RU2603103C2 - Способ получения фибриногена с использованием сильной анионообменной смолы и содержащий фибриноген продукт - Google Patents
Способ получения фибриногена с использованием сильной анионообменной смолы и содержащий фибриноген продукт Download PDFInfo
- Publication number
- RU2603103C2 RU2603103C2 RU2013118323/10A RU2013118323A RU2603103C2 RU 2603103 C2 RU2603103 C2 RU 2603103C2 RU 2013118323/10 A RU2013118323/10 A RU 2013118323/10A RU 2013118323 A RU2013118323 A RU 2013118323A RU 2603103 C2 RU2603103 C2 RU 2603103C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- fibrinogen
- approximately
- glycine
- exchange resin
- buffer
- Prior art date
Links
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 title claims abstract description 172
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 title claims abstract description 172
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 title claims abstract description 171
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 66
- 239000012609 strong anion exchange resin Substances 0.000 title claims 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 16
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 11
- JWICNZAGYSIBAR-LEEGLKINSA-N (4s)-4-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-aminopropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]acetyl]amino]-5-[[2-[[(2s)-3-carboxy-1-[[(2s)-1-[[1-[[(2s)-1-[[(2s)-4-carboxy-1-[[2-[[2-[[2-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-4-(diaminomethylideneamino Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N)CC1=CC=CC=C1 JWICNZAGYSIBAR-LEEGLKINSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 101800000974 Fibrinopeptide A Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 102400000525 Fibrinopeptide A Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 9
- 108010071289 Factor XIII Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 125000005395 methacrylic acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 6
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 claims abstract description 6
- 229940012444 factor xiii Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims abstract 6
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 claims abstract 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 34
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 28
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 24
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 17
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 17
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 14
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 14
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 claims description 11
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 9
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 8
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 8
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 claims description 7
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims description 6
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 5
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 4
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 3
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims 1
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 abstract description 4
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 abstract description 4
- 150000002734 metacrylic acid derivatives Chemical class 0.000 abstract 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 18
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 11
- 239000000535 fibrinogen concentrate Substances 0.000 description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 10
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 8
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 7
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 7
- 208000002004 Afibrinogenemia Diseases 0.000 description 6
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 5
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 5
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 5
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 5
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 229940105784 coagulation factor xiii Drugs 0.000 description 4
- 201000007182 congenital afibrinogenemia Diseases 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 4
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 3
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 3
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- -1 sulfopropyl functional groups Chemical group 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- XFCMNSHQOZQILR-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2-methylprop-2-enoyloxy)ethoxy]ethyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCOCCOC(=O)C(C)=C XFCMNSHQOZQILR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 108010080379 Fibrin Tissue Adhesive Proteins 0.000 description 2
- 239000012605 Fractogel® EMD TMAE Substances 0.000 description 2
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N [CH2]CN(CC)CC Chemical group [CH2]CN(CC)CC MZVQCMJNVPIDEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 101800003778 Fibrinopeptide B Proteins 0.000 description 1
- 102400001063 Fibrinopeptide B Human genes 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010059484 Haemodilution Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 208000031933 Rare hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 108010031318 Vitronectin Proteins 0.000 description 1
- 102100035140 Vitronectin Human genes 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229910010293 ceramic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 239000012504 chromatography matrix Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000009190 disseminated intravascular coagulation Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- MYRIFIVQGRMHRF-OECXYHNASA-N fibrinopeptide b Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 MYRIFIVQGRMHRF-OECXYHNASA-N 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- VOZRXNHHFUQHIL-UHFFFAOYSA-N glycidyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCC1CO1 VOZRXNHHFUQHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000001597 immobilized metal affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000011866 long-term treatment Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000951 phenoxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(O*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 208000008864 scrapie Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000003106 tissue adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/36—Extraction; Separation; Purification by a combination of two or more processes of different types
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/75—Fibrinogen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- A61K38/363—Fibrinogen
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены способ очистки фибриногена, содержащий фибриноген продукт и применение анионообменной смолы, содержащей гидроксилированный метакриловый полимер с привитыми через связывающую группу триметиламиногруппами, для получения указанного продукта указанным способом. Подвергают содержащий фибриноген источник хроматографии на анионообменной смоле на основе гидроксилированного метакрилового полимера с привитыми через связывающую группу триметиламиногруппами. Получают содержащий фибриноген продукт с высокой степенью чистоты без содержания вирусов и прионов с содержанием фибронектина 0,01-1,00 мкг/мг фибриногена, фибринопептида А 0,01-9,0 нг/мг фибриногена, с активностью vWF:Ag менее 0,1 МЕ/мг фибриногена, с активностью фактора XIII 0,07-1,0 МЕ/мг фибриногена и с активностью тромбина менее 0,007 МЕ/мг фибриногена. 3 н. и 15 з.п. ф-лы, 5 табл.
Description
Уровень техники, к которому относится изобретение
Фибриноген, также известный как фактор свертывания крови I, играет ключевую роль в гемостазе и заживлении ран. Он является гликопротеином, синтезируемом в печени, с приблизительной молекулярной массой 340000 Да, состоит из двух димеров, каждый из которых составляют три пары неидентичных полипептидных цепей, называемых Aα, Bβ и γ, связанных дисульфидными мостиками. Он циркулирует в кровотоке в концентрации приблизительно 150-400 мкг/мл. При повреждении кровеносных сосудов активируются тромбоциты и образуется тромб. Фибриноген участвует в первичном гемостазе, способствуя связыванию активированных тромбоцитов.
Параллельно начинается активация каскада свертывания крови. На завершающем этапе фибриноген преобразуется в фибрин путем протеолитического высвобождения тромбином фибринопептида А и, медленнее, фибринопептида В. Растворимые мономеры фибрина объединяются в двухцепочечные скрученные фибриллы. Далее эти фибриллы организуются вдоль друг друга с образованием более толстых волокон. Затем эти волокна сшиваются FXIIIa в фибриновую сеть, которая стабилизирует тромбоцитарную пробку путем взаимодействий фибрина с активированными тромбоцитами, что приводит к стабильному тромбу.
Расстройства и дефициты
Врожденная афибриногенемия представляет собой редкое нарушение свертываемости крови, при котором пациенты страдают от недостаточного свертывания крови вследствие отсутствия или нарушения функции фибриногена. Это медицинское состояние может приводить к случаям спонтанного кровотечения или обильным кровотечениям после незначительных травм или в ходе хирургических процедур.
Приобретенные дефициты фибриногена встречаются гораздо чаще, чем врожденная афибриногенемия, и могут индуцироваться гемодилюцией или другими событиями, такими как потеря крови во время хирургической операции, травма, диссеминированное внутрисосудистое свертывание или сепсис.
Дефицит фибриногена можно корректировать до нормальных уровней фибриногена в плазме приблизительно 1,5-3 г/л заместительной терапией с помощью внутривенной инфузии свежезамороженной плазмы или криопреципитата. Однако эти способы лечения сопряжены с риском занесения патогенов, например, вирусов или прионов, в организм пациента и, тем самым, возникновения дополнительных расстройств. Таким образом, рекомендуется внутривенно вводить композиции фибриногена, прошедшие вирусную инактивацию, для безопасного восстановления физиологических уровней фибриногена.
