RU2750817C1 - Применение конъюгата анти-her2 антитело-лекарственное средство при лечении уротелиальной карциномы - Google Patents
Применение конъюгата анти-her2 антитело-лекарственное средство при лечении уротелиальной карциномы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2750817C1 RU2750817C1 RU2020117761A RU2020117761A RU2750817C1 RU 2750817 C1 RU2750817 C1 RU 2750817C1 RU 2020117761 A RU2020117761 A RU 2020117761A RU 2020117761 A RU2020117761 A RU 2020117761A RU 2750817 C1 RU2750817 C1 RU 2750817C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- her2
- variable region
- urothelial carcinoma
- cdrs
- Prior art date
Links
- 206010044412 transitional cell carcinoma Diseases 0.000 title claims abstract description 58
- 208000023747 urothelial carcinoma Diseases 0.000 title claims abstract description 48
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 44
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 title claims abstract description 28
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 30
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims abstract description 24
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 11
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 claims description 51
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 claims description 51
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 26
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 14
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 8
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 8
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 8
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 7
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 claims description 6
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims description 5
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 3
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 claims description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940124532 absorption promoter Drugs 0.000 claims description 2
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 claims description 2
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 claims description 2
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 claims description 2
- 208000011645 metastatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 37
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 35
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 27
- 229940022353 herceptin Drugs 0.000 description 16
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 14
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 14
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 14
- 229960003852 atezolizumab Drugs 0.000 description 13
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 12
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 description 11
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 10
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 9
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 9
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 8
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 8
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 7
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 7
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 7
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 7
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 229960003301 nivolumab Drugs 0.000 description 7
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 6
- 108091008794 FGF receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000044168 Fibroblast Growth Factor Receptor Human genes 0.000 description 6
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 6
- 210000000244 kidney pelvis Anatomy 0.000 description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 6
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 5
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 5
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 5
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 5
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 5
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 5
- 230000004044 response Effects 0.000 description 5
- -1 2,5-dioxopyrrolidin-1-yl Chemical group 0.000 description 4
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 4
- 102000008096 B7-H1 Antigen Human genes 0.000 description 4
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010027457 Metastases to liver Diseases 0.000 description 4
- 206010027458 Metastases to lung Diseases 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 102100029986 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Human genes 0.000 description 4
- 101710100969 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-3 Proteins 0.000 description 4
- 102100029981 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Human genes 0.000 description 4
- 101710100963 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4 Proteins 0.000 description 4
- PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N TCEP Chemical compound OC(=O)CCP(CCC(O)=O)CCC(O)=O PZBFGYYEXUXCOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 4
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 4
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 4
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 4
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 4
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000007433 Lymphatic Metastasis Diseases 0.000 description 3
- 206010027459 Metastases to lymph nodes Diseases 0.000 description 3
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 3
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 3
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 3
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 3
- 229950004444 erdafitinib Drugs 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- OLAHOMJCDNXHFI-UHFFFAOYSA-N n'-(3,5-dimethoxyphenyl)-n'-[3-(1-methylpyrazol-4-yl)quinoxalin-6-yl]-n-propan-2-ylethane-1,2-diamine Chemical compound COC1=CC(OC)=CC(N(CCNC(C)C)C=2C=C3N=C(C=NC3=CC=2)C2=CN(C)N=C2)=C1 OLAHOMJCDNXHFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 229960001612 trastuzumab emtansine Drugs 0.000 description 3
- LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methoxy-5-methylheptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-3-methoxy-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 LGNCNVVZCUVPOT-FUVGGWJZSA-N 0.000 description 2
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dithiobis(6-nitrobenzoic acid) Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(C(=O)O)=CC(SSC=2C=C(C(=CC=2)[N+]([O-])=O)C(O)=O)=C1 KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 239000012623 DNA damaging agent Substances 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 2
- 206010027469 Metastases to the mediastinum Diseases 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 2
- 229940122429 Tubulin inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 2
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 2
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 229940124558 contraceptive agent Drugs 0.000 description 2
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 2
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 2
- 125000005062 perfluorophenyl group Chemical group FC1=C(C(=C(C(=C1F)F)F)F)* 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011518 platinum-based chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000012257 pre-denaturation Methods 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 238000011521 systemic chemotherapy Methods 0.000 description 2
- DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N taxane Chemical class C([C@]1(C)CCC[C@@H](C)[C@H]1C1)C[C@H]2[C@H](C)CC[C@@H]1C2(C)C DKPFODGZWDEEBT-QFIAKTPHSA-N 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 210000003708 urethra Anatomy 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 2
- 210000003741 urothelium Anatomy 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- NMDYYWFGPIMTKO-HBVLKOHWSA-N vinflunine Chemical compound C([C@@](C1=C(C2=CC=CC=C2N1)C1)(C2=C(OC)C=C3N(C)[C@@H]4[C@@]5(C3=C2)CCN2CC=C[C@]([C@@H]52)([C@H]([C@]4(O)C(=O)OC)OC(C)=O)CC)C(=O)OC)[C@H]2C[C@@H](C(C)(F)F)CN1C2 NMDYYWFGPIMTKO-HBVLKOHWSA-N 0.000 description 2
- 229960000922 vinflunine Drugs 0.000 description 2
- GKNPGQMJNWIEOE-UHFFFAOYSA-N (2,3,4,5,6-pentafluorophenyl) 3-[2-[2-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoylamino]ethoxy]ethoxy]propanoate Chemical compound FC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1OC(=O)CCOCCOCCNC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O GKNPGQMJNWIEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLXVXPPXELIDGQ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)benzoate Chemical compound C=1C=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=CC=1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O LLXVXPPXELIDGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KMEJZQCDHANYJV-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-[2-[2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)ethoxy]ethoxy]propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCOCCOCCN1C(=O)C=CC1=O KMEJZQCDHANYJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDIXVXMKIWXBFA-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-[2-[2-[(2-bromoacetyl)amino]ethoxy]ethoxy]propanoate Chemical compound BrCC(=O)NCCOCCOCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O HDIXVXMKIWXBFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[1-(pyridin-2-yldisulfanyl)ethyl]benzoate Chemical compound C=1C=C(C(=O)ON2C(CCC2=O)=O)C=CC=1C(C)SSC1=CC=CC=N1 GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJXFKVHNIGABU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-methyl-4-(pyridin-2-yldisulfanyl)pentanoate Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC(C)(C)CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O GOJXFKVHNIGABU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUTPJBLLJJNPAJ-UHFFFAOYSA-N 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O IUTPJBLLJJNPAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAXDZWQIWUSWJH-UHFFFAOYSA-N 3-methoxypropan-1-amine Chemical compound COCCCN FAXDZWQIWUSWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 208000021959 Abnormal metabolism Diseases 0.000 description 1
- 108010027164 Amanitins Proteins 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000009458 Carcinoma in Situ Diseases 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 229930188224 Cryptophycin Natural products 0.000 description 1
- 108010002156 Depsipeptides Proteins 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 1
- ICRMTRFPJXTUCG-UHFFFAOYSA-N FC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 Chemical compound FC1=C(F)C(F)=C(F)C(F)=C1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 ICRMTRFPJXTUCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150081124 FGFR gene Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 101000945318 Homo sapiens Calponin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000655188 Homo sapiens Tachykinin-3 Proteins 0.000 description 1
- 101000652736 Homo sapiens Transgelin Proteins 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000004044 Hypesthesia Diseases 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 206010027452 Metastases to bone Diseases 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- 241000186366 Mycobacterium bovis Species 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 206010041101 Small intestinal obstruction Diseases 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 102100033009 Tachykinin-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100031013 Transgelin Human genes 0.000 description 1
- YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N Tunicamycin II Natural products O1C(CC(O)C2C(C(O)C(O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)C(O)C(O)C(NC(=O)C=CCCCCCCCCC(C)C)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1NC(C)=O YJQCOFNZVFGCAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023915 Ureteral Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010046392 Ureteric cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- RUDNHCHNENLLKM-UHFFFAOYSA-N ac1mj1v6 Chemical compound O=C1NC(CC(O)=O)C(=O)N2CC(O)CC2C(=O)NC(C(C)C(O)CO)C(=O)NC(C2)C(=O)NCC(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NCC(=O)NC1CSC1=C2C2=CC=C(O)C=C2N1 RUDNHCHNENLLKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036981 active tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N anthramycin Chemical class N1[C@@H](O)[C@@H]2CC(\C=C\C(N)=O)=CN2C(=O)C2=CC=C(C)C(O)=C12 VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N 0.000 description 1
- 238000011394 anticancer treatment Methods 0.000 description 1
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 1
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical class C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 230000005880 cancer cell killing Effects 0.000 description 1
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 1
- 208000022033 carcinoma of urethra Diseases 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 150000004814 combretastatins Chemical class 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011254 conventional chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical compound CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 229930013356 epothilone Natural products 0.000 description 1
- HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N epothilone A Chemical class C/C([C@@H]1C[C@@H]2O[C@@H]2CCC[C@@H]([C@@H]([C@@H](C)C(=O)C(C)(C)[C@@H](O)CC(=O)O1)O)C)=C\C1=CSC(C)=N1 HESCAJZNRMSMJG-KKQRBIROSA-N 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000011985 exploratory data analysis Methods 0.000 description 1
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 1
- 229940125829 fibroblast growth factor receptor inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000009093 first-line therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 230000022244 formylation Effects 0.000 description 1
- 238000006170 formylation reaction Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182480 glucuronide Natural products 0.000 description 1
- 150000008134 glucuronides Chemical class 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 208000034783 hypoesthesia Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 201000004933 in situ carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000005462 in vivo assay Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229940126602 investigational medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000005015 mediastinal lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000006371 metabolic abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N oxalonitrile Chemical compound N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 238000009522 phase III clinical trial Methods 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004910 pleural fluid Anatomy 0.000 description 1
- 229920002704 polyhistidine Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 210000002097 psoas muscle Anatomy 0.000 description 1
- YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N pyrrolo[2,3-i][1,2]benzodiazepine Chemical compound C1=CN=NC2=C3C=CN=C3C=CC2=C1 YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 238000011519 second-line treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940066453 tecentriq Drugs 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- DUYAAUVXQSMXQP-UHFFFAOYSA-M thioacetate Chemical compound CC([S-])=O DUYAAUVXQSMXQP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 229960000575 trastuzumab Drugs 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- ZHSGGJXRNHWHRS-VIDYELAYSA-N tunicamycin Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@@H](O)[C@@H](CC(O)[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C(NC(=O)C=C2)=O)O)O1)O)NC(=O)/C=C/CC(C)C)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1NC(C)=O ZHSGGJXRNHWHRS-VIDYELAYSA-N 0.000 description 1
- MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N tunicamycin Natural products CC(C)CCCCCCCCCC=CC(=O)NC1C(O)C(O)C(CC(O)C2OC(C(O)C2O)N3C=CC(=O)NC3=O)OC1OC4OC(CO)C(O)C(O)C4NC(=O)C MEYZYGMYMLNUHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000007433 ureter carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5365—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/05—Dipeptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/68031—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being an auristatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
- A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
- A61K47/6817—Toxins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6847—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a hormone or a hormone-releasing or -inhibiting factor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
- A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
- A61K47/6861—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from kidney or bladder cancer cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0021—Intradermal administration, e.g. through microneedle arrays, needleless injectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0043—Nose
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/32—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Данное изобретение относится к применению анти-HER2 конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) для получения лекарственного средства для лечения уротелиальной карциномы. Лекарственное средство является безопасным и эффективным для пациентов с уротелиальной карциномой, особенно местнорастпространенной или метастатической уротелиальной карциномой, и может эффективно продлевать время выживания пациентов. 7 з.п. ф-лы, 8 ил., 6 табл., 6 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Данное изобретение относится к применению конъюгата анти-HER2 (человеческий рецептор фактора роста эпидермиса 2) антитело-лекарственное средство в лечении уротелиальной карциномы.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Уротелиальная карцинома (УК; также известная как переходно-клеточная карцинома, ПКК) является типом карциномы, которую обычно находят в мочевыделительной системе, такой как почки, мочевой пузырь и придаточные органы. Она является наиболее частым типом рака из карциномы мочевого пузыря и карциномы мочеточника, мочеиспускательного канала или пупочного протока. Она также является вторым наиболее частым типом карциномы почек, составляющим 5-10% от всех первичных злокачественных опухолей почек.
