RU2750730C1 - Способ выделения суммы таннинов, используемой для получения субстанции противоопухолевого препарата "Ханерол" из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.)Scop.) - Google Patents

Способ выделения суммы таннинов, используемой для получения субстанции противоопухолевого препарата "Ханерол" из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.)Scop.) Download PDF

Info

Publication number
RU2750730C1
RU2750730C1 RU2020121236A RU2020121236A RU2750730C1 RU 2750730 C1 RU2750730 C1 RU 2750730C1 RU 2020121236 A RU2020121236 A RU 2020121236A RU 2020121236 A RU2020121236 A RU 2020121236A RU 2750730 C1 RU2750730 C1 RU 2750730C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
solution
narrow
substance
hanerol
isolating
Prior art date
Application number
RU2020121236A
Other languages
English (en)
Inventor
Дмитрий Васильевич Гусев
Сергей Алексеевич Сасов
Вадим Никифорович Толкачев
Нина Николаевна Тотоева
Тамилаханум Алиэкрам кызы Алиева
Олег Никифорович Толкачев
Елена Николаевна Бедрина
Вера Владимировна Решетникова
Ружена Борисовна Пугачева
Валерий Юрьевич Масляков
Николай Борисович Фадеев
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России)
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений" (ФГБНУ ВИЛАР)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России), Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений" (ФГБНУ ВИЛАР) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России)
Priority to RU2020121236A priority Critical patent/RU2750730C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2750730C1 publication Critical patent/RU2750730C1/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/02—Solvent extraction of solids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения суммы таннинов для получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол». Способ выделения суммы таннинов для получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» на основе димерного макроциклического гидролизуемого таннина из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.) Scop) включает: экстракцию 500 г соцветий или побегов кипрея узколистного (иван-чая) 5 л 25% водного раствора диметилформамида, фильтрацию, концентрирование полученного раствора до 1200-1300 мл, осаждение цинковых солей танниновой фракции в две стадии: путем прибавления 40 мл 20% раствора ацетата цинка при температуре 45°С, выпавший осадок центрифугируют и отделяют, к раствору снова при 45°С прибавляют для соцветий 140 мл, а для побегов 150 мл 20%-ного раствора ацетата цинка при перемешивании, охлаждают до комнатной температуры, выпавший осадок центрифугируют, промывают водой, спиртом, водой, разлагают катионитом КУ-2-8-(Н+), обессоливают раствор на колонке с катионитом КУ-2-8-(Н+), упаривают и высушивают лиофильно. Вышеописанный способ обеспечивает получение 4-5% продукта от веса исходного сырья. 2 ил., 2 пр.

