RU2505819C1 - СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ПОЛИМЕРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Legionella pneumophila 1,3 И 6 СЕРОГРУПП (ВАРИАНТЫ) - Google Patents
СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ПОЛИМЕРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Legionella pneumophila 1,3 И 6 СЕРОГРУПП (ВАРИАНТЫ) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2505819C1 RU2505819C1 RU2012153024/15A RU2012153024A RU2505819C1 RU 2505819 C1 RU2505819 C1 RU 2505819C1 RU 2012153024/15 A RU2012153024/15 A RU 2012153024/15A RU 2012153024 A RU2012153024 A RU 2012153024A RU 2505819 C1 RU2505819 C1 RU 2505819C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- serogroup
- pneumophila
- diagnosticum
- legionella
- microspheres
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике, и описывает способ конструирования полимерного иммуноглобулинового диагностикума для выявления Legionella pneumophila 1, 3 и 6 серогрупп, включающий получение иммунных кроличьих сывороток с последующей их сенсибилизацией на полимерный носитель в виде микросфер для обнаружения клеток штаммов L. pneumophila в реакции слайд-агглютинации, причем в качестве полимерного носителя антител используют полиакролеин, который на стадии полимеризации обрабатывают сафранином Т, а микросферы выполняют диаметром 1 мкм с содержанием альдегидных групп 0,4 мкмоль/г, затем носитель дополнительно обрабатывают 5% водным раствором танина при 37-40°C в течение трех часов и выдерживают 15 часов при комнатной температуре, отмывают водой посредством центрифугирования до отрицательной реакции в супернатанте на фенолы с FeCl, после этого проводят сенсибилизацию микросфер легионеллезной кроличьей сывороткой, для этого 25 мг носителя суспендировали в 0,9 мл физиологического раствора и добавляли 0,1 мл разведенной (1:40) сыворотки, полученную суспензию перемешивают в течение 2-х часов при комнатной температуре, затем 15 часов при 4°C отмывают раствором хлористого натрия и суспендируют их в 1 мл того же раствора с 1% желатозой, проводят консервацию полученного диагностикума и разливают его в 5 мл емкости для использования и хранения. Способ обеспечивает обнаружение возбудителя Legionella pneumophila 1, 3 и 6 серогрупп с высокой специфичностью, демонстративностью и низкой себестоимостью. 4 з.п. ф-лы, 3 пр., 3 табл.
Description
Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к клинической лабораторной диагностике при идентификации патогенных бактериальных культур - возбудителя пневмоний человека Legionella pneumophila.
В настоящее время фирмами Оксоид (Англия), Биорад (США) и Микроген (Англия) выпускаются наборы латекс-диагностикумов, позволяющие в течение 2-3 мин выявлять в реакции на стекле все 14 серогрупп основного патогена L.pneumophila и ряд других видов этого возбудителя. Один препарат диагностикума выявляет 1 серогруппу L.pneumophila, другой - 2-14 группы суммарно. Наборы диагностикумов отличаются высокой активностью и специфичностью, Однако весьма дорогостоящи. Кроме того, в данных наборах отдельные серогруппы L.pneumophila, почти такие же практически важные, как и 1 серогруппа, - 3 и 6, остаются индивидуально вне досягаемости, последние чаще других серогрупп наиболее широко распространены во внешней среде и вызывают легионелез человека.
За прототип выбран способ изготовления легионеллезных латекс-диагностикумов для слайд-агглютинации (см. в работе Sedgwick А.а. Tilton R. Identification of L.pneumophila by latex agglutination // J. Clin. Microbiol. - 1983, - 17. - 2. - P.365-368) заключающийся в том, что из 10% полистирола (Dow Chemical Со, США ) изготавливают микросферы 0,8 мкм, нагрузку последних антителами осуществляли путем контакта их с разведенными иммунными сыворотками при 37°C в течение 2-х часов. Препараты разводили 1:20 глициновым буфером с 1% БСА, жидкость фильтровали от аггрегировавших частиц, с последующим использованием ее в реакции слайд-агглютинации ,учет результатов прводили через 2-3 мин и наблюдали в положительном случае бесцветный агглютинат клеточных взвесей, в отрицательном - взвесь оставалась равномерно мутной.
