RU2760525C1 - Способ количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле - Google Patents
Способ количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле Download PDFInfo
- Publication number
- RU2760525C1 RU2760525C1 RU2021110701A RU2021110701A RU2760525C1 RU 2760525 C1 RU2760525 C1 RU 2760525C1 RU 2021110701 A RU2021110701 A RU 2021110701A RU 2021110701 A RU2021110701 A RU 2021110701A RU 2760525 C1 RU2760525 C1 RU 2760525C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dexpanthenol
- chitosan
- gel
- quantitative determination
- quantitative
- Prior art date
Links
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 title claims abstract description 44
- SNPLKNRPJHDVJA-ZETCQYMHSA-N D-panthenol Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCCO SNPLKNRPJHDVJA-ZETCQYMHSA-N 0.000 title claims abstract description 41
- 235000004866 D-panthenol Nutrition 0.000 title claims abstract description 41
- 239000011703 D-panthenol Substances 0.000 title claims abstract description 41
- 229960003949 dexpanthenol Drugs 0.000 title claims abstract description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 21
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N methyl cyanide Natural products CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 7
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 6
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 5
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims description 5
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 claims description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 238000005220 pharmaceutical analysis Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 abstract description 2
- 238000001303 quality assessment method Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 abstract 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 abstract 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 abstract 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 4
- BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N benzocaine Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 BLFLLBZGZJTVJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 4
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 150000008273 hexosamines Chemical class 0.000 description 3
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 2
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 229960005274 benzocaine Drugs 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 2
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 2
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N rutin Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-NVPNHPEKSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229960003232 troxerutin Drugs 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- DYNFCHNNOHNJFG-UHFFFAOYSA-M 2-formylbenzoate Chemical compound [O-]C(=O)C1=CC=CC=C1C=O DYNFCHNNOHNJFG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N anthrone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3CC2=C1 RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007872 degassing Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000013418 fluorescence derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000007421 fluorometric assay Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N hydron;(e)-(3-methyl-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazine;chloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2S\C(=N\N)N(C)C2=C1 OEZPVSPULCMUQB-VRTOBVRTSA-N 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 229940100655 ophthalmic gel Drugs 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005464 sample preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/15—Medicinal preparations ; Physical properties thereof, e.g. dissolubility
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической химии, а именно количественному определению декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в лекарственной форме гель, что необходимо при производстве лекарственных средств на основе данных компонентов, а также их стандартизации и оценке качества при проведении фармацевтического анализа. Заявленный способ предусматривает разделение декспантенола и хитозана осаждением последнего 1,0 Μ водным раствором натрия гидроксида и определением его количественного содержания гравиметрическим методом с последующим доведением до объема надосадочной части раствора декспантенола и установлением его содержания методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектором на стальной колонке с обращенной фазой (Waters, США), используя метод построения калибровочного графика в пределах рабочих концентраций. Технический результат заключается в обеспечении простоты и универсальности условий количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в фармацевтических препаратах в форме гель без использования многостадийного и узконаправленного процесса пробоподготовки. 3 ил., 1 пр.
Description
Изобретение относится к фармацевтической химии, а именно количественному определению декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в лекарственной форме (гель), что необходимо при производстве лекарственных средств на основе данных компонентов, а также их стандартизации и оценке качества при проведении фармацевтического анализа. Анализ изобретательского уровня
Существует несколько работ, посвященных определению производных хитозана, полученных путем его гидролитического разложения до мономера глюкозамина, с помощью хроматографических, колориметрических и флуориметрических методов или их комбинаций [Eikenes Μ. Determination of chitosan in wood and water samples by acidic hydrolysis and liquid chromatography with online fluorescence derivatization / M. Eikenes [et. al.] // Carbohydrate Polymers. - 2005. - 61(l). - P. 29-38: Tsuji A. Analytical chemical studies on amino sugars. II. Determination of hexosamines using 3-methyl-2-benzothiazolone hydrazone hydrochloride / A. Tsuji, T. Kinoshita, and M. Hoshino // Chemical and Pharmaceutical Bulletin. - 1969. - 17(7). - P. 1505-1510; Tsuji A. Microdetermination of hexosamines / A. Tsuji, T. Kinoshita, and M. Hoshino // Chemical and Pharmaceutical Bulletin. - 1969. - 17(1). - P. 217-218; Bosworth T.R. A specific fluorometric assay for hexosamines in glycosaminoglycans, based on deaminative cleavage with nitrous acid / T.R. Bosworth and J.E. Scott // Analytical Biochemistry. - 1994. - 223(2). - P. 266-273; Zamani A. Determination of glucosamine and N-acetyl glucosamine in fungal cell walls / A. Zamani [et. al.] // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2008. - 56(18). P. 8314-8318].