Несмотря на то, что существуют содержащие фибриноген препараты, которые называются фибриновым клеем, фибриногеновым адгезивом, тканевым клеем и т.п., эти препараты предназначены для местного применения в виде порошков, паст, пен или в комбинации с тканью в качестве пластыря для ран, они не пригодны для внутривенного применения, так как их консистенция и состав незамедлительно вызовут тромботические явления при инъекции. Эти препараты дополнительно содержат тромбин, соли кальция и относительно высокие количества фактора свертывания крови XIII. Примерами для таких препаратов являются US-A1-2008/003272, WO-A-95/22316 или US-A1-2008/181878.
Способы получения фибриногена описаны в EP-B1-1 240 200, который относится к способу очистки фибриногена из содержащего фибриноген раствора, включающему нанесение содержащего фибриноген раствора на ионообменную матрицу в условиях, при которых фибриноген связывается матрицей, промывание ионообменной матрицы буферным раствором, содержащим по меньшей мере одну ω-аминокислоту, элюирование фибриногена с матрицы буфером, содержащим 10 мМ Трис, 10 мМ цитрат, 45 мМ сахарозу и NaCl в концентрации от 200 мМ до 1,0 М, и необязательно выделение фибриногена из элюата.
Патентная заявка EP-B1-0 771 324 относится к способу получения свободного от вируса концентрата фибриногена, получаемого путем проведения в содержащей фибриноген разбавленной фракции плазмы химической обработки для инактивации вирусов, например, такой как обработка S/D или растворителем-детергентом, проведения осаждения полученной фракции после инактивации вирусов в растворе, содержащем аминокислоту при кислом значении рН, с получением супернатанта, фильтрации супернатанта с получением очищенного концентрата фибриногена и выделения очищенного концентрата фибриногена. Выделенный концентрат фибриногена подвергают обработке ультрафиолетовым излучением в качестве второй инактивации вирусов. Перед третьей инактивацией вирусов продукт стабилизируют и лиофилизируют.
В EP-B1-1 519 944 описано использование матрицы аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом в условиях, при которых фибриноген и плазминоген связываются с матрицей, и селективного элюирования фибриногена и 93% плазминогена по отдельности с матрицы.
В EP-B1-0 555 135 описан способ получения фибриногена для внутривенного введения путем очистки раствора фибриногена на анионообменном геле на основе сшитой агарозы, содержащей четвертичные аминогруппы. Утверждается, что полученный фибриноген свободен от фактора VIIIc.
EP-B1-1 457 497 относится к способу удаления вирусов из растворов фибриногена, отличающемуся стабилизацией и замораживанием раствора и последующим его размораживанием. Отделение нерастворенных материалов происходит перед разбавлением белка, и после него следует нанофильтрация полученного раствора с использованием фильтров с размером пор менее 35 нм.
В US-A1-2006/0009376 также описан способ производства фибриногена. Его осуществляют после многократного растворения и осаждения фибриногена для удаления фактора свертываемости крови XIII.
Goheen S. C. et al., Journal of Chromatography A. 816 (1998) 89-96, описывают ВЭЖХ ионообменную хроматографию белков плазмы: альбумина, фибриногена и иммуноглобулина (G) на непористых материалах колонки, содержащих либо функциональные группы четвертичных аминов, либо сульфопропильные функциональные группы.
Сущность изобретения
Одной из задач изобретения является предоставление концентрата фибриногена, произведенного с помощью специализированных стадий устранения и/или инактивации патогенов для устранения побочных реакций или предотвращения развития заболеваний, обусловленных патогеном. Указанные патогены выбраны из групп бактерий, вирусов и прионов, таких как прионный белок скрейпи (PrPSC). Системное применение такого фибриногенового продукта внутривенным путем позволяет лечить врожденную афибриногенемию и приобретенные дефициты фибриногена. Применение этого стандартизованного концентрата фибриногена обеспечивает быстрое лечение в экстренных ситуациях без требующего времени размораживания свежезамороженной плазмы и снижение объемной нагрузки и надежные показатели свертываемости благодаря по существу постоянному составу.
Следующей задачей настоящей заявки является предоставление способа производства концентрата в промышленных масштабах, т.е. от нескольких сотен до тысяч литров исходного материала, такого как кровь или плазма крови, хотя также возможна мелкомасштабная продукция, т.е. от нескольких 1/10 литра до нескольких литров.
Эти и другие задачи решаются с помощью способа согласно пп.1-14 формулы изобретения и продукта, получаемого способом по настоящему изобретению в соответствии с пп.15-19 формулы изобретения.
В целом способ по изобретению для очистки или производства фибриногена из содержащего фибриноген сырья, включает стадии:
- формирование обогащенного фибриногеном преципитата путем добавления по меньшей мере одного осаждающего агента к содержащему фибриноген сырью;
- необязательно выделение обогащенного фибриногеном преципитата, например, путем центрифугирования указанного преципитата;
- отбор обогащенного фибриногеном преципитата в водную среду с получением содержащего фибриноген раствора, необязательно с последующей фильтрацией и/или ультра/диафильтрацией;
- проведение хроматографии содержащего фибриноген раствора с неподвижной фазой, имеющей сильные анионообменные группы, путем приведения в контакт указанного раствора с указанной фазой в условиях, при которых фибриноген связывается с указанной фазой;
- последующее элюирование фибриногена с неподвижной фазы с помощью водного раствора с более высокой ионной силой по сравнению с ионной силой предыдущей стадии с получением обогащенной фракции, которую собирают;
- необязательно последующие стадии разбавления и/или концентрирования обогащенной фибриногеном фракции;
- и необязательно заполнение обогащенной фибриногеном фракцией подходящих флаконов.
В одном из вариантов осуществления способа производства по изобретению содержащее фибриноген сырье выбрано из группы, состоящей из плазмы крови, фракций плазмы, таких как фракция I, или криопреципитат, культуры клеток, продуцирующих фибриноген, и/или супернатанты указанных культур клеток. Если в качестве исходного материала используется не криопреципитат, то в качестве исходного материала получают содержащий фибриноген промежуточный материал хорошо известными способами, такими как способы, описанные Cohn, Kistler-Nitschmann, и их модификации.
Для получения фармацевтически применимого продукта является преимущественным, чтобы содержащее фибриноген сырье подвергали способу инактивации вируса, например, способу с растворителем-детергентом.
В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения инактивацию вирусов проводят перед формированием обогащенного фибриногеном преципитата. Однако также инактивацию вирусов можно проводить на другой стадии.
В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения удаление инактивирующих вирусы веществ проводят путем масляной экстракции и/или хроматографии с сильными анионообменниками.
Типичный осаждающий агент для применения в способе производства по изобретению выбирают из группы, состоящей из аминокислот, таких как глицин, солей в высокой концентрации (высаливание) или пропиленгликоля.
В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения отбор представляет собой ресуспендирование пасты в буфере, имеющем рН от 7,5 до 8,5.
В соответствии с другим вариантом осуществления изобретения неподвижная фаза имеет третичные или четвертичные аминогруппы.
Хроматографические стадии способа производства по изобретению, в частности, можно проводить на колонке.
