGCAATATC CAGATGGAAG

3101 ATCCCACTTT TAAAGAGAAT TATCGCTTCC ATGCAATCAA TGGCTACATA

3151 ATGGATACAC TACCTGGCTT AGTAATGGCT CAGGATCAAA GGATTCGATG

3201 GTATCTGCTC AGCATGGGCA GCAATGAAAA CATCCATTCT ATTCATTTCA

3251 GTGGACATGT GTTCACTGTA CGAAAAAAAG AGGAGTATAA AATGGCACTG

3301 TACAATCTCT ATCCAGGTGT TTTTGAGACA GTGGAAATGT TACCATCCAA

3351 AGCTGGAATT TGGCGGGTGG AATGCCTTAT TGGCGAGCAT CTACATGCTG

3401 GGATGAGCAC ACTTTTTCTG GTGTACAGCA ATAAGTGTCA GACTCCCCTG

3451 GGAATGGCTT CTGGACACAT TAGAGATTTT CAGATTACAG CTTCAGGACA

3501 ATATGGACAG TGGGCCCCAA AGCTGGCCAG ACTTCATTAT TCCGGATCAA

3551 TCAATGCCTG GAGCACCAAG GAGCCCTTTT CTTGGATCAA GGTGGATCTG

3601 TTGGCACCAA TGATTATTCA CGGCATCAAG ACCCAGGGTG CCCGTCAGAA

3651 GTTCTCCAGC CTCTACATCT CTCAGTTTAT CATCATGTAT AGTCTTGATG

3701 GGAAGAAGTG GCAGACTTAT CGAGGAAATT CCACTGGAAC CTTAATGGTC

3751 TTCTTTGGCA ATGTGGATTC ATCTGGGATA AAACACAATA TTTTTAACCC

3801 TCCAATTATT GCTCGATACA TCCGTTTGCA CCCAACTCAT TATAGCATTC

3851 GCAGCACTCT TCGCATGGAG TTGATGGGCT GTGATTTAAA TAGTTGCAGC

3901 ATGCCATTGG GAATGGAGAG TAAAGCAATA TCAGATGCAC AGATTACTGC

3951 TTCATCCTAC TTTACCAATA TGTTTGCCAC CTGGTCTCCT TCAAAAGCTC

4001 GACTTCACCT CCAAGGGAGG AGTAATGCCT GGAGACCTCA GGTGAATAAT

4051 CCAAAAGAGT GGCTGCAAGT GGACTTCCAG AAGACAATGA AAGTCACAGG

4101 AGTAACTACT CAGGGAGTAA AATCTCTGCT TACCAGCATG TATGTGAAGG

4151 AGTTCCTCAT CTCCAGCAGT CAAGATGGCC ATCAGTGGAC TCTCTTTTTT

4201 CAGAATGGCA AAGTAAAGGT TTTTCAGGGA AATCAAGACT CCTTCACACC

4251 TGTGGTGAAC TCTCTAGACC CACCGTTACT GACTCGCTAC CTTCGAATTC

4301 ACCCCCAGAG TTGGGTGCAC CAGATTGCCC TGAGGATGGA GGTTCTGGGC

4351 TGCGAGGCAC AGGACCTCTA CGACAAAACT CACACATGCC CACCGTGCCC

4401 AGCTCCAGAA CTCCTGGGCG GACCGTCAGT CTTCCTCTTC CCCCCAAAAC

4451 CCAAGGACAC CCTCATGATC TCCCGGACCC CTGAGGTCAC ATGCGTGGTG

4501 GTGGACGTGA GCCACGAAGA CCCTGAGGTC AAGTTCAACT GGTACGTGGA

4551 CGGCGTGGAG GTGCATAATG CCAAGACAAA GCCGCGGGAG GAGCAGTACA

4601 ACAGCACGTA CCGTGTGGTC AGCGTCCTCA CCGTCCTGCA CCAGGACTGG

4651 CTGAATGGCA AGGAGTACAA GTGCAAGGTC TCCAACAAAG CCCTCCCAGC

4701 CCCCATCGAG AAAACCATCT CCAAAGCCAA AGGGCAGCCC CGAGAACCAC

4751 AGGTGTACAC CCTGCCCCCA TCCCGGGATG AGCTGACCAA GAACCAGGTC

4801 AGCCTGACCT GCCTGGTCAA AGGCTTCTAT CCCAGCGACA TCGCCGTGGA

4851 GTGGGAGAGC AATGGGCAGC CGGAGAACAA CTACAAGACC ACGCCTCCCG

4901 TGTTGGACTC CGACGGCTCC TTCTTCCTCT ACAGCAAGCT CACCGTGGAC

4951 AAGAGCAGGT GGCAGCAGGG GAACGTCTTC TCATGCTCCG TGATGCATGA

5001 GGCTCTGCAC AACCACTACA CGCAGAAGAG CCTCTCCCTG TCTCCGGGTA

5051 AATGA

Последовательность белка pSYNFVIII 010 (двухцепочечный FVIIIFc) (SEQ ID NO: 163)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNPPVLKR HQREITRTTL QSDQEEIDYD DTISVEMKKE

801 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

851 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

901 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

951 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1001 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1051 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1101 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1151 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1201 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1251 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1301 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1351 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1401 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1451 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1501 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

1551 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

1601 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

1651 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Последовательность белка FVIII 195 (двухцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE-144 в аминокислотных положениях 1656 и 1900) (SEQ ID NO: 73)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNPPVLKR HQREITRTTL QGAPGTPGSG TASSSPGASP

801 GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSPSAST GTGPGTPGSG

851 TASSSPGASP GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSTPSGA

901 TGSPGSSTPS GATGSPGASP GTSSTGSPAS SSDQEEIDYD DTISVEMKKE

951 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

1001 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

1051 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

1101 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1151 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRGAPTS ESATPESGPG SEPATSGSET

1201 PGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG

1251 TSESATPESG PGSPAGSPTS TEEGSPAGSP TSTEEGSPAG SPTSTEEGTS

1301 ESATPESGPG TSTEPSEGSA PGASSAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1351 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1401 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1451 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1501 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1551 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1601 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1651 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1701 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1751 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1801 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

1851 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

1901 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

1951 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Последовательность зрелого белка pSYN-FVIII-173 (SEQ ID NO: 72):

1 ATRRYYLGAV ELSWDYMQSD LGELPVDARF PPRVPKSFPF NTSVVYKKTL

51 FVEFTDHLFN IAKPRPPWMG LLGPTIQAEV YDTVVITLKN MASHPVSLHA

101 VGVSYWKASE GAEYDDQTSQ REKEDDKVFP GGSHTYVWQV LKENGPMASD

151 PLCLTYSYLS HVDLVKDLNS GLIGALLVCR EGSLAKEKTQ TLHKFILLFA

201 VFDEGKSWHS ETKNSLMQDR DAASARAWPK MHTVNGYVNR SLPGLIGCHR

251 KSVYWHVIGM GTTPEVHSIF LEGHTFLVRN HRQASLEISP ITFLTAQTLL

301 MDLGQFLLFC HISSHQHDGM EAYVKVDSCP EEPQLRMKNN EEAEDYDDDL

351 TDSEMDVVRF DDDNSPSFIQ IRSVAKKHPK TWVHYIAAEE EDWDYAPLVL

401 APDDRSYKSQ YLNNGPQRIG RKYKKVRFMA YTDETFKTRE AIQHESGILG

451 PLLYGEVGDT LLIIFKNQAS RPYNIYPHGI TDVRPLYSRR LPKGVKHLKD

501 FPILPGEIFK YKWTVTVEDG PTKSDPRCLT RYYSSFVNME RDLASGLIGP

551 LLICYKESVD QRGNQIMSDK RNVILFSVFD ENRSWYLTEN IQRFLPNPAG

601 VQLEDPEFQA SNIMHSINGY VFDSLQLSVC LHEVAYWYIL SIGAQTDFLS

651 VFFSGYTFKH KMVYEDTLTL FPFSGETVFM SMENPGLWIL GCHNSDFRNR

701 GMTALLKVSS CDKNTGDYYE DSYEDISAYL LSKNNAIEPR SFSQNGAPGT

751 SESATPESGP GSEPATSGSE TPGTSESATP ESGPGSEPAT SGSETPGTSE

801 SATPESGPGT STEPSEGSAP GSPAGSPTST EEGTSESATP ESGPGSEPAT

851 SGSETPGTSE SATPESGPGS PAGSPTSTEE GSPAGSPTST EEGTSTEPSE

901 GSAPGTSESA TPESGPGTSE SATPESGPGT SESATPESGP GSEPATSGSE

951 TPGSEPATSG SETPGSPAGS PTSTEEGTST EPSEGSAPGT STEPSEGSAP

1001 GSEPATSGSE TPGTSESATP ESGPGTSTEP SEGSAPASSP PVLKRHQREI

1051 TRTTLQSDQE EIDYDDTISV EMKKEDFDIY DEDENQSPRS FQKKTRHYFI

1101 AAVERLWDYG MSSSPHVLRN RAQSGSVPQF KKVVFQEFTD GSFTQPLYRG

1151 ELNEHLGLLG PYIRAEVEDN IMVTFRNQAS RPYSFYSSLI SYEEDQRQGA

1201 EPRKNFVKPN ETKTYFWKVQ HHMAPTKDEF DCKAWAYFSD VDLEKDVHSG

1251 LIGPLLVCHT NTLNPAHGRQ VTVQEFALFF TIFDETKSWY FTENMERNCR

1301 APCNIQMEDP TFKENYRFHA INGYIMDTLP GLVMAQDQRI RWYLLSMGSN

1351 ENIHSIHFSG HVFTVRKKEE YKMALYNLYP GVFETVEMLP SKAGIWRVEC

1401 LIGEHLHAGM STLFLVYSNK CQTPLGMASG HIRDFQITAS GQYGQWAPKL

1451 ARLHYSGSIN AWSTKEPFSW IKVDLLAPMI IHGIKTQGAR QKFSSLYISQ

1501 FIIMYSLDGK KWQTYRGNST GTLMVFFGNV DSSGIKHNIF NPPIIARYIR

1551 LHPTHYSIRS TLRMELMGCD LNSCSMPLGM ESKAISDAQI TASSYFTNMF

1601 ATWSPSKARL HLQGRSNAWR PQVNNPKEWL QVDFQKTMKV TGVTTQGVKS

1651 LLTSMYVKEF LISSSQDGHQ WTLFFQNGKV KVFQGNQDSF TPVVNSLDPP

1701 LLTRYLRIHP QSWVHQIALR MEVLGCEAQD LYDKTHTCPP CPAPELLGGP

1751 SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY VDGVEVHNAK

1801 TKPREEQYNS TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL PAPIEKTISK

1851 AKGQPREPQV YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA VEWESNGQPE

1901 NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM HEALHNHYTQ

1951 KSLSLSPGK

Последовательность белка FVIII 196 (двухцепочечный FVIIIFc с тремя XTEN AE-144 в аминокислотных положениях 26, 1656 и 1900) (SEQ ID NO: 74)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVGAPGS

51 SPSASTGTGP GSSPSASTGT GPGASPGTSS TGSPGASPGT SSTGSPGSST

101 PSGATGSPGS SPSASTGTGP GASPGTSSTG SPGSSPSAST GTGPGTPGSG

151 TASSSPGSST PSGATGSPGS STPSGATGSP GASPGTSSTG SPASSDARFP

201 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

251 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

301 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

351 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

401 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

451 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

501 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

551 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

601 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

651 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

701 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

751 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

801 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

851 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

901 SKNNAIEPRS FSQNPPVLKR HQREITRTTL QGAPGTPGSG TASSSPGASP

951 GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSPSAST GTGPGTPGSG

1001 TASSSPGASP GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSTPSGA

1051 TGSPGSSTPS GATGSPGASP GTSSTGSPAS SSDQEEIDYD DTISVEMKKE

1101 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

1151 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

1201 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

1251 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1301 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRGAPTS ESATPESGPG SEPATSGSET

1351 PGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG

1401 TSESATPESG PGSPAGSPTS TEEGSPAGSP TSTEEGSPAG SPTSTEEGTS

1451 ESATPESGPG TSTEPSEGSA PGASSAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1501 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1551 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1601 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1651 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1701 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1751 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1801 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1851 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1901 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1951 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

2001 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

2051 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

2101 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Последовательность белка FVIII 199 (одноцепочечный FVIIIFc с тремя XTEN AE-144

в аминокислотных положениях 1656 и 1900) (SEQ ID NO: 75)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNPPVLKR HQAEITRTTL QGAPGTPGSG TASSSPGASP

801 GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSPSAST GTGPGTPGSG

851 TASSSPGASP GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSTPSGA

901 TGSPGSSTPS GATGSPGASP GTSSTGSPAS SSDQEEIDYD DTISVEMKKE

951 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

1001 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

1051 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

1101 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1151 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRGAPTS ESATPESGPG SEPATSGSET

1201 PGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG

1251 TSESATPESG PGSPAGSPTS TEEGSPAGSP TSTEEGSPAG SPTSTEEGTS

1301 ESATPESGPG TSTEPSEGSA PGASSAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1351 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1401 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1451 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1501 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1551 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1601 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1651 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1701 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1751 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1801 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

1851 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

1901 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

1951 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Последовательность белка FVIII 201 (одноцепочечный FVIIIFc с тремя XTEN AE-144

в аминокислотных положениях 26, 1656 и 1900) (SEQ ID NO: 76)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVGAPGS

51 SPSASTGTGP GSSPSASTGT GPGASPGTSS TGSPGASPGT SSTGSPGSST

101 PSGATGSPGS SPSASTGTGP GASPGTSSTG SPGSSPSAST GTGPGTPGSG

151 TASSSPGSST PSGATGSPGS STPSGATGSP GASPGTSSTG SPASSDARFP

201 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

251 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

301 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

351 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

401 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

451 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

501 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

551 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

601 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

651 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

701 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

751 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

801 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

851 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

901 SKNNAIEPRS FSQNPPVLKR HQAEITRTTL QGAPGTPGSG TASSSPGASP

951 GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSPSAST GTGPGTPGSG

1001 TASSSPGASP GTSSTGSPGA SPGTSSTGSP GASPGTSSTG SPGSSTPSGA

1051 TGSPGSSTPS GATGSPGASP GTSSTGSPAS SSDQEEIDYD DTISVEMKKE

1101 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

1151 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

1201 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

1251 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1301 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRGAPTS ESATPESGPG SEPATSGSET

1351 PGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG

1401 TSESATPESG PGSPAGSPTS TEEGSPAGSP TSTEEGSPAG SPTSTEEGTS

1451 ESATPESGPG TSTEPSEGSA PGASSAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1501 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1551 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1601 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1651 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1701 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1751 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1801 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1851 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1901 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1951 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

2001 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

2051 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

2101 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Последовательность белка FVIII 203 (одноцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE - одним XTEN AE-288 в домене B и одним XTEN AE-144 в аминокислотном положении 1900) (SEQ ID NO: 77)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNGAPGTS ESATPESGPG SEPATSGSET PGTSESATPE

801 SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG SPAGSPTSTE

851 EGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGSP AGSPTSTEEG

901 SPAGSPTSTE EGTSTEPSEG SAPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGTS

951 ESATPESGPG SEPATSGSET PGSEPATSGS ETPGSPAGSP TSTEEGTSTE

1001 PSEGSAPGTS TEPSEGSAPG SEPATSGSET PGTSESATPE SGPGTSTEPS

1051 EGSAPASSPP VLKRHQAEIT RTTLQSDQEE IDYDDTISVE MKKEDFDIYD

1101 EDENQSPRSF QKKTRHYFIA AVERLWDYGM SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK

1151 KVVFQEFTDG SFTQPLYRGE LNEHLGLLGP YIRAEVEDNI MVTFRNQASR

1201 PYSFYSSLIS YEEDQRQGAE PRKNFVKPNE TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD

1251 CKAWAYFSDV DLEKDVHSGL IGPLLVCHTN TLNPAHGRQV TVQEFALFFT

1301 IFDETKSWYF TENMERNCRG APTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES

1351 ATPESGPGSE PATSGSETPG TSESATPESG PGTSTEPSEG SAPGTSESAT

1401 PESGPGSPAG SPTSTEEGSP AGSPTSTEEG SPAGSPTSTE EGTSESATPE

1451 SGPGTSTEPS EGSAPGASSA PCNIQMEDPT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG

1501 LVMAQDQRIR WYLLSMGSNE NIHSIHFSGH VFTVRKKEEY KMALYNLYPG

1551 VFETVEMLPS KAGIWRVECL IGEHLHAGMS TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

1601 IRDFQITASG QYGQWAPKLA RLHYSGSINA WSTKEPFSWI KVDLLAPMII

1651 HGIKTQGARQ KFSSLYISQF IIMYSLDGKK WQTYRGNSTG TLMVFFGNVD

1701 SSGIKHNIFN PPIIARYIRL HPTHYSIRST LRMELMGCDL NSCSMPLGME

1751 SKAISDAQIT ASSYFTNMFA TWSPSKARLH LQGRSNAWRP QVNNPKEWLQ

1801 VDFQKTMKVT GVTTQGVKSL LTSMYVKEFL ISSSQDGHQW TLFFQNGKVK

1851 VFQGNQDSFT PVVNSLDPPL LTRYLRIHPQ SWVHQIALRM EVLGCEAQDL

1901 YDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE

1951 DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY

2001 KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV

2051 KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ

2101 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK*

Последовательность белка FVIII 204 (одноцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE - одним XTEN AE-288 в домене B и одним XTEN AE-144 в аминокислотном положении 403) (SEQ ID NO: 78)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDGAPTSTEP SEGSAPGSPA GSPTSTEEGT

451 STEPSEGSAP GTSTEPSEGS APGTSESATP ESGPGTSTEP SEGSAPGTSE

501 SATPESGPGS EPATSGSETP GTSTEPSEGS APGTSTEPSE GSAPGTSESA

551 TPESGPGTSE SATPESGPGA SSDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

601 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

651 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

701 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

751 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

801 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

851 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

901 SKNNAIEPRS FSQNGAPGTS ESATPESGPG SEPATSGSET PGTSESATPE

951 SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG SPAGSPTSTE

1001 EGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGSP AGSPTSTEEG

1051 SPAGSPTSTE EGTSTEPSEG SAPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGTS

1101 ESATPESGPG SEPATSGSET PGSEPATSGS ETPGSPAGSP TSTEEGTSTE

1151 PSEGSAPGTS TEPSEGSAPG SEPATSGSET PGTSESATPE SGPGTSTEPS

1201 EGSAPASSPP VLKRHQAEIT RTTLQSDQEE IDYDDTISVE MKKEDFDIYD

1251 EDENQSPRSF QKKTRHYFIA AVERLWDYGM SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK

1301 KVVFQEFTDG SFTQPLYRGE LNEHLGLLGP YIRAEVEDNI MVTFRNQASR

1351 PYSFYSSLIS YEEDQRQGAE PRKNFVKPNE TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD

1401 CKAWAYFSDV DLEKDVHSGL IGPLLVCHTN TLNPAHGRQV TVQEFALFFT

1451 IFDETKSWYF TENMERNCRA PCNIQMEDPT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG

1501 LVMAQDQRIR WYLLSMGSNE NIHSIHFSGH VFTVRKKEEY KMALYNLYPG

1551 VFETVEMLPS KAGIWRVECL IGEHLHAGMS TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

1601 IRDFQITASG QYGQWAPKLA RLHYSGSINA WSTKEPFSWI KVDLLAPMII

1651 HGIKTQGARQ KFSSLYISQF IIMYSLDGKK WQTYRGNSTG TLMVFFGNVD

1701 SSGIKHNIFN PPIIARYIRL HPTHYSIRST LRMELMGCDL NSCSMPLGME

1751 SKAISDAQIT ASSYFTNMFA TWSPSKARLH LQGRSNAWRP QVNNPKEWLQ

1801 VDFQKTMKVT GVTTQGVKSL LTSMYVKEFL ISSSQDGHQW TLFFQNGKVK

1851 VFQGNQDSFT PVVNSLDPPL LTRYLRIHPQ SWVHQIALRM EVLGCEAQDL

1901 YDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE

1951 DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY

2001 KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV

2051 KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ

2101 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK*

Последовательность белка FVIII 205 (одноцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE - одним XTEN AE-288 в домене B и одним XTEN AE-144 в аминокислотном положении 18) (SEQ ID NO: 79)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP TSESATPESG

51 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG

101 TSTEPSEGSA PGSPAGSPTS TEEGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS

151 ESATPESGPG SPAGSPTSTE EGSPAGSPTS TEEGASSSDL GELPVDARFP

201 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

251 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

301 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

351 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

401 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

451 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

501 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

551 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

601 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

651 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

701 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

751 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

801 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

851 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

901 SKNNAIEPRS FSQNGAPGTS ESATPESGPG SEPATSGSET PGTSESATPE

951 SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG SPAGSPTSTE

1001 EGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGSP AGSPTSTEEG

1051 SPAGSPTSTE EGTSTEPSEG SAPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGTS

1101 ESATPESGPG SEPATSGSET PGSEPATSGS ETPGSPAGSP TSTEEGTSTE

1151 PSEGSAPGTS TEPSEGSAPG SEPATSGSET PGTSESATPE SGPGTSTEPS

1201 EGSAPASSPP VLKRHQAEIT RTTLQSDQEE IDYDDTISVE MKKEDFDIYD

1251 EDENQSPRSF QKKTRHYFIA AVERLWDYGM SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK

1301 KVVFQEFTDG SFTQPLYRGE LNEHLGLLGP YIRAEVEDNI MVTFRNQASR

1351 PYSFYSSLIS YEEDQRQGAE PRKNFVKPNE TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD

1401 CKAWAYFSDV DLEKDVHSGL IGPLLVCHTN TLNPAHGRQV TVQEFALFFT

1451 IFDETKSWYF TENMERNCRA PCNIQMEDPT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG

1501 LVMAQDQRIR WYLLSMGSNE NIHSIHFSGH VFTVRKKEEY KMALYNLYPG

1551 VFETVEMLPS KAGIWRVECL IGEHLHAGMS TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

1601 IRDFQITASG QYGQWAPKLA RLHYSGSINA WSTKEPFSWI KVDLLAPMII

1651 HGIKTQGARQ KFSSLYISQF IIMYSLDGKK WQTYRGNSTG TLMVFFGNVD

1701 SSGIKHNIFN PPIIARYIRL HPTHYSIRST LRMELMGCDL NSCSMPLGME

1751 SKAISDAQIT ASSYFTNMFA TWSPSKARLH LQGRSNAWRP QVNNPKEWLQ

1801 VDFQKTMKVT GVTTQGVKSL LTSMYVKEFL ISSSQDGHQW TLFFQNGKVK

1851 VFQGNQDSFT PVVNSLDPPL LTRYLRIHPQ SWVHQIALRM EVLGCEAQDL

1901 YDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE

1951 DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY

2001 KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV

2051 KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ

2101 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK*

Последовательность белка pSYN FVIII 266 (FVIII Fc с XTEN AE-42 в аминокислотном положении 18 и XTEN AE-288 в домене B) (SEQ ID NO: 80)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP GSPAGSPTST

51 EEGTSESATP ESGPGSEPAT SGSETPASSS DLGELPVDAR FPPRVPKSFP

101 FNTSVVYKKT LFVEFTDHLF NIAKPRPPWM GLLGPTIQAE VYDTVVITLK

151 NMASHPVSLH AVGVSYWKAS EGAEYDDQTS QREKEDDKVF PGGSHTYVWQ

201 VLKENGPMAS DPLCLTYSYL SHVDLVKDLN SGLIGALLVC REGSLAKEKT

251 QTLHKFILLF AVFDEGKSWH SETKNSLMQD RDAASARAWP KMHTVNGYVN

301 RSLPGLIGCH RKSVYWHVIG MGTTPEVHSI FLEGHTFLVR NHRQASLEIS

351 PITFLTAQTL LMDLGQFLLF CHISSHQHDG MEAYVKVDSC PEEPQLRMKN

401 NEEAEDYDDD LTDSEMDVVR FDDDNSPSFI QIRSVAKKHP KTWVHYIAAE

451 EEDWDYAPLV LAPDDRSYKS QYLNNGPQRI GRKYKKVRFM AYTDETFKTR

501 EAIQHESGIL GPLLYGEVGD TLLIIFKNQA SRPYNIYPHG ITDVRPLYSR

551 RLPKGVKHLK DFPILPGEIF KYKWTVTVED GPTKSDPRCL TRYYSSFVNM

601 ERDLASGLIG PLLICYKESV DQRGNQIMSD KRNVILFSVF DENRSWYLTE

651 NIQRFLPNPA GVQLEDPEFQ ASNIMHSING YVFDSLQLSV CLHEVAYWYI

701 LSIGAQTDFL SVFFSGYTFK HKMVYEDTLT LFPFSGETVF MSMENPGLWI

751 LGCHNSDFRN RGMTALLKVS SCDKNTGDYY EDSYEDISAY LLSKNNAIEP

801 RSFSQNGAPG TSESATPESG PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA

851 TSGSETPGTS ESATPESGPG TSTEPSEGSA PGSPAGSPTS TEEGTSESAT

901 PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG SPAGSPTSTE EGSPAGSPTS

951 TEEGTSTEPS EGSAPGTSES ATPESGPGTS ESATPESGPG TSESATPESG

1001 PGSEPATSGS ETPGSEPATS GSETPGSPAG SPTSTEEGTS TEPSEGSAPG

1051 TSTEPSEGSA PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGTSTE PSEGSAPASS

1101 PPVLKRHQAE ITRTTLQSDQ EEIDYDDTIS VEMKKEDFDI YDEDENQSPR

1151 SFQKKTRHYF IAAVERLWDY GMSSSPHVLR NRAQSGSVPQ FKKVVFQEFT

1201 DGSFTQPLYR GELNEHLGLL GPYIRAEVED NIMVTFRNQA SRPYSFYSSL

1251 ISYEEDQRQG AEPRKNFVKP NETKTYFWKV QHHMAPTKDE FDCKAWAYFS

1301 DVDLEKDVHS GLIGPLLVCH TNTLNPAHGR QVTVQEFALF FTIFDETKSW

1351 YFTENMERNC RAPCNIQMED PTFKENYRFH AINGYIMDTL PGLVMAQDQR

1401 IRWYLLSMGS NENIHSIHFS GHVFTVRKKE EYKMALYNLY PGVFETVEML

1451 PSKAGIWRVE CLIGEHLHAG MSTLFLVYSN KCQTPLGMAS GHIRDFQITA

1501 SGQYGQWAPK LARLHYSGSI NAWSTKEPFS WIKVDLLAPM IIHGIKTQGA

1551 RQKFSSLYIS QFIIMYSLDG KKWQTYRGNS TGTLMVFFGN VDSSGIKHNI

1601 FNPPIIARYI RLHPTHYSIR STLRMELMGC DLNSCSMPLG MESKAISDAQ

1651 ITASSYFTNM FATWSPSKAR LHLQGRSNAW RPQVNNPKEW LQVDFQKTMK

1701 VTGVTTQGVK SLLTSMYVKE FLISSSQDGH QWTLFFQNGK VKVFQGNQDS

1751 FTPVVNSLDP PLLTRYLRIH PQSWVHQIAL RMEVLGCEAQ DLYDKTHTCP

1801 PCPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVVVDVS HEDPEVKFNW

1851 YVDGVEVHNA KTKPREEQYN STYRVVSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA

1901 LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSRDE LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI

1951 AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV

2001 MHEALHNHYT QKSLSLSPGK *

Последовательность белка pSYN FVIII 267 (FVIII Fc с XTEN AE-72 в аминокислотном положении 18 и XTEN AE-288 в домене B) (SEQ ID NO: 81)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP TSESATPESG

51 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG

101 TSTEPSEGSA PGASSSDLGE LPVDARFPPR VPKSFPFNTS VVYKKTLFVE

151 FTDHLFNIAK PRPPWMGLLG PTIQAEVYDT VVITLKNMAS HPVSLHAVGV

201 SYWKASEGAE YDDQTSQREK EDDKVFPGGS HTYVWQVLKE NGPMASDPLC

251 LTYSYLSHVD LVKDLNSGLI GALLVCREGS LAKEKTQTLH KFILLFAVFD

301 EGKSWHSETK NSLMQDRDAA SARAWPKMHT VNGYVNRSLP GLIGCHRKSV

351 YWHVIGMGTT PEVHSIFLEG HTFLVRNHRQ ASLEISPITF LTAQTLLMDL

401 GQFLLFCHIS SHQHDGMEAY VKVDSCPEEP QLRMKNNEEA EDYDDDLTDS

451 EMDVVRFDDD NSPSFIQIRS VAKKHPKTWV HYIAAEEEDW DYAPLVLAPD

501 DRSYKSQYLN NGPQRIGRKY KKVRFMAYTD ETFKTREAIQ HESGILGPLL

551 YGEVGDTLLI IFKNQASRPY NIYPHGITDV RPLYSRRLPK GVKHLKDFPI

601 LPGEIFKYKW TVTVEDGPTK SDPRCLTRYY SSFVNMERDL ASGLIGPLLI

651 CYKESVDQRG NQIMSDKRNV ILFSVFDENR SWYLTENIQR FLPNPAGVQL

701 EDPEFQASNI MHSINGYVFD SLQLSVCLHE VAYWYILSIG AQTDFLSVFF

751 SGYTFKHKMV YEDTLTLFPF SGETVFMSME NPGLWILGCH NSDFRNRGMT

801 ALLKVSSCDK NTGDYYEDSY EDISAYLLSK NNAIEPRSFS QNGAPGTSES

851 ATPESGPGSE PATSGSETPG TSESATPESG PGSEPATSGS ETPGTSESAT

901 PESGPGTSTE PSEGSAPGSP AGSPTSTEEG TSESATPESG PGSEPATSGS

951 ETPGTSESAT PESGPGSPAG SPTSTEEGSP AGSPTSTEEG TSTEPSEGSA

1001 PGTSESATPE SGPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGSE PATSGSETPG

1051 SEPATSGSET PGSPAGSPTS TEEGTSTEPS EGSAPGTSTE PSEGSAPGSE

1101 PATSGSETPG TSESATPESG PGTSTEPSEG SAPASSPPVL KRHQAEITRT

1151 TLQSDQEEID YDDTISVEMK KEDFDIYDED ENQSPRSFQK KTRHYFIAAV

1201 ERLWDYGMSS SPHVLRNRAQ SGSVPQFKKV VFQEFTDGSF TQPLYRGELN

1251 EHLGLLGPYI RAEVEDNIMV TFRNQASRPY SFYSSLISYE EDQRQGAEPR

1301 KNFVKPNETK TYFWKVQHHM APTKDEFDCK AWAYFSDVDL EKDVHSGLIG

1351 PLLVCHTNTL NPAHGRQVTV QEFALFFTIF DETKSWYFTE NMERNCRAPC

1401 NIQMEDPTFK ENYRFHAING YIMDTLPGLV MAQDQRIRWY LLSMGSNENI

1451 HSIHFSGHVF TVRKKEEYKM ALYNLYPGVF ETVEMLPSKA GIWRVECLIG

1501 EHLHAGMSTL FLVYSNKCQT PLGMASGHIR DFQITASGQY GQWAPKLARL

1551 HYSGSINAWS TKEPFSWIKV DLLAPMIIHG IKTQGARQKF SSLYISQFII

1601 MYSLDGKKWQ TYRGNSTGTL MVFFGNVDSS GIKHNIFNPP IIARYIRLHP

1651 THYSIRSTLR MELMGCDLNS CSMPLGMESK AISDAQITAS SYFTNMFATW

1701 SPSKARLHLQ GRSNAWRPQV NNPKEWLQVD FQKTMKVTGV TTQGVKSLLT

1751 SMYVKEFLIS SSQDGHQWTL FFQNGKVKVF QGNQDSFTPV VNSLDPPLLT

1801 RYLRIHPQSW VHQIALRMEV LGCEAQDLYD KTHTCPPCPA PELLGGPSVF

1851 LFPPKPKDTL MISRTPEVTC VVVDVSHEDP EVKFNWYVDG VEVHNAKTKP

1901 REEQYNSTYR VVSVLTVLHQ DWLNGKEYKC KVSNKALPAP IEKTISKAKG

1951 QPREPQVYTL PPSRDELTKN QVSLTCLVKG FYPSDIAVEW ESNGQPENNY

2001 KTTPPVLDSD GSFFLYSKLT VDKSRWQQGN VFSCSVMHEA LHNHYTQKSL

2051 SLSPGK*

Последовательность белка pSYN FVIII 268 (FVIII Fc с XTEN AE-144 в аминокислотном положении 18) (SEQ ID NO: 82)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP TSESATPESG

51 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG

101 TSTEPSEGSA PGSPAGSPTS TEEGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS

151 ESATPESGPG SPAGSPTSTE EGSPAGSPTS TEEGASSSDL GELPVDARFP

201 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

251 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

301 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

351 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

401 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

451 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

501 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

551 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

601 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

651 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

701 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

751 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

801 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

851 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

901 SKNNAIEPRS FSQNPPVLKR HQAEITRTTL QSDQEEIDYD DTISVEMKKE

951 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

1001 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

1051 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

1101 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1151 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1201 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1251 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1301 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1351 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1401 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1451 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1501 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1551 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1601 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1651 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

1701 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

1751 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

1801 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Последовательность белка pSYN FVIII 269 (FVIII Fc с XTEN AE-72 в аминокислотном положении 18) (SEQ ID NO: 83)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP TSESATPESG

51 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG

101 TSTEPSEGSA PGASSSDLGE LPVDARFPPR VPKSFPFNTS VVYKKTLFVE

151 FTDHLFNIAK PRPPWMGLLG PTIQAEVYDT VVITLKNMAS HPVSLHAVGV

201 SYWKASEGAE YDDQTSQREK EDDKVFPGGS HTYVWQVLKE NGPMASDPLC

251 LTYSYLSHVD LVKDLNSGLI GALLVCREGS LAKEKTQTLH KFILLFAVFD

301 EGKSWHSETK NSLMQDRDAA SARAWPKMHT VNGYVNRSLP GLIGCHRKSV

351 YWHVIGMGTT PEVHSIFLEG HTFLVRNHRQ ASLEISPITF LTAQTLLMDL

401 GQFLLFCHIS SHQHDGMEAY VKVDSCPEEP QLRMKNNEEA EDYDDDLTDS

451 EMDVVRFDDD NSPSFIQIRS VAKKHPKTWV HYIAAEEEDW DYAPLVLAPD

501 DRSYKSQYLN NGPQRIGRKY KKVRFMAYTD ETFKTREAIQ HESGILGPLL

551 YGEVGDTLLI IFKNQASRPY NIYPHGITDV RPLYSRRLPK GVKHLKDFPI

601 LPGEIFKYKW TVTVEDGPTK SDPRCLTRYY SSFVNMERDL ASGLIGPLLI

651 CYKESVDQRG NQIMSDKRNV ILFSVFDENR SWYLTENIQR FLPNPAGVQL

701 EDPEFQASNI MHSINGYVFD SLQLSVCLHE VAYWYILSIG AQTDFLSVFF

751 SGYTFKHKMV YEDTLTLFPF SGETVFMSME NPGLWILGCH NSDFRNRGMT

801 ALLKVSSCDK NTGDYYEDSY EDISAYLLSK NNAIEPRSFS QNPPVLKRHQ

851 AEITRTTLQS DQEEIDYDDT ISVEMKKEDF DIYDEDENQS PRSFQKKTRH

901 YFIAAVERLW DYGMSSSPHV LRNRAQSGSV PQFKKVVFQE FTDGSFTQPL

951 YRGELNEHLG LLGPYIRAEV EDNIMVTFRN QASRPYSFYS SLISYEEDQR

1001 QGAEPRKNFV KPNETKTYFW KVQHHMAPTK DEFDCKAWAY FSDVDLEKDV

1051 HSGLIGPLLV CHTNTLNPAH GRQVTVQEFA LFFTIFDETK SWYFTENMER

1101 NCRAPCNIQM EDPTFKENYR FHAINGYIMD TLPGLVMAQD QRIRWYLLSM

1151 GSNENIHSIH FSGHVFTVRK KEEYKMALYN LYPGVFETVE MLPSKAGIWR

1201 VECLIGEHLH AGMSTLFLVY SNKCQTPLGM ASGHIRDFQI TASGQYGQWA

1251 PKLARLHYSG SINAWSTKEP FSWIKVDLLA PMIIHGIKTQ GARQKFSSLY

1301 ISQFIIMYSL DGKKWQTYRG NSTGTLMVFF GNVDSSGIKH NIFNPPIIAR

1351 YIRLHPTHYS IRSTLRMELM GCDLNSCSMP LGMESKAISD AQITASSYFT

1401 NMFATWSPSK ARLHLQGRSN AWRPQVNNPK EWLQVDFQKT MKVTGVTTQG

1451 VKSLLTSMYV KEFLISSSQD GHQWTLFFQN GKVKVFQGNQ DSFTPVVNSL

1501 DPPLLTRYLR IHPQSWVHQI ALRMEVLGCE AQDLYDKTHT CPPCPAPELL

1551 GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH

1601 NAKTKPREEQ YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT

1651 ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG

1701 QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH

1751 YTQKSLSLSP GK*

Последовательность белка pSYNFVIII 271 (FVIII Fc с XTEN AE-42 в аминокислотном положении 18) (SEQ ID NO: 84)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP GSPAGSPTST

51 EEGTSESATP ESGPGSEPAT SGSETPASSS DLGELPVDAR FPPRVPKSFP

101 FNTSVVYKKT LFVEFTDHLF NIAKPRPPWM GLLGPTIQAE VYDTVVITLK

151 NMASHPVSLH AVGVSYWKAS EGAEYDDQTS QREKEDDKVF PGGSHTYVWQ

201 VLKENGPMAS DPLCLTYSYL SHVDLVKDLN SGLIGALLVC REGSLAKEKT

251 QTLHKFILLF AVFDEGKSWH SETKNSLMQD RDAASARAWP KMHTVNGYVN

301 RSLPGLIGCH RKSVYWHVIG MGTTPEVHSI FLEGHTFLVR NHRQASLEIS

351 PITFLTAQTL LMDLGQFLLF CHISSHQHDG MEAYVKVDSC PEEPQLRMKN

401 NEEAEDYDDD LTDSEMDVVR FDDDNSPSFI QIRSVAKKHP KTWVHYIAAE

451 EEDWDYAPLV LAPDDRSYKS QYLNNGPQRI GRKYKKVRFM AYTDETFKTR

501 EAIQHESGIL GPLLYGEVGD TLLIIFKNQA SRPYNIYPHG ITDVRPLYSR

551 RLPKGVKHLK DFPILPGEIF KYKWTVTVED GPTKSDPRCL TRYYSSFVNM

601 ERDLASGLIG PLLICYKESV DQRGNQIMSD KRNVILFSVF DENRSWYLTE

651 NIQRFLPNPA GVQLEDPEFQ ASNIMHSING YVFDSLQLSV CLHEVAYWYI

701 LSIGAQTDFL SVFFSGYTFK HKMVYEDTLT LFPFSGETVF MSMENPGLWI

751 LGCHNSDFRN RGMTALLKVS SCDKNTGDYY EDSYEDISAY LLSKNNAIEP

801 RSFSQNPPVL KRHQAEITRT TLQSDQEEID YDDTISVEMK KEDFDIYDED

851 ENQSPRSFQK KTRHYFIAAV ERLWDYGMSS SPHVLRNRAQ SGSVPQFKKV

901 VFQEFTDGSF TQPLYRGELN EHLGLLGPYI RAEVEDNIMV TFRNQASRPY

951 SFYSSLISYE EDQRQGAEPR KNFVKPNETK TYFWKVQHHM APTKDEFDCK

1001 AWAYFSDVDL EKDVHSGLIG PLLVCHTNTL NPAHGRQVTV QEFALFFTIF

1051 DETKSWYFTE NMERNCRAPC NIQMEDPTFK ENYRFHAING YIMDTLPGLV

1101 MAQDQRIRWY LLSMGSNENI HSIHFSGHVF TVRKKEEYKM ALYNLYPGVF

1151 ETVEMLPSKA GIWRVECLIG EHLHAGMSTL FLVYSNKCQT PLGMASGHIR

1201 DFQITASGQY GQWAPKLARL HYSGSINAWS TKEPFSWIKV DLLAPMIIHG

1251 IKTQGARQKF SSLYISQFII MYSLDGKKWQ TYRGNSTGTL MVFFGNVDSS

1301 GIKHNIFNPP IIARYIRLHP THYSIRSTLR MELMGCDLNS CSMPLGMESK

1351 AISDAQITAS SYFTNMFATW SPSKARLHLQ GRSNAWRPQV NNPKEWLQVD

1401 FQKTMKVTGV TTQGVKSLLT SMYVKEFLIS SSQDGHQWTL FFQNGKVKVF

1451 QGNQDSFTPV VNSLDPPLLT RYLRIHPQSW VHQIALRMEV LGCEAQDLYD

1501 KTHTCPPCPA PELLGGPSVF LFPPKPKDTL MISRTPEVTC VVVDVSHEDP

1551 EVKFNWYVDG VEVHNAKTKP REEQYNSTYR VVSVLTVLHQ DWLNGKEYKC

1601 KVSNKALPAP IEKTISKAKG QPREPQVYTL PPSRDELTKN QVSLTCLVKG

1651 FYPSDIAVEW ESNGQPENNY KTTPPVLDSD GSFFLYSKLT VDKSRWQQGN

1701 VFSCSVMHEA LHNHYTQKSL SLSPGK*

Последовательность белка pSYN FVIII 272 (FVIII с XTEN AE-144 в аминокислотном положении 18 и XTEN AE-244 в домене B - без Fc) (SEQ ID NO: 85)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQGAP TSESATPESG

51 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG

101 TSTEPSEGSA PGSPAGSPTS TEEGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS

151 ESATPESGPG SPAGSPTSTE EGSPAGSPTS TEEGASSSDL GELPVDARFP

201 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

251 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

301 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

351 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

401 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

451 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

501 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

551 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

601 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

651 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

701 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

751 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

801 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

851 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

901 SKNNAIEPRS FSQNGAPGTS ESATPESGPG SEPATSGSET PGTSESATPE

951 SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGTS TEPSEGSAPG SPAGSPTSTE

1001 EGTSESATPE SGPGSEPATS GSETPGTSES ATPESGPGSP AGSPTSTEEG

1051 SPAGSPTSTE EGTSTEPSEG SAPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGTS

1101 ESATPESGPG SEPATSGSET PGSEPATSGS ETPGSPAGSP TSTEEGTSTE

1151 PSEGSAPGTS TEPSEGSAPG SEPATSGSET PGTSESATPE SGPGTSTEPS

1201 EGSAPASSPP VLKRHQAEIT RTTLQSDQEE IDYDDTISVE MKKEDFDIYD

1251 EDENQSPRSF QKKTRHYFIA AVERLWDYGM SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK

1301 KVVFQEFTDG SFTQPLYRGE LNEHLGLLGP YIRAEVEDNI MVTFRNQASR

1351 PYSFYSSLIS YEEDQRQGAE PRKNFVKPNE TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD

1401 CKAWAYFSDV DLEKDVHSGL IGPLLVCHTN TLNPAHGRQV TVQEFALFFT

1451 IFDETKSWYF TENMERNCRA PCNIQMEDPT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG

1501 LVMAQDQRIR WYLLSMGSNE NIHSIHFSGH VFTVRKKEEY KMALYNLYPG

1551 VFETVEMLPS KAGIWRVECL IGEHLHAGMS TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

1601 IRDFQITASG QYGQWAPKLA RLHYSGSINA WSTKEPFSWI KVDLLAPMII

1651 HGIKTQGARQ KFSSLYISQF IIMYSLDGKK WQTYRGNSTG TLMVFFGNVD

1701 SSGIKHNIFN PPIIARYIRL HPTHYSIRST LRMELMGCDL NSCSMPLGME

1751 SKAISDAQIT ASSYFTNMFA TWSPSKARLH LQGRSNAWRP QVNNPKEWLQ

1801 VDFQKTMKVT GVTTQGVKSL LTSMYVKEFL ISSSQDGHQW TLFFQNGKVK

1851 VFQGNQDSFT PVVNSLDPPL LTRYLRIHPQ SWVHQIALRM EVLGCEAQDL

1901 Y*

Последовательность белка pSYN-FVIII-161 (SEQ ID NO: 69) (аминокислотные положения 1-1457 последовательности FVIII; область, выделенная подчеркиванием, представляет Fc-область; область, выделенная волнистым подчеркиванием, представляет расщепляемый линкер между первым Fc и фрагментом VWF; область, выделенная двойным подчеркиванием, представляет фрагмент VWF; область, выделенная жиирным шрифтом, представляет расщепляемый линкер между фрагментом VWF и Fc)

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP

51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY

101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG

151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE

201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM

251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH

301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE

351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT

401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY

451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT

501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR

551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE

601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL

651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS

701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL

751 SKNNAIEPRS FSQNPPVLKR HQREITRTTL QSDQEEIDYD DTISVEMKKE

801 DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG

851 SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF

901 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP

951 TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE

1001 FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI

1051 MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL

1101 YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL

1151 GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

1201 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV

1251 FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS

1301 MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN

1351 PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS QDGHQWTLFF

1401 QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH QIALRMEVLG

1451 CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV

1501 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW

1551 LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV

1601 SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

1651 KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGKRRRRSG GGGSGGGGSG

1701 GGGSGGGGSG GGGSGGGGSR KRRKRSLSCR PPMVKLVCPA DNLRAEGLEC

1751 TKTCQNYDLE CMSMGCVSGC LCPPGMVRHE NRCVALERCP CFHQGKEYAP

1801 GETVKIGCNT CVCRDRKWNC TDHVCDATCS TIGMAHYLTF DGLKYLFPGE

1851 CQYVLVQDYC GSNPGTFRIL VGNKGCSHPS VKCKKRVTIL VEGGEIELFD

1901 GEVNVKRPMK DETHFEVVES GRYIILLLGK ALSVVWDRHL SISVVLKQTY

1951 QEKVCGLCGN FDGIQNNDLT SSNLQVEEDP VDFGNSWKVS SQCADTRKVP

2001 LDSSPATCHN NIMKQTMVDS SCRILTSDVF QDCNKLVDPE PYLDVCIYDT

2051 CSCESIGDCA AFCDTIAAYA HVCAQHGKVV TWRTATLCPQ SCEERNLREN

2101 GYEAEWRYNS CAPACQVTCQ HPEPLACPVQ CVEGCHAHCP PGKILDELLQ

2151 TCVDPEDCPV CEVAGRRFAS GKKVTLNPSD PEHCQICHCD VVNLTCEACQ

2201 EP ISGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP GSEPATSGSE

2251 TPGTSESATP ESGPGTSTEP SEGSAPGSPA GSPTSTEEGT SESATPESGP

2301 GSEPATSGSE TPGTSESATP ESGPGSPAGS PTSTEEGSPA GSPTSTEEGT

2351 STEPSEGSAP GTSESATPES GPGTSESATP ESGPGTSESA TPESGPGSEP

2401 ATSGSETPGS EPATSGSETP GSPAGSPTST EEGTSTEPSE GSAPGTSTEP

2451 SEGSAPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP GTSTEPSEGS APDSGGGGSG

2501 GGGSGGGGSG GGGSGGGGSL VPRGSGG DKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF

2551 PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE

2601 EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP

2651 REPQVYTLPP SRDELTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT

2701 TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL

2751 SPGK

Последовательность белка pSYN-FVIII-170 (SEQ ID NO: 71)

1 SLSCRPPMVK LVCPADNLRA EGLECTKTCQ NYDLECMSMG CVSGCLCPPG

51 MVRHENRCVA LERCPCFHQG KEYAPGETVK IGCNTCVCRD RKWNCTDHVC

101 DATCSTIGMA HYLTFDGLKY LFPGECQYVL VQDYCGSNPG TFRILVGNKG

151 CSHPSVKCKK RVTILVEGGE IELFDGEVNV KRPMKDETHF EVVESGRYII

201 LLLGKALSVV WDRHLSISVV LKQTYQEKVC GLCGNFDGIQ NNDLTSSNLQ

251 VEEDPVDFGN SWKVSSQCAD TRKVPLDSSP ATCHNNIMKQ TMVDSSCRIL

301 TSDVFQDCNK LVDPEPYLDV CIYDTCSCES IGDCAAFCDT IAAYAHVCAQ

351 HGKVVTWRTA TLCPQSCEER NLRENGYEAE WRYNSCAPAC QVTCQHPEPL

401 ACPVQCVEGC HAHCPPGKIL DELLQTCVDP EDCPVCEVAG RRFASGKKVT

451 LNPSDPEHCQ ICHCDVVNLT CEACQEPISG TSESATPESG PGSEPATSGS

501 ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG TSTEPSEGSA

551 PGSPAGSPTS TEEGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG

601 SPAGSPTSTE EGSPAGSPTS TEEGTSTEPS EGSAPGTSES ATPESGPGTS

651 ESATPESGPG TSESATPESG PGSEPATSGS ETPGSEPATS GSETPGSPAG

701 SPTSTEEGTS TEPSEGSAPG TSTEPSEGSA PGSEPATSGS ETPGTSESAT

751 PESGPGTSTE PSEGSAPDSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSLVPRGS

801 GGASATRRYY LGAVELSWDY MQSDLGELPV DARFPPRVPK SFPFNTSVVY

851 KKTLFVEFTD HLFNIAKPRP PWMGLLGPTI QAEVYDTVVI TLKNMASHPV

901 SLHAVGVSYW KASEGAEYDD QTSQREKEDD KVFPGGSHTY VWQVLKENGP

951 MASDPLCLTY SYLSHVDLVK DLNSGLIGAL LVCREGSLAK EKTQTLHKFI

1001 LLFAVFDEGK SWHSETKNSL MQDRDAASAR AWPKMHTVNG YVNRSLPGLI

1051 GCHRKSVYWH VIGMGTTPEV HSIFLEGHTF LVRNHRQASL EISPITFLTA

1101 QTLLMDLGQF LLFCHISSHQ HDGMEAYVKV DSCPEEPQLR MKNNEEAEDY

1151 DDDLTDSEMD VVRFDDDNSP SFIQIRSVAK KHPKTWVHYI AAEEEDWDYA

1201 PLVLAPDDRS YKSQYLNNGP QRIGRKYKKV RFMAYTDETF KTREAIQHES

1251 GILGPLLYGE VGDTLLIIFK NQASRPYNIY PHGITDVRPL YSRRLPKGVK

1301 HLKDFPILPG EIFKYKWTVT VEDGPTKSDP RCLTRYYSSF VNMERDLASG

1351 LIGPLLICYK ESVDQRGNQI MSDKRNVILF SVFDENRSWY LTENIQRFLP

1401 NPAGVQLEDP EFQASNIMHS INGYVFDSLQ LSVCLHEVAY WYILSIGAQT

1451 DFLSVFFSGY TFKHKMVYED TLTLFPFSGE TVFMSMENPG LWILGCHNSD

1501 FRNRGMTALL KVSSCDKNTG DYYEDSYEDI SAYLLSKNNA IEPRSFSQNP

1551 PVLKRHQREI TRTTLQSDQE EIDYDDTISV EMKKEDFDIY DEDENQSPRS

1601 FQKKTRHYFI AAVERLWDYG MSSSPHVLRN RAQSGSVPQF KKVVFQEFTD

1651 GSFTQPLYRG ELNEHLGLLG PYIRAEVEDN IMVTFRNQAS RPYSFYSSLI

1701 SYEEDQRQGA EPRKNFVKPN ETKTYFWKVQ HHMAPTKDEF DCKAWAYFSD

1751 VDLEKDVHSG LIGPLLVCHT NTLNPAHGRQ VTVQEFALFF TIFDETKSWY

1801 FTENMERNCR APCNIQMEDP TFKENYRFHA INGYIMDTLP GLVMAQDQRI

1851 RWYLLSMGSN ENIHSIHFSG HVFTVRKKEE YKMALYNLYP GVFETVEMLP

1901 SKAGIWRVEC LIGEHLHAGM STLFLVYSNK CQTPLGMASG HIRDFQITAS

1951 GQYGQWAPKL ARLHYSGSIN AWSTKEPFSW IKVDLLAPMI IHGIKTQGAR

2001 QKFSSLYISQ FIIMYSLDGK KWQTYRGNST GTLMVFFGNV DSSGIKHNIF

2051 NPPIIARYIR LHPTHYSIRS TLRMELMGCD LNSCSMPLGM ESKAISDAQI

2101 TASSYFTNMF ATWSPSKARL HLQGRSNAWR PQVNNPKEWL QVDFQKTMKV

2151 TGVTTQGVKS LLTSMYVKEF LISSSQDGHQ WTLFFQNGKV KVFQGNQDSF

2201 TPVVNSLDPP LLTRYLRIHP QSWVHQIALR MEVLGCEAQD LY

Нуклеотидная последовательность pSYN FVIII 310 (кодирующая FVIII с полной делецией домена B, за исключением 2 аминокислотных остатков, и XTEN AE-288, вставленным после а. к. 742) (SEQ ID NO: 170)

