RU2550969C2 - Способ улучшения биоактивации лекарственных веществ - Google Patents

Способ улучшения биоактивации лекарственных веществ Download PDF

Info

Publication number
RU2550969C2
RU2550969C2 RU2011133233/15A RU2011133233A RU2550969C2 RU 2550969 C2 RU2550969 C2 RU 2550969C2 RU 2011133233/15 A RU2011133233/15 A RU 2011133233/15A RU 2011133233 A RU2011133233 A RU 2011133233A RU 2550969 C2 RU2550969 C2 RU 2550969C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
prodrug
hydrochloride
drug substance
optionally substituted
fragment
Prior art date
Application number
RU2011133233/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2011133233A (ru
Inventor
Бернд КЛЕМЕНТ
Деннис ШАДЕ
Original Assignee
Дритте Патентпортфолио Бетайлигунгсгезелльшафт Мбх Унд Ко. Кг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дритте Патентпортфолио Бетайлигунгсгезелльшафт Мбх Унд Ко. Кг filed Critical Дритте Патентпортфолио Бетайлигунгсгезелльшафт Мбх Унд Ко. Кг
Publication of RU2011133233A publication Critical patent/RU2011133233A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2550969C2 publication Critical patent/RU2550969C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/18—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/02—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having etherified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C07C257/18—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines having carbon atoms of amidino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C259/00—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C259/12—Compounds containing carboxyl groups, an oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a nitrogen atom, this nitrogen atom being further bound to an oxygen atom and not being part of nitro or nitroso groups with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. N-hydroxyamidines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
    • C07D309/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D309/28—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к фармацевтике. Описано пролекарство, содержащее фрагмент структуры общей формулы (IIa) или (IIb). Пролекарство метаболизируется в лекарственное вещество по пути, не зависящему от фермента цитохром-P450 (CYP450). Также описан способ лечения и способ получения N-алкоксигуанидина. Технический результат обеспечивается применением пролекарства для улучшения фармакокинетических свойств лекарственного вещества. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

