RU2658485C2 - Химерные антигенные рецепторы м971 - Google Patents
Химерные антигенные рецепторы м971 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2658485C2 RU2658485C2 RU2015117237A RU2015117237A RU2658485C2 RU 2658485 C2 RU2658485 C2 RU 2658485C2 RU 2015117237 A RU2015117237 A RU 2015117237A RU 2015117237 A RU2015117237 A RU 2015117237A RU 2658485 C2 RU2658485 C2 RU 2658485C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- car
- seq
- cell
- cancer
- domain
- Prior art date
Links
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 title claims description 223
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 67
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 67
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 67
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 66
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 64
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 63
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 63
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 53
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 52
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 51
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 claims abstract description 50
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 claims abstract description 50
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 43
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 33
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000004044 response Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 163
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 98
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 46
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 44
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 39
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims description 37
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 claims description 34
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 claims description 28
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 claims description 28
- 230000011664 signaling Effects 0.000 claims description 25
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 claims description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 claims description 5
- 208000004736 B-Cell Leukemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 claims description 3
- 230000000139 costimulatory effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 12
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 claims 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 abstract description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 46
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 45
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 32
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 22
- -1 Asp or Glu) Chemical class 0.000 description 17
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 17
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 15
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 13
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 11
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 8
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 8
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 8
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 7
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 7
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 7
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 7
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 7
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 7
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 7
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 7
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 6
- 208000024893 Acute lymphoblastic leukemia Diseases 0.000 description 5
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 5
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 5
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 5
- 208000014697 Acute lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 4
- 208000010839 B-cell chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 4
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 4
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 4
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 4
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 4
- 208000031422 Lymphocytic Chronic B-Cell Leukemia Diseases 0.000 description 4
- 208000006664 Precursor Cell Lymphoblastic Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 208000032852 chronic lymphocytic leukemia Diseases 0.000 description 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 4
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 4
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 4
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 4
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 4
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 4
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 208000011691 Burkitt lymphomas Diseases 0.000 description 3
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 3
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 3
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 201000009277 hairy cell leukemia Diseases 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- WOXWUZCRWJWTRT-UHFFFAOYSA-N 1-amino-1-cyclohexanecarboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1(N)CCCCC1 WOXWUZCRWJWTRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RFLVMTUMFYRZCB-UHFFFAOYSA-N 1-methylguanine Chemical compound O=C1N(C)C(N)=NC2=C1N=CN2 RFLVMTUMFYRZCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecanoic acid Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 2,4-diaminobutyric acid Chemical compound NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 3-aminoalanine Chemical compound [NH3+]CC(N)C([O-])=O PECYZEOJVXMISF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 4-sulfanylidene-1h-pyrimidin-2-one Chemical compound SC=1C=CNC(=O)N=1 OVONXEQGWXGFJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OIVLITBTBDPEFK-UHFFFAOYSA-N 5,6-dihydrouracil Chemical compound O=C1CCNC(=O)N1 OIVLITBTBDPEFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 2
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 2
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 2
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 2
- 208000021519 Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 2
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000013602 bacteriophage vector Substances 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 2
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 2
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 2
- 208000014829 head and neck neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 230000001400 myeloablative effect Effects 0.000 description 2
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000008180 pharmaceutical surfactant Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- ZFRUKGATCGLSPK-HIIDTWFESA-N (2S)-2-amino-3-hydroxy-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C(O)C1=CC=CC=C1.OC(=O)[C@@H](N)C(O)C1=CC=CC=C1 ZFRUKGATCGLSPK-HIIDTWFESA-N 0.000 description 1
- OCLLVJCYGMCLJG-CYBMUJFWSA-N (2r)-2-azaniumyl-2-naphthalen-1-ylpropanoate Chemical compound C1=CC=C2C([C@@](N)(C(O)=O)C)=CC=CC2=C1 OCLLVJCYGMCLJG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- QFQYGJMNIDGZSG-YFKPBYRVSA-N (2r)-3-(acetamidomethylsulfanyl)-2-azaniumylpropanoate Chemical compound CC(=O)NCSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QFQYGJMNIDGZSG-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-(cyclohexylazaniumyl)propanoate Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC1CCCCC1 BVAUMRCGVHUWOZ-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-azaniumyl-2-cyclohexylacetate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1CCCCC1 WAMWSIDTKSNDCU-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 1,1-difluorocyclohexane Chemical compound FC1(F)CCCCC1 ZORQXIQZAOLNGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-3-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2CNC(C(=O)O)CC2=C1 BWKMGYQJPOAASG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WJNGQIYEQLPJMN-IOSLPCCCSA-N 1-methylinosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)N(C)C=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O WJNGQIYEQLPJMN-IOSLPCCCSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- KNQHBAFIWGORKW-UHFFFAOYSA-N 2,3-diamino-3-oxopropanoic acid Chemical compound NC(=O)C(N)C(O)=O KNQHBAFIWGORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HLYBTPMYFWWNJN-UHFFFAOYSA-N 2-(2,4-dioxo-1h-pyrimidin-5-yl)-2-hydroxyacetic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C1=CNC(=O)NC1=O HLYBTPMYFWWNJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGAKLDIYNFXTCK-UHFFFAOYSA-N 2-[(2,4-dioxo-1h-pyrimidin-5-yl)methylamino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC1=CNC(=O)NC1=O SGAKLDIYNFXTCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UWAMFJWBEGHFQE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-7-methyl-3h-purin-6-one;5-(methylaminomethyl)-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound CNCC1=CNC(=O)NC1=O.N1=C(N)NC(=O)C2=C1N=CN2C UWAMFJWBEGHFQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JINGUCXQUOKWKH-UHFFFAOYSA-N 2-aminodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(N)C(O)=O JINGUCXQUOKWKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMSMHKMPBNTBOD-UHFFFAOYSA-N 2-dimethylamino-6-hydroxypurine Chemical compound N1C(N(C)C)=NC(=O)C2=C1N=CN2 XMSMHKMPBNTBOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YXDGRBPZVQPESQ-QMMMGPOBSA-N 4-[(2s)-2-amino-2-carboxyethyl]benzoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 YXDGRBPZVQPESQ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- GJAKJCICANKRFD-UHFFFAOYSA-N 4-acetyl-4-amino-1,3-dihydropyrimidin-2-one Chemical compound CC(=O)C1(N)NC(=O)NC=C1 GJAKJCICANKRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMUHFUGDYMFHEI-QMMMGPOBSA-N 4-amino-L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N)C=C1 CMUHFUGDYMFHEI-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1-piperidin-4-ylpyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CC(O)CN1C1CCNCC1 HIQIXEFWDLTDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GTVVZTAFGPQSPC-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenylalanine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 GTVVZTAFGPQSPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPYRHVXCOQLYLY-UHFFFAOYSA-N 5-[(methoxyamino)methyl]-2-sulfanylidene-1h-pyrimidin-4-one Chemical compound CONCC1=CNC(=S)NC1=O WPYRHVXCOQLYLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQLQRFGHAALLLE-UHFFFAOYSA-N 5-bromouracil Chemical compound BrC1=CNC(=O)NC1=O LQLQRFGHAALLLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VKLFQTYNHLDMDP-PNHWDRBUSA-N 5-carboxymethylaminomethyl-2-thiouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=S)NC(=O)C(CNCC(O)=O)=C1 VKLFQTYNHLDMDP-PNHWDRBUSA-N 0.000 description 1
- ZFTBZKVVGZNMJR-UHFFFAOYSA-N 5-chlorouracil Chemical compound ClC1=CNC(=O)NC1=O ZFTBZKVVGZNMJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSNXJLQDQOIRIP-UHFFFAOYSA-N 5-iodouracil Chemical compound IC1=CNC(=O)NC1=O KSNXJLQDQOIRIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KELXHQACBIUYSE-UHFFFAOYSA-N 5-methoxy-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound COC1=CNC(=O)NC1=O KELXHQACBIUYSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 5-methyl-2-sulfanylidene-1h-pyrimidin-4-one Chemical compound CC1=CNC(=S)NC1=O ZLAQATDNGLKIEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 5-methylcytosine Chemical compound CC1=CNC(=O)N=C1N LRSASMSXMSNRBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 6,7-dimethyl-3-[[methyl-[2-[methyl-[[1-[3-(trifluoromethyl)phenyl]indol-3-yl]methyl]amino]ethyl]amino]methyl]chromen-4-one;dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C=1OC2=CC(C)=C(C)C=C2C(=O)C=1CN(C)CCN(C)CC(C1=CC=CC=C11)=CN1C1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 GOZMBJCYMQQACI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 6-amino-1h-pyrimidine-2-thione Chemical compound NC1=CC=NC(S)=N1 DCPSTSVLRXOYGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical class [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 208000007860 Anus Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 description 1
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 206010005949 Bone cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000003174 Brain Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010007279 Carcinoid tumour of the gastrointestinal tract Diseases 0.000 description 1
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 1
- 241001466804 Carnivora Species 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108091007741 Chimeric antigen receptor T cells Proteins 0.000 description 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 1
- 229920002785 Croscarmellose sodium Polymers 0.000 description 1
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000000311 Cytosine Deaminase Human genes 0.000 description 1
- 108010080611 Cytosine Deaminase Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 239000004338 Dichlorodifluoromethane Substances 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000620209 Escherichia coli DH5[alpha] Species 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282324 Felis Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N Fenclonine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 NIGWMJHCCYYCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000008808 Fibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000746373 Homo sapiens Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- ZQISRDCJNBUVMM-UHFFFAOYSA-N L-Histidinol Natural products OCC(N)CC1=CN=CN1 ZQISRDCJNBUVMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N L-alpha-phenylglycine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- ZQISRDCJNBUVMM-YFKPBYRVSA-N L-histidinol Chemical compound OC[C@@H](N)CC1=CNC=N1 ZQISRDCJNBUVMM-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- JTTHKOPSMAVJFE-VIFPVBQESA-N L-homophenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC1=CC=CC=C1 JTTHKOPSMAVJFE-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010023825 Laryngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010024291 Leukaemias acute myeloid Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000034578 Multiple myelomas Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- HYVABZIGRDEKCD-UHFFFAOYSA-N N(6)-dimethylallyladenine Chemical compound CC(C)=CCNC1=NC=NC2=C1N=CN2 HYVABZIGRDEKCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028729 Nasal cavity cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001894 Nasopharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010061306 Nasopharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 102000004459 Nitroreductase Human genes 0.000 description 1
- 208000010505 Nose Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 1
- 208000009565 Pharyngeal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010034811 Pharyngeal cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 229920002614 Polyether block amide Polymers 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101710101148 Probable 6-oxopurine nucleoside phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102000030764 Purine-nucleoside phosphorylase Human genes 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 244000000231 Sesamum indicum Species 0.000 description 1
- 235000003434 Sesamum indicum Nutrition 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000032383 Soft tissue cancer Diseases 0.000 description 1
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 1
- 208000000102 Squamous Cell Carcinoma of Head and Neck Diseases 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241001493546 Suina Species 0.000 description 1
- ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N Sulfobutanedioic acid Chemical class OC(=O)CC(C(O)=O)S(O)(=O)=O ULUAUXLGCMPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108020005038 Terminator Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 206010066901 Treatment failure Diseases 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical class OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010046431 Urethral cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010046458 Urethral neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 241000021375 Xenogenes Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000061 acid fraction Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010065867 alveolar rhabdomyosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 210000002255 anal canal Anatomy 0.000 description 1
- 201000007696 anal canal cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000000719 anti-leukaemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 108091006004 biotinylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000001531 bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 1
- 230000005859 cell recognition Effects 0.000 description 1
- 230000005889 cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 238000000975 co-precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000007891 compressed tablet Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 229960001681 croscarmellose sodium Drugs 0.000 description 1
- 235000010947 crosslinked sodium carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N dichlorodifluoromethane Chemical compound FC(F)(Cl)Cl PXBRQCKWGAHEHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019404 dichlorodifluoromethane Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 210000000959 ear middle Anatomy 0.000 description 1
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012776 electronic material Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 208000024519 eye neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000007487 gallbladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229960004275 glycolic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 201000010536 head and neck cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000000459 head and neck squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- QNRXNRGSOJZINA-UHFFFAOYSA-N indoline-2-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2NC(C(=O)O)CC2=C1 QNRXNRGSOJZINA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 210000003228 intrahepatic bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000007794 irritation Effects 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 206010023841 laryngeal neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000011475 lollipops Nutrition 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 108010026228 mRNA guanylyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001055 magnesium Nutrition 0.000 description 1
- 208000006178 malignant mesothelioma Diseases 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000026037 malignant tumor of neck Diseases 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 201000006512 mast cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000006971 mastocytoma Diseases 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000713 mesentery Anatomy 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 201000003956 middle ear cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- XJVXMWNLQRTRGH-UHFFFAOYSA-N n-(3-methylbut-3-enyl)-2-methylsulfanyl-7h-purin-6-amine Chemical compound CSC1=NC(NCCC(C)=C)=C2NC=NC2=N1 XJVXMWNLQRTRGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 201000007425 nasal cavity carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 108020001162 nitroreductase Proteins 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 201000008106 ocular cancer Diseases 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 210000002747 omentum Anatomy 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 235000015205 orange juice Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 201000002628 peritoneum cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L phosphoramidate Chemical compound NP([O-])([O-])=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 210000004224 pleura Anatomy 0.000 description 1
- 201000003437 pleural cancer Diseases 0.000 description 1
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 1
- 229920005606 polypropylene copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 210000004986 primary T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 229920000260 silastic Polymers 0.000 description 1
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003885 sodium benzoate Drugs 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- RNVYQYLELCKWAN-UHFFFAOYSA-N solketal Chemical compound CC1(C)OCC(CO)O1 RNVYQYLELCKWAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001593 sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000011069 sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035049 sorbitan monooleate Drugs 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid group Chemical class S(O)(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- BJBUEDPLEOHJGE-IMJSIDKUSA-N trans-3-hydroxy-L-proline Chemical compound O[C@H]1CC[NH2+][C@@H]1C([O-])=O BJBUEDPLEOHJGE-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-IMJSIDKUSA-N trans-4-Hydroxy-L-proline Natural products O[C@@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000010570 urinary bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 210000003905 vulva Anatomy 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000012130 whole-cell lysate Substances 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
- XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L zinc stearate Chemical compound [Zn+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
- A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464412—CD19 or B4
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
- A61K39/464413—CD22, BL-CAM, siglec-2 or sialic acid binding Ig-related lectin 2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
- C07K16/3061—Blood cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
- C12N5/0638—Cytotoxic T lymphocytes [CTL] or lymphokine activated killer cells [LAK]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5158—Antigen-pulsed cells, e.g. T-cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/70—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction
- C07K2319/74—Fusion polypeptide containing domain for protein-protein interaction containing a fusion for binding to a cell surface receptor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
- C12N15/625—DNA sequences coding for fusion proteins containing a sequence coding for a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/64—General methods for preparing the vector, for introducing it into the cell or for selecting the vector-containing host
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
- C12N2501/505—CD4; CD8
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
- C12N2501/599—Cell markers; Cell surface determinants with CD designations not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2510/00—Genetically modified cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
- C12N5/0636—T lymphocytes
Abstract
Изобретение относится к области биохимии, в частности к химерному антигенному рецептору (CAR), вызывающему антигенспецифический ответ против CD22 при связывании CAR с CD22, нуклеиновой кислоте, его кодирующей, а также к вектору и клетке-хозяину, содержащим вышеуказанную нуклеиновую кислоту. Также раскрыты фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака у млекопитающего, а также способ лечения или профилактики рака у млекопитающего с использованием вышеуказанного CAR. Изобретение также относится к применению вышеуказанной клетки-хозяина для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики рака, где рак экспрессирует CD22, а также для изготовления композиции для обнаружения рака, где рак экспрессирует CD22. Изобретение позволяет эффективно осуществлять лечение или профилактику рака у млекопитающего. 10 н. и 21 з.п. ф-лы, 6 ил., 3 табл., 7 пр.
Description
Перекрестная ссылка на родственную заявку
[0001] Данная патентная заявка претендует на приоритет предварительной патентной заявки США №61/717960, поданной 24 октября 2012 года, которая включена в данный документ во всей ее полноте посредством ссылки. Заявление о Федеральной поддержке научных исследований Настоящее изобретение было создано при поддержке Правительства с №проекта Z01 ZIA ВС 010701 Национальным институтом здоровья, Национальным институтом онкологии. Правительство имеет определенные права на изобретение.
