RU2635109C2 - Ксантиновое производное - Google Patents

Ксантиновое производное Download PDF

Info

Publication number
RU2635109C2
RU2635109C2 RU2015101339A RU2015101339A RU2635109C2 RU 2635109 C2 RU2635109 C2 RU 2635109C2 RU 2015101339 A RU2015101339 A RU 2015101339A RU 2015101339 A RU2015101339 A RU 2015101339A RU 2635109 C2 RU2635109 C2 RU 2635109C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
acid
methyl
compound
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
Prior art date
Application number
RU2015101339A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2015101339A (ru
Inventor
Ин Ван
Юнчжэ СЯН
Годун ЦЭНЬ
Лун ХУАН
Цзян ЛЮ
Нин Чжоу
Цзибин ЧЖАН
Original Assignee
Чэнду Истон Биофармасьютикалс Ко., Лтд.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Чэнду Истон Биофармасьютикалс Ко., Лтд. filed Critical Чэнду Истон Биофармасьютикалс Ко., Лтд.
Publication of RU2015101339A publication Critical patent/RU2015101339A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2635109C2 publication Critical patent/RU2635109C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/04—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two oxygen atoms
    • C07D473/06—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two oxygen atoms with radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached in position 1 or 3
    • C07D473/08—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two oxygen atoms with radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached in position 1 or 3 with methyl radicals in positions 1 and 3, e.g. theophylline
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/04—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/02—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6
    • C07D473/04—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two oxygen atoms
    • C07D473/06—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with oxygen, sulphur, or nitrogen atoms directly attached in positions 2 and 6 two oxygen atoms with radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached in position 1 or 3