Description

Настоящее изобретение относится к способу улучшения биоактивации лекарственных веществ.
Условием терапевтического эффекта лекарственного вещества после перорального введения является его всасывание из желудочно-кишечного тракта. Важнейшим механизмом такого эффекта является пассивная диффузия. Степень резорбции на пути пассивной диффузии зависит, кроме прочего, от липофилии.
Следующей проблемой при медикаментозном лечении многих болезней является необходимость прохождения гематоэнцефалического барьера. Гематоэнцефалический барьер является эффективным барьером в отношении поглощения веществ в головном мозге. Он обеспечивает избирательное поглощение и препятствует проникновению веществ. Кроме того, гематоэнцефалический барьер действует не только как физический, но и как ферментантивный барьер. В пенетрации веществ в мозг задействованы различные процессы. В продаже имеется мало, по сравнению с другими показаниями, лекарственных средств, которые предназначены для воздействия на центральную нервную систему (ЦНС). Из них преобладающая часть попадает в ЦНС путем диффузии. Таким способом лечат такие болезни как эпилепсия, хронические боли или депрессии. Другие имеющие большое значение функциональные расстройства, как, например, опухоли мозга или боковой амиотрофический склероз, в настоящее время плохо лечатся таким способом.
Чтобы быть способным преодолеть биомембраны пассивной диффузией, вещество должно быть липофильным, иметь молекулярный вес меньше 500 Да, и оно должно быть незаряженным. Чтобы специфично поглощать маленькие сильно полярные молекулы, как аминокислоты или сахар, в биомембранах с барьерной функцией (желудочно-кишечный тракт, гематоэнцефалический барьер) экспрессируются различные транспортные системы, как, например, транспортер нуклеозида, транспортер притока и истечения для органических анионов или катионов, транспортер глюкозы, транспортер пептидов и транспортер аминокислот.
Поэтому для улучшения фармакокинетических свойств привлекаются различные системы пролекарств. Под пролекарством имеется в виду фармакологически неактивное или очень малоактивное лекарственное вещество, которое переходит в активный метаболит только после метаболизации в организме.
N-гидроксиамидины (амидоксимы) и N-гидроксигуанидины представляют собой известные концепции пролекарств для повышении я пероральной биодоступности амидинов [Clement, B. Способы лечения и профилактики пневмонии Pneumocystis carinii (PCP) и других заболеваний, а также соединения и композиции для применения в указанных способах. [DE 4321444]] и гуанидинов. Так как атомы азота амино- и иминогруппы находятся в солях амидинов и гуанидинов в мезомерном равновесии, эти идеи могут применяться к обоим атомам азота.
Преобразование в активный метаболит протекает при этом, в зависимости от принципа, лежащего в основе пролекарства, через различные ферментные системы. Ферментной системой, имеющейся практически во всех формах жизни, является цитохром-P450 (CYP450), который, наряду с прочими, катализирует следующие реакции:
N-окисление, S-окисление, N-дезалкилирование, O-дезалкилирование, S-дезалкилирование, дезаминирование, дегалогенирование, а также гидроксилирование ароматических и алифатических соединений.
Разносторонность ферментной системы CYP450 влечет за собой то, что различные субстраты и лекарственные средства конкурируют при их превращении в систему. Происходят интеракции, взаимодействия и нежелательные взаимные влияния. Поэтому при разработке пролекарств стремятся к биоактивации, не зависящей от CYP450.
Поэтому задачей изобретения является создать пролекарственную систему, использующую способ биоактивации, который не зависит от фермента цитохром-P450 (CYP450). Настоящее изобретение, охарактеризованное в формуле изобретения, позволяет решить эту задачу. Зависимые пункты указывают предпочтительные формы осуществления изобретения.
Согласно изобретению, в первом аспекте задача решена обеспечением пролекарства, содержащего фрагмент структуры, имеющий общую формулу (I) или (II)
Figure 00000001
причем R1 и R2 означают водород, алкильный или арильный остаток.
В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения термин "фрагмент структуры", как он применяется здесь, означает, что структурный элемент, задаваемый соответствующей формулой, является частью формулы вещества, предпочтительно пролекарства. Например, соединение O-карбоксиметилбензамидоксим (1) является соответствующим пролекарством лекарственного вещества бензамидин, причем фрагмент структуры является фрагментом структуры формулы (II), и каждый из R1 и R2 является атомом водорода. Этот фрагмент структуры является заместителем у бензольного кольца и вместе с ним представляет лекарственное вещество бензамидин.
В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения термин "пролекарство", как он используется здесь, означает вещество, которое само по себе является неактивным или лишь очень фармакологически малоактивным веществом, которое лишь в результате обмена веществ (метаболизации) в организме переходит в фармакологически активное лекарственное вещество. Пролекарство может, но не обязательно, иметь лучшую пероральную биодоступность, чем собственно активно-действующее лекарственное вещество. Альтернативно, пролекарство может применяться, если оно по сравнению с лекарственным веществом имеет лучшую растворимость, биоактивацию, проходимость гематоэнцефалического барьера, физико-химическую стабильность, меньшую токсичность и/или допустимый или приятный вкус. Так, 2'-этилсукцинат из эритромицина A назначается детям как пролекарство только из-за горького вкуса эритромицина A, а не из-за его недостаточной резорбции или растворимости (Bhadra et al. (2005), J. Med. Chem.).
В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения изначальное пролекарство метаболизируется из пролекарства в лекарственное вещество не в одностадийной реакции, а через несколько реакционных стадий, причем каждый метаболит, образованный на реакционной стадии, может иметь одно или несколько одинаковых и/или разных выгодных свойств по сравнению с исходным пролекарством. При этом возможно, что не все метаболиты имеют выгодные свойства по сравнению с пролекарством. Например, первый продукт метаболизма пролекарства может иметь более высокую фармакологическую активность, чем пролекарство, второй продукт метаболизма, полученный из первого продукта метаболизма, также может иметь повышенную фармакологическую активность по сравнению с пролекарством, а третий продукт метаболизма, произведенный из второго продукта метаболизма, может иметь повышенные по сравнению с пролекарством проходимость гематоэнцефалического барьера и физико-химическую стабильность.
В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения под термином "физико-химическая стабильность", как он используется здесь, понимается способность вещества, например, пролекарства или лекарственного вещества, храниться и/или применяться в форме релевантного водного раствора, например, растворенного в воде, буфере или физиологическом растворе поваренной соли, без химического разложения, например, гидролиза. В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения это понятие, как оно используется здесь, означает, что вещество может быть синтезировано в стабильной и синтетической форме. В следующем предпочтительном варианте осуществления изобретения это понятие, как оно используется здесь, означает, что при синтезе вещества отдельные, релевантные стадии синтеза более стабильны по сравнению с аналогичными продуктами, предшественниками или промежуточными продуктами в случае других веществ, которые были получены по аналогичной или такой же стратегии синтеза, настолько, что продукты или промежуточные продукты последующего синтеза получены в более стабильной форме или вообще могут быть получены только так.
В одном варианте осуществления задача решена путем предоставления пролекарства, отличающегося тем, что фрагмент структуры, входящий в пролекарство, является элементом гидроксиламина, N-оксида, нитрона, диазенийдиолята (NONOат) или подобного Ν-O-содержащего донора моноксида азота; гидроксамовой кислоты, гидроксимочевины, оксима, амидоксима (N-гидроксиамидина), N-гидроксиамидиногидразона или N-гидроксигуанидина.
Например, в случае, когда карбоксиметилбензамидоксим (1) является пролекарством лекарственного вещества бензамидин, фрагмент структуры является фрагментом структуры формулы (II), и каждый из R1 и R2 означает атом водорода, а имеющийся в пролекарстве фрагмент структуры является элементом амидоксима (Ν-гидроксиамидина).
В одном варианте осуществления задача решена предоставлением пролекарства, отличающегося тем, что пролекарство метаболизируется с образованием лекарственного вещества, которое является лекарственным веществом для лечения заболевания, вызванного дефицитом моноксида азота.
В одном варианте осуществления задача решена предоставлением пролекарства, отличающегося тем, что пролекарство или соответствующее лекарственное вещество выбрано из группы, которая содержит ингибиторы протеазы, интеркалирующие ДНК и РНК соединения, ингибиторы вирусных ферментов и антагонисты рецептора N-метил-D-аспартата.
В одном предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения понятие "фрагмент структуры более высокого уровня", как он используется здесь, следует понимать так, что этот фрагмент структуры более высокого уровня, с одной стороны, включает в себя фрагмент структуры формулы (I) или (II), а с другой стороны является частью полной структуры соответствующего вещества. Например, в случае, когда предшественником лекарственного вещества бензамидин (2) является пролекарство карбоксиметилбензамидоксим (1), фрагмент структуры более высокого уровня, обозначенный здесь (1a), является фрагментом структуры формулы (IIa), в которой R1 и R2 означают водород, а фрагмент структуры, обозначенный здесь (1b), является фрагментом структуры формулы (II), причем R1 и R2 также означают водород.
Figure 00000002
В одном варианте осуществления задача решена предоставлением пролекарства, отличающегося тем, что фрагмент структуры имеет общую формулу IIa или IIb.
Figure 00000003
Например, в случае карбоксиметилбензамидоксима (1), являющегося пролекарством лекарственного вещества бензамидин, вышеуказанный фрагмент структуры является фрагментом структуры формулы (IIa), в которой R1 и R2 означают водород, тогда фрагмент структуры является фрагментом структуры формулы (II), причем R1 и R2 также означают водород, и лекарственное вещество вместо фрагмента структуры формулы (IIa) в пролекарстве имеет структуру (IIa-1).
В одном варианте осуществления изобретения задача решается предоставлением пролекарства, отличающегося тем, что пролекарство является предшественником лекарственного вещества, причем фрагмент структуры общей формулы IIa после метаболизации имеет структуру, отвечающую формуле
Figure 00000004
,
а фрагмент структуры общей формулы IIb после метаболизации имеет структуру, отвечающую формуле
Figure 00000005
.
В следующем аспекте изобретения задача решена применением фрагмента структуры, имеющего общую формулу (I) или (II)
Figure 00000006
,
в качестве компонента полной структуры пролекарства, причем это пролекарство является предшественником лекарственного вещества, причем R1 и R2 означают водород, алкильный или арильный остаток.