В своей работе Roseman and Daffner [Roseman S. Colorimetric method for determination of glucosamine and galactosamine / S. Roseman and I. Daffner // Analytical Chemistry. - 1956. - 28(11). P. 1743-1746] установили концентрацию глюкозамина ацетилированием с последующим фотометрическим определением N-ацетилглюкозамина.
Известна колориметрическая методика количественного определения хитозана, основанная на реакции дериватизации аминогрупп хитозана с о-фталевым альдегидом и тиол-N-ацетил-L-цистеином [Larionova N.I. Colorimetric assay of chitosan in presence of proteins and polyelectrolytes by using o-phthalaldehyde / N.I. Larionova [et. al.] // Carbohydrate Polymers. - 2009. - 75(4). P. 724-727].
Однако гликозидные связи хитозана устойчивы к кислотному гидролизу, такого как антроновый [Chemical analysis In Methods for General and Molecular Bacteriology / edited by Lacy Daniels, Richard S. Hanson and Jane A. Phillips. - Washington: D.C. American Society for Microbiology, USA, 1994. - P. 518-519].
Рассмотренные методики имеют ряд недостатков, таких как сложность воспроизведения, необходимость наличия дорогостоящих приборов и реактивов, воздействие на образец лекарственной формы агрессивных условий (использование хлористоводородной кислоты, высокой температуры), приводящее к разрушению декспантенола, что наиболее важно, так как описанные условия не позволяют определять хитозан при совместном присутствии других компонентов.
Несмотря на многочисленность исследований хитозана, общепринятый простой и доступный метод прямого количественного анализа отсутствует.
Известен способ определения декспантенола в составе офтальмологического геля методом ВЭЖХ при изократических условиях с использованием хроматографической колонки размером 25,0 см × 4,6 мм, заполненной сорбентом с размером частиц 5 мкм, со стационарной фазой C18, в качестве подвижной фазы используется смесь 0,037 Μ одноосновного фосфата калия в воде (доведенной 0,1% (об./об.) фосфорной кислотой до рН 3,2) и метанолом (90:10) после фильтрования через мембранный фильтр 0,45 мкм и дегазирования перед анализом [Mahboubi A. Development and Validation of A Fast, Simple And Specific Stability Indicating RP-HPLC Method for Determination of Dexpanthenol in Eye Gel Formulation / A. Mahboubi [et. al.] // Iran J Pharm Res. - 2019. - 18(2). - P. 670-676].
Известен способ определения декспантенола и эстрогена в двухкомпонентном лекарственном препарате методом ВЭЖХ обращенно-фазным с использованием хроматографической колонки размером 50×2,0 мм, заполненной носителем с размером частиц 2,0 мкм, со стационарной фазой С18 или размером 150×4,6 мм, заполненной носителем с зернением 5 мкм, в качестве подвижной фазы используют смеси 0,05% раствора кислоты ортофосфорной (рН 2,4) с ацетонитрилом для хроматографии в соотношении от 90:10 до 95:5 в режиме линейного градиента на хроматографе с использованием ультрафиолетового детектора [Патент на изобретение РФ №RU 2476873 C1. «Способ определения содержания эстрогена и декспантенола в двухкомпонентном лекарственном препарате методом вэжх». Маругина Л.В., Рудько А.И. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 27.02.2013 г.].