Включение посредством ссылки материала, представленного в электронном виде
[0002] Включенный в данный документ в полном объеме посредством ссылки читаемый на компьютере список нуклеотидных/аминокислотных последовательностей, представленный одновременно с данной заявкой и определенный следующим образом: один файл размером 31786 байт ASCII (Text) с названием "714144_ST25.txt", созданный 30 августа 2013 г.
Уровень техники
[0003] Рак является проблемой общественного здравоохранения. Несмотря на успехи в лечении, такие как химиотерапия, прогноз для многих видов рака, в том числе гематологических злокачественных новообразований, может быть плохим. Например, было подсчитано, что в 2000 году в Соединенных Штатах Америки ожидалось более 45000 смертей от неходжкинской лимфомы и лейкемии (Greenlee et al., СА Cancer J. Clin., 50:7-33 (2000)). Соответственно, существует неудовлетворенная потребность в дополнительных способах лечения рака, в частности, гематологических злокачественных новообразований.
Сущность изобретения
[0004] Воплощение данного изобретения предусматривает химерный антигенный рецептор (chimeric antigen receptor, CAR), содержащий антигенсвязывающий домен с SEQ ID NO 1-6, трансмембранный домен и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга.
[0005] Другие воплощения изобретения предусматривают родственные нуклеиновые кислоты, рекомбинантные экспрессионные векторы, клетки-хозяева, популяции клеток, антитела или их антигенсвязывающие части и фармацевтические композиции, относящиеся к CAR согласно изобретению.
[0006] Дополнительные воплощения данного изобретения предусматривают способы обнаружения присутствия рака у млекопитающего и способы лечения или профилактики рака у млекопитающего.
Краткое описание графических материалов
[0007] На фиг. 1A-1G представлены графики, показывающие % лизиса целевых 51Cr-меченых лейкемических клеточных линий REH (A), SEM (В), NALM6-GL (С), KOPN8 (D), Daudi (Е), Raji (F) и К562 (G) эффекторными Т-клетками человека, которые были нетрансдуцированными (имитирующими, контрольными, mock; •; круги) или трансдуцированными следующими CAR: HA22-SH второго поколения версии 1 (▲), m971 второго поколения версии 1 (▲; прозрачный треугольник) или CD19-специфический CAR (■; квадраты); с различным соотношением эффектора к мишени (Е: Т).
[0008] На фиг. 2А-2С представлены графики, показывающие % лизиса целевых лейкемических клеточных линий Raji (A), NALM6-GL (В) или K562 (С) эффекторными нетрансдуцированными Т-клетками (mock, •; круги), m971 второго поколения версии 1 CAR (▲) или m971 третьего поколения CAR (▼) с различным соотношением Е: Т.
[0009] На фиг. 3А-3С представлены графики, показывающие количества интерферона (IFN)-γ (пг/мл), секретируемые Т-клетками, которые были нетрансдуцированными (mock) или трансдуцированными одним из следующих CAR: анти-CD19, m971 второго поколения версии 1 (SEQ ID NO 23), m971 третьего поколения (SEQ ID NO 24), HASH22 второго поколения версии 1, HASH22 второго поколения версии 2 или HASH22 третьего поколения; при совместном культивировании с лейкемическими клеточными линиями NALM6-GL (CD22низ) (А), Raji (CD22выс) (В) или K562 (CD22-отрицательная) (С).
[0010] На фиг. 3D-3F представлены графики, показывающие количества интерлейкина (IL) 2 (пг/мл), секретируемые Т-клетками, которые были нетрансдуцированными (mock) или трансдуцированными одним из следующих CAR: анти-CD19, m971 второго поколения версии 1 (SEQ ID NO 23), m971 третьего поколения (SEQ ID NO 24), HASH22 второго поколения версии 1, HASH22 второго поколения версии 2 или HASH22 третьего поколения; при совместном культивировании с лейкемическими клеточными линиями NALM6-GL (CD22низ) (А), Raji (CD22выс) (В) или K562 (CD22-отрицательная) (С).
[0011] На фиг. 3G-3I представлены графики, показывающие количества фактора некроза опухоли (TNF) α (пг/мл), секретируемые Т-клетками, которые были нетрансдуцированными (mock) или трансдуцированными одним из следующих CAR: анти-CD19, m971 второго поколения версии 1 (SEQ ID NO 23), m971 третьего поколения (SEQ ID NO 24), HASH22 второго поколения версии 1, HASH22 второго поколения версии 2 или HASH22 третьего поколения; при совместном культивировании с лейкемическими клеточными линиями NALM6-GL (CD22низ) (А), Raji (CD22выс) (В) или K562 (С022-отрицательная) (С).
[0012] На фиг. 4А представлен график, показывающий биолюминесцентные сигналы (фотон/с/см2/стерадиан), полученные в результате реакции люциферазы (трансфицированной в лейкемические клетки, которые вводили мышам) с люциферином, который вводили мышам, и измеряемые в течение 30 дней. Мышам вводили контрольные Т-клетки ("mock", нетрансдуцированные, •; круги) или Т-клетки, трансдуцированные CAR HASH22 второго поколения версии 1 (■; квадраты) или т971 второго поколения версии 1 (треугольники, SEQ ID NO 23). Большие значения фотонов/с/см2/стерадиан указывают на большую опухолевую массу.
[0013] На фиг. 4В представлен график, показывающий процент выживаемости мышей, получавших контрольные Т-клетки ("mock" нетрансдуцированные, квадраты) или Т-клетки, трансдуцированные CAR HASH22 второго поколения версии 1 (круги) или CAR 971 второго поколения версии 1 (треугольники, SEQ ID NO 23) в течение 30 дней, (mock в сравнении с НА22, р=0,0019;. mock в сравнении с m971, р=0,0019;. М971 в сравнении с НА22, р=0,003).
[0014] На фиг. 5 представлена таблица, показывающая биолюминесцентные изображения мышей с лейкемией через три, пять и восемь дней после введения нетрансдуцированных Т-клеток (mock) или 15×106, 5×106, 1×106 или 1×105Т-клеток, трансдуцированных нуклеотидной последовательностью, кодирующей CAR m971 второго поколения версии 2 (SEQ ID NO 22). Изменение штриховки от серого к белому показывает увеличение массы опухоли.
[0015] На фиг. 6 представлен график, показывающий общее число фотонов, испускаемых при биолюминесценции мышей, показанной на фиг.5, в течение 44 дней. Общее число фотонов количественно оценивали и наносили на график, и средние и стандартные отклонения показывали для каждой временной точки. Мышам вводили нетрансдуцированные Т-клетки (mock) (знак плюса) или 15×106 (ромб), 5×106 (цветок), 1×106 (крест) или 1×105 (звезда) Т-клеток, трансдуцированных нуклеотидной последовательностью, кодирующей CAR m971 второго поколения версии 2 (SEQ ID NO 22).
Подробное описание изобретения
[0016] Воплощение данного изобретения предусматривает химерный антигенный рецептор (CAR), содержащий антигенсвязывающий домен с SEQ ID NO 1-6, трансмембранный домен и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга.
[0017] CAR представляет собой искусственно созданный гибридный белок или полипептид, содержащий антигенсвязывающие домены антитела (например, одноцепочечный вариабельный фрагмент (scFv)), связанный с доменами Т-клеточного сигналинга. Характеристики CAR включают способность перенаправлять Т-клеточную специфичность и реактивность на выбранную мишень МНС-неограниченным образом, используя антигенсвязывающие свойства моноклональных антител. МНС-неограниченное распознавание антигена дает Т-клеткам, экспрессирующим CAR, способность распознавать антиген независимо от процессинга антигена, таким образом, минуя главный механизм избегания опухоли. Более того, при экспрессии в Т-клетках CAR преимущественно не димеризуются с альфа- и бета-цепями эндогенного Т-клеточного рецептора (TCR).
[0018] Фразы "обладает антигенной специфичностью" и "вызывает антигенспецифический ответ", используемые в данном документе, означают, что CAR может специфически связываться и иммунологически распознавать антиген таким образом, что связывание CAR с антигеном вызывает иммунный ответ.
[0019] CAR согласно изобретению обладают антигенной специфичностью к CD22. CD22 представляет собой линиеспецифический В-клеточный антиген, принадлежащих суперсемейству иммуноглобулинов (lg). CD22 экспрессируется на 60-70% В-клеточных лимфом и лейкемий (например, В-хроническом лимфолейкозе, волосатоклеточной лейкемии, остром лимфобластном лейкозе (ALL) и лимфоме Беркитта) и не присутствует на клеточной поверхности на ранних стадиях В-клеточного развития или на стволовых клетках. Vaickus et al., Crit. Rev. Oncol./Hematol., 11:267-297 (1991); Bang et al., Clin. Cancer Res., 11: 1545-50 (2005).
[0020] Без связи с конкретной теорией или механизмом, полагают, что, вызывая антигенспецифический ответ против CD22, CAR согласно изобретению вызывают одно или более чем одно из следующих явлений: нацеливание и разрушение CD22-экспрессирующих раковых клеток, уменьшение или устранение раковых клеток, облегчение инфильтрации мест(а) опухоли иммунными клетками и усиление/удлинение противораковых ответов. Поскольку CD22 не экспрессируется на ранних стадиях В-клеточного развития или на стволовых клетках, предполагается, что CAR согласно изобретению преимущественно по существу не вызывают нацеливания/уничтожения стволовых клеток и/или В-клеток на ранних стадиях развития.
[0021] Воплощение данного изобретения предусматривает CAR, содержащий антигенсвязывающий домен антитела m971 ("m971"). Антигенсвязывающий домен m971 специфически связывается с CD22. В связи с этим предпочтительное воплощение данного изобретения предусматривает CAR, содержащие антигенсвязывающий домен, содержащий, состоящий из или состоящий по существу из одноцепочечного вариабельного фрагмента (scFv) антигенсвязывающего домена m971. Антитело m971 имеет улучшенное связывание с CD22 по сравнению с иммунотоксином НА22, а также связывается с другим эпитопом CD22. Xiao et al., mAbs 1:3, 297-303 (2009).
[0022] Антигенсвязывающий домен может содержать вариабельную область легкой цепи и/или вариабельную область тяжелой цепи. В одном воплощении изобретения вариабельная область тяжелой цепи содержит область CDR1, область CDR2 и область CDR3. В связи с этим антигенсвязывающий домен может содержать одну или более чем одну из CDR1-области тяжелой цепи, включающей SEQ ID NO 1; CDR2-области тяжелой цепи, включающей SEQ ID NO 2; и CDR3-области тяжелой цепи, включающей SEQ ID NO 3. Предпочтительно тяжелая цепь содержит все SEQ ID NO 1-3.
[0023] В одном воплощении изобретения вариабельная область легкой цепи может содержать CDR1-область легкой цепи, CDR2-область легкой цепи и CDR3-область легкой цепи. В связи с этим антигенсвязывающий домен может содержать одну или более чем одну из CDR1-области легкой цепи, включающей SEQ ID NO 4; CDR2-область легкой цепи, включающей SEQ ID NO 5; и CDRS-области легкой цепи, включающей SEQ ID NO 6. Предпочтительно, легкая цепь содержит все SEQ ID NO 4-6. В особенно предпочтительном воплощении антигенсвязывающий домен содержит все последовательности SEQ ID NO 1-6.
[0024] Вариабельная область легкой цепи антигенсвязывающего домена может содержать, состоять из или состоять по существу из SEQ ID NO 7. Вариабельная область тяжелой цепи антигенсвязывающего домена может содержать, состоять из или состоять по существу из SEQ ID NO 8. Соответственно, в одном из воплощений изобретения антигенсвязывающий домен содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую последовательность SEQ ID NO 7, и/или вариабельную область тяжелой цепи, содержащую последовательность SEQ ID NO 8. Предпочтительно, антигенсвязывающий домен содержит обе SEQ ID NO 7 и 8.
[0025] В одном воплощении изобретения вариабельная область легкой цепи и вариабельная область тяжелой цепи могут быть соединены с помощью линкера. Линкер может содержать любую подходящую аминокислотную последовательность. В одном воплощении изобретения линкер может содержать, состоять или по существу состоять из SEQ ID NO 11.
[0026] В одном воплощении антигенсвязывающий домен содержит вариабельную область легкой цепи и вариабельную область тяжелой цепи. В связи с этим воплощение антигенсвязывающего домена, содержащего и вариабельную область легкой цепи, и вариабельную область тяжелой цепи, содержит, состоит из или по существу состоит из SEQ ID NO 9.
[0027] В одном воплощении антигенсвязывающий домен содержит лидерную последовательность. Лидерная последовательность может быть расположена на амино-конце вариабельной области легкой цепи. Лидерная последовательность может содержать любую подходящую лидерную последовательность. В одном воплощении лидерная последовательность является последовательностью рецептора человеческого гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF). В связи с этим антигенсвязывающий домен содержит лидерную последовательность, содержащую, состоящую из или по существу состоящую из SEQ ID NO 10. В одном воплощении данного изобретения, в то время как лидерная последовательность может облегчить экспрессию CAR на поверхности клетки, наличие лидерной последовательности в экспрессированном CAR не является необходимым для того, чтобы CAR функционировал. В одном воплощении изобретения при экспрессии CAR на клеточной поверхности лидерная последовательность может быть отщеплена от CAR. Соответственно, в одном воплощении изобретения CAR не имеет лидерной последовательности.
[0028] В одном воплощении изобретения CAR содержит трансмембранный домен. В одном воплощении изобретения трансмембранный домен содержит i) CD8 и/или ii) CD28. В предпочтительном воплощении CD8 и CD28 являются человеческими. CD8 или CD28 могут содержать меньше, чем целый CD8 или CD28, соответственно. В связи с этим CAR содержит трансмембранный домен CD8, содержащий, состоящий из или состоящий по существу из SEQ ID NO 12 или 18, и/или трансмембранный домен CD28, содержащий, состоящий из или по существу состоящий из SEQ ID NO 15.
[0029] В одном воплощении изобретения CAR включает внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий один или более чем один из i) CD28, ii) CD137 и/или iii) CD3 дзета (ζ). В предпочтительном воплощении CD28, CD137 и CD3 дзета являются человеческими. CD28 является Т-клеточным маркером, важным в костимуляции Т-клеток. CD137, также известный как 4-1 ВВ, передает мощный костимулирующий сигнал Т-клеткам, стимулируя дифференцировку и удлиняя долгосрочное выживание Т-лимфоцитов. CD3ζ ассоциируется с TCR, образуя сигнал, и содержит мотив активации иммунорецептора на основе тирозина (ITAM). CD28, CD137 или CD3 дзета могут содержать меньше, чем целый CD28, CD137 или CD3 дзета, соответственно. В связи с этим внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга содержит аминокислотную последовательность CD28 содержащую, состоящую из или по существу состоящую из SEQ ID NO 16 или 19, аминокислотную последовательность CD137, включающую, состоящую из или по существу состоящую из SEQ ID NO 13 или 20, и/или аминокислотную последовательность CD3 дзета, включающую, состоящую из или по существу состоящую из SEQ ID NO 14, 17 или 21.
[0030] В одном воплощении изобретения CAR содержит трансмембранный домен, содержащий CD28, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD28 и CD3 дзета. В связи с этим CAR может содержать каждый из SEQ ID NO 15-17. Предпочтительно, CAR включает а) каждый из SEQ ID NO 1-6 и 15-17; b) 7-8 и 15-17; с) 9 и 15-17; или d) 9-10 и 15-17.
[0031] В одном воплощении изобретения CAR содержит трансмембранный домен, содержащий CD8, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD28, CD137 и CD3 дзета. В связи с этим CAR может содержать каждый из SEQ ID NO 18-21. Предпочтительно, CAR включает а) каждый из SEQ ID NO 1-6 и 18-21; b) 7-8 и 18-21; с) 9 и 18-21; или d) 9-10 и 18-21.
[0032] В одном воплощении изобретения CAR содержит трансмембранный домен, содержащий CD8, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD137 и CD3 дзета. В связи с этим CAR может содержать каждый из SEQ ID NO 12-14. Предпочтительно, CAR включает а) каждый из SEQ ID NO 1-6 и 12-14; b) 7-8 и 12-14; с) 9 и 12-14; или d) 9-10 и 12-14.
[0033] Дополнительные воплощения данного изобретения предусматривают CAR, содержащие, состоящие из или по существу состоящие из любой аминокислотной последовательности, приведенной в таблице 1.
