RU2687254C1 - N-гетероциклические производные борниламина в качестве ингибиторов ортопоксвирусов - Google Patents

N-гетероциклические производные борниламина в качестве ингибиторов ортопоксвирусов Download PDF

Info

Publication number
RU2687254C1
RU2687254C1 RU2018135000A RU2018135000A RU2687254C1 RU 2687254 C1 RU2687254 C1 RU 2687254C1 RU 2018135000 A RU2018135000 A RU 2018135000A RU 2018135000 A RU2018135000 A RU 2018135000A RU 2687254 C1 RU2687254 C1 RU 2687254C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
inhibitors
orthopoxvirus
heterocyclic
compounds
mhz
Prior art date
Application number
RU2018135000A
Other languages
English (en)
Inventor
Ольга Ивановна Яровая
Анастасия Сергеевна Соколова
Николай Иванович Бормотов
Лариса Николаевна Шишкина
Ольга Алексеевна Серова
Ринат Амирович Максютов
Нариман Фаридович Салахутдинов
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН)
Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН), Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова Сибирского отделения Российской академии наук (НИОХ СО РАН)
Priority to RU2018135000A priority Critical patent/RU2687254C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2687254C1 publication Critical patent/RU2687254C1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/10—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms
    • C07D211/14—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with radicals containing only carbon and hydrogen atoms attached to ring carbon atoms with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4453—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine only substituted in position 1, e.g. propipocaine, diperodon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к новым соединениям общей формулы I а-с. Технический результат: получены новые соединения, которые могут использоваться в качестве ингибиторов репродукции ортопоксвирусов. 2 табл., 2 пр.