Как правило, предназначенная для хранения форма заполненной обогащенной фибриногеном фракции находится в жидком состоянии, замороженном состоянии, предпочтительно при <-15°С, более предпочтительно ниже -30°С, или в качестве лиофилизата.
Также объектом настоящего изобретения является обогащенная фибриногеном фракция, полученная способом производства по изобретению. Обогащенная фибриногеном фракция по изобретению содержит, например, 0,01-9,0 нг фибринопептида А на мг фибриногена. Другая обогащенная фибриногеном фракция по изобретению имеет 0,80-1,10 мг антигена фибриногена на мг фибриногена, определенного по методу Клауса; активность vWF:Ag <0,1 МЕ на мг фибриногена; активность фактора свертывания крови XIII ≥0,07 МЕ на мг фибриногена; 0,01-1,00 мкг фибронектина на мг фибриногена и менее 0,03 МЕ тромбина на мг фибриногена.
Концентратом фибриногена заполняют конечные контейнеры после стерилизации фильтрованием, и его можно хранить в форме жидкости, замороженной жидкости или в лиофилизированной форме.
Полученный указанным способом фибриноген характеризуется низким количеством примесей, что гарантирует чистоту продукта и позволяет длительное лечение людей, нуждающихся в этом. FXIII является предпочтительным в содержащейся концентрации, поскольку он поддерживает стабилизацию образовавшегося фибрина, в то время как избыточной нагрузки этой трансглутаминазой избегают.
Термин «включающий», «включают» или «включает» также может быть заменен терминами «состоящий», «состоят» или «состоит» без изменения содержания описания.
Детальное описание изобретения
Хотя в соответствии с изобретением можно использовать практические любое содержащее фибриноген сырье, предпочтительным сырьем является криопреципитат, и далее криопреципитат служит в качестве типичного сырья для получения фибриногена в дальнейшем описании способа производства по изобретению.
Обычно криопреципитат разбавляют или растворяют в условиях подходящего буфера, в частности при приблизительно нейтральном значении рН (6,9-7,0, например, в буфере для растворения, содержащем Na-цитрат или NaCl), подвергают адсорбции, в частности, с помощью Al(OH)3, и полученный гель удаляют, например, центрифугированием. Далее проводят инактивацию вирусов в супернатанте, например, обработкой растворителем/детергентом (S/D). Этот способ хорошо известен специалисту в данной области и впервые был описан в EP-A-131 740. Соединения S/D, такие как Triton (О-[4-(1,1,3,3-тетраметилбутил)фенокси]полиэтоксиэтанол) и TnBP (три-N-бутилфосфат), в частности, удаляют экстракцией касторовым маслом. Для дальнейшей очистки водную фазу можно подвергать хроматографическому способу. Обычно его можно проводить путем приведения в контакт водной фазы с сильным ионообменным гелем, триметиламиноэтилом (TMAE), привитым к материалу матрицы, таким, как Fractogel® EMD-TMAE. Хороших результатов достигают в случае, если хроматографию проводят с буферами, имеющими значение рН 6,9-7,1 и осмоляльность 570-610 мосмоль/л. В этих условиях фибриноген не связывается с неподвижной фазой и, таким образом, обнаруживается в смыве или супернатанте, последний из которых получают при проведении периодической хроматографии.
Раствор не связавшегося фибриногена, содержащий, как правило, приблизительно 40 г/л (турбидометрический метод Клауса) доводят до рН 7,0-8,0, в частности, до 7,3-7,5. После добавления подходящего осаждающего агента, например, глицина, до концентрации 0,8-1,2 М, в частности, 0,9-1,1 М, конечный раствор можно перемешивать в течение 60-120 минут для осаждения фибриногена. Затем содержащий фибриноген преципитат можно далее отделять центрифугированием, и эту промежуточную пасту фибриногена можно хранить при ≤-70°С, предпочтительно при от -100°С до -70°С, в течение вплоть до одного месяца. Уже одно осаждение, например, с глицином, обеспечивает достаточно чистую пасту для дальнейшей переработки.
Полученный таким образом промежуточный материал можно ресуспендировать в 10-30 мМ Трис-буфере (рН=7,5-8,5), в частности, в 15-25 мМ Трис-буфере с рН=7,5-8,5. Затем полученную суспензию можно отфильтровывать и подвергать ультра/диафильтрации, например, против объема того же или другого буфера, равного 5-кратному объему суспензии.
Затем полученный содержащий фибриноген раствор наносят на сильный анионообменный гель, предпочтительно выбранный из группы третичных или четвертичных аминогрупп в качестве лигандов, привитых к матрице. Указанные функциональные группы выбраны из хорошо известных диэтиламиноэтила (DEAE), триметиламиноэтила (TMAE) и других групп, в то время как носитель может состоять из целлюлозы, агарозы, диоксида кремния, полимерного или керамического материала. Хорошие результаты, в частности, в отношении восстановления фибронектина и витронектина, могут быть достигнуты с помощью триметиламиногрупп, привитых к гидроксилированному метакриловому полимеру, такому как GigaCap Q-650®, через связывающую группу. Это является в высокой степени неожиданным, поскольку химически сходный Macro-Prep High Q®, метакриловый сополимер, состоящий из диэтиленгликольдиметакрилата/глицидилметакрилата также с триметиламинолигандами, но без гидроксильной функциональной группы в его полимерной основной цепи, является менее эффективным в отношении восстановления указанных двух белков. Эффективное восстановление вязкого фибронектина является в высокой степени преимущественным для необязательных фильтраций, таких как ультра/диафильтрация или нанофильтрация, так как срок службы фильтров увеличивается благодаря меньшей закупорке. Если предполагается, что способ включает нанофильтрацию, предпочтительным является выполнение способа с разбавленным раствором (концентрация фибриногена приблизительно 2 г/л), в частности, в случае каскадного использования нанофильтров. Хроматографический гель или смолу, в частности, предварительно уравновешивают тем же буфером, который использовался для ресуспендирования промежуточной пасты фибриногена перед нанесением раствора фибриногена. Слабо связавшиеся вещества вымывали уравновешивающим буфером, а затем промывочным буфером (1,5 г/л цитрата натрия, 6,0 г/л хлорида натрия, доведенный до рН=6,8-7,2, предпочтительно 6,9-7,1 и обладающий проводимостью 11,0-13,0 мСм/см при комнатной температуре 20-25°С).
Затем фибриноген можно элюировать с хроматографической колонки элюирующим буфером, содержащим 1,5 г/л цитрата натрия и 10,0 г/л глицина, в частности, доведенным до того же диапазона рН, что и у промывочного буфера, например, с помощью HCl и/или NaOH, и доведенным с помощью приблизительно 7,0 г/л NaCl до проводимости 13,1-15 мСм/см при комнатной температуре 20-25°С. Приблизительно 74% нанесенного на колонку фибриногена выделяется в элюате, в то время как фибронектин практически полностью удаляется из содержащего фибронектин элюата.