Description

Изобретение относится к области химико-фармацевтической промышленности, в частности, к способу выделения из кипрея узколистного (иван-чая) суммы таннинов, входящей в состав субстанции препарата «Ханерол», обладающего противоопухолевой активностью.
Кипрей узколистный (иван-чай) (Chamaenerion angustifolium (L.) Scop.) (Epilobium angustifolium (L)) семейства кипрейных (Onagraceae) - растение, произрастающее на территории России, широко используется в традиционной медицине как лекарственное растение. Действующими веществами разработанного противоопухолевого препарата «Ханерол» являются макроциклические гидролизуемые таннины, структура которых доказана химическими и спектральными методами. Основным действующим компонентом препарата является димерный макроциклический таннин хаменерин-I состава C68H48O44⋅nH2O (до 60% от общего содержания биологически активных веществ препарата) (Сасов С.А. «Выделение противоопухолевого препарата ханерол из кипрея узколистного и данные о его структуре», автореферат диссертации, канд. хим. наук, Москва, 1986, 22 стр.; Спиридонов Н.А. и др. «Цитотоксичность таннинов Chamaenerium angustifolium (L.) Scop. и Hippophae rhamnoides L. и их влияние на дыхание митохондрий», Экспериментальная и клиническая фармакология, 1997, Т. 60, №4, С. 60-63; Сасов С.А. и др. «Макроциклические таннины кипрея узколистного», Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, 2010, №10, С. 24-29; Петрова М.Ф. и др. «Оригинальный противоопухолевый препарат - ханерол», Материалы Всесоюзного совещания «Актуальные проблемы экспериментальной химиотерапии опухолей», Черноголовка 1980, Том 1, С. 210-212).
Структура действующего начала «Ханерола» - хаменерина-1 идентифицирована с энотеином В, полученным из энотеры (Т. Hatano et al. «Oenothein В, a dimeric hydrolysable tannin of cyclic structure», Chem. Pharm. Bull., 1989, V. 37, №8, P. 2269-2271; Igor A. Schepetkin et al. «Therapeutic Potential of Polyphenols from Epilobium angustifolium (Fireweed), Phytother. Res. 2016 Aug; V 30, №8. P. 1287-1297).
Известен способ получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» из суммы таннинов (Т.А. Алиева и др. «Способ получения фитогемагглютинина, обладающего противоопухолевой активностью», А.с. СССР №396040, 01.10.1971), включающий стадии экстракции цветков кипрея узколистного 25% раствором диметилформамида, осаждение таннинов основным ацетатом, свинца, разложение свинцового комплекса сероводородом, последующий диализ и обессоливание на катионите КУ-2-8 (Н+)
Позже разработан способ получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол», включающий стадии экстракции цветков кипрея узколистного (иван-чая) 25% раствором диметилформамида, осаждение свинцового комплекса таннинов средним ацетатом свинца, промывание свинцового комплекса последовательно водой, спиртом и опять водой. Далее проводят частичное разложение свинцового комплекса катионитом КУ-2-8 (Н+) и окончательное обессоливание на колонке с катионитом КУ-2-8 (Н+), упаривание и лиофильную сушку, получение готового продукта. (Сасов С.А. «Выделение противоопухолевого препарата «Ханерол» из кипрея узколистного и данные о его структуре». Автореферат диссертации, канд. хим. наук, Москва, 1986, 22 стр.; Петрова М.Ф. и др. «Выделение активного начала Chamaenerion angustifolium», Химиотерапия опухолей в СССР. Выпуск 27, Москва, 1979, С. 9-11). Сасов С.А. и др. «Гидролизуемые гало-эллаго-танины кипрея узколистного Chamaenerion angustifolium (L.)) из биоколлекции питомника ботанического сада ФГБНУ ВИЛАР - перспективный источник для получения цитотоксических средств». Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, т. 22, 2019, №1) Последний способ был выбран нами в качестве прототипа.
К недостаткам прототипа относится использование в процессе выделения токсичного среднего ацетата свинца.
Нами предлагается новый способ выделения суммы таннинов для субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» из соцветий или побегов кипрея узколистного (Chamaenerion angustifolium (L.) Scop.), свободный от недостатков прототипа, в котором исключено использование токсичных солей свинца.
Задача решается тем, что при выделении суммы таннинов субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» для осаждения целевой фракции ацетат свинца заменен на ацетат цинка.
Технический результат
Разработан новый, простой в исполнении и экологически чистый способ выделения субстанции препарата «Ханерол» на основе димерного макроциклического гидролизуемого таннина из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.) Scop) семейства кипрейных (Onagraceae), обладающего противоопухолевой активностью.
Заявляемый способ включает следующие стадии:
1. Экстракцию соцветий или побегов кипрея узколистного водным раствором диметилформамида.
2. Фильтрацию и концентрирование полученного раствора.
3. Двухстадийное осаждение цинковых солей танниновой фракции.
4. Отделение осадка и промывка водой, спиртом и водой.
5. Обработка предпочтительно катионитом КУ 2-8 (H+).
6. Концентрирование в вакууме, лиофильная сушка и получение готового продукта.
Способ осуществляется следующим образом:
