RU2808830C1 - Штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2 для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa - Google Patents
Штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2 для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa Download PDFInfo
- Publication number
- RU2808830C1 RU2808830C1 RU2023113925A RU2023113925A RU2808830C1 RU 2808830 C1 RU2808830 C1 RU 2808830C1 RU 2023113925 A RU2023113925 A RU 2023113925A RU 2023113925 A RU2023113925 A RU 2023113925A RU 2808830 C1 RU2808830 C1 RU 2808830C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacteriophage
- aeruginosa
- phage
- pseudomonas
- antimicrobial
- Prior art date
Links
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 title claims abstract description 84
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 title claims abstract description 38
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 title claims abstract description 12
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 title claims abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 24
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 32
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 28
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 description 19
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 18
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 13
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 12
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 12
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 9
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 8
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 238000009343 monoculture Methods 0.000 description 8
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 6
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000011203 antimicrobial therapy Methods 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 238000001066 phage therapy Methods 0.000 description 5
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 4
- 102000016559 DNA Primase Human genes 0.000 description 4
- 108010092681 DNA Primase Proteins 0.000 description 4
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 241001240958 Pseudomonas aeruginosa PAO1 Species 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 4
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JQQZCIIDNVIQKO-UHFFFAOYSA-N benzyl-dimethyl-[3-(tetradecanoylamino)propyl]azanium;chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 JQQZCIIDNVIQKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- AJBZENLMTKDAEK-UHFFFAOYSA-N 3a,5a,5b,8,8,11a-hexamethyl-1-prop-1-en-2-yl-1,2,3,4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a,13b-hexadecahydrocyclopenta[a]chrysene-4,9-diol Chemical compound CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC(C1(C)CC3O)(C)C2CCC1C1C3(C)CCC1C(=C)C AJBZENLMTKDAEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000132025 Calendula Species 0.000 description 3
- 235000003880 Calendula Nutrition 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N Resazurin Chemical compound C1=CC(=O)C=C2OC3=CC(O)=CC=C3[N+]([O-])=C21 PLXBWHJQWKZRKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 3
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000011477 surgical intervention Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 229940098465 tincture Drugs 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 2
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 2
- 108010061833 Integrases Proteins 0.000 description 2
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 2
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 2
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 2
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 2
- 101710166729 Tail fiber protein Proteins 0.000 description 2
- 102000008579 Transposases Human genes 0.000 description 2
- 108010020764 Transposases Proteins 0.000 description 2
- 206010064996 Ulcerative keratitis Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 2
- 201000007717 corneal ulcer Diseases 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000028744 lysogeny Effects 0.000 description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 2
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000004627 transmission electron microscopy Methods 0.000 description 2
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000589291 Acinetobacter Species 0.000 description 1
- 101000870242 Bacillus phage Nf Tail knob protein gp9 Proteins 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 108020004638 Circular DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000588919 Citrobacter freundii Species 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 206010066968 Corneal leukoma Diseases 0.000 description 1
- 206010011409 Cross infection Diseases 0.000 description 1
- 241000186427 Cutibacterium acnes Species 0.000 description 1
- 208000008960 Diabetic foot Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000588697 Enterobacter cloacae Species 0.000 description 1
- 241001245440 Enterobacter kobei Species 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101710145505 Fiber protein Proteins 0.000 description 1
- 208000008745 Healthcare-Associated Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000588744 Klebsiella pneumoniae subsp. ozaenae Species 0.000 description 1
- 206010024971 Lower respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 239000006142 Luria-Bertani Agar Substances 0.000 description 1
- 239000006391 Luria-Bertani Medium Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 241000295644 Staphylococcaceae Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 241000191963 Staphylococcus epidermidis Species 0.000 description 1
- 241000191984 Staphylococcus haemolyticus Species 0.000 description 1
- 241000122973 Stenotrophomonas maltophilia Species 0.000 description 1
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 208000024798 heartburn Diseases 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001320 lysogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000005399 mechanical ventilation Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 229940055019 propionibacterium acne Drugs 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 231100000075 skin burn Toxicity 0.000 description 1
- 206010040872 skin infection Diseases 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229940037649 staphylococcus haemolyticus Drugs 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2 ВКПМ: Ph-1630. Изобретение используется для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa. 4 ил.
Description
Предлагаемое изобретение относится к области микробиологии, может быть использовано в медицине и ветеринарии для лечения и профилактики инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa).