1 ATGCAAATAG AGCTCTCCAC CTGCTTCTTT CTGTGCCTTT TGCGATTCTG

51 CTTTAGTGCC ACCAGAAGAT ACTACCTGGG TGCAGTGGAA CTGTCATGGG

101 ACTATATGCA AAGTGATCTC GGTGAGCTGC CTGTGGACGC AAGATTTCCT

151 CCTAGAGTGC CAAAATCTTT TCCATTCAAC ACCTCAGTCG TGTACAAAAA

201 GACTCTGTTT GTAGAATTCA CGGATCACCT TTTCAACATC GCTAAGCCAA

251 GGCCACCCTG GATGGGTCTG CTAGGTCCTA CCATCCAGGC TGAGGTTTAT

301 GATACAGTGG TCATTACACT TAAGAACATG GCTTCCCATC CTGTCAGTCT

351 TCATGCTGTT GGTGTATCCT ACTGGAAAGC TTCTGAGGGA GCTGAATATG

401 ATGATCAGAC CAGTCAAAGG GAGAAAGAAG ATGATAAAGT CTTCCCTGGT

451 GGAAGCCATA CATATGTCTG GCAGGTCCTG AAAGAGAATG GTCCAATGGC

501 CTCTGACCCA CTGTGCCTTA CCTACTCATA TCTTTCTCAT GTGGACCTGG

551 TAAAAGACTT GAATTCAGGC CTCATTGGAG CCCTACTAGT ATGTAGAGAA

601 GGGAGTCTGG CCAAGGAAAA GACACAGACC TTGCACAAAT TTATACTACT

651 TTTTGCTGTA TTTGATGAAG GGAAAAGTTG GCACTCAGAA ACAAAGAACT

701 CCTTGATGCA GGATAGGGAT GCTGCATCTG CTCGGGCCTG GCCTAAAATG

751 CACACAGTCA ATGGTTATGT AAACAGGTCT CTGCCAGGTC TGATTGGATG

801 CCACAGGAAA TCAGTCTATT GGCATGTGAT TGGAATGGGC ACCACTCCTG

851 AAGTGCACTC AATATTCCTC GAAGGTCACA CATTTCTTGT GAGGAACCAT

901 CGCCAGGCGT CCTTGGAAAT CTCGCCAATA ACTTTCCTTA CTGCTCAAAC

951 ACTCTTGATG GACCTTGGAC AGTTTCTACT GTTTTGTCAT ATCTCTTCCC

1001 ACCAACATGA TGGCATGGAA GCTTATGTCA AAGTAGACAG CTGTCCAGAG

1051 GAACCCCAAC TACGAATGAA AAATAATGAA GAAGCGGAAG ACTATGATGA

1101 TGATCTTACT GATTCTGAAA TGGATGTGGT CAGGTTTGAT GATGACAACT

1151 CTCCTTCCTT TATCCAAATT CGCTCAGTTG CCAAGAAGCA TCCTAAAACT

1201 TGGGTACATT ACATTGCTGC TGAAGAGGAG GACTGGGACT ATGCTCCCTT

1251 AGTCCTCGCC CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTCAATAT TTGAACAATG

1301 GCCCTCAGCG GATTGGTAGG AAGTACAAAA AAGTCCGATT TATGGCATAC

1351 ACAGATGAAA CCTTTAAGAC TCGTGAAGCT ATTCAGCATG AATCAGGAAT

1401 CTTGGGACCT TTACTTTATG GGGAAGTTGG AGACACACTG TTGATTATAT

1451 TTAAGAATCA AGCAAGCAGA CCATATAACA TCTACCCTCA CGGAATCACT

1501 GATGTCCGTC CTTTGTATTC AAGGAGATTA CCAAAAGGTG TAAAACATTT

1551 GAAGGATTTT CCAATTCTGC CAGGAGAAAT ATTCAAATAT AAATGGACAG

1601 TGACTGTAGA AGATGGGCCA ACTAAATCAG ATCCTCGGTG CCTGACCCGC

1651 TATTACTCTA GTTTCGTTAA TATGGAGAGA GATCTAGCTT CAGGACTCAT

1701 TGGCCCTCTC CTCATCTGCT ACAAAGAATC TGTAGATCAA AGAGGAAACC

1751 AGATAATGTC AGACAAGAGG AATGTCATCC TGTTTTCTGT ATTTGATGAG

1801 AACCGAAGCT GGTACCTCAC AGAGAATATA CAACGCTTTC TCCCCAATCC

1851 AGCTGGAGTG CAGCTTGAGG ATCCAGAGTT CCAAGCCTCC AACATCATGC

1901 ACAGCATCAA TGGCTATGTT TTTGATAGTT TGCAGTTGTC AGTTTGTTTG

1951 CATGAGGTGG CATACTGGTA CATTCTAAGC ATTGGAGCAC AGACTGACTT

2001 CCTTTCTGTC TTCTTCTCTG GATATACCTT CAAACACAAA ATGGTCTATG

2051 AAGACACACT CACCCTATTC CCATTCTCAG GAGAAACTGT CTTCATGTCG

2101 ATGGAAAACC CAGGTCTATG GATTCTGGGG TGCCACAACT CAGACTTTCG

2151 GAACAGAGGC ATGACCGCCT TACTGAAGGT TTCTAGTTGT GACAAGAACA

2201 CTGGTGATTA TTACGAGGAC AGTTATGAAG ATATTTCAGC ATACTTGCTG

2251 AGTAAAAACA ATGCCATTGA ACCAAGAAGC TTCGGTACCT CAGAGTCTGC

2301 TACCCCCGAG TCAGGGCCAG GATCAGAGCC AGCCACCTCC GGGTCTGAGA

2351 CACCCGGGAC TTCCGAGAGT GCCACCCCTG AGTCCGGACC CGGGTCCGAG

2401 CCCGCCACTT CCGGCTCCGA AACTCCCGGC ACAAGCGAGA GCGCTACCCC

2451 AGAGTCAGGA CCAGGAACAT CTACAGAGCC CTCTGAAGGC TCCGCTCCAG

2501 GGTCCCCAGC CGGCAGTCCC ACTAGCACCG AGGAGGGAAC CTCTGAAAGC

2551 GCCACACCCG AATCAGGGCC AGGGTCTGAG CCTGCTACCA GCGGCAGCGA

2601 GACACCAGGC ACCTCTGAGT CCGCCACACC AGAGTCCGGA CCCGGATCTC

2651 CCGCTGGGAG CCCCACCTCC ACTGAGGAGG GATCTCCTGC TGGCTCTCCA

2701 ACATCTACTG AGGAAGGTAC CTCAACCGAG CCATCCGAGG GATCAGCTCC

2751 CGGCACCTCA GAGTCGGCAA CCCCGGAGTC TGGACCCGGA ACTTCCGAAA

2801 GTGCCACACC AGAGTCCGGT CCCGGGACTT CAGAATCAGC AACACCCGAG

2851 TCCGGCCCTG GGTCTGAACC CGCCACAAGT GGTAGTGAGA CACCAGGATC

2901 AGAACCTGCT ACCTCAGGGT CAGAGACACC CGGATCTCCG GCAGGCTCAC

2951 CAACCTCCAC TGAGGAGGGC ACCAGCACAG AACCAAGCGA GGGCTCCGCA

3001 CCCGGAACAA GCACTGAACC CAGTGAGGGT TCAGCACCCG GCTCTGAGCC

3051 GGCCACAAGT GGCAGTGAGA CACCCGGCAC TTCAGAGAGT GCCACCCCCG

3101 AGAGTGGCCC AGGCACTAGT ACCGAGCCCT CTGAAGGCAG TGCGCCAGCC

3151 TCGAGCGAAA TAACTCGTAC TACTCTTCAG TCAGATCAAG AGGAAATCGA

3201 TTATGATGAT ACCATATCAG TTGAAATGAA GAAGGAAGAT TTTGACATTT

3251 ATGATGAGGA TGAAAATCAG AGCCCCCGCA GCTTTCAAAA GAAAACACGA

3301 CACTATTTTA TTGCTGCAGT GGAGAGGCTC TGGGATTATG GGATGAGTAG

3351 CTCCCCACAT GTTCTAAGAA ACAGGGCTCA GAGTGGCAGT GTCCCTCAGT

3401 TCAAGAAAGT TGTTTTCCAG GAATTTACTG ATGGCTCCTT TACTCAGCCC

3451 TTATACCGTG GAGAACTAAA TGAACATTTG GGACTCCTGG GGCCATATAT

3501 AAGAGCAGAA GTTGAAGATA ATATCATGGT AACTTTCAGA AATCAGGCCT

3551 CTCGTCCCTA TTCCTTCTAT TCTAGCCTTA TTTCTTATGA GGAAGATCAG

3601 AGGCAAGGAG CAGAACCTAG AAAAAACTTT GTCAAGCCTA ATGAAACCAA

3651 AACTTACTTT TGGAAAGTGC AACATCATAT GGCACCCACT AAAGATGAGT

3701 TTGACTGCAA AGCCTGGGCT TATTTCTCTG ATGTTGACCT GGAAAAAGAT

3751 GTGCACTCAG GCCTGATTGG ACCCCTTCTG GTCTGCCACA CTAACACACT

3801 GAACCCTGCT CATGGGAGAC AAGTGACAGT ACAGGAATTT GCTCTGTTTT

3851 TCACCATCTT TGATGAGACC AAAAGCTGGT ACTTCACTGA AAATATGGAA

3901 AGAAACTGCA GGGCTCCCTG CAATATCCAG ATGGAAGATC CCACTTTTAA

3951 AGAGAATTAT CGCTTCCATG CAATCAATGG CTACATAATG GATACACTAC

4001 CTGGCTTAGT AATGGCTCAG GATCAAAGGA TTCGATGGTA TCTGCTCAGC

4051 ATGGGCAGCA ATGAAAACAT CCATTCTATT CATTTCAGTG GACATGTGTT

4101 CACTGTACGA AAAAAAGAGG AGTATAAAAT GGCACTGTAC AATCTCTATC

4151 CAGGTGTTTT TGAGACAGTG GAAATGTTAC CATCCAAAGC TGGAATTTGG

4201 CGGGTGGAAT GCCTTATTGG CGAGCATCTA CATGCTGGGA TGAGCACACT

4251 TTTTCTGGTG TACAGCAATA AGTGTCAGAC TCCCCTGGGA ATGGCTTCTG

4301 GACACATTAG AGATTTTCAG ATTACAGCTT CAGGACAATA TGGACAGTGG

4351 GCCCCAAAGC TGGCCAGACT TCATTATTCC GGATCAATCA ATGCCTGGAG

4401 CACCAAGGAG CCCTTTTCTT GGATCAAGGT GGATCTGTTG GCACCAATGA

4451 TTATTCACGG CATCAAGACC CAGGGTGCCC GTCAGAAGTT CTCCAGCCTC

4501 TACATCTCTC AGTTTATCAT CATGTATAGT CTTGATGGGA AGAAGTGGCA

4551 GACTTATCGA GGAAATTCCA CTGGAACCTT AATGGTCTTC TTTGGCAATG

4601 TGGATTCATC TGGGATAAAA CACAATATTT TTAACCCTCC AATTATTGCT

4651 CGATACATCC GTTTGCACCC AACTCATTAT AGCATTCGCA GCACTCTTCG

4701 CATGGAGTTG ATGGGCTGTG ATTTAAATAG TTGCAGCATG CCATTGGGAA

4751 TGGAGAGTAA AGCAATATCA GATGCACAGA TTACTGCTTC ATCCTACTTT

4801 ACCAATATGT TTGCCACCTG GTCTCCTTCA AAAGCTCGAC TTCACCTCCA

4851 AGGGAGGAGT AATGCCTGGA GACCTCAGGT GAATAATCCA AAAGAGTGGC

4901 TGCAAGTGGA CTTCCAGAAG ACAATGAAAG TCACAGGAGT AACTACTCAG

4951 GGAGTAAAAT CTCTGCTTAC CAGCATGTAT GTGAAGGAGT TCCTCATCTC

5001 CAGCAGTCAA GATGGCCATC AGTGGACTCT CTTTTTTCAG AATGGCAAAG

5051 TAAAGGTTTT TCAGGGAAAT CAAGACTCCT TCACACCTGT GGTGAACTCT

5101 CTAGACCCAC CGTTACTGAC TCGCTACCTT CGAATTCACC CCCAGAGTTG

5151 GGTGCACCAG ATTGCCCTGA GGATGGAGGT TCTGGGCTGC GAGGCACAGG

5201 ACCTCTACGA CAAAACTCAC ACATGCCCAC CGTGCCCAGC TCCAGAACTC

5251 CTGGGCGGAC CGTCAGTCTT CCTCTTCCCC CCAAAACCCA AGGACACCCT

5301 CATGATCTCC CGGACCCCTG AGGTCACATG CGTGGTGGTG GACGTGAGCC

5351 ACGAAGACCC TGAGGTCAAG TTCAACTGGT ACGTGGACGG CGTGGAGGTG

5401 CATAATGCCA AGACAAAGCC GCGGGAGGAG CAGTACAACA GCACGTACCG

5451 TGTGGTCAGC GTCCTCACCG TCCTGCACCA GGACTGGCTG AATGGCAAGG

5501 AGTACAAGTG CAAGGTCTCC AACAAAGCCC TCCCAGCCCC CATCGAGAAA

5551 ACCATCTCCA AAGCCAAAGG GCAGCCCCGA GAACCACAGG TGTACACCCT

5601 GCCCCCATCC CGGGATGAGC TGACCAAGAA CCAGGTCAGC CTGACCTGCC

5651 TGGTCAAAGG CTTCTATCCC AGCGACATCG CCGTGGAGTG GGAGAGCAAT

5701 GGGCAGCCGG AGAACAACTA CAAGACCACG CCTCCCGTGT TGGACTCCGA

5751 CGGCTCCTTC TTCCTCTACA GCAAGCTCAC CGTGGACAAG AGCAGGTGGC

5801 AGCAGGGGAA CGTCTTCTCA TGCTCCGTGA TGCATGAGGC TCTGCACAAC

5851 CACTACACGC AGAAGAGCCT CTCCCTGTCT CCGGGTAAAT GA

Последовательность белка pSYN FVIII 310 (FVIII с полной делецией домена B, за исключением 2 аминокислотных остатков, и XTEN AE-288, вставленным после а. к. 742) (SEQ ID NO: 171)

1 ATRRYYLGAV ELSWDYMQSD LGELPVDARF PPRVPKSFPF NTSVVYKKTL

51 FVEFTDHLFN IAKPRPPWMG LLGPTIQAEV YDTVVITLKN MASHPVSLHA

101 VGVSYWKASE GAEYDDQTSQ REKEDDKVFP GGSHTYVWQV LKENGPMASD

151 PLCLTYSYLS HVDLVKDLNS GLIGALLVCR EGSLAKEKTQ TLHKFILLFA

201 VFDEGKSWHS ETKNSLMQDR DAASARAWPK MHTVNGYVNR SLPGLIGCHR

251 KSVYWHVIGM GTTPEVHSIF LEGHTFLVRN HRQASLEISP ITFLTAQTLL

301 MDLGQFLLFC HISSHQHDGM EAYVKVDSCP EEPQLRMKNN EEAEDYDDDL

351 TDSEMDVVRF DDDNSPSFIQ IRSVAKKHPK TWVHYIAAEE EDWDYAPLVL

401 APDDRSYKSQ YLNNGPQRIG RKYKKVRFMA YTDETFKTRE AIQHESGILG

451 PLLYGEVGDT LLIIFKNQAS RPYNIYPHGI TDVRPLYSRR LPKGVKHLKD

501 FPILPGEIFK YKWTVTVEDG PTKSDPRCLT RYYSSFVNME RDLASGLIGP

551 LLICYKESVD QRGNQIMSDK RNVILFSVFD ENRSWYLTEN IQRFLPNPAG

601 VQLEDPEFQA SNIMHSINGY VFDSLQLSVC LHEVAYWYIL SIGAQTDFLS

651 VFFSGYTFKH KMVYEDTLTL FPFSGETVFM SMENPGLWIL GCHNSDFRNR

701 GMTALLKVSS CDKNTGDYYE DSYEDISAYL LSKNNAIEPR SFGTSESATP

751 ESGPGSEPAT SGSETPGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP GTSESATPES

801 GPGTSTEPSE GSAPGSPAGS PTSTEEGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP

851 GTSESATPES GPGSPAGSPT STEEGSPAGS PTSTEEGTST EPSEGSAPGT

901 SESATPESGP GTSESATPES GPGTSESATP ESGPGSEPAT SGSETPGSEP

951 ATSGSETPGS PAGSPTSTEE GTSTEPSEGS APGTSTEPSE GSAPGSEPAT

1001 SGSETPGTSE SATPESGPGT STEPSEGSAP ASSEITRTTL QSDQEEIDYD

1051 DTISVEMKKE DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER LWDYGMSSSP

1101 HVLRNRAQSG SVPQFKKVVF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH LGLLGPYIRA

1151 EVEDNIMVTF RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY

1201 FWKVQHHMAP TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP

1251 AHGRQVTVQE FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRAPCNI QMEDPTFKEN

1301 YRFHAINGYI MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL SMGSNENIHS IHFSGHVFTV

1351 RKKEEYKMAL YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL

1401 VYSNKCQTPL GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK

1451 EPFSWIKVDL LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY

1501 RGNSTGTLMV FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME

1551 LMGCDLNSCS MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP SKARLHLQGR

1601 SNAWRPQVNN PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM YVKEFLISSS

1651 QDGHQWTLFF QNGKVKVFQG NQDSFTPVVN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH

1701 QIALRMEVLG CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI

1751 SRTPEVTCVV VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRVV

1801 SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP

1851 SRDELTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS

1901 FFLYSKLTVD KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK*

Нуклеотидная последовательность pSYN FVIII 312 (кодирующая FVIII с полной делецией домена B, за исключением 5 аминокислотных остатков, и XTEN AE-288, вставленным после а. к. 745 - вариант B5) (SEQ ID NO: 172)

1 ATGCAAATAG AGCTCTCCAC CTGCTTCTTT CTGTGCCTTT TGCGATTCTG

51 CTTTAGTGCC ACCAGAAGAT ACTACCTGGG TGCAGTGGAA CTGTCATGGG

101 ACTATATGCA AAGTGATCTC GGTGAGCTGC CTGTGGACGC AAGATTTCCT

151 CCTAGAGTGC CAAAATCTTT TCCATTCAAC ACCTCAGTCG TGTACAAAAA

201 GACTCTGTTT GTAGAATTCA CGGATCACCT TTTCAACATC GCTAAGCCAA

251 GGCCACCCTG GATGGGTCTG CTAGGTCCTA CCATCCAGGC TGAGGTTTAT

301 GATACAGTGG TCATTACACT TAAGAACATG GCTTCCCATC CTGTCAGTCT

351 TCATGCTGTT GGTGTATCCT ACTGGAAAGC TTCTGAGGGA GCTGAATATG

401 ATGATCAGAC CAGTCAAAGG GAGAAAGAAG ATGATAAAGT CTTCCCTGGT

451 GGAAGCCATA CATATGTCTG GCAGGTCCTG AAAGAGAATG GTCCAATGGC

501 CTCTGACCCA CTGTGCCTTA CCTACTCATA TCTTTCTCAT GTGGACCTGG

551 TAAAAGACTT GAATTCAGGC CTCATTGGAG CCCTACTAGT ATGTAGAGAA

601 GGGAGTCTGG CCAAGGAAAA GACACAGACC TTGCACAAAT TTATACTACT

651 TTTTGCTGTA TTTGATGAAG GGAAAAGTTG GCACTCAGAA ACAAAGAACT

701 CCTTGATGCA GGATAGGGAT GCTGCATCTG CTCGGGCCTG GCCTAAAATG

751 CACACAGTCA ATGGTTATGT AAACAGGTCT CTGCCAGGTC TGATTGGATG

801 CCACAGGAAA TCAGTCTATT GGCATGTGAT TGGAATGGGC ACCACTCCTG

851 AAGTGCACTC AATATTCCTC GAAGGTCACA CATTTCTTGT GAGGAACCAT

901 CGCCAGGCGT CCTTGGAAAT CTCGCCAATA ACTTTCCTTA CTGCTCAAAC

951 ACTCTTGATG GACCTTGGAC AGTTTCTACT GTTTTGTCAT ATCTCTTCCC

1001 ACCAACATGA TGGCATGGAA GCTTATGTCA AAGTAGACAG CTGTCCAGAG

1051 GAACCCCAAC TACGAATGAA AAATAATGAA GAAGCGGAAG ACTATGATGA

1101 TGATCTTACT GATTCTGAAA TGGATGTGGT CAGGTTTGAT GATGACAACT

1151 CTCCTTCCTT TATCCAAATT CGCTCAGTTG CCAAGAAGCA TCCTAAAACT

1201 TGGGTACATT ACATTGCTGC TGAAGAGGAG GACTGGGACT ATGCTCCCTT

1251 AGTCCTCGCC CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTCAATAT TTGAACAATG

1301 GCCCTCAGCG GATTGGTAGG AAGTACAAAA AAGTCCGATT TATGGCATAC

1351 ACAGATGAAA CCTTTAAGAC TCGTGAAGCT ATTCAGCATG AATCAGGAAT

1401 CTTGGGACCT TTACTTTATG GGGAAGTTGG AGACACACTG TTGATTATAT

1451 TTAAGAATCA AGCAAGCAGA CCATATAACA TCTACCCTCA CGGAATCACT

1501 GATGTCCGTC CTTTGTATTC AAGGAGATTA CCAAAAGGTG TAAAACATTT

1551 GAAGGATTTT CCAATTCTGC CAGGAGAAAT ATTCAAATAT AAATGGACAG

1601 TGACTGTAGA AGATGGGCCA ACTAAATCAG ATCCTCGGTG CCTGACCCGC

1651 TATTACTCTA GTTTCGTTAA TATGGAGAGA GATCTAGCTT CAGGACTCAT

1701 TGGCCCTCTC CTCATCTGCT ACAAAGAATC TGTAGATCAA AGAGGAAACC

1751 AGATAATGTC AGACAAGAGG AATGTCATCC TGTTTTCTGT ATTTGATGAG

1801 AACCGAAGCT GGTACCTCAC AGAGAATATA CAACGCTTTC TCCCCAATCC

1851 AGCTGGAGTG CAGCTTGAGG ATCCAGAGTT CCAAGCCTCC AACATCATGC

1901 ACAGCATCAA TGGCTATGTT TTTGATAGTT TGCAGTTGTC AGTTTGTTTG

1951 CATGAGGTGG CATACTGGTA CATTCTAAGC ATTGGAGCAC AGACTGACTT

2001 CCTTTCTGTC TTCTTCTCTG GATATACCTT CAAACACAAA ATGGTCTATG

2051 AAGACACACT CACCCTATTC CCATTCTCAG GAGAAACTGT CTTCATGTCG

2101 ATGGAAAACC CAGGTCTATG GATTCTGGGG TGCCACAACT CAGACTTTCG

2151 GAACAGAGGC ATGACCGCCT TACTGAAGGT TTCTAGTTGT GACAAGAACA

2201 CTGGTGATTA TTACGAGGAC AGTTATGAAG ATATTTCAGC ATACTTGCTG

2251 AGTAAAAACA ATGCCATTGA ACCAAGAAGC TTCTCTCAAA ACGGTACCTC

2301 AGAGTCTGCT ACCCCCGAGT CAGGGCCAGG ATCAGAGCCA GCCACCTCCG

2351 GGTCTGAGAC ACCCGGGACT TCCGAGAGTG CCACCCCTGA GTCCGGACCC

2401 GGGTCCGAGC CCGCCACTTC CGGCTCCGAA ACTCCCGGCA CAAGCGAGAG

2451 CGCTACCCCA GAGTCAGGAC CAGGAACATC TACAGAGCCC TCTGAAGGCT

2501 CCGCTCCAGG GTCCCCAGCC GGCAGTCCCA CTAGCACCGA GGAGGGAACC

2551 TCTGAAAGCG CCACACCCGA ATCAGGGCCA GGGTCTGAGC CTGCTACCAG

2601 CGGCAGCGAG ACACCAGGCA CCTCTGAGTC CGCCACACCA GAGTCCGGAC

2651 CCGGATCTCC CGCTGGGAGC CCCACCTCCA CTGAGGAGGG ATCTCCTGCT

2701 GGCTCTCCAA CATCTACTGA GGAAGGTACC TCAACCGAGC CATCCGAGGG

2751 ATCAGCTCCC GGCACCTCAG AGTCGGCAAC CCCGGAGTCT GGACCCGGAA

2801 CTTCCGAAAG TGCCACACCA GAGTCCGGTC CCGGGACTTC AGAATCAGCA

2851 ACACCCGAGT CCGGCCCTGG GTCTGAACCC GCCACAAGTG GTAGTGAGAC

2901 ACCAGGATCA GAACCTGCTA CCTCAGGGTC AGAGACACCC GGATCTCCGG

2951 CAGGCTCACC AACCTCCACT GAGGAGGGCA CCAGCACAGA ACCAAGCGAG

3001 GGCTCCGCAC CCGGAACAAG CACTGAACCC AGTGAGGGTT CAGCACCCGG

3051 CTCTGAGCCG GCCACAAGTG GCAGTGAGAC ACCCGGCACT TCAGAGAGTG

3101 CCACCCCCGA GAGTGGCCCA GGCACTAGTA CCGAGCCCTC TGAAGGCAGT

3151 GCGCCAGCCT CGAGCGAAAT AACTCGTACT ACTCTTCAGT CAGATCAAGA

3201 GGAAATCGAT TATGATGATA CCATATCAGT TGAAATGAAG AAGGAAGATT

3251 TTGACATTTA TGATGAGGAT GAAAATCAGA GCCCCCGCAG CTTTCAAAAG

3301 AAAACACGAC ACTATTTTAT TGCTGCAGTG GAGAGGCTCT GGGATTATGG

3351 GATGAGTAGC TCCCCACATG TTCTAAGAAA CAGGGCTCAG AGTGGCAGTG

3401 TCCCTCAGTT CAAGAAAGTT GTTTTCCAGG AATTTACTGA TGGCTCCTTT

3451 ACTCAGCCCT TATACCGTGG AGAACTAAAT GAACATTTGG GACTCCTGGG

3501 GCCATATATA AGAGCAGAAG TTGAAGATAA TATCATGGTA ACTTTCAGAA

3551 ATCAGGCCTC TCGTCCCTAT TCCTTCTATT CTAGCCTTAT TTCTTATGAG

3601 GAAGATCAGA GGCAAGGAGC AGAACCTAGA AAAAACTTTG TCAAGCCTAA

3651 TGAAACCAAA ACTTACTTTT GGAAAGTGCA ACATCATATG GCACCCACTA

3701 AAGATGAGTT TGACTGCAAA GCCTGGGCTT ATTTCTCTGA TGTTGACCTG

3751 GAAAAAGATG TGCACTCAGG CCTGATTGGA CCCCTTCTGG TCTGCCACAC

3801 TAACACACTG AACCCTGCTC ATGGGAGACA AGTGACAGTA CAGGAATTTG

3851 CTCTGTTTTT CACCATCTTT GATGAGACCA AAAGCTGGTA CTTCACTGAA

3901 AATATGGAAA GAAACTGCAG GGCTCCCTGC AATATCCAGA TGGAAGATCC

3951 CACTTTTAAA GAGAATTATC GCTTCCATGC AATCAATGGC TACATAATGG

4001 ATACACTACC TGGCTTAGTA ATGGCTCAGG ATCAAAGGAT TCGATGGTAT

4051 CTGCTCAGCA TGGGCAGCAA TGAAAACATC CATTCTATTC ATTTCAGTGG

4101 ACATGTGTTC ACTGTACGAA AAAAAGAGGA GTATAAAATG GCACTGTACA

4151 ATCTCTATCC AGGTGTTTTT GAGACAGTGG AAATGTTACC ATCCAAAGCT

4201 GGAATTTGGC GGGTGGAATG CCTTATTGGC GAGCATCTAC ATGCTGGGAT

4251 GAGCACACTT TTTCTGGTGT ACAGCAATAA GTGTCAGACT CCCCTGGGAA

4301 TGGCTTCTGG ACACATTAGA GATTTTCAGA TTACAGCTTC AGGACAATAT

4351 GGACAGTGGG CCCCAAAGCT GGCCAGACTT CATTATTCCG GATCAATCAA

4401 TGCCTGGAGC ACCAAGGAGC CCTTTTCTTG GATCAAGGTG GATCTGTTGG

4451 CACCAATGAT TATTCACGGC ATCAAGACCC AGGGTGCCCG TCAGAAGTTC

4501 TCCAGCCTCT ACATCTCTCA GTTTATCATC ATGTATAGTC TTGATGGGAA

4551 GAAGTGGCAG ACTTATCGAG GAAATTCCAC TGGAACCTTA ATGGTCTTCT

4601 TTGGCAATGT GGATTCATCT GGGATAAAAC ACAATATTTT TAACCCTCCA

4651 ATTATTGCTC GATACATCCG TTTGCACCCA ACTCATTATA GCATTCGCAG

4701 CACTCTTCGC ATGGAGTTGA TGGGCTGTGA TTTAAATAGT TGCAGCATGC

4751 CATTGGGAAT GGAGAGTAAA GCAATATCAG ATGCACAGAT TACTGCTTCA

4801 TCCTACTTTA CCAATATGTT TGCCACCTGG TCTCCTTCAA AAGCTCGACT

4851 TCACCTCCAA GGGAGGAGTA ATGCCTGGAG ACCTCAGGTG AATAATCCAA

4901 AAGAGTGGCT GCAAGTGGAC TTCCAGAAGA CAATGAAAGT CACAGGAGTA

4951 ACTACTCAGG GAGTAAAATC TCTGCTTACC AGCATGTATG TGAAGGAGTT

5001 CCTCATCTCC AGCAGTCAAG ATGGCCATCA GTGGACTCTC TTTTTTCAGA

5051 ATGGCAAAGT AAAGGTTTTT CAGGGAAATC AAGACTCCTT CACACCTGTG

5101 GTGAACTCTC TAGACCCACC GTTACTGACT CGCTACCTTC GAATTCACCC

5151 CCAGAGTTGG GTGCACCAGA TTGCCCTGAG GATGGAGGTT CTGGGCTGCG

5201 AGGCACAGGA CCTCTACGAC AAAACTCACA CATGCCCACC GTGCCCAGCT

5251 CCAGAACTCC TGGGCGGACC GTCAGTCTTC CTCTTCCCCC CAAAACCCAA

5301 GGACACCCTC ATGATCTCCC GGACCCCTGA GGTCACATGC GTGGTGGTGG

5351 ACGTGAGCCA CGAAGACCCT GAGGTCAAGT TCAACTGGTA CGTGGACGGC

5401 GTGGAGGTGC ATAATGCCAA GACAAAGCCG CGGGAGGAGC AGTACAACAG

5451 CACGTACCGT GTGGTCAGCG TCCTCACCGT CCTGCACCAG GACTGGCTGA

5501 ATGGCAAGGA GTACAAGTGC AAGGTCTCCA ACAAAGCCCT CCCAGCCCCC

5551 ATCGAGAAAA CCATCTCCAA AGCCAAAGGG CAGCCCCGAG AACCACAGGT

5601 GTACACCCTG CCCCCATCCC GGGATGAGCT GACCAAGAAC CAGGTCAGCC

5651 TGACCTGCCT GGTCAAAGGC TTCTATCCCA GCGACATCGC CGTGGAGTGG

5701 GAGAGCAATG GGCAGCCGGA GAACAACTAC AAGACCACGC CTCCCGTGTT

5751 GGACTCCGAC GGCTCCTTCT TCCTCTACAG CAAGCTCACC GTGGACAAGA

5801 GCAGGTGGCA GCAGGGGAAC GTCTTCTCAT GCTCCGTGAT GCATGAGGCT

5851 CTGCACAACC ACTACACGCA GAAGAGCCTC TCCCTGTCTC CGGGTAAATG

Последовательность белка pSYN FVIII 312 (FVIII с полной делецией домена B, за исключением 5 аминокислотных остатков, и XTEN AE-288, вставленным после а. к. 745 - вариант B5) (SEQ ID NO: 173)

1 ATRRYYLGAV ELSWDYMQSD LGELPVDARF PPRVPKSFPF NTSVVYKKTL

51 FVEFTDHLFN IAKPRPPWMG LLGPTIQAEV YDTVVITLKN MASHPVSLHA

101 VGVSYWKASE GAEYDDQTSQ REKEDDKVFP GGSHTYVWQV LKENGPMASD

151 PLCLTYSYLS HVDLVKDLNS GLIGALLVCR EGSLAKEKTQ TLHKFILLFA

201 VFDEGKSWHS ETKNSLMQDR DAASARAWPK MHTVNGYVNR SLPGLIGCHR

251 KSVYWHVIGM GTTPEVHSIF LEGHTFLVRN HRQASLEISP ITFLTAQTLL

301 MDLGQFLLFC HISSHQHDGM EAYVKVDSCP EEPQLRMKNN EEAEDYDDDL

351 TDSEMDVVRF DDDNSPSFIQ IRSVAKKHPK TWVHYIAAEE EDWDYAPLVL

401 APDDRSYKSQ YLNNGPQRIG RKYKKVRFMA YTDETFKTRE AIQHESGILG

451 PLLYGEVGDT LLIIFKNQAS RPYNIYPHGI TDVRPLYSRR LPKGVKHLKD

501 FPILPGEIFK YKWTVTVEDG PTKSDPRCLT RYYSSFVNME RDLASGLIGP

551 LLICYKESVD QRGNQIMSDK RNVILFSVFD ENRSWYLTEN IQRFLPNPAG

601 VQLEDPEFQA SNIMHSINGY VFDSLQLSVC LHEVAYWYIL SIGAQTDFLS

651 VFFSGYTFKH KMVYEDTLTL FPFSGETVFM SMENPGLWIL GCHNSDFRNR

701 GMTALLKVSS CDKNTGDYYE DSYEDISAYL LSKNNAIEPR SFSQNGTSES

751 ATPESGPGSE PATSGSETPG TSESATPESG PGSEPATSGS ETPGTSESAT

801 PESGPGTSTE PSEGSAPGSP AGSPTSTEEG TSESATPESG PGSEPATSGS

851 ETPGTSESAT PESGPGSPAG SPTSTEEGSP AGSPTSTEEG TSTEPSEGSA

901 PGTSESATPE SGPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGSE PATSGSETPG

951 SEPATSGSET PGSPAGSPTS TEEGTSTEPS EGSAPGTSTE PSEGSAPGSE

1001 PATSGSETPG TSESATPESG PGTSTEPSEG SAPASSEITR TTLQSDQEEI

1051 DYDDTISVEM KKEDFDIYDE DENQSPRSFQ KKTRHYFIAA VERLWDYGMS

1101 SSPHVLRNRA QSGSVPQFKK VVFQEFTDGS FTQPLYRGEL NEHLGLLGPY

1151 IRAEVEDNIM VTFRNQASRP YSFYSSLISY EEDQRQGAEP RKNFVKPNET

1201 KTYFWKVQHH MAPTKDEFDC KAWAYFSDVD LEKDVHSGLI GPLLVCHTNT

1251 LNPAHGRQVT VQEFALFFTI FDETKSWYFT ENMERNCRAP CNIQMEDPTF

1301 KENYRFHAIN GYIMDTLPGL VMAQDQRIRW YLLSMGSNEN IHSIHFSGHV

1351 FTVRKKEEYK MALYNLYPGV FETVEMLPSK AGIWRVECLI GEHLHAGMST

1401 LFLVYSNKCQ TPLGMASGHI RDFQITASGQ YGQWAPKLAR LHYSGSINAW

1451 STKEPFSWIK VDLLAPMIIH GIKTQGARQK FSSLYISQFI IMYSLDGKKW

1501 QTYRGNSTGT LMVFFGNVDS SGIKHNIFNP PIIARYIRLH PTHYSIRSTL

1551 RMELMGCDLN SCSMPLGMES KAISDAQITA SSYFTNMFAT WSPSKARLHL

1601 QGRSNAWRPQ VNNPKEWLQV DFQKTMKVTG VTTQGVKSLL TSMYVKEFLI

1651 SSSQDGHQWT LFFQNGKVKV FQGNQDSFTP VVNSLDPPLL TRYLRIHPQS

1701 WVHQIALRME VLGCEAQDLY DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT

1751 LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY

1801 RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT

1851 LPPSRDELTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS

1901 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK*

Нуклеотидная последовательность pSYN VWF059 (кодирующая D'D3 VWF-Fc с сайтом расщепления тромбином в кислой области 2 (а2) в линкере) (SEQ ID NO: 196)

1 ATGATTCCTG CCAGATTTGC CGGGGTGCTG CTTGCTCTGG CCCTCATTTT

51 GCCAGGGACC CTTTGTGCAG AAGGAACTCG CGGCAGGTCA TCCACGGCCC

101 GATGCAGCCT TTTCGGAAGT GACTTCGTCA ACACCTTTGA TGGGAGCATG

151 TACAGCTTTG CGGGATACTG CAGTTACCTC CTGGCAGGGG GCTGCCAGAA

201 ACGCTCCTTC TCGATTATTG GGGACTTCCA GAATGGCAAG AGAGTGAGCC

251 TCTCCGTGTA TCTTGGGGAA TTTTTTGACA TCCATTTGTT TGTCAATGGT

301 ACCGTGACAC AGGGGGACCA AAGAGTCTCC ATGCCCTATG CCTCCAAAGG

351 GCTGTATCTA GAAACTGAGG CTGGGTACTA CAAGCTGTCC GGTGAGGCCT

401 ATGGCTTTGT GGCCAGGATC GATGGCAGCG GCAACTTTCA AGTCCTGCTG

451 TCAGACAGAT ACTTCAACAA GACCTGCGGG CTGTGTGGCA ACTTTAACAT

501 CTTTGCTGAA GATGACTTTA TGACCCAAGA AGGGACCTTG ACCTCGGACC

551 CTTATGACTT TGCCAACTCA TGGGCTCTGA GCAGTGGAGA ACAGTGGTGT

601 GAACGGGCAT CTCCTCCCAG CAGCTCATGC AACATCTCCT CTGGGGAAAT

651 GCAGAAGGGC CTGTGGGAGC AGTGCCAGCT TCTGAAGAGC ACCTCGGTGT

701 TTGCCCGCTG CCACCCTCTG GTGGACCCCG AGCCTTTTGT GGCCCTGTGT

751 GAGAAGACTT TGTGTGAGTG TGCTGGGGGG CTGGAGTGCG CCTGCCCTGC

801 CCTCCTGGAG TACGCCCGGA CCTGTGCCCA GGAGGGAATG GTGCTGTACG

851 GCTGGACCGA CCACAGCGCG TGCAGCCCAG TGTGCCCTGC TGGTATGGAG

901 TATAGGCAGT GTGTGTCCCC TTGCGCCAGG ACCTGCCAGA GCCTGCACAT

951 CAATGAAATG TGTCAGGAGC GATGCGTGGA TGGCTGCAGC TGCCCTGAGG

1001 GACAGCTCCT GGATGAAGGC CTCTGCGTGG AGAGCACCGA GTGTCCCTGC

1051 GTGCATTCCG GAAAGCGCTA CCCTCCCGGC ACCTCCCTCT CTCGAGACTG

1101 CAACACCTGC ATTTGCCGAA ACAGCCAGTG GATCTGCAGC AATGAAGAAT

1151 GTCCAGGGGA GTGCCTTGTC ACTGGTCAAT CCCACTTCAA GAGCTTTGAC

1201 AACAGATACT TCACCTTCAG TGGGATCTGC CAGTACCTGC TGGCCCGGGA

1251 TTGCCAGGAC CACTCCTTCT CCATTGTCAT TGAGACTGTC CAGTGTGCTG

1301 ATGACCGCGA CGCTGTGTGC ACCCGCTCCG TCACCGTCCG GCTGCCTGGC

1351 CTGCACAACA GCCTTGTGAA ACTGAAGCAT GGGGCAGGAG TTGCCATGGA

1401 TGGCCAGGAC ATCCAGCTCC CCCTCCTGAA AGGTGACCTC CGCATCCAGC

1451 ATACAGTGAC GGCCTCCGTG CGCCTCAGCT ACGGGGAGGA CCTGCAGATG

1501 GACTGGGATG GCCGCGGGAG GCTGCTGGTG AAGCTGTCCC CCGTCTATGC

1551 CGGGAAGACC TGCGGCCTGT GTGGGAATTA CAATGGCAAC CAGGGCGACG

1601 ACTTCCTTAC CCCCTCTGGG CTGGCGGAGC CCCGGGTGGA GGACTTCGGG

1651 AACGCCTGGA AGCTGCACGG GGACTGCCAG GACCTGCAGA AGCAGCACAG

1701 CGATCCCTGC GCCCTCAACC CGCGCATGAC CAGGTTCTCC GAGGAGGCGT

1751 GCGCGGTCCT GACGTCCCCC ACATTCGAGG CCTGCCATCG TGCCGTCAGC

1801 CCGCTGCCCT ACCTGCGGAA CTGCCGCTAC GACGTGTGCT CCTGCTCGGA

1851 CGGCCGCGAG TGCCTGTGCG GCGCCCTGGC CAGCTATGCC GCGGCCTGCG

1901 CGGGGAGAGG CGTGCGCGTC GCGTGGCGCG AGCCAGGCCG CTGTGAGCTG

1951 AACTGCCCGA AAGGCCAGGT GTACCTGCAG TGCGGGACCC CCTGCAACCT

2001 GACCTGCCGC TCTCTCTCTT ACCCGGATGA GGAATGCAAT GAGGCCTGCC

2051 TGGAGGGCTG CTTCTGCCCC CCAGGGCTCT ACATGGATGA GAGGGGGGAC

2101 TGCGTGCCCA AGGCCCAGTG CCCCTGTTAC TATGACGGTG AGATCTTCCA

2151 GCCAGAAGAC ATCTTCTCAG ACCATCACAC CATGTGCTAC TGTGAGGATG

2201 GCTTCATGCA CTGTACCATG AGTGGAGTCC CCGGAAGCTT GCTGCCTGAC

2251 GCTGTCCTCA GCAGTCCCCT GTCTCATCGC AGCAAAAGGA GCCTATCCTG

2301 TCGGCCCCCC ATGGTCAAGC TGGTGTGTCC CGCTGACAAC CTGCGGGCTG

2351 AAGGGCTCGA GTGTACCAAA ACGTGCCAGA ACTATGACCT GGAGTGCATG

2401 AGCATGGGCT GTGTCTCTGG CTGCCTCTGC CCCCCGGGCA TGGTCCGGCA

2451 TGAGAACAGA TGTGTGGCCC TGGAAAGGTG TCCCTGCTTC CATCAGGGCA

2501 AGGAGTATGC CCCTGGAGAA ACAGTGAAGA TTGGCTGCAA CACTTGTGTC

2551 TGTCGGGACC GGAAGTGGAA CTGCACAGAC CATGTGTGTG ATGCCACGTG

2601 CTCCACGATC GGCATGGCCC ACTACCTCAC CTTCGACGGG CTCAAATACC

2651 TGTTCCCCGG GGAGTGCCAG TACGTTCTGG TGCAGGATTA CTGCGGCAGT

2701 AACCCTGGGA CCTTTCGGAT CCTAGTGGGG AATAAGGGAT GCAGCCACCC

2751 CTCAGTGAAA TGCAAGAAAC GGGTCACCAT CCTGGTGGAG GGAGGAGAGA

2801 TTGAGCTGTT TGACGGGGAG GTGAATGTGA AGAGGCCCAT GAAGGATGAG

2851 ACTCACTTTG AGGTGGTGGA GTCTGGCCGG TACATCATTC TGCTGCTGGG

2901 CAAAGCCCTC TCCGTGGTCT GGGACCGCCA CCTGAGCATC TCCGTGGTCC

2951 TGAAGCAGAC ATACCAGGAG AAAGTGTGTG GCCTGTGTGG GAATTTTGAT

3001 GGCATCCAGA ACAATGACCT CACCAGCAGC AACCTCCAAG TGGAGGAAGA

3051 CCCTGTGGAC TTTGGGAACT CCTGGAAAGT GAGCTCGCAG TGTGCTGACA

3101 CCAGAAAAGT GCCTCTGGAC TCATCCCCTG CCACCTGCCA TAACAACATC

3151 ATGAAGCAGA CGATGGTGGA TTCCTCCTGT AGAATCCTTA CCAGTGACGT

3201 CTTCCAGGAC TGCAACAAGC TGGTGGACCC CGAGCCATAT CTGGATGTCT

3251 GCATTTACGA CACCTGCTCC TGTGAGTCCA TTGGGGACTG CGCCGCATTC

3301 TGCGACACCA TTGCTGCCTA TGCCCACGTG TGTGCCCAGC ATGGCAAGGT

3351 GGTGACCTGG AGGACGGCCA CATTGTGCCC CCAGAGCTGC GAGGAGAGGA

3401 ATCTCCGGGA GAACGGGTAT GAGGCTGAGT GGCGCTATAA CAGCTGTGCA

3451 CCTGCCTGTC AAGTCACGTG TCAGCACCCT GAGCCACTGG CCTGCCCTGT

3501 GCAGTGTGTG GAGGGCTGCC ATGCCCACTG CCCTCCAGGG AAAATCCTGG

3551 ATGAGCTTTT GCAGACCTGC GTTGACCCTG AAGACTGTCC AGTGTGTGAG

3601 GTGGCTGGCC GGCGTTTTGC CTCAGGAAAG AAAGTCACCT TGAATCCCAG

3651 TGACCCTGAG CACTGCCAGA TTTGCCACTG TGATGTTGTC AACCTCACCT

3701 GTGAAGCCTG CCAGGAGCCG ATATCGGGCG CGCCAACATC AGAGAGCGCC

3751 ACCCCTGAAA GTGGTCCCGG GAGCGAGCCA GCCACATCTG GGTCGGAAAC

3801 GCCAGGCACA AGTGAGTCTG CAACTCCCGA GTCCGGACCT GGCTCCGAGC

3851 CTGCCACTAG CGGCTCCGAG ACTCCGGGAA CTTCCGAGAG CGCTACACCA

3901 GAAAGCGGAC CCGGAACCAG TACCGAACCT AGCGAGGGCT CTGCTCCGGG

3951 CAGCCCAGCC GGCTCTCCTA CATCCACGGA GGAGGGCACT TCCGAATCCG

4001 CCACCCCGGA GTCAGGGCCA GGATCTGAAC CCGCTACCTC AGGCAGTGAG

4051 ACGCCAGGAA CGAGCGAGTC CGCTACACCG GAGAGTGGGC CAGGGAGCCC

4101 TGCTGGATCT CCTACGTCCA CTGAGGAAGG GTCACCAGCG GGCTCGCCCA

4151 CCAGCACTGA AGAAGGTGCC TCGATATCTG ACAAGAACAC TGGTGATTAT

4201 TACGAGGACA GTTATGAAGA TATTTCAGCA TACTTGCTGA GTAAAAACAA

4251 TGCCATTGAA CCAAGAAGCT TCTCTGACAA AACTCACACA TGCCCACCGT

4301 GCCCAGCTCC AGAACTCCTG GGCGGACCGT CAGTCTTCCT CTTCCCCCCA

4351 AAACCCAAGG ACACCCTCAT GATCTCCCGG ACCCCTGAGG TCACATGCGT

4401 GGTGGTGGAC GTGAGCCACG AAGACCCTGA GGTCAAGTTC AACTGGTACG

4451 TGGACGGCGT GGAGGTGCAT AATGCCAAGA CAAAGCCGCG GGAGGAGCAG

4501 TACAACAGCA CGTACCGTGT GGTCAGCGTC CTCACCGTCC TGCACCAGGA

4551 CTGGCTGAAT GGCAAGGAGT ACAAGTGCAA GGTCTCCAAC AAAGCCCTCC

4601 CAGCCCCCAT CGAGAAAACC ATCTCCAAAG CCAAAGGGCA GCCCCGAGAA

4651 CCACAGGTGT ACACCCTGCC CCCATCCCGG GATGAGCTGA CCAAGAACCA

4701 GGTCAGCCTG ACCTGCCTGG TCAAAGGCTT CTATCCCAGC GACATCGCCG

4751 TGGAGTGGGA GAGCAATGGG CAGCCGGAGA ACAACTACAA GACCACGCCT

4801 CCCGTGTTGG ACTCCGACGG CTCCTTCTTC CTCTACAGCA AGCTCACCGT

4851 GGACAAGAGC AGGTGGCAGC AGGGGAACGT CTTCTCATGC TCCGTGATGC

4901 ATGAGGCTCT GCACAACCAC TACACGCAGA AGAGCCTCTC CCTGTCTCCG

4951 GGTAAATGA

Последовательность белка pSYN VWF059 (D'D3 VWF-Fc с сайтом расщепления FVIII тромбином в области a2 в линкере) - зона, выделенная жирным шрифтом и подчеркиванием, показывает область a2 (SEQ ID NO: 197)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP ISGAPTSESA

1251 TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP GSEPATSGSE TPGTSESATP

1301 ESGPGTSTEP SEGSAPGSPA GSPTSTEEGT SESATPESGP GSEPATSGSE

1351 TPGTSESATP ESGPGSPAGS PTSTEEGSPA GSPTSTEEGA SIS DKNTGDY

1401 YEDSYEDISA YLLSKNNAIE PRSFS DKTHT CPPCPAPELL GGPSVFLFPP

1451 KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ

1501 YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE

1551 PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP

1601 PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP

1651 GK*

Нуклеотидная последовательность pSYN VWF062 (кодирующая D'D3 VWF-Fc без сайта расщепления тромбином в линкере) (SEQ ID NO: 198)

1 ATGATTCCTG CCAGATTTGC CGGGGTGCTG CTTGCTCTGG CCCTCATTTT

51 GCCAGGGACC CTTTGTGCAG AAGGAACTCG CGGCAGGTCA TCCACGGCCC

101 GATGCAGCCT TTTCGGAAGT GACTTCGTCA ACACCTTTGA TGGGAGCATG

151 TACAGCTTTG CGGGATACTG CAGTTACCTC CTGGCAGGGG GCTGCCAGAA

201 ACGCTCCTTC TCGATTATTG GGGACTTCCA GAATGGCAAG AGAGTGAGCC

251 TCTCCGTGTA TCTTGGGGAA TTTTTTGACA TCCATTTGTT TGTCAATGGT

301 ACCGTGACAC AGGGGGACCA AAGAGTCTCC ATGCCCTATG CCTCCAAAGG

351 GCTGTATCTA GAAACTGAGG CTGGGTACTA CAAGCTGTCC GGTGAGGCCT

401 ATGGCTTTGT GGCCAGGATC GATGGCAGCG GCAACTTTCA AGTCCTGCTG

451 TCAGACAGAT ACTTCAACAA GACCTGCGGG CTGTGTGGCA ACTTTAACAT

501 CTTTGCTGAA GATGACTTTA TGACCCAAGA AGGGACCTTG ACCTCGGACC

551 CTTATGACTT TGCCAACTCA TGGGCTCTGA GCAGTGGAGA ACAGTGGTGT

601 GAACGGGCAT CTCCTCCCAG CAGCTCATGC AACATCTCCT CTGGGGAAAT

651 GCAGAAGGGC CTGTGGGAGC AGTGCCAGCT TCTGAAGAGC ACCTCGGTGT

701 TTGCCCGCTG CCACCCTCTG GTGGACCCCG AGCCTTTTGT GGCCCTGTGT

751 GAGAAGACTT TGTGTGAGTG TGCTGGGGGG CTGGAGTGCG CCTGCCCTGC

801 CCTCCTGGAG TACGCCCGGA CCTGTGCCCA GGAGGGAATG GTGCTGTACG

851 GCTGGACCGA CCACAGCGCG TGCAGCCCAG TGTGCCCTGC TGGTATGGAG

901 TATAGGCAGT GTGTGTCCCC TTGCGCCAGG ACCTGCCAGA GCCTGCACAT

951 CAATGAAATG TGTCAGGAGC GATGCGTGGA TGGCTGCAGC TGCCCTGAGG

1001 GACAGCTCCT GGATGAAGGC CTCTGCGTGG AGAGCACCGA GTGTCCCTGC

1051 GTGCATTCCG GAAAGCGCTA CCCTCCCGGC ACCTCCCTCT CTCGAGACTG

1101 CAACACCTGC ATTTGCCGAA ACAGCCAGTG GATCTGCAGC AATGAAGAAT

1151 GTCCAGGGGA GTGCCTTGTC ACTGGTCAAT CCCACTTCAA GAGCTTTGAC

1201 AACAGATACT TCACCTTCAG TGGGATCTGC CAGTACCTGC TGGCCCGGGA

1251 TTGCCAGGAC CACTCCTTCT CCATTGTCAT TGAGACTGTC CAGTGTGCTG

1301 ATGACCGCGA CGCTGTGTGC ACCCGCTCCG TCACCGTCCG GCTGCCTGGC

1351 CTGCACAACA GCCTTGTGAA ACTGAAGCAT GGGGCAGGAG TTGCCATGGA

1401 TGGCCAGGAC ATCCAGCTCC CCCTCCTGAA AGGTGACCTC CGCATCCAGC

1451 ATACAGTGAC GGCCTCCGTG CGCCTCAGCT ACGGGGAGGA CCTGCAGATG

1501 GACTGGGATG GCCGCGGGAG GCTGCTGGTG AAGCTGTCCC CCGTCTATGC

1551 CGGGAAGACC TGCGGCCTGT GTGGGAATTA CAATGGCAAC CAGGGCGACG

1601 ACTTCCTTAC CCCCTCTGGG CTGGCGGAGC CCCGGGTGGA GGACTTCGGG

1651 AACGCCTGGA AGCTGCACGG GGACTGCCAG GACCTGCAGA AGCAGCACAG

1701 CGATCCCTGC GCCCTCAACC CGCGCATGAC CAGGTTCTCC GAGGAGGCGT

1751 GCGCGGTCCT GACGTCCCCC ACATTCGAGG CCTGCCATCG TGCCGTCAGC

1801 CCGCTGCCCT ACCTGCGGAA CTGCCGCTAC GACGTGTGCT CCTGCTCGGA

1851 CGGCCGCGAG TGCCTGTGCG GCGCCCTGGC CAGCTATGCC GCGGCCTGCG

1901 CGGGGAGAGG CGTGCGCGTC GCGTGGCGCG AGCCAGGCCG CTGTGAGCTG

1951 AACTGCCCGA AAGGCCAGGT GTACCTGCAG TGCGGGACCC CCTGCAACCT

2001 GACCTGCCGC TCTCTCTCTT ACCCGGATGA GGAATGCAAT GAGGCCTGCC

2051 TGGAGGGCTG CTTCTGCCCC CCAGGGCTCT ACATGGATGA GAGGGGGGAC

2101 TGCGTGCCCA AGGCCCAGTG CCCCTGTTAC TATGACGGTG AGATCTTCCA

2151 GCCAGAAGAC ATCTTCTCAG ACCATCACAC CATGTGCTAC TGTGAGGATG

2201 GCTTCATGCA CTGTACCATG AGTGGAGTCC CCGGAAGCTT GCTGCCTGAC

2251 GCTGTCCTCA GCAGTCCCCT GTCTCATCGC AGCAAAAGGA GCCTATCCTG

2301 TCGGCCCCCC ATGGTCAAGC TGGTGTGTCC CGCTGACAAC CTGCGGGCTG

2351 AAGGGCTCGA GTGTACCAAA ACGTGCCAGA ACTATGACCT GGAGTGCATG

2401 AGCATGGGCT GTGTCTCTGG CTGCCTCTGC CCCCCGGGCA TGGTCCGGCA

2451 TGAGAACAGA TGTGTGGCCC TGGAAAGGTG TCCCTGCTTC CATCAGGGCA

2501 AGGAGTATGC CCCTGGAGAA ACAGTGAAGA TTGGCTGCAA CACTTGTGTC

2551 TGTCGGGACC GGAAGTGGAA CTGCACAGAC CATGTGTGTG ATGCCACGTG

2601 CTCCACGATC GGCATGGCCC ACTACCTCAC CTTCGACGGG CTCAAATACC

2651 TGTTCCCCGG GGAGTGCCAG TACGTTCTGG TGCAGGATTA CTGCGGCAGT

2701 AACCCTGGGA CCTTTCGGAT CCTAGTGGGG AATAAGGGAT GCAGCCACCC

2751 CTCAGTGAAA TGCAAGAAAC GGGTCACCAT CCTGGTGGAG GGAGGAGAGA

2801 TTGAGCTGTT TGACGGGGAG GTGAATGTGA AGAGGCCCAT GAAGGATGAG

2851 ACTCACTTTG AGGTGGTGGA GTCTGGCCGG TACATCATTC TGCTGCTGGG

2901 CAAAGCCCTC TCCGTGGTCT GGGACCGCCA CCTGAGCATC TCCGTGGTCC

2951 TGAAGCAGAC ATACCAGGAG AAAGTGTGTG GCCTGTGTGG GAATTTTGAT

3001 GGCATCCAGA ACAATGACCT CACCAGCAGC AACCTCCAAG TGGAGGAAGA

3051 CCCTGTGGAC TTTGGGAACT CCTGGAAAGT GAGCTCGCAG TGTGCTGACA

3101 CCAGAAAAGT GCCTCTGGAC TCATCCCCTG CCACCTGCCA TAACAACATC

3151 ATGAAGCAGA CGATGGTGGA TTCCTCCTGT AGAATCCTTA CCAGTGACGT

3201 CTTCCAGGAC TGCAACAAGC TGGTGGACCC CGAGCCATAT CTGGATGTCT

3251 GCATTTACGA CACCTGCTCC TGTGAGTCCA TTGGGGACTG CGCCGCATTC

3301 TGCGACACCA TTGCTGCCTA TGCCCACGTG TGTGCCCAGC ATGGCAAGGT

3351 GGTGACCTGG AGGACGGCCA CATTGTGCCC CCAGAGCTGC GAGGAGAGGA

3401 ATCTCCGGGA GAACGGGTAT GAGGCTGAGT GGCGCTATAA CAGCTGTGCA

3451 CCTGCCTGTC AAGTCACGTG TCAGCACCCT GAGCCACTGG CCTGCCCTGT

3501 GCAGTGTGTG GAGGGCTGCC ATGCCCACTG CCCTCCAGGG AAAATCCTGG

3551 ATGAGCTTTT GCAGACCTGC GTTGACCCTG AAGACTGTCC AGTGTGTGAG

3601 GTGGCTGGCC GGCGTTTTGC CTCAGGAAAG AAAGTCACCT TGAATCCCAG

3651 TGACCCTGAG CACTGCCAGA TTTGCCACTG TGATGTTGTC AACCTCACCT

3701 GTGAAGCCTG CCAGGAGCCG ATATCGGGCG CGCCAACATC AGAGAGCGCC

3751 ACCCCTGAAA GTGGTCCCGG GAGCGAGCCA GCCACATCTG GGTCGGAAAC

3801 GCCAGGCACA AGTGAGTCTG CAACTCCCGA GTCCGGACCT GGCTCCGAGC

3851 CTGCCACTAG CGGCTCCGAG ACTCCGGGAA CTTCCGAGAG CGCTACACCA

3901 GAAAGCGGAC CCGGAACCAG TACCGAACCT AGCGAGGGCT CTGCTCCGGG

3951 CAGCCCAGCC GGCTCTCCTA CATCCACGGA GGAGGGCACT TCCGAATCCG

4001 CCACCCCGGA GTCAGGGCCA GGATCTGAAC CCGCTACCTC AGGCAGTGAG

4051 ACGCCAGGAA CGAGCGAGTC CGCTACACCG GAGAGTGGGC CAGGGAGCCC

4101 TGCTGGATCT CCTACGTCCA CTGAGGAAGG GTCACCAGCG GGCTCGCCCA

4151 CCAGCACTGA AGAAGGTGCC TCGAGCGACA AAACTCACAC ATGCCCACCG

4201 TGCCCAGCTC CAGAACTCCT GGGCGGACCG TCAGTCTTCC TCTTCCCCCC

4251 AAAACCCAAG GACACCCTCA TGATCTCCCG GACCCCTGAG GTCACATGCG

4301 TGGTGGTGGA CGTGAGCCAC GAAGACCCTG AGGTCAAGTT CAACTGGTAC

4351 GTGGACGGCG TGGAGGTGCA TAATGCCAAG ACAAAGCCGC GGGAGGAGCA

4401 GTACAACAGC ACGTACCGTG TGGTCAGCGT CCTCACCGTC CTGCACCAGG

4451 ACTGGCTGAA TGGCAAGGAG TACAAGTGCA AGGTCTCCAA CAAAGCCCTC

4501 CCAGCCCCCA TCGAGAAAAC CATCTCCAAA GCCAAAGGGC AGCCCCGAGA

4551 ACCACAGGTG TACACCCTGC CCCCATCCCG GGATGAGCTG ACCAAGAACC

4601 AGGTCAGCCT GACCTGCCTG GTCAAAGGCT TCTATCCCAG CGACATCGCC

4651 GTGGAGTGGG AGAGCAATGG GCAGCCGGAG AACAACTACA AGACCACGCC

4701 TCCCGTGTTG GACTCCGACG GCTCCTTCTT CCTCTACAGC AAGCTCACCG

4751 TGGACAAGAG CAGGTGGCAG CAGGGGAACG TCTTCTCATG CTCCGTGATG

4801 CATGAGGCTC TGCACAACCA CTACACGCAG AAGAGCCTCT CCCTGTCTCC

4851 GGGTAAATGA

Последовательность белка pSYN VWF062 (D'D3 VWF-Fc без сайта расщепления тромбином в линкере) (SEQ ID NO: 199)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP ISGAPTSESA

