RU2685413C1 - Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц - Google Patents
Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц Download PDFInfo
- Publication number
- RU2685413C1 RU2685413C1 RU2018113403A RU2018113403A RU2685413C1 RU 2685413 C1 RU2685413 C1 RU 2685413C1 RU 2018113403 A RU2018113403 A RU 2018113403A RU 2018113403 A RU2018113403 A RU 2018113403A RU 2685413 C1 RU2685413 C1 RU 2685413C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- erythrocytes
- obtaining
- taken
- sensitization
- final weight
- Prior art date
Links
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 45
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 6
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title abstract description 10
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 title abstract 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 241000607132 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Gallinarum Species 0.000 claims abstract description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims abstract description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims abstract description 6
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 4
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 4
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims abstract 2
- 208000037386 Typhoid Diseases 0.000 claims description 12
- 201000008297 typhoid fever Diseases 0.000 claims description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 abstract 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 abstract 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 abstract 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 17
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 13
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 10
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 7
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 3
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L sodium succinate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O ZDQYSKICYIVCPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-N sodium;hydron;carbonate Chemical compound [Na+].OC(O)=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- JGJVFLNWDJBPMS-UHFFFAOYSA-D tetradecasodium benzenesulfonyl(chloro)azanide dioxido(oxo)silane 3-dodecylbenzenesulfonate [oxido(phosphonatooxy)phosphoryl] phosphate carbonate sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O.[O-]S([O-])(=O)=O.Cl[N-]S(=O)(=O)c1ccccc1.[O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O.CCCCCCCCCCCCc1cccc(c1)S([O-])(=O)=O JGJVFLNWDJBPMS-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 2
- QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N Chloramine Chemical compound ClN QDHHCQZDFGDHMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 1
- 206010033546 Pallor Diseases 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 239000004115 Sodium Silicate Substances 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 description 1
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002048 axillary vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000000645 desinfectant Substances 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 208000028104 epidemic louse-borne typhus Diseases 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019795 sodium metasilicate Nutrition 0.000 description 1
- NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N sodium silicate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Si]([O-])=O NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052911 sodium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019832 sodium triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000271 synthetic detergent Substances 0.000 description 1
- 206010061393 typhus Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/689—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for bacteria
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способу изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц. Способ включает получение бактериальной массы Salmonella gallinarum pullorum, выделение из нее антигенной фракции, Обработку бактериальной массы поверхностно-активным веществом с добавлением соды или щелочи в дистиллированной воде при 93-96°C с дальнейшей сенсебилизацией формалинизированных эритроцитов, их очисткой и получением целевого продукта в виде 10%-ной суспензии. В качестве ПАВ используется 0,8-1,2%-ный водный раствор Дезмола, взятый в конечной весовой концентрации 0,1-0,5%. Сенсебилизацию формалинизированных эритроцитов проводят в присутствии натриевой соли сукцината хитозана, взятой в конечной весовой концентрации 0,5-1,5%. Изобретение обеспечивает получение эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц с повышенной чувствительностью. 3 пр.
Description
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности, к способам получения диагностических препаратов, используемых для массовой прижизненной диагностики пуллороза тифа птиц.
Известен способ получения эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц, включающий получение бактериальной массы Salmonella pullorum-gillinarum, выделение из нее антигенной фракции, формалинизацию эритроцитов баранов и сенсибилизацию формалинизированных эритроцитов полученным антигеном, отличающийся тем, что выделяют O-антигенную фракцию гидролизом бактериальной массы в 0,1%-ном растворе КОН при температуре 92-94°C в течение 110 120 мин, а сенсибилизацию проводят при температуре 45 50°C в течение 4 ч при концентрации O-антигенной фракции 1 1,2 мг на 1,0 см3 19 20%-ной взвеси эритроцитов в фосфатно-буферном растворе (Патент РФ №2070055, МПК A61K 39/112, G01N 33/555, опубликовано 10.12.1996).
Однако известный процесс изготовления пуллорного эритроцитарного антигена является недостаточно эффективным из-за низкого выхода целевого продукта.
Известен также способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц, включающий получение бактериальной массы Salmonella gallinarum pullorum, выделение из нее антигенной фракции обработкой бактериальной массы поверхностно-активным веществом с добавлением соды или щелочи в дистиллированной воде при 93 96°C с последующей сенсибилизацией формалинизированных эритроцитов, их очисткой и получением целевого продукта в виде 10%-ной суспензии (Патент РФ №2085949, МПК G01N 33/555, A61K 39/112, G01N 33/539, A61K 39/02, опубликовано 27.07.1997).
Задачей предполагаемого изобретения является повышение чувствительности целевого продукта.
