RU2669162C1 - Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves - Google Patents
Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves Download PDFInfo
- Publication number
- RU2669162C1 RU2669162C1 RU2017146138A RU2017146138A RU2669162C1 RU 2669162 C1 RU2669162 C1 RU 2669162C1 RU 2017146138 A RU2017146138 A RU 2017146138A RU 2017146138 A RU2017146138 A RU 2017146138A RU 2669162 C1 RU2669162 C1 RU 2669162C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vitexin
- flavonoids
- rhamnoside
- mass
- leaves
- Prior art date
Links
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 title claims abstract description 35
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 title claims abstract description 35
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 title claims abstract description 35
- 235000009917 Crataegus X brevipes Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000013204 Crataegus X haemacarpa Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000009685 Crataegus X maligna Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000009444 Crataegus X rubrocarnea Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000009486 Crataegus bullatus Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000017181 Crataegus chrysocarpa Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000009682 Crataegus limnophila Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000004423 Crataegus monogyna Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000002313 Crataegus paludosa Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 235000009840 Crataegus x incaedua Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 240000000171 Crataegus monogyna Species 0.000 title 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 57
- JMFSHKGXVSAJFY-UHFFFAOYSA-N Saponaretin Natural products OCC(O)C1OC(Oc2c(O)cc(O)c3C(=O)C=C(Oc23)c4ccc(O)cc4)C(O)C1O JMFSHKGXVSAJFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- MOZJVOCOKZLBQB-UHFFFAOYSA-N Vitexin Natural products OCC1OC(Oc2c(O)c(O)cc3C(=O)C=C(Oc23)c4ccc(O)cc4)C(O)C(O)C1O MOZJVOCOKZLBQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- PZKISQRTNNHUGF-UHFFFAOYSA-N vitexine Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=C(O)C=C(O)C2=C1OC(C=1C=CC(O)=CC=1)=CC2=O PZKISQRTNNHUGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 50
- SGEWCQFRYRRZDC-VPRICQMDSA-N vitexin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=C(O)C=C(O)C2=C1OC(C=1C=CC(O)=CC=1)=CC2=O SGEWCQFRYRRZDC-VPRICQMDSA-N 0.000 claims abstract description 44
- 241001092040 Crataegus Species 0.000 claims abstract description 30
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 29
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 29
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 24
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 5
- 235000009833 Crataegus mollis Nutrition 0.000 claims description 3
- 244000277575 Crataegus mollis Species 0.000 claims description 3
- 235000000285 Crataegus sanguinea Nutrition 0.000 claims description 3
- 241001019574 Crataegus sanguinea Species 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 235000009950 red hawthorn Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K aluminium trichloride Chemical compound Cl[Al](Cl)Cl VSCWAEJMTAWNJL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 22
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 22
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 7
- 238000002265 electronic spectrum Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 3
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 2
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 2
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 2
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 2
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/59—Transmissivity
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
- A61K36/734—Crataegus (hawthorn)
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного (Crataegus sanguinea Pall).The invention relates to the chemical and pharmaceutical industry and can be used in drug quality control centers and analytical laboratories for quantitative determination of the amount of flavonoids in the leaves of blood-red hawthorn (Crataegus sanguinea Pall).
Действующая система контроля качества лекарственных препаратов требует постоянного усовершенствования подходов к стандартизации биологически активных соединений (БАС) с использованием современных методов анализа и актуальных данных об их физико-химических, спектральных и фармакологических свойствах, позволяющих объективно и селективно определять содержание целевых веществ (1).The current drug quality control system requires continuous improvement of approaches to standardization of biologically active compounds (BAS) using modern analysis methods and relevant data on their physicochemical, spectral and pharmacological properties, which allow for the objective and selective determination of the content of target substances (1).
Сырье боярышника (плоды, листья, цветки) широко используются в отечественной и зарубежной медицине (2).Raw materials of hawthorn (fruits, leaves, flowers) are widely used in domestic and foreign medicine (2).