Высушенное растительное сырье экстрагируют водным 25% диметилформамидом в течение 24 час, фильтруют, а затем концентрируют в вакууме. К полученному концентрату при температуре 45°С и перемешивании прибавляют 20%-ный раствор ацетата цинка. Выпавший осадок центрифугируют и отделяют.
К раствору снова при 45°С прибавляют 20%-ный раствор ацетата цинка при перемешивании, охлаждают до комнатной температуры, выпавший осадок центрифугируют, тщательно перемешивают с дистиллированной водой и снова центрифугируют.
Осадок повторно промывают 2 раза дистиллированной водой, далее его дважды обрабатывают этанолом ректификатом, центрифугируют, вновь промывают водой и центрифугируют.
Цинковую соль суспендируют с дистиллированной водой, к смеси прибавляют катионит КУ-2-8 в Н+ форме и интенсивно перемешивают в течение 20-30 мин. Далее осадок отделяют на центрифуге, промывают и вновь центрифугируют.
Объединенные растворы и промывные воды пропускают через колонку с катионитом КУ-2-8 в Н+ форме. Водный элюат концентрируют в вакууме, а затем его лиофилизируют. Выход препарата 4-5% от веса растительного сырья, [α]D+221 - 228°.
Пример осуществления способа выделения суммы таннинов для получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» на основе димерного гидролизуемого таннина из соцветий кипрея узколистного (иван-чая):
Пример 1. Экстракцию 500 г соцветий кипрея узколистного проводят в течение 24 часов 5 литрами 25% водного раствора диметилформамида. Экстракт отделяют и концентрируют в ваккууме до объема 1200-1300 мл. Осаждение цинковой соли танниновой фракции проводят в две стадии путем прибавления 20% раствора ацетата цинка, сначала 40 мл, потом еще 140 мл и отделяют центрифугированием. Осадок центрифугируют, промывают водой, спиртом и еще раз водой. Осадок суспендируют в 1 литре воды, добавляют 80 мл катионита КУ-2-8 (Н+) и перемешивают 20-30 минут. Раствор отделяют от осадка центрифугированием. Остатки солей отделяют пропусканием через колонку с катионитом КУ-2-8 (H+) в количестве 125-150 мл. Водный раствор концентрируют в вакууме до 100-150 мл и высушивают в лиофильной сушке. Выход субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» 20-25 г (4-5% от веса исходного сырья, [α]D+221 - 228° (вода).
Способ выделения противоопухолевого препарата из побегов кипрея узколистного осуществляют вышеописанным способом. Осаждение цинковых солей проводят в две стадии: вначале 40 мл, затем 150 мл. Выход препарата 4-5% от веса растительного сырья, [α]D+225°.
Пример 2. Экстракцию 500 г побегов кипрея узколистного проводят в течение 24 часов 5 литрами 25% водного раствора диметилформамида. Экстракт отделяют и концентрируют в ваккууме до объема 1200-1300 мл. Осаждение цинковых солей танниновой фракции проводят в две стадии путем прибавления 20% раствора ацетата цинка сначала 40 мл потом еще 150 мл. Осадок центрифугируют, промывают водой, спиртом и еще раз водой. Осадок суспендируют в 1 литре воды добавляют 80 мл катионита КУ-2-8 (Н+) и перемешивают 20-30 минут, осадок отделяют центрифугированием. Остатки солей отделяют пропусканием через колонку с катионитом КУ-2-8 (Н+) в количестве 125-150 мл. Водный раствор концентрируют в ваккууме до 100-150 мл и высушивают в лиофильной сушке. Выход субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» также 20-25 г (4-5% от веса исходного сырья, [α]D+225° (вода).
Контроль процессов разделения и подлинности соединений осуществляют методами препаративной и аналитической хроматографии на бумаге, на полиакриламидном геле (фракционирование по молекулярной массе) и использования специфических хромогенных реакций на полифенольные соединения, а также данными перманганатометрического титрования, удельного показателя поглощения и величины углов оптического вращения ([α]D+225°) в сравнении с заведомыми образцами суммы таннинов для получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол», полученными по прототипу.
Изобретение иллюстрируется фигурами 1 и 2.
На фиг. 1 - данные ВЭЖХ суммы таннинов для получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол», полученного из иван-чая узколистого (Chamaenerium angustifolium (L.) Scop) по предлагаемому способу с использованием солей цинка.
На фиг. 2 - данные ВЭЖХ суммы таннинов для получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол», полученной известным способом из иван-чая узколистого (Chamaenerion angustifolium (L.) Scop) с использованием солей свинца.
По данным ВЭЖХ исследования образцов, полученных по заявляемому способу и заведомых образцов субстанции «Ханерола», полученных ранее, образцы идентичны по своему составу. ВЭЖХ (фиг. 1 и 2) проводили на спектрографе Agilent Quaternary LC (US) с автомультисемплером, на колонке Eclipse plus 4,5×250 мм С18, зернением 5 мкм, детектирование при длине волны 265±2 нм с использованием фотодиодного детектора G7121B. Образец растворяли в элюенте, концентрация вводимого раствора 1 мг/мл, объем вводимого раствора 5 мкл. Для работы использовали ацетонитрил UN1648 квалификации ChromAR HPLC (Польша), деионизированную воду, очищенную в системе Milipore 0,2 mkm. Хроматографирование проводили в изократическом режиме при термостатировании 40°С, скорости элюирования 2,00 мл/мин в течение 20 мин. Элюент А:В=1:9, где А - 0,04 об. % муравьиновая кислота в ацетонитриле, В - вода.