Этот отфильтрованный раствор фибриногена можно далее концентрировать ультра/диафильтрацией до 20-26 г/л и подвергать стерилизации фильтрованием через мембраны с номинальным размером пор ≤0,2 мкм. Специалистам в данной области известно, что также достижимы другие концентрации, такие как 1-19,9 г/л или 26,01-30 г/л или даже выше. Концентрат фибриногена по настоящему изобретению также можно изготавливать с адъювантами и стабилизаторами, известными специалисту в данной области, такими как углеводороды, например, сахароза, трегалоза, аминокислоты, например, глицин, гистидин, аланин, аргинин, и детергентами, например, полиоксиэтилен-(20)-сорбитанмоноолеатом (TWEEN 80®). Этот подвергнутый стерилизации фильтрованием совокупный материал либо необязательно хранят в течение вплоть до 5 суток при -70°С или ниже, в частности, при от -70°С до -80°С, до проведения стерилизации фильтрованием во второй раз и заполнения в конечные контейнеры, либо необязательно лиофилизируют без второй стерилизации фильтрованием.
Нет необходимости добавлять дополнительные буферы, стабилизаторы, адъюванты или другие добавки, такие как фактор свертывания крови XIII (F XIII). Фактор свертывания крови XIII присутствует в концентрате с активностью ≥0,05 МЕ на мг фибриногена (по методу Клауса), в частности 0,07-0,3 МЕ на мг фибриногена, 0,06-0,5 МЕ на мг фибриногена, или 0,05-1 МЕ на мг фибриногена.
Концентрат фибриногена, полученный способом по настоящему изобретению, проявляет свои биологические свойства через отношение антиген фибриногена/фибриноген по методу Клауса 0,80-1,10, в частности, 0,85-1,05 или 0,90-1,00; содержание фибринопептида А 0,01-9,0 нг на мг фибриногена (по методу Клауса), в частности, 0,05-8,0 нг на мг фибриногена или 0,08-6,0 нг на мг фибриногена; активность vWF:Ag <0,1 МЕ на мг фибриногена (по методу Клауса), в частности, 0,001-0,09 МЕ на мг фибриногена, 0,002-0,07 МЕ на мг фибриногена, 0,002-0,04 МЕ на мг фибриногена; активность фактора XIII ≥0,07 МЕ на мг фибриногена (по методу Клауса), в частности, 0,07-0,3 МЕ на мг фибриногена, в частности, 0,08-0,5 МЕ на мг фибриногена, или 0,07-1 МЕ на мг фибриногена; содержание фибронектина 0,01-1,00 мкг на мг фибриногена (по методу Клауса), в частности, 0,03-0,70 мкг на мг фибриногена или 0,05-0,40 мкг на мг фибриногена; и активность плазминогена 1-11 мМЕ на мг фибриногена. Было определено, что активность тромбина находится ниже порога определения 0,15 МЕ/мл для всех испытаний и при тех концентрациях фибриногена, которые указаны в таблице 1, что эквивалентно менее чем 0,007 МЕ на мг фибриногена или 0,0069-0,0001 МЕ/мг.
Далее изобретение поясняется с помощью следующего неограничивающего примера.
Пример
Криопреципитат, полученный из плазмы крови с использованием общепринятых способов, разбавляли или растворяли при приблизительно нейтральном значении рН, подвергали адсорбции на Al(OH)3, и полученный гель удаляли центрифугированием. Затем супернатант подвергали инактивации вирусов обработкой растворителем-детергентом (S/D). Соединения растворителя/детергента, Triton и TnBP, экстрагировали растительным маслом и водную фазу приводили в контакт с Fractogel® EMD-TMAE. Использовали условия хроматографии (значение рН 6,9-7,1 и осмоляльность 570-610 мосмоль/л), в которых фибриноген не связывался с гелем и, таким образом, обнаруживался в смыве или супернатанте.
Раствор не связавшегося фибриногена перемешивали в течение приблизительно 90 минут после добавления глицина (конечная концентрация 1 моль/л и рН=7,4) для осаждения фибриногена.
Содержащий фибриноген преципитат далее разделяли центрифугированием с получением промежуточной пасты фибриногена.
Полученный таким образом промежуточный материал ресуспендировали в 20 мМ Трис-буфере (рН=приблизительно 8,0). Затем полученную суспензию фильтровали и подвергали ультра/диафильтрации.
Затем полученный содержащий фибриноген раствор наносили на GigaCap Q-650M® и хроматографический гель или смолу предварительно уравновешивали тем же Трис-буфером, который использовали для ресуспендирования перед нанесением раствора фибриногена. Слабо связавшиеся молекулы вымывали уравновешивающим буфером, а затем промывали промывочным буфером (1,5 г/л цитрата натрия, 6,0 г/л хлорида натрия, значение рН, доведенное до приблизительно 7,0, и проводимость приблизительно 12,0 мСм/см). Затем фибриноген элюировали с хроматографической колонки элюирующим буфером (1,5 г/л цитрата натрия и 10,0 г/л глицина, доведенный до того же рН, что и у промывочного буфера, и доведенный с помощью приблизительно 7,0 г/л NaCl до проводимости 13,1-15 мСм/см).
Полученный раствор фибриногена концентрировали, составляли и подвергали стерилизации фильтрованием. Подвергнутый стерилизации фильтрованием совокупный материал хранили в течение 5 суток при температуре -80°С, а затем подвергали стерилизации фильтрованием во второй раз и заполняли в конечные контейнеры. Одну часть конечных контейнеров лиофилизировали, а другую часть хранили в качестве жидкого состава.
Продукты четырех разных серий получения анализировали после восстановления лиофилизированного продукта. Восстановление лиофилизатов проводили добавлением воды для инъекций вплоть до концентрации до лиофилизации. Все серии получения проводили, по существу так, как представлено в примере. Результаты представлены в Таблице 1.
| № серии | 1 | 2 | 3 | 4 | Диапазон |
| Фибриноген по методу Клауса (турбидометрический метод) [мг/мл] | 22,1 | 22,6 | 25,0 | 25,0 | 22,1-25,0 |
| Антиген фибриногена [мг/мл] | 20,7 | 19,1 | 22,0 | 23,0 | 19,1-23,0 |
| FXIII [МЕ/мл] | 2,9 | 2,5 | 2,4 | 2,6 | 2,4-2,9 |
| vWF:Ag [МЕ/мл] | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Фибронектин [мкг/мл] | 3,3 | 4,9 | 4,5 | 3,8 | 3,3-4,9 |
| Фибринопептид А [нг/мл] | 36 | 20 | 10 | 11 | 10-36 |
| Таблица 1 | |||||
В таблице 2 представлена нормализация измеренных значений путем вычисления содержания или активности на мг фибриногена при определении по методу Клауса.
| № серии | 1 | 2 | 3 | 4 | Диапазон |
| Фибриноген по методу Клауса [мг/мл] | 22,1 | 22,6 | 25,0 | 25,0 | 22,1-25,0 |
| мг антигена фибриногена/ мг фибриногена по методу Клауса | 0,937 | 0,845 | 0,880 | 0,920 | 0,845-0,937 |
| МЕ FXIII/мг фибриногена по методу Клауса | 0,131 | 0,111 | 0,096 | 0,104 | 0,096-0,131 |
| МЕ vWF:Ag/мг фибриногена по методу Клауса | 0,005 | 0,004 | 0,004 | 0,004 | 0,004-0,005 |
| мкг фибронектина/мг фибриногена по методу Клауса | 0,149 | 0,217 | 0,180 | 0,152 | 0,149-0,217 |
| нг фибринопептида А/мг фибриногена по методу Клауса | 1,629 | 0,885 | 0,400 | 0,440 | 0,400-1,629 |
| Таблица 2 | |||||
Сравнение с коммерчески доступными продуктами.
