RU2720470C1 - Method of producing transplant for treating limbal insufficiency - Google Patents

Method of producing transplant for treating limbal insufficiency Download PDF

Info

Publication number
RU2720470C1
RU2720470C1 RU2018141071A RU2018141071A RU2720470C1 RU 2720470 C1 RU2720470 C1 RU 2720470C1 RU 2018141071 A RU2018141071 A RU 2018141071A RU 2018141071 A RU2018141071 A RU 2018141071A RU 2720470 C1 RU2720470 C1 RU 2720470C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
hours
soaked
fragments
solution
graft
Prior art date
Application number
RU2018141071A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Александр Владимирович Киселев
Сергей Николаевич Сахнов
Александр Григорьевич Заболотний
Татьяна Алексеевна Астрелина
Original Assignee
Федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАУ "НМИЦ "МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н.
Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Кубанский Государственный Медицинский Университет" Министерства здравоохранения России (ФГБОУ ВО КубГМУ, Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАУ "НМИЦ "МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н., Федеральное Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Образования "Кубанский Государственный Медицинский Университет" Министерства здравоохранения России (ФГБОУ ВО КубГМУ, Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАУ "НМИЦ "МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н.
Priority to RU2018141071A priority Critical patent/RU2720470C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2720470C1 publication Critical patent/RU2720470C1/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/28—Materials for coating prostheses
    • A61L27/34—Macromolecular materials
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0062—General methods for three-dimensional culture

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.SUBSTANCE: invention refers to biotechnology, namely to obtaining a transplant for treating limbal insufficiency. Method involves mechanical cleaning of allogenic sclera, its soaking in 6 % hydrogen peroxide solution and maintenance for 4 hours (destruction of tissue pigments, lipid structures and disinfection), then washed with sterile distilled water and frozen at a temperature of -20 °C for 2 hours (which enables to destroy cell membranes). Then defrostation is soaked in water solution of ammonium hydroxide 10 % for 2 hours at temperature of 40 °C (which promotes washing out of lipids, but does not cause collagen denaturation). Then one performs washing with sterile physiological solution, soaking in 6 % hydrogen peroxide solution and holding for 6 hours. Then one performs washing with sterile normal saline, dividing into fragments 2 mm wide and 4 mm long and soaked in physiologic saline for 20 minutes. Fragments are placed in culture plates with 10 ml of culture medium DMEM/F12 with addition of 15 % of embryonal serum and added with 1 ml of concentrated cell suspension MMSC and progenitor cells of epithelium of cornea (0.5–0.6 × 10cells/ml) and incubated for 5 days.EFFECT: disclosed is a method for producing a transplant for treating limbal insufficiency.1 cl, 1 tbl, 2 ex

Description

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, а также к биотехнологии, и предназначено для хирургического лечения частичной или тотальной лимбальной недостаточности в качестве трансплантата, создающего биологический барьер, препятствующий нарастанию конъюнктивы на роговицу, а также как источника мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) и прогениторных клеток эпителия роговицы, обладающих барьерной, противовоспалительной, иммуномодулирующей и регенеративной активностью.The present invention relates to medicine, namely to ophthalmology, as well as to biotechnology, and is intended for the surgical treatment of partial or total limbal insufficiency as a transplant that creates a biological barrier that prevents the growth of the conjunctiva on the cornea, as well as a source of multipotent mesenchymal stromal cells (MMSC ) and progenitor cells of the corneal epithelium with barrier, anti-inflammatory, immunomodulatory and regenerative activity.

Известен способ получения гомосклерального трансплантата для использования в офтальмологии «Способ получения гомосклерального трансплантата» (Патент РФ на изобретение №2627453 от 07.06.2016 г. дата гос. per. 08.09.2017 г.). Способ включает механическую очистку донорской склеры, двукратную последовательную обработку перекисью водорода, гидроксидом аммония, вымачивание, заморозку, нагревание, фрагментирование и хранение в этиловом спирте до использования.A known method for producing a homoscleral graft for use in ophthalmology is “A method for producing a homoscleral graft” (RF Patent for the invention No. 2627453 dated June 7, 2016, state date. September 8, 2017). The method includes mechanical cleaning of the donor sclera, double sequential treatment with hydrogen peroxide, ammonium hydroxide, soaking, freezing, heating, fragmenting and storing in ethanol until use.

