RU2658435C1 - Способ выделения и идентификации бактерий pseudomonas aeruginosa - Google Patents
Способ выделения и идентификации бактерий pseudomonas aeruginosa Download PDFInfo
- Publication number
- RU2658435C1 RU2658435C1 RU2017132056A RU2017132056A RU2658435C1 RU 2658435 C1 RU2658435 C1 RU 2658435C1 RU 2017132056 A RU2017132056 A RU 2017132056A RU 2017132056 A RU2017132056 A RU 2017132056A RU 2658435 C1 RU2658435 C1 RU 2658435C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacteria
- aeruginosa
- medium
- identification
- agar
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 title claims abstract description 17
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title abstract description 15
- LGCMKPRGGJRYGM-UHFFFAOYSA-N Osalmid Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1O LGCMKPRGGJRYGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 28
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 229950011258 osalmid Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 19
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 14
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 claims abstract description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 13
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims abstract description 13
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims abstract description 11
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims abstract description 11
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 42
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 11
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 claims description 10
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 6
- 238000009331 sowing Methods 0.000 claims description 2
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 11
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract description 8
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 abstract 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 abstract 1
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 abstract 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 abstract 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 abstract 1
- 229940049906 glutamate Drugs 0.000 abstract 1
- 229960001855 mannitol Drugs 0.000 abstract 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 abstract 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 63
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 17
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 6
- 229960002798 cetrimide Drugs 0.000 description 6
- YNCMLFHHXWETLD-UHFFFAOYSA-N pyocyanin Chemical compound CN1C2=CC=CC=C2N=C2C1=CC=CC2=O YNCMLFHHXWETLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 5
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 4
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 241000588626 Acinetobacter baumannii Species 0.000 description 3
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 3
- 239000001982 cetrimide agar Substances 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 3
- 108010023063 Bacto-peptone Proteins 0.000 description 2
- 241000589513 Burkholderia cepacia Species 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 2
- 108090000913 Nitrate Reductases Proteins 0.000 description 2
- 241000168225 Pseudomonas alcaligenes Species 0.000 description 2
- 241000218905 Pseudomonas luteola Species 0.000 description 2
- 241000589630 Pseudomonas pseudoalcaligenes Species 0.000 description 2
- 241000589614 Pseudomonas stutzeri Species 0.000 description 2
- 241000122973 Stenotrophomonas maltophilia Species 0.000 description 2
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000000731 choleretic agent Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 2
- -1 monosubstituted ammonium phosphate Chemical class 0.000 description 2
- MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N nalidixic acid Chemical compound C1=C(C)N=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=C1 MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000210 nalidixic acid Drugs 0.000 description 2
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- WJFKNYWRSNBZNX-UHFFFAOYSA-N 10H-phenothiazine Chemical compound C1=CC=C2NC3=CC=CC=C3SC2=C1 WJFKNYWRSNBZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001673062 Achromobacter xylosoxidans Species 0.000 description 1
- 241000588813 Alcaligenes faecalis Species 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 241000588919 Citrobacter freundii Species 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000588697 Enterobacter cloacae Species 0.000 description 1
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000588729 Hafnia alvei Species 0.000 description 1
- 241000588915 Klebsiella aerogenes Species 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 241000588777 Providencia rettgeri Species 0.000 description 1
- 241000960608 Pseudomonas putida group Species 0.000 description 1
- 241000588746 Raoultella planticola Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 241000607715 Serratia marcescens Species 0.000 description 1
- 241001518135 Shewanella algae Species 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 229940005347 alcaligenes faecalis Drugs 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000006161 blood agar Substances 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000357 carcinogen Toxicity 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M cetylpyridinium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+]1=CC=CC=C1 YMKDRGPMQRFJGP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002075 main ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 108010025281 pyoverdin Proteins 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/38—Pseudomonas
- C12R2001/385—Pseudomonas aeruginosa
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Способ выделения и идентификации бактерий Pseudomonas aeruginosa предусматривает посев исследуемого материала на селективную синтетическую питательную среду, содержащую L-глютамат натрия, L-пролин, маннитол, осалмид (CAS 526-18-1), диметилсульфоксид, NaCl, Na2SO4, MgSO4, KH2PO4, K2HPO4, агар микробиологический и дистиллированную воду в заданных соотношениях. Проводят инкубацию в аэробных условиях при 42°С в течение 24 ч с последующей идентификацией бактерий вида P. aeruginosa по наличию выросших колоний или газона бактерий. Изобретение позволяет повысить стандартность исследования по выделению и идентификации бактерий P. aeruginosa. 2 пр.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии. Может быть использовано при бактериологических исследованиях по выделению и идентификации бактерий Pseudomonas aeruginosa, производстве питательных для этих исследований.