В таблице 3 представлены измеренные значения для коммерчески доступных концентратов фибриногена. Все продукты представляли собой лиофилизированные продукты и их восстанавливали в соответствии с рекомендациями изготовителя. Также показан диапазон значений серий 1-4 согласно настоящему изобретению, как уже показано в Таблице 1.
| Продукт 1 | Продукт 2 | Продукт 3 | Настоящее изобретение | |
| Фибриноген по методу Клауса (турбидометрический метод) [мг/мл] | 11,5 | 9,8 | 23,7 | 22,1-25,0 |
| Антиген фибриногена [мг/мл] | 16,3 | 19,1 | 21,0 | 19,1-23,0 |
| FXIII [МЕ/мл] | <0,2 | <0,2 | 1 | 2,4-2,9 |
| vWF:Ag [МЕ/мл] | 14 | 1,3 | 3,8 | 0,1 |
| Фибронектин [мкг/мл] | 13,3 | 258,9 | 944,3 | 3,3-4,9 |
| Фибринопептид А [нг/мл] | 130 | 1843 | 814 | 10-36 |
| Таблица 3 | ||||
В Таблице 4 представлена нормализация измеренных значений для коммерчески доступных продуктов путем вычисления содержания или активности на мг фибриногена при определении способом Клауса. Также показан диапазон значений для серий 1-4 в соответствии с настоящим изобретением, как уже показано в Таблице 2.
| Продукт 1 | Продукт 2 | Продукт 3 | Настоящее изобретение | |
| Фибриноген по методу Клауса (турбодиметрический метод) [мг/мл] | 11,5 | 9,8 | 23,7 | 22,1-25,0 |
| мг антигена фибриногена/мг фибриногена по методу Клауса | 1,417 | 1,949 | 0,886 | 0,845-0,937 |
| МЕ FXIII/мг фибриногена по методу Клауса | <0,017 | <0,020 | 0,042 | 0,096-0,131 |
| МЕ vWF:Ag/мг фибриногена по методу Клауса | 1,217 | 0,133 | 0,160 | 0,004-0,005 |
| мкг фибронектина/ мг фибриногена по методу Клауса | 1,157 | 26,418 | 39,844 | 0,149-0,217 |
| нг фибринопептида А/мг фибриногена по методу Клауса | 11,304 | 188,061 | 34,346 | 0,400-1,629 |
| Таблица 4 | ||||
Сравнение с предпочтительным вариантом осуществления WO 01/48016.
1 г пасты фракции I экстрагировали с помощью 8,33 г экстрагирующего буфера (0,8 М NaCl, 5 мМ ε-АСА (эпсилон-аминокапроновая кислота), 20 мМ Na-цитрат, 60 МЕ/мл гепарина и рН=7,3, т.е. усовершенствованный буфер согласно разделу 1.1.19) при 37°С в течение 2 часов. К супернатанту после выделения добавляли 50 г 2% раствора гидроксида алюминия (алгидрогеля). Смесь перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре, центрифугировали при 5000g в течение 10 минут и осадок выбрасывали. Супернатант алгидрогеля и буфер глицина/NaCl (2,1 М глицин, 20 мМ Na-цитрат, 3,6 М NaCl и 2,4 мМ CaCl2) доводили до 30,2°С и 29,7°С, соответственно, и супернатант добавляли к буферу в течение 4,5 минут. Смесь 1 части супернатанта и 2,05 частей буфера перемешивали в течение 20 минут при 30,2°С-31,1°С, после чего центрифугировали в течение 10 минут при 5000g. Преципитат Gly/NaCl повторно растворяли в буфере D, соответствующем 1/3 объема супернатанта после экстракции пасты фракции I, при 21°С при постоянном перемешивании в течение 2 часов. После этого повторно растворенный преципитат обрабатывали S/D с помощью полисорбата-80 и TnBP в течение 1 часа в концентрациях 1% (полисорбат-80) и 0,3% (TnBP) при приблизительно 23°С. Анионообменную хроматографию проводили на смоле MacroPrep® HQ в колонке XK26 и при высоте слоя приблизительно 20 см, что соответствовало приблизительно объему колонки приблизительно 100 мл при скорости потока 10 мл/мин. Уравновешивание проводили 2 объемами колонки усовершенствованного буфера MQ (50 мМ ТРИС, 100 мМ NaCl, 20 мМ ε-АСА при рН=8,0, раздел 2.2.3) и проводимость (после колонки), достигала указанных границ проводимости буфера MQ ±10%. После промывки колонки шестью объемами буфера MQ, фибриноген элюировался в виде одиночного пика с помощью усовершенствованного буфера ME (500 мМ NaCl, 1,1 мМ CaCl2, 10 мМ Na-цитрат, 10 мМ Трис и 45 мМ сахароза при рН=7,0, т.е., буфер D+2×200 мМ NaCl). Аналитические результаты представлены в Таблице 5.
| WO 01/48016 | Настоящее изобретение | |
| Фибриноген по методу Клауса (турбидометрический метод) [мг/мл] | 5,90 | 22,1-25,0 |
| мг антигена фибриногена/мг фибриногена по методу Клауса | 0,845 | 0,845-0,937 |
| МЕ FXIII/мг фибриногена по методу Клауса | 0,440 | 0,096-0,131 |
| МЕ vWF:Ag/мг фибриногена по методу Клауса | 0,100 | 0,004-0,005 |
| мкг фибронектина/мг фибриногена по методу Клауса | 10,83 | 0,149-0,217 |
| нг фибринопептида А/мг фибриногена по методу Клауса | 6,02 | 0,400-1,629 |
| Таблица 5 | ||
Claims (18)
1. Способ очистки фибриногена из содержащего фибриноген источника, причем указанный способ включает подвергание содержащего фибриноген источника хроматографии на анионообменной смоле, где анионообменная смола представляет собой гидроксилированный метакриловый полимер, к которому триметиламиногруппы привиты через связывающую группу.
2. Способ по п.1, где содержащий фибриноген источник представляет собой криопреципитат, предпочтительно растворенный при нейтральном значении рН.
3. Способ по п.2, где полученный раствор обрабатывают Al(OH)3 и полученный гель удаляют.
4. Способ по п.2 или 3, где инактивацию вирусов проводят с помощью обработки растворителем-детергентом (S/D).
5. Способ по п.4, где проводят экстракцию реагентов S/D с использованием растительного масла и приведение в контакт водной фазы со смолой ТМАЕ при значении рН 6,9-7,1 и с осмоляльностью 570-610 мосмоль/л.
6. Способ по п. 5, где фибриноген осаждают с помощью глицина, в частности приблизительно 1 М глицина, и выделяют образованную пасту фибриногена.
7. Способ по п.6, где пасту фибриногена ресуспендируют, предпочтительно в приблизительно 20 мМ Трис-буфере при значении рН приблизительно 8,0.
