RU2806047C1 - Licorice herb flavonoids assay method - Google Patents

Licorice herb flavonoids assay method Download PDF

Info

Publication number
RU2806047C1
RU2806047C1 RU2022131284A RU2022131284A RU2806047C1 RU 2806047 C1 RU2806047 C1 RU 2806047C1 RU 2022131284 A RU2022131284 A RU 2022131284A RU 2022131284 A RU2022131284 A RU 2022131284A RU 2806047 C1 RU2806047 C1 RU 2806047C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
pinocembrin
pinostrobin
flavonoids
standard sample
optical density
Prior art date
Application number
RU2022131284A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Ольга Александровна Белова
Владимир Александрович Куркин
Максим Валерьевич Егоров
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации
Application granted granted Critical
Publication of RU2806047C1 publication Critical patent/RU2806047C1/en

Links

Abstract

FIELD: chemical; pharmaceutical industry.
SUBSTANCE: invention relates to licorice herb flavonoids assay method. The following is proposed: licorice herb flavonoids assay method by extraction with an organic solvent followed by the use of a spectrophotometric method, which includes a single extraction with 90% ethyl alcohol of air-dried raw materials with an accurate weighing of 1 g, crushed to a particle size passing through a sieve with holes with a diameter of 2 mm, in the ratio of raw material: extractant — 1:50, for 60 minutes, followed by sample preparation, adding 2 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride to the test solution and determining the optical density by differential spectrophotometry converted to pinocembrin at a wavelength of 310 nm using a standard sample of pinostrobin; the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin is calculated using the formula where x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin,%; D is the optical density of the test solution; Do is the optical density of a standard sample solution (SS) of pinostrobin; m is mass of raw materials, g; mo is mass of the standard sample of pinostrobin, g; W is weight loss during drying, %; 1.05 is conversion factor; in the absence of a standard sample of pinostrobin, the calculated value of the specific absorption index at 310 nm, equal to 680 is used, and the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin is calculated using the following formula where x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin,%; D is the optical density of the test solution; m is mass of raw materials, g; 680 is specific absorption index (E) of a standard sample of pinocembrin at 310 nm; W is weight loss during drying, %.
EFFECT: above-described licorice herb flavonoids assay method makes it possible to objectively assess the quality of this raw material.
1 cl, 8 dwg, 2 ex

Description

Данное изобретение создано в рамках направления развития химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения суммы флавоноидов в траве солодки голой (Glycyrrhiza glabra L.). This invention was created within the framework of the development of the chemical-pharmaceutical industry and can be used in drug quality control centers and control and analytical laboratories when conducting a quantitative determination of the amount of flavonoids in the herb licorice ( Glycyrrhiza glabra L.).

Вопрос стандартизации биологически активных соединений (БАС) в лекарственном растительном сырье на сегодняшний день является весьма значимым в современной фармацевтической практике, а именно в процессе осуществления контроля качества. С этой целью необходимо разрабатывать новые и усовершенствовать имеющиеся методы количественного определения БАС как в сырье фармакопейном, так и в перспективном, но малоизученном сырье, каким является трава солодки голой.The issue of standardization of biologically active compounds (BAS) in medicinal plant raw materials today is very significant in modern pharmaceutical practice, namely in the process of quality control. For this purpose, it is necessary to develop new and improve existing methods for the quantitative determination of BAS both in pharmacopoeial raw materials and in promising but little-studied raw materials, such as the licorice herb.

Изучение химического состава перспективных растительных объектов является важным направлением в современной фармации. Солодка голая (Glycyrrhiza glabra L.) - представитель семейства Бобовые (Fabaceae), в качестве фармакопейного лекарственного растительного сырья (ЛРС) которого применяются корни (1). Трава солодки голой является источником БАС флавоноидной природы, а именно флавонона - пиноцембрина.The study of the chemical composition of promising plant objects is an important direction in modern pharmacy. Licorice ( Glycyrrhiza glabra L.) is a representative of the legume family ( Fabaceae ), the roots of which are used as pharmacopoeial medicinal plant raw materials (MPS) (1). The licorice herb is a source of BAS of flavonoid nature, namely flavonone - pinocembrin.