P. aeruginosa - грамотрицательные аэробные подвижные палочковидные бактерии, вызывают внутрибольничные инфекции, лечение затруднительно в виду высокой распространенности штаммов с множественной устойчивостью к противомикробным препаратам.
Штамм бактериофага Pseudomonas phage Ка2 не способен к лизогенному пути развития и является вирулентным, то есть обладает природной способностью лизировать (разрушать) клетки P. aeruginosa, вследствие чего выбран заявителем как перспективный бактериофаг для терапии инфекции, вызываемых бактериями P. aeruginosa, в том числе штаммами с множественной лекарственной устойчивостью.
Штамм бактериофага Pseudomonas phage Ка2 найден в естественных условиях, выделен из вод озера Байкал в зоне сброса сточных вод вблизи г. Слюдянка.
В результате анализа генома штамма бактериофага Pseudomonas phage Ка2 было идентифицировано 96 кодирующих последовательностей. Из них 68 генов кодируют гипотетические белки с неизвестной функцией, 28 генов кодируют белки с известными функциями, которые были распределены по функциональным группам.
Заявителем выявлено 6 генов, кодирующих структурные белки, из которых 2 гена отвечают за праймазную активность (праймаза синтезирует короткий фрагмент РНК, называемый праймером, комплементарный одноцепочечной матрице ДНК. Она играет ключевую роль в репликации ДНК) и 2 гена отвечают за хеликазную активность (хеликаза разделяет цепи двухцепочечной молекулы ДНК или внутримолекулярных связей в молекулах РНК, используя энергию гидролиза АТФ или ГТФ). В геноме штамма бактериофага Pseudomonas phage Ка2 отсутствуют потенциально связанные с лизогенией белки, такие как интеграза, транспозаза и рекомбиназа, что делает его перспективным для противомикробной терапии, в том числе в сочетании терапии с имеющимися противомикробными препаратами.
Фаговая терапия имеет ряд преимуществ перед терапией противомикробными препаратами, таких как разрушение биопленок, отсутствие зависимости от устойчивости возбудителя (бактерии) к противомикробным препаратам (в том числе множественной устойчивости), самоамплификация и отсутствие токсичности для человека. Информация, доступная по использованию фаготерапии против бактериальных инфекций, в особенности с инфекциями, вызываемыми бактериями с множественной лекарственной устойчивостью, все больше показывает многообещающие перспективы данной терапии в качестве альтернативы или дополнения к противомикробным препаратам.
Инфекционные заболевания, вызываемыми бактериями с множественной лекарственной устойчивостью, в настоящее время являются значительной причиной смертности во всем мире. Оценка этих заболеваний Всемирной организацией здравоохранения показала, что инфекции нижних дыхательных путей, вызываемые P. aeruginosa, диарейные заболевания входят в первую десятку факторов заболеваемости и смертности.
При этом появление устойчивости к противомикробным препаратам значительно увеличило распространенность инфекционных заболеваний и повысило смертность от них, а также увеличило расходы в сфере здравоохранения.
Несмотря на наличие разнообразных противомикробных агентов, используемых для лечения инфекций, у бактерий имеется резистентность ко многим из них. И эта резистентность возникает вскоре после того, как противомикробный препарат выходит в клиническую практику. Поэтому разработка противомикробных препаратов на основе бактериофагов, к которым бактерии не вырабатывают резистентности, является перспективной альтернативой классическим противомикробным препаратам для терапии инфекционных заболеваний, вызываемых бактериями с (множественной) лекарственной устойчивостью.
Использованные в описании сокращения термины и пояснения:
МПА - мясо-пептонный агар.
LA - твердая агаризованная среда Лурии-Бертани .
Лизис - в клинической медицине (греч, lysis) - растворение, разложение, ослабление, развязка клеток и их систем, в том числе микроорганизмов, под влиянием различных агентов, например ферментов, бактериолизинов, бактериофагов, противомикробных препаратов.
мкл - микролитр.
мкм - микрометр.
NaCl - хлорид натрия.
LA - твердая агаризованная среда Лурии-Бертани.
Клинические изоляты - потенциально болезнетворные микроорганизмы, в основном стафилококки и энтеробактерии, которые выделены не из природной среды, а из организма животных или людей, в том числе пациентов стационаров [https://www.google.com/search?q=%D0%BA%D0%B B%D0%B8%D0%BD%D0%B8% D1%87%D0%B5%D1%81%D0%BA%D0%B8%D0%B9+%D0%B8%D0%B7%D0%BE%D0%BB%D1%8F%D1%82+%D1%8D%D1%82%D0%BE&rlz=1C1GCEU_ruRU971RU971&oq=&aqs=chrome.0.69i59i450l8.1920183526j0j15&sourceid=chrome&ie=UTF-8].