Известен способ выделения и идентификации P. aeruginosa с использованием отечественной питательной среды «Pseudomonas APS» (Сиволодский Е.П. Питательная среда «Pseudomonas APS» для выделения и идентификации бактерий Pseudomonas aeruginosa и Pseudomonas putida. - Лабораторное дело. - 1990. - №8. - С. 65-67). Эта селективная среда была разработана на основе обнаруженного нами нового свойства лекарственного желчегонного препарата «оксафенамид» (осалмид) избирательно подавлять рост всех бактерий, кроме P.aeruginosa и P.putida. Питательная среда была защищена авторским свидетельством на изобретение СССР (Сиволодский Е.П. А.с. СССР №1414871, опубликовано 07.08.1988 г., Бюллетень №20, с. 112, приоритет от 01.04.1986 г.). В 1993 году это авторское свидетельство было переоформлено в патент на изобретение РФ №1414871. В соответствии со статьей (Лабораторное дело. - 1990. - №8. – С. 65-67) выделение и идентификацию P.aeruginosa осуществляют путем посева исследуемого материала на питательную среду «Pseudomonas APS», содержащую сухой питательный агар из рыбного гидролизата (производства Дагестанского НИИ питательных сред) 35,0 г, оксафенамид (п-оксифенилсалициламид) 1,0-1,2 г, растворенный в 10-12 мл диметилсульфоксида, воду дистиллированную до 1 л, рН 7,2±0,2. Приготовление среды: в стерильную колбу вносят 200 мл расплавленного питательного агара (приготовленного на основе 35 г сухого питательного агара из рыбного гидролизата в 1 л дистиллированной воды), добавляют 2,2 мл 10-процентного раствора оксафенамида в диметилсульфоксиде (раствор оксафенамида готовят путем растирания 1 г оксафенамида в ступке с 9 мл диметилсульфоксида),перемешивают, разливают в стерильные чашки Петри; готовая среда прозрачная, светло-серого цвета, пригодна 10 суток при хранении от 4°С до 8°С. Исследуемый материал засевают на поверхность среды петлей или ватным тампоном (можно засевать на % часть чашки), инкубируют аэробно 16-24 ч при 42°С и(или) 35°С, затем учитывают результат. Наличие колоний бактерий, выросших при 42°С, указывает на их принадлежность к виду P. aeruginosa. Бактерии, выросшие при 35°С, принадлежат к P. aeruginosa при наличии нитратредуктазы, определяемой микрообъемным методом в течение 3 ч, или принадлежат к виду Р. putida при отсутствии нитратредуктазы. Среда «Pseudomonas APS» имеет высокую аналитическую чувствительность: минимальное количество КОЕ инокулята, которое обеспечивает выявление колоний через 24 ч инкубации, составило для P. aeruginosa при 35°С 1-8, при 42°С 2-12; для P.putida при 35°С 2-50. Диагностическая чувствительность среды превышала чувствительность традиционного метода с использованием кровяного агара. Бактерии других видов на этой среде не росли.