Существует методика прямой спектрофотометрии определения флавоноидов в траве солодки голой, которая выбрана нами в качестве прототипа (2). There is a method for direct spectrophotometry for determining flavonoids in the licorice herb, which we chose as a prototype (2).

На наш взгляд, данная методика имеет ряд существенных недостатков, а именно: многостадийность процесса экстракции, неоптимальный экстрагент (96% этиловый спирт), который не позволяет исчерпывающе извлекать целевые вещества, использование прямой спектрофотометрии, в условиях который имеет место завышение результатов анализа.In our opinion, this technique has a number of significant drawbacks, namely: a multi-stage extraction process, a suboptimal extractant (96% ethyl alcohol), which does not allow exhaustive extraction of target substances, and the use of direct spectrophotometry, under conditions in which the analysis results are overestimated.

Цель настоящего исследования - разработка методики количественного определения суммы флавоноидов в траве солодки голой, позволяющей более объективно оценивать качество данного сырья. The purpose of this study is to develop a method for quantitative determination of the amount of flavonoids in the licorice herb, which allows a more objective assessment of the quality of this raw material.

Техническим результатом является создание способа количественного определения суммы флавоноидов в траве солодки голой в пересчете на пиноцембрин. The technical result is the creation of a method for quantitative determination of the amount of flavonoids in the licorice grass in terms of pinocembrin.

Технический результат достигается тем, что получают водно-спиртовое извлечение из травы солодки голой путем однократной экстракции в течение 60 минут 90% этиловым спиртом воздушно-сухого сырья точной навеской массой 1 г, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм, в соотношении «сырье-экстрагент» 1:50; количественное определение суммы флавоноидов проводят методом дифференциальной спектрофотометрии при длине волны 310 нм, в пересчете на пиноцембрин и содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин и абсолютно сухое сырье рассчитывают по формуле: The technical result is achieved by obtaining a water-alcohol extract from the licorice herb by a single extraction for 60 minutes with 90% ethyl alcohol of air-dried raw materials with an accurate weighing of 1 g, crushed to a particle size passing through a sieve with holes with a diameter of 2 mm, in the raw material-extractant ratio 1:50; quantitative determination of the amount of flavonoids is carried out using the method of differential spectrophotometry at a wavelength of 310 nm, in terms of pinocembrin and the content of the amount of flavonoids in terms of pinocembrin and absolutely dry raw materials is calculated using the formula:

где:Where:

x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %; x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %;

D - оптическая плотность испытуемого раствора; D is the optical density of the test solution;

D o - оптическая плотность раствора СО пиноцембрин; D o - optical density of pinocembrin CO solution;

m - масса сырья, г; m - mass of raw materials, g;

m о - масса СО пиноцембрина, г; m o - mass of pinocembrin CO, g;

W - потеря в массе при высушивании, %; W - weight loss during drying, %;

1,05 - коэффициент пересчета. 1.05 - conversion factor.

В случае отсутствия стандартного образца пиностробина целесообразно использовать рассчитанное значение удельного показателя поглощения при 310 нм - 680.In the absence of a standard sample of pinostrobin, it is advisable to use the calculated value of the specific absorption index at 310 nm - 680.

где:Where:

x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %; x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %;

D - оптическая плотность испытуемого раствора; D is the optical density of the test solution;

m - масса сырья, г; m - mass of raw materials, g;

680 - удельный показатель поглощения (E) СО пиноцембрина при 310 нм; 680 - specific absorption rate (E ) pinocembrin CO at 310 nm;

W - потеря в массе при высушивании, %. W - weight loss during drying, %.

Поскольку в траве данного растения преобладают флавононы, среди которых доминирующим флавоноидом является пиноцембрин - Фиг. 1А, на наш взгляд, именно пиноцембрин в основном определяет характер кривой поглощения водно-спиртового извлечения из травы солодки голой. Этот вывод соответствует литературным данным (2). Нами была изучена возможность использования в качестве СО пиностробин (ФС 42-0073-01), близкого по химическому строению пиноцембрину - Фиг. 1Б. Since the herb of this plant is dominated by flavonones, among which the dominant flavonoid is pinocembrin - Fig. 1A, in our opinion, it is pinocembrin that mainly determines the nature of the absorption curve of the aqueous-alcoholic extract from the herb licorice. This conclusion is consistent with literature data (2). We have studied the possibility of using pinostrobin (FS 42-0073-01), which is similar in chemical structure to pinocembrin, as a CO - Fig. 1B.