В одном варианте осуществления задача решена применением пролекарства, причем фрагмент структуры имеет общую формулу (II) и является частью фрагмента структуры более высокого уровня, IIa или IIb,
Figure 00000007
в качестве замены амидиновой или гуанидиновой группы лекарственного вещества для улучшения растворимости, пероральной биодоступности, проходимости гематоэнцефалического барьера, вкуса и/или физико-химической стабильности.
В одном варианте осуществления задача решена применением пролекарства, причем пролекарство является предшественником лекарственного вещества, имеющего такую же структуру, что и пролекарство, за исключением того, что оно вместо фрагмента структуры более высокого уровня, IIa, содержит фрагмент структуры IIa-1 или IIa-2,
Figure 00000004
или вместо фрагмента структуры более высокого уровня, IIb, имеет фрагмент структуры IIb-1 или IIb-2.
Figure 00000005
В одном варианте осуществления задача решена применением пролекарства для активации лекарственного вещества посредством пептидилглицин-α-амидирующей монооксигеназы (PAM).
В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения термин "активация пролекарства посредством пептидилглицин-α-амидирующей монооксигеназы (PAM)", "активация пролекарства способом PAM-активации", биоактивация или подобное, как это используется здесь, означает, что пролекарство распознается PAM как субстрат и метаболизируется. В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения выражение "введение лекарственного вещества в путь PAM-активации, включающий в себя получение пролекарства лекарственного вещества", как оно используется здесь, понимается, что из вводимого в путь PAM-активации лекарственного вещества получена соответствующая пролекарственная форма, которая распознается PAM и метаболизируется. В одном предпочтительном варианте осуществления сродство пролекарства к PAM, как может определить специалист с помощью значений KM, в 1-1000 раз, в 2-100 раз, в 3-50 раз, в 4-40 раз, в 5-20 раз или в 6-15 раз выше, чем сродство к лекарственному веществу.
В одном варианте осуществления задача решена за счет применения пролекарства, отличающегося тем, что фрагмент структуры является элементом гидроксиламина, N-оксида, нитрона, диазенийдиолята (NONOат) или подобного N-O-содержащего донора моноксида азота; гидроксамовой кислоты, гидроксимочевины, оксима, амидоксима (N-гидроксиамидина), N-гидроксиамидиногидразона или N-гидроксигуанидина.
В следующем аспекте изобретения задача решена способом введения лекарственного вещества, содержащего свободную амидиновую или гуанидиновую функциональную группу, в путь PAM-активации, содержащим получение пролекарства лекарственного вещества.
В следующем аспекте изобретения задача решена способом лечения пациента, включающим введение пациенту пролекарства.
В следующем аспекте изобретения задача решена путем применения пролекарства для получения лекарственного вещества.
В одном предпочтительном варианте осуществления изобретения лекарственное вещество является лекарственным веществом, соответственно пролекарство является пролекарством для борьбы с вирусными инфекциями, как грипп, для борьбы с ВИЧ-инфекцией, для профилактики и лечения висцерального и кожного лейшманиоза, для профилактики пневмонии, вызванной Pneumocystis carinii (PcP), для лечения трипаносомоза (африканской сонной болезни), для лечения малярии, для лечения бабезиоза, для подавления свертывания крови, например, для первичной профилактики венозных тромбоэмболических осложнений, для профилактики апоплексии у пациентов с мерцанием предсердий, для снижения кровяного давления, для подавления роста злокачественных опухолей, для нейропротекции, для борьбы с вирусными инфекциями, как грипп, для (с точки зрения диуретики) вымывания воды из тела, например, при сердечной недостаточности, отеке легких, отравлениях, почечной недостаточности или циррозе печени, для лечения аллергии, для лечения астмы, для лечения воспалительных заболеваний, например ревматизма или панкреатита, для профилактики ишемии (недостаточное кровоснабжение).
В следующем аспекте изобретения задача решена путем применения пролекарства по одному из пп.7-11 и п.14 или способом по п.13 формулы изобретения, причем применение или способ являются применением, соответственно способом лечения заболеваний, вызванных дефицитом моноксида азота.
В одном варианте осуществления задача решена путем применения пролекарства, отличающегося тем, что лекарственное вещество или пролекарство выбраны из группы ингибиторов протеазы, соединений, интеркалирующих ДНК и РНК, ингибиторов вирусных ферментов и антагонистов рецептора N-метил-D-аспартата.
В одном варианте осуществления задача решена путем применения пролекарства, причем применение означает применение для профилактики и/или лечения висцерального и/или кожного лейшманиоза, трипаносомоза, трипаносомоза второй стадии или пневмонии, вызванной Pneumocystis carinii, для подавления роста злокачественных опухолей, для подавления свертывания крови, для снижения кровяного давления, для нейропротекции или для борьбы с вирусными инфекциями, включая грипп и ВИЧ-инфекции.
В следующем аспекте изобретения задача решена лекарственным веществом с фрагментом структуры, имеющим общую формулу (I) или (II)
Figure 00000008
причем R1 и R2 означают водород, алкильный или арильный остаток.
В одном варианте осуществления задача решена лекарственным веществом с фрагментом структуры, имеющим общую формулу (I) или (II), отличающимся тем, что фрагмент структуры является элементом гидроксиламина, N-оксида, нитрона, диазенийдиолята (NONOат) или подобных, N-O-содержащих доноров моноксида азота; гидроксамовой кислоты, гидроксимочевины, оксима, амидоксима (N-гидроксиамидина), N-гидроксиамидиногидразона или N-гидроксигуанидина.
В одном варианте осуществления задача решена лекарственным веществом по одному из предыдущих пунктов, отличающимся тем, что лекарственное вещество подходит для лечения заболеваний, связанных с дефицитом моноксида азота.
В одном варианте осуществления задача решена лекарственным веществом, отличающимся тем, что лекарственное вещество выбрано из группы ингибиторов протеазы, соединений, интеркалирующих ДНК и РНК, ингибиторов вирусных ферментов и антагонистов рецептора N-метил-D-аспартата.
В следующем аспекте изобретения задача решена применением O-карбоксиалкилированной функциональной группы, содержащей N-O, для получения лекарственного вещества с фрагментом структуры, имеющим общую формулу (I) или (II)
Figure 00000009
причем R1 и R2 означают водород, алкильный или арильный остаток, для улучшения растворимости, биодоступности, проходимости гематоэнцефалического барьера, биоактивации и/или физико-химической стабильности лекарственного вещества.
В одном варианте осуществления задача решена применением лекарственного вещества с O-карбоксиалкилированной N-O-содержащей функциональной группой для активации лекарственного вещества посредством пептидилглицин-α-амидирующей монооксигеназы (PAM).
В одном варианте осуществления задача решена применением лекарственного вещества, отличающимся тем, что фрагмент структуры является элементом гидроксиламина, N-оксида, нитрона, диазенийдиолята (NONOат) или подобного, N-O-содержащего донора моноксида азота; гидроксамовой кислоты, гидроксимочевины, оксима, амидоксима (N-гидроксиамидина), N-гидроксиамидиногидразона или N-гидроксигуанидина.
В одном варианте осуществления задача решена применением лекарственного вещества, отличающимся тем, что лекарственное вещество подходит для лечения заболеваний, связанных с дефицитом моноксида азота.
В одном варианте осуществления задача решена применением лекарственного вещества, отличающимся тем, что лекарственное вещество выбрано из группы ингибиторов протеазы, соединений, интеркалирующих ДНК и РНК, ингибиторов вирусных ферментов и антагонистов рецептора N-метил-D-аспартата.
В одном варианте осуществления задача решена применением лекарственного вещества, отличающимся тем, что лекарственное вещество подходит для профилактики и/или лечения висцерального и/или кожного лейшманиоза, трипаносомоза, трипаносомоза второй стадии или пневмонии, вызванной Pneumocystis carinii, для подавления роста злокачественных опухолей, для подавления свертывания крови, для снижения кровяного давления, для нейропротекции или для борьбы с вирусными инфекциями, включая грипп и ВИЧ-инфекции.
В следующем аспекте изобретения даются фармацевтические соединения, фармацевтические композиции и лекарственные средства, которые содержат соединения согласно изобретению и/или их соли. Предпочтительно, фармацевтические композиции содержат носители и/или вспомогательные вещества и идеально совместимы фармацевтически. Подобные носители и вспомогательные вещества специалисту общеизвестны. Предоставляются также соединения согласно изобретению для применения в медицине.
Достаточно, если лекарственное вещество содержит по меньшей мере одну или несколько активных амидиновых, N-гидроксиамидиновых (амидоксим), гуанидиновых или N-гидроксигуанидиновых функциональных групп в предложенной форме. Соответственно, лекарственное вещество может содержать, например, несколько амидоксимовых функциональных групп (например, две, как в случае пентоксимового эфира) или N-гидроксигуанидиновых функциональных групп, причем тогда по меньшей мере одна из этих групп модифицирована вышеописанным способом. Могут также применяться смеси лекарственных веществ, из которых по меньшей мере одно модифицировано согласно изобретению.
Прием соединения согласно изобретению может проводиться однократно как прием болюса, ежедневно, еженедельно или ежемесячно. Способ введения также легко определить. В принципе, подходят пероральное, ректальное, парентеральное, как внутривенное, внутримышечное, подкожное, чрескожное введение, внутрилегочное введение, а также прием в виде аэрозоля, внутрипузырного капельного введения, внутрибрюшинных или внутрисердечных инъекций, впитывание через слизистую оболочку или интравагинальное введение, например, посредством суппозиториев. Пероральная форма применения может быть выполнена как жидкая, полутвердая или твердая готовая форма, в частности, как таблетка, драже, гранула или микрокапсула. При этом для таких форм осуществления, в которых применяются жидкие готовые формы, активное вещество или смесь активных веществ введены в подходящий, нетоксичный растворитель, как, например, вода, одноатомные спирты, в частности этанол, многоатомные спирты, в частности глицерин и/или пропандиол, полигликоли, в частности полиэтиленгликоли и/или миглиол, глицеринформаль, диметилизосорбит, натуральные или синтетические масла. Для получения полутвердых или твердых готовых форм подходят обычные основы, как, например, бентонит, вигум, гуаровая мука и/или производные целлюлозы, в частности метилцеллюлоза и/или карбоксиметилцеллюлоза, а также полимеры из виниловых спиртов и/или винилпирролидонов, альгинаты, пектины, полиакрилаты, твердые и/или жидкие полиэтиленгликоли, парафины, жирные спирты, вазелины и/или воски, жирные кислоты и/или сложные эфиры жирных кислот.
Кроме того, в твердых готовых формах могут содержаться известные наполнители, такие, например, как коллоидная кремниевая кислота, тальк, молочный сахар, крахмальный порошок, сахар, желатин, оксиды металлов и/или соли металлов. В качестве дальнейших добавок подходят стабилизаторы, эмульгаторы, диспергаторы, а также консерванты.
