RU2776013C1 - Способ количественного определения остаточного содержания стероидных гормонов в рыбе - Google Patents
Способ количественного определения остаточного содержания стероидных гормонов в рыбе Download PDFInfo
- Publication number
- RU2776013C1 RU2776013C1 RU2021120177A RU2021120177A RU2776013C1 RU 2776013 C1 RU2776013 C1 RU 2776013C1 RU 2021120177 A RU2021120177 A RU 2021120177A RU 2021120177 A RU2021120177 A RU 2021120177A RU 2776013 C1 RU2776013 C1 RU 2776013C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- samples
- hormones
- fish
- acetonitrile
- formic acid
- Prior art date
Links
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 title abstract 3
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 title abstract 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N formic acid Chemical compound OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 6
- 229940088597 Hormone Drugs 0.000 abstract 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 4
- 239000005556 hormone Substances 0.000 abstract 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 abstract 2
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 abstract 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 17-β-hydroxy-5-α-Androstan-3-one Chemical compound C1C(=O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 NVKAWKQGWWIWPM-ABEVXSGRSA-N 0.000 abstract 1
- 229960003399 Estrone Drugs 0.000 abstract 1
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Hiestrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 abstract 1
- WYZDXEKUWRCKOB-YDSAWKJFSA-N Mestanolone Chemical compound C([C@@H]1CC2)C(=O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@](C)(O)[C@@]2(C)CC1 WYZDXEKUWRCKOB-YDSAWKJFSA-N 0.000 abstract 1
- GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N Methyltestosterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@](C)(O)[C@@]1(C)CC2 GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N 0.000 abstract 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 abstract 1
- 229960003473 androstanolone Drugs 0.000 abstract 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 abstract 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 abstract 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 abstract 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 abstract 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 abstract 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 abstract 1
- 229950008604 mestanolone Drugs 0.000 abstract 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229960001566 methyltestosterone Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 abstract 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 abstract 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 abstract 1
Images
Abstract
Изобретение относится к пищевой промышленности. Предложен способ количественного определения остаточного содержания стероидных гормонов - эстрона, дигидротестостерона, метилтестостерона и местанонолона в рыбе, заключающийся в гомогенизации мяса рыб, добавлении в образцы дистиллированной воды с их обработкой в ультразвуковой ванне для более полного извлечения гормонов из гомогенизатов, экстракции гормонов из образцов 1% раствором муравьиной кислоты в ацетонитриле, очистке аликвоты селикагелем с привитыми октадецильными группами С18 и анионообменным сорбентом на основе первичных и вторичных аминов PSA, дериватизации гормонов раствором гидроксиламина, упаривании образцов на роторном испарителе. Далее проводят перерастворение образцов в ацетонитриле, хроматографическое разделение с использованием хроматографической колонки 2,1×75 мм зернением 3,5 мкм, заполненной обращенно-фазовым сорбентом С18, в качестве градиента подвижной фазы используют смесь вода-метанол с добавлением 0,1% муравьиной кислоты. Затем проводят анализ содержания гормонов в образцах на тройном квадрупольном масс-детекторе с источником ионизации электроспрей в положительном режиме. Способ обеспечивает увеличение чувствительности метода определения. 3 ил., 4 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к пищевой промышленности, в частности к области оценки безопасности пищевой продукции, а именно к методам количественного определения содержания в рыбе гормонов и может быть использовано в процессе экспертизы и государственного надзора за безопасностью рыбы.
Официально утвержденного способа определения стероидных гормонов в моллюсках в Российской Федерации в настоящее время нет.
Аналогом предлагаемого способа является метод определения метилтестостерона в рыбе {Cyprinus carpio). Этот способ заключается в предварительном удалении жира из тканей, добавлении фосфатного буфера, экстракции метил-трет-бутилового эфиром, твердофазной экстракции на колонке, заполненной обращено-фазовым сорбентом и последующим иммуноферментным анализом [Risto, U., Zehra, Н. М., Biljana, S.D., Elizabeta, D.S., Aleksandra, Т., & Velimir, S. (2013). Validation of screening method for determination of methyltestosterone in fish. Maced. Vet. Rev, 36, 19-23]. Недостатком способа является низкая чувствительность (564,43 нг/кг) и возможность определения в образцах рыбы только одного гормона - метилтестостерона.