Известен способ определения декспантенола в комбинации с другими компонентами (троксерутином, бензокаином и метилпарагидроксибензоатом) в лекарственном препарате методом ВЭЖХ с использованием хроматографической колонки размером 50×2,0 мм, заполненной носителем с размером частиц 2,0 мкм, со стационарной фазой С18 или размером 150×4,6 мм, заполненной носителем с зернением 5 мкм, с использованием в качестве подвижных фаз смеси 0,05% раствора кислоты ортофосфорной (рН 2,4) с ацетонитрилом для хроматографии в соотношении от 90:10 до 95:5 в режиме линейного градиента на хроматографе с использованием ультрафиолетового детектора [Патент на изобретение РФ №RU 2475733 C1. «Способ определения содержания троксерутина, декспантенола, бензокаина и метилпарагидроксибензоата в лекарственном препарате методом вэжх». Моругина Л.В., Чумачева Е.А. Зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 02.02.2013].
Однако все вышеперечисленные методы с указанными способами пробоподготовки, не предоставляют возможности количественного определения хитозана и декспантенола при их совместном присутствии в геле.
Задача изобретения заключается в разработке способа определения количественного содержания хитозана и декспантенола при их совместном присутствии в лекарственной форме - геле.
Технический результат заключается в обеспечении простоты и универсальности условий количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в фармацевтических препаратах в форме гель без использования многостадийного и узконаправленного процесса пробоподготовки.
Область применения предлагаемого способа обусловлена тем, что для анализа качества лекарственных форм, содержащих декспантенол и хитозан на настоящий момент нет ни способа их пробоподготовки, ни оптимальных условий проведения анализа.
Технический результат достигается тем, что в способе количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле, характеризующемся осаждением хитозана путем добавления к гелю, содержащему хитозан и декспантенол, 1,0 Μ водного раствора натрия гидроксида при объемном соотношении гель: 1,0 Μ водный раствор натрия гидроксида, равном 12,5:1 до рН не менее 7-9, из расчета, что для осаждения хитозана, содержащегося в геле в количестве 1 г используют по меньшей мере 8 мл 1,0 Μ раствора щелочи; фильтрование ведут выпавшего в осадок хитозана через фильтр «Синяя лента»; промывание образовавшегося осадка осуществляют дважды водой дистиллированной, из расчета, что при содержании 0,1 г декспантенола в лекарственной форме используют 40 мл дистиллированной воды; хитозан на фильтре высушивают в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянной массы; количественное определение хитозана с молекулярной массой 500-700 кДа осуществляют гравиметрическим методом, затем фильтрат нейтрализуют добавлением ледяной уксусной кислоты до рН 4-5, и далее определяют количественное содержание декспантенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектором на xколонке Zorbax Extend-C18, Rapid Resolution HT размером 2.1×50 мм; заполненной носителем - сорбентом С18 с размером частиц 1.8 мкм, подвижная фаза - ацетонитрил (А) - вода (В) + 0,1% муравьиной кислоты, изократический режим элюирования, 20% (А): 80% В, температура термостата колонок 35°С, скорость потока 0,4 мл/мин, с использованием УФ-детектора, длина волны 206±1 нм, концентрацию декспантенола определяют путем построения калибровочного графика в пределах концентраций декспантенола 0,1075-0,4300%.
В предлагаемом способе количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в лекарственной форме гель осуществляется предварительно разделение декспантенола и хитозана осаждением последнего при добавлении 1,0 Μ водного раствора натрия гидроксида до рН 7-9 за счет взаимодействия аминогруппы хитозана, обеспечивающей растворимость, с основанием и переходом в нерастворимую в водной фазе форму, и определением его количественного содержания гравиметрическим методом после высушивания в сушильном шкафу до постоянной массы. Параллельно водный раствора декспантенола доводится до рН 4-5 добавлением ледяной уксусной кислоты и устанавливается его содержание методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектором на колонке Zorbax Extend-C18 Rapid Resolution HT, размером 2.1×50 мм; заполненной носителем - сорбентом С18 с размером частиц 1.8 мкм в комплексе Agilent 1260 Infinity (Agilent Technologies, CA, USA), подвижная фаза - ацетонитрил (A) - вода (В) + 0,1% муравьиной кислоты, изократический режим элюирования. 20% (А): 80% В, температура термостата колонок 35°С, объем инжектируемой пробы 0,5 мкл, скорость потока 0,4 мл/мин, УФ-детектор, длина волны 206±1 нм, концентрацию исследуемого вещества определяли путем построения калибровочного графика в пределах концентраций 0,1075-0,4300%.
