RU2688669C2 - Способ разделения, выделение и характеристики стевиолгликозидов - Google Patents
Способ разделения, выделение и характеристики стевиолгликозидов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2688669C2 RU2688669C2 RU2016137153A RU2016137153A RU2688669C2 RU 2688669 C2 RU2688669 C2 RU 2688669C2 RU 2016137153 A RU2016137153 A RU 2016137153A RU 2016137153 A RU2016137153 A RU 2016137153A RU 2688669 C2 RU2688669 C2 RU 2688669C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- steviol glycosides
- rebaudioside
- stevia
- separation
- steviol
- Prior art date
Links
- 235000019202 steviosides Nutrition 0.000 title claims abstract description 140
- 239000004383 Steviol glycoside Substances 0.000 title claims abstract description 120
- 235000019411 steviol glycoside Nutrition 0.000 title claims abstract description 119
- 229930182488 steviol glycoside Natural products 0.000 title claims abstract description 119
- 150000008144 steviol glycosides Chemical class 0.000 title claims abstract description 118
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 62
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title claims description 6
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 claims abstract description 87
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 39
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 17
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 10
- GIPHUOWOTCAJSR-UHFFFAOYSA-N Rebaudioside A. Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC(C1O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O GIPHUOWOTCAJSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 241000544066 Stevia Species 0.000 claims abstract 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- 229930188195 rebaudioside Natural products 0.000 claims description 22
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 13
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 12
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 11
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 4
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 abstract description 37
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 abstract description 37
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 76
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 58
- RPYRMTHVSUWHSV-CUZJHZIBSA-N rebaudioside D Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RPYRMTHVSUWHSV-CUZJHZIBSA-N 0.000 description 55
- 239000001512 FEMA 4601 Substances 0.000 description 37
- HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N Rebaudioside A Natural products O=C(O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)[C@@]1(C)[C@@H]2[C@](C)([C@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@H]5[C@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@@H](O[C@H]6[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 HELXLJCILKEWJH-SEAGSNCFSA-N 0.000 description 37
- HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N entered according to Sigma 01432 Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC(C1OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)OC(CO)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O HELXLJCILKEWJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 235000019203 rebaudioside A Nutrition 0.000 description 37
- 239000000306 component Substances 0.000 description 29
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 25
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 25
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 24
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 229940013618 stevioside Drugs 0.000 description 20
- UEDUENGHJMELGK-HYDKPPNVSA-N Stevioside Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O UEDUENGHJMELGK-HYDKPPNVSA-N 0.000 description 19
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 19
- OHHNJQXIOPOJSC-UHFFFAOYSA-N stevioside Natural products CC1(CCCC2(C)C3(C)CCC4(CC3(CCC12C)CC4=C)OC5OC(CO)C(O)C(O)C5OC6OC(CO)C(O)C(O)C6O)C(=O)OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O OHHNJQXIOPOJSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 17
- 235000006092 Stevia rebaudiana Nutrition 0.000 description 16
- QSRAJVGDWKFOGU-WBXIDTKBSA-N rebaudioside c Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@]1(CC[C@H]2[C@@]3(C)[C@@H]([C@](CCC3)(C)C(=O)O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)CC3)C(=C)C[C@]23C1 QSRAJVGDWKFOGU-WBXIDTKBSA-N 0.000 description 16
- -1 diterpene glycosides Chemical class 0.000 description 14
- DRSKVOAJKLUMCL-MMUIXFKXSA-N u2n4xkx7hp Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DRSKVOAJKLUMCL-MMUIXFKXSA-N 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 11
- QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N Steviol Natural products C1CC2(C3)CC(=C)C3(O)CCC2C2(C)C1C(C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000013615 non-nutritive sweetener Nutrition 0.000 description 10
- QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N steviol Chemical compound C([C@@]1(O)C(=C)C[C@@]2(C1)CC1)C[C@H]2[C@@]2(C)[C@H]1[C@](C)(C(O)=O)CCC2 QFVOYBUQQBFCRH-VQSWZGCSSA-N 0.000 description 10
- 229940032084 steviol Drugs 0.000 description 10
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 9
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 9
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 9
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 9
- 239000001776 FEMA 4720 Substances 0.000 description 8
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- QSIDJGUAAUSPMG-CULFPKEHSA-N steviolmonoside Chemical compound O([C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O QSIDJGUAAUSPMG-CULFPKEHSA-N 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- OMHUCGDTACNQEX-OSHKXICASA-N Steviolbioside Natural products O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(O)=O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O OMHUCGDTACNQEX-OSHKXICASA-N 0.000 description 7
- JLPRGBMUVNVSKP-AHUXISJXSA-M chembl2368336 Chemical compound [Na+].O([C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C([O-])=O)[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O JLPRGBMUVNVSKP-AHUXISJXSA-M 0.000 description 7
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 7
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 6
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 6
- 239000008123 high-intensity sweetener Substances 0.000 description 6
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 5
- 238000012062 charged aerosol detection Methods 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 5
- NIKHGUQULKYIGE-UHFFFAOYSA-N kaurenoic acid Natural products C1CC2(CC3=C)CC3CCC2C2(C)C1C(C)(C(O)=O)CCC2 NIKHGUQULKYIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 229930186291 Dulcoside Natural products 0.000 description 4
- CANAPGLEBDTCAF-NTIPNFSCSA-N Dulcoside A Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@]23C(C[C@]4(C2)[C@H]([C@@]2(C)[C@@H]([C@](CCC2)(C)C(=O)O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)CC4)CC3)=C)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O CANAPGLEBDTCAF-NTIPNFSCSA-N 0.000 description 4
- CANAPGLEBDTCAF-QHSHOEHESA-N Dulcoside A Natural products C[C@@H]1O[C@H](O[C@@H]2[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]2O[C@]34CC[C@H]5[C@]6(C)CCC[C@](C)([C@H]6CC[C@@]5(CC3=C)C4)C(=O)O[C@@H]7O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]7O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O CANAPGLEBDTCAF-QHSHOEHESA-N 0.000 description 4
- 206010013911 Dysgeusia Diseases 0.000 description 4
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 4
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 4
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 4
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 4
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 4
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 4
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 4
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- RLLCWNUIHGPAJY-SFUUMPFESA-N rebaudioside E Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O RLLCWNUIHGPAJY-SFUUMPFESA-N 0.000 description 4
- GSGVXNMGMKBGQU-PHESRWQRSA-N rebaudioside M Chemical group C[C@@]12CCC[C@](C)([C@H]1CC[C@@]13CC(=C)[C@@](C1)(CC[C@@H]23)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)[C@H]1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)C(=O)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)[C@H]1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GSGVXNMGMKBGQU-PHESRWQRSA-N 0.000 description 4
- HYLAUKAHEAUVFE-AVBZULRRSA-N rebaudioside f Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HYLAUKAHEAUVFE-AVBZULRRSA-N 0.000 description 4
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 4
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 4
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UDIPTWFVPPPURJ-UHFFFAOYSA-M Cyclamate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)NC1CCCCC1 UDIPTWFVPPPURJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RLLCWNUIHGPAJY-RYBZXKSASA-N Rebaudioside E Natural products O=C(O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)[C@]1(C)[C@@H]2[C@@](C)([C@@H]3[C@@]4(CC(=C)[C@@](O[C@@H]5[C@@H](O[C@@H]6[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O6)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O5)(C4)CC3)CC2)CCC1 RLLCWNUIHGPAJY-RYBZXKSASA-N 0.000 description 3
- YWPVROCHNBYFTP-UHFFFAOYSA-N Rubusoside Natural products C1CC2C3(C)CCCC(C)(C(=O)OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)C3CCC2(C2)CC(=C)C21OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O YWPVROCHNBYFTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004376 Sucralose Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 235000015218 chewing gum Nutrition 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 3
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- QRGRAFPOLJOGRV-UHFFFAOYSA-N rebaudioside F Natural products CC12CCCC(C)(C1CCC34CC(=C)C(CCC23)(C4)OC5OC(CO)C(O)C(OC6OCC(O)C(O)C6O)C5OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O)C(=O)OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O QRGRAFPOLJOGRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- YWPVROCHNBYFTP-OSHKXICASA-N rubusoside Chemical compound O([C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O YWPVROCHNBYFTP-OSHKXICASA-N 0.000 description 3
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 3
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 3
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 3
- 235000021309 simple sugar Nutrition 0.000 description 3
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 3
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 235000019408 sucralose Nutrition 0.000 description 3
- BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N sucralose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](Cl)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@]1(CCl)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CCl)O1 BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FGOJCPKOOGIRPA-UHFFFAOYSA-N 1-o-tert-butyl 4-o-ethyl 5-oxoazepane-1,4-dicarboxylate Chemical compound CCOC(=O)C1CCN(C(=O)OC(C)(C)C)CCC1=O FGOJCPKOOGIRPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 4-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ZEYHEAKUIGZSGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WBZFUFAFFUEMEI-UHFFFAOYSA-M Acesulfame k Chemical compound [K+].CC1=CC(=O)[N-]S(=O)(=O)O1 WBZFUFAFFUEMEI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 2
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 108010025880 Cyclomaltodextrin glucanotransferase Proteins 0.000 description 2
- GGLIEWRLXDLBBF-UHFFFAOYSA-N Dulcin Chemical compound CCOC1=CC=C(NC(N)=O)C=C1 GGLIEWRLXDLBBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010055629 Glucosyltransferases Proteins 0.000 description 2
- 102000000340 Glucosyltransferases Human genes 0.000 description 2
- 241000202807 Glycyrrhiza Species 0.000 description 2
- 235000001453 Glycyrrhiza echinata Nutrition 0.000 description 2
- 235000006200 Glycyrrhiza glabra Nutrition 0.000 description 2
- 235000017382 Glycyrrhiza lepidota Nutrition 0.000 description 2
- 239000004384 Neotame Substances 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 235000010358 acesulfame potassium Nutrition 0.000 description 2
- 239000000619 acesulfame-K Substances 0.000 description 2
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 2
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 2
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 2
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 2
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 2
- 230000001055 chewing effect Effects 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 229940109275 cyclamate Drugs 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000008126 dulcin Substances 0.000 description 2
- NWNUTSZTAUGIGA-UHFFFAOYSA-N dulcin Natural products C12CC(C)(C)CCC2(C(=O)OC2C(C(O)C(O)C(COC3C(C(O)C(O)CO3)O)O2)O)C(O)CC(C2(CCC3C4(C)C)C)(C)C1=CCC2C3(C)CCC4OC1OCC(O)C(O)C1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O NWNUTSZTAUGIGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 2
- 239000005428 food component Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- FTSSQIKWUOOEGC-RULYVFMPSA-N fructooligosaccharide Chemical compound OC[C@H]1O[C@@](CO)(OC[C@@]2(OC[C@@]3(OC[C@@]4(OC[C@@]5(OC[C@@]6(OC[C@@]7(OC[C@@]8(OC[C@@]9(OC[C@@]%10(OC[C@@]%11(O[C@H]%12O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]%12O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]%11O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]%10O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]9O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]8O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]7O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]6O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]5O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]4O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]2O)[C@@H](O)[C@@H]1O FTSSQIKWUOOEGC-RULYVFMPSA-N 0.000 description 2
- 229940107187 fructooligosaccharide Drugs 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 229940010454 licorice Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- ITVGXXMINPYUHD-CUVHLRMHSA-N neohesperidin dihydrochalcone Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1CCC(=O)C(C(=C1)O)=C(O)C=C1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ITVGXXMINPYUHD-CUVHLRMHSA-N 0.000 description 2
- 235000019412 neotame Nutrition 0.000 description 2
- HLIAVLHNDJUHFG-HOTGVXAUSA-N neotame Chemical compound CC(C)(C)CCN[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 HLIAVLHNDJUHFG-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 2
- 108010070257 neotame Proteins 0.000 description 2
- 210000001331 nose Anatomy 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000000892 thaumatin Substances 0.000 description 2
- 235000010436 thaumatin Nutrition 0.000 description 2
- OQPOFZJZPYRNFF-CULFPKEHSA-N tkd5uc898q Chemical compound O=C([C@]1(C)CCC[C@@]2([C@@H]1CC[C@]13C[C@](O)(C(=C)C1)CC[C@@H]23)C)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O OQPOFZJZPYRNFF-CULFPKEHSA-N 0.000 description 2
- 230000006098 transglycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000005918 transglycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- WTARULDDTDQWMU-RKDXNWHRSA-N (+)-β-pinene Chemical compound C1[C@H]2C(C)(C)[C@@H]1CCC2=C WTARULDDTDQWMU-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- WTARULDDTDQWMU-IUCAKERBSA-N (-)-Nopinene Natural products C1[C@@H]2C(C)(C)[C@H]1CCC2=C WTARULDDTDQWMU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- NUFKRGBSZPCGQB-FLBSXDLDSA-N (3s)-3-amino-4-oxo-4-[[(2r)-1-oxo-1-[(2,2,4,4-tetramethylthietan-3-yl)amino]propan-2-yl]amino]butanoic acid;pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C)C(=O)NC1C(C)(C)SC1(C)C.OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C)C(=O)NC1C(C)(C)SC1(C)C NUFKRGBSZPCGQB-FLBSXDLDSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEDFEBOUHSBQBT-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydroflavon-3-ol Chemical compound O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(O)C1C1=CC=CC=C1 YEDFEBOUHSBQBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 description 1