КОЕ - колониеобразующая единица - единица измерения, оценивающая количество микробных клеток.
БОЕ - бляшкообразующая единица - наименьшее количество вируса или бактериофага, способное вызвать образование одной негативной (бляшки) соответственно на однослойной культуре клеток позвоночных или на агаровой культуре бактерий.
МПК - минимальная концентрация, подавляющая видимый рост исследуемого микроорганизма в бульонной культуре или на плотной среде.
Из исследованного уровня техники выявлено изобретение «Способ оценки эффективности фаготерапии при лечении инфекционных заболеваний» по патенту RU 2624511, сущностью является забор исследуемого биологического материала, введение раствора коммерческого бактериофага в исследуемый биологический материал и определение эффективности взаимодействия коммерческого бактериофага с патогенными микроорганизмами в исследуемом биологическом материале, отличается тем, что перед проведением хирургического вмешательства осуществляют идентификацию патогенных микроорганизмов в области планируемого хирургического вмешательства, определяют концентрацию (титр) бактериофага к патогенным микроорганизмам в исследуемом биологическом материале, вводят первую дозу раствора коммерческого бактериофага сразу после выполнения хирургического вмешательства, через 18 - 24 час после введения первой дозы раствора коммерческого бактериофага производят забор исследуемого биологического материала и определяют концентрацию (титр) бактериофага в исследуемом биологическом материале, при установлении титра не менее 106 БОЕ/мл делают вывод об эффективном воздействии раствора коммерческого бактериофага на целевой патогенный микроорганизм, через 18 - 24 час после введения первой дозы раствора коммерческого бактериофага вводят вторую дозу раствора коммерческого бактериофага, через 18 - 24 час после введения второй дозы раствора коммерческого бактериофага вводят третью дозу раствора коммерческого бактериофага, на 4 - 5 сутки после хирургического вмешательства выполняют забор исследуемого биологического материала и производят оценку эффективности путем сравнения бактериофага, содержащегося в исследуемом биологическом материале с раствором коммерческого бактериофага, при установлении тождественности литической активности не менее первых двух десятикратных разведений раствора коммерческого бактериофага, используемого для лечения пациента с бактериофагом, находящимся в исследуемом биологическом материале от пациента, делают вывод об эффективности фаготерапии и продолжают вводить раствор коммерческого бактериофага до полной элиминации патогенных микроорганизмов.
Недостатком известного способа является его ограниченная функциональность, а именно, он обеспечивает осуществление оценки эффективности фаготерапии при лечении инфекционных заболеваний, но не пригоден для лечения имеющегося заболевания.
Из исследованного уровня техники выявлено изобретение «Способ лечения или профилактики рецидивов нозокомиальной пневмонии» по заявке на изобретение RU 2021120556, сущностью является введение путем ингаляции фармацевтической композиции, содержащей один или более штаммов бактериофагов, отличающийся тем, что изготавливают базовый комплекс бактериофагов, содержащий фаги, активные в отношении бактерий основных возбудителей НП: Acinetobacter baumannti, Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae, Enterobacter kobei, Enterococcus faecium, Klebsiella ozaenae, Klebsiella pneumoniae, Propionibacterium acnes, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus haemolyticus, Stenotrophomonas maltophilia, Streptococcus pyogenes, адаптированный к конкретному отделению или лечебному учреждению на основании данных микробиологических исследований биоматериала пациентов с использованием чистых культур микроорганизмов, выделенных ранее из биоматериала пациентов данного учреждения и содержащий от 3 до 4 вирулентных бактериофагов к каждому из перечисленных возбудителей НП, проверяют активность фагов с использованием метода спот-тестирования, осуществляют адаптацию состава базового комплекса путем добавления штаммов бактериофагов из музея зарегистрированных в Международной коллекции микроорганизмов под инвентарным номером 986; готовую форму, содержащую базовый состав, адаптированный на основании проведенных исследований, передают в лечебное учреждение в виде раствора для ингаляций, каждый из флаконов которого содержит: действующее вещество в форме смеси стерильных очищенных фильтратов фаголизатов в концентрации по Грация 104 -9,9×107 БОЕ/см3 в 1 мл, вспомогательное вещество в форме физиологического раствора до 5 мл; препарат вводят ингаляционно пациентам по 1 дозе 5 мл 2-3 раза в день в течение не менее 7 дней. Способ, отличающийся тем, что пациентам, находящимся на самостоятельном дыхании, ингаляцию осуществляют с помощью небулайзера. Способ, отличающийся тем, что пациентам, находящимся на искусственной вентиляции легких (ИВЛ), небулайзер включают в контур аппарата ИВЛ.