Способ иллюстрируется следующим конкретным примером.
Пример 1
Способ количественного определения декспантенола и хитозана в лекарственной форме состава: 1,0 г хитозана с молекулярной массой 500-700 кДа (Sigma Aldrich (более 98% чистоты)) 0,43 г декспантенола, 0,25 мл кислоты уксусной ледяной, дистиллированная вода до 100 мл геля, реализуется следующим образом.
Навеску геля, содержащего декспантенол и хитозан, объемом 25 мл помещают в мерную колбу на 50 мл, добавляют 2 мл гидроксида натрия 1М. Выпавший в осадок, хитозан отфильтровывают через заранее взвешенный и высушенный в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянной массы фильтр «Синяя лента». Образовавшийся остаток два раза промывают водой дистиллированной (каждый раз по 20 мл). Полученный осадок хитозана на фильтре высушивают в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянной массы.
Фильтрат нейтрализуют добавлением ледяной уксусной кислоты до рН 4-5, доводят водой дистиллированной до метки в мерной колбе на 50 мл и далее определяют количественное содержание декспантенола методом ВЭЖХ в следующих условиях: колонка Zorbax Extend-C18 (Rapid Resolution HT размером 2.1×50 мм; заполненной носителем - сорбентом с размером частиц 1.8 мкм в комплексе Agilent 1260 Infinity (Agilent Technologies, CA, USA), подвижная фаза - ацетонитрил (A) - вода (В) + 0,1% муравьиной кислоты, изократический режим элюирования. 20% (А): 80% В, температура термостата колонок 35°С, объем ижектируемой пробы 0,5 мкл, скорость потока 0,4 мл/мин, с использованием УФ-детектора длина волны 206±1 нм, концентрацию исследуемого вещества определяли путем построения калибровочного графика в пределах концентраций 0,1075-0,4300%.
Количественное содержание хитозана в геле рассчитывают по формуле
g=m*F*100/a
где
m - масса осадка (гравиметрическая форма);
F - гравиметрический фактор, который равен 1, т.к. препарат представляет собой гравиметрическую форму;
а - навеска хитозана, взятая для приготовления геля.
В данных условиях установлен 100% выход хитозана, что составляет 0.25±0.004 г хитозана.
На фиг. 1 представлена хроматограмма 0,43% водного раствора стандартного образца декспантенола (данные об образце с его упаковки).
На фиг. 2 приведена хроматограмма испытуемого раствора декспантенола после осаждения и отделения хитозана.
На фиг. 3 показан калибровочный график для количественного определения декспантенола методом ВЭЖХ.
Содержание декспантенола в геле, установленное данным методом составило 2.168 мг/мл, что эквивалентно 100.8% декспантенола, содержащегося в лекарственной форме (гель).