- 239000004377 Alitame Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000208173 Apiaceae Species 0.000 description 1
- 241000208838 Asteraceae Species 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000202722 Bupleurum falcatum Species 0.000 description 1
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- YDDUMTOHNYZQPO-RVXRWRFUSA-N Cynarine Chemical compound O([C@@H]1C[C@@](C[C@H]([C@@H]1O)O)(OC(=O)\C=C\C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C(O)=O)C(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 YDDUMTOHNYZQPO-RVXRWRFUSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 108010001682 Dextranase Proteins 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 239000001329 FEMA 3811 Substances 0.000 description 1
- 239000001689 FEMA 4674 Substances 0.000 description 1
- 241000193385 Geobacillus stearothermophilus Species 0.000 description 1
- 102400000471 Isomaltase Human genes 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 1
- 108010026867 Oligo-1,6-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 101000865553 Pentadiplandra brazzeana Defensin-like protein Proteins 0.000 description 1
- XCOJIVIDDFTHGB-UEUZTHOGSA-N Perillartine Chemical compound CC(=C)[C@H]1CCC(\C=N\O)=CC1 XCOJIVIDDFTHGB-UEUZTHOGSA-N 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- WTARULDDTDQWMU-UHFFFAOYSA-N Pseudopinene Natural products C1C2C(C)(C)C1CCC2=C WTARULDDTDQWMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 description 1
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 description 1
- 101150093282 SG12 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- 229930182647 Trilobatin Natural products 0.000 description 1
- HINSNOJRHFIMKB-DJDMUFINSA-N [(2S,3R,4S,5S,6R)-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-3-[(2S,3R,4R,5R,6S)-3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxyoxan-2-yl] (1R,4S,5R,9S,10R,13S)-13-[(2S,3R,4S,5R,6R)-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)-3,4-bis[[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy]oxan-2-yl]oxy-5,9-dimethyl-14-methylidenetetracyclo[11.2.1.01,10.04,9]hexadecane-5-carboxylate Chemical compound [H][C@@]1(O[C@@H]2[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]2OC(=O)[C@]2(C)CCC[C@@]3(C)[C@]4([H])CC[C@@]5(C[C@]4(CC5=C)CC[C@]23[H])O[C@]2([H])O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O[C@]3([H])O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)[C@H]2O[C@]2([H])O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O HINSNOJRHFIMKB-DJDMUFINSA-N 0.000 description 1
- 229960004998 acesulfame potassium Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006136 alcoholysis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019409 alitame Nutrition 0.000 description 1
- 108010009985 alitame Proteins 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- XCPQUQHBVVXMRQ-UHFFFAOYSA-N alpha-Fenchene Natural products C1CC2C(=C)CC1C2(C)C XCPQUQHBVVXMRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 239000008122 artificial sweetener Substances 0.000 description 1
- 235000021311 artificial sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 235000015173 baked goods and baking mixes Nutrition 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 229930006722 beta-pinene Natural products 0.000 description 1
- 235000015895 biscuits Nutrition 0.000 description 1
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 1
- UWHUTZOCTZJUKC-JKSUJKDBSA-N brazilin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@]2(O)[C@H]1C1=CC=C(O)C=C1OC2 UWHUTZOCTZJUKC-JKSUJKDBSA-N 0.000 description 1
- UWHUTZOCTZJUKC-CVEARBPZSA-N brazilin Natural products C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@@]2(O)[C@@H]1C1=CC=C(O)C=C1OC2 UWHUTZOCTZJUKC-CVEARBPZSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000003889 chemical engineering Methods 0.000 description 1
- 238000012993 chemical processing Methods 0.000 description 1
- 229940112822 chewing gum Drugs 0.000 description 1
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 description 1
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 description 1
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 108010010165 curculin Proteins 0.000 description 1
- 239000000625 cyclamic acid and its Na and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 229950009125 cynarine Drugs 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 108010042194 dextransucrase Proteins 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000020880 diabetic diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- POCFBDFTJMJWLG-UHFFFAOYSA-N dihydrosinapic acid methyl ester Natural products COC(=O)CCC1=CC(OC)=C(O)C(OC)=C1 POCFBDFTJMJWLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000002101 electrospray ionisation tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 238000012407 engineering method Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000005189 flocculation Methods 0.000 description 1
- 230000016615 flocculation Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- LCWMKIHBLJLORW-UHFFFAOYSA-N gamma-carene Natural products C1CC(=C)CC2C(C)(C)C21 LCWMKIHBLJLORW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940087061 glucosyl steviol Drugs 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- KFVUFODCZDRVSS-XGBBNYNSSA-N iso-steviol Chemical compound C([C@]12C[C@@](C(C2)=O)(CC[C@H]11)C)C[C@H]2[C@@]1(C)CCC[C@@]2(C)C(O)=O KFVUFODCZDRVSS-XGBBNYNSSA-N 0.000 description 1
- KFVUFODCZDRVSS-UHFFFAOYSA-N isosteviol Natural products C1C(=O)C(C)(CCC23)CC21CCC1C3(C)CCCC1(C)C(O)=O KFVUFODCZDRVSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004898 kneading Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N linoleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC)(=O)O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 125000005481 linolenic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 235000020845 low-calorie diet Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229940089953 neohesperidin dihydrochalcone Drugs 0.000 description 1
- 235000010434 neohesperidine DC Nutrition 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019629 palatability Nutrition 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N palmitic acid group Chemical group C(CCCCCCCCCCCCCCC)(=O)O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930183085 periandrin Natural products 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 238000005554 pickling Methods 0.000 description 1
- 238000003976 plant breeding Methods 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 description 1
- 239000013014 purified material Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009394 selective breeding Methods 0.000 description 1
- 230000008786 sensory perception of smell Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 229960001462 sodium cyclamate Drugs 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- FRMCCTDTYSRUBE-BGPZULBFSA-N spathulenol Chemical compound C1CC(=C)[C@@H]2CC[C@](C)(O)[C@H]2[C@@H]2C(C)(C)[C@@H]21 FRMCCTDTYSRUBE-BGPZULBFSA-N 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000001256 steam distillation Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- MYMZLBHZVRWYRE-UHFFFAOYSA-N suosan Chemical compound OC(=O)CCNC(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 MYMZLBHZVRWYRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 239000000606 toothpaste Substances 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- GSTCPEBQYSOEHV-QNDFHXLGSA-N trilobatin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C=C1O)=CC(O)=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 GSTCPEBQYSOEHV-QNDFHXLGSA-N 0.000 description 1
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H1/00—Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
- A01H1/04—Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
- A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
- A21D13/00—Finished or partly finished bakery products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A21—BAKING; EDIBLE DOUGHS
- A21D—TREATMENT, e.g. PRESERVATION, OF FLOUR OR DOUGH, e.g. BY ADDITION OF MATERIALS; BAKING; BAKERY PRODUCTS; PRESERVATION THEREOF
- A21D2/00—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking
- A21D2/08—Treatment of flour or dough by adding materials thereto before or during baking by adding organic substances
- A21D2/14—Organic oxygen compounds
- A21D2/18—Carbohydrates
- A21D2/181—Sugars or sugar alcohols
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/152—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations containing additives
- A23C9/156—Flavoured milk preparations ; Addition of fruits, vegetables, sugars, sugar alcohols or sweeteners
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
- A23G3/00—Sweetmeats; Confectionery; Marzipan; Coated or filled products
- A23G3/34—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof
- A23G3/36—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
- A23G3/40—Sweetmeats, confectionery or marzipan; Processes for the preparation thereof characterised by the composition containing organic or inorganic compounds characterised by the fats used
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
- A23G4/00—Chewing gum
- A23G4/06—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
- A23G4/08—Chewing gum characterised by the composition containing organic or inorganic compounds of the chewing gum base
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
- A23L2/60—Sweeteners
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L27/30—Artificial sweetening agents
- A23L27/33—Artificial sweetening agents containing sugars or derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
- A23G2200/00—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents
- A23G2200/06—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF containing organic compounds, e.g. synthetic flavouring agents containing beet sugar or cane sugar if specifically mentioned or containing other carbohydrates, e.g. starches, gums, alcohol sugar, polysaccharides, dextrin or containing high or low amount of carbohydrate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Botany (AREA)
- Seasonings (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к способу получения комбинации стевиолгликозидов, используемых в качестве подсластителей в пищевой промышленности. Предложен способ получения комбинации двух или нескольких стевиолгликозидов, включающий экстракцию листьев стевии горячей водой, очистку общего экстракта и разделение комбинации двух или нескольких стевиолгликозидов методом непрерывной хроматографии, где непрерывную хроматография осуществляется с использованием градиентного элюирования двумя или более растворителями, и градиента температуры, где два или более растворителей содержат воду, и где комбинация двух или несколько стевиолгликозидов содержит менее чем 25% по массе ребаудиозида А. Предложен новый эффективный комплексный способ разделения, позволяющий выделить комбинацию двух или более стевиолгликозидов из экстракта стевии. 15 з.п. ф-лы, 7 ил., 9 табл., 4 пр.
Description
ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
Данная заявка заявляет приоритет предварительной заявки на патент США № 61/941018, поданной 18 февраля 2014 г., содержание которой в полном объеме включено в настоящую заявку посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Изобретение относится к комплексному способу разделения, выделения и характеристики стевиолгликозидов из экстракта растений Stevia rebaudiana и их использованию в подслащивающих композициях.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
В настоящее время альтернативам сахару уделяется все большее внимание вследствие осведомленности о многих заболеваниях, связанных с потреблением пищевых продуктов и напитков с высоким содержанием сахара. Однако многие искусственные подсластители, такие как дульцин, цикламат натрия и сахарин, были запрещены или ограничены в некоторых странах в связи с опасениями относительно их безопасности. Таким образом, некалорийные подсластители природного происхождения становятся все более популярными.
Stevia rebaudiana Bertoni является многолетним кустарником из семейства сложноцветных (Compositae), произрастающим в некоторых районах Южной Америки. Листья растения содержат от 10 до 20% дитерпеновых гликозидов, которые примерно в 150-450 раз слаще сахара. Листья в течение сотен лет традиционно использовались в Парагвае и Бразилии для подслащивания местных сортов чая и лекарств.
Типичная практика предполагает выращивание растений в теплое время года, затем сбор урожая до начала цветения растений. David J. Midmore и Andrew H. Rank (A new rural industry - Stevia - to replace imported chemical sweeteners. A report for the Rural Industries Research and Development Corporation, August 2002; RIRDC Web Publication No. W02/022, RIRDC Project No UCQ-16A) сообщают, что многократные сборы урожая в год возможны в более теплом климате, таком как в Бразилии, Парагвае, Индии или Индонезии. «Данные по урожайности при промышленном производстве не приводятся кроме как в общем виде, например, 1600-2000 кг сухих листьев/га/год. Экспериментальные данные по урожайности позволяют предположить, что системы с многократными сборами урожая в год будет давать более высокие урожаи». Данный урожай относится к массе высушенного растения, а не к оптимизации стевиолгликозидов на гектар сбора урожая. За счет эффективного использования усовершенствованных аналитических методов и хорошего агрономического развития растений, выбранных для повышения выхода стевиолгликозидов с гектара, а также координированием созревания растений в пределах данного географического региона с перерывами в сборе урожая можно достигнуть повышения после сбора урожая выхода стевиолгликозидов за сезон сбора урожая.
Midmore и Rank продолжают сообщать, что «Обычный способ предполагает сбор урожая зеленой растительной массы и транспортирование ее к оборудованию для сушки: солнечной сушки или (искусственной) сушки в сушильной печи. При низкой влажности солнечная сушка тонкого слоя собранных растений может происходить достаточно быстро (9-10 часов) со снижением влажности растений от примерно 80% до 10% [116]. Искусственная сушка может занять два дня [37]. Быстрая сушка, вероятно, позволит получить сухие листья «лучшего качества». Если собранный растительный материал не высушивается быстро, то качество листьев может ухудшиться в результате окисления, теряя до одной трети содержания стевиозидов через три дня [116]. Высокая температура в процессе искусственной сушки также может привести к снижению содержания. Зеленый цвет высушенных листьев является желательным и свидетельствует о хорошем качестве». Мы обеспечили возможность совершенствования данного способа сбором урожая с перерывами и установлением времени для экстрактивной обработки влажных (то есть свежих, невысушенных) листьев, которые не подвергаются процессу сушки. Данное усовершенствование дает двойное преимущество снижения потерь гликозидов во время сушки и экономии затрат на обработку, устраняя необходимость в сушильном оборудовании.
Высушенные листья стевии, как сообщается, содержат примерно от 5% до 9% влаги, от 10% до 20% белка, от 35% до 62% углеводов, от 3% до 5% жиров (в основном пальмитиновой, линоленовой и линолевой кислот), от 7% до 13% золы и несколько летучих компонентов, включая спатуленол, бета-пинен, бета-кариофиллен и оксид кариофиллена. Стевия также является богатым источником щавелевой кислоты (смотри Wölwer-Rieck U. The Leaves of Stevia rebaudiana (Bertoni), Their Constituents and the Analysis Thereof: A Review. J. Agric. Chem. 2012, 60,886-895). Данные компоненты могут влиять на вкусоароматический букет подсластителя, если их не удалить или не уменьшить до существенно низкого уровня. Вследствие этого выделение индивидуальных подсластителей на основе стевии высокой чистоты повлекло за собой длительную обработку, включающую обработку различными смолами, разделение с использованием органических растворителей и кристаллизацию для предоставления продукта подходящего вкуса и качества.