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение относится к соединениям, представленным общей формулой I, или их фармацевтически приемлемым солям, которые могут найти применение при лечении заболеваний, связанных с дипептидилпептидазой IV. В формуле I R1 выбран из атома водорода, атома фтора, атома хлора, атома брома, атома йода или цианогруппы. Изобретение относится также к способу получения указанных соединений и их применению при получении лекарственного препарата для лечения заболеваний, связанных с дипептидилпептидазой IV. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 4 табл., 8 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к области фармацевтической химии, в частности, к классу замещенных ксантиновых производных, способу его получения и его применению в качестве терапевтических средств, в частности, в качестве ингибиторов дипептидилпептидазы IV (DPP-IV).
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Диабет представляет собой заболевание обмена веществ, вызываемое многими причинами, которое характеризуется хроническим высоким уровнем глюкозы в крови, сопровождающееся нарушением обмена Сахаров, жиров и белков, вызванным недостатком секреции и/или действия инсулина. Диабет также является давно существующим заболеванием, которое вследствие относительного или абсолютного недостатка инсулина в организме человека вызывает повышенную концентрацию глюкозы в крови, что приводит к выделению сахара в больших количествах с мочой, и сопровождается патологически усиленной жаждой, полиурией, полифагией, потерей веса, головокружением, утомляемостью и другими симптомами.
При лечении диабета лечебная физкультура и диетотерапия являются двумя основными методами лечения диабета. Если эти два метода лечения не являются эффективными для контроля болезненного состояния, могут применяться инсулин или пероральные гипогликемические средства. Однако, поскольку данные существующие гипогликемические средства обладают слишком большим количеством побочных эффектов, особо важным является разработка нового лекарственного средства с меньшим количеством побочных эффектов и большим количеством терапевтических эффектов при лечении диабета.
Дипептидилпептидаза IV (DPP-IV) представляет собой сериновую протеазу, которая может избирательно расщеплять N-концевой дипептид пептидной цепи, содержащий один остаток пролина в предпоследнем положении от N-конца. Несмотря на то что физиологический эффект DPP-IV у млекопитающих не был полностью подтвержден, он играет важную роль в нейропептидном обмене, активации Т-клетки, адгезии раковых клеток и эндотелия, процессе вхождения ВИЧ в лимфоциты и других процессах (см. WO 98/19998).
Исследования показали, что DPP-IV может привести к снижению глюкагоноподобного пептида (GLP-1), т.е., путем расщепления дипептида на основе гистидин-аланин на N-конце GLP-1, при этом GLP-1 в его активной форме может разлагаться до неактивного амида GLP-1-(7-36), который дополнительно разлагается до неактивного амида GLP-1-(9-36) (см. Hansen L, Deacon CF, Orskov С, et al, Endocrinology, 1999, 140: 5356-5363). В физиологических условиях период полувыведения исходного GLP-1 в кровоток является очень коротким, а неактивные метаболиты, полученные после распада GLP-1 посредством DPP-IV, могут связываться с рецептором GLP-1 с порождением антагонизма GLP-1 с тем, чтобы сократить физиологические реакции рецептора GLP 1 на GLP-1, при этом ингибиторы DPP-IV могут полностью защитить эндогенный и даже экзогенный GLP-1 от инактивации посредством DPP-IV, и таким образом могут значительно повышать физиологическую активность GLP-1 (в 5-10 раз). GLP-1 является важным стимулирующим веществом для секреции панкреатического инсулина и может непосредственно влиять на распределение глюкозы, следовательно, ингибиторы DPP-IV играют очень положительную роль при лечении пациентов с инсулиннезависимым диабетом (US 6110949).
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к замещенным ксантиновым производным, а также к способу их получения и их медицинскому применению, в частности, к замещенным ксантиновым производным, представленным общей формулой (I), или их фармацевтически приемлемой соли, а также к их применению при получении лекарственного препарата для лечения заболеваний, связанных с DPP-IV. Более конкретно, указанное применение заключается в получении лекарственного препарата для лечения диабета II типа или заболеваний, связанных с нарушением толерантности к глюкозе. Одной из целей настоящего изобретения является обеспечение замещенного ксантинового производного, характеризующегося структурой, представленной следующей общей формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли,
Figure 00000001
где R1 выбран из атома водорода, атома фтора, атома хлора, атома брома, атома йода или цианогруппы.
При этом R1 предпочтительно представляет собой заместитель в положении 5 (1,3-бензотиазол-2-ил)метила и R1 дополнительно предпочтительно выбран из атома водорода, атома фтора или атома хлора.
Замещенное ксантиновое производное по настоящему изобретению предпочтительно характеризуется структурой, представленной следующей общей формулой (II),
Figure 00000002
При этом R1 выбран из атома водорода, атома фтора или атома хлора.
Наиболее предпочтительно замещенное ксантиновое производное по настоящему изобретению представляет собой следующее соединение,
Figure 00000003
,
Figure 00000004
или
Figure 00000005
.
Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению представляют собой соли, образованные соединениями по настоящему изобретению и кислотами, выбранными из следующих: соляной кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, винной кислоты, малеиновой кислоты, молочной кислоты, метансульфоновой кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, лимонной кислоты, уксусной кислоты или трифторуксусной кислоты; при этом предпочтительно кислота представляет собой соляную кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, трифторуксусную кислоту или винную кислоту.
Более конкретно, замещенные ксантиновые производные по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли представляют собой:
1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидии-1-ил]-ксантин;
1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантин;
1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантин;
1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорид;
1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидип-1-ил]-ксантина гидрохлорид.
Другой целью настоящего изобретения является обеспечение способа получения указанных выше замещенных ксантиновых производных или их фармацевтически приемлемой соли, включающего следующие стадии.
Figure 00000006
При комнатной температуре (10~25°C) осуществляют реакцию исходного сырьевого материала а с сырьевым материалом А; образованное промежуточное соединение b дополнительно подвергают реакции замещения с сырьевым материалом В с образованием промежуточного соединения с; промежуточное соединение с и (R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин подвергают реакции при условии нагревания (50~100°C) с образованием промежуточного соединения d; промежуточное соединение d подвергают снятию защитной группы в кислых условиях с получением целевого соединения I в форме свободного основания и необязательно целевое соединение 1 дополнительно подвергают реакции с кислотой с получением соответствующей соли е.
При этом в сырьевом материале А X1 представляет собой уходящую группу, причем указанный X1 предпочтительно представляет собой Cl, Br или I; при этом в сырьевом материале В X2 представляет собой уходящую группу, причем указанный X2 предпочтительно представляет собой Cl, Br или I; при этом кислота, применяемая для удаления защитной группы Вое предпочтительно представляет собой соляную кислоту или трифторуксусную кислоту.
Другой целью настоящего изобретения является обеспечение применения описанных выше замещенных ксантиновых производных или их фармацевтически приемлемой соли в качестве терапевтического средства, в частности, в качестве активного ингибитора DPP-IV в области медицины.