Известен способ количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на рутин в листьях боярышника кроваво-красного с использованием дифференциальной спектрофотометрии (3). Данная методика включает такие стадии как двухкратную экстракцию сырья 80% этиловым спиртом в соотношении «сырье-экстрагент» 1:200, реакцию комплексообразования с хлоридом алюминия, измерение оптической плотности электронного спектра испытуемого раствора при аналитической длине волны 409 нм и расчет содержания суммы флавоноидов на основе значений оптической плотности комплекса государственного стандартного образца рутина с алюминием хлоридом.A known method for the quantitative determination of the amount of flavonoids in terms of rutin in the leaves of the blood-red hawthorn using differential spectrophotometry (3). This technique includes such stages as two-fold extraction of raw materials with 80% ethyl alcohol in the ratio of "raw material-extractant" 1: 200, a complexation reaction with aluminum chloride, measurement of the optical density of the electronic spectrum of the test solution at an analytical wavelength of 409 nm, and calculation of the total content of flavonoids based on values of the optical density of the complex of the state standard sample of rutin with aluminum chloride.
Данный метод взят нами в качестве прототипа. Недостатками этого метода являются низкая специфичность, неполнота экстракции (экстрагент выбран не оптимальный), трудоемкость методики и невозможность определения в анализируемом сырье суммы флавоноидов в пересчете на вещество, специфическое для листьев боярышника кроваво-красного.This method is taken by us as a prototype. The disadvantages of this method are the low specificity, incompleteness of extraction (the extractant is not optimal), the complexity of the method, and the inability to determine the amount of flavonoids in the analyzed raw materials in terms of a substance specific for blood-red hawthorn leaves.
Таким образом, целью изобретения является разработка способа количественного определения суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного.Thus, the aim of the invention is to develop a method for the quantitative determination of the amount of flavonoids in the leaves of hawthorn blood-red.
Техническим результатом является создание способа количественного определения суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина.The technical result is the creation of a method for the quantitative determination of the amount of flavonoids in the leaves of the blood-red hawthorn in terms of 2 '' - O-ramnoside of vitexin.
Технический результат достигается тем, что экстракцию сырья осуществляют однократно, в качестве экстрагента используют этиловый спирт в концентрации 70%, количественное определение суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного проводят при длине волны 392 нм в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина; содержание суммы флавоноидов (X в процентах) в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:The technical result is achieved by the fact that the extraction of raw materials is carried out once, ethyl alcohol at a concentration of 70% is used as the extractant, the quantitative determination of the amount of flavonoids in the leaves of blood-red hawthorn is carried out at a wavelength of 392 nm in terms of 2 '' - O-ramnoside of vitexin; the content of the sum of flavonoids (X in percent) in terms of 2 '' - Vitexin O-ramnoside and absolutely dry raw materials are calculated by the formula:
где:Where:
D - оптическая плотность испытуемого раствора;D is the optical density of the test solution;
Do - оптическая плотность раствора стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина;D o the optical density of the solution of the standard sample 2 '' - O-rhamnoside vitexin;
m - масса сырья, г;m is the mass of raw materials, g;
mo - масса стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, г;m o - mass of a standard sample 2 '' - O-ramnoside of vitexin, g;
W - потеря в массе при высушивании в процентах,W is the loss in mass upon drying in percent,
в случае отсутствия стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина для расчета целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения, равное 232:in the absence of a standard sample 2 '' - O-ramnoside of vitexin, it is advisable to use the theoretical value of its specific absorption coefficient equal to 232 for calculation:
где:Where:
D - оптическая плотность испытуемого раствора;D is the optical density of the test solution;
m - масса сырья, г;m is the mass of raw materials, g;
mo - масса стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, г;m o - mass of a standard sample 2 '' - O-ramnoside of vitexin, g;
232 - удельный показатель поглощения 
W - потеря в массе при высушивании в процентах.W is the loss in weight on drying as a percentage.
В наших исследованиях было проанализировано сырье листьев боярышника кроваво-красного, из которого в ходе колоночной хроматографии был выделен 2''-O-рамнозид витексина. Нами было установлено, что данное вещество является доминирующим и специфическим для листьев боярышника кроваво-красного, химическая формула 2''-O-рамнозид витексина представлена на фигуре 1 (приложение 1).In our studies, we analyzed the raw material of the leaves of the blood-red hawthorn, from which 2 '' - O-rhamnoside of vitexin was isolated during column chromatography. We found that this substance is dominant and specific for the leaves of the hawthorn blood-red, the chemical formula 2 '' - O-rhamnoside of vitexin is presented in figure 1 (Appendix 1).