При изучении спектральных характеристик было выявлено, что пиностробин -Фиг. 2 и пиноцембрин -Фиг. 3 определяет характер кривой поглощения водно-спиртового извлечения из травы солодки голой Фиг - 4. Установлено, что при добавлении алюминия хлорида к испытуемому раствору и растворам пиноцембрина и пиностробина наблюдается батохромный сдвиг в длинноволновом спектре поглощения.When studying the spectral characteristics, it was revealed that pinostrobin -Fig. 2 and pinocembrin -Fig. 3 determines the nature of the absorption curve of the aqueous-alcoholic extract from the licorice herb. Fig - 4. It has been established that when aluminum chloride is added to the test solution and solutions of pinocembrin and pinostrobin, a bathochromic shift is observed in the long-wave absorption spectrum.

Изучение УФ-спектров фигуры 2 (где кривая 1 - раствор пиностробина, а кривая 2 - раствор пиностробина с добавлением алюминия хлорида) и фигуры 3 (где кривая 1 - раствор пиноцембрина, а кривая 2 - раствор пиностробина с добавлением алюминия хлорида) показало, что растворы СО пиностробина и пиноцембрина в присутствии алюминия хлорида имеет максимум поглощения при длине волны 310 нм. В УФ-спектре водно-спиртового извлечения из травы солодки голой в дифференциальном варианте на фигуре 4 так же обнаруживается при длине волны 310 нм максимум поглощения, который соответствует максимуму поглощения спиртовых растворов пиностробина и пиноцембрина.A study of the UV spectra of figure 2 (where curve 1 is a solution of pinostrobin, and curve 2 is a solution of pinostrobin with the addition of aluminum chloride) and figure 3 (where curve 1 is a solution of pinocembrin, and curve 2 is a solution of pinostrobin with the addition of aluminum chloride) showed that CO solutions of pinostrobin and pinocembrin in the presence of aluminum chloride have an absorption maximum at a wavelength of 310 nm. In the UV spectrum of the aqueous-alcoholic extract from the licorice herb, in the differential version in figure 4, an absorption maximum is also detected at a wavelength of 310 nm, which corresponds to the absorption maximum of alcohol solutions of pinostrobin and pinocembrin.

Данный факт позволяет проводить спектрофотометрическое определение суммы флавоноидов в траве солодки голой при аналитической длине волны 310 нм. This fact allows us to carry out a spectrophotometric determination of the amount of flavonoids in the licorice grass at an analytical wavelength of 310 nm.

Также нами было изучено влияние экстрагента на процесс экстракции. В таблице 1 Фиг. 5 представлена зависимость выхода флавоноидов травы солодки от концентрации экстрагента. В результате эксперимента в качестве оптимального экстрагента нами был выбран 90% этиловый спирт, так как выход действующих веществ из сырья при его использовании максимален. We also studied the effect of the extractant on the extraction process. In Table 1 of Fig. Figure 5 shows the dependence of the yield of flavonoids from the licorice herb on the concentration of the extractant. As a result of the experiment, we chose 90% ethyl alcohol as the optimal extractant, since the yield of active substances from raw materials when used is maximum.

Далее нами был изучен вопрос относительно продолжительности экстракции на кипящей водяной бане. В таблице 2 Фиг. 6 представлена зависимость выхода флавоноидов травы солодки голой от времени экстракции на кипящей водяной бане, при этом было выбрано время экстракции 60 минут.Next, we studied the issue regarding the duration of extraction in a boiling water bath. In table 2 Fig. Figure 6 shows the dependence of the yield of flavonoids from the licorice herb on the extraction time in a boiling water bath, with an extraction time of 60 minutes chosen.