Однако, при достаточной активности и специфичности, известным диагностикумом невозможно выявлять по отдельности ряд эпидемически важных серогрупп, а именно 3 и 6-ю, возбудителя легионеллеза наиболее широко распространенных во внешней среде и чаще других серогрупп вызывающих пневмонию у человека.
Техническая задача предлагаемого изобретения состояла в разработке диагностикума для обнаружения возбудителя легионеллеза конкретной серогруппы, а именно 1, 3 и 6 с высокой специфичностью, демонстративностью и низкой себестоимостью.
Поставленная техническая задача достигается тем, что в известном способе конструирования полимерного иммуноглобулинового диагностикума для выявления Legionella pneumophila 1, 3 и 6 серогрупп, включающем получение иммунных кроличьих сывороток с последующей их сенсибилизацией на полимерный носитель в виде микросфер для обнаружения клеток штаммов L. pneumophila в реакции слайд-агглютинации, и отличающимся тем что в качестве полимерного носителя антител используют полиакролеин, обработанный на стадии полимеризации сафранином Т, а микросферы выполняют диаметром 1 мкм с содержанием альдегидных группы 0,4 мкмоль/г , затем носитель дополнительно обрабатывают 5% водным раствором танина при 37-40°С в течении трех часов и выдерживают 15 часов при комнатной температуре, отмывают водой посредством центрифугирования до отрицательной реакции в супернатанте на фенолы с FeCl3 , после этого проводят сенсибилизацию микросфер легионеллезной кроличьей сывороткой, для этого 25 мг носителя суспендировали в 0,9 мл физиологического раствора и добавляли 0,1 мл разведенной (1:40) сыворотки, полученную суспензию перемешивают в течение 2-х часов при комнатной температуре, затем 15 часов при 4°С отмывают раствором хлористого натрия и суспендируют их в 1 мл того же раствора с 1% желатозой, проводят консервацию полученного диагностикума и разливают его в 5 мл емкости для использования и хранения.
Кроме того для диагностикума 1 серогруппы готовят легионеллезную кроличью сыворотку соответствующей серогруппы (1),которую получают к прогретым клеткам легионелл при 100°С в течение 20 мин., причем титры антител должны быть не менее 1:1600, сенсибилизацию этих антител на полимерных ( латексных ) микросферах используют для выявления в реакции слайд-агглютинации клеток штаммов L. pneumophila, содержащих гомологичные липополисахаридные антигены, которые определяют искомые серогруппы.
При этом для диагностикума 3 серогруппы готовят легионеллезную кроличью сыворотку соответствующей серогруппы (3), которую получают к прогретым клеткам легионелл при 100°С в течение 20 мин, причем титры антител должны быть не менее 1:1600, сенсибилизацию этих антител на полимерных (латексных) микросферах используют для выявления в реакции слайд-агглютинации клеток штаммов L. pneumophila, содержащих гомологичные липополисахаридные антигены, которые определяют искомые серогруппы..
Кроме того для диагностикума 6 серогруппы готовят легионеллезную кроличью сыворотку соответствующей серогруппы (6), которую получают к прогретым клеткам легионелл при 100°С в течение 20 мин, причем титры антител должны быть не менее 1:1600 , сенсибилизацию этих антител на полимерных ( латексных ) микросферах используют для выявления в реакции слайд-агтлютинации клеток штаммов L. pneumophila, содержащих гомологичные липополисахаридные антигены, которые определяют искомые серогруппы.
При этом реакцию слайд-агглютинации проводят на стекле, смешивая каплю исследуемого материала, в которую вносят микропипеткой (0,02-0,05) мкл одного из диагностикумов 1,3 или 6 серогруппы, помешивают в течение 1 мин и учитывают результат реакции как положительный по наличию ярко-красного агглютината с последующим просветлением жидкости, что подтверждает присутствие легионелл соответствующей серогруппы.
Способ осуществляется следующим образом. Для проведения способа в качестве полимерного носителя антител используют - полиакролеин, из которого получают полимеризацией в водно-щелочной среде в присутствии радикального инициатора микросферы диаметром 1 мкм с содержанием альдегидных групп 0,4 мкмоль/ г.
При этом на стадии полимеризации добавляют сафронин Т, который окрашивает микросферы в красный цвет.