[0034] В объем данного изобретения включены функциональные части описанных CAR согласно изобретению. Термин "функциональная часть", используемый в отношении к CAR, относится к любой части или фрагменту CAR согласно изобретению, где часть или фрагмент сохраняет биологическую активность того CAR, частью которого он является (родительского CAR). Функциональные части охватывают, например, те части CAR, которые сохраняют способность распознавать клетки-мишени или обнаруживать, излечивать или предотвращать заболевание в подобной степени, в той же степени или в большей степени, чем родительский CAR. В отношении родительского CAR функциональная часть может содержать, например, примерно 10%, 25%, 30%, 50%, 68%, 80%, 90%, 95% или более от родительского CAR.
[0035] Функциональная часть может содержать дополнительные аминокислоты на амино- или карбокси-конце или на обоих концах, где дополнительные аминокислоты не присутствуют в аминокислотной последовательности родительского CAR. Желательно, чтобы дополнительные аминокислоты не мешали биологической функции функциональной части, например, распознаванию клеток-мишеней, обнаружению рака, лечению или профилактике рака и т.д. Более предпочтительно, чтобы дополнительные аминокислоты повышали биологическую активность CAR по сравнению с биологической активностью родительского CAR.
[0036] В объем данного изобретения включены функциональные варианты описанного CAR согласно изобретению. Термин "функциональный вариант", используемый в данном документе, относится к CAR, полипептиду или белку, имеющему существенную или значительную идентичность или сходство последовательности с родительским CAR, при этом функциональный вариант сохраняет биологическую активность того CAR, вариантом которого он является. Функциональные варианты охватывают, например, те варианты CAR, описанные в данном документе (родительский CAR), которые сохраняют способность распознавать клетки-мишени в подобной степени, в той же степени или в большей степени, чем родительский CAR. В отношении родительского CAR функциональный вариант может быть, например, примерно на 30% идентичен, примерно на 50% идентичен, примерно на 75% идентичен, примерно на 80% идентичен, примерно на 90% идентичен, примерно на 98% идентичен или примерно на 99% идентичен аминокислотной последовательности родительского CAR.
[0037] Функциональный вариант может, например, включать аминокислотную последовательность родительского CAR по меньшей мере с одной консервативной аминокислотной заменой. Альтернативно или дополнительно, функциональные варианты могут содержать аминокислотную последовательность родительского CAR по меньшей мере с одной неконсервативной аминокислотной заменой. В этом случае предпочтительно, чтобы неконсервативная аминокислотная замена не мешала или не ингибировала биологическую активность функционального варианта. Неконсервативная аминокислотная замена может повышать биологическую активность функционального варианта, так что биологическая активность функционального варианта увеличивается по сравнению с родительским CAR.
[0038] Аминокислотные замены CAR согласно изобретению предпочтительно являются консервативными аминокислотными заменами. Консервативные аминокислотные замены известны в данной области и включают аминокислотные замены, в которых одна аминокислота с определенными физическими и/или химическими свойствами заменена на другую аминокислоту с такими же или подобными химическими или физическими свойствами. Например, консервативная аминокислотная замена может быть кислой/отрицательно заряженной полярной аминокислотой, замененной на другую кислую/отрицательно заряженную полярную аминокислоту (например, Asp или Glu), аминокислотой с неполярной боковой цепью, замененной на другую аминокислоту с неполярной боковой цепью (например, Ala, Gly, Val, He, Leu, Met, Phe, Pro, Trp, Cys, Val и т.д.), основной/положительно заряженной полярной аминокислотой, замененной на другую основную/положительно заряженную полярную аминокислоту (например, Lys, His, Arg и т.д.), незаряженной аминокислотой с полярной боковой цепью, замененной на другую незаряженную аминокислоту с полярной боковой цепью (например, Asn, Gin, Ser, Thr, Туг и т.п.), аминокислотой с бета-разветвленной боковой цепью, замененной на другую аминокислоту с бета-разветвленной боковой цепью (например, lie, Thr и Val), аминокислотой с ароматической боковой цепью, замененной на другую аминокислоту с ароматической боковой цепью (например, His, Phe, Trp и Туг) и т.д.
[0039] CAR может состоять по существу из конкретной аминокислотной последовательности или последовательностей, описанных в данном документе, так что другие компоненты, например другие аминокислоты, существенно не изменяют биологическую активность функционального варианта.
[0040] CAR воплощений изобретения (в том числе функциональные части и функциональные варианты) могут быть любой длины, т.е. могут содержать любое число аминокислот, при условии, что CAR (или их функциональные части или функциональные варианты) сохраняют их биологическую активность, например способность специфически связываться с антигеном, обнаруживать больные клетки у млекопитающего или лечить или предотвращать заболевание у млекопитающего и т.д. Например, CAR может быть длиной от примерно 50 до примерно 5000 аминокислот, например 50, 70, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000 или более аминокислот.
[0041] CAR воплощений изобретения (в том числе функциональные части и функциональные варианты) могут содержать синтетические аминокислоты вместо одной или более чем одной природной аминокислоты. Такие синтетические аминокислоты известны в данной области и включают, например, аминоциклогексанкарбоновую кислоту, норлейцин, α-амино-n-декановую кислоту, гомосерин, S-ацетиламинометилцистеин, транс-3- и транс-4-гидроксипролин, 4-аминофенилаланин, 4-нитрофенилаланин, 4-хлорофенилаланин, 4-карбоксифенилаланин, β-фенилсерин-β-гидроксифенилаланин, фенилглицин, α-нафтилаланин, циклогексилаланин, циклогексилглицин, индолин-2-карбоновую кислоту, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновую кислоту, аминомалоновую кислоту, моноамид аминомалоновой кислоты, N'-бензил-N'-метиллизин, N',N'-дибензиллизин, 6-гидроксилизин, орнитин, α-аминоциклопентанкарбоновую кислоту, α-аминоциклогексанкарбоновую кислоту, α-аминоциклогептанкарбоновую кислоту, α-(2-амино-2-норборнан)карбоновую кислоту, α,γ-диаминомасляную кислоту, α,β-диаминопропионовую кислоту, гомофенилаланин и α-трет-бутилглицин.
[0042] CAR воплощений изобретения (в том числе функциональные части и функциональные варианты) могут быть гликозилированными, амидированными, карбоксилированными, фосфорилированными, этерифицированными, N-ацилированными, циклизованными, например, через дисульфидный мостик, или могут быть превращены в кислотно-аддитивную соль и/или, возможно, димеризованы, полимеризованы или конъюгированы.
[0043] CAR воплощений изобретения (в том числе функциональные части и функциональные варианты) могут быть получены способами, известными в данной области. CAR могут быть изготовлены с помощью любого подходящего способа изготовления полипептидов или белков. Подходящие способы синтеза полипептидов и белков de novo описаны в ссылках, таких как Chan et al., Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis, Oxford University Press, Oxford, United Kingdom, 2000; Peptide and Protein Drug Analysis, ed. Reid, R., Marcel Dekker, Inc., 2000; Epitope Mapping, ed. Westwood et al., Oxford University Press, Oxford, United Kingdom, 2001; и в патенте США 5449752. Кроме того, полипептиды и белки могут быть рекомбинантно получены с использованием нуклеиновых кислот, описанных в данном документе, с помощью стандартных рекомбинантных способов. См., например, Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed., Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY 2001; и Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates and John Wiley & Sons, NY, 1994. Кроме того, некоторые из CAR согласно изобретению (в том числе функциональные части и функциональные варианты) могут быть выделены и/или очищены из источника, такого как растение, бактерия, насекомое или млекопитающее, например, крыса, человек и т.д. Способы выделения и очистки хорошо известны в данной области. Альтернативно, CAR, описанные в данном документе, могут быть коммерчески синтезированы такими компаниями как Synpep (Дублин, Калифорния), Peptide Technologies Corp. (Гейтерсберг, Мэриленд) и Multiple Peptide Systems (Сан-Диего, Калифорния). В этой связи CAR согласно изобретению может быть синтетическим, рекомбинантным, выделенным и/или очищенным.
[0044] Воплощение данного изобретения также предусматривает антитело или его антигенсвязывающую часть, которая специфически связывается с эпитопом CAR согласно изобретению. Антитело может представлять собой любой тип иммуноглобулина, который известен в данной области. Например, антитело может быть любого изотипа, например, IgA, IgD, IgE, IgG, IgM и т.д. Антитело может быть моноклональным или поликлональным. Антитело может быть природным антителом, например, антителом, выделенным и/или очищенным из млекопитающего, например, мыши, кролика, козы, лошади, курицы, хомяка, человека и т.д. Альтернативно, антитело может быть генно-инженерным антителом, например, гуманизированным антителом или химерным антителом. Антитело может находиться в мономерной или полимерной форме. Кроме того, антитело может иметь любой уровень аффинности или авидности к функциональной части CAR согласно изобретению.
[0045] Способы анализа антител на способность связываться с какой-либо функциональной частью CAR согласно изобретению известны в данной области и включают любой анализ связывания "антиген-антитело", такой как, например, радиоиммуноанализ (RIA), ИФА (ELISA), вестерн-блот, иммунопреципитацию и анализы конкурентного ингибирования (см., например, Janeway et al., см. ниже, и публикацию патентной заявки США NO 2002/0197266 А1).
[0046] Подходящие способы получения антител хорошо известны в данной области. Например, стандартные гибридомные способы описаны в Kohler and Milstein, Eur. J. Immunol., 5, 511-519 (1976), Harlow and Lane (eds.), Antibodies: A Laboratory Manual, CSH Press (1988), и C.A. Janeway et al. (eds.), Immunobiology, 5th Ed., Garland Publishing, New York, NY (2001)). Альтернативно, в данной области известны и другие способы, такие как EBV-гибридомыные способы (Haskard and Archer, J. Immunol. Methods, 74(2), 361-67 (1984), и Roder et al., Methods Enzymol., 121, 140-67 (1986)), и экспрессионные системы на основе бактериофаговых векторов (см., например, Huse et al., Science, 246, 1275-81 (1989)). Кроме того, способы получения антител в животных описаны, например, в патентах США 5545806, 5569825 и 5714352, а также в заявке на патент США 2002/0197266 А1.
[0047] Кроме того, для создания антитела можно использовать фаговый дисплей. В связи с этим фаговые библиотеки, кодирующие антигенсвязывающие вариабельные (V) домены антител, могут быть получены с использованием стандартной молекулярной биологии и методик рекомбинантной ДНК (см., например, Sambrook et al., см. выше, и Ausubel et al., см. выше). Фаг, кодирующий вариабельную область с нужной специфичностью, выбирают по специфическому связыванию с нужным антигеном и восстанавливают полное или частичное антитело, содержащее выбранный вариабельный домен. Нуклеиновокислотные последовательности, кодирующие восстановленное антитело, вводят в подходящую клеточную линию, такую как клетка миеломы, используемая для получения гибридомы, так что клетка секретирует антитела с характеристиками моноклональных антител (см., например, Janeway et al., см. выше, Huse et al., см. выше, и патент США NO 6265150).
[0048] Антитела могут быть получены с помощью трансгенных мышей, которые являются трансгенными по специфическим генам тяжелой и легкой цепей иммуноглобулина. Такие способы известны в данной области и описаны, например, в патентах США 5545806 и 5569825, а также в Janeway et al., см. выше.
[0049] Способы получения гуманизированных антител хорошо известны в данной области и описаны подробно, например, Janeway et al., см. выше, патентах США 5225539, 5585089 и 5693761, европейском патенте NO 0239400 В1 и патенте Великобритании NO 2188638. Гуманизированные антитела также могут быть получены с использованием методики перекладки антитела, описанной в патенте США 5639641 и в Pedersen et al., J. Mol. Biol., 235, 959-973 (1994).
[0050] Воплощение изобретения также предусматривает антигенсвязывающие части любого из антител, описанных в данном документе. Антигенсвязывающая часть может быть любой частью, которая имеет по меньшей мере один антигенсвязывающий сайт, например Fab, F(ab')2, dsFv, sFv, димерные и тримерные антитела.
[0051] Одноцепочечный фрагмент вариабельной области (sFv), который представляет собой усеченный Fab-фрагмент, включающий вариабельный (V) домен тяжелой цепи антитела, связанный с V доменом легкой цепи антитела с помощью синтетического пептида, может быть получен с использованием обычных методик рекомбинантных ДНК (например, Janeway et al., см. выше). Аналогичным образом стабилизированные дисульфидным мостиком вариабельные фрагменты (dsFv) могут быть получены с помощью методики рекомбинантной ДНК (см., например, Reiter et al., Protein Engineering, 7, 697-704 (1994)). Тем не менее, фрагменты антител согласно изобретению не ограничиваются этими иллюстративными типами фрагментов антител.
[0052] Кроме того, антитело или его антигенсвязывающая часть могут быть изменены так, чтобы включать обнаруживаемую метку, такую как, например, радиоактивный изотоп, флуорофор (например, флуоресцеин изотиоцианат (FITC), фикоэритрин (РЕ)), фермент (например, щелочную фосфатазу, пероксидазу хрена) и элементарные частицы (например, частицы золота).
[0053] Воплощением данного изобретения также является нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую любой из описанных в данном документе CAR (в том числе их функциональные части и функциональные варианты). Нуклеиновые кислоты согласно изобретению могут содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую любую из лидерных последовательностей, антигенсвязывающих доменов, трансмембранных доменов и/или внутриклеточных доменов Т-клеточного сигналинга, описанных в данном документе.
[0054] Воплощение данного изобретения предусматривает нуклеиновую кислоту, содержащую нуклеотидную последовательность, кодирующую лидерную последовательность и антигенсвязывающий домен (включая вариабельную область легкой цепи и вариабельную область тяжелой цепи). В связи с этим нуклеиновая кислота может содержать, состоять из или по существу состоять из SEQ ID NO 25.
[0055] Нуклеиновые кислоты согласно изобретению могут содержать нуклеотидную последовательность, кодирующую любой из трансмембранных доменов и/или внутриклеточных доменов Т-клеточного сигналинга, описанных в данном документе. Воплощение данного изобретения предусматривает нуклеиновую кислоту, содержащую нуклеотидную последовательность, кодирующую трансмембранный домен, содержащий CD28, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий домен CD28, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD3ζ. В связи с этим нуклеиновая кислота может содержать, состоять из или по существу состоять из SEQ ID NO 27. Другое воплощение изобретения предусматривает нуклеиновую кислоту, содержащую нуклеотидную последовательность, кодирующую трансмембранный домен, содержащий CD8, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD28, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD137, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD3ζ. В связи с этим нуклеиновая кислота может содержать, состоять из или по существу состоять из SEQ ID NO 28. Еще одно воплощение изобретения предусматривает нуклеиновую кислоту, содержащую нуклеотидную последовательность, кодирующую трансмембранный домен, содержащий CD8, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD137, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, содержащий CD3ζ. В связи с этим нуклеиновая кислота может содержать, состоять из или по существу состоять из SEQ ID NO 26.
[0056] В одном воплощении изобретения нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует лидерную последовательность, антигенсвязывающий домен (в том числе вариабельную область легкой цепи и вариабельную область тяжелой цепи), трансмембранный домен, включающий CD28, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD28, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD3ζ. В связи с этим нуклеиновая кислота может включать, состоять из или по существу состоять из обеих SEQ ID NO 25 и 27.
[0057] В одном воплощении изобретения нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует лидерную последовательность, антигенсвязывающий домен (в том числе вариабельную область легкой цепи и вариабельную область тяжелой цепи), трансмембранный домен, включающий CD8, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD28, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD137, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD3ζ. В связи с этим нуклеиновая кислота может включать, состоять из или по существу состоять из обеих SEQ ID NO 25 и 28.
[0058] В одном воплощении нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, которая кодирует лидерную последовательность, антигенсвязывающий домен (в том числе вариабельную область легкой цепи и вариабельную область тяжелой цепи), трансмембранный домен, включающий CD8, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD137, и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающий CD3ζ. В связи с этим нуклеиновая кислота может включать, состоять из или по существу состоять из обех SEQ ID NO 25 и 26.
[0059] Понятие "нуклеиновой кислоты", используемое в данном документе, включает "полинуклеотид", "олигонуклеотид" и "нуклеиновокислотную молекулу" и обычно означает полимер ДНК или РНК, который может быть одноцепочечным или двухцепочечным, синтезированным или полученным (например, выделенным и/или очищенным) из природных источников, который может содержать природные, неприродные или измененные нуклеотиды, и который может содержать природную, неприродную или измененную межнуклеотидную связь, например, фосфорамидатную связь или фосфоротиоатную связь, вместо фосфодиэфирной, находящейся между нуклеотидами немодифицированного олигонуклеотида. В некоторых воплощениях нуклеиновая кислота не содержит никаких вставок, делеций, инверсий и/или замен. Тем не менее, в некоторых случаях может быть подходящим, как описано в данном документе, чтобы нуклеиновая кислота включала одну или более чем одну вставку, делецию, инверсию и/или замену. В некоторых воплощениях нуклеиновая кислота может кодировать дополнительные аминокислотные последовательности, которые не влияют на функцию CAR и которые могут транслироваться или могут не транслироваться при экспрессии нуклеиновой кислоты в клетке-хозяине.