При изучении спектральных характеристик было выявлено, что именно 2''-O-рамнозид витексина определяет характер кривой поглощения водно-спиртового извлечения из листьев боярышника кроваво-красного. Данный факт продемонстрирован на фигуре 2 (приложение 2), где кривая 1 показывает электронный спектр раствора водно-спиртового извлечения из листьев боярышника кроваво-красного, а кривая 2 - электронный спектр раствора 2''-O-рамнозид витексина. На графике видно, что кривая поглощения раствора водно-спиртового извлечения повторяет форму кривой раствора 2''-O-рамнозид витексина.When studying the spectral characteristics, it was revealed that it is precisely 2 '' - O-rhamnoside of vitexin that determines the nature of the absorption curve of water-alcohol extraction from blood-red leaves of hawthorn. This fact is demonstrated in figure 2 (Appendix 2), where
Кроме того, было определено что в случае использования дифференциальной спектрофотометрии (при добавлении в качестве комплексообразующего вещества раствора хлорида алюминия) максимумы поглощения извлечения из листьев боярышника кроваво-красного и раствора 2''-O-рамнозид витексина коррелируют между собой.In addition, it was determined that in the case of using differential spectrophotometry (when a solution of aluminum chloride was added as a complexing agent), the absorption maxima of the extraction of blood-red from the leaves of the hawthorn and a solution of 2 '' - O-ramnoside of vitexin correlate with each other.
Так, на фигуре 3 (приложение 3) представлены электронные спектры при дифференциальной спектрофотометрии раствора 2''-O-рамнозид витексина, а на фигуре 4 (приложение 4) - электронные спектры при дифференциальной спектрофотометрии раствора водно-спиртового извлечения из листьев боярышника кроваво-красного. Кривая 1 на фигуре 3 и фигуре 4 демонстрирует исходный раствор 2''-O-рамнозид витексина или исходный раствор водно-спиртового извлечения из листьев боярышника кроваво-красного соответственно, а кривая 2 - раствор 2''-O-рамнозид витексина в присутствии алюминия хлорида или раствор водно-спиртового извлечения из листьев боярышника в присутствии алюминия хлорида соответственно. На фигурах видно, что в варианте дифференциальной спектрофотометрии максимумы поглощения раствора 2''-O-рамнозид витексина и водно-спиртового извлечения находятся в области 392 нм. Данный факт позволяет проводить спектрофотометрическое определение суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного при аналитической длине волны 392 нм.So, figure 3 (Appendix 3) presents electronic spectra for differential spectrophotometry of a solution 2 '' - Vitexin O-ramnoside, and figure 4 (Appendix 4) shows electronic spectra for differential spectrophotometry of a solution of water-alcohol extraction from blood-red hawthorn leaves .
Также нами было изучено влияние экстрагента на процесс экстракции. В таблице 1 (приложение 5) представлена зависимость выхода флавоноидов листьев боярышника кроваво-красного от концентрации экстрагента. В результате эксперимента в качестве оптимального экстрагента нами был выбран 70% этиловый спирт, так как выход действующих веществ из сырья при его использовании максимален.We also studied the effect of the extractant on the extraction process. Table 1 (Appendix 5) shows the dependence of the yield of blood-red hawthorn leaf flavonoids on the concentration of the extractant. As a result of the experiment, we selected 70% ethanol as the optimal extractant, since the yield of active substances from the raw material during its use is maximum.
Далее нами был изучен вопрос относительно продолжительности экстракции на кипящей водяной бане, в таблице 2 (приложение 6) представлена зависимость выхода флавоноидов листьев боярышника кроваво-красного от времени экстракции на кипящей водяной бане, при этом было выбрано время экстракции 60 минут.Next, we studied the question regarding the duration of extraction in a boiling water bath, table 2 (Appendix 6) shows the dependence of the output of blood-red hawthorn leaf flavonoids on the extraction time in a boiling water bath, and an extraction time of 60 minutes was chosen.
В таблице 3 (приложение 7) представлена зависимость выхода флавоноидов листьев боярышника кроваво-красного от соотношения «сырье-экстрагент». Из таблицы видно, что максимальный выход действующих веществ наблюдается при соотношении «сырье-экстрагент» 1:50, по этой причине данное соотношение было выбрано нами в качестве оптимального.Table 3 (Appendix 7) presents the dependence of the yield of blood-red hawthorn leaf flavonoids on the ratio of "raw material-extractant". The table shows that the maximum yield of active substances is observed when the ratio of "raw material-extractant" 1:50, for this reason, this ratio was chosen by us as optimal.