Известна также отечественная питательная среда «ЦПХ-агар» для выделения синегнойной палочки (www.microgen.ru/products/pitatelnye-sredy/pitatelnaya-sreda-dlya-vydeleniya-sinegnoynoy-palochki-sukhaya-tspkh-agar/). Состав среды (г/л): пептон сухой ферментативный для бактериологических целей 20,0; агар микробиологический 8,0±1,0; калий сернокислый 7,6; магний сернокислый 7-водный 2,4; сода кальцинированная 1,0; фенозан-кислота 0,2; N-цетилпиридиний хлористый 1-водный 0,3. Все ингредиенты вносят в 1 л дистиллированной воды, кипятят 2 мин до расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, не стерилизуют, разливают в стерильные чашки Петри. Среда непрозрачная, желтого цвета, срок хранения 15 суток от 2°С до 8°С. Посевы исследуемого материала инкубируют при 37°С в течение 24-48 ч. Наряду с колониями синегнойной палочки на среде возможен рост колоний энтерококков, клебсиелл, провиденций. Аналитическая чувствительность среды низкая 104-105 КОЕ. ЦПХ-агар производит ФГУП НПО «Микроген» Минздрава РФ (г.Махачкала).
Известна отечественная селективная среда с ацетамидом для выделения P. aeruginosa (Приказ Министерства здравоохранения СССР от 22.04.1985 г. №535 «Об унификации микробиологических(бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений». Приложение 1. - М. 1985). Среда содержит: натрий хлористый 5,0 г; магний сернокислый 0,2 г; аммоний фосфорнокислый однозамещенный 1,0; калий фосфорнокислый двузамещенный 1,0; ацетамид 20,0; агар 15,0; вода дистиллированная 1 л; рН 6,7-6,8. Все ингредиенты смешивают, кипятят до расплавления агара, стерилизуют при 121°С 20 мин, разливают в чашки Петри. Посевы материала выращивают при 42°С в течение 24-48 ч. Кроме синегнойной палочки возможен рост других видов псевдомонад и провиденций. Аналитическая чувствительность низкая - 103 КОЕ. Ацетамид - сильный канцероген. Питательная среда с ацетамидом не производится.
Известно, что многие зарубежные фирмы производят питательные среды с цетримидом для селективного выделения P. aeruginosa. Так, среди питательных сред «PRONADISA», производимых компанией Laboratories Conda S.A., Spain, известна селективная среда «Cetrimide agar base european pharmacopoeia, usp» (https://www.condalab.com/1102.pdf). Она содержит: панкреатический перевар желатина 20,0; калий сернокислый 10,0; магний хлористый 1,4; цетримид 0,3; агар 13.6; глицерин 10 мл; вода дистиллированная 1 л. Все ингредиенты растворяют при нагревании и стерилизуют при 121°С 15 мин. Посевы исследуемого материала выращивают аэробно при 30°-35°С в течение 18-72 ч. Идентифицируют бактерии P. aeruginosa по морфологии колоний, наличию пиоцианина, характерному запаху. Питательные среды с цетримидом имеют низкую аналитическую чувствительность, поэтому исследуемый инокулят должен содержать не менее 103-105 КОЕ/мл. На среде с цетримидом возможен рост некоторых штаммов клебсиелл, серраций, поэтому ряд фирм добавляют в среду налидиксовую кислоту (15 мг/л).
Известна отечественная коммерческая «селективная питательная среда для выделения псевдомонад, сухая» (патент на изобретение РФ №2530549; авторы Храмов М.В., Шепелин А.П., Полосенко О.В., Марчихина И.И., Шолохова Л.П., Мартовецкий М.Н., опубликовано 10.10.2014, приоритет от 23.05.2013 г.). Питательная среда содержит, г/л: панкреатический гидролизат казеина 10,0±2,0; пептон мясной 10,0±2,0; дрожжевой экстракт 2.0±0,5; натрий хлористый 5,0±1,0; калий фосфорнокислый двузамещенный 1,0±0,1; калий фосфорнокислый однозамещенный 1,0±0.1; магний сернокислый 1,5±0,1; цетримид (hexadecyltrimethylammonium bromide) 0,3±0,05; агар бактериологический 10,0±3,0; натрий углекислый 0,3±0,1; налидиксовая кислота 0,01±0,002; глицерин 10,0±2,0; дистиллированная вода до 1 л. Аналитическая чувствительность среды 103-104 КОЕ/мл.