Description

Изобретение относится к химии и медицине, а именно к лекарственным средствам, конкретно, к соединениям общей формулы I а-с (включая их пространственные изомеры, в том числе оптически активные формы):
Figure 00000001
где Х=CHCH3, n=1 Ia; Х=O, n=2 Ib; X=NCH3, n=2 Ic. Данные соединения I а-с могут использоваться в качестве ингибитора репродукции ортопоксвирусов и могут быть применены в медицине, вирусологии и фармакологии.
Благодаря программе глобальной ликвидации вирус натуральной оспы (ВНО) был элиминирован из окружающей среды. При этом в связи с прекратившейся с 1980 г. всеобщей вакцинацией против ВНО в настоящее время более половины населения Земли лишено противооспенного иммунитета. Вместе с тем, угроза возникновения оспы существует, поскольку невозможно исключить наличие нелегального хранения ВНО и преднамеренного использования против населения природных или рекомбинантных штаммов ВНО, а также распространения ВНО из мерзлотных грунтов с останками умерших от оспы. Кроме того, опасность для человека представляют и другие ортопоксвирусы, например, вирусы оспы обезьян и оспы коров, которые циркулируют в популяциях животных, эволюционируют, распространяются и периодически вызывают вспышки заболеваний среди людей.
В настоящее время в мире нет официально зарегистрированных химиопрепаратов для защиты людей от ВНО и других патогенных для человека ортопоксвирусов. В настоящее время проводятся клинические испытания на территории США два перорально биодоступных противооспенных препарата: ST-246 (Tecovirimat, ТРОХХ®, N-(6,8-диоксо-7-азатрицикло[3.3.2.02,4]дец9-ен-7-ил)-4-(трифторметил)бензамидметил) и СМХ001 (Brincidofovir, 3-(пентадецилокси)пропил((S)-1-(4-амино-2оксопиримидин-1(2Н)-ил)-3-гидроксипропан-2-илокси)метилфосфонат). Препарат СМХ001 представляет собой липофильный нуклеотидный аналог Цидофовира (Cidofovir CDV) (рисунок 1). CDV (Vistide®) является противовирусным препаратом, используемым для лечения цитомегаловирусного ретинита, и показал активность в летальных моделях поксвирусной инфекции с использованием мышей и обезьян. Хотя CDV является единственным противовирусным препаратом, который в настоящее время доступен для использования в случае вспышки оспы, он не зарегистрирован как препарат, разрешенный для лечения ортопоксвирусных инфекций. Кроме того, Cidofovir имеет низкую иероральную биодоступность и может быть токсичным для почек. ST-246 был разработан SIGA Technologies Inc. (США). Его механизм действия отличается от механизма CDV, который ингибирует репликацию вирусной ДНК. Мишенью ST-246 является высококонсервативный вирусный кодируемый белок р37, присутствующий во всех ортопоксвирусах.
Figure 00000002
Таким образом, наиболее близким к заявляемому соединению - прототипом, является цидофовир. Недостатком указанного препарата является не высокая активность в отношении вируса осповакцины.
Задачей изобретения является создание нового класса эффективных ингибиторов репродукции вирусов из рода Orthopoxvirus.
Технический результат: расширение ассортимента ингибиторов репродукции ортопоксвирусов.
Поставленная задача решается новыми соединениями общей формулы I а-с, обладающими выраженными свойствами ингибиторов репродукции вируса осповакцины.
Figure 00000003
где X=CHCH3, n=1 Ia; X=О, n=2 Ib; X=NCH3, n=2 Ic.