Учитывая, что увеличение числа операций по пробоподготовке ведет к возрастанию ошибки, выбор сделан в пользу одностадийного процесса экстракции с подтверждением требуемой точности количественного определения.Considering that an increase in the number of sample preparation operations leads to an increase in the error, the choice was made in favor of a one-stage extraction process with confirmation of the required accuracy of quantitative determination.
Таким образом, было определено, что оптимальными параметрами экстракции являются: однократное извлечение 70% этиловым спиртом на кипящей водяной бане в течение 60 минут в соотношении «сырье-экстрагент» - 1:50.Thus, it was determined that the optimal extraction parameters are: a single extraction of 70% ethyl alcohol in a boiling water bath for 60 minutes in the ratio of "raw material-extractant" - 1:50.
Принимая по внимание тот факт, что доминирующими и специфическим для листьев боярышника кроваво-красного является 2''-O-рамнозид витексина, а максимумы поглощения раствора 2''-O-рамнозид витексина и водно-спиртового извлечения листьев боярышника кроваво-красного находятся в области 392 нм, целесообразным является определение содержания суммы флавоноидов в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина при длине волны 392 нм.Taking into account the fact that the dominant and specific for blood-red hawthorn leaves is 2 '' - Vitexin O-rhamnoside, and the 2 '' solution absorption maxima - Vitexin O-rhamnoside and water-alcohol extraction of blood-red hawthorn are in region 392 nm, it is advisable to determine the content of the sum of flavonoids in terms of 2 '' - O-ramnoside of vitexin at a wavelength of 392 nm.
Способ реализуется следующим образом.The method is implemented as follows.
Аналитическую пробу сырья боярышника кроваво-красного измельчают до размера частиц 2 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 70% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарирных весах с точностью до ±0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 минут. Затем колбу закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через рыхлый комочек ваты или фильтр с красной полосой и остужают в течение 30 минут (извлечения из листьев).An analytical sample of the blood red hawthorn raw material is ground to a particle size of 2 mm. About 1 g (accurately weighed) of the crushed raw material is placed in a flask with a thin section with a capacity of 100 ml, 50 ml of 70% ethyl alcohol are added. The flask is closed with a stopper and weighed on a scale balance with an accuracy of ± 0.01. The flask was attached to a reflux condenser and heated in a boiling water bath (moderate boiling) for 60 minutes. Then the flask is closed with the same stopper, weighed again and make up the missing extractant to the original mass. The extract is filtered through a loose ball of cotton wool or a filter with a red stripe and cooled for 30 minutes (extract from the leaves).
Испытуемый раствор для анализа суммы флавоноидов готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом (испытуемый раствор).A test solution for analyzing the amount of flavonoids is prepared as follows: 1 ml of the obtained extract is placed in a 25 ml volumetric flask, 1 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added and the solution volume is adjusted to the mark with 70% ethyl alcohol (test solution).
Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом (раствор сравнения).The comparison solution is prepared as follows: 1 ml of the obtained extract is placed in a 25 ml volumetric flask, the solution volume is adjusted to the mark with 70% ethanol (comparison solution).
Для расчета содержания суммы флавоноидов готовят раствор стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, добавляют к нему 3% спиртовой раствор алюминия хлорида, измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса при аналитической длине волны 392 нм и определенное значение оптической плотности используют в формуле расчета.To calculate the total flavonoid content, a solution of a standard 2 '' sample of Vitexin O-ramnoside is prepared, a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added to it, the optical density of the colored complex is measured at an analytical wavelength of 392 nm, and a certain optical density is used in the calculation formula.
Приготовление раствора стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина.Preparation of a solution of a standard sample 2 '' - O-rhamnoside vitexin.
Около 0,02 г (точная навеска) 2''-O-рамнозид витексина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 96% этиловом спирте. Затем содержимое колбы доводят 96% этиловым спиртом до метки (раствор А 2''-O-рамнозид витексина). После чего 1 мл раствора А 2''-O-рамнозид витексина помещают в мерную колбу на 25 мл, добавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида, затем доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом. Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом.About 0.02 g (accurately weighed) 2``-V-texin O-ramnoside is placed in a 50 ml volumetric flask, dissolved in 96% ethanol. Then the contents of the flask were adjusted to 96% with ethyl alcohol to the mark (solution A 2 '' - V-texin O-ramnoside). Then 1 ml of solution A 2 '' - O-rhamnoside of Vitexin is placed in a 25 ml volumetric flask, 1 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added, then the solution volume is adjusted to the mark with 70% ethyl alcohol. The comparison solution is prepared as follows: 1 ml of the resulting solution is placed in a 25 ml volumetric flask, the volume of the solution is adjusted to the mark with 70% ethyl alcohol.