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому способу является метод определения остаточного содержания гормонов в рыбе и рыбных продуктах (Tilapia, Rainbow trout, Salmon). Этот способ заключается в гомогенизации материала, экстракции гормонов ацетонитрилом, очистке органического раствора гексаном, твердофазной экстракцией с использованием картриджей, заполненных ионно-обменными (четвертичный аминный сорбент) и нормально-фазовыми сорбентами (синтетический аморфный силикат магния), хроматографическом разделении с использованием ВЭЖХ системы на колонке 2,0×150 мм зернением 5 мкм, заполненной обращенно-фазовым сорбентом С8 в изократическом режиме на основе воды и ацетонитрила с добавлением 0,1% муравьиной кислоты и последующем масс-спектрометрическом анализе с источником ионизации электроспреем в положительном режиме [Watson, L., Potter, R., Murphy, С, & Gibbs, R. (2015). The development and single-laboratory validation of a method for the determination of steroid residues in fish and fish products. Journal of AOAC International, 98(3), 580-587; https://doi.org/10.5740/jaoacint.14-281]. Недостатком способа являются использование сложной схемы пробоподготовки с применением картриджей, возможность определения только одного вида стероидного гормона, низкая чувствительность метода детектирования (от 0,05 до 25 нг/г).
Техническим результатом предлагаемого способа является увеличение чувствительности метода до 20 нг/кг за счет получения производных гормонов (оксимов) эстрона, дигидротестостерона, метилтестостерона и местанонолона, полученных путем дериватизации гидроксиламином и их определения в тканях рыб в положительном режиме ионизации по ионам [M+NH+H]+с использованием ВЭЖХ-МС/МС метода.
Указанный технический результат достигается гомогенизацией мяса рыб, добавлением в образцы дистиллированной воды и их обработкой в ультразвуковой ванне для более полного извлечения гормонов из гомогенизатов, экстракцией гормонов из образцов 1% раствором муравьиной кислоты в ацетонитриле, очисткой аликвоты селикагелем с привитыми октадецильными группами С18 и анионообменным сорбентом на основе первичных и вторичных аминов PSA, дериватизацией гормонов раствором гидроксиламина, упариванием образцов на роторном испарителе, перерастворением образцов в ацетонитриле, хроматографическим разделением с использованием хроматографической колонки 2,1×75 мм зернением 3,5 мкм, заполненной обращено-фазовым сорбентом С18 при температуре 40°С, где в качестве градиента подвижной фазы используют смесь вода-метанол с добавлением 0,1% муравьиной кислоты и последующим анализом содержания гормонов в образцах на тройном квадрупольном масс-детекторе с источником ионизации электроспрей в положительном режиме (ВЭЖХ-МС/МС анализ).
ОПИСАНИЕ СПОСОБА
Для приготовления калибровочных стандартов мясо рыб (радужная форель, карп, толстолобик), не содержащее гормоны в пределах обнаружения метода, гомогенизируют, добавляют стандартные растворы гормонов в ацетонитриле с перемешиванием в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс», выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа, повторно перемешивают в течение 1 минуты с последующим замораживанием. Для построения градуировочной кривой необходимо не менее 6 контрольных точек.
Для осуществления пробоподготовки навеску измельченного образца или калибровочного стандарта массой 5 г, помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3. Вносят 10 см3 дистиллированной воды, перемешивают и помещают в ультразвуковую ванну на 10 минут. Добавляют 10 см3 1%-го раствора муравьиной кислоты в ацетонитриле и перемешивают в течение 30 минут на лабораторном мультиротаторе. В пробу добавляют 1 г NaCl и 4 г MgSO4. После добавления солей, раствор тщательно перемешивают в течение 5 минут. Затем пробу центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 g. Аликвоту экстракта объемом 6 см3 с помощью пипеточного дозатора помещают в центрифужную пробирку объемом 15 см3, содержащую 150 мг С18 и 150 мг PSA. Перемешивают в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс» и центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 18000 g. Аликвоту экстракта объемом 5 см3 с помощью пипеточного дозатора помещают в остродонную колбу объемом 15 см3 и упаривают на роторном испарителе. После упаривания с помощью пипеточного дозатора помещают 0,5 см3 раствора гидроксиламина в метаноле с концентрацией 100 ммоль и перемешивают в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс». Дериватизацию проводят с помощью термостатируемого шейкера при температуре 40°С в течение 20 минут. Полученный раствор повторно упаривают на роторном испарителе, с помощью пипеточного дозатора помещают 0,1 см3 ацетонитрила и перемешивают в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс». Аликвоту экстракта объемом 0,06 см3 с помощью пипеточного дозатора помещают в полипропиленовую вставку для проведения ВЭЖХ-МС/МС анализа.