Соединения общей формулы I, после проведения углубленных фармакологических исследований, могут использоваться, как в чистом виде, так и в качестве компонента новых низкотоксичных высокоэффективных против вируса осповакцины лекарственных форм.
Цитотоксичность и противовирусную активность синтезированных производных в отношении VV оценивали с использованием адаптированного колориметрического метода в культуре клеток Vero (Селиванов Б.А., Тихонов А.Я., Веланов Е.Ф., Бормотов Н.И., Кабанов А.С., Мазурков О.Ю., Серова О.А., Шишкина Л.Н., Агафонов А.П., Сергеев А.Н. Синтез и противовирусная активность 1-арил-3-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло-[5.3.2.02,6.08,10]додец-11-ен-4-ил}мочевин. Химико-фармацевтический журнал. 2017. Т. 51. №6. С. 13-17]. В качестве положительного контроля использовался коммерчески доступный препарат Cidofovir (Heritage Consumer Products, LLC, США).
Синтез соединений I а-с по схеме 1. Взаимодействие изоборниламина 3, полученного из оксима камфоры 2, с соответствующим хлорангидридами 2-хлоруксуной и 3-хлорпропионовой кислоты привело к образованию ключевых промежуточных продуктов 3 и 4. Полученные амиды нуклеофильным замещением соответствующими гетероциклами были трансформированы в целевые продукты I а-с.
Figure 00000004
Схема 1. Реагенты и условия: (i) NH2OH⋅HCl, NaOAc, микроволновой нагрев; (ii) NiCl2, NaBH4, MeOH, -30°C; (iii) 2-хлорацетил/3-хлорпропаноил хлорид, CH2Cl2, Et3N, 25°C; (iv) соответствующий гетероцикл, CH2Cl2, Et3N, кипячение.
Спектральные исследования выполнены в Химическом Сервисном Центре коллективного пользования СО РАН. Величины удельного вращения определяли на спектрометре PolAAr 3005. Спектры ЯМР 1Н и 13С регистрировали на спектрометре Bruker AV-400 (1Н: 400.13 МГц, 13С: 100.61 МГц. В качестве внутреннего стандарта использовали остаточные сигналы растворителя - хлороформа (1Н 7.24, 13С 76.90 м.д.). Нумерация атомов в соединениях дана для отнесения сигналов в спектрах ЯМР и не совпадает с нумерацией атомов в номенклатурном названии. Масс-спектры высокого разрешения записывали на спектрометре DFS ThermoScientific в режиме полного сканирования в диапазоне m/z 0-500, ионизация электронным ударом 70 эВ при прямом вводе образца. Разделение продуктов реакций проводили с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (60-200 μ, Masherey-Nagel). Хромато-масс-спектры записывали на газовом хроматографе Agilent 7890 А с квадрупольным масс-спектрометром Agilent 5975С в качестве детектора, кварцевая колонка HP-5MS 30000 0.25 мм, газ-носитель гелий. Удельное вращение выражено в (град⋅мл)⋅(г⋅дм)-1, концентрация раствора (г)⋅(100 мл)-1. Растворители перед использованием сушились и перегонялись. Изобретение иллюстрируется следующими примерами:
Пример 1. Синтез 2-Хлор-N-((1R,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамида 4.
К смеси амина 3 (0,012 моль), который был синтезирован по методике, описанной в работе [Sokolova AS, Pavlova A, Komarova NI, Ardashov OV, Shernyukov AV, Gatilov YV, Yarovaya OI, Tolstikova TG, Salakhutdinov NF. Synthesis and analgesic activity of new α-truxillic acid derivatives with monoterpenoid fragments. Med Chem Res 2016; 25:1608-1615] и Et3N (0,012 моль) в 20 мл сухого CH2Cl2 при 15-18°С в атмосфере Ar добавляли хлорацетилхлорид (0,017 моль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Органический слой промывали насыщенным раствором NaCl и экстрагировали CHCl3. Объединенную органическую фазу сушили над безводным Na2SO4 и растворитель удаляли. Полученный остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