Конкретно настоящее изобретение относится к применению указанных выше замещенных ксантиновых производных или их фармацевтически приемлемой соли при получении лекарственного препарата для лечения заболеваний, связанных с DPP-IV. Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению указанных выше замещенных ксантиновых производных или их фармацевтически приемлемой соли при получении лекарственного препарата для лечения диабета II типа или заболеваний, связанных с нарушением толерантности к глюкозе.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение будет описано более подробно с помощью примеров, но описание не предназначено для ограничения объема правовой охраны настоящего изобретения, поскольку какой-либо эквивалент в данной области в соответствии с раскрытием настоящего изобретения входит в объем настоящего изобретения.
Структуры соединений подтверждены с помощью масс-спектрометрии (MS) или с помощью ядерно-магнитного резонанса (1Н ЯМР). Смещение (5) ядерно-магнитного резонанса (1Н ЯМР) приведено в единице частей на миллион (ppm); измерение с помощью ядерно-магнитного резонанса (1Н ЯМР) проводят на ЯМР-анализаторе Bruker AVANCE-300, при этом растворитель для измерения представляет собой гексадейтерированный диметилсульфоксид (DMSO-d6), а внутренний стандарт представляет собой тетраметилсилан (TMS).
Измерение с помощью масс-спектрометрии (MS) проводят на масс-спектрометре FINNIGAN LCQAd (ESI) (производитель: Therm, тип: Finnigan LCQ advantage MAX).
Значения IC50 определяют посредством En Vision (PerkinElmer Corporation).
Пластины силикагеля Yantai Huanghai HSGF254 или Qingdao GF254 применяются в качестве тонкого слоя силикагеля.
Если не указано иное, реакции, указанные в настоящем изобретении, проводят в атмосфере азота.
В настоящем изобретении выражение "атмосфера азота" относится, например, к соединению реакционной колбы с баллоном с азотом с объемом в 1 л.
Если не указано иное, растворы, указанные в реакции в соответствии с настоящим изобретением, относятся к водным растворам.
В настоящем изобретении выражение "комнатная температура" относится к температуре от 10°C до 25°C.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к замещенным ксантиновым производным, характеризующимся структурой, представленной общей формулой (I), или их фармацевтически приемлемой соли,
Figure 00000007
,
где R1 выбран из атома водорода, атома фтора, атома хлора, атома брома, атома йода или цианогруппы, при этом R1 предпочтительно находится в положении 5 (1,3-бензотиазол-2- ил)метила, причем R1 дополнительно предпочтительно выбран из атома водорода, атома фтора или атома хлора.
В предпочтительном варианте осуществления упомянутые выше фармацевтически приемлемые соли образованы замещенными ксантиновым производным по настоящему изобретению и одной или несколькими кислотами, выбранными из следующих: соляной кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, винной кислоты, малеиновой кислоты, молочной кислоты, метансульфоновой кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, лимонной кислоты, уксусной кислоты или трифторуксусной кислоты. Более предпочтительно кислота выбрана из соляной кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, трифторуксусной кислоты, винной кислоты или их смесей.
В дополнительном предпочтительном варианте осуществления замещенное ксантиновое производное по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемая соль выбраны из:
Figure 00000008
,
Figure 00000009
,
Figure 00000010
,
Figure 00000011
или
Figure 00000012
.
В другом варианте осуществления, настоящее изобретение относится к способу получения замещенных ксантиновых производных, характеризующихся структурой, представленной следующей общей формулой (I), или их фармацевтически приемлемой соли, при этом способ включает следующие стадии:
Figure 00000013
(1) при комнатной температуре в течение ночи осуществляют реакцию сырьевого материала а с сырьевым материалом А в N,N-диметилформамиде; после завершения реакции, полученный реакционный раствор выливают в воду, фильтруют с отсасыванием, промывают водой и высушивают с получением промежуточного соединения b; где X1 в сырьевом материале А представляет собой уходящую группу, при этом указанный X1 предпочтительно представляет собой Cl, Br или I;
(2) полученное промежуточное соединение b подвергают реакции в течение ночи с сырьевым материалом В и основанием в N,N-диметилформамиде при комнатной температуре; после завершения реакции полученную реакционную смесь выливают в воду, фильтруют с отсасыванием, промывают водой и сушат с получением промежуточного соединения с; где X2 в сырьевом материале В представляет собой уходящую группу, причем указанный X2 предпочтительно представляет собой Cl, Br или I; при этом основание предпочтительно представляет собой карбонат калия, карбонат натрия, гидроксид натрия или гидрид натрия;
(3) полученное промежуточное соединение с подвергают реакции с (R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидином и основанием в N,N-диметилформамиде при условиях нагревания (50~100°C) в течение 2~8 ч; после реакции раствор охлаждают до комнатной температуры, полученный реакционный раствор выливают в воду, фильтруют с отсасыванием, промывают водой и сушат с получением промежуточного соединения d;
при этом основание предпочтительно представляет собой карбонат калия, карбонат натрия, гидроксид натрия или гидрид натрия;
(4) полученное промежуточное соединение d подвергают реакции с кислотой в органическом растворителе при комнатной температуре в течение 2~10 ч; после завершения реакции рН остаточного раствора регулируют до 7-8 водным раствором карбоната калия и затем экстрагируют органическим растворителем; полученную органическую фазу высушивают, фильтруют и концентрируют с получением неочищенного продукта; неочищенный продукт дополнительно очищают посредством хроматографии с получением целевого соединения I; при этом кислота, применяемая для удаления защитной группы Воc предпочтительно представляет собой соляную кислоту или трифторуксусную кислоту; использованный органический растворитель предпочтительно представляет собой дихлорметан, хлороформ, этилацетат или тетрагидрофуран; и
необязательно (5) полученное целевое соединение I подвергают реакции с раствором кислоты в органическим растворителе и перемешивают в течение соответствующего времени; затем растворитель выпаривают и остаток промывают и высушивают с получением соответствующей соли е; при этом использованный органический растворитель предпочтительно представляет собой дихлорметан, хлороформ, этилацетат или тетрагидрофуран.
В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению указанных выше замещенных ксантиновых производных или их фармацевтически приемлемой соли при получении лекарственного препарата для лечения заболеваний, связанных с DPP-IV.
В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению указанных выше замещенных ксантиновых производных или их фармацевтически приемлемой соли при получении лекарственного препарата для лечения диабета 11 типа или заболеваний, связанных с нарушением толерантности к глюкозе.
ПРИМЕРЫ
Пример 1. Получение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина
Figure 00000014
Схема получения показана ниже.
Figure 00000015
Стадия 1. Получение 3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бромксантина
При использовании хорошо известного способа 8-бром-3-метил-ксантин (5 г, 20,4 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (30 мл). Добавляли N,N-диизопропилэтиламин (2,633 г, 20,4 ммоль) и 1-бром-2-бутин (2,714 г, 20,4 ммоль) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции в течение ночи при комнатной температуре и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь выливали в воду, фильтровали с отсасыванием и полученное твердое вещество промывали водой три раза, высушивали с получением 3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантина 1а (5,15 г, светло-желтое твердое вещество), выход: 85%.
MS масса/заряд (ES): 297, 299 [М+1].
Стадия 2. Получение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бромксантина
При использовании хорошо известного способа 3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бромксантин 1а (156 мг, 0,53 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл). Добавляли 2-бромметил-5-фтор-1,3-бензотиазол (140 мг, 0,57 ммоль), карбонат калия (118 мг, 0,79 ммоль) с получением реакционной смеси. Полученную реакционную смесь подвергали реакции в течение ночи при комнатной температуре и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь выливали в воду, фильтровали с отсасыванием и полученное твердое вещество промывали водой, высушивали с получением 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бромксантина 1b (240 мг, грязно-белое твердое вещество), выход: 99%.