Это достигается в способе изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц, включающий получение бактериальной массы Salmonella gallinarum pullorum, выделение из нее антигенной фракции обработкой бактериальной массы поверхностно-активным веществом с добавлением соды или щелочи в дистиллированной воде при 93 96°C с последующей сенсибилизацией формалинизированных эритроцитов, их очисткой и получением целевого продукта в виде 10%-ной суспензии тем, что в качестве поверхностно-активного вещества для выделения антигенной фракции используют 0,8-1,2%-ный водный раствор Дезмола, взятого в конечной весовой концентрации 0,1-0,5%, а сенсибилизацию формалинизированных эритроцитов проводят в присутствии натриевой соли сукцината хитозана, взятой в конечной весовой концентрации 0,5-1,5%.
Известно моюще-дезинфицирующие средства, представляющие собой смеси синтетических детергентов, главным образом анионоактивных и бактерицидных хлорсодержащих веществ. К числу таких средств относится дезмол (авт. свид. №223979, кл. C11D 3/065, 1966 г.). Дезмол содержит поверхностно-активное - вещество триполифосфат натрия, метасиликат натрия, хлорамин, кальцинированную соду, сульфат натрия и воду.
Известен способ получения натриевой соли сукцината хитозана (Патент RU 2144040, МПК С08В 37/08, A61K 31/722, Опубликовано 10.01.2000), который может быть использован в ветеринарии, медицине и косметике в качестве пленкообразователя, гидранта или эмульгатора.
В патентной и научно-технической литературе не известны технические решения, содержащие режимы способа изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц аналогичное заявляемому, т.е. предложение соответствует критерию «новизны».
Все режимы способа осуществимы в промышленных условиях, направлены на решение реальной технической задачи, т.е. предложение «промышленно применимо».
Изобретение иллюстрируется на следующих примерах:
Пример 1.
А. Получение O-антигенной фракции.
Собранную биомассу после глубинного культивирования в биореакторах штамма S. gallinarum pullorum 24КСТ, ЛБ, 10-Б в "S''-форме возбудителя пуллороза-тифа ресуспендируют с помощью поверхностно-активного вещества и щелочи (0,8%-ный водный раствор Дезмола, взятого в конечной весовой концентрации 0,1% и 1%-ный водный раствор двууглекислого натрия, взятый в конечной весовой концентрации 0,1% или 0,2%-ный раствор NaOH, взятый в конечной весовой концентрации 0,01%) до концентрации 25 млрд. микробных клеток в 1 мл и экстрагируют в течение 60 мин при t 93-96°C. Экстракт освобождают от клеточного дейтрита центрифугированием на центрифуге OTP-101 К (20000 об/мин) и прогревают при t 93°C в течение 50 мин. Полученный экстракт фильтруют и используют для сенсибилизации эритроцитов барана.
Б. Сенсибилизация эритроцитов барана.
Сенсибилизацию формалинизированных эритроцитов проводят экстрактом антигенного комплекса в присутствии натриевой соли сукцината хитозана, взятой в конечной весовой концентрации 0,5%. На 1 л 20% взвеси формалинизированных эритроцитов на фосфатно-буферном растворе pH 7,2 добавляют 300 мл экстракта антигена. Тщательно перемешивают и подогревают в водяной бане при t 56°C 30 мин. Затем взвесь эритроцитов выдерживают при t 40°C 2 ч или при комнатной температуре 12 ч. Бутыли оставляют для осаждения методом отстоя. По мере оседания эритроцитов сенсибилизирующий раствор сливают, а к осадку доливают равный объем буфера с 0,15% формальдегида. Операцию повторяют 3-4 раза до полного осветления надосадочной жидкости.
Отмытые сенсибилизированные эритроциты фильтруют через бязево-марлевую салфетку, ресуспендируют в стерильном фосфатно-буферном растворе, содержащем 0,15% формальдегида, до 10% концентрации и выдерживают при t 37°C 24 ч. Далее производится расфасовка в 20 мл флаконы, получая состав 1 эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц.
Пример 2.
А. Получение О-антигенной фракции.
Собранную биомассу после глубинного культивирования в биореакторах штамма S. gallinarum pullorum 24КСТ, ЛБ, 10-Б в "S''-форме возбудителя пуллороза-тифа ресуспендируют с помощью поверхностно-активного вещества и щелочи (1,2%-ный водный раствор Дезмола, взятого в конечной весовой концентрации 0,5% и 2%-ный водный раствор двууглекислого натрия, взятый в конечной весовой концентрации 0,2% или 0,3%-ный раствор NaOH, взятый в конечной весовой концентрации 0,015%) до концентрации 25 млрд. микробных клеток в 1 мл и экстрагируют в течение 80 мин при t 96°C. Экстракт освобождают от клеточного дейтрита центрифугированием на центрифуге OTP-101 К (16000 об/мин) и прогревают при t 96°C в течение 60 мин. Полученный экстракт фильтруют и используют для сенсибилизации эритроцитов барана.