2-Хлор-N-((1R,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамид 4.
Figure 00000005
Выход 65%. ЯМР 1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 0.82 (6Н, с, Ме-8, Ме-10), 0,92 (3Н, с, Ме-9), 1.10-1.18 (1Н, м, Н-4эндо), 1.23-1.30 (1Н, м, Н-5эндо), 1.55-1.63 (2Н, м, Н-5экзо, Н-4экзо), 1.65-1.72 (1Н, м, Н-4экзо), 1.76 (1Н, т, J3,2экзо=J3,4экзо=4.3, Н-3), 1.85 (1Н, дд, J-9.0, 14.0, Н-2экзо), 3.86 (1Н, дт, J=4.9, 9.2, Н-1экзо), 4.02 (2Н, АВ-д, J=2.7, Н-11), 6.27 (1Н, N-H). ЯМР 13С (100 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 164.73 с (С-11), 56.85 д (С-1), 48.42 с (С-6), 46.96 с (С-7), 44.73 д (C-3), 42.75 д (С-12), 38.74 т (С-2), 35.68 т (С-5), 26.84 т (С-4), 20.07 к, 19.93 к (Ме-8, Ме-9), 11.59 к (Me-10).
Figure 00000006
(CHCl3, с=0.6). Найдено: m/z 229.1228 [М]+ C12H20O1N1C1. Вычислено: М=229.1225.
Пример 2. Синтез 3-Хлор-N-((1R,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло [2.2.11 гептан-2-ил)пропанамида 5.
К раствору 3-хлорпропановой кислоты в сухом CH2Cl2 добавели избыток оксалилхлорида и N,N-диметилформамид (одна капля). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч в атмосфере Ar. Избыток оксалилхлорида удаляли на роторном испарителе. Полученный 3-хлорпропаноилхлорид использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. К раствору амина 3 (15 ммоль) в CH2Cl2 добавили 3-хлорпропаноилхлорид (20 ммоль) в CH2Cl2 (5 мл) и Et3N (15 ммоль) при 0-5°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч в атмосфере Ar. Органический слой промывали насыщенным раствором NaCl и экстрагировали CH2Cl2. Объединенную органическую фазу сушили над безводным Na2SO4, растворитель удаляли. Полученный остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3-Хлор-N-((1R,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил)пронанамид 5.
Figure 00000007
Выход 62%. ЯМР 1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 0.80 (3Н, с, Ме-9), 0.82 (3Н, с, Me-10), 0.89 (3Н, с, Ме-8), 1.08-1.15 (1Н, м, Н-4эндо), 1.20-1.28 (1Н, м, Н-5эндо), 1.49-1.61 (2Н, м, Н-2эндо, Н-5экзо), 1.62-1.69 (1Н, м, Н-4экзо), 1.70-1.74 (1Н, м, Н-3), 1.83 (1Н, дд, J=9.0, 14.0, Н-2экзо), 2.81 (2Н, т, J=6.7, Н-12), 3.72 (2Н, т, J=6.7, H-13), 3.88 (1Н, дт, J=5.0, 9.2, Н-1экзо). ЯМР 13С (100 МГц, CDC13, δ, м.д.): 174.49 с (С-11), 57.01 д (С-1), 48.36 с (С-6), 46.93 с (С-7), 44.61 д (С-3), 40.38 т (С-13), 39.71 д (С-12), 38.72 т (С-2), 35.69 т (С-5), 26.77 т (С-4), 20.11 к, 20.05 к (Ме-8, Ме-9), 11.59 к (Ме-10).
Figure 00000008
(CHCl3, с=0.7). Найдено: m/z 243.1384 [M]+ C13H22O1N1C1. Вычислено: М=243.1385.
Пример 3. Общая синтетическая методика для соединений I а-с.
Смесь ацетамида 6 или 7 (2 ммоль), соответствующего амина (2,2 ммоль), Et3N (2,2 ммоль) и 10 мл CH2Cl2 кипятили в течение 12 часов. После завершения реакции реакционную смесь промывали насыщенным раствором NaCl и дважды экстрагировали CHCl3. Объединенный органический слой сушили безводным Na2SO4 и упарили. Остаток хроматографировали на SiO2, используя в качестве элюента гексан/этилацетат (100:0→0:100) + метанол (1%).