В таблице 3 фиг. 7 представлена зависимость выхода флавоноидов травы солодки голой от соотношения «сырье-экстрагент». Из таблицы 3 видно, что максимальный выход действующих веществ наблюдается при соотношении «сырье-экстрагент» 1:50, по этой причине данное соотношение было выбрано нами в качестве оптимального.In table 3 of Fig. Figure 7 shows the dependence of the yield of flavonoids from the licorice herb on the raw material-extractant ratio. From Table 3 it can be seen that the maximum yield of active ingredients is observed with a raw material-extractant ratio of 1:50, for this reason we chose this ratio as optimal.

В таблице 4 Фиг. 8 представлена зависимость выхода флавоноидов травы солодки голой от степени измельчения листьев. Из таблицы 4 видно, что максимальный выход действующих веществ наблюдается при степени измельчения - 2 мм.In table 4 of Fig. Figure 8 shows the dependence of the yield of flavonoids from the licorice herb on the degree of leaf grinding. From Table 4 it can be seen that the maximum yield of active substances is observed at a degree of grinding of 2 mm.

Учитывая, что увеличение числа операций на стадии пробоподготовки ведет к возрастанию ошибки, выбор сделан в пользу одностадийного процесса экстракции с подтверждением требуемой точности количественного определения. Considering that an increase in the number of operations at the sample preparation stage leads to an increase in error, the choice was made in favor of a one-step extraction process with confirmation of the required accuracy of quantitative determination.

Таким образом, было определено, что оптимальными параметрами экстракции являются: однократное извлечение 90% этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 60 минут в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:50, оптимальная степень измельчения - 2 мм.Thus, it was determined that the optimal extraction parameters are: single extraction with 90% ethyl alcohol in a boiling water bath for 60 minutes at a raw material-extractant ratio of 1:50, the optimal degree of grinding is 2 mm.

Способ реализуется следующим образом.The method is implemented as follows.

Методика количественного определения суммы флавоноидов в траве солодке голой. Аналитическую пробу воздушно-сухого сырья травы солодки голой измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Около 1 г точной навески измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 90% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарирных весах с точностью до +0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 минут. Затем колбу охлаждают в течение 60 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через фильтр с красной полосой. Method for quantitative determination of the amount of flavonoids in the herb licorice. An analytical sample of air-dried raw materials of licorice herb is ground to a particle size that passes through a sieve with holes 2 mm in diameter. About 1 g of an accurately weighed portion of the crushed raw material is placed in a flask with a ground section with a capacity of 100 ml, and 50 ml of 90% ethyl alcohol is added. The flask is stoppered and weighed on a tare scale with an accuracy of +0.01. The flask is connected to a reflux condenser and heated in a boiling water bath (moderate boiling) for 60 minutes. Then the flask is cooled for 60 minutes, closed with the same stopper, weighed again and the missing extractant is replenished to the original mass. The extract is filtered through a red band filter.

Испытуемый раствор для анализа суммы флавоноидов готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки 96 % этиловым спиртом (испытуемый раствор). The test solution for analyzing the amount of flavonoids is prepared as follows: 1 ml of the resulting extract is placed in a 50 ml volumetric flask, 2 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added and the volume of the solution is adjusted to the mark with 96% ethyl alcohol (test solution).

Для расчета содержания суммы флавоноидов готовят раствор стандартного образца рутина, добавляют к нему 3% спиртовой раствор алюминия хлорида, измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса при аналитической длине волны 310 нм и определенное значение оптической плотности используют в формуле расчета.To calculate the content of the total flavonoids, prepare a solution of a standard sample of rutin, add a 3% alcohol solution of aluminum chloride to it, measure the optical density of the colored complex at an analytical wavelength of 310 nm, and use a certain optical density value in the calculation formula.

Приготовление раствора стандартного образца пиностробина. Preparation of a solution of a standard pinostrobin sample.