Для осуществления хроматографического анализа используют ВЭЖХ систему «Agilent 1200 Series» с хроматографической колонкой «Agilent ZORBAX XDB-C18 2.1×75 mm 3.5 μm» длиной 75 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненной обращенно-фазным сорбентом С18 с двойным энд-кэппированием, зернением 3,5 мкм, температура хроматографической колонки 40°С. В качестве градиента подвижной фазы используют смесь растворителей, включающую компонент А: раствор - 0,1% муравьиной кислоты в воде, и компонент В: раствор - 0,1% муравьиной кислоты в метаноле.
Для осуществления масс-спектрометрической детекции используют подключенный к выходу из хроматографической колонки тройной квадрупольный масс-спектрометр «Thermo Fisher Scientific TSQ Quantum Access МАХ». Параметры масс-спектрометрического детектора:
- Источник ионизации: электроспрей в положительном режиме ионизации (ESI+);
- Режим работы: детектирование проводится методом «регистрации множественных реакций» (MRM). Для гормонов измеряется сигнал двух фрагментных ионов (m/z). Первый, более интенсивный пик, служит для количественного определения концентрации гормонов в рыбе, второй используется для подтверждения правильности определения (Таблица 1);
- Напряжение на капилляре электроспрея (Spray Voltage): 3 кВ;
- Sheath Gas Pressure: 35 относительных единиц;
- Aux Gas Pressure: 10 относительных единиц;
- Температура капилляра интерфейса (Capillary Temperature): 300°С;
- Температура испарителя (Vaporizer Temperature): 350°С;
- Хроматографическая колонка стальная длиной 75 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом С18 с двойным энд-кэппированием (двойной блокировкой концевых групп), зернением 3,5 мкм;
- Температура колонки: 40°С;
- Скорость потока элюента: 0,4 см3/мин;
- Объем вводимой пробы: 0,01 см3;
- Режим элюирования (градиентный), время анализа 13 минут (Таблица 2).
Построение градуировочной кривой проводится по отношению площади хроматографического пика фрагментного иона (S., I*сек) к массовой концентрации (пг/см3) в 6 калибровочных стандартах. Зависимость линейная, взвешивание равное.
Построение графиков может проводиться при помощи встроенной программы обработки данных ВЭЖХ-МС/МС или при помощи программы Excel (Microsoft Office).
Градуировочная зависимость считается приемлемой, если рассчитанное значение квадрата коэффициента корреляции для градуировочной кривой каждого фрагментного иона не менее 0,98.
Массовую долю гормонов (в виде индивидуальных веществ) в пробе (X, нг/кг) вычисляют по формуле:
где Сх - массовая концентрация гормона, пг/см3;
Vp - объем раствора для экстракции; в данном случае 10 см3;
М - масса анализируемой пробы; в данном случае 5 г.
Нижний предел количественного определения гормонов при использовании предлагаемого способа составляет 20 нг/кг. Ошибка измерения не более 15%. Пределы и точность определения гормонов, достаточны для целей экспертизы и государственного надзора за безопасностью продукции аквакультуры.
Пример 1
Количественное определение остаточного количества гормонов в мясе радужной форели.
Для елах обнаружения метода, гомогенизируют, добавляют исходные растворы гормонов в априготовления калибровочных стандартов мясо радужной форели, не содержащее гормоны в предцетонитриле с перемешиванием в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс», выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа, повторно перемешивают в течение 1 минуты с последующим замораживанием. Для построения градуировочной кривой необходимо не менее 6 контрольных точек.