Уротелий (также называемый переходным эпителием) представляет собой выстилку мочевого пузыря, мочеточника и почечной лоханки (части почки, где собирается моча). Он состоит из уротелиальных клеток или переходных клеток. Эти клетки могут развиваться в раковые клетки, известные как уротелиальная карцинома (или переходно-клеточная карцинома).
В зависимости от инвазивности раковых клеток, уротелиальная карцинома может быть неинвазивной (только в выстилке мочевого пузыря) или инвазивной (растущей в другие слои стенки мочевого пузыря). Среди них неинвазивная уротелиальная карцинома имеется только в эндометрии мочевого пузыря и не прорастает глубже в стенки мочевого пузыря. В момент диагностики, 50%-60% пациентов с уротелиальной карциномой являются неинвазивными. Типы неинвазивной уротелиальной карциномы включают: неинвазивную плоскую уротелиальную карциному (также известную как карцинома in situ); неинвазивную папиллярную уротелиальную карциному, высокозлокачественную; неинвазивную папиллярную уротелиальную карциному, высокодифференцированную опухоль; вероятность неинвазивных папиллярных уротелиальных опухолей с низким потенциалом злокачественности, развивающихся в агрессивный рак, мала.
Наоборот, инвазивная уротелиальная карцинома растет из выстилки мочевого пузыря в более глубокие слои стенки мочевого пузыря, такие как соединительная ткань (известная как собственный слой) и мышечный слой. Во время диагностики опухоли у 40%-50% пациентов с уротелиальной карциномой являются инвазивными.
В теории, уротелиальная карцинома может происходить из любой части мочевыводящих путей, включая, но не ограничиваясь ими, почечную лоханку, мочеточник, мочевой пузырь и мочеиспускательный канал.
До возникновения метастазов из релевантных опухолевых клеток, хирургическая резекция является предпочтительным способом лечения. Для пациентов с опухолями, которые имеют метастазы, обычно требуются противораковые лекарственные средства. Текущая терапия первой линии включает: комбинированную терапию из гемцитабина и цисплатина. Радиационная терапия не является идеальной для уротелиальной карциномы и обычно применяется в качестве адъювантной терапии. При лечении рака в эпителии почечной лоханки/мочеточника, вариантом может быть БЦЖ инъекционная терапия (инъекция Mycobacterium Bovis через катетер).
Уротелиальная карцинома является мультицентровой и склонной к рецидивам. Для пациентов с опухолями, вовлекающими мышечный слой, предпочтительна полная резекция, и после хирургии требуется строгое повторное исследование. Поэтому лечение является трудным, и количество рецидивов высоко. (Li Xuesong, Wang Gang, Zhang Ye, eds. Essence of Urology Cases, Peking University Medical Press, 2017). Введение митомицина (химиотерапевтического агента) в мочевой пузырь в виде одной дозы в ранний послеоперационный период (в течение 24 часов) или в виде шести доз в течение нескольких недель после хирургии также является вариантом для некоторых пациентов. Химиотерапия на основе цисплатина все еще является золотым стандартом для лечения пациентов с метастатической УК. Суммарная эффективность терапии (СЭТ) химиотерапии на основе цисплатина составляет 60-70%, общая выживаемость (ОВ) составляет 14-15 месяцев, и 5-летняя выживаемость составляет 13-15%. Химиотерапию на основе платины проводят у пациентов с рецидивом с СЭТ приблизительно 15% и средней ОВ приблизительно 7 месяцев.
Винфлунин был одобрен в Европе для лечения распространенной мочевой эпителиальной или метастатической ПКК (Bellmunt, J. et al., JClin.Oncol. 27 (27): 4454-4461 (2009)). Несколько агентов было тестировано для монотерапии и они показали среднюю активность, со средней выживаемостью 5-10 месяцев (Yafi, F.A. et al. Current Oncol. 18 (1): e25-e34 (2011)). В случае метастазов, доцетаксел вводят в качестве подменного варианта пациентам с переходно-клеточной карциномой (NCCN 2014), и медицинские сообщества в Соединенных Штатах и Канаде доказали лечение доцетакселом для распространенного заболевания на основе доказательств со 2 фазы исследований (WO2016/064649A1).
В последние годы новые лекарственные средства для лечения уротелиальной карциномы в основном включают: 1. Атезолизумаб от Roche (2016), одобренный как первая анти-PD-L1 раковая иммунотерапия на рынке. Результаты последней фазы III клинического испытания (IMvigor211) Атезолизумаба для локально распространенного или метастатического рака мочеточника и мочевого пузыря показали, что Атезолизумаб не смог достичь первичной клинической конечной точки фазы III испытания IMvigor211, которая заключается в улучшении общей выживаемости (ОВ) в лечении второй линии для пациентов в местно распространенной или метастатической уротелиальной карциномой (мУК). Среди всего 234 пациентов (116 в группе Атезолизумаба и 118 в группе химиотерапии) средняя общая выживаемость составляла 11,1 месяца в группе Атезолизумаба и 10,6 месяца в группе химиотерапии. Частота подтвержденных объективных ответов у этих оцениваемых пациентов составила 23% и 22%, а средняя продолжительность ответа составила 15,9 и 8,3 месяца, соответственно.
Средняя выживаемость без прогрессирования в этой группе составила 2,4 месяца, и 4,2 месяца в контрольной группе. В разведочном анализе популяции с назначенным лечением, 12-месячные данные общей выживаемости составляли: для Атезолизумаба 39,2% и для химиотерапии 32,4%; средняя общая выживаемость составляла 8,3 месяца для Атезолизумаба, 7,5 месяцев для таксана и 9,2 месяца для винфлунина. (The ASCO Post, IMvigor211 Trial: Atezolizumab vs Chemotherapy in Platinum-Treated Advanced Urothelial Carcinoma, Matthew Stenger, 9/17/2018)
Кроме того, Комиссия по контролю данных США установила снижение выживаемости пациентов с PD-L1 низко-экспрессирующими опухолями с применением монотерапии Атезолизумабом по сравнению с химиотерапией на основе платины. Поэтому в июне 2018 в США было принято ограничение по применению Атезолизумаба (Tecentriq) у пациентов с локально распространенным или метастатическим уротелиальным раком, который подходит для цисплатин-содержащей химиотерапии. Требуется определить экспрессию PD-L1 перед применением Атезолизумаба. Это также иллюстрирует ограничения Атезолизумаба при лечении уротелиального рака.
2. Ниволумаб от Bristol-Myers Squibb (2017) был одобрен FDA для пациентов с локально распространенной или метастатической уротелиальной карциномой. Ниволумаб является анти-PD-1 моноклональным антителом. Клинические данные показали, что эффективность терапии Ниволумабом (СЭТ) составляет 19,6% и средняя выживаемость составляет 8,7 месяца. Наиболее частые серьезные побочные эффекты включают: инфекцию мочевыводящих путей, сепсис, диарею, непроходимость тонкой кишки и ухудшение общего состояния здоровья. Лечение Ниволумабом было прекращено у 17% пациентов из-за побочных реакций, и введение Ниволумаба у 46% пациентов было отложено из-за побочных реакций. В клинической практике связанные с лечение смерти были зафиксированы у 3 пациентов из-за пневмонии или сердечнососудистой недостаточности.
На основе вышесказанного, основной проблемой PD-L1/PD-1 иммунотерапевтических лекарственных средств на текущей клинической стадии является плохая эффективность лечения, которая в основном отражена в данных лечения, таких как средняя эффективность терапии (СЭТ) и средняя общая выживаемость, и не является идеальной. Другой основной проблемой является относительно высокая доля серьезных побочных эффектов. Например, Ниволумаб вызвал 3 смерти в соответствующих клинических испытаниях.
3. Эрдафитиниб от Janssen (Johnson & Johnson company) был предоставленной прорывной квалификацией лекарственного средства от FDA в 2018 для лечения пациентов с местно распространенным или метастатическим уротеалиальным раком, который развился после химиотерапии, и где опухоль имеет специфические изменения в гене фактора роста фибробластов (FGFR). Лекарственное средство является ингибитором рецептора фактора роста фибробластов (FGFR) тирозинкиназы. Результаты второй фазы клинического исследования (BLC2001, NCT02365597) показали, что суммарная эффективность терапии эрдафитинибом составляет 40% (процент пациентов с полным ответом 3%, процент пациентов с частичным ответом 37%), средняя выживаемость без прогрессирования составляла 5,5 месяцев и общее время выживания составляло 13,8 месяца. Из всего 99 пациентов, 7 пациентов прервали лечения из-за связанных с лечение побочных эффектов. Данные из https://www.jnj.com/media-center/press-releases/erdafitinib-phase-2-study-results-show-promise-in-the-treatment-of-metastatic-urothelial-cancer. Так как терапевтической целью этого лекарственного средства является FGFR, оно подходит только для пациентов с уротелиальным раком, которые имеют определенные мутации гена FGFR, хотя FGFR сверхэкспрессируется только в 15%-20% случаев метастатического уротелиального рака, и 40%-70% не мышечного инвазивного рака мочевого пузыря (2018 ASCO Annual Meeting, Responses Found in Advanced Urothelial Carcinoma with FGFR Inhibitor).