Около 0,02 г (точная навеска) пиностробина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл 96% этилового спирта при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы до комнатной температуры доводят объем раствора 96% этиловым спиртом до метки (раствор А СО пиностробина). После чего 1 мл раствора А СО пиностробина помещают в мерную колбу на 25 мл, добавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96 % (испытуемый раствор Б СО пиностробина). Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96%.About 0.02 g (exactly weighed) of pinostrobin is placed in a 100 ml volumetric flask and dissolved in 50 ml of 96% ethyl alcohol while heating in a water bath. After cooling the contents of the flask to room temperature, adjust the volume of the solution with 96% ethyl alcohol to the mark (pinostrobin solution A CO). After that, 1 ml of solution A of pinostrobin CO is placed in a 25 ml volumetric flask, 2 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added and the volume of the solution is adjusted to the mark with ethyl alcohol 96% (test solution B of pinostrobin CO). The reference solution is prepared as follows: 1 ml of the resulting solution is placed in a 25 ml volumetric flask, the volume of the solution is adjusted to the mark with 96% ethyl alcohol.

Измерение оптической плотности проводят при длине волны 310 нм через 40 минут после приготовления всех растворов.Optical density measurements are carried out at a wavelength of 310 nm 40 minutes after preparing all solutions.

Содержание суммы флавоноидов (x, %) в пересчете на пиноцембрин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:The content of the total flavonoids (x, %) in terms of pinocembrin and absolutely dry raw materials is calculated using the formula:

где:Where:

x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %; x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %;

D - оптическая плотность испытуемого раствора; D is the optical density of the test solution;

D o - оптическая плотность раствора СО пиностробина; D o - optical density of pinostrobin CO solution;

m - масса сырья, г; m - mass of raw materials, g;

m о - масса СО пиностробина, г; m o - mass of pinostrobin CO, g;

W - потеря в массе при высушивании, %; W - weight loss during drying, %;

1,05 - коэффициент пересчета. 1.05 - conversion factor.

В случае отсутствия стандартного образца пиностробина целесообразно использовать рассчитанное значение удельного показателя поглощения при 310 нм - 680.In the absence of a standard sample of pinostrobin, it is advisable to use the calculated value of the specific absorption index at 310 nm - 680.

где:Where:

x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %; x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %;

D - оптическая плотность испытуемого раствора; D is the optical density of the test solution;

m - масса сырья, г; m - mass of raw materials, g;

680 - удельный показатель поглощения (E) СО пиноцембрина при 310 нм; 680 - specific absorption rate (E ) pinocembrin CO at 310 nm;

W - потеря в массе при высушивании, %. W - weight loss during drying, %.

Предлагаемый способ поясняется следующими примерами.The proposed method is illustrated by the following examples.

Пример 1.Example 1.

Аналитическую пробу сырья травы солодки голой (заготовлено в Самарской области, Кинельский район, п. Алексеевка, август 2021 г.) измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. 1,0028 г измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 90% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарирных весах с точностью до +0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 минут. Затем колбу охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (красная полоса).An analytical sample of raw licorice herb (prepared in the Samara region, Kinelsky district, Alekseevka village, August 2021) is crushed to a particle size that passes through a sieve with holes with a diameter of 2 mm. 1.0028 g of crushed raw material is placed in a flask with a ground section with a capacity of 100 ml, 50 ml of 90% ethyl alcohol is added. The flask is stoppered and weighed on a tare scale with an accuracy of +0.01. The flask is connected to a reflux condenser and heated in a boiling water bath (moderate boiling) for 60 minutes. Then the flask is cooled for 30 minutes, closed with the same stopper, weighed again and the missing extractant is replenished to the original mass. The extract is filtered through a paper filter (red stripe).

Испытуемый раствор для анализа суммы флавоноидов готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96% (испытуемый раствор). The test solution for analyzing the amount of flavonoids is prepared as follows: 1 ml of the resulting extract is placed in a 50 ml volumetric flask, 2 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added and the volume of the solution is adjusted to the mark with 96% ethyl alcohol (test solution).

Для расчета содержания суммы флавоноидов готовят раствор стандартного образца рутина, добавляют к нему 3% спиртовой раствор хлорида алюминия, измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса при длине волны 310 нм и определенное значение оптической плотности используют в формуле расчета.To calculate the content of the total flavonoids, prepare a solution of a standard sample of rutin, add a 3% alcohol solution of aluminum chloride to it, measure the optical density of the colored complex at a wavelength of 310 nm and use a certain optical density value in the calculation formula.

Приготовление раствора стандартного образца пиностробина.Preparation of a solution of a standard pinostrobin sample.