Известна также коммерческая селективная среда с иргазаном для выделения P. aeruginosa «BD Pseudomonas Isolation Agar» производства фирмы Becton Dickinson GmbH, Germany. В соответствии с инструкцией по ее применению (http://www.ВDРsеudоmоnаsIsоlаtiоnАqаrИнструкция) среда содержит: пептон Bacto 20,0 г; магния хлорид 1,4 г; калия сульфат 10,0; иргазан 0,025 г; агар 13,6; глицерин 20,0 мл; рН 7,0±0,2. Исследуемый материал засевают петлей на поверхность среды, инкубируют аэробно при 35°С 18-48 ч. Колонии синегнойной палочки выявляют по продукции пиоцианина. На среде возможен также рост колоний других видов псевдомонад, энтеробактерий, аэромонад, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia cepacia. Для идентификации P. aeruginosa требуются дополнительные исследования.
Прототипом заявляемого способа нами избран способ с использованием селективной питательной среды «Pseudomonas APS» (Сиволодский Е.П. Лабораторное дело. - 1990. - №8. - С. 65-67), так как в обоих способах выделение и идентификацию P. aeruginosa проводят на питательных средах с одинаковым селективным агентом осалмидом (CAS 526-18-1, оксафенамид), а различия отличительных признаков относятся только к источникам азота, углерода и солевой основе питательных сред.
Недостатком прототипного способа является отсутствие стандартности состава селективной питательной среды в связи с неопределенным составом питательного агара из рыбного гидролизата, используемого в качестве источника азота и углерода.
Недостатками других аналогов также является отсутствие стандартности состава источников азота и углерода питательных сред: в аналоге со средой «ЦПХ-агар» используют пептон ферментативный; в аналоге со средой «Cetrimide agar base european pharmacopoeia, usp» применяют панкреатический перевар желатина; в аналоге по патенту РФ №2530549 в цетримид-агаре используют панкреатический гидролизат казеина, пептон мясной, дрожжевой экстракт; в аналоге «BD Pseudomonas Isolation Agar» в среде с иргазаном применяют пептон Bacto; в аналоге селективной среды с ацетамидом используют минеральный источник азота - аммоний фосфорнокислый однозамещенный, источником углерода является селективный агент ацетамид. Все указанные аналоги имеют также недостаточную селективность.
Целью изобретения является повышение стандартности исследования по выделению и идентификации бактерий P. aeruginosa. Повышение стандартности исследования состоит в достижении полной определенности и постоянства состава селективной питательной среды, используемой для выделения и идентификации бактерий вида P. aeruginosa, при сохранении ее высоких диагностических характеристик.
В соответствии с изобретением решение указанной технической задачи достигается тем, что исследуемый материал засевают на питательную среду, содержащую в качестве источника азота и углерода L-глютамат натрия, L-пролин; маннитол; осалмид (САS 526-18-1), растворенный в диметилсульфоксиде, NaCl, Na2SO4, MgSO4, KH2PO4, K2HPO4; агар микробиологический, дистиллированную воду при следующем содержании ингредиентов: L-глютамат натрия 5,0-6,0 г; L-пролин 2,0-2,5 г; маннитол 5,0-6,0 г; осалмид (CAS 526-18-1) 1,0-1,2 г; диметилсульфоксид 10,0-12,0 мл; NaCl 5,0 г; Na2SO4 2,0 г; MgSO4 0,1 г; KH2PO4 0,5 г; K2HPO4 2,0 г; агар микробиологический 12,0 г; вода дистиллированная 1 л; рН 7,2±0,2; при этом все ингредиенты, кроме суплемента осалмида (10-12 мл 10-процентного раствора осалмида в диметилсульфоксиде), растворяют при нагревании, кипятят 5 мин, добавляют осалмид, разливают в стерильные чашки Петри; посевы инкубируют в аэробных условиях при 42°С 24 ч, затем определяют принадлежность бактерий к виду P. aeruginosa только по наличию выросших колоний или газона бактерий. Примечание: бактериологический контроль качества питательной среды заявляемого способа проводят при изготовлении среды; для положительного контроля используют типовой штамм Pseudomonas aeruginosa АТСС 10145 в посевной дозе 10-102 КОЕ/мл-1; для отрицательного контроля применяют клинические штаммы Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Staphylococcus aureus в посевной дозе 106 КОЕ/мл-1; исследование проводят по методике заявляемого способа. Среда пригодна к использованию при наличии роста синегнойной палочки (не менее 30% КОЕ) и отсутствии роста прочих контрольных бактерий. Питательная среда в чашках Петри бесцветная, прозрачная, срок хранения 1 месяц при температуре от 4° до 8°С.