Неожиданно оказалось, что O-карбоксиалкилированные, N-O-содержащие функциональные группы общей формулы (I) или (II), которые через соединение с азотом (N) связываются с молекулой лекарственного вещества,
Figure 00000010
причем (I) и (II) могут являться, например, элементом гидроксиламина, N-оксида, нитрона, диазенийдиолята (NONOат) или аналогичного, N-O-содержащего донора моноксида азота; гидроксамовой кислоты, оксима, амидоксима (N-гидроксиамидина), N-гидроксиамидиногидразона или N-гидроксигуанидина, и R1 (который должен быть в конфигурации pro-R) и R2 могут означать водород, алкильный или арильный остаток, использует путь биоактивации, который не зависит от фермента цитохром P450 (CYP450). Это является неожиданным результатом, так как известно, что фермент CYP450, вообще говоря, катализирует окислительное O-дезалкилирование, которое также потребовалось бы в предлагаемой здесь концепции пролекарства, чтобы выделить собственно лекарственное вещество.
Предложенная переэтерификация Ν-O-содержащих функциональных групп с карбоксиалкильными остатками дает то особое преимущество, что для биоактивации может использоваться другой фермент, отличный от фермента CYP450, а именно, пептидилглицин-α-амидирующая монооксигеназа (PAM). Благодаря этому можно, например, избежать побочных эффектов и обсужденных выше взаимодействий с другими, одновременно принимаемыми лекарственными веществами.
Пептидилглицин-α-амидирующая монооксигеназа (PAM) является в высших организмах (позвоночных) бифункциональным ферментом, который состоит из домена монооксигеназы (PHM, пептидилглицин-α-гидроксилирующая монооксигеназа, EC 1.14.17.3) и домена лиазы (PAL, пептидил-α-гидроксиглицин α-амидирующая лиаза, EC 4.3.2.5). В совокупности, PAM подвергается сильно тканеспецифической и зависящей от разработки регуляции через сплайсинг и экспрессию. Что касается пост-трансляционной модификации, PAM способна активировать различные пептидные гормоны физиологического происхождения, медиаторы и факторы роста (например, вещество P, нейропептид Y, окситоцин, вазопрессин, кальцитонин). При этом пептиды амидируются C-терминально тем, что концевой глицин отщепляется в результате окислительного N-дезалкилирования в реакции монооксигеназы.
Особым преимуществом предлагаемой согласно изобретению переэферификации Ν-O-содержащей функциональной группы карбоксиалкильными остатками является улучшение растворимости благодаря введению карбоновой кислоты, отрицательно заряженной в физиологических условиях (pH 6-8).
Следующее преимущество обусловлено тем, что благодаря предлагаемой согласно изобретению переэтерификации N-O-содержащих функциональных групп (при использовании (алкоксикарбонил)алкиловых эфиров или (арилоксикарбонил)алкиловых эфиров) липофилия повышается настолько, что становится возможной пассивная диффузия и тем самым улучшается биодоступность и/или проходимость гематоэнцефалического барьера.
При этом преимуществом является также возможность использовать сравнительно малый остаток, в простейшем случае карбоксиметильный остаток, как пролекарственную группу, так что размер молекулы лекарственного вещества увеличивается лишь незначительно.
Wand et al. [Metabolism 1985, 34, 11, 1044] исследовали активность PAM в различных тканях человека и обнаружили наивысшую активность в тканях ЦНС (прежде всего в гипофизе). Напротив, в классических метаболизирующих посторонние вещества органах: печени и почках не было установлено никакой активности. В плазме, сердце и легких также была обнаружена активность, которая могла использоваться для предполагаемой концепции пролекарства.
В частности, высокую активность этого фермента в ЦНС можно использовать, чтобы транспортировать O-карбоксиалкилированное пролекарство через гематоэнцефалический барьер, которое затем можно преобразовать. Но возможна также и биоактивация в сердечно-сосудистой системе после перорального введения и поглощения из желудочно-кишечного тракта.
При этом пролекарственная система согласно изобретению позволяет применение на разных лекарственных веществах, которые содержат амидиновую или гуанидиновую группу. Особенно предпочтительны при этом следующие лекарственные вещества:
пентамидин, дабигатран, BSF 411693 (Abbott), идазоксан гидрохлорид, ирбесартан, линоглирид, лофексидин гидрохлорид, тетрагидрозолин гидрохлорид, толазолин, ксилометазолин гидрохлорид, пентамидин изетионат, тарибавирин, тиамин (витамин B1), бозентан, дибромпропамидин изетионат, гидроксистильбамидин изетионат, сибрафибан, орбофибан, ксемилофибан, аргатробан, ксимелагатран, мелагатран, 2-пиперидиновая кислота, орбофибанацетат, эпинастин (релестат), RO 43-8857, AB1 (хлорамбицил, аналоги), AMG-126737, AY-0068, B-623, BABIM, BIBT-986 (Boehringer Ingelheim), CI-1031 (фирма Biosciences)), CJ-1332 (фирма Curacyte), CJ-463 (фирма Curacyte), CJ-672 (фирма Curacyte), CT50728 (Portolla Pharmaceuticals), CVS-3983, DX-9065a, ламифибан (Roche), LB-30870 (фирма LG LifeSciences Ltd), LY-178550 (фирма Lilly), PHA-927F и аналоги, RO-44-3888 (Roche), сепимостат, FUT-187 (Torii), вирамидин (Ribapharm), WX-FX4 (Wilex), YM-60828 (Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd), ZK-807191 (Berlex Biosciences), NAPAP (SR 25477), BIIL 315 (Boehringer Ingelheim), BIIL 260 (Boehringer Ingelheim), BIIL 284/260 (Boehringer Ingelheim), таногитран, моксилубант, стильбамидин, панамидин, фрадафибан, диминацен, роксифибан, фурамидин, PD0313052, PHA 927F, PHA 798, фидексабан, отамиксабан, тромстоп (тромбостоп), занамивир, амилоридгидрохлорид, анагрелидгидрохлорид, прогуанил, циметидин, клонидин гидрохлорида, гуанокса, перамивир, ромифидин, тирапазамин, тизанидин, толонидин нитрат, метмофин, диминазен, дебризоквин, сульфаметазин, эптифибатид, фамотидин (Bayer-Arzneistoff), стрептомицин, нафамостат, FUT-175, иногатран, гуанетидин (тилодигон), 3DP-10017, APC-366, CVS-1123, производное дифенилфосфоната, E-64, FOY-305, MBGB, MIBG, RWJ-422521, синталин, WX-293, WX-340, BMS-189090, JTV-803, (Japan Tabacco), напсагатран, исмелин, Tan 1057A, хидикал, фенформикс (Retardo), нетропсин (синаномицин), BIIB 722 (сабипорид), гуанадрел, деоксиспергуалин, BMS 262084, сиамформет (Orabet), PPACK (Pebac), MERGETPA (ингибитор карбоксипетидазы Пламмера), перамивир, фамотидин, залтидин.
В приложении находится таблица с химическими формулами, номерами по CAS и показаниями для лекарственных веществ.
Далее в качестве примера показано 4 пролекарства согласно изобретению:
Figure 00000011
карбоксиэтокси-предшественник занамивира
Figure 00000012
карбоксиметокси-предшественник занамивира
Figure 00000013
бис(карбоксиметокси)-предшественник пентамидина
Figure 00000014
Карбоксиметилбензамидоксим.
Неожиданное открытие, что в качестве субстратов для PAM допустимы также непептидные O-карбоксиалкилированные N-O-содержащие функциональные группы, демонстрируется в примерах осуществления на модельных соединениях, основанных на амидоксиме и N-гидроксигуанидине.
В качестве модельного соединения для амидоксима тестировался O-карбоксиметилбензамидоксим (1) на его свойства как субстрата для PAM. O-карбоксиметилбензамидоксим является возможным предшественником лекарственного вещества бензамидин. Катализируемая PAM биоактивация O-карбоксиметилбензамидоксима (1) с получением бензамидоксима (2) протекает с одновременным выделением глиоксалевой кислоты.
Figure 00000015
На фигуре 1 показаны результаты колориметрического определения образования глиоксилата. Определенные концентрации глиоксилата являются средними значениями ± стандартное отклонение по двум инкубациям, каждая из которых измерялась дважды. Образование глиоксилата как продукта отщепления PAM-каталазы из соединения 1 можно подтвердить концентрационно-зависимым способом. Инкубации при оптимальном pH PAM (pH 6,0) приводят к заметно более высоким конверсиям по сравнению с инкубацией при pH 7,4. В колориметрическом испытании проводилась 5-точечная калибровка глиоксилата параллельно испытанию соединения 1. Калибровка в измеренной области концентраций была линейной (r2=1,000).
Так как O-карбоксиметилбензамидоксим (1) согласно этим результатам признан как субстрат для PAM, реакцию более точно характеризовали через определение значений KM и Vmax.
Для этой цели была разработана методика ВЭЖХ-анализа. Калибровочная прямая для бензамидоксима была в исследуемой области концентраций линейной (r2=1,000), и степень повторного обнаружения составляла 130,6% (r2=0,999). Из двух независимых экспериментов (n=2) получено значение KM=307±80 мкМ и значение Vmax=393±40 нмоль/мин/мг PAM. На фигуре 2 такое определение представлено репрезентативно.
Для изучения субстрата CYP450 вышеуказанный метод ВЭЖХ-анализа был изменен таким образом, чтобы дополнительно можно было детектировать возможные метаболиты бензамидина, как продукт N-восстановления бензамидоксима (2). При pH 6,0, а также pH 7,4 ни с одним из использованных источников фермента CYP450 не удалось обнаружить ни бензамидоксима (возможный предшественник бензамидина), ни бензамидина.
На основе соединения 1, моделирующего бензамидоксим, в рамках реакции монооксигеназы O-карбоксиметильная группа удаляется только из PAM, но не из цитохрома P450.
В качестве модельного соединения для гидроксигуанидина испытывали N-карбоксиметокси-N',N"-дифенилгуанидин (3) на его свойства как субстрата PAM.
Figure 00000016
Катализируемая PAM биоактивация N-карбоксиметокси-N',N"-дифенилгуанидина (3) в N,N'-дифенил-N"-гидроксигуанидин (4) протекает с одновременным выделением глиоксалевой кислоты.
Результаты колориметрического испытания с соединением 3 были сравнимы с результатами для моделирующего амидоксим соединения 1. Таким образом, для определения значений KM и Vmax была разработана методика ВЭЖХ-анализа, которая способна разделить пролекарство 3 и гидроксигуанидин 4 на RP-колонке в пределах 15 минут. Калибровочная прямая для N,N'-дифенил-N"-гидроксигуанидина (4) была в измеренной области концентраций линейной (r2=0,999), и степень повторного обнаружения составляла 111,7% (r2=0,999). Из двух независимых экспериментов (n=2) получилось значение KM=37±5 мкМ и значение Vmax=373±53 мкмоль/мин/мг PAM. На фигуре 3 такое определение представлено репрезентативно.
Из установленного значения KM можно сделать вывод о в 8 раз более высоком сродстве к PAM по сравнению с амидоксимовым пролекарством 1, тогда как степени превращения сравнимы.
Для изучения субстрата CYP450 разработанная для изучения PAM методика ВЭЖХ-анализа была изменена таким образом, чтобы дополнительно можно было детектировать возможные метаболиты N,N'-дифенилгуанидина как продукта N-восстановления гидроксигуанидина 4. При pH 6,0, а также pH 7,4 ни с одним из использованных источников фермента CYP450 не удалось после 180 минут инкубации обнаружить ни соединения 4, ни N,N'-дифенилгуанидина.
По аналогии с O-карбоксиметилбензамидоксимом (1) на основе моделирующего гидроксигуанидин соединения 3 в рамках реакции монооксигеназы O-карбоксиметильная группа удалялась только из PAM, но не из цитохрома P450.
Материал и методы
Натриевая соль O-карбоксиметилбензамидоксима, моногидрат (1)
Модифицированный предшественник согласно Koch [Ber. Dtsch. Chem. Ges. 1889, 22, 3161]:
Figure 00000017