0,0207 г пиностробина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл 96% этилового спирта при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы до комнатной температуры доводят объем раствора 96% этиловым спиртом до метки (раствор А СО пиностробина). После чего 1 мл раствора А СО пиностробина помещают в мерную колбу на 25 мл, добавляют 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида, затем доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96 %. Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки спиртом этиловым 96 %.0.0207 g of pinostrobin is placed in a 100 ml volumetric flask and dissolved in 50 ml of 96% ethyl alcohol while heating in a water bath. After cooling the contents of the flask to room temperature, adjust the volume of the solution with 96% ethyl alcohol to the mark (pinostrobin solution A CO). After that, 1 ml of pinostrobin CO solution A is placed in a 25 ml volumetric flask, 2 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added, then the volume of the solution is adjusted to the mark with 96% ethyl alcohol. The reference solution is prepared as follows: 1 ml of the resulting solution is placed in a 25 ml volumetric flask, the volume of the solution is adjusted to the mark with 96% ethyl alcohol.

Измерение оптической плотности проводят при длине волны 310 нм через 40 минут после приготовления всех растворов. Optical density measurements are carried out at a wavelength of 310 nm 40 minutes after preparing all solutions.

Содержание суммы флавоноидов (x, %) в пересчете на пиноцембрин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:The content of the total flavonoids (x, %) in terms of pinocembrin and absolutely dry raw materials is calculated using the formula:

где:Where:

x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %; x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %;

D - оптическая плотность испытуемого раствора; D is the optical density of the test solution;

D o - оптическая плотность раствора СО пиностробина; D o - optical density of pinostrobin CO solution;

m - масса сырья, г; m - mass of raw materials, g;

m о - масса СО пиностробина, г; m o - mass of pinostrobin CO, g;

W - потеря в массе при высушивании, %; W - weight loss during drying, %;

1,05 - коэффициент пересчета. 1.05 - conversion factor.

Пример 2.Example 2.

При необходимости определения суммы флавоноидов в траве солодки голой в отсутствии стандартного образца пиноцембрина, необходимо провести все действия из примера 1 до приготовления раствора стандартного образца пиностробина. If it is necessary to determine the amount of flavonoids in the herb licorice glabra in the absence of a standard sample of pinocembrin, it is necessary to carry out all the steps from example 1 before preparing a solution of a standard sample of pinostrobin.

После измерения оптической плотности извлечения из травы солодки голой при длине волны 310 нм, содержание суммы флавоноидов (x, %) в пересчете на пиноцембрин и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле, используя теоретическое значение удельного показателя поглощения пиноцембрина, равное 680:After measuring the optical density of the licorice extract from the herb at a wavelength of 310 nm, the content of the total flavonoids (x, %) in terms of pinocembrin and absolutely dry raw materials is calculated by the formula using the theoretical value of the specific absorption index of pinocembrin equal to 680:

где:Where:

x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %; x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %;

D - оптическая плотность испытуемого раствора; D is the optical density of the test solution;

m - масса сырья, г; m - mass of raw materials, g;

680 - удельный показатель поглощения (E) СО пиноцембрина при 310 нм; 680 - specific absorption rate (E ) pinocembrin CO at 310 nm;

W - потеря в массе при высушивании, %. W - weight loss during drying, %.

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин x=3,41%, что сравнимо со значением, полученном в примере 1 в пределах погрешности (±0,015).The content of the total flavonoids in terms of pinocembrin x = 3.41%, which is comparable to the value obtained in example 1 within the error (±0.015).

Все результаты были статистически обработаны. Ошибка единичного количественного определения составила ±0,43%.All results were statistically processed. The error of a single quantitative determination was ±0.43%.

Таким образом, предлагаемый способ количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин в траве солодки голой с использованием дифференциальной спектрофотометрии разработан впервые для данного вида сырья и обладает следующими преимуществами:Thus, the proposed method for quantitative determination of the amount of flavonoids in terms of pinocembrin in licorice glabra using differential spectrophotometry was developed for the first time for this type of raw material and has the following advantages:

1. Разработанный метод является более специфичным и селективным, а также позволяет проводить экстракцию сырья однократно 90% этиловым спиртом, позволяющим исчерпывающе извлекать целевые вещества (флавоноиды).1. The developed method is more specific and selective, and also allows for the extraction of raw materials once with 90% ethyl alcohol, which allows for the exhaustive extraction of target substances (flavonoids).