В настоящее время насчитывается более 230 видов стевии с выраженными свойствами подсластителей. Растение успешно выращивают в различных условиях от его родных субтропиков до холодных северных широт. Состав стевиолгликозидов может быть модифицирован направленной селекцией растений. В то время как природные виды растений содержали стевиозид в качестве преобладающих стевиолгликозидов, новые культурные сорта были селектированы с повышенным содержанием ребаудиозида А, который считается подсластителем более высокого качества, чем стевиозид. Stevia rebaudiana продуцирует ряд других стевиолгликозидов, которые также обладают высокоинтенсивной сладостью и органолептическими свойствами, превосходящими в некоторых случаях многие другие встречающиеся в природе сильнодействующие подсластители. Стевиолгликозиды не метаболизируются для получения энергии в пищеварительной системе человека, и могут быть использованы для подслащивания пищевых продуктов без добавления калорий везде, где используется сахар. Они подходят для диабетических и низкокалорийных диет.
Вышеуказанные гликозиды имеют общий агликон, стевиол, и отличаются по количеству и типу углеводных остатков в положениях С13 и C19 (R2 и R1 соответственно на фиг.1). Листья стевии способны накапливать до 10-20% (в пересчете на сухой вес) стевиолгликозидов. Основными гликозидами, обнаруженными в природных листьях стевии, являются ребаудиозид А (2-10%), стевиозид (2-10%) и ребаудиозид С (1-2%). Другие гликозиды, такие как ребаудиозид В, D, Е и F, стевиолбиозид и рубузозид, также обнаружены на более низком уровне (менее 1%). Еще о других гликозидах недавно сообщили Ohta и др. в J. Appl. Glycosci. (2010) 57: 199-209.
Два главных гликозида - стевиозид и ребаудиозид А были широко изучены и охарактеризованы с точки зрения возможности их применения в качестве серийно выпускаемых высокоинтенсивных подсластителей. Например, исследования стабильности в газированных напитках подтвердили их термостабильность и pH-стабильность. Chang S. S. и др. (1983) Stability studies of Stevioside and Rebaudioside A in carbonated beverages. J. Agric. Food Chem. 31: 409-412. Даже в высокоочищенном состоянии данные стевиолгликозиды все еще обладают нежелательными вкусовыми свойствами, такими как горечь, сладкое послевкусие, вкус солодки и тому подобное. Одним из главных препятствий для успешного промышленного применения подсластителей на основе стевии являются такие нежелательные вкусовые свойства. Было показано, что данные вкусовые ноты становятся более заметными по мере того, как концентрация стевиолгликозидов увеличивается (Prakash et al. (2008) Development of Rebiana®, a natural, non-caloric sweetener. Food Chem. Toxicol., 46, S75-S82).
Ребаудиозид А показал наименее вяжущее, наименее горькое и наименее стойкое послевкусие, таким образом, обладая подходящими вкусовыми свойства по сравнению с известными стевиолгликозидами (Tanaka O. (1987) Improvement of taste of natural sweeteners. Pure Appl. Chem. 69:675-683; Phillips K. C. (1989) Stevia: steps in developing a new sweetener. In: Grenby T. H. ed. Developments in sweeteners, vol. 3. Elsevier Applied Science, London. 1-43).
В опубликованной заявке США № 2013347140, поданной Wang, раскрывается способ селекции растений стевии, имеющих высокое содержание ребаудиозида А.
В патентах США № PP23164 и № PP23728 раскрываются культурные сорта стевии, названные AKH L1 и AKH L4. Данные культурные сорта имеют высокое содержание ребаудиозида А.
Способы экстракции и очистки сладких гликозидов из растения Stevia rebaudiana с использованием воды или органических растворителей описаны, например, в патентах США № 4361697, № 4082858, № 4892938, № 5972120, № 5962678, № 7838044 и № 7862845.
Dobberstein и Ahmed (патент США № 4361697) и Morita и др. (патент США № 4082858) описывают хроматографию на силикагеле стевиолгликозидов. Giovenatto (патент США N 4892938) использует гидроксид кальция для очищения общего экстракта подсластителей на основе стевии с последующим фильтрованием или центрифугированием. Данный осадок обрабатывают сильнокислотной ионообменной смолой, а затем слабоосновной ионообменной смолой, фильтруют и сушат. Magomet и другие (патент США № 7862845) также предлагают выделение частично очищенных стевиолгликозидов обработкой общего экстракта солями кальция, фильтрацией неочищенной суспензии с последующей кристаллизацией ребаудиозида А из смеси метанол-вода. Abelyan и др. (Патент США № 7838044) предлагают экстракцию сладких гликозидов из Stevia rebaudiana Bertoni в присутствии пектиназы и очистку контактированием экстракта с циклодекстрином и бентонитом, и ионообменными смолами с последующей кристаллизацией и перекристаллизацией из этанола. Kutowy и др. (Патент США № 5972120) раскрывают способ экстракции сладких соединений из Stevia rebaudiana (Bertoni) в вертикальной экстракционной колонке с последующей очисткой, фильтрацией, использованием микрофильтрации в качестве стадии предварительной обработки для очищения экстракта, затем ультрафильтрации с последующей нанофильтрацией. Payzant и др. (Патент США № 5962678) используют две ионообменные колонки для удаления примесей из сладких гликозидов, экстрагированных из Stevia rebaudiana, используя метанол для элюирования сладких гликозидов со второй колонки, и охлаждая раствор для кристаллизации стевиозида. Фильтрат затем концентрируют и охлаждают до выкристаллизовывания ребаудиозида А.
В патенте США № 4612942 раскрываются дитерпеновые гликозиды, включая ребаудиозид D, а также их использование в пищевых продуктах, медицинских композициях, композициях для гигиены полости рта, жевательных композициях и курительных композициях.
Было установлено, что некоторые из этих нежелательных свойств можно снизить или устранить, подвергая стевиолгликозиды реакции межмолекулярного трансглюкозилирования, когда новые углеводные остатки присоединяются к исходной молекуле в положениях С13 и C19. В зависимости от количества углеводных остатков в этих положениях изменяется качество и выраженность вкуса композиций. В таблице 1 показано, каким образом качество и интенсивность сладости изменяются в зависимости от количества и положения гликозидов. Остатки глюкозы (обозначенные как Gluc или G в таблице) соединены бета-гликозидной связью. Пуллуланаза, изомальтаза (Lobov S. V. et al. (1991) Enzymatic production of sweet stevioside derivatives: transglycosylation by glucosidases. Agric. Biol. Chem. 55: 2959-2965), β-галактозидаза (Kitahata S. et al. (1989) Production of rubusoside derivatives by transglycosylation of various β-galactosidase. Agric. Biol. Chem. 53: 2923-2928) и декстрансахараза (Yamamoto K. et al. (1994) Effective production of glucosyl-stevioside by α-1,6-transglucosylation of dextran dextranase. Biosci. Biotech. Biochem. 58: 1657-1661) были использованы в качестве ферментов трансгликозилирования совместно с пуллуланом, мальтозой, лактозой и частично гидролизованным крахмалом, соответственно, в качестве доноров гликозидных остатков для линейного удлинения углеводного фрагмента в ядре стевиолгликозида альфа-связанными остатками глюкозы.
Трансглюкозилирование стевиолгликозидов также было осуществлено под действием циклодекстрин глюканотрансфераз (CGTase), продуцируемых Bacillus stearothermophilus (патенты США № 4219571 и № 7807206). В результате образовывались α-1,4-глюкозил-производные со степенью полимеризации до 10.
Было показано, что вкусовой профиль и степень сладости глюкозил-производных преимущественно зависят от целого ряда дополнительных глюкозил-производных, то есть степени полимеризации α-1,4-глюкозильной цепи. Увеличение количества α-1,4-глюкозильных остатков улучшило вкусовые качества, но в то же время снизило уровень сладости (Tanaka, 1987).
Также следует отметить, что многие продукты на основе глюкозила стевии содержат до 20% предельных декстринов, которые не обладают выраженными функциональными свойствами и снижают содержание стевиолгликозидов в продукте, кроме того уменьшая интенсивность сладости.
Таким образом, необходимо разработать простой и эффективный способ получения стевиолгликозидов высокой чистоты.
В опубликованной заявке Китая № CN103012516, поданной Wuxi Kingboon Stevia Internat Trade Co. Ltd., раскрываются способы получения стевиозидов, которые включают стадию вымачивания листьев стевии в воде; стадию грубой фильтрации и ультрафильтрации с получением раствора ультрафильтрации; стадию введения раствора ультрафильтрации в нано-, микро- предколонку; и, по меньшей мере, две стадии алкоголиза на нано-, микро- предколонке.
В опубликованной заявке Китая № CN102127129, поданной Liaoning Qianqian Biolog Technology Co., раскрывается способ получения экстракта стевии, который включает стадию механического измельчания листьев стевии; стадию фильтрации листьев стевии; стадию ультразвуковой экстракции; стадию флокуляции; стадию адсорбции; стадию анализа посредством элюирования этанолом; стадию обессоливания и обесцвечивания; стадию концентрирования; и стадию распылительной сушки.
В опубликованной заявке Китая № CN102406113, поданной Ningbo Green Health Pharmaceutical Co. Ltd., раскрывается способ получения препарата ребаудиозида А/ребаудиозида D, который включает стадию экстракции измельченных листьев стевии водой; стадию пропускания фильтрата через колонку с макропористой смолой; и стадию элюирования спиртовым растворителем с использованием анализа методом ВЭЖХ с детектированием содержания ребаудиозида А/ребаудиозида D.
В опубликованной заявке США № 20130071537, поданной E.P.C Plant Pharmaceutical Technology Co., Ltd., раскрываются композиции подсластителей на основе стевии, которые содержат солевую форму ребаудиозида B.
В опубликованной заявке США № 20140243514, поданной Cargill, Incorporated, раскрывается способ получения обогащенной композиции, содержащей, по меньшей мере, один из ребаудиозида В, ребаудиозида D или их смеси, который включает использование макропористой нейтральной пористой смолы.
В опубликованной заявке США № 20130309389, поданной Cargill, Incorporated, раскрывается композиция, содержащая установленные количества ребаудиозида D и ребаудиозида B.
В опубликованной заявке США № 20140004248, поданной LGL Life Tech Corporation, раскрывается способ получения композиции натурального подсластителя, содержащей, по меньшей мере, один из экстракта стевиолбиозида, экстракта ребаудиозида В и экстракта ребаудиозида D, включающий использование колонки с пористым адсорбционным слоем, имеющей установленные параметры. В опубликованной заявке США № 20130071339, поданной Markosyan, раскрываются способы получения высокоочищенных стевиолгликозидов, в частности ребаудиозида D.
В опубликованной заявке США № 20150017284, поданной Markosyan, раскрывается кристаллическая композиция ребаудиозида M и ребаудиозида D, содержащая, по меньшей мере, 75% ребаудиозида M.
В опубликованной заявке США № 20130071339, поданной Markosyan, раскрывается способ очистки стевиолгликозидов, который включает использование последовательно соединенных колонок, заполненных адсорбирующей смолой, способной адсорбировать стевиолгликозиды.
В патенте США № 8299224, принадлежащем PureCircle Sdn Bhd, раскрывается способ очистки ребаудиозида D из экстракта стевии, который включает предоставление экстракта стевии; растворение экстракта в первом водном растворе органического растворителя с получением первой смеси стевиолгликозидов, при этом органический растворитель выбирают из группы, состоящей из метанола, этанола, 1-пропанола, изопропанола и их смеси, и органический растворитель составляет 75-99 об.%; индуцирование кристаллизации в первой смеси; фильтрование смеси с получением первого осадка и первого фильтрата; растворение первого осадка во втором водном растворе органического растворителя с получением второй смеси, при этом органический растворитель выбирают из группы, состоящей из метанола, этанола, 1-пропанола, изопропанола и их смеси, и органический растворитель составляет 70-80 об.%; индуцирование кристаллизации во второй смеси; фильтрование смеси с получением второго осадка и второго фильтрата; растворение второго осадка в третьем водном растворе органического растворителя с получением третьей смеси, при этом органический растворитель выбирают из группы, состоящей из метанола, этанола, 1-пропанола, изопропанола и их смеси, и органический растворитель составляет 10-80 об.%; индуцирование кристаллизации в третьей смеси; и фильтрование смеси с получением третьего осадка и третьего фильтрата; при этом сушка третьего осадка приводит к получению очищенного ребаудиозида D.
В опубликованных заявках США № 20140335253, № 20140335254, № 20140335264 и № 20140335265, поданных EPC Beijing Natural Products Co. Ltd., раскрываются ненатуральные композиции ребаудиозида D, которые содержат повышенное количество очищенного ребаудиозида D, при этом повышенное количество очищенного ребаудиозида D добавляют в виде очищенного ребаудиозида D в композиции.
В опубликованной заявке США № 20120269954, поданной Tate & Lyle Ingredients Americas LLC, раскрывается экстракт стевии, содержащий ребаудиозид B.
В опубликованной заявке США № 20110256588, поданной Lee и др., раскрывается способ получения ребаудиозида А с высоким выходом повторным использованием побочных продуктов, образующихся при получении ребаудиозида А из листьев Stevia rebaudiana Bertoni.