Недостатком данного трансплантата является то, что он не применим для лечения лимбальной недостаточности, ввиду отсутствия в нем клеток, что требует его заселения лимбальными стволовыми клетками.The disadvantage of this transplant is that it is not applicable for the treatment of limbal insufficiency, due to the lack of cells in it, which requires its colonization by limbal stem cells.

Известен способ лечения лимбальной недостаточности с использованием стволовых клеток путем аутотрансплантации участка лимба (зоны физиологического залегания стволовых клеток роговичного эпителия) различного размера взятого из здорового глаза методом ламеллярной кератэктомии. Данный способ описан рядом авторов (Шишкин М.М., Цыганова Т.А. Лимбальная трансплантация как профилактика рецидивов птеригиума // Вестник ОГУ. 2004. №S. С. 132) и применяется достаточно широко. Способ обеспечивает восстановление функционально-анатомической целостности пораженного лимба.A known method of treating limbal insufficiency using stem cells by autotransplantation of a limb site (zone of physiological occurrence of stem cells of the corneal epithelium) of various sizes taken from a healthy eye by lamellar keratectomy. This method is described by a number of authors (Shishkin M.M., Tsyganova T.A. Limbal transplantation as a prophylaxis of relapses of pterygium // Vestnik OGU. 2004. No. S. P. 132) and is widely used. The method provides restoration of the functional and anatomical integrity of the affected limb.

Недостатками данного способа являются высокая вероятность развития секторальной лимбальной недостаточности, а также воспалительных и дистрофических процессов на здоровом глазу из которого был изъят участок лимба, причем вероятность таких осложнений значительно возрастает с увеличением размеров изъятого участка. Так при тотальной лимбальной недостаточности данный метод не применим.The disadvantages of this method are the high likelihood of developing sectoral limbal insufficiency, as well as inflammatory and dystrophic processes in a healthy eye from which a portion of the limb was removed, and the likelihood of such complications increases significantly with increasing size of the removed portion. So with total limbal insufficiency, this method is not applicable.

Задачи: создание комбинированного трансплантата, содержащего стволовые клетки эпителия роговицы и мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК), культивированные на склере, обладающего высокой биосовместимостью, иммуномодулирующей, регенеративной и противовоспалительной активностью, а также, уменьшение риска развития рецидива и воспалительных и дистрофических осложнений.Tasks: creating a combined graft containing stem cells of the corneal epithelium and multipotent mesenchymal stromal cells (MMSCs) cultured on the sclera with high biocompatibility, immunomodulating, regenerative and anti-inflammatory activity, as well as reducing the risk of relapse and inflammatory and dystrophic complications.

Техническим результатом, достигаемым при использовании изобретения, является анатомическое и функциональное восстановление лимбальной зоны у пациентов с ее поражением, а также создание комбинированного трансплантата, содержащего стволовые клетки эпителия роговицы и ММСК, культивированные на децеллюляризированной склере, обладающего высокой биосовместимостью, максимально очищенного от антигенов, который может быть использован для трансплантации как с целью восстановления дефекта лимбальной зоны, так и с иммуномодулирующей и репаративной целью. Это возможно благодаря использованию гомосклерального трансплантанта в качестве матрицы для культивирования прогениторных клеток эпителия роговицы и ММСК, получаемой по описанному нами ранее в патенте способу: «Способ получения гомосклерального трансплантата» (Патент РФ на изобретение №2627453 от 07.06.2016 г. дата гос. рег. 08.09.2017 г.).The technical result achieved by using the invention is the anatomical and functional restoration of the limbal zone in patients with its lesion, as well as the creation of a combined graft containing stem cells of the corneal epithelium and MMSC, cultured on a decellularized sclera, which has high biocompatibility, which is maximally purified from antigens, which can be used for transplantation both with the aim of restoring the limb zone defect, as well as with immunomodulating and repar ative goal. This is possible due to the use of a homoscleral graft as a matrix for the cultivation of progenitor cells of the corneal epithelium and MMSC obtained by the method described earlier in the patent: “Method for producing a homoscleral graft” (RF Patent for the invention No. 2627453 dated June 7, 2016, state registration date September 8, 2017).