Недостатком известного способа является отсутствие в описании технического решения информации о синергизме (взаимодействии различных биохимических и физиологических процессов, отдельных элементов целого организма) заявленной фармацевтической композиции в сочетании с противомикробными препаратами.
Из исследованного уровня техники выявлено изобретение «Способ лечения язвенных кератитов у лошадей препаратом с бактериофагами» по патенту RU 2770222, сущностью является способ лечения язвенных кератитов у лошадей препаратом с бактериофагами, включающий введение бактериофагового препарата «Фагодерм» в конъюнктивальную полость больного глаза в дозе 0,5 мл 4 раза в день в течение 25-30 дней до формирования лейкомы роговицы.
Недостатком известного способа является использование для его осуществления препарата «Фагодерм», куда входит малотоксичное вещество Carbopol ETD 2001. Но при этом данный препарат может вызывать аллергические реакции в виде кожного зуда, изжоги, тошноты, горечи во рту, болей в животе, так как содержит обладающий побочными действиями экстракт календулы [https://www.rlsnet.ru/drugs/kalenduly-nastoika-4328?ysclid.../ Календулы настойка - инструкция по применению, дозы, побочные действия, отзывы о препарате Календулы настойка: настойка - Энциклопедия лекарств РЛС (rlsnet.ru)] и эфирные масла. Кроме того, в описании отсутствует информация о положительной эффективности использовании способа в отношении антибиотико-резистентных штаммов бактерий при проведении профилактических и лечебных мероприятий в сочетании с противомикробными препаратами.
Известно изобретение «Бактериофаг, обладающий активностью против P. aeruginosa, белки бактериофага и способы их применения» по патенту RU 2580248, сущностью является выделенный бактериофаг с геномом, содержащим нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 3, обладающий активностью против P. aeruginosa. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью против P. aeruginosa, включающая терапевтически эффективное количество бактериофага по п. 1 и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция по п. 2, дополнительно включающая один или более дополнительных бактериофагов, эффективных против P. aeruginosa. Фармацевтическая композиция по п. 2, дополнительно включающая один или более дополнительных бактериофагов, эффективных против бактерий, отличных от P. aeruginosa. Белок, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 344-438, обладающий активностью против P. aeruginosa и кодируемый нуклеотидной последовательностью генома бактериофага по п. 1. Белок по п. 5, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 438 и представляющий собой концевой волоконный белок (tail fiber protein), обладающий активностью против P. aeruginosa, или белок, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 435 и представляющий собой белок хвостового отростка, обладающий активностью против P. aeruginosa. Белок, обладающий активностью против P. aeruginosa, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 438, соответствующей концевому волоконному белку, кодируемому нуклеотидной последовательностью генома бактериофага по п. 1. Белок, обладающий активностью против P. aeruginosa, имеющий аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 435, соответствующей белку хвостового отростка, кодируемому нуклеотидной последовательностью генома бактериофага по п. 1. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью против P. aeruginosa, содержащая терапевтически эффективное количество белка по п. 5, или по п. 7, или по п. 8 и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция по п. 9, включающая белок, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 435 или SEQ ID NO: 438. Фармацевтическая композиция по п. 10, дополнительно включающая один или более бактериофагов или дополнительных белков, кодируемых геномом бактериофага, где один или более бактериофагов или дополнительных белков эффективны против P. aeruginosa или эффективны против бактерий, отличных от P. aeruginosa. Выделенная нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую белок по п. 5, или по п. 7, или по п. 8, обладающий активностью против P. aeruginosa. Применение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п. 2 или п. 9 в изготовлении лекарственного средства для лечения или уменьшения частоты возникновения инфекции, обусловленной P. aeruginosa, у пациента, который в этом нуждается. Применение по п. 13, в котором инфекция является нозокомиальной. Применение по п. 13, в котором композицию вводят местно. Применение по п. 13, в котором пациентом является млекопитающее. Применение по п. 16, в котором млекопитающее является человеком. Применение по п. 13, в котором инфекцией, подвергаемой лечению, является инфекция кожи, легких, мочевых путей или почек. Применение по п. 18, в котором указанная