MS масса/заряд (ES): 462, 464 [М+1].
Стадия 3. Получение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантина
При использовании хорошо известного способа 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бромксантин 1b (240 мг, 0,51 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (5 мл). Добавляли (R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин (130 мг, 0,66 ммоль) и карбонат калия (107 мг, 0,78 ммоль) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции при 75°C в течение 2 часов и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Охлажденный реакционный раствор выливали в холодную воду, фильтровали с отсасыванием и полученное твердое вещество промывали водой, высушивали с получением 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидии-1-ил]-ксантина 1с (230 мг, желтое твердое вещество), выход: 77,6%.
MS масса/заряд (ES): 582 [М+1].
Стадия 4. Получение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина
Соединение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантин 1с (230 мг, 0.396 ммоль) растворяли в дихлорметане (5 мл). Трифторуксусную кислоту (0,7 мл) добавляли по каплям при комнатной температуре с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение 2 часов и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученный реакционный раствор концентрировали с использованием роторного испарителя при 30°C для удаления трифторуксусной кислоты. Остаток растворяли в дихлорметане (5 мл) и водный раствор карбоната калия с рН=10 применяли для регуляции рН до 7-8 для получения смешанного раствора. Смешанный раствор экстрагировали дихлорметаном и полученную органическую фазу высушивали над безводным сульфатом магния, а затем фильтровали и концентрировали. Остаток отделяли и очищали посредством тонкослойной хроматографии (дихлорметан : метанол = 10:1 в качестве элюирующей системы) с получением соединения 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина 1 (153 мг, желтое твердое вещество), выход: 80%.
MS масса/заряд (ES): 482 [М+1].
1Н ЯМР (300 МГц, DMSO) δ 8,16-8,03 (m, 1Н), 7,87-7,74 (m, 1H), 7,42-7,26 (m, 1H), 5,45 (s, 2Н), 4,93 (s, 2Н), 3,74-3,53 (m, 2Н), 3,41 (s, 3Н), 3,14-2,95 (m, 2Н), 2,95-2,80 (m, 1H), 1,98-1,73 (m, 5Н), 1,72-1,53 (m, 1H), 1,44-1,24 (m, 1Н).
Пример 2. Получение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина
Figure 00000016
Схема получения показана ниже.
Figure 00000017
Стадию 1 проводили таким же образом, как и стадию 1 в примере 1.
Стадия 2. Получение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бромксантина
При использовании хорошо известного способа 3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантин 1а (327 мг, 1 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (5 мл). Добавляли карбонат калия (221 мг, 1.6 ммоль) и 2-бромметил-1,3-бензотиазол (228 мг, 1 ммоль) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции в течение ночи при комнатной температуре и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь выливали в воду, фильтровали с отсасыванием и полученное твердое вещество промывали водой, высушивали с получением 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантина 2b (400 мг, желтое твердое вещество), выход: 90%.
MS масса/заряд (ES): 444, 446 [М+1].
Стадия 3. Получение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ид)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантина
При использовании хорошо известного способа 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантин 2b (400 мг, 0,9 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (6 мл). Добавляли (R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин (180 мг, 0,9 ммоль) и карбонат калия (186,5 мг, 1,35 ммоль) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции при 75°C в течение 2 часов и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Охлажденный реакционный раствор выливали в воду, фильтровали с отсасыванием и полученное твердое вещество промывали водой, высушивали с получением 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантина 2 с (460 мг, желтое твердое вещество), выход: 90,8%.
MS масса/заряд (ES): 564 [М+1].
Стадия 4. Получение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина
При использовании хорошо известного способа соединение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантин 2 с (460 мг, 0,82 ммоль) растворяли в дихлорметане (8 мл). Трифторуксусную кислоту (0,8 мл) добавляли по каплям при комнатной температуре с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение 2 часов и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь концентрировали с использованием роторного испарителя при 30°C для удаления трифторуксусной кислоты. Остаток растворяли в дихлорметане (5 мл) и водный раствор карбоната калия с рН=10 применяли для регуляции рН до 7-8 для получения смешанного раствора. Смешанный раствор экстрагировали дихлорметаном и полученную органическую фазу высушивали над безводным сульфатом магния, а затем фильтровали и концентрировали. Остаток отделяли и очищали посредством тонкослойной хроматографии (дихлорметан: метанол = 10:1 в качестве элюирующей системы) с получением соединения 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина 2 (210 мг, желтое твердое вещество), выход: 55,4%.
MS масса/заряд (ES): 464 [М+1].
1Н ЯМР (300 МГц, DMSO) δ 8,04 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,94 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 7,57-7,35 (m, 2Н), 5,45 (s, 2Н), 4,91 (s, 2Н), 3,75-3,55 (m, 2Н), 3,41 (s, 3Н), 3,09-2,93 (m, 1Н), 2,89-2,70 (m, 2Н), 1,92-1,73 (m, 5Н), 1,70-1,53 (m, 1H), 1,32-1,15 (m, 1H).
Схема получения показана ниже.
Пример 3. Получение 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина
Figure 00000018
Схема получения показана ниже.
Figure 00000019
Стадию 1 проводили таким же образом, как и стадию 1 в примере 1.
Стадия 2. Получение 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантина
При использовании хорошо известного способа 3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантин 1а (297 мг, 1 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (8 мл). Добавляли 2-бромметил-5-хлор-1,3-бензотиазол (263 мг, 1 ммоль) и карбонат калия (213 мг, 1,5 ммоль) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции в течение ночи при комнатной температуре и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь выливали в воду, фильтровали с отсасыванием и полученное твердое вещество промывали водой, высушивали с получением 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантина 3b (460 мг, светло-желтое твердое вещество), выход: 96%.
MS масса/заряд (ES): 478, 480 [М+1].
Стадия 3. Получение 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантина
При использовании хорошо известного способа 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-бром-ксантин 3b (460 мг, 0,96 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (12 мл). Добавляли (R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин (193 мг, 0,96 ммоль) и карбонат калия (200 мг, 1,44 ммоль) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции при 75°C в течение 2 часов и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Охлажденный реакционный раствор выливали в холодную воду, фильтровали с отсасыванием и полученное твердое вещество промывали водой, высушивали с получением 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантина 3c (417 мг, серое твердое вещество), выход: 72,6%.
MS масса/заряд (ES): 598 [М+1].
Стадия 4. Получение 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина
При использовании хорошо известного способа 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидин-1-ил]-ксантина 3с (417 мг, 0,7 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл). Трифторуксусную кислоту (1,5 мл) добавляли по каплям при комнатной температуре с получением реакционной смеси. Реакционную смесь подвергали реакции при комнатной температуре в течение 2 часов и применяли TLC для наблюдения за ходом реакции. После завершения реакции полученную реакционную смесь концентрировали с использованием роторного испарителя при 30°C для удаления трифторуксусной кислоты. Остаток растворяли в дихлорметане (5 мл) и водный раствор карбоната калия с рН=10 применяли для регуляции pH до 7-8 для получения смешанного раствора. Смешанный раствор экстрагировали дихлорметаном и полученную органическую фазу высушивали над безводным сульфатом магния, а затем фильтровали и концентрировали. Остаток отделяли и очищали посредством тонкослойной хроматографии (дихлорметан: метанол = 10:1 в качестве элюирующей системы) с получением соединения 1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина 3 (310 мг, светло-желтое твердое вещество), выход: 88,9%.
MS масса/заряд (ES): 498 [М+1].
1Н ЯМР (300 МГц, DMSO) δ 8,17-7,98 (m, 2Н), 7,54-7,42 (m, 1Н), 5,46 (s, 2Н), 5,07-4,80 (m, 2Н), 3,80-3,48 (m, 2Н), 3,41 (s, 3Н), 3,19-2,99 (m, 3Н), 2,02-1,75 (m, 5Н), 1,72-1,59 (m, 1Н), 1,57-1,43 (m, 1Н).
Пример 4. Получение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорида
Figure 00000020
Схема получения показана ниже.
Figure 00000021
Стадию 1 проводили таким же образом, как и стадию 1 в примере 1.
Стадию 2 проводили таким же образом, как и стадию 2 в примере 1.
Стадию 3 проводили таким же образом, как и стадию 3 в примере 1.
Стадию 4 проводили таким же образом, как и стадию 4 в примере 1.
Стадия 5. Получение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорида
Соединение 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутии-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантин 1 (60 мг, 0,124 ммоль) растворяли в дихлорметане (2 мл). Добавляли 0,14 мл раствора хлористого водорода в дихлорметане (1 моль/л) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 минут и растворитель отгоняли. Остаток промывали этилацетатом и высушивали с получением целевого соединения 1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорида 4 (47 мг, желтое твердое вещество), выход: 76%.
1Н ЯМР (300 МГц, DMSO) δ 8,55 (s, 3Н), 8,09 (dd, J=8,6, 5,4 Гц, 1Н), 7,87-7,75 (m, 1H), 7,34 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 5,46 (s, 2Н), 5,14-4,84 (m, 2Н), 3,75 (d, J=11,0 Гц, 1H), 3,50 (d, J=12,3 Гц, 1Н), 3,42 (s, 4H), 3,23 (dd, J=19,4, 10,9 Гц, 2H), 2,14-1,88 (m, 2H), 1,81 (s, 3Н), 1,77-1,62 (m, 2H).
Пример 5. Получение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорида
Figure 00000022
Схема получения показана ниже.
Figure 00000023
Стадию 1 проводили таким же образом, как и стадию 1 в примере 1.
Стадию 2 проводили таким же образом, как и стадию 2 в примере 2.
Стадию 3 проводили таким же образом, как и стадию 3 в примере 2.
Стадию 4 проводили таким же образом, как и стадию 4 в примере 2.
Стадия 5. Получение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорида
Соединение 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантин 2 (100 мг, 0,216 ммоль) растворяли в дихлорметане (3 мл).
Добавляли 0,24 мл раствора хлористого водорода в дихлорметане (1 моль/л) с получением реакционной смеси. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 минут и растворитель отгоняли. Остаток промывали этилацетатом и высушивали с получением целевого соединения 1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-аминопиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорида 5 (85 мг, желтое твердое вещество), выход: 79%.
1Н ЯМР (300 МГц, DMSO) δ 8,47 (s, 3Н), 8,05 (d, J=7,7 Гц, 1H), 7,94 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 7,56-7,34 (m, 2Н), 5,46 (s, 2Н), 5,11-4,84 (m, 2Н), 3,74 (d, J=11,0 Гц, 1H), 3,50 (d, J=11,3 Гц, 1H), 3,42 (s, 4Н), 3,31-3,13 (m, 2Н), 2,12-1,86 (m, 2Н), 1,80 (s, 3Н), 1,76-1,60 (m, 2Н).
Экспериментальный пример 1. Анализ in vitro ингибирующей активности в отношении DPP-IV
1. Цель эксперимента
Ингибирующие способности в отношении дипептидилпептидазы IV (DPP-1V) соединений, полученных в описанных выше примерах, подлежали рассмотрению с целью оценки ингибирующего эффекта соединений, полученных в описанных выше примерах.
2. Экспериментальные материалы
2.1 Дипептидилпептидаза IV (DPP-IV): SIGMA Products, № изделия D4943-1VL.
2.2 Субстрат: раствор Gly-Pro-7-амидо-4-метилкумарина, SIGMA Products, № изделия G2761-25 мг, FW=41,03.
2.3 Буфер для DPP-IV, содержащий 25 ммоль HEPES, 140 ммоль NaCl, 1% BSA, 80 ммоль MgCl2, рН которого регулировали до 8,0.
2.4 Лекарственное средство положительного контроля (линаглиптин): предоставленное Shanghai Yingrui Chemical Technology Co., Ltd., характеристика: 2 г, CAT: YRY0687, LCT №: YR111130, с молекулярной массой 472,54, растворенное в DMSO в виде 10 мМ исходного раствора, разбавленное дистиллированной водой до 10 мкМ в качестве рабочего раствора, с конечной концентрацией 1 мкМ.
2.5 Оборудование для испытаний: En Vision (PerkinElmer Company).
3. Принцип эксперимента
Gly-Pro-7-амидо-4-метилкумарин может быть гидролизован посредством дипептидилпептидазы IV (DPP-IV) при комнатной температуре с образованием 7-амидо-4-метилкумарина, который может излучать флуоресценцию с длиной волны 460 нм при длине волны возбуждения 355 нм. Изменение количества продукта может быть определено посредством изменения интенсивности флуоресценции для отражения уровня активности фермента.
4. Экспериментальный метод
Дипептидилпептидазу IV (DPP-IV), буфер для DPP-IV и образцы для испытаний использовали для получения 200 мкл реакционной смеси, при этом устанавливали холостой контроль (без фермента и образцов) и отрицательный контроль (без образцов) с одинаковым объемом. Реакционную систему и контроли подвергали реакции при комнатной температуре в течение 10 мин, а затем в них добавляли субстрат дипептидилпептидазы IV, соответственно, затем подвергали реакции при комнатной температуре в течение 30 мин. Определяли интенсивность флуоресценции F (длина волны возбуждения 355 нм, длина волны излучения 460 нм). Степень ингибирования рассчитывали в соответствии со значением интенсивности флуоресценции F, при этом степень ингибирования = [1-(Fобразца-Fхолостого контроля)/(F отрицательного контроля-Fхолостого контроля)]⋅100. Если каждый из образцов при разных концентрациях был предварительно представлен в двух повторностях, с образцами со степенью ингибирования более 70% проводили эксперименты на основе метода исключения ошибочно положительных образцов. Относительно образцов, подтвержденных как положительные, определяли значения IC50, при этом каждый образец последовательно разбавляли (в 3 раза) до шести концентраций и для каждой концентрации получали второй образец. В соответствии со степенью ингибирования для расчета IC50 применяли модель вероятности с логистическим распределением с 4 параметрами с помощью программного обеспечения XLfit.
5. Результаты эксперимента
Данные измеренной IC50 каждого соединения по настоящему изобретению в описанных выше примерах были следующими:
Figure 00000024
Из данных анализа in vitro ингибирующей активности в отношении DPP-IV в приведенной выше таблице может быть известно, что по сравнению с лекарственным средством положительного контроля линаглиптином соединения по настоящему изобретению в примерах обладают значительной ингибирующей активностью в отношении DPP-IV.
Экспериментальный пример 2. Влияние на толерантность к глюкозе у нормальных мышей
1. Экспериментальный материал
1.1 Лекарственные средства
Рабочее лекарственное средство: глюкоза,
Figure 00000025
, предоставленное компанией SIGMA, № партии 101021941, характеристики: 100 г/бутылка; исследуемое лекарственное средство: соединение примера 1, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., желтый порошок, № партии: 20120315;
исследуемое лекарственное средство: соединение примера 2, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., желтый порошок, № партии: 20120320;
исследуемое лекарственное средство: соединение примера 3, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., светло-желтый порошок, № партии: 20120323;
исследуемое лекарственное средство: соединение примера 4, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., желтый порошок, № партии: 20120401;
положительный контроль: линаглиптин, предоставленный Shanghai Yingrui Chemical Technology Co., Ltd., характеристики: 2 г, CAT: YRY0687, LCT №: YR111130.
1.2 Экспериментальное оборудование
Электронные весы FA2204B, предоставленные Shanghai Precision Instruments Scientific Instrument Co., Ltd.;