1251 TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP GSEPATSGSE TPGTSESATP

1301 ESGPGTSTEP SEGSAPGSPA GSPTSTEEGT SESATPESGP GSEPATSGSE

1351 TPGTSESATP ESGPGSPAGS PTSTEEGSPA GSPTSTEEGA SSDKTHTCPP

1401 CPAPELLGGP SVFLFPPKPK DTLMISRTPE VTCVVVDVSH EDPEVKFNWY

1451 VDGVEVHNAK TKPREEQYNS TYRVVSVLTV LHQDWLNGKE YKCKVSNKAL

1501 PAPIEKTISK AKGQPREPQV YTLPPSRDEL TKNQVSLTCL VKGFYPSDIA

1551 VEWESNGQPE NNYKTTPPVL DSDGSFFLYS KLTVDKSRWQ QGNVFSCSVM

1601 HEALHNHYTQ KSLSLSPGK*

Нуклеотидная последовательность pSYN VWF073 (кодирующая D1D2D'D3 VWF-XTEN AE-144-FVIII с усеченным сайтом расщепления тромбина в a2-Fc) (SEQ ID NO: 174)

1 ATGATTCCTG CCAGATTTGC CGGGGTGCTG CTTGCTCTGG CCCTCATTTT

51 GCCAGGGACC CTTTGTGCAG AAGGAACTCG CGGCAGGTCA TCCACGGCCC

101 GATGCAGCCT TTTCGGAAGT GACTTCGTCA ACACCTTTGA TGGGAGCATG

151 TACAGCTTTG CGGGATACTG CAGTTACCTC CTGGCAGGGG GCTGCCAGAA

201 ACGCTCCTTC TCGATTATTG GGGACTTCCA GAATGGCAAG AGAGTGAGCC

251 TCTCCGTGTA TCTTGGGGAA TTTTTTGACA TCCATTTGTT TGTCAATGGT

301 ACCGTGACAC AGGGGGACCA AAGAGTCTCC ATGCCCTATG CCTCCAAAGG

351 GCTGTATCTA GAAACTGAGG CTGGGTACTA CAAGCTGTCC GGTGAGGCCT

401 ATGGCTTTGT GGCCAGGATC GATGGCAGCG GCAACTTTCA AGTCCTGCTG

451 TCAGACAGAT ACTTCAACAA GACCTGCGGG CTGTGTGGCA ACTTTAACAT

501 CTTTGCTGAA GATGACTTTA TGACCCAAGA AGGGACCTTG ACCTCGGACC

551 CTTATGACTT TGCCAACTCA TGGGCTCTGA GCAGTGGAGA ACAGTGGTGT

601 GAACGGGCAT CTCCTCCCAG CAGCTCATGC AACATCTCCT CTGGGGAAAT

651 GCAGAAGGGC CTGTGGGAGC AGTGCCAGCT TCTGAAGAGC ACCTCGGTGT

701 TTGCCCGCTG CCACCCTCTG GTGGACCCCG AGCCTTTTGT GGCCCTGTGT

751 GAGAAGACTT TGTGTGAGTG TGCTGGGGGG CTGGAGTGCG CCTGCCCTGC

801 CCTCCTGGAG TACGCCCGGA CCTGTGCCCA GGAGGGAATG GTGCTGTACG

851 GCTGGACCGA CCACAGCGCG TGCAGCCCAG TGTGCCCTGC TGGTATGGAG

901 TATAGGCAGT GTGTGTCCCC TTGCGCCAGG ACCTGCCAGA GCCTGCACAT

951 CAATGAAATG TGTCAGGAGC GATGCGTGGA TGGCTGCAGC TGCCCTGAGG

1001 GACAGCTCCT GGATGAAGGC CTCTGCGTGG AGAGCACCGA GTGTCCCTGC

1051 GTGCATTCCG GAAAGCGCTA CCCTCCCGGC ACCTCCCTCT CTCGAGACTG

1101 CAACACCTGC ATTTGCCGAA ACAGCCAGTG GATCTGCAGC AATGAAGAAT

1151 GTCCAGGGGA GTGCCTTGTC ACTGGTCAAT CCCACTTCAA GAGCTTTGAC

1201 AACAGATACT TCACCTTCAG TGGGATCTGC CAGTACCTGC TGGCCCGGGA

1251 TTGCCAGGAC CACTCCTTCT CCATTGTCAT TGAGACTGTC CAGTGTGCTG

1301 ATGACCGCGA CGCTGTGTGC ACCCGCTCCG TCACCGTCCG GCTGCCTGGC

1351 CTGCACAACA GCCTTGTGAA ACTGAAGCAT GGGGCAGGAG TTGCCATGGA

1401 TGGCCAGGAC ATCCAGCTCC CCCTCCTGAA AGGTGACCTC CGCATCCAGC

1451 ATACAGTGAC GGCCTCCGTG CGCCTCAGCT ACGGGGAGGA CCTGCAGATG

1501 GACTGGGATG GCCGCGGGAG GCTGCTGGTG AAGCTGTCCC CCGTCTATGC

1551 CGGGAAGACC TGCGGCCTGT GTGGGAATTA CAATGGCAAC CAGGGCGACG

1601 ACTTCCTTAC CCCCTCTGGG CTGGCGGAGC CCCGGGTGGA GGACTTCGGG

1651 AACGCCTGGA AGCTGCACGG GGACTGCCAG GACCTGCAGA AGCAGCACAG

1701 CGATCCCTGC GCCCTCAACC CGCGCATGAC CAGGTTCTCC GAGGAGGCGT

1751 GCGCGGTCCT GACGTCCCCC ACATTCGAGG CCTGCCATCG TGCCGTCAGC

1801 CCGCTGCCCT ACCTGCGGAA CTGCCGCTAC GACGTGTGCT CCTGCTCGGA

1851 CGGCCGCGAG TGCCTGTGCG GCGCCCTGGC CAGCTATGCC GCGGCCTGCG

1901 CGGGGAGAGG CGTGCGCGTC GCGTGGCGCG AGCCAGGCCG CTGTGAGCTG

1951 AACTGCCCGA AAGGCCAGGT GTACCTGCAG TGCGGGACCC CCTGCAACCT

2001 GACCTGCCGC TCTCTCTCTT ACCCGGATGA GGAATGCAAT GAGGCCTGCC

2051 TGGAGGGCTG CTTCTGCCCC CCAGGGCTCT ACATGGATGA GAGGGGGGAC

2101 TGCGTGCCCA AGGCCCAGTG CCCCTGTTAC TATGACGGTG AGATCTTCCA

2151 GCCAGAAGAC ATCTTCTCAG ACCATCACAC CATGTGCTAC TGTGAGGATG

2201 GCTTCATGCA CTGTACCATG AGTGGAGTCC CCGGAAGCTT GCTGCCTGAC

2251 GCTGTCCTCA GCAGTCCCCT GTCTCATCGC AGCAAAAGGA GCCTATCCTG

2301 TCGGCCCCCC ATGGTCAAGC TGGTGTGTCC CGCTGACAAC CTGCGGGCTG

2351 AAGGGCTCGA GTGTACCAAA ACGTGCCAGA ACTATGACCT GGAGTGCATG

2401 AGCATGGGCT GTGTCTCTGG CTGCCTCTGC CCCCCGGGCA TGGTCCGGCA

2451 TGAGAACAGA TGTGTGGCCC TGGAAAGGTG TCCCTGCTTC CATCAGGGCA

2501 AGGAGTATGC CCCTGGAGAA ACAGTGAAGA TTGGCTGCAA CACTTGTGTC

2551 TGTCGGGACC GGAAGTGGAA CTGCACAGAC CATGTGTGTG ATGCCACGTG

2601 CTCCACGATC GGCATGGCCC ACTACCTCAC CTTCGACGGG CTCAAATACC

2651 TGTTCCCCGG GGAGTGCCAG TACGTTCTGG TGCAGGATTA CTGCGGCAGT

2701 AACCCTGGGA CCTTTCGGAT CCTAGTGGGG AATAAGGGAT GCAGCCACCC

2751 CTCAGTGAAA TGCAAGAAAC GGGTCACCAT CCTGGTGGAG GGAGGAGAGA

2801 TTGAGCTGTT TGACGGGGAG GTGAATGTGA AGAGGCCCAT GAAGGATGAG

2851 ACTCACTTTG AGGTGGTGGA GTCTGGCCGG TACATCATTC TGCTGCTGGG

2901 CAAAGCCCTC TCCGTGGTCT GGGACCGCCA CCTGAGCATC TCCGTGGTCC

2951 TGAAGCAGAC ATACCAGGAG AAAGTGTGTG GCCTGTGTGG GAATTTTGAT

3001 GGCATCCAGA ACAATGACCT CACCAGCAGC AACCTCCAAG TGGAGGAAGA

3051 CCCTGTGGAC TTTGGGAACT CCTGGAAAGT GAGCTCGCAG TGTGCTGACA

3101 CCAGAAAAGT GCCTCTGGAC TCATCCCCTG CCACCTGCCA TAACAACATC

3151 ATGAAGCAGA CGATGGTGGA TTCCTCCTGT AGAATCCTTA CCAGTGACGT

3201 CTTCCAGGAC TGCAACAAGC TGGTGGACCC CGAGCCATAT CTGGATGTCT

3251 GCATTTACGA CACCTGCTCC TGTGAGTCCA TTGGGGACTG CGCCGCATTC

3301 TGCGACACCA TTGCTGCCTA TGCCCACGTG TGTGCCCAGC ATGGCAAGGT

3351 GGTGACCTGG AGGACGGCCA CATTGTGCCC CCAGAGCTGC GAGGAGAGGA

3401 ATCTCCGGGA GAACGGGTAT GAGGCTGAGT GGCGCTATAA CAGCTGTGCA

3451 CCTGCCTGTC AAGTCACGTG TCAGCACCCT GAGCCACTGG CCTGCCCTGT

3501 GCAGTGTGTG GAGGGCTGCC ATGCCCACTG CCCTCCAGGG AAAATCCTGG

3551 ATGAGCTTTT GCAGACCTGC GTTGACCCTG AAGACTGTCC AGTGTGTGAG

3601 GTGGCTGGCC GGCGTTTTGC CTCAGGAAAG AAAGTCACCT TGAATCCCAG

3651 TGACCCTGAG CACTGCCAGA TTTGCCACTG TGATGTTGTC AACCTCACCT

3701 GTGAAGCCTG CCAGGAGCCG GGCGCGCCAA CATCAGAGAG CGCCACCCCT

3751 GAAAGTGGTC CCGGGAGCGA GCCAGCCACA TCTGGGTCGG AAACGCCAGG

3801 CACAAGTGAG TCTGCAACTC CCGAGTCCGG ACCTGGCTCC GAGCCTGCCA

3851 CTAGCGGCTC CGAGACTCCG GGAACTTCCG AGAGCGCTAC ACCAGAAAGC

3901 GGACCCGGAA CCAGTACCGA ACCTAGCGAG GGCTCTGCTC CGGGCAGCCC

3951 AGCCGGCTCT CCTACATCCA CGGAGGAGGG CACTTCCGAA TCCGCCACCC

4001 CGGAGTCAGG GCCAGGATCT GAACCCGCTA CCTCAGGCAG TGAGACGCCA

4051 GGAACGAGCG AGTCCGCTAC ACCGGAGAGT GGGCCAGGGA GCCCTGCTGG

4101 ATCTCCTACG TCCACTGAGG AAGGGTCACC AGCGGGCTCG CCCACCAGCA

4151 CTGAAGAAGG TGCCTCGAGC GGCGGTGGAG GATCCGGTGG CGGGGGATCC

4201 GGTGGCGGGG GATCCGGTGG CGGGGGATCC GGTGGCGGGG GATCCGGTGG

4251 CGGGGGATCC ATTGAACCAA GAAGCTTCTC TGGCAGCGGA GGCGACAAAA

4301 CTCACACATG CCCACCGTGC CCAGCTCCAG AACTCCTGGG CGGACCGTCA

4351 GTCTTCCTCT TCCCCCCAAA ACCCAAGGAC ACCCTCATGA TCTCCCGGAC

4401 CCCTGAGGTC ACATGCGTGG TGGTGGACGT GAGCCACGAA GACCCTGAGG

4451 TCAAGTTCAA CTGGTACGTG GACGGCGTGG AGGTGCATAA TGCCAAGACA

4501 AAGCCGCGGG AGGAGCAGTA CAACAGCACG TACCGTGTGG TCAGCGTCCT

4551 CACCGTCCTG CACCAGGACT GGCTGAATGG CAAGGAGTAC AAGTGCAAGG

4601 TCTCCAACAA AGCCCTCCCA GCCCCCATCG AGAAAACCAT CTCCAAAGCC

4651 AAAGGGCAGC CCCGAGAACC ACAGGTGTAC ACCCTGCCCC CATCCCGGGA

4701 TGAGCTGACC AAGAACCAGG TCAGCCTGAC CTGCCTGGTC AAAGGCTTCT

4751 ATCCCAGCGA CATCGCCGTG GAGTGGGAGA GCAATGGGCA GCCGGAGAAC

4801 AACTACAAGA CCACGCCTCC CGTGTTGGAC TCCGACGGCT CCTTCTTCCT

4851 CTACAGCAAG CTCACCGTGG ACAAGAGCAG GTGGCAGCAG GGGAACGTCT

4901 TCTCATGCTC CGTGATGCAT GAGGCTCTGC ACAACCACTA CACGCAGAAG

4951 AGCCTCTCCC TGTCTCCGGG TAAATGA

Последовательность белка pSYN VWF073 (D1D2D'D3 VWF-XTEN AE-144-усеченный сайт расщепления тромбином в a2-Fc) (SEQ ID NO: 175)

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM

51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG

101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL

151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC

201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC

251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME

301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC

351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD

401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG

451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM

501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG

551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS

601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL

651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD

701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD

751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM

801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV

851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS

901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE

951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD

1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI

1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF

1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA

1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE

1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP GAPTSESATP

1251 ESGPGSEPAT SGSETPGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP GTSESATPES

1301 GPGTSTEPSE GSAPGSPAGS PTSTEEGTSE SATPESGPGS EPATSGSETP

1351 GTSESATPES GPGSPAGSPT STEEGSPAGS PTSTEEGASS GGGGSGGGGS

1401 GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS IEPRSFSGSG GDKTHTCPPC PAPELLGGPS

1451 VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT

1501 KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA

1551 KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN

1601 NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK

1651 SLSLSPGK*

Таблица 18. Иллюстративные последовательности химерных полипептидов

FVIII-XTEN-Fc: SEQ ID NO: 201

TRRYYLGAVELSWDYMQSDLGELPVDARFPPRVPKSFPFNTSVVYKKTLFVEFTDHLFNIAKPRPPWMGLLGPTIQAEVYDTVVITLKNMASHPVSLHAVGVSYWKASEGAEYDDQTSQREKEDDKVFPGGSHTYVWQVLKENGPMASDPLCLTYSYLSHVDLVKDLNSGLIGALLVCREGSLAKEKTQTLHKFILLFAVFDEGKSWHSETKNSLMQDRDAASARAWPKMHTVNGYVNRSLPGLIGCHRKSVYWHVIGMGTTPEVHSIFLEGHTFLVRNHRQASLEISPITFLTAQTLLMDLGQFLLFCHISSHQHDGMEAYVKVDSCPEEPQLRMKNNEEAEDYDDDLTDSEMDVVRFDDDNSPSFIQIRSVAKKHPKTWVHYIAAEEEDWDYAPLVLAPDDRSYKSQYLNNGPQRIGRKYKKVRFMAYTDETFKTREAIQHESGILGPLLYGEVGDTLLIIFKNQASRPYNIYPHGITDVRPLYSRRLPKGVKHLKDFPILPGEIFKYKWTVTVEDGPTKSDPRCLTRYYSSFVNMERDLASGLIGPLLICYKESVDQRGNQIMSDKRNVILFSVFDENRSWYLTENIQRFLPNPAGVQLEDPEFQASNIMHSINGYVFDSLQLSVCLHEVAYWYILSIGAQTDFLSVFFSGYTFKHKMVYEDTLTLFPFSGETVFMSMENPGLWILGCHNSDFRNRGMTALLKVSSCDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFSQNGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPASSEITRTTLQSDQEEIDYDDTISVEMKKEDFDIYDEDENQSPRSFQKKTRHYFIAAVERLWDYGMSSSPHVLRNRAQSGSVPQFKKVVFQEFTDGSFTQPLYRGELNEHLGLLGPYIRAEVEDNIMVTFRNQASRPYSFYSSLISYEEDQRQGAEPRKNFVKPNETKTYFWKVQHHMAPTKDEFDCKAWAYFSDVDLEKDVHSGLIGPLLVCHTNTLNPAHGRQVTVQEFALFFTIFDETKSWYFTENMERNCRAPCNIQMEDPTFKENYRFHAINGYIMDTLPGLVMAQDQRIRWYLLSMGSNENIHSIHFSGHVFTVRKKEEYKMALYNLYPGVFETVEMLPSKAGIWRVECLIGEHLHAGMSTLFLVYSNKCQTPLGMASGHIRDFQITASGQYGQWAPKLARLHYSGSINAWSTKEPFSWIKVDLLAPMIIHGIKTQGARQKFSSLYISQFIIMYSLDGKKWQTYRGNSTGTLMVFFGNVDSSGIKHNIFNPPIIARYIRLHPTHYSIRSTLRMELMGCDLNSCSMPLGMESKAISDAQITASSYFTNMFATWSPSKARLHLQGRSNAWRPQVNNPKEWLQVDFQKTMKVTGVTTQGVKSLLTSMYVKEFLISSSQDGHQWTLFFQNGKVKVFQGNQDSFTPVVNSLDPPLLTRYLRIHPQSWVHQIALRMEVLGCEAQDLYDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG

VWF(D'D3)-XTEN-линкер a2-Fc: SEQ ID NO: 202

SLSCRPPMVKLVCPADNLRAEGLECTKTCQNYDLECMSMGCVSGCLCPPGMVRHENRCVALERCPCFHQGKEYAPGETVKIGCNTCVCRDRKWNCTDHVCDATCSTIGMAHYLTFDGLKYLFPGECQYVLVQDYCGSNPGTFRILVGNKGCSHPSVKCKKRVTILVEGGEIELFDGEVNVKRPMKDETHFEVVESGRYIILLLGKALSVVWDRHLSISVVLKQTYQEKVCGLCGNFDGIQNNDLTSSNLQVEEDPVDFGNSWKVSSQCADTRKVPLDSSPATCHNNIMKQTMVDSSCRILTSDVFQDCNKLVDPEPYLDVCIYDTCSCESIGDCAAFCDTIAAYAHVCAQHGKVVTWRTATLCPQSCEERNLRENGYEAEWRYNSCAPACQVTCQHPEPLACPVQCVEGCHAHCPPGKILDELLQTCVDPEDCPVCEVAGRRFASGKKVTLNPSDPEHCQICHCDVVNLTCEACQEPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGASSDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG

Аминокислотная последовательность белка FVIII (312A): SEQ ID NO: 203

1 MQIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE LSWDYMQSDL GELPVDARFP
51 PRVPKSFPFN TSVVYKKTLF VEFTDHLFNI AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY
101 DTVVITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG
151 GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH VDLVKDLNSG LIGALLVCRE
201 GSLAKEKTQT LHKFILLFAV FDEGKSWHSE TKNSLMQDRD AASARAWPKM
251 HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK SVYWHVIGMG TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH
301 RQASLEISPI TFLTAQTLLM DLGQFLLFCH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE
351 EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT DSEMDVVRFD DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT
401 WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA PDDRSYKSQY LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY
451 TDETFKTREA IQHESGILGP LLYGEVGDTL LIIFKNQASR PYNIYPHGIT
501 DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF PILPGEIFKY KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR
551 YYSSFVNMER DLASGLIGPL LICYKESVDQ RGNQIMSDKR NVILFSVFDE
601 NRSWYLTENI QRFLPNPAGV QLEDPEFQAS NIMHSINGYV FDSLQLSVCL
651 HEVAYWYILS IGAQTDFLSV FFSGYTFKHK MVYEDTLTLF PFSGETVFMS
701 MENPGLWILG CHNSDFRNRG MTALLKVSSC DKNTGDYYED SYEDISAYLL
751 SKNNAIEPRS FSQNGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP
801 GSEPATSGSE TPGTSESATP ESGPGTSTEP SEGSAPGSPA GSPTSTEEGT
851 SESATPESGP GSEPATSGSE TPGTSESATP ESGPGSPAGS PTSTEEGSPA
901 GSPTSTEEGT STEPSEGSAP GTSESATPES GPGTSESATP ESGPGTSESA
951 TPESGPGSEP ATSGSETPGS EPATSGSETP GSPAGSPTST EEGTSTEPSE
1001 GSAPGTSTEP SEGSAPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP GTSTEPSEGS
1051 APASSEITRT TLQSDQEEID YDDTISVEMK KEDFDIYDED ENQSPRSFQK
1101 KTRHYFIAAV ERLWDYGMSS SPHVLRNRAQ SGSVPQFKKV VFQEFTDGSF
1151 TQPLYRGELN EHLGLLGPYI RAEVEDNIMV TFRNQASRPY SFYSSLISYE
1201 EDQRQGAEPR KNFVKPNETK TYFWKVQHHM APTKDEFDCK AWAYFSDVDL
1251 EKDVHSGLIG PLLVCHTNTL NPAHGRQVTV QEFALFFTIF DETKSWYFTE
1301 NMERNCRAPC NIQMEDPTFK ENYRFHAING YIMDTLPGLV MAQDQRIRWY
1351 LLSMGSNENI HSIHFSGHVF TVRKKEEYKM ALYNLYPGVF ETVEMLPSKA
1401 GIWRVECLIG EHLHAGMSTL FLVYSNKCQT PLGMASGHIR DFQITASGQY
1451 GQWAPKLARL HYSGSINAWS TKEPFSWIKV DLLAPMIIHG IKTQGARQKF
1501 SSLYISQFII MYSLDGKKWQ TYRGNSTGTL MVFFGNVDSS GIKHNIFNPP
1551 IIARYIRLHP THYSIRSTLR MELMGCDLNS CSMPLGMESK AISDAQITAS
1601 SYFTNMFATW SPSKARLHLQ GRSNAWRPQV NNPKEWLQVD FQKTMKVTGV
1651 TTQGVKSLLT SMYVKEFLIS SSQDGHQWTL FFQNGKVKVF QGNQDSFTPV
1701 VNSLDPPLLT RYLRIHPQSW VHQIALRMEV LGCEAQDLYD KTHTCPPCPA
1751 PELLGGPSVF LFPPKPKDTL MISRTPEVTC VVVDVSHEDP EVKFNWYVDG
1801 VEVHNAKTKP REEQYNSTYR VVSVLTVLHQ DWLNGKEYKC KVSNKALPAP
1851 IEKTISKAKG QPREPQVYTL PPSRDELTKN QVSLTCLVKG FYPSDIAVEW
1901 ESNGQPENNY KTTPPVLDSD GSFFLYSKLT VDKSRWQQGN VFSCSVMHEA
1951 LHNHYTQKSL SLSPG*

Нуклеотидная последовательность, кодирующая FVIII 312A: SEQ ID NO: 204

1 ATGCAAATAG AGCTCTCCAC CTGCTTCTTT CTGTGCCTTT TGCGATTCTG
51 CTTTAGTGCC ACCAGAAGAT ACTACCTGGG TGCAGTGGAA CTGTCATGGG
101 ACTATATGCA AAGTGATCTC GGTGAGCTGC CTGTGGACGC AAGATTTCCT
151 CCTAGAGTGC CAAAATCTTT TCCATTCAAC ACCTCAGTCG TGTACAAAAA
201 GACTCTGTTT GTAGAATTCA CGGATCACCT TTTCAACATC GCTAAGCCAA
251 GGCCACCCTG GATGGGTCTG CTAGGTCCTA CCATCCAGGC TGAGGTTTAT
301 GATACAGTGG TCATTACACT TAAGAACATG GCTTCCCATC CTGTCAGTCT
351 TCATGCTGTT GGTGTATCCT ACTGGAAAGC TTCTGAGGGA GCTGAATATG
401 ATGATCAGAC CAGTCAAAGG GAGAAAGAAG ATGATAAAGT CTTCCCTGGT
451 GGAAGCCATA CATATGTCTG GCAGGTCCTG AAAGAGAATG GTCCAATGGC
501 CTCTGACCCA CTGTGCCTTA CCTACTCATA TCTTTCTCAT GTGGACCTGG
551 TAAAAGACTT GAATTCAGGC CTCATTGGAG CCCTACTAGT ATGTAGAGAA
601 GGGAGTCTGG CCAAGGAAAA GACACAGACC TTGCACAAAT TTATACTACT
651 TTTTGCTGTA TTTGATGAAG GGAAAAGTTG GCACTCAGAA ACAAAGAACT
701 CCTTGATGCA GGATAGGGAT GCTGCATCTG CTCGGGCCTG GCCTAAAATG
751 CACACAGTCA ATGGTTATGT AAACAGGTCT CTGCCAGGTC TGATTGGATG
801 CCACAGGAAA TCAGTCTATT GGCATGTGAT TGGAATGGGC ACCACTCCTG
851 AAGTGCACTC AATATTCCTC GAAGGTCACA CATTTCTTGT GAGGAACCAT
901 CGCCAGGCGT CCTTGGAAAT CTCGCCAATA ACTTTCCTTA CTGCTCAAAC
951 ACTCTTGATG GACCTTGGAC AGTTTCTACT GTTTTGTCAT ATCTCTTCCC
1001 ACCAACATGA TGGCATGGAA GCTTATGTCA AAGTAGACAG CTGTCCAGAG
1051 GAACCCCAAC TACGAATGAA AAATAATGAA GAAGCGGAAG ACTATGATGA
1101 TGATCTTACT GATTCTGAAA TGGATGTGGT CAGGTTTGAT GATGACAACT
1151 CTCCTTCCTT TATCCAAATT CGCTCAGTTG CCAAGAAGCA TCCTAAAACT
1201 TGGGTACATT ACATTGCTGC TGAAGAGGAG GACTGGGACT ATGCTCCCTT
1251 AGTCCTCGCC CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTCAATAT TTGAACAATG
1301 GCCCTCAGCG GATTGGTAGG AAGTACAAAA AAGTCCGATT TATGGCATAC
1351 ACAGATGAAA CCTTTAAGAC TCGTGAAGCT ATTCAGCATG AATCAGGAAT
1401 CTTGGGACCT TTACTTTATG GGGAAGTTGG AGACACACTG TTGATTATAT
1451 TTAAGAATCA AGCAAGCAGA CCATATAACA TCTACCCTCA CGGAATCACT
1501 GATGTCCGTC CTTTGTATTC AAGGAGATTA CCAAAAGGTG TAAAACATTT
1551 GAAGGATTTT CCAATTCTGC CAGGAGAAAT ATTCAAATAT AAATGGACAG
1601 TGACTGTAGA AGATGGGCCA ACTAAATCAG ATCCTCGGTG CCTGACCCGC
1651 TATTACTCTA GTTTCGTTAA TATGGAGAGA GATCTAGCTT CAGGACTCAT
1701 TGGCCCTCTC CTCATCTGCT ACAAAGAATC TGTAGATCAA AGAGGAAACC
1751 AGATAATGTC AGACAAGAGG AATGTCATCC TGTTTTCTGT ATTTGATGAG
1801 AACCGAAGCT GGTACCTCAC AGAGAATATA CAACGCTTTC TCCCCAATCC
1851 AGCTGGAGTG CAGCTTGAGG ATCCAGAGTT CCAAGCCTCC AACATCATGC
1901 ACAGCATCAA TGGCTATGTT TTTGATAGTT TGCAGTTGTC AGTTTGTTTG
1951 CATGAGGTGG CATACTGGTA CATTCTAAGC ATTGGAGCAC AGACTGACTT
2001 CCTTTCTGTC TTCTTCTCTG GATATACCTT CAAACACAAA ATGGTCTATG
2051 AAGACACACT CACCCTATTC CCATTCTCAG GAGAAACTGT CTTCATGTCG
2101 ATGGAAAACC CAGGTCTATG GATTCTGGGG TGCCACAACT CAGACTTTCG
2151 GAACAGAGGC ATGACCGCCT TACTGAAGGT TTCTAGTTGT GACAAGAACA
2201 CTGGTGATTA TTACGAGGAC AGTTATGAAG ATATTTCAGC ATACTTGCTG
2251 AGTAAAAACA ATGCCATTGA ACCAAGAAGC TTCTCTCAAA ACGGTACCTC
2301 AGAGTCTGCT ACCCCCGAGT CAGGGCCAGG ATCAGAGCCA GCCACCTCCG
2351 GGTCTGAGAC ACCCGGGACT TCCGAGAGTG CCACCCCTGA GTCCGGACCC
2401 GGGTCCGAGC CCGCCACTTC CGGCTCCGAA ACTCCCGGCA CAAGCGAGAG
2451 CGCTACCCCA GAGTCAGGAC CAGGAACATC TACAGAGCCC TCTGAAGGCT
2501 CCGCTCCAGG GTCCCCAGCC GGCAGTCCCA CTAGCACCGA GGAGGGAACC
2551 TCTGAAAGCG CCACACCCGA ATCAGGGCCA GGGTCTGAGC CTGCTACCAG
2601 CGGCAGCGAG ACACCAGGCA CCTCTGAGTC CGCCACACCA GAGTCCGGAC
2651 CCGGATCTCC CGCTGGGAGC CCCACCTCCA CTGAGGAGGG ATCTCCTGCT
2701 GGCTCTCCAA CATCTACTGA GGAAGGAACC TCAACCGAGC CATCCGAGGG
2751 ATCAGCTCCC GGCACCTCAG AGTCGGCAAC CCCGGAGTCT GGACCCGGAA
2801 CTTCCGAAAG TGCCACACCA GAGTCCGGTC CCGGGACTTC AGAATCAGCA
2851 ACACCCGAGT CCGGCCCTGG GTCTGAACCC GCCACAAGTG GTAGTGAGAC
2901 ACCAGGATCA GAACCTGCTA CCTCAGGGTC AGAGACACCC GGATCTCCGG
2951 CAGGCTCACC AACCTCCACT GAGGAGGGCA CCAGCACAGA ACCAAGCGAG
3001 GGCTCCGCAC CCGGAACAAG CACTGAACCC AGTGAGGGTT CAGCACCCGG
3051 CTCTGAGCCG GCCACAAGTG GCAGTGAGAC ACCCGGCACT TCAGAGAGTG
3101 CCACCCCCGA GAGTGGCCCA GGCACTAGTA CCGAGCCCTC TGAAGGCAGT
3151 GCGCCAGCCT CGAGCGAAAT AACTCGTACT ACTCTTCAGT CAGATCAAGA
3201 GGAAATTGAC TATGATGATA CCATATCAGT TGAAATGAAG AAGGAAGATT
3251 TTGACATTTA TGATGAGGAT GAAAATCAGA GCCCCCGCAG CTTTCAAAAG
3301 AAAACACGAC ACTATTTTAT TGCTGCAGTG GAGAGGCTCT GGGATTATGG
3351 GATGAGTAGC TCCCCACATG TTCTAAGAAA CAGGGCTCAG AGTGGCAGTG
3401 TCCCTCAGTT CAAGAAAGTT GTTTTCCAGG AATTTACTGA TGGCTCCTTT
3451 ACTCAGCCCT TATACCGTGG AGAACTAAAT GAACATTTGG GACTCCTGGG
3501 GCCATATATA AGAGCAGAAG TTGAAGATAA TATCATGGTA ACTTTCAGAA
3551 ATCAGGCCTC TCGTCCCTAT TCCTTCTATT CTAGCCTTAT TTCTTATGAG
3601 GAAGATCAGA GGCAAGGAGC AGAACCTAGA AAAAACTTTG TCAAGCCTAA
3651 TGAAACCAAA ACTTACTTTT GGAAAGTGCA ACATCATATG GCACCCACTA
3701 AAGATGAGTT TGACTGCAAA GCCTGGGCTT ATTTCTCTGA TGTTGACCTG
3751 GAAAAAGATG TGCACTCAGG CCTGATTGGA CCCCTTCTGG TCTGCCACAC
3801 TAACACACTG AACCCTGCTC ATGGGAGACA AGTGACAGTA CAGGAATTTG
3851 CTCTGTTTTT CACCATCTTT GATGAGACCA AAAGCTGGTA CTTCACTGAA
3901 AATATGGAAA GAAACTGCAG GGCTCCCTGC AATATCCAGA TGGAAGATCC
3951 CACTTTTAAA GAGAATTATC GCTTCCATGC AATCAATGGC TACATAATGG
4001 ATACACTACC TGGCTTAGTA ATGGCTCAGG ATCAAAGGAT TCGATGGTAT
4051 CTGCTCAGCA TGGGCAGCAA TGAAAACATC CATTCTATTC ATTTCAGTGG
4101 ACATGTGTTC ACTGTACGAA AAAAAGAGGA GTATAAAATG GCACTGTACA
4151 ATCTCTATCC AGGTGTTTTT GAGACAGTGG AAATGTTACC ATCCAAAGCT
4201 GGAATTTGGC GGGTGGAATG CCTTATTGGC GAGCATCTAC ATGCTGGGAT
4251 GAGCACACTT TTTCTGGTGT ACAGCAATAA GTGTCAGACT CCCCTGGGAA
4301 TGGCTTCTGG ACACATTAGA GATTTTCAGA TTACAGCTTC AGGACAATAT
4351 GGACAGTGGG CCCCAAAGCT GGCCAGACTT CATTATTCCG GATCAATCAA
4401 TGCCTGGAGC ACCAAGGAGC CCTTTTCTTG GATCAAGGTG GATCTGTTGG
4451 CACCAATGAT TATTCACGGC ATCAAGACCC AGGGTGCCCG TCAGAAGTTC
4501 TCCAGCCTCT ACATCTCTCA GTTTATCATC ATGTATAGTC TTGATGGGAA
4551 GAAGTGGCAG ACTTATCGAG GAAATTCCAC TGGAACCTTA ATGGTCTTCT
4601 TTGGCAATGT GGATTCATCT GGGATAAAAC ACAATATTTT TAACCCTCCA
4651 ATTATTGCTC GATACATCCG TTTGCACCCA ACTCATTATA GCATTCGCAG
4701 CACTCTTCGC ATGGAGTTGA TGGGCTGTGA TTTAAATAGT TGCAGCATGC
4751 CATTGGGAAT GGAGAGTAAA GCAATATCAG ATGCACAGAT TACTGCTTCA
4801 TCCTACTTTA CCAATATGTT TGCCACCTGG TCTCCTTCAA AAGCTCGACT
4851 TCACCTCCAA GGGAGGAGTA ATGCCTGGAG ACCTCAGGTG AATAATCCAA
4901 AAGAGTGGCT GCAAGTGGAC TTCCAGAAGA CAATGAAAGT CACAGGAGTA
4951 ACTACTCAGG GAGTAAAATC TCTGCTTACC AGCATGTATG TGAAGGAGTT
5001 CCTCATCTCC AGCAGTCAAG ATGGCCATCA GTGGACTCTC TTTTTTCAGA
5051 ATGGCAAAGT AAAGGTTTTT CAGGGAAATC AAGACTCCTT CACACCTGTG
5101 GTGAACTCTC TAGACCCACC GTTACTGACT CGCTACCTTC GAATTCACCC
5151 CCAGAGTTGG GTGCACCAGA TTGCCCTGAG GATGGAGGTT CTGGGCTGCG
5201 AGGCACAGGA CCTCTACGAC AAAACTCACA CATGCCCACC GTGCCCAGCT
5251 CCAGAACTCC TGGGCGGACC GTCAGTCTTC CTCTTCCCCC CAAAACCCAA
5301 GGACACCCTC ATGATCTCCC GGACCCCTGA GGTCACATGC GTGGTGGTGG
5351 ACGTGAGCCA CGAAGACCCT GAGGTCAAGT TCAACTGGTA TGTGGACGGC
5401 GTGGAAGTGC ATAATGCCAA GACAAAGCCG CGGGAGGAGC AGTACAACAG
5451 CACGTACCGT GTGGTCAGCG TCCTCACCGT CCTGCACCAA GACTGGCTGA
5501 ATGGCAAGGA GTACAAGTGC AAGGTCTCCA ACAAAGCCCT CCCAGCCCCC
5551 ATCGAGAAAA CCATCTCCAA AGCCAAAGGG CAGCCCCGAG AACCACAGGT
5601 GTACACCCTG CCCCCATCCC GGGATGAGCT GACCAAGAAC CAAGTTAGCC
5651 TGACCTGCCT GGTCAAAGGC TTCTATCCCA GCGACATCGC CGTGGAGTGG
5701 GAGAGCAATG GGCAGCCGGA GAACAACTAC AAGACCACGC CTCCCGTGTT
5751 GGACTCCGAC GGCTCCTTCT TCCTCTACTC CAAGCTCACC GTGGACAAGA
5801 GCAGGTGGCA GCAGGGGAAC GTCTTCTCAT GCTCCGTGAT GCATGAGGCT
5851 CTGCACAACC ACTACACGCA GAAGAGCCTC TCCCTGTCTC CGGGTTGA

Аминокислотная последовательность белка VWF059A: SEQ ID NO: 205

1 MIPARFAGVL LALALILPGT LCAEGTRGRS STARCSLFGS DFVNTFDGSM
51 YSFAGYCSYL LAGGCQKRSF SIIGDFQNGK RVSLSVYLGE FFDIHLFVNG
101 TVTQGDQRVS MPYASKGLYL ETEAGYYKLS GEAYGFVARI DGSGNFQVLL
151 SDRYFNKTCG LCGNFNIFAE DDFMTQEGTL TSDPYDFANS WALSSGEQWC
201 ERASPPSSSC NISSGEMQKG LWEQCQLLKS TSVFARCHPL VDPEPFVALC
251 EKTLCECAGG LECACPALLE YARTCAQEGM VLYGWTDHSA CSPVCPAGME
301 YRQCVSPCAR TCQSLHINEM CQERCVDGCS CPEGQLLDEG LCVESTECPC
351 VHSGKRYPPG TSLSRDCNTC ICRNSQWICS NEECPGECLV TGQSHFKSFD
401 NRYFTFSGIC QYLLARDCQD HSFSIVIETV QCADDRDAVC TRSVTVRLPG
451 LHNSLVKLKH GAGVAMDGQD IQLPLLKGDL RIQHTVTASV RLSYGEDLQM
501 DWDGRGRLLV KLSPVYAGKT CGLCGNYNGN QGDDFLTPSG LAEPRVEDFG
551 NAWKLHGDCQ DLQKQHSDPC ALNPRMTRFS EEACAVLTSP TFEACHRAVS
601 PLPYLRNCRY DVCSCSDGRE CLCGALASYA AACAGRGVRV AWREPGRCEL
651 NCPKGQVYLQ CGTPCNLTCR SLSYPDEECN EACLEGCFCP PGLYMDERGD
701 CVPKAQCPCY YDGEIFQPED IFSDHHTMCY CEDGFMHCTM SGVPGSLLPD
751 AVLSSPLSHR SKRSLSCRPP MVKLVCPADN LRAEGLECTK TCQNYDLECM
801 SMGCVSGCLC PPGMVRHENR CVALERCPCF HQGKEYAPGE TVKIGCNTCV
851 CRDRKWNCTD HVCDATCSTI GMAHYLTFDG LKYLFPGECQ YVLVQDYCGS
901 NPGTFRILVG NKGCSHPSVK CKKRVTILVE GGEIELFDGE VNVKRPMKDE
951 THFEVVESGR YIILLLGKAL SVVWDRHLSI SVVLKQTYQE KVCGLCGNFD
1001 GIQNNDLTSS NLQVEEDPVD FGNSWKVSSQ CADTRKVPLD SSPATCHNNI
1051 MKQTMVDSSC RILTSDVFQD CNKLVDPEPY LDVCIYDTCS CESIGDCAAF
1101 CDTIAAYAHV CAQHGKVVTW RTATLCPQSC EERNLRENGY EAEWRYNSCA
1151 PACQVTCQHP EPLACPVQCV EGCHAHCPPG KILDELLQTC VDPEDCPVCE
1201 VAGRRFASGK KVTLNPSDPE HCQICHCDVV NLTCEACQEP GTSESATPES
1251 GPGSEPATSG SETPGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP
1301 GTSTEPSEGS APGSPAGSPT STEEGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT
1351 SESATPESGP GSPAGSPTST EEGSPAGSPT STEEGASSDK NTGDYYEDSY
1401 EDISAYLLSK NNAIEPRSFS DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT
1451 LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY
1501 RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT
1551 LPPSRDELTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS
1601 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPG*

Нуклеотидная последовательность, кодирующая белок VWF059A: SEQ ID NO: 206

1 ATGATTCCTG CCAGATTTGC CGGGGTGCTG CTTGCTCTGG CCCTCATTTT
51 GCCAGGGACC CTTTGTGCAG AAGGAACTCG CGGCAGGTCA TCCACGGCCC
101 GATGCAGCCT TTTCGGAAGT GACTTCGTCA ACACCTTTGA TGGGAGCATG
151 TACAGCTTTG CGGGATACTG CAGTTACCTC CTGGCAGGGG GCTGCCAGAA
201 ACGCTCCTTC TCGATTATTG GGGACTTCCA GAATGGCAAG AGAGTGAGCC
251 TCTCCGTGTA TCTTGGGGAA TTTTTTGACA TCCATTTGTT TGTCAATGGT
301 ACCGTGACAC AGGGGGACCA AAGAGTCTCC ATGCCCTATG CCTCCAAAGG
351 GCTGTATCTA GAAACTGAGG CTGGGTACTA CAAGCTGTCC GGTGAGGCCT
401 ATGGCTTTGT GGCCAGGATC GATGGCAGCG GCAACTTTCA AGTCCTGCTG
451 TCAGACAGAT ACTTCAACAA GACCTGCGGG CTGTGTGGCA ACTTTAACAT
501 CTTTGCTGAA GATGACTTTA TGACCCAAGA AGGGACCTTG ACCTCGGACC
551 CTTATGACTT TGCCAACTCA TGGGCTCTGA GCAGTGGAGA ACAGTGGTGT
601 GAACGGGCAT CTCCTCCCAG CAGCTCATGC AACATCTCCT CTGGGGAAAT
651 GCAGAAGGGC CTGTGGGAGC AGTGCCAGCT TCTGAAGAGC ACCTCGGTGT
701 TTGCCCGCTG CCACCCTCTG GTGGACCCCG AGCCTTTTGT GGCCCTGTGT
751 GAGAAGACTT TGTGTGAGTG TGCTGGGGGG CTGGAGTGCG CCTGCCCTGC
801 CCTCCTGGAG TACGCCCGGA CCTGTGCCCA GGAGGGAATG GTGCTGTACG
851 GCTGGACCGA CCACAGCGCG TGCAGCCCAG TGTGCCCTGC TGGTATGGAG
901 TATAGGCAGT GTGTGTCCCC TTGCGCCAGG ACCTGCCAGA GCCTGCACAT
951 CAATGAAATG TGTCAGGAGC GATGCGTGGA TGGCTGCAGC TGCCCTGAGG
1001 GACAGCTCCT GGATGAAGGC CTCTGCGTGG AGAGCACCGA GTGTCCCTGC
1051 GTGCATTCCG GAAAGCGCTA CCCTCCCGGC ACCTCCCTCT CTCGAGACTG
1101 CAACACCTGC ATTTGCCGAA ACAGCCAGTG GATCTGCAGC AATGAAGAAT
1151 GTCCAGGGGA GTGCCTTGTC ACTGGTCAAT CCCACTTCAA GAGCTTTGAC
1201 AACAGATACT TCACCTTCAG TGGGATCTGC CAGTACCTGC TGGCCCGGGA
1251 TTGCCAGGAC CACTCCTTCT CCATTGTCAT TGAGACTGTC CAGTGTGCTG
1301 ATGACCGCGA CGCTGTGTGC ACCCGCTCCG TCACCGTCCG GCTGCCTGGC
1351 CTGCACAACA GCCTTGTGAA ACTGAAGCAT GGGGCAGGAG TTGCCATGGA
1401 TGGCCAGGAC ATCCAGCTCC CCCTCCTGAA AGGTGACCTC CGCATCCAGC
1451 ATACAGTGAC GGCCTCCGTG CGCCTCAGCT ACGGGGAGGA CCTGCAGATG
1501 GACTGGGATG GCCGCGGGAG GCTGCTGGTG AAGCTGTCCC CCGTCTATGC
1551 CGGGAAGACC TGCGGCCTGT GTGGGAATTA CAATGGCAAC CAGGGCGACG
1601 ACTTCCTTAC CCCCTCTGGG CTGGCGGAGC CCCGGGTGGA GGACTTCGGG
1651 AACGCCTGGA AGCTGCACGG GGACTGCCAG GACCTGCAGA AGCAGCACAG
1701 CGATCCCTGC GCCCTCAACC CGCGCATGAC CAGGTTCTCC GAGGAGGCGT
1751 GCGCGGTCCT GACGTCCCCC ACATTCGAGG CCTGCCATCG TGCCGTCAGC
1801 CCGCTGCCCT ACCTGCGGAA CTGCCGCTAC GACGTGTGCT CCTGCTCGGA
1851 CGGCCGCGAG TGCCTGTGCG GCGCCCTGGC CAGCTATGCC GCGGCCTGCG
1901 CGGGGAGAGG CGTGCGCGTC GCGTGGCGCG AGCCAGGCCG CTGTGAGCTG
1951 AACTGCCCGA AAGGCCAGGT GTACCTGCAG TGCGGGACCC CCTGCAACCT
2001 GACCTGCCGC TCTCTCTCTT ACCCGGATGA GGAATGCAAT GAGGCCTGCC
2051 TGGAGGGCTG CTTCTGCCCC CCAGGGCTCT ACATGGATGA GAGGGGGGAC
2101 TGCGTGCCCA AGGCCCAGTG CCCCTGTTAC TATGACGGTG AGATCTTCCA
2151 GCCAGAAGAC ATCTTCTCAG ACCATCACAC CATGTGCTAC TGTGAGGATG
2201 GCTTCATGCA CTGTACCATG AGTGGAGTCC CCGGAAGCTT GCTGCCTGAC
2251 GCTGTCCTCA GCAGTCCCCT GTCTCATCGC AGCAAAAGGA GCCTATCCTG
2301 TCGGCCCCCC ATGGTCAAGC TGGTGTGTCC CGCTGACAAC CTGCGGGCTG
2351 AAGGGCTCGA GTGTACCAAA ACGTGCCAGA ACTATGACCT GGAGTGCATG
2401 AGCATGGGCT GTGTCTCTGG CTGCCTCTGC CCCCCGGGCA TGGTCCGGCA
2451 TGAGAACAGA TGTGTGGCCC TGGAAAGGTG TCCCTGCTTC CATCAGGGCA
2501 AGGAGTATGC CCCTGGAGAA ACAGTGAAGA TTGGCTGCAA CACTTGTGTC
2551 TGTCGGGACC GGAAGTGGAA CTGCACAGAC CATGTGTGTG ATGCCACGTG
2601 CTCCACGATC GGCATGGCCC ACTACCTCAC CTTCGACGGG CTCAAATACC
2651 TGTTCCCCGG GGAGTGCCAG TACGTTCTGG TGCAGGATTA CTGCGGCAGT
2701 AACCCTGGGA CCTTTCGGAT CCTAGTGGGG AATAAGGGAT GCAGCCACCC
2751 CTCAGTGAAA TGCAAGAAAC GGGTCACCAT CCTGGTGGAG GGAGGAGAGA
2801 TTGAGCTGTT TGACGGGGAG GTGAATGTGA AGAGGCCCAT GAAGGATGAG
2851 ACTCACTTTG AGGTGGTGGA GTCTGGCCGG TACATCATTC TGCTGCTGGG
2901 CAAAGCCCTC TCCGTGGTCT GGGACCGCCA CCTGAGCATC TCCGTGGTCC
2951 TGAAGCAGAC ATACCAGGAG AAAGTGTGTG GCCTGTGTGG GAATTTTGAT
3001 GGCATCCAGA ACAATGACCT CACCAGCAGC AACCTCCAAG TGGAGGAAGA
3051 CCCTGTGGAC TTTGGGAACT CCTGGAAAGT GAGCTCGCAG TGTGCTGACA
3101 CCAGAAAAGT GCCTCTGGAC TCATCCCCTG CCACCTGCCA TAACAACATC
3151 ATGAAGCAGA CGATGGTGGA TTCCTCCTGT AGAATCCTTA CCAGTGACGT
3201 CTTCCAGGAC TGCAACAAGC TGGTGGACCC CGAGCCATAT CTGGATGTCT
3251 GCATTTACGA CACCTGCTCC TGTGAGTCCA TTGGGGACTG CGCCGCATTC
3301 TGCGACACCA TTGCTGCCTA TGCCCACGTG TGTGCCCAGC ATGGCAAGGT
3351 GGTGACCTGG AGGACGGCCA CATTGTGCCC CCAGAGCTGC GAGGAGAGGA
3401 ATCTCCGGGA GAACGGGTAT GAGGCTGAGT GGCGCTATAA CAGCTGTGCA
3451 CCTGCCTGTC AAGTCACGTG TCAGCACCCT GAGCCACTGG CCTGCCCTGT
3501 GCAGTGTGTG GAGGGCTGCC ATGCCCACTG CCCTCCAGGG AAAATCCTGG
3551 ATGAGCTTTT GCAGACCTGC GTTGACCCTG AAGACTGTCC AGTGTGTGAG
3601 GTGGCTGGCC GGCGTTTTGC CTCAGGAAAG AAAGTCACCT TGAATCCCAG
3651 TGACCCTGAG CACTGCCAGA TTTGCCACTG TGATGTTGTC AACCTCACCT
3701 GTGAAGCCTG CCAGGAGCCG GGTACATCAG AGAGCGCCAC CCCTGAAAGT
3751 GGTCCCGGGA GCGAGCCAGC CACATCTGGG TCGGAAACGC CAGGCACATC
3801 CGAGTCTGCA ACTCCCGAGT CCGGACCTGG CTCCGAGCCT GCCACTAGCG
3851 GCTCCGAGAC TCCGGGAACT TCCGAGAGCG CTACACCAGA AAGCGGACCC
3901 GGAACCAGTA CCGAACCTAG CGAGGGCTCT GCTCCGGGCA GCCCAGCCGG
3951 CTCTCCTACA TCCACGGAGG AGGGCACTTC CGAATCCGCC ACCCCGGAGT
4001 CAGGGCCAGG ATCTGAACCC GCTACCTCAG GCAGTGAGAC GCCAGGAACG
4051 AGCGAGTCCG CTACACCGGA GAGTGGGCCA GGGAGCCCTG CTGGATCTCC
4101 TACGTCCACT GAGGAAGGGT CACCAGCGGG CTCGCCCACC AGCACTGAAG
4151 AAGGTGCCTC GTCTGACAAG AACACTGGTG ATTATTACGA GGACAGTTAT
4201 GAAGATATTT CAGCATACTT GCTGAGTAAA AACAATGCCA TTGAACCAAG
4251 AAGCTTCTCT GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCTCCAGAAC
4301 TCCTGGGCGG ACCGTCAGTC TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC
4351 CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA TGCGTGGTGG TGGACGTGAG
4401 CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTATGTGGAC GGCGTGGAAG
4451 TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC
4501 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAAGACTGGC TGAATGGCAA
4551 GGAGTACAAG TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA
4601 AAACCATCTC CAAAGCCAAA GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC
4651 CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG AACCAAGTTA GCCTGACCTG
4701 CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG TGGGAGAGCA
4751 ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC
4801 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CTCCAAGCTC ACCGTGGACA AGAGCAGGTG
4851 GCAGCAGGGG AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA
4901 ACCACTACAC GCAGAAGAGC CTCTCCCTGT CTCCGGGTTG A

A-FVIII(XTEN)-Fc: SEQ ID NO: 207

ATRRYYLGAVELSWDYMQSDLGELPVDARFPPRVPKSFPFNTSVVYKKTLFVEFTDHLFNIAKPRPPWMGLLGPTIQAEVYDTVVITLKNMASHPVSLHAVGVSYWKASEGAEYDDQTSQREKEDDKVFPGGSHTYVWQVLKENGPMASDPLCLTYSYLSHVDLVKDLNSGLIGALLVCREGSLAKEKTQTLHKFILLFAVFDEGKSWHSETKNSLMQDRDAASARAWPKMHTVNGYVNRSLPGLIGCHRKSVYWHVIGMGTTPEVHSIFLEGHTFLVRNHRQASLEISPITFLTAQTLLMDLGQFLLFCHISSHQHDGMEAYVKVDSCPEEPQLRMKNNEEAEDYDDDLTDSEMDVVRFDDDNSPSFIQIRSVAKKHPKTWVHYIAAEEEDWDYAPLVLAPDDRSYKSQYLNNGPQRIGRKYKKVRFMAYTDETFKTREAIQHESGILGPLLYGEVGDTLLIIFKNQASRPYNIYPHGITDVRPLYSRRLPKGVKHLKDFPILPGEIFKYKWTVTVEDGPTKSDPRCLTRYYSSFVNMERDLASGLIGPLLICYKESVDQRGNQIMSDKRNVILFSVFDENRSWYLTENIQRFLPNPAGVQLEDPEFQASNIMHSINGYVFDSLQLSVCLHEVAYWYILSIGAQTDFLSVFFSGYTFKHKMVYEDTLTLFPFSGETVFMSMENPGLWILGCHNSDFRNRGMTALLKVSSCDKNTGDYYEDSYEDISAYLLSKNNAIEPRSFSQNGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPGSPAGSPTSTEEGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGSPAGSPTSTEEGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGTSESATPESGPGSEPATSGSETPGSEPATSGSETPGSPAGSPTSTEEGTSTEPSEGSAPGTSTEPSEGSAPGSEPATSGSETPGTSESATPESGPGTSTEPSEGSAPASSEITRTTLQSDQEEIDYDDTISVEMKKEDFDIYDEDENQSPRSFQKKTRHYFIAAVERLWDYGMSSSPHVLRNRAQSGSVPQFKKVVFQEFTDGSFTQPLYRGELNEHLGLLGPYIRAEVEDNIMVTFRNQASRPYSFYSSLISYEEDQRQGAEPRKNFVKPNETKTYFWKVQHHMAPTKDEFDCKAWAYFSDVDLEKDVHSGLIGPLLVCHTNTLNPAHGRQVTVQEFALFFTIFDETKSWYFTENMERNCRAPCNIQMEDPTFKENYRFHAINGYIMDTLPGLVMAQDQRIRWYLLSMGSNENIHSIHFSGHVFTVRKKEEYKMALYNLYPGVFETVEMLPSKAGIWRVECLIGEHLHAGMSTLFLVYSNKCQTPLGMASGHIRDFQITASGQYGQWAPKLARLHYSGSINAWSTKEPFSWIKVDLLAPMIIHGIKTQGARQKFSSLYISQFIIMYSLDGKKWQTYRGNSTGTLMVFFGNVDSSGIKHNIFNPPIIARYIRLHPTHYSIRSTLRMELMGCDLNSCSMPLGMESKAISDAQITASSYFTNMFATWSPSKARLHLQGRSNAWRPQVNNPKEWLQVDFQKTMKVTGVTTQGVKSLLTSMYVKEFLISSSQDGHQWTLFFQNGKVKVFQGNQDSFTPVVNSLDPPLLTRYLRIHPQSWVHQIALRMEVLGCEAQDLYDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG

Таблица 19. Дополнительные последовательности химерных полипептидов

Описание/ SEQ ID NO:	Последовательность
AE288 SEQ ID NO: 8	GTSESATPES GPGSEPATSG SETPGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP 60 GTSTEPSEGS APGSPAGSPT STEEGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP 120 GSPAGSPTST EEGSPAGSPT STEEGTSTEP SEGSAPGTSE SATPESGPGT SESATPESGP 180 GTSESATPES GPGSEPATSG SETPGSEPAT SGSETPGSPA GSPTSTEEGT STEPSEGSAP 240 GTSTEPSEGS APGSEPATSG SETPGTSESA TPESGPGTST EPSEGSAP 288
pSYN VWF059 SEQ ID NO: 13	TSTEEGASIS DKNTGDYYED SYEDISAYLL SKNNAIEPRS FSDKTH
pSYN VWF059A SEQ ID NO: 22	TSTEEGASSD KNTGDYYEDS YEDISAYLLS KNNAIEPRSF SDKTH
pSYN FVIII 312 SEQ ID NO: 173	ATRRYYLGAV ELSWDYMQSD LGELPVDARF PPRVPKSFPF NTSVVYKKTL FVEFTDHLFN 60 IAKPRPPWMG LLGPTIQAEV YDTVVITLKN MASHPVSLHA VGVSYWKASE GAEYDDQTSQ 120 REKEDDKVFP GGSHTYVWQV LKENGPMASD PLCLTYSYLS HVDLVKDLNS GLIGALLVCR 180 EGSLAKEKTQ TLHKFILLFA VFDEGKSWHS ETKNSLMQDR DAASARAWPK MHTVNGYVNR 240 SLPGLIGCHR KSVYWHVIGM GTTPEVHSIF LEGHTFLVRN HRQASLEISP ITFLTAQTLL 300 MDLGQFLLFC HISSHQHDGM EAYVKVDSCP EEPQLRMKNN EEAEDYDDDL TDSEMDVVRF 360 DDDNSPSFIQ IRSVAKKHPK TWVHYIAAEE EDWDYAPLVL APDDRSYKSQ YLNNGPQRIG 420 RKYKKVRFMA YTDETFKTRE AIQHESGILG PLLYGEVGDT LLIIFKNQAS RPYNIYPHGI 480 TDVRPLYSRR LPKGVKHLKD FPILPGEIFK YKWTVTVEDG PTKSDPRCLT RYYSSFVNME 540 RDLASGLIGP LLICYKESVD QRGNQIMSDK RNVILFSVFD ENRSWYLTEN IQRFLPNPAG 600 VQLEDPEFQA SNIMHSINGY VFDSLQLSVC LHEVAYWYIL SIGAQTDFLS VFFSGYTFKH 660 KMVYEDTLTL FPFSGETVFM SMENPGLWIL GCHNSDFRNR GMTALLKVSS CDKNTGDYYE 720 DSYEDISAYL LSKNNAIEPR SFSQNGTSES ATPESGPGSE PATSGSETPG TSESATPESG 780 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGTSTE PSEGSAPGSP AGSPTSTEEG TSESATPESG 840 PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSPAG SPTSTEEGSP AGSPTSTEEG TSTEPSEGSA 900 PGTSESATPE SGPGTSESAT PESGPGTSES ATPESGPGSE PATSGSETPG SEPATSGSET 960 PGSPAGSPTS TEEGTSTEPS EGSAPGTSTE PSEGSAPGSE PATSGSETPG TSESATPESG 1020 PGTSTEPSEG SAPASSEITR TTLQSDQEEI DYDDTISVEM KKEDFDIYDE DENQSPRSFQ 1080 KKTRHYFIAA VERLWDYGMS SSPHVLRNRA QSGSVPQFKK VVFQEFTDGS FTQPLYRGEL 1140 NEHLGLLGPY IRAEVEDNIM VTFRNQASRP YSFYSSLISY EEDQRQGAEP RKNFVKPNET 1200 KTYFWKVQHH MAPTKDEFDC KAWAYFSDVD LEKDVHSGLI GPLLVCHTNT LNPAHGRQVT 1260 VQEFALFFTI FDETKSWYFT ENMERNCRAP CNIQMEDPTF KENYRFHAIN GYIMDTLPGL 1320 VMAQDQRIRW YLLSMGSNEN IHSIHFSGHV FTVRKKEEYK MALYNLYPGV FETVEMLPSK 1380 AGIWRVECLI GEHLHAGMST LFLVYSNKCQ TPLGMASGHI RDFQITASGQ YGQWAPKLAR 1440 LHYSGSINAW STKEPFSWIK VDLLAPMIIH GIKTQGARQK FSSLYISQFI IMYSLDGKKW 1500 QTYRGNSTGT LMVFFGNVDS SGIKHNIFNP PIIARYIRLH PTHYSIRSTL RMELMGCDLN 1560 SCSMPLGMES KAISDAQITA SSYFTNMFAT WSPSKARLHL QGRSNAWRPQ VNNPKEWLQV 1620 DFQKTMKVTG VTTQGVKSLL TSMYVKEFLI SSSQDGHQWT LFFQNGKVKV FQGNQDSFTP 1680 VVNSLDPPLL TRYLRIHPQS WVHQIALRME VLGCEAQDLY DKTHTCPPCP APELLGGPSV 1740 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 1800 RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK 1860 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 1920 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK
XTEN AE288_2 SEQ ID NO: 54	GSPAGSPTST EEGTSESATP ESGPGSEPAT SGSETPGTSE SATPESGPGT STEPSEGSAP 60 GTSTEPSEGS APGTSTEPSE GSAPGTSTEP SEGSAPGTST EPSEGSAPGT STEPSEGSAP 120 GSPAGSPTST EEGTSTEPSE GSAPGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP 180 GSEPATSGSE TPGTSESATP ESGPGTSTEP SEGSAPGTSE SATPESGPGS PAGSPTSTEE 240 GSPAGSPTST EEGSPAGSPT STEEGTSESA TPESGPGTST EPSEGSAP 288
XTEN AE144_5A SEQ ID NO: 58	TSESATPESG PGSEPATSGS ETPGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG 60 TSTEPSEGSA PGSPAGSPTS TEEGTSESAT PESGPGSEPA TSGSETPGTS ESATPESGPG 120 SPAGSPTSTE EGSPAGSPTS TEEG
Линкер a2 химерного полипептида SEQ ID NO: 88	DKNTGDYYED SYEDISAYLL SKNNAIEPRS FS 32
Сигнальный пептид FVIII SEQ ID NO: 64	mqielstcfflcllrfcfs
Фрагмент 1 FVIII химерного полипептида SEQ ID NO: 215	ATRRYYLGAV ELSWDYMQSD LGELPVDARF PPRVPKSFPF NTSVVYKKTL FVEFTDHLFN 60 IAKPRPPWMG LLGPTIQAEV YDTVVITLKN MASHPVSLHA VGVSYWKASE GAEYDDQTSQ 120 REKEDDKVFP GGSHTYVWQV LKENGPMASD PLCLTYSYLS HVDLVKDLNS GLIGALLVCR 180 EGSLAKEKTQ TLHKFILLFA VFDEGKSWHS ETKNSLMQDR DAASARAWPK MHTVNGYVNR 240 SLPGLIGCHR KSVYWHVIGM GTTPEVHSIF LEGHTFLVRN HRQASLEISP ITFLTAQTLL 300 MDLGQFLLFC HISSHQHDGM EAYVKVDSCP EEPQLRMKNN EEAEDYDDDL TDSEMDVVRF 360 DDDNSPSFIQ IRSVAKKHPK TWVHYIAAEE EDWDYAPLVL APDDRSYKSQ YLNNGPQRIG 420 RKYKKVRFMA YTDETFKTRE AIQHESGILG PLLYGEVGDT LLIIFKNQAS RPYNIYPHGI 480 TDVRPLYSRR LPKGVKHLKD FPILPGEIFK YKWTVTVEDG PTKSDPRCLT RYYSSFVNME 540 RDLASGLIGP LLICYKESVD QRGNQIMSDK RNVILFSVFD ENRSWYLTEN IQRFLPNPAG 600 VQLEDPEFQA SNIMHSINGY VFDSLQLSVC LHEVAYWYIL SIGAQTDFLS VFFSGYTFKH 660 KMVYEDTLTL FPFSGETVFM SMENPGLWIL GCHNSDFRNR GMTALLKVSS CDKNTGDYYE 720 DSYEDISAYL LSKNNAIEPR SFSQN
Фрагмент 2 FVIII химерного полипептида SEQ ID NO: 216	EITRTTLQSD QEEIDYDDTI SVEMKKEDFD IYDEDENQSP RSFQKKTRHY FIAAVERLWD 60 YGMSSSPHVL RNRAQSGSVP QFKKVVFQEF TDGSFTQPLY RGELNEHLGL LGPYIRAEVE 120 DNIMVTFRNQ ASRPYSFYSS LISYEEDQRQ GAEPRKNFVK PNETKTYFWK VQHHMAPTKD 180 EFDCKAWAYF SDVDLEKDVH SGLIGPLLVC HTNTLNPAHG RQVTVQEFAL FFTIFDETKS 240 WYFTENMERN CRAPCNIQME DPTFKENYRF HAINGYIMDT LPGLVMAQDQ RIRWYLLSMG 300 SNENIHSIHF SGHVFTVRKK EEYKMALYNL YPGVFETVEM LPSKAGIWRV ECLIGEHLHA 360 GMSTLFLVYS NKCQTPLGMA SGHIRDFQIT ASGQYGQWAP KLARLHYSGS INAWSTKEPF 420 SWIKVDLLAP MIIHGIKTQG ARQKFSSLYI SQFIIMYSLD GKKWQTYRGN STGTLMVFFG 480 NVDSSGIKHN IFNPPIIARY IRLHPTHYSI RSTLRMELMG CDLNSCSMPL GMESKAISDA 540 QITASSYFTN MFATWSPSKA RLHLQGRSNA WRPQVNNPKE WLQVDFQKTM KVTGVTTQGV 600 KSLLTSMYVK EFLISSSQDG HQWTLFFQNG KVKVFQGNQD SFTPVVNSLD PPLLTRYLRI 660 HPQSWVHQIA LRMEVLGCEA QDLY
Сигнальный пептид VWF SEQ ID NO: 208	MIPARFAGVL LALALILPGT LC
Домен D1D2 VWF химерного полипептида SEQ ID NO: 209	AEGTRGRSST ARCSLFGSDF VNTFDGSMYS FAGYCSYLLA GGCQKRSFSI IGDFQNGKRV 60 SLSVYLGEFF DIHLFVNGTV TQGDQRVSMP YASKGLYLET EAGYYKLSGE AYGFVARIDG 120 SGNFQVLLSD RYFNKTCGLC GNFNIFAEDD FMTQEGTLTS DPYDFANSWA LSSGEQWCER 180 ASPPSSSCNI SSGEMQKGLW EQCQLLKSTS VFARCHPLVD PEPFVALCEK TLCECAGGLE 240 CACPALLEYA RTCAQEGMVL YGWTDHSACS PVCPAGMEYR QCVSPCARTC QSLHINEMCQ 300 ERCVDGCSCP EGQLLDEGLC VESTECPCVH SGKRYPPGTS LSRDCNTCIC RNSQWICSNE 360 ECPGECLVTG QSHFKSFDNR YFTFSGICQY LLARDCQDHS FSIVIETVQC ADDRDAVCTR 420 SVTVRLPGLH NSLVKLKHGA GVAMDGQDIQ LPLLKGDLRI QHTVTASVRL SYGEDLQMDW 480 DGRGRLLVKL SPVYAGKTCG LCGNYNGNQG DDFLTPSGLA EPRVEDFGNA WKLHGDCQDL 540 QKQHSDPCAL NPRMTRFSEE ACAVLTSPTF EACHRAVSPL PYLRNCRYDV CSCSDGRECL 600 CGALASYAAA CAGRGVRVAW REPGRCELNC PKGQVYLQCG TPCNLTCRSL SYPDEECNEA 660 CLEGCFCPPG LYMDERGDCV PKAQCPCYYD GEIFQPEDIF SDHHTMCYCE DGFMHCTMSG 720 VPGSLLPDAV LSSPLSHRSK R
Домен D' VWF химерного полипептида SEQ ID NO: 210	SLSCRPPMVK LVCPADNLRA EGLECTKTCQ NYDLECMSMG CVSGCLCPPG MVRHENRCVA 60 LERCPCFHQG KEYAPGETVK IGCNTCVCRD RKWNCTDHVC DAT 103
Домен D3 VWF химерного полипептида SEQ ID NO: 214	CSTIGMAHYL TFDGLKYLFP GECQYVLVQD YCGSNPGTFR ILVGNKGCSH PSVKCKKRVT 60 ILVEGGEIEL FDGEVNVKRP MKDETHFEVV ESGRYIILLL GKALSVVWDR HLSISVVLKQ 120 TYQEKVCGLC GNFDGIQNND LTSSNLQVEE DPVDFGNSWK VSSQCADTRK VPLDSSPATC 180 HNNIMKQTMV DSSCRILTSD VFQDCNKLVD PEPYLDVCIY DTCSCESIGD CAAFCDTIAA 240 YAHVCAQHGK VVTWRTATLC PQSCEERNLR ENGYEAEWRY NSCAPACQVT CQHPEPLACP 300 VQCVEGCHAH CPPGKILDEL LQTCVDPEDC PVCEVAGRRF ASGKKVTLNP SDPEHCQICH 360 CDVVNLTCEA CQEP 374
Fc-область SEQ ID NO: 217	DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD 60 GVEVHNAKTK PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK 120 GQPREPQVYT LPPSRDELTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS 180 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPG
XTEN AE288_3 SEQ ID NO: 218	GTSESATPES GPGSEPATSG SETPGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP 60 GTSTEPSEGS APGSPAGSPT STEEGTSESA TPESGPGSEP ATSGSETPGT SESATPESGP 120 GSPAGSPTST EEGSPAGSPT STEEGTSTEP SEGSAPGTSE SATPESGPGT SESATPESGP 180 GTSESATPES GPGSEPATSG SETPGSEPAT SGSETPGSPA GSPTSTEEGT STEPSEGSAP 240 GTSTEPSEGS APGSEPATSG SETPGTSESA TPESGPGTST EPSEGSAPAS S 291

[0387] Предшествующее описание конкретных вариантов осуществления настолько полно раскрывает общий характер настоящего изобретения, что другие могут, используя знания в пределах квалификации в данной области техники, легко модифицировать и/или адаптировать такие конкретные варианты осуществления для различных вариантов применения без проведения дополнительных экспериментов, не отступая от общей концепции настоящего изобретения. Следовательно, такие адаптации и модификации предназначены для того, чтобы находиться в пределах значения и диапазона эквивалентов раскрытых вариантов осуществления, основанных на идее и принципе, представленных в данном документе. Следует понимать, что формулировки или терминология в данном документе предназначены для целей описания, а не ограничения, и вследствие этого терминологию или формулировки в настоящем описании квалифицированному специалисту следует интерпретировать в свете данных идей и принципов.

[0388] Другие варианты осуществления настоящего изобретения будут очевидны специалистам в данной области при рассмотрении описания и практическом применении настоящего изобретения, раскрытого в данном документе. Предполагается, что описание и примеры должны рассматриваться только в качестве иллюстративных, а действительные объем и сущность настоящего изобретения указаны в нижеследующей формуле изобретения.

Все патенты и публикации, цитируемые в данном документе, включены в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Bioverativ Therapeutics Inc.

<120> СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ГЕМОФИЛИИ A

<130> 612297: SA9-461PC

<150> US 62/673,670

<151> 2018-05-18

<150> US 62/712,880

<151> 2018-07-31

<150> US 62/773,785

<151> 2018-11-30

<150> US 62/801,576

<151> 2019-02-05

<160> 218

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 1

Thr Gln Ser Phe Asn Asp Phe Thr Arg

1 5

<210> 2

<211> 302

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 312A

<400> 2

Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

1 5 10 15

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

20 25 30

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

35 40 45

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

50 55 60

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

65 70 75 80

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser

85 90 95

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

100 105 110

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

115 120 125

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

130 135 140

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly

145 150 155 160

Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

165 170 175

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser

180 185 190

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

195 200 205

Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

210 215 220

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu

225 230 235 240

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly

245 250 255

Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

260 265 270

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

275 280 285

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Glu Ile Thr Arg

290 295 300

<210> 3

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 3

Ser Val Ser Gln Thr Ser Lys Leu Thr Arg

1 5 10

<210> 4

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 4

Asp Phe Leu Ala Glu Gly Gly Gly Val Arg

1 5 10

<210> 5

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 5

Thr Thr Lys Ile Lys Pro Arg

1 5

<210> 6

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 6

Leu Val Pro Arg Gly

1 5

<210> 7

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 7

Ala Leu Arg Pro Arg

1 5

<210> 8

<211> 288

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE288

<400> 8

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

1 5 10 15

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

20 25 30

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

35 40 45

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

50 55 60

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

65 70 75 80

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

85 90 95

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu

100 105 110

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

115 120 125

Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

130 135 140

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu

145 150 155 160

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

165 170 175

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

180 185 190

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro

195 200 205

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

210 215 220

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

225 230 235 240

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

245 250 255

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

260 265 270

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

275 280 285

<210> 9

<211> 42

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE42

<400> 9

Gly Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

1 5 10 15

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

20 25 30

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Ala Ser Ser

35 40

<210> 10

<211> 78

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE72

<400> 10

Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

1 5 10 15

Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

20 25 30

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

35 40 45

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

50 55 60

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala Ser Ser

65 70 75

<210> 11

<211> 143

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE144

<400> 11

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu

1 5 10 15

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

20 25 30

Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

35 40 45

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

50 55 60

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

65 70 75 80

Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

85 90 95

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu

100 105 110

Ser Ala Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

115 120 125

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

130 135 140

<210> 12

<211> 56

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF057

<400> 12

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

1 5 10 15

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg

35 40 45

Gly Ser Gly Gly Asp Lys Thr His

50 55

<210> 13

<211> 46

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF059

<400> 13

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ile Ser Asp Lys Asn Thr Gly Asp

1 5 10 15

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

20 25 30

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Asp Lys Thr His

35 40 45

<210> 14

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AG144

<400> 14

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

1 5 10 15

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr

20 25 30

Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

35 40 45

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro

50 55 60

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

65 70 75 80

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

85 90 95

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

100 105 110

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala

115 120 125

Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro

130 135 140

<210> 15

<211> 864

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE864

<400> 15

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu

1 5 10 15

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

20 25 30

Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

35 40 45

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

50 55 60

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

65 70 75 80

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

85 90 95

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala

100 105 110

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

115 120 125

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

130 135 140

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala

145 150 155 160

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

165 170 175

Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

180 185 190

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

195 200 205

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

210 215 220

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

225 230 235 240

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

245 250 255

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

260 265 270

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

275 280 285

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu

290 295 300

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

305 310 315 320

Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

325 330 335

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

340 345 350

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

355 360 365

Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

370 375 380

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

385 390 395 400

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

405 410 415

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

420 425 430

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

435 440 445

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

450 455 460

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

465 470 475 480

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

485 490 495

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

500 505 510

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

515 520 525

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

530 535 540

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

545 550 555 560

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

565 570 575

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

580 585 590

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

595 600 605

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

610 615 620

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

625 630 635 640

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

645 650 655

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

660 665 670

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu

675 680 685

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

690 695 700

Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

705 710 715 720

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu

725 730 735

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

740 745 750

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

755 760 765

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro

770 775 780

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

785 790 795 800

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

805 810 815

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

820 825 830

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

835 840 845

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

850 855 860

<210> 16

<211> 576

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE576

<400> 16

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu

1 5 10 15

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

20 25 30

Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

35 40 45

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

50 55 60

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

65 70 75 80

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

85 90 95

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala

100 105 110

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

115 120 125

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

130 135 140

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala

145 150 155 160

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

165 170 175

Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

180 185 190

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

195 200 205

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

210 215 220

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

225 230 235 240

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

245 250 255

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

260 265 270

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

275 280 285

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu

290 295 300

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

305 310 315 320

Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

325 330 335

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

340 345 350

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

355 360 365

Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

370 375 380

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

385 390 395 400

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

405 410 415

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

420 425 430

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

435 440 445

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

450 455 460

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

465 470 475 480

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

485 490 495

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

500 505 510

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

515 520 525

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

530 535 540

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

545 550 555 560

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

565 570 575

<210> 17

<211> 864

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AG864

<400> 17

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

1 5 10 15

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr

20 25 30

Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

35 40 45

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

50 55 60

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

65 70 75 80

Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

85 90 95

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly

100 105 110

Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

115 120 125

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

130 135 140

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

145 150 155 160

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

165 170 175

Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

180 185 190

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

195 200 205

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr

210 215 220

Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro

225 230 235 240

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro

245 250 255

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

260 265 270

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

275 280 285

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro

290 295 300

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

305 310 315 320

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

325 330 335

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly

340 345 350

Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

355 360 365

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

370 375 380

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr

385 390 395 400

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

405 410 415

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

420 425 430

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

435 440 445

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

450 455 460

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro

465 470 475 480

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro

485 490 495

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

500 505 510

Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

515 520 525

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro

530 535 540

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

545 550 555 560

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

565 570 575

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

580 585 590

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala

595 600 605

Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro

610 615 620

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

625 630 635 640

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

645 650 655

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

660 665 670

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro

675 680 685

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala

690 695 700

Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro

705 710 715 720

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro

725 730 735

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

740 745 750

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

755 760 765

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

770 775 780

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

785 790 795 800

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

805 810 815

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

820 825 830

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

835 840 845

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

850 855 860

<210> 18

<211> 576

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AG576

<400> 18

Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser

1 5 10 15

Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser

20 25 30

Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly

35 40 45

Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser

50 55 60

Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser

65 70 75 80

Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser

85 90 95

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro

100 105 110

Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser

115 120 125

Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser

130 135 140

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser

145 150 155 160

Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr

165 170 175

Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser

180 185 190

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser

195 200 205

Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly

210 215 220

Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

225 230 235 240

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro

245 250 255

Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly

260 265 270

Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

275 280 285

Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser

290 295 300

Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser

305 310 315 320

Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser

325 330 335

Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser

340 345 350

Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser

355 360 365

Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser

370 375 380

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro

385 390 395 400

Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly

405 410 415

Ala Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser

420 425 430

Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro

435 440 445

Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly

450 455 460

Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

465 470 475 480

Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser

485 490 495

Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser

500 505 510

Ser Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser

515 520 525

Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser

530 535 540

Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser

545 550 555 560

Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser

565 570 575

<210> 19

<211> 288

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AG288

<400> 19

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser

1 5 10 15

Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr

20 25 30

Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

35 40 45

Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser

50 55 60

Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr

65 70 75 80

Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

85 90 95

Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser

100 105 110

Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser

115 120 125

Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser

130 135 140

Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser

145 150 155 160

Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser

165 170 175

Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly

180 185 190

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser

195 200 205

Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly

210 215 220

Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly

225 230 235 240

Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser

245 250 255

Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr

260 265 270

Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

275 280 285

<210> 20

<211> 8442

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 20

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcrgagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgcctgcttc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gagtgtgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

ggaggcctgg tggtgcctcc cacagatgcc ccggtgagcc ccaccactct gtatgtggag 3780

gacatctcgg aaccgccgtt gcacgatttc tactgcagca ggctactgga cctggtcttc 3840

ctgctggatg gctcctccag gctgtccgag gctgagtttg aagtgctgaa ggcctttgtg 3900

gtggacatga tggagcggct gcgcatctcc cagaagtggg tccgcgtggc cgtggtggag 3960

taccacgacg gctcccacgc ctacatcggg ctcaaggacc ggaagcgacc gtcagagctg 4020

cggcgcattg ccagccaggt gaagtatgcg ggcagccagg tggcctccac cagcgaggtc 4080

ttgaaataca cactgttcca aatcttcagc aagatcgacc gccctgaagc ctcccgcatc 4140

gccctgctcc tgatggccag ccaggagccc caacggatgt cccggaactt tgtccgctac 4200

gtccagggcc tgaagaagaa gaaggtcatt gtgatcccgg tgggcattgg gccccatgcc 4260

aacctcaagc agatccgcct catcgagaag caggcccctg agaacaaggc cttcgtgctg 4320

agcagtgtgg atgagctgga gcagcaaagg gacgagatcg ttagctacct ctgtgacctt 4380

gcccctgaag cccctcctcc tactctgccc cccgacatgg cacaagtcac tgtgggcccg 4440

gggctcttgg gggtttcgac cctggggccc aagaggaact ccatggttct ggatgtggcg 4500

ttcgtcctgg aaggatcgga caaaattggt gaagccgact tcaacaggag caaggagttc 4560

atggaggagg tgattcagcg gatggatgtg ggccaggaca gcatccacgt cacggtgctg 4620

cagtactcct acatggtgac cgtggagtac cccttcagcg aggcacagtc caaaggggac 4680

atcctgcagc gggtgcgaga gatccgctac cagggcggca acaggaccaa cactgggctg 4740

gccctgcggt acctctctga ccacagcttc ttggtcagcc agggtgaccg ggagcaggcg 4800

cccaacctgg tctacatggt caccggaaat cctgcctctg atgagatcaa gaggctgcct 4860

ggagacatcc aggtggtgcc cattggagtg ggccctaatg ccaacgtgca ggagctggag 4920

aggattggct ggcccaatgc ccctatcctc atccaggact ttgagacgct cccccgagag 4980

gctcctgacc tggtgctgca gaggtgctgc tccggagagg ggctgcagat ccccaccctc 5040

tcccctgcac ctgactgcag ccagcccctg gacgtgatcc ttctcctgga tggctcctcc 5100

agtttcccag cttcttattt tgatgaaatg aagagtttcg ccaaggcttt catttcaaaa 5160

gccaatatag ggcctcgtct cactcaggtg tcagtgctgc agtatggaag catcaccacc 5220

attgacgtgc catggaacgt ggtcccggag aaagcccatt tgctgagcct tgtggacgtc 5280

atgcagcggg agggaggccc cagccaaatc ggggatgcct tgggctttgc tgtgcgatac 5340

ttgacttcag aaatgcatgg tgccaggccg ggagcctcaa aggcggtggt catcctggtc 5400

acggacgtct ctgtggattc agtggatgca gcagctgatg ccgccaggtc caacagagtg 5460

acagtgttcc ctattggaat tggagatcgc tacgatgcag cccagctacg gatcttggca 5520

ggcccagcag gcgactccaa cgtggtgaag ctccagcgaa tcgaagacct ccctaccatg 5580

gtcaccttgg gcaattcctt cctccacaaa ctgtgctctg gatttgttag gatttgcatg 5640

gatgaggatg ggaatgagaa gaggcccggg gacgtctgga ccttgccaga ccagtgccac 5700

accgtgactt gccagccaga tggccagacc ttgctgaaga gtcatcgggt caactgtgac 5760

cgggggctga ggccttcgtg ccctaacagc cagtcccctg ttaaagtgga agagacctgt 5820

ggctgccgct ggacctgccc ctgygtgtgc acaggcagct ccactcggca catcgtgacc 5880

tttgatgggc agaatttcaa gctgactggc agctgttctt atgtcctatt tcaaaacaag 5940

gagcaggacc tggaggtgat tctccataat ggtgcctgca gccctggagc aaggcagggc 6000

tgcatgaaat ccatcgaggt gaagcacagt gccctctccg tcgagstgca cagtgacatg 6060

gaggtgacgg tgaatgggag actggtctct gttccttacg tgggtgggaa catggaagtc 6120

aacgtttatg gtgccatcat gcatgaggtc agattcaatc accttggtca catcttcaca 6180

ttcactccac aaaacaatga gttccaactg cagctcagcc ccaagacttt tgcttcaaag 6240

acgtatggtc tgtgtgggat ctgtgatgag aacggagcca atgacttcat gctgagggat 6300

ggcacagtca ccacagactg gaaaacactt gttcaggaat ggactgtgca gcggccaggg 6360

cagacgtgcc agcccatcct ggaggagcag tgtcttgtcc ccgacagctc ccactgccag 6420

gtcctcctct taccactgtt tgctgaatgc cacaaggtcc tggctccagc cacattctat 6480

gccatctgcc agcaggacag ttgccaccag gagcaagtgt gtgaggtgat cgcctcttat 6540

gcccacctct gtcggaccaa cggggtctgc gttgactgga ggacacctga tttctgtgct 6600

atgtcatgcc caccatctct ggtctacaac cactgtgagc atggctgtcc ccggcactgt 6660

gatggcaacg tgagctcctg tggggaccat ccctccgaag gctgtttctg ccctccagat 6720

aaagtcatgt tggaaggcag ctgtgtccct gaagaggcct gcactcagtg cattggtgag 6780

gatggagtcc agcaccagtt cctggaagcc tgggtcccgg accaccagcc ctgtcagatc 6840

tgcacatgcc tcagcgggcg gaaggtcaac tgcacaacgc agccctgccc cacggccaaa 6900

gctcccacgt gtggcctgtg tgaagtagcc cgcctccgcc agaatgcaga ccagtgctgc 6960

cccgagtatg agtgtgtgtg tgacccagtg agctgtgacc tgcccccagt gcctcactgt 7020

gaacgtggcc tccagcccac actgaccaac cctggcgagt gcagacccaa cttcacctgc 7080

gcctgcagga aggaggagtg caaaagagtg tccccaccct cctgcccccc gcaccgtttg 7140

cccacccttc ggaagaccca gtgctgtgat gagtatgagt gtgcctgcaa ctgtgtcaac 7200

tccacagtga gctgtcccct tgggtacttg gcctcaaccg ccaccaatga ctgtggctgt 7260

accacaacca cctgccttcc cgacaaggtg tgtgtccacc gaagcaccat ctaccctgtg 7320

ggccagttct gggaggaggg ctgcgatgtg tgcacctgca ccgacatgga ggatgccgtg 7380

atgggcctcc gcgtggccca gtgctcccag aagccctgtg aggacagctg tcggtcgggc 7440

ttcacttacg ttctgcatga aggcgagtgc tgtggaaggt gcctgccatc tgcctgtgag 7500

gtggtgactg gctcaccgcg gggggactcc cagtcttcct ggaagagtgt cggctcccag 7560

tgggcctccc cggagaaccc ctgcctcatc aatgagtgtg tccgagtgaa ggaggaggtc 7620

tttatacaac aaaggaacgt ctcctgcccc cagctggagg tccctgtctg cccctcgggc 7680

tttcagctga gctgtaagac ctcagcgtgc tgcccaagct gtcgctgtga gcgcatggag 7740

gcctgcatgc tcaatggcac tgtcattggg cccgggaaga ctgtgatgat cgatgtgtgc 7800

acgacctgcc gctgcatggt gcaggtgggg gtcatctctg gattcaagct ggagtgcagg 7860

aagaccacct gcaacccctg ccccctgggt tacaaggaag aaaataacac aggtgaatgt 7920

tgtgggagat gtttgcctac ggcttgcacc attcagctaa gaggaggaca gatcatgaca 7980

ctgaagcgtg atgagacgct ccaggatggc tgtgatactc acttctgcaa ggtcaatgag 8040

agaggagagt acttctggga gaagagggtc acaggctgcc caccctttga tgaacacaag 8100

tgtcttgctg agggaggtaa aattatgaaa attccaggca cctgctgtga cacatgtgag 8160

gagcctgagt gcaacgacat cactgccagg ctgcagtatg tcaaggtggg aagctgtaag 8220

tctgaagtag aggtggatat ccactactgc cagggcaaat gtgccagcaa agccatgtac 8280

tccattgaca tcaacgatgt gcaggaccag tgctcctgct gctctccgac acggacggag 8340

cccatgcagg tggccctgca ctgcaccaat ggctctgttg tgtaccatga ggttctcaat 8400

gccatggagt gcaaatgctc ccccaggaag tgcagcaagt ga 8442

<210> 21

<211> 2813

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой_признак

<222> (2016)..(2016)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе аминокислоту

<400> 21

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Cys Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Cys Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Gly Gly Leu Val Val Pro Pro Thr

1235 1240 1245

Asp Ala Pro Val Ser Pro Thr Thr Leu Tyr Val Glu Asp Ile Ser

1250 1255 1260

Glu Pro Pro Leu His Asp Phe Tyr Cys Ser Arg Leu Leu Asp Leu

1265 1270 1275

Val Phe Leu Leu Asp Gly Ser Ser Arg Leu Ser Glu Ala Glu Phe

1280 1285 1290

Glu Val Leu Lys Ala Phe Val Val Asp Met Met Glu Arg Leu Arg

1295 1300 1305

Ile Ser Gln Lys Trp Val Arg Val Ala Val Val Glu Tyr His Asp

1310 1315 1320

Gly Ser His Ala Tyr Ile Gly Leu Lys Asp Arg Lys Arg Pro Ser

1325 1330 1335

Glu Leu Arg Arg Ile Ala Ser Gln Val Lys Tyr Ala Gly Ser Gln

1340 1345 1350

Val Ala Ser Thr Ser Glu Val Leu Lys Tyr Thr Leu Phe Gln Ile

1355 1360 1365

Phe Ser Lys Ile Asp Arg Pro Glu Ala Ser Arg Ile Ala Leu Leu

1370 1375 1380

Leu Met Ala Ser Gln Glu Pro Gln Arg Met Ser Arg Asn Phe Val

1385 1390 1395

Arg Tyr Val Gln Gly Leu Lys Lys Lys Lys Val Ile Val Ile Pro

1400 1405 1410

Val Gly Ile Gly Pro His Ala Asn Leu Lys Gln Ile Arg Leu Ile

1415 1420 1425

Glu Lys Gln Ala Pro Glu Asn Lys Ala Phe Val Leu Ser Ser Val

1430 1435 1440

Asp Glu Leu Glu Gln Gln Arg Asp Glu Ile Val Ser Tyr Leu Cys

1445 1450 1455

Asp Leu Ala Pro Glu Ala Pro Pro Pro Thr Leu Pro Pro Asp Met

1460 1465 1470

Ala Gln Val Thr Val Gly Pro Gly Leu Leu Gly Val Ser Thr Leu

1475 1480 1485

Gly Pro Lys Arg Asn Ser Met Val Leu Asp Val Ala Phe Val Leu

1490 1495 1500

Glu Gly Ser Asp Lys Ile Gly Glu Ala Asp Phe Asn Arg Ser Lys

1505 1510 1515

Glu Phe Met Glu Glu Val Ile Gln Arg Met Asp Val Gly Gln Asp

1520 1525 1530

Ser Ile His Val Thr Val Leu Gln Tyr Ser Tyr Met Val Thr Val

1535 1540 1545

Glu Tyr Pro Phe Ser Glu Ala Gln Ser Lys Gly Asp Ile Leu Gln

1550 1555 1560

Arg Val Arg Glu Ile Arg Tyr Gln Gly Gly Asn Arg Thr Asn Thr

1565 1570 1575

Gly Leu Ala Leu Arg Tyr Leu Ser Asp His Ser Phe Leu Val Ser

1580 1585 1590

Gln Gly Asp Arg Glu Gln Ala Pro Asn Leu Val Tyr Met Val Thr

1595 1600 1605

Gly Asn Pro Ala Ser Asp Glu Ile Lys Arg Leu Pro Gly Asp Ile

1610 1615 1620

Gln Val Val Pro Ile Gly Val Gly Pro Asn Ala Asn Val Gln Glu

1625 1630 1635

Leu Glu Arg Ile Gly Trp Pro Asn Ala Pro Ile Leu Ile Gln Asp

1640 1645 1650

Phe Glu Thr Leu Pro Arg Glu Ala Pro Asp Leu Val Leu Gln Arg

1655 1660 1665

Cys Cys Ser Gly Glu Gly Leu Gln Ile Pro Thr Leu Ser Pro Ala

1670 1675 1680

Pro Asp Cys Ser Gln Pro Leu Asp Val Ile Leu Leu Leu Asp Gly

1685 1690 1695

Ser Ser Ser Phe Pro Ala Ser Tyr Phe Asp Glu Met Lys Ser Phe

1700 1705 1710

Ala Lys Ala Phe Ile Ser Lys Ala Asn Ile Gly Pro Arg Leu Thr

1715 1720 1725

Gln Val Ser Val Leu Gln Tyr Gly Ser Ile Thr Thr Ile Asp Val

1730 1735 1740

Pro Trp Asn Val Val Pro Glu Lys Ala His Leu Leu Ser Leu Val

1745 1750 1755

Asp Val Met Gln Arg Glu Gly Gly Pro Ser Gln Ile Gly Asp Ala

1760 1765 1770

Leu Gly Phe Ala Val Arg Tyr Leu Thr Ser Glu Met His Gly Ala

1775 1780 1785

Arg Pro Gly Ala Ser Lys Ala Val Val Ile Leu Val Thr Asp Val

1790 1795 1800

Ser Val Asp Ser Val Asp Ala Ala Ala Asp Ala Ala Arg Ser Asn

1805 1810 1815

Arg Val Thr Val Phe Pro Ile Gly Ile Gly Asp Arg Tyr Asp Ala

1820 1825 1830

Ala Gln Leu Arg Ile Leu Ala Gly Pro Ala Gly Asp Ser Asn Val

1835 1840 1845

Val Lys Leu Gln Arg Ile Glu Asp Leu Pro Thr Met Val Thr Leu

1850 1855 1860

Gly Asn Ser Phe Leu His Lys Leu Cys Ser Gly Phe Val Arg Ile

1865 1870 1875

Cys Met Asp Glu Asp Gly Asn Glu Lys Arg Pro Gly Asp Val Trp

1880 1885 1890

Thr Leu Pro Asp Gln Cys His Thr Val Thr Cys Gln Pro Asp Gly

1895 1900 1905

Gln Thr Leu Leu Lys Ser His Arg Val Asn Cys Asp Arg Gly Leu

1910 1915 1920

Arg Pro Ser Cys Pro Asn Ser Gln Ser Pro Val Lys Val Glu Glu

1925 1930 1935

Thr Cys Gly Cys Arg Trp Thr Cys Pro Cys Val Cys Thr Gly Ser

1940 1945 1950

Ser Thr Arg His Ile Val Thr Phe Asp Gly Gln Asn Phe Lys Leu

1955 1960 1965

Thr Gly Ser Cys Ser Tyr Val Leu Phe Gln Asn Lys Glu Gln Asp

1970 1975 1980

Leu Glu Val Ile Leu His Asn Gly Ala Cys Ser Pro Gly Ala Arg

1985 1990 1995

Gln Gly Cys Met Lys Ser Ile Glu Val Lys His Ser Ala Leu Ser

2000 2005 2010

Val Glu Xaa His Ser Asp Met Glu Val Thr Val Asn Gly Arg Leu

2015 2020 2025

Val Ser Val Pro Tyr Val Gly Gly Asn Met Glu Val Asn Val Tyr

2030 2035 2040

Gly Ala Ile Met His Glu Val Arg Phe Asn His Leu Gly His Ile

2045 2050 2055

Phe Thr Phe Thr Pro Gln Asn Asn Glu Phe Gln Leu Gln Leu Ser

2060 2065 2070

Pro Lys Thr Phe Ala Ser Lys Thr Tyr Gly Leu Cys Gly Ile Cys

2075 2080 2085

Asp Glu Asn Gly Ala Asn Asp Phe Met Leu Arg Asp Gly Thr Val

2090 2095 2100

Thr Thr Asp Trp Lys Thr Leu Val Gln Glu Trp Thr Val Gln Arg

2105 2110 2115

Pro Gly Gln Thr Cys Gln Pro Ile Leu Glu Glu Gln Cys Leu Val

2120 2125 2130

Pro Asp Ser Ser His Cys Gln Val Leu Leu Leu Pro Leu Phe Ala

2135 2140 2145

Glu Cys His Lys Val Leu Ala Pro Ala Thr Phe Tyr Ala Ile Cys

2150 2155 2160

Gln Gln Asp Ser Cys His Gln Glu Gln Val Cys Glu Val Ile Ala

2165 2170 2175

Ser Tyr Ala His Leu Cys Arg Thr Asn Gly Val Cys Val Asp Trp

2180 2185 2190

Arg Thr Pro Asp Phe Cys Ala Met Ser Cys Pro Pro Ser Leu Val

2195 2200 2205

Tyr Asn His Cys Glu His Gly Cys Pro Arg His Cys Asp Gly Asn

2210 2215 2220

Val Ser Ser Cys Gly Asp His Pro Ser Glu Gly Cys Phe Cys Pro

2225 2230 2235

Pro Asp Lys Val Met Leu Glu Gly Ser Cys Val Pro Glu Glu Ala

2240 2245 2250

Cys Thr Gln Cys Ile Gly Glu Asp Gly Val Gln His Gln Phe Leu

2255 2260 2265

Glu Ala Trp Val Pro Asp His Gln Pro Cys Gln Ile Cys Thr Cys

2270 2275 2280

Leu Ser Gly Arg Lys Val Asn Cys Thr Thr Gln Pro Cys Pro Thr

2285 2290 2295

Ala Lys Ala Pro Thr Cys Gly Leu Cys Glu Val Ala Arg Leu Arg

2300 2305 2310

Gln Asn Ala Asp Gln Cys Cys Pro Glu Tyr Glu Cys Val Cys Asp

2315 2320 2325

Pro Val Ser Cys Asp Leu Pro Pro Val Pro His Cys Glu Arg Gly

2330 2335 2340

Leu Gln Pro Thr Leu Thr Asn Pro Gly Glu Cys Arg Pro Asn Phe

2345 2350 2355

Thr Cys Ala Cys Arg Lys Glu Glu Cys Lys Arg Val Ser Pro Pro

2360 2365 2370

Ser Cys Pro Pro His Arg Leu Pro Thr Leu Arg Lys Thr Gln Cys

2375 2380 2385

Cys Asp Glu Tyr Glu Cys Ala Cys Asn Cys Val Asn Ser Thr Val

2390 2395 2400

Ser Cys Pro Leu Gly Tyr Leu Ala Ser Thr Ala Thr Asn Asp Cys

2405 2410 2415

Gly Cys Thr Thr Thr Thr Cys Leu Pro Asp Lys Val Cys Val His

2420 2425 2430

Arg Ser Thr Ile Tyr Pro Val Gly Gln Phe Trp Glu Glu Gly Cys

2435 2440 2445

Asp Val Cys Thr Cys Thr Asp Met Glu Asp Ala Val Met Gly Leu

2450 2455 2460

Arg Val Ala Gln Cys Ser Gln Lys Pro Cys Glu Asp Ser Cys Arg

2465 2470 2475

Ser Gly Phe Thr Tyr Val Leu His Glu Gly Glu Cys Cys Gly Arg

2480 2485 2490

Cys Leu Pro Ser Ala Cys Glu Val Val Thr Gly Ser Pro Arg Gly

2495 2500 2505

Asp Ser Gln Ser Ser Trp Lys Ser Val Gly Ser Gln Trp Ala Ser

2510 2515 2520

Pro Glu Asn Pro Cys Leu Ile Asn Glu Cys Val Arg Val Lys Glu

2525 2530 2535

Glu Val Phe Ile Gln Gln Arg Asn Val Ser Cys Pro Gln Leu Glu

2540 2545 2550

Val Pro Val Cys Pro Ser Gly Phe Gln Leu Ser Cys Lys Thr Ser

2555 2560 2565

Ala Cys Cys Pro Ser Cys Arg Cys Glu Arg Met Glu Ala Cys Met

2570 2575 2580

Leu Asn Gly Thr Val Ile Gly Pro Gly Lys Thr Val Met Ile Asp

2585 2590 2595

Val Cys Thr Thr Cys Arg Cys Met Val Gln Val Gly Val Ile Ser

2600 2605 2610

Gly Phe Lys Leu Glu Cys Arg Lys Thr Thr Cys Asn Pro Cys Pro

2615 2620 2625

Leu Gly Tyr Lys Glu Glu Asn Asn Thr Gly Glu Cys Cys Gly Arg

2630 2635 2640

Cys Leu Pro Thr Ala Cys Thr Ile Gln Leu Arg Gly Gly Gln Ile

2645 2650 2655

Met Thr Leu Lys Arg Asp Glu Thr Leu Gln Asp Gly Cys Asp Thr

2660 2665 2670

His Phe Cys Lys Val Asn Glu Arg Gly Glu Tyr Phe Trp Glu Lys

2675 2680 2685

Arg Val Thr Gly Cys Pro Pro Phe Asp Glu His Lys Cys Leu Ala

2690 2695 2700

Glu Gly Gly Lys Ile Met Lys Ile Pro Gly Thr Cys Cys Asp Thr

2705 2710 2715

Cys Glu Glu Pro Glu Cys Asn Asp Ile Thr Ala Arg Leu Gln Tyr

2720 2725 2730

Val Lys Val Gly Ser Cys Lys Ser Glu Val Glu Val Asp Ile His

2735 2740 2745

Tyr Cys Gln Gly Lys Cys Ala Ser Lys Ala Met Tyr Ser Ile Asp

2750 2755 2760

Ile Asn Asp Val Gln Asp Gln Cys Ser Cys Cys Ser Pro Thr Arg

2765 2770 2775

Thr Glu Pro Met Gln Val Ala Leu His Cys Thr Asn Gly Ser Val

2780 2785 2790

Val Tyr His Glu Val Leu Asn Ala Met Glu Cys Lys Cys Ser Pro

2795 2800 2805

Arg Lys Cys Ser Lys

2810

<210> 22

<211> 45

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF059A

<400> 22

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr

1 5 10 15

Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn

20 25 30

Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Asp Lys Thr His

35 40 45

<210> 23

<211> 54

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF073

<400> 23

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly

1 5 10 15

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

20 25 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gly Ser

35 40 45

Gly Gly Asp Lys Thr His

50

<210> 24

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AD XTEN

<400> 24

Gly Glu Ser Pro Gly Gly Ser Ser Gly Ser Glu Ser

1 5 10

<210> 25

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AD XTEN

<400> 25

Gly Ser Glu Gly Ser Ser Gly Pro Gly Glu Ser Ser

1 5 10

<210> 26

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AD XTEN

<400> 26

Gly Ser Ser Glu Ser Gly Ser Ser Glu Gly Gly Pro

1 5 10

<210> 27

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AD XTEN

<400> 27

Gly Ser Gly Gly Glu Pro Ser Glu Ser Gly Ser Ser

1 5 10

<210> 28

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AE, AM XTEN

<400> 28

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

1 5 10

<210> 29

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AE, AM, AQ XTEN

<400> 29

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

1 5 10

<210> 30

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AE, AM, AQ XTEN

<400> 30

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1 5 10

<210> 31

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AE, AM, AQ XTEN

<400> 31

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

1 5 10

<210> 32

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AF, AM XTEN

<400> 32

Gly Ser Thr Ser Glu Ser Pro Ser Gly Thr Ala Pro

1 5 10

<210> 33

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AF, AM XTEN

<400> 33

Gly Thr Ser Thr Pro Glu Ser Gly Ser Ala Ser Pro

1 5 10

<210> 34

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> AF, AM

<400> 34

Gly Thr Ser Pro Ser Gly Glu Ser Ser Thr Ala Pro

1 5 10

<210> 35

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AF, AM XTEN

<400> 35

Gly Ser Thr Ser Ser Thr Ala Glu Ser Pro Gly Pro

1 5 10

<210> 36

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AG, AM XTEN

<400> 36

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

1 5 10

<210> 37

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AG, AM XTEN

<400> 37

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro

1 5 10

<210> 38

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AG, AM XTEN

<400> 38

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

1 5 10

<210> 39

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейства мотивов AG, AM XTEN

<400> 39

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

1 5 10

<210> 40

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AQ XTEN

<400> 40

Gly Glu Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Ser Glu

1 5 10

<210> 41

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AQ XTEN

<400> 41

Gly Thr Gly Glu Pro Ser Ser Thr Pro Ala Ser Glu

1 5 10

<210> 42

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AQ XTEN

<400> 42

Gly Ser Gly Pro Ser Thr Glu Ser Ala Pro Thr Glu

1 5 10

<210> 43

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AQ XTEN

<400> 43

Gly Ser Glu Thr Pro Ser Gly Pro Ser Glu Thr Ala

1 5 10

<210> 44

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AQ XTEN

<400> 44

Gly Pro Ser Glu Thr Ser Thr Ser Glu Pro Gly Ala

1 5 10

<210> 45

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов AQ XTEN

<400> 45

Gly Ser Pro Ser Glu Pro Thr Glu Gly Thr Ser Ala

1 5 10

<210> 46

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BC XTEN

<400> 46

Gly Ser Gly Ala Ser Glu Pro Thr Ser Thr Glu Pro

1 5 10

<210> 47

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BC XTEN

<400> 47

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Thr Glu Pro Ser

1 5 10

<210> 48

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BC XTEN

<400> 48

Gly Thr Ser Glu Pro Ser Thr Ser Glu Pro Gly Ala

1 5 10

<210> 49

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BC XTEN

<400> 49

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Pro Gly Ser Ala

1 5 10

<210> 50

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BD XTEN

<400> 50

Gly Ser Thr Ala Gly Ser Glu Thr Ser Thr Glu Ala

1 5 10

<210> 51

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BD XTEN

<400> 51

Gly Ser Glu Thr Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Ala

1 5 10

<210> 52

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BD XTEN

<400> 52

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Ser Glu Ser Gly Ala

1 5 10

<210> 53

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Семейство мотивов BD XTEN

<400> 53

Gly Thr Ser Thr Glu Ala Ser Glu Gly Ser Ala Ser

1 5 10

<210> 54

<211> 288

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE288_2

<400> 54

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu

1 5 10 15

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

20 25 30

Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

35 40 45

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

50 55 60

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

65 70 75 80

Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

85 90 95

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

100 105 110

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

115 120 125

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

130 135 140

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

145 150 155 160

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

165 170 175

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

180 185 190

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

195 200 205

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

210 215 220

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

225 230 235 240

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

245 250 255

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

260 265 270

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

275 280 285

<210> 55

<211> 143

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE144_2A

<400> 55

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser

1 5 10 15

Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

20 25 30

Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr

35 40 45

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

50 55 60

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

65 70 75 80

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

85 90 95

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

100 105 110

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

115 120 125

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

130 135 140

<210> 56

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE144_3B

<400> 56

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser

1 5 10 15

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

20 25 30

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

35 40 45

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu

50 55 60

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly

65 70 75 80

Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

85 90 95

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu

100 105 110

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

115 120 125

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

130 135 140

<210> 57

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE144_4A

<400> 57

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

1 5 10 15

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

20 25 30

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

35 40 45

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

50 55 60

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

65 70 75 80

Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

85 90 95

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

100 105 110

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

130 135 140

<210> 58

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE144_5A

<400> 58

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

1 5 10 15

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

20 25 30

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

35 40 45

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

50 55 60

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

65 70 75 80

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

85 90 95

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser

100 105 110

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

115 120 125

Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

130 135 140

<210> 59

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE144_6B

<400> 59

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser

1 5 10 15

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

20 25 30

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

35 40 45

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala

50 55 60

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

65 70 75 80

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

85 90 95

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala

100 105 110

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

115 120 125

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

130 135 140

<210> 60

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AG144_A

<400> 60

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

1 5 10 15

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr

20 25 30

Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

35 40 45

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

50 55 60

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

65 70 75 80

Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

85 90 95

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly

100 105 110

Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

115 120 125

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

130 135 140

<210> 61

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AG144_B

<400> 61

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

1 5 10 15

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

20 25 30

Thr Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro

35 40 45

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

50 55 60

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr

65 70 75 80

Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro

85 90 95

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro

100 105 110

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

115 120 125

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

130 135 140

<210> 62

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AG144_C

<400> 62

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro

1 5 10 15

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

20 25 30

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

35 40 45

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly

50 55 60

Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

65 70 75 80

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

85 90 95

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr

100 105 110

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

115 120 125

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

130 135 140

<210> 63

<211> 144

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> AG144_F

<400> 63

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro

1 5 10 15

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

20 25 30

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

35 40 45

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

50 55 60

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

65 70 75 80

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

85 90 95

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

100 105 110

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

115 120 125

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

130 135 140

<210> 64

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сигнальный пептид FVIII

<400> 64

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser

<210> 65

<211> 2332

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Зрелый фактор VIII

<400> 65

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Ser Arg His Pro Ser Thr Arg

740 745 750

Gln Lys Gln Phe Asn Ala Thr Thr Ile Pro Glu Asn Asp Ile Glu Lys

755 760 765

Thr Asp Pro Trp Phe Ala His Arg Thr Pro Met Pro Lys Ile Gln Asn

770 775 780

Val Ser Ser Ser Asp Leu Leu Met Leu Leu Arg Gln Ser Pro Thr Pro

785 790 795 800

His Gly Leu Ser Leu Ser Asp Leu Gln Glu Ala Lys Tyr Glu Thr Phe

805 810 815

Ser Asp Asp Pro Ser Pro Gly Ala Ile Asp Ser Asn Asn Ser Leu Ser

820 825 830

Glu Met Thr His Phe Arg Pro Gln Leu His His Ser Gly Asp Met Val

835 840 845

Phe Thr Pro Glu Ser Gly Leu Gln Leu Arg Leu Asn Glu Lys Leu Gly

850 855 860

Thr Thr Ala Ala Thr Glu Leu Lys Lys Leu Asp Phe Lys Val Ser Ser

865 870 875 880

Thr Ser Asn Asn Leu Ile Ser Thr Ile Pro Ser Asp Asn Leu Ala Ala

885 890 895

Gly Thr Asp Asn Thr Ser Ser Leu Gly Pro Pro Ser Met Pro Val His

900 905 910

Tyr Asp Ser Gln Leu Asp Thr Thr Leu Phe Gly Lys Lys Ser Ser Pro

915 920 925

Leu Thr Glu Ser Gly Gly Pro Leu Ser Leu Ser Glu Glu Asn Asn Asp

930 935 940

Ser Lys Leu Leu Glu Ser Gly Leu Met Asn Ser Gln Glu Ser Ser Trp

945 950 955 960

Gly Lys Asn Val Ser Ser Thr Glu Ser Gly Arg Leu Phe Lys Gly Lys

965 970 975

Arg Ala His Gly Pro Ala Leu Leu Thr Lys Asp Asn Ala Leu Phe Lys

980 985 990

Val Ser Ile Ser Leu Leu Lys Thr Asn Lys Thr Ser Asn Asn Ser Ala

995 1000 1005

Thr Asn Arg Lys Thr His Ile Asp Gly Pro Ser Leu Leu Ile Glu

1010 1015 1020

Asn Ser Pro Ser Val Trp Gln Asn Ile Leu Glu Ser Asp Thr Glu

1025 1030 1035

Phe Lys Lys Val Thr Pro Leu Ile His Asp Arg Met Leu Met Asp

1040 1045 1050

Lys Asn Ala Thr Ala Leu Arg Leu Asn His Met Ser Asn Lys Thr

1055 1060 1065

Thr Ser Ser Lys Asn Met Glu Met Val Gln Gln Lys Lys Glu Gly

1070 1075 1080

Pro Ile Pro Pro Asp Ala Gln Asn Pro Asp Met Ser Phe Phe Lys

1085 1090 1095

Met Leu Phe Leu Pro Glu Ser Ala Arg Trp Ile Gln Arg Thr His

1100 1105 1110

Gly Lys Asn Ser Leu Asn Ser Gly Gln Gly Pro Ser Pro Lys Gln

1115 1120 1125

Leu Val Ser Leu Gly Pro Glu Lys Ser Val Glu Gly Gln Asn Phe

1130 1135 1140

Leu Ser Glu Lys Asn Lys Val Val Val Gly Lys Gly Glu Phe Thr

1145 1150 1155

Lys Asp Val Gly Leu Lys Glu Met Val Phe Pro Ser Ser Arg Asn

1160 1165 1170

Leu Phe Leu Thr Asn Leu Asp Asn Leu His Glu Asn Asn Thr His

1175 1180 1185

Asn Gln Glu Lys Lys Ile Gln Glu Glu Ile Glu Lys Lys Glu Thr

1190 1195 1200

Leu Ile Gln Glu Asn Val Val Leu Pro Gln Ile His Thr Val Thr

1205 1210 1215

Gly Thr Lys Asn Phe Met Lys Asn Leu Phe Leu Leu Ser Thr Arg

1220 1225 1230

Gln Asn Val Glu Gly Ser Tyr Asp Gly Ala Tyr Ala Pro Val Leu

1235 1240 1245

Gln Asp Phe Arg Ser Leu Asn Asp Ser Thr Asn Arg Thr Lys Lys

1250 1255 1260

His Thr Ala His Phe Ser Lys Lys Gly Glu Glu Glu Asn Leu Glu

1265 1270 1275

Gly Leu Gly Asn Gln Thr Lys Gln Ile Val Glu Lys Tyr Ala Cys

1280 1285 1290

Thr Thr Arg Ile Ser Pro Asn Thr Ser Gln Gln Asn Phe Val Thr

1295 1300 1305

Gln Arg Ser Lys Arg Ala Leu Lys Gln Phe Arg Leu Pro Leu Glu

1310 1315 1320

Glu Thr Glu Leu Glu Lys Arg Ile Ile Val Asp Asp Thr Ser Thr

1325 1330 1335

Gln Trp Ser Lys Asn Met Lys His Leu Thr Pro Ser Thr Leu Thr

1340 1345 1350

Gln Ile Asp Tyr Asn Glu Lys Glu Lys Gly Ala Ile Thr Gln Ser

1355 1360 1365

Pro Leu Ser Asp Cys Leu Thr Arg Ser His Ser Ile Pro Gln Ala

1370 1375 1380

Asn Arg Ser Pro Leu Pro Ile Ala Lys Val Ser Ser Phe Pro Ser

1385 1390 1395

Ile Arg Pro Ile Tyr Leu Thr Arg Val Leu Phe Gln Asp Asn Ser

1400 1405 1410

Ser His Leu Pro Ala Ala Ser Tyr Arg Lys Lys Asp Ser Gly Val

1415 1420 1425

Gln Glu Ser Ser His Phe Leu Gln Gly Ala Lys Lys Asn Asn Leu

1430 1435 1440

Ser Leu Ala Ile Leu Thr Leu Glu Met Thr Gly Asp Gln Arg Glu

1445 1450 1455

Val Gly Ser Leu Gly Thr Ser Ala Thr Asn Ser Val Thr Tyr Lys

1460 1465 1470

Lys Val Glu Asn Thr Val Leu Pro Lys Pro Asp Leu Pro Lys Thr

1475 1480 1485

Ser Gly Lys Val Glu Leu Leu Pro Lys Val His Ile Tyr Gln Lys

1490 1495 1500

Asp Leu Phe Pro Thr Glu Thr Ser Asn Gly Ser Pro Gly His Leu

1505 1510 1515

Asp Leu Val Glu Gly Ser Leu Leu Gln Gly Thr Glu Gly Ala Ile

1520 1525 1530

Lys Trp Asn Glu Ala Asn Arg Pro Gly Lys Val Pro Phe Leu Arg

1535 1540 1545

Val Ala Thr Glu Ser Ser Ala Lys Thr Pro Ser Lys Leu Leu Asp

1550 1555 1560

Pro Leu Ala Trp Asp Asn His Tyr Gly Thr Gln Ile Pro Lys Glu

1565 1570 1575

Glu Trp Lys Ser Gln Glu Lys Ser Pro Glu Lys Thr Ala Phe Lys

1580 1585 1590

Lys Lys Asp Thr Ile Leu Ser Leu Asn Ala Cys Glu Ser Asn His

1595 1600 1605

Ala Ile Ala Ala Ile Asn Glu Gly Gln Asn Lys Pro Glu Ile Glu

1610 1615 1620

Val Thr Trp Ala Lys Gln Gly Arg Thr Glu Arg Leu Cys Ser Gln

1625 1630 1635

Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr

1640 1645 1650

Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile

1655 1660 1665

Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp

1670 1675 1680

Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr

1685 1690 1695

Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser

1700 1705 1710

Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro

1715 1720 1725

Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe

1730 1735 1740

Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu

1745 1750 1755

Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val

1760 1765 1770

Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser

1775 1780 1785

Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg

1790 1795 1800

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys

1805 1810 1815

Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys

1820 1825 1830

Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His

1835 1840 1845

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu

1850 1855 1860

Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu

1865 1870 1875

Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu

1880 1885 1890

Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu

1895 1900 1905

Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly

1910 1915 1920

Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln

1925 1930 1935

Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile

1940 1945 1950

His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys

1955 1960 1965

Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe

1970 1975 1980

Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val

1985 1990 1995

Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu

2000 2005 2010

Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala

2015 2020 2025

Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr

2030 2035 2040

Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser

2045 2050 2055

Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val

2060 2065 2070

Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly

2075 2080 2085

Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile

2090 2095 2100

Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn

2105 2110 2115

Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser

2120 2125 2130

Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr

2135 2140 2145

Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg

2150 2155 2160

Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu

2165 2170 2175

Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser

2180 2185 2190

Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala

2195 2200 2205

Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val

2210 2215 2220

Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met

2225 2230 2235

Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr

2240 2245 2250

Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly

2255 2260 2265

His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe

2270 2275 2280

Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp

2285 2290 2295

Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp

2300 2305 2310

Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala

2315 2320 2325

Gln Asp Leu Tyr

2330

<210> 66

<211> 7053

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Полноразмерный FVIII

<400> 66

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcgt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttctcccaga attcaagaca ccctagcact aggcaaaagc aatttaatgc caccacaatt 2340