Claims (1)
- Способ количественного определения декспантенола и хитозана в лекарственной форме гель, характеризующийся осаждением хитозана путем добавления к гелю, содержащему хитозан и декспантенол, 1,0 Μ водного раствора натрия гидроксида при объемном соотношении гель : 1,0 Μ водный раствор натрия гидроксида, равном 12,5:1, до рН не менее 7-9, из расчета, что для осаждения хитозана, содержащегося в геле в количестве 1 г, используют по меньшей мере 8 мл 1,0 Μ раствора щелочи; фильтрование выпавшего в осадок хитозана осуществляют через фильтр «Синяя лента»; промывание образовавшегося осадка ведут дважды водой дистиллированной из расчета, что при содержании 0,1 г декспантенола в лекарственной форме используют 40 мл дистиллированной воды; хитозан на фильтре высушивают в сушильном шкафу при температуре 105°С до постоянной массы; количественное определение хитозана с молекулярной массы 500-700 кДа проводят гравиметрическим методом, затем фильтрат нейтрализуют добавлением ледяной уксусной кислоты до рН 4-5 и далее определяют количественное содержание декспантенола методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектором на колонке Zorbax Extend-C18, Rapid Resolution HT размером 2.1×50 мм, заполненной носителем - сорбентом С18 с размером частиц 1.8 мкм, подвижная фаза - ацетонитрил (А) - вода (В) + 0,1% муравьиной кислоты, изократический режим элюирования, 20% (А): 80% (В), температура термостата колонок 35°С, скорость потока 0,4 мл/мин, с использованием УФ-детектора длина волны 206±1 нм, концентрацию декспантенола определяют путем построения калибровочного графика в пределах концентраций декспантенола 0,1075-0,4300%.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110701A RU2760525C1 (ru) | 2021-04-15 | 2021-04-15 | Способ количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2021110701A RU2760525C1 (ru) | 2021-04-15 | 2021-04-15 | Способ количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2760525C1 true RU2760525C1 (ru) | 2021-11-26 |
Family
ID=78719490
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2021110701A RU2760525C1 (ru) | 2021-04-15 | 2021-04-15 | Способ количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2760525C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116068089A (zh) * | 2023-02-28 | 2023-05-05 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 一种测定壳聚糖季铵盐含量的方法 |
| CN116297996A (zh) * | 2023-05-23 | 2023-06-23 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种准确测定水溶液中壳聚糖含量的uplc-ms/ms方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2475733C1 (ru) * | 2011-08-22 | 2013-02-20 | Открытое акционерное общество "Нижегородский химико-фармацевтический завод" | Способ определения содержания троксерутина, декспантенола, бензокаина и метилпарагидроксибензоата в лекарственном препарате методом вэжх |
| RU2476873C1 (ru) * | 2011-08-22 | 2013-02-27 | Открытое акционерное общество "Нижегородский химико-фармацевтический завод" | Способ определения содержания эстрогена и декспантенола в двухкомпонентном лекарственном препарате методом вэжх |
-
2021
- 2021-04-15 RU RU2021110701A patent/RU2760525C1/ru active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2475733C1 (ru) * | 2011-08-22 | 2013-02-20 | Открытое акционерное общество "Нижегородский химико-фармацевтический завод" | Способ определения содержания троксерутина, декспантенола, бензокаина и метилпарагидроксибензоата в лекарственном препарате методом вэжх |
| RU2476873C1 (ru) * | 2011-08-22 | 2013-02-27 | Открытое акционерное общество "Нижегородский химико-фармацевтический завод" | Способ определения содержания эстрогена и декспантенола в двухкомпонентном лекарственном препарате методом вэжх |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| Amit Kumar De et al., Simultaneous Quantification of Dexpanthenol and Resorcinol from Hair Care Formulation Using Liquid Chromatography: Method Development and Validation, Hindawi Publishing Corporation, Scientifica, Volume 2016, Article ID 1537952, 8 pages, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://downloads.hindawi.com/journals/scientifica/2016/1537952.pdf. * |
| Arash Mahboubi et al., Development and Validation of A Fast, Simple And Specific Stability Indicating RP-HPLC Method for Determination of Dexpanthenol in Eye Gel Formulation, Iran J Pharm Res. 2019 Spring; 18(2): 670-676, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6706706/. * |