аналитические весы от METTLER-TOLEDO, тип XS-105, предоставленные компанией Mettler-Toledo, Швейцария;
тест-полоски на глюкозу в крови: активные тест-полоски на глюкозу ACCU-CHEK, характеристики: 50 полосок, № партии: 23435532, предоставленные Roche Diagnostics (Шанхай) Co., Ltd;
хирургические ножницы, шприцы и т.д.
1.3 Экспериментальные животные
Мыши КМ, 6-недельного возраста, с весом 18~22 г, половина самцы и половина самки, 60 мышей, предоставленные Chengdu Dashuo Biological Technology Co., Ltd., лицензия на производство: SCXK (Chuan) 2008-24. Животных содержали в помещении для животных после приобретения, адаптивно наблюдали в течение по меньшей мере трех дней и использовали для анализов за исключением случаев, когда они не соответствовали требованиям в отношении стандартов карантина.
2. Экспериментальный метод
2.1 Животных не кормили в течение по меньшей мере 12 часов перед началом анализа.
2.2 Группировка. Измеряли значения уровня глюкозы в крови натощак у мышей, которые не получали пищу, и мышей произвольно группировали согласно таблице 1 с незначительным отличием между группами.
Figure 00000026
2.3 Измерение значения глюкозы в крови
Животным в каждой группе вводили соответствующие исследуемые соединения согласно таблице 1 посредством внутрижелудочного введения (i.g.), затем вводили глюкозу (8 г/кг) соответственно посредством внутрижелудочного введения через 30 мин после введения лекарственных средств и для них измеряли значения глюкозы в крови соответственно через 30 мин, 60 мин и 120 мин после введения глюкозы (с нагрузкой глюкозы).
3. Статистический метод
Для статистических расчетов применяли Excel, экспериментальные данные выражали в виде
Figure 00000027
 и применяли двусторонний t-критерий Стьюдента для статистического сравнения экспериментальных данных среди нескольких групп.
4. Экспериментальные результаты
Figure 00000028
5. Выводы
(1) Как можно увидеть из таблицы 2, при сравнении с контрольной группой через 30 мин, 60 мин и 120 мин после нагрузки глюкозы значения глюкозы в крови в группе прим. 1, группе прим. 2, группе прим. 3, группе прим. 4 и группе положительного контроля есть существенное различие (**Р<0,01), что указывает на то, что все из соединения примера 1, соединения примера 2, соединение примера 3, соединения примера 4 и лекарственного средства положительного контроля (линаглиптин) могут весьма значительно снижать уровни глюкозы в крови;
(2) при сравнении с лекарственным средством положительного контроля (линаглиптином) через 30 мин, 60 мин и 120 мин после нагрузки глюкозы значение глюкозы в крови в группе прим. 1 весьма значительно снижалось (▲▲P<0,01), при этом значение глюкозы в крови в группе прим. 2, что в группе прим. 3 и что в группе прим. 4 значительно снижалось (▲Р<0,05), что указывает на то, что гипогликемические эффекты соединений по настоящему изобретению в примерах являются существенными.
Экспериментальный пример 3. Влияние на глюкозу в крови у мышей со спонтанным сахарным диабетом
1. Экспериментальные материалы
1.1 Лекарственные средства
Рабочее лекарственное средство: глюкоза,
Figure 00000025
, предоставленное компанией SIGMA, № партии 101021941, характеристики: 100 г/бутылка;
исследуемое лекарственное средство: соединение примера 1, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., желтый порошок, № партии: 20120315;
исследуемое лекарственное средство: соединение примера 2, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., желтый порошок, № партии: 20120320;
исследуемое лекарственное средство: соединение примера 3, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., светло-желтый порошок, № партии: 20120323;
исследуемое лекарственное средство: соединение примера 4, предоставленное лабораторией синтеза Chengdu Easton Pharmaceutical Co., Ltd., желтый порошок, № партии: 20120401;
положительный контроль: линаглиптин, предоставленный Shanghai Yingrui Chemical Technology Co., Ltd., характеристики: 2 г, CAT: YRY0687, LCT №: YR111130.
1.2 Экспериментальное оборудование
Электронные весы FA2204B: предоставленные Shanghai Precision Instruments Scientific Instrument Co., Ltd.;
аналитические весы METTLER-toledo, тип XS-105, предоставленные компанией Mettler-Toledo, Швейцария;
тест-полоски на глюкозу в крови: активные тест-полоски на глюкозу ACCU-CHEK, характеристики: 50 полосок, № партии: 23435532, предоставленные Roche Diagnostics (Шанхай) Co., Ltd;
хирургические ножницы, шприцы и т.д.
1.3 Экспериментальные животные
Страдающие ожирением мыши ККАу со спонтанным диабетом 11 типа, 60 мышей, 14-недельного возраста, половина самцы и половина самки, приобретенные в Институте изучения лабораторных животных, Академия медицинских наук Китая (квалификационный номер: SCXK (Jing) 2009-0004). Животных содержали в помещении для животных после приобретения, адаптивно наблюдали в течение по меньшей мере трех дней и использовали для анализов за исключением случаев, когда они не соответствовали требованиям в отношении стандартов карантина.
2. Экспериментальный метод
2.1 Животных не кормили в течение по меньшей мере 12 часов перед началом анализа.
2.2 Значения уровня глюкозы в крови натощак у мышей, которые не получали пищу, измеряли с помощью активных тест-полосок на глюкозу ACCU-CHEK и мышей произвольно группировали согласно таблице 3. Кроме того, для группы холостого контроля использовали мышей C57BL/6J, при этом мышей ККАу со спонтанным диабетом II типа использовали для модельной группы.
Figure 00000029
Figure 00000030
2.3 Измерение значения глюкозы в крови
Животным в каждой группе вводили соответствующие исследуемые соединения согласно таблице 3 посредством внутрижелудочного введения (i.g.), затем вводили глюкозу (8 г/кг) соответственно посредством внутрижелудочного введения через 30 мин после введения лекарственных средств и для них измеряли значения глюкозы в крови соответственно через 30 мин, 60 мин и 120 мин после введения глюкозы (с нагрузкой глюкозы).
3. Статистический метод
Для статистических расчетов применяли Excel, экспериментальные данные выражали в виде
Figure 00000027
и применяли двусторонний t-критерий Стьюдента для статистического сравнения экспериментальных данных среди нескольких групп.
4. Экспериментальные результаты
Figure 00000031
Figure 00000032
5. Вывод
Как можно увидеть из таблицы 4, при сравнении с контрольной группой как значение уровня глюкозы в крови натощак, так и значение глюкозы в крови после нагрузки глюкозы в модельной группе значительно повышались (*Р<0,05, **Р<0,01), что указывает на то, что мышиная модель со спонтанным диабетом была устойчива;
при сравнении с модельной группой через 30 мин, 60 мин и 120 мин после нагрузки глюкозы значения глюкозы в крови в каждой группе введения лекарственного средства значительно снижались (▲▲<0,01), что указывает на то, что все из соединений из примеров 1-4 и лекарственного средства положительного контроля линаглиптина могут весьма значительно снижать уровни глюкозы в крови;
(3) при сравнении с лекарственным средством положительного контроля линаглиптином через 30 мин после нагрузки глюкозы значение глюкозы в крови в группе прим. 1 весьма значительно снижалось (**Р<0,01), при этом значение глюкозы в крови в группе прим. 2, что в группе прим. 3 и что в группе прим. 4 значительно снижалось (*Р<0,05); через 60 мин после нагрузки глюкозы значения глюкозы в крови в каждой группе примера значительно снижались (*Р<0,05), что указывает на то, что гипогликемические эффекты соединений по настоящему изобретению в примерах являются существенными.
Вышеприведенные результаты указывают на то, что соединения по настоящему изобретению в примерах проявляют значительную ингибирующую активность в отношении DPP-IV и гипогликемический эффект.
Специалисту в данной области будет очевидно, что без отступления от сущности и объема настоящего изобретения возможны различные модификации и вариации по отношению к соединениям, композициям и способам получения по настоящему изобретению, следовательно, объем правовой охраны настоящего изобретения охватывает различные модификации и вариации, примененные по отношению к нему, при условии, что модификации и вариации подпадают под действие объема правовой охраны, охватываемого формулой изобретения и ее эквивалентными вариантами осуществления.