ccagaaaatg acatagagaa gactgaccct tggtttgcac acagaacacc tatgcctaaa 2400

atacaaaatg tctcctctag tgatttgttg atgctcttgc gacagagtcc tactccacat 2460

gggctatcct tatctgatct ccaagaagcc aaatatgaga ctttttctga tgatccatca 2520

cctggagcaa tagacagtaa taacagcctg tctgaaatga cacacttcag gccacagctc 2580

catcacagtg gggacatggt atttacccct gagtcaggcc tccaattaag attaaatgag 2640

aaactgggga caactgcagc aacagagttg aagaaacttg atttcaaagt ttctagtaca 2700

tcaaataatc tgatttcaac aattccatca gacaatttgg cagcaggtac tgataataca 2760

agttccttag gacccccaag tatgccagtt cattatgata gtcaattaga taccactcta 2820

tttggcaaaa agtcatctcc ccttactgag tctggtggac ctctgagctt gagtgaagaa 2880

aataatgatt caaagttgtt agaatcaggt ttaatgaata gccaagaaag ttcatgggga 2940

aaaaatgtat cgtcaacaga gagtggtagg ttatttaaag ggaaaagagc tcatggacct 3000

gctttgttga ctaaagataa tgccttattc aaagttagca tctctttgtt aaagacaaac 3060

aaaacttcca ataattcagc aactaataga aagactcaca ttgatggccc atcattatta 3120

attgagaata gtccatcagt ctggcaaaat atattagaaa gtgacactga gtttaaaaaa 3180

gtgacacctt tgattcatga cagaatgctt atggacaaaa atgctacagc tttgaggcta 3240

aatcatatgt caaataaaac tacttcatca aaaaacatgg aaatggtcca acagaaaaaa 3300

gagggcccca ttccaccaga tgcacaaaat ccagatatgt cgttctttaa gatgctattc 3360

ttgccagaat cagcaaggtg gatacaaagg actcatggaa agaactctct gaactctggg 3420

caaggcccca gtccaaagca attagtatcc ttaggaccag aaaaatctgt ggaaggtcag 3480

aatttcttgt ctgagaaaaa caaagtggta gtaggaaagg gtgaatttac aaaggacgta 3540

ggactcaaag agatggtttt tccaagcagc agaaacctat ttcttactaa cttggataat 3600

ttacatgaaa ataatacaca caatcaagaa aaaaaaattc aggaagaaat agaaaagaag 3660

gaaacattaa tccaagagaa tgtagttttg cctcagatac atacagtgac tggcactaag 3720

aatttcatga agaacctttt cttactgagc actaggcaaa atgtagaagg ttcatatgac 3780

ggggcatatg ctccagtact tcaagatttt aggtcattaa atgattcaac aaatagaaca 3840

aagaaacaca cagctcattt ctcaaaaaaa ggggaggaag aaaacttgga aggcttggga 3900

aatcaaacca agcaaattgt agagaaatat gcatgcacca caaggatatc tcctaataca 3960

agccagcaga attttgtcac gcaacgtagt aagagagctt tgaaacaatt cagactccca 4020

ctagaagaaa cagaacttga aaaaaggata attgtggatg acacctcaac ccagtggtcc 4080

aaaaacatga aacatttgac cccgagcacc ctcacacaga tagactacaa tgagaaggag 4140

aaaggggcca ttactcagtc tcccttatca gattgcctta cgaggagtca tagcatccct 4200

caagcaaata gatctccatt acccattgca aaggtatcat catttccatc tattagacct 4260

atatatctga ccagggtcct attccaagac aactcttctc atcttccagc agcatcttat 4320

agaaagaaag attctggggt ccaagaaagc agtcatttct tacaaggagc caaaaaaaat 4380

aacctttctt tagccattct aaccttggag atgactggtg atcaaagaga ggttggctcc 4440

ctggggacaa gtgccacaaa ttcagtcaca tacaagaaag ttgagaacac tgttctcccg 4500

aaaccagact tgcccaaaac atctggcaaa gttgaattgc ttccaaaagt tcacatttat 4560

cagaaggacc tattccctac ggaaactagc aatgggtctc ctggccatct ggatctcgtg 4620

gaagggagcc ttcttcaggg aacagaggga gcgattaagt ggaatgaagc aaacagacct 4680

ggaaaagttc cctttctgag agtagcaaca gaaagctctg caaagactcc ctccaagcta 4740

ttggatcctc ttgcttggga taaccactat ggtactcaga taccaaaaga agagtggaaa 4800

tcccaagaga agtcaccaga aaaaacagct tttaagaaaa aggataccat tttgtccctg 4860

aacgcttgtg aaagcaatca tgcaatagca gcaataaatg agggacaaaa taagcccgaa 4920

atagaagtca cctgggcaaa gcaaggtagg actgaaaggc tgtgctctca aaacccacca 4980

gtcttgaaac gccatcaacg ggaaataact cgtactactc ttcagtcaga tcaagaggaa 5040

attgactatg atgataccat atcagttgaa atgaagaagg aagattttga catttatgat 5100

gaggatgaaa atcagagccc ccgcagcttt caaaagaaaa cacgacacta ttttattgct 5160

gcagtggaga ggctctggga ttatgggatg agtagctccc cacatgttct aagaaacagg 5220

gctcagagtg gcagtgtccc tcagttcaag aaagttgttt tccaggaatt tactgatggc 5280

tcctttactc agcccttata ccgtggagaa ctaaatgaac atttgggact cctggggcca 5340

tatataagag cagaagttga agataatatc atggtaactt tcagaaatca ggcctctcgt 5400

ccctattcct tctattctag ccttatttct tatgaggaag atcagaggca aggagcagaa 5460

cctagaaaaa actttgtcaa gcctaatgaa accaaaactt acttttggaa agtgcaacat 5520

catatggcac ccactaaaga tgagtttgac tgcaaagcct gggcttattt ctctgatgtt 5580

gacctggaaa aagatgtgca ctcaggcctg attggacccc ttctggtctg ccacactaac 5640

acactgaacc ctgctcatgg gagacaagtg acagtacagg aatttgctct gtttttcacc 5700

atctttgatg agaccaaaag ctggtacttc actgaaaata tggaaagaaa ctgcagggct 5760

ccctgcaata tccagatgga agatcccact tttaaagaga attatcgctt ccatgcaatc 5820

aatggctaca taatggatac actacctggc ttagtaatgg ctcaggatca aaggattcga 5880

tggtatctgc tcagcatggg cagcaatgaa aacatccatt ctattcattt cagtggacat 5940

gtgttcactg tacgaaaaaa agaggagtat aaaatggcac tgtacaatct ctatccaggt 6000

gtttttgaga cagtggaaat gttaccatcc aaagctggaa tttggcgggt ggaatgcctt 6060

attggcgagc atctacatgc tgggatgagc acactttttc tggtgtacag caataagtgt 6120

cagactcccc tgggaatggc ttctggacac attagagatt ttcagattac agcttcagga 6180

caatatggac agtgggcccc aaagctggcc agacttcatt attccggatc aatcaatgcc 6240

tggagcacca aggagccctt ttcttggatc aaggtggatc tgttggcacc aatgattatt 6300

cacggcatca agacccaggg tgcccgtcag aagttctcca gcctctacat ctctcagttt 6360

atcatcatgt atagtcttga tgggaagaag tggcagactt atcgaggaaa ttccactgga 6420

accttaatgg tcttctttgg caatgtggat tcatctggga taaaacacaa tatttttaac 6480

cctccaatta ttgctcgata catccgtttg cacccaactc attatagcat tcgcagcact 6540

cttcgcatgg agttgatggg ctgtgattta aatagttgca gcatgccatt gggaatggag 6600

agtaaagcaa tatcagatgc acagattact gcttcatcct actttaccaa tatgtttgcc 6660

acctggtctc cttcaaaagc tcgacttcac ctccaaggga ggagtaatgc ctggagacct 6720

caggtgaata atccaaaaga gtggctgcaa gtggacttcc agaagacaat gaaagtcaca 6780

ggagtaacta ctcagggagt aaaatctctg cttaccagca tgtatgtgaa ggagttcctc 6840

atctccagca gtcaagatgg ccatcagtgg actctctttt ttcagaatgg caaagtaaag 6900

gtttttcagg gaaatcaaga ctccttcaca cctgtggtga actctctaga cccaccgtta 6960

ctgactcgct accttcgaat tcacccccag agttgggtgc accagattgc cctgaggatg 7020

gaggttctgg gctgcgaggc acaggacctc tac 7053

<210> 67

<211> 1438

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII BDD

<400> 67

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His

740 745 750

Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile

755 760 765

Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp

770 775 780

Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

785 790 795 800

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly

805 810 815

Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser

820 825 830

Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser

835 840 845

Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu

850 855 860

Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr

865 870 875 880

Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile

885 890 895

Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe

900 905 910

Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His

915 920 925

Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe

930 935 940

Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro

945 950 955 960

Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln

965 970 975

Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr

980 985 990

Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro

995 1000 1005

Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg

1010 1015 1020

Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu

1025 1030 1035

Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met

1040 1045 1050

Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val

1055 1060 1065

Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn

1070 1075 1080

Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys

1085 1090 1095

Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His

1100 1105 1110

Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln

1115 1120 1125

Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile

1130 1135 1140

Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg

1145 1150 1155

Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro

1160 1165 1170

Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His

1175 1180 1185

Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr

1190 1195 1200

Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp

1205 1210 1215

Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe

1220 1225 1230

Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro

1235 1240 1245

Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser

1250 1255 1260

Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn

1265 1270 1275

Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp

1280 1285 1290

Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr

1295 1300 1305

Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn

1310 1315 1320

Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val

1325 1330 1335

Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly

1340 1345 1350

Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile

1355 1360 1365

Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn

1370 1375 1380

Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro

1385 1390 1395

Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg

1400 1405 1410

Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu

1415 1420 1425

Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr

1430 1435

<210> 68

<211> 1429

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Аминокислотная последовательность фактора VIII с делецией домена B

(делеция всего домена B, за исключением 5 аминокислотных остатков

<400> 68

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu

740 745 750

Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu

755 760 765

Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser

770 775 780

Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val

785 790 795 800

Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg

805 810 815

Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe

820 825 830

Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu

835 840 845

Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val

850 855 860

Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr

865 870 875 880

Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

885 890 895

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr

900 905 910

Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp

915 920 925

Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val

930 935 940

His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu

945 950 955 960

Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe

965 970 975

Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met

980 985 990

Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr

995 1000 1005

Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met

1010 1015 1020

Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg

1025 1030 1035

Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile

1040 1045 1050

His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr

1055 1060 1065

Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val

1070 1075 1080

Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu

1085 1090 1095

Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val

1100 1105 1110

Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His

1115 1120 1125

Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp

1130 1135 1140

Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala

1145 1150 1155

Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu

1160 1165 1170

Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln

1175 1180 1185

Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser

1190 1195 1200

Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly

1205 1210 1215

Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys

1220 1225 1230

His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu

1235 1240 1245

His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu

1250 1255 1260

Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu

1265 1270 1275

Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe

1280 1285 1290

Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His

1295 1300 1305

Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro

1310 1315 1320

Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr

1325 1330 1335

Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr

1340 1345 1350

Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp

1355 1360 1365

Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn

1370 1375 1380

Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu

1385 1390 1395

Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln

1400 1405 1410

Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu

1415 1420 1425

Tyr

<210> 69

<211> 2754

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN-FVIII-161

<400> 69

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu

755 760 765

Lys Arg His Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln

770 775 780

Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu

785 790 795 800

Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe

805 810 815

Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp

820 825 830

Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln

835 840 845

Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

850 855 860

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His

865 870 875 880

Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile

885 890 895

Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser

900 905 910

Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg

915 920 925

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val

930 935 940

Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp

945 950 955 960

Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu

965 970 975

Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His

980 985 990

Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

995 1000 1005

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1010 1015 1020

Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1025 1030 1035

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1040 1045 1050

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1055 1060 1065

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1070 1075 1080

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1085 1090 1095

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1100 1105 1110

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1115 1120 1125

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1130 1135 1140

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1145 1150 1155

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1160 1165 1170

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1175 1180 1185

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1190 1195 1200

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1205 1210 1215

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1220 1225 1230

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1235 1240 1245

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1250 1255 1260

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1265 1270 1275

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1280 1285 1290

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1295 1300 1305

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1310 1315 1320

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1325 1330 1335

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1340 1345 1350

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1355 1360 1365

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1370 1375 1380

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1385 1390 1395

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1400 1405 1410

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1415 1420 1425

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1430 1435 1440

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1445 1450 1455

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1460 1465 1470

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1475 1480 1485

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1490 1495 1500

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1505 1510 1515

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1520 1525 1530

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1535 1540 1545

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

1550 1555 1560

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

1565 1570 1575

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

1580 1585 1590

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

1595 1600 1605

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

1610 1615 1620

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

1625 1630 1635

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

1640 1645 1650

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

1655 1660 1665

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1670 1675 1680

Lys Arg Arg Arg Arg Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

1685 1690 1695

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

1700 1705 1710

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Arg Lys Arg Arg Lys Arg Ser Leu Ser

1715 1720 1725

Cys Arg Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu

1730 1735 1740

Arg Ala Glu Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp

1745 1750 1755

Leu Glu Cys Met Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro

1760 1765 1770

Pro Gly Met Val Arg His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg

1775 1780 1785

Cys Pro Cys Phe His Gln Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr

1790 1795 1800

Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp

1805 1810 1815

Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly

1820 1825 1830

Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly Leu Lys Tyr Leu Phe Pro

1835 1840 1845

Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp Tyr Cys Gly Ser Asn

1850 1855 1860

Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys Gly Cys Ser His

1865 1870 1875

Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu Val Glu Gly

1880 1885 1890

Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys Arg Pro

1895 1900 1905

Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg Tyr

1910 1915 1920

Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

1925 1930 1935

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys

1940 1945 1950

Val Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp

1955 1960 1965

Leu Thr Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe

1970 1975 1980

Gly Asn Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys

1985 1990 1995

Val Pro Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met

2000 2005 2010

Lys Gln Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp

2015 2020 2025

Val Phe Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu

2030 2035 2040

Asp Val Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp

2045 2050 2055

Cys Ala Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys

2060 2065 2070

Ala Gln His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys

2075 2080 2085

Pro Gln Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu

2090 2095 2100

Ala Glu Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr

2105 2110 2115

Cys Gln His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu

2120 2125 2130

Gly Cys His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu

2135 2140 2145

Leu Gln Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val

2150 2155 2160

Ala Gly Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro

2165 2170 2175

Ser Asp Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn

2180 2185 2190

Leu Thr Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Thr Ser Glu

2195 2200 2205

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

2210 2215 2220

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

2225 2230 2235

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

2240 2245 2250

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

2255 2260 2265

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

2270 2275 2280

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

2285 2290 2295

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

2300 2305 2310

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala

2315 2320 2325

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

2330 2335 2340

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

2345 2350 2355

Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

2360 2365 2370

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu

2375 2380 2385

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

2390 2395 2400

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

2405 2410 2415

Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

2420 2425 2430

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

2435 2440 2445

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

2450 2455 2460

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

2465 2470 2475

Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Asp

2480 2485 2490

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly

2495 2500 2505

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg

2510 2515 2520

Gly Ser Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala

2525 2530 2535

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

2540 2545 2550

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

2555 2560 2565

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn

2570 2575 2580

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

2585 2590 2595

Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

2600 2605 2610

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

2615 2620 2625

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

2630 2635 2640

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

2645 2650 2655

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

2660 2665 2670

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

2675 2680 2685

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

2690 2695 2700

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

2705 2710 2715

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

2720 2725 2730

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

2735 2740 2745

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

2750

<210> 70

<211> 1978

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 169

<400> 70

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly

755 760 765

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

770 775 780

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

785 790 795 800

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

805 810 815

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

820 825 830

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

835 840 845

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

850 855 860

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser

865 870 875 880

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

885 890 895

Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

900 905 910

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser

915 920 925

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

930 935 940

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

945 950 955 960

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala

965 970 975

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

980 985 990

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

995 1000 1005

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

1010 1015 1020

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

1025 1030 1035

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1040 1045 1050

Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

1055 1060 1065

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1070 1075 1080

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile

1085 1090 1095

Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

1100 1105 1110

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

1115 1120 1125

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser

1130 1135 1140

Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

1145 1150 1155

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu

1160 1165 1170

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp

1175 1180 1185

Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser

1190 1195 1200

Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

1205 1210 1215

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr

1220 1225 1230

Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu

1235 1240 1245

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu

1250 1255 1260

Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His

1265 1270 1275

Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln

1280 1285 1290

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp

1295 1300 1305

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn

1310 1315 1320

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His

1325 1330 1335

Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met

1340 1345 1350

Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser

1355 1360 1365

Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr

1370 1375 1380

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr

1385 1390 1395

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly

1400 1405 1410

Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly

1415 1420 1425

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro

1430 1435 1440

Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala

1445 1450 1455

Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His

1460 1465 1470

Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser

1475 1480 1485

Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile

1490 1495 1500

Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser

1505 1510 1515

Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr

1520 1525 1530

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn

1535 1540 1545

Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

1550 1555 1560

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg

1565 1570 1575

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys

1580 1585 1590

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln

1595 1600 1605

Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser

1610 1615 1620

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp

1625 1630 1635

Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe

1640 1645 1650

Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys

1655 1660 1665

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser

1670 1675 1680

Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys

1685 1690 1695

Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val

1700 1705 1710

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His

1715 1720 1725

Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu

1730 1735 1740

Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

1745 1750 1755

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

1760 1765 1770

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

1775 1780 1785

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

1790 1795 1800

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

1805 1810 1815

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

1820 1825 1830

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

1835 1840 1845

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

1850 1855 1860

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

1865 1870 1875

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln

1880 1885 1890

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

1895 1900 1905

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

1910 1915 1920

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

1925 1930 1935

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

1940 1945 1950

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

1955 1960 1965

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1970 1975

<210> 71

<211> 2242

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN-FVIII-170

<400> 71

Ser Leu Ser Cys Arg Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp

1 5 10 15

Asn Leu Arg Ala Glu Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr

20 25 30

Asp Leu Glu Cys Met Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro

35 40 45

Pro Gly Met Val Arg His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys

50 55 60

Pro Cys Phe His Gln Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys

65 70 75 80

Ile Gly Cys Asn Thr Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr

85 90 95

Asp His Val Cys Asp Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr

100 105 110

Leu Thr Phe Asp Gly Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr

115 120 125

Val Leu Val Gln Asp Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile

130 135 140

Leu Val Gly Asn Lys Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys

145 150 155 160

Arg Val Thr Ile Leu Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly

165 170 175

Glu Val Asn Val Lys Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val

180 185 190

Val Glu Ser Gly Arg Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser

195 200 205

Val Val Trp Asp Arg His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr

210 215 220

Tyr Gln Glu Lys Val Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln

225 230 235 240

Asn Asn Asp Leu Thr Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val

245 250 255

Asp Phe Gly Asn Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg

260 265 270

Lys Val Pro Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met

275 280 285

Lys Gln Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val

290 295 300

Phe Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

305 310 315 320

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala Ala

325 330 335

Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln His Gly

340 345 350

Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln Ser Cys Glu

355 360 365

Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu Trp Arg Tyr Asn

370 375 380

Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln His Pro Glu Pro Leu

385 390 395 400

Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys His Ala His Cys Pro Pro

405 410 415

Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp

420 425 430

Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys

435 440 445

Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys

450 455 460

Asp Val Val Asn Leu Thr Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly

465 470 475 480

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

485 490 495

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

500 505 510

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

515 520 525

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

530 535 540

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

545 550 555 560

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

565 570 575

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser

580 585 590

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

595 600 605

Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

610 615 620

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser

625 630 635 640

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

645 650 655

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

660 665 670

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala

675 680 685

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

690 695 700

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

705 710 715 720

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala

725 730 735

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

740 745 750

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Asp

755 760 765

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

770 775 780

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly Ser

785 790 795 800

Gly Gly Ala Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu

805 810 815

Ser Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala

820 825 830

Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val

835 840 845

Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn

850 855 860

Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile

865 870 875 880

Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala

885 890 895

Ser His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala

900 905 910

Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu

915 920 925

Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val

930 935 940

Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr

945 950 955 960

Ser Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu

965 970 975

Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys

980 985 990

Thr Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu

995 1000 1005

Gly Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp

1010 1015 1020

Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val

1025 1030 1035

Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His

1040 1045 1050

Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro

1055 1060 1065

Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg

1070 1075 1080

Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu

1085 1090 1095

Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe

1100 1105 1110

Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val

1115 1120 1125

Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn

1130 1135 1140

Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu

1145 1150 1155

Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile

1160 1165 1170

Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

1175 1180 1185

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val

1190 1195 1200

Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn

1205 1210 1215

Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

1220 1225 1230

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His

1235 1240 1245

Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp

1250 1255 1260

Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn

1265 1270 1275

Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg

1280 1285 1290

Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu

1295 1300 1305

Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

1310 1315 1320

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser

1325 1330 1335

Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly

1340 1345 1350

Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn

1355 1360 1365

Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe

1370 1375 1380

Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe

1385 1390 1395

Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln

1400 1405 1410

Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

1415 1420 1425

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile

1430 1435 1440

Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser

1445 1450 1455

Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

1460 1465 1470

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn

1475 1480 1485

Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn

1490 1495 1500

Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn

1505 1510 1515

Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr

1520 1525 1530

Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln

1535 1540 1545

Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr

1550 1555 1560

Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile

1565 1570 1575

Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp

1580 1585 1590

Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr

1595 1600 1605

Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser

1610 1615 1620

Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro

1625 1630 1635

Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe

1640 1645 1650

Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu

1655 1660 1665

Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val

1670 1675 1680

Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser

1685 1690 1695

Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg

1700 1705 1710

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys

1715 1720 1725

Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys

1730 1735 1740

Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His

1745 1750 1755

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu

1760 1765 1770

Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu

1775 1780 1785

Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu

1790 1795 1800

Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu

1805 1810 1815

Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly

1820 1825 1830

Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln

1835 1840 1845

Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile

1850 1855 1860

His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys

1865 1870 1875

Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe

1880 1885 1890

Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val

1895 1900 1905

Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu

1910 1915 1920

Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala

1925 1930 1935

Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr

1940 1945 1950

Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser

1955 1960 1965

Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val

1970 1975 1980

Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly

1985 1990 1995

Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile

2000 2005 2010

Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn

2015 2020 2025

Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser

2030 2035 2040

Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr

2045 2050 2055

Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg

2060 2065 2070

Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu

2075 2080 2085

Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser

2090 2095 2100

Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala

2105 2110 2115

Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val

2120 2125 2130

Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met

2135 2140 2145

Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr

2150 2155 2160

Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly

2165 2170 2175

His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe

2180 2185 2190

Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp

2195 2200 2205

Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp

2210 2215 2220

Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala

2225 2230 2235

Gln Asp Leu Tyr

2240

<210> 72

<211> 1959

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN-FVIII-173

<400> 72

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu

740 745 750

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

755 760 765

Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

770 775 780

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu

785 790 795 800

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

805 810 815

Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

820 825 830

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

835 840 845

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

850 855 860

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

865 870 875 880

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr

885 890 895

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

900 905 910

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

915 920 925

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

930 935 940

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

945 950 955 960

Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

965 970 975

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

980 985 990

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

995 1000 1005

Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1010 1015 1020

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser

1025 1030 1035

Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr

1040 1045 1050

Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile

1055 1060 1065

Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp

1070 1075 1080

Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr

1085 1090 1095

Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser

1100 1105 1110

Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro

1115 1120 1125

Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe

1130 1135 1140

Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu

1145 1150 1155

Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val

1160 1165 1170

Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser

1175 1180 1185

Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg

1190 1195 1200

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys

1205 1210 1215

Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys

1220 1225 1230

Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His

1235 1240 1245

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu

1250 1255 1260

Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu

1265 1270 1275

Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu

1280 1285 1290

Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu

1295 1300 1305

Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly

1310 1315 1320

Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln

1325 1330 1335

Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile

1340 1345 1350

His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys

1355 1360 1365

Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe

1370 1375 1380

Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val

1385 1390 1395

Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu

1400 1405 1410

Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala

1415 1420 1425

Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr

1430 1435 1440

Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser

1445 1450 1455

Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val

1460 1465 1470

Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly

1475 1480 1485

Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile

1490 1495 1500

Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn

1505 1510 1515

Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser

1520 1525 1530

Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr

1535 1540 1545

Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg

1550 1555 1560

Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu

1565 1570 1575

Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser

1580 1585 1590

Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala

1595 1600 1605

Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val

1610 1615 1620

Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met

1625 1630 1635

Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr

1640 1645 1650

Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly

1655 1660 1665

His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe

1670 1675 1680

Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp

1685 1690 1695

Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp

1700 1705 1710

Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala

1715 1720 1725

Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala

1730 1735 1740

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

1745 1750 1755

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

1760 1765 1770

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn

1775 1780 1785

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

1790 1795 1800

Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

1805 1810 1815

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

1820 1825 1830

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

1835 1840 1845

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

1850 1855 1860

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

1865 1870 1875

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

1880 1885 1890

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

1895 1900 1905

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

1910 1915 1920

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

1925 1930 1935

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

1940 1945 1950

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1955

<210> 73

<211> 1984

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 195 (двухцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE-144 в

аминокислотных положениях 1656 и 1900)

<400> 73

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu

755 760 765

Lys Arg His Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Gly Ala Pro

770 775 780

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro

785 790 795 800

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

805 810 815

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

820 825 830

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly

835 840 845

Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

850 855 860

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

865 870 875 880

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr

885 890 895

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

900 905 910

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

915 920 925

Ala Ser Ser Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser

930 935 940

Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn

945 950 955 960

Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala

965 970 975

Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val

980 985 990

Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val

995 1000 1005

Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr

1010 1015 1020

Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile

1025 1030 1035

Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln

1040 1045 1050

Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu

1055 1060 1065

Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys

1070 1075 1080

Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met

1085 1090 1095

Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe

1100 1105 1110

Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly

1115 1120 1125

Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly

1130 1135 1140

Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

1145 1150 1155

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1160 1165 1170

Cys Arg Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1175 1180 1185

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

1190 1195 1200

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

1205 1210 1215

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

1220 1225 1230

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala

1235 1240 1245

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

1250 1255 1260

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

1265 1270 1275

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

1280 1285 1290

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1295 1300 1305

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala

1310 1315 1320

Ser Ser Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1325 1330 1335

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1340 1345 1350

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1355 1360 1365

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1370 1375 1380

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1385 1390 1395

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1400 1405 1410

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1415 1420 1425

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1430 1435 1440

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1445 1450 1455

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1460 1465 1470

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1475 1480 1485

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1490 1495 1500

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1505 1510 1515

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1520 1525 1530

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1535 1540 1545

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1550 1555 1560

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1565 1570 1575

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1580 1585 1590

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1595 1600 1605

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1610 1615 1620

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1625 1630 1635

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1640 1645 1650

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1655 1660 1665

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1670 1675 1680

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1685 1690 1695

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1700 1705 1710

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1715 1720 1725

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1730 1735 1740

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1745 1750 1755

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1760 1765 1770

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1775 1780 1785

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1790 1795 1800

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1805 1810 1815

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1820 1825 1830

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1835 1840 1845

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

1850 1855 1860

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

1865 1870 1875

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

1880 1885 1890

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

1895 1900 1905

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

1910 1915 1920

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

1925 1930 1935

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

1940 1945 1950

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

1955 1960 1965

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1970 1975 1980

Lys

<210> 74

<211> 2134

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 196 (двухцепочечный FVIIIFc с тремя XTEN AE-144 в

аминокислотных положениях 26, 1656 и 1900)

<400> 74

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Gly Ala Pro

35 40 45

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro

50 55 60

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

65 70 75 80

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

85 90 95

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

100 105 110

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

115 120 125

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

130 135 140

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

145 150 155 160

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

165 170 175

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

180 185 190

Ala Ser Ser Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro

195 200 205

Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr

210 215 220

Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu

225 230 235 240

Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr

245 250 255

Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val

260 265 270

Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser

275 280 285

Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr

290 295 300

Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro

305 310 315 320

Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp

325 330 335

Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser

340 345 350

Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe

355 360 365

Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser

370 375 380

Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met

385 390 395 400

His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly

405 410 415

Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr

420 425 430

Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg

435 440 445

Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr

450 455 460

Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His

465 470 475 480

Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp

485 490 495

Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala

500 505 510

Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg

515 520 525

Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala

530 535 540

Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu

545 550 555 560

Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr

565 570 575

Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr

580 585 590

Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg

595 600 605

Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly

610 615 620

Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg

625 630 635 640

Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr

645 650 655

Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile

660 665 670

Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

675 680 685

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser

690 695 700

Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu

705 710 715 720

Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met

725 730 735

Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg

740 745 750

Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala

755 760 765

Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His

770 775 780

Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu

785 790 795 800

His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp

805 810 815

Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val

820 825 830

Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe

835 840 845

Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser

850 855 860

Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys

865 870 875 880

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

885 890 895

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

900 905 910

Gln Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr

915 920 925

Thr Leu Gln Gly Ala Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser

930 935 940

Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala

945 950 955 960

Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr

965 970 975

Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr

980 985 990

Gly Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala

995 1000 1005

Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly

1010 1015 1020

Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

1025 1030 1035

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

1040 1045 1050

Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ala

1055 1060 1065

Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Ala Ser Ser Ser Asp

1070 1075 1080

Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys

1085 1090 1095

Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro

1100 1105 1110

Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val

1115 1120 1125

Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu

1130 1135 1140

Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val

1145 1150 1155

Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr

1160 1165 1170

Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile

1175 1180 1185

Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln

1190 1195 1200

Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu

1205 1210 1215

Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys

1220 1225 1230

Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met

1235 1240 1245

Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe

1250 1255 1260

Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly

1265 1270 1275

Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly

1280 1285 1290

Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

1295 1300 1305

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1310 1315 1320

Cys Arg Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1325 1330 1335

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

1340 1345 1350

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

1355 1360 1365

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

1370 1375 1380

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala

1385 1390 1395

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

1400 1405 1410

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

1415 1420 1425

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

1430 1435 1440

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1445 1450 1455

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala

1460 1465 1470

Ser Ser Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1475 1480 1485

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1490 1495 1500

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1505 1510 1515

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1520 1525 1530

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1535 1540 1545

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1550 1555 1560

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1565 1570 1575

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1580 1585 1590

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1595 1600 1605

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1610 1615 1620

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1625 1630 1635

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1640 1645 1650

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1655 1660 1665

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1670 1675 1680

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1685 1690 1695

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1700 1705 1710

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1715 1720 1725

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1730 1735 1740

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1745 1750 1755

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1760 1765 1770

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1775 1780 1785

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1790 1795 1800

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1805 1810 1815

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1820 1825 1830

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1835 1840 1845

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1850 1855 1860

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1865 1870 1875

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1880 1885 1890

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1895 1900 1905

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1910 1915 1920

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1925 1930 1935

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1940 1945 1950

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1955 1960 1965

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1970 1975 1980

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1985 1990 1995

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

2000 2005 2010

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

2015 2020 2025

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

2030 2035 2040

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

2045 2050 2055

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

2060 2065 2070

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

2075 2080 2085

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

2090 2095 2100

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

2105 2110 2115

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

2120 2125 2130

Lys

<210> 75

<211> 1984

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 199 (одноцепочечный FVIIIFc с тремя XTEN AE-144 в

аминокислотных положениях 1656 и 1900)

<400> 75

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu

755 760 765

Lys Arg His Gln Ala Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Gly Ala Pro

770 775 780

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro

785 790 795 800

Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

805 810 815

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

820 825 830

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Thr Pro Gly

835 840 845

Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

850 855 860

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

865 870 875 880

Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr

885 890 895

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

900 905 910

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

915 920 925

Ala Ser Ser Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser

930 935 940

Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn

945 950 955 960

Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala

965 970 975

Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val

980 985 990

Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val

995 1000 1005

Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr

1010 1015 1020

Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile

1025 1030 1035

Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln

1040 1045 1050

Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu

1055 1060 1065

Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys

1070 1075 1080

Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met

1085 1090 1095

Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe

1100 1105 1110

Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly

1115 1120 1125

Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly

1130 1135 1140

Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

1145 1150 1155

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1160 1165 1170

Cys Arg Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1175 1180 1185

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

1190 1195 1200

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

1205 1210 1215

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

1220 1225 1230

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala

1235 1240 1245

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

1250 1255 1260

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

1265 1270 1275

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

1280 1285 1290

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1295 1300 1305

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala

1310 1315 1320

Ser Ser Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1325 1330 1335

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1340 1345 1350

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1355 1360 1365

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1370 1375 1380

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1385 1390 1395

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1400 1405 1410

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1415 1420 1425

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1430 1435 1440

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1445 1450 1455

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1460 1465 1470

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1475 1480 1485

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1490 1495 1500

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1505 1510 1515

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1520 1525 1530

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1535 1540 1545

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1550 1555 1560

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1565 1570 1575

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1580 1585 1590

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1595 1600 1605

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1610 1615 1620

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1625 1630 1635

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1640 1645 1650

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1655 1660 1665

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1670 1675 1680

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1685 1690 1695

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1700 1705 1710

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1715 1720 1725

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1730 1735 1740

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1745 1750 1755

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1760 1765 1770

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1775 1780 1785

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1790 1795 1800

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1805 1810 1815

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1820 1825 1830

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1835 1840 1845

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

1850 1855 1860

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

1865 1870 1875

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

1880 1885 1890

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

1895 1900 1905

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

1910 1915 1920

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

1925 1930 1935

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

1940 1945 1950

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

1955 1960 1965

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1970 1975 1980

Lys

<210> 76

<211> 2134

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 201 (одноцепочечный FVIIIFc с тремя XTEN AE-144 в

аминокислотных положениях 26, 1656 и 1900)

<400> 76

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Gly Ala Pro

35 40 45

Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ser Ser Pro

50 55 60

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

65 70 75 80

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

85 90 95

Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro

100 105 110

Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

115 120 125

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr Gly Pro

130 135 140

Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ser Ser Thr

145 150 155 160

Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala

165 170 175

Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro

180 185 190

Ala Ser Ser Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro

195 200 205

Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr

210 215 220

Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu

225 230 235 240

Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr

245 250 255

Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val

260 265 270

Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser

275 280 285

Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr

290 295 300

Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro

305 310 315 320

Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp

325 330 335

Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser

340 345 350

Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe

355 360 365

Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser

370 375 380

Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met

385 390 395 400

His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly

405 410 415

Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr

420 425 430

Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg

435 440 445

Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr

450 455 460

Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His

465 470 475 480

Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp

485 490 495

Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala

500 505 510

Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg

515 520 525

Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala

530 535 540

Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu

545 550 555 560

Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr

565 570 575

Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr

580 585 590

Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg

595 600 605

Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly

610 615 620

Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg

625 630 635 640

Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr

645 650 655

Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile

660 665 670

Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

675 680 685

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser

690 695 700

Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu

705 710 715 720

Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met

725 730 735

Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg

740 745 750

Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala

755 760 765

Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His

770 775 780

Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu

785 790 795 800

His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp

805 810 815

Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val

820 825 830

Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe

835 840 845

Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser

850 855 860

Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys

865 870 875 880

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

885 890 895

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

900 905 910

Gln Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu Ile Thr Arg Thr

915 920 925

Thr Leu Gln Gly Ala Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser

930 935 940

Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala

945 950 955 960

Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr

965 970 975

Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Pro Ser Ala Ser Thr Gly Thr

980 985 990

Gly Pro Gly Thr Pro Gly Ser Gly Thr Ala Ser Ser Ser Pro Gly Ala

995 1000 1005

Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly

1010 1015 1020

Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Gly Ala Ser Pro Gly Thr Ser Ser

1025 1030 1035

Thr Gly Ser Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser

1040 1045 1050

Pro Gly Ser Ser Thr Pro Ser Gly Ala Thr Gly Ser Pro Gly Ala

1055 1060 1065

Ser Pro Gly Thr Ser Ser Thr Gly Ser Pro Ala Ser Ser Ser Asp

1070 1075 1080

Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys

1085 1090 1095

Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro

1100 1105 1110

Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val

1115 1120 1125

Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu

1130 1135 1140

Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val

1145 1150 1155

Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr

1160 1165 1170

Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile

1175 1180 1185

Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln

1190 1195 1200

Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu

1205 1210 1215

Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys

1220 1225 1230

Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met

1235 1240 1245

Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe

1250 1255 1260

Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly

1265 1270 1275

Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly

1280 1285 1290

Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

1295 1300 1305

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1310 1315 1320

Cys Arg Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1325 1330 1335

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

1340 1345 1350

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

1355 1360 1365

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

1370 1375 1380

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala

1385 1390 1395

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

1400 1405 1410

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

1415 1420 1425

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

1430 1435 1440

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

1445 1450 1455

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala

1460 1465 1470

Ser Ser Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1475 1480 1485

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1490 1495 1500

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1505 1510 1515

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1520 1525 1530

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1535 1540 1545

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1550 1555 1560

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1565 1570 1575

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1580 1585 1590

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1595 1600 1605

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1610 1615 1620

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1625 1630 1635

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1640 1645 1650

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1655 1660 1665

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1670 1675 1680

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1685 1690 1695

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1700 1705 1710

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1715 1720 1725

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1730 1735 1740

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1745 1750 1755

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1760 1765 1770

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1775 1780 1785

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1790 1795 1800

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1805 1810 1815

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1820 1825 1830

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1835 1840 1845

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1850 1855 1860

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1865 1870 1875

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1880 1885 1890

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1895 1900 1905

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1910 1915 1920

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1925 1930 1935

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1940 1945 1950

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1955 1960 1965

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1970 1975 1980

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1985 1990 1995

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

2000 2005 2010

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

2015 2020 2025

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

2030 2035 2040

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

2045 2050 2055

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

2060 2065 2070

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

2075 2080 2085

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

2090 2095 2100

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

2105 2110 2115

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

2120 2125 2130

Lys

<210> 77

<211> 2128

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 203 (одноцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE — одним XTEN

AE-288 в домене B и одним XTEN AE-144 в аминокислотном положении 1900)

<400> 77

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly

755 760 765

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

770 775 780

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

785 790 795 800

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

805 810 815

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

820 825 830

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

835 840 845

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

850 855 860

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser

865 870 875 880

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

885 890 895

Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

900 905 910

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser

915 920 925

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

930 935 940

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

945 950 955 960

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala

965 970 975

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

980 985 990

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

995 1000 1005

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

1010 1015 1020

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

1025 1030 1035

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1040 1045 1050

Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

1055 1060 1065

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1070 1075 1080

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile

1085 1090 1095

Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

1100 1105 1110

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

1115 1120 1125

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser

1130 1135 1140

Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

1145 1150 1155

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu

1160 1165 1170

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp

1175 1180 1185

Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser

1190 1195 1200

Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

1205 1210 1215

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr

1220 1225 1230

Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu

1235 1240 1245

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu

1250 1255 1260

Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His

1265 1270 1275

Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln

1280 1285 1290

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp

1295 1300 1305

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Gly Ala Pro Thr

1310 1315 1320

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

1325 1330 1335

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

1340 1345 1350

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

1355 1360 1365

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

1370 1375 1380

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser

1385 1390 1395

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

1400 1405 1410

Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu

1415 1420 1425

Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr

1430 1435 1440

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

1445 1450 1455

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ala Ser Ser Ala Pro Cys Asn

1460 1465 1470

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His

1475 1480 1485

Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met

1490 1495 1500

Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser

1505 1510 1515

Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr

1520 1525 1530

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr

1535 1540 1545

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly

1550 1555 1560

Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly

1565 1570 1575

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro

1580 1585 1590

Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala

1595 1600 1605

Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His

1610 1615 1620

Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser

1625 1630 1635

Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile

1640 1645 1650

Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser

1655 1660 1665

Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr

1670 1675 1680

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn

1685 1690 1695

Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

1700 1705 1710

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg

1715 1720 1725

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys

1730 1735 1740

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln

1745 1750 1755

Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser

1760 1765 1770

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp

1775 1780 1785

Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe

1790 1795 1800

Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys

1805 1810 1815

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser

1820 1825 1830

Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys

1835 1840 1845

Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val

1850 1855 1860

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His

1865 1870 1875

Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu

1880 1885 1890

Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

1895 1900 1905

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

1910 1915 1920

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

1925 1930 1935

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

1940 1945 1950

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

1955 1960 1965

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

1970 1975 1980

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

1985 1990 1995

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

2000 2005 2010

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

2015 2020 2025

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln

2030 2035 2040

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

2045 2050 2055

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

2060 2065 2070

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

2075 2080 2085

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

2090 2095 2100

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

2105 2110 2115

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

2120 2125

<210> 78

<211> 2128

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 204 (одноцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE — одним XTEN

AE-288 в домене B и одним XTEN AE-144 в аминокислотном положении 403)

<400> 78

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Gly Ala Pro Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

420 425 430

Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

435 440 445

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

450 455 460

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

465 470 475 480

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

485 490 495

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

500 505 510

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

515 520 525

Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

530 535 540

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu

545 550 555 560

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ala Ser Ser Asp Arg Ser Tyr

565 570 575

Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr

580 585 590

Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg

595 600 605

Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly

610 615 620

Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg

625 630 635 640

Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr

645 650 655

Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile

660 665 670

Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

675 680 685

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser

690 695 700

Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu

705 710 715 720

Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met

725 730 735

Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg

740 745 750

Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala

755 760 765

Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His

770 775 780

Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu

785 790 795 800

His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp

805 810 815

Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val

820 825 830

Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe

835 840 845

Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser

850 855 860

Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys

865 870 875 880

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

885 890 895

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

900 905 910

Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

915 920 925

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

930 935 940

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

945 950 955 960

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

965 970 975

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro

980 985 990

Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

995 1000 1005

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

1010 1015 1020

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1025 1030 1035

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

1040 1045 1050

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

1055 1060 1065

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1070 1075 1080

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1085 1090 1095

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

1100 1105 1110

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1115 1120 1125

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr

1130 1135 1140

Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

1145 1150 1155

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

1160 1165 1170

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

1175 1180 1185

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1190 1195 1200

Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

1205 1210 1215

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1220 1225 1230

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile

1235 1240 1245

Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

1250 1255 1260

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

1265 1270 1275

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser

1280 1285 1290

Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

1295 1300 1305

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu

1310 1315 1320

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp

1325 1330 1335

Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser

1340 1345 1350

Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

1355 1360 1365

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr

1370 1375 1380

Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu

1385 1390 1395

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu

1400 1405 1410

Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His

1415 1420 1425

Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln

1430 1435 1440

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp

1445 1450 1455

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn

1460 1465 1470

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His

1475 1480 1485

Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met

1490 1495 1500

Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser

1505 1510 1515

Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr

1520 1525 1530

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr

1535 1540 1545

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly

1550 1555 1560

Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly

1565 1570 1575

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro

1580 1585 1590

Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala

1595 1600 1605

Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His

1610 1615 1620

Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser

1625 1630 1635

Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile

1640 1645 1650

Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser

1655 1660 1665

Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr

1670 1675 1680

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn

1685 1690 1695

Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

1700 1705 1710

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg

1715 1720 1725

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys

1730 1735 1740

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln

1745 1750 1755

Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser

1760 1765 1770

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp

1775 1780 1785

Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe

1790 1795 1800

Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys

1805 1810 1815

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser

1820 1825 1830

Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys

1835 1840 1845

Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val

1850 1855 1860

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His

1865 1870 1875

Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu

1880 1885 1890

Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

1895 1900 1905

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

1910 1915 1920

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

1925 1930 1935

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

1940 1945 1950

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

1955 1960 1965

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

1970 1975 1980

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

1985 1990 1995

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

2000 2005 2010

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

2015 2020 2025

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln

2030 2035 2040

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

2045 2050 2055

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

2060 2065 2070

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

2075 2080 2085

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

2090 2095 2100

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

2105 2110 2115

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

2120 2125

<210> 79

<211> 2128

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 205 (одноцепочечный FVIIIFc с двумя XTEN AE — одним XTEN

AE-288 в домене B и одним XTEN AE-144 в аминокислотном положении 18)

<400> 79

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

35 40 45

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

50 55 60

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

65 70 75 80

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

85 90 95

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

100 105 110

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser

115 120 125

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

130 135 140

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

145 150 155 160

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

165 170 175

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Ser Asp Leu Gly Glu

180 185 190

Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro

195 200 205

Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr

210 215 220

Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu

225 230 235 240

Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr

245 250 255

Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val

260 265 270

Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser

275 280 285

Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr

290 295 300

Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro

305 310 315 320

Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp

325 330 335

Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser

340 345 350

Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe

355 360 365

Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser

370 375 380

Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met

385 390 395 400

His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly

405 410 415

Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr

420 425 430

Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg

435 440 445

Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr

450 455 460

Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His

465 470 475 480

Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp

485 490 495

Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala

500 505 510

Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg

515 520 525

Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala

530 535 540

Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu

545 550 555 560

Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr

565 570 575

Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr

580 585 590

Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg

595 600 605

Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly

610 615 620

Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg

625 630 635 640

Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr

645 650 655

Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile

660 665 670

Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

675 680 685

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser

690 695 700

Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu

705 710 715 720

Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met

725 730 735

Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg

740 745 750

Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala

755 760 765

Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His

770 775 780

Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu

785 790 795 800

His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp

805 810 815

Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val

820 825 830

Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe

835 840 845

Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser

850 855 860

Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys

865 870 875 880

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

885 890 895

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

900 905 910

Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

915 920 925

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

930 935 940

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

945 950 955 960

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

965 970 975

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro

980 985 990

Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

995 1000 1005

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

1010 1015 1020

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1025 1030 1035

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

1040 1045 1050

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

1055 1060 1065

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1070 1075 1080

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1085 1090 1095

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

1100 1105 1110

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1115 1120 1125

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr

1130 1135 1140

Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

1145 1150 1155

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

1160 1165 1170

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

1175 1180 1185

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1190 1195 1200

Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

1205 1210 1215

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1220 1225 1230

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile

1235 1240 1245

Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

1250 1255 1260

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

1265 1270 1275

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser

1280 1285 1290

Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

1295 1300 1305

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu

1310 1315 1320

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp

1325 1330 1335

Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser

1340 1345 1350

Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

1355 1360 1365

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr

1370 1375 1380

Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu

1385 1390 1395

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu

1400 1405 1410

Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His

1415 1420 1425

Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln

1430 1435 1440

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp

1445 1450 1455

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn

1460 1465 1470

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His

1475 1480 1485

Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met

1490 1495 1500

Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser

1505 1510 1515

Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr

1520 1525 1530

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr

1535 1540 1545

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly

1550 1555 1560

Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly

1565 1570 1575

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro

1580 1585 1590

Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala

1595 1600 1605

Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His

1610 1615 1620

Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser

1625 1630 1635

Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile

1640 1645 1650

Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser

1655 1660 1665

Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr

1670 1675 1680

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn

1685 1690 1695

Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

1700 1705 1710

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg

1715 1720 1725

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys

1730 1735 1740

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln

1745 1750 1755

Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser

1760 1765 1770

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp

1775 1780 1785

Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe

1790 1795 1800

Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys

1805 1810 1815

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser

1820 1825 1830

Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys

1835 1840 1845

Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val

1850 1855 1860

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His

1865 1870 1875

Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu

1880 1885 1890

Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

1895 1900 1905

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

1910 1915 1920

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro

1925 1930 1935

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

1940 1945 1950

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

1955 1960 1965

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

1970 1975 1980

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

1985 1990 1995

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

2000 2005 2010

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

2015 2020 2025

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln

2030 2035 2040

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

2045 2050 2055

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

2060 2065 2070

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

2075 2080 2085

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

2090 2095 2100

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr

2105 2110 2115

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

2120 2125

<210> 80

<211> 2020

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 266 (FVIII Fc с XTEN AE-42 в аминокислотном положении

18 и XTEN AE-288 в домене B)

<400> 80

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

35 40 45

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

50 55 60

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Ala Ser Ser Ser

65 70 75 80

Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro

85 90 95

Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe

100 105 110

Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro

115 120 125

Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr

130 135 140

Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His

145 150 155 160

Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp

165 170 175

Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly

180 185 190

Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met

195 200 205

Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp

210 215 220

Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys

225 230 235 240

Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe

245 250 255

Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu

260 265 270

Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala

275 280 285

Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro

290 295 300

Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly

305 310 315 320

Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr

325 330 335

Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile

340 345 350

Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu

355 360 365

Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr

370 375 380

Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn

385 390 395 400

Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met

405 410 415

Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile

420 425 430

Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala

435 440 445

Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp

450 455 460

Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile

465 470 475 480

Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr

485 490 495

Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro

500 505 510

Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn

515 520 525

Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val

530 535 540

Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys

545 550 555 560

Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val

565 570 575

Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg

580 585 590

Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu

595 600 605

Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly

610 615 620

Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe

625 630 635 640

Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu

645 650 655

Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser

660 665 670

Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu

675 680 685

Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly

690 695 700

Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys

705 710 715 720

His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly

725 730 735

Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly

740 745 750

Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys

755 760 765

Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr

770 775 780

Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro

785 790 795 800

Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

805 810 815

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

820 825 830

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu

835 840 845

Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

850 855 860

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala

865 870 875 880

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

885 890 895

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

900 905 910

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

915 920 925

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro

930 935 940

Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

945 950 955 960

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

965 970 975

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser

980 985 990

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

995 1000 1005

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

1010 1015 1020

Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

1025 1030 1035

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

1040 1045 1050

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1055 1060 1065

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1070 1075 1080

Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala

1085 1090 1095

Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu Ile Thr Arg

1100 1105 1110

Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr

1115 1120 1125

Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu

1130 1135 1140

Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His

1145 1150 1155

Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser

1160 1165 1170

Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val

1175 1180 1185

Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser

1190 1195 1200

Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly

1205 1210 1215

Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met

1220 1225 1230

Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser

1235 1240 1245

Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro

1250 1255 1260

Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp

1265 1270 1275

Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys

1280 1285 1290

Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val

1295 1300 1305

His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr

1310 1315 1320

Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala

1325 1330 1335

Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr

1340 1345 1350

Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met

1355 1360 1365

Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn

1370 1375 1380

Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp

1385 1390 1395

Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn

1400 1405 1410

Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys

1415 1420 1425

Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val

1430 1435 1440

Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg

1445 1450 1455

Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr

1460 1465 1470

Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met

1475 1480 1485

Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln

1490 1495 1500

Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly

1505 1510 1515

Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys

1520 1525 1530

Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln

1535 1540 1545

Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile

1550 1555 1560

Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly

1565 1570 1575

Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser

1580 1585 1590

Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg

1595 1600 1605

Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu

1610 1615 1620

Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro

1625 1630 1635

Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala

1640 1645 1650

Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys

1655 1660 1665

Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln

1670 1675 1680

Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr

1685 1690 1695

Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu

1700 1705 1710

Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp

1715 1720 1725

Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val

1730 1735 1740

Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu

1745 1750 1755

Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser

1760 1765 1770

Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu

1775 1780 1785

Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro

1790 1795 1800

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro

1805 1810 1815

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr

1820 1825 1830

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe

1835 1840 1845

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

1850 1855 1860

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val

1865 1870 1875

Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys

1880 1885 1890

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr

1895 1900 1905

Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

1910 1915 1920

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu

1925 1930 1935

Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

1940 1945 1950

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

1955 1960 1965

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu

1970 1975 1980

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

1985 1990 1995

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

2000 2005 2010

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

2015 2020

<210> 81

<211> 2056

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 267 (FVIII Fc с XTEN AE-72 в аминокислотном положении