В опубликованной заявке США № 20110183056, поданной Morita и др., раскрываются выделенные стевиолгликозиды, имеющие структуры, раскрытые здесь. В ссылке раскрывается, что стевиолгликозиды, которые имеют структуры, в которых присутствует более гликозидных остатков, чем в молекуле стевиозида или ребаудиозида А, могут обеспечить слабое усиление вкуса подсластителя на основе стевии.
В патенте США № 8520527, принадлежащем PureCircle Sdn Bhd, раскрывается способ получения пищевого компонента на основе стевии, который включает стадию вымачивания биомассы стевии в воде для удаления растворимых компонентов; стадию инкубирования нерастворимой в воде биомассы стевии в щелочном растворе с получением пульпы; и затем стадию обработки с получением пищевого компонента на основе стевии, который содержит микрокристаллическую целлюлозу.
В патенте США № 8337928, принадлежащем Concentrate Manufacturing Company из Ирландии, раскрывается питьевой продукт, который содержит, по меньшей мере, один стевиолгликозидный подсластитель и анисовую кислоту.
В патентах США № 8318459 и № 8257948, принадлежащих PureCircle USA, раскрывается способ получения композиции высокоочищенного глюкозила стевии с использованием крахмала в качестве источника остатков глюкозы.
В патенте США № 8299224, принадлежащем PureCircle Sdn Bhd, раскрывается способ очистки ребаудиозида D из экстракта стевии.
В патенте США № 8277862, принадлежащем Concentrate Manufacturing Company из Ирландии, раскрывается питьевой продукт, который содержит ребаудиозид А, эритрит и кислотный компонент.
В патенте США № 8277862, принадлежащем Concentrate Manufacturing Company из Ирландии, раскрывается питьевой продукт, который содержит стевиолгликозид и кислотный компонент.
В патенте США № 7964232, принадлежащем PepsiCo, Inc., раскрываются изомеры стевиолгликозидов, причем здесь экзо-циклическая двойная связь формулы I была перемещена в эндо-циклическое положение внутри пятичленного кольца.
В патенте США № 7927851, принадлежащем Vineland Research и Innovation Centre, раскрывается способ получения стевиолгликозида в растение или растительной клетке, включающий: а) выбор растений или растительной клетки, которые продуцируют энт-кауреновую кислоту; b) трансформацию растения или растительной клетки первой нуклеотидной последовательностью, кодирующей полипептид, обладающий активностью 13-гидроксилазы энт-кауреновой кислоты, и, по меньшей мере, одной другой нуклеотидной последовательностью, кодирующей одну или более глюкозилтрансфераз, чтобы катализировать добавление одной или более молекул глюкозы к стевиолу или глюкозил-стевиолу; и c) экспрессию полипептида, имеющего 13-гидроксилазу энт-кауреновой кислоты и указанную одну или более глюкозилтрансфераз в клетке для превращения энт-кауреновой кислоты в один или более стевиолгликозидов.
Ohta и др., Characterization of novel steviol glycosides from leaves of Stevia rebaudiana morita, J. Appl. Glycosci., 57, 199-209 (2010), раскрывает структуры стевиолгликозидов, выделенных из листьев S. rebaudiana Morita, которую получили отбором и селекцией S. rebaudiana Bertoni.
Zimmerman, Tandem mass spectrometric fragmentation patterns of known and new steviol glycosides with structure proposals, Rapid Commun. Mass. Spectrom. 2011, 25, 1575-1582, раскрывает применение тандемной масс-спектрометрии для идентификации 12 ранее неизвестных стевиолгликозидов.
Brandle и др. (2002) Plant Molecular Biology 50: 613-622; Richman и др. (1999) The Plant Journal 19 (4), 411-421; и Richman и др. (2005) The Plant Journal 41, 55-67, раскрывают метаболические пути для получения стевиола и превращения стевиола в различные стевиолгликозиды.
Существующие способы относятся к выделению и очистке стевиолгликозидов из исходного экстракта и не предоставляют возможность для дальнейшей обработки остаточного раствора или очистки минорных соединений, индивидуально или в совокупности. Таким образом, сохраняется потребность в эффективном и экономичном способе комплексной повторной обработки экстракта, полученного из растений Stevia rebaudiana.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к комплексному способу разделения, выделения, характеристики и использования двух или нескольких минорных стевиолгликозидов (и в частности тех, которые встречаются в природе на уровне менее чем 1% сухого веса листьев) из растений Stevia rebaudiana.
Согласно варианту осуществления обеспечивается эффективный способ разделения, выделения и характеристики комбинации двух или более стевиолгликозидов из экстракта стевии, таким образом, минимизируя отходы.
Комбинации двух или нескольких стевиолгликозидов, отдельно или в сочетании с другими подсластителями и/или другими компонентами, являются подходящими в качестве некалорийных подсластителей в пищевых и жевательных композициях, таких как напитки, кондитерские изделия, хлебопекарные изделия, печенье, жевательные резинки, фармацевтические препараты и тому подобное.
Согласно варианту осуществления способ включает:
1. использование хроматографического метода для идентификации и количественного определения комбинаций двух или более минорных стевиолгликозидов (присутствующих на уровне менее чем 5% сухого веса листьев) в качестве средства информирования селекционной программы для оптимизации получения этого определенного набора стевиолгликозидов, которые в настоящее время не используются в промышленном масштабе в качестве подсластителей,
2. способ экстрагирования, в частности ступенчатой экстракцией, листьев стевии, свежих листьев или высушенных для сохранения, для оптимизации выделения двух или более минорных стевиолгликозидов с молекулярным весом более чем приблизительно 900 г/моль и минимизации необходимости в последующих стадиях обработки,
3. использование хроматографии для выделения набора двух или нескольких стевиолгликозидов с молекулярным весом более, чем приблизительно 900 г/моль, предпочтительно ребаудиозидов D, I, О, М и/или N, каждый из которых по отдельности присутствует на уровне ниже 5% в пересчете на сухой вес листьев,
4. способ, который позволяет избежать необходимости в кристаллизации при выделении стевиолгликозидов D, I, О, М и/или N, который включает градиентное элюирование с использованием 2 или более растворителей при постоянной температуре, или при градиенте температуры с элюирующим растворителем,
5. применение в качестве подсластителя комбинации двух или нескольких стевиолгликозидов, предпочтительно ребаудиозидов D, I, О, М и/или N, которые по отдельности присутствуют на уровнях ниже 5% в пересчете на сухой вес листьев,
6. два или более стевиолгликозидов могут быть использованы отдельно или в комбинации с более преобладающими стевиолгликозидами, включая, но не ограничиваясь ими, ребаудиозид А, ребаудиозид B, ребаудиозид D, в количестве менее чем приблизительно 25% преобладающего стевиолгликозида, менее чем приблизительно 15% преобладающего стевиолгликозида, менее чем приблизительно 10% преобладающего стевиолгликозида, менее чем приблизительно 5% преобладающего стевиолгликозида. Таблица 9, взятая из публикации Ohta и др. (2010), предоставляет относительные количества стевиолгликозидов из листьев S. rebaudiana Morita и S. rebaudiana Bertoni.
Непрерывный противоточный ионный обмен и адсорбция, такие как технология SepTor компании Outotec, Espoo, Финляндия, являются методом, который можно использовать для удаления загрязняющих веществ. Непрерывная хроматография отличается от традиционной (одноколоночной или многоколоночной) стационарной твердофазной хроматографии тем, что несколько колонок, используемых в непрерывной хроматографии, функционируют, как если бы они были одной колонкой, но с несколькими точками ввода и точками выхода между колонками, что обеспечивает постепенное перемещение точек ввода для смеси и элюирующего растворителя и точек выхода для более быстро и более медленно элюирующихся компонентов, находящихся в смеси. Данный режим работы позволяет каждому составному сегменту колонки функционировать автономно по отношению к элюирующей смеси или скорости потока. Моделирование непрерывного процесса разделения описывается Johan Samuelsson в публикации «Simulation of continuous chromatographic processes» и Niklas Andersson в публикации «Simulation of continuous preparative chromatography: A case study in MCSGP» (2009) для использования градиента растворителя (SG) в многоколоночной системе (MC). «Препаративный» (P) относится к проведению разделения в большем масштабе, чем для аналитических целей, вплоть до масштаба промышленного производства. Применение непрерывного хроматографического разделения сахаров хорошо разработано в свеклосахарной промышленности и описано Bubnik и соавторами в публикации «Application of continuous chromatographic separation in sugar processing», Journal of Food Engineering 61 (2004) 509-513. Применение непрерывных методов разделения должно быть адаптировано для типа проводимого разделения. Например, стратегия разделения в целях выделения ребаудиозида А высокой чистоты будет отличаться от функционирования системы для нестандартной смеси из других стевиолгликозидов. До настоящего времени методы непрерывного разделения не использовались для выделения нестандартных смесей стевиолгликозидов, содержащих, по меньшей мере, два стевиолгликозида, выбранных из ребаудиозидов A, D, I, O, M и N.
Другим важным отличием непрерывной хроматографии является применение постоянного запаса материала, который подвергается разделению, находясь в многоколоночной системе, и который непрерывно циркулирует в системе. Такой запас преимущественно используют для облегчения разделения посредством регулирования запаса отдельных компонентов для поддержания требуемой композиции. Например, если исходная смесь имеет низкое содержание набора требуемых компонентов (например, 3-5% ребаудиозидов A, D, I, O, M и N), но преобладающее количество (>20%) ребаудиозида А, то сначала с колонки может осуществляться выход в основном преобладающего компонента, при этом позволяя минорным компонентам оставаться в запасе на колонке. Это может позволить лучше отделить минорные компоненты исходного материала в запасе на колонке от других компонентов, обеспечивая выход потока, обогащенного требуемыми (минорными) компонентами.
Возможность каждой колонки функционировать независимо имеет решающее значение при разделениях, включающих два или более входов в систему разделения (например, исходного материала, элюента А и элюента В) и два или более выходов (например, продукта 1, продукта 2, продукта 3 и так далее), где скорости потоков выхода различаются для каждого. Баланс потока в колонке рассчитывается как:
Fвход(предыдущая колонка)+Fвход(исходный материал)=Fвыход(продукт)+Fвыход(следующая колонка)
Где Fвход(исходный материал) может быть входом исходного материала или элюирующего растворитела и Fвыход(продукт) является выходом продукта.
Псевдодвижущийся слой
В производстве метод псевдодвижущегося слоя (SMB) представляет собой высокоинженерный метод для осуществления хроматографического разделения. Он используется для отделения одного химического соединения или одного класса химических соединений от одного или более других химических соединений с целью предоставления значительных количеств очищенного или обогащенного материала при более низкой стоимости, чем можно было бы получить использованием обычной (периодической) хроматографии. Он не может обеспечить разделение или очистку, которые не могут быть осуществлены обычной очисткой на колонке. Данный процесс является достаточно сложным. Преимущество, которое он привносит в хроматографическую очистку, заключается в том, что он позволяет получать большие количества высокоочищенного материала при существенном снижении затрат. Снижении затрат происходит за счет: использования меньшего количества хроматографической разделяющей среды неподвижной фазы, непрерывного и высокоскоростного получения продукта и сокращения требуемого количества растворителя и энергии. Такой улучшенный экономический результат обусловлен расположением клапан-и-колонка, которое используется для неограниченного удлинения неподвижной фазы и обеспечения очень высоких концентраций растворенных веществ в процессе.
В традиционном методе подвижного слоя производственной хроматографии вход исходного материала и выход аналита происходят одновременно и непрерывно, но из-за практических трудностей с непрерывно подвижным слоем был предложен метод псевдодвижущегося слоя. В методе псевдодвижущегося слоя вместо перемещения слоя непрерывно перемещаются входное отверстие для исходного материала, входное отверстие для растворителя или элюента, и выходное отверстие для требуемого продукта, и выходное отверстие для нежелательного продукта, создавая впечатление движущегося слоя, с непрерывным потоком твердых частиц и непрерывным потоком жидкости в направлении, противоположном направлению твердых частиц.
Другим видом непрерывного хроматографического разделения является кольцевой хроматографии. В опубликованном обзоре Frank Hilbrig и Ruth Freitag («Continuous annular chromatography», Journal of Chromatography B, 790 (2003) 1-15) сообщают «Принцип непрерывной кольцевой хроматографии (CAC) был известен на протяжении нескольких десятилетий. CAC представляет собой непрерывный режим хроматографии, который подходит для разделения многокомпонентных смесей, а также двухкомпонентных смесей. В CAC подвижные и неподвижные фазы движутся в режиме поперечного потока, что обеспечивает преобразование типичного одномерного разделения на колонке периодического действия в непрерывное двумерное разделение. За исключением линейного градиентного элюирования все хроматографические режимы были в настоящее время применены в CAC». Ранее Bart и соавторы (Continuous chromatographic separation of fructose, mannitol and sorbitol. Chemical Engineering and Processing 35 (1996) 459-471) применили метод для разделения простых сахаров, но данный метод не был использован для разделения стевиолгликозидов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фиг.1 представлена структура агликонов стевиолгликозидов с обозначенным местом гликозилирования (R1 и R2).
На фиг.2 приведена структура стевиолгликозидов.
