RU2668802C2 - Антитела, используемые для пассивной вакцинации против гриппа - Google Patents
Антитела, используемые для пассивной вакцинации против гриппа Download PDFInfo
- Publication number
- RU2668802C2 RU2668802C2 RU2014127287A RU2014127287A RU2668802C2 RU 2668802 C2 RU2668802 C2 RU 2668802C2 RU 2014127287 A RU2014127287 A RU 2014127287A RU 2014127287 A RU2014127287 A RU 2014127287A RU 2668802 C2 RU2668802 C2 RU 2668802C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- sequence
- cdrn
- cdr3
- heavy chain
- light chain
- Prior art date
Links
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 title claims abstract description 19
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 title description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 31
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 18
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 claims abstract description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract 2
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 claims 52
- 102100035361 Cerebellar degeneration-related protein 2 Human genes 0.000 claims 13
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 claims 13
- YJSXHUXXMDAOCE-UHFFFAOYSA-N 5-hydroxy-8,8-dimethyl-6-(2-methylbutanoyl)-4-phenylpyrano[2,3-h]chromen-2-one Chemical compound C=1C(=O)OC=2C=3C=CC(C)(C)OC=3C(C(=O)C(C)CC)=C(O)C=2C=1C1=CC=CC=C1 YJSXHUXXMDAOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 101100075830 Caenorhabditis elegans mab-5 gene Proteins 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 44
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 44
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 44
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 44
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 40
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 39
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 36
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 34
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 26
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 26
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 16
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 14
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 14
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 8
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 7
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 7
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 7
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 7
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 6
- PGZUMBJQJWIWGJ-ONAKXNSWSA-N oseltamivir phosphate Chemical compound OP(O)(O)=O.CCOC(=O)C1=C[C@@H](OC(CC)CC)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](N)C1 PGZUMBJQJWIWGJ-ONAKXNSWSA-N 0.000 description 6
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 4
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 4
- 229940061367 tamiflu Drugs 0.000 description 4
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 4
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 208000037798 influenza B Diseases 0.000 description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 3
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- 235000006576 Althaea officinalis Nutrition 0.000 description 2
- 241001293113 Anas clypeata Species 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 241000495866 Bucephala albeola Species 0.000 description 2
- 241000713196 Influenza B virus Species 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 1-(1-adamantyl)ethanamine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(C(N)C)C3 UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 241000534454 Arenaria interpres Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000495871 Calidris alba Species 0.000 description 1
- 241000305761 Calidris canutus Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 208000003322 Coinfection Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 206010069767 H1N1 influenza Diseases 0.000 description 1
- 101710082439 Hemagglutinin A Proteins 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 1
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 1
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000588650 Neisseria meningitidis Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940124691 antibody therapeutics Drugs 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000012203 high throughput assay Methods 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 238000005305 interferometry Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000004650 oncogenic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 229940126578 oral vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229960002194 oseltamivir phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229960005030 other vaccine in atc Drugs 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229960000888 rimantadine Drugs 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 201000010740 swine influenza Diseases 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/42—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum viral
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
- A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
- C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
- C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложены варианты моноклональных антител и их фрагментов, которые связываются с вирусом гриппа A и нейтрализуют инфекцию, вызванную кладой H3 и по меньшей мере несколькими вариантами клады H7 вируса гриппа A. Также описана фармацевтическая композиция, содержащая такие антитела или их фрагменты, и применение антитела или его фрагмента в способе лечения или профилактики инфекции гриппа. Указанные антитела и их фрагменты пригодны для контролирования эпидемии и пандемии гриппа, а также для обеспечения профилактической или терапевтической защиты против сезонного гриппа. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 6 ил., 4 табл., 6 пр.
Description
Родственная заявка
По настоящей заявке испрашивается приоритет патентной заявки США номер 61/567046, поданной 5 декабря 2011, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Область техники
Изобретение относится к области пассивной иммунизации против гриппа. В частности, описаны специфические антитела, которые связываются рядом с консенсусной последовательностью сайта расщепления HA0 при посттрансляционном изменении гемагглютинина A вируса гриппа, включая антитела, секретируемые клетками человека.
Уровень техники
Белок гемагглютинин (HA) вируса гриппа содержит домен в виде глобулярной головки, который существенно различается среди штаммов гриппа, и область “стебля”, содержащую сайт, обеспечивающий слияние, который необходим для вхождения вируса внутрь клеток. HA представлен на вирусной оболочке в виде тримера. Нерасщепленная форма белка гемагглютинина (HA0) активируется при расщеплении трипсином с образованием частей HA1 и HA2, что придает эффект вирулентности сайту, обеспечивающему слияние. Две разделяемые части остаются связанными дисульфидными связями, но подвергаются конформационному изменению в среде с низким pH эндосомального компартмента клетки-хозяина, что приводит к слиянию мембран вируса и клетки-хозяина.
Участок расщепления содержит консенсусную последовательность, которая является общей для вируса гриппа А и вируса гриппа B и для различных штаммов вируса гриппа А и вируса гриппа B. Тример нерасщепленного белка гемагглютинина (HA0) обозначается как неактивная форма, тогда как белок гемагглютинин, расщепленный на части HA1 и HA2, обозначается как белок в активной форме.
Bianchi, E., et al., J. Virol. (2005) 79:7380-7388 описывают "универсальную" вакцину против гриппа В на основе консенсусной последовательности указанного сайта расщепления, в которой пептид, содержащий этот сайт, способен вызвать образование антител у мышей, когда он конъюгирован с белковым комплексом внешней мембраны Neisseria meningitidis. Также описаны моноклональные антитела, которые, по-видимому, связываются с консенсусной последовательностью. Кроме того, успешный пассивный перенос антисыворотки наблюдали у мышей. Другие вакцины предшествующего уровня техники, такие как вакцины, описанные в WO 2004/080403, содержащие пептиды, полученные из белков вируса гриппа М2 и/или HA, индуцировали образование антител, которые либо обладают слабой эффективностью, либо не являются эффективными среди штаммов.
Антитела, описанные в данной области, которые связываются с областью “стебля” HA, включают антитела, созданные Crucell, CR6261 и CR8020, описанные в Throsby, M., et al., PLoS One (2008) 3:e3942, Ekiert, D.C, et al., Science (2011) 333:843-850, и Sui, J., et al., Nat. Struct. Mol. Biol. (2009) 16:265-273. MAB также были созданы против консервативного антигена M2E, как описано у Grandea, A.G., et al., PNAS USA (2010) 107: 12658-12663. M2E находится на поверхности инфицированных клеток, а также является мишенью для амантадина и римантадина. К указанным антибиотикам существует устойчивость микроорганизмов, что означает, что указанная мишень не выполняет необходимую функцию.
Группа Lanzavecchia: Corti, D., et al., Science (2011) 333:850-856 описала дополнительное антитело, которое связывает и нейтрализует штаммы вируса гриппа A как группы 1, так и группы 2, но его активность ниже, чем активность антител, описанных далее, как показано в приведенных ниже примерах. Кроме того, MAB, которое иммунореактивно против гриппа A и B, как описано в Dreyfus, C, et al., Science (2012) 337: 1343-1348, обладает меньшей активностью, чем антитела, описанные ниже.
В публикации заявки РСТ WO 2011/160083, которая включена в настоящее описание в качестве ссылки, описаны моноклональные антитела, которые получены из клеток человека и могут использоваться для пассивных вакцин. Антитела характеризуются высокими показателями аффинности связывания с кладой H1 вируса гриппа, который относится к группе 1, и некоторые из антител также характеризуются высокими показателями аффинности к H9, также относящейся к группе 1 и/или к H7 группы 2, и/или к H2 группы 1. Некоторые из описанных антител связываются только с неактивной формой тримера, предположительно, с консенсусным сайтом расщепления, тогда как другие антитела способны связывать активный белок гемагглютинин, который образуется после расщепления.
Сохраняется потребность в антителах, которые связываются с дополнительными кладами и характеризуются повышенной аффинностью к ним.
Описание изобретения
Настоящее изобретение относится к моноклональным антителам, которые с повышенной аффинностью связываются с тримерами, характерными для одной группы или для обеих групп 1 и 2 гриппа А. Такие антитела способны обеспечивать пассивный иммунитет в случае пандемии, вызванной, например, неустановленным ранее штаммом гриппа или штаммом, защиту против которого в настоящее время не вызывают сезонные вакцины.
Учитывая, что по меньшей мере некоторые из антител связываются со многими штаммами, что свидетельствует об их нацеленности на важную область белка, они, вероятно, могут связываться даже с необнаруженными ранее штаммами. Такие антитела также можно использовать для ослабления или профилактики инфекции у пациентов, у которых вакцинация не обеспечивает полностью защитный ответ, или которые подвергаются высокому риску из-за слабой иммунной системы (например, маленькие дети, пожилые люди, пациенты, перенесшие трансплантацию, пациенты, получавшие химиотерапию при раке или ВИЧ).
Таким образом, в одном из аспектов изобретение относится к связывающим реагентам, в частности, к моноклональным антителам или их иммунореактивным фрагментам, которые в целом перекрестно реагируют с вирусом гриппа А группы 1, включая H1, H2, H5, H6, H8, H9, H11, H13, H16, или группы 2, включая H3 и H7, в качестве типичных образцов, или которые характеризуются перекрестной межгрупповой реактивностью. Некоторые из антител, показанных ниже, специфически связываются с эпитопом, содержащимся в белке HA0, и распознают нативную тримерную форму HA, а также активную форму.
Особенно важное значение имеют биспецифичные антитела и их фрагменты, которые способны повышать диапазон специфически связываемых вирусных клад.
Как хорошо известно в данной области, неиммуноглобулиновые белки могут обладать сходными с антителами свойствами распознавания эпитопа, а также могут обеспечивать подходящие варианты осуществления, включающие связывающие реагенты на основе фибронектина, трансферрина или липокалина. Молекулы на основе нуклеиновых кислот, такие как аптомеры, также обладают указанными связывающими свойствами.
В других аспектах настоящее изобретение относится к способам применения связывающих молекул изобретения для пассивного ингибирования вирусной инфекции у пациентов, которые уже подверглись воздействию вируса или которые уже инфицированы. Изобретение также относится к рекомбинантным материалам и к способам получения антител или их фрагментов.
Краткое описание фигур
На фиг. 1 показана известная в данной области классификация вируса гриппа на группы значимых кладов.
На фиг. 2 показаны результаты связывания MAB579 in vitro с различными штаммами H7 и H3, оба представляющие группу 2.
На фиг. 3A и 3B показаны два ведущих mAb, MAB53 (группа 1) и MAB579 (группа 2), обладающие аффинностью менее нМ в кладах, охватывающих соответствующие группы.
На фиг. 4A и 4B представлено сравнение нейтрализующей активности MAB486 и MAB579. Как показано на фиг. 4A, MAB486, а также поликлональный препарат, полученный в результате иммунизации кролика, эффективно нейтрализуют H1N1 только в отсутствие трипсина. В противоположность этому, на фиг. 4В показано, что MAB579 эффективен как в присутствии, так и в отсутствие трипсина.