18 и XTEN AE-288 в домене B)

<400> 81

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

35 40 45

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

50 55 60

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

65 70 75 80

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

85 90 95

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

100 105 110

Ala Ser Ser Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro

115 120 125

Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys

130 135 140

Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys

145 150 155 160

Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu

165 170 175

Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro

180 185 190

Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly

195 200 205

Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys

210 215 220

Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu

225 230 235 240

Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu

245 250 255

Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala

260 265 270

Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr

275 280 285

Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser

290 295 300

Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala

305 310 315 320

Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn

325 330 335

Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp

340 345 350

His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu

355 360 365

Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu

370 375 380

Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu

385 390 395 400

Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly

405 410 415

Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu

420 425 430

Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr

435 440 445

Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser

450 455 460

Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val

465 470 475 480

His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val

485 490 495

Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly

500 505 510

Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr

515 520 525

Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly

530 535 540

Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile

545 550 555 560

Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly

565 570 575

Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val

580 585 590

Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr

595 600 605

Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg

610 615 620

Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu

625 630 635 640

Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val

645 650 655

Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu

660 665 670

Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile

675 680 685

Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu

690 695 700

Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp

705 710 715 720

Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile

725 730 735

Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly

740 745 750

Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe

755 760 765

Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu

770 775 780

Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr

785 790 795 800

Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr

805 810 815

Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn

820 825 830

Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser

835 840 845

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

850 855 860

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

865 870 875 880

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

885 890 895

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

900 905 910

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu

915 920 925

Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu

930 935 940

Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

945 950 955 960

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu

965 970 975

Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

980 985 990

Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

995 1000 1005

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1010 1015 1020

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1025 1030 1035

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro

1040 1045 1050

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

1055 1060 1065

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1070 1075 1080

Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

1085 1090 1095

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu

1100 1105 1110

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

1115 1120 1125

Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His

1130 1135 1140

Gln Ala Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu

1145 1150 1155

Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp

1160 1165 1170

Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe

1175 1180 1185

Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu

1190 1195 1200

Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg

1205 1210 1215

Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln

1220 1225 1230

Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu

1235 1240 1245

Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu

1250 1255 1260

Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg

1265 1270 1275

Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln

1280 1285 1290

Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu

1295 1300 1305

Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr

1310 1315 1320

Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val

1325 1330 1335

Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu

1340 1345 1350

Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val

1355 1360 1365

Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr

1370 1375 1380

Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala

1385 1390 1395

Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr

1400 1405 1410

Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly

1415 1420 1425

Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser

1430 1435 1440

Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His

1445 1450 1455

Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr

1460 1465 1470

Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser

1475 1480 1485

Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu

1490 1495 1500

His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys

1505 1510 1515

Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln

1520 1525 1530

Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala

1535 1540 1545

Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu

1550 1555 1560

Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile

1565 1570 1575

His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu

1580 1585 1590

Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys

1595 1600 1605

Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe

1610 1615 1620

Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn

1625 1630 1635

Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr

1640 1645 1650

Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu

1655 1660 1665

Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser

1670 1675 1680

Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala

1685 1690 1695

Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser

1700 1705 1710

Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln

1715 1720 1725

Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln

1730 1735 1740

Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu

1745 1750 1755

Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln

1760 1765 1770

Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr

1775 1780 1785

Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu

1790 1795 1800

Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met

1805 1810 1815

Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His

1820 1825 1830

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

1835 1840 1845

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

1850 1855 1860

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

1865 1870 1875

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

1880 1885 1890

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

1895 1900 1905

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu

1910 1915 1920

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

1925 1930 1935

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

1940 1945 1950

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr

1955 1960 1965

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

1970 1975 1980

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

1985 1990 1995

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

2000 2005 2010

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

2015 2020 2025

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

2030 2035 2040

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

2045 2050 2055

<210> 82

<211> 1834

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 268 (FVIII Fc с XTEN AE-144 в аминокислотном

положении 18)

<400> 82

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

35 40 45

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

50 55 60

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

65 70 75 80

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

85 90 95

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

100 105 110

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser

115 120 125

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

130 135 140

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

145 150 155 160

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

165 170 175

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Ser Asp Leu Gly Glu

180 185 190

Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro

195 200 205

Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr

210 215 220

Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu

225 230 235 240

Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr

245 250 255

Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val

260 265 270

Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser

275 280 285

Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr

290 295 300

Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro

305 310 315 320

Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp

325 330 335

Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser

340 345 350

Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe

355 360 365

Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser

370 375 380

Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met

385 390 395 400

His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly

405 410 415

Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr

420 425 430

Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg

435 440 445

Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr

450 455 460

Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His

465 470 475 480

Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp

485 490 495

Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala

500 505 510

Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg

515 520 525

Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala

530 535 540

Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu

545 550 555 560

Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr

565 570 575

Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr

580 585 590

Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg

595 600 605

Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly

610 615 620

Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg

625 630 635 640

Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr

645 650 655

Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile

660 665 670

Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

675 680 685

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser

690 695 700

Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu

705 710 715 720

Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met

725 730 735

Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg

740 745 750

Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala

755 760 765

Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His

770 775 780

Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu

785 790 795 800

His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp

805 810 815

Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val

820 825 830

Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe

835 840 845

Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser

850 855 860

Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys

865 870 875 880

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

885 890 895

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

900 905 910

Gln Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu Ile Thr Arg Thr

915 920 925

Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser

930 935 940

Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn

945 950 955 960

Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala

965 970 975

Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val

980 985 990

Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val

995 1000 1005

Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr

1010 1015 1020

Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile

1025 1030 1035

Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln

1040 1045 1050

Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu

1055 1060 1065

Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys

1070 1075 1080

Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met

1085 1090 1095

Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe

1100 1105 1110

Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly

1115 1120 1125

Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly

1130 1135 1140

Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

1145 1150 1155

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1160 1165 1170

Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1175 1180 1185

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1190 1195 1200

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1205 1210 1215

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1220 1225 1230

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1235 1240 1245

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1250 1255 1260

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1265 1270 1275

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1280 1285 1290

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1295 1300 1305

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1310 1315 1320

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1325 1330 1335

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1340 1345 1350

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1355 1360 1365

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1370 1375 1380

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1385 1390 1395

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1400 1405 1410

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1415 1420 1425

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1430 1435 1440

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1445 1450 1455

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1460 1465 1470

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1475 1480 1485

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1490 1495 1500

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1505 1510 1515

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1520 1525 1530

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1535 1540 1545

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1550 1555 1560

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1565 1570 1575

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1580 1585 1590

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1595 1600 1605

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1610 1615 1620

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1625 1630 1635

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1640 1645 1650

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1655 1660 1665

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1670 1675 1680

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1685 1690 1695

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

1700 1705 1710

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

1715 1720 1725

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

1730 1735 1740

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

1745 1750 1755

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

1760 1765 1770

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

1775 1780 1785

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

1790 1795 1800

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

1805 1810 1815

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1820 1825 1830

Lys

<210> 83

<211> 1762

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 269 (FVIII Fc with 72 AE-XTEN at amino acid 18)

<400> 83

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

35 40 45

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

50 55 60

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

65 70 75 80

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

85 90 95

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

100 105 110

Ala Ser Ser Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro

115 120 125

Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys

130 135 140

Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys

145 150 155 160

Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu

165 170 175

Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro

180 185 190

Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly

195 200 205

Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys

210 215 220

Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu

225 230 235 240

Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu

245 250 255

Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala

260 265 270

Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr

275 280 285

Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser

290 295 300

Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala

305 310 315 320

Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn

325 330 335

Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp

340 345 350

His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu

355 360 365

Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu

370 375 380

Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu

385 390 395 400

Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly

405 410 415

Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu

420 425 430

Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr

435 440 445

Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser

450 455 460

Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val

465 470 475 480

His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val

485 490 495

Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly

500 505 510

Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr

515 520 525

Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly

530 535 540

Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile

545 550 555 560

Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly

565 570 575

Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val

580 585 590

Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr

595 600 605

Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg

610 615 620

Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu

625 630 635 640

Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val

645 650 655

Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu

660 665 670

Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile

675 680 685

Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu

690 695 700

Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp

705 710 715 720

Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile

725 730 735

Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly

740 745 750

Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe

755 760 765

Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu

770 775 780

Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr

785 790 795 800

Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr

805 810 815

Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn

820 825 830

Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg

835 840 845

His Gln Ala Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu

850 855 860

Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe

865 870 875 880

Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys

885 890 895

Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

900 905 910

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly

915 920 925

Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly

930 935 940

Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly

945 950 955 960

Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val

965 970 975

Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu

980 985 990

Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn

995 1000 1005

Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln

1010 1015 1020

His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp

1025 1030 1035

Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly

1040 1045 1050

Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro

1055 1060 1065

Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe

1070 1075 1080

Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met

1085 1090 1095

Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro

1100 1105 1110

Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile

1115 1120 1125

Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile

1130 1135 1140

Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser

1145 1150 1155

Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu

1160 1165 1170

Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr

1175 1180 1185

Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys

1190 1195 1200

Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu

1205 1210 1215

Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly

1220 1225 1230

His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln

1235 1240 1245

Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn

1250 1255 1260

Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu

1265 1270 1275

Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg

1280 1285 1290

Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr

1295 1300 1305

Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr

1310 1315 1320

Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile

1325 1330 1335

Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg

1340 1345 1350

Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu

1355 1360 1365

Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met

1370 1375 1380

Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr

1385 1390 1395

Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu

1400 1405 1410

His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn

1415 1420 1425

Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val

1430 1435 1440

Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met

1445 1450 1455

Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln

1460 1465 1470

Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly

1475 1480 1485

Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro

1490 1495 1500

Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His

1505 1510 1515

Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp

1520 1525 1530

Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu

1535 1540 1545

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

1550 1555 1560

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val

1565 1570 1575

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

1580 1585 1590

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

1595 1600 1605

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val

1610 1615 1620

Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

1625 1630 1635

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

1640 1645 1650

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

1655 1660 1665

Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

1670 1675 1680

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

1685 1690 1695

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

1700 1705 1710

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

1715 1720 1725

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

1730 1735 1740

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

1745 1750 1755

Ser Pro Gly Lys

1760

<210> 84

<211> 1726

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 271 (FVIII Fc с XTEN AE-42 в аминокислотном

положении 18)

<400> 84

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

35 40 45

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

50 55 60

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Ala Ser Ser Ser

65 70 75 80

Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro

85 90 95

Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe

100 105 110

Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro

115 120 125

Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr

130 135 140

Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His

145 150 155 160

Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp

165 170 175

Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly

180 185 190

Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met

195 200 205

Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp

210 215 220

Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys

225 230 235 240

Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe

245 250 255

Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu

260 265 270

Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala

275 280 285

Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro

290 295 300

Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly

305 310 315 320

Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr

325 330 335

Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile

340 345 350

Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu

355 360 365

Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr

370 375 380

Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn

385 390 395 400

Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met

405 410 415

Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile

420 425 430

Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala

435 440 445

Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp

450 455 460

Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile

465 470 475 480

Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr

485 490 495

Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro

500 505 510

Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn

515 520 525

Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val

530 535 540

Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys

545 550 555 560

Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val

565 570 575

Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg

580 585 590

Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu

595 600 605

Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly

610 615 620

Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe

625 630 635 640

Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu

645 650 655

Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser

660 665 670

Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu

675 680 685

Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly

690 695 700

Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys

705 710 715 720

His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly

725 730 735

Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly

740 745 750

Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys

755 760 765

Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr

770 775 780

Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro

785 790 795 800

Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

805 810 815

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp

820 825 830

Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp

835 840 845

Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His

850 855 860

Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser

865 870 875 880

Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln

885 890 895

Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln

900 905 910

Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro

915 920 925

Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn

930 935 940

Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu

945 950 955 960

Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro

965 970 975

Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro

980 985 990

Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val

995 1000 1005

Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu

1010 1015 1020

Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val

1025 1030 1035

Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr

1040 1045 1050

Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala

1055 1060 1065

Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr

1070 1075 1080

Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly

1085 1090 1095

Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser

1100 1105 1110

Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His

1115 1120 1125

Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr

1130 1135 1140

Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser

1145 1150 1155

Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu

1160 1165 1170

His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys

1175 1180 1185

Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln

1190 1195 1200

Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala

1205 1210 1215

Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu

1220 1225 1230

Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile

1235 1240 1245

His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu

1250 1255 1260

Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys

1265 1270 1275

Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe

1280 1285 1290

Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn

1295 1300 1305

Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr

1310 1315 1320

Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu

1325 1330 1335

Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser

1340 1345 1350

Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala

1355 1360 1365

Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser

1370 1375 1380

Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln

1385 1390 1395

Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln

1400 1405 1410

Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu

1415 1420 1425

Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln

1430 1435 1440

Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr

1445 1450 1455

Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu

1460 1465 1470

Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met

1475 1480 1485

Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His

1490 1495 1500

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

1505 1510 1515

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

1520 1525 1530

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

1535 1540 1545

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

1550 1555 1560

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

1565 1570 1575

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu

1580 1585 1590

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

1595 1600 1605

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

1610 1615 1620

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr

1625 1630 1635

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

1640 1645 1650

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

1655 1660 1665

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

1670 1675 1680

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

1685 1690 1695

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

1700 1705 1710

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1715 1720 1725

<210> 85

<211> 1901

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 272 (FVIII с XTEN AE-144 в аминокислотном положении

18 и XTEN AE-244 в домене B - без Fc)

<400> 85

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

35 40 45

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

50 55 60

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

65 70 75 80

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

85 90 95

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

100 105 110

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser

115 120 125

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

130 135 140

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

145 150 155 160

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

165 170 175

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Ser Asp Leu Gly Glu

180 185 190

Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro

195 200 205

Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr

210 215 220

Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu

225 230 235 240

Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr

245 250 255

Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val

260 265 270

Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser

275 280 285

Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr

290 295 300

Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro

305 310 315 320

Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp

325 330 335

Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser

340 345 350

Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe

355 360 365

Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser

370 375 380

Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met

385 390 395 400

His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly

405 410 415

Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr

420 425 430

Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg

435 440 445

Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr

450 455 460

Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His

465 470 475 480

Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp

485 490 495

Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala

500 505 510

Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg

515 520 525

Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala

530 535 540

Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu

545 550 555 560

Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr

565 570 575

Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr

580 585 590

Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg

595 600 605

Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly

610 615 620

Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg

625 630 635 640

Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr

645 650 655

Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile

660 665 670

Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

675 680 685

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser

690 695 700

Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu

705 710 715 720

Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met

725 730 735

Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg

740 745 750

Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala

755 760 765

Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His

770 775 780

Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu

785 790 795 800

His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp

805 810 815

Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val

820 825 830

Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe

835 840 845

Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser

850 855 860

Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys

865 870 875 880

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

885 890 895

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

900 905 910

Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

915 920 925

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

930 935 940

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

945 950 955 960

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

965 970 975

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro

980 985 990

Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

995 1000 1005

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

1010 1015 1020

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1025 1030 1035

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

1040 1045 1050

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

1055 1060 1065

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1070 1075 1080

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1085 1090 1095

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

1100 1105 1110

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1115 1120 1125

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr

1130 1135 1140

Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

1145 1150 1155

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

1160 1165 1170

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

1175 1180 1185

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1190 1195 1200

Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

1205 1210 1215

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1220 1225 1230

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile

1235 1240 1245

Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

1250 1255 1260

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

1265 1270 1275

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser

1280 1285 1290

Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

1295 1300 1305

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu

1310 1315 1320

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp

1325 1330 1335

Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser

1340 1345 1350

Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

1355 1360 1365

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr

1370 1375 1380

Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu

1385 1390 1395

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu

1400 1405 1410

Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His

1415 1420 1425

Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln

1430 1435 1440

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp

1445 1450 1455

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn

1460 1465 1470

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His

1475 1480 1485

Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met

1490 1495 1500

Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser

1505 1510 1515

Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr

1520 1525 1530

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr

1535 1540 1545

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly

1550 1555 1560

Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly

1565 1570 1575

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro

1580 1585 1590

Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala

1595 1600 1605

Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His

1610 1615 1620

Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser

1625 1630 1635

Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile

1640 1645 1650

Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser

1655 1660 1665

Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr

1670 1675 1680

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn

1685 1690 1695

Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

1700 1705 1710

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg

1715 1720 1725

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys

1730 1735 1740

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln

1745 1750 1755

Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser

1760 1765 1770

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp

1775 1780 1785

Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe

1790 1795 1800

Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys

1805 1810 1815

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser

1820 1825 1830

Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys

1835 1840 1845

Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val

1850 1855 1860

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His

1865 1870 1875

Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu

1880 1885 1890

Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr

1895 1900

<210> 86

<211> 1515

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF031

<400> 86

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1235 1240 1245

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1250 1255 1260

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly Ser

1265 1270 1275

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr

1280 1285 1290

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

1295 1300 1305

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg

1310 1315 1320

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

1325 1330 1335

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

1340 1345 1350

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

1355 1360 1365

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

1370 1375 1380

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala

1385 1390 1395

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu

1400 1405 1410

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys

1415 1420 1425

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser

1430 1435 1440

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

1445 1450 1455

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

1460 1465 1470

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly

1475 1480 1485

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

1490 1495 1500

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1505 1510 1515

<210> 87

<211> 1778

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF034

<400> 87

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Thr Ser Glu Ser Ala

1235 1240 1245

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

1250 1255 1260

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1265 1270 1275

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

1280 1285 1290

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

1295 1300 1305

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

1310 1315 1320

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1325 1330 1335

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

1340 1345 1350

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser

1355 1360 1365

Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

1370 1375 1380

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

1385 1390 1395

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser

1400 1405 1410

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

1415 1420 1425

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

1430 1435 1440

Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

1445 1450 1455

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

1460 1465 1470

Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

1475 1480 1485

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

1490 1495 1500

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1505 1510 1515

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Asp Ile Gly

1520 1525 1530

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly

1535 1540 1545

Ser Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

1550 1555 1560

Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

1565 1570 1575

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

1580 1585 1590

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

1595 1600 1605

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg

1610 1615 1620

Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

1625 1630 1635

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

1640 1645 1650

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

1655 1660 1665

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

1670 1675 1680

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

1685 1690 1695

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

1700 1705 1710

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

1715 1720 1725

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

1730 1735 1740

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

1745 1750 1755

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

1760 1765 1770

Leu Ser Pro Gly Lys

1775

<210> 88

<211> 32

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 88

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

1 5 10 15

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25 30

<210> 89

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть константной области Ig

<400> 89

Pro Lys Asn Ser Ser Met Ile Ser Asn Thr Pro

1 5 10

<210> 90

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть константной области Ig

<400> 90

His Gln Ser Leu Gly Thr Gln

1 5

<210> 91

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть константной области Ig

<400> 91

His Gln Asn Leu Ser Asp Gly Lys

1 5

<210> 92

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть константной области Ig

<400> 92

His Gln Asn Ile Ser Asp Gly Lys

1 5

<210> 93

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Часть константной области Ig

<400> 93

Val Ile Ser Ser His Leu Gly Gln

1 5

<210> 94

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер, в котором последовательность может повторяться 1-20 раз

<400> 94

Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 95

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер, в котором последовательность может повторяться 1-100 раз

или 1-20 раз

<400> 95

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 96

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 96

Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser

1 5

<210> 97

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 97

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Gly

1 5 10 15

<210> 98

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 98

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 99

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 99

Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Ser

<210> 100

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 100

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 101

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер, в котором последовательность может повторяться 1-00 раз

или 1-20 раз

<400> 101

Gly Gly Gly Ser

1

<210> 102

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления

<400> 102

Arg Arg Arg Arg

1

<210> 103

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления

<400> 103

Arg Lys Arg Arg Lys Arg

1 5

<210> 104

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления

<400> 104

Arg Arg Arg Arg Ser

1 5

<210> 105

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления тромбином

<220>

<221> другой_признак

<222> (1)..(1)

<223> Xaa представляет собой алифатическую аминокислоту

<400> 105

Xaa Val Pro Arg

1

<210> 106

<211> 34

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 106

Ile Ser Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp

1 5 10 15

Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser

20 25 30

Phe Ser

<210> 107

<211> 40

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 107

Ile Ser Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu

1 5 10 15

Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro

20 25 30

Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val

35 40

<210> 108

<211> 46

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 108

Ile Ser Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile

1 5 10 15

Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp

20 25 30

Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln

35 40 45

<210> 109

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Мотив PAR1, взаимодействующий с экзосайтами

<400> 109

Ser Phe Leu Leu Arg Asn

1 5

<210> 110

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 110

Pro Asn Asp Lys

1

<210> 111

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 111

Pro Asn Asp Lys Tyr

1 5

<210> 112

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 112

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu

1 5

<210> 113

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 113

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro

1 5

<210> 114

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 114

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe

1 5

<210> 115

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 115

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe Trp

1 5

<210> 116

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 116

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe Trp Glu

1 5 10

<210> 117

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 117

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe Trp Glu Asp

1 5 10

<210> 118

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 118

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe Trp Glu Asp Glu

1 5 10

<210> 119

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 119

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe Trp Glu Asp Glu Glu

1 5 10

<210> 120

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 120

Pro Asn Asp Lys Tyr Glu Pro Phe Trp Glu Asp Glu Glu Ser

1 5 10

<210> 121

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления FXIa

<400> 121

Lys Leu Thr Arg Ala Glu Thr

1 5

<210> 122

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления FXIa

<400> 122

Asp Phe Thr Arg Val Val Gly

1 5

<210> 123

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для FXIIa

<400> 123

Thr Met Thr Arg Ile Val Gly Gly

1 5

<210> 124

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для калликреина

<400> 124

Ser Pro Phe Arg Ser Thr Gly Gly

1 5

<210> 125

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для FVIIa

<400> 125

Leu Gln Val Arg Ile Val Gly Gly

1 5

<210> 126

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для FIXa

<400> 126

Pro Leu Gly Arg Ile Val Gly Gly

1 5

<210> 127

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для FXa

<400> 127

Ile Glu Gly Arg Thr Val Gly Gly

1 5

<210> 128

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для FIIa (тромбина)

<400> 128

Leu Thr Pro Arg Ser Leu Leu Val

1 5

<210> 129

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для эластазы-2

<400> 129

Leu Gly Pro Val Ser Gly Val Pro

1 5

<210> 130

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для гранзима B

<400> 130

Val Ala Gly Asp Ser Leu Glu Glu

1 5

<210> 131

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для MMP-12

<400> 131

Gly Pro Ala Gly Leu Gly Gly Ala

1 5

<210> 132

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для MMP-13

<400> 132

Gly Pro Ala Gly Leu Arg Gly Ala

1 5

<210> 133

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для MMP-17

<400> 133

Ala Pro Leu Gly Leu Arg Leu Arg

1 5

<210> 134

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для MMP-20

<400> 134

Pro Ala Leu Pro Leu Val Ala Gln

1 5

<210> 135

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для TEV

<400> 135

Glu Asn Leu Tyr Phe Gln Gly

1 5

<210> 136

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для энтерокиназы

<400> 136

Asp Asp Asp Lys Ile Val Gly Gly

1 5

<210> 137

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для протеазы 3C (PRESCISSION)

<400> 137

Leu Glu Val Leu Phe Gln Gly Pro

1 5

<210> 138

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для сортазы A

<400> 138

Leu Pro Lys Thr Gly Ser Glu Ser

1 5

<210> 139

<211> 31

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 139

Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala

1 5 10 15

Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25 30

<210> 140

<211> 30

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 140

Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr

1 5 10 15

Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25 30

<210> 141

<211> 29

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 141

Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu

1 5 10 15

Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25

<210> 142

<211> 28

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 142

Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu

1 5 10 15

Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25

<210> 143

<211> 27

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 143

Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser

1 5 10 15

Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25

<210> 144

<211> 26

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 144

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

1 5 10 15

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25

<210> 145

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Сайт расщепления для тромбина

<400> 145

Ala Leu Arg Pro Arg Val Val Gly Gly Ala

1 5 10

<210> 146

<211> 25

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 146

Thr Leu Asp Pro Arg Ser Phe Leu Leu Arg Asn Pro Asn Asp Lys Tyr

1 5 10 15

Glu Pro Phe Trp Glu Asp Glu Glu Lys

20 25

<210> 147

<211> 4548

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF031

<400> 147

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

atatctggcg gtggaggttc cggtggcggg ggatccggcg gtggaggttc cggcggtgga 3780

ggttccggtg gcgggggatc cggtggcggg ggatccctgg tcccccgggg cagcggcggt 3840

ggaggttccg gtggcggggg atccgacaaa actcacacat gcccaccgtg cccagctcca 3900

gaactcctgg gcggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa aacccaagga caccctcatg 3960

atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg gtggtggacg tgagccacga agaccctgag 4020

gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg 4080

gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac 4140

tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aagccctccc agcccccatc 4200

gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc 4260

ccatcccgcg atgagctgac caagaaccag gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc 4320

tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag 4380

accacgcctc ccgtgttgga ctccgacggc tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg 4440

gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg 4500

cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc ctgtctccgg gtaaatga 4548

<210> 148

<211> 5379

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF034

<400> 148

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

atatcgggta cctcagagtc tgctaccccc gagtcagggc caggatcaga gccagccacc 3780

tccgggtctg agacacccgg gacttccgag agtgccaccc ctgagtccgg acccgggtcc 3840

gagcccgcca cttccggctc cgaaactccc ggcacaagcg agagcgctac cccagagtca 3900

ggaccaggaa catctacaga gccctctgaa ggctccgctc cagggtcccc agccggcagt 3960

cccactagca ccgaggaggg aacctctgaa agcgccacac ccgaatcagg gccagggtct 4020

gagcctgcta ccagcggcag cgagacacca ggcacctctg agtccgccac accagagtcc 4080

ggacccggat ctcccgctgg gagccccacc tccactgagg agggatctcc tgctggctct 4140

ccaacatcta ctgaggaagg tacctcaacc gagccatccg agggatcagc tcccggcacc 4200

tcagagtcgg caaccccgga gtctggaccc ggaacttccg aaagtgccac accagagtcc 4260

ggtcccggga cttcagaatc agcaacaccc gagtccggcc ctgggtctga acccgccaca 4320

agtggtagtg agacaccagg atcagaacct gctacctcag ggtcagagac acccggatct 4380

ccggcaggct caccaacctc cactgaggag ggcaccagca cagaaccaag cgagggctcc 4440

gcacccggaa caagcactga acccagtgag ggttcagcac ccggctctga gccggccaca 4500

agtggcagtg agacacccgg cacttcagag agtgccaccc ccgagagtgg cccaggcact 4560

agtaccgagc cctctgaagg cagtgcgcca gattctggcg gtggaggttc cggtggcggg 4620

ggatccggtg gcgggggatc cggtggcggg ggatccggtg gcgggggatc cctggtcccc 4680

cggggcagcg gaggcgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagctcc agaactcctg 4740

ggcggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 4800

acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 4860

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 4920

tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 4980

ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 5040

atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg 5100

gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 5160

gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 5220

cccgtgttgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 5280

aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 5340

tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 5379

<210> 149

<211> 4548

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF050 (с тройной мутацией IHH)

<400> 149

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

atatctggcg gtggaggttc cggtggcggg ggatccggcg gtggaggttc cggcggtgga 3780

ggttccggtg gcgggggatc cggtggcggg ggatccctgg tcccccgggg cagcggcggt 3840

ggaggttccg gtggcggggg atccgacaaa actcacacat gcccaccgtg cccagctcca 3900

gaactcctgg gcggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa aacccaagga caccctcatg 3960

gcctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg gtggtggacg tgagccacga agaccctgag 4020

gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg 4080

gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg gtcagcgtcc tcaccgtcct ggcccaggac 4140

tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aagccctccc agcccccatc 4200

gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc 4260

ccatcccgcg atgagctgac caagaaccag gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc 4320

tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag 4380

accacgcctc ccgtgttgga ctccgacggc tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg 4440

gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg 4500

cacaacgcct acacgcagaa gagcctctcc ctgtctccgg gtaaatga 4548

<210> 150

<211> 1515

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF050 (с тройной мутацией IHH)

<400> 150

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1235 1240 1245

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1250 1255 1260

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly Ser

1265 1270 1275

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr

1280 1285 1290

Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val

1295 1300 1305

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ala Ser Arg

1310 1315 1320

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

1325 1330 1335

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His

1340 1345 1350

Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

1355 1360 1365

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu Ala Gln Asp Trp Leu Asn

1370 1375 1380

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala

1385 1390 1395

Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu

1400 1405 1410

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys

1415 1420 1425

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser

1430 1435 1440

Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn

1445 1450 1455

Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe

1460 1465 1470

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly

1475 1480 1485

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala

1490 1495 1500

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1505 1510 1515

<210> 151

<211> 4959

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF057

<400> 151

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

atatcgggcg cgccaacatc agagagcgcc acccctgaaa gtggtcccgg gagcgagcca 3780

gccacatctg ggtcggaaac gccaggcaca agtgagtctg caactcccga gtccggacct 3840

ggctccgagc ctgccactag cggctccgag actccgggaa cttccgagag cgctacacca 3900

gaaagcggac ccggaaccag taccgaacct agcgagggct ctgctccggg cagcccagcc 3960

ggctctccta catccacgga ggagggcact tccgaatccg ccaccccgga gtcagggcca 4020

ggatctgaac ccgctacctc aggcagtgag acgccaggaa cgagcgagtc cgctacaccg 4080

gagagtgggc cagggagccc tgctggatct cctacgtcca ctgaggaagg gtcaccagcg 4140

ggctcgccca ccagcactga agaaggtgcc tcgagcggcg gtggaggttc cggtggcggg 4200

ggatccggtg gcgggggatc cggtggcggg ggatccggtg gcgggggatc cctggtcccc 4260

cggggcagcg gaggcgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagctcc agaactcctg 4320

ggcggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 4380

acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 4440

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 4500

tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 4560

ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 4620

atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg 4680

gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 4740

gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 4800

cccgtgttgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 4860

aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 4920

tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 4959

<210> 152

<211> 1652

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF057

<400> 152

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Ala Pro Thr Ser Glu

1235 1240 1245

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1250 1255 1260

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1265 1270 1275

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

1280 1285 1290

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

1295 1300 1305

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

1310 1315 1320

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1325 1330 1335

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

1340 1345 1350

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala

1355 1360 1365

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

1370 1375 1380

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1385 1390 1395

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1400 1405 1410

Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly Ser Gly Gly Asp Lys Thr

1415 1420 1425

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

1430 1435 1440

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

1445 1450 1455

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

1460 1465 1470

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

1475 1480 1485

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser

1490 1495 1500

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp

1505 1510 1515

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

1520 1525 1530

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro

1535 1540 1545

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

1550 1555 1560

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

1565 1570 1575

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu

1580 1585 1590

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

1595 1600 1605

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

1610 1615 1620

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

1625 1630 1635

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1640 1645 1650

<210> 153

<211> 5379

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF058 (VWF034 с мутацией IHH)

<400> 153

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

atatcgggta cctcagagtc tgctaccccc gagtcagggc caggatcaga gccagccacc 3780

tccgggtctg agacacccgg gacttccgag agtgccaccc ctgagtccgg acccgggtcc 3840

gagcccgcca cttccggctc cgaaactccc ggcacaagcg agagcgctac cccagagtca 3900

ggaccaggaa catctacaga gccctctgaa ggctccgctc cagggtcccc agccggcagt 3960

cccactagca ccgaggaggg aacctctgaa agcgccacac ccgaatcagg gccagggtct 4020

gagcctgcta ccagcggcag cgagacacca ggcacctctg agtccgccac accagagtcc 4080

ggacccggat ctcccgctgg gagccccacc tccactgagg agggatctcc tgctggctct 4140

ccaacatcta ctgaggaagg tacctcaacc gagccatccg agggatcagc tcccggcacc 4200

tcagagtcgg caaccccgga gtctggaccc ggaacttccg aaagtgccac accagagtcc 4260

ggtcccggga cttcagaatc agcaacaccc gagtccggcc ctgggtctga acccgccaca 4320

agtggtagtg agacaccagg atcagaacct gctacctcag ggtcagagac acccggatct 4380

ccggcaggct caccaacctc cactgaggag ggcaccagca cagaaccaag cgagggctcc 4440

gcacccggaa caagcactga acccagtgag ggttcagcac ccggctctga gccggccaca 4500

agtggcagtg agacacccgg cacttcagag agtgccaccc ccgagagtgg cccaggcact 4560

agtaccgagc cctctgaagg cagtgcgcca gattctggcg gtggaggttc cggtggcggg 4620

ggatccggtg gcgggggatc cggtggcggg ggatccggtg gcgggggatc cctggtcccc 4680

cggggcagcg gaggcgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagctcc agaactcctg 4740

ggcggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat ggcctcccgg 4800

acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 4860

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 4920

tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tggcccagga ctggctgaat 4980

ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 5040

atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgc 5100

gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 5160

gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 5220

cccgtgttgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 5280

aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaacgcc 5340

tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 5379

<210> 154

<211> 1792

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF058 (VWF034 с мутацией IHH)

<400> 154

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Thr Ser Glu Ser Ala

1235 1240 1245

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

1250 1255 1260

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1265 1270 1275

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

1280 1285 1290

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

1295 1300 1305

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

1310 1315 1320

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1325 1330 1335

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

1340 1345 1350

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser

1355 1360 1365

Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

1370 1375 1380

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

1385 1390 1395

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser

1400 1405 1410

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

1415 1420 1425

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

1430 1435 1440

Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

1445 1450 1455

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

1460 1465 1470

Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

1475 1480 1485

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

1490 1495 1500

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1505 1510 1515

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Asp Ser Gly

1520 1525 1530

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1535 1540 1545

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly Ser

1550 1555 1560

Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu

1565 1570 1575

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

1580 1585 1590

Asp Thr Leu Met Ala Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val

1595 1600 1605

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr

1610 1615 1620

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu

1625 1630 1635

Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val

1640 1645 1650

Leu Ala Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

1655 1660 1665

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

1670 1675 1680

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro

1685 1690 1695

Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu

1700 1705 1710

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser

1715 1720 1725

Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

1730 1735 1740

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp

1745 1750 1755

Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

1760 1765 1770

His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

1775 1780 1785

Ser Pro Gly Lys

1790

<210> 155

<211> 5937

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 169

<400> 155

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcta gcttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttctctcaaa acggcgcgcc aggtacctca gagtctgcta cccccgagtc agggccagga 2340

tcagagccag ccacctccgg gtctgagaca cccgggactt ccgagagtgc cacccctgag 2400

tccggacccg ggtccgagcc cgccacttcc ggctccgaaa ctcccggcac aagcgagagc 2460

gctaccccag agtcaggacc aggaacatct acagagccct ctgaaggctc cgctccaggg 2520

tccccagccg gcagtcccac tagcaccgag gagggaacct ctgaaagcgc cacacccgaa 2580

tcagggccag ggtctgagcc tgctaccagc ggcagcgaga caccaggcac ctctgagtcc 2640

gccacaccag agtccggacc cggatctccc gctgggagcc ccacctccac tgaggaggga 2700

tctcctgctg gctctccaac atctactgag gaaggtacct caaccgagcc atccgaggga 2760

tcagctcccg gcacctcaga gtcggcaacc ccggagtctg gacccggaac ttccgaaagt 2820

gccacaccag agtccggtcc cgggacttca gaatcagcaa cacccgagtc cggccctggg 2880

tctgaacccg ccacaagtgg tagtgagaca ccaggatcag aacctgctac ctcagggtca 2940

gagacacccg gatctccggc aggctcacca acctccactg aggagggcac cagcacagaa 3000

ccaagcgagg gctccgcacc cggaacaagc actgaaccca gtgagggttc agcacccggc 3060

tctgagccgg ccacaagtgg cagtgagaca cccggcactt cagagagtgc cacccccgag 3120

agtggcccag gcactagtac cgagccctct gaaggcagtg cgccagcctc gagcccacca 3180

gtcttgaaac gccatcaagc tgaaataact cgtactactc ttcagtcaga tcaagaggaa 3240

atcgattatg atgataccat atcagttgaa atgaagaagg aagattttga catttatgat 3300

gaggatgaaa atcagagccc ccgcagcttt caaaagaaaa cacgacacta ttttattgct 3360

gcagtggaga ggctctggga ttatgggatg agtagctccc cacatgttct aagaaacagg 3420

gctcagagtg gcagtgtccc tcagttcaag aaagttgttt tccaggaatt tactgatggc 3480

tcctttactc agcccttata ccgtggagaa ctaaatgaac atttgggact cctggggcca 3540

tatataagag cagaagttga agataatatc atggtaactt tcagaaatca ggcctctcgt 3600

ccctattcct tctattctag ccttatttct tatgaggaag atcagaggca aggagcagaa 3660

cctagaaaaa actttgtcaa gcctaatgaa accaaaactt acttttggaa agtgcaacat 3720

catatggcac ccactaaaga tgagtttgac tgcaaagcct gggcttattt ctctgatgtt 3780

gacctggaaa aagatgtgca ctcaggcctg attggacccc ttctggtctg ccacactaac 3840

acactgaacc ctgctcatgg gagacaagtg acagtacagg aatttgctct gtttttcacc 3900

atctttgatg agaccaaaag ctggtacttc actgaaaata tggaaagaaa ctgcagggct 3960

ccctgcaata tccagatgga agatcccact tttaaagaga attatcgctt ccatgcaatc 4020

aatggctaca taatggatac actacctggc ttagtaatgg ctcaggatca aaggattcga 4080

tggtatctgc tcagcatggg cagcaatgaa aacatccatt ctattcattt cagtggacat 4140

gtgttcactg tacgaaaaaa agaggagtat aaaatggcac tgtacaatct ctatccaggt 4200

gtttttgaga cagtggaaat gttaccatcc aaagctggaa tttggcgggt ggaatgcctt 4260

attggcgagc atctacatgc tgggatgagc acactttttc tggtgtacag caataagtgt 4320

cagactcccc tgggaatggc ttctggacac attagagatt ttcagattac agcttcagga 4380

caatatggac agtgggcccc aaagctggcc agacttcatt attccggatc aatcaatgcc 4440

tggagcacca aggagccctt ttcttggatc aaggtggatc tgttggcacc aatgattatt 4500

cacggcatca agacccaggg tgcccgtcag aagttctcca gcctctacat ctctcagttt 4560

atcatcatgt atagtcttga tgggaagaag tggcagactt atcgaggaaa ttccactgga 4620

accttaatgg tcttctttgg caatgtggat tcatctggga taaaacacaa tatttttaac 4680

cctccaatta ttgctcgata catccgtttg cacccaactc attatagcat tcgcagcact 4740

cttcgcatgg agttgatggg ctgtgattta aatagttgca gcatgccatt gggaatggag 4800

agtaaagcaa tatcagatgc acagattact gcttcatcct actttaccaa tatgtttgcc 4860

acctggtctc cttcaaaagc tcgacttcac ctccaaggga ggagtaatgc ctggagacct 4920

caggtgaata atccaaaaga gtggctgcaa gtggacttcc agaagacaat gaaagtcaca 4980

ggagtaacta ctcagggagt aaaatctctg cttaccagca tgtatgtgaa ggagttcctc 5040

atctccagca gtcaagatgg ccatcagtgg actctctttt ttcagaatgg caaagtaaag 5100

gtttttcagg gaaatcaaga ctccttcaca cctgtggtga actctctaga cccaccgtta 5160

ctgactcgct accttcgaat tcacccccag agttgggtgc accagattgc cctgaggatg 5220

gaggttctgg gctgcgaggc acaggacctc tacgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc 5280

ccagctccag aactcctggg cggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac 5340

accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 5400

gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 5460

aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 5520

caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 5580

gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 5640

accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 5700

aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 5760

aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 5820

ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 5880

gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 5937

<210> 156

<211> 6387

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 263 (с тройной мутацией IHH)

<400> 156

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aggcgcgcca 120

acatcagaga gcgccacccc tgaaagtggt cccgggagcg agccagccac atctgggtcg 180

gaaacgccag gcacaagtga gtctgcaact cccgagtccg gacctggctc cgagcctgcc 240

actagcggct ccgagactcc gggaacttcc gagagcgcta caccagaaag cggacccgga 300

accagtaccg aacctagcga gggctctgct ccgggcagcc cagccggctc tcctacatcc 360

acggaggagg gcacttccga atccgccacc ccggagtcag ggccaggatc tgaacccgct 420

acctcaggca gtgagacgcc aggaacgagc gagtccgcta caccggagag tgggccaggg 480

agccctgctg gatctcctac gtccactgag gaagggtcac cagcgggctc gcccaccagc 540

actgaagaag gtgcctcgag cagtgatctc ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct 600

cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt 660

gtagaattca cggatcacct tttcaacatc gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg 720

ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat gatacagtgg tcattacact taagaacatg 780

gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga 840

gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg gagaaagaag atgataaagt cttccctggt 900

ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca 960

ctgtgcctta cctactcata tctttctcat gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc 1020

ctcattggag ccctactagt atgtagagaa gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc 1080

ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa 1140

acaaagaact ccttgatgca ggatagggat gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg 1200

cacacagtca atggttatgt aaacaggtct ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa 1260

tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc accactcctg aagtgcactc aatattcctc 1320

gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat cgccaggcta gcttggaaat ctcgccaata 1380

actttcctta ctgctcaaac actcttgatg gaccttggac agtttctact gttttgtcat 1440

atctcttccc accaacatga tggcatggaa gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag 1500

gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa gaagcggaag actatgatga tgatcttact 1560

gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt 1620

cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag 1680

gactgggact atgctccctt agtcctcgcc cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat 1740

ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac 1800

acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct attcagcatg aatcaggaat cttgggacct 1860

ttactttatg gggaagttgg agacacactg ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga 1920

ccatataaca tctaccctca cggaatcact gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta 1980

ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt ccaattctgc caggagaaat attcaaatat 2040

aaatggacag tgactgtaga agatgggcca actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc 2100

tattactcta gtttcgttaa tatggagaga gatctagctt caggactcat tggccctctc 2160

ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa agaggaaacc agataatgtc agacaagagg 2220

aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag aaccgaagct ggtacctcac agagaatata 2280

caacgctttc tccccaatcc agctggagtg cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc 2340

aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg 2400

catgaggtgg catactggta cattctaagc attggagcac agactgactt cctttctgtc 2460

ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa atggtctatg aagacacact caccctattc 2520

ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg atggaaaacc caggtctatg gattctgggg 2580

tgccacaact cagactttcg gaacagaggc atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt 2640

gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac agttatgaag atatttcagc atacttgctg 2700

agtaaaaaca atgccattga accaagaagc ttctctcaaa acggcgcgcc aggtacctca 2760

gagtctgcta cccccgagtc agggccagga tcagagccag ccacctccgg gtctgagaca 2820

cccgggactt ccgagagtgc cacccctgag tccggacccg ggtccgagcc cgccacttcc 2880

ggctccgaaa ctcccggcac aagcgagagc gctaccccag agtcaggacc aggaacatct 2940

acagagccct ctgaaggctc cgctccaggg tccccagccg gcagtcccac tagcaccgag 3000

gagggaacct ctgaaagcgc cacacccgaa tcagggccag ggtctgagcc tgctaccagc 3060

ggcagcgaga caccaggcac ctctgagtcc gccacaccag agtccggacc cggatctccc 3120

gctgggagcc ccacctccac tgaggaggga tctcctgctg gctctccaac atctactgag 3180

gaaggtacct caaccgagcc atccgaggga tcagctcccg gcacctcaga gtcggcaacc 3240

ccggagtctg gacccggaac ttccgaaagt gccacaccag agtccggtcc cgggacttca 3300

gaatcagcaa cacccgagtc cggccctggg tctgaacccg ccacaagtgg tagtgagaca 3360

ccaggatcag aacctgctac ctcagggtca gagacacccg gatctccggc aggctcacca 3420

acctccactg aggagggcac cagcacagaa ccaagcgagg gctccgcacc cggaacaagc 3480

actgaaccca gtgagggttc agcacccggc tctgagccgg ccacaagtgg cagtgagaca 3540

cccggcactt cagagagtgc cacccccgag agtggcccag gcactagtac cgagccctct 3600

gaaggcagtg cgccagcctc gagcccacca gtcttgaaac gccatcaagc tgaaataact 3660

cgtactactc ttcagtcaga tcaagaggaa atcgattatg atgataccat atcagttgaa 3720

atgaagaagg aagattttga catttatgat gaggatgaaa atcagagccc ccgcagcttt 3780

caaaagaaaa cacgacacta ttttattgct gcagtggaga ggctctggga ttatgggatg 3840

agtagctccc cacatgttct aagaaacagg gctcagagtg gcagtgtccc tcagttcaag 3900

aaagttgttt tccaggaatt tactgatggc tcctttactc agcccttata ccgtggagaa 3960

ctaaatgaac atttgggact cctggggcca tatataagag cagaagttga agataatatc 4020

atggtaactt tcagaaatca ggcctctcgt ccctattcct tctattctag ccttatttct 4080

tatgaggaag atcagaggca aggagcagaa cctagaaaaa actttgtcaa gcctaatgaa 4140

accaaaactt acttttggaa agtgcaacat catatggcac ccactaaaga tgagtttgac 4200

tgcaaagcct gggcttattt ctctgatgtt gacctggaaa aagatgtgca ctcaggcctg 4260

attggacccc ttctggtctg ccacactaac acactgaacc ctgctcatgg gagacaagtg 4320

acagtacagg aatttgctct gtttttcacc atctttgatg agaccaaaag ctggtacttc 4380

actgaaaata tggaaagaaa ctgcagggct ccctgcaata tccagatgga agatcccact 4440

tttaaagaga attatcgctt ccatgcaatc aatggctaca taatggatac actacctggc 4500

ttagtaatgg ctcaggatca aaggattcga tggtatctgc tcagcatggg cagcaatgaa 4560

aacatccatt ctattcattt cagtggacat gtgttcactg tacgaaaaaa agaggagtat 4620

aaaatggcac tgtacaatct ctatccaggt gtttttgaga cagtggaaat gttaccatcc 4680

aaagctggaa tttggcgggt ggaatgcctt attggcgagc atctacatgc tgggatgagc 4740

acactttttc tggtgtacag caataagtgt cagactcccc tgggaatggc ttctggacac 4800

attagagatt ttcagattac agcttcagga caatatggac agtgggcccc aaagctggcc 4860

agacttcatt attccggatc aatcaatgcc tggagcacca aggagccctt ttcttggatc 4920

aaggtggatc tgttggcacc aatgattatt cacggcatca agacccaggg tgcccgtcag 4980

aagttctcca gcctctacat ctctcagttt atcatcatgt atagtcttga tgggaagaag 5040

tggcagactt atcgaggaaa ttccactgga accttaatgg tcttctttgg caatgtggat 5100

tcatctggga taaaacacaa tatttttaac cctccaatta ttgctcgata catccgtttg 5160

cacccaactc attatagcat tcgcagcact cttcgcatgg agttgatggg ctgtgattta 5220

aatagttgca gcatgccatt gggaatggag agtaaagcaa tatcagatgc acagattact 5280

gcttcatcct actttaccaa tatgtttgcc acctggtctc cttcaaaagc tcgacttcac 5340

ctccaaggga ggagtaatgc ctggagacct caggtgaata atccaaaaga gtggctgcaa 5400

gtggacttcc agaagacaat gaaagtcaca ggagtaacta ctcagggagt aaaatctctg 5460

cttaccagca tgtatgtgaa ggagttcctc atctccagca gtcaagatgg ccatcagtgg 5520

actctctttt ttcagaatgg caaagtaaag gtttttcagg gaaatcaaga ctccttcaca 5580

cctgtggtga actctctaga cccaccgtta ctgactcgct accttcgaat tcacccccag 5640

agttgggtgc accagattgc cctgaggatg gaggttctgg gctgcgaggc acaggacctc 5700

tacgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagctccag aactcctggg cggaccgtca 5760

gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatgg cctcccggac ccctgaggtc 5820

acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 5880

gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 5940

taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg gcccaggact ggctgaatgg caaggagtac 6000

aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 6060

aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc 6120

aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 6180

gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac 6240

tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 6300

gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaacgccta cacgcagaag 6360

agcctctccc tgtctccggg taaatga 6387

<210> 157

<211> 2128

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 263 (с тройной мутацией IHH)

<400> 157

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

35 40 45

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

50 55 60

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

65 70 75 80

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

85 90 95

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

100 105 110

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser

115 120 125

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

130 135 140

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

145 150 155 160

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

165 170 175

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Ser Asp Leu Gly Glu

180 185 190

Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro

195 200 205

Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr

210 215 220

Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu

225 230 235 240

Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr

245 250 255

Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val

260 265 270

Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser

275 280 285

Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr

290 295 300

Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro

305 310 315 320

Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp

325 330 335

Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser

340 345 350

Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe

355 360 365

Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser

370 375 380

Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met

385 390 395 400

His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly

405 410 415

Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr

420 425 430

Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg

435 440 445

Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr

450 455 460

Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His

465 470 475 480

Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp

485 490 495

Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala

500 505 510

Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg

515 520 525

Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala

530 535 540

Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu

545 550 555 560

Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr

565 570 575

Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr

580 585 590

Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg

595 600 605

Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly

610 615 620

Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg

625 630 635 640

Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr

645 650 655

Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile

660 665 670

Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp

675 680 685

Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser

690 695 700

Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu

705 710 715 720

Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met

725 730 735

Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg

740 745 750

Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala

755 760 765

Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His

770 775 780

Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu

785 790 795 800

His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp

805 810 815

Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val

820 825 830

Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe

835 840 845

Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser

850 855 860

Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys

865 870 875 880

Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser

885 890 895

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

900 905 910

Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

915 920 925

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

930 935 940

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

945 950 955 960

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

965 970 975

Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro

980 985 990

Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

995 1000 1005

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

1010 1015 1020

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1025 1030 1035

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

1040 1045 1050

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

1055 1060 1065

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1070 1075 1080

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

1085 1090 1095

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

1100 1105 1110

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1115 1120 1125

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr

1130 1135 1140

Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

1145 1150 1155

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

1160 1165 1170

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

1175 1180 1185

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1190 1195 1200

Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

1205 1210 1215

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1220 1225 1230

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile

1235 1240 1245

Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

1250 1255 1260

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

1265 1270 1275

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser

1280 1285 1290

Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

1295 1300 1305

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu

1310 1315 1320

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp

1325 1330 1335

Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser

1340 1345 1350

Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

1355 1360 1365

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr

1370 1375 1380

Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu

1385 1390 1395

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu

1400 1405 1410

Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His

1415 1420 1425

Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln

1430 1435 1440

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp

1445 1450 1455

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn

1460 1465 1470

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His

1475 1480 1485

Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met

1490 1495 1500

Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser

1505 1510 1515

Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr

1520 1525 1530

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr

1535 1540 1545

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly

1550 1555 1560

Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly

1565 1570 1575

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro

1580 1585 1590

Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala

1595 1600 1605

Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His

1610 1615 1620

Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser

1625 1630 1635

Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile

1640 1645 1650

Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser

1655 1660 1665

Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr

1670 1675 1680

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn

1685 1690 1695

Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

1700 1705 1710

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg

1715 1720 1725

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys

1730 1735 1740

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln

1745 1750 1755

Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser

1760 1765 1770

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp

1775 1780 1785

Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe

1790 1795 1800

Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys

1805 1810 1815

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser

1820 1825 1830

Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys

1835 1840 1845

Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val

1850 1855 1860

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His

1865 1870 1875

Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu

1880 1885 1890

Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

1895 1900 1905

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

1910 1915 1920

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ala Ser Arg Thr Pro

1925 1930 1935

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

1940 1945 1950

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

1955 1960 1965

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

1970 1975 1980

Val Ser Val Leu Thr Val Leu Ala Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

1985 1990 1995

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

2000 2005 2010

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

2015 2020 2025

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln

2030 2035 2040

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

2045 2050 2055

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

2060 2065 2070

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

2075 2080 2085

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

2090 2095 2100

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr

2105 2110 2115

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

2120 2125

<210> 158

<211> 5505

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 282

<400> 158

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcta gcttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttctctcaaa acggcgcgcc aacatcagag agcgccaccc ctgaaagtgg tcccgggagc 2340

gagccagcca catctgggtc ggaaacgcca ggcacaagtg agtctgcaac tcccgagtcc 2400

ggacctggct ccgagcctgc cactagcggc tccgagactc cgggaacttc cgagagcgct 2460

acaccagaaa gcggacccgg aaccagtacc gaacctagcg agggctctgc tccgggcagc 2520

ccagccggct ctcctacatc cacggaggag ggcacttccg aatccgccac cccggagtca 2580

gggccaggat ctgaacccgc tacctcaggc agtgagacgc caggaacgag cgagtccgct 2640

acaccggaga gtgggccagg gagccctgct ggatctccta cgtccactga ggaagggtca 2700

ccagcgggct cgcccaccag cactgaagaa ggtgcctcga gcccaccagt cttgaaacgc 2760

catcaagctg aaataactcg tactactctt cagtcagatc aagaggaaat cgattatgat 2820

gataccatat cagttgaaat gaagaaggaa gattttgaca tttatgatga ggatgaaaat 2880

cagagccccc gcagctttca aaagaaaaca cgacactatt ttattgctgc agtggagagg 2940

ctctgggatt atgggatgag tagctcccca catgttctaa gaaacagggc tcagagtggc 3000

agtgtccctc agttcaagaa agttgttttc caggaattta ctgatggctc ctttactcag 3060

cccttatacc gtggagaact aaatgaacat ttgggactcc tggggccata tataagagca 3120

gaagttgaag ataatatcat ggtaactttc agaaatcagg cctctcgtcc ctattccttc 3180

tattctagcc ttatttctta tgaggaagat cagaggcaag gagcagaacc tagaaaaaac 3240

tttgtcaagc ctaatgaaac caaaacttac ttttggaaag tgcaacatca tatggcaccc 3300

actaaagatg agtttgactg caaagcctgg gcttatttct ctgatgttga cctggaaaaa 3360

gatgtgcact caggcctgat tggacccctt ctggtctgcc acactaacac actgaaccct 3420

gctcatggga gacaagtgac agtacaggaa tttgctctgt ttttcaccat ctttgatgag 3480

accaaaagct ggtacttcac tgaaaatatg gaaagaaact gcagggctcc ctgcaatatc 3540

cagatggaag atcccacttt taaagagaat tatcgcttcc atgcaatcaa tggctacata 3600

atggatacac tacctggctt agtaatggct caggatcaaa ggattcgatg gtatctgctc 3660

agcatgggca gcaatgaaaa catccattct attcatttca gtggacatgt gttcactgta 3720

cgaaaaaaag aggagtataa aatggcactg tacaatctct atccaggtgt ttttgagaca 3780

gtggaaatgt taccatccaa agctggaatt tggcgggtgg aatgccttat tggcgagcat 3840

ctacatgctg ggatgagcac actttttctg gtgtacagca ataagtgtca gactcccctg 3900

ggaatggctt ctggacacat tagagatttt cagattacag cttcaggaca atatggacag 3960

tgggccccaa agctggccag acttcattat tccggatcaa tcaatgcctg gagcaccaag 4020

gagccctttt cttggatcaa ggtggatctg ttggcaccaa tgattattca cggcatcaag 4080

acccagggtg cccgtcagaa gttctccagc ctctacatct ctcagtttat catcatgtat 4140

agtcttgatg ggaagaagtg gcagacttat cgaggaaatt ccactggaac cttaatggtc 4200

ttctttggca atgtggattc atctgggata aaacacaata tttttaaccc tccaattatt 4260

gctcgataca tccgtttgca cccaactcat tatagcattc gcagcactct tcgcatggag 4320

ttgatgggct gtgatttaaa tagttgcagc atgccattgg gaatggagag taaagcaata 4380

tcagatgcac agattactgc ttcatcctac tttaccaata tgtttgccac ctggtctcct 4440

tcaaaagctc gacttcacct ccaagggagg agtaatgcct ggagacctca ggtgaataat 4500

ccaaaagagt ggctgcaagt ggacttccag aagacaatga aagtcacagg agtaactact 4560

cagggagtaa aatctctgct taccagcatg tatgtgaagg agttcctcat ctccagcagt 4620

caagatggcc atcagtggac tctctttttt cagaatggca aagtaaaggt ttttcaggga 4680

aatcaagact ccttcacacc tgtggtgaac tctctagacc caccgttact gactcgctac 4740

cttcgaattc acccccagag ttgggtgcac cagattgccc tgaggatgga ggttctgggc 4800

tgcgaggcac aggacctcta cgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agctccagaa 4860

ctcctgggcg gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc 4920

tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc 4980

aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag 5040

gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg 5100

ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag 5160

aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca 5220

tcccgggatg agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat 5280

cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc 5340

acgcctcccg tgttggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac 5400

aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac 5460

aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aatga 5505

<210> 159

<211> 1834

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 282

<400> 159

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Thr

755 760 765

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr

770 775 780

Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

785 790 795 800

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

805 810 815

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

820 825 830

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr

835 840 845

Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

850 855 860

Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

865 870 875 880

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr

885 890 895

Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala

900 905 910

Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu Ile Thr Arg Thr

915 920 925

Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser

930 935 940

Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn

945 950 955 960

Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala

965 970 975

Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val

980 985 990

Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val

995 1000 1005

Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr

1010 1015 1020

Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile

1025 1030 1035

Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln

1040 1045 1050

Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu

1055 1060 1065

Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys

1070 1075 1080

Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met

1085 1090 1095

Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe

1100 1105 1110

Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly

1115 1120 1125

Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly

1130 1135 1140

Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

1145 1150 1155

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1160 1165 1170

Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1175 1180 1185

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1190 1195 1200

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1205 1210 1215

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1220 1225 1230

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1235 1240 1245

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1250 1255 1260

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1265 1270 1275

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1280 1285 1290

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1295 1300 1305

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1310 1315 1320

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1325 1330 1335

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1340 1345 1350

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1355 1360 1365

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1370 1375 1380

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1385 1390 1395

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1400 1405 1410

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1415 1420 1425

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1430 1435 1440

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1445 1450 1455

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1460 1465 1470

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1475 1480 1485

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1490 1495 1500

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1505 1510 1515

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1520 1525 1530

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1535 1540 1545

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1550 1555 1560

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1565 1570 1575

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1580 1585 1590

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1595 1600 1605

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1610 1615 1620

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1625 1630 1635

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1640 1645 1650

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1655 1660 1665

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1670 1675 1680

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1685 1690 1695

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

1700 1705 1710

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

1715 1720 1725

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

1730 1735 1740

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

1745 1750 1755

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

1760 1765 1770

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

1775 1780 1785

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

1790 1795 1800

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

1805 1810 1815

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1820 1825 1830

Lys

<210> 160

<211> 5937

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 283 (FVIII 169 с тройной мутацией IHH)