[0060] Нуклеиновые кислоты согласно воплощению изобретения могут быть рекомбинантными. Используемый в данном документе термин "рекомбинантный" относится к (i) молекулам, которые создаются вне живых клеток путем присоединения природных или синтетических нуклеиновокислотных сегментов к нуклеиновокислотным молекулам, которые могут реплицироваться в живой клетке, или к (ii) молекулам, которые являются результатом репликации таких молекул, которые описаны в (i) выше. В данном изобретении репликация может быть репликацией in vitro или репликацией in vivo.
[0061] Рекомбинантная нуклеиновая кислота может быть такой, которая имеет неприродную последовательность, или такой, которая имеет последовательность, изготовленную с помощью искусственного объединения двух сегментов последовательности, в противном случае разделенных. Это искусственное сочетание часто осуществляется путем химического синтеза или, чаще, путем искусственной манипуляции с выделенными сегментами нуклеиновых кислот, например, с помощью методик генной инженерии, таких как те, которые описаны в Sambrook et al., см. выше. Нуклеиновые кислоты могут быть сконструированы на основе химического синтеза и/или ферментативных реакций лигирования с использованием процедур, известных в данной области. См., например, Sambrook et al., см. выше, и Ausubel et al., см. выше. Например, нуклеиновая кислота может быть химически синтезирована с использованием природных нуклеотидов или различным образом модифицированных нуклеотидов, разработанных для повышения биологической стабильности молекул или для повышения физической стабильности дуплекса, формирующегося при гибридизации (например, фосфоротиоатные производные и акридин-замещенные нуклеотиды). Примеры модифицированных нуклеотидов, которые могут быть использованы для создания нуклеиновых кислот включают, но не ограничиваясь ими, 5-фторурацил, 5-бромурацил, 5-хлорурацил, 5-йодурацил, гипоксантин, ксантин, 4-ацетилцитозин, 5-(карбоксигидроксилметил)урацил, 5-карбоксиметиламинометил-2-тиоуридин, 5-карбоксиметиламинометилурацил, дигидроурацил, бета-D-галактозилквеозин, инозин, N6-изопентениладенин, 1-метилгуанин, 1-метилинозин, 2,2-диметилгуанин, 2-метиладенин, 2-метилгуанин, 3-метилцитозин, 5-метилцитозин, N6-замещенный аденин, 7-метилгуанин, 5-метиламинометилурацил, 5-метоксиаминометил-2-тиоурацил, бета-D-маннозилквеозин, 5'-метоксикарбоксиметилурацил, 5-метоксиурацил, 2-метилтио-N6-изопентениладенин, урацил-5-оксиуксусную кислоту (v), вибутоксозин, псевдоурацил, квеозин, 2-тиоцитозин, 5-метил-2-тиоурацил, 2-тиоурацил, 4-тиоурацил, 5-метилурацил, метиловый эфир урацил-5-оксиуксусной кислоты, 3-(3-амино-3-N-2-карбоксипропил)урацил и 2,6-диаминопурин. Альтернативно, одна или более чем одна нуклеиновая кислота согласно изобретению может быть приобретена у таких компаний как Macromolecular Resources (Форт-Коллинз, Колорадо) и Synthegen (Хьюстон, Техас).
[0062] Нуклеиновая кислота может содержать любую из выделенных или очищенных нуклеотидных последовательностей, которые кодируют любой из CAR или его функциональные части или функциональные варианты. Альтернативно, нуклеотидная последовательность может содержать нуклеотидную последовательность, которая вырождена до любой из последовательностей, или комбинацию вырожденных последовательностей.
[0063] Воплощение изобретения также предусматривает выделенную или очищенную нуклеиновую кислоту, содержащую нуклеотидную последовательность, которая комплементарна нуклеотидной последовательности любой из нуклеиновых кислот, описанных в данном документе, или нуклеотидную последовательность, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеотидной последовательностью любой из нуклеиновых кислот, описанных в данном документе.
[0064] Нуклеотидная последовательность, которая гибридизуется в жестких условиях, может гибридизоваться в условиях высокой жесткости. Под "условиями высокой жесткости" понимают, что нуклеотидная последовательность специфически гибридизуется с целевой последовательностью (нуклеотидной последовательностью любой из нуклеиновых кислот, описанных в данном документе) в количестве, которое обнаруживается сильнее, чем неспецифическая гибридизация. Условия высокой жесткости включают условия, которые бы позволили отличить полинуклеотид с точной комплементарной последовательностью или полинуклеотид, содержащий только несколько разрозненных несоответствий, от случайной последовательности, в которой оказалось несколько небольших областей (например, 3-10 оснований), совпадающих с данной нуклеотидной последовательностью. Такие небольшие области комплементарности легче плавятся, чем полноразмерный комплемент длиной 14-17 или более оснований, и гибридизация в условиях высокой жесткости позволяет их легко отличить. Условия относительно высокой жесткости будут включать, например, низкое содержание солей и/или высокотемпературные условия, например, примерно 0,02-0,1 М NaCl или эквивалентное этому, при температуре примерно 50-70°С. Такие условия высокой жесткости переносят малые несоответствия, если таковые имеются, между нуклеотидной последовательностью и матричной или целевой цепью и особенно подходят для обнаружения экспрессии какого-либо из CAR согласно изобретению. Обычно считается, что условия можно сделать более жесткими путем добавления возрастающих количеств формамида.
[0065] Данное изобретение также предусматривает нуклеиновую кислоту, содержащую нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере примерно на 70% или более, например, примерно на 80%, примерно на 90%, примерно на 91%, примерно на 92%, примерно на 93%, примерно на 94%, примерно на 95%, примерно на 96%, примерно на 97%, примерно на 98% или примерно на 99% идентична любой из нуклеиновых кислот, описанных в данном документе.
[0066] В одном воплощении нуклеиновые кислоты согласно изобретению могут быть встроены в рекомбинантный экспрессионный вектор. В связи с этим воплощение данного изобретения предусматривает рекомбинантные экспрессионные векторы, содержащие любую из нуклеиновых кислот согласно изобретению. Для целей данного изобретения термин "рекомбинантный экспрессионный вектор" означает генетически модифицированную олигонуклеотидную или полинуклеотидную конструкцию, которая позволяет экспрессировать мРНК, белок, полипептид или пептид клеткой-хозяином, где указанная конструкция содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую мРНК, белок, полипептид или пептид, а вектор контактирует с клеткой в условиях, подходящих, чтобы иметь мРНК, белок, полипептид или пептид, экспрессированный в клетке. Векторы согласно данному изобретению не являются природными в виде целых молекул. Тем не менее, части векторов могут иметь природное происхождение. Рекомбинантные экспрессионные векторы согласно изобретению могут содержать любой тип нуклеотидов, в том числе, но не ограничиваясь ими, ДНК и РНК, которые могут быть одноцепочечными или двухцепочечными, синтезированными или полученными частично из природных источников, и которые могут содержать природные, неприродные или измененные нуклеотиды. Рекомбинантные экспрессионные векторы могут включать природные или неприродные межнуклеотидные связи или оба типа связей. Предпочтительно, неприродные или измененные нуклеотиды или межнуклеотидные связи не препятствуют транскрипции или репликации вектора.
[0067] В одном воплощении рекомбинантный экспрессионный вектор согласно изобретению может быть любым подходящим рекомбинантным вектором и может быть использован для трансформации или трансфекции любой подходящей клетки-хозяина. Подходящие векторы включают те, которые предназначены для размножения, для экспрессии или для того и другого, например, плазмиды и вирусы. Вектор может быть выбран из группы, включающей серию pUC (Fermentas Life Sciences, Глен-Берни (Мэриленд), серию pBluescript (Stratagene, Ла-Хойя, Калифорния), серию рЕТ (Novagen, Мэдисон, Висконсин), серию pGEX (Pharmacia Biotech, Уппсала, Швеция) и серию рЕХ (Clontech, Пало-Альто, Калифорния). Также могут быть использованы бактериофаговые векторы, такие как λGT10, λGT11, λZapII (Stratagene), λEMBL4 и λNM1149. Примеры векторов для экспрессии в растениях включают pBI01, pBI101.2, pBI101.3, pBI121 и pBIN19 (Clontech). Примеры векторов для экспрессии в животных включают pEUK-CI, рМАМ и pMAMneo (Clontech). Рекомбинантный экспрессионный вектор может быть вирусным вектором, например, ретровирусным вектором или лентивирусным вектором. В некоторых воплощений вектор может быть транспозоном.
[0068] Многие методики трансфекции хорошо известны в данной области (см., например Graham et al., Virology, 52: 456-467 (1973); Sambrook et al., см. выше; Davis et al., Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier (1986); и Chu et al., Gene, 13: 97 (1981). Способы трансфекции включают, например, копреципитацию фосфатом кальция (например, Graham et al., см. выше); прямую микроинъекцию в культивируемые клетки (например, см. Capecchi, Cell, 22: 479-488 (1980)); электропорацию (например, см. Shigekawa et al., BioTechniques, 6: 742-751 (1988)); опосредованный липосомами перенос гена (например, см. Mannino et al., BioTechniques, 6: 682-690 (1988)), липид-опосредованную трансдукцию (например, см. Feigner et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84: 7413-7417 (1987)) и доставку нуклеиновой кислоты с использованием микроснарядов высоких скоростей (см., например, Klein et al., Nature, 327: 70-73 (1987)).
[0069] В одном воплощении рекомбинантные экспрессионные векторы согласно изобретению могут быть получены с использованием стандартных методик рекомбинантных ДНК, описанных, например, в Sambrook et al., см. выше, и Ausubel et al., см. выше. Конструкции экспрессионных векторов, которые являются кольцевыми или линейными, могут быть изготовлены так, чтобы они содержали систему репликации, функционирующую в прокариотической или эукариотической клетке-хозяине. Системы репликации могут быть получены, например, из ColEI, плазмиды 2 μ, λ, SV40, вируса папилломы крупного рогатого скота и т.п.
[0070] Рекомбинантный экспрессионный вектор может содержать регуляторные последовательности, такие как кодоны инициации и терминации транскрипции и трансляции, которые специфичны для конкретного типа клетки-хозяина (например, бактерии, гриба, растения или животного), в которую вектор будет введен, при необходимости и с учетом того, основан ли вектор на ДНК или РНК. Примеры последовательностей, включающих кодоны терминации, включают SEQ ID NO 32-33. Рекомбинантный экспрессионный вектор может содержать сайты рестрикции для облегчения клонирования. Примеры последовательностей, включающих сайты рестрикции, включают SEQ ID NO 29-31.
[0071] Рекомбинантный экспрессионный вектор может включать один или более чем один маркерный ген, который позволяет отбирать трансформированные или трансфицированные клетки-хозяева. Гены-маркеры включают устойчивость к биоцидным веществам, например, устойчивость к антибиотикам, тяжелым металлам и т.д., комплементацию в ауксотрофном хозяине для получения прототрофии и т.п. Подходящие гены-маркеры для экспрессионных векторов согласно изобретению включают, например, гены устойчивости к неомицину/G3418, гены устойчивости к гигромицину, гены устойчивости к гистидинолу, гены устойчивости к тетрациклину и гены устойчивости к ампициллину.
[0072] Рекомбинантный экспрессионный вектор может включать нативный или ненативный промотор, функционально связанный с нуклеотидной последовательностью, кодирующей CAR (включая его функциональные части или функциональные варианты), или с нуклеотидной последовательностью, которая комплементарна или которая гибридизуется с нуклеотидной последовательностью, кодирующей CAR. Выбор промоторов, например, сильного, слабого, индуцируемого, специфического к ткани или развитию, находится в пределах квалификации специалиста в данной области. Аналогичным образом, объединение нуклеотидной последовательности с промотором также находится в пределах квалификации специалиста в данной области. Промотор может быть невирусным промотором или вирусным промотором, например, цитомегаловирусным (CMV) промотором, промотором SV40, промотором RSV или промотором, найденным в длинном концевом повторе вируса мышиных стволовых клеток.
[0073] Рекомбинантные экспрессионные векторы согласно изобретению могут быть сконструированы либо для временной экспрессии, либо для стабильной экспрессии, либо для той и другой экспрессии. Кроме того, рекомбинантные экспрессионные векторы могут быть сконструированы для конститутивной экспрессии или для индуцибельной экспрессии.
[0074] Кроме того, рекомбинантные экспрессионные векторы могут быть сконструированы так, чтобы они включали ген самоубийства. Используемый в данном документе термин "ген самоубийства" относится к гену, который вызывает гибель клетки, экспрессирующей ген самоубийства. Ген самоубийства может быть геном, который придает чувствительность к агенту, например, лекарственному препарату, той клетке, в которой экспрессируется ген, и вызывает гибель клетки, когда клетка контактирует с этим агентом или подвергается его воздействию. Гены самоубийства известны в данной области (см., например, Suicide Gene Therapy: Methods and Reviews, Springer, Caroline J. (Cancer Research UK Centre for Cancer Therapeutics at the Institute of Cancer Research, Sutton, Surrey, UK), Humana Press, 2004) и включают, например, ген тимидинкиназы (ТК) вируса простого герпеса (HSV), цитозиндеаминазу, фосфорилазу пуринового нуклеозида и нитроредуктазу.
[0075] В объем данного изобретения включены конъюгаты, например, биоконъюгаты, включающие любой из CAR согласно изобретению (в том числе любую из их функциональных частей или вариантов), нуклеиновые кислоты, рекомбинантные экспрессионные векторы, клетки-хозяева, популяции клеток-хозяев, антитела или их антигенсвязывающие части. Конъюгаты, а также способы синтеза конъюгатов в целом известны в данной области (см., например, Hudecz, F., Methods Mol. Biol. 298: 209-223 (2005) и Kirin et al., Inorg Chem. 44(15): 5405-5415 (2005)).
[0076] Воплощение согласно изобретению также предусматривает клетку-хозяина, содержащую любой из рекомбинантных экспрессионных векторов, описанных в данном документе. Используемый в данном документе термин "клетка-хозяин" относится к любому типу клеток, которые могут содержать рекомбинантный экспрессионный вектор согласно изобретению. Клетка-хозяин может быть эукариотической, например, клеткой растения, животного, гриба или водоросли, либо она может быть прокариотической клеткой, например, клеткой бактерии или простейшего. Клетка-хозяин может быть культивированной клеткой или первичной клеткой, т.е. выделенной непосредственно из организма, например, человека. Клетка-хозяин может быть прикрепленной клеткой или суспензионной клеткой, т.е. клеткой, которая растет в суспензии. Подходящие клетки-хозяева известны в данной области и включают, например, клетки Е. coli DH5α, клетки яичников китайского хомячка, клетки обезьяны VERO, клетки COS, клетки HEK293 и т.п. Для амплификации или репликации рекомбинантного экспрессионного вектора клетка-хозяин может быть прокариотической клеткой, например, клеткой DH5α. Для получения рекомбинантного CAR клетка-хозяин может быть клеткой млекопитающего. Клетка-хозяин может быть клеткой человека. Притом что клетка-хозяин может быть клеткой любого типа, может происходить из любого типа ткани и может находиться на любой стадии развития, клетка-хозяин может быть лимфоцитом периферической крови (PBL) или мононуклеарной клеткой периферической крови (РВМС). Клетка-хозяин может быть Т-клеткой.
[0077] Для целей данного изобретения Т-клетка может быть любой Т-клеткой, такой как культивированная Т-клетка, например, первичная Т-клетка или Т-клетка из культивируемой Т-клеточной линии, например, Jurkat, SupT1 и т.д., или Т-клетка, полученная от млекопитающего. Если Т-клетка получена от млекопитающего, то она может быть получена из различных источников, включая, но не ограничиваясь ими, кровь, костный мозг, лимфатические узлы, вилочковую железу или другие ткани или жидкости. Т-клетки также могут быть обогащенными или очищенными. Т-клетка могут быть человеческой Т-клеткой. Т-клетка может быть Т-клеткой, выделенной из организма человека. Т-клетка может быть Т-клеткой любого типа и может находиться на любой стадии развития, включая, но не ограничиваясь ими, CD4+/CD8+-двойные положительные Т-клетки, CD4+ Т-хелперы, например, клетки Th1 и Th2, CD8+ Т-клетки (например, цитотоксические Т-клетки), инфильтрирующие опухоль клетки, Т-клетки памяти, наивные Т-клетки и т.п. Т-клетка может быть CD8+ Т-клеткой или CD4+ Т-клеткой.