Отличительный существенный признак способа - использование в питательной среде L-глютамата натрия 5,0-6,0 г/л и L-пролина 2,0-2,5 г/л в качестве источника азота и углерода. Этот признак не применялся в прототипе и аналогах. Он не следует явным образом из уровня техники. Для каждого вида бактерий необходимо конкретное экспериментальное обоснование пригодности указанного признака. Так, в состав синтетической питательной среды для идентификации бактерий рода Pseudomonas (патент РФ на изобретение №2373287) входит L-глютамат натрия 1,0-3,0 и L-пролин 1,0-3,0, при этом исследование проводится при 28°С. Это сочетание аминокислот, обеспечивающее рост штаммов всех видов псевдомонад, было получено на основании экспериментального изучения профилей утилизации 20 белковых аминокислот в качестве единственного источника азота и углерода при температуре 28°С.Данных о профилях утилизации аминокислот псевдомонад при 42°С нет. Мы впервые изучили при 42°С профили утилизации 20 белковых аминокислот в качестве единственного источника азота и углерода у бактерий различных видов певдомонад, способных расти при 42°С на питательном агаре из рыбного гидролизата: 80 штаммов P. aeruginosa, по 3 штамма P. stutzeri, P. luteola, P. alcaligenes, P. pseudoalcaligenes (неопубликованные данные). Установлено, что только сочетание L-глютамата натрия и L-пролина обеспечивало рост всех изученных штаммов псевдомонад, а концентрации их, указанные в заявке, определяют оптимальный пышный рост бактерий. Установлено также, что селективный агент осалмид 1,0-1,2 г/л в синтетической среде с указанными аминокислотами обеспечивал при 42°С пышный рост всех штаммов P. aeruginosa при полном подавлении роста остальных видов псевдомонад. При этом аналитическая чувствительность синтетической среды составляет 2-15 КОЕ/мл-1 P. aeruginosa. Этот отличительный существенный признак непосредственно определяет решение поставленной технической задачи: повышается стандартность исследования ввиду замены сухого питательного агара из естестственного сырья неопределенного состава (гидролизата рыбы) питательной среды прототипа аминокислотами L-глютаматом натрия и L-пролином известного химического строения в известном количестве, то есть создается и используется синтетическая среда строго определенного состава. При этом синтетическая селективная питательная среда заявляемого способа сохраняет высокую аналитическую чувствительность и селективность питательной среды прототипа.
Второй отличительный существенный признак - использование в составе питательной среды маннитола 5,0-6,0 г/л. Нами неожиданно было установлено, что маннитол является лучшим кристаллопротектором среди изученных веществ (глицерин, глюкоза, арабиноза). Он препятствует появлению кристаллов солей в питательной среде при длительном хранении чашек со средой в холодильнике от 4°С до 8°С. Маннитол также является дополнительным источником углерода для P. aeruginosa, обеспечивая рост более крупных колоний.
Третий отличительный существенный признак - использование в составе питательной среды дополнительного комплекса минеральных солей: Na2SO4 2,0 г; MgSO4 0,1 г; KH2PO4 0,5 г; K2HPO4 2,0 г на 1 л дистиллированной воды. Эти соли необходимы для обеспечения утилизации L-глютамата натрия и L-пролина в составе синтетической среды и создания оптимальной рН среды. Количество соли магния, который индуцирует синтез пиоцианина и пиовердина, специально снижено в 15 раз по сравнению с известными средами с цетримидом и иргазаном, так как для идентификации синегнойной палочки на питательной среде заявляемого способа продукция этих пигментов не имеет значения. Однако, при этом существенно повышается аналитическая чувствительность питательной среды заявляемого способа.