<400> 160

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcta gcttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttctctcaaa acggcgcgcc aggtacctca gagtctgcta cccccgagtc agggccagga 2340

tcagagccag ccacctccgg gtctgagaca cccgggactt ccgagagtgc cacccctgag 2400

tccggacccg ggtccgagcc cgccacttcc ggctccgaaa ctcccggcac aagcgagagc 2460

gctaccccag agtcaggacc aggaacatct acagagccct ctgaaggctc cgctccaggg 2520

tccccagccg gcagtcccac tagcaccgag gagggaacct ctgaaagcgc cacacccgaa 2580

tcagggccag ggtctgagcc tgctaccagc ggcagcgaga caccaggcac ctctgagtcc 2640

gccacaccag agtccggacc cggatctccc gctgggagcc ccacctccac tgaggaggga 2700

tctcctgctg gctctccaac atctactgag gaaggtacct caaccgagcc atccgaggga 2760

tcagctcccg gcacctcaga gtcggcaacc ccggagtctg gacccggaac ttccgaaagt 2820

gccacaccag agtccggtcc cgggacttca gaatcagcaa cacccgagtc cggccctggg 2880

tctgaacccg ccacaagtgg tagtgagaca ccaggatcag aacctgctac ctcagggtca 2940

gagacacccg gatctccggc aggctcacca acctccactg aggagggcac cagcacagaa 3000

ccaagcgagg gctccgcacc cggaacaagc actgaaccca gtgagggttc agcacccggc 3060

tctgagccgg ccacaagtgg cagtgagaca cccggcactt cagagagtgc cacccccgag 3120

agtggcccag gcactagtac cgagccctct gaaggcagtg cgccagcctc gagcccacca 3180

gtcttgaaac gccatcaagc tgaaataact cgtactactc ttcagtcaga tcaagaggaa 3240

atcgattatg atgataccat atcagttgaa atgaagaagg aagattttga catttatgat 3300

gaggatgaaa atcagagccc ccgcagcttt caaaagaaaa cacgacacta ttttattgct 3360

gcagtggaga ggctctggga ttatgggatg agtagctccc cacatgttct aagaaacagg 3420

gctcagagtg gcagtgtccc tcagttcaag aaagttgttt tccaggaatt tactgatggc 3480

tcctttactc agcccttata ccgtggagaa ctaaatgaac atttgggact cctggggcca 3540

tatataagag cagaagttga agataatatc atggtaactt tcagaaatca ggcctctcgt 3600

ccctattcct tctattctag ccttatttct tatgaggaag atcagaggca aggagcagaa 3660

cctagaaaaa actttgtcaa gcctaatgaa accaaaactt acttttggaa agtgcaacat 3720

catatggcac ccactaaaga tgagtttgac tgcaaagcct gggcttattt ctctgatgtt 3780

gacctggaaa aagatgtgca ctcaggcctg attggacccc ttctggtctg ccacactaac 3840

acactgaacc ctgctcatgg gagacaagtg acagtacagg aatttgctct gtttttcacc 3900

atctttgatg agaccaaaag ctggtacttc actgaaaata tggaaagaaa ctgcagggct 3960

ccctgcaata tccagatgga agatcccact tttaaagaga attatcgctt ccatgcaatc 4020

aatggctaca taatggatac actacctggc ttagtaatgg ctcaggatca aaggattcga 4080

tggtatctgc tcagcatggg cagcaatgaa aacatccatt ctattcattt cagtggacat 4140

gtgttcactg tacgaaaaaa agaggagtat aaaatggcac tgtacaatct ctatccaggt 4200

gtttttgaga cagtggaaat gttaccatcc aaagctggaa tttggcgggt ggaatgcctt 4260

attggcgagc atctacatgc tgggatgagc acactttttc tggtgtacag caataagtgt 4320

cagactcccc tgggaatggc ttctggacac attagagatt ttcagattac agcttcagga 4380

caatatggac agtgggcccc aaagctggcc agacttcatt attccggatc aatcaatgcc 4440

tggagcacca aggagccctt ttcttggatc aaggtggatc tgttggcacc aatgattatt 4500

cacggcatca agacccaggg tgcccgtcag aagttctcca gcctctacat ctctcagttt 4560

atcatcatgt atagtcttga tgggaagaag tggcagactt atcgaggaaa ttccactgga 4620

accttaatgg tcttctttgg caatgtggat tcatctggga taaaacacaa tatttttaac 4680

cctccaatta ttgctcgata catccgtttg cacccaactc attatagcat tcgcagcact 4740

cttcgcatgg agttgatggg ctgtgattta aatagttgca gcatgccatt gggaatggag 4800

agtaaagcaa tatcagatgc acagattact gcttcatcct actttaccaa tatgtttgcc 4860

acctggtctc cttcaaaagc tcgacttcac ctccaaggga ggagtaatgc ctggagacct 4920

caggtgaata atccaaaaga gtggctgcaa gtggacttcc agaagacaat gaaagtcaca 4980

ggagtaacta ctcagggagt aaaatctctg cttaccagca tgtatgtgaa ggagttcctc 5040

atctccagca gtcaagatgg ccatcagtgg actctctttt ttcagaatgg caaagtaaag 5100

gtttttcagg gaaatcaaga ctccttcaca cctgtggtga actctctaga cccaccgtta 5160

ctgactcgct accttcgaat tcacccccag agttgggtgc accagattgc cctgaggatg 5220

gaggttctgg gctgcgaggc acaggacctc tacgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc 5280

ccagctccag aactcctggg cggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac 5340

accctcatgg cctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 5400

gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 5460

aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 5520

gcccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 5580

gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 5640

accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 5700

aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 5760

aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 5820

ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 5880

gaggctctgc acaacgccta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 5937

<210> 161

<211> 1978

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 283 (FVIII 169 с тройной мутацией IHH)

<400> 161

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly

755 760 765

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

770 775 780

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

785 790 795 800

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

805 810 815

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

820 825 830

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

835 840 845

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

850 855 860

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser

865 870 875 880

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

885 890 895

Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly

900 905 910

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser

915 920 925

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

930 935 940

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

945 950 955 960

Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala

965 970 975

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

980 985 990

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

995 1000 1005

Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

1010 1015 1020

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

1025 1030 1035

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

1040 1045 1050

Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gln Ala Glu

1055 1060 1065

Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1070 1075 1080

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile

1085 1090 1095

Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys

1100 1105 1110

Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr

1115 1120 1125

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser

1130 1135 1140

Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

1145 1150 1155

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu

1160 1165 1170

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp

1175 1180 1185

Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser

1190 1195 1200

Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly

1205 1210 1215

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr

1220 1225 1230

Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu

1235 1240 1245

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu

1250 1255 1260

Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His

1265 1270 1275

Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln

1280 1285 1290

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp

1295 1300 1305

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn

1310 1315 1320

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His

1325 1330 1335

Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met

1340 1345 1350

Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser

1355 1360 1365

Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr

1370 1375 1380

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr

1385 1390 1395

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly

1400 1405 1410

Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly

1415 1420 1425

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro

1430 1435 1440

Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala

1445 1450 1455

Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His

1460 1465 1470

Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser

1475 1480 1485

Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile

1490 1495 1500

Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser

1505 1510 1515

Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr

1520 1525 1530

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn

1535 1540 1545

Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

1550 1555 1560

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg

1565 1570 1575

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys

1580 1585 1590

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln

1595 1600 1605

Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser

1610 1615 1620

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp

1625 1630 1635

Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe

1640 1645 1650

Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys

1655 1660 1665

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser

1670 1675 1680

Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys

1685 1690 1695

Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val

1700 1705 1710

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His

1715 1720 1725

Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu

1730 1735 1740

Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

1745 1750 1755

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

1760 1765 1770

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ala Ser Arg Thr Pro

1775 1780 1785

Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu

1790 1795 1800

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala

1805 1810 1815

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

1820 1825 1830

Val Ser Val Leu Thr Val Leu Ala Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys

1835 1840 1845

Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

1850 1855 1860

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

1865 1870 1875

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln

1880 1885 1890

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

1895 1900 1905

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

1910 1915 1920

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr

1925 1930 1935

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val

1940 1945 1950

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Ala Tyr Thr

1955 1960 1965

Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1970 1975

<210> 162

<211> 5055

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 010 (двухцепочечный FVIIIFc)

<400> 162

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcgt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttctctcaaa acccaccagt cttgaaacgc catcaacggg aaataactcg tactactctt 2340

cagtcagatc aagaggaaat tgactatgat gataccatat cagttgaaat gaagaaggaa 2400

gattttgaca tttatgatga ggatgaaaat cagagccccc gcagctttca aaagaaaaca 2460

cgacactatt ttattgctgc agtggagagg ctctgggatt atgggatgag tagctcccca 2520

catgttctaa gaaacagggc tcagagtggc agtgtccctc agttcaagaa agttgttttc 2580

caggaattta ctgatggctc ctttactcag cccttatacc gtggagaact aaatgaacat 2640

ttgggactcc tggggccata tataagagca gaagttgaag ataatatcat ggtaactttc 2700

agaaatcagg cctctcgtcc ctattccttc tattctagcc ttatttctta tgaggaagat 2760

cagaggcaag gagcagaacc tagaaaaaac tttgtcaagc ctaatgaaac caaaacttac 2820

ttttggaaag tgcaacatca tatggcaccc actaaagatg agtttgactg caaagcctgg 2880

gcttatttct ctgatgttga cctggaaaaa gatgtgcact caggcctgat tggacccctt 2940

ctggtctgcc acactaacac actgaaccct gctcatggga gacaagtgac agtacaggaa 3000

tttgctctgt ttttcaccat ctttgatgag accaaaagct ggtacttcac tgaaaatatg 3060

gaaagaaact gcagggctcc ctgcaatatc cagatggaag atcccacttt taaagagaat 3120

tatcgcttcc atgcaatcaa tggctacata atggatacac tacctggctt agtaatggct 3180

caggatcaaa ggattcgatg gtatctgctc agcatgggca gcaatgaaaa catccattct 3240

attcatttca gtggacatgt gttcactgta cgaaaaaaag aggagtataa aatggcactg 3300

tacaatctct atccaggtgt ttttgagaca gtggaaatgt taccatccaa agctggaatt 3360

tggcgggtgg aatgccttat tggcgagcat ctacatgctg ggatgagcac actttttctg 3420

gtgtacagca ataagtgtca gactcccctg ggaatggctt ctggacacat tagagatttt 3480

cagattacag cttcaggaca atatggacag tgggccccaa agctggccag acttcattat 3540

tccggatcaa tcaatgcctg gagcaccaag gagccctttt cttggatcaa ggtggatctg 3600

ttggcaccaa tgattattca cggcatcaag acccagggtg cccgtcagaa gttctccagc 3660

ctctacatct ctcagtttat catcatgtat agtcttgatg ggaagaagtg gcagacttat 3720

cgaggaaatt ccactggaac cttaatggtc ttctttggca atgtggattc atctgggata 3780

aaacacaata tttttaaccc tccaattatt gctcgataca tccgtttgca cccaactcat 3840

tatagcattc gcagcactct tcgcatggag ttgatgggct gtgatttaaa tagttgcagc 3900

atgccattgg gaatggagag taaagcaata tcagatgcac agattactgc ttcatcctac 3960

tttaccaata tgtttgccac ctggtctcct tcaaaagctc gacttcacct ccaagggagg 4020

agtaatgcct ggagacctca ggtgaataat ccaaaagagt ggctgcaagt ggacttccag 4080

aagacaatga aagtcacagg agtaactact cagggagtaa aatctctgct taccagcatg 4140

tatgtgaagg agttcctcat ctccagcagt caagatggcc atcagtggac tctctttttt 4200

cagaatggca aagtaaaggt ttttcaggga aatcaagact ccttcacacc tgtggtgaac 4260

tctctagacc caccgttact gactcgctac cttcgaattc acccccagag ttgggtgcac 4320

cagattgccc tgaggatgga ggttctgggc tgcgaggcac aggacctcta cgacaaaact 4380

cacacatgcc caccgtgccc agctccagaa ctcctgggcg gaccgtcagt cttcctcttc 4440

cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg 4500

gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag 4560

gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc 4620

agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc 4680

tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc 4740

cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgggatg agctgaccaa gaaccaggtc 4800

agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc 4860

aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgttggactc cgacggctcc 4920

ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc 4980

tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg 5040

tctccgggta aatga 5055

<210> 163

<211> 1684

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 010 (двухцепочечный FVIIIFc)

<400> 163

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Pro Pro Val Leu

755 760 765

Lys Arg His Gln Arg Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln

770 775 780

Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu

785 790 795 800

Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe

805 810 815

Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp

820 825 830

Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln

835 840 845

Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr

850 855 860

Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His

865 870 875 880

Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile

885 890 895

Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser

900 905 910

Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg

915 920 925

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val

930 935 940

Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp

945 950 955 960

Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu

965 970 975

Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His

980 985 990

Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe

995 1000 1005

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn

1010 1015 1020

Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys

1025 1030 1035

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr

1040 1045 1050

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr

1055 1060 1065

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe

1070 1075 1080

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met

1085 1090 1095

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met

1100 1105 1110

Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly

1115 1120 1125

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser

1130 1135 1140

Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg

1145 1150 1155

Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

1160 1165 1170

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser

1175 1180 1185

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro

1190 1195 1200

Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe

1205 1210 1215

Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp

1220 1225 1230

Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu

1235 1240 1245

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn

1250 1255 1260

Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro

1265 1270 1275

Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly

1280 1285 1290

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys

1295 1300 1305

Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn

1310 1315 1320

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln

1325 1330 1335

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu

1340 1345 1350

Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val

1355 1360 1365

Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys

1370 1375 1380

Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu

1385 1390 1395

Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

1400 1405 1410

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr

1415 1420 1425

Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala

1430 1435 1440

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp

1445 1450 1455

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1460 1465 1470

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

1475 1480 1485

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val

1490 1495 1500

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

1505 1510 1515

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

1520 1525 1530

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln

1535 1540 1545

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys

1550 1555 1560

Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly

1565 1570 1575

Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp

1580 1585 1590

Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

1595 1600 1605

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

1610 1615 1620

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp

1625 1630 1635

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg

1640 1645 1650

Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala

1655 1660 1665

Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1670 1675 1680

Lys

<210> 164

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер, в котором последовательность может повторяться 1-10 раз

<400> 164

Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5

<210> 165

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 165

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly

1 5 10 15

Gly Gly Gly Ser

20

<210> 166

<211> 34

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Линкер

<400> 166

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Val Pro Arg Gly Ser

20 25 30

Gly Gly

<210> 167

<211> 314

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 169

<400> 167

Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

1 5 10 15

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

20 25 30

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

35 40 45

Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

50 55 60

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

65 70 75 80

Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr

85 90 95

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr

100 105 110

Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

115 120 125

Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser

130 135 140

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro

145 150 155 160

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

165 170 175

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

180 185 190

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr

195 200 205

Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

210 215 220

Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr

225 230 235 240

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

245 250 255

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

260 265 270

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

275 280 285

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Pro Pro Val

290 295 300

Leu Lys Arg His Gln Ala Glu Ile Thr Arg

305 310

<210> 168

<211> 302

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 310

<400> 168

Pro Arg Ser Phe Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

1 5 10 15

Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

20 25 30

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala

35 40 45

Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu

50 55 60

Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly

65 70 75 80

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser

85 90 95

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

100 105 110

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

115 120 125

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly

130 135 140

Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly

145 150 155 160

Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly

165 170 175

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser

180 185 190

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

195 200 205

Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

210 215 220

Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu

225 230 235 240

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly

245 250 255

Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

260 265 270

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

275 280 285

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Glu Ile Thr Arg

290 295 300

<210> 169

<211> 305

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 312

<400> 169

Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

1 5 10 15

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

20 25 30

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

35 40 45

Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

50 55 60

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

65 70 75 80

Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr

85 90 95

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr

100 105 110

Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

115 120 125

Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser

130 135 140

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro

145 150 155 160

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

165 170 175

Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

180 185 190

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr

195 200 205

Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

210 215 220

Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr

225 230 235 240

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

245 250 255

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

260 265 270

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

275 280 285

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Glu Ile Thr

290 295 300

Arg

305

<210> 170

<211> 5892

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 310 (кодирующая FVIII с полной делецией домена B,

за исключением 2 аминокислотных остатков, и XTEN AE-288, вставленным

после а. к. 742)

<400> 170

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcgt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttcggtacct cagagtctgc tacccccgag tcagggccag gatcagagcc agccacctcc 2340

gggtctgaga cacccgggac ttccgagagt gccacccctg agtccggacc cgggtccgag 2400

cccgccactt ccggctccga aactcccggc acaagcgaga gcgctacccc agagtcagga 2460

ccaggaacat ctacagagcc ctctgaaggc tccgctccag ggtccccagc cggcagtccc 2520

actagcaccg aggagggaac ctctgaaagc gccacacccg aatcagggcc agggtctgag 2580

cctgctacca gcggcagcga gacaccaggc acctctgagt ccgccacacc agagtccgga 2640

cccggatctc ccgctgggag ccccacctcc actgaggagg gatctcctgc tggctctcca 2700

acatctactg aggaaggtac ctcaaccgag ccatccgagg gatcagctcc cggcacctca 2760

gagtcggcaa ccccggagtc tggacccgga acttccgaaa gtgccacacc agagtccggt 2820

cccgggactt cagaatcagc aacacccgag tccggccctg ggtctgaacc cgccacaagt 2880

ggtagtgaga caccaggatc agaacctgct acctcagggt cagagacacc cggatctccg 2940

gcaggctcac caacctccac tgaggagggc accagcacag aaccaagcga gggctccgca 3000

cccggaacaa gcactgaacc cagtgagggt tcagcacccg gctctgagcc ggccacaagt 3060

ggcagtgaga cacccggcac ttcagagagt gccacccccg agagtggccc aggcactagt 3120

accgagccct ctgaaggcag tgcgccagcc tcgagcgaaa taactcgtac tactcttcag 3180

tcagatcaag aggaaatcga ttatgatgat accatatcag ttgaaatgaa gaaggaagat 3240

tttgacattt atgatgagga tgaaaatcag agcccccgca gctttcaaaa gaaaacacga 3300

cactatttta ttgctgcagt ggagaggctc tgggattatg ggatgagtag ctccccacat 3360

gttctaagaa acagggctca gagtggcagt gtccctcagt tcaagaaagt tgttttccag 3420

gaatttactg atggctcctt tactcagccc ttataccgtg gagaactaaa tgaacatttg 3480

ggactcctgg ggccatatat aagagcagaa gttgaagata atatcatggt aactttcaga 3540

aatcaggcct ctcgtcccta ttccttctat tctagcctta tttcttatga ggaagatcag 3600

aggcaaggag cagaacctag aaaaaacttt gtcaagccta atgaaaccaa aacttacttt 3660

tggaaagtgc aacatcatat ggcacccact aaagatgagt ttgactgcaa agcctgggct 3720

tatttctctg atgttgacct ggaaaaagat gtgcactcag gcctgattgg accccttctg 3780

gtctgccaca ctaacacact gaaccctgct catgggagac aagtgacagt acaggaattt 3840

gctctgtttt tcaccatctt tgatgagacc aaaagctggt acttcactga aaatatggaa 3900

agaaactgca gggctccctg caatatccag atggaagatc ccacttttaa agagaattat 3960

cgcttccatg caatcaatgg ctacataatg gatacactac ctggcttagt aatggctcag 4020

gatcaaagga ttcgatggta tctgctcagc atgggcagca atgaaaacat ccattctatt 4080

catttcagtg gacatgtgtt cactgtacga aaaaaagagg agtataaaat ggcactgtac 4140

aatctctatc caggtgtttt tgagacagtg gaaatgttac catccaaagc tggaatttgg 4200

cgggtggaat gccttattgg cgagcatcta catgctggga tgagcacact ttttctggtg 4260

tacagcaata agtgtcagac tcccctggga atggcttctg gacacattag agattttcag 4320

attacagctt caggacaata tggacagtgg gccccaaagc tggccagact tcattattcc 4380

ggatcaatca atgcctggag caccaaggag cccttttctt ggatcaaggt ggatctgttg 4440

gcaccaatga ttattcacgg catcaagacc cagggtgccc gtcagaagtt ctccagcctc 4500

tacatctctc agtttatcat catgtatagt cttgatggga agaagtggca gacttatcga 4560

ggaaattcca ctggaacctt aatggtcttc tttggcaatg tggattcatc tgggataaaa 4620

cacaatattt ttaaccctcc aattattgct cgatacatcc gtttgcaccc aactcattat 4680

agcattcgca gcactcttcg catggagttg atgggctgtg atttaaatag ttgcagcatg 4740

ccattgggaa tggagagtaa agcaatatca gatgcacaga ttactgcttc atcctacttt 4800

accaatatgt ttgccacctg gtctccttca aaagctcgac ttcacctcca agggaggagt 4860

aatgcctgga gacctcaggt gaataatcca aaagagtggc tgcaagtgga cttccagaag 4920

acaatgaaag tcacaggagt aactactcag ggagtaaaat ctctgcttac cagcatgtat 4980

gtgaaggagt tcctcatctc cagcagtcaa gatggccatc agtggactct cttttttcag 5040

aatggcaaag taaaggtttt tcagggaaat caagactcct tcacacctgt ggtgaactct 5100

ctagacccac cgttactgac tcgctacctt cgaattcacc cccagagttg ggtgcaccag 5160

attgccctga ggatggaggt tctgggctgc gaggcacagg acctctacga caaaactcac 5220

acatgcccac cgtgcccagc tccagaactc ctgggcggac cgtcagtctt cctcttcccc 5280

ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg 5340

gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg 5400

cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc 5460

gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 5520

aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga 5580

gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc 5640

ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 5700

gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgt tggactccga cggctccttc 5760

ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca 5820

tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct 5880

ccgggtaaat ga 5892

<210> 171

<211> 1944

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 310 (FVIII с полной делецией домена B, за исключением

2 аминокислотных остатков, и XTEN AE-288, вставленным после а. к. 742)

<400> 171

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

740 745 750

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

755 760 765

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr

770 775 780

Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

785 790 795 800

Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser

805 810 815

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala

820 825 830

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

835 840 845

Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

850 855 860

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser

865 870 875 880

Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

885 890 895

Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

900 905 910

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala

915 920 925

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu

930 935 940

Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser

945 950 955 960

Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro

965 970 975

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser

980 985 990

Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr

995 1000 1005

Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu

1010 1015 1020

Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Glu Ile Thr Arg Thr

1025 1030 1035

Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile

1040 1045 1050

Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp

1055 1060 1065

Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr

1070 1075 1080

Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser

1085 1090 1095

Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro

1100 1105 1110

Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe

1115 1120 1125

Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu

1130 1135 1140

Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val

1145 1150 1155

Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser

1160 1165 1170

Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg

1175 1180 1185

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys

1190 1195 1200

Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys

1205 1210 1215

Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His

1220 1225 1230

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu

1235 1240 1245

Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu

1250 1255 1260

Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu

1265 1270 1275

Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu

1280 1285 1290

Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile Asn Gly

1295 1300 1305

Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln Asp Gln

1310 1315 1320

Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile

1325 1330 1335

His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys

1340 1345 1350

Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe

1355 1360 1365

Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val

1370 1375 1380

Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu

1385 1390 1395

Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala

1400 1405 1410

Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr

1415 1420 1425

Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser

1430 1435 1440

Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val

1445 1450 1455

Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly

1460 1465 1470

Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile

1475 1480 1485

Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn

1490 1495 1500

Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser

1505 1510 1515

Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr

1520 1525 1530

Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg

1535 1540 1545

Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu

1550 1555 1560

Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser

1565 1570 1575

Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala

1580 1585 1590

Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val

1595 1600 1605

Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met

1610 1615 1620

Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr

1625 1630 1635

Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly

1640 1645 1650

His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe

1655 1660 1665

Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp

1670 1675 1680

Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp

1685 1690 1695

Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala

1700 1705 1710

Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala

1715 1720 1725

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys

1730 1735 1740

Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys

1745 1750 1755

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn

1760 1765 1770

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

1775 1780 1785

Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

1790 1795 1800

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys

1805 1810 1815

Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile

1820 1825 1830

Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu

1835 1840 1845

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

1850 1855 1860

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp

1865 1870 1875

Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

1880 1885 1890

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

1895 1900 1905

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser

1910 1915 1920

Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

1925 1930 1935

Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1940

<210> 172

<211> 5900

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN FVIII 312 (FVIII с полной делецией домена B, за исключением

5 аминокислотных остатков, и XTEN AE-288, вставленным после а. к. 745 –

вариант B5 FVIII)

<400> 172

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcgt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttctctcaaa acggtacctc agagtctgct acccccgagt cagggccagg atcagagcca 2340

gccacctccg ggtctgagac acccgggact tccgagagtg ccacccctga gtccggaccc 2400

gggtccgagc ccgccacttc cggctccgaa actcccggca caagcgagag cgctacccca 2460

gagtcaggac caggaacatc tacagagccc tctgaaggct ccgctccagg gtccccagcc 2520

ggcagtccca ctagcaccga ggagggaacc tctgaaagcg ccacacccga atcagggcca 2580

gggtctgagc ctgctaccag cggcagcgag acaccaggca cctctgagtc cgccacacca 2640

gagtccggac ccggatctcc cgctgggagc cccacctcca ctgaggaggg atctcctgct 2700

ggctctccaa catctactga ggaaggtacc tcaaccgagc catccgaggg atcagctccc 2760

ggcacctcag agtcggcaac cccggagtct ggacccggaa cttccgaaag tgccacacca 2820

gagtccggtc ccgggacttc agaatcagca acacccgagt ccggccctgg gtctgaaccc 2880

gccacaagtg gtagtgagac accaggatca gaacctgcta cctcagggtc agagacaccc 2940

ggatctccgg caggctcacc aacctccact gaggagggca ccagcacaga accaagcgag 3000

ggctccgcac ccggaacaag cactgaaccc agtgagggtt cagcacccgg ctctgagccg 3060

gccacaagtg gcagtgagac acccggcact tcagagagtg ccacccccga gagtggccca 3120

ggcactagta ccgagccctc tgaaggcagt gcgccagcct cgagcgaaat aactcgtact 3180

actcttcagt cagatcaaga ggaaatcgat tatgatgata ccatatcagt tgaaatgaag 3240

aaggaagatt ttgacattta tgatgaggat gaaaatcaga gcccccgcag ctttcaaaag 3300

aaaacacgac actattttat tgctgcagtg gagaggctct gggattatgg gatgagtagc 3360

tccccacatg ttctaagaaa cagggctcag agtggcagtg tccctcagtt caagaaagtt 3420

gttttccagg aatttactga tggctccttt actcagccct tataccgtgg agaactaaat 3480

gaacatttgg gactcctggg gccatatata agagcagaag ttgaagataa tatcatggta 3540

actttcagaa atcaggcctc tcgtccctat tccttctatt ctagccttat ttcttatgag 3600

gaagatcaga ggcaaggagc agaacctaga aaaaactttg tcaagcctaa tgaaaccaaa 3660

acttactttt ggaaagtgca acatcatatg gcacccacta aagatgagtt tgactgcaaa 3720

gcctgggctt atttctctga tgttgacctg gaaaaagatg tgcactcagg cctgattgga 3780

ccccttctgg tctgccacac taacacactg aaccctgctc atgggagaca agtgacagta 3840

caggaatttg ctctgttttt caccatcttt gatgagacca aaagctggta cttcactgaa 3900

aatatggaaa gaaactgcag ggctccctgc aatatccaga tggaagatcc cacttttaaa 3960

gagaattatc gcttccatgc aatcaatggc tacataatgg atacactacc tggcttagta 4020

atggctcagg atcaaaggat tcgatggtat ctgctcagca tgggcagcaa tgaaaacatc 4080

cattctattc atttcagtgg acatgtgttc actgtacgaa aaaaagagga gtataaaatg 4140

gcactgtaca atctctatcc aggtgttttt gagacagtgg aaatgttacc atccaaagct 4200

ggaatttggc gggtggaatg ccttattggc gagcatctac atgctgggat gagcacactt 4260

tttctggtgt acagcaataa gtgtcagact cccctgggaa tggcttctgg acacattaga 4320

gattttcaga ttacagcttc aggacaatat ggacagtggg ccccaaagct ggccagactt 4380

cattattccg gatcaatcaa tgcctggagc accaaggagc ccttttcttg gatcaaggtg 4440

gatctgttgg caccaatgat tattcacggc atcaagaccc agggtgcccg tcagaagttc 4500

tccagcctct acatctctca gtttatcatc atgtatagtc ttgatgggaa gaagtggcag 4560

acttatcgag gaaattccac tggaacctta atggtcttct ttggcaatgt ggattcatct 4620

gggataaaac acaatatttt taaccctcca attattgctc gatacatccg tttgcaccca 4680

actcattata gcattcgcag cactcttcgc atggagttga tgggctgtga tttaaatagt 4740

tgcagcatgc cattgggaat ggagagtaaa gcaatatcag atgcacagat tactgcttca 4800

tcctacttta ccaatatgtt tgccacctgg tctccttcaa aagctcgact tcacctccaa 4860

gggaggagta atgcctggag acctcaggtg aataatccaa aagagtggct gcaagtggac 4920

ttccagaaga caatgaaagt cacaggagta actactcagg gagtaaaatc tctgcttacc 4980

agcatgtatg tgaaggagtt cctcatctcc agcagtcaag atggccatca gtggactctc 5040

ttttttcaga atggcaaagt aaaggttttt cagggaaatc aagactcctt cacacctgtg 5100

gtgaactctc tagacccacc gttactgact cgctaccttc gaattcaccc ccagagttgg 5160

gtgcaccaga ttgccctgag gatggaggtt ctgggctgcg aggcacagga cctctacgac 5220

aaaactcaca catgcccacc gtgcccagct ccagaactcc tgggcggacc gtcagtcttc 5280

ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc 5340

gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct gaggtcaagt tcaactggta cgtggacggc 5400

gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt 5460

gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccag gactggctga atggcaagga gtacaagtgc 5520

aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 5580

cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggatgagct gaccaagaac 5640

caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg 5700

gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgtt ggactccgac 5760

ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 5820

gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 5880

tccctgtctc cgggtaaatg 5900

<210> 173

<211> 1947

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

вариант B5 FVIII)

<400> 173

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

740 745 750

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

755 760 765

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu

770 775 780

Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

785 790 795 800

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala

805 810 815

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

820 825 830

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

835 840 845

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

850 855 860

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro

865 870 875 880

Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

885 890 895

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

900 905 910

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser

915 920 925

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

930 935 940

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

945 950 955 960

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

965 970 975

Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

980 985 990

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

995 1000 1005

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

1010 1015 1020

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Glu Ile

1025 1030 1035

Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp

1040 1045 1050

Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr

1055 1060 1065

Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr

1070 1075 1080

Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly

1085 1090 1095

Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly

1100 1105 1110

Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp

1115 1120 1125

Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His

1130 1135 1140

Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn

1145 1150 1155

Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe

1160 1165 1170

Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala

1175 1180 1185

Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr

1190 1195 1200

Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe

1205 1210 1215

Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys

1220 1225 1230

Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr

1235 1240 1245

Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu

1250 1255 1260

Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr

1265 1270 1275

Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile

1280 1285 1290

Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala

1295 1300 1305

Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala

1310 1315 1320

Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn

1325 1330 1335

Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val

1340 1345 1350

Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro

1355 1360 1365

Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile

1370 1375 1380

Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met

1385 1390 1395

Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu

1400 1405 1410

Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser

1415 1420 1425

Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr

1430 1435 1440

Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp

1445 1450 1455

Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys

1460 1465 1470

Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln

1475 1480 1485

Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr

1490 1495 1500

Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val

1505 1510 1515

Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile

1520 1525 1530

Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser

1535 1540 1545

Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser

1550 1555 1560

Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile

1565 1570 1575

Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro

1580 1585 1590

Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg

1595 1600 1605

Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln

1610 1615 1620

Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser

1625 1630 1635

Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser

1640 1645 1650

Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val

1655 1660 1665

Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn

1670 1675 1680

Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro

1685 1690 1695

Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly

1700 1705 1710

Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro

1715 1720 1725

Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

1730 1735 1740

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

1745 1750 1755

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

1760 1765 1770

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

1775 1780 1785

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

1790 1795 1800

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

1805 1810 1815

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

1820 1825 1830

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

1835 1840 1845

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

1850 1855 1860

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

1865 1870 1875

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

1880 1885 1890

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

1895 1900 1905

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe

1910 1915 1920

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

1925 1930 1935

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1940 1945

<210> 174

<211> 4977

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF073 (D1D2D'D3 VWF-XTEN AE-144-FVIII с усеченным сайтом

расщепления тромбина в a2-Fc)

<400> 174

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

ggcgcgccaa catcagagag cgccacccct gaaagtggtc ccgggagcga gccagccaca 3780

tctgggtcgg aaacgccagg cacaagtgag tctgcaactc ccgagtccgg acctggctcc 3840

gagcctgcca ctagcggctc cgagactccg ggaacttccg agagcgctac accagaaagc 3900

ggacccggaa ccagtaccga acctagcgag ggctctgctc cgggcagccc agccggctct 3960

cctacatcca cggaggaggg cacttccgaa tccgccaccc cggagtcagg gccaggatct 4020

gaacccgcta cctcaggcag tgagacgcca ggaacgagcg agtccgctac accggagagt 4080

gggccaggga gccctgctgg atctcctacg tccactgagg aagggtcacc agcgggctcg 4140

cccaccagca ctgaagaagg tgcctcgagc ggcggtggag gatccggtgg cgggggatcc 4200

ggtggcgggg gatccggtgg cgggggatcc ggtggcgggg gatccggtgg cgggggatcc 4260

attgaaccaa gaagcttctc tggcagcgga ggcgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc 4320

ccagctccag aactcctggg cggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac 4380

accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 4440

gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 4500

aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 4560

caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 4620

gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 4680

accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 4740

aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 4800

aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 4860

ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 4920

gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 4977

<210> 175

<211> 1658

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF073 (D1D2D'D3 VWF-XTEN AE-144-усеченный сайт расщепления

тромбина в a2-Fc)

<400> 175

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Gly Ala Pro Thr Ser Glu Ser Ala

1235 1240 1245

Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser

1250 1255 1260

Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1265 1270 1275

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

1280 1285 1290

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro

1295 1300 1305

Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

1310 1315 1320

Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

1325 1330 1335

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

1340 1345 1350

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser

1355 1360 1365

Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser

1370 1375 1380

Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

1385 1390 1395

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly

1400 1405 1410

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gly

1415 1420 1425

Ser Gly Gly Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

1430 1435 1440

Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro

1445 1450 1455

Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val

1460 1465 1470

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp

1475 1480 1485

Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg

1490 1495 1500

Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

1505 1510 1515

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

1520 1525 1530

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser

1535 1540 1545

Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro

1550 1555 1560

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys

1565 1570 1575

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

1580 1585 1590

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val

1595 1600 1605

Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

1610 1615 1620

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

1625 1630 1635

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser

1640 1645 1650

Leu Ser Pro Gly Lys

1655

<210> 176

<211> 25

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 176

Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn

1 5 10 15

Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20 25

<210> 177

<211> 24

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 177

Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn

1 5 10 15

Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20

<210> 178

<211> 23

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 178

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

1 5 10 15

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20

<210> 179

<211> 22

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 179

Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile

1 5 10 15

Glu Pro Arg Ser Phe Ser

20

<210> 180

<211> 21

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 180

Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu

1 5 10 15

Pro Arg Ser Phe Ser

20

<210> 181

<211> 20

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 181

Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro

1 5 10 15

Arg Ser Phe Ser

20

<210> 182

<211> 19

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 182

Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg

1 5 10 15

Ser Phe Ser

<210> 183

<211> 18

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 183

Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser

1 5 10 15

Phe Ser

<210> 184

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 184

Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe

1 5 10 15

Ser

<210> 185

<211> 16

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 185

Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5 10 15

<210> 186

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 186

Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5 10 15

<210> 187

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 187

Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5 10

<210> 188

<211> 13

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 188

Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5 10

<210> 189

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 189

Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5 10

<210> 190

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 190

Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5 10

<210> 191

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 191

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5 10

<210> 192

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 192

Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5

<210> 193

<211> 8

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 193

Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5

<210> 194

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 194

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5

<210> 195

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 195

Glu Pro Arg Ser Phe Ser

1 5

<210> 196

<211> 4959

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF059 (D'D3 VWF-Fc с сайтом расщепления тромбином в кислой

области 2 (а2) в линкере)

<400> 196

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

atatcgggcg cgccaacatc agagagcgcc acccctgaaa gtggtcccgg gagcgagcca 3780

gccacatctg ggtcggaaac gccaggcaca agtgagtctg caactcccga gtccggacct 3840

ggctccgagc ctgccactag cggctccgag actccgggaa cttccgagag cgctacacca 3900

gaaagcggac ccggaaccag taccgaacct agcgagggct ctgctccggg cagcccagcc 3960

ggctctccta catccacgga ggagggcact tccgaatccg ccaccccgga gtcagggcca 4020

ggatctgaac ccgctacctc aggcagtgag acgccaggaa cgagcgagtc cgctacaccg 4080

gagagtgggc cagggagccc tgctggatct cctacgtcca ctgaggaagg gtcaccagcg 4140

ggctcgccca ccagcactga agaaggtgcc tcgatatctg acaagaacac tggtgattat 4200

tacgaggaca gttatgaaga tatttcagca tacttgctga gtaaaaacaa tgccattgaa 4260

ccaagaagct tctctgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagctcc agaactcctg 4320

ggcggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 4380

acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 4440

aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 4500

tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 4560

ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 4620

atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg 4680

gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 4740

gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 4800

cccgtgttgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 4860

aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 4920

tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 4959

<210> 197

<211> 1652

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF059 (D'D3 VWF-Fc с сайтом расщепления тромбином LVPR в

линкере)

<400> 197

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Ala Pro Thr Ser Glu

1235 1240 1245

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1250 1255 1260

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1265 1270 1275

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

1280 1285 1290

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

1295 1300 1305

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

1310 1315 1320

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1325 1330 1335

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

1340 1345 1350

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala

1355 1360 1365

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

1370 1375 1380

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ile Ser Asp Lys Asn Thr Gly

1385 1390 1395

Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu

1400 1405 1410

Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Asp Lys Thr

1415 1420 1425

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

1430 1435 1440

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile

1445 1450 1455

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

1460 1465 1470

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

1475 1480 1485

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser

1490 1495 1500

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp

1505 1510 1515

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

1520 1525 1530

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro

1535 1540 1545

Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu

1550 1555 1560

Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr

1565 1570 1575

Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu

1580 1585 1590

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

1595 1600 1605

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

1610 1615 1620

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His

1625 1630 1635

Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1640 1645 1650

<210> 198

<211> 4860

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> pSYN VWF062 (D'D3 VWF-Fc без сайта расщепления тромбином в линкере)

<400> 198

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

atatcgggcg cgccaacatc agagagcgcc acccctgaaa gtggtcccgg gagcgagcca 3780

gccacatctg ggtcggaaac gccaggcaca agtgagtctg caactcccga gtccggacct 3840

ggctccgagc ctgccactag cggctccgag actccgggaa cttccgagag cgctacacca 3900

gaaagcggac ccggaaccag taccgaacct agcgagggct ctgctccggg cagcccagcc 3960

ggctctccta catccacgga ggagggcact tccgaatccg ccaccccgga gtcagggcca 4020

ggatctgaac ccgctacctc aggcagtgag acgccaggaa cgagcgagtc cgctacaccg 4080

gagagtgggc cagggagccc tgctggatct cctacgtcca ctgaggaagg gtcaccagcg 4140

ggctcgccca ccagcactga agaaggtgcc tcgagcgaca aaactcacac atgcccaccg 4200

tgcccagctc cagaactcct gggcggaccg tcagtcttcc tcttcccccc aaaacccaag 4260

gacaccctca tgatctcccg gacccctgag gtcacatgcg tggtggtgga cgtgagccac 4320

gaagaccctg aggtcaagtt caactggtac gtggacggcg tggaggtgca taatgccaag 4380

acaaagccgc gggaggagca gtacaacagc acgtaccgtg tggtcagcgt cctcaccgtc 4440

ctgcaccagg actggctgaa tggcaaggag tacaagtgca aggtctccaa caaagccctc 4500

ccagccccca tcgagaaaac catctccaaa gccaaagggc agccccgaga accacaggtg 4560

tacaccctgc ccccatcccg ggatgagctg accaagaacc aggtcagcct gacctgcctg 4620

gtcaaaggct tctatcccag cgacatcgcc gtggagtggg agagcaatgg gcagccggag 4680

aacaactaca agaccacgcc tcccgtgttg gactccgacg gctccttctt cctctacagc 4740

aagctcaccg tggacaagag caggtggcag caggggaacg tcttctcatg ctccgtgatg 4800

catgaggctc tgcacaacca ctacacgcag aagagcctct ccctgtctcc gggtaaatga 4860

<210> 199

<211> 1619

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<400> 199

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Ile Ser Gly Ala Pro Thr Ser Glu

1235 1240 1245

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1250 1255 1260

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1265 1270 1275

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

1280 1285 1290

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

1295 1300 1305

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

1310 1315 1320

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1325 1330 1335

Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly

1340 1345 1350

Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala

1355 1360 1365

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro

1370 1375 1380

Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser Ser Asp Lys Thr His Thr Cys

1385 1390 1395

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe

1400 1405 1410

Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr

1415 1420 1425

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro

1430 1435 1440

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

1445 1450 1455

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg

1460 1465 1470

Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

1475 1480 1485

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

1490 1495 1500

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro

1505 1510 1515

Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn

1520 1525 1530

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

1535 1540 1545

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr

1550 1555 1560

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu

1565 1570 1575

Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn

1580 1585 1590

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr

1595 1600 1605

Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

1610 1615

<210> 200

<211> 4

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Расщепляемый линкер

<400> 200

Ile Glu Pro Arg

1

<210> 201

<211> 1945

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII(XTEN)-Fc

<400> 201

Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr Met

1 5 10 15

Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro Arg

20 25 30

Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys Thr

35 40 45

Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro Arg

50 55 60

Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val Tyr

65 70 75 80

Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val Ser

85 90 95

Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala Glu

100 105 110

Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val Phe

115 120 125

Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn Gly

130 135 140

Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser His

145 150 155 160

Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu Leu

165 170 175

Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu His

180 185 190

Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp His

195 200 205

Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser Ala

210 215 220

Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg Ser

225 230 235 240

Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His Val

245 250 255

Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu Gly

260 265 270

His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile Ser

275 280 285

Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly Gln

290 295 300

Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met Glu

305 310 315 320

Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg Met

325 330 335

Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp Ser

340 345 350

Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe Ile

355 360 365

Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His Tyr

370 375 380

Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu Ala

385 390 395 400

Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro Gln

405 410 415

Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr Asp

420 425 430

Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile Leu

435 440 445

Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile Phe

450 455 460

Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile Thr

465 470 475 480

Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys His

485 490 495

Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys Trp

500 505 510

Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys Leu

515 520 525

Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala Ser

530 535 540

Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp Gln

545 550 555 560

Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe Ser

565 570 575

Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln Arg

580 585 590

Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe Gln

595 600 605

Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser Leu

610 615 620

Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu Ser

625 630 635 640

Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr Thr

645 650 655

Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro Phe

660 665 670

Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp Ile

675 680 685

Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala Leu

690 695 700

Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp

705 710 715 720

Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile

725 730 735

Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

740 745 750

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

755 760 765

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

770 775 780

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

785 790 795 800

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

805 810 815

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu

820 825 830

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

835 840 845

Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

850 855 860

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala

865 870 875 880

Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

885 890 895

Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

900 905 910

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu

915 920 925

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

930 935 940

Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

945 950 955 960

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr

965 970 975

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

980 985 990

Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

995 1000 1005

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser

1010 1015 1020

Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Glu Ile Thr

1025 1030 1035

Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp Asp

1040 1045 1050

Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr Asp

1055 1060 1065

Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg

1070 1075 1080

His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met

1085 1090 1095

Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser

1100 1105 1110

Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly

1115 1120 1125

Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu

1130 1135 1140

Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile

1145 1150 1155

Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr

1160 1165 1170

Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu

1175 1180 1185

Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe

1190 1195 1200

Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp

1205 1210 1215

Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp

1220 1225 1230

Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn

1235 1240 1245

Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu Phe

1250 1255 1260

Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe

1265 1270 1275

Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile Gln

1280 1285 1290

Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala Ile

1295 1300 1305

Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln

1310 1315 1320

Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu

1325 1330 1335

Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg

1340 1345 1350

Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly

1355 1360 1365

Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp

1370 1375 1380

Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser

1385 1390 1395

Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly

1400 1405 1410

Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly

1415 1420 1425

Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser

1430 1435 1440

Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile

1445 1450 1455

Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys Thr

1460 1465 1470

Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln Phe

1475 1480 1485

Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr Arg

1490 1495 1500

Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp

1505 1510 1515

Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile Ala

1520 1525 1530

Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser Thr

1535 1540 1545

Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met

1550 1555 1560

Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr

1565 1570 1575

Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser

1580 1585 1590

Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro

1595 1600 1605

Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys

1610 1615 1620

Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu

1625 1630 1635

Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln

1640 1645 1650

Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys

1655 1660 1665

Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser

1670 1675 1680

Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln

1685 1690 1695

Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys

1700 1705 1710

Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys

1715 1720 1725

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro

1730 1735 1740

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

1745 1750 1755

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

1760 1765 1770

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr

1775 1780 1785

Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser

1790 1795 1800

Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr

1805 1810 1815

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

1820 1825 1830

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr

1835 1840 1845

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

1850 1855 1860

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

1865 1870 1875

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr

1880 1885 1890

Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

1895 1900 1905

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

1910 1915 1920

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys

1925 1930 1935

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1940 1945

<210> 202

<211> 883

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> VWF(D'D3)-XTEN-линкер a2-Fc

<400> 202

Ser Leu Ser Cys Arg Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp

1 5 10 15

Asn Leu Arg Ala Glu Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr

20 25 30

Asp Leu Glu Cys Met Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro

35 40 45

Pro Gly Met Val Arg His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys

50 55 60

Pro Cys Phe His Gln Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys

65 70 75 80

Ile Gly Cys Asn Thr Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr

85 90 95

Asp His Val Cys Asp Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr

100 105 110

Leu Thr Phe Asp Gly Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr

115 120 125

Val Leu Val Gln Asp Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile

130 135 140

Leu Val Gly Asn Lys Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys

145 150 155 160

Arg Val Thr Ile Leu Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly

165 170 175

Glu Val Asn Val Lys Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val

180 185 190

Val Glu Ser Gly Arg Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser

195 200 205

Val Val Trp Asp Arg His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr

210 215 220

Tyr Gln Glu Lys Val Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln

225 230 235 240

Asn Asn Asp Leu Thr Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val

245 250 255

Asp Phe Gly Asn Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg

260 265 270

Lys Val Pro Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met

275 280 285

Lys Gln Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val

290 295 300

Phe Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

305 310 315 320

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala Ala

325 330 335

Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln His Gly

340 345 350

Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln Ser Cys Glu

355 360 365

Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu Trp Arg Tyr Asn

370 375 380

Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln His Pro Glu Pro Leu

385 390 395 400

Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys His Ala His Cys Pro Pro

405 410 415

Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp

420 425 430

Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys

435 440 445

Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys

450 455 460

Asp Val Val Asn Leu Thr Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Gly Thr Ser

465 470 475 480

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

485 490 495

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

500 505 510

Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser

515 520 525

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

530 535 540

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu

545 550 555 560

Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu

565 570 575

Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

580 585 590

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu

595 600 605

Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ala Ser

610 615 620

Ser Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile

625 630 635 640

Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe

645 650 655

Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu

660 665 670

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu

675 680 685

Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser

690 695 700

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu

705 710 715 720

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

725 730 735

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn

740 745 750

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro

755 760 765

Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln

770 775 780

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

785 790 795 800

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val

805 810 815

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro

820 825 830

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr

835 840 845

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val

850 855 860

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu

865 870 875 880

Ser Pro Gly

<210> 203

<211> 1965

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Конечная аминокислотная последовательность FVIII 312A

<400> 203

Met Gln Ile Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe

1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser

20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg

35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val

50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile

65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln

85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser

115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp

130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu

145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile

180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr

195 200 205

Gln Thr Leu His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly

210 215 220

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp

225 230 235 240

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr

245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val

260 265 270

Tyr Trp His Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile

275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser

290 295 300

Leu Glu Ile Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met

305 310 315 320

Asp Leu Gly Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His

325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro

340 345 350

Gln Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp

355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser

370 375 380

Pro Ser Phe Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr

385 390 395 400

Trp Val His Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro

405 410 415

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn

420 425 430

Asn Gly Pro Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met

435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu

450 455 460

Ser Gly Ile Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu

465 470 475 480

Leu Ile Ile Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro

485 490 495

His Gly Ile Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys

500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe

515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp

530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg

545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu

565 570 575

Ser Val Asp Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val

580 585 590

Ile Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu

595 600 605

Asn Ile Gln Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp

610 615 620

Pro Glu Phe Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val

625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp

645 650 655

Tyr Ile Leu Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe

660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr

675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro

690 695 700

Gly Leu Trp Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly

705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp

725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys

740 745 750

Asn Asn Ala Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Thr Ser Glu

755 760 765

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

770 775 780

Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

785 790 795 800

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu

805 810 815

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

820 825 830

Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

835 840 845

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

850 855 860

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

865 870 875 880

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

885 890 895

Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr

900 905 910

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

915 920 925

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

930 935 940

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

945 950 955 960

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly

965 970 975

Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

980 985 990

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr

995 1000 1005

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

1010 1015 1020

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser

1025 1030 1035

Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala

1040 1045 1050

Ser Ser Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu

1055 1060 1065

Ile Asp Tyr Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp

1070 1075 1080

Phe Asp Ile Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe

1085 1090 1095

Gln Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu

1100 1105 1110

Trp Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg

1115 1120 1125

Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln

1130 1135 1140

Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu

1145 1150 1155

Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu

1160 1165 1170

Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg

1175 1180 1185

Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln

1190 1195 1200

Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu

1205 1210 1215

Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr

1220 1225 1230

Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val

1235 1240 1245

Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu

1250 1255 1260

Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val

1265 1270 1275

Thr Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr

1280 1285 1290

Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala

1295 1300 1305

Pro Cys Asn Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr

1310 1315 1320

Arg Phe His Ala Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly

1325 1330 1335

Leu Val Met Ala Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser

1340 1345 1350

Met Gly Ser Asn Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His

1355 1360 1365

Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr

1370 1375 1380

Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser

1385 1390 1395

Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu

1400 1405 1410

His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys

1415 1420 1425

Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln

1430 1435 1440

Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala

1445 1450 1455

Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu

1460 1465 1470

Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile

1475 1480 1485

His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu

1490 1495 1500

Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys

1505 1510 1515

Trp Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe

1520 1525 1530

Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn

1535 1540 1545

Pro Pro Ile Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr

1550 1555 1560

Ser Ile Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu

1565 1570 1575

Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser

1580 1585 1590

Asp Ala Gln Ile Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala

1595 1600 1605

Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser

1610 1615 1620

Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln

1625 1630 1635

Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln

1640 1645 1650

Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu

1655 1660 1665

Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln

1670 1675 1680

Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr

1685 1690 1695

Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu

1700 1705 1710

Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met

1715 1720 1725

Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His

1730 1735 1740

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser

1745 1750 1755

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

1760 1765 1770

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu

1775 1780 1785

Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

1790 1795 1800

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr

1805 1810 1815

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu

1820 1825 1830

Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

1835 1840 1845

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

1850 1855 1860

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr

1865 1870 1875

Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro

1880 1885 1890

Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn

1895 1900 1905

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe

1910 1915 1920

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

1925 1930 1935

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

1940 1945 1950

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1955 1960 1965

<210> 204

<211> 5898

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Конечная нуклеотидная последовательность FVIII 312A (SEQ ID NO: 204)