Измерение оптической плотности проводят при длине волны 392 нм через 40 минут после приготовления всех растворов.The measurement of optical density is carried out at a wavelength of 392 nm 40 minutes after the preparation of all solutions.
Содержание суммы флавоноидов (X в процентах) в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:The content of the sum of flavonoids (X in percent) in terms of 2 '' - V-texin O-ramnoside and absolutely dry raw materials are calculated by the formula:
где:Where:
D - оптическая плотность испытуемого раствора;D is the optical density of the test solution;
Do - оптическая плотность раствора стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина;D o the optical density of the solution of the standard sample 2 '' - O-rhamnoside vitexin;
m - масса сырья, г;m is the mass of raw materials, g;
mo - масса стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, г;m o - mass of a standard sample 2 '' - O-ramnoside of vitexin, g;
W - потеря в массе при высушивании в процентах,W is the loss in mass upon drying in percent,
в случае отсутствия стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина для расчета целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения, равное 232:in the absence of a standard sample 2 '' - O-ramnoside of vitexin, it is advisable to use the theoretical value of its specific absorption coefficient equal to 232 for calculation:
где:Where:
D - оптическая плотность испытуемого раствора;D is the optical density of the test solution;
m - масса сырья, г;m is the mass of raw materials, g;
mo - масса стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, г;m o - mass of a standard sample 2 '' - O-ramnoside of vitexin, g;
232 - удельный показатель поглощения
W - потеря в массе при высушивании в процентах.W is the loss in weight on drying as a percentage.
Предлагаемый способ поясняется следующими примерами.The proposed method is illustrated by the following examples.
Пример 1.Example 1
Аналитическую пробу сырья боярышника кроваво-красного измельчают до размера частиц 2 мм (заготовлено в г.Самаре, Ботанический сад, май 2017 г.). 1,38 г измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл 70% этилового спирта. Колбу закрывают пробкой и взвешивают на тарирных весах с точностью до ±0,01. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 60 минут. Затем колбу закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через рыхлый комочек ваты или фильтр с красной полосой и остужают в течение 30 минут (извлечения из листьев).An analytical sample of the blood red hawthorn raw material is ground to a particle size of 2 mm (harvested in Samara, Botanical Garden, May 2017). 1.38 g of crushed raw material is placed in a flask with a thin section with a capacity of 100 ml, 50 ml of 70% ethyl alcohol are added. The flask is closed with a stopper and weighed on a scale balance with an accuracy of ± 0.01. The flask was attached to a reflux condenser and heated in a boiling water bath (moderate boiling) for 60 minutes. Then the flask is closed with the same stopper, weighed again and make up the missing extractant to the original mass. The extract is filtered through a loose ball of cotton wool or a filter with a red stripe and cooled for 30 minutes (extract from the leaves).
Испытуемый раствор для анализа суммы флавоноидов готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом (испытуемый раствор).A test solution for analyzing the amount of flavonoids is prepared as follows: 1 ml of the obtained extract is placed in a 25 ml volumetric flask, 1 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added and the solution volume is adjusted to the mark with 70% ethyl alcohol (test solution).
Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного извлечения помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом (раствор сравнения).The comparison solution is prepared as follows: 1 ml of the obtained extract is placed in a 25 ml volumetric flask, the solution volume is adjusted to the mark with 70% ethanol (comparison solution).
Для расчета содержания суммы флавоноидов готовят раствор стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, добавляют к нему 3% спиртовой раствор хлорида алюминия, измеряют оптическую плотность окрашенного комплекса при длине волны 392 нм и определенное значение оптической плотности используют в формуле расчета.To calculate the total flavonoid content, a solution of a standard 2-inch sample of Vitexin O-ramnoside is prepared, a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added to it, the optical density of the colored complex is measured at a wavelength of 392 nm, and a certain optical density is used in the calculation formula.
Приготовление раствора стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина.Preparation of a solution of a standard sample 2 '' - O-rhamnoside vitexin.