инфекция кожи связана с ожогом кожи или диабетической язвой стопы. Способ диагностики бактериальной инфекции, вызванной P. aeruginosa, включающий (i) культивирование образца ткани, взятой у пациента; (ii) контактирование культуры со стадии (i) с бактериофагом по п. 1 или белком по п. 5, или по п. 7, или по п. 8, обладающим активностью против P. aeruginosa; и (iii) мониторинг роста или лизиса культуры, причем наличие лизиса культуры указывает на то, что культура включает P. aeruginosa. Способ по п. 20, в котором образец ткани представляет собой образец крови, мочи, мокроты, поврежденной кожи, жидкости, биопсии ткани или мазок, взятый у указанного пациента. Применение бактериофага по п. 1, обладающего активностью против P. aeruginosa, в изготовлении лекарственного средства для уменьшения или ингибирования инфекции, обусловленной колонизацией или ростом P. aeruginosa на биологической поверхности. Применение по п. 22, в котором указанная поверхность является кожей или слизистой оболочкой млекопитающего. 24. Применение по п. 23, в котором указанное млекопитающее является человеком. Применение белка по п. 5, или по п. 7, или по п. 8, обладающего активностью против P. aeruginosa, в изготовлении лекарственного средства для уменьшения или ингибирования инфекции, обусловленной колонизацией или ростом P. aeruginosa на биологической поверхности. Применение по п. 25, в котором указанная поверхность является кожей или слизистой оболочкой млекопитающего. Применение по п. 26, в котором указанное млекопитающее является человеком. Способ уменьшения или ингибирования колонизации или роста P. aeruginosa на твердой поверхности, включающий приведение указанной твердой поверхности в контакт с бактериофагом по п. 1 или белком по п. 5, или по п. 7, или по п. 8, обладающим активностью против P. aeruginosa. Способ по п. 28, в котором указанная поверхность является поверхностью больничной аппаратуры или частью больничного оборудования. Способ по п. 29, в котором указанная аппаратура или оборудование является хирургической аппаратурой или частью оборудования для хирургии.
Недостатком известного способа является отсутствие описания того, на скольких клинических изолятах было подтверждено его действие, также не описан положительный эффект с противомикробными препаратами. Также не описан положительный эффект воздействия бактериофагов и их белков на смешанную биоплёнку P. aeruginosa и S. aureus.
Выявленные аналоги совпадают с заявленным техническим решением по отдельным совпадающим признакам, поэтому прототип не выявлен и формула изобретения составлена без ограничительной части.
Техническим результатом заявленного решения является штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2, обладающий литической активностью в отношении бактерий P. aeruginosa, для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, в том числе в сочетании с имеющимися противомикробными препаратами. При этом достигается более высокий лечебный эффект по сравнению с использованием известных противомикробных препаратов.
Сущностью заявленного технического решения является штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2 для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa.
Заявленное техническое решение иллюстрируется Фиг.1 - Фиг.4.
На Фиг. 1 представлена морфология изолированного штамма бактериофага Pseudomonas phage Ка2, полученная с помощью трансмиссионной электронной микроскопии.
На Фиг. 2 представлены зоны лизиса на газоне монокультуры P. aeruginosa. Фиг. 2 демонстрирует полный лизис бактериальной культуры в зоне соприкосновения.
На Фиг. 3 представлена минимальная подавляющая концентрация противомикробных препаратов без и со штаммом бактериофага Pseudomonas phage Ка2 против монокультуры P. aeruginosa.
На Фиг. 4 представлена минимальная подавляющая концентрация противомикробных препаратов без и со штаммом бактериофага Pseudomonas phage Ка2 против смешанной культуры P. aeruginosa и S. aureus.
Далее заявителем приведено описание заявленного технического решения.
Характеристика заявленного штамма бактериофага
Pseudomonas Phage
Ка2.
Штамм бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 найден в естественных условиях, выделен из вод озера Байкал в зоне сброса сточных вод вблизи г. Слюдянка. На Фиг. 1 представлена морфология изолированного штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2, полученная с помощью трансмиссионной электронной микроскопии.
Культивирование штамма проводили по известной методике, например, https://pharmacopoeia.ru/ofs-1-7-1-0002-15-bakteriofagi-lechebno-profilakticheskie/#Испытания.
Средой для культивирования штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 является твердая агаризованная среда Лурии-Бертани (LA), состав среды LA (г/100 мл дистиллированной воды): триптон - 1,0; дрожжевой экстракт - 0,5; NaCl - 0,5; агар - 2,0.