Фиг.3 представляет собой диаграмму, которая показывает, как субъективное вкусовое качество и сладость можно прогнозировать по молекулярному размеру стевиолгликозида.
На фиг.4 представлена масс-спектра стевиолгликозидов, представляющих интерес.
На фиг.5 представлена масс-спектра стевиолгликозидов, представляющих интерес.
На фиг.6 показаны стадии экстракции и очистки, которые можно использовать по настоящему изобретению.
На фиг.7 показано применение хроматографии с псевдодвижущимся слоем по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение может быть более полно понятно со ссылкой на чертежи, нижеследующие подробное описание и примеры.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Считается, что специалист в данной области на основе приведенного здесь описания может использовать настоящее изобретение в наиболее полном объеме. Нижеперечисленные конкретные варианты осуществления следует рассматривать только как иллюстративные, а не как ограничивающие остальную часть описания каким-либо образом.
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют такое же значение, как обычно понимаемое средним специалистом в данной области, к которой принадлежит изобретение. Кроме того, все публикации, заявки на патенты, патенты и другие ссылки, упомянутые здесь, включены посредством ссылки. Все используемые здесь проценты являются весовыми, если не указано иное. Кроме того, все диапазоны, указанные здесь, подразумевают включение любой комбинации значений между двумя конечными точками включительно.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Под термином «вкусовые ноты» подразумеваются тонкие органолептические показатели, обычно определяемые на вкус или запах, ощущаемый при выдохе через нос после приема внутрь (ретроназальное обоняние).
Под термином «стевиол» подразумевается дитерпеновое соединение гидрокси-энт-каур-16-ен-13-ол-19-овой кислоты, которое представляет собой гидроксилированную форму соединения, называемого «энт-кауреновой кислотой», которая является энт-каур-16-ен-19-овой кислотой.
Под термином «стевиолгликозид» подразумеваются любые гликозиды агликона стевиола, включающие, но не ограничивающиеся ими, стевиозид, ребаудиозид А, ребаудиозид В, ребаудиозид С, ребаудиозид D, ребаудиозид E, ребаудиозид F, ребаудиозид I, ребаудиозид M, ребаудиозид N, ребаудиозид O, дулькозид, рубузозид, стевиолмонозид, стевиолбиозид и 19-О-β-глюкопиранозил-стевиол.
Примеры синтетических подсластителей включают сукралозу, ацесульфам калия, аспартам, алитам, сахарин, синтетические производные неогесперидин дигидрохалькон, цикламат, неотам дульцин, суосан, 1-метиловый эфир N-[N-[3-(3-гидрокси-4-метоксифенил)пропил]-L-α-аспартил]-L-фенилаланина (Адвантам), 1-метиловый эфир N-[N-[3-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-3-метилбутил]-L-α-аспартил]-L-фенилаланина, 1-метиловый эфир N-[N-[3-(3-метокси-4-гидроксифенил)пропил]-L-α-аспартил]-L-фенилаланина, их соли и тому подобное.
Примеры природных высокоинтенсивных подсластителей включают стевиозид, ребаудиозид А, ребаудиозид B, ребаудиозид С, ребаудиозид Е, ребаудиозид F, стевиолбиозид, дулькозид А, рубузозид, некоторые могрозиды (например, могрозид V), браззеин, неогесперидин дигидрохалкон (NHDC), глицирризиновую кислоту и ее соли, тауматин, периллартин, пернандульцин, мукурозиозид, байюнозид, фломизозид I, диметил-гексагидрофлуорен-дикарбоновую кислоту, абрузозиды, периандрин, карнозифлозиды, циклокариозид, птерокариозиды, полиподозид А, бразилин, гернандульцин, филлодульцин, глицифиллин, флоризин, трилобатин, дигидрофлавонол, дигидрокверцетин-3-уксусную кислоту, неоастилбин, транс-коричный альдегид, монатин и его соли, селлигвеин А, гематоксилин, монеллин, осладин, птерокариозид A, птерокариозид B, мабинлин, пентадин, миракулин, куркулин, неокулин, хлорогеновую кислоту, цинарин, сиаменозид и другие.
Подходящие «термостабильные, высокоинтенсивные подсластители» включают химические соединения или смеси соединений, которые вызывают сладкий вкус, по меньшей мере, в пять раз слаще сахарозы, если измерять в соответствии с методом испытаний, описанным в патенте Великобритании № 1543167, который включен здесь посредством ссылки. Обычно такие подсластители по существу не содержат продуктов разложения после нагревания в течение примерно одного часа при температуре около 40°С. Примеры таких подходящих подсластителей включают, но не ограничиваются ими, сукралозу, неотам, сахарин, ацесульфам-K, цикламат, неогесперидин DC, стевию, тауматин, браззеин, аспартам и их смеси.
Стевия является некалорийным натуральным подсластителем из растения Stevia rebaudiana. Растение продуцирует множество сладких соединений, совместно называемых стевиолгликозидами, которые делают стевию до 300 раз слаще сахарозы. Эти гликозиды можно экстрагировать из растения водой и другими растворителями, которые хорошо известны специалистам в данной области. Они являются термостабильными, рН-стабильными, не ферментируются и не вызывают гликемическую реакцию.
Стевиозид, иногда называемый сложным β-D-глюкопиранозиловым эфиром 13-[(2-О-β-D-глюкопиранозил-α-D-глюкопиранозил)окси]-каур-16-ен-18-овой кислоты, и ребаудиозид А являются типичными гликозидами дитерпеновых производных стевиола, экстрагированными и очищенными из листьев Stevia rebaudiana (также известной как Eupatorium rebaudianum). Данные гликозиды являются высокоинтенсивными подсластителями примерно в 100-500 раз слаще сахарозы, но имеют металлические и горькие ноты. Их можно использовать в широком диапазоне низкокалорийных или с пониженным содержанием калорий пищевых продуктов и напитков.
Другие сладкие гликозиды можно также экстрагировать из Stevia rebaudiana. Они имеют разную степень сладости. Используемый здесь термин «экстракт стевии» означает сладкий гликозид, экстрагированный из растения стевии.
Из гликозидов, обнаруженных в экстрактах стевии, ребаудиозид А, как в целом полагают, обладает наименьшим послевкусием. Это послевкусие, которое было описано многими как горькое и подобное вкусу солодки, присутствует во всех современных продуктах, подслащенных стевией. Такие композиции обычно требуют объемного разбавления или маскирующих вкус технологий.
Подобно всем высокоинтенсивным подсластителям, содержащим подслащивающие композиции, содержащие стевию подслащивающие композиции обычно получали с наполнителем для облегчения измерения и распределения при применении потребителями. В число раскрытых или использованных наполнителей включают фруктоолигосахарид (ФОС) и другие волокна, мальтодекстрины и эритрит. Эритрит является особенно популярным, так как он может немного смягчить горький вкус.
В заявках на патент США № 20120201952 и № 20120201940, поданных Catani и др., раскрывается способ получения природной подслащивающей композиции, включающий перегонку с водяным паром неочищенной смеси, содержащей, по меньшей мере, одно природное высокоинтенсивное подслащивающее соединение растительного происхождения, и фильтрацию неочищенной смеси.
В заявке на патент США № 20100285201, поданной Catani и др., раскрывается синергическая подслащивающая композиция, которая содержит сукралозу и очищенный экстракт стевии, при этом очищенный экстракт стевии содержит ребаудиозиды и дулкозиды.
В заявке на патент США № 20090017185, поданной Catani и др., раскрывается подслащивающая композиция с пониженным содержанием калорий, состоящая из экстракта стевии и простого сахара. Ссылка раскрывает, что экстракт стевии может содержать ребаудиозид А в количестве от около 80 вес.% до около 99,5 вес.% относительно всех стевиолгликозидов, а простым сахаром может быть сахароза, фруктоза или глюкоза.
В заявке на патент США № 20090004355, поданной Catani, раскрывается подслащивающая композиция, содержащая эритрит и экстракт стевии.
Настоящее изобретение относится к способу разделения, выделения и характеристики комбинации двух или более сладких гликозидов из экстракта растения Stevia rebaudiana с молекулярным весом в диапазоне от около 966 г/моль до около 1436 г/моль и с ребаудиозидом А менее чем 25% стевиолгликозидов, более предпочтительно с ребаудиозидом А менее чем 15% стевиолгликозидов, более предпочтительно с ребаудиозидом А менее чем 10% стевиолгликозидов и более предпочтительно с ребаудиозидом А менее чем 5% стевиолгликозидов.
Преимущества настоящего изобретения станут более очевидными из подробного описания, приведенного ниже. Однако следует понимать, что подробное описание и конкретные примеры, как демонстрирующие предпочтительные варианты осуществления изобретения, даются только с целью иллюстрации, поскольку различные изменения и модификации в пределах сущности и объема изобретения станут очевидными для специалистов в данной области из этого подробного описания.
Среди сладких гликозидов, встречающихся в стевии, только стевиозид, ребаудиозид А и ребаудиозид C доступны при умеренной стоимости с чистотой <80% и при высокой стоимости с чистотой >80%. Самая высокая чистота серийно выпускаемого продукта обычно составляет более 97%. В дальнейшем термин «высокоочищенный» относится к композиции стевиолгликозидов, которая содержит, по меньшей мере, от около 90% до около 100% стевиолгликозидов в пересчете на сухой вес. На рынке не существует промышленных количеств высокоочищенного ребаудиозида B или ребаудиозида D, два компонента стевии с вкусовым качеством и интенсивностью, сопоставимыми с ребаудиозидом А. Ребаудиозиды Е и F, также подсластители с хорошим вкусом, доступны в небольших количествах в качестве аналитических стандартов. Промышленное применение не получили встречающиеся в природе стевиолгликозиды с молекулярным весом, сопоставимым или больше, чем у ребаудиозида D. Настоящее изобретение направлено на определение композиции таких крупномолекулярных компонентов и недорогостоящий способ получения этой композиции, который компенсирует низкую концентрацию компонентов в Stevia rebaudiana использованием их в совокупности в качестве подслащивающего вещества.
Существует потребность в эффективном и экономичном способе комплексного разделения, выделения и/или характеристики комбинаций двух или более сладких гликозидов из экстракта стевии с молекулярным весом более чем примерно 900 г/моль. Индивидуальные стевиолгликозиды, которые были разработаны для промышленного применения, имеют ограничения с точки зрения вкусового качества и сладости временного профиля. Характеристики и ограничения выделенных встречающихся в природе и синтетических подсластителей описываются Grant E. DuBois и Indra Prakash в Annu. Rev. Food Sci. Technol. (2012), 3:353-380 (Non-Caloric Sweeteners, Sweetness Modulators, and Sweetener Enhancers). Настоящее изобретение избегает концепции выделения индивидуальных сладких компонентов в пользу разделения, выделения и/или характеристики комбинации двух или более молекул из стевии.
ПРИМЕРЫ
Известные стевиолгликозиды можно прогнозировать на основе характера замещения сахара (гликозида). Это создает возможность для прогнозирования других отсутствующих или еще неидентифицированных стевиолгликозидов, которые могут присутствовать пусть даже и на очень низком уровне в различных препаратах. Структура стевиолгликозидов приведена на фиг.2.
Качество и интенсивность сладости стевиолгликозидов, как установлено, коррелирует со степенью гликозилирования стевиола агликона. На фиг.3 ниже показано, каким образом субъективное вкусовое качество и сладость можно прогнозировать по молекулярному размеру, хотя могут возникать исключения, такие как ребаудиозид B. Это соединение может быть показательным для значимости конкретной структуры гликозида в R2, даже при отсутствии гликозилирования в R1, при определении качества и интенсивности сладости.
Качество и интенсивность сладости также зависят от наличия моносахаридов кроме глюкозы. Таким образом, наличие рамнозы (Rh) в молекуле, например, дулькозида А или ребаудиозида С, приводит к меньшей интенсивности и качеству сладости по сравнению с стевиолгликозидами, замещенными тем же количеством моносахаридов исключительно глюкозы, такими как стевиозид или ребаудиозид А соответственно.
Таблица 1.
Характер гликозилирования стевиолгликозидов коррелирует со сладостью.
Стевиол гликозид |
R1 | R2 | №глюкозы (G) |
№рам нозы (Rh) |
Мол. вес | Интенсивность сладости | Качество сладости |
стевиол | 318 | ||||||
стевиолмонозид | G- | 1 | 480 | 40 | -3 | ||
стевиолбиозид | G-2G- | 2 | 642 | 40 | -3 | ||
рубузозид | G- | G- | 2 | 642 | 115 | -2 | |
дулькозид A | G- | Rh2-G- | 2 | 1 | 788 | 70 | -2 |
стевиозид | G- | G2-G- | 3 | 804 | 145 | 0 | |
ребаудиозид B | G2-(G3)-G- | 3 | 804 | 300 | 3 | ||
ребаудиозид C | G- | Rh2-(G3)-G- | 3 | 1 | 950 | 200 | -1 |
ребаудиозид E | G2-G- | G2-G- | 4 | 966 | 200 | 1 | |
ребаудиозид A | G- | G3-(G2)-G- | 4 | 966 | 250 | 2 | |
ребаудиозид D | G2-G- | G2-(G3)-G- | 5 | 1128 | 300 | 3 |
Примечание: данные по качеству и интенсивности сладости из публикации Osamu Tanaka. «Improvement of taste of natural sweeteners», Pure & Appl. Chem. 1997, 69(4), 675-683. Интенсивность сладости, как понимается, соотносится с соответствующим весом сахарозы. Качество сладости представляет собой субъективное относительное ранжирование.