2-(4-Метилпиперидин-1-ил)-N-((1R,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил)ацетамид Ia
Figure 00000009
Выход 45%. ЯМР 1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 0.79 (3H, с, Ме-10), 0.82 (3H, с, Ме-8), 0,89 (3Н, д, J=6.3, Ме-18), 0.91 (3Н, с, Ме-9), 1.08-1.4 (5Н, м, Н-4эндо, Н-5эндо, Н-14а, Н-15, Н-16а), 1.49-1.67 (4Н, м, Н-5экзо, Н-4экзо, Н-14е, Н-16е), 1.72 (1Н, м, Н-3), 1.82 (1Н, дд, J=9.0, 14.0, Н-2экзо), 1.85-1.94 (2Н, Н-13е, Н-17е), 2.68-2.80 (2Н, м, Н-13е, Н-17е), 2.90 (2Н, АВ-д, Н-12), 3.84 (1Н, м, Н-1экзо), 7.49 (1Н, N-H). ЯМР 13С (100 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 169.56 с (С-11), 61.61 т (С-12), 55.57 д (С-1), 54.24 т (С-13, С-17), 48.24 с (С-6), 46.89 с (С-7), 44.71 д (С-3), 39.06 т (С-2), 35.70 т (С-5), 34.60 т (С-14, С-16), 29.88 д (С-15), 26.88 т (С-4), 21.67 к (Ме-18), 20.08 к, 19.90 к (Ме-8, Me-9), 11.84 к (Ме-10).
Figure 00000010
(CHCl3, с=1.1). Найдено: m/z 292.2514 [M]+ C18H32O1N2. Вычислено: М=292.2509.
3-Морфолино-N-((1R,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил)пропанамид Ib.
Figure 00000011
Выход 43%. ЯМР 1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 0.80 (3H, с, Ме-10), 0.81 (3Н, с, Ме-8), 0.91 (3Н, с, Ме-9), 1.07-1.15 (1Н, м, Н-4эндо), 1.20-1.29 (1Н, м, Н-5эндо), 1.45-1.56 (2Н, м, Н-5экзо, Н-2эндо), 1.61-1.71 (2Н, м, Н-4экзо, Н-3), 1.82 (1Н, дд, J=9.0, 14.0, Н-2экзо), 2.33-2.37 (2Н, м, Н-12), 2.40-2.47 (4Н, уш. с, Н-14, Н-15), 2.50-2.57 (2Н, м, Н-13), 3.63-3.73 (4Н, м, Н-16, Н-17), 3.84 (1Н, дт, J=4.9, 9.2, Н-1экзо), 8.10 (1H, N-H). ЯМР 13С (100 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 171.2 с (С-11), 66.37 т (С-16, С-17), 55.96 д (С-1), 54.78 т (С-13), 52.93 т (С-14, С-15), 48.10 с (С-6), 46.86 с (С-7), 44.68 д (С-3), 39.16 т (С-2), 35.81 т (С-5), 31.27 т (С-12), 26.83 т (С-4), 20.56 к, 20.03 к (Ме-8, Ме-9), 11.81 к (Ме-10).
Figure 00000012
(CHCl3, с=0.6). Найдено: m/z 294.2300 [M]+ C17H30O2N2. Вычислено: М=294.2302.
2-(4-Метилпиперазин-1-ил)-N-((1R,2R,4R)-1,7,7-триметилбицикло|2.2.1]гептан-2-ил)ацетамид Ic
Figure 00000013
Выход 63%. ЯМР 1Н (400 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 0.75 (3Н, с, Ме-10), 0.78 (3Н, с, Ме-8), 0.86 (3Н, с, Ме-9), 1.05-1.12 (1Н, м, Н-4эндо), 1.19-1.27 (1Н, м, Н-5эндо), 1.45-1.54 (2Н, м, Н-5экзо, Н-2эндо), 1.59-1.66 (1Н, м, Н-4экзо), 1.66-1.70 (1Н, м, Н-3), 1.78 (1Н, дд, J=9.0, 14.0, Н-2экзо), 2.21 (3Н, с, Ме-17), 2.29-2.55 (8Н, м, Н-13, Н-14, Н-15, Н-16), 2.91 (2Н, АВ-д, J=3.8, Н-12), 3.80 (1Н, дт, J=4.9, 9.2, Н-1экзо), 7.33 (1Н, N-H). ЯМР 13С (100 МГц, CDCl3, δ, м.д.): 168.89 с (С-11), 60.99 т (С-12), 55.58 д (С-1), 55.16 т (С-13, С-14), 53.19 т (С-16, С-15), 48.18 с (С-6), 46.86 с (С-7), 45.74 к (Me-17), 44.64 д (С-3), 39.01 т (С-2), 35.62 т (С-5), 26.80 т (С-4), 20.00 к, 19.98 к (Ме-8, Ме-9), 11.83 к (Ме-10).
Figure 00000014
(CHCl3, с=0.9). Найдено: m/z 293.2460 [М]+ C17H31O1N3. Вычислено: М=293.2462.
Определение противовирусного действия соединений I а-с в отношении вирусов осповакцины (штамм Копенгаген) и оспы мышей (штамм К-1) в культуре клеток Vero
В работе были использованы типичные представители ортопоксвирусов - вирус осповакцины (штамм Копенгаген) и эктромелии (оспы мышей, штамм К-1), полученные из Государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций и риккстсиозов ФБУН ГНЦ БВ «Вектор» Роспотребнадзора.