0,0199 г 2''-O-рамнозид витексина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 96% этиловом спирте. Затем содержимое колбы доводят 96% этиловым спиртом до метки (раствор А 2''-O-рамнозид витексина). После чего 1 мл раствора А 2''-O-рамнозид витексина помещают в мерную колбу на 25 мл, добавляют 1 мл 3% спиртового раствора алюминия хлорида, затем доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом. Раствор сравнения готовят следующим образом: 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу на 25 мл, доводят объем раствора до метки 70% этиловым спиртом.0.0199 g of 2 '' - Vitexin O-rhamnoside was placed in a 50 ml volumetric flask, dissolved in 96% ethanol. Then the contents of the flask were adjusted to 96% with ethyl alcohol to the mark (solution A 2 '' - V-texin O-ramnoside). Then 1 ml of solution A 2 '' - O-rhamnoside of Vitexin is placed in a 25 ml volumetric flask, 1 ml of a 3% alcohol solution of aluminum chloride is added, then the solution volume is adjusted to the mark with 70% ethyl alcohol. The comparison solution is prepared as follows: 1 ml of the resulting solution is placed in a 25 ml volumetric flask, the volume of the solution is adjusted to the mark with 70% ethyl alcohol.
Измерение оптической плотности проводят при длине волны 392 нм через 40 минут после приготовления всех растворов.The measurement of optical density is carried out at a wavelength of 392 nm 40 minutes after the preparation of all solutions.
Содержание суммы флавоноидов (X в процентах) в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле:The content of the sum of flavonoids (X in percent) in terms of 2 '' - V-texin O-ramnoside and absolutely dry raw materials are calculated by the formula:
где:Where:
0,7345 - оптическая плотность испытуемого раствора;0.7345 is the optical density of the test solution;
0,3697 - оптическая плотность раствора стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина;0.3697 - the optical density of the solution of the standard sample 2 '' - O-ramnoside vitexin;
1,3833 - масса сырья, г;1.3833 - the mass of raw materials, g;
0,0199 - масса стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, г.0,0199 - mass of the standard sample 2 '' - O-rhamnoside of vitexin, g.
10 - потеря в массе при высушивании в процентах.10 - loss in mass upon drying in percent.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина = 3,18%.The content of the sum of flavonoids in terms of 2 '' - O-rhamnoside of vitexin = 3.18%.
Пример 2.Example 2
При необходимости определения суммы флавоноидов в листьях боярышника кроваво-красного в отсутствии стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, необходимо провести все действия из примера 1 до приготовления раствора стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина.If it is necessary to determine the amount of flavonoids in the leaves of the blood-red hawthorn in the absence of a standard 2 '' sample - Vitexin O-ramnoside, it is necessary to carry out all the steps from Example 1 before preparing a solution of a 2 '' standard sample - Vitexin O-ramnoside.
После измерения оптической плотности извлечения из листьев боярышника кроваво-красного при длине волны 392 нм, содержание суммы флавоноидов (X в процентах) в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина и абсолютно сухое сырье вычисляют по формуле, используя теоретическое значение удельного показателя поглощения 2''-O-рамнозид витексина, равное 232:After measuring the optical density of extracting blood-red from hawthorn leaves at a wavelength of 392 nm, the content of the sum of flavonoids (X in percent) in terms of 2 '' - V-texin O-ramnoside and absolutely dry raw materials are calculated using the formula using the theoretical value of the specific absorption index 2 '' - O-rhamnoside of vitexin, equal to 232:
где:Where:
0,7345 - оптическая плотность испытуемого раствора;0.7345 is the optical density of the test solution;
1,3833 - масса сырья, г;1.3833 - the mass of raw materials, g;
mo- масса стандартного образца 2''-O-рамнозид витексина, г;m o - mass of a standard sample 2 '' - O-ramnoside of vitexin, g;
232 - удельный показатель поглощения
10 - потеря в массе при высушивании в процентах.10 - loss in mass upon drying in percent.
Содержание суммы флавоноидов в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина = 3,18%, что совпадает со значением, полученном в примере 1.The content of the sum of flavonoids in terms of 2 '' - O-rhamnoside of vitexin = 3.18%, which coincides with the value obtained in example 1.
Все результаты были статистически обработаны. Ошибка единичного количественного определения составила ±2,85%.All results were statistically processed. The error of a single quantitative determination was ± 2.85%.