[0078] Также воплощением данного изобретения является популяция клеток, содержащих по меньшей мере одну клетку-хозяина, описанную в данном документе. Популяция клеток может быть гетерогенной популяцией, содержащей клетку-хозяина, которая содержит любой из описанных рекомбинантных экспрессионных векторов, в дополнение по меньшей мере к одной другой клетке, например, клетке-хозяину (например, Т-клетке), которая не содержит никаких рекомбинантных экспрессионных векторов, или клетке, отличающейся от Т-клетки, например, В-клетке, макрофагу, нейтрофилу, эритроциту, гепатоциту, клетке эндотелия, эпителиальной клетке, мышечной клетке, клетке головного мозга и т.д. Альтернативно, популяция клеток может быть по существу гомогенной популяцией, которая включает главным образом клетки-хозяева (например, состоит по существу из них), содержащие рекомбинантный экспрессионный вектор. Популяция также может быть клональной популяцией клеток, где все клетки популяции являются клонами одной клетки-хозяина, содержащей рекомбинантный экспрессионный вектор, так что все клетки популяции содержат рекомбинантный экспрессионный вектор. В одном воплощении изобретения популяция клеток является клональной популяция, содержащей клетки-хозяева с рекомбинантным экспрессионным вектором, описанным в данном документе.
[0079] CAR (в том числе их функциональные части и варианты), нуклеиновые кислоты, рекомбинантные экспрессионные векторы, клетки-хозяева (в том числе их популяции) и антитела (в том числе их антигенсвязывающие части), которые все в совокупности далее называются "CAR-материалами согласно изобретению", могут быть выделены и/или очищены. Термин "выделенный", используемый в данном документе, означает "удаленный из природной среды". Термин "очищенный" или "выделенный" не требует абсолютной чистоты или выделения; скорее, он понимается как относительный термин. Так, например, препарат очищенной (или выделенной) клетки-хозяина является таким, в котором клетка-хозяин является более чистой, чем клетка в ее природной среде в организме. Такие клетки-хозяева могут быть получены, например, с помощью стандартных методик очистки. В некоторых воплощениях препарат клетки-хозяина очищен таким образом, что клетка-хозяин составляет по меньшей мере примерно 50%, например по меньшей мере примерно 70% от общего содержания клеток в препарате. Например, чистота может составлять по меньшей мере примерно 50%, может быть больше, чем примерно 60%, примерно 70% или примерно 80%, или может составлять примерно 100%.
[0080] CAR-материалы согласно изобретению могут быть собраны в композицию, такую как фармацевтическая композиция. В связи с этим воплощение данного изобретения предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую любой из CAR, функциональных частей, функциональных вариантов, нуклеиновых кислот, экспрессионных векторов, клеток-хозяев (в том числе их популяций) и антител (в том числе их антигенсвязывающих частей) согласно изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтические композиции согласно изобретению, содержащие любой из CAR-материалов согласно изобретению, может содержать более чем один CAR-материал согласно изобретению, например, CAR и нуклеиновую кислоту или два или более двух различных CAR. Альтернативно, фармацевтическая композиция может содержать CAR-материал согласно изобретению в сочетании с другими фармацевтически активными агентами или лекарственными препаратами, такими как химиотерапевтические агенты, например, аспарагиназа, бусульфан, карбоплатин, цисплатин, даунорубицин, доксорубицин, фторурацил, гемцитабин, гидроксимочевина, метотрексат, паклитаксел, ритуксимаб, винбластин, винкристин и т.п. В предпочтительном воплощении фармацевтическая композиция содержит клетку-хозяина согласно изобретению или ее популяцию.
[0081] CAR-материалы согласно изобретению могут быть представлены в форме соли, например, фармацевтически приемлемой соли. Подходящие фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли включают соли, полученные из минеральных кислот, таких как соляная, бромистоводородная, фосфорная, метафосфорная, азотная и серная кислоты, а также из органических кислот, таких как винная, уксусная, лимонная, яблочная, молочная, фумаровая, бензойная, гликолевая, глюконовая, янтарная и арилсульфокислота, например, п-толуолсульфокислота.
[0082] Что касается фармацевтических композиций, фармацевтически приемлемый носитель может быть любым из обычно используемых и ограничивается только физико-химическими соображениями, такими как растворимость и отсутствие реактивности с активным агентом (агентами), а также путем введения. Описанные в данном документе фармацевтически приемлемые носители, например, носители, адъюванты, эксципиенты и разбавители, хорошо известны специалистам в данной области и легко доступны. Предпочтительно, чтобы фармацевтически приемлемый носитель был таким, который химически инертен по отношению к активному агенту (агентам), и таким, который не имеет вредных побочных эффектов или токсичности в условиях применения.
[0083] Выбор носителя будет определяться отчасти конкретным CAR-материалом согласно изобретению, а также конкретным способом, используемым для введения CAR-материала согласно изобретению. Соответственно, существует множество подходящих составов фармацевтической композиции согласно изобретению. Могут быть использованы консерванты. Подходящие консерванты могут включать, например, метилпарабен, пропилпарабен, бензоат натрия и хлорид бензалкония. Возможно, может быть использована смесь из двух или более двух консервантов. Консерванты или их смеси, как правило, присутствуют в количестве от примерно 0,0001% до примерно 2% от общего веса композиции.
[0084] Подходящие буферные агенты могут включать, например, лимонную кислоту, цитрат натрия, фосфорную кислоту, фосфат калия и различные другие кислоты и соли. Возможно, может быть использована смесь двух или более двух буферных агентов. Буферные агенты или их смеси, как правило, присутствуют в количестве от примерно 0,001% до примерно 4% от общего веса композиции.
[0085] Концентрация CAR-материала согласно изобретению в фармацевтических составах может варьировать, например, от менее чем примерно 1%, как правило, на уровне или по меньшей мере примерно 10%, до примерно 20-50% или более по массе, и может быть выбрана, прежде всего, по объемам жидкости и вязкости в соответствии с конкретным выбранным способом введения.
[0086] Способы получения вводимых (например, вводимых парентеральным путем) композиций известны или очевидны специалистам в данной области и описаны более подробно, например, в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins; 21st ed. (May 1, 2005).
[0087] Следующие составы для перорального, аэрозольного, парентерального (например, подкожного, внутривенного, внутриартериального, внутримышечного, внутрикожного, внутрибрюшинного и интратекального) и местного введения являются только иллюстративными и никоим образом не являются ограничивающими. Для введения CAR-материалов согласно изобретению может быть использован более чем один путь, а в некоторых случаях конкретный путь может обеспечить более непосредственную и более эффективную реакцию, чем другой путь.
[0088] Составы, пригодные для перорального введения, могут содержать или состоять из (а) жидких растворов, таких как эффективное количество CAR-материала согласно изобретению, растворенное в разбавителях, таких как вода, физиологический раствор или апельсиновый сок; (b) капсул, саше, таблеток, пастилок и леденцов, каждый из которых содержит заранее определенное количество активного ингредиента, в виде твердых веществ или гранул; (с) порошков; (d) суспензий в соответствующей жидкости; и (е) подходящих эмульсий. Жидкие составы могут включать разбавители, такие как воду и спирты, например, этанол, бензиловый спирт и полиэтиленовые спирты, с добавлением или без добавления фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества. Капсульные формы могут быть в обычной жесткой или мягкой желатиновой оболочке и содержать, например, поверхностно-активные вещества, смазывающие вещества и инертные наполнители, такие как лактозу, сахарозу, фосфат кальция и кукурузный крахмал. Таблетированные формы могут включать один или более чем один агент, выбранный среди лактозы, сахарозы, маннита, кукурузного крахмала, картофельного крахмала, альгиновой кислоты, микрокристаллической целлюлозы, гуммиарабика, желатина, гуаровой камеди, коллоидного диоксида кремния, кроскармеллозы натрия, талька, стеарата магния, стеарата кальция, стеарата цинка, стеариновой кислоты и других наполнителей, красителей, разбавителей, буферных агентов, разрыхлителей, увлажняющих агентов, консервантов, ароматизаторов и других фармакологически совместимых эксципиентов. Леденцы могут содержать CAR-материал согласно изобретению в ароматизированной форме, обычно с сахарозой и гуммиарабиком или трагакантом, также как и пастилки, содержащие CAR-материал согласно изобретению в инертной основе, такой как желатин и глицерин, или сахароза и гуммиарабик, эмульсии, гели и подобные композиции, содержащие, помимо прочего, такие эксципиенты, которые известны в данной области.
[0089] Составы, пригодные для парентерального введения, включают водные и неводные изотонические стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические и растворенные вещества, которые делают композицию изотоничной крови предполагаемого реципиента, и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты, солюбилизаторы, загустители, стабилизаторы и консерванты. CAR-материал согласно изобретению может быть введен в физиологически приемлемом разбавителе в фармацевтическом носителе, например в виде стерильной жидкости или смеси жидкостей, включая воду, физиологический раствор, водный раствор декстрозы и растворы родственных Сахаров, спирт, такой как этанол или гексадециловый спирт, гликоль, такой как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль, диметилсульфоксид, глицерин, кетали, такие как 2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-метанол, простые эфиры, полиэтиленгликоль 400, масла, жирные кислоты, сложные эфиры или глицериды жирных кислот, или ацетилированные глицериды жирных кислот с добавлением или без добавления фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества, такого как мыло или детергент, суспендирующего агента, такого как пектин, карбомеры, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, или эмульгирующих агентов и других фармацевтических адъювантов.
[0090] Масла, которые могут быть использованы в парентеральных составах, включают масла минерального, животного, растительного или синтетического происхождения. Конкретные примеры масел включают арахисовое, соевое, кунжутное, хлопковое, кукурузное, оливковое, вазелиновое и минеральное. Подходящие жирные кислоты для применения в составах для парентерального введения включают олеиновую кислоту, стеариновую кислоту и изостеариновую кислоту. Этилолеат и изопропилмиристат являются примерами подходящих сложных эфиров жирных кислот.
[0091] Подходящие мыла для применения в составах для парентерального введения включают соли жирных кислот и щелочных металлов, аммония и триэтаноламина, и подходящие детергенты включают (а) катионные детергенты, такие как, например, диметилдиалкиламмония галогениды и алкилпиридиния галогениды, (b) анионные детергенты, такие как, например, алкила, арила и олефина сульфонаты, алкила, олефина, эфира и моноглицерида сульфаты и сульфосукцинаты, (с) неионные детергенты, такие как, например, оксиды жирных аминов, алканоламиды жирных кислот и полиоксиэтиленполипропиленовые сополимеры, (d) амфотерные детергенты, такие как, например, алкил-β-аминопропионаты и 2-алкил-имидазолина четвертичные аммониевые соли, и (е) их смеси.
[0092] Парентеральные составы, как правило, будут содержать в растворе, например, от примерно 0,5% до примерно 25% по весу CAR-материала согласно изобретению. Могут быть использованы консерванты и буферы. Для того чтобы свести к минимуму или устранить раздражение в месте инъекции, такие композиции могут содержать одно или более чем одно неионное поверхностно-активное вещество, имеющее, например, гидрофильно-липофильный баланс (HLB) от примерно 12 до примерно 17. Количество поверхностно-активного вещества в таких составах, как правило, будет находиться в диапазоне, например, от примерно 5% до примерно 15% по весу. Подходящие поверхностно-активные вещества включают сложные эфиры полиэтиленгликоль сорбитана и жирных кислот, такие как сорбитан моноолеат и высокомолекулярные продукты присоединения оксида этилена к гидрофобному основанию, образованные путем конденсации пропиленоксида с пропиленгликолем. Парентеральные составы могут быть представлены в единичной дозе или в герметичных контейнерах с несколькими дозами, таких как ампулы и флаконы, и могут храниться в замороженном (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого эксципиента, например, воды для инъекций, непосредственно перед применением. Инъекционные растворы и суспензии, приготовленные непосредственно перед применением, могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток типа таких, которые описаны выше.
[0093] Инъекционные составы представлены в соответствии с воплощением данного изобретения. Требования к эффективным фармацевтическим носителям для инъекционных композиций хорошо известны специалистам в данной области (см., например, Pharmaceutics and Pharmacy Practice, J.В. Lippincott Company, Philadelphia, PA, Banker and Chalmers, eds., pages 238-250 (1982), и ASHP Handbook on Injectable Drugs, Toissel, 4th ed., pages 622-630 (1986)).
[0094] Составы для местного применения, в том числе те, которые могут быть использованы для трансдермального введения лекарства, хорошо известны специалистам в данной области и пригодны в контексте воплощений данного изобретения для нанесения на кожу. CAR-материал согласно изобретению, используемый отдельно или в комбинации с другими подходящими компонентами, может быть сделан в виде аэрозольных составов для введения посредством ингаляции. Эти аэрозольные препараты могут находиться под давлением подходящих пропеллентов, таких как дихлордифторметан, пропан, азот и т.п. Они также могут быть собраны в состав в виде фармацевтических препаратов не под давлением, таких как небулайзер или атомайзер (распылитель). Такие аэрозольные препараты также могут быть использованы для распыления на слизистую оболочку.
[0095] Термин "эффективное количество" или "количество, эффективное для лечения" относится к дозе, которая является достаточной для предотвращения или лечения рака у индивидуума. Количества, эффективные для терапевтического или профилактического применения, будут зависеть, например, от стадии и тяжести заболевания или нарушения, подлежащего лечению, от возраста, массы и общего состояния здоровья пациента и от решения лечащего врача. Размер дозы также будет определяться выбранным активным агентом, способом введения, временем и частотой введения, наличием, природой и степенью любых побочных эффектов, которые могут сопровождать введение конкретного активного агента, и желаемым физиологическим эффектом. Специалистам в данной области должно быть понятно, что различные заболевания или нарушения могут потребовать длительного лечения с участием множественных введений, возможно, с использованием CAR-материалов согласно изобретению на каждом этапе или на различных этапах введения. В качестве примера и не ограничивая изобретение, доза CAR-материала согласно изобретению может составлять от примерно 0,001 до примерно 1000 мг/кг массы тела субъекта, подлежащего лечению, в день, от примерно 0,01 до примерно 10 мг/кг массы тела/день, от примерно 0,01 мг до примерно 1 мг/кг массы тела/день. Когда CAR-материал согласно изобретению представляет собой клетку-хозяина, иллюстративной дозой клеток-хозяев может быть минимум один миллион клеток (1 мг клеток/доза). CAR-материал согласно изобретению представляет собой нуклеиновую кислоту, упакованную в вирус, иллюстративная доза вируса может составлять 1 нг/доза.
[0096] В данном изобретении количество или доза вводимого CAR-материала согласно изобретению должна быть достаточной, чтобы вызвать терапевтический или профилактический ответ у субъекта или животного в течение разумного периода времени. Например, доза CAR-материала согласно изобретению должна быть достаточной для связывания с антигеном, или обнаружения, лечения или предотвращения заболевания в течение периода времени от примерно 2 ч или дольше, например, от примерно 12 до примерно 24 часов и более с момента введения. В некоторых воплощениях период времени может быть еще более долгим. Доза будет зависеть от эффективности конкретного CAR-материала согласно изобретению и от состояния животного (человека), а также от веса тела животного (человека), подлежащего лечению.
[0097] В данном изобретении для определения начальной дозы, которую следует вводить млекопитающему, может быть использован анализ, который включает, например, сравнение степени, в которой клетки-мишени подвергаются лизису и/или IFN-γ секретируется Т-клетками, экспрессирующими CAR согласно изобретению, при введении данной дозы таких Т-клеток млекопитающему, среди множества млекопитающих, каждому из которых даны разные дозы Т-клеток. Степень, в которой клетки-мишени подвергаются лизису и/или IFN-γ секретируется при введении определенной дозы, может быть проанализирована с помощью способов, известных в данной области.
[0098] В дополнение к описанным выше фармацевтическим композициям CAR-материалы согласно изобретению могут быть приготовлены в виде комплексов включения, таких как комплексы включения с циклодекстринами или липосомы.
Липосомы могут служить для нацеливания CAR-материалов согласно изобретению на конкретную ткань. Липосомы также могут быть использованы для увеличения периода полужизни CAR-материалов согласно изобретению. Многие способы доступны для получения липосом и описаны, например, в Szoka et al., Ann. Rev. Biophys. Bioeng., 9, 467 (1980) и патентах США 4235871, 4501728, 4837028 и 5019369.