На фиг. 5 представлена схема биспецифического антитела, которое содержит вариабельные участки MAB579 и MAB53.
На фиг. 6A-6E показана эффективность in vivo MAB53, MAB579, их смесей и биспецифического антитела, представленного на фиг. 5.
Варианты осуществления изобретения
Настоящее изобретение обеспечивает эффективные связывающие молекулы, включая антитела и их фрагменты, а также эффективные способы идентификации клеток, которые секретируют такие антитела так, что соответствующие кодирующие последовательности могут быть получены и сохранены для последующего легкого рекомбинантного получения таких антител.
Антитела или аналогичные связывающие молекулы изобретения используются как для профилактики, так и для терапии. Таким образом, они могут быть использованы для защиты индивида против заражения вирусом, а также для лечения индивидов, которые уже подверглись воздействию вируса или инфицированы вирусом гриппа. Исследуемые объекты, вызывающие наибольший интерес, представляют собой человека и объекты, предназначенные для использования у человека, человеческие формы или гуманизированные формы связывающих молекул, среди которых предпочтительными являются традиционные природные антитела или их иммунореактивные фрагменты. Однако антитела, обладающие соответствующими характеристиками связывания, которые обусловлены областями CDR, при использовании в исследованиях на лабораторных животных, могут сохранять характеристики нечеловеческих антител. Антитела, используемые в исследованиях приведенных ниже примеров, хотя исследования проводились на мышах, тем не менее содержат как вариабельные, так и константные участки, которые являются человеческими.
Индивиды, для которых связывающие молекулы, включая антитела изобретения, можно использовать для терапии и профилактики, включают, помимо человека, любого индивида, который подвержен заражению гриппом. Таким образом, различные млекопитающие, такие как крупный рогатый скот, свиньи, овцы и другие млекопитающие, включая лошадей и домашних животных, получат пользу от профилактического и терапевтического применения указанных связывающих молекул. Кроме того, как известно, гриппом заражаются различные виды птиц, которым также будут полезны композиции, содержащие антитела изобретения.
Способы применения для профилактики и терапии являются общепринятыми и обычно хорошо известны. Антитела или другие связывающие молекулы, как правило, предоставляются с помощью инъекции, но следует понимать, что пероральные вакцины также являются эффективными. Дозировки и время введения легко оптимизировать и они являются частью профессиональных навыков в данной области.
Клетки человека, которые секретируют подходящие антитела, можно идентифицировать, в частности, способом CellSpot™, описанным в патенте США 7413868, содержание которого включено в настоящее описание в качестве ссылки.
Коротко, способ позволяет осуществить скрининг отдельных клеток, полученных у человека (или других индивидов) в анализах с высокой пропускной способностью, используя маркировки частиц определенными метками и микроскопические исследования.
В одном из характерных вариантов осуществления можно осуществить анализ даже одной клетки в отношении антител, которые она секретирует, путем адсорбции или соединения секретируемых антител с поверхностью и последующей обработки поверхности желаемыми антигенами, каждый из которых соединен с отличительной меткой в виде частицы. Таким образом, «отпечаток» клетки можно идентифицировать с помощью микроскопа.
С использованием такой методики можно провести скрининг миллионов клеток в отношении секреции желаемых антител и можно получить даже редкие антитела, например, антитела, подходящие для пассивной иммунизации против многих штаммов гриппа.
Поскольку люди уже имеют антитела по меньшей мере к некоторым штаммам гриппа, и поскольку антитела, полученные по способу изобретения, связываются с консервативной последовательностью, указанные антитела предназначены для новых штаммов, а также для штаммов, с которыми популяции людей уже встречались.
Способы получения подходящих антител не ограничивается методом CellSpot™ и не ограничиваются людьми. Клетки, которые продуцируют подходящие антитела, можно идентифицировать различными способами, и клетки могут представлять собой клетки лабораторных животных, таких как мыши или другие грызуны.
Могут быть выделены последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие указанные антитела, и могут быть получены различные формы продуцируемых антител, включая химерные и гуманизированные формы антител, производимых нечеловеческими клетками. Кроме того, полученные рекомбинантным путем антитела или фрагменты включают одноцепочечные антитела или их области Fab или FAb2. Антитела человека также могут быть получены с использованием хозяев, например, XenoMouse® с гуманизированной иммунной системой. Средства получения антител при использовании скрининга в отношении подходящих связывающих характеристик, хорошо известны в данной области
Аналогичным образом, в данной области также известны средства создания аптамеров с заданными типами связывания.
Как отмечалось выше, антитела или другие связывающие молекулы могут связываться с активной формой, неактивной формой или обеими формами белка гемагглютинина. В ряде случаев полезно, когда эпитоп находится в сайте расщепления указанного белка, поскольку он является относительно консервативным в штаммах, но предпочтительно связывающая молекула связывается как с тримером, так и с активной формой.
Известен сайт расщепления для различных штаммов вируса гриппа А и гриппа В. Например, в приведенной выше статье Bianchi, et al., в таблице 1 показана последовательность вокруг сайта расщепления для нескольких таких штаммов.
Таблица 1 | ||||
Консенсусная последовательность гидрофильной области сайтов расщепления при посттрансляционном изменении вируса гриппа A и B | ||||
Вирус/подтип | Штамм | Последовательностьa | ||
A/H3/HA0 | Консенсус | NVPEKQTR (SEQ ID NO:51) |
↓ | GIFGAIAGFIE (SEQ ID NO:52) |
A/H1/HA0 | Консенсус | NIPSIQSR (SEQ ID NO:53) |
↓ | GLFGAIAGFIE (SEQ ID NO:54) |
B/HA0 | Консенсусb | PAKLLKER (SEQ ID NO:55) |
↓ | GFFGAIAGFLE (SEQ ID NO:56) |
a Место расщепления между HA1 и HA2 указано стрелкой. b Консенсус является одинаковым для линий Victoria и Yamagata. |
Как указано, строгий консенсус наблюдается, начиная с остатка аргинина выше сайта расщепления и, таким образом, предпочтительные консенсусные последовательности, включенные в тестируемые пептиды изобретения, имеют последовательность RGI/L/F FGAIAGFLE (SEQ ID NO:57). Возможно использование только части указанной последовательности в тестируемых пептидах.
Как отмечалось выше, после идентификации клеток, которые секретируют желаемые антитела, легко получить кодирующие их нуклеотидные последовательности и произвести желаемые антитела рекомбинантным путем в большом количестве. Это также позволяет манипулировать антителами, так что они могут быть получены, например, в виде одноцепочечных антител или с точки зрения только их вариабельных областей.
При этом также возможно проведение манипуляций с антителами, например, для их получения в виде одноцепочечных антител или в виде только вариабельных участков. Выделенные нуклеиновые кислоты могут быть физически сохранены и использованы для последующего рекомбинантного производства и/или информация, содержащаяся в последовательности, касающаяся кодирующей последовательности антитела, может быть получена и сохранена для обеспечения последующего синтеза соответствующих нуклеиновых кислот. Наличие информации, содержащейся в кодирующих последовательностях, и способов быстрого синтеза и клонирования наряду с известными способами рекомбинантного получения обеспечивают быстрое производство необходимых антител в случае пандемии или другой чрезвычайной ситуации.
Для сведения, последовательности константных участков обеих тяжелой и легкой цепей антитела человека описаны и представлены в данном описании в виде SEQ ID NO:1-3. В вышеуказанном WO 2011/160083 получены различные моноклональные антитела с вариабельными участками с установленной аминокислотной последовательностью и нуклеотидными кодирующими последовательностями, которые с разной степенью аффинности связываются с белком HA различных штаммов гриппа.
Структуры вариабельных участков как легкой, так и тяжелой цепей, представляющие особый интерес, приведены в данном описании для удобства в виде SEQ ID NO:22-25. Указанные антитела включают MAB8 и MAB53. MAB53 и MAB8 связываются с определенной аффинностью с H1; кроме того, MAB53 связывается с высокой аффинностью с H5, H7 и H9. MAB8 также связывается с H7 и H2. Ни одно из указанных антител не связывается прочно с H3, но MAB579 связывается с H3, описанным в данном описании. H7 и H3 являются особенно привлекательными мишенями.
Более подробно, каждое из указанных MAB связывается по меньшей мере с тремя различными кладами с достаточной или высокой аффинностью. MAB53 связывается с HA0 из клад H1, H9 и H7, и MAB8 связывается с HA0 из клад H1, H7 и менее сильно с H3, о чем свидетельствуют результаты теста ELISA для белка HA0. Показатели аффинности находятся в наномолярном диапазоне. Реакционную способность в отношении нативного тримера HA из всех кладов группы 1 проверяли с использованием HA, экспрессированного в клетках HEK293, при этом связывание антител измеряли с помощью проточной цитометрии.
Указанные результаты подтверждали с помощью альтернативной системы анализа, интерферометрии на биологическом уровне, основанной на количественном анализе связывания, называемой биосенсор ForteBio®. При измерении с помощью указанного более точного метода анализа получают следующие показатели аффинности:
MAB53/H1=60 пM, H5=6 нМ, H7=70 пМ, H9=30 пМ;
MAB8/H1=9 нМ, H3=16 нМ, H5=0,2 нМ.
Дополнительные специфические антитела, идентифицированные в настоящем описании, MAB383, MAB486, MAB579, MAB699, MAB700, MAB708, MAB710, MAB711 и MAB723 представлены SEQ ID NO:4-21 в виде их аминокислотных последовательностей вариабельных участков тяжелой цепи и легкой цепи. Указанные антитела связываются с повышенной аффинностью с дополнительными кладами штаммов вируса гриппа. Например, MAB579 связывается с высокой аффинностью с H3 и H7. Таким образом, указанные антитела дополняют репертуар антител, полезных для профилактики и лечения гриппа.
В настоящее время существует несколько методик создания отдельной молекулы, подобной антителу, которая содержит антиген-специфические домены двух отдельных антител (биспецифическое антитело). Таким образом, можно сконструировать одно антитело, обладающее реакционной способностью в отношении широкого спектра штаммов, с использованием Fab-доменов отдельных антител с широким спектром реактивности в отношении группы 1 и группы 2, соответственно. Подходящие методики описаны Macrogenics (Rockville, MD), Micromet (Bethesda, MD) и Merrimac (Cambridge, MA), (см., например, Orcutt KD, Ackerman ME, Cieslewicz M, Quiroz E, Slusarczyk AL, Frangioni JV, Wittrup KD. A modular IgG-scFv bispecific antibody topology, Protein Eng Des Sel. (2010) 23:221-228; Fitzgerald J, Lugovskoy A. Rational engineering of antibody therapeutics targeting multiple oncogene pathways. MAbs. (2011) 1:3(3); Baeuerle PA, Reinhardt C. Bispecific T-cell engaging antibodies for cancer therapy. Cancer Res. (2009) 69:4941-4944.)
Таким образом, особенно эффективно предоставление антител или других связывающих молекул, которые связываются с различными типами белка гемагглютинина, путем создания биспецифических антител. Особенно эффективными являются комбинации, которые сочетают в себе специфичность связывания с MAB53 (H1, H5, H9) и с MAB579 (H3, H7).