Штамм бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 выращивают на среде LA на бактериальном газоне методом двойного слоя агара в чашке Петри в условиях термостата при температуре плюс 37,0 ± 0,5°С в течение 24 час. Полужидкую LA с 0,6 % агара используют для верхнего слоя. Наличие бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 и титр в супернатанте определяют по появлению бляшек на бактериальном газоне. Для получения бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 из зоны лизиса носиком соскабливают слой бактериофагов Pseudomonas Phage Ка2 и опускают в 0,9% раствор NaCl 15 мл. Полученный раствор обрабатывают хлороформом 30 мкл/мл в течение 30 минут при +4°С, центрифугируют, чтобы осадить клеточный дебрис при 4500 об/мин в течение 10 мин и надосадочную жидкость фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,22 мкм. Для длительного хранения бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 500 мкл свежего фаголизата смешивают с 500 мкл стерильного глицерина и помещают в морозильную камеру при минус 86°С.
Для измерения концентрации фаголизата в стерильный 96-луночный планшет в лунки вносили по 90 мкл 0,9% NaCl. В первую лунку добавляли 10 мкл фаголизата, следующие лунки содержали двукратно уменьшающиеся концентрации фаголизата. Готовили серийные 10-кратные разведения жидкой фаговой культуры из каждой лунки в 0,9% NaCl и по 15 мкл суспензии переносили на чашки с LA, предварительно содержащие ночную культуру P. aeruginosa. БОЕ подсчитывали из капель, содержащих минимум 5 бляшек, умножая на число разведения.
Культурально-морфологические признаки бактериофага
Pseudomonas Phage
Ka2.
При высеве заявленного штамма на МПА образуются бляшкообразующие единицы с четким краем и прозрачным центром различного диаметра в диапазоне от 0,3±0,1 до 0,5±0,1 мм.
Штамм бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 способен лизировать (разрушать) клетки P. aeruginosa PAO1. С помощью просвечивающего электронного микроскопа выявлено, что фаг имеет капсид размером 57±9 нм и сократимый негибкий хвост размером 115±10 нм в несокращенном состоянии (Фиг.1).
ДНК изолята выделена с помощью коммерческого набора Viral RNA/DNA Mini Kit (Invitrogen by Thermo Fisher Scientific) и проведено shotgun-секвенирование в режиме парноконцевых прочтений с длиной 300 п.о. на платформе Illumina MiSeq. Собран кольцевой геном размером 66310 п.о. с ГЦ-составом, равным 55%. Выравнивание с базой данных GenBank выявило максимальную идентичность с геномом бактериофага Pseudomonas phage S50 (97% идентичности при покрытии 99%). Геном депонирован в GenBank под номером ON529291.1 [https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/ON529291.1]. Бактериофаг Pseudomonas Phage Ка2 задепонирован в Биоресурсном центре Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (Регистрационный номер ВКПМ: Ph-1630). В результате аннотации генома штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 получены последовательности всех генов и выявлены их основные функции. В результате анализа идентифицировано 96 кодирующих последовательностей. Из них 68 генов кодируют гипотетические белки с неизвестной функцией. 28 генов кодируют белки с известными функциями, которые были распределены по функциональным группам с помощью SnapGene DNA. Выявлено 6 генов, кодирующих структурные белки. 2 гена отвечают за праймазную активность (праймаза синтезирует короткий фрагмент РНК, называемый праймером, комплементарный одноцепочечной матрице ДНК. Она играет ключевую роль в репликации ДНК) и 2 гена отвечают за хеликазную активность (хеликаза разделяет цепи двухцепочечной молекулы ДНК или внутримолекулярных связей в молекулах РНК, используя энергию гидролиза АТФ или ГТФ). В геноме бактериофага Ка2 отсутствуют потенциально связанные с лизогенией белки, такие как интеграза, транспозаза и рекомбиназа, что делает его перспективным для противомикробной терапии, в том числе в сочетании терапии с имеющимися противомикробными препаратами.
Далее заявителем представлены примеры конкретного выполнения заявленного технического решения.
Пример 1. Использование заявленного штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ka2 для оценки лизиса культуры P. aeruginosa PAO1.
Для оценки лизиса культуры P. aeruginosa PAO1 с использованием заявленного штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ka2 получают ночную культуру P. aeruginosa PAO1, наносят ее на поверхность LB - агара и подсушивают в ламинаре в течение 15 мин. Затем наносят на поверхность фаголизат в объеме 20 мкл и приподнимают чашку так, чтобы капли стекали вниз, формируя дорожки.