8. Способ по п.7, где полученную после фильтрации фракцию наносят на сильную ионообменную смолу, содержащую триметиламиногруппы, привитые через связывающие группы к основной цепи гидроксилированного метакрилового полимера, и слабосвязавшиеся вещества отмывают предпочтительно промывочным буфером с проводимостью приблизительно 12,0 мСм/см.
9. Способ по п.8, где фибриноген элюируют элюирующим буфером, содержащим цитрат натрия, хлорид натрия и глицин, предпочтительно около 1,5 г/л цитрата натрия, 7,0 г/л хлорида натрия и 10,0 г/л глицина, в частности, со значением рН, доведенным до 7,0, и с проводимостью 13,1-15 мСм/см.
10. Способ по п.9, где полученную фракцию концентрируют, составляют, стерилизуют фильтрованием и/или заполняют.
11. Способ по п.10, где полученную фракцию лиофилизируют.
12. Способ по п.1, включающий следующие стадии:
a) растворение криопреципитата, разведенного при нейтральном значении рН,
b) подвергание раствора адсорбции с Al(ОН)3 и удаление полученного геля,
c) инактивация вирусов в полученном растворе стадии b) обработкой растворителем-детергентом (S/D), экстракция реагентов S/D с использованием растительного масла и приведение в контакт водной фазы со смолой ТМАЕ при значении рН 6,9-7,1 и с осмоляльностью 570-610 мосмоль/л,
d) осаждение фибриногена, обнаруживаемого в смыве или супернатанте стадии с), с помощью приблизительно 1 М глицина и выделение пасты фибриногена,
e) ресуспендирование пасты фибриногена в 20 мМ Трис-буфере при значении рН приблизительно 8,0, фильтрация и
f) нанесение отфильтрованного раствора стадии е) на сильную анионообменную смолу, содержащую триметиламиногруппы, привитые через связывающую группу к основной цепи гидроксилированного метакрилового полимера, и отмывка слабосвязавшихся веществ промывочным буфером с проводимостью приблизительно 12,0 мСм/см,
g) элюирование фибриногена элюирующим буфером, содержащим приблизительно 1,5 г/л цитрата натрия, приблизительно 7,0 г/л хлорида натрия и приблизительно 10,0 г/л глицина, в частности, со значением рН, доведенным до значения приблизительно 7,0, и с проводимостью 13,1-15 мСм/см,
h) концентрирование, составление, стерилизация фильтрованием и заполнение.
a) растворение криопреципитата, разведенного при нейтральном значении рН,
b) подвергание раствора адсорбции с Al(ОН)3 и удаление полученного геля,
c) инактивация вирусов в полученном растворе стадии b) обработкой растворителем-детергентом (S/D), экстракция реагентов S/D с использованием растительного масла и приведение в контакт водной фазы со смолой ТМАЕ при значении рН 6,9-7,1 и с осмоляльностью 570-610 мосмоль/л,
d) осаждение фибриногена, обнаруживаемого в смыве или супернатанте стадии с), с помощью приблизительно 1 М глицина и выделение пасты фибриногена,
e) ресуспендирование пасты фибриногена в 20 мМ Трис-буфере при значении рН приблизительно 8,0, фильтрация и
f) нанесение отфильтрованного раствора стадии е) на сильную анионообменную смолу, содержащую триметиламиногруппы, привитые через связывающую группу к основной цепи гидроксилированного метакрилового полимера, и отмывка слабосвязавшихся веществ промывочным буфером с проводимостью приблизительно 12,0 мСм/см,
g) элюирование фибриногена элюирующим буфером, содержащим приблизительно 1,5 г/л цитрата натрия, приблизительно 7,0 г/л хлорида натрия и приблизительно 10,0 г/л глицина, в частности, со значением рН, доведенным до значения приблизительно 7,0, и с проводимостью 13,1-15 мСм/см,
h) концентрирование, составление, стерилизация фильтрованием и заполнение.
13. Содержащий фибриноген продукт, полученный по любому из пп.1-12, где указанный содержащий фибриноген продукт имеет содержание фибринонектина 0,01-1,00 мкг/мг фибриногена.
14. Содержащий фибриноген продукт по п.13 с содержанием фибронектина 0,01-1,00 мкг/мг фибриногена, полученный способом, включающим следующие стадии:
a) растворение криопреципитата, разведенного при нейтральном значении рН,
b) подвергание полученного раствора адсорбции с Al(ОН)3 и удаление полученного геля,
c) инактивация вирусов в полученном растворе стадии b) обработкой растворителем-детергентом (S/D) с Triton и TnBP, экстракция реагентов S/D с использованием растительного масла и приведение в контакт водной фазы со смолой ТМАЕ при значении рН 6,9-7,1 и с осмоляльностью 570-610 мосмоль/л,
d) осаждение фибриногена, обнаруживаемого в смыве или супернатанте стадии с), с помощью приблизительно 1 М глицина и выделение пасты фибриногена,
e) ресуспендирование пасты фибриногена в 20 мМ Трис-буфере при значении рН приблизительно 8,0, фильтрация и
f) нанесение отфильтрованного раствора этапа е) на сильную анионообменную смолу, содержащую триметиламиногруппы, привитые через связывающие группы к основной цепи гидроксилированного метакрилового полимера, и отмывка слабосвязавшихся веществ промывочным буфером с проводимостью приблизительно 12,0 мСм/см,
g) элюирование фибриногена элюирующим буфером, содержащим приблизительно 1,5 г/л цитрата натрия, приблизительно 7,0 г/л хлорида натрия и приблизительно 10,0 г/л глицина, в частности, со значением рН, доведенным до значения приблизительно 7,0, и с проводимостью 13,1-15 мСм/см,
h) концентрирование, составление, стерилизация фильтрованием и заполнение.
a) растворение криопреципитата, разведенного при нейтральном значении рН,
b) подвергание полученного раствора адсорбции с Al(ОН)3 и удаление полученного геля,
c) инактивация вирусов в полученном растворе стадии b) обработкой растворителем-детергентом (S/D) с Triton и TnBP, экстракция реагентов S/D с использованием растительного масла и приведение в контакт водной фазы со смолой ТМАЕ при значении рН 6,9-7,1 и с осмоляльностью 570-610 мосмоль/л,
d) осаждение фибриногена, обнаруживаемого в смыве или супернатанте стадии с), с помощью приблизительно 1 М глицина и выделение пасты фибриногена,
e) ресуспендирование пасты фибриногена в 20 мМ Трис-буфере при значении рН приблизительно 8,0, фильтрация и
f) нанесение отфильтрованного раствора этапа е) на сильную анионообменную смолу, содержащую триметиламиногруппы, привитые через связывающие группы к основной цепи гидроксилированного метакрилового полимера, и отмывка слабосвязавшихся веществ промывочным буфером с проводимостью приблизительно 12,0 мСм/см,
g) элюирование фибриногена элюирующим буфером, содержащим приблизительно 1,5 г/л цитрата натрия, приблизительно 7,0 г/л хлорида натрия и приблизительно 10,0 г/л глицина, в частности, со значением рН, доведенным до значения приблизительно 7,0, и с проводимостью 13,1-15 мСм/см,
h) концентрирование, составление, стерилизация фильтрованием и заполнение.