Текущие результаты лечения показали, что распространенная уротелиальная карцинома имеет высокую степень злокачественности и плохой прогноз. Особенно после неудачной обычной химиотерапии, варианты лечения ограничены. Иммунотерапия может быть полезна только для некоторых пациентов. Более того, количество доступных иммунотерапевтических ингибиторов также очень ограничено, суммарная эффективность терапии не высока, побочные эффекты лечения значительны, или существуют специфические генетические требования. В настоящее время существует немного терапевтических лекарственных средств, которые могут быть выбраны пациентами. Поэтому все еще существует необходимость в разработке лекарственных средств с более значительными терапевтическими эффектами и более широким применением для удовлетворения неотложных клинических потребностей.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В данном описании представлен способ лечения уротелиальной карциномы. Способ включает инъекцию эффективного количества конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) пациенту, где ADC является конъюгированная с анти-HER2 антителом цитотоксическая молекула. Цитотоксическая молекула включает, но не ограничена ими, тубулиновый ингибитор или ДНК повреждающий агент. Тубулиновый ингибитор включает, но не ограничен ими, доластатин и его производные, ауристатин и его производные, и майтанзин и его производные; ДНК повреждающие агенты включают, но не ограничены ими, калихеамицины, дуокармицины, антрамицин производный ПБД (пирролобензодиазепин) и производное камптотецина SN-38. Ауристатин и его производные включают, но не ограничены ими, монометилауристатин E (MMAE), монометилауристатин F (MMAF), ауристатин F (AF) или их производные; майтанзин и его производные включают, но не ограничены ими, DM1, DM3, DM4 и их производные (Research progress of bullet molecules of antibody-drug conjugates, Hu Xinyueet al., ChinMedBiotechnol, December 2017, Vol. 12, No. 6) (Research progress of maytansinoid antibody drug conjugates, Zhou Lei et al., Chinese Journal of New Drugs, Volume 25, Issue 22, 2521 -2530). Цитотоксическими молекулами также могут быть аманитины, антрациклины, баккатины, камптотецины, цемадотины, колхицины, колцимиды, комбретастатины, криптофицины, дискодермолиды, доцетаксел, доксорубицин, эхиномицины, элеутеробины, эпотилоны, эстрамустины, лекситропсины, майтанзины, метотрексат, нетропсины, пиромицины, ризоксины, таксаны, тубулизины или алкалоиды барвинка. Цитотоксические молекулы не ограничены указанными выше категориями и могут включать все лекарственные средства, которые могут применяться для ADC.
Другой аспект данного описания включает получение конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) для применения в производстве медикамента для лечения рака мочевого пузыря. Конъюгат антитело-лекарственное средство содержит антитело или его функциональный фрагмент, способный связываться с HER2, где антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, и где (i) вариабельная область тяжелой цепи содержит три CDR, где CDR имеют последовательности аминокислот SEQ ID NO: 1, 2 и 3, соответственно; и (ii) вариабельная область легкой цепи содержит три CDR, где CDR имеют последовательности аминокислот SEQ ID NO: 4, 5 и 6, соответственно. Антителом также может быть антитело, способное конкурировать с определенным антителом против одинакового или подобного эпитопа, где определенное антитело содержит указанные выше CDR.
В данном описании термин "антитело" может включать полноразмерное антитело или фрагмент антитела, которое связывается с, реагирует с или объединяется с HER2. Антителом может быть любой белок, белкоподобная молекула или полипептид, который связывается, объединяется или взаимодействует с частью популяции клеток, ищущих терапевтической модификации. Антителом может быть химерное антитело или его функционально активный фрагмент, гуманизированное антитело или его функционально активный фрагмент, человеческое антитело или его функционально активный фрагмент. Им также может быть антитело или его функционально активный фрагмент производных из других видов, отличных от указанных выше видов, например: мышиное антитело или его функционально активный фрагмент, крысиное антитело или его функционально активный фрагмент, козье антитело или его функционально активный фрагмент, кроличье антитело или его функционально активный фрагмент. Антителом может быть поликлональное антитело или моноклональное антитело. В некоторых вариантах, антителом может быть биспецифическое антитело. Также антителом может быть функционально активный фрагмент, производное или аналог антитела."Функционально/функциональное" означает, что фрагменты, производные или аналоги могут распознавать одинаковый антиген, и антитела, которые могут распознавать фрагменты, производные или аналоги, полученные из антигена, такие как, но не ограниченные ими: F (ab')2, Fab, Fab', Fv фрагменты и димеры тяжелых цепей и легких цепей антитела, или любые их минимальные фрагменты, такие как Fv или одноцепочнчные антитела (ОЦА). Кроме того, антителом может быть слитый белок антитела. Антитела также могут включать аналоги и производные, которые модифицированы или не модифицированы (т.е. ковалентно связаны с любой молекулой), пока такое ковалентное связывание позволяет антителу сохранять его антиген-связывающую иммуноспецифичность. Примеры включают, но не ограничены ими, аналоги и производные антител, включая дополнительные модификации, такие как: гликозилирование, ацетилирование, пэгилирование, фосфорилирование, амидирование, дериватизацию через известные защитные/блокирующие группы, отщепление протеазы, присоединение клеточным единицам антитела или другим белкам, и подобные. Любые объемные химические модификации могут быть достигнуты с применением известных методик, включая, но не ограничиваясь ими, специфическое химическое отщепление, ацетилирование, формилирование, метаболический синтез в присутствии туникамицина, и подобные. Кроме того, аналоги или производные могут включать одну или более из ненатуральных аминокислот. В некоторых вариантах, антитело может иметь модификации (например, замещения, делеции или добавления) в аминокислотных остатках, которые взаимодействуют с Fc рецептором. В другом аспекте, конъюгат антитело-лекарственное средство имеет структуру, представленную формулой Ab-(L-U)n, где Ab является антителом или его функциональным фрагментом, L является линкером, U является сопряженной цитотоксической молекулой, n является целым числом от 1 до 8, представляющим количество молекул терапевтического агента, связанных с антителом.
В другом аспекте линкер связан с антителом или его функциональным фрагментом через тиольную группу и/или аминогруппу, и цитотоксическая молекула конъюгирована с антителом через сайт-направленное или ненаправленное конъюгирование. Линкер в соответствии с данным изобретением может быть выбран из следующей таблицы:
Аббревиатура | Полное наименование | Характеристика |
mc | Малеимидокапроил | Не отщепляемый[12] |
mc-vc-pAB | Малеимидокапроил валин цитруллин п-аминобензил | Отщепляемый [12] |
3-MPA | 3-малеимидопропионовая кислота | Не отщепляемый[12] |
Mal-di-EG-OPFP | Перфторфенил 3-(2-(2-(3-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)пропанамидо)этокси)этокси)пропаноат | Не отщепляемый[14] |
Mal-di-EG-ОВu | 2,5-диоксопирролидин-1-ил 3-(2-(2-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)этокси)этокси)пропаноат | Не отщепляемый[14] |
Mal-Tri-EG-ОВu | 2,5-диоксопирролидин-1-ил 3-(2-(2-(2-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)этокси)этокси)этокси)пропаноат | Не отщепляемый[14] |
Mal-Tetra-EG-ОВu | 2,5-диоксопирролидин-1-ил 1-(2,5-диоксо-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-ил)-3-оксо-7,10,13,16-тетраокса-4-азанонадекан-19-оат | Не отщепляемый[14] |
Br-di-EG-ОВu | 2,5-диоксопирролидин-1-ил 3-(2-(2-(2-бромацетамидо)этокси)этокси)пропаноат | Не отщепляемый[14] |
Py-ds-prp-ОВu | 2,5-диоксопирролидин-1-ил 3-(пиридин-2-илдисульфанил)пропаноат | Сократимый [14] |
Py-ds-Prp-OPFP | Перфторфенил 3-(пиридин-2-илдисульфанил)пропаноат | Сократимый [14] |
Py-ds-dmBut-ОВu | 2,5-диоксопирролидин-1-ил 4-метил-4-(пиридин-2-илдисульфанил)пентаноат | Сократимый [14] |
Py-ds-dmBut-OPF | Перфторфенил 4-метил-4-(пиридин-2-илдисульфанил)пентаноат | Сократимый [14] |
SMCC | N-сукцинимидил 4-(малеимидометил)циклогексанкарбоксилат | Не отщепляемый[13] |
MBS | 3-малеимидобензойной кислоты N-гидроксисукцинимидовый эфир | Не отщепляемый[13] |
SATA | S-(N-сукцинимидил)тиоацетат | Не отщепляемый[13] |
SPDP | N-сукцинимидил 3-(2-пиридилдитио)пропионат | Сократимый [13] |
SMPT | (N-сукцинимидилкарбонил)-1-метил-1-(2-пиридилтио)толуол | Сократимый [13] |
Линкером в соответствии с данным изобретением предпочтительно является Малеимидо-Капроил-Валин-Цитруллин-п-аминобензилокси (mc-vc-pAB) и Малеимидокапроил (mc).
Линкером в соответствии с данным изобретением также может быть риглицилпептидный линкер, который является новым линкером для ADC, разработанным недавно (Rajeeva Singh et al., A New Triglycyl Peptide Linker for Antibody-Drug Conjugates (ADCs) with Improved Targeted Killing of Cancer Cells, MCT-16-002, Published June 2016). Альтернативно, может применяться глюкуронид-тубулизиновый линкер (Patrick J. Burke et al., Glucuronide-linked antibody-tubulysin conjugates display activity in MDR+ and heterogeneous tumor models, Molecular Cancer Therapeutics, 2018).
В другом аспекте антитело или его функциональный фрагмент получают из антитела, секретированного гибридомой, внесенной в China General Microbiological Culture Collection Center of China Committee for Culture Collection of Microorganisms, с номером образца CGMCC № 8102, 22 августа 2013.