Стевиолгликозиды отличаются друг от друга не только молекулярной структурой, но и их вкусовыми свойствами. Обычно стевиозид, как установлено, слаще сахарозы в диапазоне от около 110 до около 270 раз, ребаудиозид А - в диапазоне от около 150 до около 320 раз, а ребаудиозид С слаще сахарозы в диапазоне от около 40 до около 60 раз. Дулькозид А примерно в 30 раз слаще сахарозы. Интенсивность сладости, как известно, немного изменятся в зависимости от температуры и вязкости среды носителя.
Несмотря на то, что некоторые стевиолгликозиды в настоящее время являются известными, не все были оценены по качеству и интенсивности сладости. Кроме того, несмотря на то, что многие способы используются для выделения и применения индивидуальных стевиолгликозидов в качестве подсластителей, современный уровень знаний не позволяет прогнозировать показатели сладости смеси стевиолгликозидов, особенно в пропорциях иных, чем присутствующие в природных условиях, или вкусовые характеристики в сочетании с другими подсластителями, или калорийными, или некалорийными, высокоинтенсивными или более сопоставимыми с простыми моно- и дисахаридами, такими как глюкоза, фруктоза или сахароза.
МЕТОД АНАЛИЗА
Традиционные методы анализа стевиолгликозидов требуют двойных градиентов растворителей для отделения стевиолгликозидов от других несладких компонентов растительного экстракта. Следовательно, детекторы, использующие изменения показателя преломления элюента, не подходят. Обычно используются ультрафиолетовые (УФ) детекторы для анализа стевиолгликозидов, которые содержат слабый УФ хромофор. Данный метод имеет ограниченную применимость для анализа общих экстрактов за счет присутствия компонентов с более сильными хромофорами, которые препятствуют обнаружению компонентов, представляющих интерес, поскольку компоненты с высокими молярными коэффициентами поглощения на выбранной длине волны будут казаться более видимыми, чем компоненты с более низкими коэффициентами поглощения, которые, несмотря на присутствие в более высокой концентрации по весу, будут давать значительно более слабый сигнал. Другая альтернатива показателя преломления (RI) для масс-детектирования включает испарительное светорассеяние (ELS) и детектирование заряженного аэрозоля (CAD). Компания Thermo Scientific (Determination of Steviol Glycosides by HPLC with UV and ELS Detections. Application Note 241 (2012)) указывает, каким образом ELS может предоставить преимущества по сравнению с УФ-детектированием при определении содержания ребаудиозида А и стевиозида в композициях настольных подсластителей. Однако в нашем эксперименте ELS может иметь ограниченное применение при определении концентрации минорного компонента в присутствии другого близко элюируемого основного компонента. H.Y. Eom и др. (J. Chromatogr. 1217 (2010) 4347-4354) указывает, что обнаружение сапонинов, полученных из корней Bupleurum falcatum L. (Umbelliferae), является более чувствительным при использовании CAD, чем при использовании ELS. Мы обнаружили, что использование детектора заряженного аэрозоля, компании ESA®, Inc., Chelmsford, MA, обеспечивает надежное количественное определение стевиолгликозидов в общих экстрактах Stevia rebaudiana, препараты которой богаты белками и другими растительными компонентами, которые обладают сильным УФ-поглощением, а также в присутствии больших количеств полисахаридов или других стевиолгликозидов, которые могут «ослепить» детектор для малых концентраций компонентов, представляющих интерес.
Определение эффективного детектора является лишь частью системы для эффективного количественного определения представляющих интерес компонентов в неочищенном препарате. Другой частью системы является определение системы растворителей (подвижной фазы) и твердого носителя (неподвижной фазы) для осуществления разделения. Успешная разработка подходящей комбинации подвижной и неподвижной фаз является эмпирическим методом проб и ошибок, результат которого не предсказуем априори. Мы экспериментировали с различными системами градиентной системы подвижной фазы для установления градиентов растворителей, которые подходят для разделения стевиолгликозидов, представляющих интерес, а значит позволяют их идентификацию методом масс-спектрометрии и количественное определение посредством CAD. Ниже приведен пример. Градиент можно регулировать для обеспечения более высокого разрешения около области конкретного пика, например, близко к пику ребаудиозида D.
Хроматографический метод анализа:
Неподвижная фаза: Phenomenex Kinetex C-18, 150×4,6, 2,6 мкм; Температура колонки: 55°C; Инжектируемый объем составляет 10 мкл.
Подвижная фаза (ПФА и ПФБ; скорость потока: 0,35 мл/мин):
ПФА: 0,1% муравьиная кислота в воде
ПФБ: 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле
Таблица 2.
Время (минуты) | %A | %Б |
0 | 95 | 5 |
5 | 95 | 5 |
30 | 70 | 30 |
45 | 30 | 70 |
55 | 30 | 70 |
55,1 | 95 | 5 |
60 | 95 | 5 |
Таблица 3.
Идентификация стандартного образца | RT1 (мин) | Мол.вес |
Ребаудиозид D | 35,920 | 1128 |
Ребаудиозид A | 39,544 | 966 |
Стевиозид | 39,704 | 804 |
Ребаудиозид F | 40,207 | 936 |
Ребаудиозид C | 40,468 | 950 |
Ребаудиозид A | 40,745 | 788 |
Рубузозид | 41,474 | 642 |
Ребаудиозид B | 42,027 | 804 |
Стевиолбиозид | 42,368 | 642 |
Стевиол | 50,012 | 318 |
Изостевиол | 52,427 | 318 |
RT1 - Время выхода пика
Смотрите также фиг.4.
Как известно, градиент можно изменить для ускорения разделения (0-2 мин 80% ПФА, 20% ПФБ; 2-35 мин от 80% до 0% ПФА, от 20% до 100% ПФБ, 35,01-40 мин 80% ПФА, 20% ПФБ; скорость потока 0,35 мл/мин, инжектируемый объем: 5 мкл), например, для обеспечения возможности масс-спектрометрической идентификации стевиолгликозидов. Пример приведен на фиг.5.
Таблица 4.
Идентификация пика | RT (мин) | Мол.вес |
Ребаудиозид D | 14,08 | 1128 |
Ребаудиозид N | 14,33 | 1274 |
Ребаудиозид M | 14,42 | 1290 |
Впервые полученный стевиолгликозид (возможно Reb. O) | 14,75 | Не определен |
Ребаудиозид I | 15,97 | 1128 |
Ребаудиозид A | 16,29 | 966 |
Стевиозид | 16,43 | 804 |
Внедрение аналитического метода в развитие сельского хозяйства
Мы разработали стратегию оптимизации выбора конкретного селекционного посадочного материала растений стевии на основе содержания стевиолгликозидов. Хорошо известно, что исторически природные виды стевии содержат преимущественно стевиозид в качестве основного стевиолгликозида, но селекционное выращивание способствовало внедрению посадочного материала, в котором преобладает ребаудиозид А. Мы применили наш новый анализ для предоставления возможности идентификации селекционного посадочного материала, который в дальнейшем обеспечит ребаудиозид D или другие требуемые стевиолгликозиды с молекулярным весом (мол. вес), равным или больше, чем у ребаудиозида А (мол. вес 966 г/моль), в частности ребаудиозиды I, O, M, N, которые среди прочих впоследствии могут быть обнаружены в новом селекционном посадочном материале.
РАЗДЕЛЕНИЕ ТРЕБУЕМЫХ СТЕВИОЛГЛИКОЗИДОВ БЕЗ КРИСТАЛЛИЗАЦИИ
Затем мы преобразовали информационные данные, полученные в результате аналитического разделения стевиолгликозидов, в новый способ, который устраняет необходимость в выделении и очистке отдельного компонента (обычно ребаудиозида А) кристаллизацией. Кроме того, мы разработали систему растворителей, в которой используется пищевой этанол (спирт из зернового сырья) и вода, для разделения стевиолгликозидов, представляющих интерес, без необходимости кристаллизации.
Пример:
Общий экстракт получали, подвергая 208,6 г высушенных листьев экстракции горячей водой (3 л) в течение 2 ч при 95°С. Экстракт концентрировали под вакуумом при температуре менее 40°C, очищали центрифугированием, декантировали, охлаждали и высушивали лиофилизацией с выходом 76,5 г сухого общего экстракта. Часть общего экстракта (100 г, содержащие примерно 1,7 г сухого вещества) непосредственно фракционировали на препаративной колонке с обращенной фазой (RediSep С18, 360 г) с использованием градиента этанола в воде, как показано ниже:
Таблица 5.
Время (минуты) | % вода | % этанол |
0 | 100 | 0 |
10 | 100 | 0 |
38,2 | 0 | 100 |
44,1 | 0 | 100 |
44,1 | 50 | 50 |
50 | 50 | 50 |
Точку элюции заранее отмечали с использованием подлинных образцов ребаудиозидов А и D, которые выходят в диапазоне 25-30 мин, и фракции собирали через равные промежутки времени приблизительно в этом диапазоне, объединяли и высушивали в пересчете на композицию ВЭЖХ. Выделяли в общей сложности 628 мг стевиолгликозидов. Из этого образца выделяли 18 мг, содержащие около 23% ребаудиозида D, 21% ребаудиозидов N и M, 1,4% неохарактеризованных стевиолгликозидов, 2% ребаудиозида А и около 16% других известных стевиолгликозидов. Твердое вещество имело от почти белого до бежевого цвет и чистый сладкий вкус. Продукт подходит для использования в качестве подсластителя без дополнительной обработки или очистки.
Пример:
Общий экстракт получали, подвергая 208,6 г высушенных листьев экстракции горячей водой (3 л) в течение 2 ч при 95°С. Экстракт концентрировали под вакуумом при температуре менее 40°C, очищали центрифугированием, декантировали, охлаждали и высушивали лиофилизацией с выходом 76,5 г сухого общего экстракта. Часть общего экстракта (100 г, содержащие примерно 1,7 г сухого вещества) непосредственно фракционировали на препаративной колонке с обращенной фазой (RediSep С18, 360 г) с использованием градиента этанола в воде, как показано ниже:
Таблица 6.
Время (минуты) | % вода | % этанол |
0 | 100 | 0 |
10 | 100 | 0 |
38,2 | 0 | 100 |
44,1 | 0 | 100 |
44,1 | 50 | 50 |
50 | 50 | 50 |
Таблица 7.
Время (минуты) | Масса (мг) | Композиция (методом ВЭЖХ/CAD) | Внешний вид образца | Вкус (посредством 2 независимых оценок) |
22,8-23,6 | 78 | Компоненты, не являющиеся стевиолгликозидами | Светло-бежевое твердое вещество | Горький (не сладкий) |
23,6-25 | 18 | Преимущественно Reb. D, N, М | Средне-коричневое твердое вещество | Чистый сладкий вкус |
26-31,5 | 610 | Reb. А и более мелкие стевиолгликозиды | Светло-желтое твердое вещество | «Классический» вкус Reb. А, то есть сладкий с горькими нотами |
Точку элюции заранее отмечали с использованием подлинных образцов ребаудиозидов А и D, которые выходят в диапазоне примерно 25-30 мин, и фракции собирали через равные промежутки времени приблизительно в этом диапазоне, объединяли и высушивали в пересчете на композицию ВЭЖХ. Выделяли в общей сложности 628 мг стевиолгликозидов. Из этого образца выделяли 18 мг, содержащие около 23% ребаудиозида D, 21% ребаудиозидов N и M, 1,4% неохарактеризованных стевиолгликозидов, 2% ребаудиозида А и около 16% некоторых других известных стевиолгликозидов, присутствующих в небольших количествах. Твердое вещество имело от почти белого до светло-коричневого цвет и чистый сладкий вкус. Продукт подходит для использования в качестве подсластителя без дополнительной обработки или очистки.
Стевиолгликозиды, полученные способом по данному изобретению, могут быть включены в качестве высокоинтенсивного натурального подсластителя в пищевые продукты, напитки, фармацевтические композиции, косметические средства, жевательные резинки, настольные продукты, хлопья, молочные продукты, зубные пасты и другие композиции для полости рта и тому подобное. В вышеуказанных примерах приведены репрезентативные пропорции, которые могут быть использованы.
Кроме того, стевиолгликозиды можно использовать в качестве подсластителя не только для напитков, пищевых продуктов и других продуктов, предназначенных для потребления человеком, но и в корме для животных с улучшенными характеристиками.
При производстве пищевых продуктов, напитков, фармацевтических препаратов, косметических средств, настольных продуктов, жевательных резинок можно использовать традиционные способы, такие как смешивание, замешивание, растворение, маринование, пропитывание, перколяция, обсыпание, распыление, настаивание и другие способы.
Подсластитель, полученный в данном изобретении, можно использовать в сухой или жидкой формах. Его можно добавить до или после тепловой обработки пищевых продуктов. Количество подсластителя зависит от цели использования. Его можно добавить отдельно или в комбинации с другими соединениями.
Таблица 8.
Показана химическая структура стевиола и стевиолгликозидов, присутствующих в листьях Stevia rebaudiana Bertoni.