Для повышения сорбционной емкости микросферы обрабатывают 5% водным раствором танина при 37-40°С в течение 3 часов, затем выдерживают 15 часов при комнатной температуре и отмывают водой с помощью центрифугирования до отрицательной реакции в супернатанте на фенолы с FeCl3 .
Следующм этапом способа является приготовление кроличьих иммунных легионелезных сывороток. Иммунизацию животных проводят по общепринятой схеме ,а иммунизирующими препаратами взяты типовые культуры Legionella pneumophila 1, 3 и 6 серогрупп. Легионелезные кроличьи сыворотки получают к прогретым клеткам легионел при 100°С в течение 20 мин. Прогреванием культур устраняют в них белковые и сохраняют нужные липополисахаридные антигены. Титры антител в получаемых сыворотках были не меньше 1:1600.
Сенсибилизация микросфер легионеллезными сыворотками осуществляют следующим образом: 25 мг носителя суспендируют в 0,9 мл физиологического раствора и добавляют 0,1 мл разведенной 1:40 сыворотки. Суспензию перемешивают в течение 2 - часов при комнатной температуре, затем 15 часов - при 4°С, отмывают физиологическим раствором и суспендируют их в 1 мл 0,9% хлористого натрия с 1% желатозы.
Для консервации препарата добавляют мертиолат (1:10000) и разливают в 5 мл пластиковые емкости (микропробирки) и хранят при температуре 6-8°С. Активность диагностикумов при сохранении их при температуре холодильника не снижалась в течение года. Методика постановки реакции.
Для постановки реакции слайд-агглютинации на стеклянное дно чашки Петри наносят каплю (25 мкл) 0,9%-ного раствора хлористого натрия. Петлей, забирая из газона культуру, делают в ней взвесь плотностью около 108-109 м.к./мл и вносят микропипеткой (0,02-0,03) мкл взвеси диагностикума, распределяя его по капле. Далее стекло круговыми движениями покачивают в течение 1-3 мин, заставляя взвесь перемещаться. Результат реакции учитывают по наступающей в позитивном случае агглютинации микроба в капле. Микробные клетки агглютинируют в агрегат красного цвета, капля просветляется. При отрицательном результате взвесь клеток остается мутной красноватого цвета..
Разработанный набор латекс-диагностикумов для серогрупп - 1,3 и 6 - изготовлен в трех сериях и проверен как в экспериментальных лабораторных испытаниях, так при при полевых исследованиях различных водных обьектов внешней среды на легионеллы, а также при комиссионных испытаниях. Результаты испытаний видны из примеров 1, 2, 3.
Пример 1. Экспериментальные лабораторные испытания латекс-диагностикумов на 1, 3 и 6 серогруппы с типовыми штаммами L. pneumophila. Культуры легионелл выращивают на плотной легионеллезной питательной среде СЭЛ, созданной в Ростовском ПЧИ, в течение 2-х суток при 35°С, смывают калий-фосфатным буфером (рН - 7,1 ) и готовят исходную взвесь клеток плотностью 108-1010 м.к./мл. Для реакции можно брать как живую взвесь культуры, так и автоклавированную при 121°С в течение 15 мин.
Проводят реакцию слайд-агглютинации . На стекло наносят каплю взвеси и вносят в нее маленькую капельку (0,02-0,03 мл) диагностикума. Взвесь перемешивают стеклянной палочкой или петлей в течение 1-2 мин и учитывают реакцию по образованию красного агглютината-положительный результат, который начинает образовываться на первой же минуте перемешивания и достигает максимума через 2 мин. Жидкость при этом просветляется. Отрицательный результат - капля остается равномерно красно-мутной без образования агглютината и просветления.
Параллельно для контроля проводили латекс-агглютинацию с диагностикумами на 1 и 2-14 серогруппы L. pneumophila фирмы Оксоид, а также для контроля культур - обычную агглютинацию на стекле с соответствующими серогрупповыми легионеллезными сыворотками в разведении 1:100.
Результаты данных испытаний представлены в таблице 1. Все три испытуемых диагностикума были специфичны и демонстративны четко выявляли штаммы собственной серогруппы (1, 3 и 6-й) и не реагировали со штаммами L. pneumophila других серогрупп.
