RU2264455C2 - Питательная среда для селективного накопления yersinia enterocolitica и yersinia pseudotuberculosis - Google Patents
Питательная среда для селективного накопления yersinia enterocolitica и yersinia pseudotuberculosis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2264455C2 RU2264455C2 RU2004102194/13A RU2004102194A RU2264455C2 RU 2264455 C2 RU2264455 C2 RU 2264455C2 RU 2004102194/13 A RU2004102194/13 A RU 2004102194/13A RU 2004102194 A RU2004102194 A RU 2004102194A RU 2264455 C2 RU2264455 C2 RU 2264455C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- yersinia
- broth
- pseudotuberculosis
- enterocolitica
- medium
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в микробиологии, в частности, для диагностики иерсиниоза и псевдотуберкулеза. Питательная среда содержит дистиллированную водку, пептон, дрожжевой экстракт, натрия хлорид, иргасан. Изобретение позволяет улучшить селективность питательной среды, сократить срок накопления иерсений. 1 табл.
Description
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для диагностики иерсиниоза и псевдотуберкулеза путем выделения энтеропатогенных иерсиний из клинического материала и объектов внешней среды.
Известно использование для накопления бактерий Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis буферно-казеиново-дрожжевой (БКД) среды [1]. Недостатками указанной среды являются низкие селективные свойства и длительное время накопления энтеропатогенных иерсиний.
Целью настоящего изобретения является улучшение селективности среды и сокращение срока накопления иерсиний в материале.
Поставленная цель достигается тем, что для приготовления И-бульона используют пептон, дрожжевой экстракт, натрия хлорид, иргасан и дистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, г/л:
пептон | 9,0-11,0 |
дрожжевой экстракт | 4,9-5,1 |
натрия хлорид | 19,0-21,0 |
иргасан | 0,0039-0,0040 |
дистиллированная вода | остальное |
Все компоненты среды, за исключением иргасана, растворяют в дистиллированной воде и доводят значение рН до 7,4±0,2. Среду стерилизуют в автоклаве при температуре 120-122°С в течение 14-16 минут. Иргасан растворяют в асептических условиях при помешивании в 1,5-2,5 мл стерильной дистиллированной воды при температуре 45-50°С. После стерилизации в остывшую до 45-50°С основу вносят раствор иргасана и тщательно перемешивают. Готовую среду разливают в стерильные пробирки.
Посев материала в среду производят общепринятыми методами. Учет производят после 24-48 часов инкубации при температуре 32°С. Культура иерсиний вырастает в виде равномерного помутнения среды.
Для сравнения со средой БКД в серии экспериментов у И-бульона определяли чувствительность, селективные свойства, морфолого-физиологические признаки выделенных на этой среде иерсиний.
Для определения чувствительности сред производили смыв ночных культур иерсиний со скошенного питательного агара и стандартизировали полученную суспензию до 10 единиц по ОСО 42-28-59-85 и готовили ее десятикратные разведения. По 0,1 мл взвеси из разведении 10-5, 10-6, 10-7 и 10-8 засевали в пробирки с испытуемыми средами (по 3 пробирки). Пробирки с И-бульоном инкубировали при 32°С, со средой БКД - при 5°С, время инкубации в обоих случаях составило 24 ч. Чувствительность сред определяли по наибольшему разведению, обеспечивающему видимый рост во всех пробирках с испытуемой средой. Установлено, что по изучаемому показателю И-бульон не отличается от среды БКД (показатель чувствительности составил 10-7).
Селективные свойства сред оценивали путем посева 0,1 мл микробной взвеси ночных агаровых культур, содержащих 1000 колониеобразующих единиц иерсиний или возможных ассоциантов в чистой культуре в пробирки с испытуемыми средами. В качестве ассоциантов использовали культуры Providencia rettgeri, Providencia stuartii, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Enterococcus faecalis, Enterobacter cloacae, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Serratia liquefaciens, Serratia marcescens, Salmonella Typhimurium, а в качестве контрольной среды - триптонсоевый агар в общепринятой прописи. Посевы в И-бульоне инкубировали при 32°С, а в среде БКД при 5°С в течение 24 ч. До начала инкубирования и после него содержимое пробирок перемешивали и высевали методом секторных посевов [2] на 3 чашки с TSA, которые инкубировали 24 часа при 37°С. Показатель подавления роста (ППР) определяли как отношение концентраций микроорганизмов в испытуемых средах (КОЕ/мл) в конце и начале инкубирования. Результаты приведены в таблице.
Показатели подавления роста (ППР) сред через 24 ч инкубирования | ||
Тест-штаммы | Величина ППР испытанных сред | |
Предложенная среда | Ближайший аналог | |
У. enterocolitica серовара 03 | 100000 | 5 |
У. enterocolitica серовара 09 | 100000 | 5 |
У. pseudoluberculosis | 100000 | 5 |
Р. rettgeri | 0 | 1 |
Р. stuartii | 0 | 1 |
К. oxytoca | 0 | 3 |
К. pneumoniae | 0 | 1 |
S. aureus | 0 | 1 |
Е. coli | 0 | 1 |
Е. faecalis | 0 | 3 |
Е. cloacae | 0 | 1 |
Р. aeruginosa | 100000 | 1 |
Р. mirabilis | 0 | 1 |
Р. vulgaris | 0 | 1 |
S. liquefaciens | 10 | 3 |
S. marcescens | 10 | 3 |
S. typhimurium | 0 | 1 |
Морфологические, тинкториальные, физиолого-биохимические и антигенные свойства иерсиний, выросших в И-бульоне, соответствовали таковым после культивирования на среде сравнения - БКД.