2. Пересчет суммы флавоноидов осуществляется на специфическое и доминирующее для травы солодки голой вещество флавоноидной природы - пиноцембрин, определяющий характер кривой поглощения в УФ - спектре испытуемого раствора (длина волны 310 нм).2. The amount of flavonoids is recalculated to a substance of flavonoid nature that is specific and dominant for the licorice herb - pinocembrin, which determines the nature of the absorption curve in the UV spectrum of the test solution (wavelength 310 nm).

3. В методике количественного определения суммы флавоноидов в траве солодки голой используется СО пиностробин, имеющий фармакопейный статус (ФС 42-0073-01).3. In the method for quantitative determination of the amount of flavonoids in the herb licorice, pinostrobin CO, which has pharmacopoeial status (FS 42-0073-01), is used.

4. Ошибка единичного определения предлагаемого способа составляет ±0,43%, что свидетельствует об объективности разработанного способа.4. The error of a single determination of the proposed method is ±0.43%, which indicates the objectivity of the developed method.

5. Этот способ может быть использован в центрах контроля качества лекарственных средств, на фармацевтических предприятиях и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного анализа травы солодки голой.5. This method can be used in drug quality control centers, pharmaceutical factories and control and analytical laboratories when conducting quantitative analysis of licorice herb.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ:INFORMATION SOURCES:

1. Маматханова М.А., Абдурахманов Б.А., Нигматуллаев Б.А., Сотимов Г.Б., Халилов Р.М., Маматханов А.У., Изучение надземной части Glycyrrhiza glabra в качестве перспективного сырья для производства препаратов на основе флавоноидов. // Химия растительного сырья. - 2016. - №1. - С. 171-1761. Mamathanova M.A., Abdurakhmanov B.A., Nigmatullaev B.A., Sotimov G.B., Khalilov R.M., Mamatkhanov A.U., Study of the aerial part of Glycyrrhiza glabra as a promising raw material for the production of drugs based on flavonoids. // Chemistry of plant raw materials. - 2016. - No. 1. - pp. 171-176

2. Государственная фармакопея РФ XIV изд. Том I-IV. [Электронное издание]. Режим доступа: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php2. State Pharmacopoeia of the Russian Federation XIV edition. Volume I-IV. [Electronic edition]. Access mode: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php

Claims (16)

Способ количественного определения суммы флавоноидов в траве солодки голой путем экстракции органическим растворителем с последующим использованием метода спектрофотометрии, отличающийся тем, что включает однократную экстракцию 90% этиловым спиртом воздушно-сухого сырья точной навеской массой 1 г, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм, в соотношении сырье:экстрагент - 1:50, в течение 60 минут с последующей пробоподготовкой, прибавление к исследуемому раствору 2 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и определение оптической плотности методом дифференциальной спектрофотометрии с пересчетом на пиноцембрин при длине волны 310 нм с использованием стандартного образца пиностробина; содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин рассчитывают по формуле A method for quantitative determination of the amount of flavonoids in licorice grass by extraction with an organic solvent followed by the use of a spectrophotometric method, characterized in that it includes a single extraction with 90% ethyl alcohol of air-dried raw materials with an accurate weighing of 1 g, crushed to a particle size passing through a sieve with holes with a diameter of 2 mm, in the ratio of raw material:extractant - 1:50, for 60 minutes, followed by sample preparation, adding 2 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride to the test solution and determining the optical density by differential spectrophotometry with conversion to pinocembrin at a wavelength of 310 nm using a standard sample of pinostrobin; the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin is calculated using the formula где x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %;where x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %; D - оптическая плотность испытуемого раствора;D is the optical density of the test solution; Do - оптическая плотность раствора стандартного образца (СО) пиностробина;D o is the optical density of a standard sample solution (SS) of pinostrobin; m - масса сырья, г;m - mass of raw materials, g; mо - масса стандартного образца пиностробина, г;m o - mass of the standard sample of pinostrobin, g; W - потеря в массе при высушивании, %;W - weight loss during drying, %; 1,05 - коэффициент пересчета;1.05 - conversion factor; в случае отсутствия стандартного образца пиностробина используют рассчитанное значение удельного показателя поглощения при 310 нм, равное 680, и вычисляют содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин по формулеin the absence of a standard sample of pinostrobin, use the calculated value of the specific absorption index at 310 nm, equal to 680, and calculate the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin using the formula где x - содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиноцембрин, %;where x is the content of the total flavonoids in terms of pinocembrin, %; D - оптическая плотность испытуемого раствора;D is the optical density of the test solution; m - масса сырья, г;m - mass of raw materials, g; 680 - удельный показатель поглощения (E) стандартного образца пиноцембрина при 310 нм;680 - specific absorption index (E) of a standard sample of pinocembrin at 310 nm; W - потеря в массе при высушивании, %.W - weight loss during drying, %.
RU2022131284A 2022-11-30 Licorice herb flavonoids assay method RU2806047C1 (en)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2806047C1 true RU2806047C1 (en) 2023-10-25