Сущностью изобретения является то, что в качестве матрицы для культивирования прогениторных клеток эпителия роговицы и ММСК используют гомосклеральный трансплантат, полученный известным методом, который разделяют на фрагменты шириной 2 мм и длиной 4 мм и вымачивают в физиологическом растворе в течение 20 минут, затем фрагменты помещают в планшеты с 10 мл питательной среды DMEM/F12 с добавлением 15% эмбриональной сыворотки и добавляют 1 мл концентрированной клеточной суспензии ММСК и прогениторных клеток эпителия роговицы (0,5-0,6×106 клеток/мл), полученную путем обработки культуральных планшетов трипсином + ЭДТА после предварительной 21-25 дневной инкубации донорских фрагментов лимба в питательной среде, после чего производят культивацию в СО2 инкубаторе при 37°С 5 суток. На 5 сутки фрагменты гомосклерального трансплантата с культивированными в них ММСК и прогениторными клетками эпителия роговицы используют для трансплантации пациентам с частичной или полной лимбальной недостаточностью, а так же в качестве источника ММСК.The essence of the invention is that as a matrix for the cultivation of progenitor cells of the corneal epithelium and MMSC, a homoscleral graft obtained by the known method is used, which is divided into fragments 2 mm wide and 4 mm long and soaked in physiological saline for 20 minutes, then the fragments are placed in tablets with 10 ml of DMEM / F12 nutrient medium with the addition of 15% fetal serum and add 1 ml of concentrated cell suspension of MMSC and progenitor cells of the corneal epithelium (0.5-0.6 × 10 6 cells / ml), irradiated by processing the culture plates with trypsin + EDTA after a preliminary 21-25 day incubation of donor limb fragments in a nutrient medium, followed by cultivation in a CO 2 incubator at 37 ° C for 5 days. On day 5, fragments of a homoscleral graft with MMSC and progenitor cells of the corneal epithelium cultured in them are used for transplantation to patients with partial or complete limbal insufficiency, as well as a source of MMSC.

Апробация проведена на 23 глазах с диагнозом рецидивирующий птеригиум (секторальная лимбальная недостаточность) и на 18 глазах с диагнозом постожоговое бельмо роговицы (тотальная лимбальная недостаточность) в сочетании со сквозной кератопластикой (пересадкой роговицы). Результаты представлены в таблице.Testing was carried out in 23 eyes with a diagnosis of recurrent pterygium (sectoral limbal insufficiency) and in 18 eyes with a diagnosis of post-burn cervical cornea (total limbal insufficiency) in combination with through keratoplasty (corneal transplantation). The results are presented in the table.

Figure 00000001
Figure 00000001

Способ осуществляют следующим образом. Гомосклеральный трансплантат получают по способу, описанному Киселевым А.В. и соавт. (Патент РФ на изобретение №2627453 от 07.06.2016 г. дата гос. рег. 08.09.2017 г.), разделяют на фрагменты необходимого размера и вымачивается в стерильном физиологическом растворе в течение 20 минут для удаления этилового спирта, который используют в качестве консерванта для его хранения. Затем фрагменты гомосклерального трансплантата помещают в планшеты с 10 мл. питательной среды, обогащенной 15% эмбриональной сыворотки. В питательную среду вводят эмульгированные ММСК и прогениторные клетки эпителия роговицы, получаемые путем обработки донорского материала, консервированного по способу, описанному С. А. Борзеноком, Б.Э. Малюгиным, Х.Д. Тонаевой и соавт. в патенте РФ №2475218 от 20.02.2013 г., трипсином + ЭДТА, что позволяет снять адгезированные к пластику культивированные клетки и перевести их в эмульгированное состояние. Полученную эмульсию клеток концентрируют путем щадящего центрифугирования и добавляют в питательную среду к фрагментам гомосклерального трансплантата, после чего производят культивацию в СО2 инкубаторе при 37°С 5 суток. На 5 сутки фрагменты гомосклерального трансплантата с культивированными в них ММСК и прогениторными клетками используют с целью трансплантации пациентам с частичной или полной лимбальной недостаточностью, а так же в качестве источника ММСК, обладающего местной иммуномодулирующей, противовоспалительной и репаративной активностью, путем его трансплантации в зоны повреждения тканей.The method is as follows. A homoscleral graft is obtained according to the method described by A. Kiselev. et al. (RF patent for the invention No. 2627453 dated June 7, 2016, state registration date September 8, 2017), is divided into fragments of the required size and soaked in sterile saline for 20 minutes to remove ethyl alcohol, which is used as a preservative to store it. Fragments of a homoscleral graft are then placed on 10 ml plates. nutrient medium enriched with 15% fetal serum. Emulsified MMSCs and progenitor cells of the corneal epithelium, obtained by processing donor material preserved by the method described by S. A. Borzenok, B.E., are introduced into the nutrient medium. Malyugin, Kh.D. Tonaeva et al. in the patent of the Russian Federation No. 2475218 dated 02.20.2013, trypsin + EDTA, which makes it possible to remove cultured cells adhered to plastic and transfer them to an emulsified state. The resulting cell emulsion is concentrated by gentle centrifugation and added to the nutrient medium to the fragments of the homoscleral graft, after which cultivation is performed in a CO 2 incubator at 37 ° C for 5 days. On day 5, fragments of a homoscleral transplant with MMSCs and progenitor cells cultured in them are used for transplantation to patients with partial or complete limbal insufficiency, as well as a source of MMSCs with local immunomodulating, anti-inflammatory and reparative activity, by transplanting them into tissue damage zones .