Существенными признаками способа являются селективный агент, температурный режим, время исследования. Селективный агент питательной среды заявляемого способа - осалмид (CAS 526-18-1, оксафенамид), лекарственный желчегонный препарат, нерастворим в воде, растворим в диметилсульфоксиде. Он используется для приготовления питательной среды в виде 10-процентного раствора в диметилсульфоксиде. На питательной среде заявляемого способа при 28°С и 35°С осалмид подавлял рост бактерий 42 видов 23 родов, кроме P. aeruginosa и бактерий группы P. putida. При 42°С на питательной среде заявляемого способа наблюдался пышный рост только синегнойной палочки при отсутствии роста всех остальных видов бактерий, способных расти при 42°С на питательном агаре из гидролизата рыбы: Pseudomonas stutzeri, P. luteola, P. alcaligenes, P. pseudoalcaligenes, Acinetobacter baumannii, Burkholderia cepacia, Alcaligenes faecalis, Stenotrophomonas maltophilia, Achromobacter xylosoxydans, Shewanella algae, Citrobacter freundii, Serratia marcescens, Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae subsp. pneumoniae, Klebsiella mobilis, Providencia rettgeri, Enterobacter cloacae, Hafnia alvei, Raoultella planticola, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis. Поэтому целесообразно выращивать посевы исследуемого материала при 42°С, что обеспечивает через 24 ч рост только колоний синегнойной палочки и ее окончательную идентификацию по этому признаку без дополнительных тестов.
Примеры, подтверждающие возможность осуществления способа
Пример 1. Исследуемый материал - отделяемое раны засевают петлей из пробы №1 на сектор питательной среды заявляемого способа (1/4 часть чашки Петри), на остальные секторы засевают материал из проб №2, 3, 4. Состав и приготовление питательной среды заявляемого способа указаны в примечании к примеру. Посевы инкубируют в аэробных условиях при 42°С в течение 24 ч, затем учитывают результат. На секторах №2, 3, 4 нет роста бактерий. На секторе пробы №1 имеются отдельные колонии бактерий диаметром 2-3 мм и газон бактерий желто-зеленного цвета, что указывает на принадлежность выросших бактерий к виду P. aeruginosa. Контрольная идентификация выделенных бактерий традиционными культуральными и биохимическими тестами показала их принадлежность к P. aeruginosa.
Примечание к примеру 1. Методика приготовления питательной среды заявлямого способа. В 1 л дистиллированной воды вносят, г/л: L-глютамат натрия 5,0; L-пролин 2,0; маннитол 5,0; NaCl 5,0; Na2SO4 2,0; MgSO4 0,1; KH2PO4 0,5; K2HPO4 2,0; агар микробиологический 12,0; растворяют при нагревании, кипятят в течение 5 мин, добавляют осалмид (CAS 526-18-1) 1,0 (10 мл 10-процентного раствора осалмида в диметилсульфоксиде); проверяют рН 7,2±0,2, разливают в стерильные чашки Петри. Среда бесцветная, прозрачная, пригодна 30 суток при хранении от 4°С до 8°С. Контроль питательной среды: наличие при посеве по методике заявляемого способа контрольного штамма P. aeruginosa АТСС 10145 в посевной дозе 10-102 КОЕ/мл-1 роста колоний P. aeruginosa не менее 30% от посевной дозы; отсутствие роста бактерий контрольных клинических штаммов Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Staphylococcus aureus при при посеве в посевной дозе 106 КОЕ/мл-1.
Пример 2. Исследуемый материал - мочу больного в разведении 10-3 0,1 мл засевают шпателем на поверхность питательной среды заявляемого способа, содержащей на 1 л дистиллированной воды, г/л: L-глютамат натрия 6,0; L-пролин 2,5; маннитол 6,0; осалмид 1,2 в 12 мл диметилсульфоксида; остальные ингредиенты по примечанию к примеру 1; посевы инкубируют аэробно при 42°С в течение 24 ч, после чего учитывают результат: на поверхности питательной среды в чашке Петри выросли 48 колоний бактерий диаметром 2-3 мм, плоских, желто-зеленой окраски, что указывает на их принадлежность к виду P. aeruginosa; с учетом разведения мочи количество бактерий P. aeruginosa в моче составляет 4,8×105 КОЕ/мл. Контрольная идентификация выделенных бактерий традиционными культуральными и биохимическими тестами подтвердила их принадлежность к синегнойной палочке.