Вирусы нарабатывали в культуре клеток Vero. Концентрацию вирусов в культуральной жидкости определяли путем титрования методом бляшек в культуре клеток Vero, рассчитывали и выражали в десятичных логарифмах бляшко-образующих единиц в 1 мл (lg БОЕ/мл). Концентрация вирусов в использованных в работе образцах составляла от 5,6 до 6,1 lg БОЕ/мл. Наработанные и использованные в работе серии вирусов с указанным титром хранили при -70°С.
Оценку противовирусной эффективности препаратов проводили по адаптированной и модифицированной нами методике [Селиванов Б.А., Тихонов А.Я., Беланов Е.Ф., Бормотов Н.И., Кабанов А.С., Мазурков О.Ю., Серова О.А., Шишкина Л.Н., Агафонов А.П., Сергеев А.Н. Синтез и противовирусная активность 1-арил-3-{3,5-диоксо-4-азатетрацикло-[5.3.2.02,6.08,10|додец-11-ен-4-ил}мочевин // Химико-фармацевтический журнал. 2017. Т. 51. №6. С. 13-17]. В качестве препарата сравнения использовали коммерчески доступный препарат Цидофовир (Cidofovir, Vistide) производства Gilead Sciences Inc. (США).
В лунки 96-луночных планшетов, содержащих монослой клеток Vero в 100 мкл среды DMEM с 2% эмбриональной сыворотки, сначала вносили по 50 мкл серийных разведений исследуемых соединений, а потом по 50 мкл разведения ортопоксвируса в дозе 1000 БОЕ/лунку. Токсическая активность соединений определялась по гибели клеток под воздействием препарата в лунках планшета, в которые вирус не вносили. В качестве контролей использовали монослои клеток в лунках планшета, в которые вносили вирус без соединений (контроль вируса) и монослои клеток в лунках, в которые не вносили ни вирус, ни соединения (контроль культуры клеток). После инкубирования в течение 4 сут, монослой клеток окрашивали витальным красителем нейтральным красным в течение 2 ч. После удаления красителя и отмывки лунок от его несвязавшейся фракции добавляли лизирующий буфер.
Figure 00000015
Примечание:
ТС50 - токсическая концентрация препарата, при которой разрушается 50% клеток в неинфицированном монослое;
IC50 - ингибирующая концентрация препарата, при которой не разрушается 50% клеток в инфицированном монослое;
SI - индекс селективности препарата (TC50/IC50); данные представлены в виде М±I95, где М среднее значение; I95 - 95%-й доверительный интервал; n=3 количество повторов измерения ТС50 и IC50.
Количество красителя, адсорбированное живыми клетками монослоя, оценивали по оптической плотности (ОП), которая является показателем количества неразрушенных под влиянием вируса клеток в монослое. ОП измеряли на спектрофотометре Emax (Molecular Devices, США) при длине волны 490 нм. Учет результатов проводили с использованием планшетного спектрофотометра Emax и программы SoftMax 4.0 (Molecular Devices, США), которая автоматически рассчитывала 50% токсическую концентрацию (ТС50 в μМ) и 50% ингибирующую (эффективную) концентрацию (IC50 в μМ) препаратов. По соотношению 50% токсической и эффективной концентраций определяли индекс селективности (SI) препарата в отношении вируса: SI=TC50/IC50 (таблицы 1 и 2).
Figure 00000016
Примечание: см. примечание к таблице 1.
Таким образом, заявленные соединения обладают противовирусной активностью в отношении вирусов осповакцины и оспы мышей (эктромелии) типичных представителей ортопоксвирусов.