Пример №1. Пациентка женщина 42 года трехкратно оперировали по поводу рецидивирущего птеригиума 2 степени (заболевания развивающегося при секторальной лимбальной недостаточности). Пациентке была выполнена операция удаления рецидивирующего птеригиума путем его отсепаровки от подлежащих тканей - роговицы и склеры, и последующем иссечением. В зоне иссеченного птеригиума проводили восстановление барьерной функции лимба путем подшивания фрагмента гомосклерального трансплантата соответствующей формы, который получили путем культивации ММСК и прогениторных клеток эпителия роговицы на фрагментах гомосклерального трансплантата в условиях СО2 инкубатора при 37°С в течение 5 суток по предложенному способу. На первые сутки после операции не наблюдалось воспалительных и аллергических реакций, эрозия роговицы практически полностью покрылась роговичным эпителием. Через 2 недели после операции были сняты швы с конъюнктивы и трансплантата. В сроки наблюдения 6 месяцев реакции на трансплантат не наблюдалось, он уплостился и пророс соединительной тканью. При явке через 2 года рецидива птеригиума не наблюдается, глаз спокоен.Example No. 1. A 42-year-old female patient was operated on three times for recurrent pterygium of the 2nd degree (a disease developing with sectoral limbal insufficiency). The patient underwent an operation to remove recurrent pterygium by separating it from the underlying tissues - cornea and sclera, and subsequent excision. In the area of excised pterygium, the limb barrier function was restored by suturing a fragment of a homoscleral graft of the corresponding form, which was obtained by culturing MMSC and progenitor cells of the corneal epithelium on fragments of a homoscleral graft under conditions of a CO 2 incubator at 37 ° C for 5 days by the proposed method. On the first day after the operation, no inflammatory and allergic reactions were observed, erosion of the cornea was almost completely covered by corneal epithelium. 2 weeks after surgery, the sutures from the conjunctiva and graft were removed. During the observation period of 6 months, no response to the graft was observed; it was flattened and sprouted with connective tissue. With the appearance after 2 years, pterygium relapse is not observed, the eye is calm.

Пример №2. Пациентка, женщина 37 лет, двухкратно оперировали по поводу симблефарона нижнего века, сочетанного с птеригиумом после перенесенного ожога нижнего свода конъюнктивы и части роговицы секундным клеем. Пациентке была выполнена операция устранения симблефарона и рецидивирующего птеригиума с восстановлением лимбальной зоны в пределах ложа иссеченного птеригиума предложенным трансплантатом, соответствующей формы, приготовленного по описанному способу. На первые сутки после операции не наблюдалось воспалительных и аллергических реакций. Через 2 недели после операции были сняты швы с конъюнктивы и трансплантата. В сроки наблюдения 6 месяцев реакции на трансплантат не наблюдалось. При явке через 1,5 года рецидива птеригиума и симблефарона не наблюдается, глаз спокоен.Example No. 2. The patient, a 37-year-old woman, was twice operated on for lower eyelid simblefaron combined with pterygium after a burn of the lower conjunctival arch and part of the cornea with second glue. The patient underwent surgery to eliminate simblefaron and recurrent pterygium with restoration of the limbal zone within the bed of excised pterygium by the proposed graft of the corresponding form prepared according to the described method. On the first day after the operation, no inflammatory and allergic reactions were observed. 2 weeks after surgery, the sutures from the conjunctiva and graft were removed. During the follow-up period of 6 months, no response to the graft was observed. With the appearance after 1.5 years, relapse of pterygium and simblepharon is not observed, the eye is calm.