Для осуществления пробоподготовки навеску измельченного образца или калибровочного стандарта массой 5 г, помещают в центрифужную полипропиленовую пробирку вместимостью 50 см3. Вносят 10 см3 дистиллированной воды, перемешивают и помещают в ультразвуковую ванну на 10 минут. Добавляют 10 см3 1%-го раствора муравьиной кислоты в ацетонитриле и перемешивают в течение 30 минут на лабораторном мультиротаторе. В пробу добавляют 1 г NaCl и 4 г MgSO4. После добавления солей, раствор интенсивно перемешивают в течение 5 минут. Затем пробу центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 g. Аликвоту экстракта объемом 6 см3 с помощью пипеточного дозатора помещают в центрифужную пробирку объемом 15 см3, содержащую 150 мг С18 и 150 мг PSA. Перемешивают в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс» и центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 18000 g.
Аликвоту экстракта объемом 5 см3 с помощью пипеточного дозатора помещают в остродонную колбу объемом 15 см3 и упаривают на роторном испарителе. После упаривания с помощью пипеточного дозатора помещают 0,5 см3 раствора гидроксиламина в метаноле с концентрацией 100 ммоль и перемешивают в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс». Дериватизацию проводят с помощью термостатируемого шейкера при температуре 40°С в течение 20 минут. Затем полученный раствор повторно упаривают на роторном испарителе, с помощью пипеточного дозатора помещают 0,1 см3 ацетонитрила и перемешивают в течение 1 минуты на перемешивающем устройстве типа «вортекс». Аликвоту экстракта объемом 0,06 см3 с помощью пипеточного дозатора помещают в полипропиленовую вставку для проведения ВЭЖХ-МС/МС анализа.
Для осуществления хроматографического анализа используют ВЭЖХ систему «Agilent 1200 Series» с хроматографической колонкой «Agilent ZORBAX XDB-C18 2.1×75mm 3.5 μm» длиной 75 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненной обращенно-фазным сорбентом С18 с двойным энд-кэппированием, зернением 3,5 мкм, температура хроматографической колонки 40°С. В качестве градиента подвижной фазы используют смесь растворителей, включающую компонент А: раствор - 0,1% муравьиной кислоты в воде, и компонент В: раствор - 0,1% муравьиной кислоты в метаноле.
Для осуществления масс-спектрометрической детекции используют подключенный к выходу из хроматографической колонки тройной квадрупольный масс-спектрометр «Thermo Fisher Scientific TSQ Quantum Access МАХ». Параметры масс-спектрометрического детектора:
- Источник ионизации: электроспрей в положительном режиме ионизации (ESI+);
- Режим работы: детектирование проводится методом «регистрации множественных реакций» (MRM). Для гормонов измеряется сигнал двух фрагментных ионов (m/z). Первый, более интенсивный пик, служит для количественного определения концентрации гормонов в радужной форели, второй используется для подтверждения правильности определения (Таблица 1);
- Напряжение на капилляре электроспрея (Spray Voltage): 3 кВ;
- Sheath Gas Pressure: 35 относительных единиц;
- Aux Gas Pressure: 10 относительных единиц;
- Температура капилляра интерфейса (Capillary Temperature): 300°С;
- Температура испарителя (Vaporizer Temperature): 350°С;
- Хроматографическая колонка стальная длиной 75 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом С18 с двойным энд-кэппированием (двойной блокировкой концевых групп), зернением 3,5 мкм;
- Температура колонки: 40°С;
- Скорость потока элюента: 0,4 см3/мин;
- Объем вводимой пробы: 0,01 см3;
- Режим элюирования (градиентный), время анализа 13 минут (Таблица 2).
Построение градуировочной кривой проводится по отношению площади хроматографического пика фрагментного иона (S., I*сек) к массовой концентрации (пг/см3) в 6 калибровочных стандартах. Зависимость линейная, взвешивание равное.
Построение графиков может проводиться при помощи встроенной программы обработки данных ВЭЖХ-МС/МС или при помощи программы Excel (Microsoft Office).
Градуировочная зависимость считается приемлемой, если рассчитанное значение квадрата коэффициента корреляции для градуировочной кривой каждого фрагментного иона не менее 0,98.
Нижний предел количественного определения гормонов при использовании предлагаемого способа составляет 20 нг/кг. Ошибка измерения не более 15%. Пределы и точность определения гормонов, достаточны для целей экспертизы и государственного надзора за безопасностью продукции аквакультуры.
Концентрации эстрона, дигидротестостерона и метилтестостерона в образце мяса радужной форели составляют 40 нг/кг, а местанолона - 50 нг/кг.