В другом аспекте, антителом является гуманизированное антитело, предпочтительно, антителом является антитело, секретированное клетками CHO, внесенными в China Center for Type Culture Collection, с номером образца CCTCC C2013170, 6 ноября 2013.
В одном варианте, применяемый конъюгат антитело-лекарственное средство назван RC48-mc-vc-pAB-MMAE, что соответствует структуре общей формулы Ab-(L-U)n, в которой RC48 (гуманизированное анти-HER2 моноклональное антитело) сопряжено с MMAE через линкер mc-vc-pAB, и количество сопряжений варьируется от 1 до 8, включая 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, или сочетанию конъюгатов антитело-лекарственное средство с варьирующимися количествами сопряжений с MMAE от 1 до 8.
В данном описании уротелиальной карциномой является распространенная уротелиальная карцинома, которая не может быть удалена хирургией, местно распространенная или метастатическая уротелиальная карцинома, HER2 (человеческого фактора роста эпидермиса рецептор 2, также называемый ErbB-2, C-erbB2 или HER2/neu) положительная уротелиальная карцинома, HER2 положительная местно распространенная или метастатическая уротелиальная карцинома.
Лекарственное средство, описанное в данном описании, может вводиться интраназально, подкожно, чрезкожно, внутримышечно или внутривенно. Лекарственное средство также включает фармацевтически приемлемый носитель; лекарственное средство предпочтительно является лиофилизированным составом или жидким составом; носитель включает один или более, выбранный из группы, состоящей из стабилизатора, защитного агента, буфера, лиопротектора, агента, защищающего активность, поверхностно-активного вещества и адсорбирующего носителя и промотора абсорбции.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фигура 1: SDS-PAGE очищенного человеческого рекомбинантного белка HER2-ECD, окрашенного кумасси бриллиантовым синим. Загрузка составляет 10 мкг на трек.
Фигура 2: SDS-PAGE анализ cRC48 (химерного антитела) и RC48 (гуманизированного антитела). Загрузка составляет 2 мкг на трек.
На фигуре 3 показано сродство связывания гуманизированного антитела RC48 с HER2-ECD, определенное ELISA, и рассчитана константа сродства связывания Kd. Герцептин и cRC48 применяют в качестве контроля в этом эксперименте.
На фигуре 4A показана способность к связыванию анти-HER2 гуманизированного антитела RC48 с HER2+ клетками SK-BR3, BT474 и HER2- клетками MDA-MB468 проточной цитометрией.
На фигуре 4B показана способность к связыванию анти-HER2 антител с антигенами поверхности клеток BT474 при различной концентрации антитела проточной цитометрией. Анти-HER2 антителами являются Герцептин, cRC48 и RC48. Всего анализировали 5 Ч 104 клеток.
На фигуре 5 показано, что только RC48 показывает специфическое сродство связывания с HER2, но не с EGFR, HER3 и HER4.
На фигуре 6 представлена схематическая диаграмма эффективности субъекта № 01001. Профиль пациента: женщина, возраст 57 лет, с множественными метастазами в легкие после хирургической резекции правой лоханки. Патологический диагноз уротелиальная карцинома, HER2 ИГХ 3+.
На фигуре 7 представлена схематическая диаграмма эффективности субъекта № 01003. Профиль пациента: женщина, возраст 45 лет, метастазы в абдоминальный лимфатический узел после хирургической резекции правой почечной лоханки. Патологический диагноз уротелиальная карцинома, HER2 ИГХ 3+.
На фигуре 8 представлена схематическая диаграмма эффективности субъекта № 01007. Профиль пациента: мужчина, возраст 63 года, после раза мочевого пузыря и хирургической резекции правой лоханки, метастазы в легких, метастазы в печени, метастазы в цервикальный лимфатический узел, метастазы в средостение, множественные метастазы в кости. Патологический диагноз уротелиальная карцинома, HER2 ИГХ 3+.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
Пример 1. Получение и анализ последовательности мышиного моноклонального антитела mRC48
1. Экспрессия и очистка HER2 антигена
Фрагмент кДНК, кодирующий HER2-ECD (от Thr23 до Thr652, GenBank № образца M11730) клонируют в вектор экспрессии пкДНК3 (Invitrogen) с помощью ПЦР.
Подробный способ: кДНК кодирующей области HER2-ECD получают из HER2+ колонии клеток SKBR3 (ATCC No. HTB-30) с помощью ОТ-ПЦР (применяя систему обратной транскрипции ImProm-IITM от Promega).
Праймерами являются P1: 5'CGGGATCCTGCCACCAGCTGTGCGCC (SEQ ID NO: 7), P2: 5 'GCTCTAGA TCAGTTGATGGGGCAAGGCT (SEQ ID NO: 8), подчеркнутыми последовательностями являются введенные BamHI и XbaI сайты разрезания рестриктазы, соответственно. HER2-ECD кДНК, полученную обратной транскрипцией, применяют в качестве шаблона для ПЦР амплификации с применением указанных выше праймеров. Условия амплификации: денатурация при 94°C в течение 30 с, отжиг при 60°C в течение 30 с, расширение при 72°C в течение 1 минуты, всего 30 циклов, и затем расширение при 72°C в течение 10 минут. ПЦР фрагмент затем восстанавливают, переваривают с BamHI и XbaI (от NEB) и лигируют с пкДНК3 вектором. Полигистидиновую метку добавляют к С-концу HER2-ECD для способствования очистке. Клетки HEK293 (ATCC, USA) трансфицируют сконструированным вектором экспрессии ДНК, и растворимый белок HER2-ECD с his-меткой очищают из культуральной среды Ni-NTA аффинной хроматографией (Qiagen). SDS-PAGE и окрашивание кумасси бриллиантовым синим показало, что очищенный HER2-ECD белок имеет более 95% гомогенности, как показано на фигуре 1. Растворимый HER2-ECD появляется как мономер с относительной молекулярной массой около 75 кДа, слегка больше, чем рассчитанная молекулярная масса (71 кДа), показывая, что белок был гликозилирован в клетках HEK293. Очищенный HER2-ECD белок затем концентрируют и переносят в стерильный pH 7,4 ФРФБ буфер для последующего in vivo и in vitro анализа.
2. Создание и скрининг клеток гибридомы
Мышей иммунизируют HER2-ECD, полученным выше, в качестве антигена с получением антител. Иммунизацию, гибридизацию клеток гибридомы и предварительный скрининг проводят согласно стандартным методам (ссылка: WHO Technical Report Series, No. 822, 1992 Annex 3). 0,25 мкл белка HER2-ECD (50-100 мкг) и 0,25 мл полного адъюванта Фрейнда (Difco Lab) смешивают в равном объеме и применяют для иммунизации 4Balb/c мышей (купленных у Shanghai SLAC Laboratory Animal Co.,Ltd). Вторую инъекцию делают через 2 недели. Неполный адъювант Фрейнда (Difco Lab) и антиген с количеством 25-50 мкг/0,5 мл/на мышь применяют для второй инъекции. Через 3 недели делают третью инъекцию в той же дозе, как и вторая инъекция. Кровь берут через 10 дней после третьей инъекции. Сыворотку мышей анализируют фермент-связанным иммуносорбентным исследованием (ELISA). Клетки из селезенок двух мышей с наиболее высокими титрами анти-HER2 антитела берут и затем гибридизируют с клетками миеломы P3X63Ag8 (ATCC, CRL-1580). Гибридизированные клетки разводят в 96-луночном планшете и проводят предварительный скрининг с помощью ELISA по способности к связыванию с HER2-ECD. В типовом ELISA, 96-луночный планшет NuncMaxisorb покрывают HER2-ECD (0,2-1 мкг/мл) и затеем инкубируют с градиентным разведением мышиной сывороткой или надосадочной жидкостью гибридомы (100 мкл). Мышиное анти-HER2 антитело определяют с применением конъюгированного с пероксидазой хрена козьего F(ab')2 анти-мышиного IgG Fc (Invitrogen) вторичного антитела.
ELISA применяют для скрининга надосадочных жидкостей 400 колоний клеток гибридомы, из которых 36 показали сильное связывание с HER2-ECD. Десять клеток гибридомы с сильнейшей HER2 связывающей способностью выбирают, и субклонированные колонии клеток гибридомы снова подвергают скринингу методом серийных разведений. Субклонированные колонии клеток гибридомы культивируют в суспензии, белки очищают, и сродство связывания с HER2 определяют ELISA. Способность к связыванию указанных выше антител с HER2, экспрессированным на поверхности колонии клеток рака молочной железы человека далее тестируют проточной цитометрией (BD FACS Calibur) (см. пример 4 для подробного описания). Наконец, колонию клеток гибридомы mRC48 (мышиного IgG1k) идентифицируют через анализ последовательности, которая имеет сильную HER2 связывающую емкость. Клетки гибридомы mRC48 вносят с номером образца № 8102 в China General Microbiological Culture Collection Center of China Committee for Culture Collection of Microorganisms 22 августа 2013 (дата перехода на депозит согласно Будапештскому соглашению 29 октября 2013).
3. Анализ последовательности анти-HER2 антитела из клона клеток гибридомы mRC48
5' концы вариабельной области тяжелой цепи и легкой цепи клона mRC48 быстро амплифицируют с применением коммерческого набора для амплификации кДНК SMART™ RACE (Clontech) для секвенирования согласно инструкциям.
Полную РНК экстрагируют из клеток гибридомы с помощью RNApure Tissue Kit (Beijing ComWin Biotech Co.,Ltd) и проводят обратную транскрипцию с применением набора для амплификации кДНК SMART™ RACE. Первую цепь кДНК для RACE-Ready получают обратной транскрипцией согласно протоколу, поставляемому с набором, применяя полную РНК в качестве шаблона, праймеры, поставляемые с набором и обратную транскриптазу SMARTScribe™ Reverse Transcriptase. И затем проводят два раунда ПЦР. Для первого раунда ПЦР полученная кДНК являлась шаблоном, UPM, поставляемый с набором, применяют в качестве 5' конечного праймера, и mRC48-VL-1/mRC48-VH-1 в качестве 3' конечного праймера. Условия реакции ПЦР: пре-денатурация при 94°C в течение 5 минут; 25 циклов (денатурация при 94°C в течение 30 с, отжиг при 68°C в течение 30 с и расширение при 72°C в течение 2 минут); и расширение при 72°C в течение 10 минут.