Claims (1)

Способ получения трансплантата для лечения лимбальной недостаточности заключается в том, что используют гомосклеральный трансплантат, который готовят из аллогенной склеры, при этом после механической очистки ее замачивают в 6% растворе перекиси водорода и выдерживают 4 часа (достигается разрушение тканевых пигментов, липидных структур и обеззараживание), затем промывают стерильной дистиллированной водой и замораживают при температуре -20°C 2 часа (что позволяет разрушить клеточные мембраны), затем после дефростации замачивают в водном растворе гидроксида аммония 10% на 2 часа при температуре 40°C (что способствует вымыванию липидов, но не вызывает денатурацию коллагена), после отмывают стерильным физиологическим раствором, замачивают в 6% растворе перекиси водорода и выдерживают 6 часов, затем промывают стерильным физиологическим раствором, затем разделяют на фрагменты шириной 2 мм и длиной 4 мм и вымачивают в физиологическом растворе в течение 20 минут, затем фрагменты помещают в культуральные планшеты с 10 мл питательной среды DMEM/F12 с добавлением 15% эмбриональной сыворотки и добавляют 1 мл концентрированной клеточной суспензии ММСК и прогениторных клеток эпителия роговицы (0,5-0,6 × 106 клеток/мл) и инкубируют в течение 5 суток.A method of obtaining a graft for the treatment of limbal insufficiency is that a homoscleral graft is used, which is prepared from allogeneic sclera, and after mechanical cleaning it is soaked in a 6% hydrogen peroxide solution and incubated for 4 hours (destruction of tissue pigments, lipid structures and disinfection is achieved) , then washed with sterile distilled water and frozen at -20 ° C for 2 hours (which allows the destruction of cell membranes), then, after defrosting, they are soaked in water in a solution of ammonium hydroxide 10% for 2 hours at a temperature of 40 ° C (which promotes leaching of lipids, but does not cause collagen denaturation), after which they are washed with sterile physiological solution, soaked in 6% hydrogen peroxide solution and incubated for 6 hours, then washed with sterile physiological solution, then divided into fragments 2 mm wide and 4 mm long and soaked in physiological saline for 20 minutes, then the fragments were placed in culture plates with 10 ml of DMEM / F12 culture medium supplemented with 15% fetal serum and add 1 ml of a concentrated cell suspension of MMSC and progenitor cells of the corneal epithelium (0.5-0.6 × 10 6 cells / ml) and incubated for 5 days.
RU2018141071A 2018-11-22 2018-11-22 Method of producing transplant for treating limbal insufficiency RU2720470C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018141071A RU2720470C1 (en) 2018-11-22 2018-11-22 Method of producing transplant for treating limbal insufficiency

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018141071A RU2720470C1 (en) 2018-11-22 2018-11-22 Method of producing transplant for treating limbal insufficiency

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2720470C1 true RU2720470C1 (en) 2020-04-30

Family

ID=70553075

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018141071A RU2720470C1 (en) 2018-11-22 2018-11-22 Method of producing transplant for treating limbal insufficiency

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2720470C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2807085C1 (en) * 2023-04-21 2023-11-09 федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Enzymatic method of obtaining suspension of human corneal endothelial cells

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2242190C2 (en) * 2003-02-05 2004-12-20 Республиканская офтальмологическая клиническая больница Method for treating corneal diseases
RU2269988C2 (en) * 2004-03-31 2006-02-20 Государственное учреждение Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for treating the cases of pterygium on autoplasty base
RU2627453C1 (en) * 2016-06-07 2017-08-08 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАУ МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н. Федорова" Минздрава России) Method for homoscleral transplant manufacture