Все антитела настоящего изобретения обладают по меньшей мере специфичностью связывания в отношении одного из впервые описанных антител, описанных выше. Они могут быть объединены с другими различными антителами, включая антитела, которые описаны в вышеуказанном WO 2011/160083, а также с другими членами новой группы антител, описанной в настоящем описании. Все возможные комбинации таких специфичностей связывания входят в объем настоящего изобретения.
В то время как антитело MAB53 связывается с высокой аффинностью с HA0, оно не связывается с HA1, что позволяет предположить его связывание с комплементарным фрагментом HA2, которое было подтверждено. Поскольку MAB53 не связывается с HA0 при тестировании методом вестерн-блоттинга, предполагают, что доминантный эпитоп, по меньшей мере частично, является конформационным. Обнаружено, что MAB8 и MAB53 связываются с одними и теми же или соседними эпитопами, о чем свидетельствует их способность конкурировать друг с другом за связывание с белком HA0 клады H1.
Все антитела, описанные в настоящем описании, включая антитела, раскрытые ранее в вышеуказанном WO 2011/160083, связываются с нативным тримером HA, экспрессированным на поверхности трансфицированных клеток HA. Указанную способность проверяли с помощью HA-кодирующей плазмиды, предоставляемой S. Galloway и D. Steinhauer из Университета Эмори. То есть тример представленный на клеточной поверхности кладов, распознаваемых различными MAB изобретения, распознается указанными MAB.
Показано, что MAB53 и MAB8 отличаются тем, что MAB8 освобождается от белка HA0, когда рН снижается до 6, тогда как MAB53 не освобождается. Это отличие является существенным, поскольку оно может быть прогностическим в отношении нейтрализующей способности антитела. В тестах определения способности нейтрализации вирусной инфекцию H1N1 в реакции нейтрализации бляшкообразования с клетками-мишенями MDCK, MAB53 в низких дозах, 1-5 мкг/мл, нейтрализует инфекцию, вызываемую H1N1, H7N3, H5N1 и H9N2. Однако MAB8 не нейтрализует инфекцию, вызываемую указанными штаммами. Таким образом, можно провести предпочтительный отбор нейтрализующихся штаммов путем отмывки связанного MAB или его фрагмента при pH 6 во время первичного скрининга, при этом снимая с HA0 MAB, которые с низкой вероятностью останутся связанными при поступлении комплекса антитело-вирус в клетку через эндосомальный компартмент и при этом предполагается, что они обладают пониженной способностью к нейтрализации вируса. Например, в методе CellSpot HA0 может быть связан с твердым носителем (флуоресцентные шарики) и может захватываться MAB или смесью MAB с последующей отмывкой при pH 6.
Кроме того, показано, что мыши, предварительно получившие MAB53 в возрастающих дозах, выживают при введении вирусов H1N1 и H5N1, в количествах, вызывающих летальный исход в других случаях, благодаря 100% защите против инфицирования H1N1. Эффективность антитела сравнима с эффективностью антитела известного уровня техники, описанным Crucell, которое не обладает активностью против штаммов группы 2. Throsby, M., (supra) 3:e3942. Антитела Crucell представляют собой гетеросубтипические нейтрализующие моноклональные антитела, обеспечивающие перекрестную защиту против H5N1 и H1N1, полученные из IgM+B-клеток памяти человека. Также антитела MAB53 обеспечивали полную защиту при использовании в дозе 10 мг/кг; 90% выживало при использовании в дозе 2 мг/кг и 50% выживало при использовании в дозе 0,4 мг/кг. Когда при контрольном заражении вместо H5N1 использовали H1N1, применение 10 мг/кг MAB53 обеспечивало 80% выживаемость; 2 мг/кг обеспечивало 60% выживаемость и 0,4 мг/кг обеспечивало 50% выживаемость.
MAB53 и антитела, которые связываются с тем же эпитопом в тех же условиях, то есть, в дальнейшем остаются связанными, когда рН снижается до 6, являются эффективными в качестве пассивных вакцин, подходящих для защиты населения от эпидемии и пандемии, и для профилактического или терапевтического использования против сезонного гриппа у пациентов с ослабленной иммунной системой. Комбинации области связывания эпитопа MAB53 и областей связывания эпитопов, с которыми связываются с высокой аффинностью антитела настоящего изобретения, особенно полезны при создании биспецифических антител. При этом обеспечивается, например, эффективное связывание H7, H3 и H1 одним и тем же антителом, если в антитело включены связывающие области MAB579. В таблице 2 приведены значения IC50, полученные для белка гемагглютинина различных штаммов гриппа при использовании MAB579.
Таблица 2 | |||
Значения IC50 MAB579 для различных штаммов гриппа | |||
Подтип | Штамм | IC50 (мкг/мл) | |
H3 | A/Perth/16/2009 | 0,2 | |
A/Phillipines/2/82 x-79 | 0,9 | ||
A/Udorn/307/1976 | 1,9 | ||
A/New York/55/2004* | 1,1 | ||
A/Wisconsin/67/2005 | 1,0 | ||
A/HongKong/68 | 2,8 | ||
A/SW/MN/02719 | 3,9 | ||
H4 | A/Bufflehead | 15,5 | |
H7 | A/Canada/rv444/04 | 1,6 | |
A/Netherlands/219/03 | 0,6 | ||
A/Sanderling/A106-125 | >20 | Птичьи вирусы | |
A/Redknot/NJ/1523470/06 | >20 | ||
A/Ruddy Turnstone/A106-892 | >20 | ||
H10 | A/Northern Shoveler | 0,8 |
Указанные значения получены в тесте микронейтрализации на монослое MDCK. Аффинность связывания MAB579 для различных штаммов также представлена в графическом виде на фиг. 2. Как показано, тогда как H3 и H7 связываются с высокой аффинностью, в случае H1 обнаружена незначительная аффинность связывания. Таким образом, особенно полезным является комбинирование связывающей области MAB579 и связывающей области MAB с высокой аффинностью связывания к H1. В таком случае получается, что представлены области связывания для вирусов группы 1 и группы 2. Один вариант осуществления настоящего изобретения включает биоспецифическое антитело, которое связывается с эпитопом, с которым связывается MAB53, и с эпитопом, с которым связывается MAB579.
Кроме биспецифических антител, изобретение относится к применению только тяжелой цепи в конструкциях, предназначенных для нейтрализации вирусной инфекции; такие антитела могут быть также биспецифическими. В данной области известно, что специфичность обеспечивается, главным образом, вариабельными участками тяжелых цепей, и при некоторых состояниях тяжелые цепи сами по себе успешно использовались в качестве активных ингредиентов в вакцинах. Альтернативно, тяжелая цепь соответствующей специфичности может быть соединена с различными формами легкой цепи для повышения аффинности или способности нейтрализовать вирус.
Следует особо отметить, что область CDR3 тяжелых цепей антител, описанных в данном описании, увеличена и содержит несколько остатков тирозина. Следует понимать, что такие остатки тирозина могут сульфироваться в качестве посттрансляционного события. Таким образом, частью изобретения также являются вакцины, которые содержат области CDR3 тяжелых цепей MAB579, MAB699, MAB700, MAB708, MAB710, MAB711 или MAB723, где один или более остатков тирозина необязательно сульфирован. Указанные области с сульфированием или без сульфирования также могут быть использованы отдельно в виде пассивных вакцин. Сульфирование области CDR3 соответствует критериям сульфирования, описанным Monigatti, F., et al., Bioinformatics (2002) 18:769-770. Другие примеры успешного использования только областей CDR3 тяжелых цепей для нейтрализации вирусной инфекции описаны Pejchal, R., et al., PNAS (2010) 107: 11483-11488 и Liu, L., et al., J. Virol. (2011) 85:8467-8476.
В контексте настоящего описания термин "антитело" включает иммунореактивные фрагменты обычных антител даже если, в том или ином случае, упоминание "фрагментов" является излишним. Антитела, таким образом, включают Fab-фрагменты, Fv-одноцепочечные антитела, которые по существу содержат только вариабельные участки, биспецифические антитела и их различные фрагментированные формы, которые сохраняют иммуноспецифичность, и в целом белки, которые имитируют активность "природных" антител в результате включения в состав аминокислотных последовательностей или модифицированных аминокислотных последовательностей (т.е. псевдопептиды), которые приблизительно соответствуют активности вариабельных участков более часто встречающихся в природе обычных антител.
Структура антител
Структура антител представлена в следующем порядке:
1. аминокислотные последовательности константного участка тяжелой цепи IgG1 человека, константного участка каппа-цепи человека и константного участка лямбда-цепи человека;
2. аминокислотные последовательности тяжелых и легких цепей из числа вариабельных участков тяжелых и легких цепей MAB 383, 486, 579, 699, 700, 708, 710, 711 и 723 (области CDR подчеркнуты в MAB 579, 699, 700, 708, 710, 711 и 723.);
3. аминокислотные последовательности вариабельных участков тяжелых и легких цепей MAB8 и MAB53, описанные в WO2011/160083 (последовательности LC, представленные в '083, также включали константный участок, и он был удален);
4. нуклеотидные последовательности, кодирующие константный участок тяжелой цепи IgG1 человека, константный участок каппа-цепи человека и константный участок лямбда-цепи человека;
5. нуклеотидные последовательности, кодирующие аминокислотные последовательности тяжелых и легких цепей, входящих в состав вариабельных участков тяжелых и легких цепей MAB 383, 486, 579, 699, 700,708, 710, 711 и 723;
6. нуклеотидные последовательности, кодирующие аминокислотные последовательности вариабельных участков тяжелых и легких цепей MAB 8 и MAB53.
Что касается указанных областей CDR, следует отметить, что существует более чем одна номенклатура для определения CDR. Наиболее часто используется номенклатура Кабата, впервые предложенная Wu, T.T., et al., J. Exp. Med. (1970) 132:211-250. Номенклатура Кабата является широко распространенной системой, которая позволяет идентифицировать определенные положения, которые ассоциированы с CDR. При использовании дополнительной системы, номенклатуры Чотиа, получают несколько другие результаты. Номенклатура Чотиа описана в Al-Lazikani, B., et al., J. Molec. Biol. (1997) 273:927-948. В зависимости от используемой номенклатуры получают несколько отличающиеся результаты для CDR. Например, для MAB53 CDR тяжелой цепи согласно номенклатуре Кабата представляет собой KYAIN, тогда как по номенклатуре Чотиа указанная CDR обозначается GGIIRKYAIN. Область CDR2 тяжелой цепи содержит дополнительный G на N-конце, и CDR3 содержит дополнительные AR на N-конце. Для легкой цепи обозначения CDR являются идентичными в обеих номенклатурах.
Некоторые критические замечания разных исследователей уравнивают обе номенклатуры; таким образом, понятно, что области CDR, обозначенные в описании и в формуле изобретения, могут несколько различаться. При условии, что полученные вариабельные участки сохраняют свою связывающую способность, точное местоположение областей CDR не является существенным, и области, указанные в формуле изобретения, представляют собой области, которые как полагают, включают CDR, идентифицированные согласно любой принятой номенклатуре.
