RU2751495C1 - Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма - Google Patents

Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма Download PDF

Info

Publication number
RU2751495C1
RU2751495C1 RU2019108587A RU2019108587A RU2751495C1 RU 2751495 C1 RU2751495 C1 RU 2751495C1 RU 2019108587 A RU2019108587 A RU 2019108587A RU 2019108587 A RU2019108587 A RU 2019108587A RU 2751495 C1 RU2751495 C1 RU 2751495C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
leucine
microorganism
corynebacterium glutamicum
producing
acid
Prior art date
Application number
RU2019108587A
Other languages
English (en)
Inventor
Бён Чоль СОН
Джи Хе Ли
Э Чжи ЧОН
Чжон Хён КИМ
Хе Вон КИМ
Original Assignee
СиДжей ЧеилДжеданг Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by СиДжей ЧеилДжеданг Корпорейшн filed Critical СиДжей ЧеилДжеданг Корпорейшн
Application granted granted Critical
Publication of RU2751495C1 publication Critical patent/RU2751495C1/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
    • C12N15/77—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for Corynebacterium; for Brevibacterium
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/06—Alanine; Leucine; Isoleucine; Serine; Homoserine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/15—Corynebacterium

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится биотехнологии и микробиологии, в частности к микроорганизму, обладающему продуктивностью по L-лейцину, и способу получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма и, более конкретно, к мутанту Corynebacterium glutamicum, обладающему устойчивостью к L-лейцину и его производному и улучшенной продуктивностью по L-лейцину, и к способу получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма. Изобретение позволяет получать L-лейцин с высокой степенью эффективности. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл., 2 пр.