Таким образом, предлагаемый способ количественного определения суммы флавоноидов в пересчете на 2''-O-рамнозид витексина в листьях боярышника кроваво-красного с использованием дифференциальной спектрофотометрии разработан впервые для данного вида сырья и обладает следующими преимуществами:Thus, the proposed method for quantitative determination of the amount of flavonoids in terms of 2 '' - V-texin O-ramnoside in blood-red hawthorn leaves using differential spectrophotometry was developed for the first time for this type of raw material and has the following advantages:
1. Разработанный метод является более специфичным и селективным, а также позволяет проводить экстракцию сырья однократно, поскольку в качестве экстрагента используется 70% этиловый спирт, позволяющий исчерпывающе извлекать целевые вещества (флавоноиды).1. The developed method is more specific and selective, and also allows one-time extraction of raw materials, since 70% ethyl alcohol is used as an extractant, which allows exhaustively extracting target substances (flavonoids).
2. Пересчет суммы флавоноидов идет на доминирующее и специфическое для листьев боярышника кроваво-красного - 2''-O-рамнозид витексина.2. The recount of the amount of flavonoids goes to the dominant and specific for the leaves of the hawthorn blood-red - 2 "- O-rhamnoside of vitexin.
3. Ошибка единичного определения предлагаемого способа составляет ±2,85%, тогда как в случае способа прототипа она достигает ±3,73%, что свидетельствует об объективности разработанного способа.3. The error of a single determination of the proposed method is ± 2.85%, while in the case of the prototype method it reaches ± 3.73%, which indicates the objectivity of the developed method.
Этот способ можно применять в центрах контроля качества лекарственных средств, на фармацевтических предприятиях и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного анализа листьев боярышника кроваво-красного (Crataegus sanguinea Pall).This method can be used in drug quality control centers, pharmaceutical companies and control and analytical laboratories for quantitative analysis of blood-red hawthorn leaves (Crataegus sanguinea Pall).
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ:INFORMATION SOURCES:
1. Куркин В.А. Фармакогнозия. Учебник для студентов фармацевтических вузов (факультетов). - 3-е изд., перераб. и доп. - Самара: ООО «Офорт»; ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, 2016. - 1279 с.1. Kurkin V.A. Pharmacognosy. Textbook for students of pharmaceutical universities (faculties). - 3rd ed., Revised. and add. - Samara: LLC "Etching"; FSBEI IN Samara State Medical University, Ministry of Health of Russia, 2016 .-- 1279 p.
2. Куркин В.А. Основы фитотерапии: учебное пособие. - Самара: ООО «Офорт»; ГОУ ВПО «СамГМУ Росздрава», 2009. - 963 с.2. Kurkin V.A. Fundamentals of herbal medicine: a training manual. - Samara: LLC "Etching"; GOU VPO "SamSMU of Roszdrav", 2009. - 963 p.
3. Хасанова С.Р. Экспериментально-теоретическое обоснование создания и стандартизации лекарственных растительных препаратов с антиоксидантной активностью: дисс. … доктор фарм. наук. - Уфа: Башкирский государственный медицинский университет, 2016. - 462 с.3. Khasanova S.R. Experimental and theoretical justification for the creation and standardization of herbal medicines with antioxidant activity: diss. ... doctor farm. sciences. - Ufa: Bashkir State Medical University, 2016. - 462 p.
Claims (14)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017146138A RU2669162C1 (en) | 2017-12-26 | 2017-12-26 | Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017146138A RU2669162C1 (en) | 2017-12-26 | 2017-12-26 | Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2669162C1 true RU2669162C1 (en) | 2018-10-08 |
Family
ID=63798569
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017146138A RU2669162C1 (en) | 2017-12-26 | 2017-12-26 | Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2669162C1 (en) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2701726C1 (en) * | 2018-12-03 | 2019-10-01 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of the sum of flavonoids in poplar leaves in black |
| RU2747417C1 (en) * | 2020-09-04 | 2021-05-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in black walnut bark |
| RU2751189C1 (en) * | 2020-10-14 | 2021-07-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of petiolate oak |
| RU2752316C1 (en) * | 2020-10-14 | 2021-07-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of ordinary lilac |
| CN114235766A (en) * | 2021-12-14 | 2022-03-25 | 泸州品创科技有限公司 | Method for detecting vitexin |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2266544C2 (en) * | 2003-12-24 | 2005-12-20 | Пермская государственная фармацевтическая академия | Unified assay of flavonoids in eyebright grass and extractive preparations |