Пример 2. Изучена специфичность предлагаемых диагностикумов в отношении свежевыделенных и коллекционных полевых штаммов L. pneumophila различных серогрупп.
Приготовление культур легионелл, постановка реакции слайд-агглютинации и контроли соответствуют описанным в примере 1. Результаты отражены в таблице 2 . Как видно, испытуемые диагностикумы отличались достаточно хорошей специфичностью и демонстративностью выявляя искомые серогруппы легионелл и не реагируя на гетерогенные серогруппы.
Пример 3. В этом испытании изучена специфичность диагностикумов в отношении гетерологичных видов микроорганизмов из коллекции Ростовского ПЧИ. Приготовление культур для реакции: штаммы холерных вибрионов выращивали на агаре Мартена, других видов - на агаре Хоттингера в течение 1 сут при 36°С. Плотность суспензий бактерий - 1 млрд м.к./мл. Постановка реакции слайд-агглютинации и контроли - так, как описано в примере 1. Результаты представлены в таблице 3. Как видно из таблицы, все диагностикумы были специфичными и не реагировали на посторонние культуры. Высокоспецифичными были также и диагностикумы фирмы Оксоид.
Использование предполагаемого изобретения позволяет осуществлять конструирование диагностикумов для обнаружения возбудителя легионелеза конкретной серогруппы L.pneumophila, а именно 1, 3 и 6 .
При этом созданные латекс-диагностикумы для выявления в слайд-агглютинации 1, 3 и 6 серогрупп представляют собой специфичные диагностические препараты, которые не уступают международно признанному набору легионеллезных диагностикумов фирмы Оксоид. Достоинством набора диагностикумов Ростовского ПЧИ является четкость и демонстративность реакции, а также возможность выявлять по отдельности наиболее важные с точки зрения эпидемиологии легионеллеза 1, 3 и 6 серогруппы L. pneumophila. При этом набор в стоимостном отношении более дешев, чем выпускаемые указанными фирмами.
Таблица 1 | |||||
сравнение специфичности набора экспериментальных легионеллёзны латекс-диагностикумов и коммерческой тест-системы фирмы «Oxoid» с гомологичными микроорганизмами | |||||
Исследуемые штаммы | Латекс - диагностикумы | «Oxoid» | |||
серогруппы | |||||
1 | 3 | 6 | 1 | 2-14 | |
L. pneumophila серогруппа 1 штамм Philadelphia АТСС 33152 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппа 2 штамм Togus АТСС 33154 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппа 3 штамм Blumington АТСС 33155 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппа 4 штамм Los-Angeles АТСС 33156 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппа 5 штамм Dallas АТСС 33216 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппа 6 штамм Chicago 2 АТСС 33215 | + | - | + | ||
L. pneumophila серогруппа 7 штамм Chicago 8 АТСС 33823 | - | - | - | - | + |
Таблица 2 | |||||
сравнение специфичности набора экспериментальных легионеллёзных латекс-диагностикумов и коммерческой тест-системы фирмы «Oxoid» со штаммами L. pneumophila, выделенными из объектов окружающей среды | |||||
Исследуемые штаммы | Латекс-диагностикумы | Oxoid | |||
серогрупы | |||||
1 | 3 | 6 | 1 | 2-14 | |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм ДХ-2 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм ДХ-3 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм ДХ-4 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм ДХ-5 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм ДХ-6 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм ДХ-7 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм 41 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм Р-1 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 1 штамм Р-3 | + | - | - | + | - |
L. pneumophila серогруппы 2 штамм 33154 | + | ||||
L. pneumophila серогруппы 2 штамм 38 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 2 штамм 39 | - | - | - | + | |
L. pneumophila серогруппы 2 штамм 40 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 3 штамм 33156 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 3 штамм B-l-7 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 3 штамм В-1-4 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 3 штамм С-1-6 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 3 штамм 40к | + | + | |||