Description

Область изобретения
Настоящее изобретение относится к микроорганизму, продуцирующему L-лейцин, и способу получения L-лейцина с использованием указанного микроорганизма.
Предшествующий уровень техники
К аминокислотам с разветвленной цепью относятся три типа аминокислот (то есть L-валин, L-лейцин и L-изолейцин), и известно, что они метаболизируются в основном в мышцах и используются в качестве источника энергии во время физической активности. Наряду с увеличением информированности в отношении важных ролей этих аминокислот с разветвленной цепью в поддержании и увеличении мышечной массы во время физической активности, их применение также увеличивается. В частности, L-лейцин представляет собой незаменимую аминокислоту и широко применяется лекарственных средствах, пищевых продуктах, пищевых добавках, химических соединениях для производственных нужд и так далее.
Между тем, эти аминокислоты с разветвленной цепью продуцируются в основном микроорганизмами рода Escherichia или рода Corynebacterium, и известно, что их биосинтез осуществляется из 2-кетоизокапроновой кислоты, предшественника, после прохождения нескольких стадий от пировиноградной кислоты (патенты Кореи №№10-0220018 и 10-0438146). Однако, проблема с ферментами, вовлеченными в биосинтез лейцина, заключается в том, что они подвержены ингибированию по типу обратной связи, вызванному конечным продуктом, то есть L-лейцином или его производным, что затрудняет крупномасштабное промышленное получение L-лейцина.
Техническая задача
Авторы настоящего изобретения приложили усилия для разработки микроорганизмов, продуцирующих L-лейцин с высоким выходом по сравнению со стандартными штаммами. В результате они открыли, что мутанты, полученные с использованием микроорганизма, продуцирующего глутаминовую кислоту, проявляют устойчивость к норлейцину (NL) (то есть производному лейцина), и что эти мутанты свободны от ингибирования по типу обратной связи L-лейцином или его производным, и таким образом L-лейцин продуцируется с высоким выходом, тем самым выполняя настоящее изобретение.
Техническое решение
Задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить мутант Corynebacterium glutamicum, обладающий новой L-лейцин-продуцирующей способностью.
Другая задача настоящего изобретения заключается в том, чтобы предложить способ получения L-лейцина с использованием этого мутанта Corynebacterium glutamicum.
Полезные эффекты изобретения
Микроорганизм рода Corynebacterium glutamicum представляет собой микроорганизм, обладающий устойчивостью к L-лейцину или его производному, и, следовательно, может предотвращать ингибирование по типу обратной связи и обладает улучшенной продуктивностью по L-лейцину по сравнению с его родительским штаммом. Соответственно, способ получения L-лейцина с использованием микроорганизма по настоящему изобретению позволяет получать L-лейцин с высокой эффективностью и высоким выходом.
Краткое описание графических материалов
На Фиг. 1 представлена блок-схема, иллюстрирующая путь биосинтеза L-лейцина, который представляет собой конечный продукт по настоящему изобретению.
Наилучшее воплощение изобретения
В одном аспекте настоящего изобретения предложен новый мутант Corynebacterium glutamicum (модифицированный штамм Corynebacterium glutamicum), продуцирующий L-лейцин, и, в частности, мутант, депонированный с номером доступа KCCM11661P, и мутант, депонированный с номером доступа KCCM11662P, для получения L-лейцина.
Как его используют здесь, термин “L-лейцин”, который представляет собой незаменимую аминокислоту, относится к L-аминокислоте, представленной формулой HO2CCH(NH2)CH2CH(CH3)2, которая структурно соответствует аминокислотам с разветвленной цепью, наряду с L-валином и L-изолейцином.
Между тем, в отношении биосинтеза L-лейцина у микроорганизмов известно, что биосинтез L-лейцина осуществляется из пировиноградной кислоты через ацетомолочную кислоту, дигидроксиизовалериановую кислоту, кетоизовалериановую кислоту, 2-изопропиляблочную кислоту, 3-изопропиляблочную кислоту и кетоизокапроновую кислоту путем биосинтетического процесса, показанного на Фиг. 1. Дополнительно, биосинтез L-лейцина осуществляется путем катализа биосинтетического процесса с использованием таких ферментов как синтаза ацетогидроксикислот, изомероредуктаза ацетогидроксикислот, дегидратаза дигидроксикислот, синтаза изопропиляблочной кислоты, дегидратаза изопропиляблочной кислоты, дегидрогеназа изопропиляблочной кислоты и трансаминаза B. Однако трудно промышленным путем производить только один тип аминокислоты с разветвленной цепью путем ферментации, потому что ферменты, используемые в этих путях, являются такими же, как в процессе биосинтеза аминокислот с разветвленной цепью (то есть L-валина, L-изолейцина и L-лейцина). Дополнительно, вследствие наличия ингибирования по типу обратной связи конечным продуктом (то есть L-лейцином или его производным), существует проблема с промышленным крупномасштабным производством L-лейцина. В этом отношении мутант по настоящему изобретению может обладать устойчивостью к L-лейцину или его производному.
Как его используют здесь, термин “производное” может относиться к соединениям, о которых известно, что они обладают способностью ингибировать способность микроорганизмов продуцировать L-лейцин путем индуцирования ингибирования по типу обратной связи в отношении биосинтеза L-лейцина, конечного продукта по настоящему изобретению. Примеры соединений могут включать изолейцин, терлейцин, норлейцин, циклолейцин и так далее, но без ограничения этим. В частности, мутант может обладать устойчивостью к по меньшей мере одному веществу, выбранному из группы, состоящей из лейцина, изолейцина, терлейцина, норлейцина и циклолейцина, и более конкретно к норлейцину. В целом, известно, что биосинтез L-лейцина ингибируется, когда L-лейцин накапливается выше определенного уровня в клетке. Следовательно, любой штамм, обладающий устойчивостью к этому производному, может освободиться от ингибирования L-лейцином и может продуцировать L-лейцин даже при высокой концентрации L-лейцина.