Таким образом, при всех предельных концентрациях основных ингредиентов питательной среды заявляемого способа (L-глютамат натрия 5,0-6,0 г/л; L-пролин 2,0-2,5 г/л; маннитол 5,0-6,0 г/л; осалмид 1,0-1,2 г/л) получены четкие результаты выявления, одноэтапной окончательной идентификации и количественного учета бактерий вида P. aeruginosa.
Изучение в клинико-диагностической лаборатории диагностической чувствительности и специфичности заявляемого способа и прототипа с использованием питательной среды «Pseudomonas APS» показало их равную диагностическую чувствительноть (из 200 проб клинического материала выделена синегнойная палочка в 16 пробах) и специфичность 100% (не выявлено ложно-положительнных штаммов бактерий P. aeruginosa).
Селективная синтетическая среда заявляемого способа подавляет рост грамположительных бактерий, в том числе аэробных спорообразующих бактерий рода Bacillus, поэтому не требует стерилизации в паровом стерилизаторе.
Claims (2)
- Способ выделения и идентификации бактерий Pseudomonas aeruginosa, предусматривающий посев исследуемого материала на питательную среду, содержащую источники азота и углерода, NaCl; осалмид (CAS 526-18-1), растворенный в диметилсульфоксиде, агар и дистиллированную воду; инкубирование посевов при 42°С в аэробных условиях в течение 24 ч; определение принадлежности бактерий к виду P. aeruginosa по наличию выросших колоний или газона бактерий, отличающийся тем, что в качестве источника азота и углерода питательная среда содержит L-глютамат натрия и L-пролин, а также имеет дополнительно маннитол, Na2SO4, MgSO4, KН2РO4, K2НРО4 при следующем содержании ингредиентов:
-
L-глютамат натрия 5,0-6,0 г L-пролин 2,0-2,5 г маннитол 5,0-6,0 г осалмид (CAS 526-18-1) 1,0-1,2 г диметилсульфоксид 10-12 мл NaCl 5,0 г Na2SO4 2,0 г MgSO4 0,1 г KH2РO4 0,5 г K2НPO4 2,0 г агар микробиологический 12,0 г вода дистиллированная 1 л рН 7,2±0,2
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017132056A RU2658435C1 (ru) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Способ выделения и идентификации бактерий pseudomonas aeruginosa |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017132056A RU2658435C1 (ru) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Способ выделения и идентификации бактерий pseudomonas aeruginosa |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2658435C1 true RU2658435C1 (ru) | 2018-06-21 |
Family
ID=62713398
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017132056A RU2658435C1 (ru) | 2017-09-12 | 2017-09-12 | Способ выделения и идентификации бактерий pseudomonas aeruginosa |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2658435C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2693892C1 (ru) * | 2019-01-17 | 2019-07-05 | Евгений Петрович Сиволодский | Способ выделения и идентификации бактерий групп pseudomonas putida и pseudomonas fluorescens |
| RU2709136C1 (ru) * | 2019-07-30 | 2019-12-16 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ) | Питательная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2366714C2 (ru) * | 2007-10-01 | 2009-09-10 | Евгений Петрович Сиволодский | СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИНТЕЗА ФЛУОРЕСЦЕИНА БАКТЕРИЯМИ РОДА Pseudomonas |
| RU2373287C1 (ru) * | 2008-04-16 | 2009-11-20 | Евгений Петрович Сиволодский | Способ идентификации бактерий рода pseudomonas |
| RU2530549C1 (ru) * | 2013-05-23 | 2014-10-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) | Селективная питательная среда для выделения псевдомонад, сухая |
-
2017
- 2017-09-12 RU RU2017132056A patent/RU2658435C1/ru active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2366714C2 (ru) * | 2007-10-01 | 2009-09-10 | Евгений Петрович Сиволодский | СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИНТЕЗА ФЛУОРЕСЦЕИНА БАКТЕРИЯМИ РОДА Pseudomonas |