Claims (1)

  1. Способ выделения суммы таннинов для получения субстанции противоопухолевого препарата «Ханерол» на основе димерного макроциклического гидролизуемого таннина из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.) Scop), включающий: экстракцию 500 г соцветий или побегов кипрея узколистного (иван-чая) 5 л 25% водного раствора диметилформамида, фильтрацию, концентрирование полученного раствора до 1200-1300 мл, осаждение цинковых солей танниновой фракции в две стадии: путем прибавления 40 мл 20% раствора ацетата цинка при температуре 45°С, выпавший осадок центрифугируют и отделяют, к раствору снова при 45°С прибавляют для соцветий 140 мл, а для побегов 150 мл 20%-ного раствора ацетата цинка при перемешивании, охлаждают до комнатной температуры, выпавший осадок центрифугируют, промывают водой, спиртом, водой, разлагают катионитом КУ-2-8-(Н+), обессоливают раствор на колонке с катионитом КУ-2-8-(Н+), упаривают и высушивают лиофильно.
RU2020121236A 2020-06-22 2020-06-22 Способ выделения суммы таннинов, используемой для получения субстанции противоопухолевого препарата "Ханерол" из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.)Scop.) RU2750730C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020121236A RU2750730C1 (ru) 2020-06-22 2020-06-22 Способ выделения суммы таннинов, используемой для получения субстанции противоопухолевого препарата "Ханерол" из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.)Scop.)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020121236A RU2750730C1 (ru) 2020-06-22 2020-06-22 Способ выделения суммы таннинов, используемой для получения субстанции противоопухолевого препарата "Ханерол" из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.)Scop.)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2750730C1 true RU2750730C1 (ru) 2021-07-01

Family

ID=76820132

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020121236A RU2750730C1 (ru) 2020-06-22 2020-06-22 Способ выделения суммы таннинов, используемой для получения субстанции противоопухолевого препарата "Ханерол" из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.)Scop.)