Полученную чашку после застывания переворачивают и инкубируют в термостате при +37°С 24 часа.
Получают зону лизиса на газоне монокультуры P. aeruginosa.
Полученный результат представлен на Фиг. 2 - представлены зоны лизиса на газоне монокультуры P. aeruginosa. Фиг. 2 демонстрирует полный лизис бактериальной культуры в зоне соприкосновения.
Пример 2. Использование заявленного штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ka2 для оценки его совместного действия с противомикробными препаратами.
Оценку совместного действия штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 с известными противомикробными препаратами проводят с помощью метода серийных разведений противомикробного препарата в 96-луночных стерильных полистироловых планшетах и определяют минимальную подавляющую концентрацию противомикробного препарата без добавления штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 и с добавлением штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2.
Сначала получают разведения противомикробного препарата (например, мирамистин, бензалкония хлорид) в питательной среде Мюллера-Хинтона (Sigmaaldrich). В первую лунку вносят противомикробный препарат в среде Мюллера-Хинтона в концентрации, в 2 раза превышающую максимальную, в объеме 200 мкл. В остальные лунки вносят чистую питательную среду Мюллера-Хинтона в объеме 100 мкл. Далее из первой лунки 100 мкл переносят во вторую лунку, тщательно перемешивают. Из второй лунки 100 мкл переносят в третью лунку и так далее. В результате, последовательным двукратным разведением доводят концентрацию противомикробного препарата до 0,0625 мкг/мл. Затем в каждую лунку вносят приготовленный инокулюм (100 мкл суспензии ночной культуры микроорганизмов P. aeruginosa с содержанием КОЕ 106 клеток в мл), разводя тем самым вдвое концентрацию противомикробного препарата. В результате максимальная финальная концентрация противомикробного препарата составляет 32 мкг/мл. В следующих лунках содержатся двукратно уменьшающиеся концентрации противомикробного препарата - 16-0,03125 мкг/мл.
В качестве контроля включают лунки, не содержащие противомикробного препарата (контроль роста культуры). Кроме того, ставят контроль чистоты питательных сред и растворителей.
Аналогично готовят серию разведений противомикробного препарата, в которую дополнительно вместе с инокулюмом вносят суспензию штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 до конечной концентрации 108 БОЕ/мл.
Планшеты инкубируют в термостате при +37 °С в течение 24 часов.
Оценку роста культур проводят с помощью окрашивания 0,1% водным раствором резазурина, внося по 5 мкл в каждую лунку. Сравнивают рост микроорганизмов P. aeruginosa в присутствии противомикробного препарата. Образование розовой окраски резазурина свидетельствовало о том, что данная концентрация исследуемого противомикробного препарата недостаточна, чтобы подавить жизнеспособность микроорганизмов P. aeruginosa. Первую, наименьшую, концентрацию исследуемого противомикробного препарата (из серии последовательных разведений), где не происходит образования розового продукта трансформации резазурина, считали МПК. В каждом опыте присутствовал положительный (бульон с растущей культурой P. aeruginosa) и отрицательный (бульон без растущей культуры P. aeruginosa) контроли. В качестве МПК соединения принимают его медианное значение, полученное в трех независимых экспериментах (биологические повторности).
Полученные результаты представлены на Фиг.3, где представлена минимальная подавляющая концентрация противомикробных препаратов без и с бактериофагом Pseudomonas Phage Ка2 против монокультуры P. aeruginosa. Показано, что в присутствии бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 минимальная подавляющая концентрация и мирамистина, и бензалкония хлорида снижается в 4 раза, следовательно, повышается эффективность противомикробной терапии инфекций, вызываемых P. aeruginosa.
Аналогично описанному выше провели серию разведений со смешанной культурой P. aeruginosa и S. aureus.
Полученные результаты представлены на Фиг.4, где представлена минимальная подавляющая концентрация исследуемых противомикробных препаратов без и с бактериофагом Pseudomonas Phage Ка2 против смешанной культуры P. aeruginosa и S. aureus. Показано, что в присутствии бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 минимальная подавляющая концентрация и мирамистина, и бензалкония хлорида снижается в 4 раза, следовательно, повышается эффективность противомикробной терапии смешанных инфекций, вызываемых P. aeruginosa и S. aureus.
Таким образом, из описанного выше можно сделать вывод, что заявителем достигнут заявленный технический результат, а именно: выделен штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2, обладающий литической активностью в отношении бактерий P. aeruginosa, для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, в том числе в сочетании с имеющимися противомикробными препаратами.