<400> 204

atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60

accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120

ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180

acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240

gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300

gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360

ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420

gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480

aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540

gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600

gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660

tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720

gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780

ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840

accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900

cgccaggcgt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960

gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020

gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080

gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140

gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200

tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260

cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320

aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380

attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440

ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500

gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560

ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620

actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680

gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740

agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800

aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860

cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920

tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980

attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040

atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100

atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160

atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220

agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280

ttctctcaaa acggtacctc agagtctgct acccccgagt cagggccagg atcagagcca 2340

gccacctccg ggtctgagac acccgggact tccgagagtg ccacccctga gtccggaccc 2400

gggtccgagc ccgccacttc cggctccgaa actcccggca caagcgagag cgctacccca 2460

gagtcaggac caggaacatc tacagagccc tctgaaggct ccgctccagg gtccccagcc 2520

ggcagtccca ctagcaccga ggagggaacc tctgaaagcg ccacacccga atcagggcca 2580

gggtctgagc ctgctaccag cggcagcgag acaccaggca cctctgagtc cgccacacca 2640

gagtccggac ccggatctcc cgctgggagc cccacctcca ctgaggaggg atctcctgct 2700

ggctctccaa catctactga ggaaggaacc tcaaccgagc catccgaggg atcagctccc 2760

ggcacctcag agtcggcaac cccggagtct ggacccggaa cttccgaaag tgccacacca 2820

gagtccggtc ccgggacttc agaatcagca acacccgagt ccggccctgg gtctgaaccc 2880

gccacaagtg gtagtgagac accaggatca gaacctgcta cctcagggtc agagacaccc 2940

ggatctccgg caggctcacc aacctccact gaggagggca ccagcacaga accaagcgag 3000

ggctccgcac ccggaacaag cactgaaccc agtgagggtt cagcacccgg ctctgagccg 3060

gccacaagtg gcagtgagac acccggcact tcagagagtg ccacccccga gagtggccca 3120

ggcactagta ccgagccctc tgaaggcagt gcgccagcct cgagcgaaat aactcgtact 3180

actcttcagt cagatcaaga ggaaattgac tatgatgata ccatatcagt tgaaatgaag 3240

aaggaagatt ttgacattta tgatgaggat gaaaatcaga gcccccgcag ctttcaaaag 3300

aaaacacgac actattttat tgctgcagtg gagaggctct gggattatgg gatgagtagc 3360

tccccacatg ttctaagaaa cagggctcag agtggcagtg tccctcagtt caagaaagtt 3420

gttttccagg aatttactga tggctccttt actcagccct tataccgtgg agaactaaat 3480

gaacatttgg gactcctggg gccatatata agagcagaag ttgaagataa tatcatggta 3540

actttcagaa atcaggcctc tcgtccctat tccttctatt ctagccttat ttcttatgag 3600

gaagatcaga ggcaaggagc agaacctaga aaaaactttg tcaagcctaa tgaaaccaaa 3660

acttactttt ggaaagtgca acatcatatg gcacccacta aagatgagtt tgactgcaaa 3720

gcctgggctt atttctctga tgttgacctg gaaaaagatg tgcactcagg cctgattgga 3780

ccccttctgg tctgccacac taacacactg aaccctgctc atgggagaca agtgacagta 3840

caggaatttg ctctgttttt caccatcttt gatgagacca aaagctggta cttcactgaa 3900

aatatggaaa gaaactgcag ggctccctgc aatatccaga tggaagatcc cacttttaaa 3960

gagaattatc gcttccatgc aatcaatggc tacataatgg atacactacc tggcttagta 4020

atggctcagg atcaaaggat tcgatggtat ctgctcagca tgggcagcaa tgaaaacatc 4080

cattctattc atttcagtgg acatgtgttc actgtacgaa aaaaagagga gtataaaatg 4140

gcactgtaca atctctatcc aggtgttttt gagacagtgg aaatgttacc atccaaagct 4200

ggaatttggc gggtggaatg ccttattggc gagcatctac atgctgggat gagcacactt 4260

tttctggtgt acagcaataa gtgtcagact cccctgggaa tggcttctgg acacattaga 4320

gattttcaga ttacagcttc aggacaatat ggacagtggg ccccaaagct ggccagactt 4380

cattattccg gatcaatcaa tgcctggagc accaaggagc ccttttcttg gatcaaggtg 4440

gatctgttgg caccaatgat tattcacggc atcaagaccc agggtgcccg tcagaagttc 4500

tccagcctct acatctctca gtttatcatc atgtatagtc ttgatgggaa gaagtggcag 4560

acttatcgag gaaattccac tggaacctta atggtcttct ttggcaatgt ggattcatct 4620

gggataaaac acaatatttt taaccctcca attattgctc gatacatccg tttgcaccca 4680

actcattata gcattcgcag cactcttcgc atggagttga tgggctgtga tttaaatagt 4740

tgcagcatgc cattgggaat ggagagtaaa gcaatatcag atgcacagat tactgcttca 4800

tcctacttta ccaatatgtt tgccacctgg tctccttcaa aagctcgact tcacctccaa 4860

gggaggagta atgcctggag acctcaggtg aataatccaa aagagtggct gcaagtggac 4920

ttccagaaga caatgaaagt cacaggagta actactcagg gagtaaaatc tctgcttacc 4980

agcatgtatg tgaaggagtt cctcatctcc agcagtcaag atggccatca gtggactctc 5040

ttttttcaga atggcaaagt aaaggttttt cagggaaatc aagactcctt cacacctgtg 5100

gtgaactctc tagacccacc gttactgact cgctaccttc gaattcaccc ccagagttgg 5160

gtgcaccaga ttgccctgag gatggaggtt ctgggctgcg aggcacagga cctctacgac 5220

aaaactcaca catgcccacc gtgcccagct ccagaactcc tgggcggacc gtcagtcttc 5280

ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacatgc 5340

gtggtggtgg acgtgagcca cgaagaccct gaggtcaagt tcaactggta tgtggacggc 5400

gtggaagtgc ataatgccaa gacaaagccg cgggaggagc agtacaacag cacgtaccgt 5460

gtggtcagcg tcctcaccgt cctgcaccaa gactggctga atggcaagga gtacaagtgc 5520

aaggtctcca acaaagccct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa agccaaaggg 5580

cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggatgagct gaccaagaac 5640

caagttagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctatccca gcgacatcgc cgtggagtgg 5700

gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacgc ctcccgtgtt ggactccgac 5760

ggctccttct tcctctactc caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 5820

gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 5880

tccctgtctc cgggttga 5898

<210> 205

<211> 1646

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Конечная аминокислотная последовательность полипептида VWF059A

<400> 205

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr

20 25 30

Ala Arg Cys Ser Leu Phe Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly

35 40 45

Ser Met Tyr Ser Phe Ala Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly

50 55 60

Cys Gln Lys Arg Ser Phe Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys

65 70 75 80

Arg Val Ser Leu Ser Val Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu

85 90 95

Phe Val Asn Gly Thr Val Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro

100 105 110

Tyr Ala Ser Lys Gly Leu Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys

115 120 125

Leu Ser Gly Glu Ala Tyr Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly

130 135 140

Asn Phe Gln Val Leu Leu Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly

145 150 155 160

Leu Cys Gly Asn Phe Asn Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln

165 170 175

Glu Gly Thr Leu Thr Ser Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala

180 185 190

Leu Ser Ser Gly Glu Gln Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser

195 200 205

Ser Cys Asn Ile Ser Ser Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln

210 215 220

Cys Gln Leu Leu Lys Ser Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu

225 230 235 240

Val Asp Pro Glu Pro Phe Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu

245 250 255

Cys Ala Gly Gly Leu Glu Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala

260 265 270

Arg Thr Cys Ala Gln Glu Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His

275 280 285

Ser Ala Cys Ser Pro Val Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys

290 295 300

Val Ser Pro Cys Ala Arg Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met

305 310 315 320

Cys Gln Glu Arg Cys Val Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu

325 330 335

Leu Asp Glu Gly Leu Cys Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His

340 345 350

Ser Gly Lys Arg Tyr Pro Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn

355 360 365

Thr Cys Ile Cys Arg Asn Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys

370 375 380

Pro Gly Glu Cys Leu Val Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp

385 390 395 400

Asn Arg Tyr Phe Thr Phe Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg

405 410 415

Asp Cys Gln Asp His Ser Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys

420 425 430

Ala Asp Asp Arg Asp Ala Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu

435 440 445

Pro Gly Leu His Asn Ser Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val

450 455 460

Ala Met Asp Gly Gln Asp Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu

465 470 475 480

Arg Ile Gln His Thr Val Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu

485 490 495

Asp Leu Gln Met Asp Trp Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu

500 505 510

Ser Pro Val Tyr Ala Gly Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn

515 520 525

Gly Asn Gln Gly Asp Asp Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro

530 535 540

Arg Val Glu Asp Phe Gly Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln

545 550 555 560

Asp Leu Gln Lys Gln His Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met

565 570 575

Thr Arg Phe Ser Glu Glu Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe

580 585 590

Glu Ala Cys His Arg Ala Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys

595 600 605

Arg Tyr Asp Val Cys Ser Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly

610 615 620

Ala Leu Ala Ser Tyr Ala Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val

625 630 635 640

Ala Trp Arg Glu Pro Gly Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln

645 650 655

Val Tyr Leu Gln Cys Gly Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu

660 665 670

Ser Tyr Pro Asp Glu Glu Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe

675 680 685

Cys Pro Pro Gly Leu Tyr Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys

690 695 700

Ala Gln Cys Pro Cys Tyr Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp

705 710 715 720

Ile Phe Ser Asp His His Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met

725 730 735

His Cys Thr Met Ser Gly Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val

740 745 750

Leu Ser Ser Pro Leu Ser His Arg Ser Lys Arg Ser Leu Ser Cys Arg

755 760 765

Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp Asn Leu Arg Ala Glu

770 775 780

Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr Asp Leu Glu Cys Met

785 790 795 800

Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro Pro Gly Met Val Arg

805 810 815

His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys Pro Cys Phe His Gln

820 825 830

Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Gly Cys Asn Thr

835 840 845

Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr Asp His Val Cys Asp

850 855 860

Ala Thr Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly

865 870 875 880

Leu Lys Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp

885 890 895

Tyr Cys Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys

900 905 910

Gly Cys Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu

915 920 925

Val Glu Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys

930 935 940

Arg Pro Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg

945 950 955 960

Tyr Ile Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg

965 970 975

His Leu Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val

980 985 990

Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr

995 1000 1005

Ser Ser Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn

1010 1015 1020

Ser Trp Lys Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro

1025 1030 1035

Leu Asp Ser Ser Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln

1040 1045 1050

Thr Met Val Asp Ser Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe

1055 1060 1065

Gln Asp Cys Asn Lys Leu Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val

1070 1075 1080

Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala

1085 1090 1095

Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala Tyr Ala His Val Cys Ala Gln

1100 1105 1110

His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr Ala Thr Leu Cys Pro Gln

1115 1120 1125

Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn Gly Tyr Glu Ala Glu

1130 1135 1140

Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln Val Thr Cys Gln

1145 1150 1155

His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val Glu Gly Cys

1160 1165 1170

His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu Leu Gln

1175 1180 1185

Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala Gly

1190 1195 1200

Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

1205 1210 1215

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr

1220 1225 1230

Cys Glu Ala Cys Gln Glu Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

1235 1240 1245

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

1250 1255 1260

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

1265 1270 1275

Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser

1280 1285 1290

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu

1295 1300 1305

Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu

1310 1315 1320

Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser

1325 1330 1335

Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser

1340 1345 1350

Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

1355 1360 1365

Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu

1370 1375 1380

Glu Gly Ala Ser Ser Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu Asp

1385 1390 1395

Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

1400 1405 1410

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro

1415 1420 1425

Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

1430 1435 1440

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

1445 1450 1455

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

1460 1465 1470

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

1475 1480 1485

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

1490 1495 1500

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

1505 1510 1515

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

1520 1525 1530

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

1535 1540 1545

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

1550 1555 1560

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

1565 1570 1575

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

1580 1585 1590

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

1595 1600 1605

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe

1610 1615 1620

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

1625 1630 1635

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1640 1645

<210> 206

<211> 4941

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Конечная нуклеотидная последовательность VWF059A

<400> 206

atgattcctg ccagatttgc cggggtgctg cttgctctgg ccctcatttt gccagggacc 60

ctttgtgcag aaggaactcg cggcaggtca tccacggccc gatgcagcct tttcggaagt 120

gacttcgtca acacctttga tgggagcatg tacagctttg cgggatactg cagttacctc 180

ctggcagggg gctgccagaa acgctccttc tcgattattg gggacttcca gaatggcaag 240

agagtgagcc tctccgtgta tcttggggaa ttttttgaca tccatttgtt tgtcaatggt 300

accgtgacac agggggacca aagagtctcc atgccctatg cctccaaagg gctgtatcta 360

gaaactgagg ctgggtacta caagctgtcc ggtgaggcct atggctttgt ggccaggatc 420

gatggcagcg gcaactttca agtcctgctg tcagacagat acttcaacaa gacctgcggg 480

ctgtgtggca actttaacat ctttgctgaa gatgacttta tgacccaaga agggaccttg 540

acctcggacc cttatgactt tgccaactca tgggctctga gcagtggaga acagtggtgt 600

gaacgggcat ctcctcccag cagctcatgc aacatctcct ctggggaaat gcagaagggc 660

ctgtgggagc agtgccagct tctgaagagc acctcggtgt ttgcccgctg ccaccctctg 720

gtggaccccg agccttttgt ggccctgtgt gagaagactt tgtgtgagtg tgctgggggg 780

ctggagtgcg cctgccctgc cctcctggag tacgcccgga cctgtgccca ggagggaatg 840

gtgctgtacg gctggaccga ccacagcgcg tgcagcccag tgtgccctgc tggtatggag 900

tataggcagt gtgtgtcccc ttgcgccagg acctgccaga gcctgcacat caatgaaatg 960

tgtcaggagc gatgcgtgga tggctgcagc tgccctgagg gacagctcct ggatgaaggc 1020

ctctgcgtgg agagcaccga gtgtccctgc gtgcattccg gaaagcgcta ccctcccggc 1080

acctccctct ctcgagactg caacacctgc atttgccgaa acagccagtg gatctgcagc 1140

aatgaagaat gtccagggga gtgccttgtc actggtcaat cccacttcaa gagctttgac 1200

aacagatact tcaccttcag tgggatctgc cagtacctgc tggcccggga ttgccaggac 1260

cactccttct ccattgtcat tgagactgtc cagtgtgctg atgaccgcga cgctgtgtgc 1320

acccgctccg tcaccgtccg gctgcctggc ctgcacaaca gccttgtgaa actgaagcat 1380

ggggcaggag ttgccatgga tggccaggac atccagctcc ccctcctgaa aggtgacctc 1440

cgcatccagc atacagtgac ggcctccgtg cgcctcagct acggggagga cctgcagatg 1500

gactgggatg gccgcgggag gctgctggtg aagctgtccc ccgtctatgc cgggaagacc 1560

tgcggcctgt gtgggaatta caatggcaac cagggcgacg acttccttac cccctctggg 1620

ctggcggagc cccgggtgga ggacttcggg aacgcctgga agctgcacgg ggactgccag 1680

gacctgcaga agcagcacag cgatccctgc gccctcaacc cgcgcatgac caggttctcc 1740

gaggaggcgt gcgcggtcct gacgtccccc acattcgagg cctgccatcg tgccgtcagc 1800

ccgctgccct acctgcggaa ctgccgctac gacgtgtgct cctgctcgga cggccgcgag 1860

tgcctgtgcg gcgccctggc cagctatgcc gcggcctgcg cggggagagg cgtgcgcgtc 1920

gcgtggcgcg agccaggccg ctgtgagctg aactgcccga aaggccaggt gtacctgcag 1980

tgcgggaccc cctgcaacct gacctgccgc tctctctctt acccggatga ggaatgcaat 2040

gaggcctgcc tggagggctg cttctgcccc ccagggctct acatggatga gaggggggac 2100

tgcgtgccca aggcccagtg cccctgttac tatgacggtg agatcttcca gccagaagac 2160

atcttctcag accatcacac catgtgctac tgtgaggatg gcttcatgca ctgtaccatg 2220

agtggagtcc ccggaagctt gctgcctgac gctgtcctca gcagtcccct gtctcatcgc 2280

agcaaaagga gcctatcctg tcggcccccc atggtcaagc tggtgtgtcc cgctgacaac 2340

ctgcgggctg aagggctcga gtgtaccaaa acgtgccaga actatgacct ggagtgcatg 2400

agcatgggct gtgtctctgg ctgcctctgc cccccgggca tggtccggca tgagaacaga 2460

tgtgtggccc tggaaaggtg tccctgcttc catcagggca aggagtatgc ccctggagaa 2520

acagtgaaga ttggctgcaa cacttgtgtc tgtcgggacc ggaagtggaa ctgcacagac 2580

catgtgtgtg atgccacgtg ctccacgatc ggcatggccc actacctcac cttcgacggg 2640

ctcaaatacc tgttccccgg ggagtgccag tacgttctgg tgcaggatta ctgcggcagt 2700

aaccctggga cctttcggat cctagtgggg aataagggat gcagccaccc ctcagtgaaa 2760

tgcaagaaac gggtcaccat cctggtggag ggaggagaga ttgagctgtt tgacggggag 2820

gtgaatgtga agaggcccat gaaggatgag actcactttg aggtggtgga gtctggccgg 2880

tacatcattc tgctgctggg caaagccctc tccgtggtct gggaccgcca cctgagcatc 2940

tccgtggtcc tgaagcagac ataccaggag aaagtgtgtg gcctgtgtgg gaattttgat 3000

ggcatccaga acaatgacct caccagcagc aacctccaag tggaggaaga ccctgtggac 3060

tttgggaact cctggaaagt gagctcgcag tgtgctgaca ccagaaaagt gcctctggac 3120

tcatcccctg ccacctgcca taacaacatc atgaagcaga cgatggtgga ttcctcctgt 3180

agaatcctta ccagtgacgt cttccaggac tgcaacaagc tggtggaccc cgagccatat 3240

ctggatgtct gcatttacga cacctgctcc tgtgagtcca ttggggactg cgccgcattc 3300

tgcgacacca ttgctgccta tgcccacgtg tgtgcccagc atggcaaggt ggtgacctgg 3360

aggacggcca cattgtgccc ccagagctgc gaggagagga atctccggga gaacgggtat 3420

gaggctgagt ggcgctataa cagctgtgca cctgcctgtc aagtcacgtg tcagcaccct 3480

gagccactgg cctgccctgt gcagtgtgtg gagggctgcc atgcccactg ccctccaggg 3540

aaaatcctgg atgagctttt gcagacctgc gttgaccctg aagactgtcc agtgtgtgag 3600

gtggctggcc ggcgttttgc ctcaggaaag aaagtcacct tgaatcccag tgaccctgag 3660

cactgccaga tttgccactg tgatgttgtc aacctcacct gtgaagcctg ccaggagccg 3720

ggtacatcag agagcgccac ccctgaaagt ggtcccggga gcgagccagc cacatctggg 3780

tcggaaacgc caggcacatc cgagtctgca actcccgagt ccggacctgg ctccgagcct 3840

gccactagcg gctccgagac tccgggaact tccgagagcg ctacaccaga aagcggaccc 3900

ggaaccagta ccgaacctag cgagggctct gctccgggca gcccagccgg ctctcctaca 3960

tccacggagg agggcacttc cgaatccgcc accccggagt cagggccagg atctgaaccc 4020

gctacctcag gcagtgagac gccaggaacg agcgagtccg ctacaccgga gagtgggcca 4080

gggagccctg ctggatctcc tacgtccact gaggaagggt caccagcggg ctcgcccacc 4140

agcactgaag aaggtgcctc gtctgacaag aacactggtg attattacga ggacagttat 4200

gaagatattt cagcatactt gctgagtaaa aacaatgcca ttgaaccaag aagcttctct 4260

gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccagaac tcctgggcgg accgtcagtc 4320

ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 4380

tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtatgtggac 4440

ggcgtggaag tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 4500

cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caagactggc tgaatggcaa ggagtacaag 4560

tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 4620

gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag 4680

aaccaagtta gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 4740

tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc 4800

gacggctcct tcttcctcta ctccaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 4860

aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 4920

ctctccctgt ctccgggttg a 4941

<210> 207

<211> 1946

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII(XTEN)-Fc с лидерной последовательностью A

<400> 207

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

740 745 750

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

755 760 765

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu

770 775 780

Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr

785 790 795 800

Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala

805 810 815

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

820 825 830

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

835 840 845

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

850 855 860

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro

865 870 875 880

Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

885 890 895

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly

900 905 910

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser

915 920 925

Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser

930 935 940

Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

945 950 955 960

Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser

965 970 975

Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser

980 985 990

Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr

995 1000 1005

Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr

1010 1015 1020

Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Ala Ser Ser Glu Ile

1025 1030 1035

Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr Asp

1040 1045 1050

Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr

1055 1060 1065

Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr

1070 1075 1080

Arg His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly

1085 1090 1095

Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly

1100 1105 1110

Ser Val Pro Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp

1115 1120 1125

Gly Ser Phe Thr Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His

1130 1135 1140

Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn

1145 1150 1155

Ile Met Val Thr Phe Arg Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe

1160 1165 1170

Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala

1175 1180 1185

Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr

1190 1195 1200

Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe

1205 1210 1215

Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys

1220 1225 1230

Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr

1235 1240 1245

Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr Val Gln Glu

1250 1255 1260

Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr

1265 1270 1275

Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn Ile

1280 1285 1290

Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala

1295 1300 1305

Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala

1310 1315 1320

Gln Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn

1325 1330 1335

Glu Asn Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val

1340 1345 1350

Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro

1355 1360 1365

Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile

1370 1375 1380

Trp Arg Val Glu Cys Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met

1385 1390 1395

Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu

1400 1405 1410

Gly Met Ala Ser Gly His Ile Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser

1415 1420 1425

Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr

1430 1435 1440

Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp

1445 1450 1455

Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile Ile His Gly Ile Lys

1460 1465 1470

Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu Tyr Ile Ser Gln

1475 1480 1485

Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gln Thr Tyr

1490 1495 1500

Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn Val

1505 1510 1515

Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile Ile

1520 1525 1530

Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser

1535 1540 1545

Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser

1550 1555 1560

Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile

1565 1570 1575

Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro

1580 1585 1590

Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg

1595 1600 1605

Pro Gln Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln

1610 1615 1620

Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser

1625 1630 1635

Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser

1640 1645 1650

Gln Asp Gly His Gln Trp Thr Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val

1655 1660 1665

Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp Ser Phe Thr Pro Val Val Asn

1670 1675 1680

Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg Ile His Pro

1685 1690 1695

Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg Met Glu Val Leu Gly

1700 1705 1710

Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro

1715 1720 1725

Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

1730 1735 1740

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

1745 1750 1755

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val

1760 1765 1770

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys

1775 1780 1785

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val

1790 1795 1800

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

1805 1810 1815

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu

1820 1825 1830

Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

1835 1840 1845

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val

1850 1855 1860

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala

1865 1870 1875

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

1880 1885 1890

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

1895 1900 1905

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe

1910 1915 1920

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln

1925 1930 1935

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

1940 1945

<210> 208

<211> 22

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 208

Met Ile Pro Ala Arg Phe Ala Gly Val Leu Leu Ala Leu Ala Leu Ile

1 5 10 15

Leu Pro Gly Thr Leu Cys

20

<210> 209

<211> 741

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 209

Ala Glu Gly Thr Arg Gly Arg Ser Ser Thr Ala Arg Cys Ser Leu Phe

1 5 10 15

Gly Ser Asp Phe Val Asn Thr Phe Asp Gly Ser Met Tyr Ser Phe Ala

20 25 30

Gly Tyr Cys Ser Tyr Leu Leu Ala Gly Gly Cys Gln Lys Arg Ser Phe

35 40 45

Ser Ile Ile Gly Asp Phe Gln Asn Gly Lys Arg Val Ser Leu Ser Val

50 55 60

Tyr Leu Gly Glu Phe Phe Asp Ile His Leu Phe Val Asn Gly Thr Val

65 70 75 80

Thr Gln Gly Asp Gln Arg Val Ser Met Pro Tyr Ala Ser Lys Gly Leu

85 90 95

Tyr Leu Glu Thr Glu Ala Gly Tyr Tyr Lys Leu Ser Gly Glu Ala Tyr

100 105 110

Gly Phe Val Ala Arg Ile Asp Gly Ser Gly Asn Phe Gln Val Leu Leu

115 120 125

Ser Asp Arg Tyr Phe Asn Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Phe Asn

130 135 140

Ile Phe Ala Glu Asp Asp Phe Met Thr Gln Glu Gly Thr Leu Thr Ser

145 150 155 160

Asp Pro Tyr Asp Phe Ala Asn Ser Trp Ala Leu Ser Ser Gly Glu Gln

165 170 175

Trp Cys Glu Arg Ala Ser Pro Pro Ser Ser Ser Cys Asn Ile Ser Ser

180 185 190

Gly Glu Met Gln Lys Gly Leu Trp Glu Gln Cys Gln Leu Leu Lys Ser

195 200 205

Thr Ser Val Phe Ala Arg Cys His Pro Leu Val Asp Pro Glu Pro Phe

210 215 220

Val Ala Leu Cys Glu Lys Thr Leu Cys Glu Cys Ala Gly Gly Leu Glu

225 230 235 240

Cys Ala Cys Pro Ala Leu Leu Glu Tyr Ala Arg Thr Cys Ala Gln Glu

245 250 255

Gly Met Val Leu Tyr Gly Trp Thr Asp His Ser Ala Cys Ser Pro Val

260 265 270

Cys Pro Ala Gly Met Glu Tyr Arg Gln Cys Val Ser Pro Cys Ala Arg

275 280 285

Thr Cys Gln Ser Leu His Ile Asn Glu Met Cys Gln Glu Arg Cys Val

290 295 300

Asp Gly Cys Ser Cys Pro Glu Gly Gln Leu Leu Asp Glu Gly Leu Cys

305 310 315 320

Val Glu Ser Thr Glu Cys Pro Cys Val His Ser Gly Lys Arg Tyr Pro

325 330 335

Pro Gly Thr Ser Leu Ser Arg Asp Cys Asn Thr Cys Ile Cys Arg Asn

340 345 350

Ser Gln Trp Ile Cys Ser Asn Glu Glu Cys Pro Gly Glu Cys Leu Val

355 360 365

Thr Gly Gln Ser His Phe Lys Ser Phe Asp Asn Arg Tyr Phe Thr Phe

370 375 380

Ser Gly Ile Cys Gln Tyr Leu Leu Ala Arg Asp Cys Gln Asp His Ser

385 390 395 400

Phe Ser Ile Val Ile Glu Thr Val Gln Cys Ala Asp Asp Arg Asp Ala

405 410 415

Val Cys Thr Arg Ser Val Thr Val Arg Leu Pro Gly Leu His Asn Ser

420 425 430

Leu Val Lys Leu Lys His Gly Ala Gly Val Ala Met Asp Gly Gln Asp

435 440 445

Ile Gln Leu Pro Leu Leu Lys Gly Asp Leu Arg Ile Gln His Thr Val

450 455 460

Thr Ala Ser Val Arg Leu Ser Tyr Gly Glu Asp Leu Gln Met Asp Trp

465 470 475 480

Asp Gly Arg Gly Arg Leu Leu Val Lys Leu Ser Pro Val Tyr Ala Gly

485 490 495

Lys Thr Cys Gly Leu Cys Gly Asn Tyr Asn Gly Asn Gln Gly Asp Asp

500 505 510

Phe Leu Thr Pro Ser Gly Leu Ala Glu Pro Arg Val Glu Asp Phe Gly

515 520 525

Asn Ala Trp Lys Leu His Gly Asp Cys Gln Asp Leu Gln Lys Gln His

530 535 540

Ser Asp Pro Cys Ala Leu Asn Pro Arg Met Thr Arg Phe Ser Glu Glu

545 550 555 560

Ala Cys Ala Val Leu Thr Ser Pro Thr Phe Glu Ala Cys His Arg Ala

565 570 575

Val Ser Pro Leu Pro Tyr Leu Arg Asn Cys Arg Tyr Asp Val Cys Ser

580 585 590

Cys Ser Asp Gly Arg Glu Cys Leu Cys Gly Ala Leu Ala Ser Tyr Ala

595 600 605

Ala Ala Cys Ala Gly Arg Gly Val Arg Val Ala Trp Arg Glu Pro Gly

610 615 620

Arg Cys Glu Leu Asn Cys Pro Lys Gly Gln Val Tyr Leu Gln Cys Gly

625 630 635 640

Thr Pro Cys Asn Leu Thr Cys Arg Ser Leu Ser Tyr Pro Asp Glu Glu

645 650 655

Cys Asn Glu Ala Cys Leu Glu Gly Cys Phe Cys Pro Pro Gly Leu Tyr

660 665 670

Met Asp Glu Arg Gly Asp Cys Val Pro Lys Ala Gln Cys Pro Cys Tyr

675 680 685

Tyr Asp Gly Glu Ile Phe Gln Pro Glu Asp Ile Phe Ser Asp His His

690 695 700

Thr Met Cys Tyr Cys Glu Asp Gly Phe Met His Cys Thr Met Ser Gly

705 710 715 720

Val Pro Gly Ser Leu Leu Pro Asp Ala Val Leu Ser Ser Pro Leu Ser

725 730 735

His Arg Ser Lys Arg

740

<210> 210

<211> 103

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 210

Ser Leu Ser Cys Arg Pro Pro Met Val Lys Leu Val Cys Pro Ala Asp

1 5 10 15

Asn Leu Arg Ala Glu Gly Leu Glu Cys Thr Lys Thr Cys Gln Asn Tyr

20 25 30

Asp Leu Glu Cys Met Ser Met Gly Cys Val Ser Gly Cys Leu Cys Pro

35 40 45

Pro Gly Met Val Arg His Glu Asn Arg Cys Val Ala Leu Glu Arg Cys

50 55 60

Pro Cys Phe His Gln Gly Lys Glu Tyr Ala Pro Gly Glu Thr Val Lys

65 70 75 80

Ile Gly Cys Asn Thr Cys Val Cys Arg Asp Arg Lys Trp Asn Cys Thr

85 90 95

Asp His Val Cys Asp Ala Thr

100

<210> 211

<211> 374

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 211

Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly Leu Lys

1 5 10 15

Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp Tyr Cys

20 25 30

Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys Gly Cys

35 40 45

Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu Val Glu

50 55 60

Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys Arg Pro

65 70 75 80

Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg Tyr Ile

85 90 95

Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg His Leu

100 105 110

Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val Cys Gly

115 120 125

Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr Ser Ser

130 135 140

Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn Ser Trp Lys

145 150 155 160

Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro Leu Asp Ser Ser

165 170 175

Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln Thr Met Val Asp Ser

180 185 190

Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe Gln Asp Cys Asn Lys Leu

195 200 205

Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser

210 215 220

Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala Cys Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala

225 230 235 240

Tyr Ala His Val Cys Ala Gln His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr

245 250 255

Ala Thr Leu Cys Pro Gln Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn

260 265 270

Gly Tyr Glu Cys Glu Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln

275 280 285

Val Thr Cys Gln His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val

290 295 300

Glu Gly Cys His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu

305 310 315 320

Leu Gln Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala

325 330 335

Gly Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

340 345 350

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr Cys

355 360 365

Glu Ala Cys Gln Glu Pro

370

<210> 212

<211> 239

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 212

Gly Gly Leu Val Val Pro Pro Thr Asp Ala Pro Val Ser Pro Thr Thr

1 5 10 15

Leu Tyr Val Glu Asp Ile Ser Glu Pro Pro Leu His Asp Phe Tyr Cys

20 25 30

Ser Arg Leu Leu Asp Leu Val Phe Leu Leu Asp Gly Ser Ser Arg Leu

35 40 45

Ser Glu Ala Glu Phe Glu Val Leu Lys Ala Phe Val Val Asp Met Met

50 55 60

Glu Arg Leu Arg Ile Ser Gln Lys Trp Val Arg Val Ala Val Val Glu

65 70 75 80

Tyr His Asp Gly Ser His Ala Tyr Ile Gly Leu Lys Asp Arg Lys Arg

85 90 95

Pro Ser Glu Leu Arg Arg Ile Ala Ser Gln Val Lys Tyr Ala Gly Ser

100 105 110

Gln Val Ala Ser Thr Ser Glu Val Leu Lys Tyr Thr Leu Phe Gln Ile

115 120 125

Phe Ser Lys Ile Asp Arg Pro Glu Ala Ser Arg Ile Ala Leu Leu Leu

130 135 140

Met Ala Ser Gln Glu Pro Gln Arg Met Ser Arg Asn Phe Val Arg Tyr

145 150 155 160

Val Gln Gly Leu Lys Lys Lys Lys Val Ile Val Ile Pro Val Gly Ile

165 170 175

Gly Pro His Ala Asn Leu Lys Gln Ile Arg Leu Ile Glu Lys Gln Ala

180 185 190

Pro Glu Asn Lys Ala Phe Val Leu Ser Ser Val Asp Glu Leu Glu Gln

195 200 205

Gln Arg Asp Glu Ile Val Ser Tyr Leu Cys Asp Leu Ala Pro Glu Ala

210 215 220

Pro Pro Pro Thr Leu Pro Pro Asp Met Ala Gln Val Thr Val Gly

225 230 235

<210> 213

<211> 1334

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<220>

<221> другой_признак

<222> (537)..(537)

<223> Xaa может представлять собой любую втречающуюся в природе

аминокислоту

<400> 213

Pro Gly Leu Leu Gly Val Ser Thr Leu Gly Pro Lys Arg Asn Ser Met

1 5 10 15

Val Leu Asp Val Ala Phe Val Leu Glu Gly Ser Asp Lys Ile Gly Glu

20 25 30

Ala Asp Phe Asn Arg Ser Lys Glu Phe Met Glu Glu Val Ile Gln Arg

35 40 45

Met Asp Val Gly Gln Asp Ser Ile His Val Thr Val Leu Gln Tyr Ser

50 55 60

Tyr Met Val Thr Val Glu Tyr Pro Phe Ser Glu Ala Gln Ser Lys Gly

65 70 75 80

Asp Ile Leu Gln Arg Val Arg Glu Ile Arg Tyr Gln Gly Gly Asn Arg

85 90 95

Thr Asn Thr Gly Leu Ala Leu Arg Tyr Leu Ser Asp His Ser Phe Leu

100 105 110

Val Ser Gln Gly Asp Arg Glu Gln Ala Pro Asn Leu Val Tyr Met Val

115 120 125

Thr Gly Asn Pro Ala Ser Asp Glu Ile Lys Arg Leu Pro Gly Asp Ile

130 135 140

Gln Val Val Pro Ile Gly Val Gly Pro Asn Ala Asn Val Gln Glu Leu

145 150 155 160

Glu Arg Ile Gly Trp Pro Asn Ala Pro Ile Leu Ile Gln Asp Phe Glu

165 170 175

Thr Leu Pro Arg Glu Ala Pro Asp Leu Val Leu Gln Arg Cys Cys Ser

180 185 190

Gly Glu Gly Leu Gln Ile Pro Thr Leu Ser Pro Ala Pro Asp Cys Ser

195 200 205

Gln Pro Leu Asp Val Ile Leu Leu Leu Asp Gly Ser Ser Ser Phe Pro

210 215 220

Ala Ser Tyr Phe Asp Glu Met Lys Ser Phe Ala Lys Ala Phe Ile Ser

225 230 235 240

Lys Ala Asn Ile Gly Pro Arg Leu Thr Gln Val Ser Val Leu Gln Tyr

245 250 255

Gly Ser Ile Thr Thr Ile Asp Val Pro Trp Asn Val Val Pro Glu Lys

260 265 270

Ala His Leu Leu Ser Leu Val Asp Val Met Gln Arg Glu Gly Gly Pro

275 280 285

Ser Gln Ile Gly Asp Ala Leu Gly Phe Ala Val Arg Tyr Leu Thr Ser

290 295 300

Glu Met His Gly Ala Arg Pro Gly Ala Ser Lys Ala Val Val Ile Leu

305 310 315 320

Val Thr Asp Val Ser Val Asp Ser Val Asp Ala Ala Ala Asp Ala Ala

325 330 335

Arg Ser Asn Arg Val Thr Val Phe Pro Ile Gly Ile Gly Asp Arg Tyr

340 345 350

Asp Ala Ala Gln Leu Arg Ile Leu Ala Gly Pro Ala Gly Asp Ser Asn

355 360 365

Val Val Lys Leu Gln Arg Ile Glu Asp Leu Pro Thr Met Val Thr Leu

370 375 380

Gly Asn Ser Phe Leu His Lys Leu Cys Ser Gly Phe Val Arg Ile Cys

385 390 395 400

Met Asp Glu Asp Gly Asn Glu Lys Arg Pro Gly Asp Val Trp Thr Leu

405 410 415

Pro Asp Gln Cys His Thr Val Thr Cys Gln Pro Asp Gly Gln Thr Leu

420 425 430

Leu Lys Ser His Arg Val Asn Cys Asp Arg Gly Leu Arg Pro Ser Cys

435 440 445

Pro Asn Ser Gln Ser Pro Val Lys Val Glu Glu Thr Cys Gly Cys Arg

450 455 460

Trp Thr Cys Pro Cys Val Cys Thr Gly Ser Ser Thr Arg His Ile Val

465 470 475 480

Thr Phe Asp Gly Gln Asn Phe Lys Leu Thr Gly Ser Cys Ser Tyr Val

485 490 495

Leu Phe Gln Asn Lys Glu Gln Asp Leu Glu Val Ile Leu His Asn Gly

500 505 510

Ala Cys Ser Pro Gly Ala Arg Gln Gly Cys Met Lys Ser Ile Glu Val

515 520 525

Lys His Ser Ala Leu Ser Val Glu Xaa His Ser Asp Met Glu Val Thr

530 535 540

Val Asn Gly Arg Leu Val Ser Val Pro Tyr Val Gly Gly Asn Met Glu

545 550 555 560

Val Asn Val Tyr Gly Ala Ile Met His Glu Val Arg Phe Asn His Leu

565 570 575

Gly His Ile Phe Thr Phe Thr Pro Gln Asn Asn Glu Phe Gln Leu Gln

580 585 590

Leu Ser Pro Lys Thr Phe Ala Ser Lys Thr Tyr Gly Leu Cys Gly Ile

595 600 605

Cys Asp Glu Asn Gly Ala Asn Asp Phe Met Leu Arg Asp Gly Thr Val

610 615 620

Thr Thr Asp Trp Lys Thr Leu Val Gln Glu Trp Thr Val Gln Arg Pro

625 630 635 640

Gly Gln Thr Cys Gln Pro Ile Leu Glu Glu Gln Cys Leu Val Pro Asp

645 650 655

Ser Ser His Cys Gln Val Leu Leu Leu Pro Leu Phe Ala Glu Cys His

660 665 670

Lys Val Leu Ala Pro Ala Thr Phe Tyr Ala Ile Cys Gln Gln Asp Ser

675 680 685

Cys His Gln Glu Gln Val Cys Glu Val Ile Ala Ser Tyr Ala His Leu

690 695 700

Cys Arg Thr Asn Gly Val Cys Val Asp Trp Arg Thr Pro Asp Phe Cys

705 710 715 720

Ala Met Ser Cys Pro Pro Ser Leu Val Tyr Asn His Cys Glu His Gly

725 730 735

Cys Pro Arg His Cys Asp Gly Asn Val Ser Ser Cys Gly Asp His Pro

740 745 750

Ser Glu Gly Cys Phe Cys Pro Pro Asp Lys Val Met Leu Glu Gly Ser

755 760 765

Cys Val Pro Glu Glu Ala Cys Thr Gln Cys Ile Gly Glu Asp Gly Val

770 775 780

Gln His Gln Phe Leu Glu Ala Trp Val Pro Asp His Gln Pro Cys Gln

785 790 795 800

Ile Cys Thr Cys Leu Ser Gly Arg Lys Val Asn Cys Thr Thr Gln Pro

805 810 815

Cys Pro Thr Ala Lys Ala Pro Thr Cys Gly Leu Cys Glu Val Ala Arg

820 825 830

Leu Arg Gln Asn Ala Asp Gln Cys Cys Pro Glu Tyr Glu Cys Val Cys

835 840 845

Asp Pro Val Ser Cys Asp Leu Pro Pro Val Pro His Cys Glu Arg Gly

850 855 860

Leu Gln Pro Thr Leu Thr Asn Pro Gly Glu Cys Arg Pro Asn Phe Thr

865 870 875 880

Cys Ala Cys Arg Lys Glu Glu Cys Lys Arg Val Ser Pro Pro Ser Cys

885 890 895

Pro Pro His Arg Leu Pro Thr Leu Arg Lys Thr Gln Cys Cys Asp Glu

900 905 910

Tyr Glu Cys Ala Cys Asn Cys Val Asn Ser Thr Val Ser Cys Pro Leu

915 920 925

Gly Tyr Leu Ala Ser Thr Ala Thr Asn Asp Cys Gly Cys Thr Thr Thr

930 935 940

Thr Cys Leu Pro Asp Lys Val Cys Val His Arg Ser Thr Ile Tyr Pro

945 950 955 960

Val Gly Gln Phe Trp Glu Glu Gly Cys Asp Val Cys Thr Cys Thr Asp

965 970 975

Met Glu Asp Ala Val Met Gly Leu Arg Val Ala Gln Cys Ser Gln Lys

980 985 990

Pro Cys Glu Asp Ser Cys Arg Ser Gly Phe Thr Tyr Val Leu His Glu

995 1000 1005

Gly Glu Cys Cys Gly Arg Cys Leu Pro Ser Ala Cys Glu Val Val

1010 1015 1020

Thr Gly Ser Pro Arg Gly Asp Ser Gln Ser Ser Trp Lys Ser Val

1025 1030 1035

Gly Ser Gln Trp Ala Ser Pro Glu Asn Pro Cys Leu Ile Asn Glu

1040 1045 1050

Cys Val Arg Val Lys Glu Glu Val Phe Ile Gln Gln Arg Asn Val

1055 1060 1065

Ser Cys Pro Gln Leu Glu Val Pro Val Cys Pro Ser Gly Phe Gln

1070 1075 1080

Leu Ser Cys Lys Thr Ser Ala Cys Cys Pro Ser Cys Arg Cys Glu

1085 1090 1095

Arg Met Glu Ala Cys Met Leu Asn Gly Thr Val Ile Gly Pro Gly

1100 1105 1110

Lys Thr Val Met Ile Asp Val Cys Thr Thr Cys Arg Cys Met Val

1115 1120 1125

Gln Val Gly Val Ile Ser Gly Phe Lys Leu Glu Cys Arg Lys Thr

1130 1135 1140

Thr Cys Asn Pro Cys Pro Leu Gly Tyr Lys Glu Glu Asn Asn Thr

1145 1150 1155

Gly Glu Cys Cys Gly Arg Cys Leu Pro Thr Ala Cys Thr Ile Gln

1160 1165 1170

Leu Arg Gly Gly Gln Ile Met Thr Leu Lys Arg Asp Glu Thr Leu

1175 1180 1185

Gln Asp Gly Cys Asp Thr His Phe Cys Lys Val Asn Glu Arg Gly

1190 1195 1200

Glu Tyr Phe Trp Glu Lys Arg Val Thr Gly Cys Pro Pro Phe Asp

1205 1210 1215

Glu His Lys Cys Leu Ala Glu Gly Gly Lys Ile Met Lys Ile Pro

1220 1225 1230

Gly Thr Cys Cys Asp Thr Cys Glu Glu Pro Glu Cys Asn Asp Ile

1235 1240 1245

Thr Ala Arg Leu Gln Tyr Val Lys Val Gly Ser Cys Lys Ser Glu

1250 1255 1260

Val Glu Val Asp Ile His Tyr Cys Gln Gly Lys Cys Ala Ser Lys

1265 1270 1275

Ala Met Tyr Ser Ile Asp Ile Asn Asp Val Gln Asp Gln Cys Ser

1280 1285 1290

Cys Cys Ser Pro Thr Arg Thr Glu Pro Met Gln Val Ala Leu His

1295 1300 1305

Cys Thr Asn Gly Ser Val Val Tyr His Glu Val Leu Asn Ala Met

1310 1315 1320

Glu Cys Lys Cys Ser Pro Arg Lys Cys Ser Lys

1325 1330

<210> 214

<211> 374

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Область D3 VWF с EAE

<400> 214

Cys Ser Thr Ile Gly Met Ala His Tyr Leu Thr Phe Asp Gly Leu Lys

1 5 10 15

Tyr Leu Phe Pro Gly Glu Cys Gln Tyr Val Leu Val Gln Asp Tyr Cys

20 25 30

Gly Ser Asn Pro Gly Thr Phe Arg Ile Leu Val Gly Asn Lys Gly Cys

35 40 45

Ser His Pro Ser Val Lys Cys Lys Lys Arg Val Thr Ile Leu Val Glu

50 55 60

Gly Gly Glu Ile Glu Leu Phe Asp Gly Glu Val Asn Val Lys Arg Pro

65 70 75 80

Met Lys Asp Glu Thr His Phe Glu Val Val Glu Ser Gly Arg Tyr Ile

85 90 95

Ile Leu Leu Leu Gly Lys Ala Leu Ser Val Val Trp Asp Arg His Leu

100 105 110

Ser Ile Ser Val Val Leu Lys Gln Thr Tyr Gln Glu Lys Val Cys Gly

115 120 125

Leu Cys Gly Asn Phe Asp Gly Ile Gln Asn Asn Asp Leu Thr Ser Ser

130 135 140

Asn Leu Gln Val Glu Glu Asp Pro Val Asp Phe Gly Asn Ser Trp Lys

145 150 155 160

Val Ser Ser Gln Cys Ala Asp Thr Arg Lys Val Pro Leu Asp Ser Ser

165 170 175

Pro Ala Thr Cys His Asn Asn Ile Met Lys Gln Thr Met Val Asp Ser

180 185 190

Ser Cys Arg Ile Leu Thr Ser Asp Val Phe Gln Asp Cys Asn Lys Leu

195 200 205

Val Asp Pro Glu Pro Tyr Leu Asp Val Cys Ile Tyr Asp Thr Cys Ser

210 215 220

Cys Glu Ser Ile Gly Asp Cys Ala Ala Phe Cys Asp Thr Ile Ala Ala

225 230 235 240

Tyr Ala His Val Cys Ala Gln His Gly Lys Val Val Thr Trp Arg Thr

245 250 255

Ala Thr Leu Cys Pro Gln Ser Cys Glu Glu Arg Asn Leu Arg Glu Asn

260 265 270

Gly Tyr Glu Ala Glu Trp Arg Tyr Asn Ser Cys Ala Pro Ala Cys Gln

275 280 285

Val Thr Cys Gln His Pro Glu Pro Leu Ala Cys Pro Val Gln Cys Val

290 295 300

Glu Gly Cys His Ala His Cys Pro Pro Gly Lys Ile Leu Asp Glu Leu

305 310 315 320

Leu Gln Thr Cys Val Asp Pro Glu Asp Cys Pro Val Cys Glu Val Ala

325 330 335

Gly Arg Arg Phe Ala Ser Gly Lys Lys Val Thr Leu Asn Pro Ser Asp

340 345 350

Pro Glu His Cys Gln Ile Cys His Cys Asp Val Val Asn Leu Thr Cys

355 360 365

Glu Ala Cys Gln Glu Pro

370

<210> 215

<211> 745

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> 1-745 в FVIII

<400> 215

Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser Trp Asp Tyr

1 5 10 15

Met Gln Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg Phe Pro Pro

20 25 30

Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val Tyr Lys Lys

35 40 45

Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn Ile Ala Lys Pro

50 55 60

Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr Ile Gln Ala Glu Val

65 70 75 80

Tyr Asp Thr Val Val Ile Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser His Pro Val

85 90 95

Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser Glu Gly Ala

100 105 110

Glu Tyr Asp Asp Gln Thr Ser Gln Arg Glu Lys Glu Asp Asp Lys Val

115 120 125

Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gln Val Leu Lys Glu Asn

130 135 140

Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser Tyr Leu Ser

145 150 155 160

His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu Ile Gly Ala Leu

165 170 175

Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr Gln Thr Leu

180 185 190

His Lys Phe Ile Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly Lys Ser Trp

195 200 205

His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gln Asp Arg Asp Ala Ala Ser

210 215 220

Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr Val Asn Arg

225 230 235 240

Ser Leu Pro Gly Leu Ile Gly Cys His Arg Lys Ser Val Tyr Trp His

245 250 255

Val Ile Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser Ile Phe Leu Glu

260 265 270

Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gln Ala Ser Leu Glu Ile

275 280 285

Ser Pro Ile Thr Phe Leu Thr Ala Gln Thr Leu Leu Met Asp Leu Gly

290 295 300

Gln Phe Leu Leu Phe Cys His Ile Ser Ser His Gln His Asp Gly Met

305 310 315 320

Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro Gln Leu Arg

325 330 335

Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp Leu Thr Asp

340 345 350

Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser Pro Ser Phe

355 360 365

Ile Gln Ile Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr Trp Val His

370 375 380

Tyr Ile Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro Leu Val Leu

385 390 395 400

Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gln Tyr Leu Asn Asn Gly Pro

405 410 415

Gln Arg Ile Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met Ala Tyr Thr

420 425 430

Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala Ile Gln His Glu Ser Gly Ile

435 440 445

Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu Leu Ile Ile

450 455 460

Phe Lys Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Asn Ile Tyr Pro His Gly Ile

465 470 475 480

Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys Gly Val Lys

485 490 495

His Leu Lys Asp Phe Pro Ile Leu Pro Gly Glu Ile Phe Lys Tyr Lys

500 505 510

Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp Pro Arg Cys

515 520 525

Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg Asp Leu Ala

530 535 540

Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu Ile Cys Tyr Lys Glu Ser Val Asp

545 550 555 560

Gln Arg Gly Asn Gln Ile Met Ser Asp Lys Arg Asn Val Ile Leu Phe

565 570 575

Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu Asn Ile Gln

580 585 590

Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gln Leu Glu Asp Pro Glu Phe

595 600 605

Gln Ala Ser Asn Ile Met His Ser Ile Asn Gly Tyr Val Phe Asp Ser

610 615 620

Leu Gln Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp Tyr Ile Leu

625 630 635 640

Ser Ile Gly Ala Gln Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe Ser Gly Tyr

645 650 655

Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr Leu Phe Pro

660 665 670

Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro Gly Leu Trp

675 680 685

Ile Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly Met Thr Ala

690 695 700

Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp Tyr Tyr Glu

705 710 715 720

Asp Ser Tyr Glu Asp Ile Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys Asn Asn Ala

725 730 735

Ile Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gln Asn

740 745

<210> 216

<211> 684

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> FVIII 1649-2332

<400> 216

Glu Ile Thr Arg Thr Thr Leu Gln Ser Asp Gln Glu Glu Ile Asp Tyr

1 5 10 15

Asp Asp Thr Ile Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp Ile Tyr

20 25 30

Asp Glu Asp Glu Asn Gln Ser Pro Arg Ser Phe Gln Lys Lys Thr Arg

35 40 45

His Tyr Phe Ile Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr Gly Met Ser

50 55 60

Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gln Ser Gly Ser Val Pro

65 70 75 80

Gln Phe Lys Lys Val Val Phe Gln Glu Phe Thr Asp Gly Ser Phe Thr

85 90 95

Gln Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His Leu Gly Leu Leu Gly

100 105 110

Pro Tyr Ile Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn Ile Met Val Thr Phe Arg

115 120 125

Asn Gln Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser Ser Leu Ile Ser Tyr

130 135 140

Glu Glu Asp Gln Arg Gln Gly Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys

145 150 155 160

Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val Gln His His Met Ala

165 170 175

Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp

180 185 190

Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu Ile Gly Pro Leu Leu

195 200 205

Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His Gly Arg Gln Val Thr

210 215 220

Val Gln Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr Ile Phe Asp Glu Thr Lys Ser

225 230 235 240

Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn

245 250 255

Ile Gln Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala

260 265 270

Ile Asn Gly Tyr Ile Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gln

275 280 285

Asp Gln Arg Ile Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn

290 295 300

Ile His Ser Ile His Phe Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys

305 310 315 320

Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu

325 330 335

Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly Ile Trp Arg Val Glu Cys

340 345 350

Leu Ile Gly Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val

355 360 365

Tyr Ser Asn Lys Cys Gln Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His Ile

370 375 380

Arg Asp Phe Gln Ile Thr Ala Ser Gly Gln Tyr Gly Gln Trp Ala Pro

385 390 395 400

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser Ile Asn Ala Trp Ser Thr

405 410 415

Lys Glu Pro Phe Ser Trp Ile Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met Ile

420 425 430

Ile His Gly Ile Lys Thr Gln Gly Ala Arg Gln Lys Phe Ser Ser Leu

435 440 445

Tyr Ile Ser Gln Phe Ile Ile Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp

450 455 460

Gln Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly

465 470 475 480

Asn Val Asp Ser Ser Gly Ile Lys His Asn Ile Phe Asn Pro Pro Ile

485 490 495

Ile Ala Arg Tyr Ile Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser Ile Arg Ser

500 505 510

Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met

515 520 525

Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys Ala Ile Ser Asp Ala Gln Ile Thr Ala

530 535 540

Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala

545 550 555 560

Arg Leu His Leu Gln Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gln Val Asn

565 570 575

Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gln Val Asp Phe Gln Lys Thr Met Lys Val

580 585 590

Thr Gly Val Thr Thr Gln Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr

595 600 605

Val Lys Glu Phe Leu Ile Ser Ser Ser Gln Asp Gly His Gln Trp Thr

610 615 620

Leu Phe Phe Gln Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gln Gly Asn Gln Asp

625 630 635 640

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg

645 650 655

Tyr Leu Arg Ile His Pro Gln Ser Trp Val His Gln Ile Ala Leu Arg

660 665 670

Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gln Asp Leu Tyr

675 680

<210> 217

<211> 226

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Fc-область

<400> 217

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

1 5 10 15

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

20 25 30

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

35 40 45

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

50 55 60

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

65 70 75 80

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

85 90 95

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

100 105 110

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

115 120 125

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

130 135 140

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

145 150 155 160

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

165 170 175

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

180 185 190

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

195 200 205

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser

210 215 220

Pro Gly

225

<210> 218

<211> 291

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> XTEN AE288-3

<400> 218

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro

1 5 10 15

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

20 25 30

Glu Ser Gly Pro Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro

35 40 45

Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr

50 55 60

Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

65 70 75 80

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

85 90 95

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu

100 105 110

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

115 120 125

Ser Thr Glu Glu Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr Ser Thr Glu Glu

130 135 140

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Thr Ser Glu

145 150 155 160

Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

165 170 175

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro Glu Ser Gly Pro

180 185 190

Gly Ser Glu Pro Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Glu Pro

195 200 205

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Ser Pro Ala Gly Ser Pro Thr

210 215 220

Ser Thr Glu Glu Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

225 230 235 240

Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro Gly Ser Glu Pro

245 250 255

Ala Thr Ser Gly Ser Glu Thr Pro Gly Thr Ser Glu Ser Ala Thr Pro

260 265 270

Glu Ser Gly Pro Gly Thr Ser Thr Glu Pro Ser Glu Gly Ser Ala Pro

275 280 285

Ala Ser Ser

290

<---

Claims

1. Способ лечения гемофилии A у субъекта-человека, нуждающегося в этом, предусматривающий введение субъекту химерного полипептида, содержащего:

(i) белок фактора VIII (FVIII), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 207; и (ii) белок фактора фон Виллебранда (VWF), содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 202,

где химерный полипептид вводится внутривенно в одной или более доз, составляющих от 45 МЕ/кг до 55 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет по меньшей мере 7 дней, где белок FVIII связан с белком VWF с помощью ковалентной связи.

2. Способ по п. 1, где ковалентная связь представляет собой дисульфидную связь.

3. Способ по п. 1 или 2, где каждая из нескольких доз составляет 50 МЕ/кг, а интервал между введениями доз составляет приблизительно 7 дней.

4. Способ по любому из пп. 1-3, где химерный полипептид предназначен для профилактического лечения.

5. Способ по любому из пп. 1-4, где субъект имеет тяжелую форму гемофилии A.

6. Способ по любому из пп. 1-5, где субъект ранее получал лечение гемофилии А с помощью любого рекомбинантного FVIII, полученного из плазмы крови FVIII или криопреципитата в течение по меньшей мере 150 дней воздействия (ED).

7. Способ по любому из пп. 1-6, где субъект или

(a) в настоящее время проходит режим профилактического лечения с помощью представленного на рынке продукта FVIII и имеет по меньшей мере четыре эпизода кровотечения за двенадцать месяцев до введения химерного полипептида; или

(b) в настоящее время проходит режим лечения по необходимости с помощью представленного на рынке продукта FVIII и имеет по меньшей мере двенадцать эпизодов кровотечения за двенадцать месяцев до введения химерного полипептида.

8. Способ по любому из пп. 1-7, где субъект имеет количество тромбоцитов по меньшей мере 100000 клеток/мкл.

9. Способ по любому из пп. 1-8, где у субъекта отсутствуют другие нарушения коагуляции.

10. Способ по любому из пп. 1-9, где у субъекта отсутствует в анамнезе выработка ингибиторов к продукту FVIII.

11. Способ по любому из пп. 1-10, где одну или более доз вводят в течение по меньшей мере 1 месяца, по меньшей мере 2 месяцев, по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 4 месяцев, по меньшей мере 5 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 2 лет, по меньшей мере 3 лет, по меньшей мере 4 лет, по меньшей мере 5 лет, по меньшей мере 10 лет, по меньшей мере 15 лет, по меньшей мере 20 лет или в течение по меньшей мере 25 лет.

12. Способ профилактического лечения тяжелой формы гемофилии A у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающий введение субъекту химерного полипептида, содержащего:

(i) белок FVIII, содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 207; и

(ii) белок VWF, содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 202,

где химерный полипептид вводится внутривенно в дозе 50 МЕ/кг один раз в неделю.

13. Способ по п. 12, где одна или более доз вводятся в течение по меньшей мере 6 месяцев.

14. Способ по п. 12, где одна или более доз вводятся в течение по меньшей мере 52 недель.