Раствор 681 мг бензамидоксима (5,0 ммоль), 1,04 г бромуксусной кислоты (7,5 ммоль) и 500 мг таблеток едкого натра (12,5 ммоль) в 5 мл этанола кипятили 5 часов с обратным холодильником. Затем растворитель удаляли в вакууме до тех пор, пока не начинал образовываться осадок. Это осадок оставляли до полного осаждения, отфильтровывали и сушили. Продукт перекристаллизовывали из смеси этанол (96%)/вода (95:5).
Выход: 937 мг белых, мелких спутанно-волокнистых кристаллов (80%)
Т.пл.: 226°C (разл.)
1H-ЯМР (DMSO-d6): δ/м.д.=4,13 (с, 2H, O-CH2), 6,09 (шир.с, 2H, NH2), 7,37 (м, 3H, 3',4',5'-CH), 7,67 (м, 2H, 2',6'-CH).
13C-ЯМР (CDCl3): δ/м.д.=73,6 (O-CH2), 125,7, 128,0, 129,0 (ArCH), 132,8 (ArC), 151,4 (C=N), 173,2 (CO).
МС (ESI): m/z=217 [M+Na]+, 195 [M+H]+, 119 [M-C4H2-C2H2+H]+, 105 [C6H5N2]+.
C9H9N2NaO3·1,0 H2O (234,18)
Рассчитано: C 46,16 H 4,73 N 11,96
Найдено: C 46,43 H 4,44 N 11,65
N'-карбоксиметокси-N',N"-дифенилгуанидин (3)
Figure 00000018
546 мг семихлорида аминооксиуксусной кислоты (5 ммоль) и 697 мкл триэтиламина (5 ммоль) перемешивали 30 мин в 10 мл сухого ДМФ. Осадок отфильтровывали и в фильтрат добавляли 970 мг N,N'-дифенилкарбодиимида (5 ммоль). Смесь перемешивали четыре часа при комнатной температуре, извлекали этилацетатом и продукт перекристаллизовывали из этанола.
Выход: 285 мг белого твердого вещества (20%)
Т.пл.: 176°C
DC: Rf=0,29 (дихлорметан/метанол, 9:1)
1H-ЯМР (DMSO-d6): δ/м.д.=4,37 (с, 2H, O-CH2), 6,75-6,87 (м, 2H, ArH), 7,03-7,20 (м, 8H, ArH), 8,02, 8,21 (2 × шир.с, 1H, NH), 12,05 (шир.с, 1H, COOH).
13C-ЯМР (DMSO-d6): δ/м.д.=70,0 (O-CH2), 116,7, 118,7, 119,8, 121,0, 128,5 (ArCH), 140,7, 142,3 (ArC), 147,5 (C=N), 171,8 (CO).
МС (ESI): m/z=308 [M+Na]+, 286 [M+H]+, 210 [M-C2H4O3]+.
МС (EI): m/z (%)=209 (38), 208 (37), 119 (20), 118 (38), 93 (100), 91 (47), 77 (43), 66 (31), 51 (30).
C15H15N3O3·0,3H2O (290,71)
Рассчитано: C 61,97 H 5,41 N 14,45
Найдено: C 62,18 H 5,72 N 14,57
ВЭЖХ-система:
ВЭЖХ-система Waters Breeze с насосом Waters 1525, детектором поглощения Waters 2487, автоматическим пробоотборником Waters 717 Plus и программой сбора и обработки данных Breeze (версия 3.30), термостат колонного типа Gynkotek STH 585.
Колонки ВЭЖХ:
Synergi Max-RP 80 A (250 × 4,6 мм, 4 мкм) с предколонкой C-18 (4 × 3 мм) (фирма Phenomenex);
LiChroCART, LiChrospher 100, RP-8 (125 × 4 мм, 5 мкм) с предколонкой LiChrospher 60, RP-select B (4 × 4 мм, 5 мкм) (фирма Merck);
LiChroCART, LiChrospher RP-select B (250 × 4,6 мм, 5 мкм) с предколонкой LiChrospher 60, RP-select B (4 × 4 мм, 5 мкм) (фирма Merck).
Другие приборы и материалы:
Фотометр Cary 50 UV-Vis (фирма Varian); 96-луночные планшеты (фирма Greiner); водяная баня-шейкер GFL-1083 (Gesellschaft für Labortechnik, Burgwedel); микролитровая центрифуга (фирма Hettich GmbH); pH-метр InoLab pH Level 1 (Wissenschaftlich-Technische Werkstätten GmbH, Weilheim) с pH-электродом LiQ Plast (фирма Hamilton); вихревой встряхиватель VF2 (Janke & Kunkel GmbH & Co. KG, Staufen); реакционный сосуд на 1,5 мл (Sarstedt AG & Co., Nümbrecht).
Источники ферментов:
Используемая рекомбинантная пептидилглицин-α-амидирующая монооксигеназа (PAM, крысы, EC 1.14.17.3) была предоставлена фирмой Unigene Laboratories, Inc. (New Jersey, USA) (удельная активность=5,8·106 ед./мг белка); каталаза бычьей печени (EC 1.11.1.6), удельная активность=12600 ед./мг твердого вещества (фирма Aldrich).
Получение используемого источника фермента цитохрома-P450 осуществлялось рабочей группой Clement von Grünewald по следующей инструкции:
Печеночные микросомы свиней и 9000 г избыточной фракции:
Свиная печень была приобретена у местного мясника (Bordesholm), и органы сразу после забоя переносили в 20 мМ охлаждаемого льдом фосфатного буфера (1 мМ Na2-EDTA, pH 7,4). Для дальнейшей обработки доли печени сначала перфузировали и промывали в 50 мМ фосфатного буфера (1 мМ Na2-EDTA, pH 7,4). Ткань разрезали на куски и пропускали через стандартную мясорубку. Суспензию разбавляли равным объемом фосфатного буфера и гомогенизировали с помощью проточного гомогенизатора. Дальнейшее получение микросом и 9000 г избыточной фракции проводилось путем дифференциального ультрацентрифугирования. Для хранения полученные препараты аликвотировали и замораживали при -80°C.
Печеночные микросомы человека и 9000 г избыточной фракции:
Для получения микросом человека ткань человеческой печени получали в хирургическом отделении университетской клиники университета Christian-Albrechts от раковых больных, которые должны были подвергнуться резекции половины печени.
Куски печеночной ткани мгновенно замораживали в содержащем сахарозу фосфатном буфере (10 мМ K2HPO4, 10 мМ KH2PO4, 250 мМ сахарозы, 1 мМ Na2-EDTA, pH 7,4, 4°C). После того, как в наличии появилось достаточное число частей органа (>3), соответствующие куски размораживали и соединяли, чтобы компенсировать различие из-за колебаний между отдельными индивидуумами. Куски ткани при 4°C разрезали на мелкие части, несколько раз промывали буферным раствором (без EDTA) и перерабатывали гомогенизатором в суспензию. Получение микросом и 9000 г избыточной фракции проводилось из этой суспензии путем дифференциального ультрацентрифугирования. Для хранения полученные препараты аликвотировали и замораживали при -80°C.
PAM-анализ: условия инкубации
Типичная смесь для инкубации объемом 300 мкл (полный объем) содержала 25000 ед./мл пептидилглицин-α-амидирующей монооксигеназы (PAM, фирма Unigene Laboratories), 250 ед./мл каталазы, 1 мкМ меди(II) (введенной как ацетат/моногидрат), 2 мМ аскорбата натрия, 5 мМ йодида калия и соответствующий субстрат в концентрации 0,1 мМ или 1 мМ, в буфере с разными значениями pH. В качестве буферной системы использовалось 30 мМ MES для инкубации при pH 6,0 и 50 мМ HEPES для инкубации при pH 7,4. Значение pH устанавливали разбавленным раствором едкого натра. Инкубировали 60 мин при 37°C в водяной бане-шейкере, отбирали 100 мкл и реакцию останавливали 50 мкл смеси 10%-ная TFA(водн.)/ацетонитрил (2:3). Остальную исходную смесь инкубировали еще 180 мин при 37°C и реакцию останавливали с помощью 100 мкл смеси 10%-ная TFA(водн.)/ацетонитрил (2:3).
Остановленные пробы встряхивали 5 мин (вихревой встряхиватель) и замораживали при -80°C. Для анализа проб их размораживали, 5 мин встряхивали и выпавший белок центрифугировали при 10000 об/мин. Избыточную фракцию использовали для колориметрического определения глиоксилата и/или ВЭЖХ-анализа.
Для определения значений KM и Vmax получение 100 мкл исходной смеси при pH 6,0 проводили в вышеописанных условиях, но с тем отличием, что время инкубации составляло 30 мин.
Колориметрическое определение глиоксилата
200 мкл освобожденной от белка инкубационной смеси соединяли с 20 мкл раствора фенилгидразина (20 мг в 2 мл бидистиллированной воды) и встряхивали 5 мин на водяной бане-шейкере при 37°С. Затем охлаждали за 15 мин до 0°C, добавляли 100 мкл очень холодной HCl 6н. и оставляли еще на 5 мин при 0°C. Затем добавляли 20 мкл раствора калийгексацианоферрата(III) (100 мг в 2 мл бидистиллированной воды). Смесь оставляли на 15 мин при комнатной температуре и отбирали 200 мкл для измерения с помощью планшет-ридера (фотометр Cary 50 UV-Vis, 520 нм).
Калибровка
Для 5-точечной калибровки глиоксалевую кислоту измеряли, как описано выше, в концентрациях 2, 5, 10, 50 и 100 мкМ в смеси 2:1 буфера для анализа (pH 6,0) и смеси (2:3) 10%-ная TFA(водн.)/ацетонитрил. Эта калибровка проводилась параллельно при каждом проводимом анализе испытуемого соединения.
Методика ВЭЖХ для разделения O-карбоксиметилбензамидоксима (1) и бензамидоксима (2)
Колонка Synergi Max-RP 80 A (250 × 4,6 мм, 4 мкм)
Температура колонки: 20°C
Подвижная фаза: 79% (об./об.) 10 мМ октилсульфонат, pH 2,5 (H3PO4) 21% (об./об.) ацетонитрил
Скорость течения: 1,0 мл/мин
Продолжительность: 20 мин
Детектирование: измерение поглощения на 229 нм
Объем впрыска: 20 мкл
Время удержания:  
O-карбоксиметилбензамидоксим (1) 8,9 мин±0,2 мин
бензамидоксим (2) 14,4 мин±0,2 мин
Калибровка и повторное обнаружение
Для калибровки вышеописанным способом ВЭЖХ проводили измерения с бензамидоксимом в восьми концентрациях в диапазоне 0,1-500 мкМ, растворенным в буфере для анализа (30 мМ MES, 1 мкМ ацетат меди(II), 2 мМ аскорбата натрия, 5 мМ йодида калия, pH 6,0).
Для определения повторного обнаружения получали одинаковые концентрации в буфере для анализа (конечный объем=100 мкл). Кроме того, добавляли O-карбоксиметилбензамидоксим (0,5 мМ) и 250 ед./мл каталазы, а затем также 50 мкл смеси 10%-ная TFA(водн.)/ацетонитрил (2:3). Пробы встряхивали с помощью вихревого встряхивателя и замораживали при -80°C. Для измерения пробы размораживали, 5 мин встряхивали на вихревом встряхивателе и центрифугировали 5 мин при 10000 об/мин.
Методика ВЭЖХ для разделения N-карбоксиметокси-N',N"-дифенилгуанидина (3) и N-гидрокси-N',N"-дифенилгуанидина (4)
Колонка: LiChrospher RP-select B (250 × 4,6 мм, 5 мкм)
Температура колонки: 20°C
Подвижная фаза: 70% (об./об.) 40 мМ аммонийацетат, pH 5,2
30% (об./об.) ацетонитрил
Скорость течения: 1,0 мл/мин
Продолжительность: 15 мин
Детектирование: измерение поглощения на 229 нм
Объем впрыска: 20 мкл
Время удержания:  
N-карбоксиметокси-N,N"-дифенилгуанидин (3) 5,2 мин±0,1 мин
N-гидрокси-N,N"-дифенилгуанидин (4) 9,0 мин±0,2 мин
Калибровка и повторное обнаружение
Для калибровки вышеописанной методикой ВЭЖХ-анализа проводили измерения с N-гидрокси-N,N"-дифенилгуанидином (4) в восьми концентрациях в диапазоне 0,1-500 мкМ, растворенным в буфере для анализа (30 мМ MES, 1 мкМ ацетат меди(II), 2 мМ сорбат натрия, 5 мМ йодид калия, pH 6,0).
Для определения повторного обнаружения получали одинаковые концентрации в буфере для анализа (конечный объем=100 мкл). Кроме того, добавляли N-карбоксиметокси-N,N"-дифенилгуанидина (3) (0,5 мМ) и 250 ед./мл каталазы, а затем также 50 мкл смеси (2:3) 10%-ная TFA(водн.)/ацетонитрил. Пробы встряхивали с помощью вихревого встряхивателя и замораживали при -80°C. Для измерения пробы размораживали, 5 мин встряхивали на вихревом встряхивателе и центрифугировали 5 мин при 10000 об/мин.
Испытание на CYP450: условия инкубации
Типичная исходная смесь для инкубации объемом 500 мкл (полный объем) содержала 0,3 мг белка (источник фермент печени свиньи или человека), 0,1 мМ (или 1 мМ) испытуемого соединения в 100 мМ фосфатного буфера (pH 6,0 или pH 7,4) и 1 мМ ΝADH (или ΝADPH). Инкубацию начинали после 5-минутной предварительной инкубации фермента и испытуемого соединения в буфере путем добавления ΝADH (или ΝADPH) и встряхивали 60 мин, соответственно 180 мин при 37°C в водяной бане-шейкере. Смесь останавливали добавлением равного объема ацетонитрила, встряхивали на вихревом встряхивателе и замораживали при -80°C.
Для анализа пробы размораживали, встряхивали 5 мин на вихревом встряхивателе и в результате 5-минутного центрифугирования при 10000 об/мин отделяли белок. Избыточная фракция применялась для ВЭЖХ-анализа.
Методика ВЭЖХ-анализа для разделения O-карбоксиметилбензамидоксима (1), бензамидоксима (2) и бензамидина
Колонка: Synergi Max-RP 80 A (250 × 4,6 мм, 4 мкм)
Температура колонки: 20°C
Подвижная фаза: 82,5% (об./об.) 10 мМ октилсульфонат, pH 2,5 (H3PO4)
17,5% (об./об.) ацетонитрил
Скорость течения: 1,0 мл/мин
Продолжительность 35 мин
Детектирование: измерение поглощения на 229 нм
Объем впрыска: 20 мкл
Время удержания:  
O-карбоксиметилбензамидоксим (1) 13,6 мин±0,1 мин
бензамидоксим (2) 22,8 мин±0,3 мин