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2242190C2 (en) * 2003-02-05 2004-12-20 Республиканская офтальмологическая клиническая больница Method for treating corneal diseases
RU2269988C2 (en) * 2004-03-31 2006-02-20 Государственное учреждение Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова Министерства здравоохранения Российской Федерации Method for treating the cases of pterygium on autoplasty base
RU2627453C1 (en) * 2016-06-07 2017-08-08 Федеральное государственное автономное учреждение "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАУ МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н. Федорова" Минздрава России) Method for homoscleral transplant manufacture

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ОСТРОВСКИЙ Д.С. "Разработка способов конструирования искусственной роговицы на основе 3D клеточных сфероидов и полимерных материалов", Авто дисс. канд.биол.наук, Москва. 2018 - 23 с. *
ОСТРОВСКИЙ Д.С. "Разработка способов конструирования искусственной роговицы на основе 3D клеточных сфероидов и полимерных материалов", Автореферат дисс. канд.биол.наук, Москва. 2018 - 23 с. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2807085C1 (en) * 2023-04-21 2023-11-09 федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Enzymatic method of obtaining suspension of human corneal endothelial cells
RU2807087C1 (en) * 2023-04-21 2023-11-09 федеральное государственное автономное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр "Межотраслевой научно-технический комплекс "Микрохирургия глаза" имени академика С.Н. Федорова" Министерства здравоохранения Российской Федерации Method of obtaining suspension of human corneal endothelial cells using enzyme
RU2809076C1 (en) * 2023-07-14 2023-12-06 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней им. М.М. Краснова" (ФГБНУ "НИИ глазных болезней им. М.М. Краснова") Method of obtaining limbal stem cells in collagen hydrogel

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Del Barrio et al. Corneal stroma enhancement with decellularized stromal laminas with or without stem cell recellularization for advanced keratoconus
Inatomi et al. Midterm results on ocular surface reconstruction using cultivated autologous oral mucosal epithelial transplantation
US7494802B2 (en) Amniotic membrane covering for a tissue surface and devices facilitating fastening of membranes
JP5835693B2 (en) Corneal endothelial cell culture method, method for producing corneal endothelial cell sheet for transplantation, and corneal endothelial cell culture kit
NO317738B1 (en) Use of dermal fibroblasts in the manufacture of an agent for use in cosmetic augmentation as well as an agent for use in a surgical method for prolonged cosmetic augmentation.
KR20070093991A (en) Sheet-shaped composition utilizing amnion and method of preparing the same
JP2004024852A (en) Cornea endothelium-like sheet and manufacturing method therefor
CN100368534C (en) Bioderived amniotic membrane, composite bioderived amniotic membrane and preparation method thereof
de Linde Henriksen et al. Visual outcome after corneal transplantation for corneal perforation and iris prolapse in 37 horses: 1998–2010
CN100479867C (en) Preparation method of glue adhesion amnion
TW506827B (en) Method for expansion of epithelial stem cells on an amniotic membrane and resulting graft
Gipson et al. Transplant of oral mucosal epithelium to rabbit ocular surface wounds in vivo
RU2720470C1 (en) Method of producing transplant for treating limbal insufficiency
King Jr The use of preserved ocular tissues for transplantation
RU2609253C1 (en) Method for treating deep defects of cornea
RU2526814C1 (en) Method for skin restoration in patients with vast wounds with soft tissue defects (versions)
RU2560390C1 (en) Method of urgent treatment of destructive keratopathy
RU2623646C1 (en) Method for treatment of glaucomous optic neuropathy by means of transplantation of 3d cellular culture of multipotent mesenchimal scleral sulcus stem cells
RU2444340C1 (en) Method for keratoprosthesis of vascular complicated leukomas with using biokeratoprosthetic complex
RU2242190C2 (en) Method for treating corneal diseases
RU2143875C1 (en) Method of conjunctival membrane restoration
RU2671515C1 (en) Method of keratoprosthesis of thinned burn leukoma
RU2793525C1 (en) Method for surgical treatment of corneal defects in limbal cell insufficiency
RU2766166C1 (en) Method for corneal epithelial layer reconstruction in limbal stem cell deficiency syndrome in patients with thinned cornea
RU2814630C1 (en) Method of treating limbal insufficiency by transplantation of cultured stem cells into intrastromal corneal tunnels

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20201123