Аминокислотная последовательность константного участка HC IgG1 человека (SEQ ID NO:1)
ASTKGPSVFPLVPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
Аминокислотная последовательность константного участка каппа-цепи LC человека (SEQ ID NO:2)
RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
Аминокислотная последовательность константного участка лямбда-цепи LC человека SEQ (ID NO:3)
GQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVVPAECS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB383 (SEQ ID NO:4)
QVQLVQSGAEVKRPGASVKVSCRASGYTFTSFGFSWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGDTKSPQKLQGRVTMTTDTSTNTAYMELRSLISDDTAVYYCARAPPLYYSSWSSDYWGQGTLLTVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB383 (SEQ ID NO:5)
DIQMTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKHGQAPRPLIYGASRRATDVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPRTFGQGTKLEIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB486 (SEQ ID NO:6)
QVQLVESGGGMVQPGGSRRLSCAASGFSFSTYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGEKQYYLDSVKGRFTISRDNSKDTLYLQMNSLTAEDTAVYYCVKESARRLLRYFEWLLSSPFDNWGQGALVTVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB486 (SEQ ID NO:7)
DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYTSNKKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYTSPYTFGQGTKLEIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB579 (SEQ ID NO:8)
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKTSGYTFTAYTIHWVRQAPGQRLEWMGWINAGNGHTKYSQRFKGRVTITRDTSARTTYMELRSLTSEDTALYFCARGPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQHWGHGTQVTVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB579 (SEQ ID NO:9)
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQTINNYLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNDSPLTFGGGTKVEIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB699 (SEQ ID NO:10)
QLQLVQSGAEVKKPGASVKLSCKASGYTFTSYTLHWVRQAPGQTLEWMGWINAGNGKTKYPPKFRGRVTITRDTSATTVDMHLSSLTSEDTAVYFCARGPESYYYDRSDWLNSHPDEYFQYWGQGTLVIVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB699 (SEQ ID NO:11)
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTIACRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASQLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTINSLQPDDFATYYCQLYNVYSPLTFGGGTRVDIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB700 (SEQ ID NO:12)
QVQLVESGADVKKPGASVTVSCKASGYTFRSF TMHWVRQVPGQRLEWMGWINAGNGKTKYSQKFQGRVIVTRDTSASTAYMELSSLTSEDTAVYYCARGPETYYYDSSNWLNSHPDEYLQYWGQGTPVTVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB700 (SEQ ID NO:13)
DIVLTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASTLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGGGTKVEIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB708 (SEQ ID NO:14)
QVQLVQSGADVKRPGASVTVSCKASGYTFRSF TMHWVRQVPGQRLEWMGWINAGNGKTKYSQKFQGRVIVTRDTSANTAYMELSSLTSEDTAVYYCARGPETYYYDSSNWLNSHPDEYFQHWGQGTPVTVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB708 (SEQ ID NO:15)
DIQMTQSPSTLPASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGGGTKVEIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB710 (SEQ ID NO:16)
QVQLQESGAEVKKPGASVQVSCKASGYTFTSYSVHWVRQAPGQRPEWMGWINAGNGKTKYPQKFKGRVTITRDTLARTVNIHLSSLTSEDTAVYFCARGPDSYYYDRNDWLNSHPDEYFQHWGQGTVVIVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB710 (SEQ ID NO:17)
DIVMTQSPSTLSASVGDRVTISCRASQSIDSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQLYNVHLITFGGGTRVDIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB711 (SEQ ID NO:18)
QVQLVESGAEVKKPGASVKITCEASGYTFNTYTIHWLRQAPGQRLEWMGWINAANGHTKYSRKLRSRVTIKRDTSARTSYMELSSLGSEDTAVYYCARGPETYYFDKTNWLNSHPDEYFQHWGQGTLVTVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB711 (SEQ ID NO:19)
DIVMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISTWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPARFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNDSPLILGGGTTVEIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB723 (SEQ ID NO:20)
QVQLVQSGAAVNKPGASVKVSCKASGYSFTSYTLHWVRQAPGQRPEWIGWINAGNGKVKYPRKLQGRITITRDVSATTVHMELRSLTSEDTGLYYCARGPESYFFDTSNHLNSHPDEYFQFWGQGTLVTVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB723 (SEQ ID NO:21)
DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGAGTKVEIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB8 (SEQ ID NO:22)
EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSTY TMSWVRQAPGQGLEWVSSITRTSSNIYYADSVEGRFTISRDNAKNSLYLQMHSLRVEDTAVYYCARISGVVGPVPFDYWGQGTLITVSS
Аминокислотная последовательность вариабельного домена LC MAB8 (SEQ ID NO:23)
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQTISKYLNWYQQKPGRAPKLLIYSASSLQSGVPSRFTGSGSGTDFTLTITSLQPEDFATYYCQQSYRPSQITFGPGTKVDIK
Аминокислотная последовательность вариабельного домена HC MAB53 (SEQ ID NO:24)
QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQGLEWMGGIIAIFNTANYAQKFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDYFDYWGQGSLVTVSP
Аминокислотная последовательность LC MAB53 (SEQ ID NO:25)
EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIK
Нуклеотидная последовательность, кодирующая HC константного участка IgG1 человека (интроны выделены подчеркиванием) (SEQ ID NO:26)
GCCTCCACCAAGGGCCCATCAGTCTTCCCCCTGGCACCCTCTACCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAACGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGGTGAGAGGCCAGCACAGGGAGGGAGGGTGTCTGCTGGAAGCCAGGCTCAGCGCTCCTGCCTGGACGCATCCCGGCTATGCAGTCCCAGTCCAGGGCAGCAAGGCAGGCCCCGTCTGCCTCTTCACCCGGAGGCCTCTGCCCGCCCCACTCATGCTCAGGGAGAGGGTCTTCTGGCTTTTTCCCCAGGCTCTGGGCAGGCACAGGCTAGGTGCCCCTAACCCAGGCCCTGCACACAAAGGGGCAGGTGCTGGGCTCAGACCTGCCAAGAGCCATATCCGGGAGGACCCTGCCCCTGACCTAAGCCCACCCCAAAGGCCAAACTCTCCACTCCCTCAGCTCGGACACCTTCTCTCCTCCCAGATTCCAGTAACTCCCAATCTTCTCTCTGCAGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGGTAAGCCAGCCCAGGCCTCGCCCTCCAGCTCAAGGCGGGACAGGTGCCCTAGAGTAGCCTGCATCCAGGGACAGGCCCCAGCCGGGTGCTGACACGTCCACCTCCATCTCTTCCTCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACAACAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGTGGGACCCGTGGGGTGCGAGGGCCACATGGACAGAGGCCGGCTCGGCCCACCCTCTGCCCTGAGAGTGACCGCTGTACCAACCTCTGTCCCTACAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTATAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCCCCGGGTAAATGA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая константный участок каппа-цепи LC человека (SEQ ID NO:27)
CGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCTAGCGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGTTAG
Нуклеотидная последовательность, кодирующая константный участок лямбда-цепи LC человека (SEQ ID NO:28)
GGTCAGCCCAAGGCTGCCCCCTCTGTCACTCTGTTCCCGCCCTCTAGCGAGGAGCTTCAAGCCAACAAGGCCACACTGGTGTGTCTCATAAGTGACTTCTACCCGGGAGCCGTGACAGTGGCCTGGAAGGCAGATAGCAGCCCCGTCAAGGCGGGAGTGGAGACCACCACACCCTCCAAACAAAGCAACAACAAGTACGCGGCCAGCAGCTATCTGAGCCTGACGCCTGAGCAGTGGAAGTCCCACAGAAGCTACAGCTGCCAGGTCACGCATGAAGGGAGCACCGTGGAGAAGACAGTGGTCCCTGCAGAATGCTCT
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB383 HC (SEQ ID NO:29)
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAGGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAGGGCTTCTGGTTACACCTTTACTAGCTTCGGTTTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCAGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGGTGGATCAGCGCTTACAATGGTGACACAAAGTCTCCACAGAAGCTCCAGGGCAGAGTCACCATGACTACAGACACATCCACGAACACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTCATATCTGACGACACGGCCGTGTATTATTGTGCGAGAGCCCCCCCCCTGTATTACAGTAGCTGGTCCTCAGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGCTCACCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB383 LC (SEQ ID NO:30)
GATATCCAGATGACGCAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTCAGTAGCAACTACTTAGCCTGGTACCAGCAGAAACATGGCCAGGCTCCCAGGCCCCTCATCTACGGTGCATCCAGAAGGGCCACTGACGTCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAACCTGAAGATTTTGCAGTGTATTATTGTCAGCAGTATGGTAGTTCACCTCGAACTTTTGGCCAGGGGACCAAACTGGAAATCAAAC
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB486 HC (SEQ ID NO:31)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCATGGTCCAGCCGGGGGGGTCCCGGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCAGCTTCAGTACCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATTTCATATGATGGAGAAAAGCAATATTATCTAGACTCCGTGAAGGGACGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGGACACCCTCTATCTGCAAATGAACAGTCTGACAGCTGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGTGAAGGAATCAGCGCGTCGATTATTACGATATTTTGAGTGGTTATTAAGTTCGCCTTTTGACAACTGGGGCCAGGGAGCCCTAGTCACCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB486 LC (SEP ID NO:32)
GATATCGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTTTGGGCGAGAGGGCCACCATCAACTGCAAGTCCAGCCAGACTGTTTTATACACCTCCAACAAGAAAAATTACTTAGCCTGGTACCAACAGAAGCCAGGGCAGCCTCCTAAACTGCTCATTTACTGGGCATCTACCCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAGGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATACGTCTCCCTACACATTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB579 HC (SEP ID NO:33)
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTTTCCTGCAAGACTTCTGGATACACCTTCACAGCCTATACTATACACTGGGTGCGCCAGGCCCCCGGACAAAGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACGCTGGCAATGGTCACACGAAATATTCACAGAGGTTCAAGGGCAGAGTCACCATTACCAGGGACACATCCGCGAGGACAACCTACATGGAGCTGCGCAGTCTGACATCTGAGGACACGGCTCTATATTTCTGTGCGAGAGGGCCCGAGACATATTATTATGATAAAACCAATTGGCTGAACTCCCATCCAGATGAATACTTCCAGCACTGGGGCCACGGCACCCAGGTCACCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB579 LC (SEP ID NP:34)
GATATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGACTATTAATAACTACTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATAAGGCGTCTAGTTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGATTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAGAATATAATAATGATTCTCCCCTAACTTTCGGCGGAGGGACCAAAGTGGAGATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB699 HC (SEP ID NP:35)