Второй раунд ПЦР проводят с применением продуктов первого раунда ПЦР в качестве шаблона, NUP15, поставляемый с набором, в качестве 5' конечного праймера и mRC48-VL-2/mRC48-VH-2 в качестве 3' конечного праймера. Условия реакции ПЦР: пре-денатурация при 94°C в течение 5 минут; 25 циклов (денатурация при 94°C в течение 30 с, отжиг при 68°C в течение 30 с и расширение при 72°C в течение 2 минут); расширение при 72°C в течение 10 минут. Получают обе вариабельные области тяжелой цепи и легкой цепи указанного выше антитела из клона клеток гибридомы mRC48.
Праймеры были следующими:
mRC48-VL-1: 5'-GTTGGTGCAGCATCAGCCCGTT-3' (SEQ ID NO: 9);
mRC48-VL-2: 5'-GTTCACTGCCATCAATCTTCCAC-3'(SEQ ID NO: 10);
mRC48-VH-1: 5'-GCCAGTGGATAGACAGATGG-3'(SEQ ID NO: 11);
mRC48-VH-2: 5'-AGGTCACTGTCACTGGCTCAG-3' (SEQ ID NO: 12).
Продукты ПЦР очищают электрофорезом в агарозном геле и затем субклонируют в pCR2.1TOPO вектор клонирования (Invitrogen). ДНК плазмида из десяти независимых клонов получают ПЦР и затем секвенируют с применением M13 прямого и обратного праймеров. Анализ последовательности ДНК показал, что все 10 клонов имеют кДНК, кодирующие одинаковый VH или VL полипептид. Последовательности аминокислот областей, определяющих комплементарность (CDR) анализируют с применением таблицы кодирования и перечисляют в таблице 1. Сравнительный анализ последовательности показал, что CDR анти-HER2 mRC48 значительно отличались от CDR известных HER2 антител, включая Герцептин (трастузумаб).
Таблица 1. Последовательности аминокислот CDR анти-HER2 моноклонального антитела mRC48
VH | VL | |
CDR1 | DYYIH (SEQ ID NO: 1) | KASQDVGTAVA (SEQ ID NO: 4) |
CDR2 | RVNPDHGDSYYNQKFKD (SEQ ID NO: 2) | WASIRHT (SEQ ID NO: 5) |
CDR3 | ARNYLFDHW (SEQ ID NO: 3) | HQFATYT (SEQ ID NO: 6) |
Пример 2. Гуманизация анти-HER2 моноклонального антитела mRC48 (способ, описанный в CN105008398A)
Мышиное анти-HER2 моноклональное антитело mRC48 гуманизируют трансплантацией CDR легкой цепи или тяжелой цепи в человеческие IgG1к каркасные области.
Вариабельную область легкой цепи гуманизированного RC48 антитела (RC48-VL) и вариабельную область тяжелой цепи гуманизированного RC48 антитела (RC48-VH) были созданы и составили гуманизированное анти-HER2 антитело: RC48. Сходство между всей последовательностью RC48-VH и человеческим IgG1VH составляет 84%. RC48 антитело содержит вариабельную область легкой цепи RC48-VL и вариабельную область тяжелой цепи RC48-VH.
Гуманизированное анти-HER2 моноклональное антитело RC48 получают трансплантацией CDR. Последовательности нуклеиновых кислот вариабельной области тяжелой цепи и легкой цепи прямо синтезированы Nanjing GenScript Biotech Corporation. Синтетическая вариабельная область содержит консенсусную последовательность Козака, инициирующий кодон, сигнальный пептид тяжелой цепи или легкой цепи, человеческую каркасную область и мышиные CDR. Вариабельные области и человеческую IgG1k константную область лигируют в полный фрагмент ПЦР с перекрывающимися праймерами.
Праймеры для ПЦР с перекрывающимися праймерами:
Тяжелая цепь VH1: 5’CGCGGATCC GCCGCCACCATGGGATGGAGCT3′ (SEQ ID NO: 13)
VH2: 5’GATGGGCCCTTGGTGCTAGCGGAGCTCACTGTCACCAGTGTT3’ (SEQ ID NO: 14)
CH1: 5’ GCTAGCACCAAGGGCCCATC 3’ (SEQ ID NO: 15)
CH2: 5’ CCGGAATTCTTTACCGGGAGACAGGGAGA 3’ (SEQ ID NO: 16)
Легкая цепь VL1: 5’ CGCGGATCC GCCGCCACCATGGACATGAGGGT 3’ (SEQ ID NO: 17)
VL2: 5’ GATGGTGCAGCCACAGTACGCTTTATCTCAACTTTTG TAC3’ (SEQ ID NO: 18)
CL1: 5’ CGTACTGTGGCTGCACCAT 3’ (SEQ ID NO: 19)
CL2: 5’ CCGGAATTCACACTCTCCCCTGTTGAAGC 3’ (SEQ ID NO: 20)
Для создания нуклеиновой кислоты тяжелой цепи, сначала, вариабельную область тяжелой цепи амплифицируют с применением синтетической вариабельной области в качестве шаблона и VH1 и VH2 в качестве праймеров, вместе с тем, постоянную область тяжелой цепи человеческого IgG1к используют в качестве шаблона и CH1 и CH2 в качестве праймеров для амплификации постоянной области тяжелой цепи. Условия амплификации: денатурация при 94°C в течение 30 с, отжиг при 60°C в течение 30 с, расширение при 72°C в течение 1 минуты, 30 циклов, и расширение при 72°C в течение 10 минут. Затем последовательность тяжелой цепи RC48 амплифицируют с применением полученных выше двух продуктов ПЦР в качестве шаблона, и VH1 и CH2 в качестве праймеров. Условия амплификации: денатурация при 94°C в течение 30 с, отжиг при 60°C в течение 30 с, расширение при 72°C в течение 2 минут, 30 циклов, и расширение при 72°C в течение 10 минут.
Для создания нуклеиновой кислоты легкой цепи, сначала, вариабельную область легкой цепи амплифицируют с применением синтетической переменной области в качестве шаблона и VL1 и VL2 в качестве праймеров, вместе с тем, постоянную область легкой цепи человеческого IgG1к применяют в качестве шаблона и CL1 и CL2 в качестве праймеров для амплификации постоянной области легкой цепи. Условия амплификации: денатурация при 94°C в течение 30 с, отжиг при 60°C в течение 30 с, расширение при 72°C в течение 1 минуты, 30 циклов, и расширение при 72°C в течение 10 минут. Затем последовательность легкой цепи RC48 амплифицируют с применением полученных выше двух продуктов ПЦР в качестве шаблона, и VL1 и CL2 в качестве праймеров. Условия амплификации: денатурация при 94°C в течение 30 с, отжиг при 60°C в течение 30 с, расширение при 72°C в течение 2 минут, 30 циклов, и расширение при 72°C в течение 10 минут.
Таким образом получают последовательность гуманизированного анти-HER2 моноклонального антитела RC48, где RC48 содержит постоянную область тяжелой цепи человеческого IgG1к и вариабельную область тяжелой цепи RC48-VH, и постоянную область легкой цепи человеческого IgG1к и вариабельную область легкой цепи RC48- VL.
Человеческое-мышиное химерное антитело cRC48 также получают тем же способом. Мышиную вариабельную область и постоянную область человеческого IgG1k лигируют в полную последовательность ПЦР с перекрывающимися праймерами.
Каждый из амплифицированных фрагментов субклонируют в вектор экспрессии pкДНК3.0, соответственно. Полученные конструкты трансфицируют в суспензию клеток CHO (Invitrogen) для получения различных рекомбинантных антител. Антитела очищают белком A и подвергают последующей характеризации. Химерные анти-HER2 RC48 (названные cRC48) содержат мышиную-человеческую химерную тяжелую цепь и легкую цепь. RC48 содержит гуманизированную тяжелую цепь RC48-VH и гуманизированную легкую цепь RC48-VL. Оба cRC48 и RC48 могут экспрессироваться в клетках. Антитела собирают из надосадочных жидкостей клеток CHO, очищают Белком A и анализируют SDS-PAGE в восстанавливающих и не восстанавливающих условиях (см. фигуру 2). Клетки CHO, способные секретировать RC48 антитело как описано выше (т.е. клетки CHO, трансфицированные постоянной областью тяжелой цепи человеческого IgG1к и вариабельной областью тяжелой цепи RC48-VH, и постоянной областью легкой цепи человеческого IgG1к и вариабельной областью легкой цепи RC48-VL) вносят в China Center for Type Culture Collection 6 ноября 2013 с номером образца C2013170.
Пример 3. Характеризация Анти-HER2 RC48 Антитела
Константу сродства связывания HER2 (Kd) для cRC48 (химерного антитела) и RC48 антитела (гуманизированного антитела) измеряют ELISA. Конкретный способ описан в примере 1. Коротко, 96-луночный планшет покрывают растворимым HER2-ECD, затем инкубируют с разведенными антителами (Герцептин и химерное cRC48 в качестве контроля), и HRP-конъюгированное козье F(ab')2 анти-человеческое IgGFc (Invitrogen) применяют в качестве специфического вторичного антитела для определения HER2-ECD-родственных антител (всех форм человеческого IgG1к). Значение константы сродства поверхностного связывания (Kd) для каждого анти-HER2 антитела рассчитывают построением кривой связывания с последующим использованием нелинейного уравнения моносайтового специфического связывания (Journal of Immunological Methods, 270: 155-162, 2002) (на фигуре 3 показана типовая кривая связывания HER2, полученная из трех независимых исследований ELISA). Результаты ELISA показаны на фигуре 3.
Из трех независимых исследований можно видеть, что RC48 (гуманизированное антитело) показывает среднюю константу сродства 44 пМ, показывая значительно улучшенное сродство связывания HER2-ECD по сравнению с cRC48 (средняя константа сродства 77 пМ) и Герцептином (средняя константа сродства 97 пМ). Результаты показаны в таблице 2.