Патент США | 30 октября 2012 | лист 1 из 11 | США 8299224 В2 |
Название соединения | R1(С-19) | R2(С-13) |
1. Стевиол | H | H |
2. Стевиолмонозид | H | β-Glc |
3. Рубузозид | β-Glc | β-Glc |
4. Стевиолбиозид | H | β-Glc-β-Glc(2⇒1) |
5. Стевиозид | β-Glc | β-Glc-β-Glc(2⇒1) |
6. Ребаудиозид А | β-Glc | |
7. Ребаудиозид B | H | |
8. Ребаудиозид C (Дулькозид B) |
β-Glc | |
9. Ребаудиозид D | β-Glc-β-Glc(2⇒1) | |
10. Ребаудиозид E | β-Glc-β-Glc(2⇒1) | β-Glc-β-Glc(2⇒1) |
11. Ребаудиозид F | β-Glc | |
12. Дулькозид A | β-Glc | β-Glc-α-Rha(2⇒1) |
Таблица 9.
Предлагаемые структуры и их относительное процентное содержание в стевиолгликозидах из листьев S. rebaudiana Morita и S. rebaudiana Bertoni
Стевиолгликозид | R1 | R2 | Morita (%)1 | Bertoni (%)1,2 |
SG1 (стевиолмонозид) | H- | Glcβ1- | 1,7 | 1,7 |
SG2 (стевиолбиозид) | H- | Glcβ1-2Glcβ1- | 1,0 | 5,0 |
SG3 (рубузозид) | Glcβ1- | Glcβ1- | 0,8 | ND3 |
SG4 (дулькозид B)4 | H- | Rhaα1-2(Glcβ1-3)G1cβ1- | 0,6 | 0,8 |
SG5 (дулькозид A) | G1cβ1- | Rhaα1-2Glcβ1- | 0,3 | 2,6 |
SG6 (ребаудиозид B) | H- | Glcβ1-2(Glcβl-3)Glcβ1- | 2,5 | 2,0 |
SG7 (ребаудиозид G)4 | Glcβ1- | G1cβ1-3G1cβ1- | 1,1 | 0,8 |
SG8 (стевиозид) | Glcβ1- | Glcβ1-2Glcβ1- | 9,2 | 49,8 |
SG9 (ребаудиозид C) | Glcβ1- | Rhaα1-2(Glcβ1-3)G1cβ1- | 7,5 | 6,8 |
SG10 (ребаудиозид F) | G1cβ1- | Xylβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 1,9 | 1,4 |
SG11 (ребаудиозид A) | Glcβl- | Glcβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 61,6 | 21,5 |
SG12 (ребаудиозид I)4 | Glcβ1-3Glcβ1- | G1cβ1-2(Glcβ1-3)G1cβ1- | 0,1 | ND3 |
SG13 (ребаудиозид E) | Glcβ1-2Glcβ1- | Glcβ1-2Glcβ1- | 0,3 | 0,9 |
SG14 (ребаудиозид H)4 | Glcβ1- | G1cβ1-3Rhaα1-2(G1cβ1-3)Glcβ1- | 0,5 | ND3 |
SG15 (ребаудиозид L)4 | Glcβ1- | Glcβ1-6G1cβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 0,3 | ND3 |
SG16-I (ребаудиозид K)4 | Glcβ1-2Glcβ1- | Rhaα1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 0,3 | ND3 |
SG16-II (ребаудиозид J)4 | Rhaα1-2Glcβ1- | Glcβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 0,5 | 0,1 |
SG17 (ребаудиозид M)4 | Glcβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1 | Glcβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 1,0 | ND3 |
SG18 (ребаудиозид D) | G1cβ1-2Glcβ1- | Glcβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 2,1 | 0,4 |
SG19 (ребаудиозид N)4 | Rhaα1-2(Glcβ1-3)Glcβ | Glcβ1-2(Glcβ1-3)Glcβ1- | 1,4 | <0,1 |
SG20 (ребаудиозид 0)4 | Glcβ1-3Rhaα1-2(Glcβ1-3)G1cβ1- | Glcβ1-2(Glcβl-3)Glcβ1- | 0,6 | ND3 |
*из публикации Ohta и др. (2010). 1. Относительные количества выражены в процентах от суммы площадей детектируемых пиков на основе их УФ-поглощения при 210 нм методом Amide-SO/ВЭЖХ. Пропорция SG16-I и SG16-II получена относительной интенсивностью ионов продукта при m/z 787 и 803 соответственно, напряжением CID 60 В анализом ESI-MS/MS в качестве иона-предшественника [М-Н]- при m/z 1111. 2. Структуры были предложены на основании результатов сопоставления ВЭЖХ подвижности и анализов ESI-MS и MS/MS. 3. Не обнаружено. 4. Названия были предложены в данном исследовании.
Claims (21)
1. Способ получения комбинации двух или нескольких стевиолгликозидов, включающий:
a) экстракцию листьев стевии горячей водой,
b) очистку общего экстракта и
c) разделение комбинации двух или нескольких стевиолгликозидов методом непрерывной хроматографии,
где непрерывную хроматография осуществляется с использованием градиентного элюирования двумя или более растворителями, и градиента температуры, где два или более растворителей содержат воду, и
где комбинация двух или несколько стевиолгликозидов содержит менее чем 25% по массе ребаудиозида А.
2. Способ по п.1, в котором листья стевии не были высушены.
3. Способ по п.1, в котором очистка осуществляется центрифугированием.
4. Способ по п.1, в котором очистка осуществляется фильтрацией.
5. Способ по п.4, в котором фильтрация происходит с использованием полупроницаемой мембраны.
6. Способ по п.1, в котором градиентное элюирование двумя или более растворителями осуществляется этанолом и водой.
7. Способ по п.1, в котором разделение осуществляется посредством градиента воды при температуре от приблизительно 20°С до приблизительно 90°С.
8. Способ по п.1, в котором разделение осуществляется градиентным элюированием водой при температуре от приблизительно 30°С до приблизительно 60°С.
9. Способ по п.1, в котором используется фрактальный дизайн.
10. Способ по п.1, в котором используется многоходовой выходной клапан в сборе.
11. Способ по п.1, в котором непрерывная хроматография включает использование нескольких колонок, нескольких точек подачи и нескольких точек выгрузки между колонками.
12. Способ по п.1, в котором непрерывная хроматография включает использование постоянного запаса материала, который подвергается разделению, находясь в многоколоночной системе, и который непрерывно циркулирует в системе.
13. Способ по п.1, в котором хроматография включает регулирование запаса материала из любой колонки в серии, прежде чем он пройдет через все колонки.
14. Способ по п.1, в котором где градиентное элюирование представляет собой непрерывный градиент или ступенчатый градиент.
15. Способ по п.1, в котором не происходит стадия кристаллизации во время выделения комбинации двух или более стевиолгликозидов, где стевиолгликозиды содержат по меньшей мере одного из ребаудиозидов D, I, O, M и N.
16. Способ по п.1, в котором стадия разделения с помощью непрерывной хроматографии приводит к выделению двух или более стевиолгликозидов, выбранных из группы, включающей ребаудиозиды A, M, N, O, I и D.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461941018P | 2014-02-18 | 2014-02-18 | |
US61/941,018 | 2014-02-18 | ||
PCT/US2015/016269 WO2015126876A1 (en) | 2014-02-18 | 2015-02-18 | Process for separation, isolation and characterization of steviol glycosides |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2016137153A RU2016137153A (ru) | 2018-03-22 |
RU2016137153A3 RU2016137153A3 (ru) | 2018-10-04 |
RU2688669C2 true RU2688669C2 (ru) | 2019-05-22 |
Family
ID=52727367
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016137153A RU2688669C2 (ru) | 2014-02-18 | 2015-02-18 | Способ разделения, выделение и характеристики стевиолгликозидов |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11306114B2 (ru) |
EP (1) | EP3114131B1 (ru) |
JP (2) | JP2017507141A (ru) |
CN (1) | CN106061987B (ru) |
AU (1) | AU2015219212B2 (ru) |
BR (1) | BR112016018855B1 (ru) |
CA (1) | CA2939784C (ru) |
ES (1) | ES2919870T3 (ru) |
MX (1) | MX2016010720A (ru) |
RU (1) | RU2688669C2 (ru) |
WO (1) | WO2015126876A1 (ru) |
Families Citing this family (24)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9107436B2 (en) | 2011-02-17 | 2015-08-18 | Purecircle Sdn Bhd | Glucosylated steviol glycoside as a flavor modifier |
US10952458B2 (en) | 2013-06-07 | 2021-03-23 | Purecircle Usa Inc | Stevia extract containing selected steviol glycosides as flavor, salty and sweetness profile modifier |
CA3161755A1 (en) | 2014-01-10 | 2015-07-16 | Pictometry International Corp. | Unmanned aircraft structure evaluation system and method |
CN107072237B (zh) | 2014-09-02 | 2021-12-14 | 谱赛科有限责任公司 | 甜菊提取物 |
WO2016100689A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-23 | Cargill, Incorporated | Steviol glycoside compounds, compositions for oral ingestion or use, and method for enhancing steviol glycoside solubility |
US11399558B2 (en) | 2015-03-03 | 2022-08-02 | Heartland Consumer Products Llc | Rebaudioside-D containing sweetener compositions |
CA2980090A1 (en) | 2015-04-03 | 2016-10-06 | Dsm Ip Assets B.V. | Steviol glycosides |
CA2985669C (en) * | 2015-05-20 | 2022-05-03 | Cargill, Incorporated | Glycoside compositions |
WO2017075034A1 (en) * | 2015-10-26 | 2017-05-04 | Purecircle Usa Inc. | Steviol glycoside compositions |
EP3389403A4 (en) | 2015-12-15 | 2019-09-04 | PureCircle USA Inc. | STEVIOL GLYCOSIDE COMPOSITIONS |
CN105440091A (zh) * | 2015-12-24 | 2016-03-30 | 谱赛科(江西)生物技术有限公司 | 一种阴离子交换树脂去除甜菊糖苷rb的方法 |
US20190320699A1 (en) * | 2016-06-17 | 2019-10-24 | Cargill, Incorporated | Steviol glycoside compositions for oral ingestion or use |
US10085472B2 (en) | 2016-08-29 | 2018-10-02 | Pepsico, Inc. | Compositions comprising rebaudioside J |
US11653606B2 (en) * | 2016-12-01 | 2023-05-23 | Purecircle Usa Inc. | Stevia plant and uses thereof |
SG10202111903TA (en) * | 2017-03-31 | 2021-12-30 | Suntory Holdings Ltd | Novel steviol glycoside and production method therefor, and sweetener composition containing same |
WO2019067812A1 (en) * | 2017-09-28 | 2019-04-04 | Purecircle Usa Inc. | METHODS FOR PREPARING STEVIOL GLYCOSIDES AND USES THEREOF |
CN108558966A (zh) * | 2018-01-04 | 2018-09-21 | 常州嘉众新材料科技有限公司 | 一种富集甜菊糖中莱鲍迪苷d的生产方法 |
EP3813545A4 (en) * | 2018-05-08 | 2023-03-22 | EPC Natural Products Co., Ltd. | STEVIOL GLYCOSIDE COMPOSITIONS WITH ENHANCED FLAVOR |
EP4052772A4 (en) * | 2019-11-01 | 2023-10-18 | Suntory Holdings Limited | METHOD FOR PRODUCING CRYSTALLIZED PRODUCT CONTAINING REBAUDIOSIDE-D AND CRYSTALLIZED PRODUCT CONTAINING REBAUDIOSIDE-D |
AU2021260579A1 (en) | 2020-04-20 | 2022-12-01 | Cargill, Incorporated | Stabilized steviol glycoside malonic acid esters |
AU2021258172A1 (en) * | 2020-04-20 | 2022-11-17 | Cargill, Incorporated | Steviol glycoside malonic acid esters |
US20230329299A1 (en) * | 2020-10-13 | 2023-10-19 | Firmenich Sa | Malonyl steviol glycosides and their comestible use |
CN113229136B (zh) * | 2021-05-25 | 2022-02-11 | 南京农业大学 | 一种甜叶菊叶片品质育种亲本选配方法 |
JP2022189015A (ja) * | 2021-06-10 | 2022-12-22 | サントリーホールディングス株式会社 | 甘味料組成物 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999049724A1 (en) * | 1998-03-31 | 1999-10-07 | Her Majesty In Right Of Canada, Represented By The Minister Of Agriculture And Agri-Food Canada | Stevia rebaudiana with altered steviol glycoside composition |
US20060142555A1 (en) * | 2004-12-23 | 2006-06-29 | Council Of Scientific And Industrial Research | Process for production of steviosides from stevia rebaudiana bertoni |
RU2404688C2 (ru) * | 2007-03-14 | 2010-11-27 | Дзе Консентрейт Мэньюфектуринг Компани Оф Аиэлэнд | Диетические продукты типа напитков, содержащие ребаудиозид а, эритрит или тагатозу и подкислитель |
US20110183056A1 (en) * | 2008-10-03 | 2011-07-28 | Toyoshige Morita | New steviol glycoside |