бензамидин 26,0 мин±0,3 мин
Методика ВЭЖХ-анализа для разделения N-карбоксиметокси-N',N"-дифенилгуанидина (3), N-гидрокси-N'N"-дифенилгуанидина (4) и N',N"-дифенилгуанидина
Колонка: LiChrospher RP-select B (250 × 4,6 мм, 5 мкм)
Температура колонки: 20°C
Подвижная фаза: 80% 20 мМ аммонийацетат, pH 4,3
20% ацетонитрил
Скорость течения: 1,25 мл/мин
Продолжительность: 15 мин
Детектирование: измерение поглощения на 205 нм
Объем впрыска: 30 мкл
Время удержания:  
N',N"-дифенилгуанидин 6,7 мин±0,2 мин
N-карбоксиметокси-N',N"-дифенилгуанидин (3) 7,8 мин±0,2 мин
N-гидрокси-N',N"-дифенилгуанидин (4) 10,7 мин±0,3 мин
Далее следует таблица лекарственных веществ, в которых предпочтительно может применяться система пролекарств согласно изобретению:
Структура Название субстанции CAS Действие/ показания
Figure 00000019
 идазоксан гидрохлорид 79944-58-4 селективный антагонист α2-адренергического рецептора и антагонист рецептора имидазолина. Сначала испытан как антидепрессант, сейчас проверяется как средство от шизофрении
Figure 00000020
 ирбесартан 138402-11-6 антагонист рецептора ангиотензина II, как большинство сартанов - от повышенного кровяного давления
Figure 00000021
 линоглирид 75358-37-1 от гипергликемии
Figure 00000022
 лофексидин гидрохлорид 21498-08-8 антагонист α2-адренергического рецептора, ранее как средство снижения кровяного давления, в настоящее время в основном от синдромов отмены героина и опия
Figure 00000023
 тетрагидрозолин гидрохлорид 522-48-5 в глазных каплях и спреях для носа, альфа-антагонист
Figure 00000024
 толазолин 59-98-3 неселективный конкурентный антагонист α2-адренергического рецептора. Действует как сосудорасширяющее, используется в основном в ветеринарии как средство для пробуждения
Figure 00000025
 ксилометазолин гидрохлорид 1218-35-5 Спрей для носа от насморка и т.д.
Figure 00000026
 пентамидин изетионат 140-64-7 дезинфицирующее средство, антипротозойное средство, эффективно при трипаносомозе, лейшманиозе и некоторых грибковых заболеваниях
Figure 00000027
 тарибавирин 119567-79-2 ингибитор полимеразы от гепатита C
Figure 00000028
 тиамин (витамин B1) 59-43-8 при недостатке витамина B1
Figure 00000029
 бозентан 147536-97-8 антагонист рецепторов эндотелина для лечения гипертонии легочной артерии
Figure 00000030
 дибромпропамидин изетионат 496-00-4 антисептик, глазные капли
Figure 00000031
 гидроксистильбамидин изетионат 495-99-8 лечение различных грибковых инфекций
Figure 00000032
 сибрафибан 172927-65-0 ингибитор GPIIb/IIIa
Figure 00000033
 орбофибан 163250-90-6 антитромбоцитарное лекарство
Figure 00000034
 ксемилофибан 149820-74-6 антагонист гликопротеина IIb/IIa как ингибитор свертывания
Figure 00000035
 аргатробан 74863-84-6 141396-28-3 антикоагулянты
Figure 00000036
 дабигатран 211914-51-1 антикоагулянты
Figure 00000037
 ксимелагатран/ мелагатран 159776-70-2 ингибиторы тромбина
Figure 00000038
 2-пиперидинкарбоновая кислота 74863-84-6 ингибитор тромбина
Figure 00000039
 орбофибан ацетат 165800-05-5 антагонист рецептора гликопротеина IIb/IIIa
Figure 00000040
 эпинастин (релестат) 127786-29-2 антигистаминное средство
Figure 00000041
 RO 43-8857 1322224-71-6 антагонист GPIIB/IIIa, антикоагулянт
Figure 00000042
     ингибитор FVIIa, антикоагулянт, доклинические исследования
Figure 00000043
 AB1 (аналоги хлорамбуцила) 305-03-3 лейкемия, лимфома, рак груди, доклинические исследования
Figure 00000044
 AMG-126737 224054-76-6 ингибитор триптазы, доклинические исследования
Figure 00000045
 AY-0068   ингибитор триптазы, доклинические исследования
Figure 00000046
 B-623   ингибитор урокиназы, злокачественные заболевания, доклинические исследования
Figure 00000047
 BABIM 74733-75-8 ингибитор триптазы, аллергия, астма, доклинические исследования
Figure 00000048
   1670-14-0 ингибитор фактора VIIa, антикоагулянт, доклинические исследования
Figure 00000049
 BIBT-986 (таногитран) (Boehringer Ingelheim) 637328-69-9 двойной ингибитор FXa и тромбина, антикоагулянт
Figure 00000050
 BSF 411693 (Abbott)   ингибитор тромбина, антикоагулянт, доклинические исследования
Figure 00000051
 CI-1031 (фирма: Biosciences) 605-69-6 ингибитор FXa, антикоагулянт, фаза II
Figure 00000052
 CJ-1332 (фирма: Curacyte)   ингибитор FXa, антикоагулянт, доклинические исследования
Figure 00000053
 CJ-463 (фирма: Curacyte)   ингибитор урокиназы, злокачественные заболевания, доклинические исследования
Figure 00000054
 CJ-672 (фирма: Curacyte)   ингибитор матриптазы, терапия злокачественных заболеваний, доклинические исследования
Figure 00000055
 CT50728 (Portolla Pharmaceuticals)   антагонист гликопротеина IIb/IIa как ингибитор свертывания
Figure 00000056
 CVS-3983   ингибитор матриптазы, злокачественные заболевания, доклинические исследования
Figure 00000057
 DX-9065a 155204-81-2 ингибитор FXa, антикоагулянт, фаза III
Figure 00000058
 ламифибан (Röche) 103577-45-3 антагонист гликопротеина IIb/IIa как ингибитор свертывания
Figure 00000059
 LB-30870 (фирма: LG LifeSciences Ltd)   ингибитор тромбина, антикоагулянт, фаза I
Figure 00000060
 LY-178550 (фирма: Lilly)   ингибитор тромбина, антикоагулянт, доклинические исследования
Figure 00000061
 PHA-927F и аналоги   ингибитор фактора Va, антикоагулянт
Figure 00000062
 RO-44-3888 (Röche)   антагонист гликопротеина IIb/IIa как ингибитор свертывания
Figure 00000063
 сепимостат, FUT-187 (Torii) 103926-64-3 ингибитор конвертазы C3/C5, комплемент активации, противовоспалительное средство, фаза II
Figure 00000064
 стильбамидин (аналог диминазен, беренил) 140-59-0 трипаносомоз
Figure 00000065
 вирамидин (Ribapharm) 119567-79-2 виростатическое средство (гепатит C), фаза III
Figure 00000066
 WX-FX4 (Wilex)   ингибитор FXa, антикоагулянт, доклинические исследования
Figure 00000067
 YM-60828 (Yamanouchi Pharmaceutical Co. Ltd)   ингибитор FXa, антикоагулянт, доклинические исследования
Figure 00000068
 ZK-807191 (Behex Biosciences)   ингибитор FXa, клинические испытания
Figure 00000069
 NAPAP, SR25477 86845-59-2 анальгетик
Figure 00000070
 BIIL315 (Boehringer Ingelheim) 204974-94-7 противовоспалительное средство
Figure 00000071
 BIIL 284/260 (Boehringer Ingelheim) 204974-93-6 противовоспалительное средство
Figure 00000072
 таногитран 637328-69-9 ингибитор тромбина
Figure 00000073
 моксилубант 146978-48-5 противоастматическое средство, противоинфекционное средство
Figure 00000074
 стильбамидин 122-06-5 антипротозойное средство, дезинфицирующее средство
Figure 00000075
 панамидин 104-32-5 антипротозойное средство, дезинфицирующее средство
Figure 00000076
 фрадафибан 148396-36-5 ингибитор тромбина
Figure 00000077
 орбофибан 163250-90-6 антагонист гликопротеина IIb/IIa как ингибитор свертывания
Figure 00000078
 роксифибан 170902-47-3 антагонист гликопротеина IIb/IIa как ингибитор свертывания
Figure 00000079
 ламифибан (Röche) 144412-49-7 ингибитор тромбина
Figure 00000080
 фурамидин 73819-26-8 антипротозойное средство, дезинфицирующее средство
Figure 00000081
 PD0313052 861244-44-2 ингибитор тромбина
Figure 00000082
 PHA 927F 648943-12-8 специфический ингибитор TF/VIIa
Figure 00000083
 PHA 798 508173-28-2 специфический ингибитор TF/VIIa
Figure 00000084
 стильбамидин 122-06-5 антипротозойное средство, дезинфицирующее средство
Figure 00000085
 фидексабан (ZK807834) 183305-24-0 антикоагулянт
Figure 00000086
 отамиксабан 193153-04-7 ингибитор фактора Xa
Figure 00000087
 тромбостоп 117091-16-4 ингибитор тромбина
Figure 00000088
 амилорид гидрохлорид 2016-88-8 диуретик
Figure 00000089
 анагрелид гидрохлорид 58579-51-4 пониженные тромбоциты
Figure 00000090
 прогуанил 537-21-3 профилактическое противомалярийное средство (от плазмодий)
Figure 00000091
 циметидин 51481-61-9 антагонист рецептора H2 (от изжоги)
Figure 00000092
 клонидин гидрохлорид 4205-91-8 прямой агонист α2-адренергического рецептора. Лечение гипертонии, лечение абстинентного синдрома (алкоголь, опиоиды и т.д.). При алкоголе ни какой монотерапии
Figure 00000093
 гуаноксан 19694-60-1 средство снижения кровяного давления
Figure 00000094
 перамивир 229614-55-5 ингибитор нейрамидазы (грипп), разрешен в экстренных случаях при инфекциях H1N1, внутривенно
Figure 00000095
 ромифидин 65896-14-2 агонист α2-адренергического рецептора, ветеринария: седативное, анестезирующее, анальгетическое средство для крупных животных, как лошади
Figure 00000096
 тирапазамин 27314-97-2 экспериментальное противоопухолевое действующее вещество, выделяет малые количества токсичных радикалов, ведущая структура для других лекарств от рака
Figure 00000097
 тизанидин 51322-75-9 агонист a2-адренергического рецептора, миорелаксант от спазм, судорог и т.д.
Figure 00000098
 толонидин нитрат 57524-15-9  
Figure 00000099
 метморфин 657-24-9 сахарный диабет II типа
Figure 00000100
 диминазен 536-71-0 антипротозойное средство, дезинфицирующее средств
Figure 00000101
 дебризохин 1131-64-2 гипотензивное средство
Figure 00000102
 сульфаметазин 57-68-1 добавка в корм для животных
Figure 00000103
 эптифибатид 188627-80-7 148031-34-9 антикоагулянт
Figure 00000104
 фамотидин 76824-35-6 ингибитор переноса Na+ H+
Figure 00000105
 занамивир 139110-80-8 ингибитор нейрамидазы (грипп)
Figure 00000106
 Bayer-Arzneistoff 25836-74-2  
Figure 00000107
 стрептомицин A 57-92-1 антибиотик
Figure 00000108
 нафамостат 81525-10-2  
Figure 00000109
 нафамостат
FUT-178		 81525-10-2 ингибитор конвертазы C3/C5, комплемент, активация, противовоспалительное средство, фаза II
Figure 00000110
 иногатран 155415-08-0  
Figure 00000111
 гуанетидин (тилодигон) 645-43-2 гипертония, глаукома
Figure 00000112
 3DP-10017 226566-43-4 двойной ингибитор FXa и тромбина, клиническая разработка
Figure 00000113
 APC-366 178925-65-0 ингибитор триптазы, аллергия, астма, фаза II
Figure 00000114
 CVS-1123   ингибитор тромбина, клинические испытания
Figure 00000115
 производное дифенилфосфоната 5945-33-5 ингибитор урокиназы, злокачественные заболевания, доклинические исследования
Figure 00000116
 E-64 66701-25-5 ингибитор катепсина L, злокачественные заболевания, доклинические исследования
Figure 00000117
 FOY-305 59721-28-7 ингибиторы серин-протеазы широкого спектра (панкреатит, антикоагуляция), клин. разработка
Figure 00000118
 MBGB   лимфома, лейкемия, клиника
Figure 00000119
 MIBG 103346-16-3 нейробластома, клиника
Figure 00000120
 RWJ-422521   двойной ингибитор FXa и тромбина, клиническая разработка
Figure 00000121
 синталин 301-15-5 антидиабетическое средство
Figure 00000122
 WX-293   ингибитор урокиназы, злокачественные заболевания. доклинические исследования
Figure 00000123
 WX-340   боковой амиотрофический склероз, злокачественные опухоли, фаза I
Figure 00000124
 BMS-189090   ингибитор тромбина клинические испытания
Figure 00000125
 JTV-803 (Japan Tabacco)   ингибитор FXa, антикоагулянт, фаза II
Figure 00000126
 напсагатран 159668-20-9 ингибитор тромбина, антикоагулянт, клиническая разработка
Figure 00000127
 абапрессин, азоцин, допом 55-65-2 средство от гипертонии
Figure 00000128
 TAN 1057A 128126-44-3 антибиотик
Figure 00000129
 хидикал, MK 870 2609-46-3 нарушения сердечного ритма
Figure 00000130
 фенформин, ретард 114-86-3 сахарный диабет II типа
Figure 00000131
 нетропсин, синаномицин 1438-30-8 антибиотик
Figure 00000132
 BIIB, сабипорид 261505-80-0 ингибитор переноса Na+ H+
Figure 00000133
 деоксиспергуалин 89149-10-0 иммунодепрессант
Figure 00000134
      