| RU2554780C1 (en) * | 2014-06-05 | 2015-06-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for measuring flavonoid amount in choleretic tea № 3 |
-
2017
- 2017-12-26 RU RU2017146138A patent/RU2669162C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2266544C2 (en) * | 2003-12-24 | 2005-12-20 | Пермская государственная фармацевтическая академия | Unified assay of flavonoids in eyebright grass and extractive preparations |
| RU2554780C1 (en) * | 2014-06-05 | 2015-06-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for measuring flavonoid amount in choleretic tea № 3 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| V. Kurkina "Determination of total flavonoids in siberian hawthorn fruit", PHARMACEUTICAL CHEMISTRY JOURNAL, т. 48, No. 12, 2015 г., стр. 802-805. * |
| Хасанова С. В. Экспериментально-теоретическое обоснование создания и стандартизации лекарственных растительных препаратов с антиоксидантной активностью, Диссертация на соискание степени доктора фармацевтических наук, Уфа, 2016 г. A. * |
| Хасанова С. В. Экспериментально-теоретическое обоснование создания и стандартизации лекарственных растительных препаратов с антиоксидантной активностью, Диссертация на соискание степени доктора фармацевтических наук, Уфа, 2016 г. A. V. Kurkina "Determination of total flavonoids in siberian hawthorn fruit", PHARMACEUTICAL CHEMISTRY JOURNAL, т. 48, No. 12, 2015 г., стр. 802-805. * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2701726C1 (en) * | 2018-12-03 | 2019-10-01 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of the sum of flavonoids in poplar leaves in black |
| RU2747417C1 (en) * | 2020-09-04 | 2021-05-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in black walnut bark |
| RU2751189C1 (en) * | 2020-10-14 | 2021-07-12 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of petiolate oak |
| RU2752316C1 (en) * | 2020-10-14 | 2021-07-26 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of ordinary lilac |
| CN114235766A (en) * | 2021-12-14 | 2022-03-25 | 泸州品创科技有限公司 | Method for detecting vitexin |
| CN114235766B (en) * | 2021-12-14 | 2024-02-23 | 泸州品创科技有限公司 | Method for detecting vitexin |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2669162C1 (en) | Method for quantifying the amount of flavonoids in siberian hawthorn leaves | |
| RU2696770C1 (en) | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in wild bergamot herb | |
| RU2701726C1 (en) | Method for quantitative determination of the sum of flavonoids in poplar leaves in black | |
| CN104833651B (en) | Honeysuckle concentration process is let pass detection method in real time online | |
| CN106483215B (en) | Natural finds online and integrates antioxidant activity evaluation method in pawpaw medicinal material | |
| RU2554780C1 (en) | Method for measuring flavonoid amount in choleretic tea № 3 | |
| RU2747483C1 (en) | Method for quantitative determination of amount of phenylpropanoids in lilac flowers | |
| CN109765322A (en) | The characteristic spectrum construction method and quality determining method of schizonepeta | |
| CN106706532A (en) | Detection method of total flavonoid content in Momordica charantia L. leaves | |
| RU2695760C1 (en) | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in quebec hawthorn berries | |
| RU2772821C1 (en) | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in spreading marigold flowers | |
| RU2752316C1 (en) | Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of ordinary lilac | |
| RU2786440C1 (en) | Method for quantitative determination of the amount of flavonoids in nigerus grass | |
| RU2747482C1 (en) | Method for quantifying amount of flavonoids in walnut leaves | |
| RU2807831C1 (en) | Method of quantitative determination of total flavonoids in leaves of the three-leaf watch | |
| RU2782618C1 (en) | Method for quantifying the amount of flavonoids in the buds of quercus robur | |
| Yezerska et al. | Quantitative determination of hydroxycinnamic acids in chicory root | |
| RU2614200C1 (en) | Method for determination of authenticity and quality of perforate st john's-wort (hypericum perforatum l.) | |
| RU2806035C1 (en) | Yarrow herb flavonoids assay method | |
| RU2806047C1 (en) | Licorice herb flavonoids assay method | |
| RU2596791C1 (en) | Method of determining content of malonic dialdehyde in vegetative organs of plants by capillary electrophoresis | |
| RU2747417C1 (en) | Method for quantitative determination of sum of flavonoids in black walnut bark | |
| RU2751189C1 (en) | Method for quantifying amount of flavonoids in leaves of petiolate oak | |
| RU2792011C2 (en) | Method for quantitative determination of sum of anthracene derivatives in fresh treelike aloe leaves | |
| CN106841432A (en) | A kind of discriminating of Bilberry fruit P.E and its assay method of procyanidins content |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191227 |