Claims (36)

1. Соединение, представленное общей формулой I, или его фармацевтически приемлемая соль
Figure 00000033
,
где R1 выбран из атома водорода, атома фтора, атома хлора, атома брома, атома йода или цианогруппы.
2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где R1 представляет собой заместитель в положении 5 (1,3-бензотиазол-2-ил)метила.
3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1 или 2, где R1 выбран из атома водорода, атома фтора или атома хлора.
4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где соединение выбрано из
Figure 00000034
.
5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где соединение выбрано из
Figure 00000035
.
6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где соединение выбрано из
Figure 00000036
.
7. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где фармацевтически приемлемая соль образована соединением и кислотой, выбранной из соляной кислоты, п-толуолсульфоновой кислоты, винной кислоты, малеиновой кислоты, молочной кислоты, метансульфоновой кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, лимонной кислоты, уксусной кислоты или трифторуксусной кислоты.
8. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.7, где кислота представляет собой п-толуолсульфоновую кислоту, соляную кислоту, винную кислоту или трифторуксусную кислоту.
9. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п.1, где соединение или его фармацевтически приемлемые соли представляют собой:
1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантин;
1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантин;
1-[(5-хлор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантин;
1-[(5-фтор-1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорид или
1-[(1,3-бензотиазол-2-ил)метил]-3-метил-7-(2-бутин-1-ил)-8-[(R)-3-амино-пиперидин-1-ил]-ксантина гидрохлорид.
10. Способ получения соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-9, включающий следующие стадии:
стадия 1: при комнатной температуре (10~25°C) осуществляют реакцию исходного сырьевого материала a с сырьевым материалом A с получением промежуточного соединения b
Figure 00000037
,
при этом в сырьевом материале A X1 представляет собой уходящую группу, причем указанный X1 предпочтительно представляет собой Cl, Br или I;
стадия 2: при комнатной температуре (10~25°C) промежуточное соединение b дополнительно подвергают реакции замещения с сырьевым материалом B с получением промежуточного соединения c
Figure 00000038
,
при этом в сырьевом материале B X2 представляет собой уходящую группу, причем указанный X2 предпочтительно представляет собой Cl, Br или I;
стадия 3: при условии нагревания (50~100°C) осуществляют реакцию полученного промежуточного соединения c с (R)-3-трет-бутоксикарбонил-аминопиперидином с получением промежуточного соединения d
Figure 00000039
,
стадия 4: при комнатной температуре (10~25°C) полученное промежуточное соединение d подвергают снятию защитной группы в кислых условиях с получением целевого соединения I в форме свободного основания
Figure 00000040
,
при этом кислота предпочтительно представляет собой соляную кислоту или трифторуксусную кислоту; и
стадия 5 в качестве необязательной стадии: при комнатной температуре (10~25°C) дополнительно осуществляют реакцию соединения I с кислотой (HA) с получением соответствующей соли e
Figure 00000041
,
при этом кислота предпочтительно представляет собой п-толуолсульфоновую кислоту, соляную кислоту, винную кислоту или трифторуксусную кислоту, и R1 определен в п.1.
11. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1-9 при получении лекарственного препарата для лечения заболеваний, связанных с дипептидилпептидазой IV.
12. Применение по п.11, где применение заключается в получении лекарственного препарата для лечения диабета II типа или заболеваний, связанных с нарушением толерантности к глюкозе.
RU2015101339A 2012-06-20 2013-05-15 Ксантиновое производное RU2635109C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210205678.4 2012-06-20
CN201210205678.4A CN103509023B (zh) 2012-06-20 2012-06-20 黄嘌呤衍生物
PCT/CN2013/075627 WO2013189219A1 (zh) 2012-06-20 2013-05-15 黄嘌呤衍生物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2015101339A RU2015101339A (ru) 2016-08-10
RU2635109C2 true RU2635109C2 (ru) 2017-11-09