Желаемый мутант микроорганизма, продуцирующий L-лейцин, по настоящему изобретению может быть получен путем мутагенеза его родительского штамма. В частности, мутагенез микроорганизма может быть выполнен различными способами, хорошо известными в данной области техники, и можно использовать либо физический, либо химический мутагенез. Например, примеры химических мутагенов, подходящих для настоящего изобретения, могут включать N-метил-N'-нитро-N-нитрозогуанидин (NTG), диэпоксибутан, этилметансульфонат, соединения иприта, гидразин и нитрит, но химические мутагены не ограничиваются этим. Дополнительно, примеры физических мутагенов могут включать ультрафиолет и гамма-излучение, но физические мутагены не ограничены этим.
При индуцировании мутагенеза родительский штамм подвергается воздействию мутагена в концентрации, при которой может оставаться выжившая популяция родительского штамма определенного размера. Размер варьирует в зависимости от типа мутагена и зависит от количества индуцированной мутации в выжившей популяции при постоянном уровне гибели. Например, в случае NTG уровень гибели может оставлять жизнеспособными приблизительно от 10% до 50% от начальной популяции. При мутагенезе с помощью азотистой кислоты могут оставаться жизнеспособными приблизительно от 0,01% до 0,1% от начальной популяции, и при мутагенезе с помощью ультрафиолетового света может оставаться жизнеспособным приблизительно 1,0% начальной популяции, но мутагены не ограничены этими.
В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ получения L-лейцина, включающий культивирование мутанта Corynebacterium glutamicum и выделение L-лейцина из мутанта Corynebacterium glutamicum или из его культуры.
Как его используют здесь, термин “культивирование” обозначает, что микроорганизмы выращивают подходящим образом искусственно контролируемых условиях окружающей среды. Культивирование микроорганизма по настоящему изобретению может быть выполнено с использованием способа культивирования Corynebacterium glutamicum, широко известного в данной области техники. В частности, примеры способов культивирования могут включать периодическое культивирование, непрерывное культивирование и периодическое культивирование с подпиткой, но способы культивирования не ограничены этим. Эти различные способы раскрыты, например, в “Biochemical Engineering” (James M. Lee, Prentice-Hall International Editions, стр. 138-176, 1991) и тому подобных.
Как его используют здесь, термин “культура” относится к материалу, содержащему среду, в которой выращивают или вырастили микроорганизм подходящим образом искусственно контролируемых условиях окружающей среды. Культура не включает выращенный микроорганизм в узком смысле слова, но может включать его в широком смысле. Термин “культура” включает различные вещества, которые были высвобождены в среду микроорганизмом во время его роста вместе с компонентами среды, включенными для культивирования микроорганизма, и в частности, лейцина, который представляет собой целевой материал.
Среда, используемая для культивирования, должна соответствовать требованиям для культивирования определенного штамма соответствующим образом. Примеры культуральных сред для Corynebacterium раскрыты (например, Manual of Methods for General Bacteriology. American Society for Bacteriology. Washington D.C., U.S.A., 1981). Примеры источников углерода для использования могут включать сахариды и углеводы, такие как глюкоза, сахароза, лактоза, фруктоза, мальтоза, крахмал и целлюлоза; масла и жиры, такие как соевое масло, подсолнечное масло, касторовое масло и кокосовое масло; жирные кислоты, такие как пальмитиновая кислота, стеариновая кислота и линолевая кислота; спирты, такие как глицерин и этанол, и органические кислоты, такие как уксусная кислота, но источники углерода не ограничены ими. Эти вещества можно использовать по отдельности или в комбинации. Примеры источников азота для использования могут включать пептон, дрожжевой экстракт, мясной экстракт, солодовый экстракт, жидкий кукурузный экстракт, соевую муку и мочевину; или неорганические соединения, такие как сульфат аммония, хлорид аммония, фосфат аммония, карбонат аммония и нитрат аммония, но источники азота не ограничены этим. Источники азота можно использовать по отдельности или в комбинации. Примеры источников фосфора для использования могут включать дигидроортофосфат калия, гидроортофосфат калия или соответствующие их натрийсодержащие соли, но источники фосфора не ограничены ими. Дополнительно, культуральные среды могут включать соли металлов, такие как сульфат магния и сульфат железа, которые необходимы для роста. Дополнительно к вышеперечисленным веществам могут быть включены необходимые для роста вещества, такие как аминокислоты и витамины. Также в культуральной среде могут быть использованы подходящие предшественники. Вышеупомянутые вещества можно добавлять в культуральные среды подходящим образом при периодическом культивировании или непрерывном культивировании во время культивирования.
Между тем, pH культуры может быть подходящим образом отрегулирован с использованием основных соединений, таких как гидроксид натрия, гидроксид калия и аммиак, или кислотных соединений, таких как фосфорная кислота и серная кислота. Дополнительно, образование пузырей воздуха можно предупредить, используя пеногаситель, такой как полигликолевый сложный эфир жирной кислоты. Для поддержания аэробных условий в культуру вводят кислород или кислородсодержащий газ (например, воздух). Обычно температура культуральных сред может находиться в диапазоне от 20°C до 45°C. Культивирование продолжают до тех пор, пока продукция L-лейцина не достигнет ее максимального уровня, который обычно достигается через 10-160 часов. L-лейцин может высвобождаться в культуральные среды или содержаться внутри клеток.