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2750730C1 (ru)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU396040A1 (ru) * 1971-10-01 1974-02-25 Способ получения фитогемагглютннина, обладающего противоопухолевой активностью
CN107174552A (zh) * 2017-06-27 2017-09-19 广东芭薇生物科技股份有限公司 柳兰花提取物及其制备方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SU396040A1 (ru) * 1971-10-01 1974-02-25 Способ получения фитогемагглютннина, обладающего противоопухолевой активностью
CN107174552A (zh) * 2017-06-27 2017-09-19 广东芭薇生物科技股份有限公司 柳兰花提取物及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Н. В. ПОЛУКОНОВА и др. Исследование активности флавоноидсодержащего экстракта Кипрея узколистного (Chameron angustifolium) в экспериментах in vitro и in vivo // Бюл. Бот. сада Сарат. гос. ун-та. 2017. Т. 15, вып. 4. стр. 3-15. *
С.А.САСОВ и др. Гидролизуемые гало-эллаго-танины кипрея узколистного Chamaenerion angustifolium (L.)) из биоколлекции питомника ботанического сада ФГБНУ ВИЛАР - перспективный источник для получения цитотоксических средств. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии, т. 22, 2019, N1, стр.28-33. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Cheng et al. Pharmacokinetic comparisons of typical constituents in white peony root and sulfur fumigated white peony root after oral administration to mice
JPH0399090A (ja) 植物またはその抽出物からアントシアノシド類を高純度で含有する抽出物の調製方法
JPH0739390B2 (ja) ３−〔ｎ−フェニルアセチルアミノピペリジン〕−２，６−ジオン化合物の合成法
RU2750730C1 (ru) Способ выделения суммы таннинов, используемой для получения субстанции противоопухолевого препарата "Ханерол" из кипрея узколистного (иван-чая) (Chamaenerion angustifolium (L.)Scop.)
CN102344475A (zh) 一种灯盏花乙素衍生物及其制备方法和应用
ITMI941112A1 (it) Alcaloidi da mappia foetida, loro uso e formulazioni che li contengono
RU2308284C1 (ru) Способ получения иммуностимулирующего средства из лабазника вязолистного filipendula ulmaria (l) maxim
FI98889C (fi) Menetelmä kasviuuteperäisen antineoplastisen lääkkeen valmistamiseksi
Petrichenko et al. Chemical composition and antioxidant properties of biologically active compounds from Euphrasia brevipila
DE19600301C2 (de) Durch Cyclooligomerisierung des einfachen Kohlensuboxids C¶3¶O¶2¶ aufgebaute makrocyclische Verbindungen, Verfahren zu deren Herstellung und Gewinnung sowie deren Verwendung
RU2519666C1 (ru) Средство, обладающее противоописторхозным действием и способ его получения
FI101042B (fi) Menetelmä kasviperäisten, antineoplastisten, kemoterapeuttisten aineid en valmistamiseksi
WO2019193614A2 (en) The process of achieving the highest degree of drug's purity of c-phycocyanin from spirulina alga
US3267090A (en) Viscumic acid and salts thereof
Matmuratov et al. Supramolecular complexes of kinetin and adenin with glycyrrhizin acid and its monoammonium salt
Upyr et al. The study of the chemical composition and the pharmacological activity of the polysaccharide complex obtained from Ledum palustre
Dumitrescu et al. Spectrophotometric Studies of Indolic Compounds from Vinca Minor L.
RU2697197C1 (ru) Способ получения водорастворимой солевой формы эхинохрома А, пригодной для использования в фармакологической и пищевой промышленности
CN115227723B (zh) 一种海蟑螂低聚物的制备方法及其应用
RU2691997C1 (ru) Способ получения вещества, обладающего противогрибковой активностью
Vasile Isolation of benzophenanthridine alkaloids from Macleaya leaves without using toxic solvents
RU2792378C1 (ru) Способ получения средства с диуретической активностью
RU2098111C1 (ru) Способ получения противовирусного препарата "гипорамин"
CN109836473A (zh) 一种牛膝中提取和分离的牛膝多肽单体及其制备和应用
EP1343826B1 (en) Polysaccharide compound having immune stimulating activity