Family

ID=49768089

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2015101339A RU2635109C2 (ru) 2012-06-20 2013-05-15 Ксантиновое производное

Country Status (9)

Country Link
US (1) US9255098B2 (ru)
EP (1) EP2865680B1 (ru)
JP (1) JP6080324B2 (ru)
CN (1) CN103509023B (ru)
AU (1) AU2013280099B2 (ru)
CA (1) CA2879850C (ru)
MX (1) MX362848B (ru)
RU (1) RU2635109C2 (ru)
WO (1) WO2013189219A1 (ru)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103936738B (zh) * 2013-01-23 2016-11-23 成都苑东生物制药股份有限公司 黄嘌呤衍生物
CN104292228B (zh) * 2013-07-16 2016-03-30 成都苑东生物制药股份有限公司 一种黄嘌呤化合物的多晶型及其制备方法、用途
WO2021109970A1 (zh) * 2019-12-02 2021-06-10 成都苑东生物制药股份有限公司 一种黄嘌呤衍生物药物组合物及其制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002068420A1 (de) * 2001-02-24 2002-09-06 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Xanthinderivate, deren herstellung und deren verwendung als arzneimittel
WO2004018468A2 (de) * 2002-08-21 2004-03-04 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthine, deren herstellung und deren verwendung als arzneimittel
RU2003103103A (ru) * 2000-07-04 2004-08-20 Ново Нордиск А/С (DK) Гетероциклические соединения, которые являются ингибиторами фермента dpp-iv
US20070197563A1 (en) * 2004-08-06 2007-08-23 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted, bicyclic 8-pyrrolidinoxanthines, and methods for their use as inhibitors of dipeptidyl peptidase

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW492957B (en) 1996-11-07 2002-07-01 Novartis Ag N-substituted 2-cyanopyrrolidnes
US6110949A (en) 1999-06-24 2000-08-29 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-4-cyanothiazolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
US7407955B2 (en) 2002-08-21 2008-08-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co., Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, the preparation thereof and their use as pharmaceutical compositions

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2003103103A (ru) * 2000-07-04 2004-08-20 Ново Нордиск А/С (DK) Гетероциклические соединения, которые являются ингибиторами фермента dpp-iv
WO2002068420A1 (de) * 2001-02-24 2002-09-06 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Xanthinderivate, deren herstellung und deren verwendung als arzneimittel
WO2004018468A2 (de) * 2002-08-21 2004-03-04 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthine, deren herstellung und deren verwendung als arzneimittel
US20070197563A1 (en) * 2004-08-06 2007-08-23 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted, bicyclic 8-pyrrolidinoxanthines, and methods for their use as inhibitors of dipeptidyl peptidase

Also Published As

Publication number Publication date
JP6080324B2 (ja) 2017-02-15
WO2013189219A1 (zh) 2013-12-27
EP2865680A1 (en) 2015-04-29
AU2013280099A1 (en) 2015-01-22
JP2015521605A (ja) 2015-07-30
CA2879850A1 (en) 2013-12-27
MX2015000159A (es) 2015-08-06
US9255098B2 (en) 2016-02-09
CN103509023A (zh) 2014-01-15
AU2013280099B2 (en) 2017-02-16
CA2879850C (en) 2018-09-11
EP2865680A4 (en) 2015-11-25
CN103509023B (zh) 2014-08-27
MX362848B (es) 2019-02-19
RU2015101339A (ru) 2016-08-10
US20150183788A1 (en) 2015-07-02
EP2865680B1 (en) 2016-09-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2321321B1 (en) Triazolo [4, 5-d]pyramidine derivatives and their use as purine receptor antagonists
EP3983384B1 (en) N-(phenyl)-indole-3-sulfonamide derivatives and related compounds as gpr17 modulators for treating cns disorders such as multiple sclerosis
EP1845970B1 (en) Tumor necrosis factor inhibitors
RU2374247C2 (ru) Способ получения антагонистов аденозиновых рецепторов a2b и промежуточные продукты
US20170210727A1 (en) [5,6]-fused bicyclic antidiabetic compounds
WO2019243398A1 (en) Substituted alkoxypyridinyl indolsulfonamides
US9545406B2 (en) Method of treating a CNS injury with a PDE1 inhibitor
AT503591A2 (de) Adenosin a3-rezeptor-modulatoren
KR101857931B1 (ko) 아제티디닐옥시페닐피롤리딘 화합물
JP6587637B2 (ja) カルボキサミド誘導体
US9266859B2 (en) Azetidinyloxyphenylpyrrolidine compounds
KR101012592B1 (ko) Ｐｄｅ5 억제제로서 사용되는피라졸로[4,3-ｄ]피리미딘-5-일 유도체
KR20140123041A (ko) 티에닐[3,2-d]피리미딘-4-온 화합물, 그 제조방법, 약물조성물 및 용도
RU2635109C2 (ru) Ксантиновое производное
AU2018356430A1 (en) Aromatic sulfonamide derivatives for the treatment of Ischemic Stroke
TW202122400A (zh) Jak抑制劑
JP2016539099A (ja) 新規ｓｇｌｔ１阻害剤
CN103509022B (zh) 黄嘌呤衍生物
CN103936737B (zh) 黄嘌呤衍生物
AU2016220315A1 (en) Pyrazole compounds
CN106008507B (zh) 黄嘌呤衍生物
TWI522358B (zh) 四氫咪唑并〔１，５－ａ〕吡衍生物的鹽，其製備方法及其在醫藥上的應用

Legal Events

Date Code Title Description
HZ9A Changing address for correspondence with an applicant