[0099] Системы доставки, используемые в контексте воплощений данного изобретения, могут включать систему с отсроченным высвобождением, замедленным высвобождением и пролонгированным высвобождением, так что доставка композиции согласно изобретению происходит заранее и в течение достаточно времени, чтобы вызвать сенсибилизацию места лечения. Композиция согласно изобретению может быть использована в сочетании с другими терапевтическими агентами или терапевтическими способами. С помощью таких систем можно избежать повторных введений композиции согласно изобретению, тем самым увеличивая удобство для субъекта и врача, и они могут быть особенно подходящими для определенных воплощений композиции данного изобретения.
[0100] Многие типы систем доставки с отсроченным высвобождением доступны и известны специалистам в данной области. Они включают системы на полимерной основе, такой как поли(лактид-гликолид), сополиоксалаты, поликапролактоны, полиэфирамиды, полиортоэфиры, полигидроксимасляная кислота и полиангидриды. Микрокапсулы вышеуказанных полимеров, содержащие лекарственные препараты, описаны, например, в патенте США 5075109. Системы доставки также включают неполимерные системы, которые представляют собой липиды, включая стерины, такие как холестерин, сложные эфиры холестерина и жирные кислоты, или нейтральные жиры, такие как моно-, ди- и триглицериды; системы высвобождения из гидрогеля; силастические системы; системы на основе пептидов; покрытия из воска; спрессованные таблетки, полученные с использованием стандартных связующих агентов и эксципиентов; частично расплавленные имплантаты; и т.п.Конкретными примерами являются, но не ограничиваясь ими, (а) эрозивные системы, в которых активная композиция содержится внутри матрицы, как описано в патентах США NO 4452775, 4667014, 4748034 и 5239660, и (b) диффузные системы, в которых активный компонент высвобождается с регулируемой скоростью из полимера, как описано в патентах США NO 3832253 и 3854480. Кроме того, могут быть использованы системы доставки с оборудованием на основе насоса, некоторые из которых адаптированы для имплантации.
[0101] Специалист в данной области легко поймет, что CAR-материалы согласно изобретению могут быть модифицированы с помощью любого числа способов, например, так, чтобы терапевтическая или профилактическая эффективность CAR-материалов согласно изобретению увеличилась за счет этой модификации. Например, CAR-материалы согласно изобретению могут быть конъюгированы прямо или косвенно через линкер с целевой группировкой. Практика конъюгации соединений, например, CAR-материалов согласно изобретению, с целевыми группировками известна в данной области. См., например, Wadwa et al., J. Drug Targeting 3: 111 (1995) и патент США 5087616.
[0102] Альтернативно, CAR-материалы согласно изобретению могут быть модифицированы в депо-форму, например, так, чтобы характер высвобождения CAR-материалов согласно изобретению в организм, в который их вводят, контролировался по времени и месту внутри организма (см., например, патент США 4450150). Депо-формы CAR-материалов согласно изобретению могут представлять собой, например, имплантируемую композицию, содержащую CAR-материалы согласно изобретению и пористый или непористый материал, такой как полимер, где CAR-материалы согласно изобретению инкапсулированы или диффундированы по всему материалу, и/или деградацию непористого материала. Затем депо имплантируют в нужное место в организме, и CAR-материалы согласно изобретению высвобождаются из имплантата с заданной скоростью.
[0103] Когда CAR-материалы согласно изобретению вводят с одним или более чем одним дополнительным терапевтическим агентом, этот один или более чем один дополнительный терапевтический агент может быть совместно введен млекопитающему. Под "совместным введением" понимают введение одного или более чем одного дополнительного терапевтического агента и CAR-материалов согласно изобретению достаточно близко по времени, так что CAR-материалы согласно изобретению могут усиливать эффект одного или более чем одного дополнительного терапевтического агента, или наоборот. В связи с этим CAR-материалы согласно изобретению могут быть введены вначале, а один или более чем один дополнительный терапевтический агент может быть введен во вторую очередь, или наоборот. Альтернативно, CAR-материалы согласно изобретению и один или более чем один дополнительный терапевтический агент могут быть введены одновременно. Иллюстративным терапевтическим агентом, который может быть совместно введен с CAR-материалами, является ИЛ-2. Считается, что ИЛ-2 усиливает терапевтический эффект CAR-материалов согласно изобретению. В способах данного изобретения, в которых клетки-хозяева или популяции клеток вводятся млекопитающему, клетки могут быть такими клетками, которые аутологичны данному млекопитающему.
[0104] Следует понимать, что фармацевтические композиции, CAR, нуклеиновые кислоты, рекомбинантные экспрессионные векторы, клетки-хозяева или популяции клеток согласно изобретению могут быть использованы в способах лечения или профилактики заболевания у млекопитающего. Без связи с конкретной теорией или механизмом CAR согласно изобретению обладают биологической активностью, т.е. способностью распознавать антиген, например, CD22, таким образом, что CAR, когда он экспрессируется клеткой, способен опосредовать иммунный ответ против клетки, экспрессирующей антиген, например, CD22, для которого CAR является специфическим. В связи с этим воплощение данного изобретения относится к способу лечения или профилактики рака у млекопитающего, включающему введение указанному млекопитающему CAR, нуклеиновых кислот, рекомбинантных экспрессионных векторов, клеток-хозяев, популяции клеток, антител и/или их антигенсвязывающих частей и/или фармацевтических композиций согласно изобретению в количестве, эффективном для лечения или профилактики рака у млекопитающего.
[0105] Воплощение данного изобретения также включает лимфоидное истощение млекопитающего перед введением CAR-материалов согласно изобретению. Примеры лимфоидного истощения включают, но не ограничиваясь ими, лимфоидное истощение путем немиелоаблативной химиотерапии, лимфоидное истощение путем миелоаблативной химиотерапии, облучение всего тела и т.д.
[0106] В способах изобретения, в которых вводят клетки-хозяева или популяции клеток, клетки могут быть клетками, которые аутологичны данному млекопитающему. Предпочтительно, клетки аутологичны данному млекопитающему.
[0107] Млекопитающее, упоминаемое в данном документе, может быть любым млекопитающим. Используемый в данном документе термин "млекопитающее" относится к любому млекопитающему, включая, но не ограничиваясь ими, млекопитающие отряда Rodentia, такие как мыши и хомяки, и млекопитающие отряда Logomorpha, такие как кролики. Млекопитающие могут относиться к отряду Carnivora, в том числе Felines (кошки) и Canines (собаки). Млекопитающие могут относиться к отряду Artiodactyla, в том числе Bovines (коровы) и Swines (свиньи) или к отряду Perssodactyla, в том числе Equines (лошади). Млекопитающие могут относиться к отрядам Primates, Ceboids или Simoids (обезьяны) или к отряду Anthropoids (люди и человекообразные обезьяны). Предпочтительно млекопитающее является человеком.
[0108] В отношении способов согласно изобретению рак может быть любым раком, включая любой из острого лимфоцитарного рака, острой миелоидной лейкемии, альвеолярной рабдомиосаркомы, рака мочевого пузыря (например, карциномы мочевого пузыря), рака кости, рака мозга (например, медуллобластомы), рака молочной железы, рака анального отверстия, анального канала или прямой кишки, рака глаза, рака внутрипеченочного желчного протока, рака суставов, рака шеи, желчного пузыря или плевры, рака носа, полости носа или среднего уха, рака ротовой полости, рака вульвы, хронической лимфоцитарной лейкемии, хронического миелоидного рака, рака толстой кишки, рака пищевода, рака шейки матки, фибросаркомы, желудочно-кишечной карциноидной опухоли, рака головы и шеи (например, плоскоклеточной карциномы головы и шеи), лимфомы Ходжкина, рака гортаноглотки, рака почки, рака гортани, лейкемии, несолидных опухолей, рака печени, рака легких (например, немелкоклеточного рака легких), лимфомы, злокачественной мезотелиомы, мастоцитомы, меланомы, множественной миеломы, рака носоглотки, неходжкинской лимфомы, В-хронической лимфоцитарного лейкемии, волосатоклеточной лейкемии, острой лимфоцитарной лейкемии (ALL) и лимфомы Беркитта, рака яичника, рака поджелудочной железы, рака брюшины, сальника и брыжейки, рака глотки, рака предстательной железы, рака прямой кишки, рака почки, рака кожи, рака тонкого кишечника, рака мягких тканей, солидных опухолей, рака желудка, рака яичка, рака щитовидной железы и рака уретры. Предпочтительно, рак представляет собой гематологическое злокачественное образование (например, лейкемию или лимфому, в том числе, но не ограничиваясь ими, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, хроническую лимфоцитарную лейкемию, острый лимфоцитарный рак, острую миелоидную лейкемию, В-хроническую лимфоцитарную лейкемию, волосатоклеточную лейкемию, острую лимфоцитарную лейкемию (ALL) и лимфому Беркитта). Предпочтительно, рак характеризуется экспрессией CD22.
[0109] Термины "лечить" и "предотвращать", используемые в данном документе, а также слова, образующиеся из них, не обязательно означают 100% или полное излечение или предотвращение. Скорее, есть различные степени лечения или предотвращения, которые любому специалисту в данной области очевидны как имеющие потенциальное преимущество или терапевтический эффект. В этом отношении способы согласно изобретению могут предложить любой уровень лечения или предотвращения рака у млекопитающего. Кроме того, лечение или профилактика, предложенные в способе согласно изобретению, могут включать лечение или профилактику одного или более чем одного состояния или симптома заболевания, например, рака, которые нужно лечить или предотвращать. Кроме того, в данном изобретении "профилактика" может включать задержку начала заболевания или его симптома или состояния.
[0110] Другое воплощение изобретения предусматривает применение CAR, нуклеиновых кислот, рекомбинантных экспрессионных векторов, клеток-хозяев, популяций клеток, антител или их антигенсвязывающих частей или фармацевтических композиций согласно изобретению для лечения или профилактики рака у млекопитающего.
[0111] Другое воплощение изобретения предусматривает способ обнаружения рака у млекопитающего, включающий: (а) контактирование образца, содержащего одну или более чем одну клетку млекопитающего, с CAR, нуклеиновыми кислотами, рекомбинантными экспрессионными векторами, клетками-хозяевами, популяцией клеток, антителами и/или их антигенсвязывающими частями согласно изобретению, и таким образом формирование комплекса, (b) и обнаружение комплекса, где его выявление свидетельствует о наличии рака у млекопитающего.
[0112] Образец может быть получен любым подходящим способом, например, путем биопсии или аутопсии. Биопсия представляет собой извлечение ткани и/или клеток из индивидуума. Такое извлечение может быть сделано для сбора ткани и/или клеток у индивидуума с целью выполнения экспериментов на удаленной ткани и/или клетках. Эти эксперименты могут включать эксперименты по определению того, имеет и/или страдает ли человек от определенного состояния или заболевания. Состояние или заболевание может быть, например, раком.
[0113] В отношении воплощения способа обнаружения рака у млекопитающего согласно изобретению, образец, содержащий клетки млекопитающего, может быть образцом, содержащим целые клетки, их лизаты или фракцию цельноклеточных лизатов, например, ядерную или цитоплазматическую фракцию, суммарную белковую фракцию или нуклеиновокислотную фракцию. Если образец содержит целые клетки, то эти клетки могут быть любыми клетками млекопитающего, например, клетками любого органа или ткани, в том числе клетками крови или эндотелиальными клетками.
[0114] В способе обнаружения согласно изобретению контактирование может иметь место in vitro или in vivo по отношению к млекопитающему. Предпочтительно, контактирование происходит in vitro.
[0115] Кроме того, обнаружение комплекса может осуществляться с помощью любого числа способов, известных в данной области. Например, TCR, полипептиды, белки, нуклеиновые кислоты, рекомбинантные экспрессионные векторы, клетки-хозяева, популяции клеток, антитела или их антигенсвязывающие части согласно изобретению, описанные в данном документе, могут быть помечены обнаруживаемыми метками, такими как, например, радиоактивный изотоп, флуорофор (например, флуоресцеина изотиоцианат (FITC), фикоэритрин (РЕ)), фермент (например, щелочная фосфатаза, пероксидаза хрена) и элементарные частицы (например, частицы золота).
[0116] Способы анализа CAR на способность распознавать клетки-мишени и на антигенную специфичность известны в данной области. Например, в Clay et al., J. Immunol., 163: 507-513 (1999) даны способы измерения высвобождения цитокинов (например, интерферона-γ, гранулоцитарно-моноцитарного колониестимулирующего фактора (GM-CSF), фактора некроза опухоли (TNF-α) или интерлейкина 2 (IL-2)). Кроме того, функция CAR может быть оценена путем измерения клеточной цитотоксичности, как описано в Zhao et al., J. Immunol., 174: 4415-4423 (2005).
[0117] Следующие примеры дополнительно иллюстрируют изобретение, но, конечно, не должны быть истолкованы как каким-либо образом ограничивающие его объем.
Пример 1
[0118] Этот пример демонстрирует синтез анти-CD22-CAR, трансдукцию РВМС с помощью анти-CD22-CAR и анализ поверхностной экспрессии CAR на трансдуцированных РВМС.
[0119] CAR-кодирующие последовательности были синтезированы с использованием алгоритмов оптимизации кодонов (Mr. Gene GmBH, Регенсбург, Германия) и субклонированы в векторы "назначения" (как описано в Zhao et al., J. Immunol., 183(9):5563-74 (2009)), кодирующие последовательности CAR второго поколения первой версии (трансмембранный и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга CD28 и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга цепи CD3-дзета), CAR второго поколения второй версии (трансмембранный домен CD8, связанный с доменами Т-клеточного сигналинга CD137 и CD3-дзета) или CAR третьего поколения (трансмембранный домен CD8, связанный с внутриклеточными доменами Т-клеточного сигналинга CD28, CD137 и CD3-дзета), как показано в таблице А.
[0120] Супернатанты с ретровирусными векторами были созданы путем трансфекции клеток 293GP плазмидами, кодирующими ретровирусные векторы с CAR и гликопротеин оболочки RD114, со сбором культуральных супернатантов (с/н) через 48-72 ч. Культуральные супернатанты замораживали или использовали немедленно для трансдукции ОКТ3- и ИЛ-2-активированных человеческих РВМС с помощью методики "на планшете" в течение двух последовательных дней (культура лимфоцитов на планшетах, покрытых RECTRONECTIN (Takara Bio Inc., Шига, Япония) с предварительным воздействием разведений с/н, содержащих векторы, как описано ранее в Y. Zhao et al., J. Immunol., 183: 5563 (2009). Также в данном исследовании использовали ретровирусные с/н, содержащие С019-специфический CAR от стабильной клеточной линии-продуцента (Kochenderfer et al., Stood, 116: 4099 (2010)).
[0121] Экспрессию CAR на трансдуцированных Т-клетках оценивали с помощью проточной цитометрии. Для непосредственного измерения числа клеток, способных связывать CD22 за счет домена СН2СН3, использовали козлиные противочеловеческие IgG (H&L) (Invitrogen, Гранд-Айленд, Нью-Йорк). Для обнаружения CAR, кодирующих не СН2СН3, после CD22-Fc (R&D Systems) использовали IgG-Fc РЕ (Jackson ImmunoResearch, Вест Гроув, Пенсильвания). HA22SH-CAR экспрессирует короткую последовательность константного домена иммуноглобулина вместо СН2СН3. CD19-CAR был обнаружен с помощью белка L. Биотинилированный белок L (50 нг/мкл, Thermo Scientific, Уолтем, Массачусетс), связывался, клетки промывали, затем регистрировали с помощью SA-PE (4 мкг/мл, BD Biosciences, Франклин Лейке, Нью-Джерси). Для сравнения также оценивали с/н от вектора CD19-CAR. Эксперименты с проточной цитометрией подтвердили экспрессию CAR на трансдуцированных Т-клетках. CAR второго поколения продемонстрировали повышенный уровень поверхностной экспрессии по сравнению с CAR третьего поколения, что измеряли по средней интенсивности флуоресценции (MFI).
Пример 2
[0122] Этот пример демонстрирует экспрессию антигенов CD22 и CD19 на лейкемических клеточных линиях.
[0123] В человеческих лейкемических клеточных линиях (REH, SEM, NALM6, KOPN8, Daudi, Raji и K562) оценивали уровень экспрессии CD19 и CD22 на клеточной поверхности с использованием шариков QUANTI-BRITE РЕ (BD Biosciences) и РЕ-меченных анти-CD19- и анти-CD22-антител (таблица 2). "Число рецепторов на клетку" показывает приблизительное абсолютное число молекул на клетку на каждой из указанных клеточных линий. Данные были рассчитаны путем определения антител, связанных с клеткой (ABC), с помощью программного обеспечения CELLQUEST (BD) с инструментами анализа данных в соответствии с инструкциями производителя.