| RU2373287C1 (ru) * | 2008-04-16 | 2009-11-20 | Евгений Петрович Сиволодский | Способ идентификации бактерий рода pseudomonas |
| RU2530549C1 (ru) * | 2013-05-23 | 2014-10-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии (ФБУН ГНЦ ПМБ) | Селективная питательная среда для выделения псевдомонад, сухая |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| ШЕСТАКОВ А.Г., Усовершенствование методов выделения, идентификации и индикации бактерий Pseudomonas aeruginosa, Автореф. дис. на соискание ученой степени кандидата биологических наук, Саратов, 2010, с. 8-21. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2693892C1 (ru) * | 2019-01-17 | 2019-07-05 | Евгений Петрович Сиволодский | Способ выделения и идентификации бактерий групп pseudomonas putida и pseudomonas fluorescens |
| RU2709136C1 (ru) * | 2019-07-30 | 2019-12-16 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ) | Питательная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2658435C1 (ru) | Способ выделения и идентификации бактерий pseudomonas aeruginosa | |
| RU2660567C1 (ru) | Способ выделения и идентификации бактерий комплекса acinetobacter calcoaceticus - acinetobacter baumannii | |
| RU2416635C2 (ru) | Хромогенная питательная среда для выявления и идентификации клебсиелл | |
| RU2373287C1 (ru) | Способ идентификации бактерий рода pseudomonas | |
| RU2366714C2 (ru) | СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИНТЕЗА ФЛУОРЕСЦЕИНА БАКТЕРИЯМИ РОДА Pseudomonas | |
| RU2787267C1 (ru) | Способ идентификации биовара бактерий acinetobacter baumannii bv. tryptophandestruens | |
| SANDVEN et al. | Improved medium for the transportation of gonococcal specimens | |
| RU2693892C1 (ru) | Способ выделения и идентификации бактерий групп pseudomonas putida и pseudomonas fluorescens | |
| RU2648160C2 (ru) | Питательная среда для выделения бактерий yersinia enterocolitica | |
| RU2484141C1 (ru) | Элективно-дифференциальная питательная среда для выделения холерных вибрионов (варианты) | |
| RU2233885C2 (ru) | Питательная среда для выделения шигелл и сальмонелл | |
| RU2681116C2 (ru) | Питательная среда плотная для хранения микроба чумы | |
| RU2795907C1 (ru) | Селективная питательная среда для выделения аэромонад из водных объектов | |
| RU2715329C1 (ru) | Питательная среда для выделения и идентификации неферментирующих бактерий | |
| RU2535881C1 (ru) | Способ выделения и идентификации бактерий рода klebsiella | |
| RU2267530C2 (ru) | Питательная среда для накопления энтеробактерий | |
| RU2264455C2 (ru) | Питательная среда для селективного накопления yersinia enterocolitica и yersinia pseudotuberculosis | |
| RU2792438C1 (ru) | Селективная питательная среда с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia сухая | |
| RU2251570C2 (ru) | Питательная среда для выделения возбудителей кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза | |
| Pitamber et al. | Production of L-Asparaginase by marine Actinobacteria isolated from the rhizosphere of mangrove plants | |
| RU2733431C2 (ru) | Способ контроля ингибирующих свойств в отношении бактериальной флоры питательной среды для выделения бруцелл | |
| RU2351655C1 (ru) | Способ определения антагонистической активности пробиотиков на основе лиофилизированной биомассы аэробных бактерий по отношению к патогенным микобактериям | |
| RU2722071C1 (ru) | Питательная среда для культивирования Bacillus subtilis ВКПМ В-12079 | |
| Kadhum et al. | Isolation and identification of protease Producer bacterial isolated from diabetic foot ulcer | |
| RU2266956C2 (ru) | Питательная среда для выделения бруцелл |