L. pneumophila серогруппы 3 штамм 13 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 3 штамм 38к | + | + | |||
L. pneumophila серогруппы 3 штамм 42 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 3 штамм 19 | - | + | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 4 штамм 33156 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 4 штамм 13-1 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 4 штамм 15-1 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila | - | - | - | - | + |
серогруппы 4 штамм 5-4 | |||||
L. pneumophila серогруппы 4 штамм 23-1 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 5 штамм 33216 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 5 штамм 42-1 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 5 штамм 99-1 | -- | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 6 штамм 33215 | - | - | + | - | + |
L. pneumophila серогруппы 6 штамм 22-3 | - | - | + | - | + |
L. pneumophila серогруппы 6 штамм 5 | - | - | + | - | + |
L. pneumophila серогруппы 7 штамм 16411 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 7 штамм 23-5 | - | - | - | - | + |
L. pneumophila серогруппы 7 штамм 43-2 | - | - | - | - | + |
Таблица 3 | |||||
сравнение специфичности набора экспериментальных легионеллёзных латекс-диагностикумов и коммерческой тест-системы фирмы «Oxoid» с гетерологичными микроорганизмами | |||||
Исследуемые штаммы | Латекс-диагностикумы | «Oxoid» | |||
серогруппа | |||||
1 | 3 | 6 | 1 | 2-14 | |
Y. pestis штамм 17691 | - | - | - | - | - |
Y. pestis EV-76 линии НИИЭГ | - | - | - | - | |
F. tularensis штамм 240 | - | - | - | - | - |
F. tularensis штамм 543 | - | - | - | - | - |
Y. pseudotuberculosis серовар 1 штамм 12659 | - | - | - | - | - |
Y. pseudotuberculosis серовар 2 штамм 14842 | - | - | - | - | - |
Y. pseudotuberculosis серовар 3 штамм 12310 | - | - | - | - | - |
Y. pseudotuberculosis серовар 4 штамм 1995 | - | - | - | - | - |
Y. pseudotuberculosis серовар 5 штамм 282 | - | - | - | - | - |
Y. pseudotuberculosis серовар 6 штамм |
5504 | |||||
Br.abortus штамм1151 | - | - | - | - | - |
Br. melitensis штамм1150 | - | - | - | - | - |
Br. suis штамм 1152 | - | - | - | - | - |
Y. enterocolitica серовар 09 штамм 2131 | - | - | - | - | - |
V. cholerae eltor штамм 9963 | - | - | - | - | - |
E. coliATCC 25922 | - | - | - | - | - |
Campylobacter jejuni штамм 457 | - | - | - | - | - |
С. Diphtheriae gravis штамм «Тимаков» | - | - | - | - | - |
Staphylococcus aureus | - | - | - | - | - |
Streptococcus pneumonia | - | - | - | - | - |
Klebsiella pneumonia | - | - | - | - | - |
L. monocytogenes серогруппы 1 штамм 18875 | - | - | - | - | - |
Salmonella typhimurium | - | - | - | - | - |
Claims (5)
1. Способ конструирования полимерного иммуноглобулинового диагностикума для выявления Legionella pneumophila 1, 3 и 6 серогрупп, включающий получение иммунных кроличьих сывороток с последующей их сенсибилизацией на полимерный носитель в виде микросфер для обнаружения клеток штаммов L. pneumophila в реакции слайд-агглютинации, отличающийся тем, что в качестве полимерного носителя антител используют полиакролеин, который на стадии полимеризации обрабатывают сафранином Т, а микросферы выполняют диаметром 1 мкм с содержанием альдегидных групп 0,4 мкмоль/г, затем носитель дополнительно обрабатывают 5%-ным водным раствором танина при 37-40°С в течение 3 ч и выдерживают 15 ч при комнатной температуре, отмывают водой посредством центрифугирования до отрицательной реакции в супернатанте на фенолы с FeCl3, после этого проводят сенсибилизацию микросфер легионеллезной кроличьей сывороткой, для этого 25 мг носителя суспендировали в 0,9 мл физиологического раствора и добавляли 0,1 мл разведенной (1:40) сыворотки, полученную суспензию перемешивают в течение 2-х ч при комнатной температуре, затем 15 ч при 4°C отмывают раствором хлористого натрия и суспендируют их в 1 мл того же раствора с 1%-ной желатозой, проводят консервацию полученного диагностикума и разливают его в 5-миллиметровые емкости для использования и хранения.