Пример 3
[0124] Этот пример демонстрирует литическую активность клеток, экспрессирующих CAR m971 второго поколения (версия 1).
[0125] Для определения литической активности лейкемические клеточные линии (REH, SEM, NALM6, KOPN8, Daudi, Raji и K562) метили 51Cr и использовали в качестве мишеней в анализах цитотоксичности. Клетки были нетрансдуцированными (mock) или трансдуцированными посредством CAR m971 второго поколения (версия 1) (SEQ ID NO 23), анти-CD19-CAR или HASH22 CAR второго поколения (версия 1) и были использованы в качестве эффекторных клеток в различных соотношениях эффектора к мишени в анализах цитотоксичности. Процент лизиса клеток-мишеней измерен и показан на фиг. 1A-1G.
[0126] Как показано на фиг. 1A-1G, клетки, трансдуцированные посредством CAR m971 второго поколения (версия 1) (SEQ ID NO 23), лизируют CD22-экспрессирующие лейкемические клеточные линии (REH, SEM, NALM6, KOPN8, Daudi, Raji и K562) и не лизируют неэкспрессирующую CD22 клеточную линию K562. Клетки, трансдуцированные посредством CAR m971 второго поколения (версия 1) (SEQ ID NO 23), показали превосходную литическую способность по сравнению с клетками, трансдуцированными посредством CAR HASH22 второго поколения (версия 1).
[0127] Образцы от семи пациентов с BCP-ALL были проанализированы на экспрессию CD22 и CD19. Наблюдался широкий диапазон экспрессии антигенов, что показано с помощью анализа проточной цитометрии. Некоторые пациенты показали сильную положительность на оба антигена, в то время как другие имели сниженное CD22-окрашивание. В каждом случае CD22-специфические CAR давали противолейкемическую литическую активность на третьей части лимфоцитов.
Пример 4
[0128] Этот пример демонстрирует литическую активность Т-клеток, экспрессирующих CAR m971.
[0129] Чтобы определить, дают ли конструкции с CAR второго или третьего поколения повышенную литическую активность, лейкемические клеточные линии Raji (CD22высокий), NALM6-GL (СD22низкий) или K562 (CD22-отрицательная) метили 51Cr и использовали в качестве мишеней в анализах цитотоксичности. Эффекторные клетки были человеческими Т-клетками, нетрансдуцированными (mock) или трансдуцированными посредством CAR m971 второго поколения (версия 1) (SEQ ID NO 23) или CAR m971 третьего поколения (SEQ ID NO 24). Эффекторные клетки совместно культивировали с клетками-мишенями в различных соотношениях эффектора к мишени (Е:Т). Результаты показаны на фиг. 2А-2С.
[0130] Как показано на фиг. 2А-2С, CAR m971 второго поколения продемонстрировал превосходные литическую активность по сравнению с CAR m971 третьего поколения.
Пример 5
[0131] Этот пример демонстрирует реактивность Т-клеток, экспрессирующих CAR m971.
[0132] Т-клетки, которые были нетрансдуцированными (mock) или трансдуцированными одним из следующих CAR: анти-CD19 m971 второго поколения версии 1 (SEQ ID NO 23), m971 третьего поколения (SEQ ID NO 24), HASH22 второго поколения версии 1, HASH22 второго поколения версии 2 или HASH22 третьего поколения, культивировали совместно с лейкемическими клеточными линиями Raji (CD22высокий), NALM6-GL (CD22низкий) или K562 (CD22-отрицательная), и измеряли уровни секретированного интерферона (IFN) γ, фактора некроза опухоли (TNF) α и интерлейкина (IL) 2. Результаты показаны на фиг. 3А-3I.
[0133] Как показано на фиг. 3A-3I, клетки, трансдуцированные посредством CAR m971 второго поколения версии 1, секретировали большие количества IFN-γ, IL-2 и TNF-α в ответ на совместное культивирование с CD22-экспрессирующими клеточными линиями по сравнению с CAR m971 третьего поколения.
Пример 6
[0134] Этот пример демонстрирует, что клетки, трансдуцированные посредством CAR m971, задерживают прогрессирование заболевания и удлиняют продолжительность выживания in vivo по сравнению с CAR НА22.
[0135] Иммунодефицитным мышам NOD SCID гамма (NSG) вводили в 0 день 0,5×106 NALM6-GL (NAML6, трансфицированные люциферазой). В день 3 мышам вводили 1×107 нетрансдуцированных (mock) Т-клеток или Т-клеток, трансдуцированных CAR HASH22 второго поколения, версия 1, или CAR m971 второго поколения, версия 1 (SEQ ID NO 23). Массу опухоли измеряли по биолюминесцентным сигналам на каждую мышь в виде фотонов/с/см2/стерадиан при визуализации биолюминесценции с помощью прибора Xenogen MS. Мышам вводили внутрибрюшинно (i.p.) 3 мг D-люциферина (Caliper Life Sciences, Inc., Хопкинтон, Массачусетс) и через 4 минуты после инъекции анестезированных мышей визуализировали с временем экспозиции 30 секунд. Программное обеспечение LIVING IMAGE было использовано для анализа биолюминесцентных сигналов от каждой мыши в виде фотонов/с/см2/стерадиан на 3, 7 и 15 дни. Интенсивность сигнала откладывали на графике в зависимости от времени, результаты показаны на фиг. 4А.
[0136] Как показано на фиг. 4А, все мыши имели эквивалентное заболевание на 3 день. У мышей, получавших Т-клетки, трансдуцированные посредством CAR m971 второго поколения версии 1 (SEQ ID NO 23), уменьшилась масса опухоли по сравнению с мышами, получавшими контрольные клетки или клетки, трансдуцированные посредством CAR НА22.
[0137] Выживание мышей измеряли в течение 50 дней, статистику выживания вычисляли с использованием логарифмического рангового анализа (Mantel-Cox), и результаты выживаемости приведены на фиг. 4В. Как показано на фиг. 4В, мыши, получавшие Т-клетки, трансдуцированные посредством CAR m971 второго поколения версии 1 (SEQ ID NO 23), продемонстрировали увеличение выживаемости по сравнению с мышами, получавшими контрольные клетки, трансдуцированные CAR НА22.
[0138] Чтобы определить, была ли неудача лечения результатом потери антигена, мышей умерщвляли в связи с бременем болезни в соответствии с формальным протоколом, и анализировали селезенки с помощью проточной цитометрии. До терапии высокие уровни экспрессии CAR наблюдались на HASH-28z- и m971-282-трансдуцированных Т-клетках, а клетки NALM6-GL экспрессировали и CD19, и CD22. После умерщвления селезенки сначала анализировали на экспрессию человеческого CD45 и GFP. Гейтированные GFP-положительные клетки представляли опухоль, и при дальнейшем анализе эта гейтированная популяция продолжала экспрессировать GFP. Тем не менее, все CD45-положительные и GFP-отрицательные клетки далее не экспрессировали анти-CD22-CAR. Это означает, что лейкемия продолжала экспрессировать CD22, и что CAR Т-клетки не персистировали в момент умерщвления. Когда эксперимент был повторен и мышей умерщвляли на 12-й день, когда терапевтические Т-клетки все еще оказывали влияние, они легко могли быть обнаружены в крови, селезенке и костном мозге. CAR M971-28z (второе поколение, версия 1) показал гораздо большую способность проникновения в костный мозг.
Пример 7
[0139] Этот пример демонстрирует кривую "доза-ответ" для адоптивного переноса клеток, экспрессирующих CAR m971.
[0140] Мышам NSG (иммунодефицитным) вводили 0,5×106 клеток NALM6-GL в день 0. В день 3 животных обследовали с помощью субстрата люциферина, чтобы подтвердить наличие лейкемии. На день 3 мышам с лейкемией вводили внутривенно (i.v.) нетрансдуцированные (mock) Т-клетки или 15×106, 5×106, 1×106 или 1×105 Т-клеток, трансдуцированных нуклеотидной последовательностью, кодирующей CAR m971 второго поколения версии 2 (SEQ ID NO 22). Эффективность CAR-трансдукции трансдуцированных Т-клеток составила 90%. Т-клетки стимулировали анти-CD3/CD28-шариками (1:1), культивировали в 40 ед/мл интерлейкина-2 и вводили мышам через 10 дней после первоначальной стимуляции. Мышей снова обследовали на день 5 и день 8. Результаты показаны на фиг. 5 и 6. На фиг. 5 изменение в затенении с серого до белого указывает на увеличение опухолевой массы. На фиг. 6 уменьшение фотонов указывает на увеличение опухолевой массы. Как показано на фиг. 5 и 6, полное устранение лейкемии наблюдалось на самой высокой дозе на день 8.
[0141] Все ссылки, включая публикации, патентные заявки и патенты, цитируемые в данном документе, включены посредством ссылки в той же степени, как если бы про каждый объект ссылки было отдельно и конкретно указано, что он включен посредством ссылки и изложен в данном документе во всей его полноте.
[0142] Применение терминов в единственном числе и с указанием "по меньшей мере один" и аналогичных объектов ссылки в контексте описания изобретения (особенно в контексте следующей ниже формулы изобретения) должно толковаться как охватывающее единственное число и множественное число, если иное не указано в данном документе или это явно не противоречит контексту. Применение термина "по меньшей мере один" с последующим списком одного или более чем одного элемента (например, "по меньшей мере один из А и В") означает один элемент, выбранный среди перечисленных элементов (А и В), или любое сочетание двух или более из перечисленных элементов (А и В), если иное не указано в данном документе или явно не противоречит контексту. Термины "содержащий", "имеющий" и "включающий" должны быть истолкованы как неограничивающие термины (т.е. означающие "включающий, но не ограниченный этим"), если не указано иное. Указание диапазонов значений в данном документе является только способом быстрой записи с индивидуальной ссылкой на каждое отдельное значение, попадающее в диапазон, если в данном документе не указано иное, и каждое отдельное значение включено в описание, как если бы оно было отдельно приведено в данном документе. Все описанные здесь способы могут быть выполнены в любом подходящем порядке, если это явно не противоречит контексту или не указано иное. Использование в данном документе любых и всех примеров или иллюстративных выражений (например, "такой как") предназначено только для лучшего освещения изобретения и не накладывает ограничений на объем изобретения, если не заявлено иное. Никакое выражение в описании не следует толковать как указывающее на какой-либо незаявленный элемент как существенный для практики изобретения.
[0143] В данном документе описаны предпочтительные воплощения данного изобретения, включая наилучший способ, известный авторам изобретения, для осуществления данного изобретения. Вариации этих предпочтительных воплощений могут стать очевидными для специалистов в данной области после прочтения приведенного выше описания. Изобретатели ожидают, что специалисты используют такие вариации в зависимости от обстоятельств, и изобретатели подразумевают, что изобретение будет осуществлено иначе, чем конкретно описано в данном документе. Соответственно, данное изобретение включает все модификации и эквиваленты предмета, изложенного в формуле изобретения, прилагаемой к данному документу, как предусмотрено действующим законодательством. Кроме того, любая комбинация описанных выше элементов во всех возможных вариантах охватывается изобретением, если это явно не противоречит контексту или в данном описании не указано иное.
Claims (31)
1. Химерный антигенный рецептор (CAR), вызывающий антигенспецифический ответ против CD22 при связывании CAR с CD22, содержащий антигенсвязывающий домен, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO 1-6, трансмембранный домен и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга.
2. CAR по п. 1, где антигенсвязывающий домен содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, включающую SEQ ID NO 7.
3. CAR по п. 1 или 2, где антигенсвязывающий домен содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, включающую SEQ ID NO 8.
4. CAR по п. 1 или 2, где антигенсвязывающий домен содержит аминокислотную последовательность, включающую SEQ ID NO 9.
5. CAR по п. 1 или 2, где антигенсвязывающий домен содержит линкер, включающий SEQ ID NO 11.
6. CAR по п. 1 или 2, где трансмембранный домен содержит i) часть CD8 и/или ii) часть CD28.
7. CAR по п. 1 или 2, где трансмембранный домен содержит аминокислотную последовательность, включающую SEQ ID NO 12 или 18, и/или аминокислотную последовательность, включающую SEQ ID NO 15.
8. CAR по п. 1 или 2, где внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга содержит один или более чем один из i) внутриклеточной части сигналинга CD28, ii) внутриклеточной части сигналинга CD137 и iii) внутриклеточной части сигналинга CD3 дзета.
9. CAR по п. 1 или 2, где внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга содержит аминокислотную последовательность, включающую последовательность SEQ ID NO 16 или 19.
10. CAR по п. 1 или 2, где внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга содержит аминокислотную последовательность, включающую SEQ ID NO 13 или 20.
11. CAR по п. 1 или 2, где внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга содержит аминокислотную последовательность, включающую SEQ ID NO 14, 17 или 21.
12. CAR по п. 1 или 2, где внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга содержит внутриклеточную часть CD28 или содержит внутриклеточную часть сигналинга CD137 и где указанный CAR не содержит внутриклеточный домен сигналинга как CD28, так и CD137.
13. CAR по п. 12, где указанный CAR не содержит внутриклеточный домен сигналинга, полученный от более чем одной костимулирующей Т-клетки молекулы.
14. CAR по п. 1 или 2, содержащий аминокислотную последовательность, включающую любую из SEQ ID NO 22-24.
15. CAR по п. 1 или 2, где внутриклеточный домен сигналинга содержит внутриклеточную часть сигналинга CD137 и внутриклеточной части сигналинга CD3 дзета.
16. CAR по п. 15, где трансмембранная часть содержит часть CD8.
17. CAR по п. 15, где трансмембранная часть содержит часть CD28.
18. Химерный антигенный рецептор (CAR), вызывающий антигенспецифический ответ против CD22 при связывании CAR с CD22, содержащий антигенсвязывающий домен, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO 1-6, трансмембранный домен, внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга и лидерную последовательность, включающую SEQ ID NO 10.
19. Нуклеиновая кислота, кодирующая CAR по п. 1 или 2.
20. Нуклеиновая кислота по п. 19, содержащая нуклеотидную последовательность, включающую SEQ ID NO 25.
21. Нуклеиновая кислота, кодирующая химерный антигенный рецептор (CAR), вызывающий антигенспецифический ответ против CD22 при связывании CAR с CD22, содержащий антигенсвязывающий домен, содержащий аминокислотные последовательности SEQ ID NO 1-6, трансмембранный домен и внутриклеточный домен Т-клеточного сигналинга, включающая нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO 25-28.
22. Нуклеиновая кислота по п. 21, включающая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 25 и нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 26.
23. Нуклеиновая кислота по п. 21, включающая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 25 и нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 27.
24. Рекомбинантный экспрессионный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 19.
25. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантный экспрессионный вектор по п. 24, для продуцирования химерного антигенного рецептора (CAR), способного вызывать антигенспецифический ответ против CD22.
26. Фармацевтическая композиция для лечения или профилактики рака у млекопитающего, содержащая эффективное количество CAR по п. 1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель, где рак экспрессирует CD22.
27. Способ лечения или профилактики рака у млекопитающего, включающий введение млекопитающему CAR по п. 1 или 2 в количестве, эффективном для лечения или профилактики рака у млекопитающего, где рак экспрессирует CD22.
28. Способ по п. 27, где рак включает В-клеточную лимфому или В-клеточную лейкемию.
29. Применение клетки-хозяина по п. 25 для изготовления лекарственного средства для лечения или профилактики рака, где рак экспрессирует CD22.
30. Применение клетки-хозяина по п. 25 для изготовления композиции для обнаружения рака, где рак экспрессирует CD22.