Б. Сенсибилизация эритроцитов барана.
Сенсибилизацию формалинизированных эритроцитов проводят экстрактом антигенного комплекса в присутствии натриевой соли сукцината хитозана, взятой в конечной весовой концентрации 1,5%. На 1 л 20% взвеси формалинизированных эритроцитов на фосфатно-буферном растворе pH 7,2 добавляют 300 мл экстракта антигена. Тщательно перемешивают и подогревают в водяной бане при t 56°C 30 мин. Затем взвесь эритроцитов выдерживают при t 40°C 2 ч или при комнатной температуре 12 ч. Бутыли оставляют для осаждения методом отстоя. По мере оседания эритроцитов сенсибилизирующий раствор сливают, а к осадку доливают равный объем буфера с 0,15% формальдегида. Операцию повторяют 3-4 раза до полного осветления надосадочной жидкости.
Отмытые сенсибилизированные эритроциты фильтруют через бязево-марлевую салфетку, ресуспендируют в стерильном фосфатно-буферном растворе, содержащем 0,2% формальдегида, до 10% концентрации и выдерживают при t 37°C 24 ч. Далее производится расфасовка в 20 мл флаконы, получая состав 2 эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц.
Пример 3. Эффективность эритроцитарного диагностикума (полученного согласно примерам 1-2 и прототипа) для диагностики пуллороза-тифа птиц определяют на курах. 60 цыплят в возрасте от 50 дней заражают возбудителем пуллороза-тифа в дозе 0,03 мл штаммом S. gallinarum pullorum 24КСТ, ЛБ, 10-Б в "S''-форме возбудителя и делят на три группы по 20 цыплят в каждой группы. Через 10 дней диагностику пуллороза-тифа определяют в кровекапельной реакции непрямой гемаплютинации (ККРНГА) на предметном стекле путем выявления антигена пуллороза-тифа. Кровь для ККРНГА берут у птиц из гребня или подкрыльцовой вены. Каплю крови наносят на сухое, обезжиренное предметное стекло и добавляют к ней каплю эритроцитарного диагностикума (полученного согласно примерам 1-2 и прототипа). Соотношение состава 1 или 2 или прототипа и крови должно быть 1:1. Кровь цыплят каждой группы смешивают с составом 1, 2 и прототипа (кровь группы 1 смешивают с составом 1, кровь группы 2 смешивают с составом 2, кровь группы 3 смешивают с составом, полученным согласно способу-прототипу). Предметное стекло покачивают на грелке-качалке при температуре от 37° до 40°C. Температура в помещении, где ставят реакцию, должна быть не ниже 18°C. На одном предметном стекле ставят одновременно не более трех реакций. Учет результатов реакции проводят визуально. Реакцию на эритроцитарный антиген считают положительной, если в течение 2 минут в смеси крови с антигеном выпали хорошо заметные хлопья коричневого цвета с просветлением жидкости Реакцию считают сомнительной, если в течение 2 минут в смеси крови с антигеном появились слабовыраженные мелкозернистые хлопья коричневого цвета; Отрицательная реакция характеризуется образованием в капле крови с антигеном равномерной стабильной гомогенной взвеси эритроцитов барана.
В группах 1 и 2 цыплят у всех цыплят реакция на эритроцитарный антиген была положительной. В группе 3 цыплят реакция на эритроцитарный антиген была положительной у 12 цыплят, у 5 цыплят реакция на эритроцитарный антиген была сомнительной, а у 3 цыплят реакция на эритроцитарный антиген была отрицательной.
Таким образом, чувствительность целевого продукта повысилась на 40%.
Кроме того, пуллорный эритроцитарный диагностикум, приготовленный предлагаемым способом, сохраняет свою активность и специфичность в течение 3-х лет при 4-8°C. При таком способе получают из бактериальной массы S.gallinarum-pullorum O-антиген, обладающий максимально возможной сенсибилизирующей, антителосвязывающей, агглютинирующей активностью, комплементарностью и способностью вступать в прочную химическую связь с рецепторами эритроцитов, который по своей диагностической ценности в кровекапельной реакции непрямой гемагглютинации превосходит известный пуллорный эритроцитарный диагностикум.