CN102406113A (zh) * | 2011-09-30 | 2012-04-11 | 宁波绿之健药业有限公司 | Ra和rd复配甜菊糖的制备方法 |
US20130071339A1 (en) * | 2010-03-12 | 2013-03-21 | Avetik Markosyan | High-purity steviol glycosides |
WO2013096420A1 (en) * | 2011-12-19 | 2013-06-27 | The Coca-Cola Company | Methods for purifying steviol glycosides and uses of the same |
RU2656390C2 (ru) * | 2013-07-12 | 2018-06-05 | Дзе Кока-Кола Компани | Композиции и способы повышения растворимости ребаудиозида м |
Family Cites Families (46)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS51142570A (en) | 1975-06-04 | 1976-12-08 | Morita Kagaku Kogyo | Method of imparting sweetness to food or pharmaceutical agent |
GB1543167A (en) | 1976-01-08 | 1979-03-28 | Tate & Lyle Ltd | Sweeteners |
US4219571A (en) | 1978-06-15 | 1980-08-26 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Process for producing a sweetener |
US4361697A (en) | 1981-05-21 | 1982-11-30 | F. K. Suzuki International, Inc. | Extraction, separation and recovery of diterpene glycosides from Stevia rebaudiana plants |
US4612942A (en) | 1984-03-08 | 1986-09-23 | Stevia Company, Inc. | Flavor enhancing and modifying materials |
ES2046979T3 (es) | 1987-07-21 | 1994-02-16 | Roger H Giovanetto | Procedimiento para la obtencion de esteviosidos a partir de material vegetal bruto. |
US5135549A (en) * | 1991-01-30 | 1992-08-04 | The Board Of Trustees Of Southern Illinois University | Chromatographic technique and apparatus |
US5962678A (en) | 1996-09-13 | 1999-10-05 | Alberta Research Council | Method of extracting selected sweet glycosides from the Stevia rebaudiana plant |
US5972120A (en) | 1997-07-19 | 1999-10-26 | National Research Council Of Canada | Extraction of sweet compounds from Stevia rebaudiana Bertoni |
JP3604935B2 (ja) | 1999-01-14 | 2004-12-22 | 三和興産株式会社 | 糖類の精製方法 |
JP2003061700A (ja) | 2001-08-23 | 2003-03-04 | Wada Sugar Refining Co Ltd | 砂糖精製方法及びその設備 |
US7838044B2 (en) | 2004-12-21 | 2010-11-23 | Purecircle Sdn Bhd | Extraction, separation and modification of sweet glycosides from the Stevia rebaudiana plant |
US8318459B2 (en) | 2011-02-17 | 2012-11-27 | Purecircle Usa | Glucosyl stevia composition |
US7807206B2 (en) | 2005-10-11 | 2010-10-05 | Purecircle Sdn Bhd | Sweetner and use |
US7862845B2 (en) | 2005-10-11 | 2011-01-04 | Purecircle Sdn Bhd | Process for manufacturing a sweetener and use thereof |
US8257948B1 (en) | 2011-02-17 | 2012-09-04 | Purecircle Usa | Method of preparing alpha-glucosyl Stevia composition |
US8104330B2 (en) | 2006-02-09 | 2012-01-31 | Shimadzu Corporation | Method and apparatus for analysis by liquid chromatography |
US7927851B2 (en) | 2006-03-21 | 2011-04-19 | Vineland Research And Innovation Centre | Compositions having ent-kaurenoic acid 13-hydroxylase activity and methods for producing same |
JP4883449B2 (ja) | 2007-02-28 | 2012-02-22 | 日新製糖株式会社 | セラミド類含有組成物およびその製造方法 |
US8277862B2 (en) | 2007-03-14 | 2012-10-02 | Concentrate Manufacturing Company Of Ireland | Beverage products having steviol glycosides and at least one acid |
US8084073B2 (en) | 2007-03-14 | 2011-12-27 | Concentrate Manufacturing Company Of Ireland | Anisic acid modified steviol glycoside sweetened beverage products |
WO2009006200A1 (en) | 2007-06-29 | 2009-01-08 | Mcneil Nutritionals, Llc | Erythritol and stevia (rebaudioside a) containing tabletop sweeteners and methods of producing same |
CA2691678C (en) | 2007-06-29 | 2015-07-21 | Mcneil Nutritionals, Llc | Stevia-containing tabletop sweeteners and methods of producing same |
US7964232B2 (en) | 2007-09-17 | 2011-06-21 | Pepsico, Inc. | Steviol glycoside isomers |
EP2230939B1 (en) | 2007-12-27 | 2020-04-08 | Heartland Consumer Products LLC | Synergistic sweetening compositions |
US9005444B2 (en) * | 2008-05-13 | 2015-04-14 | Cargill, Incorporated | Separation of rebaudioside A from stevia glycosides using chromatography |
CN101366496B (zh) * | 2008-09-17 | 2011-12-21 | 无锡绿色分离应用技术研究所有限公司 | 一种从甜叶菊浓缩液中分离提纯甜菊甙ra和ss的方法 |
AU2010261471A1 (en) | 2009-06-16 | 2011-12-15 | Epc (Beijing) Natural Products Co., Ltd. | Composition comprising rebaudioside D for reducing or eliminating aftertaste and preparation method thereof |
JP5570162B2 (ja) * | 2009-08-31 | 2014-08-13 | 三栄源エフ・エフ・アイ株式会社 | レバウディオサイドaの精製方法 |
US8299224B2 (en) | 2009-10-15 | 2012-10-30 | Purecircle Sdn Bhd | High-purity Rebaudioside D |
USPP23728P3 (en) | 2010-01-22 | 2013-07-09 | Purecircle Sdn Bhd | Stevia plant named ‘AKH L4’ |
USPP23164P3 (en) | 2010-01-22 | 2012-11-06 | Purecircle Sdn Bhd | Stevia plant named ‘AKH L1’ |
KR101598935B1 (ko) | 2010-04-16 | 2016-03-03 | 씨제이제일제당(주) | 레바우디오사이드 a의 생산 공정에서 발생하는 부산물을 재활용하여 고수득율의 레바우디오사이드 a를 제조하는 방법 |
US9578895B2 (en) * | 2010-08-23 | 2017-02-28 | Epc (Beijing) Natural Products Co., Ltd. | Rebaudioside A and stevioside compositions |
CN108690101B (zh) | 2010-11-19 | 2022-05-24 | 嘉吉公司 | 用于富集衍生自甜叶菊的糖苷组合物中的新蛇菊苷b和/或新蛇菊苷d的方法 |
JP6290624B2 (ja) | 2010-12-13 | 2018-03-07 | カーギル・インコーポレイテッド | 配糖体混合物 |
CN102127129A (zh) | 2010-12-13 | 2011-07-20 | 辽宁千千生物科技有限公司 | 一种用新鲜甜叶菊叶提取甜菊糖甙的方法 |
CA2857085A1 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Glg Life Tech Corporation | Processes of purifying steviol glycosides |
JP2014502505A (ja) | 2010-12-31 | 2014-02-03 | ジー エル ジー ライフ テック コーポレーション | 高いレバウディオシドa植物ならびにその生産方法および使用 |
CN108464425B (zh) | 2011-01-28 | 2021-10-01 | 泰特&莱尔组分美国公司 | 甜叶菊提取物和甜味组合物 |
JP2011105757A (ja) | 2011-02-03 | 2011-06-02 | Moriyuki Yamane | 梅抽出液 |
EP2672839B1 (en) | 2011-02-08 | 2018-11-21 | Heartland Consumer Products LLC | Method of making an enhanced natural sweetener |
US8520527B2 (en) | 2011-02-23 | 2013-08-27 | Arris Enterprises, Inc. | Identifying cloned devices |
US9795156B2 (en) | 2011-03-17 | 2017-10-24 | E.P.C (Beijing) Plant Pharmaceutical Technology Co., Ltd | Rebaudioside B and derivatives |
JP5898516B2 (ja) | 2012-02-16 | 2016-04-06 | キリンホールディングス株式会社 | 高香味脱カフェイン茶飲料 |
CN103012516B (zh) | 2012-12-27 | 2015-05-20 | 无锡金博甜菊国际贸易有限公司 | 一种甜菊糖的制备方法 |
-
2015
- 2015-02-18 JP JP2016552996A patent/JP2017507141A/ja active Pending
- 2015-02-18 CA CA2939784A patent/CA2939784C/en active Active
- 2015-02-18 WO PCT/US2015/016269 patent/WO2015126876A1/en active Application Filing
- 2015-02-18 EP EP15711909.0A patent/EP3114131B1/en active Active
- 2015-02-18 MX MX2016010720A patent/MX2016010720A/es unknown
- 2015-02-18 BR BR112016018855-1A patent/BR112016018855B1/pt active IP Right Grant
- 2015-02-18 AU AU2015219212A patent/AU2015219212B2/en active Active
- 2015-02-18 ES ES15711909T patent/ES2919870T3/es active Active
- 2015-02-18 RU RU2016137153A patent/RU2688669C2/ru active
- 2015-02-18 US US14/624,758 patent/US11306114B2/en active Active
- 2015-02-18 CN CN201580009075.9A patent/CN106061987B/zh active Active
-
2020
- 2020-12-17 JP JP2020209676A patent/JP7277427B2/ja active Active
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999049724A1 (en) * | 1998-03-31 | 1999-10-07 | Her Majesty In Right Of Canada, Represented By The Minister Of Agriculture And Agri-Food Canada | Stevia rebaudiana with altered steviol glycoside composition |
US20060142555A1 (en) * | 2004-12-23 | 2006-06-29 | Council Of Scientific And Industrial Research | Process for production of steviosides from stevia rebaudiana bertoni |
RU2404688C2 (ru) * | 2007-03-14 | 2010-11-27 | Дзе Консентрейт Мэньюфектуринг Компани Оф Аиэлэнд | Диетические продукты типа напитков, содержащие ребаудиозид а, эритрит или тагатозу и подкислитель |
US20110183056A1 (en) * | 2008-10-03 | 2011-07-28 | Toyoshige Morita | New steviol glycoside |
US20130071339A1 (en) * | 2010-03-12 | 2013-03-21 | Avetik Markosyan | High-purity steviol glycosides |
CN102406113A (zh) * | 2011-09-30 | 2012-04-11 | 宁波绿之健药业有限公司 | Ra和rd复配甜菊糖的制备方法 |
WO2013096420A1 (en) * | 2011-12-19 | 2013-06-27 | The Coca-Cola Company | Methods for purifying steviol glycosides and uses of the same |
RU2656390C2 (ru) * | 2013-07-12 | 2018-06-05 | Дзе Кока-Кола Компани | Композиции и способы повышения растворимости ребаудиозида м |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
G.I. Kovylyaeva et al., Chemistry of Natural Compounds, 2007, vol. 43, No 1, стр. 82-84. Masaya Ohta et al., J. Appl. Glycosci., 2010, 57, 199-209. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
BR112016018855A8 (pt) | 2020-06-30 |
JP2021052788A (ja) | 2021-04-08 |
JP2017507141A (ja) | 2017-03-16 |
JP7277427B2 (ja) | 2023-05-19 |
US11306114B2 (en) | 2022-04-19 |
CN106061987A (zh) | 2016-10-26 |
AU2015219212B2 (en) | 2019-03-14 |
CA2939784C (en) | 2023-01-24 |
CA2939784A1 (en) | 2015-08-27 |
EP3114131A1 (en) | 2017-01-11 |
MX2016010720A (es) | 2016-11-23 |
WO2015126876A1 (en) | 2015-08-27 |
BR112016018855B1 (pt) | 2021-08-31 |
ES2919870T3 (es) | 2022-07-28 |
AU2015219212A1 (en) | 2016-09-08 |
CN106061987B (zh) | 2023-12-01 |
RU2016137153A (ru) | 2018-03-22 |
RU2016137153A3 (ru) | 2018-10-04 |
EP3114131B1 (en) | 2022-04-13 |
US20150257424A1 (en) | 2015-09-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7277427B2 (ja) | ステビオール配糖体の分離、単離及び評価のための方法 | |
Puri et al. | Downstream processing of stevioside and its potential applications | |
US11950610B2 (en) | Glucosyl Rebaudioside C | |
US20210236641A1 (en) | High-Purity Rubusoside And Process For Producing Of The Same | |
DK3217813T3 (en) | Composition comprising glycosylated steviol glycosides | |
Rajasekaran et al. | Production of steviosides in ex vitro and in vitro grown Stevia rebaudiana Bertoni | |
CN101001539A (zh) | 天然甜味剂 | |
CA2857080A1 (en) | Sweetener compositions and methods of making same | |
US20150118379A1 (en) | High-purity rubusoside and process for producing of the same | |
US11453693B2 (en) | Stevia-derived molecules, methods of obtaining such molecules, and uses of the same | |
Prakash et al. | Steviol glycosides: natural noncaloric sweeteners | |
US20130284164A1 (en) | Processes of Purifying Steviol Glycosides Reb C | |
Inglett | Intense sweetness of natural origin | |
Formigoni et al. | Conventional extraction techniques | |
KR101914388B1 (ko) | 감미질이 개선된 효소처리 스테비아 조성물이 함유된 감미료 | |
KR102234567B1 (ko) | 호박덩굴손 유래 신규화합물 및 이의 용도 | |
WO2019099118A1 (en) | Stevia-derived molecules, methods of obtaining such molecules, and uses of the same | |
Chóez-Guaranda et al. | STEVIA REBAUDIANA: AQUEOUS EXTRACTION OF DITERPENOID GLYCOSIDES AS A POTENTIAL REPLACEMENT FOR ARTIFICIAL SWEETENERS |