31. Применение по п. 29 или 30, где рак включает В-клеточную лимфому или В-клеточную лейкемию.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261717960P | 2012-10-24 | 2012-10-24 | |
US61/717,960 | 2012-10-24 | ||
PCT/US2013/060332 WO2014065961A1 (en) | 2012-10-24 | 2013-09-18 | M971 chimeric antigen receptors |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018116582A Division RU2770411C1 (ru) | 2012-10-24 | 2018-05-04 | Химерные антигенные рецепторы m971 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2015117237A RU2015117237A (ru) | 2016-12-20 |
RU2658485C2 true RU2658485C2 (ru) | 2018-06-21 |
Family
ID=49304331
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2015117237A RU2658485C2 (ru) | 2012-10-24 | 2013-09-18 | Химерные антигенные рецепторы м971 |
RU2018116582A RU2770411C1 (ru) | 2012-10-24 | 2018-05-04 | Химерные антигенные рецепторы m971 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018116582A RU2770411C1 (ru) | 2012-10-24 | 2018-05-04 | Химерные антигенные рецепторы m971 |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US10072078B2 (ru) |
EP (1) | EP2912061B1 (ru) |
JP (2) | JP6338252B2 (ru) |
CN (2) | CN104822705B (ru) |
AU (2) | AU2013335180B2 (ru) |
BR (1) | BR112015009003B1 (ru) |
CA (1) | CA2889055C (ru) |
ES (1) | ES2718903T3 (ru) |
HK (1) | HK1213922A1 (ru) |
RU (2) | RU2658485C2 (ru) |
WO (1) | WO2014065961A1 (ru) |
Families Citing this family (41)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113512522A (zh) | 2013-03-15 | 2021-10-19 | 普林斯顿大学理事会 | 用于高通量纯化的方法和设备 |
US20150064153A1 (en) | 2013-03-15 | 2015-03-05 | The Trustees Of Princeton University | High efficiency microfluidic purification of stem cells to improve transplants |
WO2014145152A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Gpb Scientific, Llc | On-chip microfluidic processing of particles |
AU2015295346A1 (en) * | 2014-07-29 | 2017-02-16 | Allogene Therapeutics, Inc. | EGFRvlll specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy |
JP7068820B2 (ja) | 2014-12-03 | 2022-05-17 | ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド | 養子細胞療法のための方法および組成物 |
FI3560953T3 (fi) | 2014-12-24 | 2024-03-21 | Autolus Ltd | Solu |
WO2016149578A1 (en) * | 2015-03-19 | 2016-09-22 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Dual specific anti-cd22-anti-cd19 chimeric antigen receptors |
US10253086B2 (en) | 2015-04-08 | 2019-04-09 | Novartis Ag | CD20 therapies, CD22 therapies, and combination therapies with a CD19 chimeric antigen receptor (CAR)-expressing cell |
CN104829733B (zh) * | 2015-05-25 | 2018-06-05 | 广州百暨基因科技有限公司 | 抗原结合单元稳定的嵌合抗原受体及制备方法与应用 |
US10976232B2 (en) | 2015-08-24 | 2021-04-13 | Gpb Scientific, Inc. | Methods and devices for multi-step cell purification and concentration |
WO2017044699A1 (en) | 2015-09-10 | 2017-03-16 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Anti-cd276 chimeric antigen receptors |
WO2017139199A1 (en) | 2016-02-10 | 2017-08-17 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Inducible arginase |
WO2018045325A1 (en) | 2016-09-02 | 2018-03-08 | Lentigen Technology, Inc. | Compositions and methods for treating cancer with duocars |
CN107964549B (zh) * | 2016-10-20 | 2020-12-08 | 上海恒润达生生物科技有限公司 | 靶向cd22的嵌合抗原受体及其用途 |
US11590167B2 (en) | 2016-12-03 | 2023-02-28 | Juno Therapeutic, Inc. | Methods and compositions for use of therapeutic T cells in combination with kinase inhibitors |
WO2018178378A1 (en) | 2017-03-31 | 2018-10-04 | Cellectis Sa | New universal chimeric antigen receptor t cells specific for cd22 |
CN110753555A (zh) | 2017-04-19 | 2020-02-04 | 得克萨斯州大学系统董事会 | 表达工程化抗原受体的免疫细胞 |
AU2018269194A1 (en) * | 2017-05-15 | 2019-11-14 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Bicistronic chimeric antigen receptors and their uses |
BR112019025403A2 (pt) | 2017-06-02 | 2020-08-18 | Juno Therapeutics Inc | artigos de fabricação e métodos para tratamento usando terapia celular adotiva |
CN109385402A (zh) * | 2017-08-11 | 2019-02-26 | 上海恒润达生生物科技有限公司 | 一种等比例混合两种靶点cart细胞的制备方法及应用 |
US10844353B2 (en) | 2017-09-01 | 2020-11-24 | Gpb Scientific, Inc. | Methods for preparing therapeutically active cells using microfluidics |
WO2019055896A1 (en) * | 2017-09-15 | 2019-03-21 | Kite Pharma, Inc. | METHODS AND SYSTEMS FOR PERFORMING A PATIENT-CLEAN IMMUNOTHERAPY PROCEDURE WITH FOLLOW-UP OF BIOLOGICAL SAMPLE CHAIN OF CONTROL AND IDENTITY CHAIN |
CN107759700A (zh) * | 2017-10-18 | 2018-03-06 | 银丰生物工程集团有限公司 | 靶向cd19抗原的转基因t细胞及其制备方法与应用 |
CN109837305A (zh) * | 2017-11-25 | 2019-06-04 | 深圳宾德生物技术有限公司 | 一种敲除pd1的靶向cd22的嵌合抗原受体t细胞及其制备方法和应用 |
CN109836495A (zh) * | 2017-11-25 | 2019-06-04 | 深圳宾德生物技术有限公司 | 一种靶向cd22的单链抗体、嵌合抗原受体t细胞及其制备方法和应用 |
CN109988242A (zh) * | 2018-01-02 | 2019-07-09 | 武汉波睿达生物科技有限公司 | 联合嵌合抗原受体、表达载体、慢病毒及t细胞 |
AU2019260656A1 (en) | 2018-04-24 | 2020-12-10 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Methods of producing T cell populations using hydroxycitric acid and/or a salt thereof |
CN108715859B (zh) * | 2018-05-31 | 2021-08-03 | 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) | 靶向cd22的嵌合抗原受体及其应用 |
CA3105694A1 (en) * | 2018-07-12 | 2020-01-16 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Affinity matured cd22-specific monoclonal antibody and uses thereof |
US20220241330A1 (en) * | 2019-05-16 | 2022-08-04 | Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. | Immune cell receptors comprising cd4 binding moieties |
WO2021011907A1 (en) | 2019-07-18 | 2021-01-21 | Gpb Scientific, Inc. | Ordered processing of blood products to produce therapeutically active cells |
CA3166192A1 (en) | 2019-12-28 | 2021-07-01 | Gpb Scientific, Inc. | Microfluidic cartridges for processing particles and cells |
EP4086281A4 (en) * | 2019-12-30 | 2024-02-14 | China Immunotech Beijing Biotechnology Co Ltd | IMPROVED T-CELL RECEPTOR STAR AND ITS USE |
US20230258635A1 (en) | 2020-09-08 | 2023-08-17 | The United States Of America,As Represented By The Secretary,Department Of Health And Human Services | T cell phenotypes associated with response to adoptive cell therapy |
US11661459B2 (en) | 2020-12-03 | 2023-05-30 | Century Therapeutics, Inc. | Artificial cell death polypeptide for chimeric antigen receptor and uses thereof |
US11883432B2 (en) | 2020-12-18 | 2024-01-30 | Century Therapeutics, Inc. | Chimeric antigen receptor system with adaptable receptor specificity |
WO2022251070A1 (en) * | 2021-05-27 | 2022-12-01 | Innovative Cellular Therapeutics Holdings, Ltd. | Modified chimeric antigen receptor and use thereof |
US20230174651A1 (en) | 2021-06-23 | 2023-06-08 | Janssen Biotech, Inc. | Materials and methods for hinge regions in functional exogenous receptors |
AU2022310862A1 (en) | 2021-07-14 | 2024-02-01 | 2Seventy Bio, Inc. | Engineered t cell receptors fused to binding domains from antibodies |
WO2023196997A2 (en) | 2022-04-08 | 2023-10-12 | 2Seventy Bio, Inc. | Multipartite receptor and signaling complexes |
WO2024018426A1 (en) | 2022-07-22 | 2024-01-25 | Janssen Biotech, Inc. | Enhanced transfer of genetic instructions to effector immune cells |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2342401C2 (ru) * | 2002-05-02 | 2008-12-27 | Юсб Фарма С.А. | Антитела, специфичные к cd22 человека, и их применения в терапии и диагностике |
WO2009091826A2 (en) * | 2008-01-14 | 2009-07-23 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Compositions and methods related to a human cd19-specific chimeric antigen receptor (h-car) |
WO2009124109A1 (en) * | 2008-04-04 | 2009-10-08 | The Government Of The U.S. A. As Represented By The Secretary Of The Dept. Of Health &Human Services | Human monoclonal antibodies specific for cd22 |
WO2011041093A1 (en) * | 2009-10-01 | 2011-04-07 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Anti-vascular endothelial growth factor receptor-2 chimeric antigen receptors and use of same for the treatment of cancer |
Family Cites Families (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3854480A (en) | 1969-04-01 | 1974-12-17 | Alza Corp | Drug-delivery system |
US3832253A (en) | 1973-03-21 | 1974-08-27 | Baxter Laboratories Inc | Method of making an inflatable balloon catheter |
US4450150A (en) | 1973-05-17 | 1984-05-22 | Arthur D. Little, Inc. | Biodegradable, implantable drug delivery depots, and method for preparing and using the same |
US4235871A (en) | 1978-02-24 | 1980-11-25 | Papahadjopoulos Demetrios P | Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles |
US4667014A (en) | 1983-03-07 | 1987-05-19 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Nonapeptide and decapeptide analogs of LHRH, useful as LHRH antagonists |
US4452775A (en) | 1982-12-03 | 1984-06-05 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules |
US4501728A (en) | 1983-01-06 | 1985-02-26 | Technology Unlimited, Inc. | Masking of liposomes from RES recognition |
CA1200416A (en) | 1983-05-13 | 1986-02-11 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Food process |
US5019369A (en) | 1984-10-22 | 1991-05-28 | Vestar, Inc. | Method of targeting tumors in humans |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
IN165717B (ru) | 1986-08-07 | 1989-12-23 | Battelle Memorial Institute | |
US5075109A (en) | 1986-10-24 | 1991-12-24 | Southern Research Institute | Method of potentiating an immune response |
US4837028A (en) | 1986-12-24 | 1989-06-06 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
ES2108048T3 (es) | 1990-08-29 | 1997-12-16 | Genpharm Int | Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos. |
JPH04167172A (ja) | 1990-10-31 | 1992-06-15 | Nec Corp | ベクトルプロセッサ |
JP3266311B2 (ja) | 1991-05-02 | 2002-03-18 | 生化学工業株式会社 | 新規ポリペプチドおよびこれを用いる抗hiv剤 |
US5639641A (en) | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
US6265150B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-07-24 | Becton Dickinson & Company | Phage antibodies |
US5714352A (en) | 1996-03-20 | 1998-02-03 | Xenotech Incorporated | Directed switch-mediated DNA recombination |
JP2004511425A (ja) | 2000-02-08 | 2004-04-15 | ザ ペン ステート リサーチ ファウンデーション | 免疫療法に使用されるインターロイキン13受容体サブユニットアルファー2 |
CN1279056C (zh) * | 2003-06-06 | 2006-10-11 | 马菁 | 肿瘤相关抗原sm5-1的特异性抗体及其应用 |
CN100374464C (zh) * | 2003-07-10 | 2008-03-12 | 上海单抗制药技术有限公司 | 抗sars病毒的单克隆抗体、其编码序列及应用 |
WO2007134272A2 (en) * | 2006-05-12 | 2007-11-22 | Janssen Pharmaceutica N.V. | Humanized models via targeted mtagenesis with zinc finger nuclease |
WO2008045437A2 (en) | 2006-10-09 | 2008-04-17 | The General Hospital Corporation | Chimeric t-cell receptors and t-cells targeting egfrviii on tumors |
KR101688522B1 (ko) * | 2009-12-15 | 2016-12-21 | 삼성전자주식회사 | 안지오포이에틴-2에 특이적으로 결합하는 항체 및 그의 용도 |
NZ612512A (en) * | 2010-12-09 | 2015-03-27 | Univ Pennsylvania | Use of chimeric antigen receptor-modified t cells to treat cancer |
CA2851795C (en) * | 2011-10-20 | 2018-11-13 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Anti-cd22 chimeric antigen receptors |
-
2013
- 2013-09-18 CA CA2889055A patent/CA2889055C/en active Active
- 2013-09-18 BR BR112015009003-6A patent/BR112015009003B1/pt active IP Right Grant
- 2013-09-18 RU RU2015117237A patent/RU2658485C2/ru active
- 2013-09-18 CN CN201380061387.5A patent/CN104822705B/zh active Active
- 2013-09-18 CN CN201910500128.7A patent/CN110229834B/zh active Active
- 2013-09-18 US US14/437,889 patent/US10072078B2/en active Active
- 2013-09-18 ES ES13773468T patent/ES2718903T3/es active Active
- 2013-09-18 JP JP2015539602A patent/JP6338252B2/ja active Active
- 2013-09-18 WO PCT/US2013/060332 patent/WO2014065961A1/en active Application Filing
- 2013-09-18 AU AU2013335180A patent/AU2013335180B2/en active Active
- 2013-09-18 EP EP13773468.7A patent/EP2912061B1/en active Active
-
2016
- 2016-02-19 HK HK16101891.0A patent/HK1213922A1/zh unknown
-
2018
- 2018-05-02 JP JP2018088908A patent/JP6643394B2/ja active Active
- 2018-05-04 RU RU2018116582A patent/RU2770411C1/ru active
- 2018-06-14 AU AU2018204257A patent/AU2018204257B2/en active Active
- 2018-08-21 US US16/107,271 patent/US10703816B2/en active Active
-
2020
- 2020-05-08 US US16/869,792 patent/US11807682B2/en active Active
-
2023
- 2023-11-06 US US18/503,107 patent/US20240084008A1/en active Pending
- 2023-11-06 US US18/502,993 patent/US20240084007A1/en active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2342401C2 (ru) * | 2002-05-02 | 2008-12-27 | Юсб Фарма С.А. | Антитела, специфичные к cd22 человека, и их применения в терапии и диагностике |
WO2009091826A2 (en) * | 2008-01-14 | 2009-07-23 | The Board Of Regents Of The University Of Texas System | Compositions and methods related to a human cd19-specific chimeric antigen receptor (h-car) |
WO2009124109A1 (en) * | 2008-04-04 | 2009-10-08 | The Government Of The U.S. A. As Represented By The Secretary Of The Dept. Of Health &Human Services | Human monoclonal antibodies specific for cd22 |
WO2011041093A1 (en) * | 2009-10-01 | 2011-04-07 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Anti-vascular endothelial growth factor receptor-2 chimeric antigen receptors and use of same for the treatment of cancer |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
SCOTT E. JAMES et al., Antigen sensitivity of CD22-specific chimeric T cell receptors is modulated by target epitope distance from the cell membrane, J Immunol, 2008,Vol.15, N. 180(10), pp. 7028-7038. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US10072078B2 (en) | 2018-09-11 |
JP6338252B2 (ja) | 2018-06-06 |
CN110229834A (zh) | 2019-09-13 |
HK1213922A1 (zh) | 2016-07-15 |
US11807682B2 (en) | 2023-11-07 |
US20200283522A1 (en) | 2020-09-10 |
AU2018204257A1 (en) | 2018-07-05 |
US10703816B2 (en) | 2020-07-07 |
AU2018204257B2 (en) | 2020-03-05 |
JP2016502512A (ja) | 2016-01-28 |
CN104822705B (zh) | 2019-07-12 |
AU2013335180A1 (en) | 2015-05-14 |
WO2014065961A1 (en) | 2014-05-01 |
CN104822705A (zh) | 2015-08-05 |
CA2889055C (en) | 2024-01-30 |
EP2912061A1 (en) | 2015-09-02 |
US20190085078A1 (en) | 2019-03-21 |
CA2889055A1 (en) | 2014-05-01 |
BR112015009003A2 (pt) | 2017-11-14 |
RU2015117237A (ru) | 2016-12-20 |
AU2013335180B2 (en) | 2018-07-12 |
JP6643394B2 (ja) | 2020-02-12 |
EP2912061B1 (en) | 2019-02-06 |
US20150299317A1 (en) | 2015-10-22 |
JP2018153186A (ja) | 2018-10-04 |
BR112015009003B1 (pt) | 2023-01-31 |
RU2770411C1 (ru) | 2022-04-15 |
ES2718903T3 (es) | 2019-07-05 |
US20240084008A1 (en) | 2024-03-14 |
CN110229834B (zh) | 2022-11-01 |
US20240084007A1 (en) | 2024-03-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2770411C1 (ru) | Химерные антигенные рецепторы m971 | |
AU2017225049B2 (en) | Anti-cd22 chimeric antigen receptors | |
ES2876176T3 (es) | Receptores de células T anti-SSX-2 y materiales relacionados y métodos de uso | |
RU2701346C1 (ru) | Химерные антигенные рецепторы, специфичные в отношении рецептора тимусного стромального лимфопоэтина, и способы их применения |