Claims (1)
- Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики пуллороза-тифа птиц, включающий получение бактериальной массы Salmonella gallinarum pullorum, выделение из нее антигенной фракции обработкой бактериальной массы поверхностно-активным веществом с добавлением соды или щелочи в дистиллированной воде при 93-96°С с последующей сенсибилизацией формалинизированных эритроцитов, их очисткой и получением целевого продукта в виде 10%-ной суспензии, отличающийся тем, что в качестве поверхностно-активного вещества для выделения антигенной фракции используют 0,8-1,2%-ный водный раствор Дезмола, взятого в конечной весовой концентрации 0,1-0,5%, а сенсибилизацию формалинизированных эритроцитов проводят в присутствии натриевой соли сукцината хитозана, взятой в конечной весовой концентрации 0,5-1,5%.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018113403A RU2685413C1 (ru) | 2018-04-13 | 2018-04-13 | Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018113403A RU2685413C1 (ru) | 2018-04-13 | 2018-04-13 | Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2685413C1 true RU2685413C1 (ru) | 2019-04-18 |
Family
ID=66168168
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018113403A RU2685413C1 (ru) | 2018-04-13 | 2018-04-13 | Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2685413C1 (ru) |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2085949C1 (ru) * | 1996-04-10 | 1997-07-27 | Николай Данилович Скичко | Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц |
UA63003U (ru) * | 2011-02-21 | 2011-09-26 | Государственное Учреждение "Украинский Научно-Исследовательский Противочумный Институт Имени И.И. Мечникова" | Способ получения антигенного ешерихиозного эритроцитарного диагностикума |
RU2609771C1 (ru) * | 2015-11-09 | 2017-02-02 | Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" (ФКП "Армавирская биофабрика") | Способ получения эритроцитарного антигена для диагностики некробактериоза животных |
-
2018
- 2018-04-13 RU RU2018113403A patent/RU2685413C1/ru active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2085949C1 (ru) * | 1996-04-10 | 1997-07-27 | Николай Данилович Скичко | Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц |
UA63003U (ru) * | 2011-02-21 | 2011-09-26 | Государственное Учреждение "Украинский Научно-Исследовательский Противочумный Институт Имени И.И. Мечникова" | Способ получения антигенного ешерихиозного эритроцитарного диагностикума |
RU2609771C1 (ru) * | 2015-11-09 | 2017-02-02 | Федеральное казенное предприятие "Армавирская биологическая фабрика" (ФКП "Армавирская биофабрика") | Способ получения эритроцитарного антигена для диагностики некробактериоза животных |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Панферова Ю.А. и др. Детекция инфекции Coxiella burnetii у мигрирующих птиц в Болгарии //Инфекция и иммунитет. 2014. Т. 4. N 1. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104007269B (zh) | 一种鸭疫里默氏杆菌间接血凝抗体检测试剂盒及其应用 | |
CN103694348A (zh) | 一种治疗猪病毒性腹泻生物制剂的制备和应用方法 | |
Lyons | Antibacterial immunity to Staphylococcus pyogenes | |
RU2685413C1 (ru) | Способ изготовления эритроцитарного диагностикума для диагностики поллуроза-тифа птиц | |
Crook | The Nagler reaction: the breakdown of lipo-protein complexes by bacterial toxins | |
Turner et al. | Hemagglutinating virus isolated from cat scratch disease | |
Felton | A study of the isolation and concentration of the specific antibodies of antipneumococcus sera | |
RU2673677C1 (ru) | Средство для дезинвазии против цист букстонелл крупного рогатого скота | |
KARAVODIN et al. | Inhibition of adherence and cytotoxicity by circulating immune complexes formed in experimental filariasis | |
CN103910798A (zh) | 抗圆斑蝰蛇毒素和抗五步蛇毒素抗体及其制备方法和应用 | |
RU2491545C1 (ru) | Способ диагностики бруцеллеза | |
RU2525688C2 (ru) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОЧИЩЕННОГО СОМАТИЧЕСКОГО АНТИГЕНА Dirofilaria immitis | |
RU2675255C1 (ru) | Способ нормализации активности супероксиддисмутазы эритроцитов у новорожденных телят с дефицитом железа | |
RU2422832C1 (ru) | Способ получения эритроцитарного антигенного гистоплазмозного и кокцидиоидомикозного диагностикума | |
RU2675365C1 (ru) | Способ нормализации активности супероксиддисмутазы нейтрофилов у новорожденных телят с дефицитом железа | |
RU2410698C1 (ru) | Способ получения эритроцитарного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации при коксиеллезе крупного рогатого скота | |
Bokhout et al. | Preliminary investigation into the usefulness of the indirect haemagglutination | |
Newsome | Species-specific serological tests for bilharzia | |
RU2679361C1 (ru) | Способ получения биогенного стимулятора для коррекции иммунного статуса сельскохозяйственных животных | |
Kolmer et al. | Complement fixation in acute anterior poliomyelitis | |
US1448290A (en) | Method of producing with bacteria poisons intended for immunizing purposes | |
RU2786802C1 (ru) | Способ определения активности лизоцима в ротовой жидкости | |
SU1069783A1 (ru) | Способ получени туберкулезного диагностикума | |
SU1686372A1 (ru) | Способ определени активности рецепторов нейтрофилов человека | |
RU2618465C1 (ru) | Способ нормализации активности каталазы нейтрофилов у новорожденных телят с дефицитом железа |