При этом достигнут более высокий лечебный эффект при совместном использовании штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 с противомикробными препаратами по сравнению с использованием одних противомикробных препаратов против монокультуры P. aeruginosa и смешанной культуры P. aeruginosa с другим условно-патогенным микроорганизмом, например, S. aureus. В сочетании с бактериофагом минимальная подавляющая концентрация препаратов снижалась в несколько раз как в монокультуре, так и в смешанной культуре. Так, в присутствии штамма бактериофага Pseudomonas Phage Ка2 минимальная подавляющая концентрация и мирамистина, и бензалкония хлорида против монокультуры P. aeruginosa снижалась в 4 раза (Фиг. 3), против смешанной культуры P. aeruginosa и S. aureus также снижалась в 4 раза (Фиг. 4).
Claims (1)
- Штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2 ВКПМ: Ph-1630 для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa.
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2808830C1 true RU2808830C1 (ru) | 2023-12-05 |
Family
ID=
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2624511C1 (ru) * | 2016-08-03 | 2017-07-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Новосибирский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Я.Л. Цивьяна" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "ННИИТО им. Я.Л. Цивьяна" Минздрава России) | Способ оценки эффективности фаготерапии при лечении инфекционных заболеваний |
RU2770222C1 (ru) * | 2020-11-20 | 2022-04-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Способ лечения язвенных кератитов у лошадей препаратом с бактериофагами |
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2624511C1 (ru) * | 2016-08-03 | 2017-07-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Новосибирский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии им. Я.Л. Цивьяна" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "ННИИТО им. Я.Л. Цивьяна" Минздрава России) | Способ оценки эффективности фаготерапии при лечении инфекционных заболеваний |
RU2770222C1 (ru) * | 2020-11-20 | 2022-04-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина) | Способ лечения язвенных кератитов у лошадей препаратом с бактериофагами |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
SAUSSEREAU E et al. Effectiveness of bacteriophages in the sputum of cystic fibrosis patients. Clin Microbiol Infect., 2014 Dec; 20(12): O983-90, PMID: 24920209. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Ryan et al. | Recent advances in bacteriophage therapy: how delivery routes, formulation, concentration and timing influence the success of phage therapy | |
ES2632367T3 (es) | Composiciones antibacterianas | |
ES2857199T3 (es) | Terapia con fagos de infecciones de Pseudomonas | |
Lai | Fatal septicaemia from Chromobacterium violaceum: case reports and review of the literature | |
JP7492337B2 (ja) | ファージ療法 | |
JP2017507913A (ja) | E.coli感染のファージを用いての治療 | |
KR20090030532A (ko) | 시포비리대에 속하는 박테리오파지 및 이를 포함하는 세균사멸용 조성물 | |
RU2455355C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИОФАГА Pseudomonas aeruginosa, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ ОСНОВЫ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ АСЕПТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА ПРОТИВ СИНЕГНОЙНОЙ ПАЛОЧКИ | |
KR20130087118A (ko) | 그람 음성균에 대해 세포 사멸능을 갖는 포도비리대 박테리오파지 | |
CN113583971A (zh) | 一株可同时裂解大肠杆菌的沙门氏菌噬菌体及其应用 | |
RU2628312C2 (ru) | Композиция антибактериальная для профилактики или лечения госпитальных инфекций (варианты), штаммы бактериофагов, используемые для получения такой композиции | |
RU2808830C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas phage Ka2 для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызываемых Pseudomonas aeruginosa | |
CN1690194A (zh) | 一株治疗金黄色葡萄球菌感染的噬菌体 | |
CN113430176A (zh) | 一株稳定高效的烈性沙门氏菌噬菌体rdp-sa-21004及其应用 | |
RU2717451C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 323 (500317), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
RU2717420C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 327 (500321), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
RU2717435C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 326 (500320), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
RU2717022C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 328 (500322), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
RU2717972C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 324 (500318), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
RU2717973C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 322 (500316), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
RU2717026C1 (ru) | Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 325 (500319), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов | |
RU2805786C2 (ru) | Способ лечения бактериального вагиноза | |
A-Ameri et al. | Determination the efficiency of camel's urine against multi-drugs resistant Pseudomonas aeruginosa (MDRPA), isolated from effected burns, wounds and ears | |
RU2758862C1 (ru) | Способ деструкции нуклеокапсида бактериофага М.П. Покровской | |
Sakib et al. | The combination of bacteriophage therapy and antibiotic therapy |