Таблица 2. Сравнение средней константы сродства между антителами в соответствии с данным изобретением и Герцептином
Образец | Средняя константа сродства |
Герцептин | 97 пМ |
cRC48 | 77 пМ |
RC48 | 44 пМ |
Пример 4. Сродство связывания RC48 (гуманизированного антитела) с HER2
1) Тестирование сродства связывания RC48 антитела с HER2
Проточную цитометрию применяют для определения сродства связывания эндогенно экспрессированного HER2 в клетках рака молочной железы человека с гуманизированным анти-HER2 антителом RC48. Результаты показаны на фигуре 3. 6 мкг человеческого IgG (в качестве контрольной группы), Герцептин, cRC48 и RC48 соответственно инкубируют с двумя типами клеток рака молочной железы: SK-BR-3 и BT4745 по отдельности, а также клетками HER2-MDA-MB468 (2 Ч 107 клеток) на льду в течение 30-45 минут. После тщательного промывания 4 мл холодного ФРФБ дважды, антитела, связанные с поверхностью клеток, определяют R-PE-конъюгированным козьим анти-человеческим IgG Fc (15 мкл, 25 мкг/мл) вторичным антителом и затем анализируют на проточном цитометре (BDFACSCalibur). Человеческий IgG1 в контрольной группе не показывает связывание с указанными выше тремя типами раковых клеток. Наоборот, Герцептин, cRC48 и RC48 сильно связываются с двумя типами HER2-положительных клеток, но не с HER2-отрицательными клетками, показывая, что это связывание является HER2-специфическим (см. фигуру 4a). Сравнением средней интенсивности флуоресценции в одной и той же группе, было обнаружено, что RC48 показало более высокое сродство связывания, чем Герцептин и cRC48. Титрованием концентрации анти-HER2 антитела и количества клеток, анализированных проточной цитометрией, получают кривую связывания клеточного анти-HER2 антитела с поверхностью клеток HER2. Результаты показаны на фигуре 4b. Гуманизированное анти-HER2 антитело RC48 показало очевидное сродство связывания с HER2, из которого Kd сродства связывания с HER2 на поверхности клеток BT474 составляет 4 нМ, а Герцептин и cRC48 показали 10 нМ и 5 нМ, соответственно. Результаты показаны в таблице 3:
Образец | Kd сродства связывания |
Герцептин | 10 нМ |
cRC48 | 5 нМ |
RC48 | 4 нМ |
2) тестирование специфичности связывания антигена
ELISA применяют для определения способности связывания Герцептина, cRC48, RC48 с различными поверхностными антигенами: EGFR, HER2, HER3, HER4. ELISA проводят как описано в примере 1. 96-луночный планшет покрывают EGFR, HER2, HER3 или HER4, 20 нг для каждой лунки, инкубируют с разными анти-HER2 антителами, т.е. Герцептином, cRC48 и RC48, и затем определяют с применением HRP-конъюгированного козьего F (ab’)2 анти-мышиного IgG-Fc вторичного антитела (Invitrogen). Результаты показаны в таблице 5. Показано, что Герцептин, cRC48 и RC48 практически не имеют связывающей емкости для EGFR, HER3 и HER4, но имеют сильную связывающую емкость для HER2, демонстрируя, что Герцептин и RC48 имеют высокую специфичность связывания для HER2.
Пример 5. Получение конъюгатов антитело-лекарственное средство
1) Очистка моноклонального антитела RC48
Моноклональное антитело RC48 собирают из надосадочной жидкости клеточной культуры CHO с применением Белка A. Антитело подвергают SDS-PAGE электрофорезу и ГПХ анализом, и чистота составляет более 95%. Полученное антитело диализируют с ФРФБ буфером в 30 КД предельным мембранным мешком и концентрируют. Концентрацию антитела калибруют с применением устройства для измерения УФ абсорбции для последующего конъюгирования.
2) Конъюгирование моноклонального антитела RC48 с лекарственным средством
Восстанавливающий агент и защитный агент соответственно готовят с ФРФБ буфером следующим образом: исходный раствор 1-20 ммоль/л TCEP (трис-2-карбоксиэтилфосфина), 1-20 ммоль/л DTPA (диэтилентриаминпентауксусной кислоты). Восстанавливающий агент добавляют в определенном интервале концентрации согласно желаемому коэффициенту связывания, смешивают с определенной концентрацией моноклональных антител (например: 5-30 мг/мл) согласно определенному объемному отношению (например, 1:1), так, что конечное молярное отношение TCEP к антителу составляет 0,5-6,0:1, и перемешивают при 25°C в течение 2 ч. Концентрацию свободных тиольных групп определяют способом DTNB при 412 нм, и количество свободных тиольных групп рассчитывают через молярное отношение с антителом. Восстановление TCEP имеет хорошую воспроизводимость, и количество свободных тиольных групп может достигать 1,0-8,0 после восстановления.
Антитела могут быть непосредственно подвергнуты конъюгированию после восстановления TCEP. Определенную концентрацию (10 мМ) лекарственного средства (vc-MMAE, vc-MMAF или mc-MMAF) (купленного у Shanghai HaoYuan Chemical Technology Co., Ltd.) готовят в 25% ДМСО (диметилсульфоксиде). Лекарственное средство добавляют медленно к раствору антитела согласно молярному отношению лекарственных средств к тиольной группе 0,3-2,8:1 и перемешивают для взаимодействия при 25°C в течение 2 ч. Способ DTNB применяют для определения концентрации свободной тиольной группы (близкой к 0) при 412 нм. Оставшиеся непрореагировавшие лекарственные средства удаляют Sephadex G-25 и свободными маленькими молекулами, такими как ДМСО. SDS-PAGE, Р-ВЭЖХ и ГИХ-ВЭЖХ применяют для определения конъюгирования.
Пример 6. Сродство связывания конъюгатов Антитело-Лекарственное средство
Тестирование сродства связывания по ELISA
Планшет ELISA покрывают рекомбинантным белком HER2-ECD (концентрация: 0,5 мг/мл) и инкубируют в течение ночи при 2°C-8°C. После промывания планшета промывкой для планшетов 3 раза добавляют 3% БСА-ФСБТ раствор для блокирования при 37°C в течение 2 ч, и затем планшет промывают промывкой для планшетов 3 раза. Загрузка образца: стандарт, начиная с 1000 нг/мл, разводят ФСБТ буфером с получением 11 точек разведения, 100 мкл/лунку, инкубируют при 37°C в течение 2 ч. Планшет промывают промывкой для планшетов 3 раза. Вторичное антитело (козье анти-человеческое IgG-Fc-HRP) разводят 5000-кратно ФСБТ буфером. Добавляют ТМБ раствор для проведения реакции и инкубируют при комнатной температуре в темноте в течение 8-10 минут. Реакцию останавливают 2M H2SO4, и микропланшетный ридер применяют для считывания при 450/655 нм. Результаты показаны в таблице 4.
Таблица 4. Сравнение сродства связывания конъюгатов антитело-лекарственное средство (VC короткая для mc-vc-pAB) и T-DM1
Образец | Сродство связывания нг/мл | Мольный эквивалент |
RC48-VC-MMAE | 2,237 | 15,22 |
RC48-VC-MMAF | 3,349 | 13,51 |
RC48-MC-MMAF | 2,902 | 16,42 |
T-DM1 | 2,376 | 15,16 |
Как показано в результатах, RC48-VC-MMAE (т.е. RC48-mc-vc-pAB-MMAE), RC48-VC-MMAF и RC48-MC-MMAF имеют сродство связывания с HER2-ECD, эквивалентое T-DM1.
Пример 7. Тестирование эффективности и безопасности монотерапии HER2-положительной местнорастпространенной или метастатической уротелиальной карциномы
Целью этого эксперимента является оценка эффективности и безопасности монотерапии HER2-положительной местнорастпространенной или метастатической уротелиальной карциномы. Конъюгатом антитело-лекарственное средство для тестирования является RC48-mc-vc-pAB-MMAE. RC48 сочетают с MMAE через линкер mc-vc-pAB, и количество сопряженных лекарственных средств варьируется от 1 до 8.
Критерии выбора для субъектов следующие:
Возраст: от 18 лет (минимальный возраст) до 80 лет (максимальный возраст);
где критериями выбора являются:
1. Субъекты согласны участвовать в исследовании и подписали информированное согласие;
2. Мужчины или женщины в возрасте 18-60 лет;
3. Ожидаемое время выживания составляет 12 недель или более;
4. Местнорастпространенная или метастатическая уротелиальная карцинома мочевого пузыря, которая не может быть полностью удалена хирургическим вмешательством на основе патологического диагноза;
5. Субъекты, которым диагностирована местрораспространенная или метастатическая карцинома, которая не может быть удалена хирургией, и все еще происходит развитие болезни или возникла резистентность после получения, по крайней мере, системной химиотерапии первой линии;
6. По крайней мере, имеют измеримые очаги, определенные стандартом RECIST 1.1;
7. Положительная HER2 экспрессия подтверждена в тестирующей лаборатории;
8. Физический статус по ВООГ 0 или 1;
9. Удовлетворительное функционирование сердца, костного мозга, печени и почек;
10. Женщины должны быть хирургически стерилизованы или находится в постменопаузе, или согласны использовать, по крайней мере, один из одобренных медициной контрацептивов (таких как внутриматочная спираль, контрацептивные пилюли или презервативы) в течение периода лечения и в течение 6 месяцев после лечения; мужчины должны быть согласны использовать, по крайней мере, один из одобренных медициной контрацептивов (таких как презервативы, воздержание и т.д.) в течение периода лечения и в течение 6 месяцев после лечения;
11. Имеют намерение и возможность следовать процедурам исследования и отслеживания.
В то же время, критериями исключения являются:
1. Известная аллергическая реакция на конъюгат рекомбинантное гуманизированное анти-HER2 моноклональное антитело-MMAE и его компоненты;
2. Получает другое противоопухолевое лечение в течение 4 недель до лечения;
3.Ранее получал конъюгат рекомбинантное гуманизированное анти-HER2 моноклональное антитело-MMAE;
4. Имел значительное хирургическое вмешательство в течение 4 недель до начала введения и не полностью восстановился;
5. Получал живую вакцину в течение 4 недель до введения или планирует получить какую-либо вакцину во время периода лечения;
6. Имеет другие тяжелые и неконтролируемые сопутствующие заболевания, которые могут влиять на совместимость с протоколом или вмешиваться в интерпретацию результатов;
7. Имел другие злокачественные опухоли в течение 5 лет до начала введения;
8. Страдает метастатическим в ЦНС и/или злокачественным менингитом;
9. Имеет активное аутоиммунное заболевание, которое требует системного лечения в последние 2 года;
10. Ранее получил аллогенный трансплантат гемопоэтических стволовых клеток или трансплантат солидного органа;
11. Имеет большое количество плевральной жидкости или асцит с клиническими симптомами или требующий симптоматического лечения;
12. Беременная или кормящая женщина;
13. Положительный результат тестирования на ВИЧ;
14. Пациенты с активным гепатитом B или C;
15. Активный туберкулез в анамнезе;
16. Страдает любым другим заболеванием, аномальным метаболизмом, имеет аномальные результаты физического обследования или аномальные лабораторные тесты, где, в соответствии с суждением исследователя, резонно подозревать, что субъект имеет определенное заболевание или состояние, неподходящее для применения исследуемого лекарственного средства, или влияющее на интерпретацию результатов исследования, или подвержен высокой степени риска;
17. Кто, по оценкам, может в достаточной степени соблюдать это клиническое исследование.