2. Способ конструирования полимерного иммуноглобулинового диагностикума для L.pneumophila по п.1, отличающийся тем, что для диагностикума 1 серогруппы готовят легионеллезную кроличью сыворотку соответствующей серогруппы (1), которую получают к прогретым клеткам легионелл при 100°C в течение 20 мин, причем титры антител должны быть не менее 1:1600, сенсибилизацию этих антител на полимерных (латексных) микросферах используют для выявления в реакции слайд- агглютинации клеток штаммов L.pneumophila, содержащих гомологичные липополисахаридные антигены, которые определяют искомые серогруппы.
3. Способ конструирования полимерного иммуноглобулинового диагностикума для L.pneumophila по п.1, отличающийся тем, что для диагностикума 3 серогруппы готовят легионеллезную кроличью сыворотку соответствующей серогруппы (3), которую получают к прогретым клеткам легионелл при 100°C в течение 20 мин, причем титры антител должны быть не менее 1:1600, сенсибилизацию этих антител на полимерных (латексных) микросферах используют для выявления в реакции слайд-агглютинации клеток штаммов L.pneumophila, содержащих гомологичные липополисахаридные антигены, которые определяют искомые серогруппы.
4. Способ конструирования полимерного иммуноглобулинового диагностикума для L.pneumophila по п.1, отличающийся тем, что для диагностикума 6 серогруппы готовят легионеллезную кроличью сыворотку соответствующей серогруппы (6), которую получают к прогретым клеткам легионелл при 100°C в течение 20 мин, причем титры антител должны быть не менее 1:1600, сенсибилизацию этих антител на полимерных (латексных) микросферах используют для выявления в реакции слайд- агглютинации клеток штаммов L.pneumophila, содержащих гомологичные липополисахаридные антигены, которые определяют искомые серогруппы.
5. Способ по любому из пп.2, 3 и 4, отличающийся тем, что реакцию слайд-агглютинации проводят на стекле, смешивая каплю исследуемого материала, в которую вносят микропипеткой (0,02-0,03) мкл одного из диагностикумов 1, 3 или 6 серогруппы, помешивают в течение 1 мин и учитывают результат реакции как положительный по наличию ярко-красного агглютината с последующим просветлением жидкости, что подтверждает присутствие легионелл соответствующей серогруппы.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012153024/15A RU2505819C1 (ru) | 2012-12-07 | 2012-12-07 | СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ПОЛИМЕРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Legionella pneumophila 1,3 И 6 СЕРОГРУПП (ВАРИАНТЫ) |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012153024/15A RU2505819C1 (ru) | 2012-12-07 | 2012-12-07 | СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ПОЛИМЕРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Legionella pneumophila 1,3 И 6 СЕРОГРУПП (ВАРИАНТЫ) |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2505819C1 true RU2505819C1 (ru) | 2014-01-27 |
Family
ID=49957783
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012153024/15A RU2505819C1 (ru) | 2012-12-07 | 2012-12-07 | СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ПОЛИМЕРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Legionella pneumophila 1,3 И 6 СЕРОГРУПП (ВАРИАНТЫ) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2505819C1 (ru) |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2129279C1 (ru) * | 1995-11-23 | 1999-04-20 | Государственный научный центр прикладной микробиологии | Диагностикум для идентификации легионелл в клиническом материале и объектах внешней среды и способ его получения |
ES2237272B1 (es) * | 2003-03-21 | 2006-07-16 | Universidad De Malaga | Reactivo de latex para la deteccion de anticuerpos frente a legionella pneumophila. |
-
2012
- 2012-12-07 RU RU2012153024/15A patent/RU2505819C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2129279C1 (ru) * | 1995-11-23 | 1999-04-20 | Государственный научный центр прикладной микробиологии | Диагностикум для идентификации легионелл в клиническом материале и объектах внешней среды и способ его получения |
ES2237272B1 (es) * | 2003-03-21 | 2006-07-16 | Universidad De Malaga | Reactivo de latex para la deteccion de anticuerpos frente a legionella pneumophila. |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