Claims (4)

  1. N-гетероциклические производные борниламина общей формулы Ia-с
  2. Figure 00000017
  3. где X=СНСН3, n=1 Ia; X=О, n=2 Ib; X=NCH3, n=2 Ic,
  4. в качестве ингибиторов репродукции ортопоксвирусов.
RU2018135000A 2018-10-03 2018-10-03 N-гетероциклические производные борниламина в качестве ингибиторов ортопоксвирусов RU2687254C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018135000A RU2687254C1 (ru) 2018-10-03 2018-10-03 N-гетероциклические производные борниламина в качестве ингибиторов ортопоксвирусов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018135000A RU2687254C1 (ru) 2018-10-03 2018-10-03 N-гетероциклические производные борниламина в качестве ингибиторов ортопоксвирусов

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2687254C1 true RU2687254C1 (ru) 2019-05-08

Family

ID=66430686

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018135000A RU2687254C1 (ru) 2018-10-03 2018-10-03 N-гетероциклические производные борниламина в качестве ингибиторов ортопоксвирусов

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2687254C1 (ru)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2459619C2 (ru) * 2006-12-06 2012-08-27 Санофи-Авентис Мочевина и сульфамидные производные в качестве ингибиторов tafia
EA020307B1 (ru) * 2002-05-17 2014-10-30 Дипартмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисез Замещенное производное этилендиамина для лечения микобактериальных заболеваний и фармацевтическая композиция на его основе

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA020307B1 (ru) * 2002-05-17 2014-10-30 Дипартмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисез Замещенное производное этилендиамина для лечения микобактериальных заболеваний и фармацевтическая композиция на его основе
RU2459619C2 (ru) * 2006-12-06 2012-08-27 Санофи-Авентис Мочевина и сульфамидные производные в качестве ингибиторов tafia

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7451626B2 (ja) デングウイルス複製阻害剤としての一または二置換インドール誘導体
Sokolova et al. Discovery of a New Class of Inhibitors of Vaccinia Virus Based on (−)‐Borneol from Abies sibirica and (+)‐Camphor
KR102478311B1 (ko) 뎅기 바이러스 복제 억제제로서의 １치환 또는 ２치환 인돌 유도체
KR102478309B1 (ko) 뎅기 바이러스 복제 억제제로서의 １치환 또는 ２치환 인돌
Suslov et al. New chemical agents based on adamantane–monoterpene conjugates against orthopoxvirus infections
UA122973C2 (uk) Похідні моно- або дизаміщених індолів як інгібітори реплікації вірусів денге
Duran et al. New chalcone derivatives as effective against SARS‐CoV‐2 agent
AU2015339223A1 (en) Methods for treating Filoviridae virus infections
Kovaleva et al. Synthesis of D-(+)-camphor-based N-acylhydrazones and their antiviral activity
KR20170103820A (ko) 뎅기 바이러스 복제 억제제로서의 인돌 유도체
KR20220121239A (ko) 신규한 갑상선 호르몬 모방제
UA120527C2 (uk) 4-заміщені сполуки бензоксаборолу та їх застосування
Desai et al. Inhibition of diverse opportunistic viruses by structurally optimized retrograde trafficking inhibitors
Sokolova et al. Quaternary ammonium salts based on (-)-borneol as effective inhibitors of influenza virus
RU2687254C1 (ru) N-гетероциклические производные борниламина в качестве ингибиторов ортопоксвирусов
RU2649406C1 (ru) 3-n-замещенные борнилпропионаты, используемые в качестве ингибиторов вируса марбург
RU2712135C1 (ru) Амиды, сочетающие адамантановый и монотерпеновый фрагменты, используемые в качестве ингибиторов ортопоксвирусов
RU2798665C2 (ru) Амиды, содержащие адамантановые и ароматические фрагменты, используемые в качестве ингибиторов репродукции ортопоксвирусов
NZ550945A (en) Anti-coronavirus compounds
RU2800448C1 (ru) N-борнил- и n-фенхилкарбоксамиды, используемые в качестве ингибиторов репликации ортопоксвирусов
EP2887938B1 (en) Methods of preparing tecovirimat
TW202146413A (zh) 含吡啶酮稠環類衍生物抑制劑、其製備方法和應用
Kumar et al. A potent candidate against Zika virus infection: Synthesis, bioactivity, radiolabeling and biodistribution studies
JP2022509763A (ja) アレナウイルス感染症の治療のための化合物
EP4471017A1 (en) Cyclic(alkyl)(amino)alkoxy-substituted aryl-pyrone compound and use thereof