Методы эксперимента:
Это исследование включает субъектов с местнораспространенной или метастатической уротелиальной карциномой, у которых ранее была неэффективной или вызвала резистентность, по крайней мере, системная химиотерапия первой линии, и которые имеют измеримые очаги поражения, приемлемое физическое состояние и функционирование органов. Патологические срезы опухолевой ткани субъектов подвергают лабораторному тестированию на подтверждение экспрессии HER2, и положительный результат обозначают оценкой 2+ или 3+ иммуногистохимического (ИГХ) анализа (независимо от результатов определения флуоресценции гибридизации in situ [FISH]).
Результаты определения HER2 в иммуногистохимии (ИГХ) были согласно критериям для интерпретации HER2 в "Guideline for HER2 detection in breast cancer (2014 Edition, China)". Подробности показаны в таблице 5.
Таблица 5. Критерии интерпретации HER2 в "Guideline for HER2 detection in breast cancer (2014 Edition, China)".
Критерии оценки | Результаты ИГХ | Уровень экспрессии активированной HER2 |
Отсутствие окрашивания мембран клетки или ≤10% инвазивных раковых клеток показывают неполное, слабое окрашивание мембраны клетки. | 0 | отрицательная |
>10% инвазивных раковых клеток показывают слабое и неполное окрашивание мембраны клетки. | 1+ | отрицательная |
>10% инвазивных раковых клеток показывают неполное и/или от слабого до умеренного окрашивание мембраны клетки или ≤10% инвазивных раковых клеток показывают сильное и не поврежденное окрашивание мембраны клетки. | 2+ | положительная |
>10% инвазивных раковых клеток показывают сильное, полное и однородное окрашивание мембраны клетки. | 3+ | положительная |
Субъекты, соответствующие всем критериям, получают лечение RC48-ADC (2,0 мг/кг, внутривенное вливание, один раз каждые 2 недели), и эффективность оценивают каждые 6 недель пока болезнь не начнет прогрессировать, не появится непереносимая токсичность или субъект не выйдет из исследования. Первичным ожидаемым результатом исследования является объективно оцененная суммарная эффективность терапии (СЭТ). Вторичные ожидаемые результаты включают выживание при прогрессировании, общее выживание и безопасность лечения.
Результаты исследования:
Исследование начинают в декабре 2017. По состоянию на 31 июля 2018, всего 18 субъектов получали лечение, включая 15 мужчин и 3 женщин, со средним возрастом 63 года. Первичные очаги поражения включают мочевой пузырь (50,0%), почечную лоханку (27,8%) и мочеточник (22,2%). Основные места метастазирования включали легкие, печень и лимфатические узлы. 16 пациентов (88,9%) ранее получали платиновую терапию первой линии. Иммуногистохимические (ИГХ) результаты для экспрессии HER2 (проведенные в лаборатории) показали, что имеется 11 (61,1%) ИГХ2+ субъектов и 7 (38,9%) ИГХ3+ субъектов.
Оценку эффективности проводят для 13 из 18 субъектов, и 10 субъектов имели частичную ремиссию (ЧР) (где 4 субъекта имели подтвержденную ЧР (две последовательные ЧР называют подтвержденной ЧР)). Согласно стандарту RECIST: "если каждый субъект отвечает критерию для частичной или полной ремиссии и эффективность подтверждается снова в более поздний момент времени (обычно через четыре недели), то может быть установлена полная или частичная ремиссия”. То есть две последовательные оценки ЧР для субъекта называют подтвержденной ЧР. Другие 6 случаев еще не достигли временной точки для подтверждения эффективности, и только одно подтверждение было завершено. Суммарная эффективность терапии (СЭТ) составляет 76,9% (10/13), и частота контроля заболевания (ЧКЗ) (10 случаев из 13 подвергнутых оценке эффективности были с ЧР и 2 случая были стабильным заболеванием (СЗ)) составляет 92,3% (12/13). Текущий максимальный период лечения, получаемого субъектами, составлял более 7 месяцев. Среди субъектов, достигших ремиссии, 7 (53,8%) получали лечение таксаном и 4 (30,8%) получали лечение PD-1/PD-L1.
16 из 18 субъектов были субъектами для оценки безопасности. Наиболее частыми связанными с лечением нежелательными реакциями (СЛНР) при оценке безопасности были повышенная ALT (50,0%, степень 1-2), гипестезия (50,0%, степень 1-2) и пониженное количество лейкоцитов (50,0%, степень 1-2); СЛНР больше 3 степени является снижением количества нейтрофилов (12,5%, степень 3). Никаких связанных с лекарственным средством серьезных нежелательных явлений (СНЯ) не возникло.
Описания суммарного эффекта лечения в некоторых случаях показаны следующим образом:
1. Пациент 01001: женщина, возраст 57 лет, с множественными метастазами в легкие после хирургической резекции правой лоханки. Патологический диагноз уротелиальная карцинома, HER2 ИГХ 3+.
Согласно фигуре 6, через 12 недель лечения очаги опухоли в нижней доле правого легкого были уменьшены с 54 Ч 31 мм (6 недель лечения) до 37 Ч 23 мм (12 недель лечения), снижение на 49%.
2. Пациент 01003:женщина, возраст 45 лет, метастазы в абдоминальный лимфатический узел после хирургической резекции правой почечной лоханки. Патологический диагноз уротелиальная карцинома, HER2 ИГХ 3+.
Согласно фигуре 7, через 6 недель лечения очаг опухоли, расположенный около правой поясничной мышцы, был уменьшен с 56 Ч 48 мм до 33 Ч 22мм, снижение на 72,9%.
3. Пациент 01007: мужчина, возраст 63 года, после раза мочевого пузыря и хирургической резекции правой лоханки, метастазы в легких, метастазы в печени, метастазы в цервикальный лимфатический узел, метастазы в средостение, множественные метастазы в кости. Патологический диагноз уротелиальная карцинома, HER2 ИГХ 3+.
Согласно фигуре 8, можно увидеть, что через 6 недель лечения очаги опухоли, расположенные в левой верхней доле, метастазы в печени и средостенные лимфатические углы были значительно снижены. Опухоль, расположенная в левой верхней доле была уменьшена с 45 Ч 36 мм до 28Ч22 мм, снижение на 61,9%; опухоль в месте метастазов в печень была уменьшена с 38Ч32 мм до 25Ч21 мм, снижение на 56,8%; и опухоль в средостенных лимфатических узлах была уменьшена с 29Ч15 мм до 18Ч7 мм, снижение на 71,03%.
Представленные выше клинические данные и визуальные патологические изменения показали, что конъюгат анти-HER2 моноклонального антитела-MMAE в соответствии с данным изобретением обладает очень значительным терапевтическим действием. Это также можно увидеть через сравнение с продаваемыми на рынке лекарственными средствами, что конъюгат в соответствии с данным изобретением значительно лучше, чем подобные современные лекарственные средства, одобренные Европейским Союзом и Соединенными Штатами. Например, Атезолизумаб (Roche) имеет СЭТ только 23% на фазе III клинических данных, и Ниволумаб (Bristol-Myers Squibb) едва 19,6%. Эрдафитиниб (Jansen) нацелен только на пациентов с уротелиальным раком с определенными мутациями гена FGFR. Наоборот, СЭТ конъюгата рекомбинантного гуманизированного анти-HER2 моноклонального антитела-MMAE в соответствии с данным изобретением составляет 76,9%, и частота контроля заболевания (ЧКЗ) составляет 92,3%, что значительно лучше, чем подобные лекарственные средства, присутствующие на рынке, и побочные эффекты также значительно меньшие, чем у подобных лекарственных средств, без каких-либо серьезных побочных эффектов (СПЭ). Это делает его более доступным для пациентов, предоставляя другой вариант для пациентов с уротелиальным раком, нуждающихся в лечении. Можно увидеть, что конъюгат анти-HER2 антитела в соответствии с данным изобретением обладает превосходными перспективами применения при лечении уротелиальной карциномы, могут эффективно улучшать, или даже обращать процесс развития заболевания у пациентов, и достигает неожиданных технических эффектов.
Claims (17)
1. Применение конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) при получении лекарственного средства для лечения уротелиальной карциномы, где конъюгатом антитело-лекарственное средство является анти-HER2 антитело или его функциональный фрагмент, сопряженное с цитотоксической молекулой,
где конъюгат антитело-лекарственное средство представлен формулой Ab-(LU)n, где Ab представляет собой антитело или его функциональный фрагмент, L представляет собой линкер, U представляет собой конъюгированную цитотоксическую молекулу и n представляет собой целое число от 1 до 8, представляющее количество молекул терапевтического агента, связанных с антителом,
где антитело или его функциональный фрагмент способны конкурировать с определенным антителом против того же эпитопа,
где указанное антитело включает вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, определенную последовательностями области, определяющей комплементарность (CDR), и где
(i) вариабельная область тяжелой цепи содержит три CDR, при этом аминокислотные последовательности CDR представлены соответственно в SEQ ID NO: 1, 2 и 3; и
(ii) вариабельная область легкой цепи содержит три CDR, при этом аминокислотные последовательности CDR представлены соответственно в SEQ ID NO: 4, 5 и 6; и
где L представляет собой валин цитруллин п-аминобензил (mc-vc-pAB) и
U представляет собой MMAE.
2. Применение по п.1, где антитело или его функциональный фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, где
(i) вариабельная область тяжелой цепи содержит три CDR, где последовательности аминокислот CDR соответственно представлены далее в SEQ ID NO: 1, 2 и 3; и
(ii) вариабельная область легкой цепи содержит три CDR, где последовательности аминокислот CDR соответственно представлены в SEQ ID NO: 4, 5 и 6.
3. Применение по п.1 или 2, где антитело или его функциональный фрагмент является мышиным, химерным или гуманизированным.
4. Применение по любому из представленных выше пунктов, где антитело или его функциональный фрагмент получают из антитела, секретированного гибридомой, внесенной в China General Microbiological Culture Collection Center of China Committee for Culture Collection of Microorganisms 22 августа 2013 г., с номером образца CGMCC № 8102.