| Mohamed E. I. Badawy, A New Rapid and Sensitive Spectrophotometric Method for Determination of a Biopolymer Chitosan, International Journal of Carbohydrate Chemistry Volume 2012, 7 pages, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://downloads.hindawi.com/archive/2012/139328.pdf. * |
| Mohamed E. I. Badawy, A New Rapid and Sensitive Spectrophotometric Method for Determination of a Biopolymer Chitosan, International Journal of Carbohydrate Chemistry Volume 2012, 7 pages, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://downloads.hindawi.com/archive/2012/139328.pdf. Arash Mahboubi et al., Development and Validation of A Fast, Simple And Specific Stability Indicating RP-HPLC Method for Determination of Dexpanthenol in Eye Gel Formulation, Iran J Pharm Res. 2019 Spring; 18(2): 670-676, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6706706/. Amit Kumar De et al., Simultaneous Quantification of Dexpanthenol and Resorcinol from Hair Care Formulation Using Liquid Chromatography: Method Development and Validation, Hindawi Publishing Corporation, Scientifica, Volume 2016, Article ID 1537952, 8 pages, найдено онлайн, найдено в Интернете: https://downloads.hindawi.com/journals/scientifica/2016/1537952.pdf. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116068089A (zh) * | 2023-02-28 | 2023-05-05 | 中国科学院烟台海岸带研究所 | 一种测定壳聚糖季铵盐含量的方法 |
| CN116297996A (zh) * | 2023-05-23 | 2023-06-23 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种准确测定水溶液中壳聚糖含量的uplc-ms/ms方法 |
| CN116297996B (zh) * | 2023-05-23 | 2023-08-15 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种准确测定水溶液中壳聚糖含量的uplc-ms/ms方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Khan et al. | Reporting degree of deacetylation values of chitosan: the influence of analytical methods | |
| de Alvarenga | Characterization and properties of chitosan | |
| RU2760525C1 (ru) | Способ количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле | |
| Petra | Modification of carboxyl groups in bovine carboxypeptidase AI Inactivation of the enzyme by N-ethyl-5-phenylisoxazolium-3'-sulfonate (Woodward's reagent K) | |
| Cahyana et al. | Interaction of anthocyanins with human serum albumin: Influence of pH and chemical structure on binding | |
| Vongchan et al. | Structural characterization of human liver heparan sulfate | |
| Zhang et al. | Quantification of heparan sulfate disaccharides using ion-pairing reversed-phase microflow high-performance liquid chromatography with electrospray ionization trap mass spectrometry | |
| CN102323344B (zh) | 一种定量检测透明质酸片段结构变化的方法 | |
| Hontz et al. | A copper (II) macrocycle complex for sensing biologically relevant organic anions in a competitive fluorescence assay: oxalate sensor or urate sensor? | |
| Prata et al. | Nonionic amphiphilic polymers derived from Tris (hydroxymethyl)‐acrylamidomethane keep membrane proteins soluble and native in the absence of detergent | |
| JP2008185373A (ja) | 酸性オリゴ糖含有糖組成物の分析方法 | |
| Fu et al. | Analysis of natural carbohydrate biopolymer-high molecular chitosan and carboxymethyl chitosan by capillary zone electrophoresis | |
| Hu et al. | Source-induced fragmentation of heparin, heparan, and galactosaminoglycans and application | |
| CN103869002A (zh) | 一种测定低聚凤梨参糖胺聚糖含量的分析方法 | |
| Warda et al. | Dromedary glycosaminoglycans: molecular characterization of camel lung and liver heparan sulfate | |
| CN102590409B (zh) | 测定食品中焦糖色素含量的方法 | |
| CN105300945A (zh) | 一种定量分析壳聚糖的荧光猝灭法 | |
| CN1790013A (zh) | 一种同时测定生脉注射液中原儿茶酸和5－羟甲基糠醛含量的方法 | |
| CN108548875B (zh) | 一种测定壳寡糖中壳二糖、壳三糖含量的方法 | |
| Kwon et al. | Chiral separation and discrimination of catechin by sinorhizobial octasaccharides in capillary electrophoresis and 13C NMR spectroscopy | |
| Ma et al. | Study on brilliant blue-chitosan system by dual-wavelength overlapping resonance Rayleigh scattering method and its analytical applications | |
| Toby et al. | Detection of native chondroitin sulfate impurities in heparin sodium with a colorimetric micro-plate based assay | |
| Li et al. | A sensitive and simple method for the determination of chondroitin sulfate A with crystal violet by resonance Rayleigh scattering technique | |
| Suo et al. | Determination of glucosamine and its derivatives released from photocrosslinked gelatin hydrogels using HPLC | |
| Qin et al. | Detection and separation of chito/chitin oligosaccharides |