Результаты:
Площади пиков (АА) на хроматограмме 55008, 42256, 50921, 5181 соответствуют содержанию эстрона, дигидротестостерона и метилтестостерона в образце мяса радужной форели 40±15% нг/кг, а местанолона - 50±5% нг/кг (фиг. 1).
Пример 2
Количественное определение остаточного количества гормонов в мясе карпа.
Приготовление калибровочных стандартов для построения градуировочных кривых, пробоподготовка, оборудование и режимы проведения хроматографического анализа, построение градуировочных кривых и регистрация хроматограмм, нижний предел количественного определения гормонов, ошибки измерения как в примере 1.
Концентрации эстрона, дигидротестостерона и метилтестостерона в образце мяса карпа составляют 40 нг/кг, а местанолона - 50 нг/кг.
Результаты:
Площади пиков (АА) на хроматограмме 58496, 39323, 49405, 4894 соответствуют содержанию эстрона, дигидротестостерона и метилтестостерона в образце мяса карпа 40±15% нг/кг, а местанолона - 50±15% нг/кг (фиг. 2).
Пример 3
Количественное определение остаточного количества гормонов в мясе толстолобика.
Приготовление калибровочных стандартов для построения градуировочных кривых, пробоподготовка, оборудование и режимы проведения хроматографического анализа, построение градуировочных кривых и регистрация хроматограмм, нижний предел количественного определения гормонов, ошибки измерения как в примере 1.
Концентрации эстрона, дигидротестостерона и метилтестостерона в образце мяса толстолобика составляют 40 нг/кг, а местанолона - 50 нг/кг.
Результаты:
Площади пиков (АА) на хроматограмме 55390, 39405, 53579, 5119 соответствуют содержанию эстрона, дигидротестостерона и метилтестостерона в образце мяса толстолобика 40±15% нг/кг, а местанолона - 50±15% нг/кг (фиг. 3).
Claims (1)
- Способ количественного определения остаточного содержания стероидных гормонов – эстрона, дигидротестостерона, метилтестостерона и местанонолона в рыбе, заключающийся в гомогенизации мяса рыб, добавлении в образцы дистиллированной воды с их обработкой в ультразвуковой ванне для более полного извлечения гормонов из гомогенизатов, экстракции гормонов из образцов 1% раствором муравьиной кислоты в ацетонитриле, очистке аликвоты селикагелем с привитыми октадецильными группами С18 и анионообменным сорбентом на основе первичных и вторичных аминов PSA, дериватизации гормонов раствором гидроксиламина, упаривании образцов на роторном испарителе, перерастворении образцов в ацетонитриле, хроматографическом разделении с использованием хроматографической колонки 2,1×75 мм зернением 3,5 мкм, заполненной обращенно-фазовым сорбентом С18 при температуре 40°С, где в качестве градиента подвижной фазы используют смесь вода-метанол с добавлением 0,1% муравьиной кислоты, и последующем анализе содержания гормонов в образцах на тройном квадрупольном масс-детекторе с источником ионизации электроспрей в положительном режиме (ВЭЖХ-МС/МС анализ).