Выделение L-лейцина из клеток или из культуральных сред может быть выполнено традиционным способом, известным в данной области техники, например центрифугированием, фильтрованием, анионообменной хроматографией, кристаллизацией, HPLC (высокоэффективная жидкостная хроматография) и так далее, но способ не ограничен ими.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Здесь и далее настоящее изобретение будет раскрыто подробно с помощью примеров воплощений. Однако эти примеры воплощений предназначены исключительно для иллюстративных целей и не предназначены ограничивать объем настоящего изобретения.
Пример 1. Отбор мутантов путем искусственного мутагенеза
Для получения мутантных микроорганизмов, продуцирующих L-лейцин, у микроорганизмов были индуцированы модификации с помощью следующих способов.
В частности, родительские штаммы (то есть продуцирующие глутаминовую кислоту Corynebacterium glutamicum ATCC 14067 и Corynebacterium glutamicum ATCC 13869), которые были активированы путем культивирования в активирующей среде в течение 16 часов, инокулировали в посевную среду, стерилизованную при 121°C в течение 15 минут, и культивировали в ней в течение 14 часов. Затем 5 мл культуральной среды отбирали и промывали 100 мМ цитратным буфером и затем к ней добавляли N-метил-N'-нитро-N-нитрозогуанидин (NTG) до конечной концентрации 200 мг/л. После обработки в течение 20 минут культуральную среду промывали 100 мМ фосфатным буфером. Штаммы, обработанные NTG, распределяли по минимальной среде и измеряли уровень гибели. В результате было подтверждено, что уровень гибели составил 85%. Для отбора модифицированных штаммов, обладающих устойчивостью к норлейцину (NL), который соответствует производному L-лейцина, штаммы, обработанные NTG, распределяли на минимальной среде, содержащей NL в конечной концентрации 20 мМ, 30 мМ, 40 мМ и 50 мМ, соответственно. Затем штаммы культивировали при 30°C в течение 5 суток и затем получали мутанты, обладающие устойчивостью к NL.
Полученные таким образом мутанты были обозначены как Corynebacterium glutamicum KCJ-24 и Corynebacterium glutamicum KCJ-28, соответственно, и были депонированы в Корейском Центре Культур Микроорганизмов (KCCM), который представляет собой международный орган депонирования согласно Будапештскому договору, 22 января 2015 года с номерами доступа KCCM11661P и KCCM11662P, соответственно.
Состав культуральных сред, используемых в Примерах 1 и 2, был следующим:
Активирующая среда
Мясной экстракт 1%, полипептон 1%, хлорид натрия 0,5%, дрожжевой экстракт 1%, агар 2%, pH 7,2;
Посевная среда
Глюкоза 5%, бактопептон 1%, хлорид натрия 0,25%, дрожжевой экстракт 1%, мочевина 0,4%, pH 7,2;
Минимальная среда
Глюкоза 1,0%, сульфат аммония 0,4%, сульфат магния 0,04%, дигидроортофосфат калия 0,1%, мочевина 0,1%, тиамин 0,001%, биотин 200 мкг/л, агар 2%, pH 7,0.
Пример 2. Исследование L-лейцин-продуцирующей способности мутантов
Corynebacterium glutamicum KCJ-24 и Corynebacterium glutamicum KCJ-28, которые были получены в Примере 1, и для которых была подтверждена их устойчивость к NL в высоких концентрациях, культивировали следующим способом, для того, чтобы подтвердить их L-лейцин-продуцирующую способность.
Каждый из Corynebacterium glutamicum ATCC 14067 и Corynebacterium glutamicum ATCC 13869 (то есть родительских штаммов) и двух мутантов инокулировали в колбы на 250 мл с угловыми перегородками, содержащие 25 мл посевной среды, описанной ниже, и культивировали при 30°C в течение 20 часов при встряхивании при 200 об/мин для получения посевных культуральных сред. После этого 1 мл каждой из посевных культуральных сред инокулировали в колбу на 250 мл с угловыми перегородками, содержащую 24 мл следующей продукционной среды и культивировали при 30°C в течение 72 часов со встряхиванием при 200 об/мин для получения L-лейцина.
Состав продукционной среды, использованной в настоящем Примере 2, был следующим.
Продукционная среда
Глюкоза 5%, сульфат аммония 2%, дигидроортофосфат калия 0,1%, гептагидрат сульфата магния 0,05%, жидкий кукурузный экстракт (CSL) 2,0%, биотин 200 мкг/л, pH 7,2.
После завершения культивирования уровень продукции L-лейцина измеряли посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC). Концентрации L-лейцина в культуральных средах для каждого штамма для экспериментов приведены в Таблице 1 ниже.
Таблица 1. Сравнение L-лейцин-продуцирующей способности Corynebacterium glutamicum KCJ-24 и Corynebacterium glutamicum KCJ-28
Corynebacterium glutamicum
ATCC 14067
(Родительский штамм)		 Corynebacterium glutamicum
KCJ-24
(Модифицированный штамм)		 Corynebacterium glutamicum
ATCC 13869
(Родительский штамм)		 Corynebacterium glutamicum
KCJ-28
(Модифицированный штамм)
Конц. L-лейцина (г/л) 0,1 2,7 0,3 3,1
В результате, как показано в Таблице 1, родительские штаммы (то есть Corynebacterium glutamicum ATCC 14067 и Corynebacterium glutamicum ATCC 13869) продуцировали 0,1 г/л и 0,3 г/л L-лейцина, соответственно, а мутанты (то есть Corynebacterium glutamicum KCJ-24 и Corynebacterium glutamicum KCJ-28) согласно настоящему изобретению продуцировали 2,7 г/л и 3,1 г/л L-лейцина, соответственно, что подтверждает то, что L-лейцин-продуцирующая способность мутантов увеличивалась по меньшей мере примерно в 10 раз по сравнению с таковой родительских штаммов.
Приведенные выше результаты позволяют предположить, что мутанты, обладающие устойчивостью к L-лейцину и норлейцину, не подвержены ингибированию лейцином или его производным по типу обратной связи и, следовательно, могут продуцировать L-лейцин с высокой эффективностью и с высоким выходом.