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCCGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGCTTTCCTGCAAGGCTTCTGGGTACACCTTCACTTCCTATACTCTACATTGGGTGCGCCAGGCCCCCGGACAGACACTTGAGTGGATGGGATGGATCAACGCTGGCAACGGTAAAACAAAATATCCACCGAAGTTCAGGGGCAGAGTCACCATTACCAGGGACACGTCCGCGACCACAGTCGACATGCATCTAAGCAGCCTGACATCTGAAGACACGGCTGTGTATTTCTGTGCGAGAGGGCCCGAAAGTTATTACTATGATAGAAGTGATTGGCTGAACTCCCATCCAGATGAATACTTCCAGTACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCATCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB699 LC (SEP ID NP:36)
GATATCGTGCTGACGCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGGGACAGAGTCACCATCGCTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGCAGCTGGCTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTACAAGGCGTCTCAGTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGATTCAGCGGCAGCGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAACAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAACTTTATAATGTTTATTCTCCGCTCACTTTCGGCGGGGGGACCAGGGTGGACATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB700 HC (SEP ID NO:37)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGCTGACGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGACGGTTTCCTGCAAGGCCTCAGGATACACCTTCAGGAGTTTTACTATGCATTGGGTGCGCCAGGTCCCCGGACAAAGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACGCTGGCAATGGTAAAACAAAGTATTCTCAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCATCGTTACCAGGGACACATCCGCGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTAACATCTGAAGACACGGCTGTTTATTACTGTGCGAGAGGGCCCGAAACATATTACTATGATAGTAGTAATTGGCTGAATTCCCATCCAGATGAATATCTCCAGTACTGGGGCCAGGGCACCCCGGTCACCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB700 LC (SEP ID NO:38)
GATATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCGTCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTAGCTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATAAGGCGTCTACTTTAGAAAGTGGGGTCCCATCCAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAGAGTATAATAATAATTCTCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB708 HC (SEP ID NP:39)
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGACGTGAAGAGGCCTGGGGCCTCAGTGACGGTTTCCTGCAAGGCTTCAGGATACACCTTCAGGAGCTTTACTATGCATTGGGTGCGCCAGGTCCCCGGACAAAGGCTGGAGTGGATGGGATGGATCAACGCTGGCAATGGTAAAACAAAATATTCCCAGAAGTTTCAGGGCAGAGTCATCGTTACCAGGGACACATCCGCGAACACGGCCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGACATCTGAAGACACGGCTGTTTATTACTGTGCGAGAGGGCCCGAAACATATTATTATGATAGTAGTAATTGGCTGAACTCCCATCCAGATGAATATTTCCAGCACTGG
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB708 LC (SEP ID NP:40)
GATATCCAGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGCCTGCGTCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTAGCTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTTCTGATCTATAAGGCGTCTAGTTTAGAAAGTGGGGTCCCATCCAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAGGAGTATAATAATAATTCTCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB710 HC (SEP ID NP:41)
CAAGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGCAGGTTTCCTGCAAGGCTTCTGGGTACACCTTCACGTCCTATAGCGTACATTGGGTGCGCCAGGCCCCCGGACAAAGGCCTGAGTGGATGGGATGGATCAACGCTGGCAACGGAAAGACAAAATATCCACAGAAGTTCAAGGGCAGAGTCACCATAACCAGAGACACATTAGCGCGCACTGTCAACATACATCTAAGCAGCCTGACATCCGAAGACACGGCTGTGTATTTCTGTGCGAGAGGGCCCGATAGTTATTACTATGATAGAAATGATTGGCTGAACTCCCATCCAGATGAATACTTCCAGCACTGGGGCCAGGGCACCGTGGTCATCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB710 LC (SEP ID NO:42)
GATATCGTGATGACCCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTGGGAGACAGAGTCACCATCTCTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTGACAGTTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATAAGGCGTCTAATTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGATTCAGCGGCAGCGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCGACTTATTACTGCCAACTCTATAATGTTCATTTGATCACTTTCGGCGGAGGGACCAGGGTGGACATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB711 HC (SEP ID NO:43)
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGATCACCTGCGAGGCTTCTGGATACACTTTCAATACCTATACTATACATTGGCTGCGCCAGGCCCCCGGACAAAGACTTGAGTGGATGGGGTGGATCAACGCTGCCAATGGTCATACAAAATATTCACGGAAGCTCAGGTCCAGAGTCACCATTAAGAGGGACACATCCGCGAGGACAAGTTACATGGAGCTGAGCAGCCTGGGATCTGAAGACACGGCTGTCTATTACTGTGCGAGAGGGCCCGAAACATATTACTTTGATAAGACGAATTGGCTGAACTCCCATCCAGATGAATACTTCCAGCACTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB711 LC (SEP ID NP:44)
GATATCGTGATGACGCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTTCTACCTGGTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATAAGGCGTCCAATTTAGAAAGTGGGGTCCCAGCAAGATTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTACTGCCAAGAATATAATAATGATTCTCCGCTGATTTTAGGCGGAGGGACCACGGTGGAGATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB723 HC (SEP ID NP:45)
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGCGGTGAACAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTTTCCTGCAAGGCTTCTGGATACAGCTTCACTAGTTACACTTTGCATTGGGTGCGCCAGGCCCCCGGACAAAGGCCTGAGTGGATAGGGTGGATCAACGCTGGCAATGGTAAAGTAAAATATCCACGGAAGTTGCAGGGCAGAATCACCATAACCAGGGACGTATCCGCTACGACAGTTCACATGGAACTGAGGAGCCTGACATCTGAGGACACGGGTCTATATTACTGTGCGAGAGGGCCCGAAAGTTACTTCTTTGATACTTCTAATCATCTGAACTCCCATCCAGATGAATACTTCCAGTTCTGGGGCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCCTCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB723 LC (SEP ID NP:46)
GATATCGTGCTGACGCAGTCTCCTTCCACCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCCAGTCAGAGTATTAGTAGTTACTTGGCCTGGTATCAACAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAACTCCTGATCTATAAGGCGTCTAATTTAGAAAGTGGGGTCCCATCAAGATTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGCCTGATGATTTTGCAACTTATTATTGCCAAGAATATAATAATAACTCTCCGCTCACTTTCGGCGCAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB8 HC (SEQ ID NO: 47)
GAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGTTTCACTTTCAGTACCTATACTATGAGTTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGCAGGGGCTAGAGTGGGTCTCGTCCATTACTAGGACTAGTAGTAATATATACTACGCAGACTCAGTGGAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAACTCACTGTATCTGCAGATGCATAGCCTGAGAGTCGAAGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAATCAGCGGGGTAGTGGGACCTGTCCCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGATCACCGTCTCCTCT
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB8 LC (SEQ ID NO:48)
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCTTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGACCATTAGCAAGTATTTAAATTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGAGAGCCCCTAAACTCCTGATCTACTCTGCGTCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCACTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCACCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGCAACTTACTACTGTCAACAGAGTTACAGACCCTCCCAGATCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB53 HC (SEQ ID NO:49)
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAGGAAGCCGGGGTCCTCGGTGAAGGTCTCCTGCAAGGTTTCTGGAGGCATCATTAGGAAATATGCTATCAACTGGGTGCGACAGGCCCCCGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGAGGGATCATCGCTATCTTTAATACAGCAAACTATGCACAGAAATTCCAGGGCAGAGTCACGATTACCGCGGACGAGTCCACGAGCACAGTCTACATGGAGCTGAGCAGCCTGAGATCTGAAGACACGGCCCTTTATTACTGTGCGAGAGGAATGAATTACTACAGTGACTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAAGCCTTGTCACCGTCTCCCCA
Нуклеотидная последовательность, кодирующая вариабельный домен MAB53 LC (SEQ ID NO:50)
GAAATTGTGTTGACACAGTCTCCAGGCACCCTGTCTTTGTCTCCAGGGGAAAGAGCCACCCTCTCCTGCAGGGCCAGTCAGAGTGTTAGAAGCAACAACTTAGCCTGGTACCAGCACAAACCTGGCCAGGCTCCCAGGCTCCTCATCTTTGGTGCATCCAGCAGGGCCACTGGCATCCCAGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACTCTCACCATCAGCAGACTGGAGCCTGAAGATTTTGCAGTATATTACTGTCAGCAGTATGGTAGCTCACCTGCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA
Следующие примеры представлены с иллюстративной целью, но не для ограничения изобретения.
Пример 1. Аффинность MAB53 и MAB579
Аффинность MAB53 описана в приведенной выше публикации PCT. Указанное антитело связывается с высокой аффинностью с HA из клад H5, H7, H1 и H9, при этом не обладает аффинностью в отношении H2 и H3. MAB579 обладает высокой аффинностью в отношении HA из H7 и H3. На фиг. 3A и 3B представлены конкретные результаты, полученные с помощью стандартного теста ForteBio™ для каждого антитела.
Пример 2. Нейтрализация инфекции с помощью MAB486 и MAB579
MAB 486 и 579 тестировали в реакции ингибирования инфекции, вызываемой H1N1 и H3N2 (A/Perth/16/2009) и в реакции нейтрализации бляшкообразования в монослое клеток MDCK в присутствии трипсина при начальной фазе инфекции или без него. MAB486 и pAb ×CP (поликлональные антитела кролика, полученные против консенсусной последовательности сайта расщепления) нейтрализуют H1N1 (A/California/04/2009) только в отсутствии трипсина, как показано на фиг. 4A, и не способны ингибировать инфекцию и образование бляшек, если вирус сначала активирован трипсином. Данные показывают, что антитела, против участка, обеспечивающего слияние, в котором расположены эпитопы, полученные на основании интактного пептида слияния (т.е. чувствительные к протеазам), не эффективны для контролирования вирусной инфекции. Как показано на фиг. 4B, MAB579 ингибирует инфекцию, как в присутствии трипсина, так и без него.
Способность MAB53 нейтрализовать инфекцию описана ранее, но сравнение показателей аффинности и EC50 с соответствующими показателями для моноклональных антител Crucell CR6261 в реакции нейтрализации in vitro представлено в таблице 3 ниже.
Таблица 3 | ||||
Эффективность in vitro mAb Trellis и mAb, клонированных на основании патентов Crucell | ||||
Штамм | MAB53 KD (нМ) |
MAB53 EC50 (мкг/мл) |
“CR6261” EC50 (мкг/мл) |
Различие в эффективности |
H1N1 A/CA/07/09 | 0,1 | 0,14 | 4,0 | 30× |
H5N1 A/VN/1204 | 0,5 | 0,10 | 3,7 | 40× |
H2N2 A/Mallard/MN/2008 | nd | 1,20 | nd | |
H9N2 Mallard/MN/98 | nd | 0,10 | nd | |
Штамм | MAB579 KD (нМ) |
MAB579 EC50 (мкг/мл) |
“CR8020” EC50 (мкг/мл) |
Различие в эффективности |
H3N2 A/Wisconsin/67/2005 | nd | 1,0 | 3,5 | 3× |
H3N2 A/Perth/16/2009 | 0,8 | 0,05 | 2,0 | 40× |
H3N2 A/New York/55/2004 | 0,2 | 2,0 | 10,0 | 5× |
H3N2 A/Hong Kong/8/68 | 0,2 | 2,0 | 7,6 | 3× |
H7N7 A/Netherlands/219/03 | 0,4 | 0,7 | 13,1 | 20× |
H7N3 A/Canada/rv444/04 | 0,6 | 0,5 | nd | |
H4N4 A/Bufflehead | nd | 15,0 | >40 | 3× |
H10N7 A/Northern Shoveler | nd | 0,8 | nd |
Значения EC50 получали, как описано выше.