15. Содержащий фибриноген продукт по п.13 или 14 с содержанием фибринопептида А 0,01-9,0 нг/мг фибриногена, с активностью vWF:Ag менее 0,1 МЕ/мг фибриногена, с активностью фактора XIII 0,07-1 МЕ/мг фибриногена и с активностью тромбина менее 0,007 МЕ/мг фибриногена.
16. Содержащий фибриноген продукт по п.13 или 14, обладающий следующими свойствами:
17. Содержащий фибриноген продукт по п.13 или 14, отличающийся тем, что он находится в лиофилизированном виде.
18. Применение анионообменной смолы, содержащей гидроксилированный метакриловый полимер, к которому триметиламиногруппы привиты через связывающую группу, для очистки или производства содержащего фибриноген продукта по любому из пп.13-17 способом по любому из пп.1-12.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP10177640.9 | 2010-09-20 | ||
| EP10177640 | 2010-09-20 | ||
| US34471910P | 2010-09-21 | 2010-09-21 | |
| US61/344,719 | 2010-09-21 | ||
| PCT/EP2011/066293 WO2012038410A1 (en) | 2010-09-20 | 2011-09-20 | Process for production of fibrinogen |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013118323A RU2013118323A (ru) | 2014-10-27 |
| RU2603103C2 true RU2603103C2 (ru) | 2016-11-20 |
Family
ID=43048945
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013118323/10A RU2603103C2 (ru) | 2010-09-20 | 2011-09-20 | Способ получения фибриногена с использованием сильной анионообменной смолы и содержащий фибриноген продукт |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9371355B2 (ru) |
| EP (1) | EP2619225B1 (ru) |
| JP (1) | JP2013537215A (ru) |
| KR (1) | KR20130112031A (ru) |
| CN (2) | CN106046147B (ru) |
| AU (1) | AU2011304364B2 (ru) |
| BR (1) | BR112013006384B1 (ru) |
| CA (1) | CA2809471A1 (ru) |
| ES (1) | ES2586698T3 (ru) |
| MX (1) | MX347190B (ru) |
| RU (1) | RU2603103C2 (ru) |
| WO (1) | WO2012038410A1 (ru) |
Families Citing this family (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2011304364B2 (en) | 2010-09-20 | 2015-07-09 | Octapharma Ag | Process for production of fibrinogen |
| CN104321340B (zh) | 2012-03-13 | 2018-11-09 | 欧克塔医药公司 | 用于生产纤维蛋白原的改进工艺及其生产的纤维蛋白原 |
| US10188965B2 (en) | 2012-12-05 | 2019-01-29 | Csl Behring Gmbh | Hydrophobic charge induction chromatographic depletion of a protein from a solution |
| US20140154233A1 (en) * | 2012-12-05 | 2014-06-05 | Csl Limited | Method of purifying therapeutic proteins |
| RU2556804C2 (ru) * | 2013-12-17 | 2015-07-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение Гематологический научный центр Министерства здравоохранения РФ | Способ получения концентрата фибриногена |
| US9932388B2 (en) | 2014-11-13 | 2018-04-03 | Hemarus Therapeutics Limited | Chromatographic process for producing high purity fibrinogen and thrombin |
| WO2017070619A1 (en) * | 2015-10-23 | 2017-04-27 | Cerus Corporation | Plasma compositions and methods of use thereof |
| KR101841587B1 (ko) * | 2016-01-12 | 2018-05-14 | 주식회사 녹십자홀딩스 | 피브리노겐의 정제방법 |
| WO2018007767A1 (fr) | 2016-07-06 | 2018-01-11 | Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies | Fibrinogène liquide stable |
| CN107540743A (zh) * | 2017-10-11 | 2018-01-05 | 南岳生物制药有限公司 | 一种双层析法制备人纤维蛋白原的方法 |
| WO2021116110A1 (en) * | 2019-12-10 | 2021-06-17 | Biotest Ag | Method for manufacturing a fibrinogen preparation |
| JP7645133B2 (ja) * | 2021-06-04 | 2025-03-13 | Ｋｍバイオロジクス株式会社 | 血液凝固第ｘｉｉｉ因子を含むフィブリノゲンの製造方法 |
| JP2024529107A (ja) | 2021-08-13 | 2024-08-01 | ビオテスト・アクチエンゲゼルシャフト | フィブリノゲン組成物および調製方法 |
| CN113698470B (zh) * | 2021-09-02 | 2023-03-17 | 成都蓉生药业有限责任公司 | 一种人纤维蛋白原的纯化方法 |
| CN115197315A (zh) * | 2022-09-02 | 2022-10-18 | 同路生物制药有限公司 | 以冷沉淀为原料用色谱层析法制备人纤维蛋白原的方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4278594A (en) * | 1979-06-19 | 1981-07-14 | David Amrani | Process for separation and isolation of AHF, von Willebrand's ristocetin cofactor (VWF:RCF) and fibronectin from blood plasma |
| EP0555135B1 (fr) * | 1992-02-04 | 1996-08-14 | Association D'aquitaine Pour Le Developpement De La Transfusion Sanguine Et Des Recherches Hematologiques | Procédé de fabrication de fibrinogène de très haute pureté |
| US5834420A (en) * | 1994-07-14 | 1998-11-10 | Croix-Rouge De Belgique | Fibrinogen concentrate obtained from blood plasma, process and plant for its preparation |
| US6037457A (en) * | 1997-01-31 | 2000-03-14 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Method for recombinant fibrinogen production |
| US6468733B2 (en) * | 2000-06-05 | 2002-10-22 | Omrix Biopharmaceuticals Inc. | Method of the inactivation of viruses by a solvent-detergent combination and nanofiltration |
| RU2008130356A (ru) * | 2001-05-21 | 2010-01-27 | Омрикс Биофармасьютикалс С.А. (Be) | Удаление плазмин(оген)а из белковых растворов |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4540573A (en) | 1983-07-14 | 1985-09-10 | New York Blood Center, Inc. | Undenatured virus-free biologically active protein derivatives |
| US5290918A (en) * | 1993-02-23 | 1994-03-01 | Haemacure Biotech Inc. | Process for the obtention of a biological adhesive made of concentrated coagulation factors by acidic precipitation |
| ATE241340T1 (de) | 1994-02-17 | 2003-06-15 | New York Blood Ct Inc | Biologische bioadhäsive präparate, die fibrinkleber und liposomen enthalten, verfahren für ihre herstellung und verwendung |
| US7572769B2 (en) | 1998-12-23 | 2009-08-11 | Csl Behring Gmbh | Fibrin adhesive granulate and method for its preparation |
| US6579537B2 (en) * | 1999-02-12 | 2003-06-17 | Baxter Aktiengesellschaft | Method for producing fibronectin and fibrinogen compositions using a polyalkylene glycol and glycine or β-alanine |