Figure 00000135
 BMS 262084 253174-92-4 ингибитор триптазы
Figure 00000136
 апофаг, сиамформет 1115-70-4 сахарный диабет II типа
Figure 00000137
 пебак, L-пролинамид 71142-71-7 ингибитор тромбина
Figure 00000138
 MERGETPA 77102-28-4 ингибитор тромбина
Figure 00000139
 BCX 1812, перамивир 330600-85-6 ингибитор нейрамидазы (грипп)
Figure 00000140
 апогастин, фамогаст 76824-35-6 ингибитор протонной помпы
Figure 00000141
   65113-67-9  
Figure 00000142
 пентамидин 100-33-4 антипротозойное средство, дезинфицирующее средство

Claims (11)

1. Пролекарство, содержащее фрагмент структуры, имеющий общую формулу (IIa) или (IIb)
Figure 00000143

причем R1 и R2 означают водород или алкильный остаток, где пролекарство метаболизируется в лекарственное вещество по пути, не зависящему от фермента цитохром-P450 (CYP450), и где лекарственное вещество выбрано из группы, состоящей из пентамидина, дабигатрана, BSF 411693 (Abbott), идазоксана гидрохлорида, ирбесартана, линоглирида, лофексидин гидрохлорида, тетрагидрозолин гидрохлорида, толазолина, ксилометазолин гидрохлорида, пентамидин изетионата, тарибавирина, тиамина (витамин B1), бозентана, дибромпропамидин изетионата, гидроксистильбамидин изетионата, сибрафибана, орбофибана, ксемилофибана, аргатробана, ксимелагатрана, мелагатрана, 2-пиперидиновой кислоты, орбофибанацетата, эпинастина (релестата), RO 43-8857, AB1 (хлорамбицил, аналоги), AMG-126737, AY-0068, В-623, BABIM, BIBT-986 (Boehringer Ingelheim), CI-1031 (фирма Biosciences)), CJ-1332 (фирма Curacyte), CJ-463 (фирма Curacyte), CJ-672 (фирма Curacyte), CT50728 (Portolla Pharmaceuticals), CVS-3983, DX-9065a, ламифибана (Roche), LB-30870 (фирма LG LifeSciences Ltd), LY-178550 (фирма Lilly), PHA-927F и аналогов, RO-44-3888 (Roche), сепимостата, FUT-187 (Torii), вирамидина (Ribapharm), WX-FX4 (Wilex), YM-60828 (Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd), ZK-807191 (Berlex Biosciences), NAPAP (SR 25477), BIIL 315 (Boehringer Ingelheim), BIIL 260 (Boehringer Ingelheim), BIIL 284/260 (Boehringer Ingelheim), таногитрана, моксилубанта, стильбамидина, панамидина, фрадафибана, диминацена, роксифибана, фурамидина, PD0313052, PHA 927F, PHA 798, фидексабана, отамиксабана, тромстопа (тромбостопа), занамивира, амилоридгидрохлорида, анагрелидгидрохлорида, прогуанила, циметидина, клонидин гидрохлорида, гуанокса, перамивира, ромифидина, тирапазамина, тизанидина, толонидин нитрата, метмофина, диминазена, дебризоквина, сульфаметазина, эптифибатида, фамотидина (Вауеr-Arzneistoff), стрептомицина, нафамостата, FUT-175, иногатрана, гуанетидина (тилодигона), 3DP-10017, АРС-366, CVS-1123, производного дифенилфосфоната, E-64, FOY-305, MBGB, MIBG, RWJ-422521, синталина, WX-293, WX-340, BMS-189090, JTV-803, (Japan Tabacco), напсагатрана, исмелина, Tan 1057А, хидикала, фенформикса (Retardo), нетропсина (синаномицина), BIIB 722 (сабипорида), гуанадрела, деоксиспергуалина, BMS 262084, сиамформета (Orabet), РРАСК (Pebac), MERGETPA (ингибитора карбоксипетидазы Пламмера), перамивира, фамотидина, залтидина.
2. Пролекарство по п. 1, отличающееся тем, что пролекарство является предшественником лекарственного вещества, причем фрагмент структуры общей формулы IIа после метаболизирования имеет структуру, отвечающую формуле
Figure 00000144

а фрагмент структуры общей формулы IIb после метаболизирования имеет структуру, отвечающую формуле
Figure 00000145
3. Применение пролекарства для улучшения
фармакокинетических свойств лекарственного вещества, где пролекарство содержит фрагмент структуры, имеющей общую формулу (IIa) или (IIb)
Figure 00000146

причем R1 и R2 означают водород или алкильный остаток, где пролекарство метаболизируется в лекарственное вещество по пути, не зависящему от фермента цитохром-P450 (CYP450), и где лекарственное вещество выбрано из группы, состоящей из пентамидина, дабигатрана, BSF 411693 (Abbott), идазоксана гидрохлорида, ирбесартана, линоглирида, лофексидин гидрохлорида, тетрагидрозолин гидрохлорида, толазолина, ксилометазолин гидрохлорида, пентамидин изетионата, тарибавирина, тиамина (витамин B1), бозентана, дибромпропамидин изетионата, гидроксистильбамидин изетионата, сибрафибана, орбофибана, ксемилофибана, аргатробана, ксимелагатрана, мелагатрана, 2-пиперидиновой кислоты, орбофибанацетата, эпинастина (релестата), RO 43-8857, АВ1 (хлорамбицил, аналоги), AMG-126737, AY-0068, В-623, BABIM, BIBT-986 (Boehringer Ingelheim), CI-1031 (фирма Biosciences)), CJ-1332 (фирма Curacyte), CJ-463 (фирма Curacyte), CJ-672 (фирма Curacyte), CT50728 (Portolla Pharmaceuticals), CVS-3983, DX-9065a, ламифибана (Roche), LB-30870 (фирма LG LifeSciences Ltd), LY-178550 (фирма Lilly), PHA-927F и аналогов, RO-44-3888 (Roche), сепимостата, FUT-187 (Torii), вирамидина (Ribapharm), WX-FX4 (Wilex), YM-60828 (Yamanouchi Pharmaceutical Co Ltd), ZK-807191 (Berlex Biosciences), NAPAP (SR 25477), BIIL 315 (Boehringer Ingelheim), BIIL 260 (Boehringer Ingelheim), BIIL 284/260 (Boehringer Ingelheim), таногитрана, моксилубанта, стильбамидина, панамидина, фрадафибана, диминацена, роксифибана, фурамидина, PD0313052, PHA 927F, PHA 798, фидексабана, отамиксабана, тромстопа (тромбостопа), занамивира, амилоридгидрохлорида, анагрелидгидрохлорида, прогуанила, циметидина, клонидин гидрохлорида, гуанокса, перамивира, ромифидина, тирапазамина, тизанидина, толонидин нитрата, метмофина, диминазена, дебризоквина, сульфаметазина, эптифибатида, фамотидина (Bayer-Arzneistoff), стрептомицина, нафамостата, FUT-175, иногатрана, гуанетидина (тилодигона), 3DP-10017, АРС-366, CVS-1123, производного дифенилфосфоната, E-64, FOY-305, MBGB, MIBG, RWJ-422521, синталина, WX-293, WX-340, BMS-189090, JTV-803, (Japan Tabacco), напсагатрана, исмелина, Tan 1057A, хидикала, фенформикса (Retardo), нетропсина (синаномицина), BIIB 722 (сабипорида), гуанадрела, деоксиспергуалина, BMS 262084, сиамформета (Orabet), РРАСК (Pebac), MERGETPA (ингибитора карбоксипетидазы Пламмера), перамивира, фамотидина, залтидина.
4. Применение по п. 3 для улучшения растворимости, оральной биодоступности, проходимости гематоэнцефалического барьера, вкуса и/или физико-химической стабильности.
5. Применение по п. 4, где пролекарство является предшественником лекарственного вещества, которое имеет такую же структуру, как пролекарство, за исключением того, что оно вместо вышеуказанного фрагмента структуры IIa содержит фрагменты структуры IIa-1 или IIa-2
Figure 00000147