Пример 3. Определение эпитопов
Использовали технологию Pepscan CLIPS™ для картирования сайтов связывания MAB53 и MAB579. Для H1 и H3 синтезировали приблизительно 6000 уникальных пептидов различной длины и с различными по длине соединительными звеньями, связывающими концы каждого пептида, которые воспроизводят нативную структуру. Связывание MAB53 и MAB579 с областью “стебля” подтверждали с использованием антител кролика к глобулярной головке или к “стеблю” в реакции конкурентного связывания и с помощью прямого связывания с пептидами, полученными из области “стебля”. Как отмечалось выше, MAB486 связывается с вирусами группы 1 и группы 2, но только в предварительно активированном состоянии перед протеазным расщеплением HA0 на HA1 и HA2, связанные дисульфидными связями. Пришли к заключению, что эпитоп для перекрестного связывания кладов представляет собой прерывистый эпитоп, охватывающий два мономера нативного тримерного HA0.
Пример 4. Эффективность in vivo (MAB53) и фармакокинетика (MAB53 и MAB579)
В экспериментах использовали следующие штаммы:
H1N1: A/CA/04/09;
H5N1: A/Vietnam/1203/04/HPAI;
H3N2: A/Perth/16/09;
H7N3: A/Red Knot/NJ/1523470/06.
Для проверки профилактического действия MAB53 вводили мышам внутрибрюшинно в виде однократной дозы 10 мг/кг в день -1, после чего день 0 интраназально вводили вирус 10 раз в дозе LD50. Эффективность MAB53 определяли по обнаружению EC50 при дозе 0,4 мг/кг в сравнении с антителом Crucell CR6261, которое согласно сообщениям характеризуется значением EC50 1-1,5 мг/кг (Koudstaal, W., et al., J. Infect. Dis. (2009) 200: 1870-1873).
Для проверки терапевтической эффективности MAB вводили внутрибрюшинно в виде однократной дозы 10 мг/кг в день +3 для большинства штаммов или в день +1 для H7N3. MAB53 характеризовалось полной эффективностью в отношении H1N1 и H5N1, тогда как по существу все мыши контрольной группы погибали к 10-му дню. MAB579 характеризовалось полной эффективностью против H3N2 и H7N3, в то время как все мыши контрольной группы погибали до 10-го дня.
Также измеряли потерю массы, и показатели уменьшения массы составляли не более 20% у мышей, получавших лечение.
При проведении сравнительного исследования с лечением Tamiflu® (осельтамивира фосфат), мышей (10 животных в группе) после проведения анестезии инфицировали интраназально 10 раз вирусом в дозе LD50 (H1N1 Influenza A/Ca/04/09). MAB53 (или контрольный изотипически сходный IgG человека) вводили i.p. в день +1 после заражения. Tamiflu® вводили с помощью желудочного зонда два раза в день в течение 4 дней, начиная со дня +1 после инфицирования. Показатели смертности и заболеваемости (оцениваемой по потери массы) были значительно выше в группе Tamiflu®, по сравнению с группой MAB53.
Все животные контрольных групп погибли в течение восьми дней после заражения. Все животные, получавшие лечение Tamiflu®, за исключением двух мышей, погибли в течение восьми дней после инфицирования; две мыши прожили по меньшей мере до 14-го дня. В группе, получавшей лечение MAB53, восемь из десяти мышей прожили 8-4 дней после заражения.
В отношении потери массы, контрольная группа теряла в массе до 70% от начальный значений спустя восемь дней. Уменьшение массы прекращалось на 4-й день у мышей, получавших MAB53, и у 14-му дню показатели массы превышали исходные значения. У мышей, получавших Tamiflu®, потеря массы прекращалась к 6 дню, но только 92% исходной массы восстанавливалось к 14 дню.
Также у мышей исследовали фармакокинетические параметры MAB53 и MAB579. Показано, что период полувыведения у мышей, составляющий 7-14 дней, соответствует периоду полувыведения у человека продолжительностью 3-4 недели. Указанный результат соответствует результату, характерному для MAB IgG1κ. Для биспецифического антитела MAB579/53Bi (см. пример 5) получают сходное значение периода полувыведения.
Пример 5. Конструкция MAB579/53Bi
Конструкция MAB579/53Bi предоставляет scFv-часть MAB53, соединенную с константным участком MAB579, как показано на фиг. 5. Конструкция таких биспецифических антител хорошо известна в данной области (Marvin, J. S., Acta Pharmacologica Sinica (2005) 26:649-658). Таким образом, MAB579/53Bi обеспечивает бивалентное связывание по обоим концам молекулы, а также предоставляет интактную Fc-область. Из таблицы 4 видно, что биспецифическое антитело сохраняет аффинность отдельных антител, которую измеряли с помощью ForteBio™ в нМ. Биспецифическое антитело также сохраняет нейтрализующую активность отдельных антител, из которых оно состоит, и характеризуется значением EC50 3,5 мкг/мл в отношении H1N1; 6,0 мкг/мл в отношении H5N1, и 2,2 мкг/мл в отношении H3N2.
Таблица 4 | |||
Аффинность, определенная методом ForteBio™ (нМ) | |||
Штамм | MAB53 | MAB579 | Биспецифическое антитело |
H1 Calif/07/09 | 0,2 | 0,3 | |
H5 Vietnam/1203/2004 | 0,5 | 2,5 | |
H3 HongKong/8/1968 | 0,2 | 0,2 | |
H3 Perth 16/09 | 0,7 | 1,3 | |
H7 Netherlands/219/03 | 0,4 | 0,3 |
Пример 6. Эффективность MAB579/53Bi in vivo
Эффективность in vivo измеряли, как описано в целом в примере 4, полученные результаты представлены на фиг. 6A-6E.
Как показано на фиг. 6A и 6C, мышей инфицировали A/Ca/04/09 (H1N1) (представляет собой вирус гриппа группы 1) в день 0, и вводили с помощью IP инъекции отдельно 10 мг/мл MAB53, отдельно 10 мг/мл MAB579 или смесь MAB53 и MAB579 (фиг. 6A) или биспецифическое антитело (фиг. 6C) в день 2, (на фиг. 6C также представлены кривые потери массы). В качестве контролей вводили IgG в дозе 20 мг/кг. Смесь MAB вводили в дозе 10 мг/кг каждый, и биспецифическое антитело вводили в дозе 10 мг/кг. Как показано на фиг. 6A, смесь MAB53 и MAB579, а также MAB53 в чистом виде оказывали протективное действие, тогда как животные, получавшие MAB579 и контроль, погибли к 10 дню. Как показано на фиг. 6C, биспецифическое антитело обладало такой же эффективностью, как и смесь.
Сходные результаты получали в аналогичном протоколе для мышей, инфицированных вирусом гриппа группы 2 Philippines 2/82 (H2N3), как показано на фиг. 6B и 6D. (на фиг. 6D также представлены кривые потери массы). Как показано на фиг. 6B, смесь антител обладала эффективностью против вируса, как MAB579, но применение MAB53 в чистом виде и контроля приводило к смерти животных через 10 дней. На фиг. 6D показано, что биспецифическое антитело обладает такой же эффективностью как и смесь антител.
На фиг. 6E представлены результаты лечения инфекции с использованием аналогичного протокола, в котором контрольное заражение осуществляли вирусами как группы 1, так и группы 2, H1N1 и H2N3, которыми инфицировали одну и ту же мышь. Комбинация антител MAB579 и MAB53 при использовании в дозе 3 мг/кг каждое обеспечивала полную защиту и при использовании в дозе 1 мг/кг каждое обеспечивала 80% выживаемость мышей. Данный результат является существенным, поскольку в природе происходит коинфекция, приводящая к появлению рекомбинированного вируса, который может вызвать пандемию.
Claims (59)
1. Моноклональное антитело, включая необязательно биспецифическое антитело или его фрагмент, которое(-ый) связывается с вирусом гриппа A, и которое(-ый) нейтрализует инфекцию, вызванную кладой H3 и по меньшей мере несколькими вариантами клады H7 вируса гриппа A, и которое(-ый) является человеческим или гуманизированным, причем антитело или его фрагмент содержит:
a) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью AYTIH и CDR2 с последовательностью WINAGNGHTKYSQRFKGR, и CDR3 с последовательностью GPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQH, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий CDR1 с последовательность RASQTINNYLA и CDR2 с последовательностью KASSLES, и CDR3 с последовательностью QEYNNDSPLT;
b) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью SYTLH и CDR2 с последовательностью WINAGNGKTKYPPKFRGR, и CDR3 с последовательностью GPESYYYDRSDWLNSHPDEYFQY, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий DR1 с последовательностью RASQSISSWLA и CDR2 с последовательностью KASQLES, и CDR3 с последовательностью QLYNVYSPLT;
c) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью SFTMH и CDR2 с последовательностью WINAGNGKTKYSQKFQGR, и CDR3 с последовательностью GPETYYYDSSNWLNSHPDEYLQY, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью RASQSISSWLA и CDR2 с последовательностью KASTLES, и CDR3 с последовательностью QEYNNNSPLT;
d) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью SFTMH и CDR2 с последовательностью WINAGNGKTKYSQKFQGR, и CDR3 с последовательностью GPETYYYDSSNWLNSHPDEYFQH, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью RASQSISSWLA и CDR2 с последовательностью KASSLES, и CDR3 с последовательностью QEYNNNSPLT;
e) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью SYSVH и CDR2 с последовательностью WINAGNGKTKYPQKFKGR, и CDR3 с последовательностью GPDSYYYDRNDWLNSHPDEYFQH, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью RASQSIDSWLA и CDR2 с последовательностью KASNLES, и CDR3 с последовательностью QLYNVHLI;
f) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью TYTIH и CDR2 с последовательностью WINAANGHTKYSRKLRSR, и CDR3 с последовательностью GPETYYFDKTNWLNSHPDEYFQH, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью RASQSISTWLA и CDR2 с последовательностью KASNLES, и CDR3 с последовательностью QEYNNDSPLI;
g) вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью SYTLH и CDR2 с последовательностью WINAGNGKVKYPRKLQGR, и CDR3 с последовательностью GPESYFFDTSNHLNSHPDEYFQF, и вариабельный участок легкой цепи, содержащий CDR1 с последовательностью RASQSISSYLA и CDR2 с последовательностью KASNLES, и CDR3 с последовательностью QEYNNNSPLT;
h) тяжелую цепь, содержащую последовательность QVQLVQSGAEVKRPGASVKVSCRASGYTFTSFGFSWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGDTKSPQKLQGRVTMTTDTSTNTAYMELRSLISDDTAVYYCARAPPLYYSSWSSDYWGQGTLLTVSS, и легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKHGQAPRPLIYGASRRATDVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPRTFGQGTKLEIK; или
i) тяжелую цепь, содержащую последовательность QVQLVESGGGMVQPGGSRRLSCAASGFSFSTYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGEKQYYLDSVKGRFTISRDNSKDTLYLQMNSLTAEDTAVYYCVKESARRLLRYFEWLLSSPFDNWGQGALVTVSS, и легкую цепь, содержащую последовательность DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYTSNKKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYTSPYTFGQGTKLEIK.
2. Антитело или фрагмент по п.1, которое(-ый) представляет собой биспецифическое антитело или его фрагмент и дополнительно содержит второй вариабельный участок тяжелой цепи, который содержит
CDR1 с последовательностью KYAIN и
CDR2 с последовательностью GIIAIFNTANYAQKFQG, и
CDR3 с последовательностью GMNYYSDYFDY (MAB53), и
вариабельный участок легкой цепи, который содержит
CDR1 с последовательностью RASQSVRSNNLA и
CDR2 с последовательностью GASSRAT, и
CDR3 с последовательностью QQYGSSPALT (MAB53).
3. Антитело или фрагмент по п.2, которое(-ый) представляет собой биспецифическое антитело или его фрагмент, которое(-ый) содержит вариабельный участок тяжелой цепи, который содержит
CDR1 с последовательностью AYTIH и
CDR2 с последовательностью WINAGNGHTKYSQRFKGR, и
CDR3 с последовательностью GPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQH (MAB579), и
вариабельный участок легкой цепи, который содержит
CDR1 с последовательностью RASQTINNYLA и
CDR2 с последовательностью KASSLES, и
CDR3 с последовательностью QEYNNDSPLT (MAB579).
4. Антитело или фрагмент по п.1, которое(-ый) содержит тяжелую цепь, содержащую последовательность
a) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKTSGYTFTAYTIHWVRQAPGQRLEWMGWINAGNGHTKYSQRFKGRVTITRDTSARTTYMELRSLTSEDTALYFCARGPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQHWGHGTQVTVSS (MAB579) или
b) QVQLVQSGAEVKRPGASVKVSCRASGYTFTSFGFSWVRQAPGQGLEWMGWISAYNGDTKSPQKLQGRVTMTTDTSTNTAYMELRSLISDDTAVYYCARAPPLYYSSWSSDYWGQGTLLTVSS (MAB383), или
c) QVQLVESGGGMVQPGGSRRLSCAASGFSFSTYGMHWVRQAPGKGLEWVAVISYDGEKQYYLDSVKGRFTISRDNSKDTLYLQMNSLTAEDTAVYYCVKESARRLLRYFEWLLSSPFDNWGQGALVTVSS (MAB486), или
d) QLQLVQSGAEVKKPGASVKLSCKASGYTFTSYTLHWVRQAPGQTLEWMGWINAGNGKTKYPPKFRGRVTITRDTSATTVDMHLSSLTSEDTAVYFCARGPESYYYDRSDWLNSHPDEYFQYWGQGTLVIVSS (MAB699), или
e) QVQLVESGADVKKPGASVTVSCKASGYTFRSFTMHWVRQVPGQRLEWMGWINAGNGKTKYSQKFQGRVIVTRDTSASTAYMELSSLTSEDTAVYYCARGPETYYYDSSNWLNSHPDEYLQYWGQGTPVTVSS (MAB700), или
f) QVQLVQSGADVKRPGASVTVSCKASGYTFRSFTMHWVRQVPGQRLEWMGWINAGNGKTKYSQKFQGRVIVTRDTSANTAYMELSSLTSEDTAVYYCARGPETYYYDSSNWLNSHPDEYFQHWGQGTPVTVSS (MAB708), или
g) QVQLQESGAEVKKPGASVQVSCKASGYTFTSYSVHWVRQAPGQRPEWMGWINAGNGKTKYPQKFKGRVTITRDTLARTVNIHLSSLTSEDTAVYFCARGPDSYYYDRNDWLNSHPDEYFQHWGQGTVVIVSS (MAB710), или
h) QVQLVESGAEVKKPGASVKITCEASGYTFNTYTIHWLRQAPGQRLEWMGWINAANGHTKYSRKLRSRVTIKRDTSARTSYMELSSLGSEDTAVYYCARGPETYYFDKTNWLNSHPDEYFQHWGQGTLVTVSS (MAB711), или
i) QVQLVQSGAAVNKPGASVKVSCKASGYSFTSYTLHWVRQAPGQRPEWIGWINAGNGKVKYPRKLQGRITITRDVSATTVHMELRSLTSEDTGLYYCARGPESYFFDTSNHLNSHPDEYFQFWGQGTLVTVSS (MAB723).
5. Антитело или фрагмент по п.4, которое(-ый)
если содержит тяжелую цепь а), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQTINNYLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNDSPLTFGGGTKVEIK (MAB579), или
если содержит тяжелую цепь b), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVSSNYLAWYQQKHGQAPRPLIYGASRRATDVPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPRTFGQGTKLEIK (MAB383), или
если содержит тяжелую цепь c), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIVMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQTVLYTSNKKNYLAWYQQKPGQPPKLLIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYTSPYTFGQGTKLEIK (MAB486), или
если содержит тяжелую цепь d), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPSTLSASVGDRVTIACRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASQLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTINSLQPDDFATYYCQLYNVYSPLTFGGGTRVDIK (MAB699), или
если содержит тяжелую цепь e), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIVLTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASTLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGGGTKVEIK (MAB700), или
если содержит тяжелую цепь f), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPSTLPASVGDRVTITCRASQSISSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGGGTKVEIK (MAB708), или
если содержит тяжелую цепь g), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIVMTQSPSTLSASVGDRVTISCRASQSIDSWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQLYNVHLITFGGGTRVDIK (MAB710), или
если содержит тяжелую цепь h), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIVMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISTWLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPARFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNDSPLILGGGTTVEIK (MAB711), или
если содержит тяжелую цепь i), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQSISSYLAWYQQKPGKAPKLLIYKASNLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNNSPLTFGAGTKVEIK (MAB723).
6. Антитело или фрагмент по п.4 или 5, которое(-ый) представляет собой биспецифическое антитело или фрагмент, которое(-ый) также содержит вторую тяжелую цепь, содержащую
a) QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQGLEWMGGIIAIFNTANYAQKFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDYFDYWGQGSLVTVSP (MAB53) или
b) EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSTYTMSWVRQAPGQGLEWVSSITRTSSNIYYADSVEGRFTISRDNAKNSLYLQMHSLRVEDTAVYYCARISGVVGPVPFDYWGQGTLITVSS (MAB8), и
если биспецифическое антитело или фрагмент содержит тяжелую цепь a), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIK (MAB53) и
если биспецифическое антитело или фрагмент содержит тяжелую цепь b), также содержит легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQTISKYLNWYQQKPGRAPKLLIYSASSLQSGVPSRFTGSGSGTDFTLTITSLQPEDFATYYCQQSYRPSQITFGPGTKVDIK (MAB8).
7. Антитело или фрагмент по п.1, которое(-ый) представляет собой биспецифическое антитело или фрагмент, которое(-ый) содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий
QVQLVQSGAEVRKPGSSVKVSCKVSGGIIRKYAINWVRQAPGQGLEWMGGIIAIFNTANYAQKFQGRVTITADESTSTVYMELSSLRSEDTALYYCARGMNYYSDYFDYWGQGSLVTVSP (MAB53) и
легкую цепь, содержащую, последовательность EIVLTQSPGTLSLSPGERATLSCRASQSVRSNNLAWYQHKPGQAPRLLIFGASSRATGIPDRFSGSGSGTDFTLTISRLEPEDFAVYYCQQYGSSPALTFGGGTKVEIK (MAB53), и
которое(-ый) содержит вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKTSGYTFTAYTIHWVRQAPGQRLEWMGWINAGNGHTKYSQRFKGRVTITRDTSARTTYMELRSLTSEDTALYFCARGPETYYYDKTNWLNSHPDEYFQHWGHGTQVTVSS (MAB579), и
легкую цепь, содержащую последовательность DIQMTQSPSTLSASVGDRVTITCRASQTINNYLAWYQQKPGKAPKLLIYKASSLESGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPDDFATYYCQEYNNDSPLTFGGGTKVEIK (MAB579).
8. Фармацевтическая композиция для использования в способе лечения или профилактики инфекции, вызванной гриппом, содержащая антитело или его фрагмент по любому из пп.1-7 в эффективной дозе против клады H3 и по меньшей мере нескольких вариантов клады H7 вируса гриппа A.