| DE60042343D1 (de) | 1999-12-23 | 2009-07-16 | Csl Ltd | Abtrennung von fibrinogen von plasmaproteasen |
| EP1148063A1 (de) * | 2000-04-18 | 2001-10-24 | Octapharma AG | Haemostatisch aktives vWF enthaltendes Präparat und Verfahren zu seiner Herstellung |
| DE10211632A1 (de) | 2002-03-15 | 2003-10-09 | Aventis Behring Gmbh | Verfahren zur Abtrennung von Viren aus einer Proteinlösung durch Nanofiltration |
| GB0216001D0 (en) | 2002-07-10 | 2002-08-21 | Nat Blood Authority | Process and composition |
| AT501088A2 (de) | 2002-12-18 | 2006-06-15 | Bio Prod & Bio Eng Ag | Stabile therapeutische proteine |
| ES2214967B1 (es) | 2003-03-06 | 2005-06-16 | Probitas Pharma, S.A | Procedimiento para la eliminacion de virus en soluciones de fibrinogeno y fibrinogeno obtenido por dicho procedimiento. |
| FR2887883B1 (fr) | 2005-06-29 | 2007-08-31 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de separation des proteines fibrinogene, facteur xiii et colle biologique d'une fraction plasmatique solubilisee et de preparation de concentres lyophilises desdites proteines |
| US7968682B2 (en) | 2006-12-12 | 2011-06-28 | Oregon Health & Science University | Degradation-resistant fibrinogen sealants |
| WO2009155626A2 (de) | 2008-06-23 | 2009-12-30 | Bio-Products & Bio-Engineering Ag | Lagerstabiles, funktionell intaktes fibrinogen |
| CN101703763B (zh) * | 2009-11-05 | 2012-07-11 | 绿十字(中国)生物制品有限公司 | 人纤维蛋白原的生产方法 |
| AU2011304364B2 (en) * | 2010-09-20 | 2015-07-09 | Octapharma Ag | Process for production of fibrinogen |
| CN104321340B (zh) | 2012-03-13 | 2018-11-09 | 欧克塔医药公司 | 用于生产纤维蛋白原的改进工艺及其生产的纤维蛋白原 |
-
2011
- 2011-09-20 AU AU2011304364A patent/AU2011304364B2/en active Active
- 2011-09-20 CA CA2809471A patent/CA2809471A1/en not_active Abandoned
- 2011-09-20 JP JP2013528715A patent/JP2013537215A/ja not_active Withdrawn
- 2011-09-20 CN CN201610659096.1A patent/CN106046147B/zh active Active
- 2011-09-20 CN CN201180045268.1A patent/CN103328503B/zh active Active
- 2011-09-20 MX MX2013002657A patent/MX347190B/es active IP Right Grant
- 2011-09-20 WO PCT/EP2011/066293 patent/WO2012038410A1/en not_active Ceased
- 2011-09-20 US US13/825,317 patent/US9371355B2/en active Active
- 2011-09-20 EP EP11757875.7A patent/EP2619225B1/en active Active
- 2011-09-20 ES ES11757875.7T patent/ES2586698T3/es active Active
- 2011-09-20 KR KR1020137005728A patent/KR20130112031A/ko not_active Withdrawn
- 2011-09-20 RU RU2013118323/10A patent/RU2603103C2/ru active
- 2011-09-20 BR BR112013006384-0A patent/BR112013006384B1/pt active IP Right Grant
-
2016
- 2016-05-25 US US15/164,736 patent/US9938318B2/en active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4278594A (en) * | 1979-06-19 | 1981-07-14 | David Amrani | Process for separation and isolation of AHF, von Willebrand's ristocetin cofactor (VWF:RCF) and fibronectin from blood plasma |
| EP0555135B1 (fr) * | 1992-02-04 | 1996-08-14 | Association D'aquitaine Pour Le Developpement De La Transfusion Sanguine Et Des Recherches Hematologiques | Procédé de fabrication de fibrinogène de très haute pureté |
| US5834420A (en) * | 1994-07-14 | 1998-11-10 | Croix-Rouge De Belgique | Fibrinogen concentrate obtained from blood plasma, process and plant for its preparation |
| US6037457A (en) * | 1997-01-31 | 2000-03-14 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Method for recombinant fibrinogen production |
| US6468733B2 (en) * | 2000-06-05 | 2002-10-22 | Omrix Biopharmaceuticals Inc. | Method of the inactivation of viruses by a solvent-detergent combination and nanofiltration |
| RU2008130356A (ru) * | 2001-05-21 | 2010-01-27 | Омрикс Биофармасьютикалс С.А. (Be) | Удаление плазмин(оген)а из белковых растворов |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| "Toyopearl GigaCap Q-650 resin", Tosoh Bioscience LLC: The Chemistry of Innovation, 24.02.2010, Найдено в Интернет [27.07.15]. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| BR112013006384A2 (pt) | 2017-07-18 |
| EP2619225A1 (en) | 2013-07-31 |
| US9371355B2 (en) | 2016-06-21 |
| ES2586698T3 (es) | 2016-10-18 |
| KR20130112031A (ko) | 2013-10-11 |
| CN106046147B (zh) | 2019-11-19 |
| US9938318B2 (en) | 2018-04-10 |
| BR112013006384B1 (pt) | 2021-12-07 |
| US20160264619A1 (en) | 2016-09-15 |
| CN106046147A (zh) | 2016-10-26 |
| JP2013537215A (ja) | 2013-09-30 |
| RU2013118323A (ru) | 2014-10-27 |
| WO2012038410A1 (en) | 2012-03-29 |
| MX2013002657A (es) | 2013-04-08 |
| EP2619225B1 (en) | 2016-06-15 |
| US20130274444A1 (en) | 2013-10-17 |
| AU2011304364B2 (en) | 2015-07-09 |
| CN103328503B (zh) | 2016-08-24 |
| AU2011304364A1 (en) | 2013-01-31 |
| CN103328503A (zh) | 2013-09-25 |
| CA2809471A1 (en) | 2012-03-29 |
| MX347190B (es) | 2017-04-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2603103C2 (ru) | Способ получения фибриногена с использованием сильной анионообменной смолы и содержащий фибриноген продукт | |
| US11401300B2 (en) | Process for production of fibrinogen and fibrinogen produced thereby | |
| JP2013047273A (ja) | 可溶化血漿フラクションから蛋白質フィブリノーゲン、第ｘｉｉｉ因子および生物学的グルーを分離し、そして該蛋白質の凍結乾燥濃縮物を調製するための方法 | |
| AU2003244850B2 (en) | Processes for the preparation of fibrinogen | |
| NO324659B1 (no) | Utvinning av von Willebrand-faktor ved kationebytterkromatografi samt preparat inneholdende slik faktor og anvendelse derav. | |
| JP4272562B2 (ja) | フィブリノゲン溶液中のウイルスを除去する方法およびこの方法により得られるフィブリノゲン | |
| ES2237854T5 (es) | Procedimiento para la preparación mediante filtración de una solución de factor VIII víricamente segura | |
| CN109071596B (zh) | 用于纯化纤维蛋白原的方法 | |
| JP2025512143A (ja) | 酸化ケイ素吸着を使用する血漿からのｆｖｉｉｉの精製 | |
| JPWO2000061633A1 (ja) | 血液凝固第ｖｉｉｉ因子および血液凝固第ｖｉｉｉ因子／フォン・ビルブラント因子複合体の精製方法 |