5. Применение по любому из представленных выше пунктов, где антителом является гуманизированное антитело, предпочтительно антитело секретируется клетками CHO, внесенными в China Center for Type Culture Collection 6 ноября 2013 г. с номером образца CCTCC C2013170.
6. Применение по любому из представленных выше пунктов, где уротелиальную карциному выбирают из группы, состоящей из местнораспространенной уротелиальной карциномы, которая не может быть удалена хирургически, местнораспространенной или метастатической уротелиальной карциномы, HER2-положительной уротелиальной карциномы и HER2-положительной местнораспространенной или метастатической уротелиальной карциномы.
7. Применение по любому из представленных выше пунктов, где лекарственное средство дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель; лекарственное средство предпочтительно представляет собой лиофилизированный состав или жидкий состав; носитель является одним или несколькими, выбранными из группы, состоящей из стабилизатора, защитного агента, буфера, лиопротектора, защитного агента активности, поверхностно-активного вещества, адсорбционного носителя и промотора абсорбции.
8. Применение по любому из представленных выше пунктов, где лекарственное средство может вводиться интраназально, подкожно, внутрикожно, внутримышечно или внутривенно.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810998055.4 | 2018-08-29 | ||
CN201810998055 | 2018-08-29 | ||
PCT/CN2019/101283 WO2020042941A1 (zh) | 2018-08-29 | 2019-08-19 | 抗her2抗体药物偶联物在治疗尿路上皮癌中的用途 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2750817C1 true RU2750817C1 (ru) | 2021-07-05 |
Family
ID=69643195
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2020117761A RU2750817C1 (ru) | 2018-08-29 | 2019-08-19 | Применение конъюгата анти-her2 антитело-лекарственное средство при лечении уротелиальной карциномы |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20200289663A1 (ru) |
EP (1) | EP3845252A4 (ru) |
JP (3) | JP7105304B2 (ru) |
KR (3) | KR102520974B1 (ru) |
CN (1) | CN111655295B (ru) |
AU (2) | AU2019330680A1 (ru) |
BR (1) | BR112020010856A8 (ru) |
CA (1) | CA3077260C (ru) |
RU (1) | RU2750817C1 (ru) |
SG (1) | SG11202009130XA (ru) |
TW (1) | TWI767139B (ru) |
WO (1) | WO2020042941A1 (ru) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20200289663A1 (en) * | 2018-08-29 | 2020-09-17 | Remegen, Ltd | Use of anti-her2 antibody-drug conjugate in treating urothelial carcinoma |
IL308486A (en) * | 2021-05-21 | 2024-01-01 | Remegen Co Ltd | Use of an antibody-drug conjugate in combination with an immune checkpoint inhibitor in the treatment of urothelial cancer |
CN117750980A (zh) * | 2021-05-24 | 2024-03-22 | 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司 | Her2靶向抗体-药物偶联物用于治疗her2低表达乳腺癌的用途 |
CN115925954A (zh) * | 2022-12-28 | 2023-04-07 | 广州誉衡生物科技有限公司 | 抗-pd-1抗体及其在制备治疗尿路上皮癌患者的药物中的用途 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20170209594A1 (en) * | 2015-06-25 | 2017-07-27 | Immunomedics, Inc. | Synergistic effect of anti-trop-2 antibody-drug conjugate in combination therapy for triple-negative breast cancer when used with microtubule inhibitors or parp inhibitors |
RU2683780C2 (ru) * | 2014-01-31 | 2019-04-02 | Дайити Санкио Компани, Лимитед | Анти-her2 конъюгат антитела с лекарственным средством |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MX371526B (es) * | 2011-05-27 | 2020-01-31 | Ambrx Inc | Composiciones que contienen, metodos que incluyen, y usos de derivados de dolastatina enlazados a aminoacidos no naturales. |
CN103319599B (zh) * | 2013-05-27 | 2015-02-18 | 上海交联药物研发有限公司 | 一种抗人ErbB2抗体—美登木素偶联物及其应用 |
JP6326137B2 (ja) * | 2013-11-19 | 2018-05-16 | 烟台▲榮▼昌生物工程有限公司Remegen, Ltd. | 抗her2抗体及びその結合体 |
JP6517240B2 (ja) * | 2014-05-22 | 2019-05-22 | シントン・バイオファーマシューティカルズ・ビー.ブイ.Synthon Biopharmaceuticals B.V. | 抗体へのリンカー薬物の部位特異的コンジュゲーションおよび得られるadc |
TW201625304A (zh) | 2014-10-24 | 2016-07-16 | 美國禮來大藥廠 | 泌尿上皮癌之療法 |
CN107532217A (zh) * | 2015-05-29 | 2018-01-02 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 用于癌症的治疗和诊断方法 |
CN107029244B (zh) * | 2016-02-04 | 2021-04-27 | 浙江昭华生物医药有限公司 | 抗her2抗体-药物偶联物及其应用 |
AU2017367647A1 (en) * | 2016-11-30 | 2019-06-20 | Atyr Pharma, Inc. | Anti-HRS antibodies and combination therapies for treating cancers |
CN107789631B (zh) * | 2017-11-03 | 2021-03-16 | 合肥瀚科迈博生物技术有限公司 | 抗人ErbB2双表位抗体-药物偶联物及其应用 |
US20200289663A1 (en) * | 2018-08-29 | 2020-09-17 | Remegen, Ltd | Use of anti-her2 antibody-drug conjugate in treating urothelial carcinoma |
-
2019
- 2019-08-19 US US16/652,413 patent/US20200289663A1/en active Pending
- 2019-08-19 EP EP19855043.6A patent/EP3845252A4/en active Pending
- 2019-08-19 KR KR1020207029858A patent/KR102520974B1/ko active IP Right Grant
- 2019-08-19 KR KR1020237012001A patent/KR20230051318A/ko not_active Application Discontinuation
- 2019-08-19 KR KR1020247006234A patent/KR20240033092A/ko not_active Application Discontinuation
- 2019-08-19 RU RU2020117761A patent/RU2750817C1/ru active
- 2019-08-19 CA CA3077260A patent/CA3077260C/en active Active
- 2019-08-19 WO PCT/CN2019/101283 patent/WO2020042941A1/zh unknown
- 2019-08-19 CN CN201980002467.0A patent/CN111655295B/zh active Active
- 2019-08-19 AU AU2019330680A patent/AU2019330680A1/en not_active Abandoned
- 2019-08-19 SG SG11202009130XA patent/SG11202009130XA/en unknown
- 2019-08-19 BR BR112020010856A patent/BR112020010856A8/pt unknown
- 2019-08-19 JP JP2020529589A patent/JP7105304B2/ja active Active
- 2019-08-28 TW TW108130782A patent/TWI767139B/zh active
-
2022
- 2022-07-11 JP JP2022111260A patent/JP7470154B2/ja active Active
- 2022-10-11 AU AU2022252734A patent/AU2022252734A1/en active Pending
-
2024
- 2024-04-05 JP JP2024061325A patent/JP2024086799A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2683780C2 (ru) * | 2014-01-31 | 2019-04-02 | Дайити Санкио Компани, Лимитед | Анти-her2 конъюгат антитела с лекарственным средством |
US20170209594A1 (en) * | 2015-06-25 | 2017-07-27 | Immunomedics, Inc. | Synergistic effect of anti-trop-2 antibody-drug conjugate in combination therapy for triple-negative breast cancer when used with microtubule inhibitors or parp inhibitors |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
PANAGIOTIS J.V. et al., Antibody-Drug Conjugates in Bladder Cancer, Bladder Cancer, 2018, Vol.4, N3, pp. 247-259. * |
НЕПОМНЯЩИХ Т.С. и др., Краткий обзор клинических испытаний средств иммунотерапии онкологических заболеваний, Медицинская иммунология, 2017, т.19, н.2, стр.127-144. * |
ЩЕРБАКОВ А.И. и др., Аффинные свойства анти-her2 антител, полученных из растительного источника, Российский биотерапевтический журнал, 2018, т.17, н.1, стр.95-100. * |
ЩЕРБАКОВ А.И. и др., Аффинные свойства анти-her2 антител, полученных из растительного источника, Российский биотерапевтический журнал, 2018, т.17, н.1, стр.95-100. НЕПОМНЯЩИХ Т.С. и др., Краткий обзор клинических испытаний средств иммунотерапии онкологических заболеваний, Медицинская иммунология, 2017, т.19, н.2, стр.127-144. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA3077260C (en) | 2023-03-07 |
JP7105304B2 (ja) | 2022-07-22 |
TWI767139B (zh) | 2022-06-11 |
TW202310877A (zh) | 2023-03-16 |
CN111655295A (zh) | 2020-09-11 |
TW202023626A (zh) | 2020-07-01 |
SG11202009130XA (en) | 2020-10-29 |
EP3845252A1 (en) | 2021-07-07 |
JP2024086799A (ja) | 2024-06-28 |
AU2022252734A1 (en) | 2022-11-03 |
JP7470154B2 (ja) | 2024-04-17 |
CN111655295B (zh) | 2024-05-28 |
CA3077260A1 (en) | 2020-03-05 |
KR20230051318A (ko) | 2023-04-17 |
KR20240033092A (ko) | 2024-03-12 |
EP3845252A4 (en) | 2022-06-15 |
JP2021504427A (ja) | 2021-02-15 |
US20200289663A1 (en) | 2020-09-17 |
WO2020042941A1 (zh) | 2020-03-05 |
AU2019330680A1 (en) | 2020-04-23 |
JP2022130744A (ja) | 2022-09-06 |
KR20200134268A (ko) | 2020-12-01 |
BR112020010856A8 (pt) | 2023-03-07 |
KR102520974B1 (ko) | 2023-04-17 |
BR112020010856A2 (pt) | 2021-03-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2750817C1 (ru) | Применение конъюгата анти-her2 антитело-лекарственное средство при лечении уротелиальной карциномы | |
JP6728264B2 (ja) | 抗her2抗体及びその結合体 | |
AU2021213421A1 (en) | Treatment of cancer | |
CN114269389B (zh) | 靶向紧密连接蛋白18.2的抗体药物偶联物 | |
TWI843105B (zh) | 抗her2 抗體藥物偶聯物在治療尿路上皮癌中的用途 | |
TW202404646A (zh) | 抗cdh6抗體-藥物結合物之給藥方案 |