9. Применение антитела или его фрагмента по любому из пп.1-7 в способе лечения или профилактики инфекции гриппа у индивида, где указанное антитело или его фрагмент направлено против клады H3 и по меньшей мере нескольких вариантов клады H7 вируса гриппа A.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161567046P | 2011-12-05 | 2011-12-05 | |
US61/567,046 | 2011-12-05 | ||
PCT/US2012/068037 WO2013086052A2 (en) | 2011-12-05 | 2012-12-05 | Antibodies useful in passive influenza immunization |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2014127287A RU2014127287A (ru) | 2016-01-27 |
RU2668802C2 true RU2668802C2 (ru) | 2018-10-02 |
Family
ID=48575054
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014127287A RU2668802C2 (ru) | 2011-12-05 | 2012-12-05 | Антитела, используемые для пассивной вакцинации против гриппа |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10654915B2 (ru) |
EP (1) | EP2793945B1 (ru) |
JP (1) | JP6371222B2 (ru) |
CN (1) | CN104302321A (ru) |
AU (1) | AU2012347878B2 (ru) |
BR (1) | BR112014013640A8 (ru) |
CA (1) | CA2861515A1 (ru) |
DK (1) | DK2793945T3 (ru) |
ES (1) | ES2686526T3 (ru) |
HK (1) | HK1203410A1 (ru) |
IL (1) | IL232976A0 (ru) |
MX (1) | MX367743B (ru) |
RU (1) | RU2668802C2 (ru) |
WO (1) | WO2013086052A2 (ru) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9969794B2 (en) | 2012-05-10 | 2018-05-15 | Visterra, Inc. | HA binding agents |
AU2014236508A1 (en) * | 2013-03-14 | 2015-09-17 | Contrafect Corporation | Composition and methods based on neutralizing antibodies delivered intranasally for enhanced therapeutic efficacy |
AU2014329609B2 (en) | 2013-10-02 | 2019-09-12 | Humabs Biomed Sa | Neutralizing anti-influenza A antibodies and uses thereof |
WO2015120097A2 (en) | 2014-02-04 | 2015-08-13 | Contrafect Corporation | Antibodies useful in passive influenza immunization, and compositions, combinations and methods for use thereof |
US10639370B2 (en) | 2014-02-04 | 2020-05-05 | Contrafect Corporation | Antibodies useful in passive influenza immunization, and compositions, combinations and methods for use thereof |
AU2015289805B2 (en) | 2014-07-15 | 2020-06-25 | Humabs Biomed Sa | Neutralizing anti-influenza B antibodies and uses thereof |
DK3303384T3 (da) * | 2015-06-01 | 2021-10-18 | Medimmune Llc | Neutraliserende anti-influenza-bindingsmolekyler og anvendelser deraf |
WO2017083627A1 (en) | 2015-11-13 | 2017-05-18 | Visterra, Inc. | Compositions and methods for treating and preventing influenza |
SG11201805001UA (en) | 2016-01-13 | 2018-07-30 | Medimmune Llc | Method of treating influenza a |
US11780907B2 (en) | 2018-01-26 | 2023-10-10 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Human antibodies to influenza hemagglutinin |
AU2020248404A1 (en) | 2019-03-25 | 2021-09-30 | Visterra, Inc. | Compositions and methods for treating and preventing influenza |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4625015A (en) * | 1982-08-23 | 1986-11-25 | Scripps Clinic & Research Foundation | Broad spectrum influenza antisera |
US20090203538A1 (en) * | 2006-07-10 | 2009-08-13 | Institute For Antibodies Co., Ltd. | Method of classifying antibody, method of identifying antigen, method of obtaining antibody or antibody set, method of constructing antibody panel and antibody or antibody set and use of the same |
RU2366662C2 (ru) * | 2003-07-23 | 2009-09-10 | Фуджирибайо Инк. | Моноклональное антитело к вирусу типа а гриппа и устройство для иммунного анализа с использованием антитела |
US20100086555A1 (en) * | 2008-07-25 | 2010-04-08 | Institute For Research In Biomedicine | Neutralizing anti-influenza a virus antibodies and uses thereof |
WO2010130636A1 (en) * | 2009-05-11 | 2010-11-18 | Crucell Holland B.V. | Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h3n2 and uses thereof |
Family Cites Families (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6235708B1 (en) | 1998-11-20 | 2001-05-22 | Zymogenetics, Inc | Testis-specific cystatin-like protein cystatin T |
US20020006656A1 (en) | 1999-12-23 | 2002-01-17 | Holloway James L. | Zcys5: a member of the cystatin superfamily |
AU2002258621A1 (en) | 2001-03-28 | 2002-10-21 | Children's Medical Center Corporation | Fusion protein construct and method for inducing hiv-specific serum igg and secretory iga antibodies in-vivo |
WO2003080672A1 (en) | 2002-03-22 | 2003-10-02 | Aprogen, Inc. | Humanized antibody and process for preparing same |
US20040223976A1 (en) | 2003-03-07 | 2004-11-11 | Elisabetta Bianchi | Influenza virus vaccine |
KR101206206B1 (ko) | 2003-07-22 | 2012-11-29 | 크루셀 홀란드 비.브이. | 사스-코로나바이러스에 대한 결합분자 및 그것의 용도 |
US7413868B2 (en) | 2003-11-05 | 2008-08-19 | Trellis Bioscience, Inc. | Use of particulate labels in bioanalyte detection methods |
US20080014205A1 (en) | 2006-05-15 | 2008-01-17 | Lawrence Horowitz | Neutralizing Antibodies to Influenza Viruses |
WO2008028946A2 (en) | 2006-09-07 | 2008-03-13 | Crucell Holland B.V. | Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h5n1 and uses thereof |
JP5346820B2 (ja) | 2007-03-13 | 2013-11-20 | エイチユーエムエイビーエス・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | H5n1亜型a型インフルエンザウィルスに対する抗体 |
US20080299151A1 (en) | 2007-05-31 | 2008-12-04 | Statens Serum Institut | Influenza vaccines |
FR2921928B1 (fr) | 2007-10-08 | 2011-03-04 | Sanofi Pasteur | Anticorps monoclonaux specifiques de l'hemagglutinine du virus grippal |
US20110038935A1 (en) | 2007-12-06 | 2011-02-17 | Marasco Wayne A | Antibodies against influenza virus and methods of use thereof |
EP2262530A4 (en) * | 2008-03-03 | 2012-12-05 | Dyax Corp | Metalloproteinase-12 TIE PROTEINS |
AU2009228058A1 (en) | 2008-03-28 | 2009-10-01 | Sea Lane Biotechnologies, Llc | Neutralizing molecules to viral antigens |
AR073072A1 (es) | 2008-08-19 | 2010-10-13 | Regeneron Pharma | Anticuerpos humanos para el ligando del activador del receptor de nf-kb (rankl) humano |
US20120128684A1 (en) * | 2008-08-25 | 2012-05-24 | Burnham Institute For Medical Research | Conserved Hemagglutinin Epitope, Antibodies to the Epitope and Methods of Use |
US8540995B2 (en) | 2008-12-24 | 2013-09-24 | Temasek Life Sciences Laboratory Limited | Monoclonal antibodies specific to the fusion peptide from hemagglutinin from influenza A viruses and uses thereof |
US8975378B2 (en) | 2008-12-25 | 2015-03-10 | Osaka University | Human anti-human influenza virus antibody |
CN102482345A (zh) | 2009-05-13 | 2012-05-30 | 航道生物技术有限责任公司 | 针对流感病毒的中和分子 |
EP2552485B1 (en) | 2010-03-26 | 2017-03-08 | Pomona Ricerca S.r.l. | Full-length immunoglobulins of the igg isotype capable of recognizing a heterosubtype neutralizing epitope on the hemagglutinin stem region and their use as anti-influenza medicament |
ES2588708T3 (es) * | 2010-04-09 | 2016-11-04 | Universiteit Utrecht Holding B.V. | Proteínas de la gripe multiméricas recombinantes |
ES2687706T3 (es) | 2010-06-17 | 2018-10-26 | Trellis Bioscience, Llc | Anticuerpos útiles en la inmunización pasiva contra la gripe |
WO2012045001A2 (en) | 2010-09-30 | 2012-04-05 | Vanderbilt University | Influenza virus antibodies and immunogens and uses therefor |
EA027054B1 (ru) | 2011-07-14 | 2017-06-30 | Круселл Холланд Б.В. | Связывающие молекулы человека, способные нейтрализовать вирусы гриппа a филогенетической группы 1 и филогенетической группы 2 и вирусы гриппа b |
EP2814841A4 (en) | 2012-01-31 | 2015-06-17 | Univ Osaka | HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES FOR WIDE PROTECTION AGAINST INFLUENZA B VIRUS AND METHOD OF USE THEREOF |
MX360056B (es) | 2012-03-08 | 2018-10-19 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Moléculas de unión humanas que pueden unirse a los virus de la influenza b y neutralizarlos, y sus usos. |
AU2014236508A1 (en) | 2013-03-14 | 2015-09-17 | Contrafect Corporation | Composition and methods based on neutralizing antibodies delivered intranasally for enhanced therapeutic efficacy |
-
2012
- 2012-12-05 WO PCT/US2012/068037 patent/WO2013086052A2/en active Application Filing
- 2012-12-05 EP EP12854682.7A patent/EP2793945B1/en active Active
- 2012-12-05 BR BR112014013640A patent/BR112014013640A8/pt not_active IP Right Cessation
- 2012-12-05 ES ES12854682.7T patent/ES2686526T3/es active Active
- 2012-12-05 US US14/363,297 patent/US10654915B2/en active Active
- 2012-12-05 RU RU2014127287A patent/RU2668802C2/ru active
- 2012-12-05 AU AU2012347878A patent/AU2012347878B2/en not_active Ceased
- 2012-12-05 DK DK12854682.7T patent/DK2793945T3/en active
- 2012-12-05 MX MX2014006786A patent/MX367743B/es active IP Right Grant
- 2012-12-05 CN CN201280067362.1A patent/CN104302321A/zh active Pending
- 2012-12-05 JP JP2014546038A patent/JP6371222B2/ja active Active
- 2012-12-05 CA CA2861515A patent/CA2861515A1/en not_active Abandoned
-
2014
- 2014-06-05 IL IL232976A patent/IL232976A0/en unknown
-
2015
- 2015-04-29 HK HK15104163.6A patent/HK1203410A1/xx unknown
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4625015A (en) * | 1982-08-23 | 1986-11-25 | Scripps Clinic & Research Foundation | Broad spectrum influenza antisera |
RU2366662C2 (ru) * | 2003-07-23 | 2009-09-10 | Фуджирибайо Инк. | Моноклональное антитело к вирусу типа а гриппа и устройство для иммунного анализа с использованием антитела |
US20090203538A1 (en) * | 2006-07-10 | 2009-08-13 | Institute For Antibodies Co., Ltd. | Method of classifying antibody, method of identifying antigen, method of obtaining antibody or antibody set, method of constructing antibody panel and antibody or antibody set and use of the same |
US20100086555A1 (en) * | 2008-07-25 | 2010-04-08 | Institute For Research In Biomedicine | Neutralizing anti-influenza a virus antibodies and uses thereof |
WO2010130636A1 (en) * | 2009-05-11 | 2010-11-18 | Crucell Holland B.V. | Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h3n2 and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
WANG TAIA T. et al. "Broadly protective monoclonal antibodies against H3 influenza viruses following sequential immunization with different hemagglutinins." PLoS pathogens, 2010, 6(2): e1000796. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2793945B1 (en) | 2018-08-15 |
HK1203410A1 (en) | 2015-10-30 |
WO2013086052A3 (en) | 2013-08-08 |
AU2012347878A1 (en) | 2014-07-24 |
US10654915B2 (en) | 2020-05-19 |
BR112014013640A8 (pt) | 2021-03-16 |
MX367743B (es) | 2019-09-04 |
MX2014006786A (es) | 2015-03-05 |
NZ626716A (en) | 2017-11-24 |
RU2014127287A (ru) | 2016-01-27 |
WO2013086052A2 (en) | 2013-06-13 |
ES2686526T3 (es) | 2018-10-18 |
AU2012347878B2 (en) | 2018-05-10 |
BR112014013640A2 (pt) | 2017-06-13 |
US20140322210A1 (en) | 2014-10-30 |
DK2793945T3 (en) | 2018-09-03 |
AU2012347878A2 (en) | 2014-07-31 |
CN104302321A (zh) | 2015-01-21 |
CA2861515A1 (en) | 2013-06-13 |
EP2793945A4 (en) | 2015-09-09 |
IL232976A0 (en) | 2014-07-31 |
EP2793945A2 (en) | 2014-10-29 |
JP2015501815A (ja) | 2015-01-19 |
JP6371222B2 (ja) | 2018-08-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2668802C2 (ru) | Антитела, используемые для пассивной вакцинации против гриппа | |
US10815294B2 (en) | Neutralizing anti-influenza A virus antibodies and uses thereof | |
JP6022515B2 (ja) | 抗a型インフルエンザウイルス中和抗体およびその使用 | |
US8871207B2 (en) | Neutralizing anti-influenza A virus antibodies and uses thereof | |
JP6325451B2 (ja) | A型インフルエンザに特異的な抗体 | |
RU2635999C2 (ru) | Антитела, подходящие для пассивной иммунизации против гриппа | |
JP2022061986A (ja) | A型インフルエンザウイルス中和抗体及びその使用法 | |
NZ626716B2 (en) | Antibodies useful in passive influenza immunization |