Claims (6)

1. Штамм Corynebacterium glutamicum, продуцирующий L-лейцин, депонированный с номером доступа KCCM11661P.
2. Штамм Corynebacterium glutamicum по п. 1, обладающий устойчивостью к L-лейцину и его производному, которое выбрано из группы, состоящей из изолейцина, терлейцина, норлейцина и циклолейцина.
3. Штамм Corynebacterium glutamicum по п. 2, где производное L-лейцина представляет собой норлейцин (NL).
4. Способ получения L-лейцина, включающий
культивирование штамма Corynebacterium glutamicum по п. 1; и
выделение L-лейцина из штамма Corynebacterium glutamicum или из культуры.
RU2019108587A 2015-08-25 2016-08-25 Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма RU2751495C1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020150119785A KR101796830B1 (ko) 2015-08-25 2015-08-25 Ｌ-류신 생산능을 가지는 미생물 및 이를 이용한 ｌ-류신의 제조방법
KR10-2015-0119785 2015-08-25

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018108115A Division RU2693663C1 (ru) 2015-08-25 2016-08-25 Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2751495C1 true RU2751495C1 (ru) 2021-07-14

Family

ID=58100520

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018108115A RU2693663C1 (ru) 2015-08-25 2016-08-25 Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма
RU2019108587A RU2751495C1 (ru) 2015-08-25 2016-08-25 Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018108115A RU2693663C1 (ru) 2015-08-25 2016-08-25 Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма

Country Status (14)

Country Link
US (1) US10351859B2 (ru)
EP (1) EP3342871B1 (ru)
JP (1) JP6578056B2 (ru)
KR (1) KR101796830B1 (ru)
CN (1) CN108138192A (ru)
BR (1) BR112018003636A2 (ru)
CA (1) CA2996446C (ru)
ES (1) ES2805320T3 (ru)
HK (1) HK1249764A1 (ru)
HU (1) HUE049715T2 (ru)
MY (1) MY188870A (ru)
PH (1) PH12018500426A1 (ru)
RU (2) RU2693663C1 (ru)
WO (1) WO2017034343A1 (ru)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101796830B1 (ko) * 2015-08-25 2017-11-13 씨제이제일제당 (주) Ｌ-류신 생산능을 가지는 미생물 및 이를 이용한 ｌ-류신의 제조방법
KR101766964B1 (ko) * 2015-08-27 2017-08-09 씨제이제일제당 (주) L-라이신 생산능을 가지는 코리네박테리움 속 미생물 및 이를 이용한 l-라이신 생산방법
CA3048802C (en) * 2016-12-28 2021-10-19 Cj Cheiljedang Corporation A novel isopropylmalate synthase variant and a method of producing l-leucine using the same
KR101996129B1 (ko) 2017-07-11 2019-07-04 씨제이제일제당 (주) 아세토하이드록시산 신타아제 변이체, 이를 포함하는 미생물 또는 이를 이용하는 l-분지쇄 아미노산 생산 방법
KR102153534B1 (ko) 2019-09-02 2020-09-09 씨제이제일제당 주식회사 신규한 프로모터 및 이를 이용한 아미노산 생산 방법
KR102143964B1 (ko) 2019-12-06 2020-08-12 씨제이제일제당 주식회사 신규한 분지쇄 아미노산 아미노트랜스퍼라제 변이체 및 이를 이용한 류신 생산방법
KR102207867B1 (ko) 2020-01-21 2021-01-26 씨제이제일제당 주식회사 Nadp 의존적 글리세르알데하이드-3-포스페이트 디하이드로지나제를 포함하는 미생물을 이용하여 ｌ-아미노산을 생산하는 방법
KR102360900B1 (ko) 2020-05-20 2022-02-09 씨제이제일제당 (주) 신규한 폴리펩티드 및 이를 이용한 l-류신의 생산 방법
KR102263091B1 (ko) 2020-05-21 2021-06-09 씨제이제일제당 주식회사 L-분지쇄 아미노산 생산능이 강화된 미생물 및 이를 이용한 l-분지쇄 아미노산 생산방법
BR112022026480A2 (pt) 2020-06-26 2023-03-07 Cj Cheiljedang Corp Composição de alimentação, grânulos de aminoácido e seu método de preparação
CA3199126A1 (en) 2020-12-11 2022-06-16 Byoung Hoon Yoon Mutant atp-dependent protease, and method for producing l-amino acid using same
TW202333581A (zh) 2021-12-24 2023-09-01 南韓商Ｃｊ第一製糖股份有限公司 由發酵液製備含胺基酸製品之方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0271838A2 (en) * 1986-12-13 1988-06-22 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Novel microorganisms capable of assimilating lactose
RU2059726C1 (ru) * 1993-03-17 1996-05-10 Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Штамм бактерий corynebacterium sp. - продуцент l-лейцина
US5763231A (en) * 1995-03-30 1998-06-09 Ajinomoto Co., Inc. Process for producing L-leucine
US20070231259A1 (en) * 1999-06-25 2007-10-04 Basf Aktiengesellschaft Corynebacterium glutamicum genes encoding proteins involved in carbon metabolism and energy production