или вместо вышеуказанного фрагмента структуры IIb содержит фрагмент структуры IIb-I или IIb-2
Figure 00000148
6. Применение по п. 4 или 5 для активации лекарственного вещества посредством пептидилглицин-α-амидирующей монооксигеназы (PAM).
7. Способ лечения пациента, включающий введение пациенту пролекарства по одному из пп. 1 или 2.
8. Способ по п. 7, предназначенный для лечения заболеваний, связанных с дефицитом моноксида азота.
9. Способ по п. 7, предназначенный для лечения висцерального и/или кожного лейшманиоза, трипаносомоза, трипаносомоза 2 фазы или пневмонии, вызванной Pneumocystis carinii, для подавления роста злокачественных опухолей, для подавления свертывания крови, для снижения кровяного давления, для нейропротекции или для борьбы с вирусными инфекциями, включая грипп и ВИЧ-инфекции.
10. Способ получения N-алкоксигуанидина формулы
Figure 00000149

включающий взаимодействие карбодиимида формулы R1-N=C=N-R3 с аминоокси-соединением формулы H2N-O-R5 или его солью, причем в случае использования соли аминооксисоединения реакция проводится в присутствии основания, где R1 и R3, независимо друг от друга, выбраны из группы, содержащей H, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный арилоксикарбонил, необязательно замещенный аминоацил, необязательно замещенный алкоксикарбонил, необязательно замещенный алкоксикарбонилалкокси, необязательно замещенный гетероарил, необязательно замещенный алкилциклоалкил, необязательно замещенный гетероалкилциклоалкил, необязательно замещенный аралкил и необязательно замещенный циклоалкил,
каждый R2 и R4 представляют собой водород, и
R5 выбран из группы, которая содержит алкоксикарбонил, (алкоксикарбонил) алкокси и карбоксиалкокси.
11. Способ по п. 10, где взаимодействие проводят в присутствии основания, которое предпочтительно выбирают из группы, состоящей из диизопропиламина и триэтиламина.
RU2011133233/15A 2009-01-09 2010-01-08 Способ улучшения биоактивации лекарственных веществ RU2550969C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102009004204A DE102009004204A1 (de) 2009-01-09 2009-01-09 Verfahren zur verbesserten Bioaktivierung von Arzneistoffen
DE102009004204.0 2009-01-09
PCT/DE2010/000009 WO2010078867A1 (de) 2009-01-09 2010-01-08 Verfahren zur verbesserten bioaktivierung von arzneistoffen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2011133233A RU2011133233A (ru) 2013-02-20
RU2550969C2 true RU2550969C2 (ru) 2015-05-20

Family

ID=42049535

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011133233/15A RU2550969C2 (ru) 2009-01-09 2010-01-08 Способ улучшения биоактивации лекарственных веществ

Country Status (13)

Country Link
US (1) US20120077876A1 (ru)
EP (1) EP2376074B1 (ru)
JP (1) JP5918538B2 (ru)
KR (3) KR20110102506A (ru)
CN (1) CN102378628A (ru)
AU (1) AU2010204395B2 (ru)
BR (1) BRPI1004900A2 (ru)
CA (1) CA2749009A1 (ru)
DE (1) DE102009004204A1 (ru)
IL (1) IL213955A (ru)
RU (1) RU2550969C2 (ru)
SG (2) SG172911A1 (ru)
WO (1) WO2010078867A1 (ru)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2550966B1 (de) * 2011-07-25 2016-10-19 Dritte Patentportfolio Beteiligungsgesellschaft mbH & Co. KG Dabigatran-Amidoximsäureesters als Prodrugs und ihre Verwendung als Arzneimittel
WO2024089191A1 (en) 2022-10-27 2024-05-02 Syngenta Crop Protection Ag Microbiocidal heterobicyclic dihydrooxadiazine derivatives

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5840758A (en) * 1996-06-06 1998-11-24 Abbott Laboratories Oxime derivatives of fenamates as inhibitors of prostaglandin biosynthesis
RU2176644C2 (ru) * 1995-12-21 2001-12-10 Астразенека Аб Пролекарства ингибиторов тромбина
WO2008009264A1 (de) * 2006-07-21 2008-01-24 Dritte Patentportfolio Beteiligungsgesellschaft Mbh & Co. Kg Verbesserung der bioverfügbarkeit von wirkstoffen mit amidinfunktion in arzneimitteln

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1501529A (en) * 1975-09-11 1978-02-15 Philagro Sa Derivatives of amidoximes
DE3431916A1 (de) * 1984-08-30 1986-03-13 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Fluoralkoxyphenylsulfonylguanidine
DE3516616A1 (de) * 1984-08-30 1986-03-13 Bayer Ag, 5090 Leverkusen Benzodisultame
JPH02295961A (ja) * 1989-05-09 1990-12-06 Nippon Soda Co Ltd グアニジン誘導体及びその製造方法及び殺虫・殺ダニ剤
FR2678938B1 (fr) * 1991-07-10 1993-10-08 Rhone Poulenc Rorer Sa Derives de pyrrolidine, leur preparation et les medicaments les contenant.
US5587372A (en) * 1991-12-12 1996-12-24 Roussel Uclaf Cephalosporins
US5225408A (en) * 1991-12-20 1993-07-06 E. R. Squibb & Sons, Inc. Biphenyl oxadiazinone angiotensin II inhibitors
DE4321444A1 (de) 1993-06-28 1995-01-05 Bernd Prof Dr Clement Pharmazeutische Zubereitung
US5723495A (en) * 1995-11-16 1998-03-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Benzamidoxime prodrugs as antipneumocystic agents
JP2003504329A (ja) * 1999-07-08 2003-02-04 ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・ノース・キャロライナ・アト・チャペル・ヒル 抗微生物アミジンの新規プロドラッグ
WO2003053917A1 (fr) * 2001-12-21 2003-07-03 Nippon Soda Co.,Ltd. Composes de guanidine et pesticides
CN101065358B (zh) * 2004-10-20 2015-03-11 默克雪兰诺有限公司 3-芳基氨基吡啶衍生物
US7875602B2 (en) * 2005-10-21 2011-01-25 Sutter West Bay Hospitals Camptothecin derivatives as chemoradiosensitizing agents
EP2009006A4 (en) * 2006-03-27 2010-01-27 Toray Industries UREIDE DERIVATIVE AND ITS USE FOR MEDICAL PURPOSES
DE102008005484A1 (de) * 2008-01-22 2009-07-23 Schaper, Wolfgang, Dr. Induktion und Förderung der Arteriogenese
DE102008007381A1 (de) * 2008-02-01 2009-08-13 Dritte Patentportfolio Beteiligungsgesellschaft Mbh & Co.Kg Amidine und Guanidine und deren Derivate zur Behandlung von Krankheiten
DE102008007440A1 (de) * 2008-02-01 2009-08-13 Dritte Patentportfolio Beteiligungsgesellschaft Mbh & Co.Kg Aminosäurederivate als Arzneistoffe

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2176644C2 (ru) * 1995-12-21 2001-12-10 Астразенека Аб Пролекарства ингибиторов тромбина
US5840758A (en) * 1996-06-06 1998-11-24 Abbott Laboratories Oxime derivatives of fenamates as inhibitors of prostaglandin biosynthesis
WO2008009264A1 (de) * 2006-07-21 2008-01-24 Dritte Patentportfolio Beteiligungsgesellschaft Mbh & Co. Kg Verbesserung der bioverfügbarkeit von wirkstoffen mit amidinfunktion in arzneimitteln

Also Published As

Publication number Publication date
JP2012514608A (ja) 2012-06-28
EP2376074A1 (de) 2011-10-19
WO2010078867A1 (de) 2010-07-15
DE102009004204A1 (de) 2010-07-15
US20120077876A1 (en) 2012-03-29
CN102378628A (zh) 2012-03-14
JP5918538B2 (ja) 2016-05-18
AU2010204395B2 (en) 2016-04-14
SG10201504075YA (en) 2015-06-29
KR20110102506A (ko) 2011-09-16
KR20160042140A (ko) 2016-04-18
CA2749009A1 (en) 2010-07-15
BRPI1004900A2 (pt) 2016-04-05
EP2376074B1 (de) 2019-03-13
IL213955A (en) 2016-12-29
KR20150015002A (ko) 2015-02-09
AU2010204395A1 (en) 2011-09-01
SG172911A1 (en) 2011-08-29
RU2011133233A (ru) 2013-02-20
IL213955A0 (en) 2011-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11939297B2 (en) Cannabinoid receptor mediating compounds
US20190352268A1 (en) Cannabinoid receptor mediating compounds
JP2016193927A (ja) アミドキシムカルボン酸エステル及びｎ−ヒドロキシグアニジンカルボン酸エステルのプロドラッグの製造のための使用
DK2046732T3 (en) Improving the bioavailability of active substances with amidine function in drugs
RU2550969C2 (ru) Способ улучшения биоактивации лекарственных веществ
CA2572743C (en) Methods for improving bioavailability of a renin inhibitor
US20130123276A1 (en) Use of telaprevir and related compounds in atherosclerosis, heart failure, renal diseases, liver diseases or inflammatory diseases
WO2013072327A1 (en) Use of boceprevir and related compounds in atherosclerosis, heart failure, renal diseases, liver diseases or inflammatory diseases
RU2608388C2 (ru) Сложные эфиры пентамидин-амидоксим кислот как пролекарства и их применение в качестве лекарственных средств
JP5631218B2 (ja) 医薬物質としてのアミノ酸誘導体
Zhang et al. Development and characterization of glutamyl-protected N-hydroxyguanidines as reno-active nitric oxide donor drugs with therapeutic potential in acute renal failure
US20220041653A1 (en) Mitochondria-targeting peptides
US6716879B2 (en) Methods for anti-tumor therapy
US11608320B2 (en) Oxazolidinone hydroxamic acid derivatives
KR20160027967A (ko) 전구약물을 생성하기 위한 아미드옥심 카르복실산 에스테르류 및 엔-하이드록시구아니딘 카르복실산 에스테르류의 용도
US9737510B2 (en) Indazole compounds and a process for the preparation thereof
EP3423448A1 (en) Cannabinoid receptor mediating compounds
WO2012149097A2 (en) Guanidylimidazole and guanidylimidazoline derivatives as antimalarial agents, synthesis of and methods of use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20170109