Dubocry B.O., White F.C. // Latex agglutination test for tuberculosis. - American review of respiratory diseases. - 1966. v.94. - N 6. - p.914-922. * |
Holliday M.G. Use of latex agglutination technique for detecting Legionella pneumophila (serogroup 1) antibodies. J Clin Pathol. 1990 Oct.; 43(10): 860′′862. Dubocry B.O., White F.C. // Latex agglutination test for tuberculosis. - American review of respiratory diseases. - 1966. v.94. - N 6. - p.914-922. Грицкова И.А., Лобанов А.Н., Станишевский Я.М., Прокопов Н.А., Кравцов Э.Г. Получение антительных диагностических тест-систем заданной специфичности. - Биотехнология. - М., 2003, вып.2, с.81-85. * |
Holliday M.G. Use of latex agglutination technique for detecting Legionella pneumophila (serogroup 1) antibodies. J Clin Pathol. 1990 Oct.; 43(10): 860''862. * |
Sedgwick A.a. Tilton R. Identification of L.pneumophila by latex agglutination // J. Clin. Microbiol. - 1983, - 17. - 2. - P.365-368. * |
Грицкова И.А., Лобанов А.Н., Станишевский Я.М., Прокопов Н.А., Кравцов Э.Г. Получение антительных диагностических тест-систем заданной специфичности. - Биотехнология. - М., 2003, вып.2, с.81-85. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2011102805A (ja) | 血液および組織中の細菌を免疫学的に検出する方法およびキット | |
WO2023186189A2 (zh) | 分泌ActA单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用 | |
RU2377308C1 (ru) | Диагностикум псевдотуберкулезный эритроцитарный моноклональный | |
RU2505819C1 (ru) | СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ПОЛИМЕРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНОВОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ Legionella pneumophila 1,3 И 6 СЕРОГРУПП (ВАРИАНТЫ) | |
EP4235178A2 (en) | Crude native hapten-based indirect elisa assay kit and lyophilised controls for the confirmatory diagnosis of bovine brucellosis in blood serum and milk by animal and tank | |
RU2611359C1 (ru) | Способ и набор для определения продукции холерного токсина и дифференциации эпидемически значимых штаммов холерных вибрионов классического и эльтор биоваров | |
RU2366453C2 (ru) | Способ получения эритроцитарного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) при анаплазмозе крупного рогатого скота | |
CN101493468A (zh) | 一种可定量检测鼠疫耶尔森菌的蛋白质悬浮芯片方法 | |
CN111830263A (zh) | 一种绵羊肺炎支原体间接血凝检测方法的建立方法 | |
RU2449290C2 (ru) | Способ получения эритроцитарного антигенного диагностикума | |
Frolov et al. | Application of latex-agglutination for rapid detection of pathogenic burkholderia | |
RU2430376C1 (ru) | Способ получения псевдотуберкулезного антигенного полимерного диагностикума | |
RU2152035C1 (ru) | Способ диагностики бруцеллеза | |
JP2012513588A (ja) | exvivo受動的防御菌血症アッセイ | |
RU2133470C1 (ru) | Способ получения антигена для диагностики бруцеллеза | |
CN109055253B (zh) | 一种副鸡禽杆菌的血凝抑制抗原的制备方法及抗原的应用 | |
RU2270253C2 (ru) | Набор для идентификации энтерогеморрагических escherihia coli | |
RU2263142C2 (ru) | Способ получения l-субкультур штамма brucella abortus и-206 | |
US11448645B2 (en) | Microparticle for cultivating and testing cells | |
CN103852580B (zh) | 金黄色葡萄球菌鉴定试剂盒及其制备方法 | |
RU2177617C1 (ru) | Способ приготовления лептоспирозного диагностикума для постановки реакции латекс-агглютинации | |
RU2017117030A (ru) | Получение тиндализированных, интактных и иммунологически активных клеток lactobacillus rhamnosus GG и способ их качественного и количественного определения | |
RU2063769C1 (ru) | Способ получения специфической сальмонеллезной поливалентной н-сыворотки для ускоренного выявления сальмонелл в пищевых продуктах, кормах, объектах окружающей среды и клиническом материале | |
RU2295564C2 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Borrelia garinii BgVir-1, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И ПРОФИЛАКТИКИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗОВ И ДЛЯ ОЦЕНКИ ПРОТЕКТИВНОЙ И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ И ЛЕЧЕБНЫХ ПРЕПАРАТОВ | |
Bucur et al. | Demonstration of clumping factor using a screening test in Staphylococci isolated from animals. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20161208 |