Пример.
В фекалии здоровых людей, помещенные в И-бульон, вносят культуру штамма ГИСК188 Y. enterocolitica 03 (1000 КОЕ/мл). Посевы инкубируют при 32°С в течение 24 ч. Из пробирок делают высевы на чашки с И-агаром, которые затем инкубируют 48 ч при 32°С. Выделенные на них культуры иерсиний подвергают реидентификации по физиолого-биохимическим и антигенным свойствам. После 24 ч инкубации иерсинии обнаружены в 34 пробах из 36 (94,4%).
Таким образом, по сравнению с ближайшим аналогом, И-бульон имеет улучшенные селективные характеристики и позволяет проводить накопление энтеропатогенных иерсинии в более сжатые сроки.
Источники информации
1. Ценева Г.Я. Жидкая питательная среда для выделения иерсинии / Г.Я.Ценева, Ф.Г.Дятлов, М.С.Идина // Лаб. дело. - 1990. - №5. - С.66-68.
2. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник / Под. ред. В.В.Меньшикова. - М.: Медицина, 1987. - С.316-317.
Claims (1)
- Питательная среда для селективного накопления Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis, содержащая пептон, дрожжевой экстракт, натрия хлорид, иргасан и дистиллированную воду при следующем соотношении компонентов, г/л:
Пептон 9,0-11,0 Дрожжевой экстракт 4,9-5,1 Натрия хлорид 19,0-21,0 Иргасан 0,0039-0,0040 Дистиллированная вода Остальное
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004102194/13A RU2264455C2 (ru) | 2004-01-28 | 2004-01-28 | Питательная среда для селективного накопления yersinia enterocolitica и yersinia pseudotuberculosis |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2004102194/13A RU2264455C2 (ru) | 2004-01-28 | 2004-01-28 | Питательная среда для селективного накопления yersinia enterocolitica и yersinia pseudotuberculosis |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004102194A RU2004102194A (ru) | 2005-07-10 |
RU2264455C2 true RU2264455C2 (ru) | 2005-11-20 |
Family
ID=35837712
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004102194/13A RU2264455C2 (ru) | 2004-01-28 | 2004-01-28 | Питательная среда для селективного накопления yersinia enterocolitica и yersinia pseudotuberculosis |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2264455C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2648160C2 (ru) * | 2016-06-29 | 2018-03-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение"Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии" (ФГБНУ "ВНИИВСГЭ") | Питательная среда для выделения бактерий yersinia enterocolitica |
-
2004
- 2004-01-28 RU RU2004102194/13A patent/RU2264455C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
СИДОРОВ М.А., СКОРОДУМОВ Д.И, ФЕДОТОВ В.Б. Справочник. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. - М.: Колос, 1995, с.183. * |
ЦЕНЕВА Г.Я. и др. Жидкая питательная среда для выделения иерсиний. Лаб. дело. Медицина, 1990, т. №5, с.66-68. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2648160C2 (ru) * | 2016-06-29 | 2018-03-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение"Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии" (ФГБНУ "ВНИИВСГЭ") | Питательная среда для выделения бактерий yersinia enterocolitica |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2004102194A (ru) | 2005-07-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Paul | Culture media | |
RU2264455C2 (ru) | Питательная среда для селективного накопления yersinia enterocolitica и yersinia pseudotuberculosis | |
RU2681285C1 (ru) | ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ПЛОТНАЯ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БРУЦЕЛЛ ВИДА Brucella neotomae | |
RU2658435C1 (ru) | Способ выделения и идентификации бактерий pseudomonas aeruginosa | |
Domingue et al. | The possible role of microbial L-forms in pyelonephritis | |
JP2010075145A (ja) | 一般生菌数測定用培地 | |
RU2416635C2 (ru) | Хромогенная питательная среда для выявления и идентификации клебсиелл | |
RU2213779C2 (ru) | Питательная среда для выделения лактобактерий | |
RU2648160C2 (ru) | Питательная среда для выделения бактерий yersinia enterocolitica | |
RU2265654C2 (ru) | Питательная среда для выделения гемокультур | |
RU2251570C2 (ru) | Питательная среда для выделения возбудителей кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза | |
RU2266956C2 (ru) | Питательная среда для выделения бруцелл | |
RU2800127C1 (ru) | Питательная среда для культивирования микроорганизмов | |
RU2722071C1 (ru) | Питательная среда для культивирования Bacillus subtilis ВКПМ В-12079 | |
Ohyama | On the antibacterial action and mechanism of nitrofuran derivatives | |
RU2201965C2 (ru) | Питательная среда для выделения bacillus cereus | |
RU2103367C1 (ru) | Плотная диагностическая питательная среда и способ ее получения | |
RU2767782C1 (ru) | Питательная среда для получения биомассы листерий | |
SU1606535A1 (ru) | Транспортна среда дл СоRYNевастеRIUм DIрнтнеRIае | |
RU2818369C1 (ru) | Способ оценки сохранения жизнеспособности лактобактерий при воздействии различных концентраций антисептика | |
RU2265056C2 (ru) | Селективная питательная среда для выделения клебсиелл | |
RU2709136C1 (ru) | Питательная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa | |
SU1652345A1 (ru) | Питательна среда дл выделени энтерококков | |
RU2681116C2 (ru) | Питательная среда плотная для хранения микроба чумы | |
RU2792438C1 (ru) | Селективная питательная среда с маннитом, желчью и полимиксином для выявления бактерий родов Proteus, Morganella, Providencia сухая |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080129 |