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4824275B1 (ru) * 1969-11-06 1973-07-19
US3865690A (en) * 1969-11-06 1975-02-11 Ajinomoto Kk Fermentative production of L-leucine
KR100438146B1 (ko) * 1996-11-28 2004-11-03 씨제이 주식회사 L-루이신생산미생물인코리네박테리움글루타미컴ch25
KR19980039740U (ko) * 1996-12-20 1998-09-15 박병재 수동 변속기의 인풋 베어링 리테이너
KR100200516B1 (ko) * 1997-05-09 1999-06-15 손 경 식 신규한l-루이신생산미생물인코리네박테리움글루타미컴(corynebacteriumglutamicum)ch35
KR100220018B1 (ko) * 1997-06-25 1999-10-01 손 경 식 L-루이신을 생산하는 신규한 미생물 코리네박테리움 글루타미컴(Corynebacterium glutamicum) CH45
CN1314798C (zh) * 2005-06-06 2007-05-09 无锡晶海氨基酸有限公司 一种l－亮氨酸高产菌及用其发酵法生产l－亮氨酸
CN1834228A (zh) * 2006-03-30 2006-09-20 天津科技大学 黄色短杆菌突变株及其在发酵法生产l－异亮氨酸中的应用
CN103031265B (zh) * 2013-01-11 2014-04-16 新泰市佳禾生物科技有限公司 谷氨酸棒杆菌突变株及其在发酵法生产l-亮氨酸中的应用
KR101796830B1 (ko) * 2015-08-25 2017-11-13 씨제이제일제당 (주) Ｌ-류신 생산능을 가지는 미생물 및 이를 이용한 ｌ-류신의 제조방법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0271838A2 (en) * 1986-12-13 1988-06-22 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Novel microorganisms capable of assimilating lactose
RU2059726C1 (ru) * 1993-03-17 1996-05-10 Всесоюзный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Штамм бактерий corynebacterium sp. - продуцент l-лейцина
US5763231A (en) * 1995-03-30 1998-06-09 Ajinomoto Co., Inc. Process for producing L-leucine
US20070231259A1 (en) * 1999-06-25 2007-10-04 Basf Aktiengesellschaft Corynebacterium glutamicum genes encoding proteins involved in carbon metabolism and energy production

Also Published As

Publication number Publication date
MY188870A (en) 2022-01-11
JP2018525012A (ja) 2018-09-06
KR101796830B1 (ko) 2017-11-13
US20180251772A1 (en) 2018-09-06
BR112018003636A2 (pt) 2018-09-25
RU2693663C1 (ru) 2019-07-03
EP3342871B1 (en) 2020-04-22
HUE049715T2 (hu) 2020-10-28
CA2996446C (en) 2019-03-12
WO2017034343A1 (ko) 2017-03-02
EP3342871A1 (en) 2018-07-04
EP3342871A4 (en) 2019-04-10
KR20170024653A (ko) 2017-03-08
HK1249764A1 (zh) 2018-11-09
CA2996446A1 (en) 2017-03-02
PH12018500426A1 (en) 2018-08-29
CN108138192A (zh) 2018-06-08
ES2805320T3 (es) 2021-02-11
US10351859B2 (en) 2019-07-16
JP6578056B2 (ja) 2019-09-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2751495C1 (ru) Микроорганизм, продуцирующий L-лейцин, и способ получения L-лейцина с использованием этого микроорганизма
KR101117022B1 (ko) Ｌ-발린 생산능이 향상된 미생물 및 이를 이용한 ｌ-발린 제조방법
EP3009504B1 (en) Microorganism producing l-isoleucine and method for preparing l-isoleucine using the same
KR101335789B1 (ko) Ｌ-이소루신을 생산하는 미생물 및 이를 이용한 ｌ-이소루신 제조방법
KR101851898B1 (ko) Ｌ-류신 생산능을 가지는 미생물 및 이를 이용한 ｌ-류신의 제조방법
RU2665830C1 (ru) Мутантный штамм Corynebacterium glutamicum, продуцирующий L-глутамин (варианты), и способ получения L-глутамина
KR102141210B1 (ko) L-트립토판을 생산하는 코리네박테리움 글루타미컴 변이주 및 이를 이용한 l-트립토판의 생산 방법
TWI627278B (zh) 生產l-組胺酸之麩胺酸棒狀桿菌變異株與使用其生產l-組胺酸之方法