Family

ID=

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
МАМАТХАНОВА М.А. и др. Изучение надземной части Glycyrrhiza glabra в качестве перспективного сырья для производства препаратов на основе флавоноидов // Химия растительного сырья. - 2016. - N1. - С. 171-176. ПИНЧУК Л.Г. и др. Разработка методики количественного определения флавоноидов в траве солодки бледноцветковой (Glycyrrhiza pallidiflora maxim.) // Медико-фармацевтический журнал "Пульс", 2021. Vol. 23. N 5, стр.29-34. БЕЛОВА О.А. и др. Перспективы использования надземной части солодки голой в качестве фармакопейного сырья // Фармацевтическое образование СамГМУ. История, современность, перспективы. 2021 год, стр.230-234. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2701726C1 (en) Method for quantitative determination of the sum of flavonoids in poplar leaves in black
RU2669162C1 (en) Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves
RU2696770C1 (en) Method for quantitative determination of sum of flavonoids in wild bergamot herb
Yan et al. Monitoring quality consistency of Liuwei Dihuang Pill by integrating the ultraviolet spectroscopic fingerprint, a multi‐wavelength fusion fingerprint method, and antioxidant activities
RU2747483C1 (en) Method for quantitative determination of amount of phenylpropanoids in lilac flowers
RU2554780C1 (en) Method for measuring flavonoid amount in choleretic tea № 3
RU2806047C1 (en) Licorice herb flavonoids assay method
Vamsi Krishna et al. Optimization and validation of quantitative spectrophotometric methods for the determination of alfuzosin in pharmaceutical formulations
Kurkin et al. Methodological approaches to standardization of rhizomes and roots of Eleutherococcus senticosus
RU2752316C1 (en) Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of ordinary lilac
Patil et al. Evaluation of Standardization Parameters of Ayurvedic Marketed Polyherbal Formulation
CN103230448A (en) Coptis and colla corii asini decoction compound formula granule, as well as preparation method and detection method thereof
RU2772821C1 (en) Method for quantitative determination of sum of flavonoids in spreading marigold flowers
RU2747482C1 (en) Method for quantifying amount of flavonoids in walnut leaves
RU2806035C1 (en) Yarrow herb flavonoids assay method
RU2807831C1 (en) Method of quantitative determination of total flavonoids in leaves of the three-leaf watch
Kurkina et al. Development of quantitative determination methods for total flavonoids in Tagetes patula L. herbs
RU2747417C1 (en) Method for quantitative determination of sum of flavonoids in black walnut bark
RU2786440C1 (en) Method for quantitative determination of the amount of flavonoids in nigerus grass
RU2814635C1 (en) Method for quantitative determination of total flavonoids in white poplar leaves
CA2307194A1 (en) Pharmaceutical grade ginkgo biloba
RU2763264C1 (en) Method for quantitative determination of the amount of phenylpropanoids in moringa oil leaves
RU2798673C1 (en) Method of quantitative determination of the total flavonoids in the leaves of the three-leaf watch
CN113759012B (en) Quality control method of dianthus superbus formula granules
RU2751189C1 (en) Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of petiolate oak