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2776013C1 true RU2776013C1 (ru) | 2022-07-12 |
Family
ID=
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1490650A1 (ru) * | 1987-04-06 | 1989-06-30 | Институт биологической физики АН СССР | Способ количественного определени стероидных гормонов |
| CN104020240B (zh) * | 2014-06-10 | 2016-03-30 | 上海海洋大学 | 一种离体鱼类性腺内类固醇类性激素的检测方法 |
| US20170328921A1 (en) * | 2016-05-02 | 2017-11-16 | Sanis Biomedical, LLC | Methods for detecting hormones and other analytes |
| CN105866292B (zh) * | 2016-05-31 | 2019-04-12 | 中华人民共和国吉林出入境检验检疫局 | 一种离子液体均相液液萃取-高效液相色谱法测定甾体激素的方法 |
| CN110187043A (zh) * | 2019-04-25 | 2019-08-30 | 中南民族大学 | 一种同时检测血清中13种甾体激素的方法 |
| CN110824091A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-02-21 | 杭州度安医学检验实验室有限公司 | 一种类固醇激素检测方法 |
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1490650A1 (ru) * | 1987-04-06 | 1989-06-30 | Институт биологической физики АН СССР | Способ количественного определени стероидных гормонов |
| CN104020240B (zh) * | 2014-06-10 | 2016-03-30 | 上海海洋大学 | 一种离体鱼类性腺内类固醇类性激素的检测方法 |
| US20170328921A1 (en) * | 2016-05-02 | 2017-11-16 | Sanis Biomedical, LLC | Methods for detecting hormones and other analytes |
| CN105866292B (zh) * | 2016-05-31 | 2019-04-12 | 中华人民共和国吉林出入境检验检疫局 | 一种离子液体均相液液萃取-高效液相色谱法测定甾体激素的方法 |
| CN110187043A (zh) * | 2019-04-25 | 2019-08-30 | 中南民族大学 | 一种同时检测血清中13种甾体激素的方法 |
| CN110824091A (zh) * | 2019-12-17 | 2020-02-21 | 杭州度安医学检验实验室有限公司 | 一种类固醇激素检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2706953C (en) | Methods for detecting dihydroxyvitamin d metabolites by mass spectrometry | |
| CA2836907C (en) | Compositions, methods, and kits for quantifying target analytes in a sample | |
| Fan et al. | Simultaneous determination of ten steroid hormones in animal origin food by matrix solid-phase dispersion and liquid chromatography–electrospray tandem mass spectrometry | |
| Di Donna et al. | Determination of ketosteroid hormones in meat by liquid chromatography tandem mass spectrometry and derivatization chemistry | |
| Li et al. | Simultaneous determination of nine types of phthalate residues in commercial milk products using HPLC-ESI-MS-MS | |
| Xiong et al. | Simple and sensitive monitoring of β2-agonist residues in meat by liquid chromatography–tandem mass spectrometry using a QuEChERS with preconcentration as the sample treatment | |
| Wan et al. | Detection of residual bacitracin A, colistin A, and colistin B in milk and animal tissues by liquid chromatography tandem mass spectrometry | |
| Stolker et al. | The use of supercritical fluid extraction for the determination of steroids in animal tissues | |
| Decheng et al. | Trace analysis of progesterone and 21 progestins in milk by ultra-performance liquid chromatography coupled with high-field quadrupole-orbitrap high-resolution mass spectrometry | |
| Okeyo et al. | Analysis of estrogens and anabolic steroids by SPME with on‐fiber derivatization and GC/MS | |
| CN109633181A (zh) | 一种血浆中变肾上腺素和去甲变肾上腺素的检测试剂盒 | |
| Hsieh et al. | A mixed-mode liquid chromatography-tandem mass spectrometric method for the determination of cytarabine in mouse plasma | |
| Wang et al. | Determination of virginiamycin M1 residue in tissues of swine and chicken by ultra-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry | |
| RU2776013C1 (ru) | Способ количественного определения остаточного содержания стероидных гормонов в рыбе | |
| Canfell et al. | Quantitation of urinary normetanephrine and metanephrine by reversed-phase extraction and mass-fragmentographic analysis. | |
| JP7019372B2 (ja) | ビタミンｄ代謝物の選択的測定法 | |
| Jiafeng et al. | Multiresidue determination of 19 anabolic steroids in animal oil using enhanced matrix removal lipid cleanup and ultrahigh performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry | |
| CN115420812B (zh) | 一种检测尿液中Calcitroic acid的方法及其应用 | |
| RU2666247C1 (ru) | Способ количественного определения окадаиковой кислоты в морепродуктах | |
| Clark et al. | Confirmation of phenylbutazone residues in bovine kidney by liquid chromatography/mass spectrometry | |
| Ikebuchi et al. | A rapid and sensitive method for the determination of paraquat in plasma and urine by thin-layer chromatography with flame ionization detection | |
| Hardy et al. | Quantitative determination of plasma phenylalanine and tyrosine by electrospray ionization tandem mass spectrometry | |
| Pan et al. | Quantification of 37 glucocorticoids in chicken muscle by UHPLC-Q-Orbitrap-MS with parallel reaction monitoring | |
| CN111189933A (zh) | 1α,25-二羟基维生素D高效液相色谱质谱联用法检测试剂盒 | |
| CN115184499B (zh) | 一种有机氯农药、卤代阻燃剂和有机磷酸酯的协同检测方法及应用 |